Funciones de la AMPK en el Tejido Adiposo

La protena quinasa activada por AMP (AMPK) participa en la homeostasis

energtica de la clula. Sus funciones han sido ampliamente estudiadas en los
msculos y en hgado. AMPK estimula las vas que aumentan la produccin de
energa (el transporte de glucosa, oxidacin de los cidos grasos) y apaga vas que
consumen energa (lipognesis, la sntesis de protenas, la gluconeognesis). Esto ha
llevado al concepto de que la AMPK tiene un interesante potencial farmacutico en
situaciones de resistencia a la insulina y en efecto es el objetivo de los medicamentos
existentes y de las hormonas que mejoran la sensibilidad a la insulina. El tejido
adiposo es un jugador clave en el metabolismo energtico a travs de la liberacin de
sustratos y hormonas implicadas en el metabolismo y en la sensibilidad a la
insulina. La activacin de la AMPK en el tejido adiposo se puede lograr a travs de
situaciones tales como el ayuno y el ejercicio. La leptina y la adiponectina, as
como los medicamentos hipoglicemiantes son activadores de la AMPK del tejido
adiposo, esta activacin probablemente involucra cambios en la relacin AMP/ATP
y de su quinasa LKB1. Cuando se activa, la AMPK limita el flujo de salida de cidos
grasos desde los adipocitos y favorece la oxidacin de los cidos grasos locales. Dado
que los cidos grasos tienen un papel clave en la resistencia a la insulina,
especialmente en msculos, la activacin de la AMPK en el tejido adiposo puede ser
considerada beneficiosa en los estados de resistencia a la insulina y en particular la
activacin de la AMPK tambin reduce la secrecin de citoquinas en los adipocitos.
El tejido adiposo: energa y endocrinologa
El almacenamiento de energa en periodos de alimentacin es un factor
determinante de la supervivencia en los perodos de mayor gasto de energa o
disminucin de la disponibilidad de energa. Cuantitativamente, la principal forma de
almacenamiento de energa est representada por los triacilglicridos en los adipocitos
del tejido adiposo.
El origen de los lpidos almacenados pueden provenir de la dieta o de la
sntesis de novo a partir de sustratos no lipdicos (proceso de lipognesis). Este proceso
se activa en el tejido adiposo de roedores, pero es relativamente menor en el tejido
adiposo de humanos. Con el fin de asumir los lpidos del plasma, los adipocitos
sintetizan una enzima especfica llamada lipoprotena lipasa que hidroliza
lipoprotenas ricas en triacilglicridos como quilomicrones y VLDL para producir cidos
grasos y glicerol libre. Los cidos grasos entran en los adipocitos a travs de
transportadores y son re-esterificados con glicerol fosfato para formar los
triacilglicridos que son almacenados en una sola gota de lpidos en los adipocitos
blancos. Esta gota se encuentra rodeada por una membrana, formada por una cubierta
de protenas llamadas perilipinas. Cuando es necesario, los triacilglicridos son
hidrolizados (liplisis) en cidos grasos y glicerol libre, los cuales se exportan de nuevo
a la sangre. La liplisis requiere de enzimas como lo son la triacilglicrol lipasa del
tejido adiposo y la lipasa sensible a hormonas (HSL). La insulina favorece el
almacenamiento de lpidos a travs de la activacin de la lipognesis, la sntesis de LPL
y la esterificacin de triacilglicridos a travs de la produccin de
glicerol fosfato a partir glucosa. Por el contrario las hormonas adrenrgicas producidas
por la medula suprarrenal la liplisis a travs de la unin a un receptor -agonista y la
produccin de AMPc.
Adems de sus funciones relacionadas con el almacenamiento y la liberacin de
energa, el tejido adiposo es tambin un rgano endocrino, involucrado en la
homeostasis energtica global. Las hormonas ms importantes producidas por el tejido
adiposo son la leptina y adiponectina. La leptina es una citoquina producida en
proporcin a la cantidad de tejido adiposo y que acta en los ncleos especficos del
hipotlamo para reducir la ingesta de alimentos y en roedores para activar la
termognesis. La leptina tambin cumple funciones fuera del cerebro, una de ellas es
estimular la oxidacin de los cidos grasos en los msculos e hgado, al menos en
parte a travs de la activacin de la protena quinasa activada por AMP (AMPK).
