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INSTITUTO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE CHIAPAS FACULTAD DE MEDICINA

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO DE

PROCESOS BIOQUMICOS
TITULARES DE LA MATERIA: I.Q. CLAUDIA GONZLEZ ARGUELLO M. en C. I.B.Q. MARIA EMPERATRIZ DOMINGUEZ ESPINOSA M. EN C. LILIANA GAMBOA QFB. LUIS ALBERTO MORALES MARTINEZ

MANUAL DE PRCTICAS DE PROCESOS BIOQUIMICOS

AGOSTO 2013

DIRECTORIO
C. P. Y M. E. Emilio Salazar Narvez Rector C.P. Y M.A. Emilio Salazar Farias Vicerrector Dr. Eleaci Morales Mo !o"a Director Dra Mar!i a #ell $ime ez A Subdirector Lic. Sole%a% $&rez Le' Coordinadora Administrativa Dr. Fer a %o L'(ez Coordinadora de Ciencias Bsicas Dra. #ella Marle e C'r%ova Ro)les Departamento de Enseanza Lic. Carlos $es*s Ale+r,a Rivera Departamento Psicopedaggico Dr. Carlos D,az Coordinadora de Ciencias Cl nicas Dra. A a-i L&cero A(aricio .&!i/rrez Coordinacin de !itulacin Dra. Mar,a Cris!i a . %ara T/llez Coordinadora de "nternado # Servicio Social

CONTENIDO

Nm. de Prc !c"

Tem"
Introduccin Reg !"ento

P#!$"
3 # $& $+ && &+

$ & 3 #

To"! de Mue%tr! Di'u%in ! tr!()% de Me"*r!n!% Deter"in!cin de Prote,n!% Tot! e%- A *."in! / 0 o*u in! En1i"o og,! C ,nic! 2 Deter"in!cin de T0O / T0P Cur(! de to er!nci! ! ! g uco%! Per'i de L,5ido%2 Deter"in!cin de Co e%tero Tot! - Trig ic)rido% / 6DL Deter"in!cin de Met!*o ito% Nitrogen!do%2 Ure!- Cre!tinin! / cido .rico

3 4 +

3& 34 #&

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MISION INSTITUCIONA%.

For"!r ! %er 7u"!no 'o"ent!ndo e de%!rro o de !ctitude%- (! ore%- 7!*i id!de% / conoci"iento% en 5ertinenci! / (incu !do% con e entorno econ"ico- %oci! 5o ,tico / cu tur! 8ue de"!nd! nue%tr! regin / 5!,%9 MISI&N DE %A ESCUE%A DE MEDICINA DE% IESCH. For"!r recur%o% 7u"!no% c!5!cit!do% 5!r! e "!ne:o 7u"!nit!ri%t! de o% 5ro* e"!% de %! ud- contri*u/endo ! conoci"iento cient,'ico de o% "i%"o%- "edi!nte ! in(e%tig!cin / e %er(icio- 5ro"o(iendo ! tern!ti(!% de %o ucin- con%o id!ndo %u in' uenci! !c!d)"ic!- t)cnic! / cu tur! ! 'in de contri*uir ! "e:or!"iento de ! c! id!d de (id! / de "edio !"*iente 5ro5ici!ndo un *uen de%!rro o de ! 5ro'e%in "edic!9

'ISI&N INSTITUCIONA% Un! in%titucin integr!d! ! o% %ectore% 5roducti(o% / %oci! e% 8ue con:unten !cti(id!de% docente% e in(e%tig!cione% con e %er(icio / "e:or! de nue%tro e%t!do / 5!,% !corde ! 5roce%o de g o*! i1!cin !ctu! 'o"ent!ndo ! e;ce enci! / c! id!d

'ISI&N DE %A ESCUE%A DE MEDICINA DE% IESCH Ser un! In%titucin integr!d! ! Sector S! ud- !%, co"o de o% %ectore% 5roducti(o% / %oci! e% 8ue con:unten !cti(id!de% docente% / de in(e%tig!cin con e %er(icio5!r! g!r!nti1!r ! "e:or! de nue%tro e%t!do / 5!,% !corde ! 5roce%o de g o*! i1!cin !ctu! - 'o"ent!ndo en nue%tro% e#re("d)( *" e+ce*e$c!" , *" c"*!d"d e$ (- .-e/"cer d!"r!)9

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PER0I% DE% EGRESADO Ser< un M)dico 5re5!r!do 5!r! ! !tencin indi(idu! - '!"i i!r / co ecti(! de 5ri"er ni(e - con c!5!cid!d 5!r! %eguir !5rendiendo- /! %e! *!:o direccin in%titucion! o 5or %i "i%"o9 De*e %er !de"<% un in(e%tig!dor en cierne- 5ro'e%ion! cu to- 7u"!ni%t! / 7u"!nit!ri%t!

OB1ETI'OS EDUCATI'OS GENERA%ES

1. For"!r M)dico% gener! e%- c!5!ce% de di!gno%tic!r- tr!t!r- 5re(enir / re7!*i it!r !% 5!to og,!% de "!/or i"5ort!nci! 5!r! C7i!5!%- 8ue o% ! u"no% teng!n e e%5!cio / ! 8uietud nece%!ri!% 5!r! %u de%!rro o cient,'ico / t)cnico= con derec7o%o* ig!cione%- c!5!ce% de do"in!r o% 7ec7o% de ! (id! di!ri!= 5!r! 8ue con e%t! 'or"!cin- 5ued!n !co"5!>!r / %er(ir ! 7o"*re %!no / en'er"o9

2. E%ti"u !r ! o% ! u"no% 5!r! 8ue con ! o*%er(!cin- e !n< i%i%- !% 7i5te%i% / %u tr!*!:o di!rio co"o ")dico% egre%!do%- ogren d!r (id! ! 7o"*re?")dico= 'or"<ndo o% con un ! to i"5er!ti(o )tico9

3. Pro"o(er- 'or"u !r / re! i1!r ! in(e%tig!cin *io")dic! *<%ic!- c ,nic! / e5ide"io gic!- to"!ndo en cuent! o% !%5ecto% %oci! e%- econ"ico%- 5o ,tico%cu tur! e% con e 'in 5riorit!rio de identi'ic!r- 5riori1!r- / !tender o% 5ro* e"!% de %! ud de ! co"unid!d- %u% c!u%!% !5 ic!ndo o% re%u t!do% de e%to% 5roce%o% ! ! 5re(encin- cur!cin / re7!*i it!cin de o% 5ro* e"!%- t!nto ! ni(e indi(idu! co"o co ecti(o9 3

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2. Pro5ici!r e "e:or!"iento de ! 'or"!cin cient,'ic!- t)cnic! / %oci! de o% egre%!do%- ! tr!()% de ! re! i1!cin / 5rogr!"!cin de cur%o% de 5o%t?gr!do5rogr!"!% de educ!cin continu! / !*ore% de e;ten%in uni(er%it!ri!9

3. @e !r 5or ! e;! t!cin de o% (! ore% )tico% / "or! e% de ! E%cue ! de Medicin! dentro de e%5,ritu de o% Cdigo% de Deonto og,! M)dic!- de'inido% en nue%tr! Mi%in / @i%in In%titucion! 9

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INTRODUCCI&N

on e 5re%ente M!nu! de Pr<ctic!% de Proce%o% Bio8u,"ico%- %e 5retende 8ue e e%tudi!nte 8ue %e !dentr! ! '!%cin!nte "undo de ! Medicin!- cuente con e

conoci"iento / "!ne:o de !% t)cnic!% c ,nic!% !ctu! e% 5!r! ! deter"in!cin de ! guno% de o% 5!r<"etro% %!ngu,neo% / urin!rio% "<% i"5ort!nte%- !%, co"o t!"*i)n en ! !5 ic!cin de o% 5rinci5io% Bio8u,"ico% 5!r! c!d! uno de e o%9 C!*e de%t!c!r 8ue o% d!to% 5ro5orcion!do% 5or o% !*or!torio% c ,nico%- de )%to% / otro% "et!*o ito% %on e"5 e!do% 5!r! to"!r deci%ione% i"5ort!nte% en ! 5re(encin / deteccin de "uc7!% 5!to og,!%= e% 5or e o 8ue %e de*e tener un conoci"iento c!*! de o 8ue *io8u,"ic!"ente e%t< !conteciendo en e org!ni%"o 8ue %e 7! !5!rt!do de ! condicin de e8ui i*rio / 8ue 5re%ent! un e%t!do de en'er"ed!d- ! re' e:!r un! ci'r! ! ter!d!9 E ! u"no de*er< de !5render e "!ne:o de !% c!r!cter,%tic!% 'i%ico8u,"ic!%e%tructur! e% / 'uncion! e% de !% *io"o )cu !% 8ue con%titu/en %u org!ni%"o / entorno9 E conoci"iento de o% !%5ecto% *io8u,"ico% "<% re e(!nte% '!ci it!r< ! ! u"no entender / di'erenci!r e 'uncion!"iento *io8u,"ico nor"! de !nor"! en e org!ni%"o ! tr!()% de ! inter5ret!cin de (,!% "et!* ic!% corre%5ondiente%= 5odr< in'erir %o*re o% 5roce%o% *io8u,"ico% c!u%! e% 5!rci! "ente de de%e8ui i*rio de ! 7o"eo%t!%i%9 E% !%, co"o ! 5re5!r!cin de e%tudi!nte de Medicin! re8uiere de un! % id! *!%e de conoci"iento% *io8u,"ico% / 'i%io gico%- 8ue e 5er"it!n %e eccion!r !% deter"in!cione% "<% !decu!d!% 8ue con e(en ! e%c !recer conce5to% / 5oder !%, d!r un! "e:or inter5ret!cin de ! 'i%io5!to og,! de ! gun! en'er"ed!d9

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L! 5re5!r!cin / ! 'or"!cin Bio8u,"ic! 8ue %e e d) ! ! u"no en )%te cur%o terico? 5r<ctico- de*er< d!r e !% *!%e% 5!r! !'ront!r o% reto% 8ue %e e 5re%enten "<% !de !nte- t!nto en %u 'or"!cin co"o en %u (id! de e:ercicio 5ro'e%ion! 9

REG%AMENTO DE% %ABORATORIO DE PROCESOS BIOQUMICOS


GENERA%ES4 E 5re%ente reg !"ento tiene co"o o*:eti(o e%t!* ecer !% nor"!% / conduct!% 8ue de*en 5re%ent!r c!tedr<tico%- ! u"no% / !*or!tori%t!% en e tr!n%cur%o de !% 5r<ctic!% de ! "!teri! de Bio8u,"ic! In"uno gic!- 5!r! e%t!* ecer o% 5!r<"etro% de c! i'ic!cione% !%ign!d!% ! o% ! u"no%9

I.

