UNIVERSIDAD JOS FAUSTINO SNCHEZ CARRIN

FACULTAD DE INGENIERA AGRARIAS INDUSTRIAS ALIMENTARIAS Y AMBIENTAL

E.A.P ENGENIERA AMBIENTAL

CURSO: Microbiologa PROFESOR: Blgo_Mbglo. Noriega Crdoba, Huberto Williams TEMA: Tratamiento Microbiolgico de efluentes pesqueros, previos a su liberacin al mar ALUMNOS: Chvez castro, Dirce Livias Caldern Kenji Matos Tolentino Gabriel Moreno Marcos Sulen Solano Quispe Alicia

HUACHO, 2013

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INDICE
INTRODUCCIN ................................................................................................................ 3 RESUMEN .......................................................................................................................... 5 OBJETIVOS ........................................................................................................................ 6
1. TRATAMIENTO MICROBIOLGICO DE EFLUENTES PESQUEROS,

PREVIOS A SU LIBERACIN AL MAR ................................................................................................... 6 1. Caracterizacin de efluentes pesqueros ............................................................... 6 1.1. 1.2. 1.3. 1.4. 1.5. 1.6. 1.7. 1.8. Agua de bombeo ............................................................................................ 6 Sanguaza......................................................................................................... 7 Agua de cola ................................................................................................... 7 Efluentes de limpieza ..................................................................................... 7 Efluentes de laboratorio................................................................................. 7 Efluentes domsticos ..................................................................................... 7 Agua de Enfriamiento de la Columna Baromtrica ....................................... 8 Efluentes generados en las torres lavadoras de gases .................................. 8

2. Tratamiento microbiolgico de sanguaza en la industria de harina y aceite de pescado. ........................................................................................................................ 8 2.1. 2.2. Tratamiento Fsico De La Sanguaza ................................................................ 8 Tratamiento Microbiolgico De La Sanguaza ................................................ 8

CONCLUSIONES............................................................................................................... 19 BIBLIOGRAFA ................................................................................................................. 20

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INTRODUCCIN
Las algas (macro y micro-algas) han sido utilizadas por centurias por diferentes civilizaciones en la alimentacin humana y animal. El micro-alga o algas microscpicas, vienen siendo cultivadas de manera industrial para la produccin de protenas, vitaminas y otros suplementos nutritivos; son empleadas en simbiosis con las bacterias para la remocin de fosfatos y nitratos de aguas residuales, como bio-fertilizantes. Su cultivo se ha visto incrementado por ser fuente de cidos grasos insaturados, minerales, pigmentos, enzimas, aceites esenciales, antibiticos y otros metabolitos biolgicamente activos. Las algas microscpicas han merecido considerable atencin por su potencialidad como fuente de biodiesel, por la posibilidad de suplir de manera parcial la escasez de suministro de petrleo y asimismo, se presentan como una alternativa a los precios elevados de las materias primas tradicionales, para la obtencin de los biocombustibles como son la soja, caa de azcar, maz, palma aceitera, colza, grasas animales, residuos de grasas, entre los ms representativos. Se reporta que reunir solo la mitad de biodiesel que necesita el transporte existente en EE.UU, requiere de grandes reas de cultivo para producir mayor cantidad de oleaginosas. En el caso de palma aceitera (Elaeis guineensis) y jatropha (Jatropha podagrica), plantas de buen rendimiento, necesitaran que el 24% y 45% del total de tierra respectivamente, est dedicado a su cultivo para cubrir solamente 50% de la necesidad de combustible de transporte. Es evidente que en un futuro inmediato la contribucin de los cultivos de oleaginosas no alcanzar para reemplazar los combustibles lquidos, por lo que algunas compaas estn intentando comercializar biodiesel a partir de la biomasa algal obtenida en cultivos. Si se lograra implementar el uso micro-algas para producir biodiesel, entre 1 y 3% del total de rea de cultivo de los EE.UU., seran suficientes para producir la biomasa que satisfaga el 50% del combustible que necesita el transporte y su cultivo no comprometera la produccin de alimento, forraje y otros productos. Dependiendo de las especies, el micro-alga producen diferente tipos de lpidos, hidrocarburos y otros aceites complejos, de los cuales no todos son adecuados para producir biodiesel. La cantidad total de lpidos, as como la tipologa de los cidos grasos presentes, adems de ser especfica para cada especie, est ligada a factores ambientales como la intensidad luminosa, pH, salinidad, temperatura, concentracin de nitrgeno y otros nutrientes en el medio de cultivo.