La adiponectina pertenece a la familia del complemento 1q y su concentracin
plasmtica es alta. Se circula y seala como una protena multimerica constituida por
dos o mas componentes idnticos. En contraste con la leptina, su secrecin y la
concentracin plasmtica estn inversamente relacionadas con la adiposidad. Las
concentraciones plasmticas de la adiponectina estn disminuidas en obesos y en
roedores, primates y seres humanos diabticos tipo 2. La adiponectina es considerada
como una hormona insulino-sensibilizante, ya que activa la utilizacin de la glucosa en
el msculo, pero tambin induce la oxidacin de cidos grasos muscular y hepticos (la
acumulacin de cidos grasos o acil-CoA en las clulas sensibles a la insulina es
perjudicial para la sealizacin de la insulina) y disminuye la produccin de glucosa
heptica. Se ha demostrado, al menos en el hgado, que la accin de la adiponectina
requiere la activacin de AMPK.
Las citoquinas como la interleucina-6 (IL-6) y factor de necrosis tumoral (TNF)
son producidas por las clulas del estroma vascular y pueden favorecer la resistencia a
la insulina en tejidos sensibles a la insulina.
El AMPK est involucrado en otros tejidos en el mantenimiento celular, as
como la homeostasis energtica del cuerpo. Cuando se activa, inhibe los procesos que
consumen energa y activa los procesos de produccin de energa. El tejido adiposo es
un importante componente de la homeostasis energtica y un jugador clave en la
regulacin de la sensibilidad a la insulina a travs de la liberacin de cidos grasos y
secrecin hormonal. De acuerdo a la funcin de la AMPK en los adipocitos esta es
crucial para evaluar la importancia de esta enzima en la energa global metabolismo.

Estructura de la AMPK en el tejido adiposo
La AMPK existe en la clula como un complejo heterotrimrico con un
catalizador () y dos subunidades reguladoras ( y ). Se han identificado varias
Isoformas para cada subunidad (1, 2, 1, 2, 1, 2 3), que pueden conducir a la
formacin de 12 diferentes complejos. Estas combinaciones confieren propiedades
diferentes al complejo AMPK y muestran una relativa especificidad tisular. Las clulas
musculares, principalmente expresan complejos AMPK que contienen la subunidad
cataltica 2 y el hgado expresa ambas isoformas 1 y 2. En el tejido adiposo, la
subunidad cataltica 1 es la predominante y representa la mayor parte de la actividad
AMPK. Aunque el significado funcional de estos diferentes complejos an no est
claro, se puede destacar que complejos AMPK que contienen la isoforma 1 son
menos sensibles a la AMP.

Regulacin de la AMPK en el tejido adiposo
En el tejido adiposo, el ayuno y el ejercicio activan la AMPK. Puesto que ambas
situaciones son concomitantes con estimulacin adrenrgica, se podra prever que los
-adrenrgicos agonistas y su segundo mensajero el AMPc estimulan la actividad de la
AMPK. Se ha sugerido que el efecto del ejercicio sobre la AMPK en el tejido adiposo
tambin podra ser subsecuente a la secrecin de IL-6 por los msculos. De hecho, la
IL-6 es capaz de activar AMPK en adipocitos F442A y una fosforilacin disminuida de la
AMPK que se encuentran despus del ejercicio en el tejido adiposo de los ratones.
La leptina y la adiponectina son capaces de activar a la AMPK en tejido adiposo.
Frmacos hipoglicemiantes como las biguanidas tambin inducen un aumento de la
actividad de la AMPK en los adipocitos.
Las concentraciones de AMP y ATP en la clula estn estrechamente
relacionados debido a la presencia de la enzima adenilato-quinasa. Un aumento de la
AMP es un indicador exquisitamente sensible a la disminucin de la carga energtica
celular. El AMP activa la AMPK por un mecanismo complejo que implica efectos
alostricos y mas importante, la fosforilacin de las protenas quinasas en el residuo de
treonina la subunidad cataltica .
