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Monitoreo del proceso de purificacin de LDH de Gallus gallus

SDS-PAGE

Estndar de masa molecular (MW)

El gel que hicimos fue con Tris. El buffer de corrida fue un sistema Gly/Tris/SDS.

Calcular la masa molecular de la LDH.


1.Obtener la movilidad relativa (Rf) de las protenas del marcador de masa molecular :
Rf D is tanc ia re c o rrida po r la pro te na ( c m) D is tanc ia re c o rrida po r e l buffe rde mue s tra ( c m)

NOTA: En nuestro caso, casi todos los geles llegaron al borde del gel, as que pueden tomar como distancia total lo que mida el gel.

Log PM

1.Graficar el Log PM vs Rf, como se muestra en la imagen de la derecha. 2.Interpolar el valor del Log PM del monmero de la LDH, obtener el valor de Rf terico y la distancia terica recorrida por la LDH. 3.Regresar al gel e identificar que banda corresponde a la LDH.

Rf

Comentarios

Etiqueten el gel, es decir indiquen en que carril estn colocadas las diferentes fracciones. Yo coloqu cual corresponde al marcador de masa molecular (Std). Para el equipo 3, hay un problema puesto que no alcanzo a visualizar en donde est el Std, veo una banda muy tenue azul pero no estoy segura. Si pueden mejoren la imagen y localcenlo para que puedan hacer sus clculos. Una vez que ya sepan que banda corresponde a la LDH, en el gel indiquen con una flecha cual es. Envenme sus geles etiquetados y con la flecha para que el martes lleve una presentacin y podamos hacer la discusin de toda la prctica. La discusin ustedes la van a realizar, as que vayan analizando sus resultados, relacinenlos con las tcnicas que realizaron , piensen que sali mal, porqu, qu cosas se pueden mejorar, etc.

Equipo 1
Std

Equipo 2
Std

Equipo 3
Std?

Equipo 4
Equipo 7
Std

Equipo 5
Std

Equipo 6
Std

Equipo 7

Equipo 7
Std