1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. la cantidad de decolorante (si es necesario). Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción.  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram.4. 405-10 PMID 2128128 . esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. . M Wilmanns (octubre de 2008). el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. algunas más que otras. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse. 287-91. Mol." Riv. 7. Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo). Una vez se han sobreteñido. la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente. Chem Protein 22 (2):. Saltar↑ Ohno S (1990). Ir a:6.1186/1471-2105-9274 . J Barciszewski (febrero de 2003). etc. sin embargo.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. PMC 2474621 . Rychlewski J. y por supuesto el propio tejido.1 ↑ Sheari A. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. "palíndromos en proteínas" . "Evolución intrínseca de las proteínas. Hoffmann M. 83 (2-3):. 5. y la pérdida de detalles celulares. S Dolecka. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. la cantidad de tiempo de tinción. M Kargaran. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. proteínas. et al (2008). por otra parte. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente). "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" .1007/s00018-008-8265-1 . la tinción "diferencial" por componentes adicionales.  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. lípidos. Life Sci. . .111. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. 6. son bastante imperdonables. Biol. J. 109-13 DOI : 10. BMC Bioinformatics 9 : 274.000 a 1:50. 2.924 . Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. PMID 12760415 . 65 (19):.023. PMID 18547401 .1023 / A: 1. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. Para conseguir el efecto deseado. Katanforoush A. es casi imposible. la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas. . . Papel del péptido palíndromos. DOI : 10. 2953-6 DOI : 10. Saltar↑ Pinotsis N.0 6. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. PMID 18791850 . En bioquímica. Las tinciones progresivas. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. carbohidratos.000." celulares. "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste. Por ejemplo. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes.454.

la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. gelatina o clara de huevo. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. Por el contrario. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. Para piezas de tejido de mayor tamaño. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. Muchos tintes. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. sin embargo. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. esto es. Un mordiente habitual es el ácido tánico. es la tinción negativa. etanol. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. Adicionalmente. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. sin otro tratamiento previo. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. . ya sea una resina transparente. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. En algunos casos. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). En muestras de células sueltas. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. proceso conocido como inclusión. los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. Fijación: de por si. Luego de esto. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. y/o el ácido pícrico. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. para incrementar su resistencia y estabilidad.  Tinción adecuada   En su forma más simple. la Biological Stain Commission. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. incrementando su resistencia mecánica. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. metanol. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. Por ejemplo. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. la tinción mordentada permanece. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. requieren del uso de un mordiente. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. esta etapa puede consistir en varios pasos.

los metales quelantes se han denominado mordientes. Por tanto. crómico. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. Como contraste. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. y Azul de Toluidina O. particularmente asociaciones iónicas. Violeta de Metilo y Azul Celestina. Tradicionalmente. acidófilos). y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. y Hematoxilina siendo las más destacables. pero tiñe más bien poco. puentes de hidrógeno. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. violeta de metilo. y algunos colorantes de Acridina. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. que realza las propiedades de tinción de un colorante.Safranina.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. Verde Rapido. Otros colorantes metacromáticos son Tionina. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. añadido antes o después de la tinción. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. resultado en una tinción débil. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. Las tinciones no covalentes. Azul A. Ejemplos son el TBO.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. Durante la tinción. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico). mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. Además. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. . algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. Fe o Cr . C. alumínico. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. Hay cientos de métodos de tinción. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. acetocarmín. Ejemplos son la Safranina O. basofílicos). y por tanto más de un color. al que se refieren algunas veces como "lago". Cristal Violeta. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. hidrofóbicas) o covalentes. Violeta de Cresilo. B. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. Clasificación química de los colorantes. Sin embargo. o en la célula). Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. pero puede producir una tinción de fondo mayor. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. No confundir con colorante "policromático". sin embargo.

3 . Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. que usualmente es aluminio o alumbre. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados.Interacciones covalentes. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. membrana celular. es decir azul Nilo. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. tiñe a los núcleos de color azul. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. y en muchos otros protocolos de tinción. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. Por el mismo motivo. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. Marrón Bismarck. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina. También puede ser utilizado para teñir células vivas. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. amino o tiol del sustrato. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. y algunas estructuras extracelulares. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. al ser combinado con un mordiente adecuado. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. tiñe las paredes celulares de color púrpura. para hacer más visibles sus núcleos. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. Se puede utilizar con células vivas. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas.

luego de la fijación con formalina. la cual posee una suave tonalidad azul. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. Los dos colorantes son intercambiables. Al igual que la fluoresceína. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. se desarrolla un color intensamente azul. Otras células son argirofílicas. Utilizado con un mordiente. También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. lo que lo hace mas hidrofóbico. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). tal como la hidroxiquinona o formalina. Algunas células argentafines. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. y con mejor penetración en la membrana plasmática. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. haciendo mas visible el núcleo. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl.suave. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. músculo liso o mitocondrias. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. una de las mas comunes utilizadas en histología. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . Ambos compuestos son funcionalmente similares. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). reducen las soluciones de plata a plata metálica. El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). Hoechst 33258 y Hoechst 33342. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor.

Sudan IV. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. sirve para realizar la decoloración. Hay varios colorantes de la familia sudan. dejando un color marrón o negro característico. Debido a que es un metal pesado. coloreándolos de rojo. dejando un residuo negro fácilmente visible. nervios. y actúan de mordiente. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. lípidos. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. polisacáridos. y Sudan Black B. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. que absorbe los electrones. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. por lo común. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. y otros tejidos y materiales biológicos. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. Oxida agresivamente muchos materiales. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. Habitualmente es un colorante de color rojo. por ejemplo: Sudan III. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. Oil Red O. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. los cuales están presente para solubilizar el yodo. . También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM.. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. 4. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas.de las células. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Colorea los núcleos celulares de rojo. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. y se utiliza principalmente como contracoloración. o metales pesados. como la safranina o la fucsina. Por ejemplo el polietileno. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. Es un agente oxidante fuerte. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. Los organismos Gram positivos no se decoloran.

y quizá por otras causas. 2B. se refieren al número de grupos metilo contenidos. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. se tiñen de color de color violeta. 2R. como safranina. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. En este método de tinción. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. quedan teñidas Células decoloradas. otros pierden con facilidad el primer tinte. R. Aumenta la permeabilidad. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. . no es crucial para la técnica. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. La reacción de Gram no es infalible ni constante. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. rosado. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). se califican de grampositivos. etc. Al término del protocolo. safranina). Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. por consiguiente. aún después de tratarlos con un decolorante. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. en la reacción Gram. Basándonos pues. Las células Se forma el complejo CV-I. B. y el tinte más ligero. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. Se deshidratan las paredes celulares. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. Los que fijan el violeta. En realidad.. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. que se deja actuar durante un lapso determinado. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. La letra R indica matices rojos. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. pardo Bismarck. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. fucsina fenicada diluida. de gramnegativos. 3B. y toman el segundo. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. por ejemplo. y el color no se modifica al añadir éste. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. 4) Safranina Células no decoloradas.La safranina puede o no utilizarse. Se contraen los poros. tonos azules. las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. El complejo CV-I no sale porosidad. y la letra B. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. de los tres grupos. Los nombres violeta de metilo 3R. color violeta.