Metodos Analisis Derivados Uva Aguardientes y Sidras

A N A L I T I C O S
M E T O D O S
E N
A L I M E N T A R I A
D E A N A L I S I S
O F I C I A L E S
Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras
PANREAC QUIMICA, S.A. publica una nueva edicin de sus folletos de Mtodos Analticos en Alimentaria, en la que podrn apreciar a simple vista un cambio de formato respecto a las anteriores.
M E T O D O S A N A L I T I C O S E N A L I M E N T A R I A
Esta nueva imagen, pretende ser una expresin de los cambios que con el tiempo hemos experimentado en nuestros campos de actividad, puesto que si continuamos manteniendo una importante implantacin en el sector alimentario como fabricantes de reactivos para anlisis PANREAC y de los aditivos alimentarios ADITIO, actualmente hemos aumentado nuestra aportacin de productos para el anlisis alimentario con nuestras lneas de Cromatografa en Capa Fina PANREAC-TLC y Medios de Cultivo Deshidratados para Microbiologa CULTIMED. La coleccin Mtodos Analticos en Alimentaria se compone de 6 folletos monogrficos, por campos de alimentos, que recogen una transcripcin ntegra de los mtodos oficiales de anlisis en Espaa, que a su vez son publicados en los correspondientes B.O.E. mencionados en el ndice de cada monografa incorporando los reactivos y productos auxiliares PANREAC en la calidad considerada ms idnea, as como los medios de cultivo CULTIMED.
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Los ttulos de las 6 monografas son:
Aceites y grasas Aguas potables de consumo pblico y aguas de bebida envasadas Carne y productos crnicos Cereales, derivados de cereales y cerveza Leche y productos lcteos Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras
Obviamente esta edicin ha sido actualizada con las disposiciones publicadas hasta el momento, que establecen nuevos procedimientos o que modifican notablemente caractersticas anteriormente establecidas. Por ltimo, comentarles que estn a su disposicin adems de esta coleccin, nuestros: Catlogo General de Reactivos PANREAC Catlogo ADITIO de Aditivos Alimentarios Catlogo CULTIMED de Medios de Cultivo Deshidratados Catlogo PANREAC-TLC de Placas, Folios y Accesorios para Cromatografa en Capa Fina.
I N D I C E
Productos derivados de la uva: Vinos

METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977, 25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977, 30-8-1979 Y 14-10-1981) 123a3b4a4b5a5b67a7b7c8910a10b1112131415161718192021222324a24b2526Examen organolptico (B.O.E. 22-7-1977) ............................ Ensayos previos de conservacin ....... Color (B.O.E. 14-10-1981) .................. Color de los vinos (aplicable a vinos tintos y rosados (B.O.E. 22-7-1977) ... Masa volmica y densidad relativa (mtodo picnomtrico) ........................ Masa volmica y densidad relativa (mtodo areomtrico) ......................... Ttulo alcohomtrico (mtodo picnomtrico)...................................... Ttulo alcohomtrico (mtodo areomtrico) (B.O.E. 23-7-1977) ......... Extracto seco total ............................. Azcares reductores (defecacin plmbica) (provisional) ........................ Azcares reductores (defecacin mercrica) (provisional) ....................... Azcares reductores (valoracin) (B.O.E. 30-8-1979) ............................. Glicerol (Glicerina) (B.O.E. 23-7-1977).. 2,3-Butanodiol ................................... Sacarosa (mtodo cualitativo colorimtrico)...................................... Sacarosa (mtodo cuantitativo) ........... Cenizas ............................................. Alcalinidad de cenizas ........................ Fosfatos ............................................. Calcio (mtodo complexomtrico) ....... Magnesio ........................................... Hierro (mtodo colorimtrico del sulfocianuro) ....................................... Cobre ................................................ Potasio (fotometra de llama) .............. Sodio (fotometra de llama) ................. Acidez total ........................................ Acidez voltil ...................................... Acido Srbico en el destilado para acidez voltil ...................................... Acidez fija (B.O.E. 25-7-1977) ............ Acido Tartrico total (mtodo del calcio racemato)........................................... Acido Tartrico total (mtodo complexomtrico) ............................... Acido Lctico ..................................... Acido Ctrico ...................................... 9 9 10 14 14 15 22 29 31 34 36 37 38 40 42 43 43 44 44 45 46 47 48 49 49 50 51 52 53 53 54 54 56
