6

Reaccin 1. Citrato sintasa: Condensacin del acetilo y el oxalacetato. Es una reaccin muy
exergnica (-32,2 Kj/mol).



Mecanismo de reaccin de la citrato sintasa









La reaccin es semejante a una
condensacin aldlica El carbono metilico
del grupo acetilo pierde un protn por
medio de un residuo de histidina del
enzima. El carbanin resultante realiza un
ataque nucleoflico al carbono carbonlico
del oxalacetato. La reaccin genera un
compuesto muy inestable citroil-CoA, que
espontneamente se hidroliza mientras est
undo al enzima para dar productos.








7
Reaccin 2. Aconitasa: Isomerizacin a isocitrato. La aconitasa es una protena de hierro-azufre (o una
protena con hierro no-hemo), contiene como grupo prosttico un centro Fe
4
S
4
.



Mecanismo de reaccin de la aconitasa




Centro activo de la aconitasa

Centro ferro-sulfurado en la aconitasa. El
centro est coloreado en rojo y el citrato en azul.
Tres residuos Cys del enzima unen tres tomos
de hierro, el cuarto est unido a uno de los
grupos carboxilo del citrato. Un residuo bsico.
:B, en el enzima ayuda a posicionar el citrato en
el centro activo. El centro ferro-sulfurado acta
tanto en la unin al sustrato como en la catlisis.






8
Reaccin 3. Isocitrato deshidrogenasa: primera decarboxilacin (deshidrogenacin a oxalsuccinato
y decarboxilacin espontnea de ste).



Mecanismo de reaccin de la isocitrato deshidrogenasa



El oxalosuccinato aparece entre corchetes debido a que no se disocia del enzima

Reaccin 4. Complejo -cetoglutarato deshidrogenasa: segunda descarboxilacin. Reaccin
anloga y comparable a la catalizada por la piruvato deshidrogenasa. El complejo multienzimtico consta
delas siguientes enzimas:

-oxoglutarato deshidrogenasa (E1)
Dihidrolipoil transsuccinilasa (E2)
Dihidrolipoil deshidrogenasa (E3)











G= - 20,9 KJ/mol
9
Regeneracin del oxalacetato

Reaccin 5. Succinil-CoA sintetasa: Fosforilacin a nivel de sustrato



Reaccin de la succinil-CoA sintetasa




1) Formacin del succinil fosfato, un anhdrido mixto de alta energa.

2) Formacin del fosforil-His, un intermediario de alta energa.

3) Transferencia del grupo fosforilo al GDP, formandose GTP.





10
Reaccin 6. Succinato deshidrogenasa: oxidacin dependiente de flavina. La enzima (flavoprotena)
contiene FAD unido covalentemente a un residuo de histidina y est fuertemente unida a la membrana
interna mitocondrial.










Cadena de
transporte
electrnico
Unin covalente del FAD a un resto
de his de la succinato deshidrogenasa
El enzima es fuertemente inhibido por
malonato, anlogo estructural del
succinato y es un ejemplo clsico de
inhibidor competitivo.
La actividad de la succinato deshidrogenasa es estereoespecfica, y slo se
forma el ismero trans, el fumarato. El ismero cis el maleato no se forma
H
H
11

Reaccin 7. Fumarasa (Fumarasa hidratasa): hidratacin reversible del doble enlace C - C.

El enzima es altamente estereoespecfico, cataliza la hidratacin del doble enlace en trans del
fumarato, pero no el doble enlace en cis del maleato (el ismero cis del fumarato). En la reaccin inversa (de
L-malato a fumarato), la fumarasa es igualmente esteroespecfica, el D-malato no es sustrato.



Reaccin 8. Malato deshidrogenasa: Oxidacin del grupo hidroxilo del L-malato a una cetona en una
reaccin dependiente de NAD
+
.





G = - 3,8 kJ/mol
+ H
2
O
- H
2
O
G = - 3,8 kJ/mol
El G de esta reaccin es de + 29,7 kJ/mol. La concentracin de oxalacetato formado en el equilibrio
es, por tanto, muy pequea. sin embargo la reaccin catalizada por la citrato sintasa , es muy exergnica
(G = -31,5 kJ/mol) debdo a la hidrlisis del enlace tioester del citril-CoA. Esto hace que que la
formacin de citrato sea exergnica, incluso a concentraciones fisiolgicas pequeas de oxalacetato.
12
Regulacin del cido ctrico
1) Disponibilidad de sustrato. (acetil-CoA y oxalacetato)
2) Inhibicin por producto. (NADH)
3) Inhibicin competitiva por retroalimentacin de los intermediarios que se encuentran ms adelante a lo largo
del ciclo. (NADH, succinil-CoA)


Reaccin Enzima G
(kJ/mol)
G
(kJ/mol)
Inhibicin Activador

1

Citrato sintasa

- 31,5

Negativa

NADH, citrato y Succinil-CoA

Oxalacetato
2 Aconitasa 5 0
3 Isociotrato
deshidrogenasa
- 21 Negativa NADH y ATP ADP y Ca
2+

4 -cetoglutarato
deshidrogenasa
- 33 Negativa NADH y Succinil-CoA Ca
2+

5 Succinil-CoA
sintetasa
- 2,1 0
6 Succinato
deshidrogenasa
+ 6 0
7 Fumarasa - 3,4 0
8 Malato
deshidrogenasa
+ 29,7 0







Diagrama del cido ctrico y de la
reaccin de la piruvato deshidrogenasa
que indica los puntos de inhibicin
(octgonos rojos) y los intermediarios
que actan como inhibidores (flechas
rojas a trazos). El ADP y el Ca
2+
son
activadores.

Estequiometra de la ruta metablica

Acetil-CoA + 2H
2
O + 3NAD
+
+ FAD + GDP + Pi 2CO
2
+ 3NADH + FADH
2
+ CoA-SH + GTP

Una vuelta del ciclo del cido ctrico genera un fosfato de alta energa, tres NADH y un FADH
2


1
Aspartato
Asparagina
Oxalacetato
Malato
Aminocidos
Citrato
Ac. grasos
Colesterol
Esteroides
Fumarato
Isocitrato
Succinato
Succinil-CoA
-cetoglutarato
Acetil.CoA
Piruvato
Arginina
Glutamina
Histidina
Prolina
Isoleucina
Metionina
Treonina
Valina
Fenilalanina
Tirosina
Alanina
Cistena
Glicina
Serina
Triptofano
Isoleucina
Leucina
Triptofano
Acetoacetil-CoA
Leucina
Lisina
Fenilalanina
Triptfano
Tirosina
Cuerpos
Cetnicos
glutamato
Purinas
Porfirinas
Hemo
Ciclo
UREA
Pirimidinas
Fosfoenol
piruvato
Glucosa
P
i
r
u
v
a
t
o
c
a
r
b
o
x
i
l
a
s
a
P
E
P

c
a
r
b
o
x
i
q
u
i
n
a
s
a
Piruvato
Enzima Mlico
Ubiquo, eucariotas y
procariotas
Piruvato + HCO
3
-
+ NAD(P)H malato + NAD(P)
+
Enzima mlico
Corazn, musculo
esqueltico
Fosfoenolpiruvato + CO
2
+ GDP oxalacetato + GTP
PEP carboxiquinasa
Higado y rion Piruvato + HCO
3
-
+ ATP oxalacetato + ADP + Pi
piruvato carboxilasa
Tejidos Reaccin
Reacciones anaplerticas