Facultad de medicina humana

BIOLOGIA CELULAR
TEMA:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS
COMPARTIMIENTOS CELULARES
DOCENTE:
Dr. Jaime Salazar Zuloeta
Dr. Nestor Rori!ues Ala"o
MS# Leo$#io Pa#%erres Mo!ollo$
Dra. I$!ri &uezaa Ne'o
INTEGRANTES:
Bur!a Perez (iauro
De la Cruz Mo$tal)a$
D*az Del!ao Luis E$ri+ue
,i$ostrosa ,uama$ Ale-
Mateo Pa#ora Jimm" Damia$
&ui$ta$a Cu.as Jea$
Pa$o S/$#%ez ,0#tor C.
Rio1a (e1a Mar#o A$to$io
Ro1as Sa$#%ez Dei)i
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
Su#lu'e C%ero Dei)i ,.
CICLO:
I Ci#lo
Lam.a"e+ue2 34 e Julio el 3556
INTRODUCCIN
Todas las reacciones metablicas que ocurren en nuestro organismo se hayan
mediados por enzimas, estas en su mayora son de naturaleza proteica
(algunas son ARN).
uede de!inirse a las enzimas como catalizadores, capaces de acelerar las
reacciones qumicas en ambos sentidos, sin consumirse en ella, ni !ormar parte
de los productos. "a di!erencia !undamental es que tienen gran especi!icidad de
reaccin o sea por el sustrato sobre el cual act#an.
$n la c%lula las enzimas pueden encontrarse en el lquido celular (citosol) o
bien pueden estar !i&adas a determinadas organelas (e&. Adheridas a las
mitocondrias), es as que en la presente e'posicin se hablara de la
distribucin de las enzimas en los compartimientos celulares.
(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
INDICE
). *+,$T)-*.
)). /$N$RA")0A0$.
)).1. $N2)3A.
)).(. )3*RTAN4)A +)*350)4A 0$ "A. $N2)3A.
)).6. 4ARA4T$R7.T)4A. 0$ "A. $N2)3A.
)).8. R*)$0A0$. $N2)3AT)4A.
)).8.1. "as enzimas tienen un enorme poder cataltico.
)).8.(. "as enzimas poseen especi!icidad
)).8.6. "a acti9idad de algunas enzimas es regulable
)).8.8. "as enzimas trans!orman di!erentes clases de energa
)).8.:. "a mayora de enzimas requiere de co!actores
)).8.;. .ensibilidad de la acti9idad enzim<tica
)).:. 3*0$"*. 0$ "A )NT$RA44)=N .>.TRAT* ? $N2)3A
)).:.1. 3odelo de la lla9e cerradura
)).:.(. 3odelo del a&uste inducido
)).;. N*3$N4"AT>RA @ 4"A.)A)4A4)=N 0$ "A. $N2)3A.
(.;.1. "as o'idoBreductasas
(.;.(. "as trans!erasas
(.;.6. "as Cidrolasas
(.;.8. "as "iasas
(.;.:. "as )somerasas
(.;.;. "as "igasas
)).D. 3$4AN).3*. $N2)3AT)4*.
6
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
)).E. AA4T*R$. F>$ )NA">@$N $N "A R$/>"A4)*N 0$ "A
A4T)-)0A0 $N2)3AT)4A
)).E.1. Temperatura
)).E.(. pC
)).E.6. Tiempo
)).E.8. 4oncentracin de la enzima ( pC y T se mantienen constante)
)).E.:. 4oncentracin del sustrato
)).E.;. Acti9adores
))). 0).TR)+>4)*N $N2)3GT)4A $N "*. 4*3ART)3)$NT*.
4$">"AR$.
))).1. $N2)3A. $N 3$3+RANA
))).1.1. Trans!erencia de in!ormacin a tra9%s de la membrana plasm<tica
))).1.(. rincipales enzimas
))).1.(.1. A0$N)"AT*4)4"A.A
))).1.(.(. A*.A*0)$RA.A.
))).1.(.6. roteincinasas (protein Hinasas)
))).1.(.8. 4)NA.A. (Hinase)
))).1.(.:. "A A*.AATA.A A"4A")NA (AA")
))).1.(.;. NA0C *I)0A.AJ
))).(. $N2)3A. $ $" 4)T*"A.3A
))).(.1. $N2)3A. 0$" $.A4)* .*">+"$.
))).(.(. 0eshidrogenasa de lactatoJ
))).(.6. 3alato 0eshidrogenasa
))).(.8. )socitrato 0eshidrogenasa
))).(.:. "a Aconitasa
))).6. $N2)3A. $N *R/AN$"*.
))).6.1. $nzimas en ero'isomas
))).6.1.1. 4atalasa ?ero'idasa
8
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
))).6.1.(. *'idasas Ala9inicasJ
))).6.1.6. >ratoB*'idasa
))).6.1.8. .uper'idos 0ismutasaJ
))).6.1.:. Nucleasas
))).6.(. $nzimas en 4loroplastos.
))).6.6. $nzimas en la mitocondria
))).6.6.1. $nzimas en la membrana e'terna de la mitocondria
))).6.6.(. $nzimas en el espacio intramembranoso
))).6.6.6. $nzimas de la membrana interna
))).6.6.8. $nzimas de la matriz mitocondrial
))).6.8. $nzimas en "isosomas
))).6.:. $nzimas en Retculo $ndoplasm<tico
))).6.;. $nzimas en el Aparato de /olgi
))).6.D. $nzimas en el /lio'isoma
))).8. $N2)3A. $N $" NK4"$*
))).8.1. $nzimas enlazadas a 4romatina
))).8.(. $nzimas enlazadas al Nucl%olo
)-. 4*N4">.)*N$.
-. AN$I*.
-). +)+")*/RAA)A
:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
I. OBJETIVOS
1. Reconocer la distribucin de las enzimas en los compartimientos
celulares (citoplasma, organelos y n#cleo).
(. Reconocer la clasi!icacin de las enzimas de acuerdo a la reaccin que
catalizan.
6. $ntender la importancia biolgica de la presencia de enzimas en las
c%lulas.
8. 4onocer las caractersticas generales de las enzimas, as como su
mecanismo de accin.
II. GENERALIDADES:
II.1. LAS ENZIMAS
0eri9an del 9ocablo griego enzyme, que signi!ica !ermento, t%rmino
;
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
propuesto por Luhne en 1EED.
"as enzimas son protenas globulares producidas por el te&ido 9i9o que
act#an como biocatalizadores, es decir, aceleran las reacciones qumicas
en los seres 9i9os sin modi!icarse. Al acelerar las reacciones disminuyen la
energa de acti9acin y tiempo de reaccin.
4ada c%lula y cada te&ido tienen su acti9idad propia, lo que comporta
continuos cambios en su estado bioqumico, en la base de la cual est<n las
enzimas.
"os propios genes son reguladores de la produccin de las enzimasM por
tanto, genes y enzimas pueden ser considerados como las unidades
!undamentales de la 9ida.
$ste concepto, se ha desarrollado y concretado cada 9ez m<s, y constituye
un componente esencial de di9ersas disciplinasJ la microbiologa, la
!isiologa, la bioqumica, la inmunologa y la ta'onoma, !ormando adem<s
parte del campo aplicado, en gran 9ariedad de industrias.
$l con&unto de enzimas constituye el grupo de biomol%culas m<s e'tenso y
m<s especializado del organismo.
"a 9ida es, en sntesis, una cadena de procesos enzim<ticos, desde
aquellos que tienen por sustratos los materiales m<s simples, como el agua
(C
(
N) y el anhdrido carbnico (4N
(
), presentes en los 9egetales para la
!ormacin de hidratos de carbono, hasta los m<s complicados que utilizan
sustratos muy comple&os.
"a !ormacin de las protenas, los gl#cidos y los lpidos es un e&emplo tpicoJ
.on a la 9ez degradados y reconstruidos por otras reacciones enzim<ticas,
produciendo energa a una 9elocidad adecuada para el organismo, sin el
gasto energ%tico que e'igen los m%todos qumicos de laboratorio.
II.2. IMPORTANCIA BIOMDICA DE LAS ENZIMAS
.in enzimas, no sera posible la 9ida que conocemos.
)nter9ienen en la biocat<lisis que regula la 9elocidad a la cual tienen
D
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
lugar los procesos !isiolgicos.
"as enzimas lle9an a cabo !unciones relacionadas con salud y la
en!ermedad. $n tanto que, en la salud todos los procesos !isiolgicos
ocurren de una manera ordenada y se conser9a la homeostasis, durante los
estados patolgicos.
.u importancia es tal que puede considerarse la 9ida como un Oorden
sistem<tico de enzimas !uncionalesO. 4uando este orden y su sistema
!uncional son alterados de alg#n modo, cada organismo su!re m<s o menos
gra9emente y el trastorno puede ser moti9ado tanto por la !alta de accin
como por un e'ceso de acti9idad de enzima.
II.3. CARACTERSTICAS DE LAS ENZIMAS
.e sintetizan a ni9el intracelular.
Fumicamente son protenas, e'cepto los ribozimas que es un ARN.
.e necesitan en n!imas cantidades para su accin.
No son destruidas por la reaccin que catalizan, son rehusables.
ueden actuar a ni9el intracelular, es decir, en la c%lula donde se !ormo
o a ni9el e'tracelular.
.e denomina sustrato a toda mol%cula sobre la que act#a una enzima.
$squema de una reaccin enzim<ticaJ
0ondeJ
$J $nzima
.J .ustrato
$.J 4omple&o enzima sustrato
J roductos
E
$ P . $.

$ P
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.on catalizadores de naturaleza protenica con un peso molecular
bastante ele9ado y con propiedades catalticas especi!icas.
resentan gran di!usibilidad en los medios lquidos, la mayora solubles
en agua.
II.4. PROPIEDADES ENZIMATICAS:
II.4.1. Las enzimas tienen un enorme poder cataltico.
"as enzimas aceleran las reacciones multiplicando su 9elocidad por un
milln de 9eces o m<s. /racias a la energa libre emitida al !ormar los
m#ltiples enlaces d%biles e interacciones entre la enzima y su sustrato
or e&emploJ el per'ido de hidrogeno (C
(
*
(
) se descompone con gran
lentitud si la reaccin no es catalizada, pero una sola mol%cula de la
enzima catalasa ocasiona la descomposicin de cinco millones de
mol%culas de C
(
*
(
por minuto a N Q4. "a catalasa protege las clulas,
porque el perxido de hidrogeno es un subproducto toxico de varias
reacciones celulares.
II.4.2. Las enzimas poseen especificidad
0ado que e'iste una relacin estrecha entre la !orma del sitio acti9o y la
!orma del sustrato, la mayora de las enzimas son altamente espec!icas.
4asi todas son capaces de catalizar solo unas pocas reacciones
qumicas estrechamente relacionadas o, en muchos casos, una sola
reaccin. or e&emplo, la enzima ureasas, que descompone la urea en
amoniaco y dixido de carbono, no acta en ningn otro sustrato. De
igual modo, la enzima sacarasa desdobla solo la sacarosa, sin actuar en
la maltosa ni la lactosa.
