CARACTERIZACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE CONSORCIOS BACTERIANOS CAPACES DE CRECER SOBRE PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS Maria Luisa CASTREJÓN GODINEZ1, Enrique SÁNCHEZ

SALINAS2, Ma. Laura ORTIZ HERNÁNDEZ2 Facultad de Ciencias Biológicas y 2 Laboratorio de Investigaciones Ambientales. Centro de Investigación en Biotecnología. Universidad Autónoma del Estado de Morelos. Av. Universidad No 1001 col. Chamilpa, Cuernavaca Morelos, C.P 62209 Tel. (777) 329-7057. sanchez@buzon.uaem.mx, luicado@yahoo.com.mx Palabras claves: plaguicidas, bacterias, consorcios bacterianos, suelo RESUMEN Los plaguicidas aplicados constantemente a suelos agrícolas, los envases contenedores y los productos caducos, generan grandes cantidades de residuos líquidos y sólidos que contaminan suelos y cuerpos de agua, afectando a las cadenas tróficas y al hombre mismo. Ante esta situación, es importante generar alternativas para el tratamiento de residuos de estos xenobióticos y/o para la limpieza de sitios contaminados. La biodegradación con bacterias aisladas de sitios expuestos a estos xenobioticos, es una alternativa valiosa. Sin embargo, estas bacterias pueden ser patógenas, de ahí la importancia de identificarlas para utilizarlas de manera segura o bien emplear estrategias moleculares para su aprovechamiento en el tratamiento de residuos de plaguicidas o en la restauración de sitios contaminados. El consorcio bacteriano aislado de suelos agrícolas esta compuesto por 11 bacterias, seis con capacidad de crecer en presencia de Paratión metilico y cinco para cadusafos. Las especies identificadas son: Bacillus brevis, Stenotrophomonas maltophilia, Pseudomonas aeruginosa, Yersinia pseudotuberculosis, Weeksella virosa, Flavobacterium odoratum, Burkholderia cepacia, Pseudomonas stutzeri. La cepa identificada como Bacillus brevis resultó con mayor capacidad de crecimiento en un medio mínimo con paratión metílico como única fuente de carbono y en medio líquido. Burkolderia cepacia es una bacteria con capacidad de crecer en medio liquido con cadusafos; se ha reportado para la recuperación de suelos contaminados con residuos tóxicos. Diferentes bacterias identificadas son patógenas, sin embargo pueden ser utilizadas en el tratamiento de residuos de paratión metílico y cadusafos y probablemente, de otros plaguicidas de la misma familia química, con el debido control o utilizando herramientas moleculares. INTRODUCCION La extraordinaria diversidad biológica de la tierra, no solo comprende a los animales, plantas, hongos y otros organismos macroscópicos, sino también a los millones de especies microscópicas, distribuidas en los hábitats más diversos que incluyen a suelos y aguas contaminados con xenobioticos. Debido al papel particular que juegan las
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que son los más usados a nivel mundial. y las sustancias aplicadas a los cultivos antes o después de la cosecha para proteger el producto contra la deterioración durante el almacenamiento y transporte. Posteriormente fueron los compuestos arsenicales los que se emplearon para el tratamiento de las plagas de insectos en la producción agrícola. dispuestos de manera inadecuada. En ambos casos se trataba de sustancias de una elevada toxicidad. herbicidas y fumigantes. Están incluidos insecticidas. desecantes. de uso agrícola. incluyendo los vectores de enfermedades humanas o de los animales. 2001). las especies de plantas o animales indeseables que causan perjuicio o que interfieren de cualquier otra forma en la producción.5 billones de libras de plaguicidas. madera y productos de madera o alimentos para animales. lo que limitó su empleo generalizado. fungicidas. elaboración. debido a que han sido el resultado de un proceso de evolución de poblaciones microbianas autóctonas que se han adaptado a estos contaminantes y porque proveen la posibilidad de ser usadas in situ en la detoxificacion de ambiente severamente contaminados. rodenticidas. almacenamiento. arácnidos u otras plagas en o sobre sus cuerpos. MARCO TEORICO Definición de plaguicida. La Organización de las Naciones Unidas para la alimentación (FAO 2002) define a un plaguicida como cualquier sustancia o mezcla de sustancias destinadas a prevenir. Se estima que 4. La era de los plaguicidas químicos comenzó en el siglo pasado cuando se desarrollaron los sulfuros y se les encontró una aplicación práctica como fungicidas. defoliantes. El término