Editorial para AFT

Un cuento de patch-clamp
Corra el ao 1991 cuando me encontraba paseando por una cntrica calle de Montevideo. Al pasar por un kiosko de peridicos vi las fotos de los profesores Erwin Neher y Bert Sakmann. Era la noticia de que haban ganado el Premio Nobel de Medicina por el descubrimiento de las tcnicas electrofisiolgicas de patch-clamp. Casualmente, antes de emprender mi viaje a Amrica de Sur, haba enviado a don Adolfo Berzosa, director de la revista Noticias Mdicas, un artculo para mi columna Farmacoterapia. Se titulaba Erwin Neher y el patch-clamp y vio la luz coincidiendo con la noticia de la concesin del galardn. El Premio Nobel no cambi la aficin de Erwin por el laboratorio, que sigui trabajando con sus doctorandos y postdoctorandos, actividad que contina a da de hoy. No cabe duda de que en aquellos aos que siguieron a 1991 sufri las consecuencias de la fama, pero ello no le ha apartado un pice de la ciencia y de sus amigos. Esos dos ingredientes, ciencia y amistad, han trado a Erwin Neher y a su esposa Eva Neher a Madrid y Molina de Segura. Su estancia con nosotros durante la primera semana de mayo de 2009 ha sido muy intensa e interesante. Uno de los motivos de la visita a Madrid de Erwin fue tomar posesin de su silln como Acadmico de Honor de la Real Academia Nacional de Farmacia, en un solemne acto que presid la profesora Mara Teresa Miras Portugal, la Real Academia Nacional de Farmacia celebr un vistoso acto acadmico. En su discurso de recepcin record las circunstancias que le condujeron al descubrimiento de la tcnica de patch-clamp. Con su habitual brillantez expositiva, el profesor Juan Tamargo hizo una laudatio rigurosa y objetiva, destacando el impacto que tuvieron estas tcnicas: la publicacin original en la revista Pflgers Archives European Journal of Physiology ha recibido casi 16.000 citaciones en el periodo 1981-2009. Por otra parte se ha pasado de 3 artculos que incluan la palabra channel en su ttulo en 1970 a ms de 1000 en 1990 y a 118.500 en mayo de 2009. Hoy es habitual encontrar

los esquemas de la tcnica de patch-clamp junto a las fotografas de Erwin Neher y Bert Sakmannn en los ms variados textos de farmacologa, fisiologa y neurociencias.

Los orgenes de la tcnica de patch-clamp Cmo se lleg al descubrimiento de la tcnicas de patch-clamp?Cul ha sido su significado? Estas preguntas me retrotraen a la dcada de los 60 del siglo XX, cuando era estudiante de Medicina en la madrilea Universidad Complutense. Recuerdo cuando me encontraba perdido, fsica e

intelectualmente, en medio de centenares de alumnos hacinados en gigantescos anfiteatros semicirculares. Escuchaba al profesor Antonio Gallego tronar con su potente voz, intentando hacernos comprender las bases inicas del potencial de membrana y del potencial de accin de la neurona. Don Antonio nos contaba los experimentos de Hodking, Huxley, Katz, Cole y Frankenhaeuser en el axn gigante del calamar. Desde los aos cincuenta, era imperativo recurrir a esta preparacin, o a neuronas gigantes de caracol para poder estudiar los mecanismos bsicos de la excitabilidad elctrica. Para fijar el potencial de membrana haba que introducir dos electrodos en el interior celular, lo que era posible solo en estas clulas gigantes. Durante decenas de aos, los electrofisilogos acariciaban la idea de poder estudiar las corrientes inicas en neuronas y otras pequeas clulas de mamferos; pero dadas las dificultades tcnicas tuvieron que conformarse con hacer extrapolaciones de aquellas clulas primitivas a estas. En lo aos cincuenta-sesenta coincidieron en el University College de Londres un alemn (Bernard Katz), un espaol (Jos del Castillo) y un mejicano (Ricardo Miledi) quienes realizaron un anlisis exhaustivo de la liberacin de la acetilcolina en la placa motora, as como de las seales elctricas que sta generaba al estimular los receptores nicotnicos ubicados en la superficie de la fibra muscular esqueltica (potenciales miniatura, potencial de placa y potencial de accin). Antes de la llegada de estas tcnicas todo era especulaciones acerca de las estructuras de la membrana celular que generaban el potencial de membrana, el potencial de accin y su propagacin. Se hablaba, eso si, de transportadores y se especulaba con la presencia de

verdaderos canales o poros inicos en la membrana celular. Los registros de los cambios elctricos observados por estos y otros electrofisilogos presentaban pequeas oscilaciones que hicieron sospechar se trataba de aperturas y cierres de canales inicos nicos. El reto de poder captar y analizar la diminuta corriente que flua por uno solo de aquellos canales inicos fue el motor para el descubrimiento de las tcnicas de patch-clamp.

