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Universidad Nacional del Nordeste Facultad de Medicina Ctedra de Bioqumica

Brandan, Nora
Profesora Titular. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Juaristi, Julin
Profesor Titular. Ctedra de Bioqumica. Carrera de Enfermera. Facultad de Medicina. UNNE.

Aguirre, Victoria
Profesora Adjunta. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

Romero Bentez, Margarita


Jefa de Trabajos Prcticos. Ctedra de Bioqumica. Facultad de Medicina. UNNE.

PROTOONCOGENES Y ONCOGENES................................................................................................1 ROL DE LOS ONCOGENES EN EL DESARROLLO DE TUMORES....................................................3 A)-ACTIVACIN DE LOS PROCESOS DE PROLIFERACIN CELULAR.....................................3 B)-BLOQUEO DE LOS PROCESOS DE SENESCENCIA Y MUERTE CELULAR.........................3 MECANISMOS DE ACTIVACIN DE ONCOGENES............................................................................5 GENES SUPRESORES DE TUMORES (GST) .....................................................................................7 GEN SUPRESOR DE TUMORES P53: ...........................................................................................8 GEN SUPRESOR DE TUMORES PRB1 .........................................................................................8 GENES QUE PROMUEVEN LA FORMACIN DE TUMORES POR EFECTO SECUNDARIO SOBRE OTROS GENES ....................................................................10 EL CNCER..........................................................................................................................................11 BIBLIOGRAFA .....................................................................................................................................12

2002

Ctedra de Bioqumica
PROTOONCOGENES Y ONCOGENES

Facultad de Medicina. U.N.N.E.

Los protooncogenes codifican protenas con diversas localizaciones y funciones Los protooncogenes son genes normales con alta homologa con oncogenes virales
PROTOONCOGENES, son en todos los casos genes de clase II. stos codifican protenas que de algn modo pueden influenciar el ciclo celular; ya sea favoreciendo su progresin a procesos proliferativos o bien inhibiendo los procesos normales de senescencia y muerte de las clulas llamada Apoptosis. Estos protooncogenes pueden estar activos o reprimidos, dependiendo la etapa del desarrollo en que se encuentra el organismo (embrionario, fetal, adulto) Existen muchos casos en que los productos de protooncogn tienen alguna actividad biolgica en situacin fisiolgica. En este caso la expresin gnica est regulada en algn nivel y puede ser modificada en determinados momentos de la vida de la clula, segn sus necesidades. Sin embargo, se conocen algunos casos de protooncogenes cuya expresin en el organismo adulto est reprimida permanentemente. El trmino protooncogn se origina porque cuando su expresin se altera por alguna razn se descontrolan los procesos de proliferacin y muerte celular. Cuando esto se produce, las protenas generadas son defectuosas o cuando se sintetizan elevadas cantidades de producto estructural y funcionalmente normal. Otra situacin de alteracin se produce cuando protooncogenes que en el organismo adulto se encuentran reprimidos permanentemente por alguna razn comienzan a expresarse y su producto modifica la fisiologa celular. Aunque, en el vocabulario corriente se utilizan indistintamente como sinnimos, UN ONCOGN ES UN PROTOONCOGN ALTERADO. El proceso por el cual los protooncogenes se alteran constituye el MECANISMO DE ACTIVACIN DE ONCOGENES y al resultante de este proceso se denomina ONCOGN. (Oncogn, viene del griego onko que significa masa o tumor). Los oncogenes, tienen adems la particularidad de que EN TODOS LOS CASOS SU EXPRESIN ES DOMINANTE, es decir, que su alteracin genotpica siempre tiene expresin fenotpica, no importando que sea solo uno el alelo comprometido por esta alteracin. Estos oncogenes se asocian de manera particular con el desarrollo de tipos determinados de cncer. El proceso de desarrollo del tumor se denomina ONCOGNESIS. Cuando este tumor progresa hacia una forma maligna el proceso se llama TRANSFORMACIN MALIGNA. Inicialmente, los oncogenes fueron identificados como secuencias particulares portadas por virus capaces de inducir tumores en experimentos in vitro (clulas en cultivo) o in vivo (animales). El avance de la biotecnologa permiti descubrir secuencias similares a stas presentes en clulas eucariontes. Se hizo necesario establecer una nomenclatura convencional para designarlos. Por sugerencias del Comit Internacional Permanente en nomenclatura para genes se acord el uso de las siguientes reglas al referirse a ellos: Los genes humanos son referidos en letras maysculas italizadas y sus productos en maysculas no italizadas (por ejemplo, ABL1->ABL1). Los genes provenientes de otras especias son referidos con solo la primera letra en mayscula y el resto en minsculas italizadas y sus correspondiente protenas en maysculas no italizadas (por ejemplo, ErbA-> ERBA). Oncogenes de origen viral son distinguidos de los celulares por los prefijos v- c- (por ejemplo, v-Myc o c-MYC). Prefijos "p", "gp", "pp" o "P" seguidos del peso molecular en kilodaltons se refiere a las "protenas", "glicoprotenas", "fosfoprotenas" y "poliprotenas", respectivamente (por ejemplo, gp130). En ocasiones, cuando se usan superndices italizados es RB1 ). para referir los genes que codifican la protena (por ejemplo, p150

PROTOONCOGN
abl bcl2 c-erbB2 c-myc (c,l y n), c-myb,c-fos, c-jun sos y grb raf ras (h y k) RAR src trk sis

FUNCIN BIOLGICA
Tirosinquinasa control de la dinmica del citoesqueleto Senescencia y muerte celular Receptor de Membrana para EGF Factores de Transcripcin (Proteinas nucleares) Molculas adaptadoras (Cascadas de seal) Serin-Treoninquinasa (Cascadas de Seal mitognica) GTP-asas (Cascadas de Seal mitognica) Receptor Nuclear para el cido Retinoico Tirosinquinasa de molculas transductoras de seal Tirosinquinasa de receptores de membrana Receptor de PDGF

