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PRODUCCION DE ACIDO CITRICO POR ACCION DEL ASPERGILLUS NIGER A PARTIR DE MELAZA DE CAA DE AZUCAR MEDIANTE UN PROCESO SUMERGIDO

I. INTRODUCCIN Dentro de los procesos industriales, la melaza de caa mayormente empleada en la fermentacin alcohlica, encontrara altos niveles de utilizacin si se destinara amplia y simultneamente a procesos fermentativos tales como las fermentaciones ctrica, lctica, glutamica, etc. Para derivar en la obtencin de cidos orgnicos de vasta utilidad en la Industria Alimentaria. Uno de estos procesos a destacarse, es la fermentacin ctrica, que conduce a la obtencin de cido ctrico, acidulante de gran demanda en la Industria de bebidas gaseosas, produccin de cacao, chocolates y confitera en general, sectores que representan ms del 90% del consumo nacional. En el presente trabajo se tratar de delinear el proceso de obtencin del Acd. Citrico, a travs del mtodo de cultivo sumergido, para esto se utiliza una especie de hongos, del gnero Aspergillus. II. FUNDAMENTO TEORICO HISTORIA

2.1.

A partir del jugo de limn, Scheele logr aislar por primera vez en 1784 el cido ctrico usando el proceso de cal-sulfrico para separar el micelio del caldo que contiene cido ctrico en el proceso fermentativo. Antes de que se desarrollaran los procesos microbianos la principal fuente de cido ctrico eran los ctricos provenientes de Italia (limones con un contenido entre 6 y 7 %) y el citrato de lima. En 1917 debido a la imposibilidad de comprar limones italianos y citrato de lima, comienzan a experimentar otros mtodos para obtenerlo. En 1923, los hermanos Pfizer logran obtener cido ctrico a partir de Aspergillus Nger y la fermentacin del azcar. Como sustrato se utiliz melazas de remolacha y se est diversificando en sustratos como sacarosa, melazas de caa o jarabe de glucosa. Posteriormente, se registr una importante expansin debido al desarrollo del proceso de fermentacin sumergida, mucho ms econmico. 2.2. HONGO

Aspergillus niger es un hongo que produce un moho negro en vegetales -muy comn en la lechuga, el tomate o la acelga-. Es una de las especies ms corrientes del gnero Aspergillus. En 1729 los catalog por primera vez el bilogo italiano Micheli.

Aspergillus niger

Micrografa de A. niger crecido en una placa de agar Sabouraud. Aumento 100x. Clasificacin cientfica Dominio: Reino: Filo: Subfilo: Clase: Orden: Familia: Gnero: Especie: Nombre binomial Aspergillus niger P.E.L. van Tieghem Eucariota Fung Ascomicota Pezizomycotina Eurotiomycetes Eurotiales Trichocomaceae Aspergillus Aspergillus niger

Usos industriales Aspergillus niger se cultiva para varios productos qumicos: cido ctrico (E330), cido glucnico (E574) enzimas: glucoamilasa, galactosidasa, etc. A. niger es cultivada para la produccin industrial de muchas sustancias. Diversas cepas de A. niger se utilizan en la preparacin industrial de cido ctrico (E-330) y el acido gluconico (E574) y se han evaluado como aceptable para la ingesta diaria de la Organizacin Mundial de la Salud. 2.3. MELAZA DE CAA

La melaza es un producto lquido espeso derivado de la caa de azcar y en menor medida de la remolacha azucarera, obtenido del residuo restante en las cubas de extraccin de los azcares. Su aspecto es similar al de la miel aunque de color parduzco muy oscuro, prcticamente negro. El sabor es dulce ligeramente similar al del regaliz. Nutricionalmente presenta un altsimo contenido en hidratos de carbono adems de vitaminas del grupo B y abundantes minerales, entre los que destacan el hierro, cobre y magnesio. Su contenido de agua es bajo. Principalmente se emplea la melaza como suplemento energtico para la alimentacin de rumiantes por su alto contenido de azcares y su bajo costo en algunas regiones. No obstante, una pequea porcin de la

produccin se destina al consumo humano, emplendola como endulzante culinario. Es importante diferenciar la melaza empleada en la alimentacin animal, la cual es un producto residual de la industria azucarera, de la melaza que es empleada como materia prima en la produccin de azcar. 2.4. ACIDO CITRICO

