INSEMINACIN ARTIFICIAL EN OVINOS

Apunte de Inseminacin Artificial en Ovinos

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INSEMINACION ARTIFICIAL EN OVINOS

Definicin: Se entiende por inseminacin artificial a la tcnica de reproduccin que consiste en introducir el material fecundante masculino por medios artificiales, en las vas genitales femeninas. Los medios mecnicos sustituyen a los rganos, sin necesidad de poner en presencia y en contacto a los progenitores. La tcnica de la fecundacin artificial consta, por lo tanto, de las siguientes operaciones principales: a) Recoleccin y obtencin del semen del macho. b) Valoracin cuantitativa, cualitativa y sanitaria de dicho semen. c) Dilucin del mismo en los valores adecuados. d) Conservacin in vitro, y transporte del semen a distancia. e) Introduccin del lquido seminal en el aparato genital femenino o siembra. En los ltimos aos, la inseminacin artificial ha adquirido constante difusin, debido a que esta tcnica se ha ido perfeccionando constantemente y su auge se debe, sin duda, al aprovechamiento integral que se puede lograr de un buen carnero padre, y obtener del mismo, muchas ms cras que las que se conseguiran mediante la monta natural. Principales ventajas Mayor aprovechamiento de buenos carneros o de calidad superior al obtener considerablemente ms cras que en la monta natural. En el servicio convencional de la majada, puede esperarse que un carnero cubra entre 50 y 100 ovejas por ao; y cuando se emplea semen diluido pueden inseminarse ms de 1000 ovejas en un perodo de dos a tres semanas. Contribuye a formar familias numerosas de animales de calidad descendientes de carneros probados, extendiendo la accin de estos, y por lo tanto, puede determinar una mayor rapidez de la mejora zootcnica. Prevencin y control de enfermedades. Al no existir contacto macho hembra, se controlan y previenen enfermedades, especialmente venreas (de transmisin sexual). Uso de machos incapacitados. A veces, reproductores particularmente valiosos, pueden sufrir lesiones o estar imposibilitados por edad. En estos casos, la inseminacin artificial permite que el servicio con estos reproductores contine.

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Desventajas La Inseminacin Artificial requiere un manejo intensivo de la hacienda durante su aplicacin. Estas tareas reclaman capacidad del personal de campo, insumiendo mayor mano de obra, y tiempo superior a la monta natural. La aplicacin del mtodo requiere idoneidad y conocimiento por parte del inseminador, es decir, reclama presencia de gente con conocimientos y capacidad para evitar maltrato de animales y fracaso en las pariciones. Disminucin en los porcentajes de preez. Esto ocurre cuando los mtodos de deteccin de celo no son correctamente empleados, o cuando el operador no manipula el semen con propiedad. Costos de implementacin. Incluyen el empleo de mano de obra especializada, equipamiento, drogas, y la compra del semen o mantenimiento de los padres.

Anatoma y fisiologa del aparato reproductor ovino Fase masculina En forma sinttica se expondrn los principios anatmicos y fisiolgicos del aparato reproductor del carnero. Para su estudio los ordenamos en: a) Testculos: Glndulas esenciales de la reproduccin, con cubiertas y accesorios. b) Vas espermticas: Epiddimos, conducto deferente, cordn espermtico y pene. c) Glndulas anexas: Vesculas seminales, glndulas bulbouretrales o de Cowper, glndulas uretrales y prstata. a) Testculos: En nmero de dos, con forma ovoidea, se sitan en la regin inguinal, dentro de una bolsa denominada escroto. La funcin de sta es proporcionar a los testculos una temperatura inferior (2 a 3 C menor) que la de la cavidad abdominal, lo que favorece el desarrollo normal de la espermatognesis. El testculo puede medir de 10 a 15 cm de largo y pesar aproximadamente 300 gr. b) Vas espermticas: Epiddimo: Conducto flexuoso adosado ntimamente al testculo. La primera parte, ubicada en el borde superior, es la cabeza, que recibe los conductos eferentes del testculo. Contina el cuerpo, prolongacin delgada que recorriendo la cara interna del testculo, desemboca en un ensanchamiento conocido como cola.
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Conducto deferente: Largo tubo que transporta los espermatozoides de los testculos a la uretra, saliendo de la cara interna de la cola de los epiddimos. Constituye parte del cordn testicular o binza. El conocimiento anatmico del conducto deferente es de primordial importancia para la operacin de la vasectoma, que consiste en la amputacin de un trozo del mismo, y se logran as los carneros retajos, que identifican las ovejas en celo. Cordn espermtico o binza: Est integrado por los siguientes elementos: Tnica vaginal: Est dividida en dos capas, la parietal que tapiza al escroto y la visceral, que se adosa al testculo y las dems formaciones del cordn. Msculo cremaster interno, que retrae el testculo. Conducto deferente y las arterias, venas, linfticos y nervios del testculo. El cordn espermtico comienza en el anillo inguinal y termina en el testculo. Pene: Est constituido por tejido erctil y especialmente adaptado para depositar el semen dentro de la vagina de la hembra. Est recorrido por la uretra, que termina 3 4 cm ms all del glande, formando una prolongacin (prolongacin uretral). c) Glndulas anexas: Son un conjunto de glndulas cuya secrecin forma parte del eyaculado: la prstata, ubicada detrs de la vejiga; las bulbouretrales o de Cowper, por delante del msculo uretral; las uretrales y las vesculas seminales, que constituyen una dilatacin del conducto deferente. Resumen de las funciones reproductoras masculinas El testculo, produce un nmero elevadsimo de espermatozoides, elaborando a su vez, la hormona de la masculinidad (testosterona) En el trayecto de los epiddimos se realiza la maduracin y el almacenamiento de los espermatozoides, los que son suspendidos, nutridos y vehiculizados por las secreciones de los deferentes, glndulas anexas y epiddimos. El pene acta como rgano copulatorio, depositando la dosis de espermatozoides dentro del tracto femenino, y por ltimo, pero no menos importante, es fundamental el correcto funcionamiento del aparato locomotor.

