P. 1
EVALUACIÓN DE LA OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL ALMIDÓN DE ÑAME (DIOSCOREA ROTUNDATA, DIOSC_JOSÉ MURGAS_USBCTG_2012

EVALUACIÓN DE LA OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL ALMIDÓN DE ÑAME (DIOSCOREA ROTUNDATA, DIOSC_JOSÉ MURGAS_USBCTG_2012

|Views: 20|Likes:
Publicado porMaicol Gonzalez

More info:

Published by: Maicol Gonzalez on Dec 11, 2013
Copyright:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

06/12/2014

pdf

text

original

Sections

  • 1. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN
  • 1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
  • 1.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
  • 1.3 JUSTIFICACIÓN
  • 1.4 OBJETIVOS
  • 1.4.1 Objetivo general
  • 1.4.2 Objetivos específicos
  • 2. MARCO DE REFERENCIA
  • 2.1 ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS
  • Figura 1. Línea de tiempo de utilización de Bioetanol a nivel mundial
  • 2.1.1 Historia – etanol
  • 2.1.2 Estado actual Latinoamérica
  • 2.2 BASES TEÓRICAS
  • 2.2.1 Ñame
  • Figura 2. Imagen sobre hojas de Dioscorea (izquierda) y Tubérculo (derecha)
  • Figura 3. Hojas D. Alata (izquierda) y tubérculo (derecha)
  • Figura 4. Hoja de Dioscorea Trífida (izquierda) y tubérculo (derecha)
  • Figura 5. Hojas de D. Rotundata (izquierda) y tubérculo (derecha)
  • Tabla 1. Producción de Ñame A nivel Mundial año 2005
  • 2.2.6 Producción de ñame en Colombia
  • 2.2.7 ALMIDÓN
  • Figura 7. Estructura del almidón
  • Tabla 2. Almidón presente en diferentes alimentos
  • 2.2.9 Hidrólisis Química
  • 2.2.11 Fermentación
  • Figura 8. Esquema del proceso de glucolisis
  • Tabla 3. Compuestos producidos por el proceso de fermentación
  • Tabla 4. Metabolitos microbianos comerciales
  • Tabla 5. Tamaño de células en procesos Biotecnológicos
  • Figura 9. Esquema de distintas formas de levadura
  • Figura 10. Diagrama de la estructura de una levadura
  • Figura 11.Curva de crecimiento de un microorganismo
  • 2.2.12 Etanol
  • 2.2.13 DESTILACIÓN
  • Figura 12. Diagrama de flujo proceso de destilación
  • Figura 13. Equipo de destilación simple
  • 2.3 MARCO LEGAL
  • 2.4 MARCO CONCEPTUAL
  • 3 DISEÑO METODOLÓGICO
  • 3.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN
  • 3.2 POBLACIÓN Y MUESTRA
  • 3.3 METODOLOGÍA UTILIZADA EN EL PROYECTO
  • 3.3.1 Obtención de la harina de ñame
  • Tabla 6. Cantidad de ñame utilizada en el proceso
  • Figura 14. Proceso de extracción de harina de ñame
  • 3.3.2 Hidrólisis enzimática
  • Tabla 7. Condiciones de la enzima α Amilasa
  • Tabla 8. Condiciones de la enzima AMG (Amiloglucosidasa)
  • Figura 15. Esquema general del proceso de hidrólisis
  • 3.3.3 Fermentación
  • Figura 16. Hidrolizados Esterilizados
  • Tabla 9. Condiciones en el proceso de la fermentación
  • Figura 17. Fermentadores usados
  • Figura 18. Toma de muestras
  • Figura 19. Lecturas de pH
  • 3.3.4 Destilación
  • Figura 20. Montaje del equipo de Destilación
  • 3.4 RECOLECCION DE LA INFORMACIÓN
  • 3.5 INSTRUMENTOS
  • 3.5.1 Instrumentos y equipos
  • Tabla 10. Equipos e instrumentos de laboratorio
  • 3.5.2 Materias primas y reactivos
  • Tabla 11. Lista de materias primas y reactivos
  • 3.6.1 Hipótesis nula
  • 3.6.2 Hipótesis alternativa
  • 3.7.1 variables independientes
  • 3.7.2 Variables dependientes
  • 3.8 OPERACIONALIZACION DE VARIABLES
  • Tabla 12. Operacionalización de las variables
  • 3.9 PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN
  • 4 RESULTADOS
  • 4.1 Comportamiento de Dioscorea Alata en la hidrólisis enzimática
  • Gráfica 2. Comportamiento ºBrix en la hidrolisis enzimática de D. Alata
  • 4.2 Comportamiento de Dioscorea Trífida en la hidrólisis enzimática
  • 4.3 Comportamiento de Dioscorea Rotundata en la hidrólisis enzimática
  • 4.4 Lectura de pH
  • 4.4.1 Lectura de pH para Dioscorea Alata
  • Gráfica 7. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Alata
  • 4.4.2 Lectura de pH para Dioscorea Trífida
  • Gráfica 8. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Trífida
  • 4.4.3 Lectura de pH para Dioscorea Rotundata
  • Gráfica 9. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Rotundata
  • 4.5 Lectura de ºBrix
  • 4.5.1 Lectura de ºBrix para Dioscorea Alata
  • 4.5.2 Lectura de ºBrix para Dioscorea Trífida
  • 4.5.3 Lectura de ºBrix para Dioscorea Rotundata
  • 4.6 Lectura de Azucares Reductores en la fermentación
  • 4.6.1 Lectura de Azucares Reductores para Dioscorea Alata
  • 4.6.2 Lectura de azucares reductores para D. Trífida
  • 4.6.3 Lectura de azucares reductores para Dioscorea Rotundata
  • 4.7 Conteo de microorganismos
  • 4.7.1 Conteos de microorganismos para Dioscorea Alata
  • 4.7.2 conteos de microorganismos para Dioscorea Trífida
  • 4.8 Producción de etanol
  • 4.8.1 Producción de etanol de Dioscorea Alata
  • 4.8.3 Producción de etanol de Dioscorea Rotundata
  • 4.9 Rendimientos del proceso
  • 4.9.1 Rendimiento para Dioscorea Alata
  • 4.9.2 Rendimiento para Dioscorea Trífida
  • 4.10 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
  • 5 CONCLUSIONES
  • 6 RECOMENDACIONES
  • BIBLIOGRAFÍA
  • ANEXOS

EVALUACIÓN DE LA OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL ALMIDÓN DE ÑAME (DIOSCOREA ROTUNDATA, DIOSCOREA ALATA Y DIOSCOREA TRÍFIDA) MEDIANTE LA HIDRÓLISIS

ENZIMÁTICA Y POSTERIOR FERMENTACIÓN.

JOSE DAVID MURGAS TORRES MIGUEL ANGEL VASQUEZ MONTERROSA

UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA FACULTAD DE INGENIERÍAS, ARQUITECTURA, ARTE Y DISEÑOS PROGRAMA DE INGENIERÍA QUÍMICA CARTAGENA 2012

EVALUACIÓN DE LA OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL ALMIDÓN DE ÑAME (DIOSCOREA ROTUNDATA, DIOSCOREA ALATA Y DIOSCOREA TRÍFIDA), MEDIANTE LA HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA Y POSTERIOR FERMENTACION.

JOSE DAVID MURGAS TORRES MIGUEL ANGEL VASQUEZ MONTERROSA

Trabajo de grado presentado como requisito para optar al título de Ingeniero Químico

Asesora Externa Adriana Alejandra Pérez Bacterióloga

UNIVERSIDAD DE SAN BUENAVENTURA FACULTAD DE INGENIERÍAS, ARQUITECTURA, ARTE Y DISEÑOS PROGRAMA DE INGENIERÍA QUÍMICA CARTAGENA 2012

Nota de aceptación

Firma del Presidente del jurado

Firma del jurado

Firma del jurado

Cartagena,Mayo de 2012

A mi querida madre María Lourdes por luchar junto a mí en la búsqueda de mis objetivos. por brindarme siempre palabras de aliento y el apoyo en los momentos difíciles. la persona que considero como mi padre.DEDICATORIA Celebramos el fin de una etapa importante en nuestra vida dando las gracias. para apoyarme cuando lo necesite. A mis amigos y todos lo que hicieron parte de esta formación. principalmente a nuestro señor Dios que nos permitió compartir este tiempo de enseñanza necesaria para nuestra formación. gracias por su apoyo incondicional. Dedico esto a una persona muy especial que ha sido una fuente inagotable de luz para mí. por su educación y valores inculcados a lo largo de mi vida. por ese motivo gracias te doy mi querido tío Jonny Torres Saurith. que me ha brindado su confianza y que siempre estuvo ahí. JOSE DAVID MURGAS TORRES .

por darme tú ejemplo y educación me ayudaste a ser una mejor persona. gracias por su amistad incondicional. por creer en mí en la adversidad. siempre estuvo apoyándome en las buenas y en las malas. A mis demás tías Clara y Raquel quienes siempre estuvieron pendientes de mi proceso y me brindaron su cariño y comprensión. A mi hermana Gina por ser fuente de alegría en todo momento. le doy las gracias por su comprensión y paciencia. A mi tía Carmenza Monterrosa quien siempre estuvo a lo largo del desarrollo de mi carrera apoyándome.DEDICATORIA A dios principalmente ya que gracias a él todo esto fue posible A mí querida madre Milagros Monterrosa quien con mucho sacrificio me saco adelante durante todos estos años. A mis amigos María. Carlos y Fabián con quienes pude compartir alegrías y tristezas. A mi tía Marina quien a pesar de la distancia me dio su apoyo y consejo. Miguel Ángel Vásquez Monterrosa .

logrando formar profesionales integrales. Rosa Rangel. familiares y amigos que estuvieron siempre presente en cada uno de nuestros felices y difíciles. Expresamos nuestros más sinceros agradecimientos: A nuestros padres. brindándonos su apoyo de manera incondicional. Al personal de los laboratorios: Aissa Rodríguez.AGRADECIMIENTOS El desarrollo y culminación de este proyecto se debe al apoyo de todas aquellas personas que nos brindaron sus conocimientos y experiencia. Carmen Muskus y Alma Estrada por brindarnos su ayuda incondicional. Bacterióloga quien estuvo asesorándonos en el desarrollo del proyecto de grado. . A todos muchas gracias. A la Universidad de San Buenaventura por la excelente formación académica brindada. A Adriana Alejandra Pérez.

4 MARCO CONCEPTUAL 3 DISEÑO METODOLÓGICO 3.7 Almidón 2.2 Dioscorea Alata 2.2.1 Historia del etanol 2.4 RECOLECCION DE LA INFORMACION 3.2.4.2.3.3 Fermentación 3.4.4 Destilación 3.3 METODOLOGÍA UTILIZADA EN EL PROYECTO 3.2.2.10 Hidrolisis Enzimática 2.2 BASES TEÓRICAS 2.6 HIPOTESIS 3.2 Materias primas y reactivos 3.13 Destilación 2.2.1 Hipótesis nula I Pag 1 1 4 4 5 5 5 6 6 6 7 10 10 11 12 13 14 15 16 20 21 22 24 38 40 42 44 46 46 48 48 48 50 52 56 56 56 56 57 57 57 58 58 .9 Hidrolisis Química 2.1 Objetivo general 1.2 Objetivos específicos 2 MARCO DE REFERENCIA 2.11 Fermentación 2.3.3 MARCO LEGAL 2.2.2.4.1.2 Estado actual en Latinoamérica 2.2 Hidrólisis enzimática 3.4 Dioscorea Rotundata 2.CONTENIDO 1 PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 1.6 Producción de Ñame en Colombia 2.1 Obtención de la harina de ñame 3.1 Ñame 2.1 ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS 2.3.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 1.5 INSTRUMENTOS 3.5.5 Producción Mundial de Ñame 2.6.2.1 Instrumentos y equipos 3.4 OBJETIVOS 1.3.2.5.1.1 Fuentes primarias 3.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA 1.2.2.2.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN 3.3 JUSTIFICACIÓN 1.8 Hidrolisis 2.12 Etanol 2.3 Dioscorea Trífida 2.2 Fuentes secundarias 3.4.2 POBLACIÓN Y MUESTRA 3.

7 VARIABLES 3.7.7.3 Producción de etanol de Dioscorea Rotundata 4.2 Producción de etanol de Dioscorea Trífida 4.8.9.6.6.1 Producción de etanol de Dioscorea Alata 4.1 Variables Independientes 3.7.9 PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN 4 RESULTADOS 4.9 Rendimientos del proceso 4.2 Lectura de °BRIX para Dioscorea Trífida 4.8.2 Conteo de microorganismos para Dioscorea Trífida 4.5.3 Conteo de microorganismos para Dioscorea Rotundata 4.3 Comportamiento de Dioscorea Rotundata en la hidrólisis enzimática 4.1 Conteo de microorganismos para Dioscorea Alata 4.2 Hipótesis alternativa 3.3 Lectura de °BRIX para Dioscorea Rotundata 4.6.3.4 Lectura de pH 4. 4.1 Lectura de azucares reductores para Dioscorea Alata 4.3 Lectura de pH para Dioscorea Rotundata 4.2 Variables Dependientes 3.7.4.3 Rendimiento para Dioscorea Rotundata 4.5.8. 4.4.10 ANÁLISIS ESTADÍSTICO 5 CONCLUSIONES 6 RECOMENDACIONES BIBLIOGRAFÍA ANEXOS 58 58 58 58 59 59 60 60 62 64 66 66 67 68 69 69 70 71 72 72 73 74 75 75 76 77 78 78 80 82 84 84 84 85 85 87 88 89 92 II .2 Lectura de pH para Dioscorea Trífida 4.2 Comportamiento de Dioscorea Trífida en la hidrólisis enzimática 4.7.1 Lectura de °BRIX para Dioscorea Alata.2 Rendimiento para Dioscorea Trífida 4.9.4. 4.1 Rendimiento para Dioscorea Alata .2 Lectura de azucares reductores para la Dioscorea Trífida 4.3 Lectura de azucares reductores para Dioscorea Rotundata 4.9.1 Lectura de pH para Dioscorea Alata 4.5 Lectura de °BRIX 4.6.8 Producción de etanol 4.7 Conteo de microorganismos 4.6 Lectura de azucares reductores en la fermentación.1 Comportamiento de Dioscorea Alata en la hidrólisis enzimática 4.8 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES 3.5.

Diagrama de flujo de un proceso de destilación Figura 13. Esquema de distintas formas de levadura Figura 10. Hojas de D. Producción de ñame en los departamentos de Colombia año 2010 Figura 7. Esquema del proceso de glucolisis. Proceso de extracción de harina de ñame Figura 15. Estructura del almidón Figura 8. Hoja de D. Línea de tiempo de utilización de bioetanol a nivel mundial.Trífida (izquierda) y tubérculo (derecha) Figura 5. Hidrolizados Esterilizados Figura 17. Alata (izquierda) y tubérculo (derecha) Figura 4. Figura 2. Equipo de destilación simple Figura 14. Diagrama de la estructura de una levadura Figura 11. Toma de muestras Figura 19.LISTA DE FIGURAS Pag Figura 1. Hojas D. Imagen sobre hojas de Dioscorea (izquierda) y morfología del ñame (derecha) Figura 3. Lecturas de pH Figura 20. Rotundata (izquierda) y tubérculo (derecha) Figura 6. Curva de crecimiento de un microorganismo Figura 12. Esquema general del proceso de hidrólisis Figura 16. Montaje del equipo de Destilación III 6 10 12 13 14 16 18 27 34 35 37 42 42 49 52 53 54 55 55 56 . Figura 9. Fermentadores usados Figura 18.

Alata. Alata. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D. Gráfica 6. Gráfica 5. Comportamiento del descenso de °Brix durante la fermentación de D. Trífida. Comportamiento azucares reductores en la hidrólisis enzimática de D. Rotundata. Pag Gráfica 1. Trífida. Comportamiento del descenso de °Brix durante la fermentación de D. Alata Gráfica 3. Gráfica 4. Comportamiento °Brix en la hidrolisis enzimática de D. Comportamiento °Brix en la hidrólisis enzimática de D. Gráfica 12. Comportamiento de azucares reductores en la hidrólisis enzimática de D. Alata Gráfica 2.LISTA DE GRAFICAS. Comportamiento °Brix en la hidrólisis enzimática de D. Trífida. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Gráfica 10. Comportamiento azucares reductores en la hidrólisis enzimática de D. Gráfica 11. IV 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 . Rotundata. Gráfica 7. Rotundata. Rotundata. Alata. Comportamiento del descenso de °Brix durante la fermentación de D. Trífida. Gráfica 8. Comportamiento del pH durante la fermentación de D. Gráfica 9. Gráfica 13.

Alata Gráfica 17. Alata Gráfica 20. Trífida Gráfica 15. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D. Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D. Gráfica 22. Rotundata Gráfica 16.Gráfica 14. Rotundata Gráfica 24. Gráfico de medias de la variedad Dioscorea Trífida Gráfica 23. Gráfico de medias de la variedad Dioscorea Rotundata 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 83 V . Gráfico de medias variedad Dioscorea Alata Gráfica 21. Trífida. Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D. Trífida Gráfica 18. Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D. Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D. Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D. Rotundata Gráfica 19. Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D.

Equipos e instrumentos laboratorio Tabla 11. Almidón presente en diferentes alimentos. Tabla 2.LISTA DE TABLAS Pag Tabla 1. Tabla 6. Condiciones de la enzima α Amilasa Tabla 8.Lista de materias primas y reactivos Tabla 12. Cantidad de ñame utilizada en el proceso Tabla 7. Condiciones en el proceso de la fermentación Tabla 10. Tabla 5. Condiciones de la enzima AMG (Amiloglucosidasa) Tabla 9. Tamaño de células en procesos Biotecnológicos. Operacionalización de las variables 15 19 29 29 34 49 51 51 53 57 57 59 VI . Producción de Ñame A nivel Mundial año 2005. Metabolitos microbianos comerciales. Tabla 3. Compuestos producidos por el proceso de fermentación. Tabla 4.

se recopilaron las investigaciones realizadas previamente a esta investigación. De acuerdo a lo planteado anteriormente. teniendo en cuenta las propiedades que posee este tubérculo y sualta producción en las zonas regionales.mediante el proceso de hidrólisis enzimática y posterior fermentación. en el primer capítulo del proyecto se realizó el planteamiento y la formulación del problema. también se proponen los objetivos los cuales deben ser alcanzables para que la investigación sea valedera. además se establece las fuentes de información utilizadas y la descripción de las variables implicadas en el proceso.RESUMEN Hoy en día la búsqueda de energías alternativas y su utilización se ha convertido en una de las principales preocupaciones y desafíos para la humanidad. el futuro de la humanidad y del planeta se prevé desastroso debido al acelerado ritmo de contaminación y al gran impacto que se ha generando en la capa de ozono por su combustión. en donde se destaca la importancia de evaluar un nuevo sustrato (ñame) para la obtención de etanol y utilizarlo como alcohol carburante y así minimizar las emisiones de gases en la atmósfera reduciendo así el impacto ambiental. las bases teóricas que fundamentan la investigación y se planteo la metodología empleada para la obtención de los resultados. En el segundo y tercer capítulo. con el consumo desaforado de los combustibles fósiles. Por lo planteado anteriormente esta investigación tiene como finalidad realizar la evaluación de la obtención de etanol a partir de tres variedades de ñame como sustrato. con lo que se busca darle un valor agregado al uso de este producto agrícola. De seguir así. En el capítulo 5 y 6 se encuentran las conclusiones y recomendaciones que se pudieron extraer del proyecto. que servirán como punto de referencia a futuros investigadores que decidan indagar o explorar en este campo o que deseen llevar a cabo el proceso a escala piloto o industrial VII .

que por su composición permite la obtención de bioetanol. incluso algunos residuos de animales). pero hasta el momento no se ha desarrollado una fuente de energía que reemplace por completo a los combustibles fósiles. porque se puede reducir la contaminación proveniente de la utilización de energía a partir de los combustibles fósiles. Debido al agotamiento progresivo de los combustibles fósiles. 1.ESTUDIO DE LA OBTENCIÓN DE BIOETANOL A PARTIR DEL ALMIDÓN DE ÑAME (DIOSCOREA ROTUNDATA. caña de azúcar. producido a partir de la fermentación de los azucares que se encuentran en los productos vegetales (cereales. que supone la obtención de combustibles desde fuentes vivas (plantas. MEDIANTE LA HIDRÓLISIS ENZIMATICA Y POSTERIOR FERMENTACIÓN. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 1. que se puede utilizar como combustible o como aditivo de la gasolina. la calefacción y las industrias de generación de energía eléctrica) son los combustibles fósiles (petróleo. debido a que poseen un gran potencial energético. se han desarrollado innumerables estudios a lo largo de estas cuatro últimas décadas y en la literatura científica se reporta que una potencial fuente nueva energía es la biomasa. Teniendo en cuenta esto. Cada día que pasa se hace más evidente la necesidad de encontrar nuevas alternativas que puedan reemplazar a los combustibles fósiles. Sin embargo. que ayuden a la conservación y recuperación del medio ambiente. remolacha. en los últimos años se ha generado una gran preocupación por parte de los países de todo el mundo por buscar nuevas fuentes de energía. 1 Estudio realizado por Global Bioenergy Partnership (Asociación Global de Bioenergía) [GBEP (2007)] 1 . DIOSCOREA ALATA Y DIOSCOREA TRÍFIDA). microorganismos. Es por esto que la energía a partir de la biomasa. para la investigación se utilizó como biomasa un producto vegetal(ñame). carbón y gas natural). maíz entre otros). las fábricas. Este combustible debidamente procesado poco a poco comienza a penetrar como combustible en el mercado internacional1. es sin lugar a duda una fuente importante a tener en cuenta. Por eso estos compuestos son claves en el desarrollo de la vida y sociedad de nuestro planeta.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Históricamente las fuentes de energía que se han utilizado en el desarrollo de muchos procesos (el transporte. como el etanol o alcohol etílico.

19 N°5-2008. Trífida). además en la región de la Costa Atlántica. el ñame es solo importante en Brasil. la subregión natural de los montes de María en los departamentos de Sucre y Bolívar. Aun cuando actualmente se le conoce en todo el mundo. que se realiza generalmente en predios de economía campesina con bajo nivel de tecnificación. Rotundata). como el ñame criollo (D.cl/scielo. en Colombia el ñame se ha caracterizado como producto de cultivo y consumo tradicional en la Costa Atlántica2. de los cuales la primera es la preferida en la producción de tubérculos para el consumo humano. las áreas de mayor producción en Colombia son: la zona costera del departamento de Córdoba.php?pid=S0718-07642008000500003&script=sci_arttext 2 . y hay que tener presente que se necesitan alimentos para vivir. Armando y VELEZ. género Dioscorea. y algunos municipios de los departamentos del Cesar y la Guajira.unicordoba. El cultivo del ñame se considera abundante en la Costa Atlántica. Haití. Cayenensis. donde el 78% de la producción se dirige al mercado en fresco. Se encuentra distribuido en las regiones tropicales de alta pluviosidad. Japón. Trífida. trífida. El uso del ñame se ve en reflejado en las comidas cotidianas como (mote de ñame. pero también se necesitan combustibles para atender las necesidades 2 Evaluación De Propiedades Tecnofuncionales De Variedades De Ñame De La Costa Atlántica. Colombia. ñame azúcar (D. ñame espino (D. D. Alata). En Colombia se pueden encontrar varias especies de ñame. D. donde se cultivan alrededor de 29. sur de Asia incluyendo parte de China. Rotundata. El área mundial cultivada comprende tres regiones principales: África occidental.scielo. contiene fécula abundante y constituye un importante alimento en las regiones tropicales. a pesar de la alta producción en el año el ñame no es utilizado con otros fines a parte del alimenticio. ya que no se conocen transformaciones tecnológicas que permitan generar otro uso para este. Bulbífera y D. Alata y D. El cultivo de este tubérculo involucra a 9. escasa infraestructura de acopio. dulce de ñame y sancocho).: 11-18 Disponible en: http://www. Información Tecnológica-Vol. pág. seguidas por D.co/pregrado/copia%20alimentos/proyectos/pba. Disponible en: http://www. Esculenta) y ñampin (D. Venezuela y Antillas Francesas. En América. Carlos. Las especies más cultivadas corresponden a Dioscorea Alata. D.000 familias de pequeños productores cuyos sistemas de comercialización se caracterizan por bajos volúmenes. Su condición de alimento regional que no se sitúa como de primera necesidad ha estancado su explotación.757 ton/año3.El ñame pertenece a la familia DIOSCOREACEA. D. D. ñame papa (D.pdf fecha:13/03/2012 3 ALVIS.edu. Rotundata son las especies de mayor importancia tanto por el área sembrada como por la demanda del tubérculo. Esculenta. transporte y almacenamiento y una reducida transformación. Oceanía y los países del Caribe. Es necesario realizar un análisis sobre cómo afecta la producción de biocombustible al campo. Bulbífera).

