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MANEJO DEL MICROSCOPIO Antecedentes: Un aparato fundamental para la investigacin ha sido el microscopio, con base en la microscopia, se ha podido escudriar en un mundo extremadamente pequeo. Los antecedentes de los modernos microscopios datan de la Grecia clsica y los rabes, quienes ya conocan los mecanismos de la ptica. Pero la aparicin del microscopio compuesto se da en el Renacimiento y fue Galileo Galilei quien acopl dos lentes en un tubo, mismo que fue perfeccionado a fines del siglo XVI por los hermanos holandeses Jans y Zaccharias Cansen. Es relevante el trabajo del astrnomo y matemtico Robert Hooke sobre la observacin de la estructura del corcho, a travs de un microscopio fabricado por el mismo. Por ltimo est Antn Van Leeuwenhoek, quien no tenia preparacin acadmica y se convirti en un experto tallador de lentes, fue tal su grado de perfeccin, que pudo observar varios tipos de microorganismos. Llam tanto la atencin que la Royal Society of London (primera asociacin cientfica reconocida en el mundo) mand algunos investigadores cientficos a corroborar sus notas, que envi durante 20 aos. El nico defecto que tenan sus microscopios era la aberracin cromtica, lo cual corrigi a fines XIX el qumico alemn Ernst Abbe. A partir del microscopio compuesto se han derivado otros. Procedimiento: En el esquema del microscopio, seala las siguientes partes: oculares, revlver, objetivos, tornillos macromtrico y micromtrico, pinzas, platina, condensador, diafragma, brazo, espejo o lmpara, pie o base, sealando su funcin ms elemental. Para familiarizarse con el manejo del microscopio se har lo siguiente: Colocar en un portaobjetos una muestra a criterio del maestro (a) (restos de organismos, cabello, etc.) Coloca la muestra sobre la platina, asegurndola con las pinzas. Emplea primero el objetivo de 4X, seguido por el de 10X y luego el de 40X. En caso de hacer uso del objetivo de 100X usar adecuadamente el aceite de inmersin, siguiendo las instrucciones. Reporta tus conclusiones: Muestra:

Obj. _____ X Cuestionario:

Obj. _____ X

Obj. _____ X

1.-Qu diferencias observaste en las estructuras, al utilizar los diferentes objetivos? 2.-Qu importancia ha tenido el microscopio en el desarrollo de la biologa? Conclusiones: Nombre del Alumno: __________________________________________________
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IDENTIFICACIN DE BIOMOLCULAS CARBOHIDRATOS Antecedentes: Los carbohidratos son compuestos orgnicos formados por carbono, hidrgeno y oxgeno. Estos forman parte e intervienen en una gran cantidad de procesos de los seres vivientes. Los ms importantes son de tres tipos: energticos, de reserva y estructurales. Desde el punto de vista energtico uno de los carbohidratos ms sencillos, la glucosa constituye el material de ms rpido aprovechamiento en el organismo y su oxidacin satisface las necesidades energticas y calricas del mismo. Como materiales de reserva, los carbohidratos existen en reino vegetal en forma de almidones y en el reino animal en forma de glucgenos; tanto uno como el otro son susceptibles de convertirse en glucosa para poder ser utilizados. Y en el aspecto estructural, los carbohidratos llevan a cabo una importante funcin en los vegetales debido a que la clula, que es su estructura leosa o esqueleto, est constituida por cadenas de azcares simples. Procedimiento: En el primer tubo de ensayo agrega 5 ml de agua simple; este ser nuestro tubo testigo. En el segundo coloca 5 ml. De agua con sal. En el tercero agrega la misma cantidad de clara de huevo y en el cuarto coloca tambin 5 ml. De jugo de manzana. Despus agrega 8 gotas de reactivo de Benedict y observa los resultados. El reactivo reacciona con la glucosa produciendo un color que va de rojo a anaranjado, dependiendo de la concentracin a la que sta se encuentre en el medio. CUADRO DE RESULTADOS: (Utiliza 3 cruces para el tubo con mayor concentracin de glucosa, y luego 2, 1 y 0 para los dems tubos). TUBO CONCENTRACIN

CUESTIONARIO: 1.- Qu diferencias encontraste en los tubos? 2.- A qu crees que se debieron las diferencias? 3.- De qu est formada principalmente la clara de huevo? 4.- Qu es un polisacrido? Menciona algunos ejemplos que conozcas, o investigues.