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Organos genitales del carnero

Los espermatozoides El semen es el vehculo de los espermatozoides, emitido por el carnero en el momento de la eyaculacin normal. Una vez que los espermatozoides progresan por los conductos en direccin al epiddimo, se realiza aqu la maduracin de los mismos. Los espermatozoides constituyen aproximadamente el 25% del volumen del eyaculado (semen normal) y lo restante es secrecin de tubos y glndulas. Fsico-qumicamente estn integrados por un 86% de agua; sustancias inorgnicas: sodio, potasio, calcio, magnesio, fsforo y otras; sustancias

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orgnicas: protenas, hidratos de carbono (fructosa), cido lctico y ctrico, vitaminas y, otros, en menor cuanta. Los espermatozoides son pequeas clulas, las nicas vivientes dotadas de una movilidad independiente, muy enrgica y capaces de mantenerse en actividad fuera del cuerpo durante un tiempo prolongado. En el ovino miden de 70 a 80 (micras). Constan bsicamente de una porcin globosa, la cabeza, la cual es aplanada y contiene el material cromosmico o ADN, responsable directo de la transmisin hereditaria y, de un apndice fino y largo denominado cola, por cuyo interior pasa el filamento axial, constituido por nueve microfibrillas que son las encargadas de brindar forma y movimiento al espermatozoide.

Fisiologa del espermatozoide Son funciones del espermatozoide: 1) Aportar la dotacin paterna de cromosomas. 2) Iniciar la divisin celular del vulo. El logro de estos objetivos se realiza en varias fases: a) Inseminacin: colocacin de los espermatozoides en el aparato genital de la hembra. b) Movimiento o traslacin de los espermatozoides a los oviductos. c) Penetracin de la pared celular del vulo por un espermatozoide. d) Prdida del cuerpo y cola del espermatozoide. e) Unin de los gametos masculino y femenino, formando el huevo o cigota. La supervivencia de los espermatozoides dentro del aparato genital del ovino, probablemente no pase de las 36 a 48 hs., existiendo variaciones considerables en los diversos tramos del mismo. Parece probable que las contracciones uterinas, mediante la ocitocina secretada por la hipfisis, influyan notablemente en el transporte de los espermatozoides a travs del tracto genital femenino, tardando escasos minutos ( 10 a 20 aproximadamente) a alcanzar los oviductos, lugar donde se llevar a cabo la fertilizacin, que es la fusin entre un vulo y un espermatozoide, resultando en una clula denominada embrin o cigota. Fase femenina Podemos agrupar los rganos genitales femeninos en:

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a) Ovarios o gnadas femeninas b) Vas o conductos genitales: oviductos, tero, cuello uterino, vagina y vulva c) Glndulas mamarias.

a) Ovarios:
Son las gnadas femeninas y estn ubicadas en la regin sublumbar, en la cavidad abdominal. Son aplanados y pequeos (1,5 cm.), similares a una almendra. En nmero de dos, mantienen su posicin por un ligamento corto que los suspende al techo de la cavidad pelviana y se encuentran en la extremidad libre de los oviductos. En el ovario se produce la formacin de los vulos, conocida como ovognesis. El vulo se encuentra encerrado en una estructura denominada folculo de Graaf; es de forma esfrica y est cubierta por el protoplasma, el vitelo, una membrana fina (membrana vitelina) y otra ms fuerte (zona pelcida). Su tamao es superior al del espermatozoide (100 a 130 micras).

b) Vas o conductos genitales:

Oviductos o trompas de Falopio: Son dos tubos finos, que se abren en forma de embudo cerca de los ovarios. Se conectan con los cuernos uterinos, y su funcin es recoger el vulo en el momento de la rotura del folculo y, conducirlo hasta el tero. En el oviducto se realiza el proceso de la fecundacin, por los espermatozoides que han ascendido a travs de la vagina y el tero. tero: Comprende el cuerpo y cuernos hasta el cuello uterino. Los cuernos miden de 10 a 12 cm. de longitud, y se adelgazan en la punta, de tal manera, que su unin con los oviductos se hace casi imperceptible. Los cuernos son ondulados, formando una espiral cerrada, y al unirse constituyen el cuerpo, de aproximadamente 3 cm. de largo. Cuello uterino u Hocico de Tenca: El tero desemboca en la vagina, mediante una porcin posterior alargada, ms o menos cnica, de unos 5 cm. de largo, conocida como cuello. Este rgano es de significativa importancia para la Inseminacin Artificial, dado que en este lugar se realizan las siembras de espermatozoides. Resulta difcil localizar rpidamente el conducto del cuello uterino (conducto cervical), porque puede presentar diversas localizaciones, estando cubierta en su desembocadura por las papilas cervicales (lengetas de la mucosa del tero). Vagina: El cuello uterino desemboca en la vagina, rgano ms o menos cilndrico, y que en la oveja alcanza unos 8 a 10 cm. de largo.