La tcnica Para registrar la corriente que flua a travs de un solo canal se necesitaba aislar elctricamente un pequeo parche de membrana. Para ello, Neher y Sakmann pulieron con calor una micropipeta de vidrio de 0,5-1 micrmetros de dimetro rellena de una solucin salina. Al contactar con la limpia superficie de una clula aislada de msculo esqueltico de rana, observaron que se formaba un sello entre la membrana celular y la punta de la pipeta. Cuando intentaron por vez primera este experimento, Neher y Sakmann encontraron una grave dificultad tcnica: el parche de membrana no estaba bien aislado de su entorno, por lo que la corriente que flua a travs de la pipeta se escapaba en parte; la seal obtenida por el amplificador no reflejaba toda la corriente generada en el parchecito de membrana incluido en el circulito de la punta de la micropipeta. Sin embargo, fueron afortunados en la seleccin de la clula y del canal inico. La clula proceda de un msculo esqueltico denervado de rana, cuyo nmero de receptores nicotnicos para la acetilcolina estaba incrementado drsticamente, cosa que saba Sakmann, ya que haba hecho un postdoctorado de 3 aos junto a Bernard Katz, en el londinense University College. El canal inico asociado a ese receptor conduce una cantidad elevada de corriente. Por ello, a pesar de que el sello era laxo, pudieron obtener los primeros registros de corrientes a travs de canales inicos individuales, registros que vieron la luz en la revista Nature, en 1976. Cinco aos despus, los esfuerzos de Neher por mejorar la tcnica se vieron compensados por dos innovaciones tan simples como espectaculares en sus resultados. La firmeza del sello pipeta-membrana se mejor en un factor de 100 a 1000 veces utilizando una pipeta nueva para cada sello bien pulida y limpia, y por la aplicacin de una ligera succin a travs de la pipeta, una vez que su punta contacta la superficie celular. As, un pequeo parche de la

membrana se introduce en el interior de la punta de la micropipeta, formado una semivescula en forma de omega. Erwin obtuvo este sello tras muchos meses de intentarlo en largos das de experimentos. Y una tarde de sbado, en marzo de 1980, segn me cont, estaba terminando de utilizar las pipetas que le quedaban, pues no poda dejarlas para el da siguiente. La punta de la pipeta pulida al fuego deba estar limpia y si se guardaba para das sucesivos, una simple motita de polvo poda impedir la formacin de un sello de alta resistencia (gigasello). De esta manera se instaura un sello firme, que muestra una elevadsima resistencia al paso de la corriente, quedando as el parche de membrana aislado elctricamente del resto de la membrana celular y del medio extracelular. Este gigasello ha permitido el registro de corrientes en canales nicos en casi todos los sistemas celulares explorados; ello se debe a la drstica disminucin del ruido de fondo que tanto perturbaba los registros de corrientes en los primitivos sellos ms laxos. Estas modificaciones tcnicas se publicaron en 1981 en la revista alemana Pflgers Archives European Journal of Physiology figurando como coautores Neher, Hamil, Marty, Sakmann y Sigworth; 27 aos despus, este trabajo es probablemente uno de los ms citados en la literatura cientfica de todos lo tiempos.