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Actividad Biolgica de Productos de Protooncogenes

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Habitualmente la actividad biolgica de los productos de estos protooncogenes tiene alguna relacin con procesos involucrados en la regulacin de la proliferacin o muerte celular. Los productos de protooncogenes conocidos pueden agruparse segn su actividad biolgica normal en:

FACTORES DE CRECIMIENTO: Estos son factores solubles, secretados normalmente por determinados tipos celulares. El ligado a sus receptores de membrana en las clulas blanco, activa seales de quinasa que conducen a la activacin del ciclo celular y la proliferacin. El Factor de Crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) es un ejemplo de producto de oncogn que acta normalmente de este modo. Tambin existen factores inhibitorios del crecimiento que son productos de protooncogn, como el Factor de Necrosis Tumoral (TNF). Existen otros casos como el del Factor Transformante del Crecimiento (TGF) en que el factor de crecimiento no es producto de oncogn aunque participa en procesos de diferenciacin y proliferacin celular. Sin embargo, el TGF acta sobre la expresin gnica del protooncogn sis, de modo que alguna alteracin en su estructura o en el camino de transduccin de su seal afecta a protooncogenes. En todos los casos cantidades anormales de factor de crecimiento favorecen el progreso descontrolado del ciclo celular. RECEPTORES PARA FACTORES DE CRECIMIENTO: o subunidades componentes de estas protenas: Existen protooncogenes que codifican para subunidades de receptores de membrana de seales estimuladoras del crecimiento. Este es el caso, por ejemplo, de una de las subunidades del receptor para el Factor de Crecimiento Epidermoide (EGFRc) que es el producto del protooncogn c-erb B. Puede ocurrir que una alteracin en el ADN desencadene la sntesis de una protena anormal cuya conformacin se vuelva constitutivamente activa y no responda a ningn tipo de seal o control externo. Se conocen otros casos en que la activacin del oncogn provoca la dimerizacin y consiguiente activacin permanente de las subunidades de receptores de membrana y sus cascadas de seales estimuladoras del crecimiento. MOLCULAS TRANSDUCTORAS DE SEAL: La transduccin de seales en el interior de la clula en respuesta a factores activadores o inhibidores del crecimiento, comprende cascadas de modulacin covalente por interacciones protena-protena. Estas cascadas de modulacin covalente incluyen pasos de: fosforilaciones (mediadas por quinasas de serina, treonina o tirosina), desfosforilaciones, e hidrlisis de GTP. Muchas de las enzimas intervinientes en estas reacciones: quinasas, fosfatasas o GTP asas, son productos de protooncogn. Son algunos ejemplos de estos proto oncogenes: c-raf, c-rac, c-ras (Cuyos productos intervinienen como GTP asas que modifican la dinmica del citoesqueleto y la transcripcin de varios genes) Los productos JNK, MAPK (Quinasas cuya activacin conlleva la sntesis o represin de factores de transcripcin, intervienen mediando seales de factores de crecimiento) y el producto del protooncogn src (Fosfatasa interviniente en la cascada de quinasa activada por mitgeno). Tambin se encuentran productos de protooncogn que sin ser quinasas o fosfatasas, intervienen facilitando la interaccin protena-protena entre stas y sus sustratos. Estas molculas tienen diferentes nombres segn el papel que cumplen en la cascada de regulacin covalente (protenas adaptadoras, protenas muelle, protenas scaffold) Un ejemplo de ellos es el producto del protooncogn sos. Existen protenas productos de protooncogn que cumplen funciones de control sobre la dinmica del citoesqueleto (ej: abl) o sobre los mecanismos de adherencia celular. En general actan tambin como quinasas, fosfatasas o GTPasas y, pueden interferir las cascadas activadas por mitgeno que responden a seales proliferativas o de muerte celular PROTENAS INVOLUCRADAS DIRECTAMENTE EN LA PROGRESIN DEL CICLO CELULAR: Existen productos de protooncogenes cuya actividad fisiolgica es la regulacin del progreso del ciclo celular. Entre ellos encontramos, por ejemplo a la Ciclina D (producto del protooncogn bcl-1) PROTENAS INVOLUCRADAS DIRECTAMENTE EN LA REGULACIN DE LA MUERTE CELULAR PROGRAMADA: Se conocen tambin productos de protooncogenes cuya actividad biolgica es la regulacin de los procesos normales de senescencia (envejecimiento) y muerte celular. Este es el caso de una familia de protenas llamadas BCL. Las protenas de la familia BCL regulan la apoptosis, algunas la inducen (BAD, BAX) y otras la bloquean (BCL2, BCL Xl). En condiciones fisiolgicas existen cantidades determinadas de uno u otro grupo, cuando la expresin de alguno de los protooncogenes que las producen se descontrola (represin en el caso de bad o bax o induccin en el caso de bcl2 o bclx) se favorece el crecimiento celular y contribuye a la oncognesis.

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ROL DE LOS ONCOGENES EN EL DESARROLLO DE TUMORES La activacin de un oncogn puede contribuir al desarrollo de cncer de 2 maneras: A)-ACTIVACIN CELULAR DE LOS PROCESOS DE PROLIFERACIN