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Anatmicamente este rgano est destinado a alojar al pene del carnero durante el acto sexual y es aqu donde quedan depositados los espermatozoides durante la Inseminacin artificial. Vulva: La vagina se contina sin lnea de demarcacin con la vulva, que mide de 3,5 a 4 cm. en la oveja adulta.

c) Glndulas mamarias:

En nmero de dos, estn ubicadas en la regin inguinal. Cuando el animal est seco, o sin cra al pie, no muestran desarrollo, el que slo se alcanza en los ltimos das de gestacin y durante toda la lactancia. Pubertad - Resumen de las funciones reproductoras La espermatognesis en el macho y la ovognesis en la hembra se alcanzan luego de la madurez sexual, conocida como pubertad. Los rganos sexuales llegan a su completo desarrollo y al estado funcional en edades que varan segn la especie, raza y nutricin individual.
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El desarrollo de esos rganos es un proceso gradual, regulado por una secrecin de la hipfisis, que es un glndula que regula tambin el crecimiento del cuerpo. Generalmente el desarrollo sexual es ms rpido que el crecimiento del cuerpo, y si esa aptitud funcional es inmediatamente utilizada, puede producirse un efecto desfavorable en el desarrollo corporal. Estacin sexual La ovulacin en el ovino se produce solamente en un determinado perodo del ao (estacin sexual), por lo que se ha dado en denominar a la especie como polistrico estacional. La estacin sexual se presenta en forma muy marcada y regular en nuestra zona en los meses de otoo, hasta el mes de julio, hasta tanto la relacin luz-oscuridad siga estimulando la hipfisis. Es en estos meses cuando se realiza la monta natural o encarnerada y la Inseminacin Artificial. Pasado ese momento, la oveja entrar en anestro (fin de invierno, primavera y verano) y, aunque en el ovario muchos folculos sigan creciendo y desapareciendo, la ovulacin y el celo permanecern suspendidos hasta la llegada de una nueva temporada (otoo). Ciclo Estral La estacin sexual en la oveja est caracterizada por la periodicidad con que se van repitiendo una serie de acontecimientos, los que conocemos como ciclo estral. El ciclo estral dura aproximadamente 17 das y se ha dividido en cuatro etapas o perodos que son: proestro, estro, metaestro y diestro. Proestro: Es el perodo que antecede al estro, presentndose 12 hs antes aproximadamente y est caracterizado por el desarrollo folicular y aumento de la actividad reproductiva. Estro: Tambin conocido como celo o calor y, debido a que en los ovinos no hay una caracterstica externa notoria, se recurre a los retajos. Dura alrededor de 24 a 48 hs. Y su importancia radica en que en el transcurso del mismo se produce la ovulacin. El celo se caracteriza por ser el nico perodo de receptibilidad sexual de la oveja, o sea, que tiene buena disposicin para aceptar al macho: permanece tranquila, en pie y no ofrece resistencia cuando el carnero salta. Adems trata de seguir al carnero o lo busca. Otra particularidad del celo es la secrecin del mucus vaginal. El mismo se aprecia en el interior de la vagina, dando clara idea al inseminador del momento del celo del animal. Por ej: el mucus claro (parecido a la clara de huevo) en poca cantidad, indica un celo
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incipiente. Al aumentar la cantidad, va aumentando el celo hasta decaer cuando el mucus toma una consistencia cremosa. Metaestro: Dura aproximadamente desde el segundo da al dcimoprimero. En este lapso se forma el cuerpo lteo o amarillo que, al secretar la progesterona, determina el desarrollo final del tero para la preez. Diestro: Comprende el perodo que abarca desde el dcimoprimer da hasta el comienzo del proestro. En caso de no haber preez, el cuerpo amarillo no se desarrolla al mximo y se produce un breve perodo de descanso genital, hasta la reaparicin del estro.