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Entre las micro-algas de potencial importancia para la produccin de biocombustibles que existen en los cuerpos de agua marina, se encuentra la Tetraselmis suecica, la cual posee en base seca 52% de protena y entre 15 a 23% de lpidos. Se caracteriza por ser una alga Chlorofita, unicelular y mvil, de 7 a 9 m de dimetro y 10 a 16 m de largo. En cultivos autotrficos puede utilizar diferentes fuentes nitrogenadas como urea, fosfato diamnico, nitratos, nitritos, etc.; y en cultivo heterotrfico como ensilado de pescado puede metabolizar diversos aminocidos y vitaminas, sintetizar cidos grasos poliinsaturados. Actualmente se realizan esfuerzos para la generacin de nuevas metodologas y desarrollo tecnolgico para la produccin masiva de micro-algas y sus derivados, mediante el uso de medios de cultivos alternativos. Una alternativa a los medios de cultivo tradicionales ya estandarizados (puros y qumicamente definidos, como el medio Guillard) son los sustratos orgnicos, mayormente subproductos de otras industrias y en cuya composicin se encuentran fuentes de C, N, P, microelementos y oligoelementos. Utilizndose en la actualidad diversas harinas (de pescado, soya, lombriz de tierra, girasol), gallinaza, gas, aceites, melaza de caa, exudados gomosos y residuos pesqueros como la sanguaza. En Per, los residuos pesqueros se producen en grandes cantidades como consecuencia de la intensa actividad de la industria pesquera, que es una de las actividades extractivas importantes del pas. Los residuos como vsceras, cabezas, piel, huesos y colas, se cuantifican alrededor del 50% de la materia prima, resultando finalmente en contaminantes al ser vertidos indiscriminadamente al medio ambiente, provocando problemas de contaminacin y enfermedades. Un residuo de importancia es la sanguaza, efluente constituido por agua, sangre y slidos de pescado, generado durante su almacenamiento en pozas y transporte hacia los cocinadores en las fbricas de pescado. Sin embargo, estos residuos pueden ser aprovechados eficientemente si reciben un buen tratamiento para transformarlos. Por lo que se considera importante evaluar la sanguaza de pescado como medio de cultivo de las algas microscpicas y en este sentido se ha evaluado a nivel de preexperimental cuatro concentraciones de sanguaza/agua de mar (% v/v) en la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica, caracterizada por la velocidad especfica de crecimiento (max), tiempo de generacin (TG), fase lag () y crecimiento mximo (a). Asimismo se ha determinado por el Mtodo de Superficie de Respuesta Diseo Central Compuesto Rotacional (MSR - DCCR) la concentracin de sanguaza/agua de mar que permite obtener la mayor produccin de biomasa caracterizada por el mximo crecimiento (a) de Tetraselmis suecica.

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RESUMEN
Se evalu el crecimiento de Tetraselmis suecica. El experimento fue realizado aplicando la Metodologa de Superficie de Respuesta (MSR) con un Diseo Central Compuesto Rotacional (DCCR) con dos factores; pH y concentracin sanguaza/agua de mar, en los rangos de 7 - 9 y 2 5 % (v/v) respectivamente. Los medios de cultivo fueron agitados por burbujeo de aire constante (0.07 L/s) e iluminados de manera continua con luz fluorescente de 40 W en recipientes de vidrio de 1.5 L de capacidad a una temperatura de 22.5 2.1 C. Se determin, utilizando el modelo matemtico de Gompertz, que a partir de un pH de 8.0 y una concentracin de sanguaza/agua de mar de 3.5% se logra el crecimiento mximo de Tetraselmis suecica. Un pH de 8.71 y una concentracin de sanguaza/agua de mar de 4.56% permiten obtener un crecimiento mximo (logN/N0) de Tetraselmis suecica de 0.659, con un error de 12.3% al aplicar un modelo matemtico de 2 orden. Los valores obtenidos con el medio de cultivo sanguaza/agua de mar, superaron al medio de cultivo tradicionalmente usado (Guillard F/2 con agua de mar). Los resultados demuestran la potencialidad de uso del medio sanguaza/agua de mar en estudios escalables a nivel piloto de produccin de Tetraselmis suecica, con miras a la produccin de biodiesel.