>nas cuantas enzimas son espec!icas solo en el sentido de requerir un
sustrato con determinado tipo de enlace qumico. or e&emplo, la lipasa
que secreta el p<ncreas rompe los enlaces %ster que conectan el glicerol
y los <cidos grasos en una amplia 9ariedad de grasas.
R
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
II.4.3. La actividad de algunas enzimas es regulable
"a especi!icidad de las enzimas est< ba&o control !isiolgico. "a sntesis
de la lactosa es un e&emplo adecuado, lactato sintetasa, la enzima que
cataliza la sntesis de lactosa consta de una subunidad cataltica y otra
su unidad modi!icadora.
II.4.4. Las enzimas transforman diferentes clases de energa
$n muchas reacciones de bioqumica la energa de las sustancias
reaccionantes se con9ierte en una energa di!erente con una e!iciencia
muy ele9ada, por e&emplo en la mitocondria en las mol%culas pequeSas
deri9adas de los alimentos se con9ierte en un tipo de energa di!erente,
el adenosin tri!os!ato (AT).
II.4.5. La a!"#$a %& &'()a* #&+,)&#& %& -".a-/"#&*
3uchas enzimas requieren co!actores. or e&emplo la pepsina, secretada por
el estomago, consisten solo en protenas, en tanto que otras tienen dos
componentes, una protena llamada apoenzima y otro componente qumico
adicional, el co!actor. Ni la apoenzima ni el co!actor por si solos tiene capacidad
catalticaM slo cuando ambos se combinan puede !uncionar la enzima. $l
co!actor puede ser una mol%cula inorg<nica u org<nica.
Algunas enzimas requieren como co!actor un ion met<lico espec!ico. 0os
co!actores inorg<nicos muy comunes son los iones 3agnesio y los iones
4alcio. "a mayora de los oligoelementos (como hierro, cobre, zinc y
manganeso, necesarios en cantidades mnimas) !uncionan como co!actores.
>n compuesto org<nico no polipeptdico que se une a la apoenzima y sir9e
como co!actor se denomina coenzima. "a mayora de las coenzimas pueden
1N
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
clasi!icarse como agentes de trans!erencia B esto es, agentes que trans!ieren
alg#n componente de una mol%cula a otraB. Algunos e&emplos de coenzimas
que transportan electrones son el NA0C, NA0C y AA0C
(
, el AT act#a como
coenzima, ya que se encarga de trans!erir grupos !os!atos. *tra coenzima muy
conocida es la coenzima A, la cual participa en la trans!erencia de grupos
deri9ados de <cidos org<nicos. "a mayora de las 9itaminas (compuestos
org<nicos que los organismos requieren en pequeSas cantidades pero no
pueden sintetizar por si mismos) son coenzimas o componentes de coenzimas.
"as 9itaminas + hidrosolubles aportan componentes importantes de numerosas
coenzimas
-itamina +1 o TiaminaJ su deri9ado, el piro!os!ato de tiamina es esencial
para el metabolismo energ%tico de los gl#cidos.
-itamina +( o Ribo!la9inaJ sus deri9ados son nucletidos coenzima ticos
con gran poder reductor como el AA0 y el A3N.
-itamina +6 o NiacinaJ sus deri9ados son nucletidos coenzim<ticos con
gran poder reductor como el NA0P o el NA0P.
-itamina +: o <cido antot%nicoJ su principal deri9ado es la coenzima A
(4oBA), con gran importancia en di9ersos procesos metablicos.
-itamina +; o irido'ina. .us principales deri9ados son los coenzimas
" (!os!ato de pirido'al) y 3 (!os!ato de irido'amina), esenciales
en el metabolismo de los amino<cidos.
-itamina +D o +iotina (9itamina C). .u deri9ado, la +iocitina, es esencial
para el !uncionamiento de numerosas carbo'ilasas (enzimas).
-itamina +R o Acido !lico (9itamina 3). .u deri9ado, el AC8 es esencial
en la sntesis de purinas.
-itamina +1( o 4ianocobalaminaJ coenzima +1(.
$l mecanismo de accin de una coenzima es el siguienteJ
1.B"a coenzima se une a una enzima,
(.B"a enzima capta su sustrato espec!ico,
11
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
6.B"a enzima ataca a su sustrato arranc<ndole algunos de sus <tomos,
8.B"a enzima cede a la coenzima dichos <tomos,
:.B"a coenzima acepta dichos <tomos y se desprende de la enzima,
;.B"a coenzima no es el aceptor !inal de estos <tomos, sino que debe
liberarlos,
D.B"a coenzima transporta dichos <tomos y acaba cedi%ndolos,
recuperando as su capacidad para aceptar nue9os <tomos.
II.4.0. S&'*)1)2)%a% %& 2a a-/)3)%a% &'()4/)-a
Algunas sustancias qumica inhiben (disminuyen la acti9idad) a muchas
enzimas o incluso las destruyen. $sta inhibicin puede ser re9ersible o
irre9ersibleJ
a5 I'6)1)-)7' #&3&#*)12&: esta inhibicin ocurre cuando un inhibidor !orma
enlaces qumicos d%biles con la enzima. uede ser competiti9a o no
competiti9a.
$n la )'6)1)-)7' -"8&/)/)3a, el inhibidor compite con el sustrato
normal por la unin con el sitio acti9o de la enzima. 0icho inhibidor suele
ser estructuralmente similar al sustrato normal, de modo que se a&usta al
sitio acti9o y se combina con la enzima. .in embrago, tal similitud no
basta para sustituir por completo al sustrato en la reaccin qumica, de
manera que la enzima no puede atacarlo para !ormar productos de
1(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
reaccin. $l inhibidor competiti9o ocupa los sitios acti9os solo por un
tiempo y no produce daSos permanentes en las enzimas. $n la inhibicin
competiti9a, un sitio acti9o es ocupado por el inhibidor parte del tiempo y
por el sustrato normal otra parte.
.i la concentracin del sustrato se ele9a respecto a la del inhibidor, por
lo com#n el sitio acti9o ser< ocupado por el sustrato. $sta !orma de
inhibicin puede reconocerse e'perimentalmente por el hecho de que
puede re9ertirse incrementando la concentracin de sustrato.
$n la )'6)1)-)7' '" -"8&/)/)3a, el inhibidor se une con la enzima en
un sitio que no es el acti9o, esto hace que se inacti9e la enzima por
modi!icacin de su !orma, debido a lo cual el sitio acti9o no puede unirse
con el sustrato. 3uchos inhibidores no competiti9os de importancia son
sustancias metablicas que regulan la acti9idad enzim<tica al
combinarse con la enzima de manera re9ersible. "a inhibicin no
competiti9a comparte algunas caractersticas con la inhibicin alost%rica.
15 E' 2a )'6)1)-)7' )##&3&#*)12&: el inhibidor se combina con un grupo
!uncional de la enzima y la desacti9a o destruye en manera permanente.
3uchos 9enenos son inhibidores irre9ersibles. or e&emplo, los metales
pesados como mercurio y plomo se unen irre9ersiblemente a muchas
protenas, incluso enzimas, y las desnaturalizan. Algunos gases
ner9iosos atro!ian la enzima acetilcolinesterasa, de importancia en el
!uncionamiento de ner9ios y m#sculos. 0i9ersos insecticidas y
medicamentos son inhibidores enzim<ticos. Tambi%n puede ocurrir
inhibicin enzim<tica irre9ersible si una protena es desnaturalizada
debido al calor o sol9entes org<nicos.
II.5. MODELOS DE LA INTERACCIN SUSTRATO 9 ENZIMA
II.5.1. M"%&2" %& 2a 22a3& -&##a%,#a:
16
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
$nunciadoJ T"a enzima y el sustrato tienen una interaccin seme&ante a la lla9e
con la cerradura, es decir la enzima tiene un sitio rgido para el sustratoU
$ste modelo !ue propuesto por Aisher en 1ER8. "lamado modelo rgido.
II.5.2. M"%&2" %&2 a:,*/& )'%,-)%":
$nunciadoJ T$l sustrato induce un cambio con!ormacional en la enzima, de esta
manera el o los sitios acti9os de la enzima es complementario del sustratoU.
$ste modelo !ue propuesto por Losland. "lamado modelo ameboide. $s el
modelo aceptado actualmente.
II.0. NOMENCLATURA ; CLASI<ICACIN DE LAS ENZIMAS
"as enzimas reciben nombre y se clasi!ican de acuerdo a las reacciones que
catalizan. "a mayor parte de las enzimas tienen un nombre que se !orma
adicionando el su!i&o TasaU al nombre del sustrato sobre el cual act#an o a un
t%rmino que describe las reacciones que cataliza. As, la ureasa tiene la urea
como sustrato. "a alcohol deshidrogenasa cataliza la remocin de hidrgenos
de los alcoholes (es decir, cataliza la o'idacin de los alcoholes). A pesar de
ello, algunas enzimas como la tripsina o la quimiotripsina, aun se reconocen
por sus nombres histricos.
>n comit% de la >nin )nternacional de +ioqumica publico un esquema de
18
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
clasi!icacin que asigna un n#mero a cada enzima y clasi!ica a las enzimas en
seis grupos importantes de acuerdo a la clase general de reacciones qumicas
que catalizan.
II.0.1. La* "=)%">#&%,-/a*a*
.on las enzimas relacionadas con las o'idaciones y las reducciones biolgicas
que inter9ienen de modo !undamental en los procesos de respiracin y
!ermentacin. "as o'idorreductasas son importantes a ni9el de algunas
cadenas metablicas, como la escisin enzim<tica de la glucosa, !abricando
tambi%n AT, 9erdadero almac%n de energa. $'trayendo dos <tomos de
hidrgeno, catalizan las o'idaciones de muchas mol%culas org<nicas presentes
en el protoplasmaM los <tomos de hidrogeno tomados del sustrato son cedidos
a algun aceptor. "a mayor parte de estas enzimas se conocen como
deshidrogenasas, pero algunas de ellas reciben el nombre de o'idasas,
pero'idasas, o'igenasas, o reductasas.
II.0.2. La* /#a'*.&#a*a*
4atalizan reacciones de trans!erencia de grupos (obtenidos de la rotura de
ciertas mol%culas) a otras sustancias receptoras. 3uchas de ellas requieren de
la e'istencia de coenzimas. $stas enzimas o sus coenzimas son sustituidas en
!orma co9alente por una porcin de la mol%cula del sustrato. .uelen actuar en
procesos de intercon9ersin de azucares, de amino<cidos, etc. $&emploJ
transaldolasas, Transcetolasas, Transaminasas.
II.0.3. La* ?)%#"2a*a*
.on una clase especial de trans!erasas, el agua les sir9e como un receptor del
grupo trans!erido. -eri!ican reacciones de hidrlisis con la consiguiente
obtencin de monmeros a partir de polmeros. .uelen ser de tipo digesti9o,
por lo que normalmente act#an en primer lugar. "as m<s importantes sonJ las
$sterasas, carbohidrasas, protidasas, lipasas y !os!atasas.
II.0.4. La* L)a*a*
1:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
.on enzimas que regulan reacciones en las cuales se rompen enlaces con
p%rdida de grupos y con la aparicin generalmente de dobles enlaces. $n la
direccin in9ersa, una liasa cataliza la adicin de un sustrato a un doble enlace
de un segundo sustrato. >na liasa que cataliza una reaccin de adicin en las
c%lulas se denomina con !recuencia sintetasa. $ntre algunos e&emplos de liasas
est<n las aldolasas, descarbo'ilasas.