ESQUEMA DEL CICLO ESTRAL

Una vez conocida la fisiologa de los rganos genitales del carnero y de la oveja y, del momento ptimo para inseminar, comenzaremos a hablar, en forma resumida, de una serie de elementos, imprescindibles para llevar a cabo, con xito, la Inseminacin Artificial. Como nombramos anteriormente, debido a que el celo de la oveja no es caracterizado por ninguna manifestacin externa que se pueda apreciar a simple vista, se utilizan los machos marcadores denominados retajos cuya funcin es detectar a las ovejas que van entrando en celo. Retajos Podemos definirlos como aquellos machos que poseen instinto sexual o lbido, pero que, de alguna manera, se lo ha incapacitado en su capacidad para fecundar, es decir, que no deben emitir o introducir espermatozoides en el aparato genital de las ovejas. En la mayora de los casos se utilizan machos vasectomizados, que a travs de una operacin quirrgica se le anula la capacidad fecundante, pero no as, su deseo sexual.
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El nmero de retajos que se necesitan est relacionado directamente con la cantidad de ovejas a inseminar, normalmente se trabaja con el 1,5 a 2 % Como medida de seguridad y para un mayor xito, se prefiere ir rotando los retajos, en su trabajo, es decir, que si mantenemos esa proporcin, ser necesario duplicar el nmero de retajos. Pintura de los retajos Como mencionamos anteriormente estos animales los utilizamos para detectar las ovejas en celo y, para ello, se les pinta la zona del pecho y la panza, para que al montar a las ovejas, stas queden marcadas en la zona de la grupa. Para obtener buenos resultados se pintan los retajos antes de largarlos con las ovejas. El nico inconveniente que podra aparecer es que, en inviernos muy fros se les forme una pequea pelcula superficial de escarcha, siendo esto de menor importancia. A modo de comentario, nombraremos otras tcnicas utilizadas, pero menos difundidas, para detectar el celo: se pueden usar carneros enteros y funcionales con una especie de delantal de arpillera, como as tambin capones tratados con hormonas con cierta antelacin a la Inseminacin Artificial. Sin lugar a dudas otro tema de vital importancia es el de contar con potreros bien empastados y de instalaciones necesarias para llevar adelante el trabajo de Inseminacin Artificial. Los potreros deben reunir algunas condiciones elementales, tales como buen pasto, estar cerca del lugar donde se realiza la Inseminacin Artificial, buenos alambrados, aguadas abundantes y tranqueras en buenas condiciones y bien ubicadas. Instalaciones para inseminar En los ovinos la Inseminacin Artificial se realiza bajo techo y para esto podemos utilizar alguna construccin del establecimiento o crear una mvil en caso de no contar con potreros en buenas condiciones cercanos al casco. Generalmente son necesarias dos habitaciones como mnimo: en una se montar el laboratorio, donde se realiza el procesado del semen y en la otra se insemina. En la mayora de los establecimientos del sur se adapta el galpn de esquila o, como en nuestro caso, la cabaa para este fin. A continuacin se detallan los lugares o divisiones necesarios:

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Sala de Laboratorio: Sin llegar a ser muy sofisticada, debe contar con luz y una calefaccin adecuada, al igual que agua corriente (en lo posible caliente y fra) y alguna mesada y armario para procesar el material seminal y guardar el instrumental. Sala de Siembra: Se encuentra pegada al laboratorio y contar con las comodidades necesarias para inseminar los animales, segn las diversas tcnicas de sujecin de los mismos. Deber tener adems una fosa bajo nivel en la que se ubicar el operario para inseminar parado o sentado. Sala de extraccin del semen: Para la correcta realizacin de este trabajo, se puede contar con una habitacin especialmente destinada a esto y aislada del resto, para poder trabajar en las condiciones de tranquilidad que requiere esta operacin. En el caso de la Escuela, contamos con una rampa elevada que tiene un cepo para sujetar a la oveja en celo en uno de los extremos y del otro lado una rampa para que suba el carnero. Sala de sujecin: Puede estar separada de la sala de siembra a travs de una pared, o no, y es aqu donde se sujeta a la oveja para que el inseminador pueda trabajar con comodidad. Para ello el operador puede valerse de algn dispositivo mvil, llamado carrito, que es donde introduce a la oveja y la sujeta o directamente apretarla contra alguna pared. Es importante que el operario que trabaja aqu mantenga al animal lo ms quieto y tranquilo posible. Corrales y manga: Generalmente se utilizan los ya existentes en el establecimiento y es aqu donde se apartan los retajos y las ovejas en celo del resto del lote. En caso de hacer la Inseminacin Artificial en el campo con alguna casilla se pueden armar corrales porttiles y para su construccin se utilizan tablones de madera sujetados al piso con piquetes de hierro. Una vez nombradas las instalaciones mnimas necesarias para hacer la Inseminacin Artificial nombraremos los materiales o instrumentos que se necesitan en el laboratorio. Vagina artificial: La utilizamos para obtener el semen del carnero y, como su nombre indica, semeja la vagina de la oveja, porque provee estimulacin trmica (temperatura) y mecnica (presin) para producir la eyaculacin. Est constituida por un tubo rgido, de tipo manguera de
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VAGINA ARTIFICIAL ARMADA

radiador, que cuanto ms gruesa es, mantiene ms el calor. Puede medir de 20 a 30 cm de largo y de 6 a 8 cm de dimetro. Dentro de este tubo pasa otro de ltex cuyos extremos se reinvierten en los extremos de la manguera formando de esta manera una cmara hermtica que se llena con agua caliente a travs de un grifo ubicado en uno de sus laterales. Adems cuenta con una vlvula que utilizamos para soplar y colocar aire a la vagina artificial y darle de esta manera la presin deseada. Por ltimo, en uno de sus extremos lleva un cono de ltex ms grueso, que lleva adosado en su extremo un tubo colector y graduado. Vaginoscopio: Se utiliza para realizar el examen de la vagina y para ubicar el cuello uterino al momento de llevar a cabo la Inseminacin Artificial. Por su interior se introduce la cnula de la pistola dosificadora de semen. El vaginoscopio consta de un tubo cnico, que mide entre 10 y 20 cm de largo aproximadamente, pudiendo ser de metal cromado o plstico. En ngulo de 90 , este tubo tiene un mango por donde se sujeta y, en el interior del mismo van las pilas que sern la fuente de energa para la lamparita de 3 voltios ubicada en el interior y cuya luz es suficiente para visualizar los detalles del interior de la vagina. Pistola dosificadora del semen: Tambin llamada pistola inseminadora, consta de una cnula de vidrio larga que va adosada a una jeringa protegida con una armazn metlica. El mbolo es movido por una varilla dentada que se acciona por un gatillo, o sea que, al gatillar, se va moviendo el mbolo y saliendo el material contenido en el interior de la jeringa. Tubo colector graduado: Utilizado para recoger el semen. Es de vidrio y trae una graduacin, para que, en el momento de obtener el salto del carnero se pueda hacer una valoracin cuantitativa del semen.

