PHYILOGENETIC ANLISIS de Persea (Lauraceae) Y gnero relacionado base en caracteres morfolgicos Campos-Rojas, Eduardo 1 2, Terrazas-Teresas 1Programa de Fruticultura, Colegio

de Postgraduados, Montecillos 56230, Estado de Mxico y2Fundaci6n Salvador Sanchez Colin CICTAMEX, SC 51700 Coatepec Harinas, Estado de Mxico. educamro@yahoo.com.mx. 3 Programa de Botanica, Colegio de Postgraduados, Montecillos 56230,Estado de Mxico RESUMEN Gnero Persea est constituida por dos subgneros, Persea y Eriodaphne. Persea contiene pocos estrechamente relacionados y es bien conocido como el subgnero de los verdaderos aguacates. Eriodaphne, numerosos y variables, se considera como los subgneros de los aguacates pequeos. El objetivo de la presente investigacin fue evaluar si el gnero Persea es un grupo monofiltico y si los subgneros son artificiales, as como a proponer una hiptesis de las relaciones filogenticas de las especies de este gnero, Suppo ing propuesta del origen de las razas. La determinacin de Persea como un grupo monofiltico no era posible, que se recuper como un grupo parafiltico por medio de la evaluacin de 36 morfolgica caracteres, de los que, color de la carne (26) determinan la separacin en dos subgneros. El subgnero Eriodhapne, contiene: P. cinerascens, borbonia P. y P. palustris, la definicin del grupo se apoya en las caractersticas: color de la fruta, el alivio de la vena y la forma de la hoja. El subgnero Persea incluye a los dos gneros que se consideran como relacionados (Nectandra y Ocotea) Por lo tanto, se determin que este subgnero no es monofiltico. Se logr la distincin de las tres especies consideradas como razas ovariedades botnicas de la Persea subgnero, as como la presencia de dos clados que contienen la especies consideradas como tipos de P. americana (P. jloccosa, P. y P. steyermarkii zentmeyerii), grupo que se define por los rasgos: forma de la semilla y el color carne, la cual no podra recuperarse como sinapomorfas. Dentro de este grupo, el fonn semilla personaje apoya la separacin de P.jloccosa y P. zentmyerii. En y P. primatogena, adems de P. americana, P. y P. parviflora schiedeana. Anlisis con caracteres moleculares (ITS) es necesario apoyar a los clados de Persea que se sugieren aqu. Palabras clave: Persea, Eriodaphne, parientes, filogenia, variedades. INTRODUCCIN El nombre de Persea fue utilizado por primera vez por Clusius (1601), quien lo tom de la mitologa griega. Los Persea americana taxn fue descrita por Linnaeus (1753) en su obra Species Plantarum como Laurus Persea L. Nees (1836) public una revisin general de la familia Lauraceae en Systema Laurinarum, donde se reconoci a dos subgneros en Persea: Eruodaphne y Genessiopersea. Meissner (1864) reconoci y estableci dos secciones similares a los subgneros propuestos por Nees. Los Lauraceas de Amrica fueron descritos por Mez (1889), que divide Persea en cuatro subgneros, est basado en el nmero de lculos en las anteras. La delimitacin de varios gnero de los Lauraceas es difcil de determinar. Kostermans (1952) sugiri que Nees Machilus, Nothaphoebe Blume y Nees Alseodaphne, como los familiares de Persea. Varios nombres han