%ABORATORISTAS4 E !*or!tori%t! 5er"!necer< en e !*or!torio en e 7or!rio 8ue e corre%5onde9 Tendr< i%to e "!teri! Acri%t! er,!- in%tru"ent! - re!cti(o% / e8ui5o%B 5!r! !% 5r<ctic!% dentro de !*or!torio- de !cuerdo ! o %o icit!do 5or e 5ro'e%or- con tre% d,!% de !ntici5!cin 5or o "eno%9 Entreg!r< con de*id! corte%,!- e "!teri! ! o% ! u"no% / ! o% 5ro'e%ore% dur!nte e tie"5o e%ti5u !do 5!r! c!d! %e%in de !*or!torio9 E "!teri! %er< entreg!do dur!nte o% 5ri"ero% $3 "inuto%9 Reci*ir< / re(i%!r< 8ue e "!teri! / e e8ui5o e%t)n en *uen e%t!do / en 5er'ect!% condicione% de i"5ie1!9 Au;i i!r< ! o% 5ro'e%ore% en ! 5re5!r!cin de %o ucione% u otro% re!cti(o% 8ue %e re8uier!n 5!r! e de%!rro o de ! 5r<ctic!9 Orient!r< ! o% e%tudi!nte% en e "!ne:o / cuid!do de e8ui5o9

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Tendr< ! d,! o% in(ent!rio% ',%ico%- de cri%t! er,!- in%tru"ent! - re!cti(o% / e8ui5o de !*or!torio ! %u c!rgo / o% entreg!r< ! 'in de %e"e%tre ! ! Coordin!cin de ! "!teri!9

M!ntendr< e e8ui5o en %u %itio 5rocur!ndo %u correct! uti i1!cin / *!:o contro e% de %egurid!d9 Ser< e re%5on%!* e !*%o uto de 8ue e e8ui5o de !*or!torio e%te en 5er'ecto e%t!do de u%o A i"5io- 'uncion!ndo- etcB Contro !r< e regre%o de "!teri! - e8ui5o- etc- en e tie"5o e%ti5u !do9 En c!%o% e%trict!"ente nece%!rio%- %e 8ued!r< uno% "inuto% "<% 5!r! '!ci it!r ! 5r<ctic!9 A 'in! de %e"e%tre e entreg!r< ! o% ! u"no% un co"5ro*!nte de N) Ade-d) de "!teri! de L!*or!torio9 E%t! 5ro7i*ido co"er- *e*er o 'u"!r dentro de !*or!torio9

II. A%UMNOS2 E ! u"no de*er< eg!r 5untu! ! ! 7or! corre%5ondiente de ! 5r<ctic!9 Se e d!r< un! to er!nci! "<;i"! de $C "inuto%- tr!n%currido e%e tie"5o- no 5odr< ingre%!r ! !*or!torio9 Lo% ! u"no% !%i%tir<n ! !% c !%e% de teor,!- 5r<ctic!% de !*or!torio / e;<"ene% con uni'or"e * !nco / 5ort!ndo en ! %o !5! de uni'or"e %u credenci! de ! u"no (igente9 Q-!e$ $) c-m5*" c)$ e( e re.-!(! ) $) 5)dr 5erm"$ecer e$ *" (e(!6$ de *"7)r" )r!). E% indi%5en%!* e e u%o de ! *!t! dentro de !*or!torio- $) (e 5erm! e e* -() de 8!*!5!$". Dur!nte !% %e%ione% de L!*or!torio- o% ! u"no% de*er<n !cti(!r e "odo %i encio%o de %u% te )'ono% ce u !re%- 5!r! no interru"5ir e tr!*!:o9 E%t! 5ro7i*ido co"er- *e*er o 'u"!r dentro de !*or!torio- cu! 8uier incurri"iento en o !nte% "encion!do !nu !r< e derec7o ! re! i1!r ! 5r<ctic!9

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Entr!ndo ! !*or!torio- e ! u"no de*er< entreg!r o% re8ui%ito% de ! 5r<ctic! ! re! i1!r de o contr!rio %e !nu !r< dic7! 5r<ctic!9 Se de*er< entreg!r un DRe5orte de Pr<ctic!E F d,!% de%5u)% de 7!*er ! re! i1!do9 E contenido de "i%"o %er< indic!do 5or e c!tedr<tico9 E ! u"no de*er< cu"5 ir con ! "eno% e FCG de !%i%tenci!% en e !*or!torio dur!nte todo e cic o e%co !r- 5!r! e(it!r ! *!:! de cur%o 5r<ctico9 E M!teri! *io gico nece%!rio 5!r! ! re! i1!cin de !% 5r<ctic!% %er< 5ro5orcion!do 5or o% ! u"no%- e* !$c-m5*!m!e$ ) de e( " d!(5)(!c!6$ "$-*"r e* derec/) " re"*!9"r *" 5rc !c".

E ! u"no de*er< %o icit!r e "!teri! de !*or!torio con un "<;i"o de 3 d,!% de !ntici5!cin- "edi!nte un (! e ! o% !*or!tori%t!- de o contr!rio 5erder< e derec7o de re! i1!r ! 5r<ctic!9

Cu! 8uier "!teri! 8ue re%u te d!>!do dur!nte ! re! i1!cin de ! 5r<ctic! de*er< %er re5ue%to 5or e ! u"no ! "<% t!rd!r en F d,!%- de o contr!rio 5erder< e derec7o de re! i1!r ! %iguiente 5r<ctic! / %u c! i'ic!cin de e%e "e% %er< !nu !d!9

L! c! i'ic!cin de !*or!torio con%tituir< e &CG de ! c! i'ic!cin g o*! de ! "!teri!9 E ! u"no 5re%ent!r< un e;!"en terico de ! 5r<ctic!- dur!nte e tr!n%cur%o de ! re! i1!cin de ! "i%"!9 L! c! i'ic!cin de c!d! 5r<ctic! e%t!r< integr!d! 5or e re5orte- ! e(! u!cin teric! de ! 5r<ctic! / e de%e"5e>o dur!nte ! "i%"!9 L! c! i'ic!cin ",ni"! !5ro*!tori! e% de 49C Lo% ! u"no% 8ue re5rue*en "<% de &CG de tot! de !% 5r<ctic!%- %e (er<n o* ig!do% ! 5re%ent!r un E;!"en terico?5r!ctico Fin! de L!*or!torio- co"o re8ui%ito indi%5en%!* e 5!r! 5oder to"!r en cuent! e 5orcent!:e corre%5ondiente ! L!*or!torio 5!r! ! c! i'ic!cin 'in! de ! "!teri!9

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L!% in!%i%tenci!% ! !*or!torio %e 5)dr$ :-( !8!c"r de$ r) de *)( re( d;"( /7!*e( %iguiente%- con ! docu"ent!cin o'ici! 5ertinente9 En c!%o de no !%i%tir ! !*or!torio- e* "*-m$) 5)dr :-( !8!c"r *" 8"* " 5er) $) re5)$er *" 5rc !c" 9

III. PRO0ESORES2 E 5ro'e%or de*er< eg!r $C "inuto% !nte% de inicio de ! 5r<ctic! 5!r! (eri'ic!r e orden / 'uncion!"iento de "!teri! de !*or!torio 8ue %e e"5 e!r< en e de%!rro o de ! "i%"!9 L! c! i'ic!cin de !*or!torio con%tituir< e &CG de ! c! i'ic!cin g o*! de ! "!teri!9 E ! u"no 5re%ent!r< un e;!"en terico de ! 5r<ctic!- dur!nte e tr!n%cur%o de ! re! i1!cin de ! "i%"!9 L! c! i'ic!cin de c!d! 5r<ctic! e%t!r< integr!d! 5or e re5orte- ! e(! u!cin teric! de ! 5r<ctic! / e de%e"5e>o dur!nte ! "i%"!9 L! c! i'ic!cin ",ni"! !5ro*!tori! e% de 49C Lo% ! u"no% 8ue re5rue*en "<% de &CG de tot! de !% 5r<ctic!%- %e (er<n o* ig!do% ! 5re%ent!r un E+"me$ e6r!c)<5rc !c) 0!$"* de* %"7)r" )r!) co"o re8ui%ito indi%5en%!* e 5!r! 5oder to"!r en cuent! e 5orcent!:e corre%5ondiente ! L!*or!torio 5!r! ! c! i'ic!cin 'in! de ! "!teri!9 E%t! 5ro7i*ido co"er- *e*er o 'u"!r dentro de !*or!torio9 9 Re#*"( de Se#-r!d"d e$ e* %"7)r" )r!) de B!).-;m!c" I$m-$)*6#!c".

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E "!ne:o in!5ro5i!do de %u%t!nci!%- "!teri! e% / e8ui5o 8ue %e encuentr!n en e !*or!torio- re5re%ent! 5e igro t!nto ! ! %! ud de !% 5er%on!%- co"o ! ! integrid!d de !% in%t! !cione% / e8ui5o de tr!*!:o9 E% 5or e o 8ue %e de*en o*edecer !% Reg !% de %egurid!d 8ue %e en i%t!n ! continu!cin- c !%i'ic!d!% en o% %iguiente% gru5o%2 $9 Su%t!nci!% 8u,"ic!%9 &9 M!teri! *io gico9 39 M!teri! de (idrio9 #9 E8ui5o e )ctrico e in%t! !cione% de g!%9 39 Orden / i"5ie1!9 $9 Su%t!nci!% 8u,"ic!%9 C!d! %u%t!nci! de*e tener eti8uet! de identi'ic!cin- %i no e% !%, no !% uti ice9 Ante% de uti i1!r un! %u%t!nci!- (eri'i8ue 8ue %e tr!t! de re!cti(o correcto / 8ue tiene ! concentr!cin re8uerid!9 Identi'i8ue ! n!tur! e1! de ! %u%t!nci! / e ti5o de 5e igro 8ue i"5 ic! %u "!ne:o= He% (enenoI- H8u) t!n t;ico e%I- He% in' !"!* eI- He% corro%i(oI E(ite e cont!cto o e;5o%icin innece%!ri! con %u%t!nci!% 8u,"ic!%- uti ice e e8ui5o de 5roteccin !decu!do / di%5oni* e2 *!t! !rg!- ente%- gu!nte%c!"5!n! e;tr!ctor!- etc9 No 5i5etee %u%t!nci!% 8u,"ic!% direct!"ente9 Sie"5re uti ice ! 5re5i5et! A5eri !B9 E(ite in7! !r 5roducto% 8u,"ico% / %u% (!5ore%9 Tr!*!:e / "!nteng! *!:o ! c!"5!n! o% re!cti(o% corro%i(o% o (o <ti e%9 Lo% 7idroc!r*uro% igero% / %o (ente% de*en "!ne:!r%e e:o% de 'uego u otr!% 'uente% de c! or9 E"5 e) *!>o "!r,! 5!r! c! ent!r o%9 P!r! di uir o% <cido%- e%to% de*en (erter%e ent!"ente en e !gu!- !git!ndo cuid!do%!"ente9 No (iert! !gu! direct!"ente %o*re e <cido 5or8ue 5ro(oc!r< %! 5ic!dur!%9 !"

