1.

Secuencia palindrómica

Estructura de un ADN palíndromo A: palíndromos, B: Loop, C: Stem. Una secuencia palindrómica es una secuencia de nucleótidos de unácido nucleico ( ADN o ARN ) que es igual a leerlo en la dirección 5 '→ 3' o una cadena (también) en la dirección 5 '→ 3' en la hebra complementaria, que puede formar la una doble hélice. El significado de palíndromo en el contexto de la genética es algo diferente de la definición que se da en las secuencias de palabras y frases.Una palabra o frase capicúa es simplemente leer empezando por el final es el mismo (por ejemplo, "radar" o "la torre de la derrota"), pero en los ácidos nucleicos debe revertir secuencia complementaria primero, es decir, para revertir su complemento . Como la doble hélice consiste en dos cadenas de nucleótidos apareados para funcionar en la dirección opuesta (5 '→ 3' y de otro modo), y los nucleótidos siempre aparearse de la misma manera ( adenina (A) con timina (T) en el ADN, o A con uracilo (U) en el ARN, citosina (C) con guanina (G)), se dice que una secuencia de una sola cadena de nucleótidos a ser un palíndromo si es igual a su complemento inverso . Por ejemplo, la secuencia de ADN ACCTAGGT es palindrómica porque su base complementaria de nucleótidos hasta el nucleótido haríaTGGATCCA , y invertimos última secuencia, es decir, Lemola comenzando al final, sería ACCTAGGT , que es idéntica a la secuencia original. En las secuencias de ARN bases palindrómicas permiten que se produzca la unión complementarios antiparalelas regiones de la molécula, que forman una estructura secundaria en el ARN de doble hélice, que puede ser importante en la determinación de la [1] forma en que un ARNm se procesa por la célula. secuencias palíndromo de ARN están separados por un número de nucleótidos que no pertenecen a la palíndromo. Una secuencia palindrómica de nucleótidos puede formar una estructura de tallo-bucle (o tenedor tallo-bucle ). Las razones palindrómicos de ADN se encuentran en la mayoría de los genomas . Las razones son palindrómicos causados por el orden de sus nucleótidos. Fueron estudiados especialmente en los cromosomas bacterianoselementos en los llamados Mosaico dispersa bacteriana (o BIME bacteriana interpersed Mosaico Elementos ) que ellos se dispersan. Recientemente, un proyecto de secuenciación del genoma de investigación encontró que muchas de las bases del cromosoma Y se disponen formando palíndromos, [2][3] lo que podría permitir una "recombinación" del cromosoma Y con ella misma (la conversión de genes).   Palíndromos en proteínas
[4][5]

]

Palindrómico también aparecen con frecuencia en las secuencias de aminoácidos de las proteínas, pero su función no se les [6] conoce bien. Dos ejemplos son palíndromos con la sistemina péptido y p53 supresor de tumor humano. Recientemente, sugerido que la existencia frecuente de palíndromos en péptidos podría estar relacionado con las regiones de baja complejidad frecuentes observados en las proteínas , ya que existe una asociación entre los dos. Su frecuencia podría ser también relacionado con la [6] [7] tendencia a formar hélices alfa de esas secuencias, o la frecuencia de la formación de complejo de proteína / proteína. 1. 2. Saltar↑ CE Creutz. Longitudes y número máximo de palíndromos en los ARN mensajeros. Biopolímeros. Volumen 17, Número 7, páginas 1815 a 1819, julio de 1978. DOI:. 10.1002/bip.1978.360170715 [1] Saltar↑ Rozen S, Skaletsky H, Marszalek JD, Minx PJ, Cordum SA, Waterston RH, Wilson RK, DC Page. Abundante conversión génica entre los brazos de palíndromos en humanos y simios Cromosoma. Naturaleza. 2003 Jun 19, 423 (6942) :873-6. PMID 12815433 . [2] Saltar↑ palíndromos del cromosoma Y [3]

3.