Estudio de los factores que afectan la hidrolisis enzimática y el proceso fermentativo para la producción de alcohol a partir de la papa. Esta competencia exige volcar la vista al campo. etc. etc. Enero/Julio 2006. La demanda de alimentos y la demanda de combustibles van en aumento. por lo que se puede considerar una buena fuente de dicho polisacárido 6.1984. ¿Habrá otras alternativas? Sí. Si se mantiene la superficie agrícola actual solamente para la producción de alimentos. In Whistler & Paschal (Eds. Si hoy en día de una hectárea se puede obtener aproximadamente 3. La elección entre alimentos y biocombustibles no se puede plantear en términos absolutos.000 millones de hectáreas. técnicas más eficientes. elevar los rendimientos de producción agraria y reducir el consumo de combustibles por persona son alternativas viables para enfrentar la crisis. Pero mejor si no los tomamos en cuenta. Debido a la creciente necesidad en el país para la producción de bioetanol. entonces se necesitará incrementar las hectáreas arriba mencionadas. el de alimentos y el de combustibles. Manuel. que es un componente importante de los tubérculos encontrándose en una concentración aproximada de 15. 16(1). Juan Carlos. R. Sin embargo. mecanización. Se necesita tanto de los alimentos como de los combustibles. Manufacture of potato starch. Alimentos o combustible ¿Sinergia o dilema? Revista “Análisis” ISSN 1999‐6233vol 1 Nr 1 2008. mejoramiento del empresariado. Fuera de ampliar la frontera agrícola. Ambos mercados. a la agricultura.000 – 5. 4 BARRIENTOS. Starch: Chemistry and Technology (pp 87-101). la que actualmente está cubierta por bosques.de transporte. créditos. comercio. como por el crecimiento poblacional. semillas mejoradas.5 %5.000 – 9. entonces se necesitarían entre 220 y 800 millones de hectáreas para producir un volumen de bioetanol y biodiesel igual al volumen de gasolina y diesel consumidos actualmente. Para elevarla productividad agraria se tiene que aplicar nuevas tecnologías en la producción. En el mundo son aproximadamente 5.org 5 TREADWAY.000 litros de biodiesel. fecha: 30/11/2011 6 GONZALES.000millones de hectáreas las que se ocupan en agricultura. existen y van a seguir existiendo. porque no se puede renunciar a ninguno. Las nuevas tecnologías incluyen riego. están y seguirán compitiendo por los productos agrarios que son materia prima para la fabricación de biocombustibles. es relevante realizar investigaciones relacionadas con la evaluación de nuevos sustratos y metodologías para la obtención de azucares fermentables por medio de hidrólisis. aproximadamente 4. El ñame en su composición química posee almidón. La reducción del consumo de combustibles por persona tiene mucho que ver con el tipo de vehículos que se utilizan4.Disponible en www. 3 .ibepa. Jorge y MOLINA. elevar la productividad y hacer más eficiente el uso de combustibles. vivienda.). New York: Academic Press Inc. industria. tanto por el desarrollo económico. H.000 litros de bioetanol/año y 1. todavía queda superficie cultivable. Revista de ingeniería vol.

1. Este proyecto se hace necesario para la búsqueda de alternativas energéticas viables con el fin de disminuir el consumo de los combustibles fósiles debido a la contaminación que estos generan y con el tiempo poder llegar a remplazarlos.Por tal razón en esta investigación se evaluará un sustrato rico en almidón. utilizándolo como materia prima para la obtención de etanol a partir de la hidrolización del almidón mediante el uso de enzimas como la alfa amilasa.3 JUSTIFICACIÓN Los recursos no renovables (combustibles fósiles) en el país día a día se están agotando debido a la gran demanda que estos generan a nivel mundial por las diferentes aplicaciones y usos que estos tienen en procesos industriales. razón por la cual se identifica con las políticas de la Universidad de San Buenaventura planteado en su PEB “ La Universidad de San Buenaventura concibe 4 . debido a la generación de oportunidades para personas de escasos recursos que pueden desempeñarse en la siembra y recolección de la materia prima. teorías o procesos de fabricación las cuales conforman una ciencia más competitiva frente al ámbito laboral ya que el papel del ingeniero químico en la industria es fundamental en el desarrollo de muchos procesos. para enfrentar los retos que se nos presenten a lo largo de nuestra carrera profesional. La Ingeniería Química como ciencia está a la expectativa de nuevas investigaciones. Mediante la obtención de etanol a nivel de laboratorio se desarrollaran los pasos adecuados para realizar el proceso en mayores proporciones. Este proyecto se caracterizó por su proyección social. Amiloglucosidasa y la fermentación con Saccharomyces cerevisiae? 1. Amiloglucosidasa y posteriormente la fermentación con la Saccharomyces cerevisiae. Por otra parte generaría desarrollo en las investigaciones del país cerrando poco a poco la brecha tecnológica con los países industrializados de Suramérica como Brasil. 13. Es necesario realizar este estudio ya que busca dar un uso diferente a este alimento. Este proyecto es importante para investigadores y la comunidad científica porque se aplican las bases y conocimientos prácticos adquiridos a lo largo del proceso de aprendizaje. mejorando así su calidad de vida. Esto permite tener una visión más amplia del papel que ocupa el profesional formado en la Universidad de San Buenaventura en la sociedad.5 y 15 en %m/v utilizando las enzimas alfa amilasa.5.2 FORMULACIÓN DEL PROBLEMA ¿Se podrá obtener bioetanol a partir de la hidrólisis de almidón de ñame a concentraciones de 10.

1. evaluación de proyectos entre otras. Y con ellas se desarrollaran todas las actitudes y destrezas necesarias para la gestión del proyecto. adquiridos durante la formación universitaria las áreas de operaciones unitarias. 13.la proyección social como la relación permanente que la institución establece con la comunidad o medio externo para articularse en ella. Además en esta investigación se ponen al servicio de la sociedad los conocimientos adquiridos para mejorar la calidad de vida del hombre sin causar daño a la naturaleza. mediante la utilización de la levadura Saccharomyces cerevisiae.”7 En la realización de este proyecto se hizo necesaria la utilización de conocimientos. influir en los procesos de transformación social y en las realidades de su propio desarrollo. crecimiento microbiano y etanol producido) de las 3 variedades a las concentraciones 10. Realizar la fermentación del hidrolizado obtenido. ética.1 Objetivo general Evaluar la obtención bioetanol a partir del almidón de ñame (Dioscorea Rotundata.5 y 15% m/v. se hace necesaria relacionarlas con la orientación y aplicación de los programas académicos vistos en la Facultad de Ingeniería.2 Objetivos específicos Realizar la hidrólisis enzimática de las tres variedades de harina de ñame a las concentraciones 10. 2010. ayudando por medio de estas a la conservación del medio ambiente en busca del mejoramiento de su entorno. Dioscorea Alata y Dioscorea Trífida) mediante la hidrolisis enzimática y posterior fermentación. biotecnología.4 OBJETIVOS 1. 7 Proyecto Educativo Bonaventuriano.5. 1. Determinar los parámetros (azucares reductores. tecnología ambiental. Arte y Diseño de La Universidad de San Buenaventura. Dentro de la trascendencia de esta investigación.4.4. información. P49 5 . 13. Arquitectura.5y 15% m/v utilizando la enzima α amilasa y la amiloglucocidasa. comunidades regionales y nacionales.5.

1 Historia – etanol El Programa PROALCOHOL. iniciado en 1975 por el gobierno brasileño a raíz de la crisis del petróleo. Línea de tiempo de utilización de Bioetanol a nivel mundial. la preparación de vinos y cervezas se sugiere desde la prehistoria. Fuente:http://www. el descubrimiento de yacimientos de Petrobras. tenía por finalidad reducir la dependencia del país respecto a las importaciones del combustible fósil. Este programa se basó en los siguientes conceptos:    Un volumen de compras y precio garantizados de etanol por parte de Petrobras.1 ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS La producción de alcohol existe desde que el hombre conoce el fenómeno de la fermentación.edu.C. A mediados de los 80’s.2.pdf fecha: 28/10/2011 2.1. Una de las primeras menciones. se han hallado en papiros egipcios que datan de 3. sin embargo. Una subvención a la compra de vehículos impulsados por etanol puro. debilitaron el argumento de la independencia del petróleo y la caída de los precios 6 . El establecimiento de incentivos a la inversión en nuevos centros de producción. Figura 1. MARCO DE REFERENCIA 2.ec/bio2008/Documentos/BIOETANOLPPT. La figura 1 ilustra la evolución del uso de bioetanol a nivel mundial en el siglo 20.500 A.epn.

haciendo así más barato el etanol que la gasolina10. disponibles en el mercado a partir de 2003. En Colombia desde el 2005 se usa E10 en el 70% del territorio y a finales de 2009 estará el 100% del país usando esta mezcla. En agosto de 2008 la flota de carros "Flex" ya había alcanzado 6 millones de vehículos. Durante la década del 90.1. Bolivia. Paraguay.de este. ejemplo claro de esto se ve en su parque automovilístico que suma hoy casi tres millones de vehículos “dedicados” (solo etanol) y cerca de 16 millones de vehículos que consumen mezcla etanol – gasolina. Conferencia ARPEL 2009.2 Estado actual Latinoamérica El sector mundial de la producción de etanol se encuentra en plena expansión. Desgravación fiscal prácticamente total para la venta de etanol. En los últimos años. ya que el motor funciona con cualquier proporción de gasolina (mezcla E20-E25) y etanol anhidro (E100). año en que el gobierno aprobó la ley 693 que obligaba al enriquecimiento en oxígeno de la gasolina. José Guillermo.alcaldiabogota. Esto se hizo inicialmente para reducir las emisiones de monóxido de carbono de los coches. determinada por el gobierno8. Perú9. Al principio todo el interés en la producción del etanol vino de la industria de azúcar existente. popularmente conocidos como "Flex". representando un 23% de la flota de vehículos livianos de Brasil. La legislación sobre producción y uso de biocombustibles también se está aplicando en países como: Argentina. Regulaciones más recientes eximieron al etanol elaborado a partir de biomasa de algunos impuestos que gravan la gasolina. Punta del Este.7 10 Ley 788 de 2002 articulo 88 “Exención de impuestos para el alcohol carburante” disponible en:http://www. hizo para los productores de caña más atractivo la producción de éste que del etanol. Nicaragua. Los Biocombustibles. incluyendo automóviles y vehículos comerciales livianos. la industria automovilística brasileña desarrolló vehículos que operan con flexibilidad en el tipo de combustible. Costa Rica. En Colombia las investigaciones para utilizar el etanol como combustible comenzaron en 2001. la evolución del mercado del azúcar.jsp?i=7260 7 . La obligación de añadir a la gasolina una proporción mínima de etanol del 22-24%. Uruguay p. Por otro lado. Guatemala.co/sisjur/normas/Norma1. 8 LEÓN. p.gov. el programa fue revisado a fondo y a partir de 1999 se produjo la apertura del mercado de etanol y el fin de los precios garantizados y con las siguientes modificaciones:    Orientación hacia el sistema de mezcla. hizo que el apoyo a la producción de etanol decayera por el diferencial elevado de precios. 2. Honduras.6 9 Ibíd.

en el estudio para la cuantificación de alcohol a partir de harina de batata obtuvo una concentración de etanol del 9. Trífida en las concentraciones 10% y 13% m/v presentó mayores rendimientos en cuanto a volúmenes de alcohol.01 (mezcla de alfa amilasa y glucoamilasa) en la hidrolisis y la Saccharomyces cerevisiae en la fermentación. Empleando las enzimas comerciales Pectinex UltraSP-L. Termamyl 120 L y la AMG 300 L de la Novo Nordisk en la hidrólisis y Saccharomyces cerevisiae en la fermentación. estudiaron la hidrólisis enzimática y la fermentación de la papa (Solanum tuberosum). Las plantas del etanol están siendo incentivadas por tratos fiscales. durante un tiempo de fermentación de 56 horas. El gobierno alienta a convertir gradualmente las fuentes de combustible de los coches a una mezcla del 10 por ciento de etanol y de 90 por ciento de gasolina. empleando como microorganismo Saccharomyces cerevisiae.66 L/Tm de harina. quienes en el seguimiento del proceso de fermentación alcanzaron una concentración máxima de alcohol de 10. por lo tanto se realizó una recopilación de estudios e investigaciones afines con esta proyecto y que presentamos a continuación: CASTAÑO y colaboradores.4% v/v y un rendimiento de 129 L de etanol/Tm de harina de batata. Bulbífera en las concentración 16% m/v arrojo los menores rendimientos con un valor de 520. Trífida) por vía enzimática. González y Molina en el 2006. algunos de los que se han utilizado con estos fines son la yuca y la papa.87 y 792. Se obtuvo una concentración de etanol de 14. De forma similar se demostró que la variedad D. a fin de determinar las mejores condiciones para producir alcohol.96 L/Tm de harina respectivamente. ASTURIZAGA y BOCANEGRA. Las investigaciones sobre el bioprocesamiento de ñame y de tubérculos afines son escasas debido a que por lo general su estudio va más dirigido como alimento. Los resultados en la producción de alcohol demostraron que la variedad D. con valores de 786. Ha habido interés en plantas de etanol de yuca (mandioca) y de nuevas plantaciones de la caña de azúcar. lo que lo convierte en materia disponible para el procesamiento de etanol.5 g/h (48 horas de proceso) y con una concentración de harina de ñame de 28% m/v empleando la enzima STARGENTM0. El rendimiento 8 . T. pero este es de los tubérculos con mayor presencia de almidón. y las necesidades energéticas son similares a las que se necesitarían para producir el azúcar.En la industria del alcohol el ñame es muy poco empleado. (2011) Evaluaron la producción de etanol a partir de harina de yuca en un sistema de hidrolisis enzimática y fermentación. pero aún no se ha conseguido producir carbohidratos a bajo precio.33% v/v. (2007). Assis.ya que es relativamente fácil añadir un módulo para desarrollar etanol al final de una fábrica de azúcar. (2008) Evaluaron los rendimientos en el proceso de obtención de alcohol a partir de harina de Ñame ( Dioscorea Bulbífera.6% v/v con una productividad de 2.

15 y 20% v/v respectivamente. 20 y 30 ml/Kg.31% del almidón inicial y un 80% de rendimiento de azucares totales. BRINGHENTI. En el diseño de un proceso de producción de etanol anhidro a partir de jugo de caña.. también en el 2006.45% de azucares. de almidón para el extracto de glucoamilasa. necesitando un ajuste para su realización comercial. P.6% v/v y4% v/v a partir de un hidrolizado de almidón residual de harina de yuca del 10%m/v. Un análisis mostró que cerca del 75% de la materia seca inicial fue hidrolizado y el residuo presento 37% de almidón. En el trabajo “Estudio preliminar para la obtención de jarabe de glucosa a partir de la hidrólisis enzimática del almidón de yuca utilizando extractos crudos de alfa amilasa (B. (2001). 20. Níger)”. en el estudio de la fermentación alcohólica de sustrato amiláceo hidrolizado enriquecido con melaza de caña. 1.5 L de etanol/Tm de papa. A. obtuvieron una concentración de etanol del9. Los 9 . aplicaron extractos crudos enzimáticos a una solución de almidón de yuca 20% (m/v). El jugo de caña contenía una composición de 14% de sólidos solubles (14 ºBrix) y en la fermentación el microorganismo utilizado fue Saccharomyces cerevisiae.85% de proteínas y 0. 2% v/v. en un volumen de reacción de 500 ml. 0. 45 ml/ Kg. el análisis económico demostró un proceso viable. la fermentación alcohólica se realizó en 48 horas. 30% de fibra en base seca. Para esto se usó como enzima complementaria la pectinasa para la hidrólisis del mosto. et. 2.4% v/v. Se ensayaron tres relaciones enzimas /sustrato 10.de etanol del proceso fue de 94. usando como microorganismo Saccharomyces cerevisiae. BRINGHENTI..76% v/v a partir de residuos del proceso de obtención de harina y almidón de yuca usando una concentración del 18% m/v y enriquecido con un 12% de melaza residual del proceso de producción de sacarosa de caña de azúcar. L y CABELLO.Desarrollaron un estudio sobre la utilización del residuo sólido obtenido en la extracción de almidón de yuca que es usado fundamentalmente en la alimentación animal. L y CABELLO. 30% de azucares totales. Licheniformis) y glucoamilasa (A. obtuvieron concentraciones de etanol del 1. 11. al. la caracterización del subproducto presentándolos siguientes resultados en base seca: 80% de almidón. obtuvieron una concentración de 6 .8% v/v de etanol. el mosto obtenido presentó una concentración de 13 ºBrix siendo necesario concentrarlo. enriquecido con concentraciones de melaza de caña del 5. C en el 2005.14% de cenizas. 3. MAGALY L. El proceso de hidrólisis tuvo una conversión de 86. GRISALES. de almidón para el extracto de alfa amilasa y 15.6% v/v. en Brasil 2004. utilizando una concentración de 20% m/v de sustrato. C. 10. CEREDA M. el objetivo de este trabajo fue desarrollar la evaluación técnica económica de la producción de alcohol a partir del subproducto de la obtención del almidón de yuca.5% de fibra.

34% de equivalente de dextrosa (Lujan D. 108 p. Alvarino N. licuefacción y 45 ml/Kg de almidón en la licuefacción. Trífida) por vía enzimática. Salcedo J. Este tubérculo tropical cuya parte expuesta es en forma de enredadera. de almidón en la. Carmen.mejores resultados de la hidrólisis del almidón de yuca se lograron con las relaciones de 30 ml/ Kg. Universidad de Sucre. Imagen sobre hojas de Dioscorea (izquierda) y Tubérculo (derecha) Fuente: www.elapuron. SIN 0127610.2. es muy popular en centro y sur América. 2. 11 ASTURIZAGA AVILEZ. 2001)11.infojardin. Yajaira y BOCANEGRA AMAYA. Sincelejo.2 BASES TEÓRICAS 2.1 Ñame Nombre Científico: Dioscorea spp En la figura 2 se puede observar la forma de las hojas y del tubérculo de una de las especies de este género. 2008. Figura 2. África y partes de Asia. Diversas variedades de ñame se cultivan a través de los trópicos y en parte de las regiones sub-tropicales y templadas.com y www.. con lo que se obtuvo un jarabe de glucosa de 83. 10 .com/blogs/cocina/9/el-ame/ fecha: 13/06/2011 Identificación del Producto El ñame es una de varias especies de plantas del género Dioscorea (de la familia Dioscoreácea). Evaluación de los rendimientos en el proceso de obtención de alcohol a partir de harina de Ñame ( Dioscorea Bulbífera. Facultad de Educación Y Ciencias. Revista Temas Agrarios. En África occidental y en Nueva Guinea el de ñame es uno de los principales cultivos primarios. Programa de Biología. nativo a regiones cálidas de ambos hemisferios. al igual que en el Caribe.

Dioscorea Japónica. Ecología El ñame requiere para su cultivo temperaturas entre 18º C y 34º C y condiciones de precipitación de entre 1.Aunque el Camote "SweetPotato" y el ñame son similares en muchas formas. estos se caracterizan principalmente por la forma de los rizomas (esféricos. En la actualidad el ñame es el más difundido especialmente en las Antillas. Dioscorea Cayenensis (ñame amarillo).300 mm Y suelo franco arenoso (más arenoso que arcilloso). Esta especie se caracteriza por sus tallos cuadrangulares. Mano de Tigre. 11 . con altura máxima de 800 más. dependiendo de la variedad del ñame. La textura de este tubérculo puede variar de suave y húmedo a áspero. con 3 a 5 nervios principales que salen de la inserción del peciolo. la parte carnosa puede ser de diferentes tonalidades de blanco. y Canadá se presta a confusión). cada una con dos o tres yemas. estas son plantas de diferentes especies. seco y harinoso.200 mm y 1. Diamante 22. Existen más de 150 especies de ñames en el mundo. púrpura o rosado. con frecuencia manchadas de morado.UU. Variedad Dioscorea spp. estas especies tienen hojas de forma acorazonada y se propagan por rajas (trozos). En el viejo continente su área de distribución solo incluye zonas de alta humedad. Características El ñame es un planta (tubérculo) cuya raíz comestible es muy apetecida por su valor alimenticio y rico sabor. La parte superficial de la planta es una enredadera trepadora con tallos (bejucos) que pueden alcanzar hasta más de 3 m. La lámina es acorazonada. cilíndricos. En nuestro medio el ñame se presenta por regla general en trozos y se vende por masa. (y por ello en países como los EE. y la piel desde blancuzca a chocolate oscuro. Brasil y Venezuela. Culebra. 2. Sobre el nivel del mar. Como es una planta de cultivo muy antiguo se conocen numerosos clones.2. amarillo.2 Dioscorea Alata (Ñame Diamante) Tipos silvestres de esta especie se encuentran aún en las selvas húmedas de malasia. con las alas membranosas de borde irregular. planos.. A América fue introducido por los esclavos africanos y navegantes portugueses en el siglo XVII. Dioscorea Alata (ñame de agua). Baboso de Ocú. Dioscorea Rotundata (ñame blanco).

aladas.html y http://www. Esta especie florece más regularmente que las otras especies del genero Dioscorea spp cultivadas.stuartxchange. delgados que enrollan hacia la izquierda. Las inflorescencias estaminadas son racimos simples o muy ramificados. 12 . trífida es una planta de tallos volubles. La pulpa es uniforme.flickr.2. raíces y estolones. El fruto es una cápsula. se observa forma esférica.3 Dioscorea Trífida (Ñame Baboso). compacta y varía de 12 LEÓN. Las plantas son unisexuales.Fecha: 13/06/2011 2. claviforme y a menudo con ramificaciones muy cortas. D. La superficie es rugosa. Fundamentos Botánicos de los Cultivos Tropicales. La figura 3 ilustra el tipo de hojas y la forma del tubérculo de la especie Dioscorea Alata Figura 3. aun en la misma planta.encorvados y alargados) son de forma irregular generalmente. se ensancha formando el tubérculo. provistos de dos a ocho alas membranosas. generalmente en mayor número y desarrollo en la parte inferior del tallo. 1968. a veces con raicillas.org/Ubi. Las hojas miden hasta 25 cm de largo. son digitadas. Jorge. El tallo subterráneo es un órgano irregular y corto del que emergen los tallos aéreos. 92p. con flores verduzcas de 4 a 6 mm de diámetro. estos últimos en círculos sucesivos. Alata (izquierda) y tubérculo (derecha) Fuente:http://www. El color de la pulpa varía de blanco a amarillento12. con tres lóculos. mientras que las inflorescencias pistiladas consisten de dos racimos simples qué nacen de la misma axila con flores de 12 a 24 mm de largo. cada uno con dos semillas diminutas. El estolón que mide hasta 70 cm de largo.com. con tres a siete segmentos o lóbulos. Costa Rica. fusiforme. Hojas D. Los tubérculos varían mucho en forma y tamaño. con el central más grande.

tramil. 14 SÁNCHEZ. Figura 4. Evaluación de los rendimientos en el proceso de obtención de alcohol a partir de harina de Ñame (Dioscorea Bulbífera. Sucre y Bolívar”. de empleo rural y de oferta de alimento a sus pobladores y también es un producto de exportación.color blanco.. de postcosecha y de comercialización del ñame en Córdoba. En Colombia.. con un sabor y apariencia muy agradable después de cocinado. amarillo hasta morado.4 Dioscorea Rotundata (Ñame Espino) El ñame espino (Dioscorea rotundata) es un cultivo de pequeños y medianos agricultores. es cultivado por pequeños y medianos agricultores y constituye la principal fuente de ingresos y de empleo rural en muchas zonas. Universidad de Sucre.2. La figura 4 muestra ejemplares que corresponden a las características descritas anteriormente. 2008. Los tubérculos durante el período de almacenamiento. El peso de los tubérculos está entre 300 y 400g cada uno13. “Descripción de aspectos productivos. HERNÁNDEZ. 108 p.5 millones anuales14. el ñame se usa para alimentación de la población de la Costa Atlántica. Hoja de Dioscorea Trífida (izquierda) y tubérculo (derecha) Fuente:http://www. L.php?id_elem=160&famil=DIOSCOREACEAE fecha: 06/05/2012 2. Carmen. Sincelejo. 13 . El tubérculo es una estructura del tallo y no de la raíz cuya función es el almacenamiento de gránulos de almidón. C. Además su exportación a los mercados de Estados Unidos y Europa le genera al país más de US$2. presentan puntos elevados semejantes a pústulas que van a dar origen a raíces. Los gránulos de almidón son 13 ASTURIZAGA AVILEZ. Yajaira y BOCANEGRA AMAYA. Programa de Biología. Trífida) por vía enzimática. La planta de ñame tiene un sistema de raíces fibroso.net/fototeca/imageDisplay. 2003. Corpoica. Facultad de Educación Y Ciencias. que constituye en muchas regiones la principal fuente de ingresos.