El cido ctrico, es un slido translucido o blanco. se ofrece en forma granular; es inodoro, sabor cido fuerte, fluorescente al aire seco; Cristaliza a partir de soluciones acuosas concentradas calientes en forma de grandes prismas rmbicos, con una molcula de agua, la cual pierde cuando se caliente a 100oC5, fundindose al mismo tiempo. El cido ctrico se produce en su totalidad por fermentacin. El descubrimiento de la capacidad de algunos hongos filamentosos de producir cido ctrico se remonta a 1893, gracias a los estudios de Wehmer. En 1917 Currie demostr que especies de Aspergillus niger acumulaban cido ctrico a la par con cido oxlico. Posteriormente se definieron las condiciones que reduzcan la produccin del cido oxlico contaminante. A partir de entonces, variedades de Aspergillus niger han dominado la produccin industrial. Fundamentalmente porque su fisiloga. El cido ctrico, o su forma ionizada, el citrato, es un acido orgnico tricarboxilico que est presente en la mayora de las frutas, sobre todo en ctricos como el limn y la naranja. Su frmula qumica es C6H8O7. Es un buen conservante y antioxidante natural que se aade industrialmente como Aditivo alimentario aditivo en el envasado de muchos alimentos como las conservas de vegetales enlatadas. CARACTERSTICAS La acidez del acido ctrico es debida a los tres grupos carboxilos -COOH que pueden perder un protn en las soluciones. Si sucede esto, se produce un ion citrato. Los citratos son unos buenos controladores del pH de soluciones acidas. Los iones citrato forman sales llamadas citratos con muchos iones metlicos. El citrato de calcio precipita a temperatura ambiente. El acido ctrico es un polvo cristalino blanco. Puede existir en una forma anhidra (sin agua), monohidrato que contenga una molcula de agua por cada molcula de acido ctrico. La forma anhidra se cristaliza en el agua caliente, mientras que la forma monohidrato cuando el acido ctrico se cristaliza en agua fra. El monohidrato se puede convertir a la forma anhidra calentndolo sobre 74 C. Qumicamente, el acido ctrico comparte las caractersticas de otros cidos carboxlicos. Cuando se calienta a mas de 175 C, se descompone produciendo dioxido de carbono y agua. El nombre IUPAC del acido ctrico es acido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico.

2.5.

OBTENCIN DEL CIDO ASPERGILLUS NGER

CTRICO

POR

MEDIO

DE

La preparacin del cido ctrico consiste, en trminos generales, en una fermentacin aerbica del azcar, utilizando un cultivo de Aspergillus Nger que es un hongo que produce como metabolito primario cido ctrico, por eso en este proceso se usa como agente fermentador. Luego la posterior purificacin, mediante el proceso cal-sulfrico y la recuperacin final del producto. 2.5.1. Materias Primas (Proceso a partir de Aspergillus Nger) Melaza o jarabe de Caa de Azcar Lquido viscoso de color castao oscuro que se obtiene como producto secundario en la fabricacin del azcar de caa. Las melazas son la parte no cristalizable del azcar. Formada por un 67% de sacarosa, junto con algo de glucosa y fructosa; las melazas se utilizan tambin para fabricar alcohol industrial, cido actico, cido ctrico, levaduras y en general para cualquier proceso donde se requiera de un medio de cultivo que sirva como fuente de nutrientes para facilitar la germinacin, crecimiento y reproduccin de los microorganismos productores de determinado metabolito en este caso del cido ctrico. Cal apagada (Ca(OH)2) El hidrxido de calcio, dihidrxido de calcio o cal hidratada con frmula Ca(OH)2, se obtiene, de manera natural, por hidratacin del xido de calcio (cal viva) en unos equipos denominados hidratadores. El agua de cal, que es una disolucin alcalina de cal apagada en agua, se utiliza principalmente en medicina como anticido, como neutralizador de un cido venenoso o para el tratamiento de las quemaduras. En muchos procesos qumicos se usa para neutralizar el pH. En la elaboracin de cido ctrico es usada para formar citrato de calcio y as poder separar el cido ctrico. cido sulfrico El cido sulfrico es un cido fuerte, es decir, en disolucin acuosa se disocia fcilmente en iones hidrgeno (H+) e iones sulfato (SO42-). Sus disoluciones diluidas muestran todas las caractersticas de los cidos: tienen sabor amargo, conducen la electricidad, neutralizan los lcalis y corroen los metales activos desprendindose gas hidrgeno. A partir del cido sulfrico se pueden preparar sales que contienen el grupo sulfato SO4, y sales cidas que contienen el grupo hidrogenosulfato, HSO 4. El cido sulfrico concentrado, llamado antiguamente aceite de vitriolo, es un importante agente desecante. Acta tan vigorosamente en este aspecto que extrae el agua, y por lo tanto carboniza, la madera, el algodn, el azcar y el papel. Debido a estas propiedades desecantes, se usa para fabricar ter, nitroglicerina y tintes. Cuando se calienta, el cido sulfrico concentrado se comporta como un agente oxidante