son bastante imperdonables. Algunos colorantes trabajan mejor cuando dan una sobretinción y a continuación son lavados para revelar la estructura celular (tinción regresiva). por otra parte. Saltar↑ Pinotsis N. Life Sci. proteínas.000.4. cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal. el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram.924 .) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto." celulares. 405-10 PMID 2128128 . Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles. En bioquímica. etc. 6. la cantidad de decolorante (si es necesario). algunas más que otras. . carbohidratos.111. esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN. frecuente mente una sal metálica añadida (mordiente). 2953-6 DOI : 10. PMID 18547401 .023. "Historia de dos colas simétricas: características estructurales y funcionales de las proteínas en Palindromes" . Las tinciones progresivas. la temperatura durante la tinción (para colorantes "reactivos"). Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. J. para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas." Riv. y por supuesto el propio tejido. PMID 18791850 .  Tinción in vivo e in vitro Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. 109-13 DOI : 10. Ir a:6.1186/1471-2105-9274 . Saltar↑ Giel-Pietraszuk M. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos. La tinción es un resultado de la sinergia entre la adición de tinción. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo). PMID 12760415 . lípidos. . 83 (2-3):. poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltarorganelas dentro de células individuales. la tinción "diferencial" por componentes adicionales.1023 / A: 1. Tinciones y reconocimientos histoquímicos El proceso de tinción de corte o tejidos completos es más un arte que una ciencia. "Evolución intrínseca de las proteínas. Por ejemplo. Katanforoush A. 287-91. . Chem Protein 22 (2):. Otros colorantes tiñen los tejidos tan lentamente que se puede observar la progresión en la tinción y pararlo en el momento más apropiado ( tinción progresiva). BMC Bioinformatics 9 : 274. . 2. Saltar↑ Ohno S (1990). DOI : 10. se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. PMC 2474621 .1 ↑ Sheari A.  Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. Mol.1007/s00018-008-8265-1 .454. la cantidad de tiempo de tinción. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. . "asambleas de proteínas con estructura palindrómica motivo. bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos. S Dolecka. J Barciszewski (febrero de 2003). los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. y la pérdida de detalles celulares. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células). 7. Para conseguir el efecto deseado.  Métodos de tinción in vitro Preparación Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado. sin embargo. los detalles del tejido generalmente se pierden de forma permanente. El propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes. M Wilmanns (octubre de 2008).000 a 1:50. et al (2008). Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste.0 6. M Kargaran. Los colorantes regresivos son perdonados en esta sobretinción. Una vez se han sobreteñido. Hoffmann M. Rychlewski J. Biol. Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas. la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos. Papel del péptido palíndromos. es casi imposible. "palíndromos en proteínas" . 65 (19):. 5. el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5.

Adicionalmente. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. los tejidos cromófobos no toman colorante con facilidad. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero. se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. incrementando su resistencia mecánica. como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos. o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra.  Tinción negativa Un método sencillo de tinción para bacterias. Para piezas de tejido de mayor tamaño. sin embargo. la Biological Stain Commission. Un mordiente habitual es el ácido tánico. ya que cuanto más delgado es un corte histológico. La 2 utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados. Por el contrario. En algunos casos. Estos estándares son publicados detalladamente en la 1 revistaBiotechnic & Histochemistry. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. Por ejemplo. metanol. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente. la tinción mordentada permanece. seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado. Luego de esto. adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. esto es. Montaje frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. etanol. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas. La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados.   Tinción directa Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato. la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos. Muchos tintes. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar. más definición se obtiene en las imágenes microscópicas. gelatina o clara de huevo. Fijación: de por si. es la tinción negativa. por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos. el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante. Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. y/o el ácido pícrico. sin otro tratamiento previo. la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la 4 hematoxilina). que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan. Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filoo -fílico. los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro 5 como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea. permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos. proceso conocido como inclusión. ya sea una resina transparente. y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza.  Tinción adecuada   En su forma más simple. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído. En muestras de células sueltas. para incrementar su resistencia y estabilidad. Tinción indirecta 3 Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar un precipitado coloreado insoluble. . requieren del uso de un mordiente. Permeabilización este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas. se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. esta etapa puede consistir en varios pasos. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas. y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes. para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original.