de los cuales la primera es la preferida en la producción de tubérculos para el consumo humano.Bulbífera y D. Las especies más cultivadas son: D. Rotundata. Está estimado que existen más de 600 especies en el mundo. Galo. dependiendo de la especie. Rotundata (izquierda) y tubérculo (derecha) Fuente:http://insumosdeamecoloso. Figura 5. LAWANSON AO.fecha: 13/06/2011 2. los cuales junto con la papa. 15 16 GAMERO. D. Es el principal alimento cultivado en África occidental. “Consideraciones sobre fisiología de la planta de ñame”. D.org. la arracacha y la batata ocupan un lugar importante en la alimentación humana.5 Producción de Ñame a nivel Mundial La mayoría de los ñames cultivados pertenecen a la familia Dioscoreácea. Disease induced changes in carotenoid content of edible yam (Dioscorea spp) infected by Botryo diploid theobromaeandAspergillusNiger. tienen concentraciones de sustancias urticantes. siendo Nigeria el mayor productor con 26587000 toneladas. sur este de Asia. rotundata) los concentran más que otras especies (D. Además de almidones los tubérculos de ñame. islas del Pacifico sur.wikimedia. Hojas de D. (1987). Alata). D. la yuca.com/y species. D. La mayor producción de ñame y los mejores rendimientos de los cultivos se dan en el continente africano. trífida. Colombia ocupa el séptimo lugar con una producción de 333532 y en el último lugar se encuentra se encuentra la República Democrática del Congo. Mycopathologia 98:49-58. 2004 ADELUSI A. 14 .blogspot. y al género Dioscorea. En la figura 5 se observa la forma de las hojas y el tubérculo de la especie Dioscorea Rotundata.2. el Caribe.Cayenensis.Esculenta. Corpoica. India y partes de Brasil)16.redondeados o elípticos y algunas especies de ñame (D. fenoles y otras sustancias como esteroides o corticoides15. Alata. Esta planta se presenta como una enredadera y se caracteriza por la presencia de tubérculos subterráneos y aéreos. de taninos. Todas las estadísticas están reflejadas en la tabla 1. en donde en una escala de mayor a menor productor los primeros 9 países constituye a este continente. con una producción de 84900.

fao.6 Producción de ñame en Colombia De acuerdo con las cifras del Ministerio de Agricultura y el Instituto Colombiano Agropecuario (2009). con un rendimiento medio de 12 a 15 Tm/ha entre las variedades espino y diamante17.Tabla 1.2.gov.000 hectáreas en ñame y se producen 200.000 Tm. La producción se realiza principalmente en las regiones de las costas Atlántica y Pacífica. siendo los principales productores los 17 Articulo exportadores de ñame de la mano del ICA (2009) disponible en: www. en el país se cultivan 25.co 15 .ica.org . Fecha: 06/05/2012 2. Producción de Ñame A nivel Mundial año 2005 Fuente: www.dirección estadística. “principales productores de alimentos y productos agrícolas.

generalmente asociado con cultivos de yuca y maíz. F. España y Alemania para alimento de la población latina y uso farmacológico. 16 . como se ilustra en la figura 6. En el anexo A se observa la superficie cosechada.5 millones anuales. Producción de ñame en los departamentos de Colombia año 2010 Fuente: Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. La comercialización de ñame es regional para consumo en fresco. con bajo nivel tecnológico. Los griegos los llamaron Anylon quizás debido a que el contrario de lo que sucede con la harina. Además su exportación a los mercados de Estados Unidos y Europa le genera al país más de US$2. 1954 p. producción y rendimiento obtenido por los departamentos de Colombia entre los años 1997 – 2008.Según rastros arqueológicos hallados en las tumbas de los reyes egipcios.7 ALMIDÓN Historia del almidón Exactamente no se sabe desde que época es conocido como el almidón. Anuario estadístico (2010) fecha de actualización 27/03/2012 En Colombia el ñame es cultivado por pequeños y medianos agricultores.2. sino por el lavado 18. Bolívar y Sucre. enciclopedia de química industrial. Barcelona: Gustavo Gill. tomo VI. 2. y constituye la principal fuente de ingresos y de empleo rural en muchas zonas de la Costa Atlántica. presentan muestras 18 ULLMAN. aunque una parte se exporta a Estados Unidos.departamentos de Córdoba. Figura 6. se obtenía no por el molino.

transformándolos por hidrolisis en glucosa la cual es transformada por medio de la savia. Zaragoza. El almidón es un polisacárido de reserva alimenticia predominante en las plantas. Del mismo modo. por lo que un análisis microscópico es muy útil para confirmar el origen del almidón. la celulosa forma parte del armazón de las plantas.de pegantes a base de almidón. Tanto el almidón como los productos de la hidrólisis del almidón constituyen la mayor parte de los carbohidratos digestibles de la dieta habitual. es transformado en azucares por medio de enzimas diastáticas. además ayuda a determinar la presencia de materiales extraños. son insolubles en agua fría. formando así el almidón transitorio. Después de la celulosa. En la figura 7 se ilustra la estructura química del almidón. forma un gel19. es llamado almidón de reserva. la cantidad de almidón utilizado en la preparación de productos alimenticios. si su membrana externa se rompe al ser molidos. transitorio y de reserva. Editorial ACRIBIA. los cuales datan aproximadamente de año 3500 A. El resto de almidón es transportado a los sitios de almacenamiento donde tiene como función servir de alimento para los brotes jóvenes. En las plantas existen tres clases de almidón: Almidón de asimilación. P. Cuando los gránulos están intactos. El almidón de asimilación es aquel que ha de hervir en la nutrición de la planta y el cual se encuentra en forma de almidón soluble. pero usando como materia prima el trigo. En la industria de almidón se conoce muy poco acerca de su aparición. Química de los Alimentos. pasando primero por la fase de almidón soluble.C. O. 17 . El almidón en el interior de la planta. el desarrollo debió efectuarse muy lentamente al igual que en otros países. 19 FERMEMA. el almidón es la sustancia orgánica más ampliamente distribuida en la naturaleza. sin contar el que se encuentra presente en las harinas usadas para hacer pan y otros productos de panadería. y proporciona el 70-80% de las calorías consumidas por los humanos de todo el mundo. 2 228-240 da ed. el cual puede transformarse algunas veces en gránulos muy finos. insectos o residuos de estos. afrecho. estos gránulos se hinchan en agua fría y si se calienta por encima de 55 ºC. España 2000. aprovechando su solubilidad. Se admite probablemente que los holandeses en el siglo XVI habían fabricado almidón a gran escala. mientras que el almidón representa su reserva de carbohidratos. El almidón se halla en forma de gránulos con la forma y tamaño característicos de la planta de la cual se obtiene.

Estructura del almidón. En virtud de su forma podemos dividir los almidones en 5 clases:      Almidones de gránulos en forma de óvalos grandes formando anillos concéntricos y con el núcleo (hilum) colocado excéntricamente.ar/botanica/tema8/8-4plastidios. gelificante. varios tipos de arroz (Oryza sativa). humectante. particularmente de patata (Solanum tuberosum). estabilizante. Su procedencia se distingue por el tamaño y la forma de los granos. Ejemplo: el trigo. agente antienvejecimiento de pan. 18 . Almidones cuyos gránulos forman ángulos pequeños y poligonales.biologia.edu.htm. Fuente: http://www.Figura 7. Fecha: 24/04/2011 Los almidones comerciales se obtienen de las semillas de cereales. particularmente de maíz (Zea mays). nitrógeno y carbono). Almidones de gránulos ovoides usualmente formando anillos concéntricos. que incluyen las siguientes: adhesivo. trigo (Triticum spp. alcohol y éter. Ejemplo: la yuca.). ligante. Almidones de gránulos ovoides con núcleo central. pudiéndose identificar fácilmente.6 mg/ml. Ejemplo: las leguminosas. Al microscopio presenta características definidas. Almidones de gránulos truncos en uno de los extremos. Ejemplo: el arroz. formador de películas. y de algunas raíces y tubérculos. plástico. Tanto los almidones como los almidones modificados tienen un número enorme de posibles aplicaciones en los alimentos. Ejemplo: la papa. amorfo. texturizante y espesante. enturbiante. es un hidrato del carbono (oxigeno. Es insoluble en agua. batata (Ipomoea batatas) y mandioca (Manihot esculenta). Grupo del sagú. Químicamente. cuya densidad es 1. con núcleo irregular. glaseante. que a veces se caracteriza por un brillo peculiar. estabilizante de espumas. Propiedades del almidón El almidón es un polvo blanco.

pero no como constituyente del granulo. estudio de alimentación y nutrición año 1997. Además de esto se sabe que el almidón contiene alrededor del 20 % de una fracción soluble en agua llamado Amilosa y el 80% de una solución insoluble conocida como amilo pectina. con orientación α. Los carbohidratos en la nutrición humana. Esta parte es más soluble que la anterior y no forma una pasta. la hemicelulosa. La tercera parte es hallada solo en los cereales. el cual es un Ester amilofosfórico. granulosa o βalmidón. En el granulo de almidón podemos distinguir tres partes: La primera es una envoltura de amilopectina y α -amilosa o un almidón a menos soluble y que contiene un Ester fosfórico. necesitándose para ello un calentamiento. mientras que la celulosa tiene uniones 1-4 glucosidicas con orientación β. ni da color con el yodo-yoduro. Es difícilmente atacada por enzimas. Estructura y composición Todos los almidones tienen fórmula empírica (C6H10O5)n.La tabla 2 muestra la concentración en masa seca de almidón presente en varios alimentos. Tabla 2. Almidón presente en diferentes alimentos Cantidad de almidon presente en algunos alimentos Alimento % en masa de Almidon Cereal 65-75 Edulcorantes 10-12 Raices y Tuberculos 70-75 Frutas 5-8 Hortalizas 8-15 Legumbres 50-60 Fuente: FAO (1999). el factor n tiene por lo menos un valor igual a 4. La diferencia entre la celulosa y el almidón radica en que en el almidón. Con dicho calentamiento forma una pasta y con una solución alcohólica de yodoyoduro da una coloración violeta La segunda parte es una sustancia inerte formada por β-amilosa. llegándose a encontrar fórmulas con 100 a más átomos de carbono. Químicamente es una mezcla de dos polisacáridos muy 19 . los restos de glucosa están unidos entre sí por uniones glucosidicas 1-4.

glucosa se encuentran unidas mediante enlaces glucosidicos α (1. La disposición radial y ordenada de las moléculas de almidón en un gránulo resulta evidente al observar la cruz de polarización (cruz blanca sobre un fondo negro) en un microscopio de polarización cuando se colocan los polarizadores a 90° entre sí. además tiene alrededor de 4-5% de las unidades de glucosa unidas por enlaces α (1. Puesto que la cristalinidad es producida por el ordenamiento de las cadenas de amilopectina. Robert.es/~macromol/curso08-09/pls/quees. esta hidrólisis puede llevarse a cabo con ácidos inorgánicos. ácidos orgánicos o por acción enzimática.va en el otro). (el H + va en un componente y el OH.6) dando una estructura ramificada creciente. la cual es la más utilizada industrialmente22. en donde el agua efectúa una doble descomposición con otro compuesto. la amilosa y la amilopectina. España 2000.eis. Entre los valores aceptados para la amilosa están entre 1.2. 20 21 Disponible en: http://www. 22 da FERMEMA. USA. el centro de crecimiento de gránulo20 Amilosa La α.amilosa está constituida por cadenas largas no ramificadas en las que todas las unidades de D. Amilopectina Presenta una cadena lineal de tipo α como en la amilosa.htm ta MORRISON.1 y 1. Zaragoza. 2 ed. Y BOYD. por lo tanto la unidad que se repite es la maltosa. El peso molecular de la amilopectina es muy variable. en mayor o menor cantidad para acelerar la reacción. Addison–Wesley Iberoamericana. Editorial ACRIBIA. su aislamiento y el método utilizado. las mejores valoraciones del peso molecular promedio (pro difracción) es de 10 a más de 20 millones de daltons21.4). El centro de la cruz corresponde con el hilum.9 millones de daltons.8 Hidrólisis Se denomina hidrólisis a las reacciones de la química inorgánica.uva. 5 Ed. contienen regiones cristalinas y no cristalinas en capas alternadas.Química Orgánica. Química de los Alimentos. Este término también puede aplicarse a reacciones en donde un ácido se añade al agua. 1996. 228-240 20 . O. Robert.similares. P. El peso molecular de la amilosa depende de su origen botánico. los gránulos de almidón céreo tienen parecido grado de cristalinidad que los almidones normales. 2.

21 . A medida que actúa el ácido. Si hervimos el almidón con ácido Clorhídrico 1N durante 1 hora.5 paz una solución al 33% de almidón. España 2000. ya que el ácido fosfórico que existe en el almidón forma después de neutralizarse fosfatos de hierro insolubles. Editorial ACRIBIA. el almidón se rompe totalmente y se reduce a glucosa esta reacción es conocida como hidrolisis intensa. 2 228-240 da ed. El almidón tratado con ácidos se rompe en cadenas cortas de dextrina. el peso molecular y la viscosidad de los productos decrecen y el poder reductor aumenta. la temperatura. de ser lo más pura posible y libre de hierro. Química de los Alimentos.2. El grado de degradación depende de la concentración del ácido. que da al jarabe un sabor amargo. y el tiempo de hidrolisis. quedando en suspensión en el jarabe y es muy difícil su separación por filtración23. El almidón es sometido a un proceso de hidrolisis mediante la cual ocurre un desdoblamiento ya sea por un exceso de agua o por la presencia de una pequeña cantidad de fermento o acido. así como la presión y la temperatura ejercen gran influencia en la duración de la sacarificación. Los ácidos utilizados para la producción de dextrinas son el Ácido clorhídrico y el Ácido Nítrico. un ejemplo de estos productos en la Genciobiosa. la cantidad de ácido empleado es tal que el valor de pH se ajuste a 1. y el ácido fórmico. O. Los productos de degradación son principalmente el hidroximetulfurtutal. el ácido levulinico. finamente dividido. La recombinación de unidades de D-glucosa o de esta con fragmentos como maltosas. P. Mediante este procedimiento se logra el desdoblamiento de las moléculas de almidón por la acción de ácido sulfúrico o ácido clorhídrico diluidos. El agua utilizada. conducen a la formación de productos de reversión los cuales pueden ser hidrolizados. 2. su concentración. Zaragoza. La clase de ácido. Por lo general. la cantidad empleada referida a la cantidad de almidón.9 Hidrólisis Química. 23 FERMEMA.Reacción de hidrólisis enzimática: Con la finalidad de transformar las moléculas del almidón en azucares fermentables los cuales son asimilados por las levaduras o bacterias.

las células de la sangre. las semillas y granos de muchas plantas. Las dos clases de amilasas más conocidas actualmente son: Alfa-amilasas: las cuales desdoblan el almidón en glucosa y maltosa. G y WOODS. 1964 MONTES. L. Las amilasas actúan muy lentamente sobre el almidón. 26 TUCKER. Enzimas con Aplicación Industrial. La acción de las amilasas sobre el almidón depende del origen del mismo. las semillas y granos de muchas plantas. primero la 24 25 DE RAFOLS. W. dando productos semejantes a los obtenidos por hidrólisis acida. Las enzimas son piezas esenciales en el funcionamiento de todos los organismos vivos. las células de la sangre. La función de estas enzimas es de romper las moléculas de almidón. M y MAGANA. London. los jugos pancreáticos. que no dan color con el yodo. Dicha transformación es catalizada por enzimas. Barcelona.1991. lo que evita alteraciones de los componentes.10 Hidrólisis enzimática (sacarificación de materiales amiláceos) La sacarificación es el proceso que tiene por objeto la transformación del almidón de las materias primas amiláceas en azucares. en hongos y bacterias.4 glucosídicos. Esta última se compone de cadenas longitudinales que contienen unidades de glucosa unidas por enlaces α-1.mx/publicaciones/avaype/sepoct02/HORCASITAS.2. Disponible en: http://www. actuando como catalizadores de las reacciones de síntesis y degradación que tienen lugar en ellos25. Asimismo se puede trabajar en condiciones moderadas. La función de estas enzimas se encuentra en la saliva. su gran especificidad de acción hace que no se produzcan reacciones laterales imprevistas26. 22 .La utilización de estas en la hidrolisis del almidón presenta una serie de ventajas. La producción de jarabes de glucosa a partir de almidón se realiza en dos pasos. Eds.Enzymes in Food Processing. Aprovechamiento Industrial de los productos agrícolas.PDF. especialmente de temperatura. Estas enzimas se encuentran en la saliva. por lo que debe ser sometido a un proceso de cocción para obtener una buena dispersión y rompimiento de los granos de almidón llevándose a cabo una hidrolisis rápida. se caracteriza por la facilidad de fragmentación de los almidones en dextrinas reductoras. I. Una cadena lineal puede contener de 70 a 100 unidades de glucosa aproximadamente 24 Enzimas.2.2004. Blackie and Son Ltd. ya que el almidón consta de una mezcla de 75-80% de amilopectina y el recto de amilosa. en hongos y bacterias. Beta-amilasas: convierten el almidón en glucosa.cinvestav. los jugos pancreáticos. además de las de índole económica o tecnológica.

J. Enzimas industriales. Enzimas α – amilasas. en los procesos de industria del almidón y de un número de ventajas tales como: especificidad de la reacción. M. C. New Delhi. poseen una estructura (β/α) o barril TIM conteniendo residuos 27 FRAZIER. La roche (Eds. India pp 189 – 220. a. Universidad de Salamanca. hidrolizan los enlaces glucosídicos α 1-4. CR. Pandey. las cuales rompen al azar enlaces α 1-4 glucosídicos presentes en la parte interior del sustrato o de la cadena de amilasa y amilopectina (endo amilasas). J. y WESTHOFF D. Las enzimas hidrolizadas prefieren la hidrolisis acida.licuefacción del almidón y segundo la sacarificación (conversión de la molécula de almidón en moléculas de glucosa). que rompen enlaces α 1 -4 y enlaces α1-6 glucosídicos ordenadamente a partir de los extremos no reductores del sustrato28. Zaragoza. Las enzimas que hidrolizan el almidón y las que lo modifican o enzimas transglicolisantes30. Soccol. 1ª edición.). Asiatech Publishers Inc.amilasas puede ser dividida en dos grupos. C. de enlaces α 1-4 o α 1-6 glucosídicos (transglicosilación). La isoamilasa hidroliza enlaces α 1-6 en la amilopectina y la pollulanasa tipo I hidroliza enlaces α 1-6 glucosídicos en pululan y amilopectina29. España. EZHILVAN NAN. A. Universidad del Cauca. Acribia S. o una combinación de ambas actividades. p. Webb. In: Enzyme Technology. estabilidad de los productos generados. R. 2005. Actúan sobre los residuos de glucosa externos de la amilasa y amilopectina produciendo solamente glucosa (glucoamilasa y glucosidasa) o maltosa y dextrinas y glucoamilasa que liberan unidades de glucosa a partir de los extremos no reductores del sustrato. Aplicaciones de las enzimas. RAO.Añilases. Microbiología de los alimentos. Las amilasas se pueden dividir en tres grupos: α amilasas. Estas enzimas degradan amilopectina obteniéndose así polisacáridos de longitud lineal.A 1993. T. 30 CARRERA. Enzimas degradadoras de almidón (amilasas). W. bajo requerimientos de energía y eliminación de la etapa de neutralización. Estas enzimas se caracterizan por actuar sobre los enlaces α glucosídicos e hidrolizan estos enlaces para producir mono u oligosacáridos α -anomericos (hidrolisis). Módulos de Biotecnología. 23 . 2005 29 SATYANARAYANA. La familia de la α. La licuefacción se realiza utilizando como catalizador las enzimas α -amilasas ó βamilasas. y la sacarificación se realiza utilizando como catalizador la glucoamilasa o la pollulanasa y también se puede utilizar mezclas de enzimas27. 431-438 28 ARTIME. son las enzimas responsables de la degradación del almidón. β amilasas o examilasas. Existen otras enzimas que degradan almidón tales como las desramificantes que hidrolizan enlaces α 1-6 glucosídicos. Se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza.

En la segunda fase. Durante la hidrolisis. Colombia. En: Ospina. Inicialmente. maltosa y una serie de dextrinas y oligosacáridos de cuatro o más residuos de glucosa todos con enlaces glucosídicos α 1-632. Michael. 2. elimina gradualmente las unidades de glucosa de los extremos no reductores desacarificado. 586 pp. Bioeng. 2002. La yuca en el tercer milenio. T. p. 34 BROCK y MADIGAN. 49-75. IMANAKAT. 114 p. 31 KURIKI. Enzimas β. simplificado.1 Marzo 2005. Biología de los Microorganismos. utilización y comercialización. 2004. 32 LOPEZ. cada una de las cuales comprende una serie de reacciones individuales catalizadas enzimáticamente. Semilla vegetativa de yuca. 33 CARRERA. Jorge y MERA. y la energía se produce por fosforilación a nivel sustrato. Obtención de glucosa a partir de almidón de yuca Manihot sculenta. H. Una ruta bioquímica muy usada para la fermentación de la glucosa es la glucolisis. 10 edición.amilasas sobre la fracción de amilasa del almidón.p87. 24 .AMG 300L. Sistemas modernos de producción. procesamiento. Editorial prentice hall.2. 557 – 565. Ingrid. formando glucosa y maltosa como productos finales. El proceso. más lenta ocurre hidrolisis de los oligosacáridos.11 Fermentación. tiene lugar una rápida degradación de la amilasa para dar maltosa y maltotriosa. CIAT. The concept of the a-amylase family: structure Similarity and common catalytic mechanism. Biosci. La velocidad de hidrolisis depende del tipo de enlace y del rompimiento de la cadena. La acción de la α. Cali. de la fermentación es: Ahora bien la glucolisis se puede dividir en tres etapas principales. Es una Amiloglucosidasa de grado alimenticio. La acción sobre la amilopectina produce glucosa. J. B y Ceballos. Facultad de Ciencias Agropecuarias Vol 3 No. 1999. J. se da en dos etapas. Una fermentación es una reacción de oxidación-reducción interna equilibrada en la que algunos átomos de la fuente de energía (donador de electrones) se reducen mientras otros se oxidan34.Amilasas. T. pp. también denominada vía de Embdem-Meyerhof en atención a sus descubridores.del sitio catalítico y tienen cuatro regiones altamente conservadas en su secuencia primaria que contienen los aminoácidos que forman el sitio catalítico31. La enzima hidroliza los enlaces α 1-4 y α 1-6 del almidón licuado. producida a partir de una cepa seleccionada de Aspergillus Níger. La AMG es recomendada para la sacarificación del almidón y la producción de glucosa33.

La etapa 1 incluye una serie de reacciones preparatorias que no implican ni oxidación ni reducción y que no liberan energía, pero que conducen a la producción a partir de glucosa de dos moléculas del intermediario clave gliceraldehido-3-fosfato. En la etapa 2 ocurre un proceso redox, la energía se conserva en forma de ATP, y se forman dos moléculas de piruvato. En la etapa 3 tiene lugar una segunda reacción redox y se originan los productos de fermentación (etanol y CO2 o ácido láctico) Etapas I y II: reacciones preliminares y reacciones redox. En la etapa 1, la glucosa es fosforilada por el ATP dando lugar a glucosa-6-fosfato, que es convertida a continuación a una forma isomérica, la fructosa-6-fosfato, que mediante una segunda fosforilación se convierte en fructosa-1,6-difosfato, que es un metabolito intermediario clave de la glucolisis. Si se fermentan otros azucares distintos a la glucosa, se convierte antes a fructosa-1,6-difosfatopara poder ser utilizados por la ruta de Embdem-Meyerhof. La enzima aldolasa cataliza la rotura de la fructosa-1,6-difosfato en dos moléculas de tres átomos de carbono, el gliceraldehido-3-fosfato y su isómero dihidroxiacetona-fosfato. Existe una enzima que cataliza la interconversión de dihidroxiacetona-fosfato a gliceraldehido-3fosfato pero, para simplificar, se considera solo este último ya que es el que será metabolizado. En esta primera etapa no ha ocurrido ninguna reacción redox y que todas las reacciones, incluyendo las del consumo de ATP, tienen lugar sin transferencia de electrones. La primera reacción redox de la glucolisis tiene lugar en la etapa 2 durante la conversión del gliceraldehido-3-fosfato a acido 1,3-difosfoglicerico. En esta reacción (que ocurre dos veces, una por cada molécula de gliceraldehido-3fosfato), una enzima cuyo coenzima es NAD+ acepta 2 átomos de hidrogeno y el NAD+ se convierte en NADH; la enzima que cataliza esta transformación se llama gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa. Simultáneamente, cada molécula de gliceraldehido-3-fosfato es fosforilada por la acción de una molécula de fosfato inorgánico se convierte en orgánico, prepara el escenario para la conservación de la energía por fosforilación a nivel de sustrato; la formación de ATP es posible porque cada uno de los fosfatos de la molécula de ácido 1,3-difoglicerico y cuando más tarde se convierte en acido 1,3-fosfoglicerico y cuando más tarde en la vía, cada molécula fosfoenol piruvato se convierte en piruvato. En la glucolisis, se consumen dos moléculas de ATP en las dos fosforilaciones de la glucosa y se sintetizan cuatro moléculas de ATP (dos por cada molécula de ácido 1,3-difosfoglicerico convertida a piruvato). Por tanto, la ganancia neta del organismo es de dos moléculas de ATP por cada molécula de glucosa.

