1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

Saltar↑ Ohno S (1990). En bioquímica. Chem Protein 22 (2):." Riv. PMID 12760415 . PMID 18791850 . etc. sin embargo.4. 287-91. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). la tinción "diferencial" por componentes adicionales. los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente.1023 / A: 1.924 . PMID 18547401 . 83 (2-3):. S Dolecka.111. . Una vez se han sobreteñido. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente). es casi imposible.1186/1471-2105-9274 . y la pérdida de detalles celulares.454. y por supuesto el propio tejido. carbohidratos.000. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" . Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse.1 ↑ Sheari A. la cantidad de decolorante (si es necesario). BMC Bioinformatics 9 : 274. 5. M Wilmanns (octubre de 2008). Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). Ir a:6. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. J. proteínas. la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). 65 (19):. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Por ejemplo. esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. Las tinciones progresivas. . Rychlewski J." celulares. Hoffmann M. algunas más que otras. .  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. por otra parte. 2. et al (2008).0 6. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. Mol. Katanforoush A. Para conseguir el efecto deseado. lípidos. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste. M Kargaran. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. la cantidad de tiempo de tinción. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. 7. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. PMC 2474621 . "palíndromos en proteínas" . se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. son bastante imperdonables. DOI : 10. el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5.  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos.023. Biol. "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. Saltar↑ Pinotsis N. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. "Evolución intrínseca de las proteínas. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo).  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. 405-10 PMID 2128128 . Life Sci. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. 109-13 DOI : 10. 2953-6 DOI : 10. Papel del péptido palíndromos. cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. .1007/s00018-008-8265-1 . la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. J Barciszewski (febrero de 2003).000 a 1:50. . 6.

basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. En muestras de células sueltas. . Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. gelatina o clara de huevo. Para piezas de tejido de mayor tamaño. requieren del uso de un mordiente. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. Muchos tintes. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. Fijación: de por si. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. para incrementar su resistencia y estabilidad. incrementando su resistencia mecánica. la Biological Stain Commission. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. Por ejemplo. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Por el contrario. sin otro tratamiento previo. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. esto es. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. proceso conocido como inclusión. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. metanol. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. Luego de esto. ya sea una resina transparente. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. etanol. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. la tinción mordentada permanece. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. esta etapa puede consistir en varios pasos. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. es la tinción negativa. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído.  Tinción adecuada   En su forma más simple. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. sin embargo. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. En algunos casos. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. Un mordiente habitual es el ácido tánico. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. y/o el ácido pícrico. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. Adicionalmente. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original.

hidrofóbicas) o covalentes. Otros colorantes metacromáticos son Tionina. Hay cientos de métodos de tinción. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. Verde Rapido. B. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. Fe o Cr . Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. y algunos colorantes de Acridina. Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. Como contraste. Clasificación química de los colorantes. los metales quelantes se han denominado mordientes. El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. Durante la tinción. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF. que realza las propiedades de tinción de un colorante. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. basofílicos). resultado en una tinción débil. Las tinciones no covalentes. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. Ejemplos son el TBO. al que se refieren algunas veces como "lago". No confundir con colorante "policromático". Por tanto. acidófilos). La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. sin embargo. añadido antes o después de la tinción. . Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. pero tiñe más bien poco. Además. Sin embargo. y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. Violeta de Cresilo.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. y Azul de Toluidina O. crómico. Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. pero puede producir una tinción de fondo mayor. C. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. o en la célula). puentes de hidrógeno. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. alumínico. Ejemplos son la Safranina O.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. Cristal Violeta. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa.Safranina. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. Tradicionalmente. Azul A. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. violeta de metilo. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. Violeta de Metilo y Azul Celestina. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico). los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. y Hematoxilina siendo las más destacables. y por tanto más de un color. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. acetocarmín. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. particularmente asociaciones iónicas.

al ser combinado con un mordiente adecuado. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. es decir azul Nilo. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. Marrón Bismarck. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. Se puede utilizar con células vivas. y algunas estructuras extracelulares. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. que usualmente es aluminio o alumbre. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). para hacer más visibles sus núcleos. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo.Interacciones covalentes. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . membrana celular.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. y en muchos otros protocolos de tinción. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. Por el mismo motivo. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. También puede ser utilizado para teñir células vivas. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. tiñe a los núcleos de color azul. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. tiñe las paredes celulares de color púrpura. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. amino o tiol del sustrato. 3 . Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas.

y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . Utilizado con un mordiente. Algunas células argentafines. luego de la fijación con formalina. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. reducen las soluciones de plata a plata metálica. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. una de las mas comunes utilizadas en histología. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. la cual posee una suave tonalidad azul. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. Al igual que la fluoresceína. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática.suave. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). lo que lo hace mas hidrofóbico. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. y con mejor penetración en la membrana plasmática. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. Los dos colorantes son intercambiables. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. Ambos compuestos son funcionalmente similares. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. tal como la hidroxiquinona o formalina. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. Hoechst 33258 y Hoechst 33342. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. se desarrolla un color intensamente azul. y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. haciendo mas visible el núcleo. Otras células son argirofílicas. músculo liso o mitocondrias. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular.

polisacáridos. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. y otros tejidos y materiales biológicos. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. Hay varios colorantes de la familia sudan. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. y actúan de mordiente.de las células. los cuales están presente para solubilizar el yodo. que absorbe los electrones. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. por lo común. . Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. Colorea los núcleos celulares de rojo. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". Es un agente oxidante fuerte. 4. Sudan IV. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. Por ejemplo el polietileno. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. Oil Red O.. dejando un residuo negro fácilmente visible. sirve para realizar la decoloración. nervios. es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. Habitualmente es un colorante de color rojo. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. y Sudan Black B. por ejemplo: Sudan III. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. como la safranina o la fucsina. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). coloreándolos de rojo. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. y se utiliza principalmente como contracoloración. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. lípidos. Oxida agresivamente muchos materiales. o metales pesados. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. dejando un color marrón o negro característico. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. Debido a que es un metal pesado. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. Los organismos Gram positivos no se decoloran. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas.

puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. y el tinte más ligero. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). Disminuye la continúan teñidas de color violeta.. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. Basándonos pues. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. como safranina. B. safranina). color violeta. fucsina fenicada diluida. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. se califican de grampositivos. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. 2B. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. La letra R indica matices rojos. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. 3B. En realidad. por ejemplo. aún después de tratarlos con un decolorante. y toman el segundo. etc. Los nombres violeta de metilo 3R. Al término del protocolo. rosado. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. El complejo CV-I no sale porosidad. Se contraen los poros. pardo Bismarck. en la reacción Gram. tonos azules. Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. Se deshidratan las paredes celulares.La safranina puede o no utilizarse. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. no es crucial para la técnica. otros pierden con facilidad el primer tinte. En este método de tinción. R. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. . las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). 2R. quedan teñidas Células decoloradas. 4) Safranina Células no decoloradas. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. y quizá por otras causas. y el color no se modifica al añadir éste. de los tres grupos. La reacción de Gram no es infalible ni constante. Las células Se forma el complejo CV-I. por consiguiente. Los que fijan el violeta. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. se tiñen de color de color violeta. Aumenta la permeabilidad. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. que se deja actuar durante un lapso determinado. se refieren al número de grupos metilo contenidos. de gramnegativos. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. y la letra B. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias.

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