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IDENTIFICACIN DE PROTEINAS Las protenas son elementos vitales para los organismos, encontrndose en plantas y animales en una proporcin elevada. Hay una gran variedad de protenas y cada una desempea una funcin biolgica especfica que puede ser de reserva, de sostn, transporte, estructural, etc. Qumicamente las protenas estn constituidas por combinaciones complejas de carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, otros elementos en menor proporcin como son azufre, cobre, fsforo y fierro. Cuando la estructura de la protena se desorganiza, se dice que se encuentra desnaturalizada y esto trae como consecuencia la prdida de la actividad biolgica. La desnaturalizacin puede lograrse por medios fsicos como el calor o qumicos como una variacin de pH, observndose una disminucin en la solubilidad y la formacin de un coagulo. Este mtodo es utilizado para demostrar la presencia de protenas. Tambin se pueden identificar protenas mediante el uso de sustancias que al ponerse en contacto con ellas, producen una coloracin especfica; tal es el caso de la Reaccin de Biuret. En esta tcnica, se agrega hidrxido sdico y sulfato cprico a la protena; el cobre se combina con ella y toma una coloracin prpura.

PROCEDIMIENTO: Coloca en cada tubo 3 ml. de uno de los siguientes productos solucin de clara de huevo al 60 %, leche, consom de pollo, jugo de naranja y solucin de macerado de papa. Aade a cada tubo 3 ml. de hidrxido sdico al 10 % y una gota de sulfato cprico al 1 %. Observa cada uno de los tubos y describe tus observaciones. Tabla de resultados: ALIMENTO

OBSERVACIONES

Cuestionario y conclusiones: 1.- Observaste la presencia de protenas en alguno de los tubos? 2.- En qu te basas para afirmarlo?

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EXTRACCIN, SEPARACIN E IDENTIFICACIN DE LPIDOS Adems del agua, los carbohidratos y las protenas, los seres vivos estn constituidos por otras molculas que, aunque en menor cantidad, desempean funciones muy importantes. Los lpidos son biomolculas insolubles en agua que se encuentran en los seres vivos y desempean funciones diversas como: ser componentes estructurales de membranas, almacenan energa, separan, por sus condiciones de insolubilidad en agua regiones donde tiene lugar reacciones diferentes. Funcionan tambin como cubierta protectora en el caso de algunos animales mamferos. Procedimiento: Toma una muestra del tejido que hayas elegido y homogenzalo, es decir mulelo con el mortero, si el tejido es muy duro lcualo en seco. Coloca tu muestra en el vaso de precipitados agrgale un poco de mezcla Folch (suficiente para cubrir en exceso la muestra). La mezcla de Folch se prepara con cloroformo y metanol en proporcin de 2:1. Cuando hayas agregado la mezcla Folch a tu muestra, agtala durante algunos minutos, dejando tiempo suficiente para que la grasa se disuelva en la mezcla. Coloca el papel filtro sobre el embudo y ste sobre matraz y filtra la mezcla. En el papel filtro se quedarn las protenas y otras sustancias insolubles en la mezcla y en el filtrado estarn las grasas, pero disueltas en la mezcla de cloroformo-metanol, por ello es necesario evaporar para obtener un extracto puro. Debers hacer la evaporacin con mucha precaucin, ya que los solventes que ests utilizando son muy inflamables y requieren precauciones extremas, por lo que es necesario que utilices un bao mara ya que no pueden ponerse a fuego directo. Monta el bao mara, colocando dentro de la muestra piedrecillas de roca volcnica o pedacitos de vidrio pequeos para favorecer la ebullicin y evitar que haya movimientos muy fuertes. Evapora a sequedad y deja enfriar; adele unas gotas de Sudn IV que es un reactivo que indica presencia de grasas y observa el cambio del color. Resultados: ALIMENTO

OBSERVACIONES

Cuestionario: 1.-En el residuo del papel filtro han quedado protenas, cmo puedes demostrar que realmente lo son? 2.- Qu es el tejido adiposo? Cul es su funcin y su importancia en los mamferos?