II.0.5. La* I*"&#a*a*
Trans!orman ciertas sustancias en otras ismeras, es decir, de id%ntica !ormula
emprica pero con distinto desarrollo. .on las enzimas que catalizan di9ersos
tipos de isomerizacin, sea ptica, !uncional, de posicin, etc. 0ebido a que
estas reacciones tienen un solo sustrato y un producto, son lo por regular
reacciones enzim<ticas m<s sencillas. .uelen actuar en procesos de
intercon9ersin. or e&emploJ )somerasas de az#car, epimerasas, multasas.
II.0.0. La* L)@a*a*
4atalizan la ligadura o unin de dos sustratos en reacciones sint%ticas que
requieren el ingreso de la energa qumica potencial de un nucleosido tri!os!ato,
como el AT. "a accin de estas enzimas se mani!iesta con la !ormacin de
enlaces entre <tomos de carbono y o'igeno de di9ersas mol%culas, o bien entre
carbono y azu!re, carbono y nitrgeno y carbono y carbono. A este grupo
pertenecen enzimas de gran rele9ancia reciente, como las amino<cido ?ARTt
ligasas conocidas habitualmente con el nombre de sintetasas de amino<cidos ?
ARTt o enzimas acti9adoras de amino<cidos que representan el primer paso en
el proceso biosint%tico de las protenas, y que !orman uniones 4B*, ABsintetasa,
que !orma acetil coenzima. A las ligasas se les da el nombre de sintetasas.
$&emploJ carbo'ilasas, p%ptidosintetasas.
II.A. MECANISMOS ENZIMATICOS
"os mecanismos son los e9entos atmicos o moleculares que ocurren durante
las reacciones. "os mecanismos indi9iduales de las enzimas se han deducido a
partir de e'perimentos y m<s recientemente a partir de estudios estructurales
1;
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
de las enzimas, en particular por la cristalogra!a con rayos I. .e procede de la
siguiente maneraJ
*rienta a los sustratosJ parte de la energa de acti9acin se utiliza para
que los sustratos roten y se en!renten con los <tomos correctos para
!ormar los enlaces.
Agregan carga a los sustratosJ las cadenas laterales de (R) de los
amino<cidos de las enzimas pueden participar directamente haciendo a
los sustratos qumicamente mas reacti9os.
)nducen la de!ormacin del sustratoJ cuando una sustancia se une al
sitio acti9o, la enzima puede causar que los enlaces se estiren,
poni%ndolo en un estado de transicin estable.
4ambio de !orma de la enzima al unirse al sustratoJ este cambio por la
unin al sustrato se denomina a&uste inducido.
"a acti9idad de la enzima depende en parte de la disposicin o arreglos de los
amino<cidos y grupos prost%ticos en determinada regin de la protena.
II.B. <ACTORES CUE IN<LU;EN EN LA REGULACION DE LA
ACTIVIDAD ENZIMATICA
"a acti9idad de una enzima depende de un cierto n#mero de !actores, entre los
cuales est<n la temperatura, el pC, la concentracin de sustratos, los
acti9adores y los inhibidores.
II.B.1. T&8&#a/,#a
.i se suministra a una reaccin enzim<tica energa en !orma de calor, al ser
captada por las mol%culas es trans!ormado en energa cinetica. $llo !a9orece la
acti9idad de la enzima, pero si la temperatura es e'cesi9a la enzima se
desnaturaliza por tanto la acti9idad enzim<tica cesa.
II.B.2. 8?
1D
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
Todas las enzimas tienen dos 9alores lmites de pC entre los cuales son
e!ecti9as. Traspasados estos 9alores, la enzima se desnaturaliza y de&a de
actuar. $ntre estos dos 9alores e'tremos se sit#a un pC en el cual la enzima
alcanza una e!ecti9idad m<'imaJ es el llamado pC ptimo.
4ada reaccin tendr< su pC optimo, por e&emplo, la pepsina es mas e!ecti9a
sobre la hemoglobina a pCV(.( y sobre la albumina a pCV1.:.
II.B.3. T)&8"
A medida que se consume el sustrato y la reaccin se acerca al equilibrio, la
9elocidad de la reaccin misma disminuye hasta cero.
II.B.4. C"'-&'/#a-)7' %& 2a &'()a D 8? ! T *& a'/)&'&' -"'*/a'/&5
$n presencia de e'ceso de sustrato la 9elocidad de la reaccin es directamente
proporcional a la concentracin de la enzima.
II.B.5. C"'-&'/#a-)7' %&2 *,*/#a/"
$n toda reaccin enzim<tica, si se incrementa la concentracin del sustrato se
produce un aumento de la 9elocidad de !ormacin del producto. $n este
proceso la enzima no 9ara. .i la concentracin del sustrato es e'cesi9a, la
9elocidad de reaccin no aumentar<, debido a que todas las enzimas est<n en
!orma de comple&o $B..
II.B.0. A-/)3a%"#&*
Algunos iones !a9orecen la unin de la enzima con el sustrato, por e&emploJ la
enzima !os!olirasa, que regula la !ormacin de AT a partir de A0 y el grupo
!os!ato (i), se 9e acti9a por la presencia de iones 3g
PP
.
III. DISTRIBUCION ENZIMETICA EN LOS COMPARTIMIENTOS
CELULARES
III.1. ENZIMAS EN MEMBRANA
1E
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
III.1.1. T#a'*.&#&'-)a %& )'."#a-)7' a /#a3F* %& 2a &1#a'a
82a*4/)-a
W4mo puede una hormona e'tracelular u otra mol%cula regulatoria transmitir
in!ormacin al interior de la c%lula sin cruzar !sicamente la membrana
plasm<ticaX
4asi todas las mol%culas seSalizadoras dependen de la interaccin del sistema
de protenas integrales de membrana para transmitir in!ormacin por traduccin
de seSales. "uego que el ligando (una hormona seSal, como una hormona u
otra mol%cula regulatoria) se une al receptor de membrana, la seSal es
transmitida a tra9%s de una serie de protenas. "a mol%cula sintetizadora a
9eces se denomina primer mensa&ero. A menudo, en la 9a participan cinasas
de protena, enzimas que trans!ieren grupos !os!atos del AT a determinadas
protenas integrales de membrana, llamadas protenas G, as llamadas porque
su !orma acti9a se une a un tri!os!ato de guanosina (/T) una mol%cula similar
al AT pero que contiene la base nitrogenada guanina en lugar de adenina. "a
protenas / catalizan la hidrlisis de /T a /0, un proceso e'ot%rmico.
$n una serie comple&a de sucesos, una protena / trans!iere el mensa&e del
receptor a una enzima como la ciclasa del adenililo, que cataliza la
produccin de un segundo mensa&ero, a menudo a A3
c
(adenosin
mono!os!ato cclico). Tpicamente el segundo mensa&ero acti9a cinasas de
protenas, enzimas que a su 9ez, acti9an a determinadas protenas
!os!oril<ndolas. $sta secuencia de reacciones, que comienza con el enlace de
la mol%cula seSalizadora con el receptor, ocasiona un cambio en alguna
!uncin celular. "as protenas / participan en 9arias traducciones de seSales
importantes, que incluyen la accin de muchas hormonas. Algunas protenas /
regulan conductos que permiten que los iones crucen la membrana plasm<tica
y otras m<s tienen !unciones importantes en los sentidos de la 9ista, el ol!ato y
el gusto.
.e piensa que las protenas Ras, un grupo de protenas de unin a /T que
act#an de modo un tanto similar a como lo hacen las protenas /, son
1R
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
importantes en la traduccin de seSales necesarias para muchas acti9idades
celulares. "os !ibroblastos (un tipo de c%lula del te&ido conecti9o) requieren de
la presencia de dos !actores de crecimiento (!actor de crecimiento deri9ado de
las plaquetas) para la sntesis de A0N sin embargo, cuando los in9estigadores
desacti9aron protenas Ras inyectando en los !ibroblastos anticuerpos dirigidos
contra ellas, el !actor de crecimiento de&o de ser e!icaz. "os resultados de estos
e'perimentos y otros similares lle9aron a concluir que la protena Ras es
importante en la traduccin de seSales en que participan !actores de
crecimiento con una clase de enzimas llamadas cinasas de serina.
"os bilogos celulares han demostrado que cuando determinados ligamentos
se unen a integrinas (protenas transmembranosas que conectaban las c%lulas
con la matriz e'tracelular) en la membrana plasm<tica, se acti9an 9as de
seSalizacin de dentro hacia !uera, in!luyen en que tan selecti9as son las
integrinas respecto de las mol%culas a las cuales se unen y que tan
!uertemente se une a ellas.
III.1.2. P#)'-)8a2&* &'()a*
III.1.2.1. ADENILATOCICLASA
.e encuentra en la cara interna de la membrana plasm<tica. $s una
enzima que cataliza la sntesis de adenosin mono!os!ato cclico (A3
4
),
que es un segundo mensa&ero que se encuentra tambi%n dentro de la
c%lula, a partir del AT.
$s un compuesto que se acti9a en el mecanismo de accin de una
hormona hidrosoluble cuya secuencia es la siguienteJ
"a hormona hidrosoluble di!unde desde la sangre, por el lquido intersticial
y se une a su receptor en la membrana plasm<tica de las c%lulas blanco. $sto
acti9a otra protena membranosa, la protena G, que a su 9ez acti9a a la
adenilato ciclasa.
"a adenilato ciclasa con9ierte el AT en adenosin mono!os!ato cclico
(A3
4
), en el citosol.
(N
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
El AM
!
o segundo mensa"ero acti9a una o m<s protencinasas
(enzimas), que pueden estar libres en el citosol o unidos a la membrana
plasm<tica.
>na #nica hormona unida al receptor supone la sntesis de muchas
mol%culas de A3
4
. .e encuentran tambi%n las protenas G
in#ibidoras, dependientes de receptores inhibidores, en este caso la
seSal interacciona con el i (!s!oro inorg<nico) y %ste act#a sobre la
protena /, mecanismo seme&ante al anterior solo que en este caso con
tendencia inhibitoria.
III.1.2.2. <OS<ODIERAS
AS
"as ."*."%)&*/&#a*a* o ',-2&a*a* son enzima hidrolizas que catalizan la
ruptura de los enlaces !os!odiester como por e&emplo los que se establecen en
los <cidos nucleicos entre la pentosa de un nucletido y el grupo !os!ato de
otro. .u accin regula la concentracin dentro de las c%lulas del A3 cclico y
del /3 cclico. $st<n descitas : isoenzimas. $n la actualidad hay !<rmacos
usados como inhibidores de las !os!odiesterasas.
$stas enzimas se clasi!ican seg#n el tipo de acido nucleico y el tipo de enlace
hidrolizan.
