TECNICAS Citologicas

Laboratorio de Técnicas Citológicas
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANÁLISIS
REGIÓN VERACRUZ
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
CATEDRÁTICA:
Dra. Martha Elva Díaz Viveros

ALUMNO:
FECHA:
Facultad de Bioanálisis, Región Veracruz.

Práctica No. 1
DESCRIPCION, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

E
ILUMINACIÓN DE KÖHLER
* FUNDAMENTO:
El microscopio como su nombre lo indica, es un instrumento
óptico que amplifica la imagen de un objeto pequeño, las imágenes
microscópicas pueden aumentar de 100 a 2000 veces el tamaño
original. No obstante, la función más importante del instrumento no es
solo ver los objetos pequeños sino interpretar lo que se ve, debido a
esto, el empleo del microscopio exige más que en ningún otro caso, un
gran conocimiento del instrumento y su adecuado manejo para lograr
imágenes amplificadas con la menor cantidad posible de defectos
ópticos y el logro de contraste adecuado.
El microscopio es el instrumento que más se usa en los
laboratorios que estudian imágenes pequeñas. Actualmente existen
dos tipos de microscopios: el óptico y el electrónico. En el microscopio
óptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentes
que manipula el paso de los rayos de luz entre el objeto y los ojos. El
microscopio electrónico utiliza un rayo de electrones controlado por un
campo magnético. A nivel del laboratorio, en donde el Químico Clínico
desempeña su principal función, el microscopio es un instrumento
fundamental de trabajo, por lo anterior, se considera necesario que en
la formación del Químico Clínico se ponga principal interés en su
enseñanza.
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que se emplea
para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no
visibles a simple vista. El microscopio óptico común está conformado
por tres sistemas:
a. El sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en
las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento
para el enfoque.
b. El sistema óptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de
tal manera que produce el aumento de las imágenes que se
observan a través de ellas
c. El sistema de iluminación comprende las partes del microscopio
que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria
para efectuar la observación a través del microscopio.
La parte mecánica del Microscopio

La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el

revólver, el asa, la platina, el carro, el tornillo macrométrico y el tornillo
micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de
iluminación, además permite los desplazamientos necesarios para el
enfoque del objeto.
El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene
por lo general forma de Y o bien es rectangular
El tubo. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para
evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su
extremidad superior se colocan los oculares.
El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se
enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el
eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el
ruido de un piñón que lo fija.
La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en
la parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y
por el extremo inferior se adapta al pie.
La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la
preparación u objeto que se va a observar. Presenta un orificio en el eje
óptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la
preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece
inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos
laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que permite deslizar
la preparación con movimiento ortogonal de adelante hacia atrás y de
derecha a izquierda.
El tornillo macrométrico. Girando este tornillo, asciende o desciende
el tubo del microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a una
cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido de la
preparación.
El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible
que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto
y nitido de la preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en
divisiones de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y
puede medir el espesor de los objetos.
Sistema Óptico
El sistema óptico es el encargado de reproducir y aumentar las
imágenes mediante el conjunto de lentes que lo componen.
Los oculares. Los oculares están constituidos generalmente por dos
lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los oculares generalmente más
utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar
en forma abreviada los aumentos.

Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imágenes de

los objetos y organismos y, por tanto, se hallan cerca de la preparación
que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos
tipos: objetivos secos y objetivos de inmersión.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia
alguna entre ellos y la preparación. En la cara externa llevan una serie
de índices que indican el aumento que producen, la abertura numérica
y otros datos. Así por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan
40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es planacromático, su
aumento 40 y su abertura numérica 0,65, calculada para una longitud
de tubo de 160 mm. El número de objetivos varía con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos
secos más frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X.
El objetivo de inmersión está compuesto por un complicado sistema de
lentes. Para observar a través de este objetivo es necesario colocar
una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparación, de
manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro.
Generalmente, estos objetivos son de 1 OOX y se distingue por uno o
dos círculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.
Los objetivos se disponen en una pieza giratoria denominada revólver.
Sistema de Iluminación
Dirige la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparación u objeto que se va a observar en el microscopio.
Comprende los siguientes elementos:
El espejo. Tiene dos caras: una cóncava y otra plana. Goza de
movimientos en todas las direcciones. La cara cóncava se emplea de
preferencia con iluminación artificial, y la plana, para iluminación
natural (luz solar). Modernamente se prescinde del espejo en la
fabricación de microscopios, ya que éstos traen incorporada una
lámpara colocada en el eje del microscopio.
Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes,
cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la
preparación. El condensador se halla debajo de la platina. Puede
deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que
determina su movimiento ascendente o descendente.
Diafragma. Generalmente, el condensador está provisto de un
diafragma-iris, que regula su abertura y controla la calidad de luz que
debe pasar a través del condensador.
Trayectoria del Rayo de Luz a través del Microscopio

El haz luminoso procedente de la lámpara pasa directamente a través
del diafragma al condensador. Gracias al sistema de lentes que posee

el condensador, la luz es concentrada sobre la preparación a observar.

El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar el
ocular, donde es captado por el ojo del observador
* MATERIAL:
Microscopio Compuesto de campo claro.
* METODOLOGÍA:
El microscopio es un instrumento óptico de precisión que proporciona la

amplificación de las imágenes de los objetos, lo que hace posible, ver con
detalles y claridad sus estructuras pequeñas o invisibles a la vista humana,
facilitando de esta manera su estudio. Esta integrado por tres sistemas;
óptico, mecánico y de iluminación, a su vez cada sistema esta constituido
por varios componentes y cada uno tiene funciones especificas, las que son
necesarias conocer para su buen funcionamiento.
1. Identifique las partes del sistema mecánico del microscopio.

2. Identifique las partes del sistema óptico del microscopio.
3. Identifique las partes del sistema de iluminación del microscopio.
4. Describa las principales características de cada uno de los
componentes que integran el sistema mecánico, óptico y de
iluminación del microscopio.
5. Describa la función que tienen cada una de las partes que
integran los sistemas antes mencionados.
1. Colocar el microscopio en una mesa que permita una cómoda

observación a través del ocular.
2. Limpiar el sistema óptico y el de iluminación.
3. Subir el condensador hasta el tope y cerrar el diafragma iris
aproximadamente a la mitad.
4. Seleccionar con el revolver el objetivo de menor aumento (10 X).

Bajar la platina y colocar la preparación (fijarse que quede firmemente

sujeta al carro, y que el cubre objetos y el objeto estén situados hacia
arriba) acomodando la porción de la preparación que se va examinar en la
apertura central de la platina
5. Mirando por los extremos subir la platina hasta el tope, si no hay

tope acercar la platina lo más cerca posible a la lente objetiva, hasta
apoyarlo levemente sobre la preparación. Normalmente los
microscopios convencionales poseen un tope que impide su ascenso
por arriba de cierta marca. Sin embargo, puede darse el caso que tal
tope no exista. (este tope solo existe en la lente objetiva de 10X)
6. Mirando por los oculares bajar la platina con el tornillo

macrométrico hasta que empiecen a distinguirse los detalles de la
preparación.
7. Afinar los detalles de la imagen moviendo el tornillo micrométrico.