Dos protenas quinasas han sido caracterizadas, La LKB1 es una quinasa que es
constitutivamente activa y fosforila la AMPK cuando aumenta la concentracin de AMP
en la clula y se une a la subunidad . La segunda quinasa, calmodulina quinasa
quinasa , fosforila y activa la AMPK en la presencia de un incremento de la
concentracin de calcio, independientemente del aumento de la concentracin de
AMP. El tratamiento de adipocitos con AICAR, un medicamento que se transforma en
la clula en ZMP, un anlogo de la AMP, activa la AMPK en los adipocitos. Adems la
fenformina, una biguanida, induce la activacin de la AMPK y disminuye la
concentracin de ATP. En los ratones transgnicos que expresan una protena
desacoplante (UCP1) en el tejido adiposo blanco, la relacin AMP / ATP es mayor y la
AMPK se activa. Por ultimo, los agentes lipolticos -adrenrgico que inducen la
estimulacin de AMPK son acompaados con una disminucin en la concentracin de
ATP.
En conclusin, varias situaciones que activan la AMPK en el tejido adiposo son
acompaados con un aumento de la relacin AMP / ATP, sugiriendo fuertemente la
participacin de la quinasa LKB1.

AMPK y la diferenciacin de adipocitos
La evidencia indirecta sugiere que la activacin de la AMPK puede inhibir la
diferenciacin de los preadipocitos. El tratamiento AICAR de preadipocitos 3T3-L1 o
F442A inhibe la diferenciacin de adipocitos y bloquea la expresin de marcadores
adipognicos finales como la sintasa de cidos grasos la apoptosis. Esto no es
totalmente inesperado si se considera que la diferenciacin es un proceso que
consume energa que involucra la sntesis de nuevas membranas (y por tanto de
lpidos) y de protenas, dos vas que estn fuertemente inhibida por la activacin
de la AMPK.
AMPK y la regulacin del metabolismo del tejido adiposo

Una vez activada, la AMPK fosforila a una serie de protenas y modula la
transcripcin de los genes implicados en la regulacin del metabolismo energtico
para activar las vas catablicas que producen ATP e inactivar las vas anablicas
que consumen ATP.

La lipognesis y la sntesis de triglicridos
Una de las primeras protenas identificadas como un objetivo de la AMPK fue la
acetil-CoA carboxilasa (ACC), que sintetiza malonil-CoA a partir de acetil-CoA. La
fosforilacin y, por tanto La inhibicin de la CAC por la AMPK se ha demostrado en
varios estudios in vivo y en clulas intactas. En los adipocitos, un efecto directo de la
activacin de la AMPK en la fosforilacin y actividad de ACC fue demostrado en los
adipocitos de roedores utilizando AICAR o la expresin de una AMPK
constitutivamente activa. El ejercicio, que activa la AMPK en el tejido adiposo esta
acompaado con una disminucin de la actividad del CAC y de la concentracin de
malonil-CoA.
En conclusin, la activacin de la AMPK en los adipocitos de roedores conduce
a una disminucin del flujo de lipognesis y la disminucin de la sntesis de
triacilglicridos.
La liplisis.
La otra funcin importante de tejido adiposo es la descomposicin de los
triglicridos a travs de la va lipoltica que se produce durante el ayuno para
proporcionar cidos grasos y glicerol como combustibles para los tejidos perifricos.
En los adipocitos, la activacin de AMPK utilizando AICAR se ha demostrado
que inhibe la lipolisis inducida por -adrenrgicos. Un trabajo reciente ha confirmado
que que la sobreexpresin de una AMPK activa en los adipocitos de rata en realidad
inhibe la liplisis inducida por el isoproterenol, mientras que la sobreexpresin de una
forma negativa de AMPK tuvo un efecto contrario. Otros activadores de la AMPK
como biguanidas tambin tuvieron una accin inhibidora sobre la liplisis. Usando la
misma lnea celular, hemos demostrado que AICAR y fenformina inducen la actividad
de la AMPK y afectan fuertemente la liplisis.