III.1.2.3. PROTEINCINASAS DPROTEIN GINASAS5
$nzima de la clase tran!erasa que cataliza la reaccinJ
(1
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
AT P protena VAT P !os!oprotenas
"a reaccin !os!oriliza grupos de serina, treonina y tirosina en enzimas y otras
protenas. roteincinasas espec!icas regulan enzimas que catalizan
reacciones cla9es en procesos tales como la reno9acin del glicgeno,
biosntesis del colesterol y trans!ormaciones de amino<cidos. *tras producen la
casena secretadas en la leche.
"a proteincinasa A, una enzima dependiente del A3Bc, !os!orila las protenas
intracelulares a tra9%s de su acti9acin y realiza una importante labor
mediadora en di9ersas !unciones !isiolgicas cerebrales.
III.1.2.4. CINASAS D$inasa%
.ubclase de trans!erasas que comprende a las enzimas que catalizan la
trans!erencia de un grupo de alta energa desde un donador, por lo general
tri!os!ato de adenosina, hacia alg#n receptor, y de los nombres di9ersos seg#n
este #ltimo (por e&emploJ cinasa de la creatina, !ructosinasa, galactosinasa,
e'ocinasa, etc.).
III.1.2.5. LA <OS<ATASA ALCALINA D<AL5
$s una enzima hidrolasa responsable de eliminar grupos de !os!atos de 9arios
tipos de mol%culas como nucletidos, protenas y alcaloides. $l proceso de
eliminar el grupo !os!<tico se denomina des!os!orilacin. 4omo sugiere su
nombre, las !os!atasas alcalinas son m<s e!ecti9as en un entorno alcalino.
"a !os!atasa alcalina recibe el nombre de ortoB!os!ricoBmono%ster hidrolasa.
$stas enzimas proceden de la ruptura normal de las c%lulas sanguneas y de
otros te&idos, muchas de ellas no tienen un papel metablico en el plasma
e'cepto las enzimas relacionadas con la coagulacin y con el sistema del
complemento. "as !os!atasas alcalinas son enzimas que se encuentran
presentes en casi todos los te&idos del organismo, siendo particularmente alta
((
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
en huesos, hgado, placenta, intestinos y riSn. Tanto el aumento, as como su
disminucin en plasma tienen signi!icado clnico.
"as causas de un aumento de AA"J
$n!ermedad sea de aget, obstrucciones hep<ticas, hepatitis,
hepato'icidad por medicamentos y osteomalacia.
"as causas de una disminucin de AA"J
4retinismo y d%!icit de 9itamina 4
III.1.2.0. NADP? OHIDASA:
$nzima !la9oprotena que cataliza la reduccin mono9alente del o'geno
utilizando NA0C como !uente de $lectrones para !ormar un anin super'ido
(.>$R=I)0*.).
$nzima de la clase o'idoBreductasa que cataliza la reaccinJ
NA0C P *
(
V NA0C
P
P ( *
(
Y
"a reaccin !orma parte del aumento brusco y repentino del consumo de
o'igeno de los !agocitos neutr!ilos, eosin!ilos y mononucleares .roduce
aniones super'idos como o'idantes en el sistema !agoctico microbicida.
"a enzima depende de distintos citocromos. 0e!ectos en la produccin de iones
super'idos por $nzimas como la NA0C *'idasa dan lugar a $n!ermedad
/ranulomatosa 4rnica.
III.2. ENZIMAS EN EL CITOPLASMA
III.2.1. ENZIMAS DEL ESPACIO SOLUBLE.
E'()a* @2)-"2$/)-a*J
/liclisisJ "a gluclisis o gliclisis (del griego glycosJ az#car y lysisJ ruptura), es
la 9a metablica encargada de o'idar o !ermentar la glucosa y as obtener
(6
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
energa para la c%lula. 5sta consiste de 1N reacciones enzim<ticas que
con9ierten a la glucosa en dos mol%culas de piru9ato la cual es capaz de seguir
otras 9as metablicas y as continuar entregando energa al organismo.
Reaccin global de la gluclisis

"a 9a principal de degradaciones del catabolismo tiene tres !unciones
principalesJ
1. "a generacin de mol%culas de alta energa (AT y NA0C) como !uente
de energa celular en procesos de respiracin aerbica (presencia de
o'geno) y anaerbica (ausencia de o'geno).
(. "a generacin de piru9ato que pasar< al 4iclo de Hrebs, como parte de
la respiracin aerbica.
6. "a produccin de intermediarios de ; y 6 carbonos que pueden ser
ocupados por otros procesos celulares.
III.2.1.1. D&*6)%#"@&'a*a %& 2a-/a/":
$nzima tetr<mero que se encuentra en corazn, hgado, m#sculo,
eritrocitos, plaquetas y ndulos lin!<ticos. .e sintetiza desde dos genes
indi9iduales distintos, que originan polip%ptidos estructuralmente di!erentes
pero con la misma acti9idad cataltica.
(8
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
4orresponde a la categora de las o'idorreductasas dado que cataliza una
reaccin redo', en la que el piru9ato es reducido a lactato gracias a la
o'idacin de NA0C a NA0
P
. 0ado que la enzima tambi%n puede catalizar la
o'idacin de hidro'ibutirato, ocasionalmente es conocida como Cidro'ibutirato
0eshidrogenasa (C+0).
articipa en el metabolismo energ%tico anaerobio, reduciendo el piru9ato
(procedente de la gluclisis) para regenerar el NA0
P
, que en presencia de
glucosa es el sustrato limitante de la 9a glucoltica.
Cay cinco !orma isoenzim<ticas distintas codi!icadas por genes distintos. .u
!uncin es la de reducir re9ersiblemente el piru9ato a lactato. $st< relacionada
con el in!arto de miocardio, hemlisis y en!ermedades del par%nquima hep<tico.
III.2.1.2. Ma2a/" D&*6)%#"@&'a*a
"a enzima Ma2a/" %&*6)%#"@&'a*a cataliza la reaccin de o'idacin del (.)B
malato a o'aloacetato utilizando NA0
P
como aceptor de electrones.
S>a2a/" I NAD
I
"=a2"a-&/a/" I NAD?
$sta enzima tambi%n o'ida otros <cidos (Bhidrocarbo'licos.
"a malato deshidrogenasa (30C) participa en el ciclo del <cido ctrico y e'iste
en todos los organismos aerobios. 3ientras que los organismos procariotas
tienen una sola !orma de 30C, en las c%lulas eucariotas hay dos isozimasJ una
de ellas localizada en la matriz mitocondrial y otra en el citoplasma. "os hongos
y las plantas tambi%n tienen una !orma glio'isomal que es usada en la ruta del
glio'ilato. $n los cloroplastos de las plantas hay una !orma adicional de 30C
dependiente del NA0, malato deshidrogenasa (NA0P), que es esencial para
la !otosntesis uni9ersal 46, ciclo de 4al9in, y para la ruta 48 m<s
especializada.
III.2.1.3. I*"-)/#a/" D&*6)%#"@&'a*a
(:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
$nzima alost%rica, de 3 6EN H0, !ormada E subunidades. Requiere de 3n
(P
y
3g
(P
.
"a enzima cataliza la descarbo'ilacin o'idati9a del isocitrato a Z
Bcetoglutarato. $n un primer paso cataliza la o'idacin del isocitrato a una
cetona (o'alsuccinato), y posteriormente, la descarbo'ilacin del carbo'ilato en
posicin b con respecto a la cetona. $n esta reaccin sale el primer 4*
(
del
ciclo.
$n los eucariotas e'isten al menos tres isozimas de la )0CJ
a) )0C1 B )socitrato deshidrogenasa dependiente del NA0
P
citoplasm<tica
b) )0C( B )socitrato deshidrogenasa dependiente del NA0
P
mitocondrial,
c) )0C6 B )socitrato deshidrogenasa dependiente del NA0
P
, en los
humanos !ormada por las subunidades al!a, beta y gamma.
III.2.1.4. La A-"')/a*a
osee en su centro acti9o un centro de (8AeB8.) encargado de coordinar el
*C del citrato, para !acilitar su eliminacin .4on9ierte al citrato en isocitrato a
tra9%s de una reaccin de isomerizacin. "a aconitasa es una enzima que se
(;
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
llama enzima de tres puntos tiene tres sitios acti9os que se unen al 4C, 4**,
y la Acetil 4oA queda muy le&os sea queda en una posicin en que no podra
!ormar el comple&o enzimaBsustrato y por lo tanto no se puede trans!ormar.
$ntonces la enzima lo que hace es que 9a a quitar ese o'idrilo por un C y
!orma una mol%cula de C* pero la enzima se queda con ella y luego de&a un
doble enlace y se llama cisBaconiato.
"a aconitasa tiene !ierro !erroso que es el que sostiene a la mol%cula de C* y
tambi%n tiene como co!actor al glutatin.
"legamos al )socitrato y tenemos la primera reaccin o'idati9a del ciclo.
4)TRAT* ).*4)TRAT*
Aconitasa
III.3. ENZIMAS EN ORGANELOS
III.3.1. E'()a* &' P&#"=)*"a*
"os pero'isomas son org<nulos citoplasm<ticos muy comunes en !orma de
9esculas que contienen o'idasas y catalasas. $stas enzimas cumplen
!unciones de deto'i!icacin celular. 4omo todos los org<nulos, los pero'isomas
(D
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
solo se encuentran en c%lulas eucariontes.
"os pero'isomas son pequeSas 9esculas pro9istas de membrana plasm<tica
semipermeable, que contienen 9arias enzimas que producen o utilizan per'ido
de hidrgeno (agua o'igenada, C
(
*
(
)M se ha identi!icado m<s de :N enzimas en
los pero'isomas de di!erentes te&idos. .e !orman por gemacin al desprenderse
del retculo endoplasm<tico liso, aunque por s mismos pueden abulatar cierta
porcin de su membrana produciendo nue9os pero'isomas sin derramar su
contenido en el citoplasma. 0icha membrana protege la c%lula de los e!ectos
daSinos del interior del pero'isoma. "as partculas de su interior suelen estar
cristalizadas.
"os pero'isomas tienen un papel esencial en el metabolismo lipdico, en
especial en el acortamiento de los <cidos grasos de cadena muy larga, para su
completa o'idacin en las mitocondrias, y en la o'idacin de la cadena lateral
del colesterol, necesaria para la sntesis de <cidos biliaresM tambi%n inter9iene
en la sntesis de glicerolpidos, %steres lipdicos del glicerol (plasmgenos) e
isoprenoidesM tambi%n contienen enzimas que o'idan amino<cidos, <cido #rico
y otros sustratos utilizando o'geno molecular con !ormacin de agua
o'igenadaJ
R?
2
I O
2
J R I ?
2
O
2

$l agua o'igenada es un producto t'ico, que se degrada r<pidamente dentro
del propio pero'isoma por la enzima o'idati9a catalasa en agua y o'geno
usando como intermediarios de ciertas sustancias org<nicas (en la ecuacin la
9ariable R[).
?
2
O
2
I RK?
2
J RK I 2?
2
O
(E
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
III.3.1.1. Ca/a2a*a 9P&#"=)%a*a
$n animales, el per'ido de hidrgeno s% desto'i!ica mediante las acti9idades
de la catalasa y la glutatin pero'idasa. Aunque la catalasa no es esencial para
algunos tipos de c%lulas en condiciones normales, tiene un importante papel en
la adquisicin de tolerancia al estr%s o'idati9o en la respuesta adaptati9a de las
c%lulas. "a catalasa captura el C
(
*
(
antes de que pueda escapar de la c%lula y
lo con9ierte en o'geno molecular.