Un ejemplo es el Verde Rápido FCF. De los muchos pasos de tinción diseñados por los investigadores.Safranina. y han sidu usados para facilitar la tinción principalmente de ácidos nucleicos. alumínico. Como contraste. Este cambio de color en fluorescencia se denomina metacromasia y el colorante se llama colorante metacromático. Los do complejos colorante/mordiente más comunos son las tinciones nucleares Hematoxilina y Gallocianina. Los colorantes y las microtécnicas en tinción pueden ser agrupadas en clases de acuerdo a su especificidad y estructura química. y por tanto más de un color. crómico. pero tiñe más bien poco. Violeta de Metilo y Azul Celestina. o en la célula). Clasificación química de los colorantes. Verde Rapido. Ciertos colorantes muestran un cambio en los picos de absorción (color) después de de unirse a polianiones (bien en solución. hidrofóbicas) o covalentes. Azul A. el cual es un colorante compuesto o una mezcla de colorantes que consisten en más de un colorante.  Colorantes químicos Las moléculas de colorante deben reaccionar con componentes celulares bien por uniones no covalentes (inónicos. los metales quelantes se han denominado mordientes. particularmente asociaciones iónicas. un mordiente también debe ser un compuesto tal como el ácdio acético o el pícrico que es añadido para lavar la solución para realzar el brillo de una tinción como la eosina o el eritrosin (ácido acético) o colorantes violeta (ácido pícrico). Los colorantes reactivos son usados extensivamente en la industria textil pero no frecuentemente en biología. que preferentemente tiñe componentes tales como la celulosa y el citoplasma. cueden ser inestables y el colorante puede perderse del tejido. mientras que los cortes encastrados en plástico mantienen la matriz durante los pasos de tinción. Las clases que se enumeran aquí pertenecen específicamente a microtécnicas e histoquímica. las diferencias en el pH y la concentración en sales dentro del tejido pueden dar como resultado en tinciones diferenciales. al que se refieren algunas veces como "lago". Los colorantes catiónicos ("colorantes básicos") son atraídos a los componentes celulares que son ácidos de forma natural (cargados negativamente. C. Durante la tinción.Erhlich usó el término "matriz ortocromática" para referirse al color de la solución de colorante y "matriz metacromática" al color del complejo colorante-tejido. Los tejidos encastrados en parafina deben ser desparafinadso usando HistoClear o xileno. acetocarmín. y Hematoxilina siendo las más destacables. Tradicionalmente. la interacción iónica de la molécula colorante al componente del tejido puede ser inherentemente inespecífica. Hay cientos de métodos de tinción. añadido antes o después de la tinción. .  Mordientes El término mordiente se refiere a cualquier compuesto. Las tinciones no covalentes. resultado en una tinción débil. La Hematoxilina-cromica es específicapara ácidos nucleicos. Los colorantes reactivos más prometedores son los colorantes diclorotriazina en el grupo Promoción M de colorantes comerciales. y Azul de Toluidina O. Otros colorantes ácidos son el Naranja G y el Azul de Anilina. Ejemplos son la Safranina O. algunas de estas moléculas de agua pueden ser intercambiadas por los grupos ligando de la molécula colorante formando un quelato entre el colorante y el metal. las microtécnicas vegetales han tendido a limitar su uso a sólo unas pocas. todos los métodos siguen ciertos procedimientos generalizados dependiendo si los cortes a teñir fueron encastrados en parafina o plástico. violeta de metilo. Sin embargo. No confundir con colorante "policromático". Colorantes aniónicos ("colorantes ácidos") son atraídos por componentes celulares que son básicos (cargados positivamente. Entre las innumerables tinciones químicas disponibles para investigación hitológica. Ejemplos son el TBO. y depende del estado iónico de la molécula diana (componente celular) y el ambiente en el cual la diana resida. B. El agente quelante puede determinar la selectividad del colorante. basofílicos). Los átomos metálicos (ligandos) pueden formar un complejo multiátomo con moléculas de agua in situ. Los mordientes son generalmente metales como el manganeso. Violeta de Cresilo. sólo unos pocos son usados generalmente en microtécnicas vegetales. dependiendo de los cmponentes celulares a los que se une el TBO. Por ejemplo tejidos teñidos con Azul de Toluidina O puenden variar de azul oscuro/ púrpura hata azul muy claro a rosa. Además. los enlaces covalentes de las moléculas de colorante resultan en un complejo excesivamente estable que puede ser bastante específico. Otros colorantes metacromáticos son Tionina. Fe o Cr . y algunos colorantes de Acridina. acidófilos). y 3+ 3+/2+ 3+ el metal quelante usado puede ser Al . Por tanto. puentes de hidrógeno. El pH de la solución del colorante puede determinar la extensión de la tinción mientras que la reactividad de una molécula colorante con el tejido es dependiente a mendudo del cambio. que realza las propiedades de tinción de un colorante. La Hematoxilina Férrica tiñe rápidamente. Ivanov se refiere a colorantes que reaccionan covalentemente como colorantes reactivos ya que contienen un grupo que reacciona con grupos funcionales en los componentes celulares. sin embargo. Cristal Violeta. pero puede producir una tinción de fondo mayor.