8. Ajustar la distancia interpupilar ( distancia entre los ojos).
9. Ajustar dioptrías (agudeza visual) en el porta ocular izquierdo, o bien

con el ocular enfocable izquierdo

10 Una vez conseguido el enfoque correcto, recorra todo la preparación, a

fin de ir reconociendo imágenes que le sean familiares. recordar que el
objetivo de 10X permite ver la visión panorámica del preparado. Es
decir, los tejidos, su ubicación, y sus relaciones (función importante al
inicio del estudio que ahorrará tiempo dedicado al análisis de la
muestra).
11 Cambiar a un objetivo de más aumento (sin bajar la platina con el
tornillo macrométrico) y enfocar únicamente con el tornillo micrométrico.
12 Para usar el objetivo de 100X, aleje la lente de la muestra, deposite una
gota de aceite de inmersión en el portaobjetos (sin quitar la laminilla de
la platina) en el punto de mayor concentración luminosa, acerque la
lente de 100 lentamente hasta que esta se encuentre en contacto con el
aceite (observar lateralmente éste movimiento). Observe por el ocular y
mueva ligeramente el tornillo micrométrico hasta encontrar la imagen.
13 Recordar que los objetivos de 40X y 100X, permiten ver detalles de una
célula, o la conformación celular de una estructura. Se puede observar la
forma y tamaño de células o grupo de ellas, aspecto que permite
analizar la muestra de manera eficiente.
14 Al finalizar su observación, apague la fuente de luz, colocar la lente de menor aumento. Aleje la platina del
objetivo. Retire la laminilla y limpie las lentes objetivas y la platina.
MICROSCOPIO COMPUESTO

* OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
El microscopio, es uno de los instrumentos de uso más frecuente en los

laboratorios clínicos, muchos de los errores diagnósticos no tienen su base
en el preparado, sino en la errónea manipulación del instrumento. El uso
adecuado de los recursos ópticos del microscopio permitirá reconocer
detalles y variaciones tintoriales, que ayudarán al correcto diagnóstico, es
por eso importante, que para su manejo, se cuente con técnicas adecuadas
que permitan obtener imágenes claras en el menor tiempo posible y que
además, mantengan al instrumento en buenas condiciones.
El microscopio es un instrumento óptico de precisión, mediante un sistema
de lentes y fuentes de iluminación puede hacer visible un objeto
microscópico y proporciona la amplificación de las imágenes de los objetos,
lo que hace posible, ver con detalles y claridad sus estructuras pequeñas o
invisibles a la vista humana, facilitando de esta manera su estudio. Las
lentes de un microscopio óptico se encuentran en el condensador, el objetivo
y el ocular. El condensador se utiliza para enfocar la luz sobre la preparación.
Elevando o bajando el condensador puede alterarse el plano del foco de luz y
elegirse una posición que consiga el foco preciso. El objetivo es la lente
situada cerca del objeto que se observa. El aumento primario del objeto es
producido por la lente objetivo y la imagen se transmite al ocular, donde se
realiza el aumento final. En los microscopios modernos el tubo óptico tiene
una medida estándar y produce aumentos de 1x, no obstante este aumento
varia de acuerdo a su medida. Por lo tanto, el aumento total de un
microscopio compuesto se debe calcular tomando en cuenta el producto del
aumento de su objetivo, tubo óptico y de su ocular.

Práctica No. 2
TOMA DE ESTUDIO CITÓLOGICO CÉRVICO-VAGINAL PARA DOC
* FUNDAMENTO:
El cáncer cérvico-uterino es la neoplasia maligna más frecuente en

México. El estudio citológico cérvico-vaginal anual es la forma más adecuada,
sencilla y de bajo costo para detectar este tipo de cáncer. Para un
diagnóstico correcto es fundamental abarcar la zona escamocolumnar.
El estudio al microscopio de las células exfoliadas del aparato genital
femenino es un complemento diagnóstico de primordial importancia en
ginecología y obstetricia.
La principal utilidad de la citología exfoliativa ginecológica es la
detección precoz de lesiones precursoras del carcinoma de cuello
uterino. Mediante la organización de programas de detección masiva en
mujeres asintomáticas, con el procedimiento de Papanicolaou y el
tratamiento y control adecuado de los casos diagnosticados, se ha logrado,
en algunos países del mundo, reducir la incidencia y, la mortalidad por
cáncer invasor del cuello uterino.
La citología exfoliativa también puede tener utilidad en el diagnóstico
de tumores de la vagina, endometrio y ovario. La citología hormonal puede
ser empleada para evaluar ciertos aspectos de la condición hormonal en la
mujer.
El estudio de la citología exfoliativa del aparato genital de la mujer fue
especialmente desarrollado por George Papanicolaou, quien, además de
describir las características morfológicas de las células exfoliadas, desarrolló
una técnica de fijación y tinción de los extendidos que se mantiene hasta hoy
y que permite un adecuado estudio citológico. En su honor se denomina,
prácticamente en todo el mundo, examen de Papanicolaou (PAP) al estudio
de la citología exfoliativa diagnóstica del aparato genital femenino,
especialmente a la proveniente del cuello uterino. En la actualidad ya está

demostrado que el uso del PAP no sólo es útil en la detección del cáncer en la
citología ginecológica sino en otros tipos de patologías.
El Dr. George Papanicolaou en 1941 propuso por primera vez la

evaluación citológica de células obtenidas del cervix y vagina como método
para detectar cáncer cervical y sus precursores. Posteriormente la citología
cervical ha sido aprobada como el método más eficaz y efectivo para la
detección del cáncer y sus precursores.
A pesar de la probada efectividad de los frotis de PAP en la reducción de la
incidencia del cáncer cervical, muchos se han preocupado de la precisión de
esta prueba diagnóstica, la cual depende de su especificidad y sensibilidad
para detectar. La citología es extremadamente específica para detectar
cáncer cervical y NIC de alto grado, pero es mucho menos específica para
diagnosticar NIC de bajo grado.
En contraste a su alta especificidad para detectar alto grado de NIC y

cáncer invasor el PAP no es muy sensitivo, pues los resultados falsos
negativos ocurren entre el 8 y 50%. Cuando los frotis de PAP fueron
introducidos por Papanicolaou las muestras eran tomadas solo del fondo de
saco vaginal y prontamente pareció que este método era inadecuado
resultando una proporción alta de falsos negativos, Ayre en 1947 reportó el
uso de espátula de madera para raspar la superficie del cervix para obtener
las células del área en que se inician y desarrollan las NIC y cánceres muy
conocida como la Zona de Transformación, la muestra puede ser tornada con
un aspirador endocervical, un hisopo de algodón humedecido con solución
salina o con escobilla endocervical (citobrush). Con esta última se obtiene 10
veces más células endocervicales que con el hisopo de algodón, mejorando
la eficacia del PAP. Estudios que usan una combinación de espátula de
madera y escobilla endocervical reportan alrededor de 20% de falsos
negativos. Otros factores importantes para reducir la proporción de falsos
negativos son la fijación rápida de células para prevenir cambios secundarios
artificiales debidos a la sequedad por aire y también el uso de un laboratorio
citológico con normas rigurosas de control de calidad.
Es necesario cumplir simples lineamientos. La paciente debe ser
instruida a no usar ducha o lavado vaginal y no tener coito por 24 horas
antes de la obtención de la muestra. El PAP no debe ser obtenido durante la
regla o menos de una semana después de cesar antibióticos intravaginales o
agentes antimicóticos. Debe ser tomado antes del examen bimanual usando
una pequeña cantidad o no de lubricante. Ácido acético no debe ser aplicado
al cervix antes de tomar el frotis. Una espátula de madera tipo Ayre deberá
ser usada y rotada alrededor del cervix dos veces con presión firme, Una
escobilla endocervical, inmediatamente colocada en el orificio externo,
rotada 180º solamente y retirada. Las células obtenidas con ambos métodos
son colocadas en la misma lámina. La muestra es inmediatamente fijada y
etiquetada con el nombre de la paciente.