destinado Persea: borbonia Boehmer (1760), Farnesia Heister (1763), Menestrata Peludas (1827) y Tamala Rafinesque (1838). Por otro lado, Blake (1920) estudi Persea en Amrica del Norte y las Antillas, Standley (1937) y Standley y Steyermark (1946) en Costa Rica y Guatemala, Allen (1945) y Kopp (1966) en Mxico y Centro Am "e 'rica. Existen dos claves para la identificacin de los miembros de Persea, especficamente para el Persea subgneros (Kopp, 1966 y Williams, 1977) y una revisin ms reciente del gnero no ha sido intented. La primera clave de Koop (1966) no incluye algunas especies de reciente clasificacin, ni se la considera Persea americana var. guatemalensis (raza guatemalteca) y P. nubigena, ya que se clasificaron dentro de Persea americana var. nubigena. De conformidad con Bergh, (1992), el gnero Persea tiene un nmero indeterminado de especies, aunque algunos autores aseguran que son aproximadamente 80, la reconocido como vlido (Storey et al, 1986;. Zentmeyer, 1991, Bergh, 1992). Por el momento es Persea reconocida con dos subgneros, Persea y Eriodhapne: la primera contiene pocas especies estrechamente relacionadas entre s, incluyendo el aguacate comercial comn, Persea americana Mill. Los subgneros, Eriodaphne, es muy numerosa, variables y claramente diferenciado, que contiene especies que tiene como caracterstica principal la produccin de frutos pequeos (menores de 2 em de dimetro), por lo que se considera los subgneros pequeos aguacates Ofthe (Bergh y Ellstrand, 1987; Storey eta / 1987;. Bergh, 1992; Zentmeyer y Schieber, 1992). La importancia que tienen algunas de las especies ofthis subgneros es su inmunidad a la "tristeza del aguacate", enfermedad causada por Phytophthora cinnamomi Rands;. Sin embargo, no son genticamente compatibles con el P. americana Mill. (Litz, 2001; Zentmeyer y Schieber, 1992). Eriodaphne contiene Persea borbonia, P. cinerascens, P. donenel-smithi, P. excelsa, P. indica, P. lingue, P. alustris, P. rigens, P. silvatia, P. y P. skutchii standleyii (Kopp, 1966; Williams, 1977, Bergh y Ellstrand, 1987;. Barrientos y Lpez, 2000) . La mayora de los miembros vlidos de los ocurrs Persea subgneros de la misma regin: desde la parte central de Mxico, a travs de Guatemala, hasta que gran parte de Amrica Central, el apoyo a la suposicin del centro de origen del gnero Persea y probablemente de toda la subgneros Persea (Bergh y Ellstrand,1986; Storey et al, 1986;. Schroeder, 1990; Ben Yaacov, 1992). Segn Kopp (1966), el origen de las formas actuales de Persea no est claro ", debido a su estrecha relacin con los representantes de muy antiguas civilizaciones de la zona de Mxico-GuatemalaHonduras", que aprecia sus frutos. El tamao de la fruta no ayuda a separar entre las formas silvestres y cultivadas (Ben Yaacov, 1992), razn por la cual se afirma que "no hay una distincin botnica o ecolgica clara entre los cultivos y aguacates silvestres "(Ben Yaacov, 1992). La diferenciacin entre las formas silvestres y cultivadas sern una tarea difcil. Ben Yaacov (1992); Bergh y Ellstrand, (1986) que apoyan esta hiptesis en parte Yo subgnero Persea americana Mill incluye P.., P. americana var. americana, P. americana var. drymifolia, P. americana var. guatemalensis, P. jloccosa, P. gigantea, P. nubigena, P. primatogena, P. tolimanensis, P. schiedeana, P. steyermarkii, P. zentmyerii, (Williams, 1977; Bergh y Ellstrand, 1987; Scora y Bergh, 1990; Zentmeyer y Schieber, 1992) y otras especies que sera mejor considerarlos como subespecies de P. americana segn varios autores: P. primatogena, P. parvifolia y P. tolimanensis (Storey et al, 1986;. Schieber y Zentmyer, 1987; Zentmyer, 1991; Bergh, 1992).

