CAP1

Captulo
Neurociencia y psiquiatra
Steven E. Hyman,
M.D.
Josep T. Coyle, M.D.
Los avances en las investigaciones del cerebro se han sucedido con un ritmo rpido y creciente durante los ltimos veinte aos y han alcanzado un punto en que la neurociencia puede considerarse justificadamente como el fundamento biomdico de la psiquiatra. El crecimiento logartmico de nuestra comprensin de la organizacin y el funcionamiento del cerebro ha hecho posible empezar a analizar la conducta a nivel molecular. Estos avances han permitido la explotacin fructfera de metodologas experimentales y diagnsticas centradas en el cerebro como la resonancia nuclear magntica, la tomografa por emisin de positrones y el anlisis topogrfico de la actividad elctrica cerebral, para caracterizar irregularidades estructurales, metablicas y electrofisiolgicas en cerebros de pacientes psiquitricos. Adems, los avances paralelos en gentica humana y en biologa molecular nos permitirn definir las bases genticas de las enfermedades hereditarias del comportamiento, y fundamentalmente, determinar los mecanismos moleculares y celulares responsables de estos trastornos. Estos desarrollos estn reduciendo progresivamente la separacin cartesiana entre mente y cerebro, mejorando nuestra capacidad para correlacionar la experiencia mental con los procesos cerebrales. La investigacin en el campo de la neurociencia ofrece importantes oportunidades a la psiquia-
tra por su aplicacin a la asistencia de los pacientes y, a largo plazo, porque aumenta la comprensin de la experiencia y del comportamiento humanos. Por ello, es esencial para la psiquiatra aprovechar esta rea de conocimiento de rpida evolucin. Por consiguiente, la intencin de este captulo es revisar los aspectos moleculares y celulares de la investigacin en neurociencia. No es posible, por limitacin de espacio, tratar en profundidad la totalidad de los avances en la investigacin del cerebro. Por tanto, hemos preferido abordar los temas principales y las estrategias ms destacadas de la investigacin en neurociencia, que afectan directamente a la psiquiatra. Esperamos que este estudio servir como fundamento para entender el cuerpo de conocimientos actuales y para evaluar crticamente los progresos futuros en esta rama de la ciencia, as como su utilidad para los psiquiatras.
ANATOMA FUNCIONAL DE LA NEURONA