* MATERIAL:
• Mesa de exploraciones.
• Espejo vaginal estéril y sin lubricantes.
• Guantes estériles.
• Citobrush, espátula de Ayre o hisopo sin algodón.
• Citospray o alcohol de 96º.
• Laminillas portaobjetos.
• Lápiz diamante.
* METODOLOGÍA:
Con la paciente en posición ginecológica, se introduce el espejo vaginal

cerrado verticalmente cabía adentro y ligeramente hacia abajo, rotándolo
hasta quedar dentro y horizontal. Se abre el espejo, se observa el cerviz y se
procede a la toma del estudio mediante el citobrush o espátula de Ayre,
introduciendo la parte convexa dentro del orificio cervical y rotándola 360º.
Se coloca la muestra sobre el portaobjetos previamente identificado
con los datos de la paciente poniéndola a continuación de la muestra o la
toma exocervical. Se fija con el citospray rociándola a 30 cm de distancia.
* OBSERVACIONES:
Se debe tratar de localizar el cerviz siempre, con el mínimo de

molestias para la paciente. En caso de no contar con material adecuado,
puede usarse el abatelenguas junto con el hisopo sin algodón. En caso de
carecer del citospray puede sustituirse por alcohol de 96º. Se debe procurar
que no pasen más de 10 segundos entre la toma y la fijación.
* RESULTADOS:
Se obtendrán así las laminillas con material celular adecuado y

fijado, listas para ser teñidas y observadas al microscopio.
* ESQUEMAS

Frotis de Papanicolaou
El examen de Papanicolaou es un
procedimiento simple y relativamente
económico que puede detectar con facilidad
condiciones cancerosas o precancerosas.
Práctica No. 4
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS CERVICOVAGINALES NORMALES
* FUNDAMENTO:
La muestra citológica habitual se obtiene del cuello uterino de la unión

escamocolumnar y del fondo de saco posterior de la vagina para
diagnóstico oncológico y de pared lateral de la vagina para diagnóstico
hormonal. Con este procedimiento se obtienen fundamentalmente células
exfoliadas del epitelio pavimentoso cervicovaginal y del epitelio cilíndrico
endocervical, en ocasiones también se encuentran células endometriales y,
excepcionalmente, células del epitelio de la trompa y del ovario, Además

pueden encontrarse eritrocitos, células inflamatorias, microorganismos y

elementos de contaminación.
El Frotis Citológico se tiñe generalmente con el método de Papanicolaou. Este

método emplea hematoxilina para teñir el núcleo de color azul oscuro o
violeta oscuro y un conjunto de substancias que colorea el citoplasma en
forma diferente según la maduración celular. El citoplasma de las células
inmaduras y en general de las metabólicamente activas, se tiñe de color azul
pálido o azul verdoso porque capta el light green, que es un colorante básico,
estas células se denominan basófilas o cianófilas. Las células con citoplasma
acidófilo toman el color rosado de la eosina y se denominan eosinófilas.
También es eosinófilo el nucleolo. Las células que contienen gránulos de
queratina tienen avidez por el colorante Orange G, que tiñe el citoplasma de
color anaranjado o amarillo. Aquí se describen los rasgos morfológicos
esenciales de los componentes del extendido cervicovaginal, como se
observan con la tinción de Papanicolaou.
Células exfoliadas del epitelio pavimentoso estratificado.- El epitelio que

reviste la vagina y porción vaginal del cuello uterino de la mujer sexualmente
madura es un epitelio pavimentoso estratificado, llamado también epitelio
escamoso. Mide aproximadamente 0,2 mm de espesor y está formado por
estratos histológicamente bien diferenciables:
El estrato basal está formado por una sola capa de células de tipo cilíndrico
dispuestas en empalizada sobre la membrana basal. Las células germinativas
(aquellas cuya función es producir células de la especie) son redondas u
ovaladas, con núcleo grande, ovalado y central, que ocupa gran parte de la
célula. El proceso de regeneración del epitelio se efectúa a partir de esta
capa celular, el resto de los estratos representan etapas del proceso de
maduración y diferenciación celular para, finalmente, descamarse en la
superficie.
El estrato parabasal está compuesto de varias capas de células
redondeadas o poliédricas, de núcleo central, citoplasma grueso, con
puentes intercelulares (estrato espinoso profundo).
El estrato intermedio también presenta puentes intercelulares (estrato
espinoso superficial) y está formado, por numerosas capas de células
aplanadas, con citoplasma rico en glucógeno, núcleos relativamente
pequeños, centrales y vesiculosos.
El estrato superficial consta de varias capas de células aplanadas grandes,
de forma poligonal, de citoplasma delgado y claro, sin puentes intercelulares
y con núcleo picnótico central. El epitelio escamoso tiene la capacidad de
exfoliar diversos tipos celulares según el grado de maduración alcanzado.
Habitualmente las células que se exfolian provienen de los estratos
superiores, a menos que existan úlceras o que la muestra se tome con
excesiva energía. Los tipos celulares del epitelio escamoso que se
reconocen en el extendido citológico son los siguientes:

Células superficiales:
Las células exfoliadas del estrato superficial miden 40 a 60 micrones de
diámetro. Son aplanadas, delgadas, de contorno generalmente poligonal. La
mayoría de ellas tienen citoplasma eosinófilo, pero puede ser cianófilo. El
núcleo es central, circular y pequeño, mide menos de 6 micrones de
diámetro. Es picnótico, denso, homogéneo y no se reconoce en él estructura
cromatínica.
Células intermedias:
Las células exfoliadas del estrato intermedio son del mismo tamaño o
ligeramente menores que las superficiales. Tienen forma redondeada o
poligonal, algunas con el borde plegado, el citoplasma es algo más grueso
que el de las células superficiales, generalmente basófilo, pudiendo ser
eosinófilo. El núcleo es central, redondo y mide alrededor de 8 micrones; la
cromatina nuclear tiene disposición reticular.
Existen algunas variedades de células intermedias. Las células intermedias
superficiales son más grandes y poligonales que las células intermedias
profundas, que tienen un contorno más ovalado. Las células naviculares
presentan dos extremos aguzados que le confieren la forma de un bote; por
su contenido de glucógeno, su citoplasma puede aparecer vacío y el núcleo
desplazado hacia un borde.
Células parabasales:
En el frotis normal de una mujer en edad fértil no constituyen más del 5% de
las células exfoliadas del epitelio pavimentoso. Miden 15 a 25 micrones, son
generalmente redondeadas, con citoplasma grueso cianófilo. El núcleo es
central, redondo o elíptico, con un diámetro mayor que el de las células
intermedias; la cromatina se dispone en forma de finos gránulos. Las células
básales prácticamente no aparecen en los frotis.
Células exfoliadas del epitelio endocervical:

La mucosa endocervical está revestida por epitelio cilíndrico simple muco
secretor. Estas células cilíndricas pueden descamarse aisladamente o en
grupos. Las células aisladas observadas de perfil, presentan el núcleo cerca
de uno de los extremos que corresponde al polo basal. En este extremo se
reduce el diámetro de la célula a manera de un tallo. El núcleo es redondo u
ovalado, con la cromatina granular fina y dispersa.
Cuando las células endocervicales descamadas en grupos se observan desde
el polo superior, presentan un aspecto semejante a un panal de abejas,
porque muestran su borde citoplasmático nítido, de forma hexagonal; cuando
se observan lateralmente presentan un característico aspecto en
"empalizada".
Células exfoliadas del endometrio:

Aproximadamente el 2% de los frotis obtenidos por aspirado endocervical

contienen células endometriales. Las células endometriales recogidas
habitualmente en el frotis cervicovaginal suelen presentar signos de
degeneración.
Otros tipos de células:

Rara vez aparecen en el frotis células epiteliales cilíndricas exfoliadas del
epitelio tubárico; cuando ello ocurre, pueden ser confundidas con células
endocervicales. También es excepcional observar células de la decidua o del
trofoblasto (postaborto, placenta previa). Los histiocitos o macrófagos
generalmente se encuentran aislados. Miden entre 10 y 25 micrones de
diámetro, según el estado funcional. Son redondeados u ovalados, el
citoplasma es semitransparente, finamente vacuolado o con grandes
vacuolas restos de células fagocitadas. El núcleo es oval o reniforme con la
cromatina fina y granular, el nucléolo es pequeño. Los histiocitos se
presentan comúnmente alrededor del período menstrual, en el embarazo, en
el post parto y en los procesos inflamatorios del endometrio. En algunos
procesos inflamatorios y en la menopausia se pueden observar histiocitos
gigantes multinucleados. Los leucocitos polimorfonucleares pueden
encontrarse en el frotis normal. Miden alrededor de 10 micrones, tienen
citoplasma poco definido y a menudo transparente. En los procesos inflama
torios pueden llegar a ser tan abundantes que impiden ver las células
epiteliales. Los linfocitos y plasmocitos se observan en las inflamaciones
crónicas cervicovaginales. Es frecuente observar eritrocitos, son
considerados como componentes anormales.
* MATERIAL:
* Microscopio
* Aceite de inmersión
* Laminillas fijadas y teñidas por la técnica de Papanicolaou.
* METODOLOGÍA:
Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras

muestras de estudio citológico cérvico-vaginal, se procede a la observación
de las mismas, para lo cual se requiere de un microscopio óptico., el cual
deberá estar limpio y con la iluminación regulada, posteriormente se coloca
la laminilla en la platina y se enfoca la muestra con el objetivo de 10 X ,
después, se procede a la observación con el objetivo seco fuerte (40 X), la
cual debe realizares de manera sistemática y precisa para dar un resultado
preciso.
* OBSERVACIONES:

Células parabasales Células superficiales Células

superficiales
RESULTADOS:
Se observó la morfología cervicovaginal normal, lo cual es muy importante
para poder diferenciar entre las células normales y las células malignas. El
conocimiento detallado de la morfología celular normal nos ayuda para que
un momento dado podamos establecer la diferencia entre una célula normal
y una célula maligna, de acuerdo a las características morfológicas de las
células.
Práctica No. 6
OBSERVACIÓN DE DISPLASIAS: LEVE, MODERADA Y GRAVE
* FUNDAMENTO:
La displasia se puede definir como la presencia de alteraciones nucleares,

cambios en la relación núcleo/citoplasma y de las características
citoplasmáticas de una célula cualquiera. La intensidad de la displasia puede
ser leve, moderada o avanzada. En la displasia del epitelio escamoso las
células se exfolian generalmente aisladas; las que se descaman en grupos,
presentan límites netos. A mayor diferenciación de la lesión, los límites
celulares de los grupos exfoliados son menos distinguibles. La forma y
tamaño de las células depende del grado de maduración que alcanza el
epitelio.
En 1973 fue propuesto el término de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC)

para incluir todas las formas de lesiones precursoras de cáncer cervical,
incluyendo displasia y carcinoma in situ; el NIC se divide en tres grupos: NIC
1 corresponde a displasia leve; NIC 2 corresponde a displasia moderada.
Dado que los patólogos no pueden distinguir la reproducibilidad entre
displasia severa y carcinoma in situ, NIC 3 abarca ambas lesiones.
En diciembre de 1988, el Instituto Nacional de Cáncer (NCI) propuso un
nuevo sistema de nomenclatura, el Sistema Bethesda (TBS), en donde las
displasias leves (NIC 1) están dentro del grupo de Lesiones Escamosas
Intraepiteliales de Bajo Grado, y las displasias moderada, severa (NIC 1, NIC
2) y cáncer in situ se encuentran en las Lesiones Escamosas Intraepiteliales
de Alto Grado.

Displasia Leve, Neoplasia Intraepitelial Cervical 1 (NIC I), Lesión Escamosa

Intraepitelial de Bajo Grado (LIE BG). Las células exfoliadas de una displasia
leve corresponden a células poligonales de tipo intermedio o superficial, con
núcleo levemente aumentado de tamaño y discreto aumento de la relación
núcleo/citoplasma. Generalmente el núcleo ocupa menos de 1/3 del área
celular. Existe leve variación del tamaño y forma de los núcleos, algunos de
los cuales pierden su contorno perfectamente redondo u ovalado al ser
observados al microscopio de luz. El núcleo es hipercromático, con la
cromatina dispuesta en forma reticular o finamente granular.
Displasia Moderada, Neoplasia Intraepitelial Cervical 2 (NIC II), Lesión

Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LIE AG). En el extendido obtenido de
una displasia moderada las células corresponden en general a células
intermedias profundas, con mayor variación en la forma celular. Algunas
células son poligonales u ovaladas; otras presentan características
citoplasmáticas de metaplasia inmadura. También se pueden encontrar
células fusadas y de formas bizarras. La variación en la forma y tamaño de
los núcleos y la alteración de la relación núcleo/citoplasma es mayor que en
la displasia leve. Existe mayor hipercromatismo, pero la cromatina aún se
dispone en gránulos finos uniformes. Nucléolos ausentes. En la actualidad los
cambios citopáticos producidos por la infección por VPH son considerados
dentro de este grupo.
Displasia Severa, Neoplasia Intraepitelial Cervical 3 (NIC III), Lesión

Escamosa Intraepitelial de Alto Grado (LIE AG). Las alteraciones descritas son
más marcadas en la displasia avanzada, en la que se observan numerosas
células de tipo parabasal, siendo posible reconocer células poligonales y aun,
en ocasiones, células aplanadas queratinizadas de citoplasma anaranjado,
signo de que persiste tendencia a la diferenciación del epitelio. La relación
núcleo/citoplasma es mayor a 2/3. Puede haber nucléolos eosinofílicos,
aunque generalmente están oscurecidos por la cromatina densa.
La buena salud también puede prevenir o disminuir la displasia. Un sistema
inmunológico sano puede ayudar a prevenir la displasia. Las mujeres con la
infección del VIH tienen más probabilidades de desarrollar displasia. La
displasia es más común en mujeres que:
* Fuman
* Presentan infecciones por VPH.
* Tienen más de un(a) compañero(a) sexual
* Tienen relaciones sexuales por primera vez a una edad muy
temprana
* Tienen deficiencias de vitaminas y mala nutrición
* MATERIAL:
* Microscopio

* METODOLOGÍA:

preciso.
* OBSERVACIONES:
Displasia leve Displasia moderada

Displasia grave
RESULTADOS:
Después de haber hecho una revisión y observación detallada de las

muestras, se obtuvieron los siguientes resultados:
Displasia leve:
Flora bacteriana cocoide (+ +).
Reacción inflamatoria (+ +).
Eritrocitos (+ +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de Displasia Leve,
asociada a infección por VPH y Gardnerella vaginalis.
Papanicolaou Negativo Clase III.
NIC I.
LIE Bajo grado.

Displasia moderada:
Reacción inflamatoria (+ + +).
Lectura hormonal no fue posible.
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de displasia moderada.
NIC II.
Displasia grave + VPH:

Flora bacteriana bacilar (+ +).
Reacción inflamatoria (+).
Lectura hormonal no fue posible.
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de discariosis,
pleomorfismo y coilocitosis que integran el diagnóstico de Displasia Grave,
asociada a infección por VPH.
NIC III.
LIE Alto grado.
Practica No. 7
OBSERVACIÓN DE CÁNCER IN SITU Y CÁNCER INVASOR
* FUNDAMENTO:
Existen alteraciones morfológicas, que en conjunto caracterizan a las células

tumorales malignas. Estas alteraciones se conocen como criterios de
malignidad (Frost, 1979). Sin embargo, es indispensable precisar que no
existe un signo morfológico patognomónico de cáncer. Por otra parte, no
siempre todos los signos de malignidad se encuentran en cada célula
cancerosa. Por estos hechos la citología, como método de colaboración
diagnóstica, requiere de gran experiencia y ponderación.

Los criterios de malignidad se clasifican en: alteraciones de la célula,

alteraciones del núcleo y alteraciones de la relación entre las células.
*Alteraciones de la célula:
Las células cancerosas exfoliadas presentan variaciones en el tamaño
(anisocitosis) y en la forma (polimorfismo), la que en ocasiones puede ser
muy anormal, como en las células en forma de fibra o de raqueta. El
citoplasma puede ser cianófilo (signo de menor diferenciación), pudiendo
presentar características de diferenciación anómala (queratinización intensa
o gran acumulación de mucus en una gran vacuola que desplaza al núcleo
hacia la periferia). Pueden presentar numerosas mitosis; siendo el hallazgo
más importante, pero poco frecuente, las mitosis atípicas.
*Alteraciones del núcleo

Son las de mayor valor en la estimación de malignidad. Los núcleos
presentan variaciones de tamaño (anisocariosis); generalmente son mayores
que los de las células normales. El aumento del núcleo es proporcionalmente
mayor que el de la célula, por lo que la relación núcleo/citoplasma está
aumentada. En algunas células tumorales el citoplasma es reducido a una
delgada banda alrededor del núcleo, que sólo se ve con los mayores
aumentos del microscopio. Se observan también alteraciones en la forma del
núcleo (polimorfismo): el borde nuclear puede tener angulaciones y pliegues
y la membrana nuclear presentar grosor irregular. La densidad de la
cromatina puede estar aumentada (hipercromatismo), ya sea en forma difusa
o en gruesos grumos que alternan con espacios ópticamente vacíos Los
nucléolos pueden estar aumentados en número y tamaño; a menudo de
contorno irregular y angulado. Puede haber multinucleación,
*Alteración de la relación entre las células