incluye las sustancias destinadas a utilizarse como reguladoras del crecimiento de las plantas. se han empezado a investigar sus patrones de diversidad y las factores que los regulan (Horner-Devine et al. principalmente de la familia de los organofosforados. Esto genera grandes cantidades de residuos y productos obsoletos. agentes para reducir la densidad de fruta o agentes para evitar la caída prematura de la fruta. Fue en 1940 cuando aparecieron en el mercado los primeros plaguicidas organoclorados que tienen su máximo exponente en el dicloro 2 . Por esta razón. son comercializados en todo el mundo anualmente (Klaasen 2001). destruir o controlar cualquier plaga. Cronología del desarrollo de los plaguicidas. productos agrícolas. Los estudios de diversidad microbiana en sitios con constantes aplicaciones de plaguicidas permiten la caracterización e identificación de especies bacterianas con un potencial de aplicación en procesos de biorremediación de sitios contaminados y/o el tratamiento de residuos caducos u obsoletos.bacterias en los ecosistemas y su importancia en la vida del hombre. La presencia de bacterias capaces de metabolizar compuestos organofosforados ha recibido una especial atención. industrial y doméstico. estos sitios son los mas apropiados para el aislamiento de cepas capaces de crecer y en consecuencia de degradar estos xenobioticos (Ortiz-Hernández et al. 2003). transporte o comercialización de alimentos. o que pueden administrarse a los animales para combatir insectos.

incluso crecen mejor ahí. Se sustenta que es indudable el gran beneficio derivado del empleo de los plaguicidas en los programas de salud y en la lucha contra enfermedades transmitidas por vectores o con huéspedes intermediarios (Olea y Fernández 2001). El suelo contiene básicamente cinco grupos de microorganismos: bacterias. 2001). Desde entonces se han empleado tanto en los tratamientos agrícolas como en el control de plagas vehiculizadas por insectos portadores. En el transcurso de los últimos 150 años el hombre ha fabricado muy diversos compuestos químicos con objeto de satisfacer las necesidades crecientes del desarrollo tecnológico y mejorar su calidad de vida. censo que se incrementa día a día y que parece no tener fin si se considera que se incorporan a la lista cerca de 2. frecuentemente mediante prácticas inadecuadas. Se ha manifestado frecuentemente que debido al empleo de plaguicidas. hongos. Como ecosistema. La aplicación de plaguicidas genera conflictos sociales por el elevado número de trabajadores del campo intoxicados por estos productos.000 nuevos compuestos cada año (Olea y Fernández 2001). el suelo incluye además a los constituyentes orgánicos e inorgánicos propios de un determinado lugar (Alexander 1980). El empleo de agroquímicos en las actividades agropecuarias es una de las más grandes amenazas para la pérdida de la fertilidad de los suelos. Los microorganismos del suelo. se estiman en más de 120. que impactan no sólo los suelos de las áreas en donde se aplican.difenil tricloroetano (DDT). en ellos pueden existir microorganismos que. así como también por la sospecha de efectos adversos sobre la salud de las comunidades vecinas. también lo es para el crecimiento de microorganismos. con un alto índice de mortalidad. en algunos casos. sino que llegan a través de los ríos hasta las zonas costeras afectando las especies marinas. 3 .000 las sustancias químicas de nueva síntesis y los subproductos derivados de éstas producidos por la actividad humana. herbicidas y fertilizantes. las cosechas se han visto incrementadas significativamente y las pérdidas en la producción se han reducido de forma espectacular. Los hábitats naturales de los microorganismos son extremadamente diversos. algas y protozoarios. no se encuentran organismos superiores. sin embargo. de su capacidad biodegradadora y otras funciones. Desde el inicio de la revolución industrial. Efecto de los plaguicidas en el ambiente. Importancia de los plaguicidas. constituye una de las formas de contaminación más importantes. En la tabla 1 se muestra la distribución de los microorganismos en varios horizontes del suelo. debido a las extremas condiciones físicas o químicas. Pero además. En la tabla 2 se muestra el número aproximado de organismos comúnmente encontrados en suelos. hay muchos hábitats donde. actinomicetos. Cualquier hábitat que sea adecuado para el crecimiento de organismos superiores. la flora y la fauna (Lichtinger et al.