Recordemos brevemente que la vida de una clula se inicia con su formacin a partir de una clula madre y termina con la formacin de sus clulas hijas o bien con su muerte. Las etapas a travs de las cuales pasa la clula de una divisin a la siguiente constituye el ciclo celular. Este ciclo se divide bsicamente en dos tiempos: la mitosis (Fase M) y la interfase (Fases G1 metabolismo y crecimiento, transcripcin-, S replicacin- y G2 crecimiento y transcripcin-) Los pasajes de G1 a S y de G2 a M constituyen momentos en que se verifica si estn dadas las condiciones adecuadas para progresar en el ciclo, esto es lo que se denomina: Puntos de Control, Puntos de Verificacin o Checkpoint. En caso de no darse las condiciones adecuadas, el progreso del ciclo es detenido para reparar los daos sufridos por la clula en la etapa anterior. Estas condiciones adecuadas tienen que ver por ejemplo con: la disponibilidad de nutrientes, la integridad del ADN, la actividad de los factores de crecimiento y el funcionamiento de las vas metablicas. Recordemos tambin que el pasaje de G1/S y G2/M involucran la fosforilacin de Quinasas dependientes de Ciclinas (cdk) ej: cdk2 en G1/S y cdk1 en G2M- por Ciclinas. Las Ciclinas ej: Ciclina E en G1/S y Ciclina B o A en G2/M- constituyen las subunidades reguladoras de serintreoninquinasas llamadas genricamente Factores Promotores de la Mitosis (FPM) A su vez las cdks fosforilan protenas que sern tiles para el progreso del ciclo celular. Por ejemplo: en el paso G2/M se sintetiza p54, quinasa que fosforila a la ciclina M y esta a su vez a las cdkM. Esta cdkM fosforila varias protenas como las Histonas H1, lamininas, nucleolina y la miosinquinasa, todas participantes en la mitosis o en la citoquinesis. Adems, las cdks son controladas por protenas inhibidoras. Estos inhibidores de las cdks constituyen una familia proteica llamada: Familia de la Protena Inhibidora de Kinasa (KIP) Esta familia est compuesta por: p21, p27 y p57 y la familia inhibidora de cdk4 (CIN4) Estos genes pueden sufrir mutaciones que contribuyan a la transformacin maligna por interferir en el control de ciclo celular. La activacin o represin de la sntesis de ciclinas depender de cascadas de activacin covalente que transducen seales externas para inducir proliferacin. As que los protooncogenes codificantes para protenas que intervienen en cualquier nivel en esta cascada regulatoria al ser activados en oncogenes podran participar en la transformacin maligna por medio de la activacin descontrolada de la proliferacin celular. Por ejemplo: Factores de crecimiento como el Factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), subunidades de receptores para factores de crecimiento como el receptor para el factor de crecimiento epidermoide (EGFRc), molculas transductoras de seal (Ras, ABL), factores de transcripcin que activan la sntesis de ciclina por interaccin directa con el ADN como Myc, Fos y Jun y las propias ciclinas. En cualquiera de los casos, el producto de oncogn contribuye a la transformacin maligna por dos mecanismos: avance del ciclo celular en forma descontrolada y evasin de los puntos de control de modo que no hay tiempo para reparar alteraciones en la clula acumulando daos sobre el ADN. En el caso del oncogn c-myc en particular, ste producto se halla ausente en clulas quiescentes (G0) y se expresa cuando el ciclo comenzar a progresar en G1, hallndose en grandes cantidades en G1/S. Su expresin se sostiene mientras la clula siga ciclando. Existen tumores en que este oncogn se halla amplificado o redispuesto como en el linfoma de Burkitt, y se expresa anormalmente en forma permanente. B)-BLOQUEO DE LOS PROCESOS DE SENESCENCIA Y MUERTE CELULAR Para morir las clulas entran en el proceso de APOPTOSIS, tambin llamada MUERTE CELULAR PROGRAMADA. Este proceso involucra el desemblaje controlado de una clula sin que ello afecte a sus clulas vecinas ni al organismo en general. Cuando una clula muere en apoptosis no hay proceso inflamatorio activado en el rea circundante. Cuando por alguna razn la clula no responde a controles y resiste ingresar en esta va se alteran los procesos fisiolgicos del entorno celular, como en el caso de las clulas cancerosas. Las clulas apoptticas sufren cambios caractersticos como la alteracin de la composicin lipdica de la cara externa de la membrana plasmtica que posteriormente englobar restos celulares envueltos por membrana que se denominan cuerpos apoptticos. El proceso ordenado de muerte celular por apoptosis es caracterizado por diversas fases: Las clulas que inician su muerte comienzan por perder contacto con sus clulas vecinas y se desprenden del tejido. Condensacin del ncleo y de la cromatina. Condensacin del citoplasma con marcada reduccin del volumen celular. Las mitocondrias liberan citocromo c al citoplasma y pierden potencial de membrana. Fragmentacin internucleosomal del ADN por parte de endonucleasas dependiente de Mg . Burbujeo de la membrana celular y vesicularizacin del contenido celular (cuerpos apoptticos) Sealizacin a clulas vecinas y atraccin de fagocitos.
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La cascada de eventos que resulta en la activacin de la muerte celular es bastante compleja y puede ser desencadenada por varios estmulos. Estos se han divido de acuerdo a su naturaleza en tres grupos: Qumicos: Actualmente se conoce que la forma en que actan varias drogas usadas en el tratamiento del cncer (quimioterapia) es estimulando apoptosis. Muchas de ellas inducen dao a nivel del ADN activando as la sntesis de algunas protenas promotoras de apoptosis. Fsicos: Radiaciones ionizantes, radiaciones ultra violeta, etc. Son estmulos comunes en la activacin de apoptosis. El dao provocado por la radiacin o el estrs oxidativo sobre el ADN es detectado en los puntos de control del ciclo, ste se detiene y cuando la reparacin no es suficiente para sostener la homeostasis, la clula es dirigida a la apoptosis. Biolgicos: Receptores en la superficie celular, tales como los miembros de la superfamilia del Factor de Necrosis Tumoral (TNFR, Fas (CD95/Apo1), TRAIL, etc.) al unirse a sus ligandos naturales, son capaces de desencadenar muerte celular programada. Esos ligandos, en general, son liberados por clulas del sistema inmune y estn destinados a eliminar clulas alteradas a consecuencia de infeccin o injuria as como clulas viejas o que manifiesten caractersticas anormales. La activacin de receptores de muerte es tambin el modo de seleccionar las poblaciones celulares que van a sobrevivir en el desarrollo y la diferenciacin de las diferentes lneas. La compleja cascada de eventos mediada por estos receptores est rigurosamente controlada. Diversas son las seales que pueden inducir la apoptosis en una clula: alteraciones del metabolismo, produccin de radicales libres o activacin se seales de muerte mediadas por receptor. La progresin de la muerte est mediada por un grupo de enzimas llamadas genricamente CASPASAS (de: Proteasas Citoslicas Especficas de Aspartato). stas se hallan como proenzimas que se activan por clivaje proteoltico. Las ms importantes son: Caspasa 8 que inicia el proceso en respuesta a ligandos extracelulares por su activacin asociada en complejos proteicos con receptores portadores de dominios de muerte y Caspasa 9 que se activa por injurias que liberan Citocromo C desde la mitocondria. Cualquiera sea el mecanismo de inicio, se activa por clivaje a partir de una de stas la Caspasa 3. La caspasa 3 cliva a su vez protenas vitales para la clula y caspasas adicionales que amplifican el proceso de muerte. Existen dos vas centrales de induccin de apoptosis: 1- La unin de un ligando extracelular a un receptor en la membrana plasmtica. Como en el caso de citoquinas (Factor de Necrosis Tumoral TNF- o o Fas ligando) Tambin por la unin de un ligando extracelular puede inducirse la activacin a las caspasas a travs de modificaciones en el receptor de Interleuquina 1 (IL-1, cuya seal normal es proliferativa) 2- La liberacin de Citocromo C por alteracin en el potencial de membrana de la mitocondria a causa de un desequilibrio severo en el metabolismo celular. Esto habitualmente suele acompaarse del incremento de los niveles de Calcio intracelular. Esta ltima va de induccin de apoptosis se halla regulada por una familia de protenas dimricas de la membrana mitocondrial interna conocidas como protenas BCL. Algunas de stas como Bad y Bax cuando se encuentran en cantidades mayores a la normal producen un bloqueo de la fase M (Arresto Mittico) que detiene el ciclo y si se mantiene en el tiempo desencadena la alteracin del potencial de membrana mitocondrial y la activacin de caspasas. Otras como BCL 2 y BCL X son inhibidoras de la apoptosis favoreciendo la progresin del ciclo celular. La tasa de expresin de estas protenas depende de las condiciones en que se encuentra la clula (metabolismo, disponibilidad de nutrientes, etc.) Algunos de los genes codificantes para las protenas que intervienen en la activacin de cualquiera de las dos vas de induccin de apoptosis son protooncogenes. Entre ellos encontramos: una de las subunidades del receptor para el TNF, una de las subunidades del Receptor para IL-1 y a los productos de la familia de genes bcl. La complicada maquinaria compuesta de factores pro y antiapoptticos es necesaria para los organismos multicelulares como salvaguarda para prevenir disparadores errneos de muerte o proliferacin. Los efectos balanceados de estos factores en los diferentes puntos de control de transduccin de seales culminan en la decisin final de vivir o morir. El colapso de este balance lleva a una variedad de enfermedades, entre ellas el cncer.