La cohesión entre las células es menor en los tumores malignos, por eso en
general se exfolian abundantes células y una gran proporción de ellas se
desprenden aisladas o en grupos pequeños. A diferencia de los conjuntos de
células normales, que se desprenden, estos grupos son irregulares, por lo
cual, el extendido se observa superposición de núcleos y pueden no
observarse los bordes celulares. En algunos frotis obtenidos de tumores
malignos, las células forman estructuras que normalmente no existen en el
órgano de origen; por ejemplo, células endometriales dispuestas en forma de
papilas.
Cáncer se define como crecimiento desordenado de un tejido. El cáncer
cervicouterino, es una enfermedad en la cual se encuentra células
cancerosas (malignas) en los tejidos del cuello uterino. El cuello uterino es la
abertura del útero, el órgano hueco en forma de pera donde se desarrolla el
feto, y lo conecta con la vagina (canal de nacimiento).
El cáncer cervicouterino suele crecer lentamente por un período de tiempo.
Antes de que se encuentre células cancerosas en el cuello uterino, sus
tejidos experimentan cambios y empiezan a aparecer células anormales

(proceso conocido como displasia). La prueba de Papanicolaou generalmente

encuentra estas células. Posteriormente, las células cancerosas comienzan a
crecer y se diseminan con mayor profundidad en el cuello uterino y en las
áreas circundantes.
Ya que en general no hay síntomas asociados con el cáncer cervicouterino, el

médico debe hacer una serie de pruebas para buscar el cáncer. La primera
prueba es la de Papanicolaou, que se lleva a cabo usando un pedazo de
algodón, un cepillo o una espátula de madera pequeña para raspar
suavemente el exterior del cuello uterino con el fin de recoger células.
Si se encuentra células anormales, el médico tendrá que extraer una
muestra de tejido (este procedimiento se conoce con el nombre de biopsia)
del cuello uterino y lo observará a través del microscopio para ver si hay
células cancerosas.
El pronóstico (posibilidades de recuperación) y la selección del tratamiento
dependen de la etapa en que se encuentra el cáncer (si se encuentra en el
cuello uterino o si se ha diseminado a otros lugares) y el estado de salud en
general de la paciente.
* MATERIAL:
* Microscopio
* METODOLOGÍA:

preciso.
* OBSERVACIONES:

* RESULTADOS:

muestras, se obtuvieron los siguientes resultados
Cáncer In situ:
Reacción inflamatoria (+ + +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia,
pérdida de la relación núcleo-citoplasma, que integran el diagnóstico de
Cáncer Epidermoide In situ asociado a infección por VPH.
Papanicolaou Positivo Clase IV.
LIE Alto grado.
NIC III.
Cáncer Invasor de células pequeñas:

Flora bacteriana cocoide (+).
Eritrocitos (+ +).
Lectura hormonal no posible.
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de Cáncer epidermoide
invasor de células pequeñas.
Papanicolaou Positivo Clase V.
OBSERVACIONES: Se recomienda toma de biopsia por colposcopía para iniciar
tratamiento.
Cáncer invasor:
Flora bacteriana mixta (+ +).
Células del epitelio cérvico-vaginal con alteraciones de hipercromasia,
pleomorfismo, pérdida de la relación núcleo-citoplasma, células fibroideas y
células en raqueta, que integran el diagnóstico de Cáncer Epidermoide
invasor.
Papanicolaou Positivo Clase V.

Práctica No. 5
AGENTES BIOLÓGICOS VIRUS, BACTERIAS, HONGOS Y PARÁSITOS
* FUNDAMENTO:
Mediante el examen citológico podemos diagnosticar enfermedades

infecciosas como las ocasionadas por: virus, bacterias, hongos y parásitos.
VIRUS: La identificación de estas infecciones tiene implicaciones de tipo

venéreo, perinatal y neoplásico. Ejemplos: Herpes, condiloma, varicela,
citomegalovirus.
Virus de Papiloma Humano (VPH): Los papilomavirus son virus DNA y de

los 41 tipos identificados, el 16, 18, 45, 56, se relacionan con el cáncer
cervicouterino. El 6 y el 11 se encontraron en el condiloma acuminado y
neoplasia leve, mientras que el 16 y el 18 se relacionan con lesiones
premalignas de alto grado de cáncer invasor. Patrón clínico en la infección
por VPH:
* Coliocitosis
* Macronucleosis
* Binucleación
* Anfofilia
* Distribución irregular de la cromatina.
Herpes.- Es un virus de DNA transmitido habitualmente por relación sexual.

Periodicidad de 1 a 3 meses, relaciones prolongadas después de 7 años.
Presenta imagen citológica en “Vidrio esmerilado”, núcleo con aumento de
tamaño y multinucleación; apariencia en bolsa de canicas.
BACTERIAS: Entre las bacterias que más frecuentemente causan infecciones

del tracto genital femenino, se encuentran:
Chlamydia trachomatis.- Interviene de manera importante en la etiología
de cervicitis mucopurulenta, en la enfermedad pélvica inflamatoria aguda y
LGV. Vacuolización en células basales (grandes burbujas en el citoplasma).
No se puede establecer un diagnóstico certero mediante la técnica de
Papanicolaou.
Gardnerella vaginalis.- Puede aparecer en forma de cocos o bacilos;
presencia de células indicio (clue). Cuadro clínico vulvovaginitis.

Lepthrotrix actinomyces.- Grandes bacilos que se entrelazan y dan una

apariencia de madejas de cabellos.
Candida albicans.- Más frecuente en mujeres embarazadas, diabéticas, que
toman anticonceptivos orales. En el frotis se observan como hifas o
esporas, que se tiñen en color pardo rojizo y se ven refringentes al
microscopio.
PARÁSITOS: Entre los protozoarios que infectan al aparato reproductor

femenino se encuentran las Tricomonas y las amebas.
Trichomonas vaginalis.- tiene forma oval o de pera; la imagen citologica es
de color gris o verde con núcleo oval o redondo excéntrico.
* MATERIAL:
* Microscopio
* METODOLOGÍA:

preciso.
* OBSERVACIONES:
VPH HERPES

CHLAMYDIA TRACHOMATIS GARDNERELLA VAGINALIS
CANDIDA ALBICANS LEPTHOTRIX ACTYNOMICES

CÁNDIDA ALBICANS ENTAMOEBA HISTOLYTICA.

DIGIRIENDO
ERITROCITOS
* RESULTADOS:
Se observaron laminillas que presentan diversas alteraciones celulares

debida a agentes biológicos tales como: virus, bacterias, hongo y parásitos.
muestras, se obtuvieron los siguientes resultados:
VPH
Flora bacteriana mixta +++
Rx. Inflamatoria ++
Lectura hormonal no posible
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por VPH
Papanicolaou negativo. Clase II. LIE bajo grado.
HERPES
Flora bacteriana mixta ++
Rx. Inflamatoria +++
Lectura hormonal no posible
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes)
Papanicolaou negativo. Clase II
Gardnerella vaginalis
Rx. Inflamatoria ++
Índice de Frost 0/70/30= 68 de valor estrogénico
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por infección viral (herpes)

Leptothrix actynomices
Rx. Inflamatoria ++
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Leptothrix actynomices
Cándida albicans
Flora bacteriana bacilar ++
Rx. Inflamatoria +
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por Cándida albicans
Trichomonas vaginalis
Flora bacteriana cocoide +++
Rx. Inflamatoria ++
CECV con alteraciones inflamatorias específicas por T. vaginalis
Práctica No. 3
TINCIÓN DE PAPANICOLAOU
* FUNDAMENTO:
La constante exfoliación de células de los estratos tisulares mas

superficiales del epitelio de revestimiento mezclados con otros elementos
celulares de la sangre y liquido intersticial o moco secretado, es la base del
método.
El citograma será diferente de acuerdo con el órgano del cual se
obtuvo el material a examinar. Se deben considerar:
1.- Recolección del material
2.- Preparación de los extendidos
3.- Manejo del material obtenido
4.- Tinción de los extendidos
5.- Interpretación microscópica
Recolección del material: El órgano que se va a estudiar debe estar en

condiciones fisiológicas, sin manipular, sin lavar, y sin medicamentos; si esto
no se puede evitar debe informarse por escrito en la solicitud de estudio.
Además la recolección del material a examinar será diferente para cada
órgano.

