PRCTICA N 3.

POLARIMETRA

PRESENTADO POR: DIANA MARA MEJA CARDONA CD. 800813935 JHON EDUARD OCAMPO CD. 800821567

Trabajo presentado en la asignatura de: LABORATORIO ANLISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE: YANED MILENA CORREA NAVARRO

MANIZALES UNIVERSIDAD DE CALDAS INGENIERIA DE ALIMENTOS 2013

POLARIMETRA

OBJETIVOS. Identificar las partes bsicas de un polarmetro y sus funciones. Realizar el anlisis cuantitativo y cualitativo de sustancias pticamente activas. Construir curvas de calibracin para determinar la concentracin de una sustancia pura en una solucin problema. Determinar el efecto de la concentracin y la temperatura n la rotacin especifica de una sustancia problema.

RESUMEN. Una sustancia pticamente activa es aquella que hace girar el plano de vibracin de una luz polarizada; con las mediciones en polarimetra se puede realizar anlisis cualitativo y cuantitativo de estas sustancias para su posterior identificacin, por medio de la rotacin especfica. Durante la elaboracin de esta prctica se determin el efecto de la temperatura y la concentracin en la rotacin especifica de una muestra problema por medio de la tcnica de polarimetra, en la cual se determina el ngulo de giro de una sustancia pticamente activa. El objetivo es aprender a manejar el polarmetro y observar detalladamente como es el ngulo de giro y la rotacin especifica de diferentes muestras problema. Para este caso se utilizan diferentes formas, donde en la sesin cualitativa se identifican las sustancias a una temperatura ambiente y se busca conocer el efecto que tiene la temperatura sobre estas sustancias. Para la sesin cuantitativa se busca realizar una curva de calibracin con el fin de conocer el efecto de la concentracin de la sustancia problema que se est analizando en el polarmetro.

PROCEDIMIENTO Anlisis Cualitativo: 1 Recibir instrucciones sobre el uso del equipo (Polarmetro)

2
Calibracin del equipo con agua destilada

3
Medir el ngulo de giro B, de las sustancias puras y de las muestras problemas

4
Medir la temperatura a la cual se realiz el anlisis

5
Apagar y dejar el equipo en orden

Variacin de la Rotacin Especfica con la Temperatura

1 Recibir instrucciones sobre el uso del equipo y calibrarlo con agua destilada

2
Calentamiento de la muestra problema usando el bao termosttico, para medicin del ngulo de giro a 15, 20, 25,30 y 35 C

3
Apagar y dejar el equipo en orden

Anlisis Cuantitativo: 1 Preparacin de 5 soluciones de diferente concentracin a partir de la solucion madre de la solucin patrn.

2
Purgamiento de la celda del polarmetro.

3
Llenado de la celda con la solucin a medir (muestra problema y las soluciones preparadas a partir de la solucin patron).

4
Lectura del ngulo de giro para cada una de las muestras analizadas.

5
Apagado del equipo y organizacin de todo.

CLCULOS Y RESULTADOS. ANLISIS CUALITATIVO: 1. Medicin del ngulo de giro B para 2 muestras problema
Tabla 1. Resultados de la medicin del ngulo de giro B, de las Muestras problema. ngulo de Giro (B) Sustancia P-SOA-4 Mediciones 15,5 15,55 15,5 3,85 P-SOA-9 3,85 3,8 3,85 24,5 19,25 D-Xilosa 15,5 24,5 77,5 D-Galactosa Mediana Temperatura D Corregida a C 20 C Posible Sustancia

D Corregida a 20 C: Usando la ley de Biot para hallar la rotacin especfica a cada temperatura:

Donde: B= ngulo de giro. = Rotacin especfica de la sustancia. L= Espesor de la capa de la solucin (en decmetros). C= Concentracin de la solucin (en g/ml). Concentracin MP:

Muestra 1 (P-SOA-4):

 Muestra 2 (P-SOA-9):

Anexo 1. Rotaciones Especficas de varios Carbohidratos. Rotacin Especfica (Lnea D, 20 C) +135 +104.0 +19.0 -23.7 +52.7 +14.2 +81.5 -92.0 +138.5 +52.5 +66.5 +200.0

Carbohidratos D-Gliceraldehdo L-Arabinosa D-Xilosa D-Ribosa D-Glucosa D-Manosa D-Galactosa D-Fructosa Maltosa Lactosa Sacarosa Almidn (solucin en CaCl2)

2. Variacin de la Rotacin Especfica con la Temperatura (Muestra P-SOA-4), identificada como D-Galactosa.
Tabla 2. Resultados de la medicin del ngulo de giro B, de la Muestra Dgalactosa a diferentes temperaturas. ngulo de Giro (B) 1 16,95 16,05 P-SOA-4 16,00 15,75 15,05 2 16,90 16,10 15,90 15,80 15,05 3 16,95 16,05 15,90 15,70 15,10 Mediana 16,95 16,05 15,90 15,75 15,05 Temperatura C 15 20 25 30 35 D Corregida a 20 C 84,75 80,25 79,50 78,75 75,25