con capacidad de crecimiento sobre plaguicidas organofosforados. Por lo tanto. PROFUNDIDAD (cm) 3-8 20-25 35-40 65-75 135-145 BACTERIAS AEROBIAS 7. es importante mantener el contenido de humedad a un nivel adecuado.800 1.000/100g Requerimientos fisiológicos de los microorganismos degradadores.000/g 1. Número aproximado de organismos comúnmente encontrados en suelos (Martínez 1997). La mayoría de las bacterias crecen de manera óptima. 4 .000/g 1.000. Las bacterias llegan a necesitar micronutrimentos en concentraciones traza y algunos factores de crecimiento como aminoácidos. Temperatura: La temperatura óptima para el crecimiento de las bacterias aisladas del suelo es entre 20 y 25°C.000 a 500. otros nutrimentos y un aceptor final de electrones. en un rango de 6.000.5.000 a 500. pH del suelo: La acidez o alcalinidad de una solución afecta el crecimiento de los microorganismos.Tabla 1.000 a 20.800 472 10 1 BACTERIAS ANAEROBIAS 1. 3.000/g 1. 4.000/g 1. 2. 1997): 1.5 a 7.000 a 100.000 a 900. Distribución de microorganismos en diferentes profundidades de un perfil de suelo (Alexander 1980). se enlistan continuación (Ortiz et al.4 ACTINOMICETOS 2.000.5 0. igual que todos los organismos.000/g 5. es de 50 a 80%. OBJETIVO GENERAL Caracterizar e identificar bacterias de consorcios bacterianos aislados de suelos agrícolas. Nutrimentos y oxígeno: Las bacterias heterotróficas para crecer necesitan una fuente de carbono.080 245 49 5 HONGOS 119 50 14 6 3 ALGAS 25 5 0. aunque hay excepciones. La mayoría de los microorganismos necesitan de diferentes factores para su óptimo crecimiento. Humedad del suelo: Los microorganismos. necesitan humedad para crecer.950 379 98 1 0. Organismos Bacterias Actinomicetos Hongos filamentosos Algas Protozoarios Levaduras Nemátodos Número estimado 3.1 - Tabla 2.000/g 5.000. vitaminas u otras moléculas orgánicas. el cual es el oxígeno para el caso de las aerobias. que de acuerdo a varios autores. ya que se componen por más de un 80% de agua.000 a 20.000 a 500.

tamaño. Pseudomonas stutzeri. Las diversas pruebas bioquímicas aplicadas. El procedimiento para la identificación fue realizado de acuerdo con Bergey`s Manual of Systematic Bacteriology (Krieg y Holt 1984). Caracterización de los consorcios bacterianos. Weeksella virosa. Las colonias se eligieron en función de su morfología. motilidad y citrato de Simons (Koneman et al. 1992). Burkholderia cepacia. Las colonias se incubaron durante 24 horas a 37ºC. oxidasa. color. Proceso de selección y obtención de colonias puras (Ortiz-Hernández et al. este procedimiento fue repetido varias veces para asegurar el aislamiento de las colonias. Pseudomonas aeruginosa.60 y 100 mg/L de cadusafos como única fuente de carbono. utilizando tubos eppendorf con glicerol adicionado con cada plaguicida a una concentración final de 25 mg/L y conservados a una temperatura de -70ºC en un congelador REVCO (Yañez-Ocampo 1998). tinción de Gram. Voges Proskauer. bordes y superficie. Se cultivaron por un periodo de 120 horas. adicionalmente se aplicaron diferentes pruebas bioquímicas como rojo de metilo. Fueron cultivadas en placas con agar de soya de tripticaseína (ATS) conteniendo 15 mg/L de paratión metilico y cadusafos (concentración final). fermentación de carbohidratos. 5 . a una temperatura de 25°C.MATERIAL Y METODOS Los consorcios bacterianos previamente aislados de suelos agrícolas del estado Morelos (Sánchez-Salinas 2005) fueron empleados para la obtención de cepas puras. 25 y 40 mg/L de paratión metilico y 40. RESULTADOS Y DISCUSION De los consorcios seleccionados se aislaron 6 cepas puras para el consorcio bacteriano aislado en presencia de Paratión metílico (CB-SP) y 5 para el consorcio bacteriano aislado sobre medio con Cadusafos (CB-SC). consistencia. además del sistema de BBL Crystal. Las cepas fueron identificadas como: Bacillus brevis. Conservación de los consorcios. 150 rpm y bajo ausencia de luz. Se tomaron aquellas que se lograron aislar para asegurar la pureza. Se realizaron cinéticas de crecimiento de los consorcios y fueron cultivaron en 30 mL de medio mineral a 10. Indol. Flavobacterium odoratu. Stenotrophomonas maltophilia. Los consorcios bacterianos y las cepas puras se adicionaron a la colección bacteriana del Laboratorio de Investigaciones Ambientales. proporcionaron la información que permitió la identificación y el porcentaje de confiabilidad para cada cepa bacteriana (tabla 3). El sistema de identificación bacteriana BBL-Crystal® fue empleado para la identificación bacteriana. Yersinia pseudotuberculosis. 2002).