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MECANISMOS DE ACTIVACIN DE ONCOGENES

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Una mutacin es bsicamente la alteracin de la estructura en el ADN involucrando esto el cambio de una o ms bases en la secuencia de nucletidos, conllevando la alteracin de uno o ms codones. A diario se producen mutaciones que pueden ser reparadas por las enzimas del mecanismo de reparacin del ADN. Si no alcanzan a ser reparadas el genotipo mutado puede o no traducirse fenotpicamente, es decir, que una mutacin puede expresarse como alteracin en la estructura de la protena para la que el gen afectado codifica o bien puede no alterar la protena, en este caso se trata de una mutacin silenciosa. A su vez estas mutaciones pueden ser clasificadas en: CROMOSMICAS (Anomalas de Nmero como las Trisomas y Monosomas Anormala Esctructurales como Translocaciones, Supresiones e Inserciones o GNICAS (Mutaciones puntuales como Transiciones y Transversiones y Mutaciones en la pauta de lectura como Inserciones y Delecciones) dependiendo de la cantidad y nivel estructural del ADN afectado. La activacin de un oncogn es el resultado de una o varias mutaciones en un protooncogn que alteran estructural y funcionalmente a su producto.. A nivel gnico: El gen puede sufrir mutaciones que afecten los exones de modo que se altera la estructura de sus productos y con ello su actividad biolgica (protenas truncadas, protenas mal plegadas, etc) Una mutacin puede ocurrir sobre enhancers cercanos a la regin del promotor de modo que el producto normal se expresa en cantidades anormalmente bajas o anormalmente altas. A nivel cromosmico: Puede ocurrir una redisposicin del cromosoma que lleve una secuencia de ADN desde una porcin normalmente muy distante a un sitio prximo al oncogn pudiendo afectar su tasa de expresin o la pauta de lectura. O bien se produzcan supresiones o recombinaciones anormales con traslocacin. La activacin del oncogn puede ser resultado de una o varias mutaciones en otros genes que alteran la tasa de expresin de un protooncogn an cuando el producto sea estructural y funcionalmente normal Estas mutaciones pueden ser causadas por agentes fsicos, qumicos o biolgicos. Los agentes que inducen mutacin sobre el ADN se llaman MUTGENOS. Cuando estas mutaciones conllevan oncognesis y transformacin maligna hablamos de CARCINGENOS. Todos los carcingenos son mutgenos pero no todos los mutgenos son carcingenos. AGENTES FSICOS: las radiaciones UV, ionizantes ( y rayos X daan al ADN de diversas maneras. La radiacin UV puede generar dmeros de timina. Pueden tambin formarse sitios apurnicos o apirimidnicos por eliminacin de bases. Puede romperse la cadena de nucletidos o formarse puentes cruzados entre ellas. En el caso de los rayos X y las radiaciones ionizantes stos pueden generar radicales libres intracelulares provocando estrs oxidativo potencindose el efecto mutagnico. AGENTES QUIMICOS Hidrocarburos policclicos aromticos (Intercaladores) Aminas Aromticas Nitrosaminas Compuestos Naturales Alquilantes Compuestos Inorgnicos COMPUESTOS Benzopireno, Dimetilbenzoantraceno, PCB, Dietiletilbestrol MAV Dimetilnitrosamina, Dietilnitrosamina Dactinomicina, Aflatoxina B1 Ciclofosfamida, Cisplatino Arsnico, Asbesto, Berilio, Cadmio, Cromo

