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CULTIVOS MICROBIANOS

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PRACTICA N° 4 CULTIVOS MICROBIANOS UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS ARPASI ORDOÑO Dennys Alfredo dealfred_111@hotmail

.com RESUMEN: Los medios de cultivo constituyen la herramienta fundamental en los laboratorios de Microbiología, por lo que realizar pruebas de control de calidad a los medios preparados es vital, con el fin de comprobar si estos cumplen con sus especificaciones y si la metodología empleada en su preparación es satisfactoria. Teniendo así como objetivos: Establecer los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo, Aprender la clasificación y uso de los medios de cultivo y Preparar medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave (olla a presión). Metodología: Esterilización y preparación de medio de cultivo (técnicas por disolución, puntos y exposición de placa). Los resultados obtenidos aun no son definidos, ya que no se observo si realmente crecieron los microorganismos. Pero si se llego a la conclusión de que existen diferentes maneras de cultivar o sembrar microorganismos, de acuerdo al uso y necesidad de los medios de cultivo, Para ello tenemos que saber los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo. Palabras Clave.- Cultivo microbiano, Disolución, Exposición, Plaqueado.

ABSTRACT The culture media are the fundamental tool in microbiology labs , so testing quality control is vital media prepared in order to check whether they meet your specifications and whether the methodology used in their preparation is satisfactory. Taking and objectives : To establish the theoretical foundations for the preparation of culture media , Learning classification and use of culture media and culture media Prepare and properly handle the autoclave ( pressure cooker ) . Methodology: Sterilization and preparation of the culture medium (by dissolution techniques, and plate exposure points). The results are not yet defined, since it was not observed if actually grew microorganisms. But if I conclude that there are different ways to cultivate or sow microorganisms, according to the use and need for culture media, for this we need to know the theoretical basis for the preparation of culture media. Keywords.- Microbial culture, Dissolution, Exhibition, plating.

2003) A los cultivos microbianos originalmente se les designaba como prebióticos. [2] .I. en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado. de NO3 o de NO2 o en forma de aminoácidos a los que se pueda tomar su grupo amino. hongos y parásitos. 3) No dejan residuos en los tejidos animales. por lo tanto. 2) No se absorben en el tracto digestivo. sin embargo. INTRODUCCION En biología. 7) Son estables a temperaturas elevadas y 8) No causan mutación. y específicamente en microbiología. 4) Se utilizan en pequeñas cantidades. ni tóxicos. 5) Proliferan in vivo e in vitro. en 1989 la Administración de Fármacos y Alimentos (FDA de Estados Unidos de Norteamérica) estableció que no era adecuado el nombre de probiótico. 6) Promueven el crecimiento de bacterias celulolíticas. [1] Hubert (1987). tales como bacterias. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura. un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos. Así. se modificó la nomenclatura a “cultivos microbianos proporcionados directamente” o “cultivos microbianos” (González 1995). grado de humedad y presión de oxígeno adecuado. por ejemplo. el N en forma de NH4. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en medicina humana y veterinaria ( Restrepo et al. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante. La elaboración de medios de cultivo requiere proporcionar los elementos antes citados en una forma asimilable. el C debe estar en forma de carbono orgánico para los heterótrofos y como CO2 para los autótrofos. Jones y Thomas (1987) mencionan que los cultivos de levadura presentan varias características importantes: 1) No son patógenos. así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.

Respecto al empleo del aceite esencial encapsulado se puede decir que no tuvo un efecto significativo ya que el medio de cultivo se encontraba con una humedad muy elevada. (Rivera M. et al. en Gleysol con derrame crónico y muy contaminado y en Gleysol no contaminado con petróleo. con un halo de inhibición de 1. lo que confirma la influencia de los exudados de la planta sobre las poblaciones rizosféricas. 2008). 2002). hongos totales y hongos degradadores de petróleo se encontraron en sistemas rizosféricos de los pastos alemán y cabezón. et al. bacterias fijadoras de N atmosférico de vida libre. bacterias asimiladoras de N. (Calvo P. Se observa también un efecto de la variedad de papa sobre las poblaciones de estos microorganismos en la rizósfera. bacterias asimiladoras de N.. no se evidenció diferencias respecto al tipo de cultivo (levadura pura o mohos y levaduras presentes en tomate). Del total de 17 muestras procesadas se obtuvieron 63 aislamientos de Bacillus spp. Las poblaciones de bacterias totales. Se obtuvo mejores resultados por el método del papel filtro y aceite esencial no encapsulado. establecidos en Gleysoles contaminados con derrame reciente. 29 (46%) de Huancavelica y 34 (54%) de Puno. no son exactos pero tiene similitud con nuestra practica ya q para estas investigaciones se utilizaron cultivos microbianos. ANTECEDENTES: Estos antecedentes. en Gleysol con derrame crónico y muy contaminado y en Gleysol no contaminado con petróleo. 32 (87%) de Huancavelica y 5 (13%) de Puno y 50 aislamientos de Azotobacter spp. 37 (74%) de Huancavelica y 13 (26%) de Puno. (Chamorro A. bacterias degradadoras de petróleo. establecidos en Gleysoles contaminados con derrame reciente. hongos totales y hongos degradadores de petróleo se encontraron en sistemas rizosféricos de los pastos alemán y cabezón..II. et al.7 cm. humedeciendo excesivamente las cápsulas de la β-ciclo dextrina diluyendo la liberación y acción del aceite esencial. Las poblaciones de bacterias totales. 2010). 37 aislamientos de Actinomicetos. observándose para estos dos últimos casos una mayor diversidad en suelos de pH ácido. bacterias fijadoras de N atmosférico de vida libre. . bacterias degradadoras de petróleo.