25

Etapa III Producción de productos de fermentación Durante la formación de dos moléculas de ácido 1-3, difosglicerico, se reducen dos moléculas de NAD+ a NADH. Sin embargo, las células contienen solo una pequeña cantidad de NAD+, y si todo se convirtiera en NADH se detendría la oxidación de la glucosa, la oxidación continuada del gliceraldehido-3-fosfato solo se puede proseguir si está presente una molécula de NAD+ para aceptar los electrones liberados. Este bloqueo se supera en la fermentación mediante la nueva oxidación de NADH a NAD+, a través de reacciones que suponen la reducción del piruvato a una extensa variedad de productos de fermentación. Se conocen muchas rutas para la oxidación del piruvato en procariotas fermentativos, pero el resultado final es el mismo; el NADH debe volver a la forma oxidada NAD+, a fin de que las reacciones que liberan energía en la fermentación puedan continuar. Como coenzima difusible, el NADH puede soltarse de la enzima gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa y unirse a una enzima que reduzca el piruvato de nuevo, haciendo que le ciclo de reconversión del NADH a NAD + y de NAD+ a NADH se repita otra vez. En cualquier proceso que produzca energía, la oxidación debe acompañarse de una reducción y debe haber un aceptor de electrones por cada electrón cedido. En este caso, la reducción del NAD+ en un paso enzimático de la glucolisis se equilibra con su oxidación en otro paso. Los productos finales deben estar también en equilibrio redox con el sustrato inicial, la glucosa. De aquí que los productos que aquí se generan, etanol más CO2 o lactato más protones, estén en equilibrio atómico y electrónico con la glucosa inicial35. En la figura 8 podemos ver una descripción del proceso de glucolisis.

35

BROCK y MADIGAN. Michael. Biología de los Microorganismos. 2004. Editorial prentice hall. 10 edición.120-123 p.

26

Figura

8.

Esquema

del

proceso

de

glucolisis.

Fuente: BROCK y MADIGAN. Michael. Biología de los Microorganismos. 2004. Editorial Prentice hall. 10edición.

27

2003. 37-39 28 . Que poseen importancia comercial se encuentran en la tabla 3. en las distintas rutas anabólicas y catabólicas del proceso. Células Microbianas (biomasa). Productos Finales de la fermentación Desde el punto de vista comercial se pueden clasificar tomando en cuenta los productos que se obtendrán entre ellos. a partir de la utilización de sustancias orgánicas en ausencia o presencia de oxígeno. Esto ocurre en el proceso de fermentación cuando hay un sobre crecimiento de células. etc. siempre y cuando estén presentes sus enzimas. se pueden mencionar:    Células microbianas (biomasa) Metabolitos microbianos: metabolitos primarios y secundarias (enzimas. Son moléculas de bajo peso molecular que se forman en la fase exponencial o tropofase e intervienen como productos finales o intermediarios. ácidos orgánicos. etanol. Edición 1 pág. La descomposición de los sustratos es llevada a cabo por enzimas producidas por microorganismos para tal finalidad. Metabolitos primarios microbianos. la velocidad de obtención y los rendimientos del producto son menores. Clasificación de los primeros procesos de fermentación La gran cantidad de procesos y productos que involucra el termino fermentación hace difícil no solo la definición del concepto si no también su clasificación. butanol. Microbiología industrial. Editorial EUNED. se establecen divisiones con base en:   El tipo de producto final por obtener La presencia o ausencia de oxígeno en el proceso. sin embargo. acetona. Algunos ejemplos de éstos. en estos casos. Se debe observar que el concepto llega a excluir a los microorganismos del proceso. y solo utilizan el sustrato para su crecimiento y hay poca producción de metabolitos36. Alicia. En general.Concepto Microbiológico de la fermentación Se entiende por fermentación aquel proceso en el que los microorganismos producen metabolitos o biomasa. 36 HERNÁNDEZ.

cianocobalamina caroteno. testosterona acido ascórbico. polisacáridos y saborizantes Otros Fuente: Hernández. bacterias y algas Proteína Unicelular (biomasa) Alcaloides. butanol. Edición 1. glicerol Alcoholes y Solventes bacitracina. metano. riboflavina Vitaminas Células de hongos. en la tabla 4 podemos ver algunos de estos metabolitos.Tabla 3. Gingold. láctico Ácidos orgánicos Aminoácidos lisina. Metabolitos microbianos comerciales Metabolitos microbianos secundarios comercializados Metabolito Secundario Penicilina Cefalosporina Tretraciclina Estreptomicina Griseofulvina Actinomicina Pepstatina Ciclosporina A Krestina Betatina Gibberelina Utilidad Comercial Antibiotico Antibiotico Antibiotico Antibiotico Antibiotico (antifungico) Antitumoral Tratamientos antiulcerosos Inmunosupresor Tratamiento de cancer Tratamiento de cancer Regulador de crecimiento vegetal Fuente: WALKER. Biotecnología Molecular. valina acetona.M. Estos se forman durante la ideofase (fase durante la cual un cultivo sintetiza productos distintos a los Metabolitos primarios. J. itaconico. 2003. Microbiología industrial. triptófano. estreptomicina.3-butanodiol etanol. Biológicos. gluconico. 5-6 29 . Acribia. Enzimas. levaduras. 39 Metabolitos Secundarios Microbianos. 2. Compuestos producidos por el proceso de fermentación Algunos compuestos de interés comercial producidos por fermentación Tipo de Sustancia Productos acético. Son moléculas orgánicas complejas que para su formación requieren un gran número de reacciones enzimáticas específicas. Editorial EUNED. Pág. cítrico fumarico. pág. tetraciclina Antibióticos Esteroides cortisona. neomicina Penicilina. metionina. SA. Alicia. sustancias que no tienen un papel significativo en el metabolismo celular) y donde los metabolitos secundarios tienden a ser sintetizados de los productos intermedios y finales del metabolismo primario. Edición. insecticidas. hidrocortisona. Tabla 4.

Pág. como Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo.M. a través de la cantidad de oxígeno. se favorece la reproducción del microorganismo. los microorganismos producen mucho menos energía que en los aerobios y. En este tipo de fermentación el proceso de producción de metabolito de interés se desarrolla en ausencia de oxigeno. como por ejemplo. En los procesos anaerobios. Alicia. E. se puede manipular un proceso de fermentación para incrementar la producción de la sustancia de interés: Cuando se trabaja con un microorganismo facultativo (capaz de crecer en presencia o ausencia de oxigeno). Entonces. Acribia. según la concentración de oxígeno en el medio: si es muy limitada. Oxígeno en el proceso de fermentación También es posible clasificar las fermentaciones con base en la presencia o ausencia de oxigeno molecular durante el proceso. por consiguiente. Sin embargo. En este tipo de fermentación el aceptor final de electrones es el oxígeno. en la mayoría de las fermentaciones anaeróbicas se requiere un poco de oxígeno al principio del proceso para favorecer el crecimiento y la reproducción del microorganismo. los productos finales son sustancias orgánicas. 39 30 . . Edición 1. Gingold. se produce fundamentalmente biomasa. S. se obtienen diferentes productos mayoritarios. habrá una mayor producción de etanol. etanol. Fermentación anaerobia. pág. por ejemplo. dióxido de carbono y agua. ácido láctico. el etanol y la acetona. para suplir sus necesidades de energía. 5-6 Hernández. butanol. 37 38 WALKERJ. En este tipo de procesos. Editorial EUNED. De acuerdo con esta división. muchos Metabolitos secundarios poseen propiedades anti-microbianas y por lo tanto. y acetona.A. la producción de biomasa38. elaboran más metabolitos. es imprescindible su presencia para el desarrollo del microorganismo y la producción del compuesto deseado. mientras que si es alta. ácido acético.A simple vista puede resultar extraño que los microorganismos elaboren compuestos que no parecen tener ninguna función metabólica y que. en el medio ambiente natural podrían ser implicados en procesos competitivos37. metabolizan una mayor cantidad de azucares.B. Edición. ácido propionico. en realidad no constituyen productos intermediaros del catabolismo. o sea. Microbiología industrial. 2003. los procesos se denominan: Fermentación aerobia. Biotecnología Molecular.

celulasa y vitamina B1239. después de iniciado el proceso (al mezclar los nutrimentos y el microorganismo). Algunas sustancias obtenidas por fermentación continua son: acetona. se ha utilizado en el tratamiento de aguas residuales. entre ellos. Edición 1. butano. por ejemplo si lo que se requiere es la producción de metabolitos primarios . también. glicógeno. para aumentarla cantidad de biomasa. la cerveza y el etanol. ácido gluconico. Microbiología industrial. penicilinasa. En muchas fermentaciones. a una determinada velocidad. Después. se logra mantener en el reactor. antiespumantes y bases o ácidos para el control de pH. 2003. la concentración de biomasa y la de metabolitos. ácido itacónico. y las condiciones fisicoquímicas necesarias para el desarrollo del proceso. Editorial EUNED. Alicia. Proteína unicelular. etanol. El estado estacionario se define como una condición de estabilidad. el volumen del cultivo. y a diferencia del cultivo por lotes. 39 Hernández. durante el cual varia la composición del medio de cultivo. y se extrae caldo de fermentación (medio de cultivo con microorganismos y metabolitos). Cultivo continuo Se puede describir como un sistema abierto. si son metabolitos secundarios. al respecto. se debe alargar la fase logarítmica. ácido acético. butanodiol.Cultivo en lote Es un sistema cerrado. glucosa-isomerasa. estreptomicina. es necesario conocer la curva de crecimiento del microorganismo: al saber el comportamiento de su crecimiento . 51-54 31 . pág. se interrumpe el proceso y se recupera el producto. los procesos fermentativos se pueden mantener por largos periodos. en la que varios factores permanecen constantes a través del tiempo. siempre y cuando el sistema se mantenga libre de contaminación. el compuesto de interés se produce durante la fase exponencial. se pueden manipular las condiciones de manera que se obtenga el producto deseado. una de las ventajas del sistema continuo es que se puede mantener estable la población en esta fase por periodos prolongados de tiempo. El cultivo continuo se ha utilizado para fabricar una serie de productos. solo se adiciona oxígeno. entre ellos. se adiciona constantemente medio de cultivo fresco a los microorganismos. Como resultado de la estabilidad. cloranfenicol. la concentración celular y de metabolitos. una población estable de microorganismos en condiciones uniformes. La fermentación se lleva a cabo en un periodo definido de tiempo. se extiende la fase estacionaria y. Para realizar exitosamente una fermentación en lote. ácido láctico. porque. ácido cítrico. a las mismas velocidades. se buscan las condiciones de mayor producción de células. Así. Para que el cultivo continuó sea efectivo es necesario que el proceso se encuentre en estado estacionario. penicilina.

producto y consumo de sustrato.pdf 32 .0 a 6. Desde el punto de operación es importante decidir las siguientes variables: temperatura. El pH óptimo para algunos organismos en especial para las levaduras se encuentra en un rango de 4.espe. La temperatura afecta al organismo de manera notable ya que los organismos de una especie dada solo pueden crecer en un rango de temperatura y esto afecta de manera notable al organismo. Evaluación de las condiciones de la fermentación alcohólica utilizando Saccharomyces cerevisiae y jugo de caña de azúcar como sustrato para obtener etanol. Extraído del sitio web de la escuela politécnica del ejército ecuatoriano. nutrientes y las variables que se puede medir de manera intermitente son: biomasa. Temperatura La temperatura ejerce un marcado efecto sobre la velocidad metabólica del organismo.Condiciones que deben medirse y controlarse en una fermentación discontinua. La temperatura tiene una influencia directa sobre la velocidad de reacción y esta puede cambiar la configuración de los constituyentes celulares. Es importante recordar que el pH es una función logarítmica. La temperatura optima de crecimiento de las levaduras especialmente de la Saccharomyces cerevisiae es de 30 a 35°C. Las variables que se puede medir de manera continua son: temperatura. nutrientes y productividad entre otras. un cambio en una unidad de pH representa un cambio de diez veces en la concentración de iones hidrogeno.ec/bitstream/21000/990/1/T-ESPE-026782. pH. pH La acidez o alcalinidad de una solución se expresa por su índice de pH en una escala de 0 a 14. 40 NIETO. El pH tiene un marcado efecto en la velocidad de crecimiento y en el rendimiento. Una vez que el sustrato y el organismo han sido seleccionados es necesario darles las condiciones adecuadas de operación y optimización del sistema.edu. El pH tiene una gran influencia en los productos finales del metabolismo anaerobio40. GALARZA.0. pH. ºBrix. Un cambio en el valor de pH puede afectar su composición o su naturaleza de la superficie microbiana al disociarse ácidos y bases. ºBrix.http://repositorio. Este último21puede afectar la floculación de la biomasa o la adhesión a las paredes. (2009). especialmente de las proteínas y de los componentes de la membrana. Una de estas variables se mide de manera continua y otras intermitentemente.

peso húmedo. La cantidad de biomasa o de un componente celular específico en un biorreactor puede determinarse gravimétricamente (por peso seco. La tabla 5 muestra el tamaño de las células de algunos microorganismos utilizados en procesos biotecnológicos. Saccharomyces cerevisiae es una levadura que posee alta actividad metabólica. cada ºBrix indica 1 gramo de sacarosa por cada 100 gr de líquido. DNA. por lo que en un proceso fermentativo en base aeróbica se caracteriza por la producción de biomasa y en base anaeróbica generalmente por la producción de etanol. El tiempo de duplicación hace referencia al periodo de tiempo requerido para la duplicación del peso de la biomasa.6 a20°C. Si la fermentación es anaeróbico.ºBrix El ºBrix o grados Balling es otra escala del hidrómetro utilizada en la industria azucarera. Aireación La ausencia o abundancia de oxigeno permite una selección tanto de microorganismo como de productos metabólicos. mientras que el tiempo de generación se refiere al periodo necesario para duplicar el número de células. Principios del crecimiento microbiano. o proteína) o numéricamente para los sistemas unicelulares (por número de células). pH y la aireación. El crecimiento de los microorganismos puede verse como el incremento de material celular expresado en términos de masa o número de células y procede de una serie de pasos biológicos coordinados y muy complicados catalizados enzimáticamente. Conla escala a 20°C. Los tiempos de duplicación medios se incrementan con el aumento del tamaño celular. la fermentación se denomina fermentación aeróbica y cuando se realiza en ausencia de oxigeno molecular se denomina anaeróbico. la mayor parte del carbono se emplea como energía y solo el 2% se asimila como material celular. 33 . Cuando el cultivo se produce en presencia de oxigeno molecular. Normalmente las escalas ºBrix se calibran a 15. El crecimiento dependerá de la disponibilidad y transporte de nutrientes necesarios para la célula y su subsiguiente captación y del mantenimiento óptimo de los parámetros medioambientales tales como la temperatura.

más bien. 2004. en estos casos. Las levaduras son bastante heterogéneas en su morfología y fisiología. dan simultáneamente en el medio donde se encuentra el microorganismo. se presenta en varios hongos patógenos. por ejemplo un nutriente esencial. Pág. pueden presentar micelio. Este fenómeno.Tabla 5. 2006. Edición 4. Biotecnología. además de la forma unicelular o de levadura. Levaduras Están agrupadas en unas 350 especies (clasificadas a su vez en 39 géneros). 53 Un organismo raramente tendrá condiciones totalmente ideales para un crecimiento ilimitado. 41 SMITH. a medida que la concentración de este factor cae también lo hará el potencial de crecimiento del organismo41. el crecimiento dependerá de un factor limitante. Tamaño de células en procesos Biotecnológicos Tamaño aproximado de las células usadas en procesos biotecnológicos Tipo celular Tamaño (µm) Bacterias 1x2 Levaduras 7 x 10 Células de mamífero 40 x 40 Células Vegetales 100 x 100 Fuente: SMITH. Pág. Editorial Acribia. sin embargo. Vera. John E. Editorial Acribia. Biotecnología. que se conoce como dimorfismo. Esquema de distintas formas de levadura. La figura 9 ilustra las distintas formas de levadura que se pueden encontrar. lo que muestra que dentro de los hongos constituyen un pequeño grupo. Edición 2. Algunas. Introducción a la microbiología. 2006. Ambas formas. Figura 9. la forma habitual en que se les encuentra es la unicelular. Edición 4. Pág. 53-54 34 . Fuente: GARCÍA CORTES. John E. Editorial EUNED. 109 Es importante señalar que las condiciones ambientales influyen para que algunos hongos crezcan como filamentos o como levaduras.

el magnesio. iodo y molibdeno. hierro. Los azucares constituyen el mejor alimento energético de las levaduras. Vera. el cual da como resultado etanol y dióxido de carbono. Muchas pueden catabolizar la glucosa. Las levaduras requieren. como otros seres. 2004. A continuación la figura 10 ilustra los componentes internos de la célula de la levadura Figura 10. en el néctar de las flores y en ambientes acuático. ya sea en forma aerobia (respiración) o anaeróbica (fermentación). Fuente: GARCÍA CORTES. minerales para su crecimiento. requieren de carbono orgánico para la síntesis obtener la energía y el carbono para la síntesis de sus componentes celulares. Introducción a la microbiología. Pág. conocido comúnmente como fermentación alcohólica. el sodio y el calcio se incluyen dentro de los necesarios. por lo tanto. Diagrama de la estructura de una levadura. La mayor parte de las levaduras crece mejor en medios en los que está disponible una buena cantidad de agua. los requerimientos nutricionales específicos de las levaduras pueden variar entre las diferentes especies.Las levaduras se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza. Edición 2. Sin embargo. muchas de ellas pueden crecer en medios con relativamente poca cantidad de agua como en soluciones con una 35 . El proceso típico es la disimilación anaerobia. Se ha determinado que le potasio. 109 Requerimientos nutricionales Las levaduras son organismos heterótrofos. Sin embargo. localizada en el suelo. Editorial EUNED. se ha demostrado que para obtener un rendimiento óptimo en medios de cultivo sintéticos se requiere la presencia de boro. en la superficie de las frutas. En relación con los elementos traza. cobre zinc. manganeso.

se determina cuando se produce la mayor cantidad de biomasa o metabólicos (primarios o secundarios). Concentración de solutos Generalmente pueden desarrollarse en medios con concentraciones altas de solutos. Vera. Las levaduras aerobias estrictas se conocen como oxidativas. Introducción a la microbiología. Editorial EUNED.5. con base en ella. la mayoría de las especies saprofitas. Condiciones ambientales requeridas para el crecimiento. 2004. Existe un grupo que tolera cantidades de solutos mayores. Las facultativas crecen mejor en aereobiosis y bajo condiciones anaerobias lo hacen más lentamente. Oxigeno Las levaduras crecen bajo condiciones aerobias. 2004. 42 Fuente: GARCÍA CORTES. 112-114 36 . Edición 2. los siropes y los concentrados de fruta43. pH En general se considera que las levaduras.6). Editorial EUNED. La figura 11 ilustra el crecimiento de un microorganismo en el tiempo. Introducción a la microbiología.8 . tienen temperaturas optimas de crecimiento entre los 22 y los 30 °C. generalmente en un rango que va desde 0 a 50 °C. Edición 2. y las que pueden desarrollarse en medios aerobios como en anaerobios se denominan fermentativas. se desarrollan mejor en medios ácidos (3. por lo que puede decirse que en general requieren para su crecimiento menos humedad que las bacterias 42.concentración elevada de solutos (sal o azúcar). sin embargo. por lo que se denominan osmófilas. 112 p. al igual que los mohos. Pág. estas pueden tolerar un rango de pH que va desde 2 a 8. Curva de crecimiento de un microorganismo Esta curva representa el comportamiento del crecimiento del microorganismo a través del tiempo. Algunas son estrictamente aerobias y otras son facultativas. Estas tienen importancia en el deterioro de alimentos tales como la miel de abeja. 43 GARCÍA CORTES. Sin embargo. Vera. Temperatura Existen levaduras que pueden crecer a muy diversas temperaturas.

Si el microorganismo se encuentra en su fase logarítmica antes de la inoculación. coincide con el periodo de adaptación del microorganismo a las nuevas condiciones nutricionales y ambientales. 37 . Durante este periodo no existe aumento en el número de células. pues el microorganismo utiliza la energía disponible con el fin de sintetizar las enzimas que requiere para su desarrollo en el nuevo medio.Figura 11.unam.Curva de crecimiento de un microorganismo. En esta fase las células se multiplican a la máxima velocidad y su crecimiento puede ser cuantificado con base en el número de células que se producen por unidad de tiempo (para levaduras y bacterias) o por el aumento en la biomasa por unidad de tiempo (para hongos filamentosos). Se presenta inmediatamente después de la inoculación y su duración depende del estado fisiológico de la célula inoculada y de las condiciones ambientales. siempre y cuando esta sustancia se encuentre en exceso.facmed. Fase logarítmica o exponencial. Disponible en: http://www.html Fecha: 10/05/2012 Fase de latencia También conocida como fase lag.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/generalidades. la fase lag es muy pequeña o puede no presentarse. La velocidad de crecimiento durante este periodo permanece constante y es independiente de la concentración del sustrato.

Alicia. da una mezcla azeotrópica. Para obtener etanol libre de agua se aplica la destilación azeotrópica en una mezcla con benceno o ciclo hexano. El etanol está presente en diversas bebidas fermentadas. Otro de los motivos por los cuales empieza esta etapa es la producción. El compuesto químico etanol es un alcohol que se presenta como un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78°C. mientras que el etanol se queda retenido. entre otras características. Microbiología industrial.2. las condiciones ambientales indispensables para la célula se modifican o cuando la célula produce metabolitos tóxicos o que inhiben su reproducción. Su fórmula química es CH3 CH2 -OH y su fórmula molecular es C2H5OH. el alcohol aparece acompañado de distintos elementos químicos que lo dotan de color. de sustancias toxicas que impiden la multiplicación de las células.La fase logarítmica termina cuando se produce alguna de estas tres situaciones: los nutrimentos se agotan. sabor. Al mezclarse con agua en cualquier proporción. Por el contrario en la producción de antibióticos. formado por el disolvente auxiliar con el agua. Editorial EUNED. no es necesario (ni rentable) continuar el proceso cuando se alcanza la fase estacionaria. 2003. Separación de la Mezcla Agua-Etanol (Destilación). Fase estacionaria La velocidad de crecimiento (reproducción) del microorganismo es igual a la velocidad de muerte y se llega a un equilibrio celular. Si el objetivo final de la fermentación es la producción de etanol. 43-45 38 . como parte del metabolismo. La importancia de esta fase varía con el tipo de fermentación. Desde la antigüedad se obtenía el etanol por fermentación anaeróbica de una disolución con contenido en azúcares con levadura y posterior destilación. pág.12 Etanol. Fase de muerte Se inicia cuando los nutrimentos que están en el medio de cultico no son suficientes para que el microorganismo pueda reproducirse. Edición 1. la mayor acumulación de estas sustancias se presenta durante la fase estacionaria44. la producción de etanol disminuye. Otro método de purificación muy utilizado actualmente es la absorción física mediante tamices moleculares A escala de laboratorio también se pueden 44 HERNÁNDEZ. De estas mezclas se destila a temperaturas más bajas el azeótropo. 2. ya que una vez que se obtiene la máxima concentración de las células. olor. Dependiendo del género de Bebida alcohólica que lo contenga.