Recientemente funciona con isoenzyms (Bergh y Buffler, 1987) que apoyan la conclusin de taxonmico que las tres razas de aguacate estn estrechamente relacionados entre s, siendo el ms distante de la raza mexicana tal como se propone por Kopp (1966), y que la carrera de Guatemala no es por s mismo una subespecie como Williams declar que (1977). Del mismo modo podramos concluir que las tres razas de aguacate no son lo suficientemente diferentes entre ellos para ser considerados como subespecies, Unstead de ser aceptado como variedades:americana, drymifolia y guatemalensis (Popenoe, 1941, Kopp, 1966). Bergh y Buffler (1987) y Scora et al. (1970, 1973) llevaron a cabo un anlisis de terpenos en hojas, observaciones morfolgicas, fisiolgicas en el campo y el anlisis isoenzyimes para las especies de la Persea subgneros (Bergh et al.,1989) y lleg a la conclusin de que la raza mexicana y la raza guatemalteca son distantes de la raza antillana. En un estudio de la taxonoma numrica se encontr una relacin mayor entre P. americana var. americana y P. americana var. guatemalensis que entre P. americana var. americana y P. americana var. drymifolia (Rhodes et al., 1971). Garca y Tsunewaki, (1977) y Garca y Ichikawa (1979) llegaron a la misma conclusin, segn Rhodes et al. (1971) a travs del anlisis de los rasgos morfolgicos e isoenzimas, respectivamente. Con base en un anlisis alcane en las hojas de aguacate Scora et al. (1975) encontraron que la raza guatemalteca y de la raza mexicana se separan de la carrera de las Indias Occidentales. Sin embargo, Butler y Ben-Yaacov (1992), analizaron la variacin en el oflongitude repeticin y lugares de restriccin de ADNr en las hojas de las tres razas de P. americana y se encontr una relacin de ms proximidad entre los de Guatemala y el Oeste. razas indias, sin embargo las tres carreras son prcticamente a mitad de camino entre s segn un anlisis de RAPD en ADNr (Butler y Fiedler, 1996). Se ha sugerido que Persea nubigena, P. steyermarkii (Schieber y Zentmyer, 1981; 1991), P. y P. tolimanensis zentmeyerii (Williams,1977), son precursores de P. guatemalensis. Bergh et al. (1973) indicaron que la filogentica Enlaces existe entre nubigena P. y P. americana var. guatemalensis, sobre la base de un anlisis de los aceites esenciales de hojas. Adems, por medio de un anlisis de ADNr se ha encontrado que P. y P. steyermarkii nubigena (Fumier et al., 1990) que estn muy relacionados con el P. americana var. guatemalensis. Las evidencias sugieren que P. nubigena, P. steyermarkii, P. y P. tolimanensis zentmeyerii como predecesores de P. americana var. guatemalensis (Shieber y Bergh, 1987). En el caso de P. americana var. drymifolia, se ha considerado la parte superior. jloccosa como su ancestro (Scora y Bergh, 1990). P. americana var. americana se considera como el de ms reciente aparicin. Garca (1970) estim que P. americana var. americana podra haber originado por hibridacin entre P. americana var. drymifolia y P. schiedeana. Se ha propuesto a P. schiedeana como ancestro de P. americana var. americana (Bergh et al., 1973). Williams (1977) supone que P. schiedeana se origin a partir de la seleccin comimg de P. americana var. drymifolia. El gnero Beilschmiedia cuya morfologa y las frutas son muy similares a los de P. americana, particularmente B. Anay, se considera un gnero estrechamente relacionados (Borys et al., 1993). Otros gneros asociados a. Persea son Nectandra, Ocotea y Phoebe cuya particularidad, el mismo que con Beilschmiedia es su semejanza en la estructura floral (Standley y Steyermark, 1946). Persea como Beilschmiedia presente cliz y anteras de 2 a 4 vlvulas segmentado, se diferencian en la longitud y nmero de estaminodes. Phoebe y cuota de Persea la presencia de un perianto persistente, esto puede ser o no presente en Persea. Nectandra se distingue de Persea por sus anteras que son