Cinta Masking tape . OBJETIVOS:  Establecer los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo. 3.Trapo . .Aza de siembra .Materiales: ... . utilizado en la anterior practica (preparación de medios y esterilización de materiales) 1.. 5..  Aprender la clasificación y uso de los medios de cultivo.  Preparar medios de cultivo y manejar adecuadamente la autoclave (olla a presión) IV.2.Plumón indeleble .ESTERILIZADO: Se realiza el mismo proceso.Muestras de hongos . 2.1 balanza .III.Envolver las cajas de Petri y tubos de ensayo. 4.Muestras de tierra.Métodos: 4. En las pipetas poner un filtro de algodón en la boquilla y envolver con papel Kraft.Secar el material de vidrio de preferencia en horno..Lavar material con detergente líquido. MATERIAL Y METODOS: 4.Agua destilada Figura 1 4..5 placas petry .2.1 probeta de 250 mL ..1. enjuagar con abundante agua de la llave y al final con agua destilada.2 tubos de ensayo .1. si no es posible secar al aire.1 espátula .Introducir los hisopos en un tubo y tapar con algodón.1 matraz de 500 mL .Agar Saboraud .mecheros Bunsen .

.Disolver el medio en 100mL de agua destilada y una vez disuelto completar el volumen a 120mL. 5. Seguidamente se coloco la muestra en el centro de la placa y se cubrió con el agar preparado... - Luego se empezó a colocar en las placas. Para ellos se saco la muestra ya preparada con una pipeta. 4.1L ---------------------120 ml X= 7..Calcular la cantidad necesaria para preparar 120 ml de Agar Saboraud Exactamente seria: 65g AS X ---------------------. Procedemos a esterilizar todo.Leer cuidadosamente el membrete del medio de cultivo (leer las indicaciones para el preparado) 2. 7.2.. A) Técnicas de disoluciones: Para ello se preparo una muestra.. 4.3. . aparte de tierra (1 g de tierra y 9ml de agua destilada) Figura 4.Tapar el matraz y calentar hasta disolver totalmente durante 1 a 2 minutos.-PREPARACION DE MEDIO DE CULTIVO: 1.EMPEZAMOS A PLAQUEAR. (Dejar reposar 1 a 2 minutos) 4.8 g AS Figura 2.Alistar tubos de ensayo y vaciar equitativamente la solución. luego taparlo con algodón y etiquetarlos. 3.6.2..Identificar con nombre y marcar el volumen en el papel de las pipetas..2.Listo para ser esterilizado. Figura 3.

Luego cargar con hongos y empezar a colocar en distintos lugares ( en cada punto. B) Técnica por Puntos ( se realiza en una muestra ya plaqueada) 1. Destapar y exponer la placa al medio ambiente (durante 30 minutos) Figura 9 - Luego de todo el procedimiento. esperar a que se gelifique el Agar.Hacer movimientos suaves Después de plaquear. 2...Alistar las placas. 3.Esterilizar la boca del matraz 4.Esterilizar los bordes.Figura 5 y 6. como se muestra en la figura 8) Figura 7 y 8.Vaciar a una placa 5.. Marcar con lapicero indeleble y Llevar a la incubadora ... C) Exposición de Placa (Agar Gelificado) - Después que quedo gelificado .

Pero de acuerdo a los pasos que hicimos. Figura 12.Figura 10. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Bueno aun no se ha revisado los resultados. V. Sembrados por disoluciones. esta claro que deberían quedarnos de este modo Figura 11. Sembrado por Puntos .

org/articulo. C. C. de acuerdo al uso y necesidad de los medios de cultivo. Leiderman E. González.redalyc. el número de colonias resultantes. M. Veracruz. Rivera M.. Ediciones Quebecor Word. 1987 Maintenance of strain specificity and bile tolerance when producing. M. And Thomas. Restrepo M.Tras la incubación. Yea-Sacc1026) en el valor nutritivo de dietas para borregos en crecimiento. Biotechnology center. Volke V..T. Mendoza.com.G.. Disponible en: http://www.H. Biotechnology in the Feed Industry. Ferrera R.) VI. García-Bojalil. Colombia Disponible en: http://books.. Lyons Ed..A. CONCLUSIONES.google.S. Bárcenas. Hubert. C. B..R...D. Botero D. Para ello tenemos que saber los fundamentos teóricos para la preparación de medios de cultivo. Rodríguez R. Bogota S. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: Restrepo A. USA. y Bedoya V.oa?id=57320407 .-  Se llego a la conclusión de que existen diferentes maneras de cultivar o sembrar microorganismos. ¡Podemos contar células vivas! (Balsalobre J.S. 1995 Efecto del nivel de rastrojo de maíz y de un cultivo de levadura (Saccharomyces cerevisiae.. 6ta Edición. J. se corresponde con el número de células vivas que inicialmente había en la dilución de la muestra sembrada. Department of animal Sci. 1987 Fungal additives for lactating cows.. University of Arizona..pe/books?id=67FIJx2qf U8C&pg=PA14&redir_ esc=y#v=onepage&q&f=false Avendaño. Adaptación y selección de microorganismos autóctonos en medios de cultivos enriquecidos con petróleo crudo. Fernández L. (2002). Jones. G.. Nicholasville. USA. (2003) Enfermedades Infecciosas. Alltech’s. KY. Memorias VII Congreso Nacional AMENA.Robledo J. In: T.P.

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