AGENTES QUMICOS: Los carcingenos qumicos pueden actuar en dos formas. Pueden, por s mismos, interaccionar con el ADN (CARCINGENOS DIRECTOS) o bien, necesitar una modificacin previa catalizada por enzimas del propio organismo (PROCARCINGENOS) En el caso de estos ltimos el proceso por el cual se vuelven capaces de producir mutaciones se llama ACTIVACION METABLICA, los intermediarios formados en este proceso se llaman CARCINGENOS INMEDIATOS y el producto que reacciona con el ADN se llama CARCINGENO FINAL o CARCINGENO ESENCIAL. Las enzimas responsables de la activacin metablica estn relacionadas al citocromo P450, con utilizacin de NADPH y habitualmente participan en la eliminacin de sustancias txicas y frmacos del organismo. Los agentes qumicos provocan dao al ADN por varios mecanismos segn su estructura. Existe otro grupo de compuestos qumicos llamados en general: PROMOTORES DE TUMOR. stos no son mutgenos y no producen tumores por s solos. Su accin altera la regulacin de la expresin gentica y estimula la divisin celular potenciando a los carcingenos. Este es el caso de los steres de forbol y la sacarina. Al mutgeno que interacciona con un promotor de tumor en general se lo llama INICIADOR. La iniciacin del tumor generalmente es rpida e irreversible, la promocin en cambio es lenta (desde meses hasta aos) Por ltimo se conocen tambin sustancias qumicas que si bien no actan directamente sobre el ADN son responsables de alterar la biologa de la clula o la interaccin con su entorno. A esta alteracin del medio, la clula responde provocando mutaciones en su
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ADN que pueden llevar a transformacin maligna, este un mecanismo por cambios epigenticos. Un gran nmero de sustancias qumicas, como contaminantes ambientales, de las que hasta hace poco no se conoca que eran cancergenos actan de esta manera. Hay una gran variacin en la ocurrencia y los tipos de cncer hallados en todo el mundo. Cuando la gente emigra a un nuevo lugar en general adquiere el perfil de ocurrencia de cncer de su nuevo hogar en una generacin. Adems, la incidencia de cncer en determinadas profesiones es ms alta que en otras. Esto prueba que los factores ambientales especialmente los qumicos contaminantes son de gran importancia en la patognesis de las transformaciones malignas. AGENTES BIOLGICOS: Algunos virus son capaces de producir transformacin maligna. Virus DNA: todava no se sabe a ciencia cierta cmo actan. Algunos portan secuencias de oncogenes virales que toman el comando en la clula husped modificando su proliferacin y muerte. Otro mecanismo propuesto y aceptado es que las protenas virales se unan a genes supresores de tumor impidiendo su accin normal. Son ejemplos: el virus de Epstein Barr, el virus B de la hepatitis, y dos cepas de papilomavirus humanos. En todos los casos estos virus son causantes de enfermedades benignas luego de las que algunos casos evolucionan posteriormente a la formacin de tumores. Esto sugiere que la infeccin viral es slo uno de los pasos en la transformacin maligna. Virus RNA: En enfermedad humana son dos los retrovirus relacionados a transformacin maligna y en ambos casos son de baja incidencia. El HTLV-1 virus causante de leucemia humana a clulas T del adulto y el HIV (virus de inmunodeficiencia humana). Este ltimo en realidad no se ha asociado directamente a transformacin maligna sino que favorece el desarrollo de tumores por la inmunosupresin. Los tumores habitualmente asociados al HIV son el sarcoma de Kaposi y los linfomas aunque es amplia la variedad de tumores que pueden presentarse en estos pacientes. Si el virus DNA porta en su genoma una secuencia de oncogn viral no es necesario que se inserte en un sitio especial del genoma para provocar la transformacin maligna. Cuando el virus DNA o RNA no porta un oncogn viral, dependiendo del sitio de insercin del ADN viral que se integra al genoma del husped pueden presentarse dos casos que constituyen lo que se llama: MUTAGNESIS POR INSERCIN: INSERCIN PROMOTORA: cuando la insercin del ADN viral se produce cercana a la regin del promotor o corriente arriba del sitio de inicio de transcripcin de un protooncogn de modo que este se activa y el oncogn celular comienza a transcribirse en forma descontrolada. INSERCIN FACILITADORA: cuando el ADN del virus se inserta corriente debajo del sitio de iniciacin del protooncogn y acta como un enhancer corriente abajo. Cualquiera sea la causa encontraremos los siguientes mecanismos de activacin de oncogenes: 1- Mutagnesis por insercin: descripta en el tem anterior. 2- Traslocaciones cromosmicas: cuando parte de un cromosoma se liga con otro. Esta translocacin puede afectar la estructura de un protooncogn y determinar su activacin. Este es el caso del cromosoma Filadelfia (de la leucemia mieloide crnica) en que se produce una traslocacin 9,22 originando un oncogn codificante para una protena de fusin quimrica (BCR-ABL) con actividad descontrolada de tirosin quinasa. Otro ejemplo es la translocacin 8,14 que activa en forma permanente al oncogn c-myc en linfocitos originando el Linfoma de Burkitt. 3- Amplificacin Gnica: Un gran nmero de tumores cursa con la amplificacin (es decir la repeticin de secuencias) de oncogenes presentes en un nmero de copias mucho mayor al normal, lo que aumenta su tasa de expresin. 4- Mutaciones Puntuales: Se conocen muchos casos en que mutaciones puntuales determinan la sntesis de protenas productos de oncogn que pierden su capacidad de ser reguladas y permanecen activas o inactivas sin responder a controles, lo que altera los procesos normales de proliferacin y muerte de las clulas. Las mutaciones son tambin el mecanismo por el que genes supresores de tumores y otros genes contribuyen a la transformacin maligna.