1946), esto lo diferencia del resto del gnero mencionado. Para el mencionado objetivo de la presente investigacin fue evaluar si el gnero Persea es un grupo monofiltico y si el subgneros son monophyleties, as como proponer una hiptesis de las relaciones filogenticas de las 15 especies de este gnero. MATERIALES Y MTODOS Se utilizaron materiales pertenecientes al banco de germoplasma Persea de gran altitud, propiedad de la Fundaci6n Salvador Sanchez Colin CICTAMEX, SC, ubicada en el Centro Experimental La Cruz, en Coatepec Harinas, Estado de Mxico. Quince especies del gnero Persea se utilizan, as como cuatro gnero relacionado como grupos externos: Beilschmiedia, Nectandra, Ocotea y Phoebe. Se registraron los datos de campo de las especies evaluadas durante el perodo 2002-2003. El registro de los caracteres evaluados que estaba de acuerdo con los descriptores de aguacate (CICTAMEX, 1990), por los rasgos descriptivos. Regla y nonio se utiliza en aquellos casos en que se requiere para realizar las mediciones de longitud o dimetro en frutas y grosor de la cscara. En la Tabla 1 se indican el carcter y el cdigo de las etapas "de carcter. Los anlisis de parsimonia de los taxa utilizados se llevaron a cabo utilizando el programa de Winclada 1.00.08 (www.cladistics.com 1999-2002). La bsqueda heurstica se llev a cabo en la Sucursal 100 repeticiones por etapas y TBR intercambiar con MULTIPARS activados. Los clados se evalu utilizando los valores de arranque y jackknife con 100 repeticiones y TBR rama intercambio. RESULTADOS Y DISCUSIONES A partir del rbol de consentimiento, con IC = 38 e IR = 59, obtenido por el anlisis heurstico (fig. 1) se aprecia con la base en la evaluacin de 36 rasgos morfolgicos de Persea y especies que se sintoniza que el gnero Persea se recupera como un gnero parafiletic y no como monofiletic. La existencia de dos clados muy bien definidos de Persea es reconocido, el cual se ha considerado como subgneros: Eriodhapne y Persea (Kopp, 1966; Williams, 1977; Bergh y Ellstrand, 1987; Scora y Bergh, 1990), pero este ltimo, la modificacin de sus lmites. En la primera clado (fig. 1) que se recuperan todas las especies de la Eriodhapne subgneros que han sido reportado (Kopp, 1966, Williams, 1977, Bergh y Ellstrand, 1987, Scora y Bergh, 1990). En este grupo tenemos Persea borbonia, P. cinerascens, P. indica y P. alustris. La definicin de este clado con el apoyo de los rasgos: color de la fruta (2), mejorar la nervadura de las hojas (16) y la hoja fonn (25), de los cuales forma de la hoja slo resulta ser un sinapomorphy, la pubescencia de color rasgo en hojas (18) y el posicionamiento de la inflorescencia (19) apoyan la distincin de P. indica, mientras que el color de la corteza rasgo en las ramas (4) es el autapomorfa de P. cinerascens. Persea borbonia es sostenida por un nico personaje, la pubertad brctea (20), que se recupera como rasgo homoplasic pero que en esta evaluacin no podra ser recuperado como un personaje sinapomorphyc; en contraste, el autapomorphyc carcter de P. palustris era el color de la hoja madura (10) y con ello permite el reconocimiento de dos especies diferentes. Por lo tanto, las aseveraciones de los diferentes autores que mencionan que fue por propia especie (Kopp, 1966, Williams, 1977, Bergh y Ellstrand, 1987), no se sostienen con los resultados obtenidos en el presente estudio. Estos resultados sugieren que la Eriodaphne subgneros y Persea deben ser considerados como productos independientes. El subgnero Persea recupera