A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram.colorantes reactivos Una molécula de colorante reactivo está formada generalmente por dos componentes: el revelador de color (cromóforo) y el componente reactivo (auxocromo) generalmente reaccionando con un grupo hidroxil. al ser combinado con un mordiente adecuado. Carmín[editar] El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. La técnica de 6 tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente. Se puede utilizar con células vivas. se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. que usualmente es aluminio o alumbre. Bismarck brown[editar] Bismarck brown. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente.Interacciones covalentes. puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis. Azul Nilo[editar] El Nile blue (o Nile blue A). Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos. el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. y algunas estructuras extracelulares. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. Por el mismo motivo. Azul de metileno[editar] Azul de metileno se utiliza para teñir células animales. tiñe a los núcleos de color azul. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. Si el componente del cromóforo de la molécula es fluorescente se conoce entonces como fluoróforo. Además imparte un fuerte color rojo a loseritrocitos. DAPI[editar] El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente. impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático. Azul brillante de Coomassie[editar] Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. es decir azul Nilo. También puede ser utilizado para teñir células vivas. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. 3 . Bromuro de etidio[editar] El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. tiñe las paredes celulares de color púrpura. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas. membrana celular. para hacer más visibles sus núcleos. Cristal violeta[editar] El cristal violeta. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas.Colorantes histológicos más comunes Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos. Marrón Bismarck. amino o tiol del sustrato. mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a las mucinas ácidas. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy . y en muchos otros protocolos de tinción. ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. Eosina[editar] La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina.

Estas células reducen la plata a su forma metálica luego de ser expuestas a una tinción que contiene un agente reductor. Hay dos tipos principales de colorantes Hoechst. Cuando se mezcla almidón con una solución de yodo. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B. El yodo tambíen es componente de la coloración de Gram utilizada en microbiología. Lugol[editar] El yodo se utiliza en química analítica como indicador para el almidón. utilizando una reacción entre el nitrato de plata y el dicromato de potasio. Ambos compuestos son funcionalmente similares. Rojo neutro[editar] El rojo neutro (toluylene red) colorea de rojo a la substancia de Nissl. una de las mas comunes utilizadas en histología. Utilizado con un mordiente. También se utiliza la tinción argéntica en la electroforesis en gel en gradiente de temperatura. y emite luz azul cuando recibe luz ultravioleta. Rojo Nilo[editar] El Rojo Nilo (también conocido como oxazona del azul nilo) se produce hirviendo el Azul Nilo con ácido sulfúrico. Este método fue descubierto por el fisiólogo italiano Camillo Golgi. aunque esta característica disminuye su habilidad para penetrar la membrana plasmática. El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo sustituyendo al grupo hidroxilo terminal (un grupo etileter). Se utiliza con frecuencia en microscopía de fluorescencia para colorear el ADN. La solución de Lugol o Lugol yoduro (IKI) es una solución de color marrón que se torna negra en presencia de almidones y puede ser utilizada para colorear células. aumentando la capacidad del colorante para entrar en las células a través de los poros presentes en la membrana o pared celular. Algunas células argentafines. El almidón es una sustancia muy común en la mayor parte de las células vegetales. para precipitar cromato de plata en algunas células (método de Golgi). Se utiliza para facilitar la visualización de ambas sustancias tanto dentro como fuera de las células. la cual posee una suave tonalidad azul. luego de la fijación con formalina. Hoechst 33258 y Hoechst 33342. músculo liso o mitocondrias. se puede utilizar también como una tinción inespecífica para dar un trasfondo fluorescente (contraste) a tinciones convencionales en la superficie de muestras 7 sólidas de tejidos (coloración de contraste fluorescente) ) Plata[editar] Una tinción argéntica es el uso de plata para colorear preparados histológicos. y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición. se desarrolla un color intensamente azul. la fucsina es la responsable de dar el color rojo a las fibras de colágeno. Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma. y por lo tanto es mas soluble en solventes acuosos. Cuando se une al ADN presenta un espectro muy similar al de la fluoresceína. Hoechst tiene color amarillo cuando se encuentra disuelto en agua. catiónico y selectivo para ácidos nucleicos útil para demostraciones sobre el ciclo celular. aunque poseen pequeñas diferencias en su estructura. En la coloración de gram el yoduro se utiliza como mordiente. Otras células son argirofílicas. Naranja de acridina[editar] El naranja de acridina es un colorante fluorescente. representando la formación del complejo de inclusión yodo/almidón. y se acumula en los glóbulos lipídicos en el interior . También es una coloración tradicional para colorear mitocondrias (método de Altmann). Con frecuencia se utiliza como contracoloración en otras técnicas de tinción. Mayormente se utiliza en combinación con eosina en la coloración H&E (Hematoxilina y Eosina). El Rojo Nilo es una coloración lipofílica. Este tratamiento produce una mezcla de Rojo y Azul Nilo. la hematoxilina tiñe a los nucleos celulares de color azul violeta a negro. lo que lo hace mas hidrofóbico. Hoechst[editar] Hoechst es un compuesto derivado bis-benzimidazol que se une al surco menor del ADN. de modo que una solución diluida de yodo puede colorear el almidón presente en las células. también conocida como eosina azulada o rojo imperial. En la tinción de Van Gieson (picrofucsina).suave. Hematoxilina[editar] La Hematoxilina es un colorante nuclear. Fucsina ácida[editar] La fucsina ácida puede ser utilizada para colorear colágeno. Al igual que la fluoresceína. tal como la hidroxiquinona o formalina. El Hoechst 33258 contiene un hidroxilo terminal. Este tipo de coloración es especialmente importante para demostrar proteínas (por ejemplo el colágeno tipo III) y ADN. Es capaz de atravezar la membrana celular e interactúa con el ADN y el ARN por intercalación o interacciones electrostáticas. y con mejor penetración en la membrana plasmática. Los dos colorantes son intercambiables. Rodamina[editar] La rodamina es una tinción fluorescente específica para proteínas utilizada comunmente en microscopía fluorescente. reducen las soluciones de plata a plata metálica. haciendo mas visible el núcleo.

