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Los microarreglos de DNA son soportes slidos en los cuales se encuentran inmovilizados, en un rea pequea, de cientos a miles de genes

de manera ordenada. Los soportes slidos pueden ser laminillas de vidrio para microscopio, laminillas de silicon o membranas de nylon.

Cabe mencionar que los microarreglos de DNA son una versin paralela y masiva a las tcnicas de Northern y Southern blot; sin embargo, en vez de que las sondas de oligonucletidos sean reconocidas a lo largo de un gel de DNA o RNA.

En el microarreglo, las sondas son inmovilizadas en una superficie slida. Adems, la muestra no se marca con istopos radioactivos, en su lugar se usan colorantes fluorescentes que pueden detectarse por un escner.

Los microarreglos pueden ser divididos en dos tipos principales, los cuales difieren en su construccin y en el nmero de condiciones que se pueden monitorear en cada caso.

Los cuales tambin se conocen como microarreglos de dos colorantes y permiten comparar dos condiciones en la misma laminilla.

En estos microarreglos, las molculas de inters son depositadas directamente sobre la superficie slida. La composicin de la superficie slida en la cual se depositan las molculas determinar cmo es que stas sern inmovilizadas en la superficie.

Los cuales slo permiten monitorear una condicin por arreglo.

Diseo del microarreglo. Fabricacin del arreglo. Extraccin y marcado del RNA de cada una de las muestras. Hibridizacin, en el arreglo, de los cDNAs marcados. Lectura del arreglo. Cuantificacin de la imagen.

Durante este proceso se produce la seleccin del tipo y cantidad de material biolgico que se va a inmovilizar sobre la superficie, que variar en funcin del tipo de experimento que se desee llevar a cabo.

Este paso determina la densidad de integracin que se puede lograr en un microarreglo. Por lo general se comercializan los microarreglos ya listos y se piden personalizados.

En este paso se realiza la extraccin y purificacin del material a analizar, un proceso de amplificacin si es necesario y el marcaje. Los marcadores empleados son los fluorescentes Cy3 Cy5.

Se

produce la reaccin de afinidad en la que se hibridan las hebras de DNA de las muestras marcadas.

El lavado se realiza para eliminar las interacciones inespecficas que se dan entre la muestra y el material inmovilizado o la superficie del arreglo.

Las ms comunes son la utilizacin de escneres lser y cmaras CCD (Charge-coupled device) para la deteccin de marcadores fluorescentes.

En este paso se analizan las imgenes de 16 bits obtenidas para cada una de las longitudes de onda en los que la reaccin de hibridacin ha sido positiva o no.

http://www.hospitalameijeiras.sld.cu/hha/m pm/documentos/ANATOMIA/GP/TECNICAS %20DE%20BIOLOGIA%20MOLECULAR.pdf Gentica humana: fundamentos y aplicaciones en medicina, Alberto Juan Solari http://www.alfabeta.net/notas/tema21/nota-556-21.xtp http://bacteria.fciencias.unam.mx/bioinfor matica/micro.htm