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2728a28b293031323334Sulfatos (B.O.E. 26-7-1977) ............... Anhdrido Sulfuroso (mtodo Paul) ......... Anhdrido Sulfuroso (mtodo Ripper doble) Acido Srbico .................................... Cloruros (B.O.E. 30-8-1979) ............... Acido Benzoico (B.O.E. 26-7-1977) .... Bromo total ....................................... Bromo orgnico ................................. Acidos Monobromoactico y Monocloroactico de origen orgnico (mtodo cualitativo) (provisional) ......... Indice de Permanganato (B.O.E. 27-7-1977) ............................ Determinacin de presencia de vino procedente de hbridos productores directos (mtodo cualitativo) ............. Determinacin de presencia de vino procedente de hbridos productores directos (provisional) ........................ Metanol (Alcohol metlico) (mtodo del cido cromotrpico) .......................... Nitrgeno (mtodo Kjeldhal) .............. Flor (provisional) .............................. Flor (B.O.E. 30-8-1979) ................... Hidroximetilfurfural (provisional) (B.O.E. 27-7-1977) ............................ Determinacin cualitativa de Acido Srbico, Benzoico, p-Clorobenzoico, Saliclico, p-Hidroxibenzoico y su ster etlico ................................................ Investigacin de derivados monohalogenados del Acido Actico (B.O.E. 30-8-1979) ............................ Grado alcohlico en potencia ............ Grado alcohlico total ....................... Colorantes sintticos ......................... Mercurio ............................................ Plomo ................................................ Relacin P/ ..................................... Anhdrido Carbnico (mtodo aprobado pero no publicado en el B.O.E.) ......... Etanal (mtodo aprobado pero no publicado en el B.O.E.) ...................... Presin del Anhdrido Carbnico (B.O.E. 14-10-1981) .......................... Antispticos y Antifermentos (mtodo microbiolgico) .................................. 58 59 60 61 62 63 64 65 7891011121314151617181920212223242526272829Azcares totales y reductores ............ Acido Ascrbico ................................ Relacin glucosa/fructosa ................. Nitrgeno total .................................. Etanol ............................................... Indice de formol ................................ Prolina .............................................. Acido Srbico .................................... Acido Benzoico ................................. Hidroximetilfurfural ............................. Cenizas ............................................. Material mineral insoluble en Acido Clorhdrico al 10% ............................ Fsforo total ...................................... Sulfatos ............................................. Anhdrido Sulfuroso ........................... Potasio .............................................. Sodio ................................................ Arsnico ............................................ Hierro ................................................ Plomo ............................................... Estao ............................................... Cobre ............................................... Zinc ................................................... 103 104 105 105 106 107 107 108 108 109 109 110 110 111 112 112 113 113 114 115 115 116 116
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68 69 70 71 73 74
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Vinagres
METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 27-7-1977, 30-8-1979 Y 14-10-1981) 12345678910a10b11121314151617Extracto total (B.O.E. 27-7-1977) ....... Acidez total (grado actico) ................ Acidez fija ......................................... Acidez voltil ..................................... Sulfatos ............................................. Acetilmetilcarbinol (Acetona) (B.O.E. 30-8-1979) ............................ Cenizas (B.O.E. 27-7-1977) ............... Indice de oxidacin ........................... Metanol (Alcohol Metlico), mtodo del Acido Cromotrpico (B.O.E. 30-8-1979). Acido Tartrico (mtodo cualitativo) .... Acido Tartrico (mtodo cuantitativo) .. Cobre ............................................... Cloruros ............................................ Grado alcohlico ................................ Arsnico ............................................ Zinc ................................................... Prolina .............................................. Acido Actico de sntesis (B.O.E. 14-10-1981) .......................... 119 119 119 120 120 121 121 122 123 123 124 125 126 126 127 128 129 129
75
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43444546474849505152-
77 78 78 78 79 81 82 82 84 85 85
Zumos de Uva
METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 7-5-1988) 123456Grado Brix ........................................ Densidad .......................................... pH .................................................... Acidez total ...................................... Acidez voltil ..................................... Slidos solubles ................................. 89 98 99 99 100 101