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Bao de Mara: Es de vital importancia para poder mantener en buenas condiciones el material seminal cuando se hace la Inseminacin Artificial con semen fresco. En el mercado se venden unos recipientes que calientan el agua a la temperatura adecuada y la mantienen a travs de un termmetro que tiene incorporado. Otro mtodo ms prctico es fabricarla con un recipiente de telgopor con tapa a la cual se le hace unos orificios para colocar ah los vasitos recolectores. Vaselina neutra: Se utiliza en poca cantidad para lubricar la vagina artificial al momento de obtener el salto. Termmetro: Se utiliza para saber la temperatura de la vagina artificial al momento de la extraccin del semen y, evitar as exceso de temperatura, que podra quemar al carnero, o falta de temperatura, provocando que el carnero no eyacule. Microscopio: Sirve para realizar los exmenes del semen obtenido, tales como: recuento de espermatozoides, movilidad individual, etc. Tubos de ensayos graduados: Se pueden utilizar para preparar el diluyente y realizar las diluciones del semen de manera correcta. Portaobjetos, cubreobjetos: Se utilizan para observar los espermatozoides al microscopio. Detergente neutro, agua destilada, cepillos de cerda redondos: Para el lavado del instrumental. Planteo de la Inseminacin Artificial Este prrafo se referir a todo lo relacionado con el marcado de la hacienda lanar. Se describir el manejo de los retajos, pintura, recambio, manejo del carnero para la recoleccin del semen, preparacin de la vagina artificial, etc. poca de inicio de los trabajos El ciclo sexual del ovino se repite durante varios meses, generalmente en abril, mayo, junio, y julio, o sea, que se realizar la Inseminacin Artificial en el transcurso de los mismos. Duracin de la Inseminacin Artificial

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Muchos factores regulan el tiempo que se dedicar a Inseminacin Artificial, siendo uno de los ms importantes la calidad y cantidad de potreros que dispone el establecimiento. El tiempo de duracin se divide en perodos, que corresponden al del celo o estro del ovino, cuyo promedio de duracin es de 17 das. Es difcil precisar con exactitud el promedio de duracin de la Inseminacin Artificial en el sur, pero a modo de gua, se observa que vara entre 1 y 3 celos. Alimentacin de las madres Como dijimos anteriormente, la importancia de tener buenos campos es un factor de xito en el logro de la Inseminacin Artificial. Si bien, el ingreso de alimentos es importante tanto en carneros, como en ovejas, son stas ltimas las que como madres deben responder a un doble objetivo: producir cras normales y proteger y reparar sus propios tejidos. Si la alimentacin no cubre estas exigencias, la madre debe recurrir a otras fuentes de nutrientes. Debido a lo intensivo del trabajo de Inseminacin Artificial, se observa que las madres decaen en forma notoria y, es por esto que, en algunos casos hay que recurrir a la suplementacin de la disponibilidad forrajera, ya sea a travs de fardos de alfalfa, pellets o cualquier otro pasto que se consiga. Como contrapartida a este punto tenemos el valor que implica la compra de estos productos, debido a que aqu, en el sur, el flete de los mismos encarece considerablemente los costos. Pintura de los retajos Una vez que las ovejas estn cerca de los potreros de la estancia, se procede a organizar el trabajo con los retajos. Se dividen los mismos en dos lotes y la mitad comenzar a trabajar inmediatamente y el resto quedar para recambio. Se pintan los retajos en el pecho o vientre, a fin de que la marca que impriman en la oveja en celo sea perfectamente legible al momento de la mangueada. Trabajo de los retajos El primer da que se largan los retajos aparecer un alto porcentaje de animales marcados, que se debe a la gran cantidad de ovejas en celo y al exceso de lbido de los retajos. En lo posible, nunca se largan los retajos con las ovejas en los corrales, ya que stos podran marcar las ovejas por el solo hecho de amontonarse. Entonces se largan una vez que las ovejas ya se encuentran en el potrero destinado a este fin. El lote de retajos trabajando se repone por el otro en descanso, diariamente, por regla general, aunque se puede hacer cada tantos das.

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Organizacin de los movimientos y aparte de las ovejas marcadas Generalmente el aparte de las ovejas en celo se realiza en los corrales de la estancia. El rodeo se realiza lo ms temprano posible, calculando el horario en que aclara para no tener los animales encerrados en el corral; en invierno recin a partir de las 9,30 hs se comienza a ver algo. Mediante la manga se clasifican tres grupos de animales: el primero, que est formado por la mayora, y sale generalmente derecho, es el de las ovejas que no estn en celo; en el segundo se apartan las que estn en celo (marcadas) y, en el ltimo, los retajos. El hombre encargado de separar los animales en la manga debe tener prctica, para realizar una buena labor y apartar solamente las ovejas que estn bien marcadas en la zona de la grupa. Cuando la Inseminacin Artificial se plantea para hacer dos siembras diarias, el trabajo de aparte se realiza tambin dos veces al da. Pero la experiencia en nuestra zona sugiere que los resultados finales son muy similares, con una siembra o dos, debido a que un solo aparte diario nos representa ms ventajas, no slo desde un punto de vista prctico, sino que adems los animales no estn tan corraleados. Una vez terminado el trabajo en la manga las ovejas marcadas se llevan a la sala de la siembra y las que no fueron montadas se devuelven al potrero para despus echarles los retajos. Recoleccin del semen Habindose organizado los trabajos con la hacienda, describimos a continuacin las tcnicas empleadas para la recoleccin del semen. Prcticamente todos los inseminadores utilizan la vagina artificial, pudindose recurrir a la electroeyaculacin en circunstancias apremiantes.