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OBJETIVOS
Conocer los principales componentes de los efluentes pesqueros Comprender el tratamiento microbiolgico de efluentes pesqueros a partir de Tetraselmis suecica Formar un nuevo producto aprovechable a partir de la sanguaza

TRATAMIENTO MICROBIOLGICO DE EFLUENTES PESQUEROS, PREVIOS A SU LIBERACIN AL MAR

1. Caracterizacin de efluentes pesqueros Los efluentes que se producen a lo largo del proceso productivo y desde los inicios de la actividad de harina de pescado han contribuido significativamente a la degradacin ambiental de los ecosistemas aledaos. Gradualmente los efluentes se han venido incorporando al proceso productivo, actualmente la sanguaza y el agua de cola, son incorporados al proceso productivo y otros pasan por sistemas de tratamiento para recuperar los componentes orgnicos que se encuentran presentes, pero es evidente que la eficiencia de recuperacin, en la mayora de casos con sistemas instalados an no son suficientes. De acuerdo a los resultados de los monitoreos de las plantas de harina y aceite de pescado, los efluentes despus de ser tratados y antes de ser vertidos al mar aun presentan niveles considerables de Aceites y Grasas, Slidos Suspendidos (SSTs), Demanda Biolgica (o Bioqumica) de Oxgeno (DBO5). A continuacin se describen los efluentes que se generan en las diferentes etapas del proceso productivo. 1.1. Agua de bombeo

Es el efluente de mayor volumen, se origina durante el trasvase de la materia prima de la embarcacin a la planta; contiene materia orgnica suspendida y diluida, aceites y grasas, sangre y agua de mar. Los resultados de pruebas efectuadas por el proyecto en Paracas1 mostraron que el agua de bombeo contena en promedio 3% de protena (suspendida y disuelta) y 2% de aceite, cifras que representan oportunidades nicas para que la industria mejore sus rendimientos y aumente su rentabilidad2 Considerando el uso promedio de 2 toneladas de agua de bombeo por tonelada de pescado descargado con concentraciones de 1.5 % de aceite y 4% de slidos (valores conservadores) en 7 millones de toneladas de pescado desembarcadas (menos del promedio anual actual) se han vertido al mar 280,000 TM de protenas solubles y no soluble y 105,000 TM de aceite que representan aproximadamente 220 millones de dlares en prdidas.

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1.2.

Sanguaza

La sanguaza se genera en la poza de almacenamiento de materia prima, cuya degradacin proteica se produce inmediatamente despus de la muerte de la anchoveta y comienza por una accin enzimtica, para continuar por una rpida accin bacteriana y procesos oxidativos de los productos de degradacin. El aumento de la temperatura ambiental en verano, acelera los procesos de descomposicin tanto en las bodegas como en las pozas de almacenamiento con el desprendimiento de gas sulfhdrico (H2S). 1.3. Agua de cola

El agua de cola es uno de los residuales del proceso productivo de una planta de harina de pescado, generado como un sub producto de la prensa. Se genera a partir del licor de prensa; son los slidos solubles que se separan del aceite al centrifugar el licor de la separadora; su volumen y contenido cambian con la condicin y tiempo del pescado. Cuanto mayor es el tiempo de captura, mayor ser la cantidad de protena y aceite que se liberen al agua de cola durante el prensado. El agua de cola puede representar hasta un 60% del peso de la materia prima y esta contendr cerca de 8% a 10% de slidos totales. Si la materia prima se encuentra en malas condiciones, estas cifras se incrementarn. Actualmente los EIP recuperan estos compuestos para mejorar la calidad del producto y tambin para mejorar la eficiencia de las plantas. Sin embargo es necesario indicar que tambin existen EIP que an vierten este efluente al mar sin mayor tratamiento. 1.4. Efluentes de limpieza

Son los efluentes provienen de la limpieza de equipos y establecimiento industrial pesquero, contienen partculas suspendidas, aceites y grasas, agua, soda custica, cido ntrico y cido fosfrico altamente contaminantes. 1.5. Efluentes de laboratorio

Son los efluentes de los laboratorios de las plantas de harina y aceite de pescado se caracterizan por contener detergentes y productos qumicos diluidos como: sulfato de sodio, cido ntrico, cido sulfrico, etc., los que en la mayora de casos son considerados como desage domstico y no son neutralizados. El volumen y caracterizacin de los efluentes de laboratorio varan en funcin de su grado de equipamiento, y del tipo de anlisis que realicen. 1.6. Efluentes domsticos

Efluentes que provienen de oficinas, servicios higinicos y el comedor. Contienen sustancias procedentes de la actividad humana (alimentos, deyecciones, basuras, productos de limpieza, jabones, etc.).