La neurona es una clula altamente especializada, tanto anatmica como bioqumicamente, para llevar a cabo la funcin de procesamiento de la informacin. En el sistema nervioso hay cientos de tipos de neuronas, cada una de las cuales se ocupa de funciones especializadas. A diferencia de mu3
TRATADO DE PSIQUIATRA
Canal ligand-gated
Na + Axn hilloch Potencial de accin Ncleo Canales Na + de apertura segn el voltage Axn
Vesculas de contenido neurotransmisor
Ca ++ Terminal presinaptico
Na + Dendritas
Na +
Pericarin
Figura 1-1. Representacin esquemtica de una neurona. Un canal ligand-gated, posiblemente un receptor de glutamato, se muestra permitiendo la entrada de Na + en el cuerpo de una neurona. Si el equilibrio de cargas positivas y negativas es adecuado para despolarizar la neurona hasta llegar al umbral en la regin del axn proximal o el engrosamiento del axn, los canales de intercambio inico de Na + se abrirn, generando as un potencial de accin. El potencial de accin se propaga a lo largo del axn debido a la apertura secuencial de los canales Na +. Cuando el potencial de accin invade la terminal presinptica, los canales de intercambio inico de Ca ++ se abren, y la entrada de Ca++ causa una liberacin de neurotransmisores (ver exposicin en el texto). La repolarizacin de la neurona es el resultado de la apertura en rpida sucesin de los canales de intercambio inico de K + despus de la entrada de Na+.
chos tipos de clulas, como las que constituyen el hgado, la epidermis o el sistema hematopoytico, que son capaces de realizar la divisin celular durante toda la vida del individuo, el alto grado de especializacin de la neurona generalmente le impide llevar a cabo la divisin celular una vez esta clula es completamente madura. Esta incapacidad de la mayora de las neuronas de experimentar una mitosis, influye de forma evidente en la irreversibilidad de las lesiones del sistema nervioso. La neurona puede dividirse en cuatro componentes distintos: el cuerpo celular o soma, las dendritas, el axn y las sinapsis (ver Figura 1-1). En el soma de la neurona tiene lugar la sntesis de prcticamente todas las protenas y otros componentes estructurales. Situado en el soma se encuentra el ncleo, que contiene el material gentico en forma de cido desoxirribonucleico (ADN). La informacin para la sntesis de protenas est codificada por los genes que contiene el ADN: esta informacin gentica se lee mediante un proceso llamado transcripcin en el cual el ADN sirve de plantilla para la sntesis del cido ribonucleico (ARN). Las primeras transcripciones de ARN que resultan se procesan y dan lugar al ARN mensajero (ARNm), que se exporta del ncleo al citoplasma del soma. All, el ARNm se traduce en protenas grnulos llamadas ribosomas. La rica concentracin alrededor del ncleo de este sistema de sntesis de protena a travs del ARNm explica la presencia de la
sustancia de Nissl, que se observa en el soma de las neuronas del tejido cerebral al emplear tinciones vitales. La sntesis de protenas ocurre mayoritariamente en el soma, pero los ribosomas activos se han detectado recientemente en dendritas, lo cual aumenta la posibilidad de que exista un control local de sntesis de protenas por estmulo neuronal. El tamao del soma neuronal es aproximadamente proporcional a la extensin de las proyecciones de las dendritas y de los axones. Hay que destacar que el soma tan slo contiene un porcentaje muy reducido de volumen neuronal; la parte principal del volumen celular se distribuye entre el axn y el rbol dendrtico. Por esta razn, los requerimientos metablicos y sintticos del soma neuronal son inmensos, ya que el soma neuronal nutre al resto de la neurona. Los materiales sintetizados en el interior del soma son transportados a lo largo de los axones y las dendritas por transporte axoplasmtico para reemplazar los componentes inactivados. Por el contrario, los productos de desecho de las protenas metablicas y estructurales de los axones y las dendritas, se transportan en sentido inverso hacia el cuerpo celular para ser catabolizados. El axn es una fina extensin tubular del cuerpo celular por el que circulan impulsos elctricos hacia la terminacin nerviosa. La neurona emite solamente un axn, cuya longitud vara desde
NEUROCIENCIA Y PSIQUIATRA
menos de un milmetro en las interneuronas, hasta ms de un metro en las neuronas motoras que inervan las extremidades. El axn, cuando se acerca a su campo de inervacin, puede ramificarse en diversos grados, dependiendo del nmero de neuronas con las que establezca sinapsis. Algunas neuronas pueden tener uniones sinpticas muy especficas y restrictivas, mientras que los axones de otras neuronas, como los de las neuronas dopaminrgicas nigrostriadas, pueden ramificarse para conectar con millones de neuronas en su zona terminal de inervacin. Las dendritas son extensiones tubulares mltiples del cuerpo celular neuronal que sirven de estructura primaria para la recepcin de uniones sinpticas procedentes de otras neuronas. (Algunas neuronas, como las clulas Purkinje en el cerebelo y algunos componentes del sistema reticular del tronco del cerebro, que poseen funciones integradoras, poseen rboles dendrticos muy extensos que reciben input sinptico de miles de neuronas. La sinapsis es una estructura especializada en la que la terminacin nerviosa de una neurona se pone en contacto con la parte receptora de la neurona adyacente; generalmente, la transmisin se consigue por mensajeros qumicos llamados neurotransmisores, pero en algunos casos puede tratarse de mensajeros elctricos. La sinapsis consiste en una evaginacin de las regiones terminales del axn denominada botn terminal, que est finamente sujeta a la membrana dendrtica de la neurona adyacente por contactos especializados. La membrana dendrtica de la sinapsis es muy rica en receptores que responden al neurotransmisor liberado por el botn terminal. El propio botn terminal contiene numerosas estructuras celulares que le permiten mantenerse relativamente independiente a nivel metablico y funcional del cuerpo celular neuronal. As pues, contiene mitocondrias (unidades energticas de la celula que generan ATP (adenosn 5 -trifosfato) a partir del metabolismo de la glucosa), enzimas implicados en la sntesis y en la degradacin del neurotransmisor y vesculas de almacenamiento que mantienen importantes concentraciones de neurotransmisor en estado protegido. Cuando el tejido cerebral se homogeniza cuidadosamente en una solucin isotnica de sacarosa, la sinapsis con el botn terminal y la membrana postsinptica adyacente especializada se separan del resto para formar sinaptosomas. Estas estructuras se han utilizado para estudiar aspectos bioqumicos de la neurotransmisin sinptica del cerebro. La propiedad fundamental de todas las neuronas es la naturaleza excitable de su membrana, que les confiere la capacidad de generar y transmitir una onda de despolarizacin electroqumica. Esta
propiedad deriva de la naturaleza especializada de la membrana neuronal, que mantiene un gradiente de voltaje y posee canales de iones sensibles al voltaje. Dos tipos de protenas son mayoritariamente responsables de la regulacin de iones y por tanto del voltaje de la membrana neuronal. Estos son las bombas inicas y los canales de sodio voltaje. Basndose en la clonacin molecular que tienen codificada algunas de estas bombas inicas y canales de sodio voltaje, parece ser que cada uno representa una familia de genes que deriva de su gen ancestral comn. An ms importante, la clonacin molecular ha iniciado una era de estructura y anlisis detallados de la actividad que muy probablemente conducir a la creacin de frmacos neuroactivos ms eficaces. Las bombas crticas para establecer el gradiente fisiolgico de iones que se encuentran a lo largo de la membrana neuronal son una bomba de ATPdependiente, la ATPasa que extrae dos iones de Na+ por cada ion de K+ que entra; y bombas que extraen Ca++ de la neurona. Durante los descansos, hay altas concentraciones de Na+ y Cl fuera de la neurona y una concentracin relativamente alta de K + dentro de la neurona. La fuente principal de carga negativa dentro de la neurona proviene de aminocidos de carga negativa. La membrana se polariza en su totalidad con una diferencia de voltaje a lo largo de la membrana de aproximadamente 70mV, en comparacin con el exterior de la neurona. Esto se llama el potencial de descanso de la membrana. Cuando la membrana neuronal se despolariza hasta llegar a aproximadamente 35mV, se produce un potencial de accin que representa a la actividad de disparo de la neurona, y es el mecanismo fundamental de la estimulacin neuronal. Concretamente, a medida que el interior de la neurona se vuelve positivo, los canales especializados de sodio voltaje se abren, lo que permite que ms iones positivos entren en la neurona (Figura 1-1). El potencial de accin representa la extensin de la despolarizacin por la apertura vectorial de los canales de sodio. Debido a que cada canal de Na+ que se abre en sucesin proporciona la carga positiva para que el siguiente segmento del axn alcance el umbral para abrir sus canales de Na+, el potencial de accin es autorregenerador y una vez ha empezado, se propaga a lo largo del axn sin problemas. Al llegar al terminal presinptico, el potencial de accin causa la apertura de los canales de Ca++ voltaje que se encuentran all (denominados canales de Ca++ tipo N, en contraposicin con los canales Ca ++ tipo L, bloqueados por los bloqueantes de canales de Ca++ tipo verapamino utilizados en la clnica). El Ca++ entra e inicia una serie de procesos bioqumicos complejos pero
rpidos que causan una fusin de las vesculas contenedoras de neurotransmisores con la membrana presinptica y por tanto liberan su contenido en la sinapsis, permitiendo una transmisin sinptica. Debido a que la entrada de la carga positiva despolariza la membrana, acercando as la neurona al umbral para disparar un potencial de accin, los receptores de neurotransmisores que permiten la entrada de cationes como Na+ o Ca++ son excitadores y los que causan la entrada de aniones como Cl, o la salida de cationes, como K+, son inhibidores. Las dendritas suman continuamente todos los potenciales de las aferencias excitadoras e inhibidoras, para determinar si la neurona generar o no un potencial de accin. La organizacin espacial de la inervacin de la neurona no es casual sino que est altamente organizada. Las aferencias excitadoras estn generalmente concentradas en el extremo distal de las dendritas, mientras que las aferencias inhibidoras estn localizadas principalmente en el extremo proximal de las dendritas y alrededor del soma. Esta distribucin espacial significa que las aferencias inhibidoras tienen un papel predominante al determinar si una neurona generar o no, un potencial de accin. Debido a que el potencial de accin es autorregenerador, la decisin de d i s p a r a r un potecial de accin es un proceso de todo o nada, y cuando el equilibrio se decanta hacia la despolarizacin adecuada en la regin del axn proximal, donde la densidad de los canales de sodio es alta, se genera un potencial de accin (Figura 1-1).
TABLA 1-1. CRITERIOS QUE DEBE CUMPLIR UN NEUROTRANSMISOR 1. 2. 3. 4. La neurona contiene la sustancia. * La neurona sintetiza la sustancia.* La neurona libera la sustancia en la despolarizacin. * La sustancia es fisiolgicamente activa en las n e u r o n a s .* 5. La respuesta fisiolgica postsinptica a la sustancia es idntica a la del neurotransmisor liberado por la neurona.
* Todas las sustancias enumeradas en las tablas 1-2 y 1-3 cumplen
con este criterio.
NEUROTRANSMISORES
Aunque no suele apreciarse, cabe recordar que la psiquiatra, especialidad mdica que se ocupa de muchos aspectos de la comunicacin, foment la mayor parte de las primeras investigaciones sobre los mecanismos de la comunicacin qumica entre las neuronas. Debemos sealar que la existencia de neurotransmisores cerebrales fue propuesta por primera vez con la hiptesis de que la esquizofrenia sera el resultado de una anomala del metabolismo del neurotransmisor adrenalina, por lo que se generara un metabolito psicomimtico, el adrenocromo. Aunque esta hiptesis finalmente no pudo probarse, al principio de los aos sesenta promovi numerosos estudios para caracterizar la disposicin metablica de las catecolaminas cerebrales. Ms recientemente, esta estrategia de estudio de la comunicacin neuronal en el cerebro ha conducido a la identificacin de un conjunto rpidamente creciente de sustancias que actan como neurotransmisores. As pues, a mediados de los
aos sesenta se crea que slo un reducido nmero de sustancias satisfacan el criterio de neurotransmisores cerebrales putativos. El trmino putativo se refiere al hecho de que es muy difcil satisfacer todos los criterios para que una sustancia se considere sin lugar a dudas un neurotransmisor cerebral (ver Tabla 1-1). Durante la ltima dcada, el nmero ha crecido aproximadamente diez veces (ver una lista parcial en las Tablas 1-2 y 1-3). Adems, actualmente disponemos de un dato convincente y es que la mayora de neuronas liberan ms de un neurotransmisor, a menudo una pequea molcula neurotransmisora y uno o ms pptidos. La siguiente exposicin se centra en ejemplos representativos de los dos tipos principales de neurotransmisores en el cerebro: a) los neurotransmisores clsicos como la adrenalina, que se sintetizan localmente en las terminaciones nerviosas, y b) los neurotransmisores neuropptidos como la beta-endorfina, que se sintetizan en el soma neuronal. Para un estudio detallado, ver Nestler (1993) y Cooper et al. (1991).
Catecolaminas
El sistema de neurotransmisores mejor estudiado desde el punto de vista de la sntesis, el almacenamiento, la liberacin y el metabolismo, es el sistema catecolaminrgico. Los principios establecidos para la neurotransmisin catecolaminrgica perifrica y central tienen una aplicabilidad general al resto de los sistemas de neurotransmisores clsicos. Los neurotransmisores catecolaminrgicos comprenden la dopamina, la noradrenalina y la adrenalina. Aunque cada uno de ellos acta como neurotransmisor diferenciado en los sistemas neuronales especficos del cerebro, todos ellos forman parte de una misma ruta biosinttica (Figura 1-2). Las enzimas responsables de la sntesis de catecolaminas se sintetizan en el soma de la neurona y se transportan a lo largo del axn hasta los terminales presinpticos. Las neuronas que usan dopamina como neurotransmisor poseen las primeras
TABLA 1-2. NEUROTRANSMISORES CLSICOS Acetilcolina Histamina Serotonina Dopamina Noradrenalina Adrenalina cido asprtico cido gamma-aminobutrico cido glutmico Glicina Homocistena Taurina
dos enzimas de la ruta, tirosina hidroxilasa y dopa decarboxilasa. Las neuronas que liberan noradrenalina presentan una tercera enzima, dopamina-betahidroxilasa, y las neuronas que producen adrenalina presentan una cuarta enzima, feniletanolamina N-metil transferasa (PNMT). Debido a que la tirosina hidroxilasa es una enzima de flujo limitado y altamente controlado, los mecanismos reguladores generales que determinan la disponibilidad del neurotransmisor son comunes para todos los neurotransmisores de este grupo. Las rutas sintticas de los neurotransmisores clsicos, generalmente, aunque no de manera invariable, implican la conversin de un precursor inactivo en cuanto a capacidad de transmisin de informacin en un neurotransmisor cargado de informacin. En el caso de las catecolaminas, acta como precursor el aminocido no esencial L-tirosina. La tirosina hidroxilasa es el paso limitante de la tasa de sntesis y virtualmente se satura por los niveles cerebrales de este aminocido. Por tanto, el incremento de los niveles de este aminocido en el cerebro no afectar significativamente la biosntesis de las catecolaminas. Adems, para prevenir un crculo vicioso de sntesis y de degradacin de catecolaminas, la tirosina hidroxilasa est sujeta a un mecanismo de retroalimentacin negativo regido por el producto final. De este modo, cuando la concentracin de catecolaminas en la terminacin nerviosa sobrepasa su capacidad de almacenamiento, el exceso de catecolaminas inhibe la actividad de la tirosina hidroxilasa, evitando que
Figura 1-2. Va de la biosntesis de las catecolaminas. Obsrvese que la tirosina hidroxilasa se activa por la accin de las proten-quinasas y que la sntesis de feniletanolamina-N-metil transferasa depende de los corticosteroides.
prosiga la sntesis de catecolaminas. Esta retroalimentacin asegura que siempre exista una concentracin constante de catecolaminas frente a la demanda de liberacin de las mismas de la sinapsis. Por tanto, cuando las neuronas catecolaminrgicas no transmiten, la sntesis de catecolaminas se detiene. Por otra parte, cuando se liberan catecolaminas y se agotan las reservas, esta retroalimentacin inhibidora desaparece y la sntesis se reanuda. Se hace patente, sin embargo, que actan tambin otros mecanismos durante los perodos de mayor demanda en la liberacin de catecolaminas. Los disparos repetidos de la neurona catecolaminrgica producen la activacin de sistemas de segundos mensajeros y por tanto de protenas quinasas (ver ms adelante). La fosforilacin de la enzima tirosina hidroxilasa por las protenas quinasas reduce su sensibilidad para la retroalimentacin inhibidora e incrementa su afinidad por el cofactor crtico pterina (Nose et al., 1985). Los perodos de incremento prolongado de la actividad neuronal catecolaminrgica provocan la puesta en marcha de un segundo mecanismo, la sntesis de molculas enzimticas adicionales en la va de biosntesis de las catecolaminas. Este segundo proceso est regulado a nivel del soma de las neuronas catecolaminrgicas, donde el ARNm adicional codificado por la tirosina hidroxilasa es copiado a partir del ADN del ncleo. As, se hace patente que la sntesis de catecolaminas est sometida a una regulacin dinmica que, a su vez, est firmemente coordinada por la actividad elctrica de la neurona catecolaminrgica. Despus de que en el citosol del nervio terminal se haya producido la sntesis enzimtica de las catecolaminas, estas sustancias se concentran en vesculas, pequeos sacos membranosos localizados en la terminacin nerviosa. El almacenamiento vesicular es un proceso activo que requiere energa y que resulta inhibido irreversiblemente por el frmaco antihipertensivo reserpina. Las vesculas de almacenamiento cumplen dos funciones. Primero, protegen a las catecolaminas de ser degradadas por el enzima monoamino-oxidasa (MAO). Segundo, las vesculas influyen en la descarga cuntica de catecolaminas por liberacin mediante exocitosis, cuando un potencial de accin llega al nervio terminal. Adems de la enzima intraneuronal MAO, una segunda enzima que inactiva catecolaminas se encuentra en la superficie externa de la membrana neuronal, as como en la superficie externa de muchos otros tipos de neuronas. Esta enzima, catecolO-metiltransferasa (COMPT), cataliza la inactivacin de las catecolaminas por metilacin de uno de los grupos co/anillo hidroxil. Sin embargo, la degradacin enzimtica no es el mecanismo ms significativo por el cual se ter-
TABLA 1-3. NEUROPPTIDOS NEUROTRANSMISORES PUTATIVOS Hormona adrenocorticotropa (ACTH) Angiotensina II * Beta-endorfina Bombesina Bradiquinina Carnosina Colecistoquinina * Dinorfina Factor liberador de corticotropina Galinina Gastrina Glucagn Hormona liberadora de tirotropina (TRH) Insulina * Leu-encefalina * Met-encefalina Neuropptido Neurotensina Pancreostatina Pptido natriurtico auricular Pptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP) Pptido vasoactivo intestinal (VIP) Somatostatina Sustancia P Vasopresina
* Miembros de la familia de las endorfinas.
neurotransmisores son sintetizados a partir de precursores neurofisiolgicamente inactivos. El aminocido glutamato parece ser el neurotransmisor excitador predominante en el cerebro; y los aminocidos como el GABA (cido gamma-aminobutrico), la glicina y posiblemente la taurina parecen ser los neurotransmisores inhibidores ms destacables. Estas molculas estn presentes en el plasma y son precursores importantes en la sntesis de protenas. Estas caractersticas pareceran ser contradictorias con las de un neurotransmisor, que debe poseer una accin altamente localizada sobre los receptores apropiados. Sin embargo, se gasta una cantidad considerable de energa para mantener procesos de transporte selectivo y la accin de enzimas catablicos, con el objeto de mantener concentraciones de estos neurotransmisores aminocidos extremadamente bajas en el espacio extracelular del cerebro. La importancia de esta proteccin se ilustra por el hecho de que la concentracin intracelular de cido glutamtico en ciertas regiones del cerebro es mayor de 10 mM, mientras que la concentracin en el lquido cefalorraqudeo (CSF) es aproximadamente de 0,1 M, lo que representa un gradiente 100.000 veces mayor.
mina la accin de catecolaminas en la sinapsis. El mecanismo ms crtico es una recaptacin activa de las catecolaminas por la propia terminal nerviosa que las ha liberado. La recaptacin se lleva a cabo gracias a una protena transportadora especfica que cambia las catecolaminas con un proceso dependiente de energa impulsado por el gradiente de sodio a travs de la membrana neuronal (Pacholczyk et al., 1991). Los transportadores dopaminrgicos y la noradrenalina son miembros de una misma familia gentica de protenas que tambin incluye los transportadores serotoninrgicos y de GABA (cido gama-aminobutrico) (Revisado por Giros y Caron, 1993). Los procesos implicados en la sntesis, almacenamiento, liberacin e inactivacin de los neurotransmisores clsicos se resumen en la Figura 13. Estos procesos interrelacionados aseguran una disponibilidad estable del neurotransmisor en la terminal nerviosa, sea cual sea la demanda y la inactivacin del neurotransmisor liberado, a fin de que no pueda difundirse fuera de la hendidura sinptica en cantidades significativas. Ha sido demostrada la operatividad de los mismos principios en un grado importante, aunque variable, para los otros neurotransmisores clsicos, incluyendo la serotonina, la acetilcolina y la histamina. Los neurotransmisores de tipo aminocido, sin embargo, representan una excepcin importante del principio de acuerdo con el que los
Neuropptidos
El hecho de que las protenas pequeas, como por ejemplo los pptidos, sean utilizadas en el cuerpo como seales, es bien conocido por su funcin como hormonas en la hipfisis y en varias glndulas endocrinas. El posible papel de los pptidos como neurotransmisores procede del descubrimiento de que los factores de liberacin que controlan la secrecin de diversas hormonas hipofisiarias fueran, de hecho, pptidos sintetizados por neuronas en el ncleo arqueado del hipotlamo. Sin embargo, el descubrimiento decisivo que provoc un am-
Figura 1-3. Procesos que intervienen en la sntesis, la accin sinptica y la inactivacin de los neurotransmisores clsicos.
plio inters en relacin con los pptidos como posibles neurotransmisores fue el hallazgo de las endorfinas, pptidos opiceos endgenos, que se encuentran ampliamente distribuidos en el sistema nervioso central (SNC) (Hughes et al., 1975). Desde el descubrimiento de las endorfinas hace una dcada, el nmero de pptidos que se cree que actan como neurotransmisores en el cerebro se ha incrementado considerablemente, y en la actualidad es superior a cuarenta. La investigacin de los neuropptidos (para una revisin, ver Hokfelt, 1991) en la ltima dcada ha revelado varios principios generales. A diferencia de los pequeos neurotransmisores moleculares que se sintetizan por procesos enzimticos localizados dentro de la terminal nerviosa, los neuropptidos se sintetizan dentro del cuerpo neuronal (Figura 1-4). Esto refleja el hecho de que la sntesis de los neuropptidos, que son pequeas protenas, se dirige por ARNm que ha sido transcrito del ADN nuclear. Los niveles de neuropptidos en la terminal nerviosa dependen completamente de la sntesis, el procesamiento y el transporte de los pptidos del soma neuronal. Asimismo, parece que las neuronas peptidrgicas son menos propensas a responder rpidamente a aumentos prolongados en la liberacin a causa del retraso en la sntesis y transporte de neuropptidos suplementarios que deben llegar desde el soma neuronal.
Figura 1-4. Secuencia de la sntesis de neuropptidos. En el ncleo, el gen del neuropptido precursor se transcribe en ARNm. EL ARNm se transporta desde el ncleo al citoplasma, donde se fija a los ribosomas. Posteriormente, el ARN se transcribe merced a la sntesis proteica en los ribosomas del retculo endoplasmtico rugoso. En el aparato de Golgi, el pptido precursor se modifica enzimticamente para convertirse en neuropptido, que se almacena en vesculas para su transporte axoplasmtico hasta las terminaciones nerviosas.
Uno de los hallazgos ms sorprendentes en relacin a la sntesis de neuropptidos es que un solo gen a menudo da lugar a mltiples pptidos activos y, adems, que la gama de pptidos producidos por un solo gen puede variar en cuanto al tipo de neuronas. La diversidad empieza despus de la transcripcin del gen que codifica el precursor del pptido. En neuronas eucariotas la mayora de genes tienen sus secuencias codificadas de protenas (llamados *exones) interrumpidas por secuencias no-codificadas (llamadas *itrones). Cuando se transcribe un gen, la transcripcin principal es co-lineal con el ADN y por tanto contiene *exones e *itrones. Antes de que el ARN parta del ncleo para ser traducido, los *itrones se expulsan y los *exones se parten para formar el ARNm. Se ha visto que la primera transcripcin de ciertos genes neuropptidos se parte de maneras distintas en diferentes tipos de neuronas. Al incluir o excluir exones concretos en el ARNm citoplsmico, se pueden producir pptidos de ARNm con diferentes codificaciones. Por ejemplo, los pptidos calcitronin y CGRP son productos del mismo gen derivado de esta divisin alternativa. La codificacin de neuropptidos maduros de ARNm se traduce, en el retculo endoplasmtico rugoso para producir precursores grandes llamados poliprotenas. Estos precursores (es decir, pre-proopiomelanocortina o pre-proencefalina) contienen una secuencia, casi siempre en el terminus de amino de la protena, que dirige la protena por la va secretoria de la neurona. Esta secuencia lder o pre-secuencia se parte rpidamente por una endopeptidasa y deja el resto del precursor (pre-proopiamelano cortina o pre-proencefalina). Este precursor lleva a cabo ms particin proteoltica y por lo tanto qumicamente modificada (es decir, glicosilacin, amidacin, acetilacin o fosforilacin) dentro del retculo endoplasmtico rugoso y el aparato de Golgi para ceder numerosos pptidos biolgicos activos para liberar. As como la divisin alternativa de ARNm permite la regeneracin de mltiples molculas de estimulacin a partir de un solo gen, el procesamiento diferencial de los precursores de pptidos permite la regeneracin de mltiples molculas de estimulacin de un mismo pptido precursor. Dentro de los pptidos precursores, hay pares de residuos de aminocidos bsicos (lisina o arginina) reconocidos por los enzimas procesadores como zonas de divisin. La familia de enzimas responsable de procesar den tro de las neuronas mamferas ha sido descubierta recientemente y por tanto no estn completamente caracterizadas. Sin embargo, parece ser que ciertas enzimas tienen mayor afinidad por algunos pares de residuos dibsicos que por otros. Por tanto, dependiendo de los enzimas que se expresan en un tipo
10
neuronal particular o endocrino, los precursores grandes pueden ser divididos en diferentes pptidos activos con diferentes papeles fisiolgicos. Entre los neurotransmisores pptidos, los pptidos opiceos endgenos son los ms estudiados y tienen una clara relevancia para la psiquiatra debido a su papel en la respuesta al estrs, en las conductas motivadas y en la analgesia. Hughes et al. (1975) identificaron los primeros opiceos endgenos met y leu encefalina. Desde entonces, se han aislado y caracterizado aproximadamente 20 pptidos opiceos activos de cerebros de mamferos y de glndulas pituitarias y adrenales. Todos estos opiceos endgenos contienen los mismos cuatro aminocidos cuyo grupo amino terminal es TirGli-Gli-Fe, seguidos por Met o Leu (Met-encefalina, Leu-encefalina). Todos los pptidos opiceos derivan de uno de tres grandes precursores poliprotenicos, cada uno codificado en un gen separado. Los precursores son la pro-encefalina (que tiene codificadas seis copias de la secuencia de Met-encefalina y una de las secuencias de Leu-encefalina), la prodinorfina (que es el precursor de la *dinorfina opicea endgena y pptidos relacionados) y la pro-opiomelanocortina. La pro-opiomelanocortina (POMC) es particularmente interesante porque contiene las secuencias de pptidos activos con funciones biolgicas aparentemente diferentes, el pptido opiceo beta-endorfina y el no-opiceo, la hormona adrenocorticotropa (ACTH), y porque se procesa para producir diferentes tejidos (Figura 1-5). En el lbulo anterior de la pituitaria, slo un subgrupo de las zonas de divisin dibsicas dentro de la pro-opiomelanocortina es reconocido por la enzima que est presente. En este tejido, el precursor produce un pptido terminal-N de funcin bio-
lgica desconocida junto con ACTH y la hormona beta-lipotropina. La beta-lipotropina se somete a otra divisin para procesar el pptido opiceo betaendorfina. Por tanto, cuando la ACTH es liberada por la glndula pituitaria, las beta-endorfinas tambin son liberadas. Muchos mamferos (pero no los humanos) tienen un lbulo pituitario intermedio que contiene una enzima procesadora adicional. En el lbulo intermedio, la ACTH se somete a otra divisin para procesar un pptido llamado pptido del lbulo intermedio tipo corticotropina (CLIP) y la hormona melanocito estimulante (MSH). Este proceso, sin embargo, no ocurre en los humanos.
Co-localizacin
Antes se crea que cada neurona usa un neurotransmisor, y slo uno. Sin embargo, en los ltimos aos se ha asistido a un rpido crecimiento de la lista de excepciones a este principio, y se ha demostrado que las neuronas contienen y liberan ms de un neurotransmisor. Generalmente, la demostracin de la co-localizacin de dos o ms neurotransmisores en la neurona, comporta que uno de ellos sea un neurotransmisor clsico y el otro un neuropptido. Pero adems en la actualidad existen ejemplos en los que dos neurotransmisores clsicos, como la serotonina y el GABA, coexisten en la misma neurona. Es importante entender que los mismos neurotransmisores no estn co-localizados. Por ejemplo, se ha demostrado que la encefalina, pptido opiceo, est co-localizado en determinadas neuronas noradrenrgicas del sistema nervioso simptico y en algunas neuronas serotoninrgicas del cerebro. Se ha demostrado tambin que en el cerebro la *colescistocinina est co-localizada en las neuronas dopaminrgicas que inervan el sistema corticolmbico, pero no en las neuronas dopaminrgicas que inervan el estriado. Con el gran nmero de neurotransmisores putativos en el cerebro, el nmero de posibles combinaciones es inmenso y sugiere un grado mucho mayor de complejidad en la neurotransmisin sinptica del que haba sido considerado con anterioridad. Los mecanismos claramente diferenciados implicados en la sntesis de los neuropptidos comparados con los de los neurotransmisores clsicos sugieren que los neurotransmisores co-localizados pueden desempear funciones algo diferentes, pero complementarias. Algunos estudios sugieren que los neuropptidos se liberan slo durante los perodos de marcada actividad neuronal, mientras que los neurotransmisores clsicos se liberan en proporcin al flujo de los impulsos. Sin embargo, actualmente la comprensin de los mecanismos implicados en la comunicacin compartida contina siendo rudimentaria.
Figura 1-5. Procesamiento de la pro-opiomelanocortina (POMC). La protena precursora POMC, que contiene 165 aminocidos, se divide enzimticamente para convertirse en los pptidos fisiolgicamente activos que se indican. En funcin de la localizacin (hipfisis anterior, hipotlamo, terminales nerviosas del mesencfalo), algunos de estos neuropptidos se expresan y otros no. (Ver Watson et al., 1985).
11
RECEPTORES
La identificacin, caracterizacin y, ms recientemente, la cenificacin molecular de los receptores de los neurotransmisores, constituyen un gran avance en la neurociencia, produciendo un impacto considerable en la comprensin de la elaboracin de informacin en el cerebro y los lugares de accin de las sustancias neuroactivas, incluyendo los frmacos psicotrpicos. Aunque habitualmente los neurotransmisores son descritos como excitadores o inhibidores, como si esta accin fuese inherente a su estructura molecular, la naturaleza de la respuesta neuronal a un neurotransmisor depende en ltimo trmino de la presencia de un receptor unido a un transductor. Dependiendo del tipo de receptor-transductor que posea una neurona dada, un neurotransmisor puede ejercer efectos inhibidores, excitadores o moduladores. Los receptores neuronales son protenas situadas en la superficie externa de la membrana neuronal. Estas protenas tienen regiones de fijacin del ligando accesibles a los mensajeros extra-celulares y a otras regiones involucradas en la transduccin de la interaccin de unin a un efecto intercelular. La unin reversible del neurotransmisor con la zona de reconocimiento del receptor causa un cambio de conformacin que desencadena la posibilidad de que la membrana sea atravesada. Este hecho puede implicar la apertura de los canales inicos que atraviesan la membrana neuronal o la activacin de una protena-G estimuladora de transduccin (ver ms adelante) que se asocia a la superficie interna de la membrana. Los receptores que actan de va de entrada en un canal inico intrnsico se llaman canales ligand-gated; los receptores que actan va las protenas-G se llaman receptores protenas-G linked. Como en el caso de otros tipos importantes de molculas mencionadas anteriormente en este captulo, como los canales inicos sensibles al voltaje y los transportadores de neurotransmisores, los canales ligand-gated, los receptores pro-lin-G y las protenas-G forman grandes familias independientes de molculas con estructuras homlogas. Se cree que cada una de estas familias de genes empez con un nico predecesor primitivo (es decir, un canal ligand-gated ancestral) que, despus de duplicaciones y mutaciones de genes dio lugar a un gran nmero de genes y por tanto a protenas con funciones especficas pero relacionadas, permitiendo una complejidad creciente de estimulacin neuronal durante la evolucin.
La fijacin del ligando