"a catalasa es la enzima encargada de neutralizar el agua o'igenada, puede
tambi%n neutralizar el per'ido de hidrogeno generado en mitocondrias, en el
retculo endoplasmatico y en el citosol. "a presencia de catalasa y pero'idasa
son las que usan los pero'isomas en el hgado para descomponer las
mol%culas de alcohol en sustancias que puedan ser eliminadas del organismo.
III.3.1.2. O=)%a*a* <2a3)')-a*:
*'idan sustratos !ormando agua o'igenada.
$l (:\ de los <cidos grasos se degradan en los pero'isoma por un proceso de
beta o'idacin que 9a a dar lugar a la Acetil 4oA. "a di!erencia con la
mitocondria es que la primera reaccin de o'idacin en el pero'isoma produce
agua o'igenada, pues es catalizada por una o'idasa !la9nica.
"as o'idas participan en reacciones metablicas de o'idacin utilizando el
o'igeno molecular y produciendo per'ido de hidrogeno.
III.3.1.3. U#a/">O=)%a*a
$l urato o'idasa es una enzima homotetram%rica que contiene cuatro sitios
acti9os id%nticos situados en la inter!acia entre sus cuatro subunidades. $st<
compuesto de un n#mero 9ariable de amino<cidos (seg#n la especie) siendo
alrededor de 6NN residuos de los mismos, con un peso molecular 6686E 0alton.
(R
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
$l urato o'idasa es una enzima de la clase de las o'idoreductasas, que est<
presente en 9arios organismos tanto unicelulares como multicelulares,
not<ndose sin embargo su ausencia en los seres humanos y algunos primates,
present<ndose acti9a en el catabolismo de la purina. $sta enzima cataliza la
o'idacin del <cido #rico a :Bhidro'iisourato, siendo el producto de la reaccin
inestable trans!orm<ndose espont<neamente en alantona.
Gcido Krico P *( P C(* ] :Bhidro'iisourato P C(*(] alantona P 4*(
III.3.1.4. S,8&#7=)%"* D)*,/a*a:
$nzima antio'idante natural del cuerpo que tiene la capacidad de neutralizar
un destructi9o radical libre, el anin super'idos producidas en las reacciones
de o'idacin de las mitocondrias, retculo endoplasmatico y citosol. $s la
primera lnea de de!ensa contra los radicales libres en el cuerpo humano.
III.3.1.5. N,-2&a*a*
"as nucleasas son enzimas que producen la rotura de los enlaces !os!odiester
de la cadena polinucleotdica de los <cidos nucleicos.
"os <cidos nucleicos son degradados en sus constituyentes por medio de las
nucleasas especi!icas, primero en nucletidos y luego en bases nitrogenadas.
"as nucleasas se pueden emplear en el tratamiento de en!ermedades
producidas por 9irus, hongos, bacterias y algunos tipos de c<ncer. .i el grupo
cataltico est< unido a un oligonucletido anti sentido pueden producir la rotura
del ARNm lo cual impide la sntesis de la protena codi!icada por el gen
respecti9o.
III.3.2. E'()a* &' C2"#"82a*/"*.
"os cloroplastos son org<nulos con !orma de disco. Aparecen en mayor
cantidad en las c%lulas de las ho&as, lugar en el cual parece que pueden
orientarse hacia la luz. $s posible que en una c%lula haya entre cuarenta y
cincuenta cloroplastos, y en cada milmetro cuadrado de la super!icie de la ho&a
hay :NN.NNN cloroplastos. 4ada cloroplasto est< recubierto por una membrana
6N
Gcido Krico P *
(
P C
(
* ] :Bhidro'iisourato P C
(
*
(
] alantona P4*(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
doble. $l cloroplasto contiene en su interior una sustancia b<sica denominada
estroma, la cual est< atra9esada por una red comple&a de discos conectados
entre s, llamados lamelas. 3uchas de las lamelas se encuentran apiladas
como si !ueran platillosM a estas pilas se les llama grana.
"os cloroplastos desempeSan una !uncin a#n m<s esencial que la de las
mitocondriasJ en ellos ocurre la !otosntesisM esta !uncin consiste en utilizar la
energa de la luz solar para acti9ar la sntesis de mol%culas de carbono
pequeSas y ricas en energa, y 9a acompaSado de liberacin de o'geno. "os
cloroplastos producen tanto las mol%culas nutriti9as como el o'geno que
utilizan las mitocondrias.
P#)'-)8a2&* &'()a*
E'()a Ca#a-/&#$*/)-a
ATP 9 SINTETASA
$l comple&o AT sintetasa es una enzima
situada en la membrana de los tilacoides de
los cloroplastos , encargada de sintetizar AT
a partir de A0 y un grupo !os!ato y la
energa suministrada por un chorro de
protones (C
P
). Responde a la sntesis de AT
de 3itchell. "a sntesis de AT gracias a esta
enzima se denomina !os!oliracin o'idati9a
del A0.
$sta enzima est< compuesta de dos
subunidades. >na anclada a la mitocondria o
al tilacoide llamada A* (4A* en el caso de
los tilacoides) y otras que sobresalen por la
cara interna de la estructura llamada A1(4A1
en el caso de los tilacoides).
<ERRODOHINA 9
NADP I REDUCTASAS
A D<RN5
<OTOSINTETICA
$s un enzima que contiene como centro
redo' una molecula de AA0 (0inucleotido de
nicotinamida y adenina) y, cuya !uncin es
catalizar la trans!erencia de electrones de
!orma secuencial desde dos mol%culas de
Aerrodo'ina (transportador de un electrn) a
una molecula de NA0
P
, con ob&eto de
61
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
almacenar la energa luminosa captada
durante la !otosntesis en poder reductor en
!orma de NA0C.
RUBISCO
Rubisco es la !orma abre9iada con que
normalmente se designa a la enzima cuyo
nombre completo es ribulosa 1,: di!os!ato
carbo'ilasa o'igenasa. $sta enzima tiene un
doble comportamiento que &usti!ica su
nombre, catalizando dos procesos opuestos.
rimero la !i&acin del 4*
(
a una !orma
org<nica, lo que &usti!ica su clasi!icacin como
carbo'ilasa. .egundo la !otorrespiracion, en
la que act#a como o'igenasa del mismo
sustrato. Rubisco es la protena mas
ab#ndate de la atmos!era.
III.3.3. E'()a* &' 2a )/"-"'%#)a
3itocondria, diminuta estructura celular de doble membrana responsable de la
con9ersin de nutrientes en el compuesto rico en energa tri!os!ato de
adenosina (AT), que act#a como combustible celular. or esta !uncin que
desempeSan, llamada respiracin, se dice que las mitocondrias son el motor de
la c%lula.
.e encuentran mitocondrias en las c%lulas eucariotas (c%lulas con el n#cleo
delimitado por membrana). $l n#mero de mitocondrias de una c%lula depende
de la !uncin de %sta. "as c%lulas con demandas de energa particularmente
ele9adas, como las musculares, tienen muchas m<s mitocondrias que otras.
or su acusado parecido con las bacterias aerbicas (es decir, que necesitan
o'geno), los cient!icos creen que las mitocondrias han e9olucionado a partir
de una relacin simbitica o de cooperacin entre una bacteria aerbica y una
c%lula eucariota ancestral.
"a mayora de las enzimas mitocondriales guardan relacin con la produccin
de energa, con las reacciones o'idati9as que proporcionan la !uerza de
6(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
induccin necesaria para muchas !unciones celulares.
III.3.3.1. E'()a* &' 2a &1#a'a &=/&#'a %& 2a )/"-"'%#)a
"a membrana e'terna posee enzimas capaces de modi!icar a los acidos grasos
para que estos puedan atra9esar la membrana interna e ingresar en la matriz
mitocondrial donde son degradados.
$n la membrana e'terna encontramos pocas enzimas entre las que m<s
destacanJ
Reductasas de citocromos b:
Amina o'idasa
.intetaza de acil 4oA
Aceltrans!errasa de colina
Aos!otrans!errasa de colina
Fuinasa de adenilato
Ce'oquinasa
Aos!olipasa A(
III.3.3.2. E'()a* &' &2 &*8a-)" )'/#a&1#a'"*"
0ada la presencia de la porina en la membrana e'terna su contenido de
solutos es similar al del citosol.
"as principales enzimas sonJ
Fuinasa de adenilato
Fuinasa de adenilato
Fuinasa de nuclesido di!os!atado
Fuinasa de nuclesido mono!os!atado
Reductasa de 'ilulosa
66
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
III.3.3.3. E'()a* %& 2a &1#a'a )'/&#'a
"a membrana interna contiene m<s protenas, carece de poros y es altamente
selecti9aM contiene muchos comple&os enzim<ticos y sistemas de transporte
transmembrana, que est<n implicados en la translocacin de mol%culas. $sta
membrana !orma in9aginaciones o pliegues llamadas crestas mitocondriales,
que aumentan mucho la super!icie para el asentamiento de dichas enzimas. $n
la mayora de los eucariontes, las crestas !orman tabiques aplanados
perpendiculares al e&e de la mitocondria, pero en algunos protistas tienen !orma
tubular o discoidal. $n la composicin de la membrana interna hay una gran
abundancia de protenas (un EN\), que son adem<s e'clusi9as de esta
organela. "as principales enzimas sonJ
0ehidrogenasa de succinato
0ehidrogenasa de NA0C
.intasa de AT
0ehidrogenasa de 6Bhidro'ibutarato
almitoiltrans!erasa de carnitina
0ehidrogenasa de glicerolB6B!os!ato
Ce'oquinasa
*'idasa de citocromo c
III.3.3.4. E'()a* %& 2a a/#)( )/"-"'%#)a2
$n la matriz mitocondrial tienen lugar di9ersas rutas metablicas cla9e para la
9ida, como el ciclo de Lrebs y la betaBo'idacin de los <cidos grasosM tambi%n
se o'idan los amino<cidos y se localizan algunas reacciones de la sntesis de
urea y grupos hemo.
M"2F-,2a E'()a T)8" %& R&a-/)3"* P#"%,-/"*L
68
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
#&a--)7'
L
C"&'()a
*
C"&'()a
). 4itrato 1. Aconitasa 0eshidratacin C
(
*
)). cisBAconitato (. Aconitasa Cidratacin C
(
*
))). )socitrato
6.)socitrato
deshidrogenasa
*'idacin NA0
P
NA0C P C
P
)-. *'alosuccinato
8.)socitrato
deshidrogenasa
0escarbo'ilaci
n
-. ZBcetoglutarato
:.ZBcetoglutarato
deshidrogenasa
0escarbo'ilaci
n o'idati9a
NA0
P
P
4oAB.C
NA0C P C
P
P 4*
(
-). .uccinilB4oA
;..uccinilB4oA
sintetasa
Cidrlisis
/0
P
i
/T P
4oAB.C
-)). .uccinato
D..uccinato
deshidrogenasa
*'idacin AA0 AA0C
(
-))). Aumarato
E.Aumarato
Cidratasa
Adicin (C
(
*) C
(
*
)I. LB3alato
R.3alato
deshidrogenasa
*'idacin NA0
P
NA0C P C
P
I. *'aloacetato
1N. 4itrato
sintasa
4ondensacin
III.3.4. E'()a* &' L)*"*"a*
.aco delimitado por una membrana que se encuentra en las c%lulas con n#cleo
(eucariotas) y contiene enzimas digesti9as que degradan mol%culas comple&as.