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No de:e %o*re ! "e%! t!5one% de 'r!%co% de <cido% u otr!% %u%t!nci!% corro%i(!%- 5or8ue %e 5ueden cont!"in!r o de:!r re%iduo% corro%i(o% 8ue 5odr,!n c!u%!r 8ue"!dur!%9

&9 M!teri! *io gico P!r! e "!ne:o de e%to% "!teri! e% 5rot):!%e !decu!d!"ente %eg.n %e! e c!%o9 U%!ndo gu!nte%- cu*re *oc!- etc9 M!ne:e cuid!do%!"ente !% "ue%tr!% *io gic!% A%!ngre- orin!- %! i(!- etc9B 5!r! e(it!r cont!"in!cione% de 5er%on!% / "!teri! e%9 39 M!teri! de (idrio De*e e;!"in!r todo e "!teri! de (idrio !nte% de uti i1!r o- 5!r! detect!r ! e;i%tenci! de griet!% o rotur!%9 En e c!%o de 8ue encuentre "!teri! de'ectuo%ore5rte o de in"edi!to ! enc!rg!do de !*or!torio 5!r! 8ue %e o c!"*ie9 No u%e e "!teri! de (idrio con ori !% cort!nte%- con cu!rte!dor!%- o en gener! en "! e%t!do9 De*e tr!n%5ort!r- "o(er o "!ni5u !r % o ! c!ntid!d de "!teri! de (idrio 8ue 5ued! "!ne:!r con %egurid!d U%e 5in1!%- 'r!ne ! 5!r! tr!n%5ort!r o "o(er reci5iente% de (idrio c! iente%9 Nunc! de:e "!teri! roto 5!r! %er !(!do- re5rte o / t,re o ! ! *!%ur!9 No de:e (idrio% roto% %o*re ! "e%! o en cu! 8uier otro ug!r en donde 5ued! c!u%!r !ccidente

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TOMA DE MUESTRA SANGUINEA
OB1ETI'OS E ! u"no conocer< e 'und!"ento terico / 5r<ctico 5!r! ! to"! de "ue%tr! de %!ngre (eno%!9

INTRODUCCI&N L! %!ngre e% un te:ido ,8uido de org!ni%"o- e cu! e%t< 'or"!do 5or do% 5!rte% *<%ic!% 8ue %on2 C) u !% / 5 !%"!9 E P!8uete ce u !r e%t< con%tituido 5or g *u o% ro:o% eritrocito%- g *u o% * !nco% Leucocito% / 5 !8uet!% tro"*ocito%

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AGOSTO 2013

E P !%"! e% ! 5!rte ,8uid! 8ue tr!n%5ort! 5rote,n!%- 7or"on!%- "iner! e%- g!%e%5o i%!c<rido%- !1.c!re%- e ectro ito%- etc9 E Suero AP!r! !% "ue%tr!% to"!d!% %in !ntico!gu !nteB e% ! 5!rte ,8uid! 8ue 5or !cti(!cin de o% '!ctore% de co!gu !cin %e i*er!9 E 'i*ringeno %e !cti(! 5!r! 5roducir un! "! ! de 'i*rin! 8ue 'or"! e co<gu o9 En e co<gu o %e !tr!5!n co"5onente% ce u !re% de ! %!ngre- o% 0 *u o% ro:o%- e P !%"! / o% 0 *u o% * !nco%9

0UNDAMENTO E ")dico uti i1! e !*or!torio co"o "edio de !/ud! 5!r! e di!gno%tico / tr!t!"iento de 5!ciente9 L! 5eticin de !n< i%i% 5one en "o(i"iento un! gr!n c!ntid!d de "!nio*r!%- 5!r! ! o*tencin de un re%u t!do9 E%to% %on uti i1!do% 5!r! e%t!* ecer :uicio% c ,nico%9 Por 8u) / 5!r! 8u) %e %o icit! un !n< i%i%9 $9 Con'ir"!r un! i"5re%in c ,nic! &9 De%c!rt!r un di!gno%tico9 39 Contro !r un tr!t!"iento9 #9 E%t!* ecer un di!gno%tico9 39 Re! i1!r e;5 or!cin %e ecti(! o deteccin de un! en'er"ed!d9 L! recogid!- "!ni5u !cin / 5roce%!"iento de ! "ue%tr! !nte% de re! i1!r e !n< i%i% %on 'und!"ent! e%9 E ")dico gener! e 5edido- de e%te %urgen e ti5o- con%er(!cin / "!ni5u !cin de !% "ue%tr!% ! to"!r- !% cu! e% 5ueden %er2

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MUESTRAS SAN0UINEAS E% e ' uido "<% uti i1!do9 L!% (eni5uncione% %e de*en e%t!nd!ri1!r en t)r"ino% de !7or! de reco eccin9 Se de*e de'inir "u/ *ien e 5rotoco o de 5re5!r!cin de "ue%tr!%- e tie"5o de !5 ic!cin de torni8uete- ! 5o%tur! dur!nte ! to"! de %!ngre! te"5er!tur!- de tr!n%5orte / e ! "!cen!"iento9 Lo% d!to% o*tenido% de %!ngre (eno%! no 5ueden co"5!r!r%e con o% o*tenido% de %!ngre de c!5i !re%9 Lo% (! ore% 7e"!to gico% t!"*i)n de5enden de ! ed!d- %e;o 7<*ito de 'u"!r- 7or! de d,!5o%icin erect! o %u5in! de 5!ciente dur!nte ! to"!- dur!cin de ! e%t!%i% (eno%!% 5roducid! 5or e torni8uete / ! !d"ini%tr!cin de ,8uido% / drog!%9 Lo% 3 ")todo% "<% i"5ort!nte% 5!r! o*tener o %on2 $B Puncin (eno%!= &B Puncin c!5i !r 3B Puncin !rteri! 9 L! %!ngre o;igen!d! 5or e 5u "n- e% *o"*e!d! 5or e cor!1n 7!ci! todo% o% rg!no% / te:ido% 5!r! cu*rir !% nece%id!de% "et!* ic!%9 E%t! %!ngre !rteri! tiene 5r<ctic!"ente un! co"5o%icin uni'or"e en todo e cuer5o9 L! (eno%! (!r,! %eg.n ! !4

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!cti(id!d "et!* ic! de rg!no o te:ido 5or o 8ue e 5unto donde %e e;tr!e ! "ue%tr! 5uede in' uir en ! co"5o%icin de ! %!ngre (eno%!9 E%t! tiene "eno% O;igeno 8ue ! !rteri! t!"*i)n %e di'erenci! 5or e 56- 5or %u concentr!cin en Di;ido de C!r*ono / %u 7e"!tocrito9 L! %!ngre o*tenid! 5or 5uncin de ! 5ie - 8ue ! (ece% %e deno"in! %!ngre c!5i !r incorrect!"ente- e% un! "e1c ! de %!ngre 5rocedente de !rterio !%- ()nu !% / c!5i !re% 5or o t!nto e% en 5!rte !rteri! - / en 5!rte (eno%!9 E !u"ento de 5re%in en !% !rterio !% 7!ce 8ue ! "ue%tr! %e! "<% ric! en %!ngre !rteri! - 5ero contiene t!"*i)n ,8uido inter%tici! e intr!ce u !r9

REQUISITOS A9 Pre%ent!r e cue%tion!rio conte%t!do9 B9 Re! i1!r un! in(e%tig!cin %o*re ! to"! de "ue%tr! / %u% re8ui%ito%9 MATERIA% $ tu*o% ro:o / un tu*o i ! $ 0r!di ! $ Centr,'ug! $ Jering! / ig!dur! Torund!% de A godn con ! co7o MUESTRA BIO%&GICA4 S!ngre tot! con 7e5!rin! o EDTA9

PROCEDIMIENTO $9 Lo% e%tudi!nte% de*en org!ni1!r%e en 5!re:!%- un e%tudi!nte de*e to"!r un! "ue%tr! de %u co"5!>ero con (!cut!iner / otr! con :ering!9 Po%terior"ente- e otro e%tudi!nte de ! 5!re:! 7!ce o "i%"o con %u co"5!>ero9 !5

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&9 Un e%tudi!nte de c!d! 5!re:! tr!*!:! con tu*o de t!5! i ! / e otro con tu*o de t!5! ro:!9 39 O*teng! 3 " de %!ngre (eno%! / co 8ue ! en un tu*o con !ntico!gu !nte9 Sig! !% in%truccione% de 5ro'e%or9 #9 Un! (e1 to"!d!% !% "ue%tr!% en o% tu*o%- %e 5rocede ! 7!cer centri'ug!cin / tr!n%'erir en otro tu*o e 5 !%"! o %uero %eg.n %e tr!te de tu*o i ! o ro:ore%5ecti(!"ente9 39 Centri'ugue 5or 3 "in9 ! &3CC r959"9 / o*%er(e9 RESU%TADOS Di*u:e !% o*%er(!cione% / e;5 ,8ue !%9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS P!r! o% !n< i%i%- de*er< re !cion!r 7ec7o en e !*or!torio con ! *i* iogr!',!- 7!g! un e%8ue"! de !% (en!% en !% 8ue 5uede re! i1!r ! to"! de "ue%tr!- o% re8ui%ito% 8ue de*e cu"5 ir e 5!ciente / 8uien to"! ! "ue%tr! 5!r! 8ue e%t! %e! !decu!d! / 5ued! cu"5 ir ! 'in! id!d 5or ! 8ue %e to"o9 CUESTIONARIO $9 De'in! e conce5to de ' e*oto"i! &9 Cu< e% %on o% re8ui%ito% 8ue de*e cu"5 ir e 5!ciente 5!r! re! i1!r un! to"! de "ue%tr! correct!9 39 Que inter'erenci!% 5ueden e;i%tir cu!ndo %e to"! ! "ue%tr! #9 In(e%tigue / e;5 i8ue !% 'or"!% en cu! e% %e 5uede "edir re! i1!r ! to"! de "ue%tr! 39 HPor 8ue uti i1!"o% e !ntico!gu !nte en ! "ue%tr!I 49 Co"o %e c !%i'ic!n o% tu*o% 8ue %e uti i1!n en ! to"! de "ue%tr! %!ngu,ne!9

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RE0ERENCIAS # L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 Ort)n J9M9 Bioqumica Humana9 $$K9 Edicin9 Bueno% Aire%9 Editori! M)dic!9 P!n!"eric!n!9 $LLC9 # Trtor! J909 Principios de Anatoma y Fisiologa. 4K9 Edicin9 Ed9 6!r !9 M);ico9 $LF39

&
DI0USI&N A TRA'>S DE MEMBRANAS
OB1ETI'OS E ! u"no o*%er(!r< e co"5ort!"iento de o% eritrocito% !nte %o ucione% de di'erente o%"o !rid!d9 Re !cion!r< e 5 !%" i%i%9 A5 ic!r< ! o*%er(!cin !nte c!%o% 7i5ot)tico% de de%7idr!t!cin9 "ec!ni%"o de o%"o%i% con o% 'en"eno% de turgenci! /

INTRODUCCI&N

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E !gu! e% ! %u%t!nci! "<% !*und!nte en o% %i%te"!% (i(o% / con%titu/e e +C G o "<% de 5e%o de ! "!/or 5!rte de !% 'or"!% de (id!9 Co"o e !gu! i"5regn! tod!% !% 5orcione% de !% c) u !%- con%titu/e un "edio en e 8ue tr!n%curren e tr!n%5orte de o% e e"ento% nutriti(o%- !% re!ccione% de "et!*o i%"o c!t! i1!d!% 5or en1i"!% / ! tr!n%'erenci! de energ,! 8u,"ic!= 5or )%t!% r!1one%- todo% o% !%5ecto% de ! e%tructur! de ! c) u ! / %u 'uncin- %e !d!5t!n ! !% 5ro5ied!de% 'i%ico8u,"ic!% de !gu!9 E;i%ten cu!tro 5ro5ied!de% 5!rticu !re% de !gu! ,8uid!- de%ign!d!% con e no"*re de 5ro5ied!de% co ig!ti(!%- !% cu! e% %e "odi'ic!n 5ro'und!"ente 5or o% %o uto% di%ue to%- de "odo 5redeci* e9 L!% 5ro5ied!de% co ig!ti(!% %on2 Punto de 'u%in- 5unto de e*u icin- 5re%in de (!5or / 5re%in o%"tic!= / de5enden %o !"ente de n."ero de "o )cu !% de %o uto 5or unid!d de (o u"en de di%o (ente- / %on inde5endiente% de %u e%tructur! 8u,"ic!9 Lo% e'ecto% de e%to% %o uto% %o*re !% 5ro5ied!de% co ig!ti(!% de !gu! tienen un! i"5ort!nci! *io gic! con%ider!* e- 5ue%to 8ue e !gu! e% e %o (ente 5re%ente en todo% o% %i%te"!% (i(o%9 0UNDAMENTO En e org!ni%"o 7u"!no ! 5re%in o%"tic! :ueg! un 5!5e 'und!"ent! en e "o(i"iento de !gu! en o% di(er%o% e%5!cio% 'i%io gico%9 P!r! 5oner de "!ni'ie%to )%t! %itu!cin- %e 5ondr<n g *u o% ro:o% en %o ucione% 7i5otnic!% A!gu! de%ti !d! M C o%"o e%B- en e !%- e interior de g *u o ro:o !tr!e !gu! con t! inten%id!d 8ue eg! un "o"ento en e cu! /! no re%i%te e !u"ento de ! 5re%in / e g *u o ro:o e% de%truido A7e" i%i%B de:!ndo ! ! 7e"og o*in! i*er!d!9 E%to %e de*e ! 'en"eno de turgenci! o 7inc7!"iento9 En un! %o ucin i%otnic! Ac oruro de %odio ! C9F3 G o g uco%!d! ! 3 GB- ! entr!d! de !gu! ! eritrocito %e ni(e ! con ! 8ue %! e- 5or o 8ue e (o u"en de eritrocito no %e (e ! ter!do9 Por . ti"o- en un! %o ucin 7i5ertnic! Ac oruro de %odio ! $C GB- e "edio e;terno e;tr!e !gu! intr!eritrocit!ri! con "!/or inten%id!d- de%7idr!t!ndo tot! "ente ! o% g *u o% ro:o%9 A e%te 'en"eno %e e deno"in! 5 !%" i%i% o cren!cin9

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REQUISITOS C9 Pre%ent!r e cue%tion!rio conte%t!do9 D9 Re! i1!r un! in(e%tig!cin %o*re !% 5!to og,!% en !% 8ue %e e"5 een %o ucione% i%otnic!%- 7i5otnic!% e 7i5ertnic!% co"o un "edio ter!5)utico9 MATERIA% 3 tu*o% de en%!/e de $3 ; $CC $ 0r!di ! # Pi5et!% P!%teur con *u *o $ Centr,'ug! $ Micro%co5io # Port!o*:eto% / cu*reo*:eto% $ Jering! / ig!dur! P!5e 5!r!'i " MUESTRA BIO%&GICA4 S!ngre tot! con 7e5!rin! o EDTA9 REACTI'OS So ucin de g *u o% ro:o% ! 3 G So ucin de c oruro de %odio ! $C G So ucin de c oruro de %odio ! C9L G So ucin de g uco%! ! 3 G Agu! de%ti !d! Torund!% con ! co7o Antico!gu !nte AEDTAB PROCEDIMIENTO 49 O*teng! 3 " de %!ngre (eno%! / co 8ue ! en un tu*o con !ntico!gu !nte9 Sig! !% in%truccione% de 5ro'e%or9 !

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+9 Pre5!re un! %o ucin de g *u o% ro:o% ! 3 G !>!diendo ! #93 " de %o ucin %! in! i%otnic! ASSIB C93 " de ! %!ngre (eno%! F9 Nu"ere # tu*o% de en%!/o de $ ! #9 Procure 5oner e% un! %e>! 8ue o% di%ting! de o% de"<% e8ui5o%9 L9 A tu*o no9 $ !gregue 3 " de %o ucin de N!C ! $C G9 $C9 A tu*o no9 & !dicione 3 " de %o ucin de N!C ! C9F3 G9 $$9 A tu*o no9 3 !gregue 3 " de %o ucin g uco%!d! ! 3 G9 $&9 A tu*o no9 # !dicione 3 " de !gu! de%ti !d!9 $39 A c!d! uno de o% # tu*o% !nteriore%- !>!d! $C got!% de ! %o ucin de g *u o% ro:o% ! 3 G- t!5e con un 5oco de 5!5e 5!r!'i " / "e1c e %u!(e"ente9 De:e re5o%!r 3 "inuto%9 $#9 Centri'ugue 5or 3 "in9 ! &3CC r959"9 / o*%er(e9 $39 E i"ine ! "!/or 5!rte de %o*ren!d!nte / re%u%5end!9 Co o8ue un! o do% got!% en un 5ort!o*:eto%- co o8ue %o*re e !% un cu*reo*:eto% / o*%er(e ! "icro%co5io9

RESU%TADOS Di*u:e !% o*%er(!cione% ! "icro%co5io 5!r! !% di'erente% %o ucione% / e;5 ,8ue !%9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS P!r! o% !n< i%i%- de*er< re !cion!r o o*%er(!do ! "icro%co5io con !

concentr!cin de !% %o ucione% en !% 8ue %e encontr!*!n o% g *u o% ro:o%- 5!r! e o de*er< de"o%tr!r 8ue2 !B L! %o ucin ! C9L G de c oruro de %odio e% i%otnic! con re%5ecto ! 5 !%"!9 P!r! e o %e de*e con%ider!r o %iguiente2 E c oruro de %odio %e di%oci! en %o ucin !cuo%! en o% ione% de %odio / c oruro5or o 8ue ! concentr!cin %e du5 ic!9 Por o !nterior2 $ ""o NL M & "O%"NL9 *B T!nto ! %o ucin de N!C ! C9F3 G / ! %o ucin g uco%!d! ! 3 G %on i%otnic!%9 2"

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cB E !gu! de%ti !d! e% 7i5otnic! con re%5ecto ! 5 !%"!9 Pre%ent!r< o% c< cu o% corre%5ondiente% 5!r! c!d! uno de o% inci%o% !nteriore%9

CUESTIONARIO +9 De'in! / e:e"5 i'i8ue e conce5to de 5re%in o%"tic!9 F9 HQu) e% un! %o ucin o%"o !rI9 L9 Conce5to de "e"*r!n! %e"i5er"e!* e / "e"*r!n! i"5er"e!* e9 $C9 Cu< e% ! di'erenci! entre un! %o ucin i%otnic!- 7i5otnic! e 7i5ertnic!9 $$9 E;5 i8ue *re(e"ente e 'und!"ento de o% ")todo% ',%ico% de %e5!r!cin9 $&9 In(e%tigue / e;5 i8ue !% 'or"!% en cu! e% %e 5uede "edir ! 5re%in o%"tic! $39 E;5 i8ue e 'en"eno de turgenci! / 5 !%" i%i%9 E:e"5 i',8ue o9 $#9 HPor 8ue uti i1!"o% e !ntico!gu !nte en ! "ue%tr!I

RE0ERENCIAS # L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 Ort)n J9M9 Bioqumica Humana9 $$K9 Edicin9 Bueno% Aire%9 Editori! M)dic!9 P!n!"eric!n!9 $LLC9 # Trtor! J909 Principios de Anatoma y Fisiologa. 4K9 Edicin9 Ed9 6!r !9 M);ico9 $LF39

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DETERMINACI&N DE PROTENAS TOTA%ES? A%B@MINA A G%OBU%INA
OB1ETI'OS E ! u"no conocer< / %e '!"i i!ri1!r< con !% e(! u!cione% .ti e% en e <"*ito ")dico9 Conocer ! i"5ort!nci! de !% 5rote,n!% 5 !%"<tic!% / cu!nti'ic!r !%9 Conocer< !% di'erente% 5!to og,!% 8ue ! ter!n o% (! ore% nor"! e% de !% 5rote,n!% %)ric!%9

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AGOSTO 2013

INTRODUCCI&N Seg.n %u e%tructur! !% 5rote,n!% de o% org!ni%"o% %e c !%i'ic!n en do% gr!nde% gru5o%2 'i*ro%!% / g o*u !re%9 E%t!% . ti"!% %on !% 8ue intere%!n de%de e 5unto de (i%t! *io gico / dentro de !% cu! e% %e inc u/en ! ! ! *."in! / ! !% g o*u in!% 5 !%"<tic!%9 Entre %u% 'uncione% e%t<n inter(enir en e "ec!ni%"o de co!gu !cin"!ntener ! 5re%in onctic! / tr!n%5ort!r %u%t!nci!% in%o u* e% co"o o% ,5ido% con o% 8ue 'or"!n co"5 e:o% %o u*i i1<ndo o%9 0UNDAMENTO Lo% e8ui5o% di!gn%tico% e"5 e!do% 5!r! e%t!% deter"in!cione% %er<n de Ser!?P!Ode B!/er9 L!% 5rote,n!% / o% 5)5tido% ! di'erenci! de otro% co"5ue%to% nitrogen!do%- 'or"!n en %o ucin ! c! in! con ione% co*re- un co"5 e:o 8u,"ico de co or (io et!- cu/! inten%id!d e% 5ro5orcion! ! ! c!ntid!d de 5rote,n!% 5re%ente%9 E%t! re!ccin deno"in!d! DRe!ccin de BiuretE o*tiene re%u t!do% re5roduci* e%9 L! ! *."in! de %uero- cu!ndo e%t< en 5re%enci! de un !"ortigu!dor / ! un 56 !decu!do- tiene ! 5ro5ied!d de unir%e "edi!nte 5uente% de 7idrgeno / 'uer1!% de @!n der P!! % ! cierto% co or!nte% e indic!dore% co"o e (erde de *ro"ocre%o ABC0B'or"!ndo co"5 e:o% co orido% cu/! inten%id!d e% 5ro5orcion! ! ! concentr!cin de )%te "edio *io gico9 A"*!% co or!cione% %on "edi* e% "edi!nte un e%5ectro'ot"etro9 REQUISITOS A9 Conte%t!r e cue%tion!rio9 B9 In(e%tig!r !% 5!to og,!% en !% cu! e% %e encuentr!n ! ter!d!% !% 5rote,n!% tot! e%- ! *."in! / g o*u in!%9 MATERIA% Tu*o% de en%!/e de $3 ; $CC $ 0r!di ! & Micro5i5et!% de &C / 3C A"icro itro%B Punti !% 5!r! "icro5i5et! & Pi5et!% %ero gic!% de 3 " $ Jering! de 3 " / ig!dur! Torund!% ! co7o !d!% $ E8ui5o RA 3C Centri'ug! 23

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MUESTRA BIO%&GICA4 Suero o 5 !%"! Acon 7e5!rin! o EDTAB- no 7e"o i1!do ni i5)"ico9 REACTI'OS SPINREACT2 Re"c !B) 1 B!-re S "$d"rd PROCEDIMIENTO A9 DETERMINACIRN DE PROTESNAS TOTALES9 Te"5er!tur!2 3C?3+T C T!rtr!to Q?N! Ioduro N! Ioduro Q Su '!to de co*re So 9 5rote,n!% $3 ""o N $CC ""o N $3 ""o N 3 ""o N + gNd

Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2

B !nco E%t<nd!r Mue%tr! R9 $ Biuret ????? ????? &9C "

E%t<nd!r 3C ????? &9C "

Mue%tr! ???? 3C &9C "

Me1c !r e incu*!r $3 "in ! 3C?3+ TC9 M!ntener 3 "inuto% ! te"5er!tur! !"*iente9 To"!r ! ectur! direct!"ente en e e8ui5o9 24

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Co or!cin e%t!* e 3C "in9 B9 DETERMINACIRN DE ALBUMINA ASPINREACTB9 Te"5er!tur!2 Lectur!2 $3?&3 TC Contr! * !nco9

Pi5ete!r en un! cu*et!2 B !nco RT A" B E%t<nd!r A B Mue%tr! A B &9C ????? E%t<nd!r &9C $C9C Mue%tr! &9C ?????

?????

?????

$C9C

Me1c !r e incu*!r $C "in ! te"5er!tur! !"*iente A$3?&3TCB9 To"!r ! ectur! direct!"ente en e e8ui5o9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS Prote,n!% Tot! e% @! ore% de re'erenci!2 SueroM Reci)n n!cido%2 39& ? L9$ gNdL Ni>o% A7!%t! 3 !>o%B 39# ? F9+ gNdL Adu to% 49+ ? F9+ gNdL 393 V 39C gNd 33 V 3C gNL 39$ V 393 gNd

AB A *."in!9 @! ore% de re'erenci!2 SueroM BB 0 o*u in!%9 @! ore% de re'erenci!2 SueroM

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AGOSTO 2013

P!r! c!d! deter"in!cin !n! ice o% (! ore% o*tenido% indic!ndo %i %e encuentr!n o no dentro de o% (! ore% nor"! e%9 En c!%o de 8ue no %e encuentren- di%cutir ! c!u%!9 CUESTIONARIO $9 De'in! / c !%i'i8ue ! !% 5rote,n!% deter"in!* e% en e%t! 5r<ctic! de !cuerdo ! %u 'or"! / 'uncin9 &9 HA 8ue %e e deno"in!n 5rote,n!% con:ug!d!%I9 39 In(e%tigue ! i"5ort!nci! de !% 5rote,n!% en e 7o"*re9 #9 E:e"5 i'i8ue ! "eno% $C 5rote,n!% / %u 'uncin9 39 HCu< e% ! i"5ort!nci! de e%t!% deter"in!cione%I9 49 HCu< e% %on !% 5rinci5! e% 5rote,n!% 8ue %e encuentr!n en e 5 !%"!I9 +9 HCu< e% %on !% 'uncione% de !% 5rote,n!% en e 5 !%"!I9 F9 HDnde %e 5roducen !% 5rote,n!% 5 !%"<tic!%I9 L9 In(e%tigue 8u) 5!to og,!% %e 5roducen 5or ! ! ter!cin en ! concentr!cin de !% 5rote,n!% 5 !%"<tic!%9 $C9 HCu< e% ! 'uncin de re!cti(o de Biuret en )%t! 5r<ctic!I9 $$9 HA 8ue %e e deno"in! 5roteinuri! / 5or 8u) %e 5uede 5roducirI9

RE0ERENCIAS # # # # 0!nong- F9P9- Fisiologa Mdica. $$K9 Edicin9 Editori! E M!nu! Moderno9 M);ico9$LLF9 L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 M!t7eW%- Q9C9 / @!n 6o de Q9E9 Bioqumica9 $K Ed9 Editori! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LLF9 NeW%7o "e E9A9 / Leec7 A9R9 Bioqumica Mdica9 $K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LF+9

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#
ENCIMO%OGA C%NICA4
DETERMINACIRN DE TRANSAMINASAS2 T0O AASATB X T0P AALATB OB1ETI'OS Re! i1!r< ! deter"in!cin %)ric! de !% tr!n%!"in!%!% g ut<"ico?5ir.(ic! AT0PB / g ut<"ico?o;! !c)tic! AT0OB9 Conocer ! i"5ort!nci! de !"*!% deter"in!cione% en e di!gn%tico / %egui"iento de 5!deci"iento% 7e5<tico% / c!rdi!co%9 Re !cion!r< e incre"ento en o% (! ore% nor"! e% de !% tr!n%!"in!%!% con ! ! ter!cin ti%u !r de o% te:ido% 7e5<tico / c!rdi!co9

INTRODUCCI&N 27

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L! deter"in!cin de nu"ero%o% en1i"!% "e:or conocid! co"o En1i"o og,! C ,nic!- en ! er! "odern! de ! in(e%tig!cin ")dico?c ,nic!- %e 7! con(ertido en un !r"! 5odero%! 5!r! e di!gn%tico9 Su !"5 i! di%tri*ucin / oc! i1!cin ce u !r ! ni(e e% c!r!cter,%tico% / con%t!nte% 5!r! c!d! te:ido u rg!no- 8ue re%u t! de e8ui i*rio entre 5roce%o% %int)tico% / degr!d!ti(o%7! 5er"itido e%t!* ecer cierto% D5!trone%E en1i"<tico% 5!r! c!d! ti5o ce u !r9 E di!gn%tico en1i"<tico %e *!%! en e 7ec7o de 8ue en un! c) u ! d!>!d!- %e i*er!n !% en1i"!% oc! i1!d!% intr!ce u !r"ente= e re%u t!do e% ! e e(!cin de %u concentr!cin en %uero9 Aun8ue e;i%ten "<% de $CC en1i"!% e%tudi!d!% % o ! gun!% %e e"5 e!n 5!r! e di!gn%tico2 T0O- T0P- LD6- CQ- 'o%'!t!%! <cid! / ! c! in!- ?0T- entre otr!%9 Por ! re !cin e;i%tente entre ! gun!% en1i"!% c!r!cter,%tic!% de un te:ido- %e 5odr< 5redecir e di!gn%tico- co"o e:e"5 o- ! re !cin de !% tr!n%!"in!%!%2 T0P / T0O A8ue %e conoce co"o cociente de Riti%2 T0ONT0PB- 8ue en 5!deci"iento% 7e5<tico% e% "enor 8ue ! unid!d / en o% c!rdi!co% e% "!/or 8ue ! unid!d9 De e%te "odo"ientr!% "!/or e% e n."ero de deter"in!cione% en1i"<tic!% 8ue %e e'ect.e- "<% '<ci e% e di!gn%tico9 P!r! !% deter"in!cione% en1i"<tic!% %e 5ueden e"5 e!r 'und!"ent! "ente do% ti5o% de ")todo%2 directo% e indirecto%9 En o% 5ri"ero% %e "ide ! de%!5!ricin de %u%tr!to en1i"<tico o ! !5!ricin de ! guno de o% 5roducto% de re!ccin9 En o% %egundo%- ! !cti(id!d en1i"<tic! %e deter"in! !co5 !ndo do% o "<% re!ccione%- en un! de !% cu! e% inter(iene ! en1i"! 8ue %e de%e! deter"in!r- ! cu! gener! "ente c!t! i1! ! tr!n%'or"!cin de un %u%tr!to ! un 5roducto cu/! concentr!cin %e deter"in! 5or ! !ccin de un! %egund! en1i"! !"!d! Den1i"! !u;i i!rE9 L! deter"in!cin de !% tr!n%!"in!%!% %e 5uede e'ectu!r "edi!nte ")todo% directo%en o% cu! e% o% 5roducto% de ! re!ccin %on inco oro% / %e 7!cen re!ccion!r con re!cti(o% 8u,"ico% e%5ec,'ico% 'or"!ndo co"5 e:o% co orido% 8ue 5ueden "edir%e e%5ectro'oto")tric!"ente9 A e%to% ")todo% %e e% deno"in! Co ori")trico%9 0UNDAMENTO T0O L! tr!n%!"in!%! g ut<"ico?o;! !c)tic! AT0OB- c!t! i1! e tr!n%5orte de nitrgeno de%de e g ut!"!to ! o;! !cet!to %eg.n ! %iguiente ecu!cin2 ?Cetog ut!r!to Y A%5!rt!to T0O 0 ut!"!to Y O;! !cet!to ! "! !to

E o;! !cet!to 5roducido %e tr!n%'or"! en "! !to 5or "edio de de%7idrogen!%! AMD6B en 5re%enci! de NAD6 Y 6Y2 O;! !cet!to Y NAD6 Y 6Y MD6 M! !to Y NADY

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L! (e ocid!d de con%u"o de NAD6 Y 6 Y- 5uede "edir%e 'oto")tric!"ente 5or ! "edicin de ! e;tincin en ! regin de u tr!(io et! 5r;i"o9 Su% (! ore% %on direct!"ente 5ro5orcion! e% ! ! !cti(id!d de ! T0O9 T0P L! tr!n%!"in!%! g ut<"ico?5ir.(ic! AT0PB- c!t! i1! e tr!n%5orte de nitrgeno de%de e g ut!"!to ! 5iru(!to %eg.n ! %iguiente ecu!cin2 ?Cetog ut!r!to Y A !nin! T0P 0 ut!"!to Y Piru(!to

E 5iru(!to 5roducido %e tr!n%'or"! en1i"<tic!"ente en !ct!to 5or "edio de ! !ct!to de%7idrogen!%! ALD6B en 5re%enci! de ! coen1i"! NAD6 Y 6 Y2 Piru(!to Y NAD6 Y 6Y LD6 L!ct!to Y NADY

L! (e ocid!d de con%u"o de NAD6 Y 6 Y- 5uede "edir%e 'oto")tric!"ente 5or ! "edicin de ! e;tincin en ! regin de u tr!(io et! 5r;i"o9 Su% (! ore% %on direct!"ente 5ro5orcion! e% ! ! !cti(id!d de ! T0P9

REQUISITOS A9 Conte%t!r e cue%tion!rio9 B9 In(e%tig!r !% 5!to og,!% en !% cu! e% %e encuentr!n ! ter!d!% o% (! ore% nor"! e% de !% T0O / T0P9 MATERIA% 3 Tu*o% de en%!/e & Pi5et!% %ero gic!% de 3 " $ Micro5i5et! de $CC $ Micro5i5et! de &CC Punt!% 5!r! "icro5i5et! A!"!ri !% / !1u e%B $ B!>o M!r,! NTer""etro $ Jering! / ig!dur! Torund!% ! co7o !d!% $ Cron"etro Centr,'ug! REACTI'OS 2

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SPINREACT # T0O2 ZR$ T!"5n ZR& Su*%tr!to ? T0P2 ZR$ T!"5n ZR& Su*%tr!to

MUESTRA BIO%OGICA4 Suero o 5 !%"! Acon 7e5!rin! o EDTAB- no 7e"o i1!do%9 PROCEDIMIENTO A9 DETERMINACIRN DE T0O A:u%t!r e e%5ectro'ot"etro ! cero 'rente ! !gu! de%ti !d! o !ire9 Pi5ete!r en un tu*o de en%!/e2 Re!cti(o A" B Mue%tr! A B $9C $CC