Orujos, Heces y Las

METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 30-8-1979) 1Contenido alcohlico en orujos, heces y las ................................................. 133
Aguardientes compuestos: Whisky

METODOS DE ANALISIS (Anexo I de la Orden 3-4-1985, B.O.E. 13-4-1985) 1234567891011121314Obtencin del destilado ..................... Furfurol ............................................. Extracto seco .................................... Esteres .............................................. Alcoholes superiores .......................... Metanol ............................................. Grado alcohlico ............................... Aldehdos .......................................... Acidez voltil ...................................... Cenizas (materia mineral total) ............ Plomo ................................................ Zinc ................................................... Cobre ................................................ Arsnico ............................................ 135 135 136 136 137 138 138 139 140 140 141 142 142 142
8Sacarosa ........................................... 9Acidez total ....................................... 10- Materias reductoras (Azcares reductores) ........................ 11- Plomo ................................................ 12- Zinc ................................................... 13- Cobre ................................................ 14- Arsnico ............................................
160 161 161 163 163 164 164
Ans
METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 13-5-1987) 1234567891011121314Obtencin del destilado ..................... Peso especfico del aceite esencial natural (en materia prima) ................... Punto de fusin del aceite esencial natural (en materia prima) ................... Grado alcohlico ............................... Azcares totales ............................... Anetol ............................................... Metanol ............................................. Bases nitrogenadas ........................... Aceites esenciales ............................. Hidroximetilfurfural y furfural ............... Arsnico ............................................ Plomo ............................................... Zinc ................................................... Cobre ................................................ 167 167 168 169 169 170 171 172 173 174 174 176 176 177
Ron
METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 24-10-1985) 123456789101112131415Obtencin del destilado ...................... Furfurol (Furfuraldehdo) ...................... Extracto seco reducido ...................... Esteres .............................................. Alcoholes superiores .......................... Metanol (Alcohol Metlico) .................. Grado alcohlico ............................... Aldehdos .......................................... Acidez voltil ..................................... Azcares reductores .......................... Plomo ............................................... Zinc ................................................... Cobre ................................................ Arsnico ............................................ Sacarosa .......................................... 145 145 146 147 148 148 149 149 150 150 153 153 154 154 155
Sidras: Sidra y otras bebidas derivadas de la manzana

METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 28-7-1980) 1Eliminacin del Anhdrido Carbnico .......................................... 2Grado alcohlico adquirido ................ 3Azcares reductores .......................... 4Anhdrido Sulfuroso ............................ 5Metanol (Alcohol Metlico) .................. 6Acidez voltil ..................................... 7Extrato seco total .............................. 8Cenizas ............................................. 9Hierro ................................................ 10- Etanal ................................................ 11- Anhdrido Carbnico ..........................
Ginebra
METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 25-10-1985) 1234567Obtencin del destilado ..................... Furfurol (Furfuraldehdo) ..................... Extracto seco .................................... Bases nitrogenadas ........................... Alcoholes superiores .......................... Metanol (Alcohol Metlico) .................. Grado alcohlico ............................... 157 157 158 158 158 159 160
179 179 179 179 179 179 179 179 179 179 180
Relacin de reactivos y productos auxiliares que se utilizan en los mtodos analticos, Productos derivados de la Uva, Aguardientes y Sidras ....................................... 184 Aditivos y coadyuvantes tecnolgicos para uso alimentario industrial .................................
