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Guia de Microbiologia

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Introducción:
Algunos grupos bacterianos poseen un elevado contenido de lípidos en su estructura,
que impide tomar los colorantes en soluciones acuosas. Las Mycobacterias y las
Nocardias tienen ésta propiedad.
La coloración de Ziehl-Neelsen utiliza fucsina con fenol y la ayuda del calor para
que el colorante penetre en la pared celular. Como decolorante emplea una mezcla de
alcohol con ácido clorhídrico. Luego las bacterias que retienen el colorante se les
denomina ácido alcohol resistentes.
Coloración útil para el diagnóstico de enfermedades como la tuberculosis y la lepra.

Materiales:
1.Juego de colorantes para Ziehl-Neelsen
a.Solución de Fucsina fenicada
b.Solución de alcohol-ácido al 3 %
c.Solución de Azul de metileno 5%
d.Mechero de alcohol
2. Muestra de esputo

Procedimiento:
1.Hacer un frotis a partir de la muestra de esputo. Fijarlo al calor suave.
2.Colocar el portaobjetos con frotis sobre un soporte en el lavatorio
3.Cubrir la lámina con colorante Fucsina fenicada
4.Con la ayuda del mechero de alcohol, calentar suavemente la preparación hasta
que se desprendan vapores, retirar la llama y repetir por tres veces éste
procedimiento. El colorante NO debe hervir ni secarse.
5.Eliminar el colorante y lavar la lámina con agua.
6.Decolorar con alcohol-ácido, cubriendo la preparación y hacer movimientos de
vaiven durante 15 a 30 segundos, hasta que no se desprenda colorante.
7.Lavar con agua y cubrir la lámina con solución Azul de metileno. Dejar actuar
durante 10 minutos.
8.Lavar con agua Secar.
9.Observar al microscopio con objetivo de inmersión

Resultados:

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URP. Facultad de Medicina

Hacer esquema de las estructuras celulares observadas de color azul y resaltar los
bacilos ácido resistentes de color rojo con morfología característica.

CUESTIONARIO:
1. Desarrolle el fundamento de la coloración de Gram
2. Señale cuatro géneros bacterianos Gram positivos y cuatro Gram negativos
3. Qué bacterias no toman la coloración de Gram?
4. Señale las diferencias entre la coloración de Gram y de Ziehl Neelsen?
5. Describa usted la morfología del bacilo tuberculoso observado:

DESARROLLO

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URP. Facultad de Medicina

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