como monofiletic con la base en la combinacin nica del sabor de la fruta rasgo (5), pubescencia de color en la superficie de las hojas, color del follaje (23) y las venas divergentes entumecidos. En el subgnero Persea tres especies bien definidas P. schiedeana, P. parviflora y P. americana,esto coincide. con el reportado por Scora y Bergh (1990). El ngulo de divergencia rasgo de la nervadura (7), formas estaminode (12) y la hoja de anchura (32) se reconocen como sinapomorfas para el clado formado por las diez especies de Persea. Es notable que la forma de la semilla (14) que soporta el conjunto de las especies consideradas como ancestral en la literatura: Es. guatemalensis, P.jloccosa, P. nubigena, P. tolimanensis, P. y P. steyermarkii zentmeyerii (Bergh y Ellstrand, 1987; Scora y Bergh, 1990). Tambin recientemente una especie polimrfica, que puede incluir varios taxones separados, entre ellos a Persea drymifolia, P.jloccosa, P. guatemalensis, P. nubigena, P. steyermarkii, P. y tolimanensis. P. zentmeyerii. Estos especies incluyen las tres variedades o razas del aguacatero con importancia comercial (P. americana, P. y P. drymifolia guatemalensis, Indias Occidentales, Mxico y Guatemala, respectivamente). Schieber y Bergh (1987) sugieren que todas las especies que en el grupo de subgnero Persea, excepcin de los tres razas, que pueden ser considerados como ecotipos. Estos autores afirman que las especies fueron desarrollados originalmente en el mismo lugar y luego de un proceso de dispersin, la seleccin y la especiacin se diversific. P. jloccosa Es de esta manera distribuida en Mxico y Amrica Central (Schieber y Zentmyer, 1978), P. y P. drymifolia guatemalensis se origin y domestic en las tierras altas del sureste de Mxico y Guatemala, Centro y Sudamrica (Storey et al, 1987.;Bergh, 1992). Persea americana se distribuye desde el sudeste al sur de Mxico hasta el norte de Amrica del Sur (Bergh y Ellstrand, 1987; Storey et al, 1987;. Bergh, 1992). Persea nubigena reciente en Mxico y Amrica Central (Bergh y Ellstrand, 1987; Storey et al, 1987;. Bergh, 1992). Persea parviflora se distribuye en el sureste de Mxico (Williams, 1977). Persea primatogena se considera como origen nicaragense. Persea schiedeana est en Mxico y Centroamrica (Borys et al., 1993). Persea steyerm arkii se distribuye en Mxico y Guatemala, al igual que P. tolimanensis, este ltimo tambin se encuentra en Amrica Central (Zentmyer y Schieber, 1978). Contrariamente a lo que propuso por Popenoe (1941), Kopp (1966) y Williams (1977), se determin que los tres aguacate rac "ES son lo suficientemente a cada otra diferente, por esta razn, tanto la intencin de que ellos deben ser consideradas como especies de Persea segn Bergh y Ellstrand, (1987) y para Scora y Bergh, (1990). Zentmeyer y Schieber (1987) sugieren que P. nubigena, P. steyermarkii y P. zentmeyerii, son especies separadas de P. americana Mill. Estas hiptesis no estn de acuerdo con los resultados de este trabajo, por el contrario P. drymifolia es la especie que los grupos de la clado formado por seis especies (P. jloccosa, P. guatemalensis, P. nubigena, P. tolimanensis, P. y P. steyermarkii zentmeyerii), que se recuper de los rasgos: forma de la semilla (14), la mejora nervadura (16) y la pulpa de color de la pulpa (26). Mientras que el zcalo formado por P. nubigena, P. guatemalensis y P. tolimanensis se distingue por los personajes: dimetro del fruto (17) y las venas divergentes nmero de hojas (33). Estos resultados sugieren que P.nubigena es una especie hermana de P. guatemalensis y P. tolimanensis, que no se haba sugerido previamente (Fig. 1). En el segundo zcalo donde el grupo de las especies del subgnero Persea con Ocatea y Nectandra, la relacin de estas sugiere que la separacin de la Yersea subgnero es poco sostenido, por lo que se debe incluir un mayor nmero de especies de Ocotea y Nectandra con el propsito de confitming que son los taxones hermanos del subgnero Persea. En este estudio Persea primatogena recupera para los rasgos: color de la flor (22) y la pubertad flor (24), as como otros cuatro caracteres homoplasc (Fig. 1). Sin embargo,