Cul podra ser el mecanismo que explica la inhibicin de la liplisis por
AMPK?
En la actualidad, se han descrito dos enzimas limitantes que controlan la
hidrlisis de los triglicridos en los adipocitos. La lipasa sensible a hormonas (LSH) fue
la primera a la que se le atribuye un papel regulador. La LSH hidroliza los triglicridos,
digliceridos y esteres de colesterol, a pesar de que tiene una actividad mucho ms
especfica para digliceridos. Agentes lipolticos como los -adrenrgicos agonistas
regulan la LSH aumentando los niveles de AMPc en la clula, activando la protena
quinasa A que a su vez fosforila a LSH y aumenta su actividad intrnseca, as como la
promocin de su translocacin a la gota de lpidos. LSH es un sustrato de AMPK. AMPK
fosforila el residuo de Ser-565, impidiendo la fosforilacin adicional del residuo Ser-
563 por la PKA, y la translocacin de LSH inducida por el isoproterenol a la gota de
lpidos, un requisito importante para la activacin de la liplisis.
La existencia de una segunda lipasa reguladora fue descubierta durante los
estudios de los ratones con falta de HSL, La Triacilgricerol Adiposo lipasa (ATGL), la cual
mantena una lipolisis basal normal estimulada por Beta-agonistas que promueven la
translocacion de la enzima desde el citoplasma hasta la gota de lpido.
Por lo tanto, es de inters probar si la ATGL tambin es un sustrato de la AMPK y si su
fosforilacin se opone a su traslado a la gota de lpidos.
La membrana de las gotas de lpidos se cubre con perilipina, una fosfoprotena
hidrofbicas. La fosforilacin de la perilipina por la PKA induce su reubicacin fuera de
la de la membrana lipdica de la gota, lo que permite a la LSH (y probablemente
ATGL) llegar a sus sustratos.
En resumen, la AMPK se activa en condiciones de aumento de la liplisis como
el ejercicio y el ayuno. Esta activacin inhibe la sntesis de cidos grasos y triglicridos
y podra limitar la liplisis, ya que una alta tasa de liplisis podra ser muy exigente
para la homeostasis energtica de los adipocitos ya que parte de los
cidos grasos pueden ser reactivados en acil-CoA, una reaccin que consume ATP y
genera AMP. Por otra parte, la acumulacin de cidos grasos libres en el adipocito
podra ser perjudicial para los procesos que producen energa, ya que son bien
conocidos los desacoplantes mitocondriales. La activacin de la AMPK sera entonces
un mecanismo de retroalimentacin que limita la fuga de energa celular asociada
con la liplisis en los adipocitos.
Oxidacin de cidos grasos.
Dos modelos de la activacin de la AMPK en tejido adiposo estn acompaados
con un aumento de la oxidacin cidos grasos. En el primero, el desacoplamiento
mitocondrial de la protena UCP-1 se sobreexpresa en los adipocitos lder con un
aumento en la relacin AMP / ATP, la activacin de AMPK, la inactivacin del CAC y
una disminucin de la lipognesis. Esto induce un aumento de la capacidad de la
oxidacin de los cidos grasos que podra deberse a una disminucin de concentracin
de malonil-CoA, que inhibe la carnitina palmitoil-transferasa I, que cataliza la entrada
de los cidos grasos en la mitocondria y constituye la enzima que limita la velocidad de
oxidacin de los cidos grasos.
En un segundo modelo, Orci y compaeros de trabajo han inducido una
hiperleptinaemia utilizando la sobreexpresin adenoviral mediada de la leptina en el
hgado. En el tejido adiposo de estas ratas hiper-leptinizadas, la expresin de UCP-1
y UCP-2 se incrementa, la actividad de la AMPK es inducida y conduce a la fosforilacin
y la inactivacin del CAC. Tambin hay una biognesis mitocondrial fuerte,
caractersticas que podra conducir a la transformacin rpida de adipocitos blancos en
las mquinas oxidantes de grasa.
