Está en la página 1de 8

1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

7.000 a 1:50.1 ↑ Sheari A. lípidos.1186/1471-2105-9274 . En bioquímica.  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. J Barciszewski (febrero de 2003). Rychlewski J. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse. . "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. 405-10 PMID 2128128 . El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. S Dolecka. Saltar↑ Pinotsis N. Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. carbohidratos.924 . Papel del péptido palíndromos.000. 83 (2-3):. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). Life Sci.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. . algunas más que otras. PMID 18791850 . proteínas. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste. DOI : 10." celulares. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" . Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. 2953-6 DOI : 10. Hoffmann M. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5. PMC 2474621 .  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. . Ir a:6. 6. 65 (19):. los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente.0 6. Mol. la cantidad de decolorante (si es necesario)." Riv. Para conseguir el efecto deseado. 5. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. por otra parte. y por supuesto el propio tejido. M Kargaran. la cantidad de tiempo de tinción. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción.454. el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas. "palíndromos en proteínas" . 287-91. etc. es casi imposible. J. Biol. la tinción "diferencial" por componentes adicionales.1007/s00018-008-8265-1 . PMID 12760415 . PMID 18547401 . Saltar↑ Ohno S (1990). Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). BMC Bioinformatics 9 : 274. y la pérdida de detalles celulares. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. sin embargo. . Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo). 109-13 DOI : 10. M Wilmanns (octubre de 2008).4.111. et al (2008).) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Las tinciones progresivas.1023 / A: 1. Una vez se han sobreteñido. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente).023. . 2. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Katanforoush A. son bastante imperdonables. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. "Evolución intrínseca de las proteínas. Chem Protein 22 (2):. Por ejemplo.

permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. sin otro tratamiento previo. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. y/o el ácido pícrico. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. metanol. Fijación: de por si. incrementando su resistencia mecánica. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. esto es.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. para incrementar su resistencia y estabilidad. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. requieren del uso de un mordiente. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. sin embargo. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. Por el contrario. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. . Para piezas de tejido de mayor tamaño. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. En algunos casos. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados.  Tinción adecuada   En su forma más simple. Por ejemplo. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original. es la tinción negativa. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Un mordiente habitual es el ácido tánico. Luego de esto. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. la tinción mordentada permanece. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). proceso conocido como inclusión. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. En muestras de células sueltas. ya sea una resina transparente. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. esta etapa puede consistir en varios pasos. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. Adicionalmente. Muchos tintes. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. etanol. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. la Biological Stain Commission. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. gelatina o clara de huevo. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico.

y por tanto más de un color.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. sin embargo. basofílicos). y Azul de Toluidina O. Por tanto. resultado en una tinción débil. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. los metales quelantes se han denominado mordientes. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. Hay cientos de métodos de tinción. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. que realza las propiedades de tinción de un colorante. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. Violeta de Metilo y Azul Celestina. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. Otros colorantes metacromáticos son Tionina. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . Como contraste. hidrofóbicas) o covalentes. añadido antes o después de la tinción. al que se refieren algunas veces como "lago". Cristal Violeta. crómico. y algunos colorantes de Acridina. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. C. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico).Safranina. pero puede producir una tinción de fondo mayor. . Clasificación química de los colorantes. Tradicionalmente. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. Verde Rapido. acidófilos). B. puentes de hidrógeno. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. y Hematoxilina siendo las más destacables. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. o en la célula). acetocarmín. mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. particularmente asociaciones iónicas. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. Además. Ejemplos son la Safranina O. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. Las tinciones no covalentes. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. Ejemplos son el TBO. Fe o Cr . violeta de metilo.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. pero tiñe más bien poco. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF. Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. Violeta de Cresilo. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. Durante la tinción. Azul A. Sin embargo. No confundir con colorante "policromático". alumínico. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas.

colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. membrana celular. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. amino o tiol del sustrato. al ser combinado con un mordiente adecuado. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. 3 . y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo.Interacciones covalentes. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram. Marrón Bismarck. es decir azul Nilo. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. para hacer más visibles sus núcleos. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. También puede ser utilizado para teñir células vivas. Se puede utilizar con células vivas. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. tiñe las paredes celulares de color púrpura. y algunas estructuras extracelulares. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . y en muchos otros protocolos de tinción. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina. que usualmente es aluminio o alumbre. Por el mismo motivo. tiñe a los núcleos de color azul. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno.

y con mejor penetración en la membrana plasmática. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). lo que lo hace mas hidrofóbico. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. luego de la fijación con formalina. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. la cual posee una suave tonalidad azul. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . músculo liso o mitocondrias. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno.suave. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. Al igual que la fluoresceína. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. Hoechst 33258 y Hoechst 33342. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. tal como la hidroxiquinona o formalina. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. Algunas células argentafines. reducen las soluciones de plata a plata metálica. Utilizado con un mordiente. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. una de las mas comunes utilizadas en histología. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. Ambos compuestos son funcionalmente similares. se desarrolla un color intensamente azul. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. Los dos colorantes son intercambiables. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. Otras células son argirofílicas. Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. haciendo mas visible el núcleo.

Sudan IV. lípidos. por lo común. Oxida agresivamente muchos materiales. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos.. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. 4. o metales pesados. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. Hay varios colorantes de la familia sudan. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. polisacáridos. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. sirve para realizar la decoloración. los cuales están presente para solubilizar el yodo. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. nervios. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. dejando un residuo negro fácilmente visible. . El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana.de las células. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. Colorea los núcleos celulares de rojo. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. Los organismos Gram positivos no se decoloran. Por ejemplo el polietileno. y se utiliza principalmente como contracoloración. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. Habitualmente es un colorante de color rojo. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. Es un agente oxidante fuerte. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. y otros tejidos y materiales biológicos. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. y Sudan Black B. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. que absorbe los electrones. dejando un color marrón o negro característico. Debido a que es un metal pesado. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. como la safranina o la fucsina. Oil Red O. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. coloreándolos de rojo. y actúan de mordiente. También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. por ejemplo: Sudan III.

3B. 4) Safranina Células no decoloradas. rosado. . y el tinte más ligero. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. otros pierden con facilidad el primer tinte. En este método de tinción. aún después de tratarlos con un decolorante. como safranina. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. se tiñen de color de color violeta. color violeta. por consiguiente. pardo Bismarck. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. B. y toman el segundo. 2B. safranina). Al término del protocolo. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. Los que fijan el violeta. La letra R indica matices rojos. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. El complejo CV-I no sale porosidad. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. se refieren al número de grupos metilo contenidos. Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. que se deja actuar durante un lapso determinado. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. quedan teñidas Células decoloradas. las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas.La safranina puede o no utilizarse. 2R. Se contraen los poros. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). Las células Se forma el complejo CV-I. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. Aumenta la permeabilidad. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. R. tonos azules. Se deshidratan las paredes celulares. Los nombres violeta de metilo 3R. de gramnegativos. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. y la letra B. por ejemplo. etc. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. en la reacción Gram. fucsina fenicada diluida. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. se califican de grampositivos. Basándonos pues. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. La reacción de Gram no es infalible ni constante. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. de los tres grupos.. y el color no se modifica al añadir éste. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. no es crucial para la técnica. En realidad. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. y quizá por otras causas. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo.