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Determinacin de la actividad total de cuajo en la leche 1.

Buffer: Pipetear 10 ml de acido actico 1M con10 g de acetato de sodio trihidratado y mezclar, aforar a 1000ml en baln aforado, si es necesario el pH debe de ser ajustado a 5.5. 2. Solucin de trabajo de cloruro de calcio: Utilizar una solucin madre de cloruro de calcio de 500g/L para realizar una solucin de trabajo de 0.5g/L pesando 2.70 g de cloruro de calcio y aforar en un baln de 2000ml con agua desmineralizada, esta solucin debe ser fresca (2-18C). 3. Preparacin de sustrato: Pesar 110g de leche libre de grasa y caloras en polvo y estril y pasa a un Beacker de 2000ml y agregarle 100ml de la solucin de cloruro de calcio y mezclar manualmente hasta tener una mezcla homognea, adherir 900ml ms de cloruro de calcio. 4. Solucin estndar de Microorganismo Rhizomucor miehei: Pesar 2.5g del microorganismo (ampolla) y agregarlo a un baln aforado de 50ml aadir 15ml de solucin buffer y mezclar. Pipetear 3ml de la solucin anterior en otro baln aforado de 50ml y aforar el baln con solucin buffer. 5. Preparacin de la muestra problema del microorganismo: Servir 3ml o 3 g de la muestra problema, si se utilizan gramos debe ser diluido en solucin buffer y de esta solucin tomar 3 ml. 6. Procedimiento: Pipetear 25ml del sustrato y calentarlo por 12 min, en bao de mara a 32c luego agregar rpidamente 0.5ml de solucin estndar del microorganismo. Activar el cronometro al mismo tiempo y mezclar circularmente, evitando la formacin de espuma, y mezclar con agitador elctrico. Leer el tiempo de coagulacin en el cronometro cuando el primer floculo sea observado en el sustrato o en la pared del matraz. Repetir este procedimiento sin retraso pero cambiando los 3ml de solucin estndar de microorganismo por 3ml de la muestra problema. Realizar cada procedimiento por duplicado, y calcular la media de tiempos de cuajado de estndar y de la muestra problema. Calculo de resultados: Se realizaran segn la formula y los resultados sern reportados por UMCU/ml