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1.7.

Agua de Enfriamiento de la Columna Baromtrica

Es el agua de mar utilizada para efectuar vaco en la torre baromtrica de las plantas evaporadoras de agua de cola, en uno de los efectos. El agua de mar permanece limpia ya que no ha tomado contacto con ninguna materia prima, luego de cumplir su funcin de enfriar es derivada hacia el colector general y dispuesto a orilla de playa sin tratamiento alguno porque no lo requiere, su T es de 28C a 35C que se disipa rpidamente en el medio. 1.8. Efluentes generados en las torres lavadoras de gases

Adems de quemar residuos, los incineradores los producen: cenizas de fondo que quedan en el incinerador, cenizas volantes que son capturadas por los dispositivos de control de la contaminacin y efluentes lquidos provenientes de la planta de lavado de gases.

2. Tratamiento microbiolgico de sanguaza en la industria de harina y aceite de pescado. Para el tratamiento microbiolgico se lleva cabo de la siguiente manera: 2.1. Tratamiento Fsico de La Sanguaza

La sanguaza proveniente de las pozas de recepcin es recolectada en una poza de concreto, comnmente ubicada debajo de las rastras que trasportan la materia prima de las pozas a las cocinas. Luego, sta es bombeada a la lnea de tratamiento. La sanguaza puede ser tratada de tres maneras: a. En una lnea propia, que consta de filtros rotativos para recuperar slidos mayores a 0.5, intercambiador de calor para su coagulacin, separadoras de slidos y centrfugas. b. Incorporndose al licor de prensa. Es decir, utilizando un intercambiador de calor para coagular las protenas de la sanguaza e incorporndola a la lnea de licores del proceso. c. Incorporndose a las espumas recuperadas del sistema de flotacin del tratamiento del agua de bombeo. 2.2. Tratamiento Microbiolgico De La Sanguaza

A. Material Y Mtodo

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Se utiliza cepas de Tetraselmis suecica, agua destilada, C2H5OH, CH3COOH, NaCl al 30 %, NaOH 0.1 N, lugol, aire comprimido, sanguaza del Terminal Pesquero 27 de Octubre, Baha de Chimbote, Ancash, Per (Tabla 1), agua de mar (Tabla 2). Medio Guillard F/2 (medio tradicional estandarizado, puro y qumicamente definido) (Guillard, 1973). Microscopio ptico de 400x, cmara de Neubauer, autoclave, mufla, compresora. Tabla 1 Anlisis proximal de la sanguaza

Tabla 2 Composicin qumica de 1 litro de agua de mar

Durante el desarrollo experimental, se utiliz 4 concentraciones de sanguaza/agua de mar (2.5, 5, 10 y 20% v/v) y un experimento control (agua de mar sin sanguaza y medio Guillard F/2) (Figura 1). A cada una de los medios se le adicion 250 mL de inculo completando un volumen total de 1500 mL. A los biorreactores se le introdujo aire con una compresora a flujo constante (0.07 L/s), con iluminacin constante (2 fluorescentes de 40 watts). Durante el desarrollo de los cultivos se determin el pH y temperatura; la variacin de biomasa se realiz a travs de tres conteos diarios de las clulas por mililitro, para lo cual se tom una muestra de cultivo de 1 mL, la cual fue colocada en cmara de Neubauer, fijndose con lugol, para evitar la movilidad de las clulas. El recuento se realiz con un microscopio ptico con aumento de 400x.

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En la Tabla 3 se muestra el protocolo pre-experimental que se utiliz para delimitar el efecto de la concentracin sanguaza/agua de mar en la produccin de biomasa de Tetraselmis suecica.

