1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

En bioquímica." celulares." Riv. Katanforoush A. "palíndromos en proteínas" . PMC 2474621 .000. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. la cantidad de tiempo de tinción.1186/1471-2105-9274 .454. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas. Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. 6. et al (2008). Por ejemplo. la tinción "diferencial" por componentes adicionales. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo).  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. Life Sci. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. . Una vez se han sobreteñido. 5. M Wilmanns (octubre de 2008). Saltar↑ Pinotsis N. sin embargo. Para conseguir el efecto deseado. 287-91. los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente. el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. Chem Protein 22 (2):. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo.023. "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. Las tinciones progresivas. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. J.111. M Kargaran.1007/s00018-008-8265-1 .  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. DOI : 10. PMID 12760415 . cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. etc. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales.000 a 1:50. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5. Saltar↑ Ohno S (1990). Ir a:6. Papel del péptido palíndromos. 109-13 DOI : 10. J Barciszewski (febrero de 2003). 2953-6 DOI : 10. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. y por supuesto el propio tejido.4. Mol. . . la cantidad de decolorante (si es necesario). algunas más que otras. Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). . proteínas.1 ↑ Sheari A. carbohidratos. es casi imposible. S Dolecka. la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. PMID 18791850 . .) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. Hoffmann M. BMC Bioinformatics 9 : 274.0 6. PMID 18547401 . lípidos. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" . 83 (2-3):. Rychlewski J. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. Biol. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente).924 . "Evolución intrínseca de las proteínas. y la pérdida de detalles celulares. 65 (19):. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse. 7. 405-10 PMID 2128128 . la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). son bastante imperdonables. por otra parte. 2. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células).1023 / A: 1. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste.

esto es. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. sin embargo. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. requieren del uso de un mordiente. En algunos casos. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. ya sea una resina transparente. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. En muestras de células sueltas. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. es la tinción negativa.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. Muchos tintes. proceso conocido como inclusión. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. incrementando su resistencia mecánica. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. Para piezas de tejido de mayor tamaño. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados. metanol. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. esta etapa puede consistir en varios pasos. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Luego de esto. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. la Biological Stain Commission. Fijación: de por si. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. sin otro tratamiento previo. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. la tinción mordentada permanece. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. Por ejemplo. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). y/o el ácido pícrico. . Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. para incrementar su resistencia y estabilidad. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. etanol. gelatina o clara de huevo.  Tinción adecuada   En su forma más simple. Adicionalmente. Un mordiente habitual es el ácido tánico. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. Por el contrario. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas.

y por tanto más de un color. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. pero puede producir una tinción de fondo mayor. Además. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. Cristal Violeta. añadido antes o después de la tinción. Verde Rapido. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. alumínico. violeta de metilo. y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. sin embargo. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico). Otros colorantes metacromáticos son Tionina. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. pero tiñe más bien poco. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF. Clasificación química de los colorantes. Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. Por tanto. acetocarmín. B. y algunos colorantes de Acridina. Azul A. Violeta de Metilo y Azul Celestina. y Hematoxilina siendo las más destacables. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. . basofílicos). Violeta de Cresilo. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica.Safranina. y Azul de Toluidina O. que realza las propiedades de tinción de un colorante. No confundir con colorante "policromático". las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. Ejemplos son la Safranina O. particularmente asociaciones iónicas. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. Como contraste. Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. Fe o Cr . puentes de hidrógeno. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. C. Sin embargo.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. crómico. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. Ejemplos son el TBO. Hay cientos de métodos de tinción. hidrofóbicas) o covalentes. Durante la tinción. los metales quelantes se han denominado mordientes. o en la célula). Las tinciones no covalentes. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. acidófilos). y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . resultado en una tinción débil. al que se refieren algunas veces como "lago". Tradicionalmente. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica.

se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. membrana celular. es decir azul Nilo. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. Marrón Bismarck. 3 . amino o tiol del sustrato. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables.Interacciones covalentes. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. tiñe las paredes celulares de color púrpura. y en muchos otros protocolos de tinción. y algunas estructuras extracelulares. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. tiñe a los núcleos de color azul. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. Se puede utilizar con células vivas. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. al ser combinado con un mordiente adecuado. para hacer más visibles sus núcleos. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. También puede ser utilizado para teñir células vivas. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. que usualmente es aluminio o alumbre. Por el mismo motivo.

luego de la fijación con formalina. y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . Hoechst 33258 y Hoechst 33342. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. una de las mas comunes utilizadas en histología. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. haciendo mas visible el núcleo. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. tal como la hidroxiquinona o formalina. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. reducen las soluciones de plata a plata metálica. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. Utilizado con un mordiente. lo que lo hace mas hidrofóbico. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. Algunas células argentafines. músculo liso o mitocondrias. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. Al igual que la fluoresceína. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura.suave. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. Otras células son argirofílicas. Los dos colorantes son intercambiables. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. y con mejor penetración en la membrana plasmática. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. se desarrolla un color intensamente azul. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. la cual posee una suave tonalidad azul. Ambos compuestos son funcionalmente similares.

Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. Oil Red O. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. Los organismos Gram positivos no se decoloran. nervios. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. como la safranina o la fucsina. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. Habitualmente es un colorante de color rojo. Oxida agresivamente muchos materiales.de las células. los cuales están presente para solubilizar el yodo. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. Sudan IV. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. Es un agente oxidante fuerte. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. por ejemplo: Sudan III. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. por lo común. y se utiliza principalmente como contracoloración. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. polisacáridos. 4. Colorea los núcleos celulares de rojo. dejando un color marrón o negro característico. sirve para realizar la decoloración. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. que absorbe los electrones. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. coloreándolos de rojo. y Sudan Black B. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. Hay varios colorantes de la familia sudan. lípidos. . dejando un residuo negro fácilmente visible.. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. Por ejemplo el polietileno. También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. Debido a que es un metal pesado. y otros tejidos y materiales biológicos. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. o metales pesados. y actúan de mordiente.

La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. La letra R indica matices rojos. color violeta. Se contraen los poros. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. B. En realidad. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. se refieren al número de grupos metilo contenidos. quedan teñidas Células decoloradas.. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. y la letra B. . El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. no es crucial para la técnica. por consiguiente. Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. etc. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. safranina). que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. otros pierden con facilidad el primer tinte. en la reacción Gram. se califican de grampositivos. Al término del protocolo. El complejo CV-I no sale porosidad. Los que fijan el violeta. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En este método de tinción. por ejemplo. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. de los tres grupos. que se deja actuar durante un lapso determinado. Aumenta la permeabilidad. y el color no se modifica al añadir éste. R. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). como safranina.La safranina puede o no utilizarse. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. aún después de tratarlos con un decolorante. y toman el segundo. tonos azules. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. pardo Bismarck. y quizá por otras causas. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas. 2R. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. Las células Se forma el complejo CV-I. La reacción de Gram no es infalible ni constante. 4) Safranina Células no decoloradas. Se deshidratan las paredes celulares. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. Los nombres violeta de metilo 3R. 3B. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. Basándonos pues. rosado. y el tinte más ligero. de gramnegativos. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. fucsina fenicada diluida. 2B. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. se tiñen de color de color violeta.

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