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Productos derivados de la uva: Vinos
NOTA: Se han consignado todos los mtodos oficiales de anlisis de vinos publicados en el B.O.E., pero no los prescritos por el Reglamento 2676/90 de la C.E., por no estar suficientemente extendidos en nuestro pas y, por tanto, no tener una aplicacin generalizada.
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METODOS DE ANALISIS (B.O.E. 22-7-1977, 23-7-1977, 25-7-1977, 26-7-1977, 27-7-1977, 30-8-1979 Y 14-10-1981) 1. EXAMEN ORGANOLEPTICO 1.1. Examen del color. Determinar mediante apreciacin visual las caractersticas, bien definidas, del color del vino. Observar el vino colocado en copas de cristal fino e incoloro, o bien en tazas de plata o de fondo plateado, el cual presentar diferentes formas convexas o abolladas, para apreciar el vino en diferentes espesores y sobre fondo brillante. Utilizar las siguientes calificaciones del color para vinos tintos: rojo rub, rojo violceo o morado, viraje a tono cebolla o amarillento. Segn la intensidad del color, el vino tinto puede calificarse en: vino tinto, rosado, clarete, y si tiene mucho o poco color dentro de estos tipos, se dir que tiene mucha o poca capa. En vinos blancos, utilizar las calificaciones de tono verdoso, casi incoloro, amarillo, amarillo-oro, ambarino, pajizo claro u oscuro (rancia), etc., y en todos los tipos, si el color es blanco, o si azulea, pardea o ennegrece. 1.2. Formacin de espuma. Observar el aspecto de la espuma que se forma al agitar el vino en la copa y determinar si es o no abundante, si desaparece rpidamente o, en caso de vinos tintos, si persiste unos momentos el color ms o menos intenso. El vino de mucha capa o el vino enyesado produce espuma que tarda mucho en desaparecer. 1.3. Presencia de gas carbnico. Verter vino en una copa. La formacin de burbujas indica la presencia de gas carbnico en el vino. Este gas carbnico debe eliminarse para continuar el examen de la muestra, agitando o en la forma que se indica en los mtodos analticos. 1.4. Limpieza. Apreciar en copa o en taza de plata, al mismo tiempo que el color, si el vino est turbio, claro o brillante. Observar tambin si hay depsito y si al agitar tiene aspecto cristalino o pulverulento que enturbie el vino. 1.5. Degustacin o cata. Proceder a la degustacin recin destapada la botella, consignando datos, referentes a la calidad, origen, edad y posibles alteraciones del vino. Coger una copa de cristal ovoide por su platillo con los dedos pulgar, ndice y central de la mano derecha, quedando la copa libre para examinar el vino. Llenar con vino slo 1/3 o 1/4 de la copa, para poder agitar bien y tener un espacio vaco donde se concentren los aromas. Agitar haciendo girar el vino y apreciar el aroma. Apreciar y caracterizar el olor a vinoso, que acusa vino nuevo, el afrutado, el del vino que comenz la crianza, la riqueza alcohlica, olores cidos voltiles, olores que acusen defectos de elaboracin, etc., y la presencia de enfermedades y alteraciones. En degustacin de ms precisin, como ser la necesaria para definir caractersticas de un tipo de vino y que han de servir de referencia, es necesario reunir un grupo determinado de buenos catadores, y realizar un n-mero de catas suficientes para obtener resultados satisfactorios estadsticamente segn las normas especficas existentes. 1.6. Referencia. 1.6.1. Amerine, M.A., y Feduchy, E.: Los resultados de la cata del vino y del anlisis qumico. Boletn I.N.I.A., 31, 353-375, 1956. 2. ENSAYOS PREVIOS DE CONSERVACION 2.1. Prueba del aire. 2.1.1. Quiebras tnico-frricas o fosfatofrricas.