"os lisosomas abundan en las c%lulas encargadas de combatir las
en!ermedades, como los leucocitos, que destruyen in9asores noci9os y restos
celulares.
$l tamaSo de los lisosomas es muy 9ariable, pero suele oscilar entre N,N: y N,:
micrmetros de di<metro. 4ada uno est< rodeado por una membrana que
protege la c%lula de las enzimas digesti9as del lisosoma. "as protenas de la
6:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
membrana protegen la acti9idad de las enzimas manteniendo la acidez interna
adecuadaM tambi%n transportan los productos digeridos !uera del lisosoma.
"as enzimas lisosmicas se !abrican en el retculo endoplasm<tico rugoso y se
procesan en el aparato de /olgi. .e distribuyen englobadas en sacos llamados
9esculas de transporte que se !unden con tres tipos de estructuras en9ueltas
por membranasJ endosomas, !agosomas y auto!agosomas. $n todos los casos,
las enzimas digesti9as suministradas por los lisosomas digieren los ob&etos
en9ueltos en membranas y los reducen a compuestos sencillos que se en9an
al citoplasma como nue9os materiales de construccin celular.
"as alteraciones de las enzimas lisosmicas pueden causar en!ermedades. "os
niSos nacidos con la en!ermedad de TayB.achs carecen de una enzima que
degrada un lpido comple&o llamado ganglisido. 4uando se acumula en el
organismo, daSa el sistema ner9ioso central, pro9oca retraso mental y causa la
muerte a los cinco aSos. "a in!lamacin y el dolor asociados con la artritis
reumatoide y la gota tienen relacin con la !uga de enzimas lisosmicas.
a5 E'()a* 8#"/&"2$/)-a*:
4atepsinas +, 0, /, "
$lastasa
4olagenasa
15 ?)%#72)*)* %& &*/&#&*:
0eo'iribonucleasa ))
Ribonucleasa ))
-5 ?)%#72)*)* %& @2,-7*)%"*:
/lucoronidasa
Acetil he'osaminidasa
Cialuronoglucosaminidasa
6;
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
"isosima
Neuraminidasa
%5 ?)%#72)*)* %& 2$8)%"*:
Aos!olipasa A1 y A(
$sterasa de colesterol
<OS<ATASA ACIDA
"a enzima !os!atasa <cida pertenece a la clase hidrolasa. "as !uentes
principales de la !os!atasa <cida son la gl<ndula prost<tica, plaquetas, el baso,
los riSones y los glbulos ro&os. $stas !os!atasas tienen acti9idad ptima por
deba&o de un C D,N.
"a !os!atasa <cida prost<tica es de mayor inter%s clnico ya que puede
encontrarse en concentraciones s%ricas ele9adas de enzimas que produce en
pacientes con carcinoma prost<tico con met<stasis.
"a !os!atasa <cida es considerada un marcador lisosmico. $sta enzima se
encuentra en polimor!o nucleares, neutr!ilos, macr!agos, !ibroblastos y
lin!ocitos. Tambi%n !ue relacionada con procesos de lisis celular,
queratinizacin, metabolismo de huesos, in!lamacin y en la sntesis y
degradacin de col<geno.
III.3.5. E'()a* &' R&/$-,2" E'%"82a*4/)-"
Tambi%n llamado retculo endopl<smico, sistema de membranas que !abrica y
transporta materiales dentro de las c%lulas con n#cleo (c%lulas eucariotas). $l
R$ est< !ormado por t#bulos rami!icados limitados por membrana y sacos
aplanados que se e'tienden por todo el citoplasma (contenido celular e'terno al
n#cleo) y se conectan con la doble membrana que en9uel9e al n#cleo. Cay dos
tipos de Retculo $ndoplasm<ticoJ liso y rugoso.
a5 E'()a* &' R&/$-,2" E'%"82a*4/)-" L)*"
6D
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
$l R$ liso (R$") desempeSa 9arias !unciones
)nter9iene en la sntesis de casi todos los lpidos que !orman la
membrana celular y las otras membranas que rodean las dem<s
estructuras celulares, como las mitocondrias. "as c%lulas especializadas
en el metabolismo de lpidos, como las hep<ticas, suelen tener m<s R$
liso.
"iberacin de glucosa a partir de /lucosa ;B!os!ato 9a /lucosa ;B
!os!atasa.
$l R$ liso tambi%n inter9iene en la absorcin y liberacin de calcio para
mediar en algunos tipos de acti9idad celular. $n las c%lulas del m#sculo
esquel%tico, por e&emplo, la liberacin de calcio por parte del R$ acti9a
la contraccin muscular.
Adem<s el R$ liso participa en los procesos de deto'i!icacin celular,
siendo el lugar donde son metabolizadas una gran cantidad de drogas
como !enobarbital, alcaloides, hidrocarburos arom<ticos. "a
deto'i!icacin tiene lugar por una serie de enzimas o'igenasas entre las
que se encuentra el citocromo 8:N que dada su inespeci!icidad son
capaces de deto'i!icar miles de compuestos hidr!obos
trans!orm<ndolos en hidr!ilos, m<s !<ciles de e'cretar.
E'()a* 8#)'-)8a2&*:
ENZIMA <UNCIN
4)T*4R*3* B8:N Realizan la desinto'icacin en el hgado de di9ersos
compuestos org<nicos. $stas enzimas se caracterizan por
su !alta de especi!icidad de sustrato y pueden o'idar miles
de compuestos hidr!obos distintos y con9ertirlos en
sustancias mas hidro!licas y m<s !<ciles de e'cretar. "os
e!ectos no siempre son positi9os. or e&emplo, el
compuesto relati9amente inocuo 9enzo pireno que se !orma
cuando se requema la carne en una parrilla se con9ierte en
un carcinogenopotente por e!ecto de las enzimas
desinto'icantes del R$". "as enzimas del citocromoB8:N
6E
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
metabolizan muchos medicamentos prescritos y la 9ariacin
gen%tica en estas enzimas en los seres humanos e'plican
la di!erencia en la e!ecti9idad y acciones colaterales de
muchos !<rmacos entre unas personas y otras.
/">4*.A ;B
A*.AATA.A
4uando se requiere energa esta enzima con9ierte el
glucgeno en glucosa ;B!os!ato luego retiran el grupo
Aos!ato, lo que genera mol%culas de glucosa en la sangre,
que las lle9a a los te&idos del cuerpo.
$sta enzima acti9ada por el 3gP( se encuentra en la cara
luminar del (R$) de los hepatocitos y c%lulas renales %sta
enzima no se encuentra en el m#sculo ni en el cerebro por
lo que la gluconeog%nesis no se da en estos te&idos.
"a glucosa ; !os!atasa es una enzima de membrana y est<
localizado en su centro acti9o dentro del retculo
endoplasmatico (R$). "a glucosaB;!os!ato se transporta
hacia el interior del R$ por una protena T1, all
eshidroglucosa m<s i por la glucosa ? ; B !os!atasa, y
entonces la glucosa pasan de nue9o al citosol por las
protenas T6 la glucosa ; ? !os!atasa est< estabilizada por
una protena asociada unida a 4a( "a relacin catalizada
por la glucosa ; !os!atasa no requiere de sntesis de AT si
no que es una simple hidrlisis de un %ster !os!ato.
/lucosa ; !os!ato P agua glucosa i B 16E L^ mol
"a de!iciencia de la enzima glucosa ; !os!atasa se
denomina en!ermedad de 9on /ienHe o glucogenosis de
tipo ).
15 E'()a* %&2 R&/$-,2" E'%"82a*4/)-" R,@"*"
resentan ribosomas en su super!icie e'terna adheridos a protenas
denominadas ribo!orinas. .e ubica cerca del n#cleo, el retculo endoplasm<tico
rugoso es el punto inicial de la 9a biocin%ticaJ es el punto donde se sintetizan
las protenas, cadenas de carbohidratos y !os!olpidos que 9ia&an
por los compartimientos membranosos de la c%lula.
<,'-)"'&*:
$s responsable de la sntesis y segregacin de protenas no citoslicas.
6R
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
.ntesis de protenas en ribosomas unidos con la membrana o con
ribosomas libres.
.ntesis de protenas secretoras, lisosmicas o 9acuolares 9egetales en
los ribosomas unidos a membranas.
rocesamiento de protenas reci%n sintetizadas en el Retculo
$ndoplasm<tico.
.ntesis de protenas integrales de membrana en los ribosomas unidos a
la membrana.
P#)'-)8a2&* &'()a* &' &2 R&/$-,2" E'%"82a*4/)-" #,@"*":
E'()a <,'-)7'
OLIGOSACARIL
TRANS<ERRASAS
Agrega los carbohidratos a las protenas
nacientes y &unto con la peptidasa de
seSal son protenas integrales de la
membrana que est<n pr'imas a la
translocacin y act#an sobre las protenas
nacientes con!orme entra la luz del
retculo $ndoplasm<tico, tras!iere unos
monosac<ridos espec!icos de un
donador de az#car apropiado a un
aceptor de az#car apropiado. "a mol%cula
donadora siempre es el az#car de
nucletido y la receptora es el e'tremo
creciente del carbohidrato.
PEPTIDASAS DE SEMAL
Retira la porcin NBterminal de la mayora
de los polipeptidos nacientes que
contiene el p%ptido de seSal.
ISOMERASAS DE
<OS<OS<OMANOSA
4ataliza la con9ersin de la !ructuosa ;B
!os!ato en manosa ; !os!ato, una reaccin
crucial en la 9a que hace que la manosa
este disponible para incorporarla a los
oligosacaridos. "a a!eccion puede
tratarse con complementos orales de
manosa. Al principio el tratamiento se
probo que su!ria de hemorragias
8N
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
gastrointestinal intolerable, una de las
complicaciones !recuentes de la
en!ermedad. >nos meses despu%s de
iniciar el complemento de manosa el niSo
lle9a una 9ida normal.
ISOMERASA DE
DISUL<URO DE
PROTEINA DPDI5
4ataliza la unin entre los enlaces de
disul!uro y los residuos de cisterna de las
cadenas polipeptidicas. "os enlaces de
disul!uro tienen una !uncin esencial en el
mantenimiento de la estabilidad de las
protenas.
III.3.0. E'()a* &' &2 A8a#a/" %& G"2@)
"a principal !uncin del aparato de /olgi es la secrecin de las protenas
producidas en los polisomas del R$ rugoso, las cuales se incorporan por la
cara _cis` procedentes de las 9esculas de transicin. A continuacin atra9iesan
la zona media y emigran a la cara _trans`M desde aqu pasan a las 9esculas
secretoras para ser eliminadas por un proceso de e'ocitosis al medio
e'tracelular.
$n este proceso, las membranas de las 9esculas se !usionan con la membrana
plasm<tica, de tal !orma que esta se regenera.