Puesto que los receptores se unen con el neurotransmisor con el que interaccionan, de forma
vida, especfica, reversible y saturable (por ejemplo, el nmero de zonas receptoras est limitado), los neurocientficos han aprovechado estas caractersticas al utilizar ligandos radioactivos para marcar los receptores de una manera especfica. Si la avidez de la interaccin especfica entre el ligando marcado radioactivamente es suficientemente alta, dicho ligando puede quedar atrapado en el receptor de forma lo bastante intensa como para que el complejo radioactivo resultante pueda ser aislado. Esta estrategia ha facilitado enormemente los estudios orientados a examinar las caractersticas de estas interacciones entre receptor y neurotransmisor y su localizacin en el sistema nervioso. Por ejemplo, la afinidad relativa entre los frmacos o sustancias parecidas a los neurotransmisores y al receptor, puede determinarse midiendo su potencia para la unin de un ligando radioactivo con su receptor. Con este mtodo, Snyder y sus colaboradores demostraron una correlacin precisa entre las afinidades de los frmacos antipsicticos con los receptores dopamnicos tipo D2 y la potencia clnica de estos frmacos en el tratamiento de trastornos psicticos (Figura 1-6). Los mtodos de fijacin del ligando combinados con modelos tridimensionales de receptores clonados deberan facilitar una comprensin de la estructura precisa de las molculas requeridas para un reconocimiento ptimo en la zona del receptor y, por tanto, a la larga, un diseo farmacolgico racional. Como ciertos radioligandos se unen estrechamente a sus receptores especficos, ha sido posible visualizar la distribucin de los receptores en el cerebro mediante tcnicas autorradiogrficas. Con este mtodo, cortes finos de tejido cerebral son incubados con el ligando radioactivo en un tampn fisiolgico. A continuacin, el corte se lava con un tampn libre de radioligando para eliminar la parte de ste unida de forma no especfica y laxa, que es fcil y rpidamente reversible. En el tejido queda el radioligando especficamente asociado con el receptor. Esta asociacin puede entonces ser revelada por aposicin del corte del tejido con una pelcula sensible a los rayos X, con lo que se produce la precipitacin de los grnulos de plata de la emulsin de la fotografa en aquellas zonas donde estn situados los ligandos radioactivos. La Figura 1-7 presenta un autorradiografa de la distribucin de los receptores muscarnicos evaluados por la fijacin del antaponista muscarnico 3H especfico y muy potente denominado quinuclidinil benzilato en una seccin parasagital del cerebro de mono. Con el desarrollo de los mtodos de imagen asistida por ordenador capaces de localizar la fuente de emisiones radioactivas de positrones en un espacio tridimensional, ha sido posible emplear las tcnicas de fijacin de ligando y receptor in vivo, con
12
pecficos. Esta dificultad deriva del hecho de que las interacciones entre el receptor y el transductor a menudo no pueden ser determinadas cuando se estudian al mismo tiempo amplias poblaciones de receptores, como sucede en los estudios de fijacin de ligandos, ya que pueden estar asociados con diferentes transductores en las distintas neuronas. En consecuencia, tcnicamente es ms complicado medir la respuesta fisiolgica provocada por la activacin de receptores neuronales especficos. Se han desarrollado varios mtodos para medir las consecuencias electrofisiolgicas de la aplicacin local de neurotransmisores en neuronas concretas. Con micropipetas mltiples formadas por un electrodo de registro y un conjunto de pipetas adosadas entre s, colocadas en una neurona en el cerebro, el neurotransmisor o el frmaco es envia-
Figura 1-6. Correlacin entre la potencia clnica de los neurolpticos y su afinidad por los receptores dopaminrgicos D-2. Las ordenadas muestran la dosis media diaria de neurolpticos administrados para tratar la esquizofrenia y las abcisas indican la afinidad de los neurolpticos por el receptor dopaminrgico D-2 (vase el texto). (Por cortesa de S. Snyder).
objeto de determinar la distribucin de los receptores de los neurotransmisores en el cerebro del hombre. Por ejemplo, usando spiperona marcada con carbono 11 y emisora de positrones, que es un neurolptico con una alta afinidad por los receptores de dopamina-2, Wong y sus colaboradores (1986) han visualizado la distribucin de estos receptores para la dopamina en el cerebro humano (Figura 18). A medida que se vayan desarrollando ligandos emisores de positrones suficientemente vidos para otros receptores, podrn ser utilizados tambin para la visualizacin de las correspondientes zonas cerebrales con las tcnicas tomogrficas por emisin de positrones. Estas tecnologas ofrecen la posibilidad de estudiar cambios en los receptores in vivo en estados patolgicos y en respuesta a la ingesta de frmacos.
Neurofisiologa
Los transductores, con los que interacciona el receptor de un neurotransmisor, determinan en ltimo trmino la respuesta fisiolgica resultante de la unin del neurotransmisor al receptor en una neurona dada. La relativa facilidad con que los estudios de fijacin de ligando son capaces de caracterizar las interacciones entre los receptores y los neurotransmisores, no elimina la tarea ms ardua de definir los transductores acoplados con receptores es-
Figura 1-7. Corte coronal de un cerebro de mono que muestra los receptores muscarnicos. El corte se incub con (3N)-quinuclidinil benzilato, un potente antagonista de los receptores muscarnicos. A continuacin el corte se coloc sobre una pelcula de rayos X para revelar el autorradiograma. Esta imagen negativa pone de manifiesto los receptores muscarnicos en forma de puntos de color blanco: las reas de alta densidad de receptores, como el ncleo caudado (C), el putamen (P) y el crtex (Cx) aparecen de color blanco; las reas de baja densidad de receptores como el cuerpo calloso (CC) aparecen de color negro.
13
do desde las micropipetas hacia la neurona. Con este procedimiento pueden ser determinados los efectos del neurotransmisor o del frmaco administrados tpicamente sobre la actividad espontnea de la neurona o la respuesta de sta ante una aferencia excitadora o inhibidora. Para obtener una informacin ms precisa acerca de los canales inicos concretos implicados en las alteraciones de la respuesta electrofisiolgica, los investigadores han empleado cada vez ms las tcnicas de registro intracelular, en las que una fina micropipeta es insertada en el cuerpo neuronal para medir los cambios de voltaje a travs de la membrana neuronal que se producen como respuesta a la aplicacin del neurotransmisor sobre la superficie de la neurona. Los estudios de registro intracelular en el animal intacto son sumamente difciles, es como pretender pinchar una uva colgada de un palo de 30 metros de altura. De acuerdo con esto, los investigadores estn trabajando en la actualidad con estudios de cortes finos del tejido cerebral que se conservan vivos durante varias horas, por perfusin mediante un medio fisiolgico oxigenado. En este tipo de preparaciones, las neuronas que nos interesan pueden observarse directamente con un microscopio de contraste de fases, y el electrodo de registro intracelular puede ser in-
sertado en las neuronas previamente identificadas, bajo control visual directo. Finalmente, un procedimiento nuevo para obtener informacin lo ms precisa posible sobre el acoplamiento entre receptores concretos con un canal inico determinado, es el pinzamiento de canal en el que un fragmento microscpico de membrana neuronal es mantenido por medio de aspiracin en la punta de una micropipeta. Con este mtodo, el flujo de corriente a travs de los canales inicos individuales puede ser controlado mediante la exposicin del canal de la membrana a los receptores antagonistas. Modificando la composicin inica, es posible determinar los canales inicos especficos que estn afectados por la influencia del antagonista (sodio, potasio, calcio) y la influencia cintica del antagonista sobre la dinmica del canal (tiempo de apertura, tiempo de circulacin, dimetro del canal, etc.). Aunque las propiedades del canal inico pueda parecer que estn lejos de la psiquiatra clnica, proporcionan la base fisiolgica para la estimulacin neuronal. Por tanto, la funcin de los canales es una consideracin importante cuando se habla de la fisiopatologa de los trastornos psiquitricos y los efectos globales de frmacos psicotrpicos. De hecho, el frmaco anticonvulsivo carbamacepina, utilizado en el tratamiento del trastorno bipolar, tiene como principal accin un efecto directo sobre la puerta de entrada de ciertos canales de Na+.
Canales Ligand-gated
Los canales ligand-gated son protenas receptoras neurotransmisoras que contienen una zona de unin y un poro en el canal. Para formar el poro, cada subgrupo de la protena atraviesa la membrana cuatro veces. Los receptores parecen estar formados por cinco subgrupos diferentes ordenados en forma de barril. La activacin de este tipo de receptores, que contienen canales inicos intrnsicos de rpida respuesta, es responsable de la transmisin rpida de informacin de extremo a extremo del cerebro. El neurotransmisor excitador ms importante en el cerebro parece ser el glutamato. Un subgrupo de receptores de membrana cierran directamente los canales de Na+ de manera que cuando el glutamato se une al receptor, el canal trans-membrana de la molecula receptora se abre para dejar entrar la afluencia de sodio, despolarizando as la neurona. Otros canales ligand-gated importantes en el sistema nervioso incluyen los receptores de acetilcolina nicotnicos. El neurotransmisor inhibidor ms importante en el cerebro es GABA, y en la mdula espinal el aminocido relacionado glicina. Los canales receptores de GABA y glicina admiten Cl, lo que, en consecuencia, produce una hiperpolarizacin de la membrana neuronal.
Figura 1-8. Tomografa por emisin de positrones de los receptores dopaminrgicos D-2 en un cerebro humano. Se ha utilizado como marcador (11 C)-espiperona. Obsrvese la intensa fijacin del caudado-putamen (C-P), una regin notablemente densa en receptores D-2. (Por cortesa de L. Tune).
14
Receptores unidos a una protena G (G-protein linked)