Algunas pueden ser parte de la flora intestinal normal del hombre y los animales (Krieg y Holt 1984).67% RM = Rojo de metilo. y aguas negras.9 µm x 1. pozos. de agua y de alimentos.99% Weeksella virosa 97. y de muchos antibióticos 6 . es un bacilo gram-negativo no fermentativo. benceno.0 µm. F-C = Fermentación de carbohidratos. plantas y residuos orgánicos (López et al. aerobio. Es un bacilo gram-negativo versátil. lagos. etilbenzeno.8 µm por 1. Las especies de Bacillus son de naturaleza ubicua y habitan en el suelo. brevis. CS = Citrato de simons. comprende más de 40 especies de bacilos aerobios y anaerobios facultativos grampositivos que producen endosporas y son generalmente cilíndricos o elipsoidales. resultó ser la cepa con mayor capacidad de crecimiento en un medio mínimo con paratión metílico como única fuente de carbono.60. Anteriormente conocida como Pseudomonas maltophilia o Xantophomonas maltophilia. Clave CB-SP1 CB-SP2 CB-SP3 CB-SP4 CB-SP5 CB-SP6 CB-SC1 CB-SC2 CB-SC3 CB-SC4 RM V-P Gram + Indol Mot + + + + ++ Cat + + + + + + + + + + F-C Ac SC Alc-SC Alc-SC SC Alc-SC Alc-SC Alc-SC Alc-SC Ox + -(+) + + + CS + + +(-) + + + Forma Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo Cocobacilo Bacilo Cocobacilo Coco Bacilo Bacilo Identificación (sistema BBL) Bacillus brevis 97% Stenotrophomonas maltophilia 98% Pseudomonas aeruginosa 97. suelo.8% Alc-SC CB-SC5 + + Alc-SC + + Coco Pseudomonas stutzeri 87. 2003). Pseudomonas aeruginosa. Lee et al.5 a 3. La mayor parte de las especies producen catalasa (Grimont et al. y las infecciones gastrointestinales.67% Flavobacterium odoratum 85% Burkholderia cepacia 75% Burkholderia cepacia 99. B. brevis.5-4 µm. 1991). Características de las bacterias identificadas Bacillus brevis. Gram = Tinción de gram. agua embotellada. infecciones del sistema respiratorio. Mot = Motilidad. Su temperatura óptima para el crecimiento es 37ºC y crece a temperaturas de hasta 42ºC.19% Yersinia pseudotuberculosis 99. Stenotrophomonas maltophilia. Este género es típico de la familia Bacillaceae. habita en suelo y agua. de antisépticos débiles. dermatitis. pertenece a la familia pseudomonadaceae.5 a 0. alimentos. V-P = Voges-Proskauer. esto permite plantear su potencial en la degradación de residuos de plaguicidas. mide 0. Es un patógeno oportunista causa infecciones de la zona urinaria. agua y polvo del aire. B. suelos y aguas contaminados con estos xenobioticos. se ha aislado principalmente de suelos. Crawford (1975) informa que esta especie presenta una importante eficiencia en remoción de hidrocarburos. es un microorganismo ubicuo que ha sido aislado en numerosas fuentes de agua: ríos.Tabla 3. Este microorganismo produce antibióticos como la gramicidina y la tirotricina (Zinsser 2004). Es resistente a las altas concentraciones de sales y de tintes. Bacillus brevis mide 0.67% Stenotrophomonas maltophilia 97. Esta especie fue aislada a partir de suelos agrícolas con un amplio historial de aplicaciones de plaguicidas organofosforados. (2002). y xileno. reportan a esta especie con capacidad para degradar tolueno. Ac = Acido. Pruebas bioquímicas de las cepas aisladas.8% Stenotrophomonas maltophilia 99. son móviles por medio de un flagelo polar. animales. bacteremia. (Schaumann 2003). Móvil mediante varios flagelos polares. aerobio.