Algunas 9esculas secretoras que contienen enzimas hidrolticas se
trans!orman en lisosomas. Adem<s, en este org<nulo ocurre la glucosilacin de
protenas y lpidos para producir glicoprotenas y glicoes!ingolpidos. "os
az#cares, oligosac<ridos que ya se haban unido a protenas y lpidos en el R$,
son eliminados y sustituidos por otros nue9os en el aparato de /olgi. Algunos
de los productos que se secretan inter9ienen en la !ormacin de la pared
celular de las c%lulas 9egetales.
P#)'-)8a2&* &'()a*
81
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
ENZIMA <UNCIN EN EL APARATO DE GOLGI
GLUCOSIL
TRANS<ERASAS
articipan en el proceso de glucosilacin. @ dentro de
estas est< la trans!erasa de sialilo (que coloca un acido
si<lico en la posicin terminal de la cadena en c%lulas
animales. .e localiza en e'tremo trans de la pila de
/olgi. $ntre otras tenemos aJ sialiltrans!erasa,
galactosiltrans!erasa, NBacetilglucosaminiltrans!erasa,
galactosi)BNBacetilglucosamina trans!erasa, etc. (estas
#ltimas enzimas est<n in9olucradas en la trans!erencia
de <cido 43Bneuramnico (43BNANA), >0B
galactosa y >0Bacetilglucosamina a los oligosac<ridos
precursores, las cuales est<n altamente concentradas
en la !raccin de /olgi de hgado de rata)
MANOSIDASA II
>na enzima residente de las cisternas mediales del
aparato de /olgi. "a enzima aparece en una 9escula y
las cisternas. .e presume que la 9escula marcada
transporta la enzima en sentido retrgrado para
compensar el mo9imiento de a9ance de la enzima como
resultado de la maduracin de las cisternas.
8(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
$l Aparato de /olgi tambi%n presenta enzimas que se hallan en el Retculo
endoplasm<tico, como NA0C citocromo b: reductasa, NA0C citocromo c
reductasa y :Bnucleotidasa.
Adem<s el Aparato de /olgi se encarga de ensamblar las enzimas que se 9an
encontrar presentes en el lisosoma.
86
GLUCOSIL
TRAN<ERASAS
D&'/#" %& &*/a* /&'&"*:
Pa#/)-)8a' &' &2 8#"-&*" %&
@2,-"*)2a-)7'
)n9olucradas en la trans!erencia de
GALACTOSIL>N
"ipasa
Aos!olipasa A1, A(
Aos!atasa <cida (9arios tipos)
Aos!oprotena B !os!atasa
Aos!odiesterasa
Aos!olipasa e
Antisul!atasa A y +
?)%#"2a*a* +,& a-/Na' *"1#&
-"8,&*/"* @2,-7*)%"*
"isozima (3uramidasa)
Neuraminidasa
/lucosidasa
/lucosidasa
/alactosidasa
/lucoronidasa
Cialuronidasa
?)%#"2a*a* +,& a-/Na' *"1#& ,')"'&*
8&8/$%)-a*
4arbo'ipeptidasa
4atepsina A
4arbo'ipeptidasa <cida
0ipeptidasa
4atepsina +l, +(, 4, 0, $
4olagenasa
E'()a* +,& a-/Na' *"1#& ,')"'&*
a'6)%#)%" > 4-)%" &' a'6)%#)%"* +,&
/)&'&' ."*."#)2"
iro!os!atasa
Aril!os!atasa
E'()a* +,& a-/Na' *"1#& 2a* ,')"'&* P
> N
Aos!amidasa
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
III.3.A. E'()a* &' &2 G2)"=)*"a
.on organelos que se encuentran en las c%lulas eucariota, particularmente en
los te&idos de almacena&e de lpidos de las semillas, y tambi%n en los hongos
!ilamentosos. "os glio'isomas son pero'isomas especializados que con9ierten
los lpidos en carbohidratos durante la germinacin de las semillas.
$n los glio'isomas, los <cidos grasos se hidrolizan a acetilB4oA mediante las
enzimas aBo'idacin pero'isomiales. Adem<s, contienen las enzimas cla9e del
ciclo del glio'ilato (isocitrato liasa y malato sintasa). As realizan la ruptura de
los <cidos grasos y producen los productos intermedios para la sntesis de
az#cares por gluconeog%nesis.
P#)'-)8a2&* &'()a* %&2 G2)"=)*"a
ENZIMA <UNCIN
)socitrato liasa. $nzima cla9e del ciclo del glio'ilato.
3alato sintasa. $nzima cla9e del ciclo del glio'ilato.
III.4. ENZIMAS EN EL NOCLEO
III.4.1. E'()a* &'2a(a%a* a C#"a/)'a
E'()a <,'-)7'
ARN
POL2MERASA II
ARN polimerasa )), localizada en el n#cleoplasma
.intetiza precursores de ARN mensa&ero. $sta
88
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
polimerasa es el tipo m<s estudiado, y se
requieren !actores de trascripcin para que se
una a los promotores del A0N.
roduce ARN heterog%neo nuclear (ARNBhn) que
tras el procesamiento da lugar a los ARN
mensa&eros (ARNBm) que se traducen a
protenas.
"as ARN polimerasas o transcriptasas, a
di!erencia de lo que ocurre con las A0N
polimerasas, carecen de !uncin Ocorrectora de
pruebasO. $sta di!erencia se debe en primer lugar
a que los transcritos son cortos y la probabilidad
de que uno de los ARN posea una alteracin es
ba&a, y en segundo lugar a que la 9ida media de
los ARN es corta y pronto se 9uel9e a sintetizar
otro ARN nue9o. or consiguiente el que e'ista
un ARN con una alteracin no es gra9e ya que
durar< poco y ser< remplazado pronto por otro
nue9o sin la alteracin. .in embargo, un error en
la replicacin del A0N puede transmitirse a todas
las c%lulas que deri9en por di9isin de la c%lula
a!ectada.
ARN
POL2MERASA III
"as ARN polimerasas ))) sintetizan ARN de
trans!erencia, ARN ribosmico de :. y otros
pequeSos ARN encontrados en el n#cleo celular y
en el citoplasma.
"as ARN polimerasas est<n constituidas de al
menos 1N subunidades, ciertas de entre ellas son
comunes a las 6 enzimas mencionadas. "as m<s
grandes subunidades de cada polimerasa son
homlogas entre ellas y entre sus subBunidades
a, b y b[ al ARN polimerasa de la $.coli.
8:
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
"os comple&os enzim<ticos de las polimerasas
eucariontes son separables en columnas de
intercambio inico y sus acti9idades catalticas de
polimerizacin son distinguibles unas de otras por
su sensibilidad relati9a a la droga al!a amanitina.
As se tiene que el tipo enzim<tico m<s sensible
es la ARN polimerasa )) (que transcribe ARN
mensa&eros) y la enzima menos sensible, o
relati9amente resistente, es la ARN polimerasa )
(que transcribe ARN ribosomal). "a ARN
polimerasa ))) presenta una sensibilidad
intermedia a la droga.
TRI<OS<ATASA
DE NUCLEOSIDO
>na enzima que cata liza la hidrlisis de
nuclesidos tri!os!atos a nuclesidos di!os!atos.
Tambi%n puede catalizar la hidrlisis de
nucletidos tri!os!atos, di!os!atos, tiamina
di!os!atos y AA0. $l nuclesido tri!os!ato
!os!ohidrolasas ) y )) son subtipos de la enzima y
se encuentran principalmente en 9irus.
Tambi%n cumple otra !uncin, tal como
transportar 4a
(P
a tra9%s de la membrana. $stas
enzimas pueden ser dependientes de 4a
(P,
3g
(P,
aniones, C
P
, o A0N.
ADN
POLIMERASA
"a A0N polimerasa es una enzima que cataliza la
sntesis de A0N a partir de deso'irribonucletidos
y de una mol%cula de A0N plantilla o molde que
es la que ser< OcopiadaO.
Tras la accin de la A0N polimerasa ) y una 9ez
que se han eliminado y aSadido alrededor de
unas 1N bases, inter9iene la enzima A0N ligasa,
que une los e'tremo libres del !ragmento reci%n
!ormado con el resto de la cadena, recuperando
as el A0N su estructura normal.
$sta enzima inter9iene en dos procesosJ
or un lado, en la duplicacin del A0N en !orma
8;
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
de cromatina para dar a cada c%lula hi&a una
copia del A0N original en el proceso de la mitosis.
$n este caso, la enzima copia la cadena de
nucletidos de !orma complementaria (A por T, 4
por /).
or otro lado, en el proceso de transcripcin del
A0N, copiando el A0N de de una de las cadenas
de nucletidos, pero esta 9ez, la copia se realiza
en !orma de ARN, tambi%n de !orma
complementaria (A por >, 4 por /).
"a propiedad de las A0N polimerasas para
replicar hebras de A0N se utiliza para la reaccin
en cadena de la polimerasa, conocida como 4R
por sus siglas en ingl%s, para obtener un gran
n#mero de copias de un !ragmento de A0N
particular, ampli!ic<ndolo para propsitos de
in9estigacin.
$n cada horquilla de replicacin, la A0N
polimerasa y otras enzimas sintetizan dos nue9as
cadenas de A0N que son complementarias
respecto a las ( cadenas originales. 0urante este
proceso, la A0N polimerasa reconoce una base
nucleotdica no apareada de la cadena original y
la combina con un nucletido libre que tiene la
base complementaria correcta.
"uego, la A0N polimerasa cataliza la !ormacin
de nue9os enlaces co9alentes que ligan el !os!ato
del nucletido libre entrante con el az#car del
nucletido pre9iamente.
III.4.2. E'()a* &'2a(a%a* a2 N,-2&"2"
E'()a <,'-)7'
METILASAS DEL RNA $s una enzima que cataliza la metilacin de
bases o ribosa en las mol%culas de ARN.
*tros tipos de metilasasJ
DAM
"a metilasa dam pone un metilo sobre el
nitrgeno ; (m;N) del ad%nine en la
8D
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
secuencia /AT4. $l A0N listo a partir de
c%lulas dam P contendr< /m;AT4 y no ser<
cortando por enzimas bloqueadas por este
modo de metilacin (3bo ) y +am C)).
DCM
"as metilasas dcm ponen un metilo sobre el
carbono : del citosina (m:4) en la secuencia
44A// o 44T//. $l A0N listo a partir de
c%lulas dcm P contendr< 4m:(A^T)// y no
ser< cortando por enzimas bloqueadas por
este modelo de metilacin (+st *)).
&'I(A)A *E
+,-E.(A)
La .,'-)7' %& 2a +,)'a*a &' 2a -F2,2a
"as quinasas incluyen en un gran n#mero
de enzimas que regulan la acti9idad de otras
protenas y, m<s indirectamente, las acti9idades
de las c%lulas. Todas las quinasas aSaden grupos
de !os!ato a otras mol%culas, a menudo otras
protenas, en la c%lula. "a !os!orilacin de las
protenas, la adicin de un grupo de !os!ato a una
cadena del amino<cido, es una accin regulatoria
muy importante. or la razn de que cada grupo
de !os!ato lle9a consigo dos cargas negati9as, la
adicin de un !os!ato puede alterar la !orma de la
protena. "a !orma alterada de una protena es a
menudo relacionada con la acti9idad alterada de
la protena. "a habilidad de cambiar la
con!ormacin de una protena entre dos !ormas
di!erentes permite un control regulatorio sobre la
acti9idad de la protena. "a !os!orilacin (la
adicin de un grupo de !os!ato a una protena) por
las quinasas es un proceso re9ersible, y las
protenas pueden ser des!os!oriladas
(remo9imiento de un grupo de !os!ato) por
enzimas que se conocen protenaB!os!atasa.