La neurotransmisin excitadora rpida en el cerebro parece ser llevada a cabo por una pequea cantidad de neurotransmisores, especialmente por glutamato. En comparacin, con slo una excepcin, (el receptor serotoninrgico 5-HT3), los receptores para todos los monoaminos y neuropptidos no cierran directamente los canales inicos, pero actan a travs de protenas estimuladoras de transduccin asociadas a la membrana llamadas protenas G. Como se ver, los receptores unidos a las protenas G estn constantemente involucrados en un proceso de modulacin de la respuesta de circuitos neurales. Esto aade una gran complejidad a la rpida transmisin de impulsos excitadores e inhibidores de glutamato, GABA y neurotransmisores relacionados por todo el sistema neural. Los receptores unidos a las protenas G que han sido analizados estructuralmente hasta ahora en estudios de clonacin molecular tienen una estructura general comn, que cruza la membrana neuronal siete veces (Kobilka, 1992). El dominio de fijacin del ligando parece estar en un bolsillo producido por estos dominios trans-membrana dentro del plano de la membrana. El acoplamiento a los mecanismos intracelulares de estimulacin tiene lugar en el lado del citoplasma de la membrana neuronal. Las protenas G, as llamadas porque unen nucletidos de guanina, se asocian con el interior de la membrana. La fijacin del ligando al receptor causa un cambio en la conformacin del receptor que activa las protenas G. Las protenas G, a cambio, transducen la estimulacin a efectos intracelulares. Las protenas G son heterotrmeras (es decir, protenas hechas de tres subunidades diferentes), las subunidades de las cuales se denominan alfa, beta y gama. Con muy pocas excepciones, las subunidades alfa, que son muy diversas, son las que causan especficamente la activacin de protenas G (Simon et al., 1991; Figura 1-9). En el estado inactivo, las unidades alfa, beta y gama estn unidas y una molcula de difosfato de guanosina (GDP) se une a la subunidad alfa. Cuando el GDP se activa por un receptor, es reemplazado por un trifosfato de guanosina (GTP) en la subunidad alfa, que luego se disocia del complejo con beta y gama. Esta subunidad activa permanece asociada con la membrana, donde puede causar la apertura o el cierre de canales de intercambio inico especficos o la activacin o inhibicin de enzimas que producen segundos mensajeros intracelulares. La accin en particular depende del tipo de subunidad alfa que se activa por un receptor dado.
Por ejemplo, los receptores beta-adrenrgicos y dopamnicos D1 activan una protena G llamada Gs. La protena G entera se nombra por su subunidad alfa. La subunidad alfa activa puede estimular ciertos canales de intercambio inico de calcio (los canales tipo-L que son el tipo bloqueado por frmacos tipo verapamino) y adenilciclasa, una enzima que cataliza la produccin del segundo mensajero, AMP cclico. La subunidad alfa activa tiene una actividad intrnseca GTPasa que conduce a hidrlisis de GTP a GDP. Cuando esto ocurre, la subunidad alfa se reasocia con beta y gama y la accin finaliza. Los efectos de las protenas G en los canales inicos alteran las respuestas de neuronas a la estimulacin subsecuente a travs de neurotransmisores excitadores o inhibidores, como el glutamato y el GABA. Por ejemplo, los pptidos opiceos endgenos pueden actuar a travs de un tipo de receptor (designado mu) para activar un canal K+. Debido a que la fuerza de conduccin electroqumica de K+ est fuera de las neuronas, estos opiceos decrecen la carga positiva neta dentro de neuronas diana. La neurona, por tanto, responde menos al glutamato (es decir, se muestra menos inclinada a disparar). Este es un mecanismo por el que las protenas G pueden alterar la respuesta de los circuitos neurales. Adems de sus efectos en los canales inicos, las protenas G regulan las enzimas que producen los segundos mensajeros. Como ya se ha descrito, los receptores ligados a Gs inhiben la adenilciclasa para incrementar la produccin de AMP cclico. Los receptores ligados a Gi inhiben la adenilciclasa. Otra protena G, llamada Gq, activa la enzima fosfolipasa C, que hidroliza ciertos fosfolpidos en la membrana para generar segundos mensajeros, diaciglicerol y trifosfato de inositol (IP3) (Figura 110). Otras vas importantes de segundos mensajeros parecen incluir metabolitos del cido arachidnico y xido ntrico. Aunque la cantidad de segundos mensajeros que se encuentra en neuronas es grande, los mecanismos de accin pueden generalizarse conceptualmente. Con pocas excepciones (por ejemplo, el AMP cclico puede cerrar independientemente ciertos canales inicos del sistema olfativo), los segundos mensajeros ejercen sus efectos biolgicos principales a travs de protein-quinasas especficas. Las protein-quinasas son enzimas que mueven grupos de fosfato de ATP a substratos de protena especficos. Basados en su carga y tamao, los grupos de fosfatos alteran la conformacin de protenas y por tanto su funcin. Debido a que la fosforilacin es una modificacin covalente, puede actuar durante una extensin de tiempo muy larga. Los substratos para la fosforilizacin activada del segundo mensajero incluyen canales inicos, receptores, en-
Ca ++
15
GDP ATP cAMP
GTP
PO 4
Proteinquiasa A
PO 4
Ncleo
PO 4
ARN
Tirosina hidroxilasa
CREB
ADN
Figura 1-9. Sistema de segundo mensajero de adenilato. En la parte superior se muestra un esquema de la membrana neuronal. Los receptores neurotransmisores (trama de puntos grises), los canales (se muestra un canal de Na + en negro), y adenilciclasa (AC) son protenas integrales de la membrana. Las subunidades de las protenas G heterotrimricas (ver texto) , y estn asociadas a la superficie interna de la membrana. Se muestra un receptor no ocupado a la izquierda; en esta circunstancia, la subunidad alfa se une a GDP y las subunidades de protena G se asocian totalmente. Con el ligando de un neurotransmisor (tringulo negro que se muestra a la derecha), el receptor puede activar la protena G. La GDP se intercambia por GTP, y la subunidad alfa se disocia de beta y gama. Aqu, -s se muestra en el centro activando adenilciclasa que cataliza la sntesis del segundo mensajero intracelular c-AMP de la adenosina trifosfato (ATP). El c-AMP activa la proten-quinesa A (que se muestra fosforilando el canal de calcio), la enzima sintetizadora de neurotransmisores tirosina hidroxilasa, y el factor de transcripcin CREB en el ncleo de la neurona.
zimas sintetizadas por neurotransmisores, protenas citosquelticas y protenas de control de la transcripcin gentica. A travs de la activacin de la fosforilizacin protenica, los receptores ligados a una protena G regulan diversas funciones dentro de la clula, y al regular la expresin gentica, incluso regulan los constituyentes protenicos de la clula. La fosforilizacin que puede, por ejemplo, desactivar los receptores o aumentar o disminuir la probabilidad de apertura de los canales inicos de barrera de voltaje, alterarn el modo en que las neuronas procesan la informacin, por lo que alterarn el comportamiento de los circuitos cerebrales de formas significativas. Claramente, en consecuencia, el cerebro no es un simple sistema de alta tensin en donde la informacin se transmite a travs de potenciales excitatorios o inhibitorios. El cerebro est modificando constantemente la forma en que sus neuronas pueden procesar la informacin. Esta plasticidad del funcionamiento neuronal es fundamental en procesos como el aprendizaje y la memoria, aunque probablemente tambin est implicado en el origen de estados psicopatolgicos (por ejemplo, los cambios de estado que aparecen al comienzo de la depresin) y, tal
como se describir ms adelante, esta plasticidad puede ser la base del mecanismo de accin de muchas drogas psicotrpicas.
NEUROANATOMA
Mtodos
Si bien una descripcin detallada de la neuroanatoma del cerebro est fuera de la intencin de esta revisin, merecen mencionarse algunos temas y estrategias de investigacin nuevos. Hasta hace quince aos, los procedimientos neuroanatmicos estaban restringidos a las tcnicas de tincin que ponan de manifiesto a las neuronas, en base a unas caractersticas qumicas que no eran exclusivas de ninguna clase particular de ellas. Las conexiones entre neuronas podan ser deducidas solamente a partir de mtodos indirectos, por medio de estudios realizados con microscopio electrnico, que resultaban muy laboriosos. Dos adelantos tcnicos principales han facilitado un progreso enorme en el conocimiento de la organizacin funcional del cerebro. El primero emplea anticuerpos a fin de iden-
16
Figura 1-10. Sistema de segundo mensajero fosfatidilinositol. Muchos receptores neurotransmisores estn conectados va las protenasG Gq y, en ocasiones Go a la enzima fosfolipasa C, que hidroliza fosfatidilinositol 4,5-bis-fosfato (PIP 2) para generar segundos mensajeros, diaciglicerol e inositol 1,4,5-trifosfato (Ins 1,4,5 P3, ms a menudo abreviado IP3). El IP 3 acta en las neuronas liberando calcio de almacenamiento intracelular. Se metaboliza en formas que pueden ser inactivas, incluyendo inositol 1,4,5-tetrafosfato (Ins 1,3,4,5 P4). Estas formas son metabolizadas eventualmente para producir tres monofosfatos de inositol diferentes que se distinguen slo por el tomo de carbono al que el grupo de fosfatos se une. La sntesis de inositol de glucosa-6-fosfato tambin debe pasar por un intermediario de monofosfato inositol. Todos los monofosfatos de inositol se metabolizan por la enzima fosfatasa de monofosfato inositol. El litio en concentraciones teraputicas inhibe esta enzima. Como resultado, en presencia de litio, los monofosfatos de inositol no pueden desfoforilarse para producir el inositol libre que se necesita para regenerar fosfatidilinositol 4,5-bifosfato. Tambin se muestra en la figura la habilidad del litio para inhibir una enzima adicional en este ciclo (inositol polifosfato 1-fosfatasa), que se requiere para los dos pasos metablicos anteriores de la va de reciclaje. Adaptado de Hyman y Nestler, 1993.
17
tificar las caractersticas qumicas de las neuronas, y el segundo revela con facilidad las conexiones neuronales. El alto grado de especificidad de las interacciones entre antgenos e inmunoglobulinas, permite la tincin selectiva de partes concretas del tejido, como los neurotransmisores, las enzimas, o los marcadores de superficie contra los que el antisuero ha sido preparado. La eficacia y especificidad de estas tcnicas han sido potenciadas por la introduccin de metodologas con capacidad de generar anticuerpos monoclonales, que reconocen una sola parte de un antgeno (es decir, un epitope). Con los procedimientos inmunocitoqumicos estndar, se prepara el antisuero capaz de reconocer un mayor nmero de epitopes. Aunque puede perderse algo de especificidad, aumenta la posibilidad de detectar el antgeno de inters. Tanto si se utilizan anticuerpos monoclonales como policlonales, stos son incubados con secciones de tejido y unidos al antgeno que reconocen. Esta reaccin es despus visualizada al incubar este corte con un segundo anticuerpo, como la inmunoglobulinaovina antirratn, a la que se le ha unido un marcador visualizable como la enzima peroxidasa. A continuacin, los cortes se revelan y puede ser observado el antgeno en neuronas concretas y en sus estructuras, ya sea con los procedimientos del microscopio ptico o electrnico. La va inmunocitoqumica ha sido explotada en grado considerable para visualizar la anatoma de las neuronas que utilizan neurotransmisores especficos, basndose en el desarrollo de anticuerpos contra el neurotransmisor, contra su enzima de sntesis especfica, o contra un neuropptido. A diferencia de las tcnicas histolgicas tradicionales que revelan las neuronas partiendo de una base de caractersticas comunes a todas ellas, como la presencia de cido nuclico cuando se emplean las tinciones de Nissl, o la capacidad de ser impregnadas con iones de plata en la tincin de Golgi, la tincin inmunoqumica para los antgenos relacionados con neurotransmisores permite la visualizacin de una neurona y su axn basndose en el tipo de neurotransmisor utilizado (Figura 1-11). El enfoque inmunocitoqumico est siendo extendido para identificar otros componentes importantes del sistema nervioso, con objeto de entender mejor su organizacin y funcin a nivel molecular. Un mtodo adicional para identificar los componentes especficos de las neuronas es la hibridacin in situ. Esta tcnica explota el principio del emparejamiento de base complementario que caracteriza los cidos nuclicos. Los mensajeros ARNm que codifican protenas celulares son de una hebra. Un ARN de una sola hebra o sonda de ADN hibridar
slo con un ARNm complentario dentro de una seccin de tejido bajo las condiciones experimentales correctas. De manera muy similar a lo que pasa en la autorradiografa del receptor, descrita anteriormente, la seccin puede despus yuxtaponerse sobre una pelcula. Los granos plateados pueden visualizarse describiendo el ARNm de inters. Combinada con la inmunohistoqumica, la hibridacin in situ ha revelado muchas especies moleculares que dan a neuronas determinadas sus identidades especficas.
Figura 1-11. Tincin inmunocitoqumica de fibras serotoninrgicas en el crtex somatosensorial del mono. Se incub un corte de 10 m de crtex de mono previamente fijado, con un anticuerpo antiserotonina de cobaya. Los complejos anticuerpo-serotonina en los axones serotoninrgicos se visualizaron mediante un anticuerpo ovino anti gamma-globulina de cobaya conjugado con fluorescena. Obsrvese la densa red de axones serotoninrgicos dispuestos aleatoriamente en el campo de observacin entre las capas I y II. P = superficie de la pa madre; V = vaso sanguneo. (Por cortesa de M.A. Wilson y M.E. Molliver.)
18
Un segundo mtodo que ha contribuido considerablemente a la comprensin de la organizacin cerebral, aprovecha el proceso de transporte axoplasmtico mediante el que las sustancias son transportadas de forma antergrada desde el cuerpo neuronal hacia la terminacin nerviosa, y de manera retrgrada desde la terminacin nerviosa hacia el cuerpo neuronal. Los cuerpos neuronales individuales pueden dar proyecciones que inerven distintas reas del cerebro. Para entender el papel funcional de un ncleo neuronal especfico, es esencial comprender qu neuronas inerva. Este tema puede estudiarse tanto con tcnicas de trazado retrgrado como antergrado. Con estos mtodos, se realiza una inyeccin mnima de un colorante o de otro marcador en una regin especfica del cerebro. El colorante es captado por las terminaciones nerviosas para ser transportado hasta los cuerpos neuronales en un perodo de 24 a 48 horas. Despus de este tiempo, los cuerpos neuronales que envan axones para inervar el rea inyectada pueden ser identificados en el cerebro debido al colorante. A la inversa, puede ser inyectado un colorante en la zona del cuerpo neuronal, que ser transportado en direccin antergrada para poner de manifiesto los axones y las terminaciones nerviosas que proceden de la neurona. Recientemente, estas tcnicas de trazado de vas han sido combinadas con las tcnicas de inmunocitoqumicas para determinar el circuito neuronal concreto de los sistemas neuronales de neurotransmisores especficos (Figura 1-12).
formacin hard del cerebro, sino con una alteracin de las funciones conductuales, afectivas, de activacin y cognitivas. Naturalmente, estos hallazgos no impiden pensar en la posibilidad de que anomalas mucho ms localizadas de las neuronas que inervan o que estn influidas por las proyecciones del sistema reticular, puedan contribuir tambin de manera sustancial en la etiologa o en las manifestaciones sintomticas de muchos trastornos mentales. Diversos componentes de la formacin reticular han sido muy bien caracterizados en cuanto a
Formacin reticular
Entre los sistemas neuronales de mayor inters para la psiquiatra estn los componentes de la formacin reticular (Coyle, 1986). Su implicacin en la fisiopatologa de las enfermedades mentales se basa en el descubrimiento casual de diversos tipos de agentes psicofarmacolgicos eficaces cuyo mecanismo de accin se ha atribuido a modificaciones en la neurotransmisin sinptica de zonas especficas del sistema reticular. Estos descubrimientos han conseguido validez neurofisiolgica y neuroanatmica en el contexto de una organizacin y funcin inusuales de las neuronas de la formacin reticular del cerebro. Actualmente, la mayora de las pruebas apuntan a que las neuronas del sistema reticular no participan en la transmisin de informacin especfica, sino que ms bien modulan la funcin neuronal en amplias zonas del sistema nervioso, especialmente en las regiones cortical y lmbica. Por tanto, la alteracin de sus funciones generalmente no se asocia con signos neurolgicos focales, habitualmente relacionados con una lesin de importantes sistemas de procesamiento de in-
Figura 1-12. Tcnica de trazado neuronal retrgado. A) Se inyecta una cantidad de sustancia marcadora (por ejemplo, peroxidasa de rbano) en un rea de inervacin neuronal. Tras un intervalo adecuado para permitir el transporte retrgado del marcador hacia el cuerpo celular de la neurona, se efectan cortes histolgicos y se examinan los cuerpos celulares de las neuronas. Si una neurona enva axones que inervan el rea inyectada, contendr el marcador en su cuerpo celular, y en caso contrario se hallar exenta de marcador. B) Neuronas colinrgicas del septo medio visualizadas mediante microscopio de campo oscuro. Estas clulas haban sido marcadas previamente con peroxidasa de rbano mediante inyeccin del marcador en el hipocampo, la regin inervada por estas neuronas septales.
19
sus neurotransmisores. Entre ellos, son de particular importancia para la psiquiatra las vas noradrenrgicas, serotoninrgicas, dopaminrgicas y colinrgicas.
Neuronas noradrenrgicas
Las neuronas noradrenrgicas utilizan la noradrenalina como neurotransmisor principal. En la Figura 1-2 se muestra la va de sntesis de la noradrenalina. El ncleo noradrenrgico principal es el locus ceruleus, llamado as por su color azul en las preparaciones frescas de cerebro. El locus ceruleus se localiza bilateralmente en el suelo del cuarto ventrculo (Figura 1-13). Existen otros ncleos noradrenrgicos y adrenrgicos (neuronas liberadoras de adrenalina) esparcidos por la protuberancia, que inervan en primer lugar el tronco cerebral. Las 40.000 neuronas que se estiman existen en el locus ceruleus humano son la fuente principal de inervacin noradrenrgica para la mayor parte del SNC, incluyendo la mdula espinal, el cerebelo y las estructuras del prosencfalo. Se calcula que una amplia arborizacin axonal abarca ms del 95 % del volumen celular de cada neurona noradrenrgica del locus ceruleus. Como los otros componentes del sistema reticular, los axones noradrenrgicos son expansiones finas y desmielinizadas, que contienen neurotransmisores en toda su longitud. Los abultamientos arrosariados distribuidos a lo largo de los axones son zonas de contacto sinptico especializado conocidas con el nombre de sinapsis de paso. Tal como queda especialmente bien representado en el crtex cerebral, los axones noradrenrgicos individuales establecen contactos sinpticos con miles de neuronas, y el rbol axnico aparece como una densa trama que se ramifica a travs de todas las capas del crtex cerebral (ver Figura 1-13). Adems, las neuronas noradrenrgicas individua-
les envan axones que inervan regiones del cerebro muy diversas funcionalmente (por ejemplo, crtex cerebral y cerebelo). En el cerebro, los efectos de la noradrenalina estn mediados en gran parte por dos clases de receptores: los receptores alfa y los receptores beta (Tabla 1-14). Estas categoras estn subdivididas a su vez, en funcin de sus caractersticas farmacolgicas y sus efectos fisiolgicos, en receptores alfa1, alfa-2, beta-1 y beta-2. La estimulacin de receptores alfa-1 se traduce en una excitacin neuronal que puede ligarse parcialmente con el movimiento de fosfoinostidos. La clonidina y la alfa-metilDOPA, son potentes agonistas de los receptores alfa-2. La activacin de los receptores alfa-2 se asocia habitualmente con una disminucin en la actividad noradrenrgica central y perifrica. Los receptores alfa-2 en el soma noradrenrgico, que son estimulados normalmente a travs de colaterales noradrenrgicos recurrentes, inhiben la tasa de descarga de las neuronas noradrenrgicas. Adems, la activacin de los receptores alfa-2 en las terminaciones noradrenrgicas reduce la cantidad de noradrenalina liberada, seguramente por disminucin del flujo de calcio durante la despolarizacin de la terminacin nerviosa. Estos efectos inhibidores de los alfa-2 agonistas de la clonidina explican su accin ansioltica y su eficacia en la reduccin de ciertos sntomas en la abstinencia aguda de opiceos. Los receptores beta-1 y beta-2 se distinguen principalmente por una actividad noradrenrgica intrnseca menor en estos ltimos y por su diferente sensibilidad a los antagonistas. En el cerebro, los receptores beta-1 parecen tener un alto grado de localizacin en las neuronas, mientras que los receptores beta-2 se asocian predominantemente, aunque no de manera exclusiva, con elementos no neuronales tales como las clulas gliales. La activacin de los receptores beta se traduce en una estimulacin de la adenil ciclasa a travs de la protena Gs, y en una elevacin de los niveles intracelulares del AMP cclico. Por tanto, las respuestas celulares de los agonistas beta reflejan la activacin de proten-quinasas dependientes del AMP cclico, que alteran transitoriamente la actividad de enzimas especficas a travs de una fosforilacin reversible. La desensibilizacin de los receptores beta corticolmbicos sa ha asociado con el mecanismo de accin de los antidepresivos.
Neuronas serotoninrgicas
Las neuronas liberadoras de serotonina tienen sus somas localizados en un grupo de ncleos que rodean el acueducto en el cerebro medio, conocidos como Ncleos del rafe (Figura 1-14). Al igual que las neuronas noradrenrgicas del locus ceruleus, las
Figura 1-13. Proyecciones primarias del locus ceruleus noradrenrgico.
20
Los efectos serotoninrgicos en el sistema lmbico pueden tener un papel en el control del estado de nimo, la ansiedad, la agresin, y en la modulacin del dolor.
Neuronas dopaminrgicas
Para la investigacin psiquitrica, han sido de especial inters tres grandes sistemas dopaminrgicos (ver Figura 1-15). Los cuerpos celulares dopaminrgicos ampliamente pigmentados localizados en la sustancia negra proporcionan una inervacin considerablemente densa al caudado y al putamen, y constituyen aproximadamente un 15% de las sinapsis de dichas estructuras. Esta va de axones desmielinizados, provista de un gran nmero de colaterales, se ramifica en una fina filigrana de axones repletos de varicosidades, que proporcionan millares de sinapsis de paso. Las proyecciones dopaminrgicas negrostriadas estn ntimamente implicadas en la iniciacin, mantenimiento y ejecucin ajustada de las actividades motoras, y pueden influir de forma similar en las funciones cognitivas, como reflejo de la gran conexin que va desde el crtex frontal hasta el caudado. La degeneracin de la va dopaminrgica negrostriada provoca los sntomas de la enfermedad de Parkinson, y el bloqueo de los receptores dopaminrgicos por los neurolpticos genera intensos efectos colaterales extrapiramidales, lo que indica una alteracin en la neurotransmisin dopaminrgica del estriado.
Figura 1-14.
Vas de las neuronas serotoninrgicas del rafe.
neuronas serotoninrgicas proporcionan una inervacin formada por numerosos colaterales que se distribuyen hacia prcticamente todas las reas del SNC. Sin embargo, los componentes de los ncleos del rafe proporcionan una inervacin ms regionalizada. Los efectos postsinpticos de la serotonina estn mediados por varios receptores pre y post-sinpticos (Tabla 1-4). Los estudios recientes farmacolgicos y de clonacin sugieren que existen al menos cuatro tipos de receptores serotoninrgicos (5-hidroxitriptamina (5-HT)) con mltiples subtipos. Los receptores 5-HT1 relevantes en la farmacologa humana son el receptor 5-HT1a, un receptor mayoritariamente presinptico, zona de accin del frmaco ansioltico buspirona; el receptor 5-HT1c, que es tanto pre como postsinptico; y el receptor 5-HT1d, del cual es antagonista el nuevo frmaco sumatriptano. El receptor 5-HT2 es un receptor postsinptico que parece ser la zona de accin clave de la dietilamida del cido lisrgico (LSD), la mescalina y otros alucingenos relacionados. Los receptores 5-HT1a y 5-HT1d inhiben la adenilciclasa y activan el potencial inico de los canales de K + a travs de Gi. Los receptores 5HT1c y 5-HT2 activan las vas del segundo mensajero inositol trifosfato/diacilglicerol. El receptor 5-HT3 es el nico receptor monoamino conocido que sea un canal ligand-gated . El frmaco reciente antiemtico odansetrn antagoniza los efectos excitadores de la serotonina en la recepcin 5-HT3 en la zona de la mdula qumicamente activada. (El otro tipo de receptor significativo de estas neuronas es el receptor dopamnico D2; por tanto, los antiemticos ms antiguos son antagonistas de receptores dopaminrgicos.) No est clara la funcin de los receptores 5-HT4. Las neuronas serotoninrgicas, a travs de la inervacin del crtex cerebral, han sido asociadas con la regulacin del estado de vigilia.