Posibilidades de la tcnica Hasta la aparicin de las tcnicas de patch-clamp, el registro de la actividad elctrica de una clula poda hacerse solo por expertos

electrofisilogos y en un nmero limitado de clulas de suficiente tamao. Hoy, los equipos de patch-clamp se ven en laboratorios de bioqumicos, farmaclogos y fisilogos como si de una tcnica ms se tratara. Erwin Neher dot a esos equipos de una elevada automatizacin, as como de programas de ordenador que permiten el anlisis de los datos obtenidos por cualquier investigador medianamente familiarizado con la metodologa. As pues, el mrito de Neher no es solo la ideacin de equipos y metodologas para estudiar la actividad de un solo canal inico, sino el haberlos simplificado a fin de hacerlos asequibles a cualquier clula, por pequea que sta sea. Otra ventaja de la tcnica es el acceso directo al interior celular. Rompiendo mediante succin el parche de membrana, el interior de la pipeta se comunica con el interior celular. De esta manera pueden medirse corrientes

inicas en clulas tan pequeas como los eritrocitos y plaquetas, clulas cromafines, clulas adenohipofisarias y neuronas de varios tipos. A travs de la pipeta pueden introducirse tambin sondas fluorescentes en la clula, o anticuerpos, pptidos, frmacos o enzimas cuyo mecanismo de accin sobre un determinado canal inico se desea explorar. En suma, con esta metodologa puede manipularse con facilidad la composicin del medio intracelular. Otra ingeniosa estrategia consiste en el estudio simultneo de corrientes inicas, de los cambios en la concentracin de calcio citoslico y de la liberacin de catecolaminas en una sola clula cromafn. Para ello, con una micropipeta de patch-clamp Neher inyect fura-2 (una sustancia que emite fluorescencia al combinarse con calcio) en una sola clula cromafn de la glndula suprarrenal. Con la misma micropipeta pudo estimular la clula, que genera una corriente de calcio hacia el interior celular al abrirse los canales de calcio dependientes del voltaje. El calcio que entra se combina con el fura-2, cuya seal fluorescente es captada por un equipo de microfluorometra acoplado a un microscopio invertido y al sistema de patch-clamp. Finalmente, la misma micorpipeta puede medir la capacidad elctrica de la membrana

celular, que es proporcional a la superficie celular. Las vesculas que almacenan catecolaminas se fusionan con el plasmalema y su membrana se incorpora transitoriamente a la membrana plasmtica, incrementando la

superficie de la clula as como su capacidad elctrica; esta capacidad es directamente proporcional a la intensidad del fenmeno secretor. El registro simultneo de estos tres parmetros ha permitido a Neher y colaboradores el esclarecimiento de cmo los niveles de calcio citoslico regulan la liberacin de neurotransmisores y hormonas en varios tipos de clulas secretoras.

El cliz de Held En su preciosa conferencia en la Real Academia Nacional de Farmacia, Erwin dej bien claro que no iba a hablar solo del descubrimiento de la tcnica patch-clamp y de sus implicaciones para el conocimiento de las propiedades biofsicas y farmacolgicas de los canales inicos. Ya mencion antes que la concesin del premio Nobel a Erwin, cuando tena solo 42 aos, no merm su entusiasmo por la investigacin. Al contrario, ahora que tena la herramienta quiso sacarle el mximo partido. He escuchado a Erwin impartir conferencias y

seminarios de investigacin y siempre sorprende a la audiencia con resultados recientes y novedosos. Eso ocurri tambin en la Real Academia Nacional de Farmacia. Se refiri a sus experimentos de los ltimos aos en una sinapsis grande, con una terminacin que rodea la neurona postsinptica, y que a modo de cliz, fuera descrita por Held en 1893 en el bulbo olfatorio. Erwin mencion que Cajal estudi en profundidad esta sinapsis porque encajaba en su teora neuronal. Erwin y sus colaboradores colocaron un electrodo de patch-clamp presinpticamente y otro postsinpticamente en el cliz de Held del tronco del encfalo de la rata. De esta manera pudieron estudiar la liberacin rpida de neurotransmisor (medida en forma de corrientes postsinapticas) inducida por la fotoliberacin de calcio en la terminacin presinptica, en una escala de tiempo de microsegundos. Con esta elegante preparacin ha demostrado por primera vez, en una sinapsis de mamferos, que la liberacin de neurotransmisores se debe a la gnesis de un transiente citoslico de calcio de 10-20 micromolar, que tiene una vida media de tan solo 500 microsegundos. Esta rapidez solo es posible con una localizacin muy prxima de los canales de calcio y de la maquinaria de la exocitosis en la terminacin nerviosa presinptica. Erwin continu la charla comentado otras funciones del calcio, particularmente una que ha perseguido durante ms de dos dcadas, primero en la clula cromafn de la suprarrenal y ahora en el cliz de Held: el transporte e incorporacin de nuevas vesculas sinpticas est controlado por pequeas elevaciones de la concentracin de calcio libre en el citosol. Este proceso es vital para mantener la neurotransmisin de forma prolongada, as como para asegurar la eficacia sinptica y los fenmenos de facilitacin y depresin de dicho proceso. Finaliz con algunos apuntes farmacolgicos, para hacer honor al ambiente farmacutico en que se encontraba.

Una conferencia autobiogrfica dirigida a 700 estudiantes de bachillerato de Molina de Segura Erwin haba aceptado mi invitacin para pasar un fin de semana en Murcia. Pasamos el 2 de mayo en Caravaca y, tras los desfiles y carreras de los afamados Caballos del Vino, comimos en el castillo pues el alcalde, don Domingo Aranda Muoz tuvo la amabilidad de invitarnos. El domingo cambiamos la montaa del interior de Murcia por la costa, para admirar con

tranquilidad el recin estrenado museo de Moneo y el teatro romano de Cartagena. Comimos opparamente en el Restaurante Ramn de Los Alczares, a base de marisco y el tpico caldero del Mar Menor, un arroz con sabor a mjol. Un largo paseo por la tranquila playa de Los Alczares hizo las veces de digestivo. A media maana del lunes, en el teatro Villa de Molina, repleto de estudiantes de bachillerato de Molina de Segura y de los pueblos vecinos (Alguazas, Torres de Cotillas, Lorqu, Ceut) tuvo lugar un curioso acto acadmico y cientfico. Desde hace casi una dcada, la Fundacin de Estudios Mdicos de Molina de Segura (FEM) organiza diversas actividades para difundir la ciencia y aumentar la sensibilidad de los ciudadanos por los avances mdicos. Dos de esas actividades van dirigidas a los estudiantes de los seis centros de enseanza secundaria de Molina de Segura. Por una parte, la FEM concede becas a seis alumnos (uno por centro) para que asistan a los cursos de verano que organiza Eva Mara Neher en el llamado X-LAB de la universidad de Gotinga. Eva cont a los alumnos la historia de esta interesante actividad, a la que acuden jvenes estudiantes de 46 pases de todo el mundo, incluyendo los de Molina de Segura. En el marco de la actividad a la que me refera, la FEM financia la visita a Molina de Segura de jvenes cientficos para que en cuatro ocasiones distintas a lo largo del curso acadmico, impartan un seminario cientfico autobiogrfico en cada uno de sus seis centros de enseanza secundaria. La idea es que los alumnos entiendan las motivaciones que condujeron a estos jvenes cientficos a dedicar su vida a la tarea investigadora en el rea de la ciencia en general, y de las ciencias mdicas en particular. En este marco, y aunque Erwin ya no es un joven cientfico (cuenta con 65 aos en su haber) si accedi a impartir uno de estos seminarios. Dado el xito que tuvo la idea, tuvimos que concentrar a los alumnos en el magnfico Teatro de Molina. Erwin les explic (en ingls, claro) cmo discurri su niez, su aficin por la biologa y la biofsica, sus estudios de fsica, su doctorado con Hans Dieter Lux (el padre de la moderna electrofisiologa alemana) y las ideas que precedieron al descubrimiento de la tcnicas de patch-clamp, sobre la gnesis y conduccin del impulso nervioso. Puso ejemplos didcticos sobre la corriente necesaria para encender el filamento de una bombilla y la diminuta corriente

que circula por un solo canal inico, un billn de veces ms pequea. Luego describi la estructura y funcin de la sinapsis, refirindose a Cajal, y las posibilidades de esta potente y resolutiva metodologa para entender, un poco mejor, la comunicacin neuronal y el funcionamiento de nuestro cerebro. En el vivo coloquio que sigui a la conferencia hubo alumnos que le preguntaron en alemn, en ingls y en espaol. Yo hice de intrprete pero tuve la sensacin, a juzgar por los duraderos y apretados aplausos con que los bachilleres, despidieron a Erwin, que no olvidaran esta experiencia con un Premio Nobel. Quizs ms de uno de esos 700 bachilleres dediquen su vida a la ciencia y, quizs, la charla de Erwin haya servido de catalizador de esa vocacin. Con esa idea organizamos estas actividades en mi ciudad natal.

XV Leccin Conmemorativa Tefilo Hernando y XXXII Minicongreso de Farmacologa de los Estudiantes de Medicina Tras un rpido refrigerio pusimos rumbo a Madrid. Eva, Estrella, Erwin y yo comentbamos la necesidad de que los jvenes espaoles hablen correctamente el ingls, como lo hacen los jvenes del Centro y Norte de Europa. Todo llegar, pensamos. Durante el viaje admiramos las cuidadas arboledas de melocotoneros de Cieza, las de albaricoqueros de Tobarra y los verdes y ondulados campos de cereales de Albacete y Cuenca, antes de llegar a las tierras hoscas del sur de Madrid. Al da siguiente, Erwin imparti la XV Leccin Conmemorativa Tefilo Hernando, en el saln de actos de la Facultad de Medicina de la Universidad Autnoma de Madrid, que organiza cada dos aos la Fundacin Tefilo Hernando. Se celebra en el marco del ya tradicional Minicongreso de Farmacologa, que los estudiantes de medicina organizan con el asesoramiento de un profesor, este ao la doctora Mara Cano Abad. En esta conferencia Erwin present los datos ms recientes de su laboratorio, obtenidos en la sinapsis del cliz de Held combinando tcnicas de patch-clamp y de imagen, que ya he comentado anteriormente. Su mensaje se centr en las distintas funciones del calcio que regula, segn su procedencia, y la rapidez de los cambios de su concentracin, las distintas etapas de la exocitosis, base de la neurotransmisin y la comunicacin neuronal. Luego hicimos una rpida visita a la casa del profesor Lus Hernando y junto con otros amigos, tras un gape rpido, nos fuimos al aeropuerto. Cuando

conduca a Erwin y Eva al aeropuerto pensaba en una de mis visitas a Gotinga, y en mi larga amistad con ellos.

La personalidad de Erwin y el impacto de sus contribuciones cientficas Un mes de julio de 1991, justo dos meses antes de la noticia del Premio Nobel, la tarde caa lentamente en la Sajonia Alemana. Erwin y yo contemplbamos desde su coche los bellos valles de los alrededores de Gotinga. Los colores de los campos de cereales verdiamarillentos contrastaban con los verdes de las grandes arboledas que los circundaban. No se parecan a los amarillos sin fin de las llanuras manchegas durante los meses estivales, donde slo el verde de algn pino o encina aislado, rompe ese mar amarillo. Llegamos a un pueblecito de la Antigua Alemania del Oeste, Dderstadt, con una iglesia de torre afilada y casas centenarias con fachadas plagadas de flores. Seguramente, desde la Universidad de Gotinga, alguno de los hermanos Grimm se deslizaba hacia aquel pueblecito de ensueo para obtener una dosis de inspiracin para alguno de sus cuentos de hadas, brujas, magos, prncipes, princesas y dragones. Luego, Erwin me llev a otro pueblecito cercano, Heilligenstardt (Ciudad de los Santos), ya en la antigua Alemania del Este. Era un lugar solitario; con casas a medio construir, otras en reparacin y escaparates de tiendas semivacos, en proceso de transformacin. Erwin me contaba los pormenores de la reunificacin alemana, pero yo inquira por los pormenores del descubrimiento de las tcnicas de patch-clamp. Saqu la impresin de que no le daba la mayor importancia, y que atribua al azar y la suerte muchos de los hallazgos que condujeron a tan notorio descubrimiento. A travs de un programa de intercambio y colaboracin mutua, he tenido la oportunidad y la suerte de compartir con el profesor Neher, en mi laboratorio y en el suyo, experiencias cientficas y humanas. En junio de ese ao, un cientfico de la Clnica Mayo, de EE.UU. imparta un seminario de investigacin en mi Departamento de Farmacologa de la UAM. Erwin estaba entre el pblico. Al finalizar el Seminario se lo present y exclam, sorprendido de encontrarle en aquella audiencia: Oh, you are Neher, the man of the patch-clamp!!!. Esta ancdota refleja el impacto que han tenido sus descubrimientos en la comunidad cientfica internacional.