Sustancia

Muestra de clculo para determinar la rotacin especifica de la muestra a diferentes temperaturas. A 15 C:

Grfica 1. Comportamiento de ngulo de giro (B), de la sustancia Dgalactosa con variacin de la temperatura.

ngulo de Giro Vs. Temperatura

17.50 ngulo de Giro (B) 17.00 16.50 16.00 15.50 15.00 14.50 0 5 10 15 20 25 30 35 40 Temperatura (C)

y = -0,082x + 17,99 R = 0,9028

ANLISIS CUANTITATIVO: Preparacin de Soluciones : Se prepararon 5 disoluciones de 10 ml cada una con concentraciones entre es decir desde , a partir de la muestra patrn P-SOA-9 identificada como D-xilosa, en medio acuoso con una concentracin del Para esto se utiliz la igualdad:

Dnde:

Muestra de Clculo: , , ,

Tabla 3. Resultados de la medicin del ngulo de giro B, de las Muestras patrn y la muestra problema. ngulo de Giro (B) 1 0,20 0,40 0,30 0,80 1,30 0,60 2 0,15 0,25 0,40 0,80 1,45 0,60 3 0,10 0,35 0,45 0,70 1,30 0,55 Mediana 0,15 0,35 0,40 0,80 1,30 0,60

Concentracin Sustancia % 1 3 P-SOA-9 (D-xilosa) 5 7 9 MP P-SOA-9 ?

Volumen a tomar (ml) 1,25 3,75 6,25 8,75 11,25 -----

D
0,75 1,75 2,00 4,00 6,50 3

La rotacin especfica se determina de igual forma que en la tabla 1 y 2, con L = 1 dm y C = 20%.

Grfica 2. Curva de calibracin de D-xilosa, a temperatura ambiente.

ngulo de Giro Vs. Concentracin

1.4 ngulo de Giro (B) 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 2 4 6 Concentracin (%) 8 10 y = 0.1375x - 0.0375 R = 0.9634

El coeficiente de correlacin arrojado por la tendencia de las cinco mediciones realizada fue igual a 0.9057; este coeficiente debera estar mayor a 0.95, el cual asegurara una relacin ms lineal entre la concentracin y el ngulo de giro.

Para efectos de obtener un coeficiente de correlacin, ms aceptable y confiable, se elimin de la curva el punto correspondiente a la concentracin del 5%; obteniendo entonces un coeficiente de 0.96. Con la ecuacin que nos presenta la grfica se calcul la concentracin de la muestra problema.

Concentracin de la muestra problema:

ANLISIS DE RESULTADOS. Al encontrar la rotacin especfica de las muestras problemas en el anlisis cualitativo y compararlas con los datos de la referencia bibliogrfica, se pudo determinar que la muestra P-SOA-4 y PSOA-9 analizadas son D-Galactosa y D-Xilosa, respectivamente, ya que la rotacin especfica de estas son 81.5 y 19.0 (Anexo 1) y la encontrada en la prctica es de 77.5 y 19.25 respectivamente a temperatura ambiente, los cuales son valores relativamente cercanos a los datos bibliogrficos, obteniendo los siguientes porcentajes de error:

El porcentaje de error en la identificacin de la sustancia DGalactosa correspondera entonces al 4.90 %, y el porcentaje de error de la sustancia D-Xilosa 1.31 %.

En las Tablas 2 y 3, se puede observar el efecto de la temperatura y la concentracin en la rotacin especifica. Como se puede observar en la Tabla 2, la temperatura tiene una relacin inversamente proporcional con la rotacin especfica, ya que a medida que aumenta la temperatura disminuye la rotacin especfica (a 15 C se tiene una de 84.75 y a 20 C una de 80.25). Mientras en la Tabla 3 se puede observar que hay una relacin directamente proporcional entre la Concentracin y la rotacin especfica, ya que a medida que aumenta una la otra tambin aumenta (a una concentracin de 0.01g/ml se tiene un de 0.75 y a 0.03 g/ml una de 1.75). Lo expuesto anteriormente tambin se puede inferir de igual forma observando las grficas correspondientes a cada tabla (grfica 1 y 2). La relacin entre el ngulo de giro y la concentracin es lineal, por lo que el valor del contenido de la muestra problema P-SOA-9 se pudo hallar por medio de la ecuacin de la lnea recta dando como resultado 0.046 g/ml, despus de realizar una curva de calibracin. En la cuantificacin de muestras problemas es importante conocer primero su ngulo de giro, para establecer las concentraciones con las que se realizaran la curva de calibracin, que servir posteriormente para la identificacin de esta. Si se desconoce el ngulo de giro de la sustancia problema, y se realiza la curva de calibracin sin tener en cuenta este parmetro, para la preparacin de los patrones; al momento de la identificacin podra evidenciarse un error de extrapolacin, es decir que el ngulo de giro B de la sustancia problema , no se encuentre dentro de los datos graficados, obteniendo entonces un porcentaje de error amplio y un resultado poco confiable, en cuanto a la identificacin de sustancias por curva de calibracin.