capaz, por ejemplo, de disolver metales tan poco reactivos como el cobre, el mercurio y el plomo, produciendo el sulfato del metal, dixido de azufre y agua. En el proceso es muy importante porque reacciona con el citrato de calcio y lo hace precipitar en forma de yeso o sulfato clcico, permitiendo liberar el cido ctrico presente. El citrato de calcio (citrato clcico o sal amarga) es la sal del cido ctrico e hidrxido de calcio. Amoniaco, NH3 Gas de olor picante, incoloro, de frmula NH3, muy soluble en agua. Una disolucin acuosa saturada contiene un 45% en peso de amonaco a 0 C, y un 30% a temperatura ambiente. Disuelto en agua, el amonaco se convierte en hidrxido de amonio, NH4OH, de marcado carcter bsico y similar en su comportamiento qumico a los hidrxidos de los metales alcalinos. En la fermentacin de la glucosa con Aspergillus Nger, el amoniaco representa una importante fuente de nitrgeno, til para que se lleve a cabo la germinacin y crecimiento del hongo. 2.5.2. Procedimiento 1. PREPARACIN DEL SUSTRATO (MELAZA) El objetivo de esta primera etapa del proceso es la purificacin del jarabe. Se inicia mezclando el jarabe con agua para diluirlo; una vez diluido se pasa por un filtro de vaco para eliminar los slidos suspendidos y las impurezas de la melaza. Luego el jarabe es pasado por una celda de intercambio inico para retirar los iones del flujo. Despus el jarabe es sometido a un proceso de pasteurizacin que consiste en elevar la temperatura a 1050C durante tres minutos y bajarla nuevamente hasta 370C. La pasteurizacin se lleva a cabo primero en un calentador de evaporacin instantnea, despus se utiliza un circuito de acumulacin y un enfriador de jarabe. 2. FERMENTACIN Una vez pasteurizado, es bombeado al fermentador el cual es un recipiente rgido de 150 m3 en donde se lleva a cabo la transformacin de la sacarosa en cido ctrico por medio del Aspergillus Nger. El Aspergillus Nger es inoculado en este fermentador. Se hace el ajuste del pH y se aaden nutrientes (amoniaco NH3, sales de fermentacin). El aire estril se burbujea dentro del fermentador. Luego de la fermentacin, el flujo es pasado por un filtro rotatorio al vaco para separar el micelio. La masa conformada por el micelio y el microorganismo muerto se denomina biomasa o torta y constituye un subproducto o un efluente del proceso. 3. PURIFICACIN DEL CIDO CTRICO

El cido ctrico debe ser separado del micelio, el microorganismo muerto, el azcar residual, las protenas producidas por la fermentacin y otras impurezas solubles. Para lo cual se lleva a cabo el proceso denominado cal-sulfrico: se basa en tratar el licor madre con una lachada de la cal (Ca(OH)2 cal apagada)de lo cual se forma citrato de calcio. Este citrato resultante es lavado y el micelio es filtrado. Posteriormente se aade cido sulfrico para descomponer el citrato de calcio. Por lo tanto en esta etapa se forma sulfato de calcio el cual es retirado de la solucin por medio de un filtro rotatorio al vaco y se constituye como un desperdicio o como un subproducto del proceso. 3.1 Celdas primarias de carbn activado En estas celdas son removidas las impurezas solubles que producen color a la solucin de cido Ctrico y en general sustancias orgnicas contenidas en el licor. Debido que a lo largo del proceso se aaden sustancias que aumentan la cantidad de iones contenidos en la solucin de acido Ctrico, antes de cristalizarlo hay que retirar estos iones (Ca++ y SO4=) para estos se usan celdas de resinas de intercambio inico. La corriente alimenta los evaporadores de doble o de triple efecto donde se busca retirar la mayor cantidad de agua para pasar al cristalizador. 3.2 Cristalizacin En este proceso se separan los cristales formados del lquido saturado que se denomina licor madre. Este licor se recircula a la etapa de intercambio inico (celdas de carbn) o al tanque de tratamiento por cal. Los cristales de cido ctrico hmedos se redisuelven y se recristalizan al vaco. Luego pasan a la centrifuga en donde es eliminado el licor madre de los cristales formados. 3.3 Secado Se realiza en un equipo de lecho fluidizado, que permite retirar humedad hasta cumplir con las especificaciones. 2.6. TIPOS DE FERMENTACIN PARA EL ACIDO CTRICO Hay tres tcnicas bsicas de procesos de fermentacin para el acido ctrico: CULTIVO DE SUPERFICIE