- Dejar el vino en contacto con el aire (en una copa mediada), en sitio fresco y al resguardo de la luz. Observar al cabo de 12 o ms horas. El enturbiamiento o el ennegrecimiento pone de manifiesto la posibilidad de quiebras tnico-frricas o fosfato-frricas. 2.1.2. Quiebra oxidsica.- Proceder como en 2.1.1., utilizando dos muestras de vino, una pasterizada, para destruir la oxidasa, y la otra sin pasterizar. La formacin de color pardo y precipitado pulverulento oscuro son seales caractersticas de la quiebra oxidsica. 2.1.3. Quiebra cuprosa.- Poner la muestra en botella cerrada, calentar en bao de agua a 35, y exponer a la luz. Si la riqueza en cobre es suficiente, aparece enturbiamiento caracterstico de la quiebra cuprosa. 2.2. Prueba del fro. Enfriar el vino a la temperatura que normalmente se suponga va a estar expuesto, y comprobar si se produce precipitacin de bitartrato. 2.3. Prueba de la estufa. Mantener una muestra de vino en estufa a 22-25 durante 3-4 das. Examinar al microscopio el posible desarrollo microbiano distinguiendo si se trata de levaduras o de bacterias. Si es necesario, proceder al conteo y la identificacin de los microorganismos. 2.4. Examen microscpico. Realizar el examen microscpico sobre preparacin del poso de la muestra, que puede aparecer despus de reposo en estufa o a temperatura ambiente.
Si el vino se presenta turbio en el envase original, hacer una preparacin directamente del vino o del poso obtenido por centrifugacin de ese vino. Si no se presenta depsito y el vino est poco turbio, hacer una preparacin del poso obtenido por centrifugacin. Determinar en el examen microscpico si el depsito es microbiano, distinguiendo levaduras y bacterias.
X x = X+Y+Z
Y y = X+Y+Z
X = 0,42 T625 + 0,35 T550 + 0,21 T445 Y = 0,20 T625 + 0,63 T550 + 0,17 T495 Z = 0,24 T495 + 0,94 T445 Los valores triestimulares X, Y, Z, expresan las proporciones de colores rojos, verdes y azules que dan por mezcla el color del vino. Cuando el espesor b de la cubeta sea inferior a 1 cm, referir la transmitancia a 1 cm en la siguiente forma T = T1/b y si la transmitancia viene expresada en porcentaje. T T = 1/b -1 100 ( ) T = transmitancia referida a 1 cm de espesor de cubeta. T = transmitancia obtenida para b cm de espesor de cubeta. b = espesor en cm de la cubeta utilizada. Como los espectrofotmetros estn generalmente graduados tanto en transmitancia T como en absorbancia A, se puede tambin calcular la transmitancia en 1 cm de espesor del vino a partir de la absorbancia observada en el espesor b, si la medida se ha hecho en cubeta de espesor inferior a 1 cm, teniendo en cuenta que: 1 A = log T Con este fin, se calculan las absorbancias A en un cm de espesor multiplicando respectivamente por 2,5 y 10 las absorbancias ledas en un espesor b de 0,5; 0,2 y 0,1 cm. Se obtienen despus los valores correspondientes de transmitancia bien por aplicacin de la relacin anterior, bien refirindose a la tabla calculada a partir de esa misma relacin. 3(a).4.2. Luminosidad relativa.- Es el valor de Y, expresado en porcentaje (siendo el negro y = 0 y el incoloro y = 100). 3(a).4.3. Cromaticidad.- Para expresar la cromaticidad (longitud de onda dominante y pureza) se recurre al diagrama de cromaticidad, que representa el locus de todos los colores del espectro, considerando que a 400 nm, corresponde el azul, a 520 nm corresponde el verde y a 700 nm el rojo. El punto 0 corresponde a la fuente luminosa utilizada, que, en este caso, es el iluminante estndar Q, que representa la luz