La recoleccin del semen se realiza momentos antes de la inseminacin, debido a que la experiencia indica que la utilizacin del semen fresco o recin extrado es de mayor fertilidad. Esta razn hace que en general siempre se trabaje con el semen del da, o a lo sumo, de la tarde anterior.

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Tcnica de la vagina artificial La vagina artificial es una imitacin de la vagina de la oveja y provee una estimulacin trmica (temperatura) y mecnica (presin) necesarias para producir la eyaculacin del carnero. La vagina artificial se carga con agua a 48 C a 50 C y, luego se le coloca aire a travs de una vlvula alojada al costado del tubo hasta lograr la presin adecuada. Por ltimo se lubrica el interior de la misma con algn lubricante neutro, que no tenga accin nociva sobre los espermatozoides, por ej: vaselina neutra. La temperatura de la vagina justo antes de la recoleccin no debe superar los 45 C, variando segn el carnero. Una temperatura muy baja provocar que el animal salte pero no eyacule, por falta de excitacin sobre los centros nerviosos y, una temperatura muy alta, puede acobardar al animal de tal manera que se corre el riesgo de que ese carnero no vuelva a saltar. ESTIMULACIN MECNICA La recoleccin del semen se har en un lugar (PRESIN) limpio y libre de polvo. La hembra que se utilizar deber estar en celo, para provocar el inters del macho. Se la asegura mediante un cepo y puede estar directamente en el piso o tener una rampa para que el operador trabaje ms cmodo. Una vez preparado para sacar el salto, se trae al carnero hacia el lugar donde est la oveja y se espera al costado de ste, para que luego de unos minutos, salte. El operador debe estar preparado para una monta y eyaculacin veloz. Cuando el macho salta, se desva el pene para introducirlo dentro de la vagina artificial. Un golpe hacia arriba y hacia delante indica que la eyaculacin ha ocurrido. Inmediatamente despus del salto, el tubo de recoleccin se coloca en un Bao de Mara a 35 C 37 C. Anlisis del semen El anlisis del semen es un elemento primordial para comprobar la capacidad funcional del mismo. Luego de su recoleccin es importante que, en todo momento, el semen se mantenga protegido de los cambios bruscos de temperatura, del contacto con el agua y metales, de la radiacin solar directa, e impurezas. Por lo tanto, todo el material que entre en

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contacto con el eyaculado, deber ser de vidrio o plstico, estar esterilizado y seco, y a la misma temperatura que el semen. El volumen y concentracin espermtica deben ser estimadas antes de su utilizacin, para realizar una correcta dilucin segn el volumen y nmero de espermatozoides totales a inseminar por dosis. El volumen promedio del eyaculado del carnero es de 1 ml (0,7 ml a 3 ml) y su concentracin vara entre 2.000 y 6.000 millones de espermatozoides/ml. Podemos dividir al anlisis que realizamos sobre el material seminal en dos: A- Inspeccin visual macroscpica B- Observacin microscpica A- Se realiza inmediatamente despus de la recoleccin, percibindose en lneas generales, las condiciones fsicas tales como volumen, color, densidad, olor y movilidad en masa. Volumen: es la cantidad de semen de un eyaculado y est condicionado por diferentes factores como: Edad del animal (los adultos producen eyaculados ms voluminosos); Alimentacin adecuada y abundante durante todo el ao; Ritmo sexual, que es el rgimen por el que el animal habituado a saltar diariamente, eyacular ms que otro que lo hace solo de vez en cuando; La excitacin, condicionada por una serie de factores nerviosos y externos que influyen directamente sobre el volumen, y que el operario puede regular en gran medida. Estado general del animal: aparte de los factores ya mencionados, una buena sanidad, dosificacin peridica, vacunacin en caso de ser necesario, etc., pero fundamentalmente, un buen manejo. Color: Salvo contaminaciones con pus o sangre, el color est condicionado por la concentracin espermtica. Un semen de alta concentracin, 3.000 a 4.000 millones de espermatozoides por mm ser por lo general de un color blanco cremoso. Cuando la concentracin es de 2.000 a 2.500 millones espermatozoides por mm, tendr un color blanco mate. Cuando la concentracin est por debajo de los 2.000 millones, el color caracterstico es blanco lechoso y, cuando est por debajo de estos valores, es transparente (incoloro). Olor: El semen normal del carnero es inodoro.

Movilidad en masa: Es la apreciacin visual de los movimientos en ondas en el mismo tubo colector, donde se recogi el eyaculado.

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Entre otras cosas la movilidad est condicionada por la concentracin espermtica, la intensidad de movimientos, y la proporcin de clulas vivas y muertas. B- Observacin microscpica: Manteniendo el semen a una temperatura fisiolgica, 37 C, observando al microscopio obtendremos los datos referentes a la movilidad de los espermatozoides. 1- Con pequeo aumento, muestra la movilidad en masa. 2- Con gran aumento, nos permite observar la movilidad individual. En cuanto a la observacin de la actividad propia de los espermatozoides, los podemos clasificar de la siguiente manera: 1) Movimiento rectilneo: Por la energa que poseen los espermatozoides, consiguen el mximo de proyeccin hacia adelante. Este movimiento se observa en un semen de alta viabilidad y elevado ndice de fertilidad.