Preparación de los extendidos: El material que será objeto de estudio

debe llegar al laboratorio de citología lo más pronto posible para ser
procesado debidamente. En forma ideal, el clínico debería conocer los
primeros pasos y llevarlos a efecto en el momento de la toma. El material a
examinar se toma sobre una laminilla portaobjeto limpia y seca; se hace un
extendido delgado y uniforme de la muestra representativa; se sumerge en
alcohol etílico de 96 o se rocía con líquido fijador a base de polietileglicol e
isopropil (spray normal). Si se usa el alcohol las laminillas deben permanecer
dentro del fijador durante 10 minutos como mínimo.
Manejo del material obtenido: El material, una vez fijado, puede ser
transportado a cualquier distancia en estuches que prevean su destrucción.
Las laminillas deben identificarse con nombre, fecha o número en un
extremo utilizando lápiz diamante. Se puede utilizar plomo si las láminas
tienen extremo mate.
Tinción de los extendidos: Existen varias coloraciones. No obstante, la

mas utilizada es la tinción de Papanicolaou modificada, ya que resulta ser
mas útil tanto para el diagnostico de alteraciones tisulares como para la
valoración hormonal. Y se basa en la reacción química de los colorantes con
los elementos celulares; su captación varía de acuerdo con el pH del medio
intracelular. Es tricrómica a base de: hematoxilina, Orange G y EA 50. La
primera tiñe los núcleos, la segunda los citoplasmas transparentes y la
tercera los citoplasmas mas densos.
Interpretación microscópica: Todo citólogo antes de revisar una laminilla

debe conocer los datos aportados por el clínico en la solicitud; edad, sexo,
diagnostico clínico probable, órgano del cual se obtuvo el material, hallazgos
durante el examen clínico, tratamiento previo y diagnostico citológico
anterior. El medico solicitante debe conocer las posibilidades y limitaciones
de la citología para que pueda aprovechar en su diagnostico y tratamiento
los datos proporcionados por el citólogo.
La evaluación de los extendidos requiere experiencia. La toma del producto
puede hacerla el citóloga o el medico en el consultorio, siempre que este
conozca perfectamente las técnicas y posibles causas de error. El 50% del
éxito en el diagnostico dependerá de la toma y fijación de la muestra.
El envío de ella puede hacerse en el fijador o bien sacando la laminilla y
cubriéndola con una gota de glicerina y otro portaobjeto.
La laminilla debe observarse a seco débil recorriéndola en zigzag, de tal
manera que el circulo luminoso del ocular corresponda al principio del circulo
del campo siguiente a observar; no deberá pasarse sin observar ningún
campo de la preparación.
* MATERIAL:

* Portaobjetos
* Aplicadores y espatulas
* Cubreobjetos
* Microscopio
* REACTIVOS:
* Los siguientes colorantes: hematoxilina de Harris, OG-6 y EA-50.

* Alcohol de 96°
* Alcohol ácido
* Xilol
* Alcohol absoluto
* Resina sintética
* METODOLOGÍA:
Inmediatamente que se toma la muestra, y se extiende sobre el

portaobjetos, se introduce dentro de alcohol de 96°. Y se procede con la
tinción:
1.- Se introduce en una tina con hematoxilina de Harris durante 3
minutos.
2.- Se lava con agua corriente.
3.- Se introduce en alcohol ácido (un baño).
4.- Se enjuaga con agua corriente.
5.- Se introduce en alcohol de 96° (10 baños)
6.- Se introduce en alcohol de 96° (10 baños)
7.- Se introduce dentro del colorante OG-6 durante 30 segundos y no
se enjuaga.
8.- Se introduce en una tina con alcohol (10 baños)
11.- Se introduce en una tina con el colorante EA-50 durante minuto y
medio.
12.- Se introduce en alcohol (10 baños)
15.- Se introduce en xilol (10 baños)
16.- Se introduce en xilol (10 baños)
17.- Se deja secar.
18.- Se le coloca resina sintética y se le pone un cubreobjetos.
* OBSERVACIONES:
Inmediatamente se toma la muestra, se debe realizar el extendido e

introducir en alcohol de 96°, es decir, no se debe esperar a que seque la
muestra. Los colorantes utilizados dentro de la tinción de Papanicolaou son:

Hematoxilina de Harris: tiñe los núcleos de las células.

OG-6: tiñe los citoplasmas de las células superficiales e intermedias.
EA-50: tiñe los citoplasmas de las células basales y parabasales.
* RESULTADOS:
Se obtiene una lámina perfectamente teñida por Papanicolaou, lista para ser
leída al microscopio.

Un cáncer incipiente y no invasivo (carcinoma in situ) puede ser tratado con

una operación mínima, mientras que un cáncer invasivo suele requerir una
histerectomía (extirpación de cérvix y útero y posiblemente de otros órganos
de la pelvis.
• Colposcopía: Técnica para estudiar el cérvix o cuello del útero

mediante la visión) para examinar las células cervicales más
detalladamente con aparatos de aumento especiales.
• Conización, una forma más extensiva de biopsia en la cual se extrae
una cuña del cérvix.
CÁNCER CERVICAL.-El cáncer cervical o de

cérvix uterino es uno de los más
comunes, y en México es el más
frecuente. En el pasado era una de las
mayores causas de muerte por cáncer,
pero gracias a los nuevos conocimientos
sobre la enfermedad y a los avances
hechos para detectarlo en su primera
etapa, es hoy uno de los más curables.
El cáncer cervical se desarrolla en cualquier
lugar del cérvix o en la porción inferior del útero.
El cáncer cervical, como su nombre indica, se sitúa en el cérvix uterino,

porción inferior y estrecha del útero que desemboca en la vagina. En este
lugar, las células del cérvix se malignizan originando el cáncer.
SIGNOS Y SÍNTOMAS
Hemorragia anormal
Aumento de flujo vaginal
Dolor en el pubis
Dolor durante el coito
Cáncer cervical .-El desarrollo del cáncer

cervical es gradual y se inicia como una
condición pre-cancerosa que se denomina
displasia. Por lo general, es un cáncer de
lento crecimiento y si se detecta de manera
temprana puede tratarse con éxito. La
realización de exámenes rutinarios de Papanicolaou puede detectar en forma
temprana los cambios celulares en el cuello uterino, lo que permite una
detección a tiempo del cáncer cervical. Los principales factores de riesgo
identificados en la aparición del cáncer cervicouterino son:
Clase I: negativa
Clase II: atipias
Clase III: sospechoso

Clase IV: muy sugestivo de malignidad

Clase V: conclusivo de malignidad
Con el paso de los años la clasificación evolucionó y el reporte se informaba
como:
PAP I: negativo
PAP II: atipias benignas – Atipias severas o metaplasia escamosa
PAP III: displasia ligera, moderada o severa
PAP IV: carcinoma in situ
PAP V: carcinoma invasor
En el año 1966 R. Richart propuso adoptar el sistema NIC (Neoplasia
Intraepitelial Cervical), que se reporta así:
NIC I: displasia leve
NIC II: displasia moderada
NIC III: displasia severa – Carcinoma in situ
Carcinoma de células escamosas
Luego aparece el sistema Bethesda que se reporta así:
Normal
Normal inflamatorio
LIE bajo grado
LIE alto grado
Células sospechosas de cáncer invasor
Un informe citológico debe contener:
• Descripción de la muestra como adecuada o inadecuada
• Descripción de cambios reparativos o reactivos
• Diagnóstico de la flora microbiana como hongos, bacterias, protozoos,
virus.
• Descripción de las anormalidades epiteliales de las células escamosas.
Etapas del cáncer cervicouterino
Una vez detectado (diagnosticado) el cáncer cervicouterino, se harán más
pruebas para determinar si las células cancerosas se han diseminado a otras
partes del cuerpo. Este proceso se conoce como clasificación por etapas. El
médico necesita saber la etapa de la enfermedad para planear el tratamiento
adecuado. Las siguientes etapas se usan en la clasificación del cáncer
cervicouterino:
Etapa 0 o carcinoma in situ El carcinoma in situ es un cáncer en su etapa

inicial. Las células anormales se encuentran sólo en la primera capa de
células que recubren el cuello uterino y no invaden los tejidos más profundos
del cuello uterino.
Etapa I El cáncer afecta el cuello uterino, pero no se ha diseminado a los

alrededores.
etapa IA: una cantidad muy pequeña de cáncer que sólo es visible a través
del microscopio se encuentra en el tejido más profundo del cuello uterino
etapa IB: una cantidad mayor de cáncer se encuentra en el tejido del cuello
uterino