Gasohol: Es un sustituto de la gasolina. 1990. 215 p. provocando estados de euforia. el etanol se utiliza ampliamente en muchos sectores industriales y en el sector farmacéutico. mareos. tintas. Tiezzi. La resistencia al alcohol parece aumentar en las personas adultas.Alcohol Industrial: Es alcohol etílico. en otra cierta cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los impulsos. Muchas medicinas. cremas . como principio activo de algunos medicamentos y cosméticos . por medio de ácido sulfúrico concentrado. mientras que los niños son especialmente vulnerables.(la tierra o la muerte: los problemas de “la nueva ecología”.utilizar disecantes como el magnesio. Aplicación. productos alimenticios. somnolencia. explosivos . Se distribuye generalmente en forma de alcohol puro (96% en volumen). Se han comunicado casos de bebés que murieron por intoxicación debida a la inhalación de vapores de etanol tras haberles aplicado trapos impregnados de alcohol. excepto bebidas. condimentos y cosméticos no se podrían producir sin él. normalmente de alta graduación. confusión y alucinaciones. Además de usarse como bebida alcohólica. barbitúricos. Se produce deshidratando alcohol puro de 96%. como combustible en motores de explosión y también en múltiples procesos industriales. 39 . Alcohol Absoluto: Se usa como reactivo en laboratorio o en biomedicina. alcoholes naturalizado (mezclado con sustancias amargas o toxicas que lo convierten en no apto para consumo en licores) y mezclas de solventes de marca registrada. volviéndose impulsivamente descontrolados y frenéticos. conduce al coma y puede provocar la muerte. cloroformo. finalmente. Tiempos históricos. jarabes. etc. Fondo de cultura económica. La ingesta en niños puede conducir a un retardo mental agravado o aun 45 E. detergentes. pérdida temporal de la visión. desinhibición. tintes. pegamentos. Con concentraciones más altas impide la coordinación correcta de los miembros. México. tónicos compuestos. hecho de una mezcla de gasolina y de 10% a 20% de etanol45. que reacciona con el agua formando hidrógeno y óxido de magnesio. producido y vendido para cualquier uso. Se utilizan para producir vacunas. El etanol puede afectar al sistema nervioso central. de mayor peso y de menor altura. antisépticos. tiempos biológicos. El gasohol posee un octanaje más alto que la gasolina normal y quema a menor temperatura. cloruro de calcio anhidro o alúmina. Toxicología. cosméticos. plásticos y textiles.Según su pureza el etanol recibe distintas nominaciones:. En ciertos casos se produce un incremento en la irritabilidad del sujeto intoxicado como también en la agresividad. por lo cual produce menores emisiones contaminantes tipo NOx.

 Rectificación  Continua  Intermitente. Para el cálculo de la composición del vapor que se desprende se supondrá que éste se encuentra en equilibrio con la fase líquida presente en cada instante.2. La destilación simple se caracteriza porque no se establece ningún tipo de contacto entre el vapor generado por el líquido que hierve y un líquido cualquiera. Linda Luz y ACEVEDO. Puede ser abierta o cerrada.  Continua.subdesarrollo físico y mental46.En el anexo se encuentra la ficha técnica del etanol o alcohol etílico 2. el vapor generado y el líquido en ebullición están en equilibrio. el producto a destilar se calienta y luego se descarga en un recipiente a presión muy reducida. 2008 40 . para la obtención de Grado el Título de ingeniero Químico. Sonia. La separación se basa en la diferencia de volatilidades absolutas de los componentes. es decir. de composición diferente a la del equilibrio. también llamada destilación súbita o destilación flash.  Condensación parcial. Destilación con enriquecimiento de vapor:  Repetida. Cartagena. En la destilación simple cerrada o de equilibrio. Los distintos métodos empleados en la destilación se pueden clasificar del siguiente modo: Destilación simple:  Abierta  Intermitente o diferencial. cuanto mayor sea la diferencia de volatilidades mayor será la separación que se puede conseguir.  Destilación con arrastre de vapor. donde experimenta una expansión súbita que conduce a la 46 JIMENEZ. lo que tiene como consecuencia la formación de un vapor de composición diferente a la del líquido del que procede. Evelin.13 DESTILACIÓN La destilación es una operación unitaria que consiste en la separación de los componentes de una mezcla líquida (en la que todos los compuestos son más o menos volátiles) por evaporación y condensación sucesivas. Lógicamente. Evaluación comparativa de la actividad fermentativa de Células libres e inmovilizadas de Saccharomyces cerevisiae Sobre cáscaras de naranja y gluten. MARBELLO.  Cerrada o de equilibrio.

Debe por tanto compensar las pérdidas. En ese instante comienza la ebullición. en función de su composición. el destilado que se va acumulando a la salida del condensador tendrá una composición que será el resultado de la acumulación de los sucesivos destilados de composición variable y. en equilibrio. Obsérvese que. Estas condiciones pueden ser difíciles de conseguir en la práctica. El destilado puede recogerse en distintos recipientes. En la destilación simple abierta se carga una caldera. empobreciéndose en el componente más volátil. en este proceso tampoco podrá haber reflujo (el vapor se debe eliminar instantáneamente y separarse del líquido). en consecuencia. y el destilado se va recogiendo a la salida de un condensador. El calor debe suministrarse en la caldera de modo que en todo instante el vapor generado esté en equilibrio con el líquido en la caldera. el calor latente de vaporización y el calor sensible del líquido. también lo hace la del vapor. en la destilación simple abierta diferencial. Lógicamente. por tanto. Este tipo de destilación se usa frecuentemente en trabajos de laboratorio y en plantas piloto. Destilación simple abierta diferencial La destilación simple abierta diferencial es una operación intermitente en la que la mezcla a destilar se carga en la caldera. La figura 12 muestra como se realiza el proceso de destilación y la figura 13 un montaje a nivel de laboratorio de un proceso de destilación simple. vapor y líquido. También se utiliza con fines analíticos en caracterización de fracciones de petróleo o distintos productos (por ejemplo en algunas normas ASTM para la determinación de intervalos de destilación). tras su condensación) permanecen constantes con el tiempo. por tanto. Este vapor se condensa en el exterior dando lugar al producto destilado. no estará en equilibrio con el líquido que va que dando en cada momento en la caldera. el vapor (siempre en equilibrio con el líquido en la caldera) también cambiará continuamente su composición.formación de las dos fases. El proceso se continúa hasta que se alcanza la separación deseada. consiguientemente. Lógicamente. la composición del líquido cambia de forma continua y. ya que se eliminan preferentemente los componentes más volátiles. la temperatura de burbuja de la mezcla. mientras que en la destilación simple abierta continua y en la destilación simple cerrada. que se mantiene mientras se va eliminando continuamente el vapor generado. 41 . lo que se conoce como destilación fraccionada. de forma intermitente o de forma continua. la composición del líquido que hierve y la del destilado que se recoge (en fase vapor o en fase líquida. donde se suministra el calor necesario para llevarla a su temperatura de burbuja. Conforme transcurre el proceso se va modificando la composición del líquido. con lo cual va aumentando.

com/trabajos83/destilacionsimple/destilacionsimple.000 habitantes deben tener gasolina oxigenada.monografias. 42 . las ciudades de más de 500. • A partir de septiembre 2005. tendrán que contener compues tos Oxigenados tales como alcoholes carburantes. • Se decreto que el uso del alcohol carburante recibirá un tratamiento especial en las Políticas sectoriales de autosuficiencia energética de producción agropecuaria y de Energética.shtml fecha:: 24/04/2011 2. Alcohol Carburante. Diagrama de flujo proceso de destilación Figura 13. generación de empleo. Equipo de destilación simple Fuente:http://www.Figura 12. Ley 693 de 2001 (Uso de alcoholes carburantes en Colombia) en donde se estableció lo siguiente: • Las gasolinas que se utilicen en el país.3 MARCO LEGAL A continuación se hace mención a la normativa en Colombia relacionadas con el alcohol como combustible.

los artículos de mayor importancia en esta reforma fueron: • ARTÍCULO 31: Se declara exento del IVA al alcohol carburante con destino a la mezcla con el combustible motor. recientemente definido y un precio que reconoce los costos de oportunidad de las materias primas que se utilizan en la producción del alcohol (Paridad exportación del azúcar refinado). con esta resolución Se definió la regulación técnica en 47 48 Disponible en: www.secretariasenado.co/senado/basedoc/ley/2001/ley_0693_2001. • ARTÍCULO 88: Se exoneró del pago del impuesto global y de la sobretasa al porcentaje de alcohol carburante que se mezcle con la gasolina motor.26 dólares por galón). se establecen los requisitos técnicos y ambientales de los alcoholes carburantes y los combustibles oxigenados que se vienen distribuyendo en el país desde el año 2005 PRECIOS Resolución 18 0222 de 2006 (Ministerio de Minas y Energía). • Subsidios por us$80 millones para los productores47. Vivienda y Desarrollo Territorial y Minas y Energía). modificada a través de la resolución 18 de Ministerio de Minas y Energía). modificada por la resolución 1565 de 2004 (Ministerios del Ambiente.gov.html Disponible en: Asociación colombiana de productores y proveedores de caña de azúcarprocaña. en este decreto se establecen estímulos para la implementación de zonas francas para de biocombustibles Tasa de proyectos agroindustriales en materia – renta diferencial y beneficios en materia de exenciones de aranceles en bienes de capital – proyectos con potencial exportador). Actualmente se viene ajustando el precio gradualmente con el fin de alcanzar el precio piso48. REGLAMENTACION TECNICA Resolución 18 0687 de 2003.com 43 . Se definió una banda de precios que toma el mayor valor entre un precio de estabilidad de $4.594 pesos por galón para el Alcohol Carburante (que es equivalente aproximadamente a US$2. DECRETO ZONAS FRANCAS (Decreto 383 de 2007). CALIDAD DEL COMBUSTIBLE (Resolución 447 de 2003).ESTÍMULOS TRIBUTARIOS Ley 788 de 2002 (Reforma Tributaria) en donde se dan incentivos tributarios a la producción de alcohol carburante.

regulan la velocidad de muchas reacciones químicas. Se produce directamente a partir de plantas o indirectamente de desechos industriales.relación con la producción. que actúan como catalizadores en el metabolismo de los seres vivos. proporcionan la mayor parte de la energía que mueven a la sociedad moderna. generalmente O2 para lanzar calor. como glucosa o glucógeno. comerciales. ENZIMA: es un biocatalizador de naturaleza proteica cualquiera de las numerosas sustancias orgánicas especializadas compuesto por polímeros de aminoácidos. DESTILACION: método de separación de mezclas que se basa en el aprovechamiento de las diferencias de composición de las mezclas liquidas y de vapor originadas por la vaporización parcial de una mezcla liquida o por la condensación parcial de una mezcla vapor. liquido o gaseoso producido a partir de materia orgánica. o transformando la materia orgánica en otros combustibles. que incluyen el petróleo. distribución y puntos de mezcla de los alcoholes carburantes y su uso en los combustibles nacionales e importados 2. acopio. 44 . COMBUSTION: es un proceso químico. Con su acción. ALCOHOL CARBURANTE: es un compuesto inflamable que no tiene color y tiene olor característico de los alcoholes. el carbón y el gas natural. los combustibles fósiles. COMBUSTIBLES FOSILES: sustancias ricas en energía que se han formado a partir de plantas y microorganismo enterrados durante mucho tiempo. AZÙCAR: termino aplicado a cualquier compuesto químico del grupo de los hidratos de carbono. que se recupera como combustión directa.4 MARCO CONCEPTUAL ALCOHOL ANHIDRO: es un alcohol que se ha sometido a un proceso de deshidratación para eliminar el agua contenido en él. domésticos o agrícolas BIOMASA: se define como la energía solar convertida en materia orgánica por la vegetación. CARBOHIDRATOS: son los compuestos orgánicos más abundantes de la biosfera y a su vez los más diversos normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y también en los tejidos animales. una reacción exotérmica entre una sustancia (combustible) y un gas (oxidante). BIOCOMBUSTIBLE: cualquier combustible sólido.

GLUCOSA: azúcar monosacáridos de formula C6H12O6 se encuentra en la miel y en el jugo de numerosas frutas. y la molécula AB se descompone en A+ y B-. 45 . Se produce la hidrólisis de numerosos glucósidos naturales.FERMENTACION: cambios químicos en las sustancias orgánicas por la acción de las enzimas. HIDRÓLISIS: tipo de reacción química en que una molécula de agua reacciona. Luego estos fragmentos se unen proporcionando los productos finales AOH y BH. la molécula de agua se descompone n los fragmentos H+ y OH-. Es una escala numérica utilizada para medir la acidez y basicidad de una sustancia. con una molécula de una sustancia A-B en la que A y B representan átomos o grupos de átomos. pH: es el logaritmo negativo de la concentración de los iones de hidrogeno. En la reacción.

Donde la clave del positivismo lógico consiste en contrastar hipótesis probabilísticamente y en caso de ser aceptadas y demostradas en circunstancias distintas. Este tipo de investigación va más allá de la descripción de conceptos o fenómenos o del relacionamiento entre conceptos. Por tanto el método 46 . y para la etapa de fermentación se efectuaron 56 muestras. Como su nombre lo indica. De acuerdo a Roberto Hernández Sampierí el tipo de investigación experimental se define como un“estudio explicativo” porque muchas veces los resultados experimentales no explican lo que en cierto fenómeno ha ocurrido. o por qué dos o más variables están relacionadas. con el fin de garantizar la acción efectiva de estos complejos. Luego se observó cómo se ven afectadas las variables independientes en el proceso. en los proceso de hidrolisis y fermentación. se medirán concentraciones de sustratos y cantidades de aguas específicas. su interés se centra en explicar por qué ocurre un fenómeno y en qué condiciones se da éste. debido a que eran 3 variedades de ñame con 3 concentraciones y se midieron a 9 tiempos diferentes en la etapa de hidrolisis. Además se observó la relación de ciertas variables que afectan el rendimiento del proceso que explicaran los resultados. Los fundamentos de la metodología cuantitativa se pueden encontrar en el positivismo. concentración de células. refractómetro y Dicromato de potasio) para determinar el comportamiento de las variables (azucares reductores. dentro de una situación de control para el investigador” El tipo de enfoque es cuantitativo de acuerdo a la teoría referenciada. El tipo de diseño que se adopta es el experimental ya que se manipularon las variables independiente como son: la concentración de reactivos y complejos enzimáticos así como los complejos de la levadura manteniendo fijos los valores óptimos de temperatura y pH. La estadística dispone de instrumentos cuantitativos para contrastar estas hipótesis. además se efectuaron pruebas (DNS. ºBrix y concentración de alcohol) que rigen el proceso. esta investigación cumple con todos los requisitos descritos.3 DISEÑO METODOLÓGICO 3. Según Roberto Hernández el término experimento que va más de acuerdo con un sentido científico del término. cámara Neuvauer. se realizaran cálculos para determinar la cantidad de azucares que se obtenga de la hidrolisis. a partir de ellas elaborar teorías generales.1 TIPO DE INVESTIGACIÓN El tipo de estudio que se desarrolla es explicativo porque se tomaron 81 muestras. se refiere a un estudio de investigación en el que se manipulan deliberadamente una o más variables independientes (supuestas causas) para analizar las consecuencias de esa manipulación sobre una o más variables dependientes (supuestos efectos). están dirigidos a responder a las causas de los eventos físicos o sociales.

Unidad de epidemiologia Clínica y Bioestadística. e) Los análisis se interpretan a la luz de las prodiciones iníciales (hipótesis) y de estudios previos (teoría) f) La investigación cuantitativa debe ser lo más objetiva posibles. Para obtener tales resultados el investigador recolecta datos numéricos de los objetos fenómenos o participantes. c) Debido a que los datos son productos de mediciones. En general los métodos cuantitativos son muy potentes en términos de validez externa. La Coruña (España). genera una hipótesis que contrasta y emite posteriormente unas conclusiones derivadas de dicho contraste de hipótesis. S. tras una observación. d) En el proceso se busca el máximo control para lograr que otras explicaciones posibles distintas a la propuesta del estudio (hipótesis) sean desechadas y se excluya la incertidumbre y minimice el error. El enfoque cuantitativo pretende acotar la información.científico. a) Las hipótesis se generan antes de recolectar y analizar los datos. sino que permite cuantificar la relevancia clínica de un fenómeno midiendo la reducción relativa del riesgo. 2002.  Somete a prueba las hipótesis mediante el empleo de los diseños de investigación apropiados. Pita y PÉRTEGAS Díaz. g) Los estudios cuantitativos siguen un patrón predecible y estructurando (el proceso). medir con precisión las variables del estudio49. h) En una investigación cuantitativa se pretende explicar y predecir los fenómenos investigados. De esta teoría deriva hipótesis. 47 . b) La recolección de los datos se fundamenta en la medición. Investigación cuantitativa y cualitativa. 49 FERNADEZ. El enfoque cuantitativo se caracteriza por los siguientes pasos que emplea el investigador:   Plantea un problema de estudio delimitado y concreto. buscando regularidades y relaciones causales entre elementos. se representan mediante números (cantidades) y se deben analizar a través de métodos estadísticos. i) Con los estudios cuantitativos se pretende explicar y predecir los fenómenos investigados. Una vez planteado el problema de estudio delimitado y concreto Sobre la base de la revisión de la literatura construye un marco teórico. La investigación cuantitativa con los test de hipótesis no sólo permite eliminar el papel delazar para descartar o rechazar una hipótesis.

3 kg por cada variedad. 3. por lo tanto no garantizan la representativa de la muestra y así no permiten realizar estimaciones inferenciales sobre la población.1M. luego de secado fue molido. al tomar la muestra no se garantiza que ésta tenga un valor promedio o real. se procedió al proceso de tamizado para obtener las partículas más 50 Hernández Sampierí. las conclusiones derivadas contribuirán a la generación de conocimiento. y para la extracción del almidón solo se utilizo1. Graw-Hill México 2006 48 . para ello se seleccionaron las muestras siguiendo determinados criterios procurando que ésta sea representativa. Roberto Metodología de la investigación Editorial MC. con el fin de eliminar la babosidad del ñame o el residuo mucilaginoso del tubérculo.2 POBLACIÓN Y MUESTRA La población tenida en cuenta para la producción de etanol a nivel de laboratorio. 3. fueron 3 kg del ñame fresco de cada una de las 3 variedades (ñame espino. En este caso las concentraciones en cada punto del Erlenmeyer varía. ñame diamante y ñame baboso) que se comercializa en el mercado Bazurto de Cartagena.j) Los datos generados poseen los estándares de validez y confiabilidad. teniendo en cuenta que no tuvieran ningún tipo de problema de descomposición. La caracterización de las muestra se determinó mediante un muestreo no probabilístico.1 Obtención de la harina de ñame Para la obtención de la harina de ñame se pesaron 1. por lo cual. Las muestras tomadas en la etapa de fermentación fueron de 5ml en cada uno de los biorreactores por cada tipejo. l) La búsqueda cuantitativa ocurre en la realidad externa del individuo 50. luego se cortaron en trozos pequeños para poder rallarlo con más facilidad y así lograr un completo secado. a continuación se describirá la metodología llevada a cabo en estas tres etapas.3. que comienza con la teoría y de esta se deriva expresiones lógicas denominadas hipótesis que el investigador busca someter a prueba. 3. debido a que no todos los sujetos de la población tienen la misma probabilidad de ser elegidos. la hidrólisis enzimática y la fermentación.34 kg de cada una de las variedades y se procedió a ser pelados. k) Este enfoque utiliza la lógica o razonamiento deductivo.3 METODOLOGÍA UTILIZADA EN EL PROYECTO La investigación de la obtención de etanol a partir de 3 variedades de ñames se dividió en tres etapas: obtención de la harina de ñame. a continuación se procedió a lavarlos con una solución de amoniaco 0.

Proceso de extracción de harina de ñame Fuente: los autores del proyecto. y finalmente fue empacado en bolsas ziploc.Alata 1.09 Variedades Peso con cascara D. 49 . Tabla 6.34 D.34 Fuente: los autores del proyecto Peso de la cascara 0.05 1.09 1.finas.25 A continuación en la figura 14 se ilustra la metodología utilizada en la obtención de la harina de ñame. Rotundata 1. Trifida 1.29 0. Cantidad de ñame utilizada en el proceso Peso del ñame (kg) Peso sin cascara 1. Figura 14.25 0.34 D. con el peso antes y después del proceso de pelado. En la tabla 6 se ilustra la cantidad de ñame utilizada.

Durante el tiempo de residencia de la enzima se realizaron mediciones. 3 por cada variedad de ñame D.25. junto con la curva de calibración empleada en la lectura de azucares reductores. Este proceso de hidrolisis de la harina de ñame se realizó en dos etapas: Licuefacción y sacarificación. en la tabla 7 se observa las condiciones utilizadas de la enzima alfa amilasa en la etapa de hidrólisis. baboso y espino respectivamente) con sus respectivas concentraciones 10. Al momento de realizar la lectura de azucares reductores fue necesario diluir las muestras en 100 ml para que el espectrofotómetro pudiera captar un valor de absorbancia visible. Rotundata (diamante.5 con una solución de HCl 0.3.5 gramos para un volumen de agua de 650ml.5% y 15% m/v. 13.5 y 15%m/v. Ya con las soluciones preparadas se les midió el pH y se ajustó a 6.5.2 Hidrólisis enzimática Basado en investigaciones anteriores citadas en el capítulo 2 de acuerdo al contenido de humedad los mejores rendimientos de etanol se han obtenido en el rango de concentraciones entre 10 y 16% en peso seco de la harina de ñame. en total fueron 9 Biorreactores. En el anexo E se observa la técnica de DNS. Para esta primera etapa se utilizó la enzima Alfa amilasa suministrada por la empresa Procesos y Fermentación S. de acuerdo a estos lineamientos en esta investigación se evaluaron los sustratos a 10. mediante el Refractómetro (modelo VBR90A) y azucares reductores. 13.5%.5 Dinitrosalicilico (DNS). mediante la técnica del ácido 3. 13.3. Alata. La cantidad de harina de ñame con la cual se trabajó fue de 68.5.5 y 97. Trífida y D. En el proceso de hidrolisis las soluciones preparadas se montaron en frascos de 750 ml con un volumen de reacción de 650 ml. de los ºBrix. Licuefacción. esto se realizó por cada especie de ñame. que corresponde a las concentraciones de 10.5 y 15%m/v respectivamente. 87.A (Cartagena) en las cantidades y en las condiciones óptimas estipuladas en la ficha técnica del fabricante de acuerdo a su actividad enzimática. 50 .1N. luego se colocaron en horno con control de temperatura entre 90 – 95 ºC con un tiempo de residencia de 24 horas. D.

Alata Amilasa D.072 0. Rotundata AMG D. Tabla 8. Alfa Rotundata Amilasa Alfa D.5 6. Condiciones de la enzima α Amilasa Cantidad de enzima por concentración (ml) 10.1N y se debió ajustar la temperatura a 55º. ir al anexo B.02 2. en la tabla 8 se ilustra las condiciones a las que se utilizo la enzima Amiloglucosidasa en la etapa de sacarificación.5% 13.5 6. Trífida Amilasa Variedad Temperatura 90 – 95 90 – 95 90 – 95 pH 6.042 0.3 4. Para esta etapa se agregó la enzima Amiloglucosidasa (AMG 300 L) para la obtención de glucosa en mayor proporción mediante la sacarificación. durante este tiempo se efectuaron mediciones de grados Brix.072 0.5% 15% 0. Para la etapa de sacarificación fue necesario ajustar el pH a 4.042 0.054 0.02 Variedad Enzima D.5 4.042 0.3 4.5 4.5% 15% 2.02 4. Alata AMG D.5 Fuente: los autores del proyecto Sacarificación. Durante este proceso el tiempo de residencia de la enzima fue de 4 horas donde los azucares reductores se tornaron constante. y también se efectuaron mediciones de azucares reductores a partir de la técnica del ácido 3.072 Enzima Alfa D. Condiciones de la enzima AMG (Amiloglucosidasa) Cantidad de enzima por concentración (ml) 10.5% 13.054 0.5 con una solución de HCl 0.4 3.3 3.4 3. Trífida AMG Temperatura ºC 55 55 55 pH 4.5 dinitrosalicilico (DNS).Tabla 7. esta fue suministrada por la empresa Nutrianálisis (Bogotá) en las cantidades y en las condiciones óptimas estipuladas en la ficha técnica del fabricante de acuerdo a su actividad enzimática para este proceso.5 Fuente: los autores del proyecto 51 .054 0.4 2.

en la figura 16 se observa los biorreactores después de esterilizados. pH de 4. Esquema general del proceso de hidrólisis (D. DNS y 0 Brix 3 Biorreactores controlando Temperatura a 55 0 C. Alata. Rotunda y D.5 muestreo durante 4horas. A continuación los frascos se llevaron al proceso de esterilizado por 2 horas y posteriormente se sellaron lo más hermético posible.5 muestreo durante 24horas. Trífida) Acción Enzimática Licuefacción: Alfa amilasa Sacarificación: AMG 300 3 Biorreactores controlando Temperatura a 90 0C. Figura 15. D. para la obtención del caldo glucosado que posteriormente sería fermentado. para que no se contaminaran con algún microorganismo hasta ser usados.3 Fermentación Culminando el proceso de hidrólisis se procedió a filtrar cada uno de las biorreactores. DNS y 0 Brix Fuente: los autores del proyecto 3. el volumen final de este caldo fue de 350 ml por cada uno de los 9 frascos.3. pH de 6. 52 .En la figura 15 se presenta el resumen general del proceso de hidrólisis enzimática.