aeruginosa que tienen la capacidad de degradar alcanos y alquenos de cadena ramificada y que. 1990). (Reina et al. aerobio facultativo y presenta movilidad por flagelos peritricos. en los gatos. 7 . son útiles en la limpieza de sitios contaminados con estos compuestos o con metales pesados (Soberón-Chávez et al. Es un bacilo gram-negativo. producen olor a frutas. oxidasa positiva. Yersinia Pseudotuberculosis es un cocobacilo gram negativo. En relación taxonómica las flavobacterias son suficientemente similares al género Weeksella por lo que Botha et al. (1989) sugieren la inclusión posible en este género.comúnmente usados (Zinsser 2004). El contagio es por la ingestión de pequeñas aves y roedores que son portadores de la bacteria. pertenece a la familia Enterobacteriaceae. Es característico que reduzcan nitritos pero no nitratos. Esta bacteria es capaz de utilizar una enorme variedad de compuestos orgánicos como sustrato para crecer. enfermedad de pronóstico fatal en la que se producen lesiones piogranulomatosas generalizadas. Se han reportado cepas de P. indol negativo. plantas y materias del alimento.5 µm x 1.0 µm. Algunas especies del Flavobacterium son capaces de degradar el pentaclorofenol y otros compuestos similares. en el hombre es la responsable de la peste bubónica. por tanto. debido a la semejaza que presenta con estas dos bacterias. Aislada por primera vez en 1883 por Malasez y Vignal el organismo recibió distintos nombres hasta concluir en el genero Yersinia. son aisladas de los especimenes clínicos humanos (Holmes et al. Yersinia pseudotuberculosis y Yersinia enterocolitica. Yersinia pseudotuberculosis. No se encontraron reportes acerca de su capacidad de crecer o degradar algún xenobiotico. es un cocobacilo gram negativo. capacidad que le permite colonizar nichos en los que son escasos los nutrimentos que otros organismos pueden asimilar. tres de las cuales son potencialmente patógenas para humanos: Yersinia pestis. aerobias. catalasa positiva. agua. Hasta el momento no se sabe donde clasificarla. Éste es un ejemplo de las capacidades de biodegradación de este género (Korin 2004). 1994). es importante realizar experimentos de cinéticas de degradación de la cepa y de sus extractos enzimáticos. Casi todas las especies de animales son vectores. Flavobacterium Odoratum. de la pseudotuberculosis felina. La designación de pseudotuberculosis deriva de la característica histopatológica encontradas en nodos linfáticos mesentéricos. Es la causante. no presentan movilidad. Se encuentra en suelo. Mide 0. Aun cuando no hay reportes de su posible capacidad de degradación de xenobioticos y su patogenicidad. afín de confirmar su capacidad de transformación de los organofosforados y la posibilidad de continuar con otros trabajos con herramientas moleculares. etc) esta bacteria es el patógeno principal de animales salvajes y domésticos en todos los continentes. 1998). agua.0-2. Yersinia pseudotuberculosis se encuentra distribuida ampliamente en el ambiente (suelo. El genero Yersinia incluye 11 especies. 1986). Se reporta como un nuevo género y una nueva especie. Las colonias son generalmente de color amarillo. Son no fermentadores. Además mencionan que Weeksella virosa presenta una semejanza con Bergeyella. vegetales. Weeksella virosa. al ser examinadas por taxonomía numérica (Botha et al.