Figura 1 Esquema pre-experimental para la evaluacin del efecto de cuatro concentraciones de sanguaza/agua de mar en la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica. Tabla 3 Protocolo pre-experimental de la composicin de los medios de cultivo para Tetraselmis suecica

De los resultados obtenidos en la etapa pre-experimental se obtuvo los rangos de pH y concentracin de sanguaza/agua de mar, plantendose en base a esto un diseo experimental utilizando MSR, con DCCR. Realizndose un planeamiento factorial completo 2k, incluido 4 puntos axiales y cuatro puntos centrales, con lo que obtuvo un nmero total de 12 unidades experimentales. El exponencial k representa el nmero de variables independientes (k=2) pH y proporcin sanguaza/agua de mar. Se utiliz el valor de de 1.4142 (Rodrguez y Iemma, 2005), de acuerdo a:

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En la Tabla 4 se muestran los valores que fueron utilizados en el experimento principal sobre la base de las pruebas pre-experimentales desarrolladas (Figura 1): Tabla 4 Valores usados en DCCR para las dos variables utilizadas

Dnde: X1 = Concentracin sanguaza/agua de mar (%, v/v) X2 = pH Con los valores de la Tabla 4 se elabor la matriz (Tabla 5) en donde las variables respuesta fueron los parmetros de cintica de crecimiento: crecimiento mximo (a), fase de adaptacin (), velocidad especfica de crecimiento (max) y tiempo de generacin (TG). Los volmenes de sanguaza, agua de mar e inculo para los diferentes tratamientos se presenta en la Tabla 6. Para el desarrollo de la investigacin se dispuso de agua de mar, la cual fue mezclada con sanguaza entre las concentraciones de 2.0 a 5.0% v/v (Tabla 3) y los valores de pH fueron ajustados entre 7.0 y 9.0, disponindose de un diseo experimental con 12 ensayos, los cuales fueron desarrollados para la evaluacin de produccin de biomasa a travs de la cintica de crecimiento de un proceso fotosinttico. La secuencia del desarrollo experimental se observa en la Figura 2. Tabla 5 Valores codificados para las variables independientes y respuesta (cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica)

Durante el desarrollo experimental posterior a la preparacin de las doce (12) concentraciones de sanguaza/agua de mar, se ajust los valores de pH, los cuales

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fueron controlados y ajustados durante todo el proceso con NaOH 0.1 N y CH3COOH 0.1 N. Se realiz dos conteos diarios por microscopia de la produccin de biomasa microbiana (clulas/mL), tomndose 1 mL como muestra, la cual se coloc en cmara de Neubauer y fijndose con lugol para evitar el movimiento de las microalgas durante el recuento en la lmina portaobjetos. Igualmente en esta etapa se evalu la cintica de crecimiento con el modelo de matemtico de Gompertz, lo que permiti determinar la cintica de crecimiento a travs del crecimiento mximo (a), fase lag o de adaptacin (), velocidad especfica de crecimiento (max) y tiempo de generacin (TG). Haciendo uso de MSR a travs de un DCCR, se evalu el efecto del pH y la concentracin de sanguaza/agua de mar en la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica. Se realiz un ANVA para verificar si el modelo matemtico fue significativo (p<0.05), as como la determinacin del nivel del coeficiente de determinacin R2. La produccin de biomasa de Tetraselmis suecica se realiz de acuerdo al esquema mostrado en la Figura 3. Tabla 6 Volmenes de sanguaza, agua de mar e inculo

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Figura 2 Esquema del experimento principal para la evaluacin del efecto del pH y concentracin sanguaza/agua de mar en la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica.

Figura 3 Diagrama de flujo de produccin de biomasa de Tetraselmis suecica B. Resultados y discusin a. Resultados del pre-experimento Se analiz la cintica de crecimiento con el modelo matemtico de Gompertz, determinndose los valores de los parmetros (a, b y c), as como los valores de la fase
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lag o adaptacin (), velocidad especfica de crecimiento (max), tiempo de generacin (TG). Los rangos de pH observados fueron determinados entre 7.13 y 8.69 y la temperatura fluctu entre 21 y 24C. Se reporta experiencias de buen crecimiento de Tetracelmis suecica a 20 2C (Serdar et al., 2007). Coll-Morales (1983) indican una temperatura ptima de 18C; Laim y Helm (1981) mencionan que la productividad de T. suecica no es afectada por temperatura de 18-22C, disminuyendo si la fuente de dixido de carbono es insuficiente para mantener el pH igual o inferior a 7.8. Se reporta cultivos de T. Suecica en intervalos de pH de 7.3 a 8.5 (Milln-Nez et al., 2010). Helm y Laing (1981) reportan una intensidad lumnica ptima de 40000 Lux (6 lmparas). Se determin un p<0.05 para el recuento celular y para el pH en todos los ensayos incluidos el control. Tabla 7 Valores de los parmetros de la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica ajustado al modelo de Gompertz en la etapa pre-experimental