2) Movimiento zigzagueante: el avance hacia delante se efecta siguiendo un recorrido vacilante, con frecuentes curvas y tanteos a ambos lados.

3) Movimientos circulares: Con velocidad reducida, el espermatozoide describe crculos en forma de espirales, como si hubiese perdido el rumbo de su recorrido.

4) Movimiento oscilatorio: Las clulas germinales prcticamente no cambian de sitio, pero hacen movimientos reducidos hacia ambos lados. Colean sin avanzar, siendo esta la forma de movimiento que antecede a la inmovilizacin completa.

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Conviene tener presente que el movimiento rectilneo es fundamental para la fecundacin, ya que es el nico progresivo. Este movimiento, con las contracciones de los cuernos y oviductos, permite a los espermatozoides llegar en pocos minutos a las trompas uterinas. Estimacin de la concentracin espermtica Analizada la movilidad de la muestra de semen, interesa conocer la cantidad de espermatozoides con respecto a la unidad. Esta cifra relacionada con el valor conocido del volumen eyaculado del carnero nos permite calcular el nmero total de espermatozoides, de gran utilidad en la determinacin de la capacidad fecundante del macho. Dos de las tcnicas ms difundidas para este fin son: Mtodo de apreciacin visual: Aplicando la siguiente escala puede hacerse una evaluacin cuyo margen de error no afectara las dosis espermticas necesarias por dosis inseminante: Puntaje 5 4 3 2 1 1 Consistencia Espeso-cremoso Cremoso Cremoso liviano Lechoso Nuboso Aguachento Cant.Espermat./cm 5.000.000.000 4.000.000.000 3.000.000.000 2.000.000.000 700.000.000 Insignificante

Recuento Espermtico Microscpico

Para hacer este anlisis se necesitan los siguientes elementos: cmara cuentaglbulos y pipeta; solucin alcohlica de azul de metileno y microscopio. Despus de asegurarse de que los espermatozoides se hallan uniformemente distribuidos en la masa total de la muestra de semen, se aspiran 0,5 ml con la pipeta. Se completa la carga de la pipeta con diluyente hasta la marca de 1,01 ml y, con esto se obtiene una dilucin del semen al 1/200. Se agita suavemente la pipeta para asegurarse de que los espermatozoides se mezclen en el bulbo.
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Entre tanto, se ha preparado la cmara cuentaglbulos colocando el cubreobjetos especial sobre el centro de la misma. A continuacin se vierte la parte del lquido que ha quedado en la columna capilar por estar mal mezclado y, se deja caer una gota correcta en el borde del cubreobjeto, con lo cual, el lquido se extiende uniformemente en toda la superficie de la cmara. Con el microscopio se cuentan los espermatozoides contenidos en cinco de los cuadrados grandes del retculo, y el total se multiplica por 10.000, obteniendo de esta manera la cantidad de espermatozoides por mm. Para conocer la cantidad total del eyaculado, se multiplica por la cantidad de mm obtenidos del mismo. A pesar de que la realizacin de todas estas pruebas o exmenes para obtener una informacin cabal sobre las aptitudes de una muestra de semen, su realizacin no siempre es factible en los laboratorios de campaa, ya sea por exigir equipos completos y que requieren personal entrenado. Por razones de practicidad, con una buena apreciacin visual y utilizando la escala que vimos anteriormente, se puede realizar un buen trabajo. Dilucin del semen y siembra La dilucin del semen se lleva a cabo por razones tcnicas y biolgicas: Razones tcnicas: Incrementar el volumen de eyaculado para inseminar un gran nmero de hembras (uso intensivo del padre). Razones biolgicas: Proveer a los espermatozoides nutrientes y proteccin contra el enfriamiento y congelamiento. Un diluyente adecuado debe reunir estas caractersticas principales: a- Mantener la capacidad fertilizante de los espermatozoides durante el mayor tiempo posible, lo que se consigue: - ofreciendo un medio fsico-qumico satisfactorio - Conteniendo un agente amortiguador (buffer), que mantenga el pH normal (6,8) - Proveyendo principios nutritivos b- Debe prepararse fcilmente, con sustancias que se encuentren en el mercado c- Que sean de bajo costo. Los diluyentes que se utilizan para semen fresco pueden ser sintticos o naturales (leche de vaca).

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Diluyentes sintticos Los diluyentes sintticos comnmente utilizados en la dilucin del semen del carnero para Inseminacin Artificial contienen tris o citrato de sodio como buffers, glucosa o fructosa como fuente de energa, y yema de huevo como protector de las membranas de las clulas espermticas contra eventuales golpes de fro. Se recomiendan los siguientes diluyentes sintticos: Diluyente yema de huevo, tris, glucosa Tris Glucosa cido Ctrico Agua destilada hasta 3,630 gr. 0,500 gr. 1,900 gr. 80 cc

Diluyente yema de huevo, glucosa, citrato Citrato de sodio Glucosa Yema de huevo Agua destilada hasta 2,37 gr. 0,80 gr. 20 ml 100 ml