Figura 1-15. Las tres principales vas dopaminrgicas. Comprenden la nigrostriada, la mesocorticolmbica (que tiene origen en A-10) y la va del ncleo arqueado al infundbulum.
21
Los somas neuronales dopaminrgicos de la regin A-10 , situados ms centralmente, inervan el nucleus accumbens, la zona central del circuito lmbico, y tambin el crtex frontal, el crtex cingulado y el hipocampo. La inervacin cortical est mucho ms dispersa que en el estriado y en el accumbens, y parece tener una distribucin complementaria a la de los aferentes noradrenrgicos (Levitt et al., 1984). La proyeccin dopaminrgica de la regin A-10 al ncleo accumbens se ha implicado como un circuito cerebral de recompensa, que mediatiza los efectos positivos del abuso de drogas, incluyendo la cocana, la anfetamina y probablemente los opiceos. Las proyecciones dopaminrgicas corticales pueden estar implicadas en la atencin, la memoria activa y, por inferencia, la integracin cognitiva. Basndose en las propiedades antagonistas dopamnicas de los frmacos antipsicticos (vase ms adelante), se ha supuesto que en la esquizofrenia y otros trastornos psicticos existe una disfuncin de los circuitos dopaminrgicos mesocorticolmbicos. Finalmente, un grupo de cuerpos neuronales dopaminrgicos, localizados en el ncleo arqueado del hipotlamo, emite axones que terminan en los senos venosos de la hipfisis. Estas proyecciones dopaminrgicas inhiben, en concreto, la liberacin de la prolactina, una hormona de la hipfisis. Este papel fisiolgico ha sido ampliamente utilizado como medida perifrica de las alteraciones de la neurotransmisin dopaminrgica central. Es el caso de los neurolpticos que, como potentes bloqueadores de los receptores D2 de dopamina, aumentan la liberacin de prolactina. Los efectos sinpticos de la dopamina parecen ser mediados por varios receptores farmacolgica y fisiolgicamente diferentes (Tabla 1-4). Es probable que no se hayan descubierto todos los tipos de receptores dopaminrgicos y, actualmente, no existe una nomenclatura establecida. En base a su estructura (que se deduce de la clonacin molecular) y sus propiedades farmacolgicas, los receptores dopaminrgicos pueden agruparse en dos familias, llamadas tipo D1 (los receptores D1 y D5, tambin llamados D1a y D1b por algunos) y las tipo D2 (los receptores D2, D3 y D4, tambin llamados D2a, D2b y D2c por algunos). Adems, se ha encontrado una forma larga y una corta del receptor D2 a partir de la divisin del receptor D2 ARNm, pero no se han aclarado las diferencias funcionales de las dos formas. Los diferentes tipos de receptores tienen distribuciones que se solapan aunque no son idnticas en las regiones del cerebro inervadas por las fibras dopaminrgicas. Los receptores D1 y D5 activan la adenilciclasa a travs de Gs. El receptor D2 inhibe la adenilciclasa y activa el potencial inico de un canal de K+ a travs de Gi. Los efectos precisos de segundo
mensajero de los receptores D3 y D4 todava no son claros. Los frmacos antipsicticos son antagonistas de los receptores D2, D 3 y D4. Una observacin intrigante, que se comenta ms abajo, es que la clozapina, un frmaco antipsictico atpico, tiene una afinidad particularmente alta para los receptores D 4 (Van Tol et al., 1991). Su baja afinidad al receptor D2 probablemente explica la falta de efectos extrapiramidales.
Neuronas colinrgicas
La mayor fuente de inervacin colinrgica que recibe el crtex cerebral, el hipocampo y las estructuras lmbicas, es un complejo de grandes somas neuronales muy sensibles a la acetilcolinesterasa, localizados en la base del prosencfalo (Figura 1-16). El ncleo basal de Meynert, un grupo algo disperso de somas colinrgicos localizado en la zona ventral y media del globus pallidus, enva axones que inervan el crtex cerebral. La banda diagonal de Broca, localizada ms hacia delante, y el ncleo septal medio inervan la formacin hipocmpica y el crtex cingulado. Las ramificaciones terminales de los aferentes colinrgicos proporcionan una trama de fibras orientadas al azar, distribuidas hacia todas las capas del crtex cerebral. Por el contrario, en el hipocampo, aparece una distribucin especfica mucho ms laminar, especialmente en la circunvolucin dentada. La inervacin densa del caudado y del putamen no est proporcionada por estas proyecciones ascendentes, sino por neuronas de circuito local, y las ramificaciones de su axn se limitan al ganglio basal. Los efectos postsinpticos de la acetilcolina en el prosencfalo parecen estar mediados sobre todo
Figura 1-16. Neuronas colinrgicas prosenceflicas. Las neuronas colinrgicas de la base del prosencfalo (incluyendo el ncleo basal de Meynert, la banda diagonal de Broca y el ncleo septal medio) inervan estructuras del crtex cerebral, el hipocampo y el sistema lmbico. El estriado posee un circuito local de interneuronas colinrgicas.
22
TABLA 1-4. FARMACOLOGIA DE LOS RECEPTORES DE MONOAMINA Y ACETILOLINA Agonistas clnicamente relevantes Antagonistas cnicamente relevantes
Receptor
Receptores adrenrgicos
Coupling
1-adrenrgicos (4 subtipos) 2-adrenrgicos (3 subtipos) -adrenrgicos (3 subtipos: 1 en el corazn; 2 en los pulmones) Receptores dopaminrgicos D 1 ( o D 1A) D 2 (o D 2A) D3 (o D 2B) D4 (o D 2c) D 5 (o D 1B) Receptores serotoninrgicos (5-HT) 5-HT1A 5-HT1B 5-HT1D 5 - H T 1E 5-HT1F 5 - H T 2A 5 - H T 2B 5-HT2c (antes 5-HT 5-HT3 5-HT4 Receptores muscarnicos M1 M2 M3 M4
Fenilefrina Clonidina Isoproterenol
Prazosina Yohimbina Propanolol
IP3/DG cAMP ; K+ canal cAMP
SFK38393 Bromocriptina Kiniporola Kiniporola SFK38393
SCH39166 Antipsicticos tpicos (selectivos raclopide) Antipsicticos tpicos Clozapina
cAMP cAMP ; + canal ; Ca++ canal desconocido cAMP cAMP
Agonista parcial buspirona (8-OH-DPAT selectivo) Sumatriptan
cAMP ; K+ canal cAMP cAMP cAMP cAMP Ritaserin (selectivo) Clozapina (no selectivo) Clozapina (no selectivo) Odansetron IP3/DG IP3/DG IP3/DG Canal Catinico intrnseco cAMP
1C)
-Metilo-5-HT -Metilo-5-HT -Metilo-5-HT 2-Metilo-5-HT 5-Metoxitriptamina Oxotremorina Oxotremorina Oxotremorina Oxotremorina Oxotremorina
Atropina Pirenzepina selectivo Metroctamina selectivo Hexahidrosiladifeidol selectivo Tropicamide IP3/DG cAMP ; K+ canal IP3/DG cAMP
Nota: DG = Diacilglicerol; 8-OH-DPAT = hidroxi-2-(di-u-propilamino)tetraln.
por los receptores muscarnicos. Aunque en el cerebro puede ser demostrada la existencia de respuestas nicotnicas, este tipo de receptores parecen ser distintos a los que median los efectos de la acetilcolina en la unin neuromuscular perifrica. Aparte del propio efecto psicotrpico central de la nicotina, todava se conoce poco la influencia de los receptores nicotnicos en el cerebro. Por lo menos se han identificado cuatro tipos de receptores muscarnicos colinrgicos gracias a los estudios farmacolgicos y de clonacin (M1-M4) (Tabla 1-4). Un quinto receptor muscarnico identificado por clonacin no se ha establecido todava como funcional. Los receptores muscarnicos que median los efectos de la acetilcolina en las prolongaciones colinrgicas corticales y del hipocampo tienen una funcin integradora en las funciones cognitivas ms elevadas, especialmente en la me-
moria a corto plazo y su traduccin en memoria a largo plazo. As pues, los frmacos que bloquean estos receptores, o la destruccin de las prolongaciones colinrgicas de la base del prosencfalo en animales de experimentacin, provocan defectos selectivos en las funciones de la memoria reciente. Hay que sealar que una prdida importante de axones colinrgicos del crtex y del hipocampo parece ser una alteracin habitual de la enfermedad de Alzheimer, y puede contribuir al deterioro cognitivo tpico de esta enfermedad (Coyle et al., 1983). El sistema colinrgico se ha relacionado tambin con los estados de nimo, ya que los antagonistas de los receptores muscarnicos mejoran el estado de nimo en el hombre, mientras que la fisostigmina, un inhibidor de la acetilcolinesterasa de accin central, se ha descrito que provoca un estado de nimo depresivo. Finalmente, las pro-
23
yecciones colinrgicas tienen un papel en el sueo, especialmente en el sueo REM. Durante ste, las neuronas noradrenrgicas del locus coeruleus estn tnicamente inhibidas, mientras que las neuronas colinrgicas estn activas. Los frmacos colinrgicos estimulan el REM, y los frmacos anticolinrgicos lo antagonizan. El hecho de que la latencia del REM disminuya durante una depresin mayor (consistente con una hiperactividad de las neuronas colinrgicas) hace ms evidente que los sistemas colinrgicos pueden tener un papel en la regulacin y en los trastornos del estado de nimo.
Glutamato
El glutamato es el neurotransmisor excitador ms importante del cerebro. Algunos ejemplos estudiados de neuronas que utilizan glutamato, incluyen las clulas piramidales en el crtex cerebral, las clulas hipocmpicas (Figura 1-18), y los aferentes sensoriales primarios. La mayor parte de la neurotransmisin excitadora en el cerebro utiliza receptores de glutamato que son canales ligand-gated. Estos receptores han sido llamados por sus antagonistas farmacolgicos, cainato, cido--amino-3-hidroxil-5-metil-4-fosfonobutrico (AMPA), y Nmetil-D-aspartato (NMDA). Los subtipos de estos receptores son en la actualidad sujeto de intensa investigacin basada en la clonacin molecular de las subunidades receptoras nuevas (Nakanishi et al., 1990). Tambin hay receptores de glutamato que activan las protenas G, actualmente conocidas como receptores de glutamato metabotrpicos. Los estudios sobre clonacin tambin han identificado mltiples subtipos de estos receptores. La unin del glutamato causa que los receptores de cainato y AMPA abran un canal intrnsico de Na +, aunque ciertos subtipos tambin pueden admitir Ca ++. Los receptores de NMDA son nicos porque su canal, que puede permitir la entrada de Na+ y Ca ++, es bloqueado por Mg+ en ciertas condiciones. La activacin de los receptores de NMDA slo puede ocurrir cuando dos hechos se dan simultneamente: el glutamato debe adherirse al receptor y la membrana debe despolarizarse (por activacin de los receptores de glutamato noNMDA que lo rodean), lo cual permite que el Mg+ salga por el canal. Debido a que hacen falta dos hechos simultneos para la activacin del receptor
Aminocidos
En el cerebro, los principales neurotransmisores excitadores e inhibidores son los aminocidos Lglutmico y GABA. Su amplio papel en el procesamiento de la informacin indica que estn localizados en un gran nmero de sistemas neuronales distintos en todo el cerebro, al revs que las neuronas de la formacin reticular, cuyos somas estn concentrados principalmente en ncleos concretos dentro del tronco cerebral.
GABA
Las neuronas GABArgicas son especialmente importantes para la psiquiatra porque numerosos sedantes, ansiolticos y anticonvulsivantes ejercen sus efectos a travs de la activacin de los receptores GABA (ver ms adelante). En el crtex cerebral, el hipocampo y las estructuras lmbicas, las neuronas GABArgicas son predominantemente neuronas de circuito local que tienen tanto sus somas como sus terminaciones axnicas dentro de dichas estructuras (ver Figura 1-17). En realidad, domina en ellas la neurotransmisin inhibidora GABArgica, dado que el bloqueo farmacolgico de los receptores para el GABA con el frmaco bicuculina provoca una desinhibicin difusa y convulsiones. Las neuronas GABArgicas pueden ser tambin neuronas con proyecciones de largo recorrido en otras reas del cerebro. Por ejemplo, las eferencias principales que desde el caudado-putamen se dirigen hacia el globus pallidus y la sustancia negra, son neuronas GABArgicas. Aparte de su vulnerabilidad en la enfermedad de Huntington, lo que contribuye a los sntomas discinticos de esta enfermedad, descubrimientos recientes indican que en la discinesia tarda se produce la prdida de la eferencia GABArgica de largo recorrido. Los sntomas cerebelosos, tales como la ataxia que se manifiesta con una dosis excesiva de barbitricos, reflejan seguramente la potenciacin de la neurotransmisin GABArgica en este tipo de eferencias del cerebelo.
Figura 1-17. Principales vas GABArgicas. El neurotransmisor inhibidor GABA (cido gamma-aminobutrico) se sintetiza en un circuito local de clulas estrelladas del crtex cerebral, en las clulas cerebelosas de Purkinje y en las neuronas nigrostriadas.
24
NMDA (el receptor es un detector de coincidencias), los receptores NMDA se han considerado como un posible substrato para el aprendizaje asociativo. El glutamato ha sido implicado en un nmero creciente de trastornos neurolgicos y psiquitricos. Un hallazgo interesante para la psiquiatra es que los efectos psicotomimticos de la droga PCP penciclidina y los componentes relacionados son debidos a la habilidad de estos para bloquear el canal de receptores NMDA (Martin y Lodge, 1985). Debido a que el gutamato es el neurotransmisor de las neuronas piramidales corticales e hipocmpicas, se ha supuesto que los efectos disociativos y psicotomimticos del PCP pueden reflejar una interferencia con la neurotransmisin glutamatrgica en esos sistemas. Olney (1969) fue el primero en demostrar que la inyeccin perifrica de glutamato en animales recin nacidos produca un modelo selectivo de degeneracin neuronal que afectaba a las neuronas del ncleo arqueado del hipotlamo, los rganos circumventriculares del cerebro, y las capas ms internas de la retina. Propuso que la neurotoxicidad del glutamato era el resultado de una excitacin excesiva de las neuronas, mediada por receptores de glutamato excitadores. Estudios posteriores pusieron de manifiesto que la inyeccin intracerebral de agonistas, de los tres subtipos principales de receptores glutmicos (cido canico, cido quisculico y receptores de NMDA) mataban las neuronas prximas al lugar de la inyeccin pero no los axones de las neuronas alejadas o elementos no neurona-
les tales como las clulas gliales. Segn la localizacin de la inyeccin cerebral, estas excitotoxinas podan reducir la patologa de diversas enfermedades neurodegenerativas, incluidas la enfermedad de Huntington, la epilepsia del lbulo temporal y la degeneracin espinocerebelosa (Schwarz y Meldrum, 1985). Estas observaciones llevaron a los cientficos a preguntarse si el glutamato y otros neurotransmisores excitadores endgenos afines podan causar una degeneracin neuronal en el cerebro, en ciertas circunstancias, como resultado de una liberacin excesiva o de una inactivacin insuficiente. Con el desarrollo de antagonistas potentes y especficos de los receptores de NMDA, ciertos hallazgos recientes muy esperanzadores han ratificado esta hiptesis. El tratamiento con antagonistas de la NMDA previene la degeneracin de las neuronas del sistema lmbico causada por ataques persistentes en la degeneracin a neuronas del estriado como consecuencia de una hipoglucemia aguda, y del hipocampo como resultado de cinco minutos de isquemia completa. Estos resultados auguran el desarrollo de nuevas clases de medicamentos neuropsicotrpicos que puedan prevenir o restringir sensiblemente el dao cerebral como consecuencia de la hipoxia y la isquemia, las causas ms frecuentes de morbilidad aguda y muerte como consecuencia de infartos de miocardio y enfermedades vasculares (Robinson y Cole, 1988).
Purinas
As como ciertos aminocidos que construyen grupos de protenas (por ejemplo, el glutamato o la glicina) pueden actuar como molculas estimuladoras en el sistema nervioso, se ha visto que ciertos grupos de purinas construidos a partir de cidos nuclicos tambin pueden actuar como neurotransmisores. La adenosin purina acta a travs de dos tipos de receptores ligados a protenas G. Se ha establecido que los efectos estimulantes de la cafena son el resultado de su accin como un antagonista competitivo de los receptores de adenosina. Adems, parece ser que el ATP, la principal fuente de energa de las neuronas, tambin puede actuar como neurotransmisor. Un tipo de receptor ATP ha mostrado ser un canal ligand-gated.
Endorfinas
Tal y como se describe en este captulo, los neuropptidos ms importantes para la psiquiatra son las endorfinas. Esta familia de neuropptidos fue descubierta originalmente en estudios destinados a determinar si existan sustancias cerebrales endgenas que sirvieran como agonistas de los re-
Figura 1-18. Va glutamatrgica principal. El neurotransmisor excitador cido L-glutmico se libera en numerosas neuronas, como las clulas piramidales corticales e hipocmpicas, las clulas granulares cerebelosas, las fibras trepadoras cerebelosas y las aferentes sensoriales primarias.
25
ceptores de narcticos. Los pentapptidos met y leuencefalina fueron los primeros pptidos opiceos endgenos descubiertos, aunque estudios posteriores han revelado la existencia de una familia completa de estos pptidos con distintos efectos sobre las diversas subclases de receptores opiceos. En la Tabla 1-3 se indica una lista de los pptidos opiceos identificados en el cerebro. Las encefalinas se encuentran principalmente en neuronas de circuito local en diversas reas del SNC, pero tambin se encuentran en neuronas de proyeccin. Las encefalinas se encuentran en la sustancia gris situada alrededor del acueducto en el cerebro medio, que es una importante estacin de relevo para los estmulos dolorosos. Las interneuronas que contienen encefalina que liberan neuronas dopaminrgicas VTA de la inhibicin tnica a travs de las neuronas GABArgicas, pueden presentar parte del sustrato de la recompensa cerebral inducida por opio y, por tanto, de abuso y adiccin opicea. Las encefalinas se hallan tambin en altas concentraciones en el caudado, el putamen y en el globus pallidus, reas probablemente relacionadas con procesos motores. El pptido opiceo endgeno de mayor tamao, la beta-endorfina, tiene una doble localizacin en el cerebro. La beta-endorfina se localiza en un grupo de neuronas dentro del hipotlamo que emiten axones que se proyectan hacia las reas lmbicas. Adems, la beta-endorfina es segregada por los corticotropos en la hipfisis anterior. La colocalizacin de ACTH y beta-endorfina refleja el origen comn de estos dos pptidos a partir del precursor POMC. Durante etapas de estrs, la liberacin de ACTH y betaendorfina por parte de la hipfisis se incrementa notablemente. Y los altos niveles de beta-endorfina circulante pueden explicar la analgesia relacionada con el estrs. Es ms, las alteraciones hipotlamohipfisis-adrenales observables en las depresiones mayores, implican una secrecin excesiva de betaendorfina as como de ACTH y cortisol.
mtodos para identificar los genes que codifican las protenas implicadas en la estructura y funcin del cerebro, y los mtodos para estudiar la regulacin de la expresin gentica por estmulos ambientales, incluyendo drogas. Con el conocimiento, rpidamente creciente, acerca de la localizacin de los genes importantes para el funcionamiento cerebral en el genoma humano, habr probablemente en la prxima dcada una convergencia de informacin que aclarar la base molecular y celular de muchas enfermedades psiquitricas y de conductas no patolgicas.
Clonacin molecular
La aproximacin ms utilizada para identificar y localizar los genes ms importantes en relacin con el cerebro requiere la purificacin de la protena que interesa. La protena puede ser una enzima relacionada con la ndole del neurotransmisor, un receptor, un neuropptido o una protena estructural. La protena, o un fragmento importante de aproximadamente 20 aminocidos de longitud, es secuenciada para determinar la serie de aminocidos. Dado que se conocen los cdigos del ADN para cada aminocido en particular, es posible sintetizar un filamento de ADN capaz de codificar la secuencia entera de aminocidos. Debido a que se conoce el cdigo gentico, la secuencia de protena puede ser traducida a la inversa en una secuencia de ADN y ser utilizada para generar sondas de ADN sinttico marcadas radioactivamente (es decir, oligonucletido) que pueden utilizarse para identificar el gen que interese. Esto se consigue utilizando la sonda para la hibridacin de un fragmento de ADN complementario (ADNc) dentro de lo que se llama la biblioteca de ADNc. En resumen, el proceso de la clonacin molecular requiere enzimas llamadas endonucleasas de restriccin que cortan el ADN en secuencias especficas, y enzimas llamadas ligasas que pueden unir los fragmentos de ADN. Una biblioteca de ADNc contiene una mezcla de fragmentos de ADN que representan todos los genes expresados en un determinado tejido o tipo neuronal. Para desarrollar una biblioteca de ADN, un tejido particular (por ejemplo, una regin cerebral) se disecciona y homogeniza, y su ARNm es extrado qumicamente. Una muestra de tejido del ARNm da una representacin de todos los genes contenidos que han sido transcritos (o expresados). De manera que, por ejemplo, una muestra de estriatum contendra receptores dopaminrgicos codificados, pero no as el ARNm que codifica la hemoglobina. Las copias de ADN complementarias de cada ARN se producen luego en un proceso que incluye la enzima inversora transcriptasa (as llamada porque transcribe a la inversa ARN a ADN).
NEUROBIOLOGA MOLECULAR
Quizs los descubrimientos ms interesantes de la investigacin neurocientfica reciente procedan del uso creciente de las tcnicas de la biologa molecular (Hyman y Nestler, 1993). Estos mtodos abren considerables esperanzas para poder salvar el lapso entre la gentica clnica en psiquiatra, y los procesos moleculares que regulan la estructura y la funcin cerebral. Estos mtodos poderosos incluyen el anlisis de acoplamiento con los polimorfismos del DNA para localizar los genes que pueden ser responsables de trastornos psiquitricos,
26
Cada uno de los ADNc que salen como resultado deben ser propagados (es decir, clonados) insertndolos en un plsmido bacterial o en virus bacterifago de ADN. Ambos pueden servir de vector que puede replicarse de forma autnoma en bacterias como la Escherichia coli. Los plsmidos son pequeos crculos de ADN que contienen solo unos pocos genes; los plsmidos utilizados en la clonacin se disearon a partir de plsmidos resistentes a los antibiticos que ya se encontraban en la bacteria. La endonucleasa de restriccin se utiliza para abrir el vector de clonacin. Cada vector se vuelve a cerrar con ligasas despus de introducir un ADNc. La poblacin de plsmidos o bacterifaga, cada uno con un contenido de una copia de ADNc de un gene expresado en el tejido de inters, se vuelve a introducir en una Escherichia coli, donde se duplica. Cuando la bacteria se cultiva en un medio agar, cada una crecer hasta formar una colonia que contiene mltiples copias de un solo ADNc, la llamada biblioteca de ADNc. Se puede hacer un cribado en la biblioteca para hallar genes concretos utilizando sondas que detectarn secuencias particulares por emparejamiento de base complementaria. Un ejemplo del poder de este mtodo era la clonacin del gen que codifica la protena amiloidea, el mayor componente de las placas seniles neurticas en la enfermedad de Alzheimer. La protena amiloidea se purific de los cerebros de pacientes con la enfermedad de Alzheimer determinndose la secuencia de aminocidos. De esta secuencia, se sintetiz y utiliz una sonda para cribar una biblioteca de ADNc cerebral. Sin embargo, el poder de estos mtodos va ms all. Pueden utilizarse para la clonacin de ADNc para protenas que nunca han sido purificadas. Tal y como se ha descrito anteriormente, muchas protenas importantes en el sistema nervioso son miembros de familias relacionadas evolutivamente. stas incluyen receptores, transportadores y canales inicos. Recientemente, los transportadores de GABA y la noradrenalina se purificaron y clonaron (Pacholczyk et al., 1991). Entonces fue posible comparar sus secuencias y determinar qu regiones se conservaron entre las dos protenas transportadoras. Las regiones de conservacin de secuencias compartidas por protenas relacionadas generalmente representan dominios funcionales crticos que han sido preservados de la tendencia mutacional por la seleccin natural. Las sondas sintticas de ADN que codifican estas regiones conservadas se utilizan luego para cribar bibliotecas bajo condiciones que toleran un pequeo grado de desparejamiento entre la sonda y su complemento; alternativamente, la sonda se puede utilizar en un proceso que amplifica los ADNc a los que une una solucin (una tc-
nica que se llama reaccin en cadena polimerasa, o RCP). Explotadas las secuencias transportadoras conservadas derivadas de transportadores de GABA y noradrenalina, transportadores de serotonina y dopamina y otros transportadores desconocidos se clonaron. Se utilizaron tcnicas similares para la clonacin de la famila entera de receptores dopamnicos (Van Tol et al., 1991).
Poliformismos del ADN