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GENES SUPRESORES DE TUMORES (GST)

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La activacin de oncogenes no constituye la nica va hacia la malignidad. En la gran mayora de los cnceres la transformacin maligna es resultado de la combinacin de la activacin de oncogenes y la anormal inactivacin de GST. Los GST son tambin genes de clase II cuyos productos poseen actividad fisiolgica que influencia el progreso del ciclo celular y la induccin de Apoptosis. A diferencia de los protooncogenes, los GST son activadores de procesos apoptticos o bloqueantes del progreso del ciclo celular. Los mecanismos por los cuales la expresin gentica de los GST puede alterarse son similares a los de activacin de oncogenes, y es vlido para stos todo lo descripto anteriormente. Casi todos los tipos de cncer humano parecen acompaarse de la prdida o mutacin de uno o ms GST. Algunos incluso parecen ser causales de tipos especficos de tumores mientras que otros se hallan presentes en una amplia gama de cnceres. En todos los casos, la alteracin de los GST se manifiesta con carcter RECESIVO, es decir se necesita la alteracin de ambos alelos del gen en cuestin para provocar una alteracin fenotpica que comprometa la fisiologa de la clula. Por otro lado, la alteracin puede ser heredada en lnea germinal. Esto explica en gran parte el carcter hereditario de algunos cnceres cuya frecuencia es alta en determinadas familias (formas hereditarias) y que se presentan raras veces en la poblacin general (formas espordicas) En las formas hereditarias inicialmente uno de los alelos est daado desde la lnea germinal y el restante puede sufrir una mutacin por cualquiera de las causas antes descriptas y expresarse la alteracin. En las formas espordicas se necesita alterar los dos alelos en una misma clula por estos mecanismos, lo que por azar es bastante difcil y estas formas son raras . Se conocen en este momento una docena de GST cuyas funciones biolgicas normales incluyen: Enzimas de la maquinaria de reparacin del ADN Molculas de transduccin de seales de proliferacin o muerte Factores de Transcripcin Protenas que participan en el control del progreso del ciclo celular Protenas que participan en la regulacin de la Apoptosis.

Se demostr que en general todas las formas alteradas de GST tienen relacin con tumores altamente invasivos y resistentes al tratamiento. Los quimioterpicos o radioterpicos afectan a las clulas ciclantes y a las tumorales ms que a las normales. Esto se produce porque al ser daado el ADN por el tratamiento se arresta el ciclo celular en alguno de los puntos de control y en este mecanismo de bloqueo del ciclo participan los GST; encaminando la clula cuyo ADN fue daado a la Apoptosis. Cuando los GST no funcionan adecuadamente la clula sigue ciclando a pesar del dao provocado por el tratamiento, y, de esta manera contina proliferando y, es ms progresando en la malignidad por acumulacin de mutaciones que no son corregidas. Los ejemplos ms importantes de este grupo de protenas son la p53 y la pRB1 (protena de retinoblastoma1) GEN SUPRESOR DE TUMOR RB1, p53, WT1, BRCA1 y BRCA2 RET NF1 NF2 ECC o DCC PAC VHL FUNCION BIOLGICA Factores de transcripcin Receptor de tirosinquinasa GTPasa Control de dinmica del citoesqueleto Adherencia celular ? ?

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GEN SUPRESOR DE TUMORES P53: En 1990 se demostr que la protena p53 se hallaba ausente en una rara enfermedad gentica caracterizada por la presencia de mtltiples tumores llamada Sndrome de Li Fraumeni. Posteriormente se demostr que en diversos tumores humanos poda hallarse la expresin alterada de este gen. Hoy se conocen alrededor de 1000 mutaciones diferentes que pueden afectarlo de las cuales el 80% corresponden a mutaciones puntuales y el resto a alteraciones en la pauta de lectura. Los tumores con alteracin de p53 son altamente invasivos es decir con gran nivel metstasis y en general son ms resistentes al tratamiento que otros tumores. p53 es activado por seales proapoptticas. Se lo denomin El guardin del Genoma dado que su funcin consiste en responder a situaciones en que las condiciones no son adecuadas para el progreso del ciclo en el punto de control G1/S. La activacin de p53 se produce por fosforilacin y desencadena la sntesis de factores de transcripcin. Estos factores de transcripcin inducen la sntesis de una quinasa llamada p21. La p21 acta sobre diversos sutratos para arrestar el ciclo en este

p53: Brazo corto del cromosoma 17 Fosfoprotena de 53Kda Regula la transcripcin unindose al ADN Frente a agentes que daan el ADN Se inactiva por unin a protenas virales (SV40) Su aumenta la incidencia de tumores Sus alteraciones ms comunes son las mutaciones puntuales

punto de control. La p21 bsicamente inhibe la interaccin CiclinaE/ cdk2, impidiendo que la cdk2 promueva el progreso a la fase S. Tambin inhibe la actividad de la ADN Polimerasa dificultando la replicacin. Si bien la actividad p53, a travs de p21, permite el arresto del ciclo celular en G1/S, tambin se conoce que puede ejercer el mismo efecto en G2/M por inhibicin de la cdk25, impidiendo la formacin del FPM. El arresto del ciclo crea las condiciones adecuadas para la reparacin del ADN o, en caso de ser irreparable el dao detectado, la induccin de la apoptosis. Por ltimo la p21 puede unirse al Antgeno Nuclear de Clulas Proliferantes (PCNA) que forma parte de la maquinaria proteica de la replicacin bloquendola. La accin de p53 no se limita a bloquear el ciclo sino que tambin participa directamente en la induccin de Apoptosis ya que a travs de la activacin de factores de transcripcin puede modificar la expresin de protenas reguladoras de la Apoptosis como los productos de la familia BCL.

