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5-tinciones-especiales

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Tinciones especiales: Gram, Ziehl Neelsen y cápsula

Práctica 5

Coloración • Favorece la observación • Estudio de características ▫ Forma ▫ Agrupación ▫ Estructuras celulares .

Frotis o extendido • Preparación del extendido  obtener una monocapa separada de células • Secado  evaporar el líquido del extendido • Fijado  ▫ coagular las proteínas protoplasmáticas. ▫ adherir los microorganismos a la lamina y ▫ soportar los pasos de las tinciones • Coloración .

.

Procedimiento • Preparación del frotis ▫ Lámina 1: Staphylococcus aureus ▫ Lámina 2: Escherichia coli ▫ Lámina 3: Laminas preparadas ▫ Lámina 4: Klebsiella pneumoniae .

Gram positivo Gram negativo .Tinción de gram Las diferencias de la tinción se deben a los distintos grados de permeabilidad de las paredes celulares.

Fijar Cristal violeta Yodo Alcohol-acetona Safranina .

Tinción de Gram (lamina 1 y 2) • Cristal violeta (1 minuto) ▫ Lavar • Lugol (1 minuto) ▫ Lavar • Alcohol-acetona (3-5 segundos) ▫ Lavar • Safranina (1 minuto) ▫ Lavar .

Tinción de Ziehl Neelsen Propiedad que presentan las bacterias para resistir la decoloración de ácidos fuertes después de teñirse con fucsina caliente Bacterias alcohol ácido resistentes .

Tinción de Ziehl Neelsen (lamina 3) • Fucsina feniciada (1 minuto) ▫ Calentar con mechero de alcohol  producción de vapores ▫ Esperar 5 minutos ▫ Lavar • Alcohol ácido (30 segundos) ▫ Lavar • Azul de metileno (30 segundos) ▫ Lavar .

.Tinción de la cápsula CAPSULA: estructura superficial. que consiste en la acumulación de material mucoso o viscoso alrededor de la pared celular. no la cápsula. Tinción: se tiñe el entorno.

Tinción de Cápsula (lámina 4) • Azul de metileno (5 minutos) ▫ Lavar ▫ Dejar secar • Tinta Parker  con otra lámina hacer un frote sobre la lamina (ángulo de 45 ) .

Observación al microscopio • Dibujo en 100x ▫ Enfocar primero en 10 x • Laminas: ▫ Gram positivo ▫ Gram negativo ▫ Alcohol ácido resistentes ▫ Cápsula .

.

Gram positivo Gram negativo Alcohol ácido resistente Cápsula .

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