1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

65 (19):. "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. etc. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" . es casi imposible. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. y por supuesto el propio tejido. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente. "Evolución intrínseca de las proteínas. PMC 2474621 .1186/1471-2105-9274 . Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo). Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. Para conseguir el efecto deseado. Saltar↑ Pinotsis N. la cantidad de decolorante (si es necesario). esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. En bioquímica. . . el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5. . Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). 83 (2-3):. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles.111. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. carbohidratos. 6. PMID 12760415 . Ir a:6. Life Sci. J Barciszewski (febrero de 2003). Una vez se han sobreteñido. la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). la cantidad de tiempo de tinción. "palíndromos en proteínas" . 405-10 PMID 2128128 . 109-13 DOI : 10. BMC Bioinformatics 9 : 274." celulares. Mol. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente). y la pérdida de detalles celulares. la tinción "diferencial" por componentes adicionales. algunas más que otras.924 .454." Riv. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse. . Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. lípidos. cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. Rychlewski J. proteínas.0 6. et al (2008). son bastante imperdonables. Por ejemplo. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. PMID 18547401 . la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. S Dolecka. Hoffmann M. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. 2.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste.1023 / A: 1.023. por otra parte. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico.000.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. M Kargaran. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Katanforoush A.  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. Saltar↑ Ohno S (1990).000 a 1:50. 7. Biol. Chem Protein 22 (2):. . Papel del péptido palíndromos. 2953-6 DOI : 10. Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. 287-91. DOI : 10. 5. Las tinciones progresivas. J. M Wilmanns (octubre de 2008).4.1 ↑ Sheari A.  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. sin embargo. PMID 18791850 . para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas.1007/s00018-008-8265-1 .

Para piezas de tejido de mayor tamaño. . los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. ya sea una resina transparente. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. etanol. sin otro tratamiento previo. requieren del uso de un mordiente. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. esto es. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. metanol. y/o el ácido pícrico. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados.  Tinción adecuada   En su forma más simple. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. para incrementar su resistencia y estabilidad. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. es la tinción negativa. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. sin embargo. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. Adicionalmente. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. incrementando su resistencia mecánica. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). Por el contrario. Fijación: de por si. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados. Por ejemplo. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. Luego de esto. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. Muchos tintes. gelatina o clara de huevo. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. En muestras de células sueltas. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. esta etapa puede consistir en varios pasos. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. Un mordiente habitual es el ácido tánico. En algunos casos. proceso conocido como inclusión. la Biological Stain Commission. la tinción mordentada permanece. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato.

violeta de metilo. y algunos colorantes de Acridina. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. los metales quelantes se han denominado mordientes. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. añadido antes o después de la tinción. Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica. Ejemplos son el TBO. resultado en una tinción débil. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. al que se refieren algunas veces como "lago". Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno.  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. y Azul de Toluidina O. Azul A. Tradicionalmente. pero tiñe más bien poco. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. Sin embargo. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. B. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. Por tanto. y por tanto más de un color. puentes de hidrógeno. hidrofóbicas) o covalentes. y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. pero puede producir una tinción de fondo mayor. acidófilos). Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. Durante la tinción. alumínico. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. particularmente asociaciones iónicas. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. sin embargo. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. Violeta de Metilo y Azul Celestina. que realza las propiedades de tinción de un colorante. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. Un ejemplo es el Verde Rápido FCF.Safranina. Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. crómico. Como contraste. Fe o Cr . las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. Otros colorantes metacromáticos son Tionina. No confundir con colorante "policromático". El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. Verde Rapido. Ejemplos son la Safranina O. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. y Hematoxilina siendo las más destacables. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. . o en la célula). Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. Clasificación química de los colorantes. acetocarmín. Además. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. Las tinciones no covalentes. Hay cientos de métodos de tinción.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. Violeta de Cresilo. C. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico). Cristal Violeta. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. basofílicos).

Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. Marrón Bismarck. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. y algunas estructuras extracelulares. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. para hacer más visibles sus núcleos. es decir azul Nilo. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. membrana celular. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. 3 . impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. Por el mismo motivo. También puede ser utilizado para teñir células vivas. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. y en muchos otros protocolos de tinción. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. tiñe las paredes celulares de color púrpura. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). amino o tiol del sustrato. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. tiñe a los núcleos de color azul. Se puede utilizar con células vivas. al ser combinado con un mordiente adecuado.Interacciones covalentes. que usualmente es aluminio o alumbre. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina.

También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). Ambos compuestos son funcionalmente similares. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. luego de la fijación con formalina. se desarrolla un color intensamente azul. Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. tal como la hidroxiquinona o formalina. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. haciendo mas visible el núcleo. Otras células son argirofílicas. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. Los dos colorantes son intercambiables. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). una de las mas comunes utilizadas en histología. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. Algunas células argentafines. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. lo que lo hace mas hidrofóbico. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. y con mejor penetración en la membrana plasmática. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. la cual posee una suave tonalidad azul. Hoechst 33258 y Hoechst 33342. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). también conocida como eosina azulada o rojo imperial. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. reducen las soluciones de plata a plata metálica. Al igual que la fluoresceína. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B.suave. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina). y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. músculo liso o mitocondrias. Utilizado con un mordiente.

También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas". pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. como la safranina o la fucsina. dejando un color marrón o negro característico. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. Hay varios colorantes de la familia sudan. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. que absorbe los electrones. nervios. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. Es un agente oxidante fuerte. coloreándolos de rojo. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. Sudan IV. Los organismos Gram positivos no se decoloran. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. Habitualmente es un colorante de color rojo.de las células. Oxida agresivamente muchos materiales. Por ejemplo el polietileno. . Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. lípidos. y Sudan Black B. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. por lo común. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus.. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. y actúan de mordiente. por ejemplo: Sudan III. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. Colorea los núcleos celulares de rojo. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. o metales pesados. sirve para realizar la decoloración. los cuales están presente para solubilizar el yodo. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). y se utiliza principalmente como contracoloración. dejando un residuo negro fácilmente visible. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. polisacáridos. 4. Oil Red O. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. y otros tejidos y materiales biológicos. es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. Debido a que es un metal pesado.

Al término del protocolo. 3B. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. fucsina fenicada diluida. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. de gramnegativos. El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. aún después de tratarlos con un decolorante. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. pardo Bismarck. 4) Safranina Células no decoloradas. tonos azules. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. otros pierden con facilidad el primer tinte. En realidad. de los tres grupos. La letra R indica matices rojos. Se deshidratan las paredes celulares. 2B. como safranina. y el color no se modifica al añadir éste. etc. . Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. B. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. El complejo CV-I no sale porosidad. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. quedan teñidas Células decoloradas. Las células Se forma el complejo CV-I. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. se refieren al número de grupos metilo contenidos. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. 2R. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. Basándonos pues. R. Aumenta la permeabilidad. rosado. los mohos se tiñen con cierta irregularidad. Los nombres violeta de metilo 3R.. Los que fijan el violeta. y el tinte más ligero. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. y quizá por otras causas. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. y toman el segundo. se tiñen de color de color violeta. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). color violeta. Se contraen los poros. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. en la reacción Gram. las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas. En este método de tinción. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. por ejemplo. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula. se califican de grampositivos. no es crucial para la técnica. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. y la letra B. La reacción de Gram no es infalible ni constante. por consiguiente. que se deja actuar durante un lapso determinado. safranina).La safranina puede o no utilizarse.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful