TINCIN DE GRAM

DEFINICIN FUNDAMENTO

PASOS

TCNICA

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TINCIN DE GRAM: DEFINICIN

La tincin de Gram es una tincin diferencial muy utilizada en Bacteriologa para observar bacterias en muestras clnicas. Debe su nombre a Christian Gram (1984) Morfologa bacteriana Diferenciacin bacteriana
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TINCIN DE GRAM: FUNDAMENTO

El fundamento de la tincin de Gram se basa en las diferencias de la pared celular de las bacterias Grampositivas y Gramnegativas.

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TINCIN DE GRAM: FUNDAMENTO

La pared celular de las Bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano (retiene el complejo colorante-mordiente)y dos clases de cido teicoico

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TINCIN DE GRAM: FUNDAMENTO

La pared celular de las bacterias Gram negativas tiene una capa de peptidoglucano ms fina (facilita la salida del complejo colorantemordiente)

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TINCIN DE GRAM: PASOS

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TINCIN DE GRAM: PASOS

El cristal violeta penetra en todas las clulas bacterianas a travs de la pared bacteriana

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TINCIN DE GRAM: PASOS

El lugol acta como mordiente haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.
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TINCIN DE GRAM: PASOS

La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble el complejo I2-cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos s lo hacen.
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TINCIN DE GRAM: PASOS

Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la coloracin de contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.
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TINCIN DE GRAM: TCNICA

Realizar un frotis fino. Dejar secar. Fijar con metanol. Aadir Violeta de Genciana (1 minuto) Lavar con agua. Aadir Lugol Lavar con agua Decolorar con alcohol-acetona Lavar con agua Aadir colorante de contraste (1 minuto) Lavar con agua Dejar secar

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