CONCLUSIONES.

Al momento de comenzar la prctica es necesario realizar la calibracin al equipo para en caso de existir una descalibracin se deba corregir las lecturas posteriores y as poder obtener buenos resultados, en este caso no fue necesaria la correccin de datos debida a este factor. La adecuada formulacin, preparacin e identificacin de las soluciones patrones son de vital importancia pues su concentracin es un factor importante en la medida del ngulo de giro. Se ha demostrado que la temperatura y la concentracin son muy importantes al momento de analizar una sustancia pticamente activa ya que estos parmetros afectan la rotacin de la sustancia a analizar, adems de estos dos parmetros es importante mencionar que la rotacin tambin es afectada por la longitud de onda de la fuente de luz que se utiliza. Los resultados obtenidos en la presente prctica, permitieron comprobar que la concentracin tiene una relacin directamente proporcional con el ngulo de giro B, de una sustancia pticamente activa, como lo afirma la ley de Biot; por lo que la determinacin cuantitativa realizada, puede ser confiable para posteriores investigaciones. Las mediciones de la rotacin ptica pueden emplearse para determinar la concentracin y/o la pureza de una sustancia, o simplemente para detectar la presencia de una sustancia qumica pticamente activa en una mezcla. La polarimetra es empleada en control de calidad, control de procesos e investigacin. La temperatura a la cual se encuentra la sustancia, el tiempo transcurrido, la presencia o ausencia de catalizadores, retardan o aceleran la inversin de la sacarosa en sus carbohidratos ms simples.

PREGUNTAS.

1. En un polarmetro como se obtiene la luz polarizada? Un haz de luz ordinaria est formado por ondas electromagnticas que oscilan en una cantidad infinita de lados y las direcciones forman ngulo recto con la direccin de propagacin de la luz. Sin embargo, cuando un haz de luz ordinaria pasa por un dispositivo llamado polarizador, slo lo atraviesan las ondas luminosas que oscilan en un plano, de ah el nombre de luz polarizada en un plano. Las ondas luminosas en los dems planos son detenidas. 2. Para qu se utilizan los dispositivos de media sombra? Se utilizan para graduar exactamente el ngulo de rotacin de la sustancia pticamente activa. Es el ngulo entre los planos de luz polarizada por las mitades del polarizador pero el ngulo debe ser lo suficientemente grande para que permita pasar bastante luz para una visibilidad efectiva. Los dispositivos de media sombra son usados para realizar enfocar y ubicar la el espacio en el que se debe tomar la medida del ngulo de giro. 3. Qu son mezclas racmicas y mutarrotacin? Las mezclas racmicas son aquellas en el cual sus productos son originarios de una serie de reacciones qumicas, donde su actividad ptica se encuentra en una forma igual tanto en el levgiro como dextrgiro en una misma proporcin. La mutarrotacin es un proceso de isomerizacin que ocurre en monosacridos referido a la rotacin que sufre el carbono anomrico al pasar de un confiomtro a otro. Este puede pasar de un enlace de carbono beta y viceversa. 4. Consultar en que consiste la Escala Internacional del Azcar. La escala internacional de azcar ICUMSA, fija las bases de los mtodos polarimtricos permitiendo la determinacin de las relaciones entre las rotaciones pticas causadas por soluciones acuosas de una muestra y la causada por una solucin de sacarosa pura de una concentracin predefinida

5. Consultar una determinacin analtica en la que se utilice la polarimetra como tcnica instrumental. La polarimetra es utilizada en la Industria Alimenticia, como mtodo para determinacin de concentracin en soluciones, especialmente en la Industria azucarera. En esta industria se emplea para: Determinar la pureza del azcar comercial (sacarosa), o la cantidad de sacarosa contenida en una muestra; conociendo el poder rotatorio especfico de la sacarosa, en solucin acuosa, con luz de sodio y a temperatura ambiente. Utilizando la ley de Biot para soluciones, se puede calcular el poder rotatorio especfico de una muestra, a una determinada longitud de onda y temperatura: = []. L .C = ngulo de rotacin []: rotacin ptica especfica (0.ml.dm-1.g-1) L: longitud del tubo (dm) C: concentracin de la muestra (g/ml)

BIBLIOGRAFA.

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