pRB1
Cromosoma 13q14 Fosfoprotena nuclear 110Kda Complejos inactivos con proteinas virales Complejos con E2F control en G1/S Formas familiares de cancer

GEN SUPRESOR DE TUMORES PRB1: Llamada as por estar caractersticamente ausente en este tipo de tumor, esta protena se halla fisiolgicamente activa en variados tipos celulares como: retina, osteoblastos, fibroblastos y piel. Su actividad biolgica est relacionada al progreso del ciclo en G1/S por interaccin con la familia E2F de factores de transcripcin. Normalmente, en G1 pRB se halla dimerizada con el E2F. La activacin por seales mitognicas que inducen ciclinas desencadenan la activacin de cdks. El complejo pRB/E2F es sustrato de fosforilacin para cdks. Cuando las cdks se activan fosforilan a pRB liberndola del complejo; de este modo E2F queda disponible para migrar al ncleo e inducir la transcripcin de genes necesarios para el progreso hacia la fase S, especialmente el protooncogn c-myc. Cuando por alguna razn pRB no es sintetizada en cantidad y calidad adecuada E2F se encuentra permanentemente disponible y se puede perder el control de proliferacin de la clula. Esto ocurre en casos de supresin del GST pRB y puede darse tambin en clulas en que la expresin gnica de pRB es normal pero la clula ha sido infectada por un virus. Se sabe que los adenovirus, papilomavirus y el SV40 producen protenas virales que ligan a pRB compitiendo con E2F y facilitando de este modo la transformacin maligna. Se ha comprobado la actividad sinrgica de pRB con p53 y los tumores en que se da la alteracin combinada de ambos genes, la agresividad es alta as como la resistencia al tratamiento.

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Gen supresor de tumores ECC ECC es una sigla que quiere decir Eliminado en Cncer Colorrectal. El producto de este GST es compatible estructuralmente con molculas de adherencia celular. La inactivacin de ECC puede disminuir la adherencia celular desarrollando el potencial de metstasis. Genes supresores de tumores BRCA1 y BRCA2 BRCA1 codifica para una protena que contiene un dominio dedo de cinc. Su funcin normal no ha sido determinada, pero este dominio le permite interaccionar con el ADN como un factor de transcripcin. Mutaciones en estos genes se asocian con el 30% de los cnceres de mama diagnosticados antes de los 30 aos. Han sido identificadas una grna cantidad de mutaciones de este gen en la lnea germinal, lo que indica predisposicin hereditaria a estos tipos de cncer.

CARACTERISTICAS

ONCOGENES

GENES SUPRESORES

Alteracin del ciclo celular

Por activacin

Por inactivacin

Expresin

Dominante (mutacin de un alelo)

Recesiva (mutacin de ambos alelos o mutacin de uno con prdida o reduccin de la homocigocidad del segundo)

Origen de la mutacin

Se origina en tejido somtico, no es hereditaria

Presente en clulas germinales (hereditaria) o en clulas somticas

Especificidad tisular

Moderada

Fuerte

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GENES QUE PROMUEVEN LA FORMACIN DE TUMORES POR EFECTO SECUNDARIO SOBRE OTROS GENES Estos genes codifican para protenas que intervienen en procesos que afectan indirectamente la progresin del ciclo celular. Este grupo incluye: enzimas de la maquinaria de reparacin del ADN, protenas reguladoras de la activacin o represin de protooncogenes y GST. Se descubri que los pacientes con un tipo muy particular de cncer: el cncer de colon no relacionado con poliposis (HNPCC) presentan mutaciones en genes del cromosoma 2 codificantes para enzimas del sistema de reparacin de apareamiento del ADN (hMSH2, hMLH1 y hPMS2). Esta forma de cncer se caracteriza por la alteracin de la longitud de secuencias repetitivas de ADN, especialmente el ADN microsatlite, respecto de las clulas normales. Esto se debe a la alteracin en el mecanismo de reparacin. Este problema se llama inestabilidad del microsatlite. La inestabilidad del microsatlite se relaciona con la falta de respuesta a seales inducidas por el TGF. ste factor de crecimiento posee un efecto inhibidor de crecimiento; de modo que una respuesta alterada en su seal facilita la proliferacin. Otra forma de cncer de colon, la poliposis adenomatosa familiar (poliposis adenomatosa coli), se asocia con la alteracin autosmica dominante del locus PAF Este est ubicado en el brazo largo del cromosoma 5. se implicaron dos genes en esta enfermedad el gen PAC y el CCM, aunque no se conoce cual es su mecanismo.

SE HAN AISLADO UN GRAN NMERO DE GENES CUYAS MUTACIONES AUMENTAN LA SUSCEPTIBILIDAD AL CNCER, AUNQUE SUSCEPTIBILIDAD Y ASOCIACIN NO SIGNIFICAN CAUSALIDAD.

