Reactivo de Fehling

El reactivo de Fehling, es una solucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

Sulfato cprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml. Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solucin de hidrxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre(I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor. Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a un falso positivo.

Reactivo de Fehling
Reactivo de Fehling El reactivo de Fehling, es una solucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas: Sulfato cprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml. Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solucin de hidrxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 1.000 ml.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de unaldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre(I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor.

Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a un falso positivo. Al reaccionar con monosacridos, se torna verdoso; si lo hace con disacridos, toma el color delladrillo.

REACCIN DE FELHING El reactivo est formado por dos soluciones llamadas A y B. La primera es una solucin de sulfato cprico; la segunda , de hidrxido de sodio y una sal orgnica llamada tartrato de sodio y potasio (sal de Seignette). Cuando se mezclan cantidades iguales de ambas soluciones, aparece un color azul intenso por la formacin de un complejo formado entre el ion cprico y el tartrato. Agregando un aldehdo y calentando suavemente, el color azul desaparece y aparece un precipitado rojo de xido cuproso (Cu2O). La reaccin, en forma simplificada, puede representarse as: SE OXIDA +1 +3 R - C = O + 2Cu2- + 5 OH ------------ R - C = O + Cu2O + 3 H2O H O+2 +1 SE REDUCE Las cetonas no dan esta reaccin. Los aldehdos pueden reconocerse tambin por medio de la reaccin de Schiff. La fucsina es un colorante rojo que puede ser decolorado por el dixido de azufre. Si en estas condiciones se la pone en contacto con un aldehdo, reaparece el color rojo- violceo. Las cetonas no dan esta reaccin, por lo que permite diferenciar ambos tipos de compuestos. Procedimiento de reaccin de FEHLING Tomamos dos tubos de ensayo; en uno de ellos colocamos acetona (propanona) con reactivos Fehling a y b, que son sulfato cprico e hidrxido de sodio y potasio, respectivamente. Y en el otro tubo colocamos formol (metanal) y como en la primer probeta tambin colocamos los reactivos Fehling. El reactivo Fehling a (sulfato cprico) posee un color celes y el reactivos b (hidrxido de sodio y potasio, como dije anteriormente) tiene un color transparente, pero cuando estos dos reactivos estn juntos componen un color azul oscuro. En la probeta de la cetona, la acetona ni siquiera se mezcla con el reactivo Fehling. Pusimos a calentar todo a bao Mara.. En este mismo tubo de ensayo el lquido comienza a burbujear. Finalmente la sustancia transparente se junta con la celeste y luego se pone todo de un tono azulado. La acetona se evapora hasta que desaparece dado que su punto de ebullicin es mucho menos que el de Fehling (el punto de ebullicin de este reactivo es igual al del agua).

En cambio, en el tubo del formol, a medida que le vamos dando calor, esta sustancia comienza a aclarase de a poquito. Empieza a hacer efervescencia y cada vez se pone ms blancuzco. Luego de unos minutos comienzan a pegarse a las paredes una sustancia de color cobre (xido cuproso). El resto del concentrado se aclara cada vez ms. Finalmente queda de color celeste muy transparente. Esta reaccin slo es positiva con formol, debido a la obtencin y el producto que obtuvimos. Cu2+------------- Cu2O OO H-C -H ------- H-C OH (cido matanoico)

Reactivo

de

Fehling

El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, es una disolucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glusosa, as como para detectar derivados de sta tales como la sacarosa o la fructosa. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

Sulfato de cobre cristalizado, 35 g y agua destilad hasta 1.000 mL. Sal de Seignette o Tartrato mixto de potasio y sodio 150 g, solucin de hidrxido de sodio al 40 %, 3 g y agua hasta 1.000 mL.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso, para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre. El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los aldehdos. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre en medio alcalino a xido de cobre, formando un precipitado de color rojo.

Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre rojo, se dice que es un azcar reductor. Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa que contiene un grupo cetona, puede enolizarse a la forma aldehido dando lugar a un falso positivo. Al reaccionar con monosacaridos se torna verdoso, y si lo hace con disacricos toma el color del ladrillo. Por ebullicin se decolora el reactivo. Un cc. de reactividad corresponde a 0005 gr. de glucosa. Sensibilidad 1:500.
Fehling El reactivo de Fehling, es una solucin descubierta por el qumico alemn Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinacin deazcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, as como para detectar derivados de esta tales como la sacarosa o la fructosa. El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

Sulfato de cobre cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.

Sal de Seignette(Tartrato mixto de Potasio y Sodio), 150 g; solucin dehidrxido de sodio al 40%, 3; agua, hasta 1.000 ml. Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitacin del hidrxido de cobre (II). El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre(I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el licor de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor. Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa que contiene un grupo cetona puede enolizarse a la forma aldehido dando lugar a un falso positivo. Al reaccionar con monosacridos, se torna verdoso; si lo hace con disacridos, toma el color del ladrillo.

Reaccin de Benedict
En qumica, la reaccin o prueba de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C anomrico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cprico; Citrato de sodio; Carbonato Anhidro de Sodio. Adems se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico (otorgado por el sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del azcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O). El medio alcalino facilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enlico) aglucosa (que es capaz de reducir al ion cprico). Los disacridos como la sacarosa (enlace (1 2)O) y la trehalosa (enlace (11)O), no dan positivo puesto que sus OH del C anomricos estn siendo utilizados en el enlace glucosdico. En resumen, se habla de azcares reductores cuando tienen su OH del C anomrico libre, y stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.

REACCIN DE FEHLING
Se basa en el carcter reductor de los monosacridos. Si el glcido que se investiga es reductor, se oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.

La reaccin de Fehling se realiza del siguiente modo:

Se toman 3 ml de la muestra que se quiera analizar Aadir 1 ml del reactivo Fehling A y 1 ml del reactivo Fehling B El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte color azul. Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de Laboratorio La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo y aparece un precipitado La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso
Inicio de la reaccin si da positivo: ejemplos (dos positivos y uno negativo)

Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 5 H2O en 100 ml de agua destilada Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en 100 ml de agua destilada

El efecto de la solucin de Benedict sobre la glucosa

La solucin de Benedict en estado puro es de color azul claro.

hand with syringa isolated on white image by Olaru Radian-Alexandru from Fotolia.com

Una forma rpida para probar la presencia de glucosa en una muestra es agregar solucin de Benedict, un reactivo con cobre. La solucin de Benedict es un lquido de color azul claro en su estado puro, pero cuando se agrega a la glucosa y se calienta, se vuelve marrn anaranjado. La solucin de Benedict tambin puede detectar la presencia de otros azcares de estructura similar.

Prueba de Barfoed
La Prueba de Barfoed es un ensayo qumico utilizado para detectar monosacridos. Se basa en la reduccin de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de xido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.1 2 RCOH + 2Cu+2 + 2H2O RCOOH + Cu2O + 4H+

Los disacridos tambin pueden reaccionar, pero en forma ms lenta. El grupo aldehdo del monosacrido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su cido carboxlico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio,3 pueden interferir en la prueba. Esta prueba fue descrita por primera vez por el qumico dans Christen Thomsen Barfoed 1 y se utiliza principalmente en botnica.4 La prueba es similar a la prueba de Fehling.

Composicin[editar editar cdigo]

El reactivo de Barfoed se compone de una solucin de 0.33 molar de acetato de cobre neutro en una solucin de 1% de cido actico. No es recomendable guardar el reactivo, sino prepararlo previamente a su uso.