Moller et al. Es un microorganismo con una extraordinaria variabilidad fenotípica y genotípica. 1995. Es un reconocido patógeno en pacientes portadores de fibrosis quística (FQ) y neutropénicos. Pseudomonas aeruginosa. Debido a esta enorme variabilidad genotípica la especie se subdivide en genomovares. distribuidas por todo el medio. Bacillus brevis. 1997. Frateuria y Zooglea). Son muy numerosas las publicaciones en las que se hace referencia a la capacidad de Pseudomonas sp. Bieszkiewics et al. cepacia (antes denominadas Pseudomonas cepacia) es un bacilo Gram negativo no fermentador. Kumasi et al. 1995. o bien utilizando herramientas moleculares como la clonación y la transformación. presenta motilidad. Hubert et al.2. Isken et al. pueden ser utilizadas en el tratamiento de residuos de plaguicidas como el paratión metílico y cadusafos y probablemente de otros de la misma familia química. 1999). Stenotrophomonas maltophilia. Xanthomonas. puede también crecer en antisépticos (Gil 2001). 1999. 2005). Lee y Kim 1997. Lebkowska et al. Weeksella virosa. Secretan una biomolecula. Pseudomonas stutzeri. Burkholderia cepacia se reporta para la biorecuperación de suelos contaminados con residuos tóxicos (Hillyard 2005). pyridine-2. Pertenece a la familia Pseudomonadaceae que incluye cuatro géneros diferentes (Pseudomonas. los hidrocarburos derivados del petróleo y otros compuestos halogenados (Fuenmayor y Rodríguez 1997. 1998. Descrito en 1950 como patógeno de plantas. Flavobacterium odoratu. Para sobrevivir e incluso degradar una amplia variedad de compuestos orgánicos como los plaguicidas. Pseudomonas stutzeri. CONCLUSIONES Se identificaron ocho especies bacterianas: Bacillus brevis. 1998. Diferentes bacterias identificadas son reportadas como patógenas. Burkholderia cepacia. Esta biomolécula es usada en transformaciones de tetracloruro de carbono a CO2 (Lewis 1999). 1998. En la actualidad se conocen 18 genomovares diferentes (Cladera et al. B. Burkholderia cepacia.Burkolderia cepacia. han sido reportadas por su capacidad de degradar diferentes xenobioticos. Pseudomonas stutzeri. Es una bacteria gram negativa. crece a una temperatura optima de 37ºC. Auto compiten con otras bacterias a un pH 8. Chablain et al. Kallastu et al.6-bis (thiocarboxylic acid) (PDTC). multiresistente. Yersinia pseudotuberculosis. sin embargo con un manejo adecuado como el tratamiento de residuos en reactores. Pseudomonas aeruginosa. entendiendo a la genomovar como un estatus taxonómico provisional que agrupa a cepas genotípicamente similares dentro de una misma especie. Whyte et al. En medio sólido TS en un periodo de 24 horas a 28ºC se observan colonias grandes 4-6 mm de diámetro. Flavobacterium odoratu. presentan un color café claro y son opacas (Yañez-Ocampo 1998). Stenotrophomonas maltophilia. 1998. especialmente encontrado en cebollas y ampliamente distribuido en el suelo. 8 . Esta especie se ubica dentro del género Pseudomonas. poseen una forma fusiforme con bordes ondulados irregulares y una superficie convexa. presenta respiración aeróbica. Ashok et al. Puede crecer en niveles bajos de hierro y degradar el tetracloruro de carbono a bióxido de carbono o a otros compuestos inertes (Dybas 1995). 1997.

Introducción a la microbiología del suelo. y Rodríguez Lemoine V. Horoch M. Philippe G. García-Valdés. 1980. Groboillot A. The taxonomic relationship of certain environmental flavobacteria to the genus Weeksella. A. G. Hugo CJ. M. Lett. M." Applied and Environmental Microbiology. 439-444. 1-31. Department of Food Science. Jooste PJ. J. Roma pp. Microbiol.Los géneros identificados son pobladores frecuentes de suelos y aguas. México. Department of Food Science and Department of Microbiology. Appl. 1975. The incidence of Weeksella. Cladera. 30.F. Àrea de Microbiologia. (1992) Characterization of polycyclic aromatic hydrocarbons degradative soil Pseudomonas.M. 1989. Degradation of 3-Hydroxybenzoate by Bacteria of the Genus Bacillus. Código Internacional de Conducta para la Distribución y Utilización de Plaguicidas. Britz TJ. 27-114.and Bergeyella-like bacteria in the food environment. 47 (3): 305-12. strain KC. Pol. Universitat de les Illes Balears. South Africa. Ashok BT. 9 . J Appl Microbiol. M. pp. Boszczyk Maleszak H and Mycielski R (1998) An attempt to use selected strains of bacteria adapted to high concentrations of petroleum oil to increase the effective removal of petroleum products in excess activated sludge in laboratory conditions. No. FAO (Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación) 2002. 61(2). Chablain PA. Editorial AGT. 21 (4): 246-8. pp 349-356. Vol. C. 1998. 84(3). Acta Cient. J. S. 3. Criddle. Bieszkiewics E. cloritidismutans.L. University of the Orange Free State. 551-559. Crawford. Acta Microbiol. 2005. 1995. Applied microbiology. 43 (6): 349-54. Bloemfontein. Saxena S and Musarrat J (1995) Isolation and characterization of four polycyclic aromatic hydrocarbon degrading bacteria from soil near an oil refinery. Adoptado por el 123º periodo de sesiones del Consejo de la FAO. D. Venez. Truffaut N and Guespin Michel JF (1997) Res. 148 (2): 153-61. Botha WC. Tatara. J Appl Bacteriol. University of the Orange Free State. R. 758-762. Microbiol. REFERENCIAS Alexander. Fuenmayor S. E. Dybas. L. Lalucat. "Localizaton and characterization of the carbon tetrachloride transformation activity of Pseudomonas sp. Botha WC. p. South Africa. Genotipo versus fenotipo en la descripción de especies bacterianas: el caso de Pseudomonas stutzeri y P. Jooste PJ. pp. 67(5).