Para la preparacin de los diluyentes se deben pesar los qumicos en primera instancia y disolverlos en 75-80 ml de agua destilada. Luego del agregado de la yema de huevo que complete el volumen final (100 ml), se mezcla el diluyente invirtiendo la probeta varias veces. La yema debe ser fresca, proveniente de un huevo del da. Se lava cuidadosamente la cscara, se esteriliza con un pao mojado con alcohol y se deja secar. Luego de separar la clara, se coloca la yema en un papel absorbente, cuidando que no se rompa la membrana. Luego con una jeringa se extrae desde el interior de la yema la cantidad necesaria de la misma. La dilucin se hace en base a: a- La cantidad de ovejas en celo para inseminar b- Cantidad de semen obtenido Un buen carnero puede dar una media de 1,2 cm de semen en uno o dos saltos diarios, habiendo animales que pasan ampliamente esta cantidad. Si el semen es bueno, contendr por lo menos 3.000 millones de espermatozoides, pero frecuentemente contienen ms. Con una simple dilucin de uno:uno (tambin se pueden hacer diluciones mayores) se consiguen 2,4 cm de material seminal, utilizando 0,2 cm por oveja, tericamente se
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fecundan 12 animales por carnero y por salto. En cada oveja se introducirn por lo menos 200 millones, cantidad necesaria para lograr una buena fecundidad. Para el proceso de dilucin del semen propiamente dicho, conviene verter el diluyente en el recipiente que contenga el semen. Inseminacin de las ovejas Manejo de los animales en celo Una vez apartadas las ovejas marcadas por los retajos, se arrean hasta las instalaciones para inseminar. Se presta especial atencin a que todos los animales apartados estn bien marcados, caso contrario, se apartan los dudosos, seguramente producto de un roce en el corral. Sujecin del animal Anteriormente se mencionaron elementos tales como plataformas o carros, que fueron ideados para realizar una mejor y ms rpida labor. Lo principal de este trabajo es que el animal se presente al inseminador lo ms quieto y tranquilo posible para facilitar de esta manera el proceso de siembra. Momento de la inseminacin Analizando la fisiologa de la reproduccin, vemos que el celo en la oveja dura aproximadamente de 24 a 48 hs. En ese intern se produce la maduracin folicular, presumiblemente de la mitad en adelante del estro, siendo, por lo tanto el momento indicado para inseminar. En la prctica, es difcil hacer coincidir la siembra con el momento ideal del celo especialmente, cuando sta se realiza una sola vez por animal y por da. En nuestra zona se acostumbra hacer dos siembras, una por la maana y otra por la tarde, pero en distintos animales, es decir, que se inseminan una sola vez. En la prctica, hacer un aparte diario e inseminar o hacer dos apartes y siembras por da, no muestra diferencias significativas en los porcentajes de pariciones. Preparacin de la pistola inseminadora El armado se hace fcilmente montando en primer lugar el portambolo y agregndole luego la cnula de vidrio. Antes de esto, se puede lubricar el mbolo con el semen para que se deslice ms fcilmente la cnula.
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Inseminacin Presentado el animal por los ayudantes el inseminador introduce el vaginoscopio en la vagina de la oveja. En caso de lubricar el vaginoscopio se cuenta con un recipiente para lubricante y un trozo de algodn o papel absorbente. Mediante el vaginoscopio se localizan el cuello uterino y el conducto cervical (orificio externo), generalmente cubiertos por las lengetas de la mucosa y la secrecin del estro. Con la mano derecha se introduce la pistola dosificadora y con la ayuda de la cnula se hace correr el flujo hacia el exterior. Localizado el cuello se llega con la cnula hasta el orificio del conducto. Antes de gatillar la pistola, se extrae el vaginoscopio algunos mm y se realiza la siembra o inseminacin. La extraccin previa del vaginoscopio es indispensable para evitar que, por contacto con el animal, el material seminal refluya a la vagina. Queda terminada la operacin cuando el inseminador retira la pistola y consecutivamente el vaginoscopio.

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Acondicionamiento del material utilizado. Todo el instrumental utilizado deber ser limpiado y esterilizado. Ser importante remojar el material en agua con detergente neutro inmediatamente despus de ser utilizado. Para el lavado de pipetas, se recomienda dejarlas en remojo cambiando varias veces el agua. Luego se lavar teniendo especial cuidado con el enjuague, primero con agua comn y a continuacin varias veces con agua destilada. El material as tratado se dejar secar en estufa.

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El material de vidrio, previamente envuelto en papel de aluminio, se esterilizar en autoclave, llevndolo a una temperatura mxima de 165 C, por lo menos durante una hora. El material de plstico se esterilizar con alcohol al 70%, dejndolo escurrir aproximadamente una hora. La parte externa de la vagina artificial no necesita esterilizacin despus de lavada. La parte interna se esterilizar con alcohol al 70% antes de ser utilizada.

COMENTARIO FINAL El trabajo de Inseminacin artificial es de fundamental importancia cuando se busca lograr un mejoramiento gentico. Como vimos anteriormente, la tcnica de siembra o inseminacin propiamente dicha es lo que menos espacio nos ocup, pues al ser algo sistemtico, con el hecho de inseminar un nmero bajo de ovejas, ya nos queda grabada la forma correcta de llevar a cabo esta tcnica. Para lograr buenos resultados, debemos hacer especial hincapi en el manejo de los corrales, apartando solamente las ovejas que estn bien marcadas por los retajos, por ms que sean un nmero bajo. Otro tema de vital importancia es el del manipuleo del semen, con materiales perfectamente limpios y esterilizados.

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