$stos dos grupos de enzimas a menudo traba&an
&untas para OapagarO y OencenderO las seSales
celulares. "as quinasas &uegan un papel muy
importante en 9arios procesos de seSalizacin
8E
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
&'I(A)A *E
+,-E.(A)
intracelular, incluyendo aquellos que controlan el
crecimiento y la di9isin celular.
La* +,)'a*a* ! &2 -4'-&#
$l crecimiento celular y los procesos del ciclo
celular se encuentran acti9ados constituti9amente
en las c%lulas cancerosas. "as !unciones
normales e&ercidas por las quinasas y las
!os!atasas ya no sir9en. >na caracterstica cla9e
de las c%lulas cancerosas es su habilidad
de reproducirse en la ausencia de seSales
e'ternas tales como los !actores de crecimiento.
$n el proceso normal, los !actores de crecimiento
que son emitidos por otras c%lulas se ligan a
los receptores en la super!icie celular,
estimulando a que la c%lula se di9ida. "as c%lulas
cancerosas encienden estos procesos en la
ausencia de un !actor de crecimiento. $sto puede
ocurrir por una mutacin en un gen de una
quinasa o de una !os!atasa. $n un e&emplo,
la leucemia crnica mieloide, una
translocacin cromosomal en particular (llamado
el cromosoma hiladelphia) ha sido identi!icada
que crea una quinasa nue9a que se encuentra
OencendidaO todo el tiempo. "os procesos que
esta quinasa controla permanecen,
e!ecti9amente, siempre acti9os. $sto resulta en la
proli!eracin de c%lulas cancerosas.
/C/L/C,,
<OS<ATASA DE LA
<OS<OPROTEINA
Ca sido implicada en di!erentes !acetas de la
!uncin celular.
$n mam!eros, es una de las principales
!os!atasas de serina^treonina y modula muchas
protenas in9olucradas en transduccin de
seSales, incluyendo mol%culas de super!icie que
!uncionan como receptores, F citoslicas y
!actores de transcripcin. Adem<s, modi!ica
protenas de importancia en la regulacin del ciclo
celular y en la trans!ormacin, crecimiento y
8R
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
di9isin celular.
RIBONUCLEASAS
"as ribonucleasas (RNasas), pertenecientes a la
super!amilia Ribonucleasa A, son enzimas que
participan en 9arios procesos !isiolgicos, que 9an
desde el procesamiento alternati9o del RNA hasta
la angiog%nesis.
$stas enzimas son e'presadas por di!erentes
te&idos y e'hiben especi!icidades 9ariables contra
di!erentes sustratos de RNA. $l potencial
terap%utico de las RNasas se ha sugerido en
procesos oncog%nicosM adicionalmente, se ha
descrito que tienen acti9idad anti9iral directa y el
potencial de acti9ar c%lulas del sistema inmune
innato induciendo su maduracin y la produccin
de citoquinas proin!lamatorias. Nuestro grupo de
in9estigacin ha realizado estudios que seSalan la
capacidad de cuatro RNasas recombinantesJ
$0N, B8$0N, RNasa A y angiogenina de inhibir la
replicacin del 9irus de la inmunode!iciencia
humana tipo 1 en lin!ocitos T de sangre peri!%rica
acti9ados.
$n este artculo se re9isar< la clasi!icacin de las
ribonucleasas que constituyen la super!amilia
RNasa A y se describir<, en !orma detallada, lo
que se conoce de la !uncin biolgica, accin
anti9iral y mecanismo de accin de las RNasas a
las que se les ha reportado acti9idad anti9iral.
IV. CONCLUSIONES
r<cticamente todas las reacciones qumicas dentro de las c%lulas son
catalizadas por las enzima.
"as enzimas incrementan la 9elocidad de las reacciones uniendo
sustratos en la posicin adecuada, alterando la con!ormacin de los
:N
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
sustratos para apro'imarlos al estado de transicin y participando
directamente en las reacciones qumicas.
"as enzimas son muy importante a que seran la cla9e de todos los
procesos 9itales y !isiolgicos que rigen los !enmenos de la 9ida.
Todas las acti9idades de las enzimas son reguladas para cubrir las
necesidades esenciales de la c%lula.
"a acti9idad enzim<tica puede ser controlada a tra9%s de la unin de
mol%culas pequeSas, de interaccin con otras protenas y de
modi!icaciones co9alentes.
"as coenzimas traba&an &unto con las enzimas para transportar grupo
bioqumicos entre sustratos.
V. ANEHO
:1
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
ENZIMAS ; MANIPULACIN GENTICA
"a in9estigacin gen%tica necesita la manipulacin de A0N para poder
construir teoras sobre los mecanismos que suceden en las c%lulas in 9i9o y
elucidar la estructura del genoma y su organizacin (intrones, e'ones,
elementos de regulacin), tambi%n para poder desarrollar t%cnicas nue9as de
curacin y terapia mediante la caracterizacin de los genes terap%uticamente
interesantes, y para la !abricacin de plantas y animales de las caractersticas
deseadas, con un mayor rendimiento agrcola y ganadero. $s importante
mantener siempre en el pensamiento que la manipulacin gen%tica sir9e un !in
muy determinado, que a 9eces se di!umina cuando se entra en pro!undidades
t%cnicas.
T%cnicas b<sicasJ
Cay que tener en cuenta que toda la manipulacin gen%tica implica un
aislamiento del medio celular, por lo que las condiciones de e'perimentacin
son todas in 9itro, y no tienen nada que 9er con el metabolismo de las <cidos
nucleicos. 4on esta premisa en mente, los resultados que se pudieran obtener
mediante estas t%cnicas siempre deber<n ser contrastados y 9eri!icados antes
de e'trapolarlos a la situacin de un organismo 9i9o. $stas t%cnicas utilizan las
enzimas presentes en las c%lulas como herramientas para poder cortar,
empalmar, duplicar, ampli!icar y recombinar los !ragmentos de A0N con los que
se traba&aM en suma, las enzimas e!ect#an las mismas !unciones que en el
medio !isiolgico, pero libres de todo !actor de regulacin, para hacer su
acti9idad m<s predecible y permitir una manipulacin al anto&o del
e'perimentador. 5sta es la principal di!erencia entre los sistemas in 9i9o e in
9itro.
3%todos enzim<ticos.
:(
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
"as t%cnicas de manipulacin enzim<tica de los <cidos nucleicos son mucho
m<s !inas y espec!icas que las anteriores, por lo que se puede hablar de
diseccin g%nica. "as enzimas, llamadas nucleasas, se e'traen de di9ersos
organismos, generalmente microscpicos, y hay de todos los tiposJ endoB y
e'onucleasas, A0N o ARNasas, espec!icas de secuencia o no, espec!icas de
hebra sencilla o de doble hebra, y todas las combinaciones entre ellas. $n la
siguiente lista se detallan algunas de las m<s utilizadas.
A0Nasa ).
$s una endonucleasa de $. coli que corta A0Nds y A0Nss, sin especi!icidad de
secuencia, pero pre!erentemente detr<s de pirimidinas. $l corte al azar sobre
A0Nds se realiza en distintos sitios en cada hebra si el medio tiene 3g(P, pero
si el catin es 3n(P los dos cortes est<n generalmente en el mismo sitio. $l
uso indiscriminado (al azar) de esta enzima permite determinar zonas de
acti9idad de la cromatina mediante la mayor abundancia de cortes, lo que
signi!icara que el A0N est< m<s e'puesto al corte.
$'onucleasa ))).
*tra enzima de $. coli que elimina nucletidos uno por uno desde los e'tremos
6[B*C. Act#a sobre todos los tipos de A0Nds que tengan esos e'tremos (lineal
y circular con una muesca), y en los A0Nds se utiliza para !abricar e'tremos
cohesi9os (e'tremos de una mol%cula de A0Nds en los que una de las hebras
sobresale un poco sobre la otra).
A0N polimerasa ).
$s la reina de la !iesta por e'celencia. .e obtiene de $. coli y !ue una de las
primeras en estudiarse y caracterizarse. 4omo todas las A0N polimerasas
conocidas, tiene tres acti9idades di!erenciadasJ A0N polimerasa :[B6[ (necesita
empezar por un e'tremo 6[B*C libre), e'onucleasa :[B6[ (para eliminar
cebadores in 9i9o), y A0N e'onucleasa 6[B:[ (Acti9idad correctora de errores).
"a acti9idad e'o:[B6[ se utiliza para sustituir una hebra en un A0Nds con una
:6
DISTRIBUCIN DE ENZIMAS EN LOS COMPARTIMIENTOS CELULARES
muesca (producida por la A0Nasa )) por otra e'actamente igual, pero marcada,
en lo que se llama marca&e por desplazamiento de la mella. .in embargo, esta
acti9idad es tan potente que puede signi!icar un problema, al eliminar cualquier
hebra con un e'tremo :[B!os!ato, por lo que se ha diseSado una A0N
polimerasa especial, llamada A0N polimerasa Llenob (que slo consta de la
subunidad con ese mismo nombre, el n#cleo), en la que !alta la acti9idad
e'onucleasa :[B6[. $stas A0N polimerasa especiales no pueden hacer traslado
de la mella, sino slo rellenar huecos o eliminar e'tremos cohesi9os al alargar
el e'tremo m<s corto sobre el m<s largo (rellenar los huecos generados con
+al61). *tra !uncin de esta polimerasa es la t%cnica de polimerizacin con
iniciacin al azar (random priming), en la que un oligo pequeSo (8 ; nt) se
une m<s o menos inespec!icamente a un !ragmento de A0N desnaturalizado
(la unin inespec!ica se obtiene sua9izando las condiciones de hibridacin). $l
oligo presenta el e'tremo 6[B*C necesario para comenzar la sntesis, que ha de
hacerse a un pC ligeramente <cido (;,;) para minimizar el e!ecto de la acti9idad
correctora de errores, que e9itara la polimerizacin sobre el oligo, al no
aparear e'actamente %ste con el A0N molde.
VI. BIBLIOGRA<A
:8
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0$ R*+$RT)R $.C. +iologa 4elular y 3olecular 1(Q $dicin. +uenos
Aires $l Ateneo (NN:.
C. R*+$RT C*RT*N. T+ioqumicaU. $ditorial rentice Call. 3%'ico.
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desley )beroamericana. 3%'ico.
+ioqumica, 4apitulo ;J $N2)3A. 4*N4$T*. +G.)4*. @
4)N5T)4ABag 1N6B11;
3*NT/*3$R@ 4%lula 6Q $dic.$ditorial Carcourt +race ? A/B;RBD(
CAR$R bioqumica ilustrada 1;Q edic.
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