Etapa II El cáncer se ha diseminado a regiones cercanas, pero aún se

encuentra en la región pélvica.
etapa IIA: el cáncer se ha diseminado fuera del cuello uterino a los dos
tercios superiores de la vagina
etapa IIB: el cáncer se ha diseminado al tejido alrededor del cuello uterino
Etapa III El cáncer se ha diseminado a toda la región pélvica. Las células

cancerosas pueden haberse diseminado a la parte inferior de la vagina. Las
células también pueden haberse diseminado para bloquear los tubos que
conectan los riñones a la vejiga (los uréteres).
Etapa IV El cáncer se ha diseminado a otras partes del cuerpo.

etapa IVA: el cáncer se ha diseminado a la vejiga o al recto (órganos
cercanos al cuello uterino)
etapa IVB: el cáncer se ha diseminado a órganos distales como los pulmones
Recurrente La enfermedad recurrente significa que el cáncer ha vuelto
(reaparecído) después de haber sido tratado. Puede volver al cuello uterino o
a otro lugar.
PRACTICA No. 10
CANCER BRONQUIAL
El cáncer bronquial constituye el 30% de todas las neoplasias del ser
humano. La mortalidad por cáncer bronquial ha aumentado en las últimas
décadas y en Chile se estima en 18 hombres y 5 mujeres por 100.000
habitantes. Afecta con mayor frecuencia a hombres de edad promedio 60
años. La frecuencia ha aumentado especialmente en mujeres y en estrecha
relación con el hábito de fumar. La sobrevida a un año del diagnóstico es de
20% y a los 5 años de 5%. Para los casos con tumor extirpable
quirúrgicamente puede aumentar a 35% a los 5 años.
ETIOLOGIA
hay que considerar factores ocupacionales, hereditarios, contaminación
ambiental y hábitos personales. Los trabajadores de industrias
convencionales y nucleares en que se utilizan sustancias químicas para la
manufactura de materiales, instrumentos, maquinarias, etc tienen mayor
incidencia de cáncer bronquial. En estas condiciones los trabajadores están
expuestos a radiaciones y sustancias tales como uranio, níquel, hierro
metálico, sales de cromo, óxidos de hierro, asbesto, arsénico, berilio, gas de
mostaza, etc. En el aire contaminado de las grandes ciudades se encuentran
además de los irritantes comunes, sustancias carcinógenas tales como 3,4-
benzopireno, 1,12-benzoperileno, óxido arsenioso, trazas de elementos
radiactivos, gases de aceite de petróleo, ozono, polvo de asbesto, trazas de
níquel, cromo, compuestos de arsénico, óxido de nitrógeno, formaldehído,
hidrocarburos aromáticos y alifáticos. Sin embargo, estos factores

representan una proporción infinitesimal de causas cuando se comparan con

el cigarrillo
Está comprobada la relación causal entre humo de cigarrillo y cáncer
bronquial (pipa y cigarro también). El humo del cigarrillo contiene
benzopireno y otros cancerígenos, así como irritantes. Existiría una relación
entre daño epitelial y el efecto de los irritantes, tales como cianuro,
acroleína, formaldehído y óxido nitroso. El epitelio bajo y el metaplásico, que
reemplazan al epitelio respiratorio destruído por los irritantes del humo del
cigarrillo, son más sensibles a la acción de los carcinógenos y la ausencia de
factores defensivos mecánicos y funcionales favorece la penetración de los
carcinógenos y el contacto de éstos con las células en fase proliferativa.
LESIONES PRECURSORAS
Se consideran lesiones precursoras (precancerosas) de la mucosa bronquial :
hiperplasia de células basales y de células caliciformes, metaplasia
epidermoide, displasia y carcinoma in situ.
En la hiperplasia el epitelio esté engrosado (más de 50 µm), debido a un
aumento en el número de células basales, de células caliciformes o de
ambas. En la metaplasia epidermoide el epitelio respiratorio normal está
reemplazado por uno plano estratificado maduro. Se distinguen tres grados
de displasia: leve, moderado y avanzado, según la intensidad de las atipias y
la extensión de la distorsión arquitectural del epitelio. Las alteraciones
estructurales son estratificación, espesor irregular, reemplazo total o parcial
de las células normales por las atípicas y discontinuidades de la membrana
basal. En el carcinoma in situ las alteraciones citológicas e histológicas
mencionadas alcanzan su máxima expresión. Todo el espesor del epitelio
está reemplazado por células atípicas, habitualmente es un foco pequeño,
con irregularidades y discontinuidades evidentes de la membrana basal. En
la mucosa adyacente al carcinoma in situ hay frecuentemente signos de
displasia y metaplasia.
En casos de carcinoma bronquial manifiesto, en las zonas vecinas se
encuentran la hiperplasia y la metaplasia casi en el 90% de los casos,
displasia en alrededor del 40% y carcinoma in situ en 20-30%. El tiempo de
transformación calculado citológicamente para la fase displasia moderada-
carcinoma invasor es de 3,2 años.
CLASIFICACIÓN HISTOLÓGICA DEL CÁNCER BRONQUIAL

Existe una gran variedad de tumores, siendo los más frecuentes los
carcinomas. Los tipos histológicos de este grupo, según la clasificación de la
OMS, son:
Carcinoma epidermoide o escamoso.-Es el prototipo del carcinoma
bronquial. Se origina aparentemente en los bronquios mayores y medianos.
Es el tipo histológico más frecuente en las biopsias (cerca del 45% de todas
las biopsias bronquiales positivas). Es más frecuente en el hombre y la
sobrevida a los 5 años es de 22%. Histológicamente son carcinomas sólidos
con diferenciación córnea (perlas córneas y disqueratosis) o presencia de

abundantes puentes intercelulares, o ambas. Tiende a ser multifocal en un

20%.
Carcinoma indiferenciado de células pequeñas.-Representa alrededor

del 20% de todos los carcinomas bronquiales y el 40% de todas las biopsias
positivas. Afecta predominantemente a hombres en proporción de 19 : 1. Al
momento del diagnóstico mas del 80% tiene extensión extratorácica. La
sobrevida a los 5 años es de 2%. Es un tumor constituido por células
uniformemente pequeñas (10-15 µm), de escaso citoplasma, núcleos
pequeños, redondos o fusados, de cromatina fina y en grumos regulares, con
o sin focos de diferenciación glandular o córnea. Las células tumorales
pueden ser argentafines.
Adenocarcinoma .-Representa alrededor del 10% de los carcinomas en el

hombre y el 50% en las mujeres. Es predominantemente periférico.
Sobrevida a los 5 años es de 10%. Es el tipo más frecuente en no fumadores.
Se asocia en 45-65% de los casos a cicatrices de infarto, tuberculosis y otros
granulomas. Los criterios histológicos son presencia de secreción mucosa,
estructuras glanduliformes o papilares y vacuolas citoplasmáticas con
mucus. El carcinoma bronquíoloalveolar es una variedad de adenocarcinoma,
que tiende a ser multicéntrico, multinodular, de aspecto bronconeumónico.
Carcinoma indiferenciado de células grandes .-Se presenta como un

carcinoma sólido, constituido por células uniformemente grandes (20 µm o
más), de núcleos polimorfos y frecuente canibalismo celular.
Histológicamente, no presentan ninguno de los caracteres histológicos
mencionados en los otros tipos. Es un diagnóstico de exclusión.
Carcinoma combinado adeno-epidermoide o adeno-escamoso .-

Corresponde a un tumor en cuya masa coexisten un carcinoma epidermoide
y un adenocarcinoma. Constituye el 0,4 - 3% de los casos.