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COMPARACIN MORFOLGICA DE CLULAS ANIMALES Y VEGETALES Antecedentes La clula no solo constituye la unidad estructural de los seres vivos, sino tambin la unidad funcional, es decir que una clula debe desempear por si misma todas las funciones que realiza un organismo pluricelular para mantenerse vivo. As pues una clula se nutre, responde a los estmulos del medio ambiente, crece, se reproduce, etc. Para realizar estas funciones requiere de diferentes estructuras como ncleo, citoplasma, membrana, vacuolas, mitocondrias, cloroplastos, lisosomas etc., que tienen un trabajo especfico cada una de ellas y que en conjunto hacen que la clula pueda ser una unidad funcional. Todas las clulas tienen muchos elementos en comn, pero hay algunas diferencias entre ellas, ya que el trabajo que deben desempear cambia dependiendo del organismo en que se encuentren, por ello las clulas que forman un organismo vegetal son diferentes a las de un organismo animal. Con el bistur corta un pedazo del tejido transparente que se encuentra entre dos capas de la cebolla, pues por ser muy delgado te ayudar a que puedas observar las clulas ms fcilmente. Coloca el tejido extendido sobre un portaobjetos, ponindole una gota de agua y a continuacin una de yodo; esto har que las estructuras celulares se tian y puedas verlas mejor. Coloca el cubreobjetos sobre la muestra y obsrvala al microscopio, empezando por el objetivo de menor aumento para que distingas al tejido completo, y despus a mayor aumento para que distingas las estructuras celulares y las identifiques sealndolas en tus esquemas. Con el palillo de dientes raspa suavemente el interior de tu mejilla y frota el material obtenido en un portaobjetos, extendindolo para que de una capa delgada. Deja que seque y agrega una gota de solucin de yodo, coloca el cubreobjetos y observa al microscopio; identifica las estructuras y selalas en tu esquema. Resultados:

Cuestionario: 1.-Enumera las diferencias que encontraste entre los dos tipos de clulas observadas 2.- Cul es la importancia de la pared celular en las clulas vegetales? 3.- Menciona los organelos presente en las clulas procariotas y en la eucariota animal y vegeta.

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MITOSIS

Antecedentes Cuando una clula ha llegado a su madurez y ha realizado normalmente su metabolismo, es capaz de reproducirse. Esto se lleva a cabo por medio de la divisin celular, ya se trate de una clula animal, vegetal o de un organismo unicelular. Fleming llam mitosis al fenmeno de divisin, sta se divide a su vez en cuatro fases llamadas: profase, metafase, anafase y telofase. Procedimiento: Coloca la preparacin de mitosis en el microscopio, obsrvala primero a 10X y luego a 40X. Observa detenidamente cada clula y distingue las diferentes fases. Esquematiza lo observado sealando cada fase con una flecha. Resultados:

Cuestionario: 1.- Qu importancia tiene la mitosis? 2.- Cules son las diferencias de cada una de las fases en la mitosis? 3.- En qu momento de la mitosis se observan los cromosomas con mayor facilidad y porqu? 4.- Reporta tus conclusiones

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FOTOSNTESIS (CLOROPLASTOS Y CLOROFILAS)

Antecedentes Uno de los procesos metablicos ms importantes para la vida es el que realizan las plantas, que se conoce como fotosntesis, en el que a partir de molculas simples- el agua y el bixido de carbono- y la energa luminosa, se producen sustancias complejas como los carbohidratos. Este proceso se realiza en los cloroplastos, una estructura particular, pues tiene unos sacos apilados llamados grana, conectados por una membrana denominada tilacoide. Dentro de la grana se encuentra la molcula responsable de la captura de la luz: la clorofila. ste es un pigmento fotosinttico que se encarga de atrapar los fotones que se emplearn en la produccin de la energa necesaria para formar los enlaces qumicos de la glucosa. Procedimiento: 1. Corta una hoja de la punta de la elodea y colcala en un portaobjetos con el lado inferior hacia arriba, agrega una gota de agua y cbrela. Obsrvala en el microscopio a 10X y dibuja tus observaciones. Los cuerpos de color verde son los cloroplastos; obsrvalos a 40X y esquematzalos. 2. Corta la hoja de espinaca en trozos y colcalos en el mortero, macralos con el pistilo y ve agregando acetona previamente calentada, hasta que quede una plasta uniforme. Filtra el macerado con ayuda de la gasa en uno de los tubos de ensayo. 3. Marca la banda de papel filtro con una lnea a dos centmetros de ambos bordes, procura no tocar demasiado el papel con las manos para no contaminarlo. Con la pipeta Pasteur toma un poco de filtrado y coloca una pequea gota en la parte media de la lnea que marcaste, repite la operacin dos veces sobre el mismo lugar. Vaca alcohol en el vaso de precipitados de manera que cubra aproximadamente un centmetro de altura. Coloca el papel filtro con la muestra sin que sta toque las paredes del vaso ni la muestra. Cuando el alcohol llegue a la otra marca, retira el papel y deja que se seque sostenindolo con unas pinzas. 4. Observa las manchas, deben observarse tres o cuatro bandas, las cuales corresponden de abajo hacia arriba a: clorofila b; clorofila a; xantofila y carotenos. 5. Dibuja lo observado. Resultados:

Cuestionario: 1. 2. 3. 4. 5. Describe como observaste a los cloroplastos. Qu tipo de luz absorbe la clorofila? Cuntas manchas presenta la banda de papel? Qu color tienen? Anota tus conclusiones
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EXTRACCIN DE ADN Antecedentes La extraccin de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atrados hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolucin y posterior extraccin de la clula. Se empieza por lisar (romper) las clulas mediante un detergente, vacindose su contenido molecular en una disolucin tampn en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el tampn contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, protenas y otras sustancias en menor proporcin. Las protenas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrn fraccionado en cadenas ms pequeas. y separado de l por accin del detergente. Slo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente, para lo cual se utiliza alcohol isoamlico, probablemente el nico reactivo de esta prctica que no suele haber en una cocina.

Procedimiento: 1. Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un bao de hielo triturado: 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato sdico. 5ml de detergente lquido o shampoo 2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos. 3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. As se rompern muchas clulas y otras quedarn expuestas a la accin del detergente. 4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampn fro y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar despus los restos vegetales ms grandes del caldo molecular hacindolo pasar por un colador lo ms fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y despus pipetear el sobrenadante. 5. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamlico enfriado a 0 C Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo ste inclinado. El alcohol quedar flotando sobre el tampn. 6. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separacin entre el alcohol y el tampn. Remover la varilla hacia delante y hacia atrs y poco a poco se irn enrollando los fragmentos de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodn mojado. Resultados: El producto filamentoso obtenido de la extraccin no es ADN puro ya que, entremezclado con l, hay fragmentos de ARN. Una extraccin "profesional" se realiza aadiendo enzimas que fragmentan las molculas de ARN e impiden que se unan al ADN. Esquematiza lo realizado e indica que sucede en cada paso. Anota tus conclusiones:

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VARIACIN GENTICA Antecedentes La variedad de las caractersticas en los seres vivos con reproduccin sexual es una ventaja, pues les permite tener e intercambiar informacin para poder soportar las variaciones o cambios en su ambiente. Estas variaciones se pueden observar fcilmente al comparar una caracterstica especfica. Sabemos que el genotipo nos indica las posibilidades (alelos) que tiene un gen de expresarse, pues los genes pueden ser dominantes o recesivos. El fenotipo sera la caracterstica o gen que se expresa y que podemos ver o detectar. Procedimiento: 1. Las siguientes caractersticas del ser humano no estn determinadas por genes, y siempre tienen dos posibilidades: a) b) c) d) e) f) Capacidad de enrollar la lengua en forma de U Lbulo de la oreja separado Hoyuelos en las mejillas Presencia del pico de viuda Predominancia del uso de la mano derecha Miopa

2. Realiza una contabilizacin de los compaeros de tu saln que presenten las caractersticas anteriores. Y cuantifcalas en la tabla de resultados. 3. con los datos que obtengas, realiza una grfica de frecuencias en papel milimtrico. CARACTER Enrollar la lengua Lbulo de la oreja separado Hoyuelos en las mejillas Diestro Miopa PRESENCIA AUSENCIA DOMINANTE RECESIVO

Cuestionario: 1. A qu se refiere los trminos homocigoto y heterocigoto? 2. De las caractersticas mencionadas en la prctica, investiga cules de ellas son determinadas por un gen recesivo y cules por un gen dominante.

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Tincin de Lpidos FUNDAMENTO Los lpidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudn III. TCNICA 1. 2. 3. 4. 5. Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite. Aadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III. Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar. Observar los resultados: en el tubo con Sudn III todo el aceite tiene que aparecer teido, mientras que en el tubo con tinta, sta se ir al fondo y el aceite no estar teido. 3. SOLUBILIDAD FUNDAMENTO Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sita sobre el agua. Por el contrario, las grasas son solubles en disolventes orgnicos, como el ter, cloroformo, acetona, benceno, etc. TCNICA 1. Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo. 2. Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de ter, acetona u otro disolvente orgnico, 3. Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar. 4. Observar los resultados: Se ver cmo el aceite se ha disuelto en el ter y, en cambio no lo hace en el agua y el aceite subir debido a su menor densidad.

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