este trabajo no es compatible con los informes anteriores, porque es evidente que a partir de P. drymifolia que comenz la especiacin de tales especies y esta clado se define por los caracteres: forma de la semilla (14), color de la pulpa (26) y el grosor de la cscara (27), de los que Slo la semilla formato de caracteres (14) se recuper como un sinapomorphie. El zcalo integrado por P. jloccosa, P. y P. steyermarkii zentmeyerii, se define por los rasgos: forma de la semilla (14) y el color de la pulpa (26), que no se recuperan como sinapomorfas (Fig. 1). La asociacin de P. guatemalensis, P. nubigena y P. tolomanensis cuyo zcalo es soportes por caracteres: dimetro de fruta (17) y el nmero de venas divergente (33), siendo el carcter 17 un sinapomorphie, a su vez el carcter ngulo de divergencia en Nervadura hojas (7) Es compatible con la fraternidad de P. guatemalensis y P. tolimanesnsis. La forma de la fruta rasgos (3), color de la corteza en, pranches (4) y en el follaje de color de la superficie (23) resultaron ser caracteres exclusivos de P. guatemalinsis, P. y P. nubigena tolimanensis, respectivamente, y que son los que pueden recuperar como las especies autapomorfias of.each . El zcalo de P. jloccosa, P. y P. steyermarkii zentmeyerii; no se recuper por un poco de carcter como sinapomorfies, a pesar de esto, se determin que los rasgos forma de semilla (14) y el color de la pulpa (26) apoyan este zcalo. P. nubigena y P. tolimanensis, P. steyermarkii no est de acuerdo con este informe anterior. Se ined determ que P. tolimanensis est ms relacionada con P.guatemalensis, la determinacin de esta fraternidad, el ngulo de divergencia de carcter nervadura (7), adems de la clado conformado por P. nubigena, P. guatemalensis y P. tolimanensis fue apoyada por el carcter forma estaminode (12). En este clado no contiene P. steyermarkii, del mismo modo se determin que ninguna de las especies es ancestral a P. guatemalensis. Podra ser posible considerar que estas especies son producto de la especiaci6n a partir de un antepasado que comparte con P. drymifolia y de la interaccin de los cambios con el medio ambiente en el que originalmente se desarrollaron. La propuesta de Bergh et al. (1973) cuando la conclusin de que existe semejanza entre P. guatemalensis y P. nubigena estar de acuerdo con los resultados del presente trabajo. Sin embargo, la propuesta de que P. y P. nubigena steyermarkii (Shieber y Bergh, 1987;. Fumier et al, 1990) que estn relacionados con la raza guatemalteca con base en un anlisis de ADNr que no se inclina con una base para los caracteres morfolgicos aqu analizado dichas especies ya que parte de los diferentes subtipos y formas P. steyermarkii es el taxn hermano de P. jloccosa que es considerado por algunos autores como antepasado de P. drymifolia (Scora y Bergh, 1990). Es evidente la necesidad de complementar el anlisis morfolgico con el anlisis de caracteres moleculares como anlisis de los ITS, para obtener una mejor separacin en el interior de los clados de Persea y para apoyar la clados que aqu se propone. CONCLUSIONES El gnero Persea es un monofiletic parafiletic y no el gnero lo obtenido en el presente estudio. Se reconoce la existencia de dos subgnero que conforman el gnero Persea slo si Nectandra y Ocotea formaban parte del subgnero. Los dos subgnero se distinguen con personajes homoplasic, para la mayora de que no era posible recuperarlos como sinapomorfas. Sin embargo, el subgnero Persea est soportado por el color de la pulpa carcter, como sinapomorphie y la forma carcter hoja, resultaron ser la sinapomorphie para la Eriodhapne subgnero. Se hace evidente la necesidad de incorporar un mayor nmero de caracteres morfolgicos, bioqumicos y moleculares, con el propsito de obtener una mejor separacin al interior de los clados de Persea que aqu se presenta.