Los avances recientes han proporcionado diferentes mtodos para localizar los genes responsables de enfermedades hereditarias que no requieren ningn conocimiento previo acerca de la expresin del producto gentico defectuoso responsable de la enfermedad (Wexler et al., 1991). Dado que en psiquiatra habitualmente se conoce muy poco acerca de los productos genticos alterados que pueden ser responsables de un nmero creciente de enfermedades psiquitricas, tales como la enfermedad bipolar, la esquizofrenia o el sndrome de la Tourette, sobre las que hay evidencia de una predisposicin hereditaria, este mtodo representa una poderosa herramienta para aclarar los mecanismos involucrados en dichas enfermedades. La tcnica permite la identificacin del locus cromosmico relacionado estrechamente con la manifestacin fenotpica de un defecto gentico, y por tanto resulta prometedora para identificar de forma definitiva los genes alterados responsables de las enfermedades. Una vez identificado el gen, puede ser caracterizada su funcin, lo que en muchos casos implicar un producto gentico deficiente o alterado. Estos mtodos representan un tipo especial de anlisis de la cadena gentica, excepto que el vnculo no es a un marcador fenotpico como el tipo HLA, sino a un marcador ADN polimrfico. Estos marcadores son regiones detectables de cromosomas que contienen variaciones en la primera secuencia de ADN (es decir, polimorfismos) en la poblacin humana. Dos de los tipos ms importantes de polimorfismos de ADN de uso comn en estos anlisis son los polimorfismos de longitud de los fragmentos de restriccin (RFLP) y los polimorfismos en nmeros de secuencias repetidas, ms a menudo repeticiones de dinucletidos, pero tambin secuencias ms largas llamadas nmeros variables de repeticiones en tndem (VNTR). Los marcadores de ADN polimrficos pueden utilizarse en el anlisis de cadenas, observando la co-segregacin de un rasgo de inters (por ejemplo, el trastorno bipolar) dentro de un pedigr con un marcador particular. En el mtodo RFLP, la demostracin de la variacin de secuencias entre individuos depende de las endonucleasas de restriccin, las enzimas men-
27
cionadas anteriormente que reconocen secuencias particulares en el ADN y lo dividen dentro o cerca de la secuencia (Botstein et al., 1980). Si ocurre una variacin dentro de la secuencia en el genoma humano en la secuencia de reconocimiento de una enzima de restriccin, aunque altere tan slo una sola base, la enzima ya no se dividir en esa zona. Alternativamente, la variacin puede crear una secuencia de reconocimiento donde no exista previamente. Una prdida o ganancia en la zona de restriccin, producir fragmentos de diferentes tamaos cuando el ADN sea digerido por la enzima. Son estos fragmentos de diferentes tamaos los que se llaman RFLPs. En la prctica, la enzima de restriccin se utiliza para digerir ADN de los linfocitos provenientes de un sujeto concreto. Una enzima de restriccin dada puede dividir el ADN del genoma humano total en ms de un milln de veces y producir un nmero inicialmente no-interpretable de fragmentos de ADN de muchos y variados tamaos. Sin embargo, los fragmentos pueden ordenarse por tamaos utilizando electroforesis de gel. En la electroforesis, el ADN, que tiene una carga negativa, migra hacia un ctodo en un campo elctrico aplicado. Debido a que el ADN pasa por un gel que retrasa su movimiento, los fragmentos pequeos de ADN son los que migran ms rpido. Los fragmentos especficos de ADN pueden identificarse entonces por la tcnica secante Southern. En este procedimiento, el ADN se transfiere por accin capilar, del gel al filtro de la membrana al cual se adhiere irreversiblemente. El filtro pasa a incubarse con una sonda de ADN marcada radioactivamente desde una localizacin cromosmica conocida que hibridar slo aquellas hebras de ADN en el filtro que contengan secuencias complementarias a la sonda. El secante se expone entonces a una pelcula de rayos-X, que revela la localizacin de los fragmentos de ADN marcados radioactivamente. La ganancia o prdida de la zona de restriccin cambia los patrones migratorios porque cambia la longitud de los fragmentos de ADN (es decir, los RFLP) detectados por la sonda radioactiva (Figura 1-19). Con la hibridacin sistemtica utilizando un panel de sondas que cubre el genoma humano, puede demostrarse que un patrn de RFLP en concreto (o, alternativamente, una repeticin dinucletida) cosegrega con la enfermedad en un pedigr dado. Si la cadena de unin es fuerte, se puede obtener informacin de la localizacin general del gen vulnerable a la enfermedad dentro del genoma. El siguiente paso es aislar el gen y determinar su funcin. El inters de esta tcnica radica en que no requiere una identificacin previa de la patofisiologa del trastorno, sino que depende ms bien de la
herencia de secuencias de bases alteradas suficientemente prximas al gen, de modo que puede considerarse muy probable que sean heredadas junto con el gen. La secuencia en cuestin ha sido utilizada con xito para encontrar los genes que causan la enfermedad de Parkinson y la fibrosis qustica. Este mtodo, sin embargo, supone una gran cantidad de trabajo. Puede emplearse una estrategia alternativa para identificar los genes enfermos si se dispone de una buena informacin patofisiolgica que proporcione pistas sobre las protenas especficas que pueden ser potencialmente anormales en la enfermedad estudiada. Los genes que codifican estas protenas pueden ser clonados y utilizados como genes candidatos de la enfermedad . Los poliformismos que se identifican en o cerca de estos genes, se utilizan posteriormente en un anlisis de cadena. Este anlisis no slo es ms eficaz, sino que, si el gen candidato resulta ser el gen enfermo, no hace falta ms trabajo para pasar del marcador de unin hasta el gen enfermo. En el caso de la enfermedad de Huntington, el intento continuado de ir desde el marcador fuertemente ligado al gen enfermo dur una dcada. Una vez se ha identificado el gen enfermo, su accin en el cerebro debe ser investigada. Existe una gran variedad de sistemas, incluyendo la posibilidad de expresar el gen humano en otras especies, ms comunmente en ratas, o inactivar el gen implicado en un modelo con ratas con una tcnica llamada recombinacin homloga. Estos mtodos suelen permitir un estudio
Figura 1-19. Tcnica de los polimorfismos de la longitud de los fragmentos de restriccin. El ADN aislado de los linfocitos se divide mediante incubacin con una endonucleasa de restriccin especfica. Los fragmentos se separan segn su tamao (por ejemplo, la longitud) mediante electroforesis en gel de agarosa. A continuacin, estos fragmentos de ADN se transfieren a nitrocelulosa, a la que se fijan firmemente, y se incuban con una sonda de cADN marcada radioactivamente. La sonda de cADN se fijar slo al fragmento(s) al que sea complementaria. La sonda de cADN libre se eliminar por lavado y la(s) banda(s) a las que se haya fijado el cADN radioactivo se identificar(n) mediante autorradiografa.
28
FACTORES DE TRANSCIPCION
ARN ARN POLIMERASA
ADN
FACILITADOR
PROMOTOR
SECUENCIAS TRANSCRITAS
Figura 1-20. Regulacin de la expresin del gen. Se requieren ciertas regiones de ADN, los facilitadores y los promotores designados, para la transcripcin precisa de los genes y para determinar la velocidad a la que se expresarn los genes. Una funcin especfica del gen promoter es la de determinar la zona precisa en la que empezar la transcripcin por la ARN polimerasa. Los promoters y los enhancers son secuencias de ADN que funcionan sirviendo zonas especficas de ligando para las protenas involucradas en la regulacin de la transcripcin (es decir, los factores de transcripcin).
detallado de la accin de la protena codificada por el gen, lo que proporciona pistas sobre la patofisiologa del trastorno humano.
Regulacin de la fosforilacin de protenas y expresin neural del gen por neurotransmisores y frmacos
Una de las propiedades ms importantes del sistema nervioso es su plasticidad: puede adaptarse a los cambios en el ambiente y puede formar recuerdos. Hay descrito un buen ejemplo de adaptacin en la explicacin de la hidroxilasa tirosina, la enzima que controla la velocidad en la biosntesis de catecolaminas. En circunstancias en que las neuronas de noradrenalina o dopamina deben disparar a velocidades rpidas, se adaptan incrementando la actividad de tirosina hidroxilasa y, adems, producen ms molculas de esta enzima. La primera adaptacin se debe a la fosforilacin de protenas y la segunda a la regulacin de la expresin gentica. Juntas constituyen los mecanismos ms significativos que regulan la adaptacin a largo plazo y, probablemente, toda forma de memoria en el sistema nervioso. La regulacin de la expresin neural gentica por neurotransmisores, hormonas y frmacos puede producir potencialmente alteraciones de larga duracin en prcticamente todos los aspectos del funcionamiento de las enzimas sintetizadoras de neurotransmisores, neurotransmisores pptidos, canales inicos, protenas estimuladoras de transduccin y otras protenas neurales crticas. La fosforilacin de protena y la regulacin de la expresin gentica a menudo estn relacionadas. En la mayora de los casos, es la fosforilacin dependiente de proten-quinasas la que acopla estmulos ambientales a cambios en la expresin gentica neural. (El otro mecanismo importante que
regula la expresin gentica neural se produce a travs de hormonas esteroides, como se describe ms adelante). Aunque la expresin gentica se regula a muchos niveles, el control de la iniciacin de la transcripcin parece ser el mecanismo ms importante que regula la informacin desde el genoma a la produccin de protenas celulares. La regulacin del inicio de la transcripcin incluye dos procesos crticos: 1) la colocacin de la polimerasa, la enzima que transcribe el ADN en ARN, en la zona correcta de partida de los genes, y 2) el control de la eficacia de las iniciaciones para producir la velocidad transcripcional apropiada. Estas funciones de control son favorecidas por extensiones cortas de ADN (elementos cis-regulatorios) dentro de los genes (Figura 1-20) que actan como lugares de fijacin especficos para las protenas que regulan la transcripcin, generalmente llamados factores de transcripcin. Los anlisis de mutaciones han demostrado que cada gen tiene una combinacin particular de elementos cis-regulatorios. La naturaleza, el nmero y el arreglo espacial de los elementos cis-regulatorios determinan el patrn de expresin nico de cada gen, incluido los tipos de neuronas donde se expresarn, los niveles basales en los que se expresarn y la respuesta a los estmulos del ambiente (Mitchell y Tijan, 1989). Como se ha descrito en una seccin anterior, la estimulacin de los receptores ligados a protenas G activa o inhibe los sistemas de segundo mensajero y, en consecuencia, la proten-quinasa. Cuando son activadas, ciertas proten-quinasas no slo actan en el citoplasma neuronal sino que se trasladan al ncleo de la neurona donde pueden fosforilar factores de transcripcin. Estos factores de transcripcin que se activan (o desactivan) por la fosforilacin pueden unir la estimulacin de receptores neurotransmisores a cambios en la expresin gentica.
29
Aquellos elementos cis-regulatorios que ligan los factores de transcripcin que son regulados fisiolgicamente (es decir, por fosforilacin) y que, por tanto, otorgan una capacidad de respuesta a un neurotransmisor, una hormona o un segundo mensajero en los genes, a menudo se llaman elementos de respuesta. Quizs el ejemplo mejor caracterizado de la respuesta de un elemento de un segundo mensajero es el que confiere la activacin por AMP cclico (y por tanto la proten-quinasa dependiente del cclico) en aquellos genes que la poseen (Comb et al., 1987). El descubrimiento y anlisis de los elementos que responden al AMP cclico (CRE) de muchos genes, depende de la habilidad de mutar las secuencias de ADN in vitro, y reintroducirlas posteriormente en neuronas en cultivo (un proceso que se llama corte transversal). Pueden observarse entonces los efectos de las mutaciones en las secuencias de ADN respecto a la habilidad del AMP cclico para activar el gen. Utilizando tales mtodos se descubri que los CRE contienen la secuencia CGTCA de ADN o secuencias relacionadas, y que esta secuencia de nucletidos puede ligar una protena llamada CREB (protena ligadora CRE). Cuando se une a un CRE, la CREB activa la transcripcin al ser fosforila da por una proten-quinasa dependiente del AMP cclico. Muchos elementos de respuesta adicionales y factores de transcripcin han sido caracterizados.
roideas actan como factores de transcripcin sensibles a hormonas. La mayora de los efectos conocidos de los glucocorticoides, los esteroides gonadales, la hormona tiroidea y la vitamina D en la funcin neuronal, son mediados por sus acciones en la expresin gentica.
PSICOFARMACOLOGA MOLECULAR
El descubrimiento de medicamentos que reducen de forma selectiva los sntomas de diversas enfermedades psquicas ha proporcionado una batera productiva de pruebas farmacolgicas para estudiar las funciones potenciales de los sistemas neurales especficos en relacin con la patofisiologa de los trastornos psiquitricos. Naturalmente, no puede asumirse de forma directa que el lugar de accin molecular o celular de un medicamento psicotrpico localice el defecto patofisiolgico responsable de la enfermedad. Es posible que el sistema neuronal afectado por el frmaco est implicado slo de forma secundaria, y que la alteracin farmacolgicamente inducida de su funcin compense una alteracin bsica en otros lugares del sistema nervioso. Sin embargo, nuestra capacidad para identificar los puntos diana moleculares y los sistemas neurales en donde actan los frmacos psicotrpicos, ha potenciado el desarrollo de teoras patofisiolgicas importantes y de descubrimientos fundamentales en el campo de la neurociencia bsica. En este apartado se revisan los conocimientos actuales de los mecanismos de accin de tres grandes grupos de frmacos psicotrpicos, haciendo particular hincapi en los mtodos de investigacin utilizados para aclarar sus funciones.
Receptores de la hormona esteroide