Me1c !r e incu*!r $ "inuto9 To"!r ! ectur! en e e8ui5o inici! de ! "ue%tr!9 Medir e c!"*io de !*%or*!nci! 5or "inuto- dur!nte tre% "inuto% con%ecuti(o% Ae"5 e!r cron"etroB9 B9 DETERMINACIRN DE T0P Te"5er!tur!2 Lectur!2 &3 TCN3C oCN3+ oC Contr! * !nco de !gu! de%ti !d!9

Pi5ete!r en un tu*o de en%!/e2 Re!cti(o% A" B Mue%tr! A B Pro* e"! $CC

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Me1c !r /- tr!% un! incu*!cin de $ "inuto- to"!r ! ectur! en e e8ui5o 5or "inutodur!nte tre% "inuto% con%ecuti(o% Ae"5 e!r cron"etroB9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS An! ice o% (! ore% o*tenido% indic!ndo %i %e encuentr!n o no dentro de o% (! ore% nor"! e%9 En c!%o de 8ue no %e encuentren- di%cutir ! c!u%!9 Di%cut! ! (! ,! de ! deter"in!cin de ! T0O / T0P9

@! ore% de Re'erenci!2 A &3 oC2 A 3C oC2 A 3+oC2 T0O2 T0P2 T0O2 T0P2 T0O2 T0P2

6o"*re% 6!%t! $L UNL 6!%t! && UNL &4 UNL &L UNL 3F UNL #C UNL

Mu:ere% 6!%t! $4 UNL 6!%t! $F UNL && UNL && UNL 3$ UNL 3& UNL

CUSTIONARIO $9 E;5 i8ue ! i"5ort!nci! de un! *uen! ! i"ent!cin en e 'uncion!"iento de !% en1i"!%9 &9 HQu) %on !% en1i"!% / cu< e% %u 'uncinI9 39 HCu< e% ! i"5ort!nci! de !% en1i"!% en e cuer5oI9 #9 HQu) '!ctore% "odi'ic!n ! !cti(id!d en1i"<tic!I9 39 De'in! e t)r"ino de !cti(id!d en1i"<tic!9 49 HQu) otro% ti5o% de en1i"!% e;i%tenI9 +9 De'in! e t)r"ino tr!n%!"in!cin9 F9 In(e%tigue 8u) deter"in!cione% %e re! i1!n en e 5er'i 7e5<tico / en e c!rdi!co9 L9 HPor 8u) e% i"5ort!nte 8ue ! "ue%tr! no e%t) 7e"o i1!d! 5!r! re! i1!r e%t!% deter"in!cione%I9 $C9 In(e%tigue ! (ent!:! / 'in! id!d de di!gn%tico en1i"<tico9 $$9 HQu) condicione% dur!nte ! re! i1!cin de ! 5r<ctic! de*en (igi !r%e 5!r! 8ue no %e ! tere e re%u t!doI9

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RE0ERENCIAS # # # # # # # D!d(i%o7n I9 Diagnstico lnico por el Laboratorio. !odd"#an$ord9 S! (!t Editore%9 0!nong- F9P9- Fisiologa Mdica. $$K9 Edicin9 Editori! E M!nu! Moderno9 M);ico9$LLF9 L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 Q!5 !n A9 %umica lnica9 Editori! M)dico P!n!"eric!n!9 N!O!"ur!- R9 linical Laboratory Assays9 Ed9 M!%%on Pu* i%7ing $LF&9 Reit"!n S9 X Fr!nOe S9- American &ournal linical Pat'ology9 A$L3+B &F-349 Tiet1- N9P9- !e(boo) o$ linical 'emistry9 E9 P9B9 S!under% Co9 $LF3

3
CUR'A DE TO%ERANCIA A %A G%UCOSA
OB1ETI'OS E ! u"no re! i1!r< un! cur(! de to er!nci! ! ! g uco%!9 Inter5ret!r< o% re%u t!do% o*tenido%- / o% re !cion!r< con indi(iduo% 5!to gico%9 Co"5render< de "!ner! 5r<ctic! e "et!*o i%"o de !1.c!re%9

INTRODUCCI&N

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E "et!*o i%"o de o% c!r*o7idr!to% en e org!ni%"o !ni"! - con%i%te e%enci! "ente en o% c!"*io% 8ue e;5eri"ent! ! g uco%! / e g ucgeno- / en "uc7o "enor 5ro5orcin ! 'ructo%! / ! g! !cto%!9 L! "!/or 5!rte de o% g .cido% 5re%ente% en e org!ni%"o %e 7!/!n en 'or"! de g ucgeno A3CC?#CC gr en e 7o"*re !du toB- 5re%ente% %o*re todo en e ".%cu o e 7,g!do9 E g ucgeno e% 5or con%iguiente- ! 5rinci5! re%er(! de c!r*o7idr!to%9 E 5rinci5! g .cido de ! %!ngre circu !nte e% ! g uco%!9 Aun8ue ! g uco%! e%t< 5re%ente en e org!ni%"o en c!ntid!de% "enore% 8ue e g ucgeno- %e 5uede con%ider!r co"o un! 'r!ccin g uco%,dic! !cti(!- "ientr!% 8ue e g ucgeno re5re%ent! ! 'or"! de de5%ito9 0UNDAMENTO L! g uco%! o;id!%! A0ODB- c!t! i1! %iguiente2 0 uco%! Y O& Y 6&O ! o;id!cin de g uco%! %eg.n ! ecu!cin Acido g ucnico Y 6&O&

<????????? 0OD ?????????>

E 5er;ido de 7idrgeno 'or"!do en )%t! re!ccin- re!ccion! en 5re%enci! de 5ero;id!%! con e cro"geno #?!"ino!nti5irin!N'eno - o;id<ndo o / con(irti)ndo o en un co"5ue%to de co or ro:o9

REQUISITOS A9 Conte%t!r e cue%tion!rio9 B9 In(e%tig!r cu! e% ! (! ,! de ! cur(! de to er!nci! ! ! g uco%!9 C9 In(e%tig!r !% 5!to og,!% en !% cu! e% %e encuentr! ! ter!d! ! g uco%! %)ric!9 MATERIA% # Tu*o% de en%!/e $ Micro5i5et! de &C Punt!% 5!r! "icro5i5et! $ Pi5et! %ero gic! de 3 " $ E8ui5o RA 3C $ B!>o M!r,! N ter""etro & Jering!% / ig!dur! Torund!% ! co7o !d!% Centri'ug! REACTI'OS SPINREACT 33

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R$ T!"5n R& En1i"!% 0 uco%e c! MUESTRA BIO%&GICA4 Suero o 5 !%"! Acon 7e5!rin! o EDTAB- no 7e"o i1!do%9 CONDICIONES DE %A PRUEBA4 AB 4 7or!% de !/uno9 BB Dur!nte ! re! i1!cin de e%tudio- no %e de*er< re! i1!r !cti(id!d 'uer! de o nor"! Ae:ercicioB9 PROCEDIMIENTO $9 Se eccion!r ! un ! u"no e cu! %e 7!/! %o"etido ! !% condicione% !nte% "encion!d!%9 &9 O*tener 3 " de %!ngre (eno%! AM $B9 39 D!r de *e*er ! ! u"no un! %o ucin de de;tro%!- ! cu! %e de*er< ingerir en un tie"5o "<;i"o de 3 "inuto%9 #9 Tr!n%currid! "edi! 7or!- o*tener 3 " de otr! "ue%tr! %!ngu,ne! AM &B9 39 A c!*o de otr! "edi! 7or! (o (er ! to"!r un! nue(! "ue%tr! AM 3B9 49 Tod!% !% "ue%tr!% %e centri'ug!n ! 3-3CC r9 59"9 dur!nte 3 "inuto%- / e;tr!er e% e %uero9 +9 L!% deter"in!cione% de g uco%! %e e'ectu!r<n de ! %iguiente 'or"!2 Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e 5re(i!"ente "!rc!do%2 B !nco RT E%t<nd!r Mue%tr! $" ????? ????? E%t<nd!r $" $C ????? Mue%tr! $" ????? $C

Me1c !r e incu*!r ! 3+ oC dur!nte $C "inuto% 3C "in ! te"5er!tur! !"*iente A$3? &3TC B 9 Leer e re%u t!do direct!"ente en e e8ui5o9 34

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RESU%TADOS Re! ice ! gr<'ic!- e"5 e!ndo 5!5e "i i")trico- en ! 8ue %e o*%er(e e co"5ort!"iento de "et!*o i%"o de c!r*o7idr!to2 Concentr!cin de g uco%! en "gNd Ae:e de !% !*%ci%!%= [B contr! tie"5o en "inuto% Ae:e de !% orden!d!%= XB9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS An! ice ! conduct! de ! cur(! / di%c.t! !9 Co"5!re ! concentr!cin de g uco%! de ! "ue%tr! en !/un!% AM $B e indi8ue %i e% nor"! o no9 Di%cut! !% c!u%!% de %u re%u t!do9

@! or de re'erenci!2 4C?$$C "gNd M 3933?49$C ""o NL CUESTIONARIO $9 &9 39 #9 HQu) 5!ciente% %on c!ndid!to% 5!r! ! re! i1!cin de )%t! 5rue*!I9 HQu) '!ctore% incre"ent!n ! concentr!cin de g uco%! circu !nteI9 HQu) e% un! 5rue*! de to er!nci!I9 HCu< e% e 5!r<"etro de g ice"i! con e cu! %e di!gno%tic! ! un 5!ciente into er!nte ! ! g uco%!I9 39 HEn cu!nto% ti5o% %e c !%i'ic! ! ! di!*ete% "e itu% e indi8ue cu! e% %on %u% di'erenci!%I9 49 E%cri*! !% (,!% 8ue co"5rende e "et!*o i%"o de c!r*o7idr!to%9 +9 HQu) "ec!ni%"o% 'i%io gico% !u"ent!n ! concentr!cin de g uco%! ! e;5en%!% de %u%t!nci! /! e;i%tente% en e org!ni%"oI9 F9 HCu< e% ! 'uncin de ! In%u in! / en donde %e 'or"!I9 L9 HQu) '!ctore% e%ti"u !n ! g ucogen i%i%I9 $C9 HPor 8ui)n e% c!t! i1!d! ! g ucog)ne%i%I9 $$9 HQu) e% e g uc!gon / cu! e% %u 'uncinI9 $&9 HEn 8u) te:ido% %e 'or"! e g ucgenoI9 $39 HCu< e% ! 'uncin de g ucgeno 7e5<tico / "u%cu !rI9 $#9 Indi8ue 8u) "ec!ni%"o% tienden ! di%"inuir ! concentr!cin de g uco%! circu !nte9 $39 HQu) otr!% 5rue*!% de !*or!torio %on nece%!ri!% 5!r! e %egui"iento de un 5!ciente di!*)ticoI9 $49 In(e%tigue 8ue otr!% 5!to og,!% 5ueden detect!r%e con un! cur(! de into er!nci! ! ! g uco%!9 $+9 Di*u:e o% e%8ue"!% corre%5ondiente%9 Glucosa Sacarosa Almidn Celulosa $F9 Anote o% g .cido% 8ue 5re%enten e%tructur! cri%t! in!9 35

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$LHQu) re !cin e;i%te entre ! e%tructur! de un g .cido / %u 5e%o "o ecu !rI9 RE0ERENCIAS # # # 0!nong- F9P9- Fisiologa Mdica. $$K9 Edicin9 Editori! E M!nu! Moderno9 M);ico9$LLF9 L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 Trinder- P9- Ann. linical Bioc'emistry. 4-&#9 $L4L9