5g/l) (NH4)2SO4 (0. el tiempo de fermentación fue de 52 horas. 7H2O Los fermentadores se sellaron con tapones elaborados con gasa y algodón.5. KH2PO4 (0.Figura 16.5g/l).2 g/l) MgSO4. periodo que alcanza los 20min hasta notar un aumento del volumen tres veces mayor al inicial esta etapa se le denomina etapa de inoculación en donde se desea conseguir que el microorganismo reconozca el sustrato y se adapte más fácil al medio y así estimular su crecimiento. se procedió a la adición de levadura activa seca se humedeció en cada uno de los 9 fermentadores de 750 ml.06 26°C 1g (0. se adaptaron cánulas estériles las cuales permitirían la toma de las muestras y no hubiese contacto con el medio y este fuera contaminado. 7 H2O. agitándose hasta disolución completa para estimular su crecimiento.66 . se utilizó 1 g de levadura y se le proporcionaron los nutrientes característicos para su crecimiento ((NH4)2SO4 (0.25 g/l) KH2PO4 (0. Tabla 9. Hidrolizados Esterilizados Fuente: autores del proyecto Teniendo en cuenta que la investigación era a escala de laboratorio y que el volumen del medio final fue de 350 ml se procedió a utilizar las relaciones correspondientes para este volumen. Condiciones en el proceso de la fermentación Variables Volumen del Rx pH Temperatura Cantidad de levadura Nutrientes para el crecimiento Fuente: los autores Cantidad/unidad 350 ml 4. En la tabla 9 se muestran las condiciones utilizadas en la fermentación.2g/l)MgSO4 .25g/l) y (0. los tapones fueron 53 .

Fermentadores usados Fuente: los autores del proyecto El proceso fermentativo se llevó a cabo durante 52 horas. 54 . En la figura 18 se ilustra en donde se conservaban las muestras para su posterior análisis. para la medición de los ºBrix se utilizó el Refractómetro (Modelo VBR90A). En la figura 17 se ilustran los fermentadores sellados y hermetizados. durante el proceso fermentativo se tomaron 3 muestras diarias. con el fin de conocer y evaluar el comportamiento de las variables en esta etapa. se evaluaron los valores de pH. Figura 17. la concentración de etanol y el crecimiento microbiano. los ºBrix. este tiempo fue un valor tomado de distintas referencias citadas en el capítulo 2 (Marco de referencia) donde aconsejan que este sea entre 2 y 3 días. y para el crecimiento microbiano se realizó por conteo directo en la cámara de Neuvauer. se le aplico también la técnica de DNS para conocer la concentración de azucares reductores presentes en la fermentación. La toma de muestras en esta etapa se midieron tres veces por día de cada uno de los fermentadores y los análisis que realizaron fueron: lecturas de pH en donde se utilizó un peachimetro digital.asegurados con cinta de enmascarar para lograr el mayor hermetismo posible. aunque la gran mayoría de las investigación de fermentaciones de tubérculos este tiempo no sobrepasa las 50 horas. además para la medición de la concentración de etanol se aplicó el método de dicromato de Potasio mediante espectrofotometría (Spectronic 20D+ Instruments).

Las lecturas se efectuaron mediante la utilización de un pH metro digital y estas se realizaron 3 veces por día. Figura 19. Se notó durante todo el proceso para las 3 especies q hubo variaciones de pH debido a que en la fermentación hay formación de ácido láctico pero en este caso prevaleció la formación de etanol. En la figura 19 se ilustra la toma de la lectura de pH.66 a 5.06. Toma de muestras Fuente: los autores del proyecto Lecturas de pH En la etapa de inoculación se hizo el ajuste respectivo de pH en cada uno de los medios para el buen funcionamiento de la levadura y estuvo en un rango de 4.Figura 18. Lecturas de pH Fuente: los autores del proyecto 55 .

Las fuentes primarias que se utilizaron para la realización de la investigación se obtuvo a partir de los diferentes experimentos y pruebas a realizar en el laboratorio. que aportaron información de gran importancia para elaborar y ejecutar el proyecto de forma adecuada.4 Destilación El liquido fermentado se procedió a filtrar mediante papel filtro para eliminar los sólidos presentes (biomasa) y el liquido final se procedió ha realizar la separación del producto de nuestro interés (etanol) mediante el proceso de destilación. artículos especializados.3. manuales. También se utilizó las asesorías y consultorías con docentes especialistas en el tema de investigación. en donde con el análisis de los resultados pudo establecer que tan viable es el proyecto. libros. así como tesis.4.2 Fuentes secundarias. revistas.1 Fuentes primarias. Fuentes: autores del proyecto 3.3. Montaje del equipo de Destilación. Otra fuente de información que ayudarán al desarrollo de la investigación está relacionada en su mayoría por el internet. Figura 20. Se utilizaron recursos bibliográficos. En la figura 20 se ilustra el montaje del equipo de destilación.4 RECOLECCION DE LA INFORMACIÓN 3. prensa. 56 . 3. como la técnica de DNS que permitió conocer la cantidad de azucares presentes durante la etapa de hidrolisis y fermentación.4. donde se ha obtenido la mayor parte de la información. para esto se realizó el montaje del equipo de destilación en el laboratorio de ingeniería de la Universidad de San Buenaventura. también el método colorimétrico para cuantificar el etanol (Dicromato de potasio). el alcohol separado se procedió a envasar en frascos con sus respectivas etiquetas con la variedad y su respectiva concentración. etc.

Equipos e instrumentos de laboratorio EQUIPOS espectrofotómetro Refractómetro Densímetro Medidor de Ph Balanza Analítica Secador de Bandejas Refrigerador Equipo de filtración al vacio Incubador Equipo de Destilación Simple INSTRUMENTOS Beaker Espátula Vidrio de Reloj Policía Mortero Erlenmeyer mechero Molino Rallador Matraz de 500 y 1000 ml Peras de Succión 3.5.5.5 INSTRUMENTOS 3. Tabla 11.Dinitrosalicilico Fuente: los autores del proyecto 57 . Lista de materias primas y reactivos MATERIAS PRIMAS Y REACTIVOS harina de ñame α Amilasa Amiloglucosidasa Saccharomyces cereviciae Acido Sulfúrico Depurado Yoduro de Potasio Sodio Sulfito Anhidro Tiosulfato de Sodio Pentahidratado Fenol o acido Fenico Hidróxido de Sodio Dicromato de Potasio Glucosa Anhidra Acido 3. Tabla 10.5.1 Instrumentos y equipos Se utilizaron una gran cantidad de equipos e instrumentos durante la investigación la tabla 10 muestra cada uno de estos elementos.3.2 Materias primas y reactivos Los reactivos utilizados en el proyecto se muestran a continuación en la tabla 11.

3.6.2 Variables dependientes Concentración de etanol Concentración de Azucares reductores Grados ºBrix Concentración de microorganismos Rendimiento 58 .7.1 Hipótesis nula Estableciendo los parámetros fisicoquímicos y biológicos (concentración glucosa.2 Hipótesis alternativa Estableciendo los parámetros fisicoquímicos y biológicos (concentración glucosa. humedad. temperatura) será posible obtener etanol con una %v/v diferente al 10%v/v.3. pH. pH. temperatura) será posible obtener etanol con 10% v/v.1 variables independientes Concentración de levadura /sustrato Concentración de almidón de ñame en la solución Concentración de enzima / sustrato Temperatura pH 3.6.7. humedad.6 HIPÓTESIS 3.7 VARIABLES 3. 3.

las cuales son claves en la síntesis del producto deseado. El análisis de las variables.3. Operacionalización de las variables Variable Variable independiente Concentración de harina de ñame en la solución Concentración de enzima Concentración de levadura sustrato Temperatura pH Variable dependiente Concentración de etanol Rendimiento de etanol Concentración de microorganismo Concentración de azucares reductores Grados ºBrix Fuente: autores del proyecto Dimensión Física Física Física Física Química Indicador g/l L g C pH 0 Física Física Física Física Física g/L l/kg UFC/ml g/L 3. Se analizaron las variables antes mencionas. los datos obtenidos de las experiencias en el laboratorio y el estudio de las condiciones técnicas para el desarrollo del proceso. Se describieron cada uno de los cambios observados durante el proceso. Tabla 12.9 PROCESAMIENTO DE LA INFORMACIÓN Para la realización del proyecto de grado. Esta información se organizó en tablas. 59 . se analizó la información recolectada (internet.8 OPERACIONALIZACION DE VARIABLES La Tabla 12 muestra la operacionalización de todas las variables que se tomaron para la investigación. cuadros y graficas en Excel. ºBrix análisis colorimétrico con Dicromato de potasio). monografías). en conjunto con los resultados que se obtuvieron en experimentos y pruebas en el laboratorio (DNS o azucares reductores. mostraron que tan viable puede ser el proyecto. revistas. además de las recomendaciones que se ofrecerán para el mejoramiento del mismo.

4 RESULTADOS 4. dando una aumento en la concentración de azucares de manera transcendental y vertiginoso en todas las variedades. pero a partir de la 10 horas se empezó a regular y a las 24 horas posee una concentración de ART similar al de la concentración de 15%m/v. presentando como valor final de 57. en donde se refleja cómo estos van en aumento a medida que se adicionan las enzimas y transcurre el tiempo.32g/L. afectando la conversión de almidón en azucares reductores. En la gráfica 1 se observa el comportamiento de ART de la variedad de ñame Dioscorea Alata. la concentración de 13.32g/L y 61. existían partículas más grandes y no se tuvo en cuenta y esto dificulto la degradación de la enzima a lo largo de la etapa de la licuefacción. en donde se adiciono la enzima AMG 300L que cobra un papel definitivo en este proceso.5% con un valor de 69.12g/L. finalizando así la etapa de hidrolisis. haciendo referencia de la concentración de azucares reductores finalizando así esta primera etapa y dando así paso a la ejecución de la etapa de sacarificación. En esta variedad las concentraciones de azucares con la adición de la enzima AMG 300L varían desde 35. En la concentración de 10.68g/L 60 . inicialmente había una concentración de 4. Al examinar los resultados de esta variedad se observa que la concentración de 15%m/v presento los valores más bajos de concentración de azucares al iniciar la hidrolisis enzimática con un valor de 1.12g/L para la concentración de 10.5% m/v inicio con los valores más altos de ART y se observa un aumento en la concentración de forma abrupta.02g/L a 57. con este análisis se observa que la mayor concentración para esta variedad lo presento la concentración de 13.5%m/v los valores oscilan entre 53.68g/L y para la concentración de 15%m/v los valores oscilaron entre 47.5%. en la concentración de 13.1 Comportamiento de Dioscorea Alata en la hidrólisis enzimática.57g/L que indica que hubo problemas de experimentación a la hora de la preparación de la solución.32 g/L.5% la conversión de almidón en ART a lo largo de todo el proceso fue normal. Con la adición de la enzima alfa amilasa se refleja su gran importancia en la primera etapa de la hidrolisis (licuefacción) por como aumenta la velocidad y alteración química de la composición química del almidón de ñame.82g/L a 69.

Alata 13.Gráfica 1.00 -10.00 10.00 [ART] g/L 40.00 HORAS Fuente: autores del proyecto En la gráfica 2 se presenta el comportamiento de los 0Brix de las tres concentraciones (10.5%. en donde se refleja una notable diferencia en los valores máximos debido a la acción de la enzima en cada una de las concentraciones. aunque al iniciar el proceso no hay diferencias significativas en la cantidad de sólidos solubles en el jugo glucosado aun así la de mayor ºBrix al iniciar el proceso la tiene la concentración de 13. 13. 61 .5% y 15%) usadas.00 60. Alata 80.00 0.5% D.00 70. Comportamiento de azucares reductores en la enzimática de D.00 20.00 50. Alata 15% -20.00 30.5%m/v que coincide con la de mayor concentración de ART al iniciar.5% AMG D. Alata 10.00 0 5 10 15 20 25 30 hidrólisis α Amilasa D.

5% α Amilasa AMG D.00 10.5%m/v aumento significativamente con respecto a la concentración de 15%m/v.5% y 15%).21% con 0Brix.00 1. se observa un aumento en la conversión de almidón en ART debido a la actividad enzimática.00 °BRIX 6.00 11. A pesar de que hubo un aumento progresivo en las 3 concentraciones.00 5.00 7. 13.00 4.5%m/v presento los valores más altos de ART comparada con las otras 2 concentraciones. La gráfica 3 muestra el comportamiento que se dio durante el proceso de hidrólisis enzimática del ñame baboso a concentraciones de (10. Alata 15% Fuente: autores del proyecto En el anexo C se encuentran los datos correspondientes a la concentración de azucares reductores y de grados Brix. aun así la concentración de 13. Comportamiento ºBrix en la hidrolisis enzimática de D. 62 .00 3.5% D.00 8. 4. y en la concentración de 10. Alata 12.5%. Alata 10.00 -1. Se observa que menor concentración de ART la posee la concentración de 15%m/v se puede deber al aglutinamiento de las partículas de almidón y fue más difícil evidenciar la presencia de ART al inicio de esta etapa. con la adición de la enzima AMG en la segunda etapa se observan cambios representativos en la producción de azucares. Alata 13.Gráfica 2. aunque el máximo valor lo presento la concentración de 11.00 9.2 Comportamiento de Dioscorea Trífida en la hidrólisis enzimática.00 0.00 0 5 10 15 HORAS 20 25 30 D.00 2. se observa de acuerdo a estos datos que los grados 0Brix son directamente proporcional a los de azucares reductores.

00 20.trifida 13. Esta presento el mejor resultado con 12.5% D.00 0 -10.99.trifida15% α Amilasa AMG Fuente: los autores del proyecto En el anexo C se encuentran los datos tabulados de la producción de azucares reductores y grados ºBrix.00 70. La gráfica 4 ilustra la cantidad de sólidos solubles generada para cada una de las concentraciones de ñame dentro de las cuales la del 15%.5% entre 0.00 [ART] g/L 40.00 60.00 30.00 50.00 0.64 como valor final.00 10. oscilo entre 1.24 y 11 con 10. 63 .88 como valor final y la de 10. los comportamientos de los ºBrix son directamente proporcionales a la producción de azucares.Gráfica 3.5% entre 1. la concentración de 13.00 5 10 15 HORAS 20 25 30 D.trifida 10. Trífida.5% D. Comportamiento azucares reductores en la hidrólisis enzimática de D.6 y 13.92 y 9 con 8. 80.

3 Comportamiento de Dioscorea Rotundata en la hidrólisis enzimática. en donde se observa que el comportamiento es similar al de las otras 2 variedades aumentando las concentraciones a medida que transcurre el tiempo y se desarrolla la hidrolisis enzimática.Gráfica 4.5% el valor inicial es de2. Trífida 14.00 0.trifida 10. en donde los valores para la concentración de 10.00 α Amilasa 8.trifida 13.37g/L y un valor final de 78.00 5 10 15 HORAS 20 25 30 Fuente: los autores del proyecto 4. y los mejores rendimientos los presento la concentraciones de 15% con un valor inicial de 21.57g/L.82g/L que a diferencia de las otras variedades las mejores concentraciones de azucares reductores las presento la concentración de 15%.32g/L. para la concentración de 13.5% D.82g/L y el máximo fue de 71.00 0 -2.00 D.00 12.00 °BRIX 6.5% el valor mínimo fue de 11. La gráfica 5 ilustra el comportamiento de azucares reductores de la variedad de ñame Dioscorea Rotundata.00 10.00 4.trifida15% AMG 2.5% D. Comportamiento ºBrix en la hidrólisis enzimática de D.82gr/L a 67. 64 .

00 -20.Gráfica 5.00 30.00 60. aunque a diferencia tuvo el mayor valor final de los ºBrix de todo el proceso de hidrolisis enzimático.00 -10. 80.00 20.00 [ART] g/L 40. Rotundata 10.00 Fuente: autores del proyecto 0 5 10 15 20 25 30 D. donde la acción de la enzima fue más efectiva.00 50. 13.00 0. Comportamiento azucares reductores en la hidrólisis enzimática de D. el valor fue de 15.00 10.5% y 15%) usadas. para esta variedad tuvo un comportamiento similar al de las otras 2 variedades. Rotundata 15% HORAS La gráfica 6 muestra que el comportamiento de los 0Brix de las tres concentraciones (10.5% D. Rotundata 13.5%.00 70.5% α Amilasa AMG D.70 ºBrix y lo presentó la concentración de 15% 65 . Rotundata.

5% D.00 0 5 10 15 Horas 20 25 30 D.00 16.4 Lectura de pH 4.00 0.4.00 °BRIX D.00 2.00 10. Rotundata 10. Rotundata 13.00 4. Rotundata 18. a partir de las 44 horas presento variaciones mínimas y los valores se tornaron constante. Rotundata 15% α Amilasa AMG -2. Comportamiento ºBrix en la hidrólisis enzimática de D.Grafica 6.00 14. Se ilustra el comportamiento del pH en el proceso fermentativo de esta especie.00 Fuente: autores del proyecto 4.00 6. 66 .00 12. En el anexo B se reportan los datos correspondientes a la variación de pH a través de todo el proceso fermentativo para Dioscorea Alata. mostrando disminución a través del tiempo. En la gráfica 7.1 Lectura de pH para Dioscorea Alata.5% 8.

4 4.5% y 15% hasta finalizar el proceso fermentativo. 67 .Gráfica 7.2 5 4.27 para las concentraciones 10. Alata 10.2 Lectura de pH para Dioscorea Trífida La gráfica 8. se ilustra disminución a lo largo del tiempo. pero a partir de las 28 horas presento valores promedios a 4.5% D. Muestra un comportamiento similar del pH a la anterior especie.4. Alata 15% 4.2 4 0 10 20 30 HORAS Fuente: los autores del proyecto 40 50 60 D. Alata 13.5% D.8 pH 4. Comportamiento del pH durante la fermentación de D.6 4. Alata 5. En el anexo C se reportan los datos correspondientes a la variación de pH a través de todo el proceso fermentativo para Dioscorea Trífida.

Comportamiento del pH durante la fermentación de D.7 D.trifida 13.5% 4.4. En la gráfica 9.1 4.trifida 10. es evidente que en la concentración de 13.Gráfica 8.1 0 10 20 30 HORAS 40 50 60 D.3 Lectura de pH para Dioscorea Rotundata.trifida15% Fuente: los autores del proyecto 4. 68 . Se nota claramente que hay una disminución pronunciada del pH.5 4. y este no logra a estabilizarse.3 4. Trífida 5.5% de esta especie comparada con las otras 2 especies sufrió un descenso de pH más rápido en donde pudo verse afectado el microorganismo y reteniendo la producción de Etanol.9 pH 4.5% D.

1 Lectura de ºBrix para Dioscorea Alata.10 4. 69 .5%.5.5% y 15% m/v) de la especie D. Se destaca que la concentración de 10. 1. Rotundata 15% 4.5% D.Gráfica 9. En la gráfica 10. Se ilustra el comportamiento de los ºBrix de las 3 concentraciones (10. Rotundata 10.5% D. 13.5 y 15%) fueron 0.80. Comportamiento del pH durante la fermentación de D.90 4.10 0 10 20 HORAS Fuente: los autores del proyecto 30 40 50 60 pH D.5%.30 4.50 4.70 4. 13.12 y 1. 4.80 indicando que la fermentación fue completa. los valores finales en cada una de las concentraciones (10.5 Lectura de ºBrix.13 respectivamente.5% presento la mayor disminución 0. Alata donde se nota una disminución progresiva de los ºBrix a lo largo del proceso fermentativo. Rotundata 13. Rotundata 5.

el cual es el valor más pequeño de esta especie. Alata.00 0 10 20 30 HORAS 40 50 60 D.5% D.00 2. 70 . Alata 10.5.5% D.2 ºBrix. Comportamiento del descenso de ºBrix durante la fermentación de D. 16. lo cual indica que su fermentación fue completa.00 -2.00 12. Alata 15% Fuente: los autores del proyecto En el anexo B se presentan los datos correspondientes a los ºBrix en la etapa de fermentación para la especie Dioscorea Alata.2 Lectura de ºBrix para Dioscorea Trífida La concentración 13.00 10.00 14.Gráfica 10. 4.00 °Brix 8.00 0. Alata 13.00 4.00 6. pero a las 44 horas descendió nuevamente para finalizar así el proceso con un valor de 2.5% presento un comportamiento irregular donde a partir de las 30 horas los ºBrix no hubo variación considerable.

T. A. pp 389–392. 4.00 12.00 0 10 20 30 HORAS Fuente: los autores del proyecto 40 50 60 En el anexo C se presentan los datos correspondientes a los ºBrix en la etapa de fermentación para la especie Dioscorea.Gráfica 11.3 Lectura de ºBrix para Dioscorea Rotundata.trifida 13.trifida15% 2.trifida 10. 13.00 6. La siguiente grafica 12.5. 71 .00 14. con disminución a lo largo del proceso y refleja para las concentraciones de trabajo (10. esto es gracias a que el alcohol genera modificaciones en la organización y permeabilidad de las células presentes por concentración.00 D.. 51 AGUILERA. BENITEZ.00 °Brix 8.Role of mitochondria in ethanol tolerance of Saccharomyces cerevisiae. Comportamiento del descenso de ºBrix durante la fermentación de D.00 4.5% D.5 y 15% m/v) valores similares destacando que la concentración de 10% presento siempre los valores más bajos.00 0. Muestra que el comportamiento de esta especie es similar al de las otras 2 especies. Vol 142. 1986.5% D. afectando su composición lipídica y el funcionamiento de proteínas de membrana involucradas en el transporte de azúcares y aminoácidos51. Arch.00 10. Microbiol. Trífida 16.5.

00 2.00 12.Gráfica 12.00 °BRIX 10. Rotundata 13. 20.5% y 15% respectivamente. 72 .31 g/L y a las 50 horas un valor de 3. Rotundata 15% En el anexo D se presentan los datos correspondientes a los ºBrix en la etapa de fermentación para la especie Dioscorea Rotundata. se observa que la concentración 10.00 8.00 16. el descenso de azucares en general fue muy similar.12 g/L siendo este ultimo el valor más bajo y también se evidencia que la concentración de 15% presento a las 50 horas menos consumo de azucares reductores por lo tanto se espera que tenga una menor producción de etanol en comparación a las demás variedades.5% D. 4. Comportamiento del descenso de ºBrix durante la fermentación de D.5% D.5% disminuyo rápidamente con un consumo notable de azúcar.00 18. A las 28 horas presentaba una caída de 9. Rotundata 10.00 0 10 20 30 HORAS Fuente: los autores del proyecto 40 50 60 D.00 -2.00 6. Rotundata. 6. Los valores finales de concentración de azucares reductores fue de 3.12g/L.1 Lectura de Azucares Reductores para Dioscorea Alata. Alata.6.5%.75g/L para 10. 13.00 4.00 0.6 Lectura de Azucares Reductores en la fermentación 4.00 14.52g/L y 3. En la gráfica 13 se ilustra como fue el consumo de azucares reductores para la especie D.

00 20..00 80.6.00 0 10 20 30 40 50 60 HORAS Fuente: los autores del proyecto Los datos correspondientes al consumo de azucares se encuentra en el anexo B.00 0.00 40. se ilustra el consumo de glucosa para la especie D.Gráfica 13.5% D.00 10.5% 4.00 60. y se observa un mayor consumo en las concentraciones de 13% y 15% m/v un comportamiento similar.00 D.5% D. Trífida En la gráfica 14. Alata 13. 73 . evidenciando la disminución de esta y que los valores finales de las concentraciones 10.16g/L y 2.00 70. el valor final para estas dos concentraciones fue de 2.2 Lectura de azucares reductores para D. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D. aunque quien presento mayor producción de etanol es la concentración de 13.5% m/v y 15% m/v son los de menor valor.60g/L que indica eficiencia en la fermentación. Alata 15% 30.00 -10. Alata 10. al finalizar el proceso de fermentación. Alata 90.00 [ART] g/L 50.

A continuación en la gráfica 15. Trífida 90.00 60. Los valores finales de concentración de glucosa fueron 5.34g/L para las concentraciones restantes 13.00 40.00 20.trifida 13.5% y 15% m/v respectivamente.3 Lectura de azucares reductores para Dioscorea Rotundata.22 g/L. don la diferencia que al final el valor más bajo lo obtuvo la concentración de 10.6. 74 .00 30.89g/L y 4.5% con 2.00 10.5% D.trifida 10.trifida15% -10.00 0 10 20 30 HORAS 40 50 60 D. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D.00 70.00 0.00 [ART] g/L 50.00 80.5% m/v y 15% m/v existe poca diferencia. se ilustra el comportamiento del consumo de glucosa para Dioscorea rotundata en donde se puede inferir que es similar al de las otras 2 especies. 4.5% D.Gráfica 14.00 Fuente: los Autores del proyecto En el anexo C se encuentra los datos correspondientes al consumo de Azucares evidenciando la disminución de la concentración de azucares reductores a lo largo de la fermentación y que los valores finales de las concentraciones 13.