y Grimont F. Holmes B. pp. Bacteriol. 1877-1902. DJ. MICROBIOL. RE. Rev. Allen. Kallastu A. Soil Microbiology BIOL/CSES 4684. CA 94305. Folia Microbiol. sp. pp.. 371 Serra Mall. infectol. Appl. Horner-Devine M.vt. Steigerwalt. Obtenido el 29 de junio de 2005 en http://www. Microbiol. 514-515. Appl. 1984.org/pub/edition_2/Spanish/And_The_Question_Is_Spanish. 1992. Bergey`s Manual of Systematic Bacteriology volumen 1. Pp. Hubert C. Stanford. 185-190. Hillyard S. E. Horak R and Kivisaar M (1998) Identification and characterization of SI1411. 1986. Volumen 2.. Flavobacterium. chil.]. Edición 2..G. 2001. Brenner. E. y Holt J. Goodman-Gilman. Edited by J. 10 . C.GIL D. Bacteremia de curso fatal por Burkholderia cepacia: Revisión de la literatura a propósito de un caso clínico. Bora TC and Roy MK (1998) Experimental biofilm and its application in malathion degradation. C. Nonmetallic environmental toxicants: air pollulants. Pp. Stanford University. nov.cfww.D. Newsletter. Obtenido el 29 de junio de 2005 en http://soils1. McGrawHill. found in human clinical specimens. and A.U. 8 (3). nov. Janda. 2004. solvents and vapors.18. 43 (1): 27-30. Grimont P. Krieg N.cses.asp.edu/ch/biol_4684/Microbes/Flavobacterium. (ED) Williams and Wilkins. U. Weeksella virosa gen. Dowell. Derks A. 2001.1.E. Winn. En: Goodman & Gilman’s The pharmacological basis of therapeutics. En Bergey´s Manual of Systematic Bacteriology William y Wilkins. 65 (7): 3064-70. and Department of Geological and Environmental Sciences. Weaver.E. pp. p. 203-268. (formerly group IIf). An ecological perspective on bacterial biodiversity. pp. Koneman. Diagnostico microbiológico. 113-122. 1991. Pathak MG. Sommers. AG. J. Systematic and Applied Microbiology [SYST. Hardman. Shen Y and Voordouw G (1999) Composition of toluene degrading microbial communities from soil at different concentrations of toluene. 180 (20): 5306-12. 2003. Wolffs P and de Bont JA (1999) Effect of organic solvents on the yield of solvent tolerant Pseudomonas putida S12. a new insertion sequence which causes transcripcional activation of the phenol degradation genes in Pseudomonas putida.html. Editorial medica panamericana. no. 65 (6): 2631-35. Department of Biological Sciences. APPL. M. Guha A.41-44. USA. Klaassen. 24-27. Limbird. Microbiol. Carney K. L. Facultatively Anaerobic Gram-Negative Rods. Kumari B. Isken S. Korin M.U. Tercera edición. vol. and pesticides. International edition. M y Bohannan B. ISSN 0716-1018. 303-310. Environ. M. J. Environ.