4
PER0I% DE %PIDOS4
DETERMINACIRN DE COLESTEROL TOTAL- TRI0LIC\RIDOS- 6DL X LDL OB1ETI'OS E ! u"no re! i1!r< !% deter"in!cione% 5ro5i!% de un 5er'i de ,5ido%9 Se in(o ucr!r< con ! deter"in!cin- ! 'in de co"5render co"5 et!"ente ! uti id!d ")dic! de e%tudio9

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Integr!r< o% conoci"iento% !d8uirido% dur!nte e cur%o- de 'or"! 5r<ctic! / re !cion!r< o% "i%"o% ! <"*ito ")dico9 Deter"in!r< %u uti id!d di!gn%tic! en ! ter!5)utic! de !% i5ide"i!%9

INTRODUCCI&N Lo% ,5ido% de%e"5e>!n di(er%!% 'uncione% de "et!*o i%"o energ)tico / en otro% (!rio% 5roce%o%9 L! "!/or 5!rte de o% ,5ido% e%t< en 'or"! de tri!ci g icero e%9 L! uti i1!cin de e o% e%t< interre !cion!d! con e "et!*o i%"o de !% i5o5rote,n!%- co"o ocurre con e "et!*o i%"o de co e%tero 9 L! "edid! de !% concentr!cione% de tri!ci g ic)rido% / de co e%tero en 5 !%"! 7! %ido dur!nte "uc7o tie"5o un! t)cnic! e%t<nd!r en ! 8u,"ic! c ,nic! de di!gn%tico- d!do 8ue ! concentr!cin de )%to% ,5ido% %e incre"ent!n en nu"ero%!% en'er"ed!de%= e incre"ento en o% ni(e e% de co e%tero "ue%tr! un "!/or rie%go ! en'er"ed!de% coron!ri!%9 M<% reciente"ente- ! "edid! de ! concentr!cin de !% c !%e% indi(idu! e% de i5o5rote,n!% 7! de"o%tr!do %er un indic!dor di!gn%tico de "<% (! ,! inc u%o9 0UNDAMENTO COLESTEROL TOTAL Lo% )%tere% de co e%tero %on 7idro i1!do% 5or ! co e%tero e%ter!%! ! co e%tero i*re / <cido% gr!%o%9 E co e%tero i*re e;i%tente- con:unt!"ente con e 5roducido 5or )%t! re!ccin- e% o;id!do 5or ! co e%tero o;id!%! ! #?co e%tenon! / 5er;ido de 7idrgeno9 E%te . ti"o- en 5re%enci! de 5ero;id!%!- o;id! ! cro"geno A#? !ni"o!nti5irin!N'eno B ! un co"5ue%to de co or ro:o2 #?A5?*en1o8uinon!?"onoi"ino? 'en!1on!B- 8ue !*%or*e c!r!cter,%tic!"ente ! 3CC n" de ongitud de ond!9 L! concentr!cin de co"5ue%to e% direct!"ente 5ro5orcion! ! ! concentr!cin de co e%tero 5re%ente en ! "ue%tr!9

TRI0LIC\RIDOS E g icero i*er!do en ! 7idr i%i% de o% tri!g ic)rido%- c!t! i1!d! 5or ! i5o5rote,n i5!%!- %e con(ierte- "edi!nte ! g icero 8uin!%!- en g icero ?3?'o%'!to- 8ue %e o;id! ! di7idro;i!ceton! / 5er;ido de 7idrgeno en 5re%enci! de g icero 'o%'!to o;id!%!9 Ante ! 5ero;id!%!- e 5er;ido de 7idrgeno o;id! ! cro"geno A#? !ni"o!nti5irin!N5?c oro'eno B ! un co"5ue%to de co or ro:o9

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COLESTEROL 6DL L!% i5o5rote,n!% de ! t! den%id!d A6DLB %e %e5!r!n de o% 8ui o"icrone%- de !% i5o5rote,n!% de "u/ *!:! den%id!d A@LDLB / de !% i5o5rote,n!% de *!:! den%id!d ALDLB 5or ! !dicin de un re!cti(o de 5reci5it!cin A<cido 'o%'ot.ng%ticoNc oruro de "!gne%ioB ! %uero o ! 5 !%"!9 De%5u)% de centri'ug!r- %e deter"in! e contenido de co e%tero en ! 'r!ccin 6DL 8ue 5er"!nece en e %o*ren!d!nte- 5or e ")todo co ori")trico en1i"<tico uti i1!ndo ! co e%tero e%ter!%!- co e%tero o;id!%!- 5ero;id!%! / e cro"geno #?!ni"o!nti5irin!N'eno 9 REQUISITOS A9 Conte%t!r e cue%tion!rio9 B9 In(e%tig!r !% 5!to og,!% en !% cu! e% %e encuentren ! ter!do% c!d! uno de o% "et!*o ito% de con%titu/en e 5er'i de ,5ido%9 MATERIA% $C Tu*o% de en%!/e $ Tu*o de centr,'ug! $ B!>o M!r,!Nter""etro $ E8ui5o RA 3C 3 Pi5et!% %ero gic!% de 3 " $ Micro5i5et! de 3CC $ Micro5i5et! de $CC $ Micro5i5et! de &C Punt!% 5!r! "icro5i5et! A!1u e% / !"!ri !%B $ Jering! / ig!dur! Torund!% ! co7o !d!% REACTI'OS SPINREACT2 ? Co e%tero Tot! 2 ZE%t<nd!r Ac7o e%tero c! B ZRe!cti(o $ AT!"5nB ZRe!cti(o & Aen1i"!%B ? Trig ic)rido%2 ? Co e%tero 6DL2 ZR ZRe!cti(o 5reci5it!nte ZE%t<nd!r ?Agu! de%ti !d! 38 EQUIPO Centr,'ug!

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ZE%t<nd!r Atrig /ceride% c! B ZRe!cti(o $ AT!"5nB ZRe!cti(o & Aen1i"!%B MUESTRA BIO%&GICA4 Suero o 5 !%"! Acon 7e5!rin! o EDTAB- no 7e"o i1!do%9 CONDICIONES DE %A PRUEBA4 AB A/uno de $& 7or!%9 BB L! cen! de d,! !nterior ! ! 5rue*! de*e %er i*re de gr!%!%9 PROCEDIMIENTO A9 DETERMINACIRN DE COLESTEROL TOTAL L! %o ucin $ de*er< !te"5er!r%e !nte% de %er uti i1!d!9 Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2 B !nco Re!cti(o A" B P!trn A B Mue%tr! A B $9C ????? E%t<nd!r $9C $C Pro* e"! $9C ?????

?????

?????

$C

Me1c !r e incu*!r ! 3+ oC dur!nte 3 "inuto% $C "in9 ! te"5er!tur! !"*iente9 To"!r ! ectur! direct!"ente en e e8ui5o9 E co or e% e%t!* e co"o ",ni"o 4C "in9 B9 DETERMINACIRN DE TRIACIL0LIC\RIDOS Te"5er!tur!2 Lectur!2 3+ oC Contr! * !nco9

Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2 B !nco E%t<nd!r Pro* e"!

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Re!cti(o A" B E%t<nd!r A B Mue%tr! A B

$9C

$9C

$9C

????? ?????

$C ?????

????? $C

Me1c !r e incu*!r ! 3+ oC dur!nte 3 $C "inuto%9 To"!r ! ectur!9 C9 DETERMINACIRN DE COLESTEROL 6DL Preci5it!cin2 Pi5ete!r en tu*o de centr,'ug!2 Mue%tr! Re!cti(o 5reci5it!nte $9C " $CC9C

Me1c !r *ien- e%5er!r $C "inuto% ! te"5er!tur! !"*iente / centri'ug!r ! #CCC r9 59 "9 dur!nte &C "inuto%9 A%eg.re%e de 8ue e %o*ren!d!nte 8ue %e o*teng! %e! c !ro9 Recoger e %o*ren!d!nte9 E$(",)2 5roceder %eg.n o indic!do en !% in%truccione% de tr!*!:o de re!cti(o de co e%tero An< i%i% de Co e%tero 6DL2 B !nco Re!cti(o A" B E%t<nd!r A B So*ren!d!nte A B $9C ????? ????? E%t<nd!r $9C $C ????? Pro* e"! $9C ????? $C

Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2

Me1c !r e incu*!r ! 3+ oC dur!nte 3 "inuto% $C "inuto% ! te"5er!tur! !"*iente9 To"!r ! ectur!9

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AN=%ISIS DE RESU%TADOS An! ice o% (! ore% o*tenido% indic!ndo %i %e encuentr!n o no dentro de o% (! ore% nor"! e%9 En c!%o de 8ue no %e encuentren- di%cutir ! c!u%!9 Di%cut! ! (! ,! de ! deter"in!cin de 5er'i de ,5ido%9

@! ore% de re'erenci!2 Co e%tero 2 E(! u!cin de rie%go2 Meno% de &CC "gNd Nor"! &CC?&3L "gNd Moder!do &#C "<% A to Trig ic)rido%2 6o"*re%2 #C?$4C "gNd Mu:ere%2 33?$#C "gNd Co e%tero 6DL2 Rie%go "enor Rie%go nor"! Rie%go e e(!do 6o"*re% ] 33 "gNd 33?33 "gNd ^ 33 "gNd $3C "gNd $LC "gNd Mu:ere% ] 43 "gNd #3?43 "gNd ^ #3 "gNd

Co e%tero LDL2 @! ore% %o%5ec7o%o% ! 5!rtir de2 @! ore% e e(!do% ! 5!rtir de2 CUESTIONARIO $9 &9 39 #9

HQu) %on o% ,5ido%I9 E%cri*! ! c !%i'ic!cin gener! de o% ,5ido%9 E%cri*! ! de'inicin / e:e"5 o% de gr!%!% %!tur!d!% e in%!tur!d!%9 HQu) en'er"ed!d e% 'recuente cu!ndo o% (! ore% de o% ,5ido% %!ngu,neo% e%t<n e e(!do%I9 39 De'in! e conce5to de i5o5rote,n!- con%titucin e i"5ort!nci! en e 7u"!no9 49 HCu< e% %on !% i5o5rote,n!% de tr!n%5orte e;geno / endgenoI9 +9 Indi8ue cu! e% ! 'uncin de co e%tero en e org!ni%"o9 F9 HQu) %on o% 8ui o"icrone%I9 L9 HQu) '!ctore% in' u/en en o% ni(e e% de co e%tero en e 5 !%"! %!ngu,neoI9 $C9 HEn 8u) te:ido% %e 5ueden encontr!r gr!nde% c!ntid!de% de co e%tero I9 $$9 Mencione !% 7i5er i5o5roteine"i!% "<% 'recuente% / en 8ue con%i%ten9 $&9 9HQu) no"*re reci*e e %uero con gr!nde% c!ntid!de% de 8ui o"icrone% / con !%5ecto ec7o%oI E;5 i8ue de 8ue 'or"! inter'iere en o% re%u t!do% de !% 5rue*!% de !*or!torio9 $39 HQu) e% ! !teroe%c ero%i%I9 $#9 HA 8ue %e e deno"in! 7i5er i5ide"i!I9 4!