4.7 Conteo de microorganismos Los datos para cada una de las variedades se encuentran en los anexos B.1 Conteos de microorganismos para Dioscorea Alata.00 60. Alata en sus tres concentraciones (10. La grafica muestra el comportamiento de la levadura durante el proceso de fermentación para el D. Rotundata 100. durante el inicio del proceso se observa que el crecimiento del microorganismo es lento y pequeño.5% y 15%).00 D. C. 75 . 13.00 10 20 30 HORAS 40 50 60 Fuente: los autores del proyecto En el anexo D se presenta los datos correspondientes a la concentración de glucosa en el tiempo. 4. y D del documento. esto corresponde del tiempo 0 al 10.5% D. Rotundata 13.Gráfica 15. aquí la célula reconoció al alimento enseguida y empezó a crecer por lo tanto no hubo fase de adaptación. como se puede observar en la gráfica 16. esto es debido a que la levadura está reconociendo y se está adaptando al medio de donde debe tomar los nutrientes necesarios para desarrollarsu proceso productivo.00 0 -20. para el proceso de fermentación de la especie Dioscorea Rotundata.00 80.5% 40.7.00 0. Comportamiento del descenso de azucares reductores durante la fermentación de D. Rotundata 15% 20.00 [ART] g/L D. Rotundata 10.5%.

2 conteos de microorganismos para Dioscorea Trífida. También se puede destacar que el mayor crecimiento se produce en la concentración de 15% con un valor de 1.7. Alata 10.10E+06 4. en donde se puede apreciar que la concentración de D. Esta variedad de ñame fue la que obtuvo la menor formación de microorganismo durante el proceso. Alata 15% 1. Alata 13.16E+6 UFC/ml.10E+06 2. A las 44 horas se ve un descenso en la concentración de células que puede ser el resultado de la formación de metabolitos secundarios durante el proceso.32E+07 UFC/ml.40E+07/ml.01E+07 D. Alata 13. para esta concentración el crecimiento total va desde 1.10E+06 D.61E+07 1. Alata 1.41E+07 1.00E+06 hasta 1.4E+07 UFC/ml.10E+06 6.5% 8. En la primera etapa la adaptación del microorganismo fue similar al de la del D. sin embargo la fase lag para esta especie es pequeña y la levadura toma acción y en la segunda fase se produce un incremento para las concentraciones 76 . Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D. 4.81E+07 1.5% D. para esta especie la levadura demoro un poco más tiempo en adaptarse al medio.40E+06/ml hasta 1. Para esta concentración el crecimiento va desde 1.00E+05 0 10 20 30 HORAS 40 50 60 Fuente: los autores del proyecto Durante este proceso también podemos observar una segunda fase en donde se origina un crecimiento exponencial para las tres concentraciones.5% es la primera que comienza con el crecimiento con 3.21E+07 UFC 1.Gráfica 16. Alata.

02E+07 UFC/ml.80E+07 1.trifida15% Fuente: los autores del proyecto El crecimiento total de la concentración 10. pero a las 20 horas se produjo un descenso en la concentración de las levaduras hasta 1.50E+07 UFC 1. 77 .trifida 13.5 y 15 % en donde el crecimiento fue constante.18E+06/ml hasta 1.5% en las primeras 10 horas tuvo una etapa de adaptación normal.00E+06 6.77E+07 UFC/ml y finalmente la concentración de 15% desde 4. Esto origino un incremento constante de la producción de biomasa este medio en general para las tres concentraciones como se ve en la gráfica 18.10E+07 1.3 conteos de microorganismos para Dioscorea Rotundata.20E+07 9.19E+06 UFC/ml esto se puede deber a que en el momento de tomar las muestras no hubo un rígido control y haya habido un aumento en la cantidad de oxigeno disminuyendo la actividad de la levadura e impidiendo su crecimiento normal. siendo este último el de mayor crecimiento para esta especie.00E+06 0.77E+07 UFC/ml como se puede ver en la gráfica 17.5% fue desde 1.68E+07 UFC/ml.7. prácticamente no hubo fase lag con esta especie. .50E+06/ml hasta 2. para la concentración de 13.31E+06/ml hasta 1. Gráfica 17.00E+06 0 10 20 30 HORAS 40 50 60 D. para la concentración de 13. 4. aunque posteriormente se produjo un incremento en la producción de levadura para esta concentración y finalmente termino con 1.00E+00 -3.trifida 10.5% D.00E+06 3. El crecimiento para esta especie en la primera fase fue pequeño pero acelerado ya que la levadura tuvo una muy buena adaptación al medio. Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D.40E+07 2.5% D. Trífida 2.de 10.5% fue desde 2.

00E+06 hasta 2.5% de 5.76E+07 UFC/ml.30E+06 UFC/ml hasta 1.23E+07 8.5% D.5%. observándose una Concentración final de etanol de 3. 13.46E+07 UFC/ml.8. Esta especie fue la que genero mayor producción de Biomasa durante el proceso de fermentación con la concentración 15% con un valor de 2. 4. Rotundata 15% Durante la fase logarítmica se logró un buen rendimiento en la producción de biomasa donde se obtuvieron los siguientes crecimientos.5% 1.1 Producción de etanol Producción de etanol de Dioscorea Alata. 3. La producción de etanol durante el tiempo de Fermentación para las concentraciones de harina de ñame del 10.27% v/v respectivamente.64% v/v. Alata 13.8 4.95E+07 UFC/ml y para la de 15% 8.5% y 15%M/v de la variedad D.63E+07 1.46E+07UFC/ml.43E+07 2. Alata se representan en la gráfica.35E+06 UFC/ml hasta 1.03E+07 1.00E+05 0 Fuente: los autores del proyecto 20 HORAS 40 60 D. para la concentración de 10.30E+06 4. Alata donde se observa que las tres tienen valores muy similares. UFC 78 . para la de 13. Rotundata 10. Comportamiento del crecimiento de biomasa durante la fermentación de D.5% con 3. Rotundata 13. Rotundata 2.5% D.64% v/v y 3.83E+07 2. observándose la producción de alcohol a partir de las 4 horas hasta alcanzar un valor máximo a las 50 horas para las tres concentraciones de D. Sin embargo la que mayor valor obtuvo fue la D.22% v/v.Gráfica 18.30E+06 3.

Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D. 79 .05 lo que indica que no existen diferencias significativas entre las medias de alcohol de un nivel de concentraciones a otro. en donde esta especie obtuvo los menores porcentajes de alcohol de las tres variedades presentadas para el estudio. La grafica 20. Alata 10.00 3. Alata 13.5% D. Alata. Alata 15% 1.00 0 -1.Muestra el incremento de la producción de etanol durante el proceso de fermentación con Saccharomyces cerevisiae.00 %V/V 2. Ilustra la diferencia de medias para la variedad D. el análisis de varianza realizado para esta especie dio como resultado un valor de p> a 0.00 10 20 30 HORAS 40 50 60 Fuente: los autores del proyecto La grafica 19.00 0.5% D.Gráfica 19. Alata 5.00 D.00 4.

Alata.Grafica 20. variedad Dioscorea Alata Fuente: los autores 4.2 Producción de Etanol de Dioscorea Trífida. 80 .5% y 10.53% v/v.5%m/v dieron los mayores resultados para esta variedad con 4. los mejores resultados se presentó en la concentración de 13. La producción de alcohol para esta especie se produjo entre el tiempo 4 y 50 de fermentación en donde la concentración de 15% tuvo el menor valor con 3. Las concentraciones 13.4% v/v Lo cual sedebe a un menor consumo de los Azucares reductores por parte de Saccharomyces cerevisiae.5% a las concentraciones obtenidas por D.5% para esta especie. superando con la de 13. Trífida durante la producción de alcohol y no se observa mucha variación en la producción de etanol. Gráfico de medias. En La grafica 21 muestra el comportamiento del D.43% v/v y 3.8.

00 3.05 lo que indica que no existen diferencias significativas entre las medias de alcohol de un nivel de concentraciones a otro.trifida15% 1.00 0. el análisis de varianza realizado para esta especie dio como resultado un valor de p> a 0.00 4. Trífida.trifida 13.00 D.5% D.00 0 10 20 30 HORAS Fuente: los autores 40 50 60 La grafica 22. Ilustra la diferencia de medias para la variedad D.5% 2. Trífida 5.Gráfica 21. 81 .trifida 10. Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D.00 %V/V D.

7% v/v respectivamente. En la gráfica 23.Gráfica 22. con lo que se puede asumir que la concentración más rentable para el proceso de obtención de alcohol es la de 15%m/v de D. Gráfico de medias. En la grafica 82 . se observa como aumenta la concentración de alcohol a partir de las 4 horas hasta alcanzar un punto máximo a las 50 horas para las tres concentraciones de D. Alata.8.3 Producción de etanol de Dioscorea Rotundata. Rotundata.5%m/v presentaron los mejores resultados. Las concentraciones 15% m/v y 13.5% m/v con un 3. este valor es mayor al valor obtenido por la concentración 13.55% v/v y 3.5%de los datos obtenidos por la variedad D.62% v/v. Rotundata donde el menor valor lo obtiene 10. esto es de 4. de la variedad Dioscorea Trífida Fuente: los autores 4.

Comportamiento de la producción de alcohol durante la fermentación de D.05 lo que indica que no existen diferencias significativas entre las medias de alcohol de un nivel de concentraciones a otro.00 5.5% D.00 1. el análisis de varianza realizado para esta especie dio como resultado un valor de p> a 0. Rotundata 6.Gráfica 23.5% D.00 Fuente: los autores del proyecto 10 20 30 HORAS 40 50 60 D.00 0. Rotundata 15% La grafica 24 ilustra la diferencia de medias para la variedad D. para la variedad Dioscorea Rotundata Fuente: los autores %V/V 83 . Rotundata 13. Rotundata 10.00 3.00 0 -1. Gráfico de medias. Rotundata.00 2.00 4. Gráfica 24.

Esta ecuación se aplicó para cada una de las especies y para las 3 concentraciones de trabajo.4. 4.5% m/v ( ( ) ) Concentración 15% m/v ( ) ( ) 4.9.9 Rendimientos del proceso Para calcular el rendimiento del proceso se procede de la siguiente manera de acuerdo a la ecuación entonces ( ) Yp/s: Rendimiento producto.sustrato P: concentración de etanol (g/L) S: concentración de glucosa (g/L) Hay que tener en cuenta que al iniciar el proceso de fermentación en P 0 no hay producción de etanol.5% m/v ( ) ( ( Remplazando los valores ) ) Concentración 13.9.5% m/v ( ) ( ( Remplazando los valores ) ) Concentración 13.1 Rendimiento para Dioscorea Alata Concentración 10.5% m/v ( ) ( ) 84 .2 Rendimiento para Dioscorea Trífida Concentración 10.

1 y Statistical Package for the Social Sciences (SPSS). es decir uno por cada especie. se realizaron 3 análisis de varianza. siendo el rendimiento teórico o estequiométrico 51.5% y 15%) m/v la concentración que presento mayor rendimiento fue la concentración de 15% con 49.8% del rendimiento teórico. lo cual supera el rendimiento alcanzado a nivel industrial que varía entre 87 y 95%. H.3 ) ) Rendimientos para Dioscorea Trífida Concentración 10.J.5%.5% m/v ( ) ( ) Concentración 15% m/v ( ) ( ) De acuerdo al cálculo de los rendimientos de cada una de las 3 especies a las diferentes concentraciones de trabajo (10.5% que representa un 96./dic. y DACOSTA.5% m/v Remplazando los valores ( ) ( ) ( ) Concentración 13.8 n. 13.1%52 4. Fermentación alcohólica: Una opción para la producción de energía renovable a partir de desechos agrícolas. investigación y tecnología. O. el primero para realizar el análisis de varianza (ANOVA)en donde se trabajó con un nivel de significancia o error estadístico del 5% (0. Ingeniería.9. VÁZQUEZ.10 ANÁLISIS ESTADÍSTICO Para el análisis estadístico de esta investigación se utilizaron como herramientas tecnológicas los software Statgraphics 5. 2007 52 85 .Concentración 15% m/v ( ( 4.4 México oct.05) que permitió determinar si los datos arrojados en la investigación existen o no variaciones significativas de las variables que interesan a los investigadores. v.

también se determino con el análisis de varianza que la variedad que ofrece los mejores resultados en cuanto a la producción de etanol es la Dioscorea Trífida y con las concentraciones de 10. para comprobar las hipótesis fue necesario realizar inicialmente la prueba no paramétricas Kolmogorov-Smirnov para una muestra que se busca comprobar si los datos proviene de una distribución normal y así aplicar la prueba T de Student que es la prueba que permite el contraste de las Hipótesis. que la concentración es diferente de 10%.5 y 13. 13. En el anexo H se reportan los resultados de las pruebas no paramétricas Kolmogorov-Smirnov y de las pruebas T de Student. en el anexo G se encuentran los resultados del ANOVA de las 3 variedades. es decir que los datos si provienen de una distribución normal y si se puede aplicar la prueba T de Student. es decir. ya que con la concentración de 15%m/v se desaprovecha mucha materia prima y no hay diferencias significativa en los resultados que con las otras dos concentraciones. El segundo software se utilizó para contrastar las hipótesis propuestas en el capítulo 3 en donde la Hipótesis nula afirmaba que la concentración de etanol es igual a 10% y la hipótesis alternativa es diferente al 10%. La prueba se realizó a las 3 especies y a cada una de las concentraciones.5% y 15%). 86 .El análisis de varianza en cada una de las especies determino que no hay estadísticamente diferencias significativas entre las medias de etanol de una concentración a otra (10.5%. para un total de 9 pruebas y se aceptó la hipótesis alternativa en las 9 pruebas.5 %m/v. la primera prueba dio positivo.

Es posible obtener bioetanol con cualquier de las especies de ñame (Dioscorea Rotundata. en la variedad Dioscorea Trífida.55%v/v a la concentración de 15%m/v. 9.84g/L en la concentración de 13. Dioscorea Trífida y Dioscorea Alata respectivamente.66%v/v a la concentración de 13. en las variedades Dioscorea Rotundata.68g/L a la concentración de 13.32g/L y el crecimiento de microorganismos presento valores máximos al final de la etapa exponencial en la variedad Dioscorea Rotundata de 1. . 73. 87 . los valores mínimos obtenidos de azucares reductores al final de la fermentación fueron de 4. el valor fue de 1.18g/L en la concentración de 13. Dioscorea Alata y Dioscorea Trífida) utilizadas en esta investigación.34g/L para la concentración de 15% en la variedad Dioscorea Rotundata.82g/L en concentración de 15%m/v en la variedad Dioscorea Rotundata.90x107UFC/ml en la concentración de 15%m/v.5% en la variedad Dioscorea Trífida.5%m/v. 4. mientras que para la variedad Dioscorea Alata e obtuvieron valores de 61. cualquiera de las concentraciones utilizadas.5%m/v y 3. Dioscorea Trífida y Dioscorea Rotundata) con valores máximos de concentración de 4.5 CONCLUSIONES Se obtuvo etanol a partir de tres variedades de ñame (Dioscorea Alata.69x107UFC/ml en la concentración de 15%y en la variedad Dioscorea Alata. fue de 1. alcanzándose máximos valores al final del proceso de 78. Durante la etapa de hidrolisis enzimática (licuefacción y sacarificación) los azucares reductores y ºBrix aumentan significativamente. Al calcular los parámetros cinéticos.25x107UFC/ml.5%m/v.5% m/v y para la variedad Dioscorea Trífida valores mínimos 3.43%v/v a la concentración de 13.

para complementar y que haya una ataque oportuno sobre el almidón en la hidrolisis y así obtener mayores resultados y altas concentración en cuanto a la conversión de azucares reductores que garantizan mayor producción de alcohol. antes de usar la enzima alfa amilasa.6 RECOMENDACIONES Para este tipo de investigación es recomendable el empleo de la enzima Pectinex ultra. En cuanto a la celulosa liberada (cascara del ñame) está también se puede utilizar para la producción de etanol o de compostaje y así aprovechar los residuos de cualquier proceso en donde se trabaje con ñame. este estudio se recomienda para futuros investigadores en donde le darían un valor agregado a este promisorio tubérculo. Se recomienda reducir el tiempo de residencia de la enzima alfa amilasa debido a que esta trabaja entre 88 a 95ºC el mantener esta temperatura por mucho tiempo implica altos costos de combustible. Evaluar los rendimientos durante el proceso de obtención de alcohol usando otro tipo de microorganismos como las bacterias Zymomonas mobilisque transforman la glucosa en etanol con un rendimiento del 5 al 10 % mayor que la mayoría de las levaduras. Se recomienda trabajar con la especie Dioscorea Trífida debido a que presento un comportamiento estable durante toda la investigación. además hay que tener en cuenta que este proyecto es un estudio preliminar y se desea que quede como línea base para futuras investigaciones. 88 . Para la cuantificación de etanol es importante emplear el método cromatografía de gases debido a que es un método más exacto y representa mayor confiabilidad en los resultados.

Biología de los Microorganismos.BIBLIOGRAFÍA ACEVEDO. LAWANSON AO. Enzimas industriales. 1986. 19 N°5-2008. Aprovechamiento Industrial de los productos agrícolas. 1964 Disponible en: www. ALVIS. Carlos. A. pág. Sincelejo. Arch. Sonia y MARBELLO. Información Tecnológica-Vol. Ingrid. Yajaira y BOCANEGRA AMAYA. Armando y VELEZ. 108 p. BROCK y MADIGAN. 142. Jorge y MERA. Obtención de glucosa a partir de almidón de yuca Manihot esculenta. pp 389–392. 2005 ASTURIZAGA AVILEZ.scielo. Aplicaciones de las enzimas. Universidad del Cauca. Disease induced changes in carotenoid content of edible yam (Dioscorea spp) infected by Botryodiplodia the obromae and Aspergillus Niger. Trífida) por vía enzimática.2004 CARRERA.Evaluación comparativa de la actividad fermentativa de Células libres e inmovilizadas de Saccharomyces cerevisiae Sobre cáscaras de naranja y gluten. Editorial Prentice Hall. Linda Luz . CARRERA.com 89 . Cartagena.: 11-18 Disponible en: http://www. 2008.abengoabioenergy.php?pid=S071807642008000500003&script=sci_arttext ARTIME.1 Marzo 2005 CIEMAT . Evelin.Role of mitochondria in ethanol tolerance of Saccharomyces cerevisiae.1987 AGUILERA. Universidad del Cauca.cl/scielo.Departamento de Energías Renovables DE RAFOLS. Programa de Biología. Módulos de Biotecnología. 3 No. JIMENEZ. Facultad de Ciencias Agropecuarias Vol. Mycopathologia 98:49-58.. Para la obtención de Grado el Título de ingeniero Químico en la Universidad de San Buenaventura. T. Universidad de Sucre. R. 1ª edición. Microbiology. Carmen. Michael. Evaluación de los rendimientos en el proceso de obtención de alcohol a partir de harina de Ñame (Dioscorea Bulbífera. Universidad de Salamanca. J. BENITEZ. 10 Edición. Vol. Barcelona. 2008 ADELUSI A. W. Facultad de Educación Y Ciencias.

6. Manuel. Enero/Julio 2006. Revista de ingeniería vol. T. Pág. 112-114. José Guillermo.gov. 2004 GONZALES.unicordoba. HERNANDEZ SAMPIERI. O. 228 FERNADEZ. Los Biocombustibles. Corpoica. Estudio de los factores que afectan la hidrolisis enzimática y el proceso fermentativo para la producción de alcohol a partir de la papa. Zaragoza. Acribia S.htm Estudio realizado por Global BioenergyPartnership (Asociación Global de Bioenergía) [GBEP (2007)] Evaluación De Propiedades Tecnofuncionales De Variedades De Ñame De La Costa Atlántica. Unidad de epidemiologia Clínica y Bioestadística.eis.p 87. Pita y PÉRTEGAS Díaz. Disponible en: http://www. J. Microbiología de los alimentos. Conferencia ARPEL. Alicia. 2004 GAMERO. FRAZIER. Bioeng.Disponible: http://www.1999. Zaragoza. 16(1). y WESTHOFF D. España. Pág.es/~macromol/curso08-09/pls/quees. Edición 2. La Coruña (España). HERNÁNDEZ.co/senado/basedoc/ley/2001/ley_0693_2001.com Disponible en: http://www. Editorial EUNED. Galo. p. Jorge y MOLINA. Punta del Este. S.uva. T.A 1993. Química de los Alimentos. LEÓN.procaña. 2002. 557 – 565.edu. Introducción a la microbiología. Editorial EUNED. p. Graw-Hill México 2006 KURIKI.co/pregrado/copia%20alimentos/proyectos/pba. W. pág. Roberto Metodología de la investigación Editorial MC. España 2000.html Disponible en: Asociación colombiana de productores y proveedores de caña de azúcar. Investigación cuantitativa y cualitativa. Edición 1 pág. 3739. The concept of the a-amylase family: structure Similarity and common catalytic mechanism. 90 . Biosci. IMANAKAT. Editorial ACRIBIA. 431-438 GARCÍA CORTES.pdf FERMEMA. 2da ed. Uruguay. Vera.secretariasenado. “Consideraciones sobre fisiología de la planta de ñame”. 2003. 2009. Microbiología industrial.

O. 49. MARCILLA GOMIS. E. 2002. Pág.A.a. London. Semilla vegetativa de yuca. Química Orgánica. Pandey.edu. Ingeniería.M. Addison–Wesley Iberoamericana. La roche (Eds. Para la obtención de Grado el Título de ingeniero en biotecnología. USA. CIAT. NIETO. 2005. Robert. H.B. India pp 189 – 220. 5taEd. 2007 WALKER J.1991. L. In Whistler & Paschal (Eds. CR. (1984). Proyecto Educativo Bonaventuriano. Enzymes in Food Processing. 1996. Introducción a las operaciones de separación calculo por etapas. Eds. J. . J. GALARZA. 2010. 53-54 VÁZQUEZ. Editorial Acribia. John E. Evaluación de las condiciones de la fermentación alcohólica utilizando Saccharomyces cerevisiae y jugo de caña de azúcar como sustrato para obtener etanol.8 n.)./dic. Extraído del sitio web de la escuela politécnica del ejército ecuatoriano. La yuca en el tercer milenio. S. RAO. TUCKER. 5-6 91 . 2004 MORRISON. pp. SMITH. H. H. Manufacture of potato starch.LOPEZ. Starch: Chemistry and Technology (pp 87-101).mx/publicaciones/avaype/sepoct02/HORCASITAS. 2009. Fermentación alcohólica: Una opción para la producción de energía renovable a partir de desechos agrícolas. investigación y tecnología. Cali. 49-75. R. Sistemas modernos de producción.http://repositorio. y BOYD. A. Pág. procesamiento.espe. Biotecnología Molecular.Amylases. Asiatech Publishers Inc. Robert.).J. Edición 4. I. Soccol. 2006. In: Enzyme Technology.ec/bitstream/21000/990/1/T-ESPE 026782.cinvestav. y DACOSTA. Acribia. Webb. v. Pág. M y MAGANA. 586 pp. EZHILVAN NAN. Colombia. A. T.pdf. TREADWAY. C. New Delhi. Edición. Disponible en: http://www. Gingold.PDF. SATYANARAYANA.4 México oct. M. utilización y comercialización. C. B y Ceballos. Biotecnología. G y WOODS. MONTES. Blackie and Son Ltd. Enzimas con Aplicación Industrial. En: Ospina. New York: Academic Press Inc.

ANEXOS 92 .

SUPERFICIE COSECHADA. PRODUCCIÓN Y RENDIMIENTO DEL CULTIVO DE ÑAME EN COLOMBIA AÑOS 1997 – 2008 93 .ANEXO A.

PH: 6.60 °C fermentaciones. FICHAS TÉCNICAS DE LAS ENZIMAS Α AMILASA Y AMILOGLUCOSIDASA α Amilasa cerveza.ANEXO B.5 Temperatura 55 .20 g/ml Actividad: 1 unidad Novo Amiloglucosidasa (AGU): cantidad de la enzima que Propiedades Parámetros óptimos Hidroliza 1µmol de maltosa/min a condiciones estándar. Propiedades 94 . PH: 4.20 -1. industria de aminoácidos. avalado por el método estándar de Novozymes A/S).25 g/ml Actividad: 120 KNU/g (1 KNU: cantidad de enzima que rompe 5. antibióticos Aplicaciones industria textil y adhesivos Apariencia: liquido no viscoso de grado alimenticio Características Color: marrón oscuro Densidad : 1.5 Parámetros óptimos Temperatura 90-105 °C Calcio 50-70 ppm Amiloglucosidasa Industria alimenticia: producción de glucosa y fructosa Aplicaciones industria del papel: protección contra daños mecánicos Industria de la Cerveza: producción de cerveza clara Apariencia: liquido no viscoso de grado alimenticio Características Color: marrón Densidad : 1. vitaminas.26 g de almidón Por hora.