En la Tabla 7 se aprecia que los mejores tratamientos para la produccin de biomasa fueron los tratamientos P1 y P2, con concentraciones sanguaza/agua de mar de 2.5 y 5.0% respectivamente, donde se observa una menor fase de adaptacin o fase lag () de 50.16 y 71.98 horas, una mayor velocidad especifica de crecimiento (max) de 0.023 h-1 y 0.053 h-1, un menor tiempo de generacin (TG) de 12.96 y 5.68, un crecimiento mximo (a) de 0.39 y 0.46 respectivamente; con elevados valores de coeficiente de correlacin R1 = 0.96 y R2 = 0.97, mientras que para los tratamientos P3=10% y P4=20% de concentracin de sanguaza/agua de mar, los valores obtenidos en toda la cintica de crecimiento fueron inferiores; incluyendo los coeficientes de correlacin, R3=0.91 y R4=0.46 respectivamente. Rodriguez et al., (2007) reportan experiencias con buenos resultados utilizando 20% de salinidad. Se puede notar que el tratamiento 4 tuvo limitaciones de crecimiento por la presencia de una alta proporcin de sanguaza, que le confiere un color oscuro al medio, lo que no permite una adecuada iluminacin limitando el proceso fotosinttico (Coll-Morales, 1983). Asimismo se puede observar que el control con medio Guillard no se ajusta adecuadamente al modelo de Gompertz, lo que contrasta con lo afirmado por Guillard (1973) y Herrero et al. (1994) quienes sostienen que este medio es adecuado para el cultivo de microalgas marinas por el aporte de macro y micronutrientes. En este contexto Snchez et al. (2008) encontraron que un ensilado de pescado no hidrolizado, proporciona buena productividad de la microalga Nannochloropsis oculata, en relacin a la obtenida cuando se usan los medios de cultivo Yashima y Guillard F/2. El ensilado de pescado fue obtenido mediante un proceso de fermentacin cido lctico con melaza como fuente de carbono. Rodriguez et al. (2007) investigaron el empleo del medio EM-Bokashi con Tetraselmis suecica, obteniendo un buen crecimiento poblacional en relacin a los medios Yashima y Guillard modificado. Asimismo determinaron que el medio EM-Bokashi proporciona
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un menor costo de produccin (98.8% menor que cuando se usa el medio Yashima). Este medio es un fertilizante orgnico, obtenido mediante fermentacin de materia orgnica por accin de microorganismos eficaces (EM), confiriendo propiedades probiticas. Sostienen que la presencia de probiticos compite con las bacterias patgenas inhibiendo su desarrollo, lo que contribuye al equilibrio ecolgico del medio.

b. Resultados del experimento principal En el Tabla 8 se presentan los valores de a, b y c para los 12 tratamientos del experimento principal, obtenidos aplicando el modelo matemtico de Gompertz [YA=a*exp(-exp(b-c*TA)), donde YA = log(N/N0) y TA = tiempo en h], as como los parmetros de la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica, comprendidos por la fase lag o de adaptacin (), velocidad especifica de crecimiento (max), tiempo de generacin (TG); as como el coeficiente de correlacin R. Los valores de R obtenidos en todos los ajustes variaron entre un mnimo de 0.93 y 0.99, lo que indica el buen ajuste de los datos experimentales. Los valores que se presentan en Tabla 8 fueron usados en el DCCR para la obtencin de la Superficie de Respuesta. En la Tabla 9 se presentan los coeficientes de regresin de la fase lag, velocidad especfica de crecimiento, tiempo de generacin y crecimiento mximo; lo que permite obtener modelos matemticos de 2 orden, pasibles de corregirse cuando p<0.05, los cuales mostraron baja capacidad de prediccin de la fase lag entre los valores experimentales y los predichos con un R2 de 79.2% conforme se observa en la Figura 4. Tabla 8 Valores de los parmetros de la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica ajustado al modelo de Gompertz en el experimento principal