PRACTICA 9
CANCER MAMARIO
El cáncer de mama, que por lo general se presenta en mujeres, es una
enfermedad en la que células malignas (cancerosas) crecen dentro del tejido
mamario.
Cada mama contiene entre 15 y 20 lóbulos, los que poseen secciones

menores llamadas lobulillos. Los lóbulos y lobulillos están conectados por
conductos llamados ductos. El tipo más frecuente de cáncer mamario nace
en los ductos a partir de células ductales. Los que surgen en los lóbulos o
lobulillos son llamados cánceres lobulillares. Éstos afectan con mayor
frecuencia ambas mamas, a diferencia de otros tipos de tumores.
El cáncer inflamatorio de la mama es una clase especial de cáncer de
mama, bastante poco frecuente. El aspecto de la mama se parece a una
inflamación o quemadura de sol. Se ve inflamada, roja y caliente. Tiende a
avanzar con rapidez. Lo más importante es no confundirlo con una mastitis,
Existen formas hereditarias de cáncer mamario, que representan alrededor
del 5-10% de todos los casos.
Por otro lado, la mayoría de los casos corresponde al llamado cáncer

esporádico de mama, en donde no existe una alteración genética
heredada que sea responsable de su aparición.
También hay otros factores relacionados con el cáncer de mama como

nuliparidad, primera menstruación precoz y menopaucia tardía, entre otros.
Algunos estudios sugieren que el uso de terapia de sustitución hormonal se
asocia a un riesgo un poco mayor de desarrollar cáncer mamario.
Se debe consultar a un especialista si se notan cambios de coloración en la
piel de la mama, un nódulo o retracción del pezón. Una radiografía
especialmente diseñada para la mama que es capaz de detectar nódulos que
no son palpables. Dependiendo de las características del nódulo, con
frecuencia es necesaria una muestra de ese tejido para ser analizada bajo el
microscopio, procedimiento que se llama biopsia. La muestra de tejido se
puede obtener usando una aguja especial o mediante una pequeña
operación.
Las probabilidades de mejoría (pronóstico) y la elección del tratamiento
dependen del estado de avance de la enfermedad (si se ubica en la mama o
se ha extendido fuera de la glándula); del tipo de cáncer de que se trate; de
algunas características de las células tumorales que tienen que ver con la
agresividad del tumor, y de si está comprometida una o las dos mamas. La
edad, el peso, el estado menstrual y las condiciones generales de salud
también afectan el pronóstico y el tratamiento necesario.
- Estadio 0:
Es la forma más temprana que puede tener un cáncer de mama. Existen dos

tipos: carcinoma in situ ductal (carcinoma intraductal) y el carcinoma in situ

lobulillar. El carcinoma lobulillar in situ NO es realmente un cáncer sino más
bien un indicador del riesgo de desarrollarlo (25% de probabilidades de tener
un cáncer en un plazo de 25 años; puede afectar a cualquiera de las dos
mamas).
- Estadio I:
El tumor se encuentra confinado a la mama y es menor de 2 cms. de
diámetro máximo.
- Estadio II:
Incluye las siguientes situaciones:
- El tumor mide menos de 2 cms. Pero existen metástasis en los ganglios de
la axila.
- El tumor mide entre 2 y 5 cms., con o sin metástasis en los ganglios de la
axila.
- El tumor mide más de 5 cms., y NO existen metástasis en los ganglios de la
axila.
- Estadio III:
Se divide en IIIA y IIIB.
IIIA
- El tumor mide menos de 5 cms. y existen metástasis en los ganglios de la
axila que provocan que se adhieran unos con otros, o a estructuras vecinas.
- El tumor mide más de 5 cms. y existen metástasis en los ganglios de la
axila.
IIIB
- El tumor ha invadido la piel o la pared del tórax (músculos o costillas).
- Existen metástasis en los ganglios que se encuentran detrás del esternón.
- Estadio IV:
El cáncer se ha extendido lejos de la mama y la axila, comprometiendo otros
órganos, frecuentemente los huesos, pulmones, hígado o cerebro.
- Cáncer de Mama Recurrente

Es cuando el tumor vuelve a aparecer después de haber sido tratado. Esta
reaparición o recurrencia puede ser en la mama, en alguna otra parte de la
pared torácica o en cualquier otra zona del cuerpo. Esta condición si se limita
a la mama puede ser tratada con muy buenos resultados, sin que aumente la
mortalidad.
El cáncer mamario se puede clasificar como:
Inicial (in situ):

Este comienza en las células que revisten los conductos que
conectan las glándulas productoras de leche como el pezón.
El cáncer que se detecta en esta etapa es curable en más del
95% de los casos.

Invasivo:
El cáncer se ha diseminado más allá de los conductos y ha llegado al tejido
circundante y más tarde a los ganglios linfáticos contiguos.
Metastásico:
Este cáncer se ha diseminado a otras regiones del organismo, como ganglios
linfáticos distantes, huesos, pulmones, hígado o cerebro.
Los tipos de cáncer de mama se clasifican en:
El carcinoma ductal in situ se origina en las células de las paredes de los

conductos mamarios. Es un cáncer muy localizado, que no se ha extendido a
otras zonas ni ha producido metástasis. Por este motivo esta enfermedad
'premaligna' puede extirparse fácilmente. La tasa de curación ronda el 100%.
Este tipo de tumor se puede detectar a través de una mamografía.
El carcinoma ductal infiltrante (o invasivo) es el que se inicia en el

conducto mamario pero logra atravesarlo y pasa al tejido adiposo de la
mama y luego puede extenderse a otras partes del cuerpo. Es el más
frecuente de los carcinomas de mama, se da en el 80% de los casos.
El carcinoma lobular in situ se origina en las glándulas mamarias (o

lóbulos) y, aunque no es un verdadero cáncer, aumenta el riesgo de que la
mujer pueda desarrollar un cátumor en el futuro. Se suele dar antes de la
menopausia. Una vez que es detectado, es importante que la mujer se
realice una mamografía de control al año y varios exámenes clínicos para
vigilar el posible desarrollo de cáncer.
El carcinoma lobular infiltrante (o invasivo) comienza en las glándulas

mamarias pero se puede extender y destruir otros tejidos del cuerpo. Entre el
10% y el 15% de los tumores de mama son de este tipo. Este carcinoma es
más difícil de detectar a través de una mamografía.

El carcinoma inflamatorio es un cáncer poco común, tan sólo representa

un 1% del total de los tumores cancerosos de la mama. Es agresivo y de
rápido crecimiento. Hace enrojecer la piel del seno y aumentar su
temperatura. La apariencia de la piel se vuelve gruesa y ahuecada, como la
de una naranja, y pueden aparecer arrugas y protuberancias. Estos síntomas
se deben al bloqueo que producen las células cancerosas sobre los vasos
linfáticos.

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Laboratorio de Técnicas Citológicas

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

Dra. Martha Elva Díaz Viveros

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DESCRIPCION, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

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La parte mecánica del microscopio comprende: el pie, el tubo, el

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Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imágenes de

Trayectoria del Rayo de Luz a través del Microscopio

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el condensador, la luz es concentrada sobre la preparación a observar.

El microscopio es un instrumento óptico de precisión que proporciona la

1. Identifique las partes del sistema mecánico del microscopio.

1. Colocar el microscopio en una mesa que permita una cómoda

4. Seleccionar con el revolver el objetivo de menor aumento (10 X).

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Bajar la platina y colocar la preparación (fijarse que quede firmemente

5. Mirando por los extremos subir la platina hasta el tope, si no hay

6. Mirando por los oculares bajar la platina con el tornillo

7. Afinar los detalles de la imagen moviendo el tornillo micrométrico.

9. Ajustar dioptrías (agudeza visual) en el porta ocular izquierdo, o bien

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10 Una vez conseguido el enfoque correcto, recorra todo la preparación, a

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El microscopio, es uno de los instrumentos de uso más frecuente en los

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En 1973 fue propuesto el término de Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC)

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Displasia Severa, Neoplasia Intraepitelial Cervical 3 (NIC III), Lesión

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Una vez fijada y teñidas (tinción modificada de Papanicolaou) nuestras

Displasia leve Displasia moderada

Después de haber hecho una revisión y observación detallada de las