Comparacin de microscopia, cultivo y PCR convencional para la deteccin de Blastocystis sp. En muestras sanguineas.

Introduccion
Blastocystis Sp. , el mas comn parasito aislado de muestras de heces humanas . Tasas de infeccin de 3.3% pases desarrollados y 4-53.8% en pases en desarrollo. Controversia si este organismo es patgeno, actualmente se considera patgeno. Diferentes mtodos de diagnostico para la deteccin de Blastocystis( cultivo , microscopia, tcnica de PCR) Tcnica de PCR usando la pequea subunidad del gen del ARN ribosomal es la tcnica mas comnmente usada en parsitos enteros. Tcnica costosa , mas sensible que el frotis directo y el cultivo. Los cebadores son cruciales para el diagnostico y para la diferenciacin de los subtipos de Blastocystis Sp.

 El subtipo mas frecuente en el humano es el Blastocystis de tipo 3. Este estudio se hizo con la finalidad de comparar la sensibilidad de tcnicas diagnosticas para la identificacin del Blastocystis sp. Las tcnicas son: Microscopia con tincin permanente de hematoxilina y hierro Medio de cultivo MBD(BOECK modificado y Drbohlav , triptosa y glucosa) Medio de cultivo de metionina (TYGM-9) 2 metodos de PCR convencional que identifica la subunidad pequea del DNA ribosomal para la deteccin de muestra de heces

Materiales y Mtodos
Muestra de heces: 513 muestras de heces presentadas al departamento de microbiologa del Hospital San Vicente en Sdney, Australia desde marzo del 2008 diciembre 2008. Muestras fueron divididas en 3 alcuotas: 1) Una muestra mezclada con acetato de sodio y acido actico con formalina como preservante. 2) 10 mg fue tomado de una muestra fecal fresca 3) Otra muestra fue congelada para la extraccin del ADN y analisis de PCR.

Microscopia
Muestras fueron fijadas y teidas con la tincion de hematoxilina y hierro. Diagnostico de Blastocystis se basa con la visualizacin de la morfologa del parasito.

Cultivo