A. Importancia de la identificación de los microorganismos que participan en la biodegradación de compuestos xenobioticos. Sánchez-Salinas E. N. y Quintero-Ramírez R. 2001. B..42-46. Karwowska E and Miaskiewicz E (1995) Isolation and identification of bacteria from petroleum derivatives contaminated soil. México.. Microbiol. Gamallo T. R. E. Moller S. Hig. R. Cho KS. fungi. F. Universidad Autónoma del Estado de Morelos.. 64 (2): 721-732. Bello-Ramírez A. CINVESTAV-IPN. National Subsurface Environmental Research Laboratory. V. Christiensen B. 5-65.. 2003. 11 . Vázquez. pp. Korea. Rodríguez L. Olea.F. Ewha Womans University. Environ. p. Martínez. Ortiz-Hernández M. Andersen JB. 400-6. ISSN 0212-7199. I. 52(4). y Quintero. 1997. 1-18. Jun YS. Y. J.. Hospital Clínico Universidad de Granada. Ryu HW. Laboratorio de Investigaciones Médicas. L. actinimycetes and soil microbial biomass. Bolaños-Cacho. jun. Arriaga. Ortiz-Hernández M. Lorenzo Z. Michalcewicz W (1995) The influence of diesel fuel oil on the number of bacteria.20. Pol. L. Ramos J. México. Seoul. López R. ethylbenzene. D. Rocz. An. R. L. Rodríguezotero. Symposium Biorremediacion de suelos y acuíferos (6-7 de Noviembre 1997).F. W. Sánchez-Salinas E. Plaguicidas persistentes. Biotechnol Bioeng. 46 (1): 91-7. M . Sternebrg C. Acta Mocrobiol.. R. Appl. R. Roh JR and Kim HS (1997) Metabolic engineering of Pseudomonas putida for the simultaneous degradation of benzene. J Air Waste Manag Assoc. 2001.6. benzene. Lado L. Lee J. 44 (3-4): 297-303. Madrid España pp. V. y Fernández. Givskov M and Soren M (1998) In situ gene expresion in mixed-culture biofilms: evidence of metabolic interactions between community members. Semarnat. Castillo-Pérez R. 1-24. Hydrolysis of tetrachlorvinphos by bacteria isolated of agricultural soils and identification of its metabolite.. Plaguicidas Organofosforados y Ambiente. J. Biotecnología 2(3): 129-151. Zakl. 43: 1146-1152. Endocarditis por Stenotrophomonas maltophilia: presentación de un caso y revisión de la literatura.. vol.. Med.. Degradation characteristics of toluene.Lebkowska M. Lichtinger. L. Bases de la política para la prevención de la contaminación del suelo y su remediación. 2002. pp. Panstw. Pp. Lee EY. and xylene by Stenotrophomonas maltophilia T3-c. no. 1997. Interna (Madrid).. 2001. toluene and p-xylene mixture.

Tesis de licenciatura. 63 (9): 3719-3723. Pp. Tesis de doctorado. 36-41. 1998. Pp. 1-155. Critical Rev. Centro de Investigaciones en Biotecnología. Pseudomonas aeruginosa. Biodegradación de plaguicidas organofosforados por nuevas bacterias aisladas del suelo. Kenneth Todar University of WisconsinMadison Department of Bacteriology. Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology. Universidad Autónoma del estado de Morelos.Ortiz-Hernández M. Cuernavaca Morelos. México. L. Alemania. Sánchez-Salinas E. Pp. 1-17 12 . Aislamiento y caracterización de bacterias del suelo capaces de degradar paratión metilico. Appl. Schaumann R. Yañez-Ocampo G. Institute for Medical Microbiology and Epidemiology of Infectious Diseases. Environ. 2002. B Palmeros. 20: 95-105. Centro de Investigaciones en Biotecnología. Zinsser H. Bourbonniere L and Greer CW (1997) Biodegradation of petroleum hydrocarbons by psychrotrophic Pseudomonas strains possessing both alkane (alk) and naphtalene (nah) catabolic pathways. Primer informe de doctorado. 2003. Whyte L. 2005. Microbiol. Zinsser H. 1994 Pseudomonas lipases: Molecular genetics and potential industrial applications. 2004. Leipzig. México. Soberón-Chávez G. Nutrition and growth of bacteria. University of Leipzig. 2004. Retencion y biodegradacion de plaguicidas organofosforados en suelos: efectos del tipo de suelo y de la forma de inoculación. Microbiol. Stenotrophomonas maltophilia un importante patógeno bacteriano. Universidad Autónoma del estado de Morelos. Cuernavaca Morelos.