Una familia importante de elementos de respuesta del ADN que no incluyen necesariamente la fosforilacin son los elementos de respuesta de los gluocorticoides (GRE) y otros elementos de respuesta de hormonas esteroideas. A diferencia de otros neurotransmisores u hormonas pptidas, que se unen a receptores en la superficie de las neuronas, los glucocorticoides y otras hormonas esteroides son hiposolubles y entran directamente en las neuronas. Actan unindose a receptores especficos dentro del citoplasma de la neurona. Los receptores esteroideos citoplasmticos incluyen receptores glucocorticoides, receptores estrognicos, receptores mineralocorticoideos y otros parecidos. Debido a que las hormonas esteroideas se expanden ampliamente, la especificidad de la respuesta depende de la presencia o ausencia de receptores especficos dentro de cada tipo de neurona. Cuando son activados por fijacin hormonal, los receptores esteroideos pasan al ncleo, donde se unen a GRE (u otros elementos de respuesta a las hormonas esteroideas) contenidas en genes concretos. La unin del receptor al ADN aumenta o disminuye la velocidad con que estos genes diana se transcriben. Por tanto, los receptores de hormonas este-
Neurolpticos
El descubrimiento de que la reserpina (un alcaloide de la rauwolfia) y la fenotiacina-clorpromazina, reducen drsticamente la agitacin, las alucinaciones y los delirios en las psicosis esquizofrnicas agudas, abri la moderna era de la psicofarmacologa hace 35 aos. En la dcada siguiente, la industria farmacutica sintetiz un gran nmero de frmacos con posibles efectos antipsicticos. Aunque muchos de estos frmacos eran variaciones estructurales de la clorpromazina, se desarrollaron tambin estructuras nuevas, tales como el grupo de la butiroferona, con el haloperidol como ejemplo. Puesto que se desconoca la causa de la esquizofrenia, y que el mecanismo de accin de estos medicamentos era poco claro, el uso clnico se basaba en gran medida en la reduccin emprica de los sntomas evitando en lo posible los efectos secundarios.
30
A principio de los aos sesenta, la US Veterans Administration y el National Institute of Mental Health emprendieron un ambicioso estudio para demostrar de manera inequvoca la eficacia clnica de los medicamentos antipsicticos. Para prevenir las apreciaciones subjetivas, se utilizaron estudios con la tcnica de doble ciego y el uso de placebos, considerada hoy en da como la regla de oro a la que se someten la mayora de los frmacos nuevos (Kurland et al., 1961). Las drogas presuntamente activas se comparaban con el placebo para determinar si la droga era ms efectiva que una sustancia inerte, un objetivo de gran inters para estudios relacionados con enfermedades cuyos sntomas aumentan y disminuyen a lo largo del tiempo. Para evitar que la propia situacin de estar en tratamiento influyera positivamente sobre los sntomas, no se inform a los pacientes acerca de si reciban una droga activa o un placebo. Para eliminar factores conscientes o inconscientes que pudieran afectar la respuesta al tratamiento, tanto los mdicos como los evaluadores tampoco fueron informados acerca de si el paciente estaba siendo tratado con una sustancia activa o con un placebo. Estos estudios generaron una gran cantidad de informacin que fue esencial para comprender el mecanismo de accin de los frmacos antipsicticos. En primer lugar, establecieron que la sedacin por s misma no explica la eficacia teraputica, ya que el fenobarbital fue ineficaz. En segundo lugar, revelaron que la presencia de la estructura de la fenotiazina no era suficiente ya que la prometazina era relativamente ineficaz comparada con la clorpromazina. En tercer lugar, estos y otros estudios posteriores que comparaban otros neurolpticos con la clorpromazina, pusieron de manifiesto que todos los antipsicticos eran igualmente eficaces desde el punto de vista cualitativo, aunque haba una diferencia de casi 50 veces referida a su potencial clnico. Por tanto, dichos estudios generaron una herramienta decisiva, la relacin entre estructura y actividad de los frmacos antipsicticos, que poda ser utilizada para investigar los mecanismos de accin del frmaco y disear nuevos compuestos activos. A principio de los aos sesenta, varias observaciones dispares implicaban a las neuronas dopaminrgicas del cerebro anterior en el mecanismo de accin de los neurolpticos. Hornyekiewicz (1966) acababa de demostrar que la enfemedad de Parkinson se asociaba con una gran disminucin de dopamina en la sustancia negra y el caudadoputamen. Se hall que la reserpina, un antipsictico que no tena relacin estructural con las fenotiazinas, causaba una marcada deplecin de aminas bigenas, incluida la dopamina, en el cerebro de los animales de experimentacin. Por l-
timo, los efectos colaterales de tipo neurolgico ms comnmente observados en la administracin de frmacos antipsicticos eficaces, eran sntomas de tipo parkinsoniano. En estudios realizados con clorpromazina y haloperidol, Carlsson observ que, mientras que estos antipsicticos no mermaban la dopamina del cerebro, como haca la reserpina, producan un incremento sustancial en el flujo de dopamina. Enlazando ambas evidencias, Carlsson fue el primero en proponer que los frmacos antipsicticos pueden ejercer sus efectos teraputicos bloqueando los receptores cerebrales de la dopamina (Carlsson y Lindqvist, 1963). Esta hiptesis recibi apoyo, aunque algo indirecto, a travs de los estudios psicofarmacolgicos del comportamiento. De este modo, fenmenos tales como la estereotipia y el vmito, que son inducidos en animales de experimentacin por frmacos que aumentan directa o indirectamente la neurotransmisin dopaminrgica central, pueden prevenirse con la administracin de neurolpticos. Las especulaciones sobre las interacciones entre los frmacos antipsicticos y los receptores dopaminrgicos quedaron a la espera de una validacin directa hasta que, en los aos setenta, se desarrollaron mtodos para caracterizar bioqumicamente los receptores de los neurotransmisores. Con el precedente de que los beta-receptores estn ligados a la adenil ciclasa, Kebabian et al. (1972) demostraron que la dopamina estimulaba la formacin de AMP cclico en homogeneizados preparados a partir del caudado-putamen, un rea cerebral rica en inervacin dopaminrgica, pero no noradrenrgica. En estos homogeneizados, el propanolol, antagonista de los beta-receptores, mostraba unos efectos dbiles bloqueando la formacin de AMP cclico, mientras que los neurolpticos del grupo de las fenotiazinas eran potentes bloqueadores de la actividad de la adenilciclasa. Adems, debido a que la potencia en este ensayo era proporcional a la eficacia clnica como antipsicticos, se concluy que las fenotiazinas actuaban sobre un receptor dopaminrgico. Sin embargo, la conclusin de que este receptor de la dopamina mediaba los efectos antipsicticos de los neurolpticos, qued socavada por la observacin de que potentes neurolpticos del grupo de las butiroferonas, tales como el haloperidol, eran desproporcionadamente dbiles como antagonistas. El uso de haloperidol radioactivo como ligando para identificar los receptores de la dopamina por tcnicas de fijacin del ligando, revel la existencia de un receptor claramente distinto. El 3H haloperidol se una con una gran afinidad a una serie de zonas de reconocimiento que eran bastante abundantes en regiones cerebrales que reciban
31
inervacin dopaminrgica. A pesar de que la propia dopamina tena una afinidad 1.000 veces menor por esa zona que el 3H haloperidol, la dopamina era el neurotransmisor ms activo en dicha zona. Es ms, cuando se examin el espectro total de neurolpticos clnicamente eficaces, se observ una correlacin ms que notable entre su potencia clnica como antipsicticos y su afinidad por esta zona de reconocimiento del receptor, independientemente de la clase de frmaco (Creese et al., 1976). Actualmente se sabe que estos dos tipos de receptores son estructuralmente distintos: el primero, ligado a la adenil ciclasa, se ha designado como receptor D1, y el segundo, que constituye el lugar de accin de los neurolpticos, se conoce como receptor D2. La accin de las fenotiazinas sobre los receptores D1 refleja la falta de especificidad, ms que una accin teraputica crtica. Subsecuentemente se demostr que el receptor D2 inhibe la adenilciclasa y activa un canal de K+ a travs de Gi. Como se ha descrito en una seccin anterior, sin embargo, estudios recientes de clonacin molecular han identificado al menos tres receptores dopaminrgicos adicionales. Estos estudios se plantean si el antagonismo D2 es necesario o tan siquiera suficiente para la accin del frmaco antipsictico. Esto es debido a que el frmaco antipsictico atpico clozapina, que puede tener un efecto singular en la esquizofrenia pero est relativamente libre de efectos extrapiramidales, se une con baja afinidad a los receptores D2, pero con una alta afinidad a los recientemente descubiertos receptores D4. Resulta que casi todos los frmacos que interactan con los receptores D2 tambin interactan con los receptores D3 y D 4. La afinidad relativamente baja de la clozapina al receptor D2 explica la falta de efectos secundarios extrapiramidales, y quizs la singular eficacia en el tratamiento de sntomas negativos de la esquizofrenia, tales como el repliegue emocional, que de hecho pueden estar causados por el antagonismo del receptor D2. La importancia relativa de bloquear D2, D 3, D4, o incluso los receptores dopaminrgicos todava desconocidos para la accin antipsictica es, en estos momentos, objeto de una investigacin intensiva. Existe una observacin adicional sobre la accin de frmacos antipsicticos que es de importancia crtica para entender el mecanismo. Todos los frmacos antipsicticos requieren unas semanas de administracin antes de conseguir su mximo efecto teraputico. Los pacientes que toman clozapina pueden seguir mejorando incluso durante meses, lo que implica que el bloqueo de receptores dopaminrgicos (el tipo resulta ser muy importante) representa la interaccin inicial de los frmacos antipsicticos con el sistema nervioso.
Sin embargo, todo esto forma parte de la todava desconocida respuesta adaptativa de aparicin lenta del sistema nervioso al bloqueo del receptor dopaminrgico, lo que representa el actual mecanismo por el cual los sntomas psicticos se alivian. Los mecanismos ms probablemente involucrados se centran en la posibilidad de que el bloqueo de receptores dopaminrgicos conduzca a cambios significativos en las protenas (es decir, los canales inicos, los receptores, las enzimas) contenidas por neuronas diana (que pueden ser la neurona dopaminoceptiva misma u otras neuronas alejadas por una o dos sinapsis). Se postula que tales cambios conducen a funcionamientos alterados del circuito lmbico crtico. Esta aparicin lenta y los cambios de larga duracin en el funcionamiento neuronal probablemente incluyan cambios mediados por segundos mensajeros en la expresin del gen.
Antidepresivos
Las primeras pistas sobre el mecanismo de accin de los frmacos antidepresivos fueron resultado directo de los estudios fundamentales del Dr. Julius Axelrod en el National Institute of Mental Health. En un experimento destinado a controlar el catabolismo de la noradrenalina radioactiva en vivo, Axelrod se dio cuenta de que una pequea cantidad de la noradrenalina administrada por va sistmica era retenida por los tejidos perifricos, sin ser metabolizada (Axelrod et al., 1959). La cantidad de noradrenalina radioactiva secuestrada por estos tejidos era proporcional al grado de inervacin simptica. En estudios posteriores se demostr que las neuronas noradrenrgicas tenan un proceso de transporte de alta afinidad para la noradrenalina y que los antidepresivos tricclicos eran potentes inhibidores de este proceso de transporte. Se observ que las neuronas centrales noradrenrgicas, las dopaminrgicas y las serotoninrgicas tenan protenas transportadoras especficas para sus neurotransmisores; estos transportadores actualmente clonados, son el mecanismo principal para que el neurotransmisor liberado en el espacio sinptico deje de ejercer su accin. Estudios detallados desarrollados a lo largo de los aos han puesto de manifiesto que los antidepresivos tricclicos y los antidepresivos heterocclicos, introducidos ms recientemente, son antagonistas poderosos de los transportadores de la noradrenalina y/o la serotonina, y que de esta manera potencian la accin de estos dos neurotransmisores en el espacio sinptico. Ms recientemente, se han introducido inhibidores selectivos de la serotonina como la fluoxetina y sertralina. Los estudios sobre los antidepresivos tricclicos han confirmado la importante distincin entre la identifi-
32
cacin del lugar de accin de un frmaco y la comprensin del mecanismo de su accin teraputica. Mientras que la inhibicin de la captacin, y por tanto, de la potenciacin de la neurotransmisin noradrenrgica y serotoninrgica, debera ser una consecuencia bastante inmediata de la administracin de antidepresivos, existe una considerable evidencia clnica de que se produce un retraso sustancial de dos o tres semanas antes de que aparezcan mejoras sintomticas en una depresin mayor. La demora evoca la accin de los frmacos antipsicticos mencionada anteriormente. La demora en la aparicin de efectos clnicos llev a los cientficos a investigar sobre los efectos de los antidepresivos que slo aparecan bajo una administracin crnica de frmacos. El primer efecto con inicio demorado que se observ fue una desensibilizacin de los receptores beta-adrenrgicos en el crtex cerebral en ratas. Es interesante el hecho que esta desensibilizacin acompaa prcticamente todos los tratamientos eficaces de las depresiones mayores, incluyendo los antidepresivos tricclicos, los inhibidores de la monoaminooxidasa, diversos antidepresivos atpicos, y el tratamiento electroconvulsivo. Subsecuentemente, se demostr que la destruccin selectiva de neuronas serotoninrgicas del cerebro causa una desensibilizacin de beta-receptores inducido por antidepresivos, lo que demuestra una unin funcional entre los sistemas serotoninrgicos y noradrenrgicos (Janowsky et al., 1982). Subsecuentemente, se ha demostrado que algunos tratamientos antidepresivos, aunque no todos, desensibilizan los receptores adrenrgicos alfa-2 y los receptores serotoninrgicos 5HT2 (ver subseccin anterior sobre neuronas serotoninrgicas para un repaso de los receptores serotoninrgicos). A medida que se han acumulado pruebas, parece posible que estas alteraciones en la sensibilidad del receptor sean marcadores de los efectos antidepresivos crnicos, aunque probablemente no representen el mecanismo de accin teraputica. Los hallazgos sobre receptores, sin embargo, sugieren posibilidades para la investigacin. Por ejemplo, se sabe ahora que la desensibilizacin del receptor beta-adrenrgico se debe a los incrementos de actividad del AMP cclico dependiente de la protenquinasa y otras quinasas con alta especificidad para el beta-receptor mismo. La activacin de estas quinasas es probablemente el resultado de una estimulacin noradrenrgica aumentada de los beta-receptores mismos, a consecuencia de la accin inicial de los antidepresivos (por ejemplo, el bloqueo de la recaptacin o inhibicin de la MAO). Por tanto, la desensibilizacin de los beta-receptores es un marcador neuronal que muestra que la administracin crnica de antidepresivos lleva a un aumento
de activacin de la proten-quinasa en las neuronas inervadas noradrenrgicamente. Ahora podemos investigar otras funciones de dichas quinasas, incluyendo factores de transcripcin que pueden alterar la expresin gentica neural. Tambin hacen falta estudios complementarios a nivel de los sistemas, como por ejemplo anlisis del estado de receptores de monoamina en pacientes deprimidos que pueden abordarse con tcnicas de TEP o quiz con imgenes por resonancia magntica. Juntos, estos mtodos prometen grandes posibilidades para conocer aspectos de la accin de los antidepresivos en la prxima dcada.
Litio
El mecanismo preciso de la accin del litio en el tratamiento de la enfermedad manaco-depresiva es desconocido, pero existen pistas cientficas interesantes. En concreto, parece ser que el litio es el nico psicofrmaco que acta directamente sobre las protenas G y los sistemas de segundo mensajero. Muchos receptores neurotransmisores, incluyendo los receptores adrenrgicos y los 5-HT2, estn ligados a travs de protenas G (mayoritariamente Gq) a la activacin de la fosfolipasa C, una enzima que hidroliza un fosfolpido de la membrana, el fosfatidilinositol bisfosfato (PIP2) para producir dos segundos mensajeros, el diaglicerol y el inositol trifosfato (IP3). Como muestra la Figura 110, el litio inhibe ciertos pasos en el ciclo fosfatidilinositol, y algunos autores han planteado la hiptesis de que estas acciones son responsables de los efectos antimanacos y antidepresivos del litio. El fosfatidilinositol bifosfato se sintetiza a partir de inositol libre y de grupos de lpidos para ser subsecuentemente fosforilatado. La mayora de las clulas obtienen inositol libre para la sntesis directamente del plasma, pero las neuronas no pueden porque el inositol no cruza la barrera de sangre del cerebro. Como resultado, las neuronas deben reciclar inositol o sintetizarlo de nuevo de la glucosa-6-fosfato, un producto de la glicolisis. Como muestra la Figura 1-10, tanto el reciclaje como la sntesis requieren desfosforilacin de fosfatos de inositol. Sin embargo, utilizado en concentraciones teraputicas, el litio inhibe ciertas fosfatasas. Por tanto, las neuronas expuestas al litio tienen una capacidad disminuida de regenerar PIP2 despus de que haya sido hidrolizado como respuesta a la activacin del receptor neurotransmisor (Berriche et al., 1989). Se ha propuesto que cuando la velocidad de disparo de las neuronas es excesivamente alta, las neuronas tratadas con litio se vacan de PIP2 ms rpidamente, y la neurotransmisin dependiente de este sistema de segundo mensajero se frena. Esta hiptesis de la reduccin de inositol es