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$39 HQu) e% ! e%te!torre!I9 RE0ERENCIAS # # # # # # A%%"!n- 09 en2 69 0reten- P9D9 L!ng / 09 Sc7ett er9 Lipoproteine und Her*i$ar). Pit1%troc7?@er !g- B!den9 $L+L9 0!nong- F9P9- Fisiologa Mdica. $$K9 Edicin9 Editori! E M!nu! Moderno9 M);ico9$LLF9 L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 M!t7eW%- Q9C9 / @!n 6o de Q9E9 Bioqumica9 $K Ed9 Editori! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LLF9 NeW%7o "e E9A9 / Leec7 A9R9 Bioqumica Mdica9 $K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LF+9 Tiet1- N9P9- !e(boo) o$ linical 'emistry9 E9 P9B9 S!under% Co9 $LF3

+
METABO%ITOS NITROGENADOS4
DETERMINACIRN DE UREA- CREATININA X CIDO URICO OB1ETI'OS 42

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Re! i1!r< ! deter"in!cin %)ric! de Ure!- Cre!tinin! / cido Urico9 Identi'ic!r< !% 5!to og,!% re !cion!d!% con ! ! ter!cin de o% (! ore% de ure!cre!tinin! / <cido .rico9 Integr!r< ! re! i1!cin de )%t! 5r<ctic! ! "et!*o i%"o de !% 5rote,n!% / <cido% nuc )ico%- d!ndo un en'o8ue ")dico 5!r! ! uti id!d de dic7o% e%tudio%9

INTRODUCCI&N L! ure! e% un "et!*o ito 5roducido en e 7,g!do / e;cret!do 5or e ri>n- co"o 5roducto de c!t!*o i%"o de !% 5rote,n!%9 Cu!ndo e;i%te un! 7e5!to5!t,! gr!(e ! concentr!cin de nitrgeno ureico di%"inu/e / !u"ent! ! concentr!cin de N6 39 L! cre!tin! e% %inteti1!d! en e 7,g!do ! 5!rtir de ! "etionin!- g icin! / !rginin!9 En e ".%cu o e%8ue )tico ! cre!tin! e% 'o%'ori !d! ! 'o%'ocre!tin!- ! cu! e% un i"5ort!nte ! "!c)n energ)tico 5!r! ! %,nte%i% de ATP9 L! cre!tinin! e% un deri(!do de ! 'o%'ocre!tin! 8ue %e e;cret! en ! orin!- %iendo %u t!%! de e;crecin re !ti(!"ente con%t!nte d,! ! d,!9 Cu!ndo %e !cu"u !n en ! %!ngre 5roducto% de degr!d!cin de "et!*o i%"o 5roteico- %e 5re%ent! e %,ndro"e conocido co"o ure"i!= e nitrgeno ureico de ! %!ngre ANUSB / ! cre!tinin! e%t<n e e(!do%- / o% ni(e e% %!ngu,neo% de )%t!% %u%t!nci!% %e e"5 e!n co"o ,ndice de ! gr!(ed!d de ! ure"i!9 E <cido .rico e% 5roducto de c!t!*o i%"o de !% 5urin!%= en e 7o"*re %e e;cret! 5or ! orin!9 L! e;crecin de <cido .rico en un! diet! e;ent! de 5urin!% e% !5ro;i"!d!"ente de C93 gN&# 7r%9 / cerc! de $ gN&# 7r% en un! diet! regu !r9 Cu!ndo ! concentr!cin de <cido .rico %!ngu,neo %e incre"ent!- %e 5roduce un! en'er"ed!d deno"in!d! D0ot!E- 8ue %e c!r!cteri1! 5or !t!8ue% recurrente% de !rtriti%- de5%ito% de ur!to% en !% !rticu !cione%- ri>one% / otro% te:ido%- !%, co"o 5or ! e;crecin de gr!nde% c!ntid!de% de <cido .rico en ! orin!9

0UNDAMENTO UREA L! ure! %e 7idro i1! 5or !ccin de ! ure!%! 'or"!ndo !"oni!co / *i;ido de c!r*ono co"o 5roducto% 'in! e%9 E in !"onio 5roducido en )%t! re!ccin %e co"*in! con e ! '!?cetog ut!r!to / NAD6 en 5re%enci! de g ut!"!to de%7idrogen!%!- d!ndo co"o re%u t!do g ut!"!to "<% NAD9 E con%u"o de NAD6- 8ue %e "ide 5or ! di%"inucin de %u !*%orcin en ! regin u tr!(io et!- e% 5ro5orcion! ! ! c!ntid!d de ure! en ! "ue%tr!2

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Ure! Y & 6&O

??? Ure!%!

CO& Y N6# Y

N6# Y Y ! '!?cetog ut!r!to Y NAD6

?????? 0 ut!"!to D6 0 ut!"!to Y NADY

CREATININA L! cre!tinin! en %o ucin ! c! in! re!ccion! con e 5icr!to 5!r! 'or"!r un co"5ue%to ro:o !n!r!n:!do ARe!ccin de J!'')B- co or 8ue e% "edido 5or ! ectur! en do% 5unto%9 ACIDO URICO E <cido .rico e% con(ertido 5or !ccin de ! uric!%! en ! !nto,n! / 5er;ido de 7idrgeno- e cu! en 5re%enci! de 5ero;id!%!- o;id! ! cro"geno [N?eti ?N?A&?7idro;i? 3?%u 'o5ro5i oB n?to uidin!] en un co"5ue%to de co or ro:o9 REQUISITOS A9 Conte%t!r e cue%tion!rio9 B9 In(e%tig!r !% 5!to og,!% en !% cu! e% %e encuentren ! ter!do% o% (! ore% nor"! e% de ure!- cre!tinin! / <cido .rico9 MATERIA% L Tu*o% de en%!/e $ 0r!di ! $ B!>o M!r,!Nter""etro $ E8ui5o RA 3C # Pi5et!% %ero gic!% de 3 " $ Micro5i5et! de 3C $ Micro5i5et! de &CC $ Micro5i5et! de &C Punt!% 5!r! "icro5i5et! A!1u e% / !"!ri !%B $ Jering! / ig!dur! Torund!% ! co7o !d!% Centr,'ug! $ Cron"etro REACTI'OS SPINREACT 44

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? Ure!2 ZE%t<nd!r9 ZRe!cti(o $ At!"5nB9 ZRe!cti(o & Aen1i"!%B9 ? Cre!tinin!2 ZE%t<nd!r9 ZRe!cti(o $ Are!cti(o 5,cricoB9 ZRe!cti(o & Are!cti(o ! c! ini1!nteB9 ? cido .rico2 ZE%t<nd!r9 ZRe!cti(o $ At!"5nB9 ZRe!cti(o & Aen1i"!%B9 MUESTRA BIO%&GICA4 Suero o 5 !%"! Acon 7e5!rin! o EDTAB- no 7e"o i1!do% o i5)"ico%9 PROCEDIMIENTO A9 DETERMINACIRN DE UREA Pi5ete!r en un tu*o de en%!/e2 B !nco Re!cti(o A" B E%t<nd!r
$%&

P!trn $9C $C ?

Mue%tr! $9C ? $C

$9C ? ?

Mue%tr!
$%&

B9 DETERMINACIRN DE CREATININA

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Longitud de ond!2 Cu*et!9 Te"5er!tur!2 Lectur!2

#L& n" A#LC?3$C n"B9 $ c" de 5!%o de u19 3+ oC9 A:u%t!r e e%5ectro'ot"etro ! cero 'rente ! * !nco de re!cti(o9

Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2 Re!cti(o A" B E%t<nd!r A B Mue%tr! A B B !nco $9C ? ? E%t<nd!r $9C $CC ? Mue%tr! $9C ? $CC

Me1c !r / 5oner en "!rc7! e cron"etro9 Leer ! !*%or*!nci! AA $B ! c!*o de 3C %eg9 / ! c!*o de LC %eg9 AA&B de ! !dicin de ! "ue%tr!9 C! cu !r2 AMA$?A& C9 DETERMINACIRN DE CIDO URICO Pi5ete!r en tu*o% de en%!/e2 B !nco Re!cti(o A" B P!trn A B Mue%tr! A B &9C ???? ???? E%t<nd!r &9C 3C9C ???? Pro* e"! &9C ???? 3C9C

Me1c !r e incu*!r ! 3+ oC dur!nte 3 "inuto% $C "in9 $3?&3 TC9 To"!r ! ectur!9 AN=%ISIS DE RESU%TADOS An! ice o% (! ore% o*tenido% indic!ndo %i %e encuentr!n o no dentro de o% (! ore% nor"! e%9 En c!%o de 8ue no %e encuentren- di%cutir ! c!u%!9 Di%cut! ! (! ,! de ! deter"in!cin de ! ure! / cre!tinin! co"o e(! u!dore% de ! 'uncin ren! 9

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@! ore% de re'erenci!2 Ure!2 Suero2 de $3 ! #3 "gNd A&9#L?+9#L ""o N B9 Orin!2 de &C ! 33 grN&# 7or!%9 Cre!tinin!2 Suero o 5 !%"!2 6o"*re%2 C9+?$9# "gNd 4$9F?$&39+ "o N 9 Mu:ere% 2 C94?$9$ "gNd 339C?L+9& "o N 9 cido .rico2 Suero o 5 !%"!2 6o"*re%2 393?+9& "gNd &CF?#&F "o N 9 Mu:ere% 2 &94?49C "gNd $33?33+ "o N 9 CUESTIONARIO $9 &9 39 #9 39 49 +9 HQu) e% un! ne'ro5!t,!I9 HEn 8u) rg!no% %e 'or"! ! ure! / ! cre!tinin!I9 HQu) e% un! de5ur!cin ren! I9 De'in! e t)r"ino cre!tinuri!- / en 8u) c!%o% %e 5re%ent!9 De'in! e t)r"ino de ure"i!9 E%8ue"!tice e cic o de ! ure!9 Mencione !% 5!to og,!% 8ue %e 5roducen 5or ! de'icienci! de !% en1i"!% de cic o de ! ure!9 F9 Mencione en 8ue c!%o% %e 5roduce un! in%u'icienci! ren! / 8ue otro% e%tudio% %e tendr,!n 8ue re! i1!r 5!r! %u di!gn%tico9 L9 E;5 i8ue ! i"5ort!nci! de ! 'or"!cin de ure! en o% 7u"!no%9 $C9 HQu) e% ! got!I9 $$9 HC"o %e 5uede di!gno%tic!r ! got!I9 RE0ERENCIAS # # # # # 0!nong- F9P9- Fisiologa Mdica. $$K9 Edicin9 Editori! E M!nu! Moderno9 M);ico9$LLF9 L/nc7- J9M9 !nd R!57!e S- S9 Mtodos de Laboratorio9 &K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n!9 M);ico9 $LL$9 M!t7eW%- Q9C9 / @!n 6o de Q9E9 Bioqumica9 $K Ed9 Editori! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LLF9 NeW%7o "e E9A9 / Leec7 A9R9 Bioqumica Mdica9 $K9 Edicin9 Ed9 Inter!"eric!n! Mc0r!W?6i 9 E%5!>!9 $LF+9 Tiet1- N9P9- !e(boo) o$ linical 'emistry9 E9 P9B9 S!under% Co9 $LF3

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ANE[OS

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