nervios. por ejemplo: Sudan III. es quizás la coloración mas común para resaltar morfologías en la microscopía electrónica. Se disuelve con facilidad en las grasas y se reduce aosmio metálico al interactuar con material orgánico. Fluoresce fuertemente cuando se encuentra particionado en lípidos. y actúan de mordiente. pero practicamente no presenta fluorescencia en soluciones acuosas. Tetróxido de rutenio[editar] El tetróxido de rutenio es igualmente volátil e incluso mas agresivo que el tetróxido de osmio. Debido a que es un metal pesado. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para teñir lípidos. lo que permite colorear materiales que se resisten a la coloración con osmio. o metales pesados. Por ejemplo el polietileno. También se puede utilizar directamente para colorear endosporas. dejando un residuo negro fácilmente visible. coloreándolos de rojo. TINCIÓN DE GRAM Explicación[editar] El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en todas las células bacterianas (tanto Gram positivas como Gram negativas) a través de la pared bacteriana. La mezcla de alcohol-acetona que se agrega. como la safranina o la fucsina. El OsO4 es muy volátil y extremadamente tóxico. Verde de metilo[editar] El verde de metilo se utiliza frecuentemente en microscopia de campo claro. polisacáridos. Oxida agresivamente muchos materiales. y otros tejidos y materiales biológicos. Los organismos Gram positivos no se decoloran. El I2 entra en las células y forma un complejo insoluble en solución acuosa con el cristal violeta. Habitualmente es un colorante de color rojo. Sudan IV. dejando un color marrón o negro característico. se puede hacer uso de sustancias que aumentan el contraste en la microscopía de transmisión electrónica. Safranina[editar] La safranina (o safranina O) es un colorante nuclear. Por lo general se utilizan sustancias electrondensas. Hay varios colorantes de la familia sudan. Ácido fosfotúngstico[editar] El ácido fosfotúngstico es un colorante negativo común utilizado para resaltar virus. lípidos. El Rojo Nilo puede ser utilizado con células vivas. También se utiliza para la tinción de varios polímeros para el estudio de los mismos por TEM. . Es un agente oxidante fuerte. y Sudan Black B. Para poner de manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste. También se utiliza para determinar los niveles de grasa en materia fecal para diagnosticar esteatorrea. haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la célula bacteriana. los cuales están presente para solubilizar el yodo. ya que en la misma es soluble el complejo I 2/cristal violeta. Tetróxido de osmio[editar] El tetróxido de osmio se utiliza en microscopía óptica para colorear lípidos. En microscopía electrónica[editar] Al igual que en la microscopía óptica. sirve para realizar la decoloración. ya que en él el osmio tiene un estado de oxidación +8. Verde malaquita[editar] El verde malaquita (conocido tambíen como diamond green B o victoria green B) puede ser utilizado como contracoloración azulverdosa en combinación con la safranina un ejemplo es la coloración de Gimenez para bacterias. Se disuelve en grasas y se reduce por la presencia de materiales orgánicos a osmio metálico. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son rojas. También puede ser utilizada para darle una coloración amarilla al colágeno. para teñir la cromatina de las células y facilitar así su visualización. mientras que las Gram positivas permanecen violetas. mientras que los Gram negativos sí lo hacen. Colorea los núcleos celulares de rojo. y se utiliza principalmente como contracoloración.. por lo común.de las células. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio). que absorbe los electrones. Oil Red O. dejando un depósito de osmio no volátil en un estado de oxidación bajo. 4. Sudan[editar] La coloración de Sudan se utiliza para destacar sustancias "sudanofílicas".