33
atractiva porque los efectos del litio pueden evidenciarse slo en las neuronas con velocidades anormalmente altas, y porque el litio frena los efectos de mltiples sistemas de neurotransmisores, por lo que podra tratar tanto los estados manacos como los depresivos. Sin embargo, aunque est hiptesis sea correcta permanece incompleta. Las neuronas crticas que son el blanco de la accin teraputica del litio siguen sin conocerse, y no est claro qu sistemas de neurotransmisores dependientes de fosfatodilinositol deben ser frenados para que el litio tenga efectos teraputicos. Adems de los efectos en el ciclo del fosfatidilinositol, el litio altera el acoplamiento de algunos receptores neurotransmisores a las protenas G, alterando as la funcin de mltiples vas de transduccin de neurotransmisores estimuladores en el cerebro (Avissar et al., 1988). A diferencia de la hiptesis de reduccin de inositol, sin embargo, no hay actualmente una teora que explique de qu forma los efectos del litio sobre las protenas G producir a efectos especficos en los estados manaco y depresivo. El litio tambin inhibe la adenilciclasa. Sin embargo, las concentraciones que se requieren para ejercer este efecto en el cerebro se encuentran a niveles ms altos de los conseguidos clnicamente.
Ansiolticos
A pesar de que la benzodiazepina prototpica, el clordiazepxido, fue descubierta por azar, pronto se observaron las notables propiedades de sta y otras benzodiazepinas sintetizadas ms tarde, y su superioridad frente a los barbitricos, utilizados comnmente como sedantes y ansiolticos. Las benzodiazepinas muestran una ratio mucho ms favorable, un mayor ndice teraputico y menos riesgo de dependencia y sntomas serios de abstinencia comparadas con los barbitricos. La comprensin de las zonas moleculares de accin de las benzodiazepinas, as como de los barbitricos, dependi de la elucidacin de los mecanismos fisiolgicos y de los receptores que mediaban los efectos del GABA, el principal neurotransmisor inhibidor del cerebro. La aplicacin local del GABA en neuronas concretas produce una inhibicin de la descarga, causada por la hiperpolarizacin que sigue a la apertura de los canales de cloro en la membrana neuronal, hiperpolarizando as la neurona. Utilizando tcnicas de fijacin de ligando con GABA radioactivo, se detect un receptor de GABA entre las membranas cerebrales. Adems, utilizando diazepam radioactivo fue posible marcar directamente las zonas de reconocimiento para las benzodiazepinas. Despus de investigaciones adicionales, se estableci que el receptor de las
benzodiazepinas representaba una zona de unin en el receptor GABAA, una gran protena con mltiples subunidades que sirve como el principal receptor del GABA en el sistema central nervioso (Levitan et al., 1988). El receptor GABAA est formado por mltiples subunidades, que han sido denominadas (basndose en estudios de clonacin) alfa, beta, gama y delta. Los receptores GABAA son probablemente pentmeros compuestos de dos unidades alfa, dos beta y una gama o delta. Las subunidades del receptor GABAA muestran un extraordinario grado de heterogeneidad; hasta la fecha, al menos siete subunidades alfa diferentes, cuatro subunidades beta diferentes y dos subunidades gama han sido clonadas. Las diferentes subunidades estn expresadas diferencialmente en varias regiones del sistema nervioso central y muestran diferentes propiedades funcionales. El receptor GABAA contiene por lo menos tres zonas de unin relevantes para la psicofarmacologa. La zona de unin para el GABA est en la subunidad beta del receptor; las benzodiazepinas se juntan con la subunidad alfa. Sin embargo, la subunidad alfa no es capaz de unirse a las benzodiazepinas a menos que una subunidad gama est presente en el complejo, presuntamente, por la regulacin alostrica de la subunidad alfa por la subunidad gama (Pritchett et al., 1989). Las benzodiazepinas no abren directamente el canal del receptor CL. Ms bien actan aumentando la afinidad de la zona de unin de GABA en la subunidad beta de GABA, y por tanto realzan la accin sinptica de GABA. Los barbitricos tambin se unen al receptor GABAA, pero en una zona que es fsicamente distinta de la de las benzodiazepinas, y por tanto ambos frmacos pueden unirse al receptor a la vez. Los barbitricos pueden ejercer una influencia en el receptor similar a la de las benzodiazepinas, aumentando la afinidad del receptor para GABA y por tanto aumentando la habilidad del GABA para activar el canal receptor de CL. Sin embargo, a diferencia de las benzodiazepinas, altas dosis de barbitricos pueden causar la apertura del canal CL directamente, en ausencia de GABA. Esto puede explicar por qu los barbitricos pueden causar una depresin ms seria en el sistema nervioso central (con ms probabilidad de ser letal) que una sobredosis de benzodiazepinas. Adems de aumentar la afinidad del receptor GABAA para el GABA, las benzodiazepinas y los barbitricos aumentan la afinidad del receptor mtuamente. El alcochol etlico produce efectos en el sistema nervioso central a concentraciones de sangre mucho ms altas que cualquier otra sustancia psicotrpica ampliamente utilizada. En concentraciones de alcochol asociadas con intoxicacin, las alteraciones en las propiedades de la membrana
34
neuronal probablemente afectarn el funcionamiento de una amplia gama de protenas de la membrana como receptores, canales y transportadores. Sin embargo, existen pruebas cada vez mayores de que un pequeo nmero de neurotransmisores receptores y quizs de canales inicos que son particularmente susceptibles a los cambios inducidos por el etanol en la membrana, son responsables de los efectos conductuales del etanol. En concreto, en concentraciones farmacolgicas relevantes, el etanol inhibe la accin de un tipo de receptor (es decir, el receptor NMDA) que hace de mediador de los efectos importantes sobre el neurotransmisor excitador principal del cerebro, el glutamato. Todava ms pronunciados son los efectos facilitadores del etanol sobre el receptor GABAA. En concentraciones bajas, el etanol altera el funcionamiento del receptor GABA tanto como las benzodiazepinas y los barbitricos: el receptor tiene una mayor afinidad para el GABA. Como los barbitricos, el etanol en grandes concentraciones puede causar la apertura del canal Cl i n d e p e ndientemente del GABA. Adems, el etanol aumenta la aparente afinidad del receptor tanto para las benzodiazepinas como para los barbitricos. Nuestra creciente comprensin de la farmacologa de este receptor racionaliza un nmero de observaciones clnicas. La similitud de las acciones entre los frmacos con baja dosis de etanol, de los ansiolticos y los sedantes es consistente con el uso de etanol que hacen muchos individuos para aliviar la ansiedad, para sobreponerse a las inhibicione sociales y para conseguir dormir. (Este uso es mal interpretado ya que, a medida que las concentraciones de alcohol en la sangre caen, frecuentemente tienen lugar sntomas de rebote reflectivos de tolerancia a la dosis. Por tanto, la ansiedad puede volverse mucho peor que antes de haber tomado alcohol y el sueo puede interrumpirse). La zona de accin comn entre el etanol, las benzodiazepinas y los barbitricos tambin explica por qu estos frmacos producen tolerancia y dependencia cruzadas, caractersticas explotadas en el uso de benzodiazepinas para la desintoxicacin de etanol. Tambin explica por qu estos frmacos potencian sus efectos mutuamente, haciendo que la sobredosis de una combinacin de ellos sea tan arriesgada.
CONCLUSIONES
La psiquiatra, como especialidad mdica dedicada principalmente al diagnstico y el tratamiento de los trastornos conductuales, debe incorporar necesariamente la neurociencia en sus fundamentos cientficos. Basndose en el creciemiento casi logartmico de la investigacin neurocientfica en la
ltima dcada, los progresos en el conocimiento de la estructura, de la organizacin y del funcionamiento del cerebro prometen ofrecer poderosos mtodos nuevos para el diagnstico de enfermedades psiquitricas, aclarando su fisiopatologa y desarrollando teraputicas ms especficas y eficaces. Parecen infundados los temores de que estos avances, que se basan en aproximaciones cada vez ms reduccionistas, pueden minar la tradicin humanstica de la psiquiatra y nieguen la importancia de la relacin entre el paciente y el mdico. En primer lugar, incluso cuando sean factibles las tcnicas diagnsticas de base gentica para diagnosticar algunas de las enfermedades mentales hereditarias ms importantes, el mtodo clnico usado actualmente para el desarrollo de diagnsticos provisionales todava ser necesario para determinar qu personas deben ser sometidas a pruebas. En segundo lugar, el diagnstico no puede hacerse ni aceptarse de manera mecnica; elaborar un diagnstico definitivo requiere un tratamiento psicolgico humano y continuado. En tercer lugar, la investigacin clnica sobre los tratamientos psicofarmacolgicos de ciertas enfermedades psiquitricas est demostrando que la farmacoterapia sola es insuficiente para el tratamiento completo y eficaz de los pacientes. Se va haciendo cada vez ms evidente que los mtodos especficos conductuales, psicolgicos y psicosociales deben asociarse a la farmacoterapia para conseguir resultados ptimos en el tratamiento de enfermedades psiquitricas. En cuarto lugar, los mtodos para establecer de forma rigurosa la eficacia de las terapias somticas se aplicarn a las terapias conductuales y psicolgicas a fin de determinar las intervenciones ms eficaces en cada enfermedad en particular. As pues, los mdicos podrn usar los tratamientos, sean somticos o psicolgicos, con una confianza creciente en su especificidad y eficacia. Aunque los progresos en neurociencia y en biologa molecular pueden contemplarse acertadamente como causantes de un cambio paradigmtico en la psiquiatra, hay que mirar ms all para considerar la siguiente serie de cuestiones que estos conocimientos traern consigo. Por lo que se refiere al cerebro, un rgano sensible de manera nica a la experiencia vital, es probable que se despierte de nuevo el intenso inters sobre los acontecimientos vitales durante el desarrollo, ya que stos ejercen una influencia crtica en la expresin fenotpica de los genes y en ltimo trmino, afectan a los sistemas neuronales cerebrales relacionados con los impulsos, los afectos y las funciones cognitivas. Es ms, ser posible someter este tipo de cuestiones a riguroso estudio. El desvelamiento de los mecanismos moleculares implicados en la psicopatologa originar una infinidad de cues-
35
tiones acerca de los mecanismos de proteccin que modifican o previenen la expresin de enfermedades psiquitricas en personas genticamente vulnerables. Por consiguiente, la profundizacin en la fisiopatologa de la enfermedad mental y en la disparidad entre las caractersticas fenotpicas y genotpicas conducir en ltima instancia a una mejor comprensin de los factores que determinan tanto el bienestar mental como la enfermedad mental.
BIBLIOGRAFA
Avissar S, Schreiber G, Danon A, et al: Lithium inhibits adrenergic and cholinergic increases in GTP binding in rat cortex. Nature 331:440442,1988 Axelrod J, Weil-Malherbe H, Tomchick R: The physiological disposition of 3H-epinephrine and its metabolite, metanephrine. J Pharmacol Exp Ther 127:251256, 1959 Berridge MJ, Downes CP, Hanley MR: Neural and developmental actions of lithium: a unifying hypothesis. Cell 59:411419, 1989 Botstein D, Whik R, Skolnick M, et al: Construction of a genetic linkage map in man using RFLPs. Am J Hum Genet 32:314331, 1980 Carlsson A, Lindqvist M: Effect of chlorpromazine and haloperidol on formation of 3-methoxytyramine and normetanephrine in mouse brain. Acta Pharmacol Toxicol 20:140144, 1963 Choi DW, Rothman SM: The role of glutamate neurotoxicity in hypoxic-ischemic neuronal death. Annu Rev Neurosci 13:171182, 1990 Comb M, Hyman SE, Goodman HM: Mechanisms of trans-synaptic regulation of gene expression. Trends Neurosci 10:473478, 1987 Cooper JR, Bloom FE, Roth RH: The Biochemical Basis of Neuropharmacology, 6th Edition. New York, Oxford University Press, 1991 Coyle JT: Aminergic projections from the reticular core, in Diseases of the Nervous System. Edited by Asbury A, McKhann G, McDonald W. Philadelphia, PA, WB Saunders, 1986, pp 880889 Coyle JT, Price DL, DeLong MR: Alzheimer's disease: a disorder of cholinergic innervation of cortex. Science 219:11841190, 1983 Creese I, Burt DR, Snyder SH: Dopamine receptor binding predicts clinical and pharmacological potencies of antischizophrenic drugs. Science 192:481 483, 1976 Giros B, Caron MG: Molecular characterization of the dopamine transporter. Trends Pharmacol Sci 14:43 49, 1993 Hokfelt T: Neuropeptides in perspective: the last ten years. Neuron 7:867879, 1991 Hornykiewicz O: Dopamine and brain function. Pharmacol Rev 18:925964, 1966 Hughes JU, Smith TW, Kosterlitz HW: Identification of two related penta peptides from the brain with potent opiate agonist activity. Nature 258:577579, 1975
Hyman SE, Nestler EJ: The Molecular Foundations of Psychiatry. Washington, DC, American Psychiatric Press, 1993 Janowsky AJ, Okada F, Applegate C, et al: Role of serotonergic input in the regulation of the betaadrenoreceptor coupled adenylate cyclase system in brain. Science 218:900901, 1982 Kebabian JW, Petzold GL, Greengard P: Dopamine-sensitive adenylate cyclase in the caudate nucleus of the rat brain and its similarity to the dopamine receptor. Proc Natl Acad Sci U S A 79:21452149,1972 Kobilka B: Adrenergic receptors as models for G protein coupled receptors. Annu Rev Neurosci 15:87114, 1992 Kurland AA, Hanlon TE, Tatom MH, et al: The comparative effectiveness of six phenothiazine compounds, phenobarbital and inert placebo in the treatment of acutely ill patients: global measures of severity of illness. J Nerv Ment Dis 133:118, 1961 Levitan ES, Schofield PR, Burt DR, et al: Structural and functional basis for GABA A receptor heterogeneity. Nature 335:7679, 1988 Levitt P, Rakic P, Goldman-Rakic P: Region-specific distribution of catecholamine afferents in primate cerebral cortex: a fluorescence histochemical analysis. J Comp Neurol 227:2336, 1984 Martin D, Lodge D: Ketamine acts as a non-competitive N-methyl-D-aspartate antagonist on frog spinal cord in vitro. Neuropharmacology 24:9991006, 1985 Mitchell PJ, Tjian R: Transcriptional regulation in mammalian cells by sequence-specific DNA binding proteins. Science 245:371378, 1989 Nakanishi N, Shneider NA, Axel R: A family of glutamate receptor genes: evidence for the formation of heteromultimeric receptors with distinct channel properties. Neuron 5:569581, 1990 Nose PS, Griffith LC, Schulman H: Ca2+-dependent phosphorylation of tyrosine hydroxylase in PC 12 cells. J Cell Biol 101:11821190, 1985 Olney JW: Brain lesions, obesity and other disturbances in mice treated with monosodium glutamate. Science 164:719721, 1969 Pacholczyk T, Blakely RD, Amara SG: Expression cloning of a cocaine- and antidepressant-sensitive human noradrenaline transporter. Nature 350:350354, 1991 Pritchett DB, Sontheimer H, Shivers B, et al: Importance of a novel GABAA receptor subunit for benzodiazepine pharmacology. Nature 13:338:582585, 1989 Robinson, Coyle JT: Glutamate and related acidic neurotransmitters: from basic science to clinical practice. FASEB J 1:446455 ,1988 Schwarz R, Meldrum B: Excitatory amino acid antagonists provide a therapeutic approach to neurologic disorders. Lancet 2:140143, 1985 Simon MI, Strathmann MP, Gautam N: Diversity of G proteins in signal transduction. Science 252:802808, 1991 Van Tol HMV, Bunzow JR, Guan HC, et al: Cloning of the gene for a human dopamine D 4 receptor with high affinity for the antipsychotic clozapine. Nature 350:610614, 1991 Watson SJ, Kelsey JE, Lopez JF, et al: Neuropeptide biology: basic and clinical lessons from the opioids, in Psychiatry Update: American Psychiatric Association Annual Review, Vol 4. Edited by Hales RE, Frances
36
AJ. Washington, DC, American Psychiatric Press, 1985, pp 8396 Wexler NS, Rose EA, Housman DE: Molecular approaches to hereditary diseases of the nervous system: Huntington's disease as a paradigm. Annu Rev Neu-
rosci 14:503530, 1991 Wong DF, Wagner Jr HN, Tune LE, et al: Positron emission tomography reveals elevated D2 dopamine receptors in drug-naive schizophrenics. Science 234:15581563, 1986

CAP1

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

CAP1

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Captulo

Josep T. Coyle, M.D.

ANATOMA FUNCIONAL DE LA NEURONA

Vesculas de contenido neurotransmisor

con este criterio.

La fijacin del ligando

Receptores unidos a una protena G (G-protein linked)

GDP ATP cAMP

Figura 1-13. Proyecciones primarias del locus ceruleus noradrenrgico.

Vas de las neuronas serotoninrgicas del rafe.

Fenilefrina Clonidina Isoproterenol

Prazosina Yohimbina Propanolol

IP3/DG cAMP ; K+ canal cAMP

SFK38393 Bromocriptina Kiniporola Kiniporola SFK38393

SCH39166 Antipsicticos tpicos (selectivos raclopide) Antipsicticos tpicos Clozapina

cAMP cAMP ; + canal ; Ca++ canal desconocido cAMP cAMP

Agonista parcial buspirona (8-OH-DPAT selectivo) Sumatriptan

Nota: DG = Diacilglicerol; 8-OH-DPAT = hidroxi-2-(di-u-propilamino)tetraln.

Poliformismos del ADN

ARN ARN POLIMERASA

Receptores de la hormona esteroide

También podría gustarte