1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

924 . los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente. carbohidratos.  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo). "palíndromos en proteínas" . J. 65 (19):. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos.1186/1471-2105-9274 . la cantidad de tiempo de tinción. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función.000 a 1:50. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" .1023 / A: 1. Las tinciones progresivas.4. son bastante imperdonables.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. "Evolución intrínseca de las proteínas. M Wilmanns (octubre de 2008). Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. es casi imposible. Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). proteínas. . . Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. PMID 18791850 . la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). 5. 405-10 PMID 2128128 . PMID 12760415 . la tinción "diferencial" por componentes adicionales. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. 83 (2-3):. M Kargaran. Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. sin embargo. Katanforoush A. Para conseguir el efecto deseado. Saltar↑ Ohno S (1990). "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. 287-91.454. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). . Por ejemplo. Life Sci. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. PMID 18547401 . Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas." celulares.1 ↑ Sheari A. DOI : 10. Ir a:6. PMC 2474621 . 2953-6 DOI : 10.0 6. Chem Protein 22 (2):. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste. et al (2008). Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia." Riv. algunas más que otras. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. Mol. 2.  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. Biol. el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. Saltar↑ Pinotsis N. por otra parte. Papel del péptido palíndromos.023.1007/s00018-008-8265-1 .111. Una vez se han sobreteñido. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. En bioquímica. 6.000. . . frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente). y la pérdida de detalles celulares. el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5. etc. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. 7. BMC Bioinformatics 9 : 274. Hoffmann M. 109-13 DOI : 10. la cantidad de decolorante (si es necesario). Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. J Barciszewski (febrero de 2003). cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. y por supuesto el propio tejido. Rychlewski J. lípidos. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. S Dolecka.

La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. Para piezas de tejido de mayor tamaño. Muchos tintes. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. Fijación: de por si. la Biological Stain Commission. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. Un mordiente habitual es el ácido tánico.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. sin otro tratamiento previo. gelatina o clara de huevo. es la tinción negativa. requieren del uso de un mordiente. Luego de esto.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. etanol. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. Por el contrario. esta etapa puede consistir en varios pasos. En algunos casos. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. Adicionalmente. los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. En muestras de células sueltas. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. la tinción mordentada permanece. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. y/o el ácido pícrico. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. Por ejemplo. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. proceso conocido como inclusión. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. esto es. ya sea una resina transparente. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. sin embargo. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado.  Tinción adecuada   En su forma más simple. . y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. metanol. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. para incrementar su resistencia y estabilidad. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados. incrementando su resistencia mecánica. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos.

que realza las propiedades de tinción de un colorante. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. y por tanto más de un color. Clasificación química de los colorantes. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. y algunos colorantes de Acridina. puentes de hidrógeno. Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. Hay cientos de métodos de tinción. Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. los metales quelantes se han denominado mordientes. Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida.Safranina. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. alumínico. resultado en una tinción débil. Violeta de Cresilo. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. Sin embargo. pero tiñe más bien poco. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico).Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. Ejemplos son el TBO. B. particularmente asociaciones iónicas. C. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. Verde Rapido. Como contraste. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. Las tinciones no covalentes. o en la célula). Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. No confundir con colorante "policromático". Otros colorantes metacromáticos son Tionina. acetocarmín. pero puede producir una tinción de fondo mayor.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. Cristal Violeta. crómico. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica. Ejemplos son la Safranina O. y Hematoxilina siendo las más destacables. . y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. Violeta de Metilo y Azul Celestina. violeta de metilo. Azul A. Fe o Cr . Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. añadido antes o después de la tinción. Además. Durante la tinción. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. basofílicos). todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. acidófilos). El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. Por tanto. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . sin embargo. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. Tradicionalmente. y Azul de Toluidina O. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. al que se refieren algunas veces como "lago". hidrofóbicas) o covalentes. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico.

puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. tiñe a los núcleos de color azul. 3 . Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. que usualmente es aluminio o alumbre.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. membrana celular. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. tiñe las paredes celulares de color púrpura. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. También puede ser utilizado para teñir células vivas. para hacer más visibles sus núcleos. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. y en muchos otros protocolos de tinción. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. Se puede utilizar con células vivas. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram. Por el mismo motivo. al ser combinado con un mordiente adecuado. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN.Interacciones covalentes. y algunas estructuras extracelulares. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. amino o tiol del sustrato. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. Marrón Bismarck. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. es decir azul Nilo.

Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. lo que lo hace mas hidrofóbico. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. Ambos compuestos son funcionalmente similares. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. Otras células son argirofílicas. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). Hoechst 33258 y Hoechst 33342. haciendo mas visible el núcleo. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). una de las mas comunes utilizadas en histología. y con mejor penetración en la membrana plasmática. tal como la hidroxiquinona o formalina. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. reducen las soluciones de plata a plata metálica. Algunas células argentafines. y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. Utilizado con un mordiente. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. luego de la fijación con formalina. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. la cual posee una suave tonalidad azul. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. Al igual que la fluoresceína. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. músculo liso o mitocondrias. Los dos colorantes son intercambiables. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. se desarrolla un color intensamente azul. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición.suave. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura.

lípidos. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. Los organismos Gram positivos no se decoloran. y se utiliza principalmente como contracoloración. los cuales están presente para solubilizar el yodo. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. Sudan IV. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. y otros tejidos y materiales biológicos. Por ejemplo el polietileno. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. que absorbe los electrones. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. Hay varios colorantes de la familia sudan. dejando un color marrón o negro característico. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste.de las células. dejando un residuo negro fácilmente visible. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. como la safranina o la fucsina. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. Es un agente oxidante fuerte. por lo común. Oxida agresivamente muchos materiales. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. y Sudan Black B. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. Colorea los núcleos celulares de rojo. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo.. También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. y actúan de mordiente. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. o metales pesados. sirve para realizar la decoloración. por ejemplo: Sudan III. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. polisacáridos. . coloreándolos de rojo. 4. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. Habitualmente es un colorante de color rojo. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. Debido a que es un metal pesado. nervios. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. Oil Red O.

que se deja actuar durante un lapso determinado. tonos azules. Las células Se forma el complejo CV-I. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. pardo Bismarck. no es crucial para la técnica. safranina). Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. La reacción de Gram no es infalible ni constante. Se deshidratan las paredes celulares.. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. En este método de tinción. Los nombres violeta de metilo 3R. 4) Safranina Células no decoloradas. Se contraen los poros. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. aún después de tratarlos con un decolorante. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. B. y la letra B. En realidad.La safranina puede o no utilizarse. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. y el tinte más ligero. etc. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. se califican de grampositivos. de gramnegativos. y el color no se modifica al añadir éste. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. de los tres grupos. 2R. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. color violeta. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. por consiguiente. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. se tiñen de color de color violeta. otros pierden con facilidad el primer tinte. Basándonos pues. 3B. quedan teñidas Células decoloradas. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. Aumenta la permeabilidad. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. como safranina. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. R. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. y quizá por otras causas. se refieren al número de grupos metilo contenidos. La letra R indica matices rojos. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). El complejo CV-I no sale porosidad. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. rosado. fucsina fenicada diluida. y toman el segundo. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. 2B. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. Al término del protocolo. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. en la reacción Gram. por ejemplo. Los que fijan el violeta. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. . las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas.

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