Aunque la activacin de la AMPK probablemente no es responsable de todas las
caractersticas metablicas de estos modelos, los resultados sugieren que, al igual que
sus efectos en otros tejidos, la activacin de la AMPK en los adipocitos induce el
aumento de la oxidacin de cidos grasos
Transporte de glucosa.
Slo unos pocos estudios han abordado el papel potencial de AMPK en la
captacin de glucosa en las clulas adiposas. Los estudios realizados en adipocitos 3T3-
L1 han informado que el tratamiento diferenciado de los adipocitos con AICAR
mejora la captacin de glucosa basal. Otro estudio realizado en los adipocitos
primarios de rata demostr que la adiponectina activa la AMPK y el aumento de
captacin de glucosa. Cabe sealar que ambos estn basados en un mecanismo
independiente de la sealizacin de la insulina. La AMPK tambin induce de la
translocacin de GLUT4 a la membrana de adipocitos pero su mecanismo siendo poco
claro.
AMPK y la secrecin de adipoquinas
Como se indic anteriormente, el tejido adiposo se considera ahora como un
rgano endocrino que participa en la homeostasis energtica en el que se ha
demostrado que AICAR aumenta la expresin de la hormona adiponectina insulino-
sensibilizante. Un estudio realizado en 3T3-L1 tiene demostrado lo contrario,
reportando la inhibicin de la expresin y secrecin de la adiponectina en respuesta a
la activacin de la AMPK por la metformina, medicamento contra la diabetes. Sin
embargo, en pacientes diabticos tipo 2 tratados con metformina no muestran
cambio en la concentracin de adiponectina srica o contenido de la adiponectina en
adipocitos. El papel de la AMPK en la regulacin expresin y secrecin de la
adiponectina por lo tanto no est claro.
En el tejido adiposo humano, los efectos inhibitorios de AICAR en la expresin y
secrecin de dos citoquinas pro-inflamatorias, TNF y la interleucina-6 (IL-6) han
sido reportados. Desde que TNFa inhibe la expresin de adiponectina, se ha sugerido
que la disminucin de la protena TNFa puede participar en la sobre regulacin de la
expresin de adiponectina y que los efectos de AICAR sobre la adiponectina puede
ser indirecta. La inhibicin de la secrecin de TNF-alfa y IL-6 por AMPK podra ser
beneficiosa, ya que la inflamacin se piensa contribuir al desarrollo de trastornos
asociados con la obesidad como la resistencia a la insulina. La activacin de AMPK en el
tejido adiposo, disminuyendo TNFa e IL-6 e indirectamente aumentando la secrecin
de adiponectina puede contribuir a la prevencin o neutralizacin de la insulino-
resistencia en los pacientes obesos. Sin embargo, la demostracin de un efecto ms
directo de la AMPK en la secrecin de citoquinas espera experimentos adicionales.
Conclusin
En el hgado, la AMPK es parte de un mecanismo que coordina los cambios del
metabolismo de los lpidos de anabolismo a catabolismo en caso de escasez de
energa. Incluye una inhibicin de la sntesis de lpidos y un aumento de la oxidacin de
los lpidos mediada por una disminucin del contenido de malonil-CoA
debido a una inhibicin de la actividad del CAC. En adipocitos, un papel similar para la
AMPK es concebible en el caso de la escasez de energa o una mayor demanda de
energa (ejercicio) ya que en estas situaciones se observ que la activacin de la
AMPK puede dar lugar a una inhibicin de la sntesis de cidos grasos y una
activacin de la oxidacin de cidos grasos. Sin embargo, en los adipocitos la AMPK
tambin inhibe la liplisis. Todas estas acciones de AMPK tendern a disminuir la
disponibilidad de cidos grasos en el plasma. Dado que los cidos grasos tienen un
papel clave en el inicio de resistencia a la insulina, especialmente en los msculos,
activando la AMPK en el tejido adiposo puede ser muy beneficioso en
estados resistentes a la insulina como la diabetes tipo 2, en particular la activacin de
la AMPK tambin reduce la secrecin de citoquinas inflamatorias en los adipocitos.