Hay otra nota curiosa sobre la universalidad de sus aportaciones cientficas. Cuando Erwin y yo contemplbamos el desfile de los caballos ataviados tan espectacularmente, subidos al pedestal de una farola de la abarrotada plaza del Ayuntamiento de Caravaca, se acerc a nosotros una joven. Confes a Erwin su sorpresa al verle en aqul lugar contemplando ese desfile de charangas y caballos, y le pidi hacerse con l una fotografa. Erwin accedi gustoso y mientras hacan la fotografa a los dos, la joven le cont que era una cientfica que trabajaba en Valencia y que conoca sus tcnicas. En Caravaca de la Cruz! Pocas veces una metodologa es causa de una revolucin cientfica que facilita el avance de la ciencia a pasos de gigante. As ocurri con los rayos X para el diagnstico mdico, la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) o la resonancia magntica funcional. La de patch-clamp puede, sin duda, ubicarse al mismo nivel que esas tcnicas. En los 25 aos de su utilizacin en cientos de laboratorios de todo el mundo, el patch-clamp`ha permitido identificar y caracterizar la biofsica y la farmacologa de decenas de canales inicos de clulas excitables, grandes (neuronas de Purkinje) y pequeas (plaquetas). Incluso ha permitido registrar corrientes inicas en una sola mitocondria! Esta variedad de canales ha permitido el estudio del mecanismo de accin de los frmacos ms variopintos, sobre las cinticas de apertura y cierre de esos canales, sobre su participacin en la liberacin de neurotransmisores, en la contraccin muscular o en la secrecin de hormonas. Ello ha permitido esclarecer la funcin de muchos canales y protenas, lo que se facilita mediante la expresin de su ADN en lneas celulares como las de rin de embrin humano. Cuando el 5 de mayo pasado present a Erwin con ocasin de la XV Leccin Conmemorativa Tefilo Hernando recurr a dos palabras de nuestra hermosa lengua castellana, impacto y generosidad. Para resumir el impacto de sus aportaciones cientficas suger a estudiantes y profesores que abrieran el ndice de las ediciones recientes de los clsicos libros de bioqumica (Lehninger), fisiologa (Guyton), farmacologa (Goodman), neurociencia (Bear) o medicina (Harrison) y que buscaran las palabras patch-clamp o Neher; las veran reflejadas en sus pginas.

La segunda palabra a la que recurr, generosidad, la ilustr con la siguiente ancdota. En 1990, un ao antes de conocerse la noticia del Nobel, ped a Erwin que me ayudara a montar el primer equipo de patch-clamp de mi laboratorio. Me envi una lista de los componentes del equipo y sugerencias sobre el tipo de amplificadores que podran servirme para registrar las corrientes que fluyen por los distintos subtipos de canales de calcio. Le ped que viniera a ayudarnos cuando tuviera disponibles todos lo equipos. Acept mi invitacin y se present en mi laboratorio en junio de 1990. El plan era que l vendra solo durante el mes de junio y que en julio se uniran a l Eva Mara, su esposa, y sus cinco hijos, Richard, Benjamin, Carola, Sigmund y Margaret. Encontr un piso para albergar a la familia Neher en una agradable urbanizacin de Alpedrete, piscina incluida, lo que mitig los rigores del calor de julio. La urbanizacin en que aloj a Erwin estaba pegada a la estacin de cercanas de Alpedrete. As que, el primer lunes despus de su llegada a Alpedrete pas a recogerle a las 8 y nos fuimos en un tren hasta la estacin del Hospital Ramn y Cajal. Desde all fuimos paseando hasta la Facultad de Medicina de la UAM, situada junto al hospital de La Paz. Le dej un pequeo despacho junto a mi laboratorio y cuando los profesores Lus Ganda y Antonio Artalejo fueron a pedir asesorarmiento a Erwin para iniciar el montaje del equipo, el entonces casi Nobel se fue al laboratorio, ech una ojeada, se sent frente al microscopio y pidi unos pequeos alicates para montar una conexin elctrica. As, da tras da, Erwin puso a punto, con sus propias manos y la ayuda de mis colaboradores, a los que inici en sus tcnicas, los equipos para medir corrientes de calcio y seales citoslicas de calcio en una sola clula. Generosidad. Estoy asombrado que an hoy, a sus 65 aos, Erwin quiera continuar en la brecha haciendo investigacin de primera lnea. Me dijo que aunque en el Max-Plank jubilan a los investigadores a los 65 aos, l pensaba continuar hasta los 70 o incluso ms, pues existe esa posibilidad. Seguro que en el prximo quinquenio Erwin nos sorprender con un nuevo hallazgo sobre los sutiles y delicados mecanismos que aseguran la eficacia de la transmisin sinptica y de la comunicacin neuronal.