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Tabla 9 Coeficientes de regresin para la fase lag (), velocidad especifica de crecimiento (max) y tiempo de generacin (TG) y crecimiento mximo (a) de Tetraselmis suecica

Figura 4 Valores esperados y predichos para la fase lag () o de adaptacin por el modelo matemtico

Figura 5 Superficie de Respuesta del crecimiento mximo (a) de Tetraselmis suecica en funcin del pH y concentracin sanguaza/agua de mar (% v/v) Desde el punto de vista de produccin de biomasa el crecimiento mximo (a) es un elemento importante. En la Figura 5 se observa la Superficie de Respuesta de

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crecimiento mximo en funcin al pH y concentracin sanguaza/agua de mar, notndose a partir de un pH de 8.0 y de una concentracin sanguaza/agua de mar de 3.5% (v/v), permiten alcanzar un crecimiento mximo. Los valores experimentales con los valores predichos para el crecimiento mximo (a) mostraron un R2 de 84.9% cuyo nivel de dispersin se muestra en la Figura 6.

Figura 6 Valores esperados y predichos para el crecimiento mximo (a) por el modelo matemtico. De acuerdo al tratamiento experimental 4 con un pH de 8.71 y una concentracin sanguaza/agua de mar de 4.56 % (v/v) se obtuvo una cintica de crecimiento mostrada en la Figura 7. Observndose un valor de crecimiento mximo (logN/N0) de 0.659 y utilizando el modelo matemtico que proyecta la MSR se obtiene un valor de 0.73 (error de 12.3%). El uso de agua de mar con sanguaza, ha demostrado ser una buena alternativa para la produccin de biomasa de Tetraselmis suecica, considerando que la sanguaza es un residuo, cuyo costo es menor que el medio EM-Bokashi y obviamente que el medio Yashima. El medio Bokashi est constituido por 50% de salvado de trigo, 30% de harina de soja, 18% de cebadina, 2% de carbn vegetal, 1% de EM activado (10% de EM puro + 10% de melaza + 80% de agua) (Rodrguez et al., 2007). La composicin de la sanguaza podra variar dependiendo de la incorporacin del tipo de residuos y de las operaciones durante el procesamiento de pescado. Sin embargo queda abierta la posibilidad de evaluar la eficiencia del medio EM- Bokashi y con respecto a la sanguaza.

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Figura 7 Curva suavizada por el modelo de Gompertz para el tratamiento 4 con pH = 8.71 y concentracin sanguaza/agua de mar de 4.56 %.

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CONCLUSIONES
Se evalu a nivel pre-experimental cuatro concentraciones sanguaza/agua de mar (2.5, 5, 10 y 20 % v/v) en la cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica, determinndose que los rangos de pH y concentracin de sanguaza/agua de mar de 7 - 9 y 2 5 % (v/v) respectivamente, permiten obtener la mejor cintica de crecimiento de Tetraselmis suecica, caracterizada por una menor fase de adaptacin o fase lag () de 50.16 y 71.98 h, una mayor velocidad especifica de crecimiento (max) de 0.023 h-1 y 0.053 h-1, un menor tiempo de generacin (TG) de 12.96 y 5.68 h, un crecimiento mximo (a) con valores de: 0.39 y 0.46 respectivamente, con elevados valores de coeficiente de correlacin R1 = 0.96 y R2 = 0.97. Se determin por el Mtodo de Superficie de Respuesta (MSR) con un Diseo Central Compuesto Rotable (DCCR), utilizando el modelo matemtico de Gompertz, que a partir de un pH de 8.0 y una concentracin de sanguaza/agua de mar de 3.5% (v/v) se logra un crecimiento mximo de Tetraselmis suecica. Un pH de 8.71 y una concentracin de sanguaza/agua de mar de 4.56% (v/v) permite obtener un crecimiento mximo (logN/N0) de 0.659 de Tetraselmis suecica, obtenindose una prediccin con un 12.3% de error con un modelo matemtico de 2 orden.

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BIBLIOGRAFA
http://www.elprisma.com/apuntes/ingenieria_quimica/aguasindustriales/ http://faolex.fao.org/docs/pdf/per90180anx.pdf http://www.drimasd.org/informacionidi/biblioteca/publicacion/doc/vt/vt2_tra tamientos_avanzados_de_aguas_residuales_industriales.pdf

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