Se permite que un medio estril con azcar fluya en recipientes de acero inoxidable o de aluminio, arreglados en fila en cmaras de fermentacin estriles. La mayora de las cmaras controlan la temperatura, la humedad relativa y la circulacin del aire. El medio se inocula con esporas de A. Niger a una temperatura constante de 28-30 C con una humedad relativa de 40-60 %

durante 8-12 das. El organismo crece y se extiende sobre la superficie acidificando el medio. Al final de la fermentacin seguida mediante la medicin del ph del medio, el licor se drena y el acido ctrico se cristaliza. El micelio puede reutilizarse adicionando medio nuevo. El proceso de superficie es el mtodo mas antiguo y aunque aun se utiliza, ha sido reemplazado en gran medida por los procesos sumergidos.

PROCESOS SUMERGIDO

Este es el principal proceso en uso en el que se inocula el medio seguido por la agitacin y aeracin vigorosas y controladas en grandes fermentadores. El periodo de fermentacin se reduce bastante (3-5 das) a 25-30 C. Despus, el licor se drena para la extraccin del acido ctrico y el micelio se puede reutilizar. El micelio es la masa de hifas que constituye el cuerpo vegetativo de un hongo. Una modificacin de este mtodo tiene un proceso en dos etapas en los cuales inicialmente el medio se inocula primero con esporas y despus de 3 o 4 das, el micelio se separa y adiciona al medio de produccin.

Despus de 3 o 4 mas a 25-30 C con oxigenacin, se extrae el acido ctrico.

FERMENTACIN EN ESTADO SOLIDO Este proceso fue descrito inicialmente por Cahn en 1935, pero a pesar de su potencial no se ha empleado industrialmente a ningn grado importante debido a su laboriosidad.

III.

DIAGRAMA DE BLOQUES

Agua

Resinas de Intercambio

A. Niger

Aire

Melaza

PREPARACION DEL SUSTRATO

PASTEURIZACION

FERMENTACION (6 das aprox.)

Impurezas

Microelementos CAL

Ac. Sulfrico

DESCOMPOSICON DEL CITRATO

FORMACION DEL CITRATO

FILTRACION

Sulfato de Calcio Micelio Carbn activado

FILTRACION CON CARBON ACITVADO EVAPORACION CRISTALIZACION ENVASADO

Ac. Citrico

IV.

CONCLUSIONES

El cido ctrico si se puede elaborar mediante la fermentacin del azcar por parte de un microorganismo llamado Aspergillus Niger Mediante el estudio de un proceso industrial como el utilizado para la elaboracin de cido ctrico es fcilmente evidenciable la aplicacin de conceptos propios de la ingeniera qumica. Al final de nuestra experiencia nos dimos cuenta que este proceso es muy eficaz ya que obtuvimos un rendimiento del 50.67 % Pudimos comprobar que en 6 das de fermentacin a 25 C podemos obtener nuestro producto. V. RECOMENDACIONES Las condiciones deben ser estrictamente cumplidas, en un ambiente esteril y con las variables adecuadas. Asesorarnos de la disponibilidad de nuestra materia prima asi como los reactivos a utilizar. Estimular el uso de este tipo de tecnologa para darle un mayor aprovechamiento a materia que se desecha. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS LIBROS

VI.

1. AUSTIN, G.T. (1983) Shreves Chemical Process Industries, 5th international ed., McGraw-Hill, New York, Sydney, 597-598. 2. CARVAJAL C., Fabricio; ROJAS D., Carlos. Diseo de un proceso del filtrado de Citrato Triclcico. Tesis Ingeniero Qumico. Facultad de Ingeniera. Universidad del Valle. Cali (1993) 3. FONDO DE PROMOCION DE EXPORTACIONES. Catalogo del Potencial Exportable de la Industria Qumica en Colombia. Bogot (1979) 147 148. 4. McKETTA, John J., DEKKER, Marcel. "Encyclopedia of Chemical Processing and INTERNET

5.http://www.lurgilifescience.com/english/nbsp/menu/portfolio/renewable_resour ces/citric_acid/overview/index.html 6. http://www.foodproductdesign.com/archive/1993/0593DE.html&prev=/ 7. www.pfizer.com.ar/about/em_historia.asp 8. www.infomed.sld.cu/revistas/far/vol_34_3_00/