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EL CNCER es una familia de enfermedades caracterizada por la proliferacin celular descontrolada con formacin de tumores. Se conocen ms de 100 tipos de cncer aunque los ms frecuentes son los de pulmn, mamas y colorrectal que juntos corresponden al 44% del total de casos. Cada tipo de cncer tiene su curso clnico, pronstico y tratamiento caractersticos. Los tumores originados en la proliferacin celular descontrolada pueden ser benignos o malignos. Los benignos se localizan en un tejido y carecen de la capacidad para invadir a otros (metstasis). Los malignos invaden el tejido adyacente y pueden metastatizarse a otros lugares del cuerpo. Los cnceres se clasifican segn el tejido y el tipo celular. Los carcinomas provienen de tejidos derivados del ectodermo o el endodermo, los sarcomas provienen de tejidos derivados del mesodermo y las leucemias y linfomas aunque son tambin derivadas del mesodermo se clasifican por separado porque su clnica tratamiento es muy diferente, afectando a clulas del sistema hematopoytico.. Las leucemias y linfomas corresponden a casi el 50% de los cnceres infantiles. El desarrollo de cncer comprende varios pasos y la posibilidad de sufrirlo aumenta con la edad Como vimos anteriormente son los factores ambientales los que predominan en la iniciacin de esta transformacin maligna al provocar activacin de oncogenes y/o mutaciones en GST y genes que promueven la formacin de tumores por efecto secundario sobre otros; aunque pueda haber predisposicin por herencia de alelos mutados de GST el factor ambiental es determinante. Los cambios esenciales que transforman las clulas normales en cancerosas se deben ms que nada a mutaciones celulares somticas. La teora corrientemente aceptada para explicar la patogenia de esta enfermedad propone que se necesitan varias mutaciones celulares somticas para producir cncer. Se necesitaran entre 2 y 7 mutaciones somticas una clula para el inicio y la progresin de tumores malignos.. En su Inicio, el cncer da comienzo cuando la acumulacin de mutaciones en una sola clula hace que sta empiece a proliferar descontroladamente, por lo que todas las clulas de un tumor derivan de una sola clula madre (clona). La progenie de la clula transformada tiende a incrementar su malignidad con aumento del nmero progresivo de cariotipos anormales, aumento de la tasa de crecimiento celular y tendencia a la metstasis. La aceleracin de la proliferacin permite que se acumulen nuevas mutaciones somticas adicionales por fallo o falta de tiempo para la reparacin, esto torna a las clulas ms agresivas y proliferan an ms rpido, pudiendo volverse resistentes al tratamiento (progresin). Esta teora se llama: Teora del multiescenario de la carcinognesis. Las clulas cancerosas son clulas transformadas y manifiestan cambios en su membrana plasmatica: Alteraciones en la permeabilidad, alteraciones en las propiedades de transporte, adherencia alterada, aumento de la proporcin de lectinas, alteracin de la actividad de muchas enzimas, alteracin de la carga elctrica de superficie, aparicin de neoantgenos con prdida de antgenos normales y cambios en la composicin glucdica de las glicoprotenas. Alteraciones en la composicin lipdica. Cualquier tipo de clula cancerosa habitualmente produce altas cantidades de lactato, lo que se denomina efecto Warburg. Las clulas tumorales expresan una forma fetal de Fosfofructoquinasa que no es sensible a la inhibicin por ATP y citrato de modo que la gluclisis est activada en forma permanente, favoreciendo la produccin de lactato. Estas clulas transformadas pueden secretar factores angiognicos (que inducen el desarrollo de vasos sanguineo para alimentar el tumor). Este es el caso del Factor de Crecimiento de Fibroblastos, producido normalmente por fibroblastos y en forma controlada que es secretado por una gran variedad de clulas tumorales sin responder a ningn tipo de regulacin. (Las clulas con tasas de crecimiento ms alta tienen mayor ventaja selectiva, es decir mejor supervivencia) Las clulas en crecimiento rpido tienden a maximizar sus procesos anablicos (transcripciones y replicaciones) bloqueando catabolismos como el de las purinas y pirimidinas. Se modifica en ellas la expresin gentica, con la induccin de sntesis de protenas fetales que potencian el descontrol del crecimiento, alteracin en la composicin de las protenas de membrana de modo de evadir su destruccin por mecanismos inmunolgicos normales y la sntesis de factores de crecimiento u hormonas que no responden a los controles del organismo. El fenmeno de la progresin refleja la inestabilidad del genoma de estas clulas. Parece posible que las mutaciones en los genes de la maquinaria de reparacin del ADN intervengan en este proceso, as como la mutacin de genes adicionales. Las clulas transformadas pueden inducir la expresin de una familia de genes llamados genes de resistencia a multidroga (mdr). Una glucoprotena de membrana llamada glucoprotena P (de pleiotrpica) es la mediadora de la actividad de las MDR y puede ser sintetizada en grandes cantidades por clulas tumorales. Esta glucoprotena P acta como una bomba independiente de energa que bombea hacia fuera de la clula las molculas de las drogas utilizadas en la quimioterapia volviendo la clula resistente al tratamiento. La transformacin maligna tambin se asocia con elevada actividad de telomerasa en las clulas tumorales. Esta ribonucleoprotena permite el acortamiento de los extremos 3 del ADN con acortamiento de los cromosomas con cada replicacin y la mayor facilidad para perder genes importantes. Los tumores malignos producen tambin metaloproteinasas y colagenasas que facilitan la invasin del tejido adyacente. La digestin enzimtica del colgeno y la membrana basal, permite la invasin de capilares y linfticos. El ingreso de las clulas tumorales a circulacin permite su implantacin en sitios adecuados, distantes del tumor primario originando metstasis. Algunos tipos de tumor hacen metstasis en sitios especficos por ejemplo: el cncer de prstata en hueso, los de pulmn y mama en cerebro.
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Las caractersticas de las clulas transformadas hacen del cncer una entidad muy difcil de controlar siendo, de hecho, una de las principales causas de muerte en todo el mundo.

BIBLIOGRAFA Murray, Granner, Johnes, Bioqumica de Harper. 15 Edicin. (2002) Roscovsky, R. Bioqumica. (1999) Karp, G. Biologa Celular (2000) Farreras Rozman, Medicina Interna. Versin CD-Rom. 14 Edicin. (1999) Current Opinion in Genetics and Development, vol 11 p19-26. (2001) Current Opinion in Genetics and Development, vol 4 p15-24. (1994) Current Opinion in Genetics and Development, vol 4 p120-119. (1994) Journal of Biochemistry, vol. 130 p 1-18 (2001) Sitios de Internet http://www.cancernet.com/ http://www.cnio.es/cancer/ http://www.opolanco.es/apat/boletin9/ http://www.infomedonline.com-me/oncologia/ http://www.intermedicina.com/ http://views.vcu.edu/ana/bogler.htm

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