ALATA.52 51.52 45.68 61.32 36. Comportamiento De Grados ºBrix Durante La Hidrólisis Enzimática.ANEXO C.6 3.5% 13. Azucares reductores en la hidrolisis enzimática α Amilasa Concentraciones Tiempo Tiempo (H) 10.7 0.84 19 4.32 42.64 4.32 54.82 47.49 4.06 5.13 4.06 4 4.5% 15% 0 0.7 8.9 4 1.55 4.32 41. RESULTADOS PARA LA ESPECIE D.32 48.31 4.7 5.5% 13.12 69.02 53.32 16.70 4.62 32.9 7.36 4.5% 15% (H) 0 4.56 28 4.0 27 7.32 64.32 AMG Concentraciones 10.9 10.90 4.21 4.32 12.52 27 18 22.52 26 10 15.6 8.84 4.5% 13.47 34.32 b.2 7. A continuación se registraron los resultados obtenidos durante la etapa de hidrolisis enzimática y de la fermentación para la especie Dioscórea Alata a.4 7.9 1.82 42.9 18 4.5% 13. Alata Concentraciones Tiempo (H) 10.1 6.41 44 4.0 8. Alata.72 28 24 33. Comportamiento De pH Durante El Proceso De Fermentación De D.82 58.5 28 7.3 1.11 4.2 24 4.79 4.5% 15% 0 4.27 66.74 23 4.2 11.2 26 6.82 1.4 2.25 4. α Amilasa AMG Concentraciones Concentraciones Tiempo Tiempo (H) 10.29 50 4.16 95 .5% 15% 35.1 9.3 10 2.5% 15% (H) 10.0 25 5.44 4.96 8 4.57 25 4 7.1 8.3 10. D.2 c.32 61.97 5.5% 13.

00E+06 1.8 11.52 3.80E+06 1.5% 15% 0 7.08 19 29.4 2.0 19 4.40E+07 96 .6 44 1.52 50 3.31E+07 1.5 8.80E+06 9.64 12.d.32 60.73 21. Alata.1 f.50E+06 19 4.04E+07 1.5% 13.75 e.22 8.33E+07 44 1.32 70.3 9.0 50 0.5% 15% 0 65.90E+06 9. Alata Concentraciones Tiempo (H) 10.17 36.5% 15% 0 8.69E+06 1.40E+06 4 1.28 7.54E+06 23 6.00E+05 1.1 23 4. Crecimiento de Biomasa durante el proceso de Fermentación de D.5 28 2.12 29.27 23 21.8 8.32E+07 1.10E+06 3.74 50.00E+06 1.56E+06 8 1.3 4 6. D.1 5. Descenso de Grados ºBrix durante el proceso de Fermentación de D.98 44 6.31 18.7 0.81 61. D.00E+06 1.25E+07 28 8.6 7.22 48.12 6.5 12. Descenso de Azucares Reductores durante el proceso de Fermentación de D.3 9.16E+06 1.32 4 50.3 11.8 1.7 8 6. Alata D.00E+06 2. Alata Concentraciones Tiempo (H) 10.0 8.30 8 42. Alata.2 5.15E+07 1.1 4.36E+07 50 7.5% 13. Alata Concentraciones Tiempo (H) 10.5% 13.50E+06 6.28 28 9.27 35.34 45.9 4.

1 2. Alata Concentraciones Tiempo (H) 10.g.4 2.1 3. Producción de Alcohol durante el proceso de Fermentación de D.6 2.4 3.2 3.5 50 3.5 2.4 44 3.5 19 2.5% 15% 0 0.0 28 3.1 3.8 2.0 0. Alata.0 3.7 97 .0 0.0 4 1.6 3. D.8 23 2.1 2.3 8 1.5% 13.5 3.0 3.

82 10 19.18 4.32 35.8 26 7.62 47.5 7.61 4.41 4.42 73. D. TRÍFIDA.2 c.88 4.29 4.9 12.32 2.4 28 67. Comportamiento de pH durante el proceso de Fermentación de D.24 4.5% 13.ANEXO D.32 58. RESULTADOS PARA LA ESPECIE D.3 6.32 41.5% 15% 0 0.8 7.8 9.82 42.21 98 .6 10.9 2.25 4.6 4 1.67 19 4.85 14.32 20.87 4 4.43 28 4.32 66.0 18 4.8 b.32 45. Resultados de la Hidrólisis Enzimática Para la D.4 10 3.21 4.32 18 25.42 51.0 24 5.5 1.1 27 7.18 24 44.5% 15% (H) 10.33 4.5 25 48.32 52.32 48. Trífida α Amilasa AMG Concentraciones Concentraciones Tiempo Tiempo (H) 10.6 25 6.1 8.2 11.5% 13.27 44 4.5% 13.9 1.66 5.02 4.58 4. Trífida.8 27 61.75 4.5% 15% 0 5.9 9.23 50 4.5% 15% (H) 10.2 8.32 58.0 9.2 1.84 67.52 38.82 53.3 28 8.53 4.9 13. Comportamiento de Grados Brix durante la Hidrólisis enzimática de D.6 4.5% 13. Trífida.5 10.93 4.5% 15% 0 4.9 26 55.5% 13.46 4.55 23 4. A continuación se registraron los resultados obtenidos durante la etapa de hidrolisis enzimática y de la fermentación para la especie Dioscórea Trífida a.75 8 4.62 4 8. Trífida Concentraciones Tiempo (H) 10. α Amilasa AMG Concentraciones Concentraciones Tiempo Tiempo (H) 10.

1 12. Trífida.83 19 43.5% 8.0 2. Descenso de Azucares Reductores durante el proceso de Fermentación de D.60 20.9 8.15 23 34.05 63. durante el proceso de Fermentación de D.7 6. Trífida Concentraciones Tiempo (H) 10.27 50 9.31 44 14.d.75 8 48.5% 15% 0 68.5% 13.19 36.0 5.1 8.55 46.75 2.82 74.31 23.94 4 62.2 Tiempo (H) 0 4 8 19 23 28 44 50 15% 13.1 4.4 2.68 52.9 5.4 10.51 44.2 10.2 8.7 10.52 68.60 e.16 2.5% 13.8 11. D.3 4.81 57.1 4.5 3.4 12.57 28 26.2 3. D.7 7.12 34.66 41.6 99 .08 11.83 12. Trífida Concentraciones 10.2 2.5 4. Descenso de Grados ºBrix Trífida.

86E+07 44 1.7 4.3 3.54E+07 1.79E+06 6.45E+07 1.9 2.61E+06 2.30E+07 23 1.0 4 1.7 3.7 3.68E+07 1. Trífida Concentraciones Tiempo (H) 10.5% 15% 0 0.76E+07 1.2 100 .09E+07 1.3 3.51E+06 2.5% 13. D.2 3.57E+06 8 1.45E+07 1.91E+07 50 1.7 28 3.69E+07 28 1.9 44 3.77E+07 2.5 3.5% 15% 0 1. D.61E+06 19 7.4 2.60E+06 1.18E+06 2.9 4. Trífida.f.5% 13.2 2.65E+07 1.0 0.02E+07 g. Trífida.7 8 2.50E+06 4 1.19E+06 1. Crecimiento de Biomasa durante el proceso de Fermentación D.0 50 3.7 2.1 19 2.0 3.5 3.31E+06 4.0 0. Trífida Concentraciones Tiempo (H) 10.59E+06 4.5 23 3. Producción de Alcohol durante el proceso de Fermentación de D.

5% 13.82 b.8 6.32 71.0 AMG Concentraciones 10.1 12.57 69.62 53. RESULTADOS PARA LA ESPECIE D.4 2. Comportamiento de Grados Brix durante la Hidrólisis enzimática de D.7 12.37 25 54.32 53.9 4.5% 13.4 12.82 26 63.5 13.07 78. α Amilasa Concentraciones 10.32 67.3 9.4 15.72 50.1 15.2 7. Rotundata.5 1.6 11.5% 15% 0 2.5% 13. α Amilasa AMG Concentraciones Concentraciones Tiempo Tiempo (H) 10.02 34.22 71. ROTUNDATA.5% 15% 1. Resultados de la Hidrólisis Enzimática Para la D.7 10.62 45.17 63.3 14.0 14.82 27 28 66.7 Tiempo (H) 0 4 10 18 24 Tiempo (H) 25 26 27 28 15% 13.5% 15% (H) 10.32 48.1 12.92 40.8 2.82 56.82 21.32 4 7.5% 13.5% 10. Rotundata.2 8.6 8.4 11.82 70.0 11.32 59.7 101 . A continuación se registraron los resultados obtenidos durante la etapa de hidrolisis enzimática y de la fermentación para la especie Dioscorea Rotundata a.07 31.77 67.32 10 18 24 14.6 10.ANEXO E.9 14.82 11.22 58.

72 30. Rotundata.07 23.757 4.27 79.89 4.18 51.22 5.55 4. Rotundata Concentraciones Tiempo (H) 10.97 4.421 4.21 4.04 4 4.76 26.05 65.34 102 .63 4.36 4.86 19 46.22 51.87 4 50. Rotundata.5% 13.281 4. Comportamiento de pH durante el proceso de Fermentación de D.5% 13.81 33.32 13.58 44 4. D.5% 15% 0 67.7 5.521 4.15 28 31.411 4. Descenso de Azucares Reductores durante el proceso de Fermentación de D. Rotundata Concentraciones Tiempo (H) 10.92 60.04 16.23 d.82 41.66 28 4.30 50 2.32 70.607 4.47 4.5% 15% 0 4.c.76 44 25. D.32 8 47.46 50 4.41 4.98 8 4.72 23 4.29 4.81 4.81 23 43.84 19 4.12 44.

6 5.2 13.58E+07 1.5 11.90E+07 28 1.00E+07 44 1.04E+06 1.80E+07 2.0 15.3 f. D.76E+07 1.2 12. Rotundata Concentraciones Tiempo (H) 10.9 14.5% 15% 0 1.3 7.88E+07 2. Rotundata Concentraciones Tiempo (H) 0 4 8 19 23 28 44 50 10.2 1.4 14. Crecimiento de Biomasa durante el proceso de Fermentación D.8 8.58E+07 23 1.0 2.5% 12.7 12.9 11.5% 13.37E+06 9.56E+07 1.8 12.10E+07 1.5 7.5% 15.30E+07 50 1.2 9.46E+07 103 .06E+07 19 1. durante el proceso de Fermentación de D.7 3. Rotundata.04E+06 8 4.3 7.95E+07 2.60E+07 1.30E+06 5.7 8.00E+06 4 1.4 9. Descenso de Grados ºBrix Rotundata.10E+06 7.2 14.e.41E+07 1. D.2 9.35E+06 8.30E+07 1.4 15% 16.49E+06 6.

3 2.9 104 .5% 0.0 2.0 4.4 3.6 3.2 3. Producción de Alcohol durante el proceso de Fermentación de D.4 3. Rotundata Concentraciones Tiempo (H) 0 4 8 19 23 28 44 50 10.5% 0.5 2.0 2.6 13.0 2.0 2.7 2. D.9 4.4 4.1 3.0 3.4 3.0 1.2 15% 0. Rotundata.7 3.4 4.0 3.g.

L. 105 ..2 Fenol 100cm 3 Agua destilada C. La lectura se realiza a 575 nm. Ventajas y desventajas: Altas concentraciones de proteínas interfieren en la determinación de los Azúcares reductores. 0. Labo MT205) Fundamento: El ácido 3.5 dinitrosalicilico y fenol.ANEXO F. Materiales y equipo Tubos de ensayo con tapa Pipeta de 1ml.(Fer. dinitrosalicilico en presencia del calor se reduce un color amarillo café. Curva estándar Establecer una escala estándar de 0 a 1mg/cm 3 dentro de una serie de tubos de ensayo introducir: 0.AnalyeChen. Use of dinitrosalicylieachlreagattforDetermination of reducing sugar.P. 31:426429.2. 0.6. Pipeta o distribuidor automático Matraz aforado de 100ml o 1000ml Frasco color ámbar Macerador de tejidos Potter Espectrofotómetro para leer a 575 nm Balanza analítica Agitador de tubos (vórtex) Centrifuga Baño de María Baño de Hielo Reactivos Reactivos 1 g Ácido 3.4.5 dinitrosalicílico 1 g Hidróxido de sodio (NaOH) 0.8 y 1 cm 3 de la solución estándar y Completar a 1 cm 3 con agua destilada. AZUCARES REDUCTORES (METODO DEL DNS) Referencia: MILLER. G. Interferencias. 1959.B.5 g Sulfito de sodio anhidro 0. Otra desventaja es el costo de los reactivos Principalmente en del ácido 3. Además de que es un método sencillo y rápido.5. 0. Una de las ventajas de este método es que el calor final desarrollado es estable hasta 24 horas. 0. Pipeta de 5ml.

2 0.Tubo concentracion (Mg de azucar/1) 0 1 2 3 4 5 Muestra 0 0. Reordenando la ecuación (1) en términos de X.4 0.8 200 0.6 400 0. tenemos: ( ) Sustituir las lecturas que se obtengan en la ecuación (2) para conocer X concentración de azúcares. la pendiente y la ordenada al origen. M = pendiente.O. se hace una regresión lineal.4 600 0. sacar el coeficiente de correlación (el cual no debe ser menor a 0. Sustituir estos valores en la ecuación de la recta: ( ) Dónde: Y = absorbancia. X = concentración (mg de azúcar/1) b = ordenada al origen.99). Curva de Calibración 106 .6 0.8 1 Agua destilada ml 1 0 0.2 800 0 1000 Cálculos Con los valores obtenidos de la curva estándar de D.

ANEXO G. MÉTODO COLORIMÉTRICO DICROMATO DE POTASIO EVALUACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE ETANOL (Método Colorimétrico de Dicromato de potasio). Para cuantificar la cantidad de etanol producido en la fermentación se realizara aplicando el Método Colorimétrico de Dicromato de Potasio. PROCEDIMIENTO: Se colocan 4 ml de solución oxidante (mezcla formada por 4.165 g de Dicromato de potasio y 250 ml de ácido sulfúrico, aforado con agua destilada a un litro) en tubos de ensayo; luego se adicionan 2 ml de solución saturada de carbonato de potasio gota a gota por las paredes del tubo hasta que cese el burbujeo y agitar por 10 segundos, seguidamente agregan 2 ml de la muestra a analizar, previamente centrifugada a 3000rpm durante 20 minutos y diluida al 5% v/v con agua destilada. Después, todos los tubos se agitan a 1500 rpm durante 10 segundos. Para homogenizar la solución se calienta en un baño de maría termostato a una temperatura ambiente se procede a leer la absorbancia a 440 nm en el espectrofotómetro UV-Vis, se recomienda realizar este procedimiento por duplicado. Los datos obtenidos se deben llevar a una curva patrón que se trazara a partir de estándares de etanol, los cuales se elaboran por medio de una solución patrón de etanol al 1% (7894 ppm) en el rango de 315.76 ppm hasta 1894.56 ppm (hacer por duplicado y sacar promedio) a los que se les aplica el método descrito anteriormente. Con las absorbancias obtenidas de la serie de patrones estimar la ecuación de la recta (coeficiente de determinación R2) y luego hallar las diferentes concentraciones.

107

ANEXO H. ANÁLISIS DE VARIANZA PRUEBA ANOVA SIMPLE Análisis Estadístico para el alcohol producido D. Rotundata Este procedimiento realiza un análisis de la varianza simple para Alcohol. Realiza varios test y gráficos para comparar los valores medios de Alcohol para los 3 diferentes niveles de Concentraciones. El F-test en la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las medias. Si hay, los Test de Rangos Múltiples le indicarán las medias que son significativamente diferentes unas de otras. Si le preocupa la presencia de valores atípicos, puede elegir el test Kruskal-Wallis que compara las medianas en lugar de las medias. Los diferentes gráficos le ayudarán a juzgar la significación práctica de los resultados, y le permitirán buscar las posibles violaciones a las asunciones subyacentes en el análisis de la varianza.

Resumen Estadístico para Alcohol

Esta tabla muestra los datos estadísticos de Alcohol para cada uno de los 3 niveles de Concentraciones. El análisis de la varianza simple está pensado principalmente para comparar las medias de los diferentes niveles, listados aquí bajo la columna Media. .

108

Tabla ANOVA para Alcohol según Concentraciones

La tabla ANOVA descompone la varianza de Alcohol en dos componentes: un componente entre grupos y un componente dentro de los grupos. El F-ratio, que en este caso es igual a 0,755223, es el cociente de la estimación entre grupos y la estimación dentro de los grupos. Puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0,05,no hay diferencia estadísticamente significativa entre las medias de alcohol de un nivel de Concentraciones a otro para un 95,0%. Grafica 23.Gráfico de dispersión para D. Rotundata

109

Grafica 24. Gráfico de cajas y bigotes para D. Rotundata

Análisis Estadístico para el alcohol producido D. Alata Este procedimiento realiza un análisis de la varianza simple para Alcohol. Realiza varios test y gráficos para comparar los valores medios de Alcohol para los 3 diferentes niveles de Concentración. El F-test en la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las medias. Si hay, los Test de Rangos Múltiples le indicarán las medias que son significativamente diferentes unas de otras. Si le preocupa la presencia de valores atípicos, puede elegir el test KruskalWallis que compara las medianas en lugar de las medias. Los diferentes gráficos le ayudarán a juzgar la significación práctica de los resultados, y le permitirán buscar las posibles violaciones a las asunciones subyacentes en el análisis de la varianza.

110

Puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0. que en este caso es igual a 0. Tabla ANOVA para Alcohol según Concentración. Alata Esta tabla muestra los datos estadísticos de Alcohol para cada uno de los 3 niveles de Concentración.no hay diferencia estadísticamente significativa entre las medias de alcohol de un nivel de Concentración a otro para un 95.Resumen Estadístico para Alcohol producido ñame D. El análisis de la varianza simple está pensado principalmente para comparar las medias de los diferentes niveles.283889.05. listados aquí bajo la columna Media. La tabla ANOVA descompone la varianza de Alcohol en dos componentes: un componente entre grupos y un componente dentro de los grupos. 111 . es el cociente de la estimación entre grupos y la estimación dentro de los grupos.0%. El F-ratio.

Gráfico de cajas y bigotes para D.Grafica 26. Grafica 27. Alata. Gráfico de dispersión para D. Alata 112 .

Este procedimiento realiza un análisis de la varianza simple para Alcohol. Resumen Estadístico para Alcohol producido ñame D. Trífida. puede elegir el test Kruskal-Wallis que compara las medianas en lugar de las medias. Si le preocupa la presencia de valores atípicos. 113 . El F-test en la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las medias.Análisis Estadístico para el alcohol producido D. El análisis de la varianza simple está pensado principalmente para comparar las medias de los diferentes niveles. Realiza varios test y gráficos para comparar los valores medios de Alcohol para los 3 diferentes niveles de Concentraciones. Trífida. Si hay. Esta tabla muestra varios estadísticos de Alcohol para cada uno delos 3 niveles de Concentraciones. los Test de Rangos Múltiples le indicarán las medias que son significativamente diferentes unas de otras.

que en este caso es igual a 0.05. El F-ratio.0705905.Tabla ANOVA para el etanol según las concentraciones La tabla ANOVA descompone la varianza de Alcohol en dos componentes: un componente entre grupos y un componente dentro de los grupos. Grafica 29. Puesto que el p-valor del test F es superior o igual a 0. 114 .0%. Trífida.no hay diferencia estadísticamente significativa entre las medias de alcohol de un nivel de Concentraciones a otro para un 95. Gráfico de dispersión para D. es el cociente de la estimación entre grupos y la estimación dentro de los grupos.

Trífida 115 . Gráfico de cajas y bigotes para D.Grafica 30.

164 -.000 Diferencia de medias -7.07449 Error típ.156 . ALATA 10. 1.5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol N Media Parámetros normales(a.1675 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t etanol -20.7308 Superior -6.83250 Inferior -8. 8 2. PRUEBAS NO PARAMETRICAS Y PRUEBA T DE STUDENT.37989 N etanol 8 Media 2. de la media . (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal. b Se han calculado a partir de los datos. asintót.618 gl 7 Sig.9342 116 .b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig. Dioscorea.164 . (bilateral) . A continuación se encuentran reportada las pruebas de no paramétricas y la prueba T de Student en donde se comprueba que en todas se acepta la Hipótesis alternativa.463 .983 Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.07449 .1675 1.ANEXO H.

D. 2.0883 Superior -6.494 gl 7 Sig.0513 1.36307 Error típ.48192 etanol N 8 Media 2.984 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.36307 . (bilateral) .0513 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t -16.163 .460 . (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal. 1.8092 etanol 117 .163 .000 Diferencia de medias -7. ALATA 13. de la media .122 -.94875 Inferior -9.5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra etanol 8 Media Parámetros normales(a. asintót.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig. b Se han calculado a partir de los datos.

b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.7238 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t -19. 1.20983 Error típ. ALATA 15% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra etanol 8 Media Parámetros normales(a.000 Diferencia de medias -8.165 . asintót. 1.D. (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal.20983 .143 -. (bilateral) .7238 1.981 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.2648 etanol 118 . de la media . b Se han calculado a partir de los datos.349 gl 7 Sig.467 .165 .2877 Superior -7.27625 Inferior -9.42774 etanol N 8 Media 1.

D.27250 . asintót.121 .2638 Superior -7. 1.1362 119 .226 gl 7 Sig.343 1.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.27250 Error típ. de la media .8000 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -18.20000 Inferior -9. b Se han calculado a partir de los datos.44990 Etanol N 8 Media 1.121 . 1. (bilateral) . (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal.000 Diferencia de medias -8. TRÍFIDA 10.8000 1.109 -.5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a.000 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.

TRÍFIDA 13.5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a.107 -.D.000 Diferencia de medias -7.53034 Etanol N 8 Media 2. b Se han calculado a partir de los datos.107 .301 1.0463 1.95375 Inferior -9. (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal. de la media .50003 .095 .2078 Superior -6.6997 120 .997 gl 7 Sig. (bilateral) . 1.0463 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -14.50003 Error típ. asintót.000 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig. 2.

0884 121 .989 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.553 gl 7 Sig.1591 Superior -7.157 .157 .23848 Error típ. (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal.8763 1.000 Diferencia de medias -8. TRÍFIDA 15% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a. (bilateral) . 1. 1. de la media .8763 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -18.43787 N Etanol 8 Media 1. asintót.443 .116 -. b Se han calculado a partir de los datos.12375 Inferior -9.D.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.23848 .

412 gl 7 Sig.41049 Etanol N 8 Media 1. 1. 1.16104 Error típ.131 .000 Diferencia de medias -8.6213 1. ROTUNDATA 10. b Se han calculado a partir de los datos.217 -.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.D. (bilateral) . asintót.16104 . (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal.615 .37875 Inferior -9. de la media .6213 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -20.217 .844 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.3494 Superior -7.5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a.4081 122 .

9050 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -17.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.D.000 Diferencia de medias -8. (bilateral) .2033 Superior -6. b Se han calculado a partir de los datos.119 .9050 1.348 1.46871 Etanol N 8 Media 1. ROTUNDATA 13.9867 123 .32571 . asintót.09500 Inferior -9. 1.000 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ.123 .5% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a.123 -. (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal. 1.32571 Error típ.271 gl 7 Sig. de la media .

092 .52974 Etanol N 8 Media 2. 1.49834 . (bilateral) .D.260 1.57000 Inferior -8.3174 124 . b Se han calculado a partir de los datos. asintót. 2.079 -.092 .000 N Prueba T Estadísticos para una muestra Desviación típ. (bilateral) a La distribución de contraste es la Normal.000 Diferencia de medias -7.4300 Prueba para una muestra Valor de prueba = 10 95% Intervalo de confianza para la diferencia t Etanol -14. ROTUNDATA 15% Pruebas no paramétricas Prueba de Kolmogorov-Smirnov para una muestra Etanol 8 Media Parámetros normales(a.4300 1.49834 Error típ. de la media .290 gl 7 Sig.b) Diferencias más extremas Desviación típica Absoluta Positiva Negativa Z de Kolmogorov-Smirnov Sig.8226 Superior -6.

ANEXO I. claro está que se propone como alternativa la siembra de células productoras de las enzimas. Rotundata Ñ. Alata Ñ. alfa amilasa y glucoamilasa.ESTIMACIÓN DE COSTOS El estudio fue realizado a escala de laboratorio y a continuación en la tabla 13 se presentan los costos de los reactivos y materiales. Baboso Kg D. Diamante Kg D. Espino Reactivos Gasa Estéril Jeringas de 10 ml Cinta de Enmascarar Algodón Venoclisis de Macrogoteo Tubos Cónico con tapa COSTO TOTAL Fuente: los autores del proyecto COSTOS 4800 5400 7200 724000 12000 10000 10000 3000 25000 44080 845480 Al observar los costos presentados en la tabla anterior. 125 . Estimación de costos de proyecto FUENTES DE FINANCIACIÓN Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio Recursos propio RUBROS Kg D. Tabla 13. debido a que los costos de estas enzimas comercialmente son bastante elevados y la siembra de células supone costos más bajos por los requerimientos del cultivo. Trífida Ñ. se puede realizar una proyección a escala industrial ya que los costos de materia prima no son tan elevados lo cual puede sustentar viabilidad para proyectos futuros.

You're Reading a Free Preview

Descarga
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->