se tiñen de color de color violeta. se refieren al número de grupos metilo contenidos. los gránulos de micelios propenden retener el colorante. Los representantes más usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. y los que pierden la primera coloración y retienen la segunda. por ejemplo. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloración Gram. La reacción de Gram no es infalible ni constante. safranina). los mohos se tiñen con cierta irregularidad. Productos que se utilizan Reacción y coloración de las bacterias GRAM + GRAM Células color violeta 1) Cristal violeta Células color violeta 2) Lugol solución Se forma el complejo CV-I. quedan teñidas Células decoloradas. y el tinte más ligero. Se deshidratan las paredes celulares. Al término del protocolo. puede variar con el tiempo del cultivo y el pH del medio. Esta importante coloración diferencial fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884. pironin B o hasta inclusive verde de malaquita. se verán rosas (si no se hizo la tinción de contraste) o rojas (si se usó. . El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el número de grupos metilo en la molécula. por consiguiente. Disminuye la continúan teñidas de color violeta. tonos azules. La facultad de las células para tomar la coloración Gram no es propia de toda sustancia viviente. podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos. Algunos microorganismos retienen el colorante violeta. Las células iodada 3) Alcohol continúan teñidas de color violeta. y se considera como el mejor colorante primario para teñir por el método de Gram. Se escurre luego el exceso de violeta de metilo y se añade luego una solución de yodo. pardo Bismarck. Las células Se forma el complejo CV-I. R. la extensión bacteriana se cubre con solución de uno de los colorantes de violeta de metilo. B. y la letra B. Los que fijan el violeta. se califican de grampositivos. sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. y quizá por otras causas. 2R. El complejo CV-I se separa de las células que continúan teñidas de de la célula.La safranina puede o no utilizarse. violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina. como safranina. En realidad. rosado. de gramnegativos. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo. Los nombres violeta de metilo 3R. que se deja actuar durante un lapso determinado. no es crucial para la técnica. en la reacción Gram. aún después de tratarlos con un decolorante. Se contraen los poros. de los tres grupos.. que se deja durante el mismo tiempo que la anterior. y toman el segundo. El complejo CV-I no sale porosidad. etc. la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares. La letra R indica matices rojos. Aumenta la permeabilidad. color violeta. y el color no se modifica al añadir éste. el tono más oscuro es la hexametil-p-rosanilina (violeta cristal). otros pierden con facilidad el primer tinte. En este método de tinción. Así vemos que las células de plantas y animales superiores no conservan la primera coloración. 4) Safranina Células no decoloradas. 3B. fucsina fenicada diluida. Basándonos pues. después se lava el portaobjetos con alcohol hasta que éste no arrastre más colorante. 2B. Sigue a tal tratamiento una coloración de contraste. Sirve para hacer una tinción de contraste que pone de manifiesto las bacterias Gram negativas. las Gram positivas se verán azul-violáceas y las Gram negativas.

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