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3(a). COLOR 3.(a).1. Principio. El color de los vinos se determina por transparencia como se percibe por la vista, pero por un procedimiento independiente de la apreciacin personal, valindose de mtodos espectrofomtricos triestimulares de ordenadas seleccionadas de Hardy, fundado en el sistema de la Commisin Internationale de lEchairage (C.I.E.), con relacin a la luz producida por un cielo nublado (fuente C). 3(a).2.1. Espectrofotmetro para medida en el espectro visible. Los valores de transmitancia correspondientes a una misma muestra, no deben acusar diferencias superiores a 0,005 y cuando la escala del aparato est graduada en valores de transmitancia multiplicados por 100, no debe haber diferencias superiores a 0,5. Las cubetas de cuarzo o de vidrio de ndice de refraccin mximo 1,5, de paredes paralelas y espesor interno b que se expresa en centmetros y con una aproximacin de 0,002.b. Conviene disponer de cuatro pares de cubetas en las que los espesores b, sean de 0,1 cm; 0,2 cm; 0,5 cm y 1 cm. Segn la intensidad del color se escogern un par de cubetas de tal forma que la absorbancia A quede comprendida entre 0,3-0,7 (transmitancia 0,5-0,2). 3(a).3. Procedimiento. Si el vino no est limpio centrifugar previamente. Eliminar el gas carbnico, si es necesario, por agitacin con vaco parcial. Medir directamente con el espectrofotmetro las transmitancias del vino a las cuatro longitudes de onda = 625, 550, 495 y 445 mm, empleando la cubeta de espesor conveniente, segn intensidad del color del vino. 3(a).4. Clculo. Utilizar 131074 Agua PA-ACS como lquido de referencia. 3(a).4.1. Calcular las coordenadas (x, y) del punto representativo del color del vino en el diagrama tricromtico de la C.I.E.
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de un da medianamente claro y cuyas coordenadas son: xo = 0,3101 e y o = 0,3163 esta longitud de onda prolongando la recta en la direccin de C hacia 0 para que ella corte el Spectrum Locus como hemos visto antes. Este color complementario en el caso de vinos de tono rojo prpura se sita en el verde. Se anota el valor de esta longitud de onda seguida de c (complementario), por ejemplo 495 c. 3(a).4.5. Pureza. La pureza se calcula determinando la distancia relativa del punto C que representa el color del vino examinado y del punto S que corresponde al Spectrum Locus al punto 0 que representa al iluminante. Se expresa la pureza en porcentaje por la relacin: Distancia del punto C al punto 0 100 x Distancia del punto 0 al punto S
3(a).4.4. Longitud de onda dominante. Conocidas las coordenadas x e y del color, se une el punto de esas coordenadas C al punto 0. En el punto en el que esta recta corta al Spectrum Locus se encuentra la longitud de onda dominante que corresponde al matiz de este color. As en el caso de vinos de tono teja, la longitud de onda dominante se sita entre 585 y 598 nm aproximadamente. Para los vinos de un color tinto franco, se sita entre 599 y 650 nm, mientras que para los vinos de tono rojo prpura est caracterizada por la longitud de onda dominante del color complementario. Se obtiene el valor de
11
Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.
3(a).5. Observaciones. 3(a).5.1. El color de un vino queda completamente definido por la luminosidad relativa Y en porcentaje y las coordenadas tricromticas x e y. Se pueden preveer las caractersticas cromticas de una mezcla de varios vinos cuando se
conocen las caractersticas cromticas de las mismas. Los valores triestimulares X, Y, Z de la mezcla se obtienen por la suma de esos valores multiplicando por su proporcin para cada constituyente.
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS % trans 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 ,0 ,1 3,00 1,96 1,68 1,51 1,39 1,29 1,21 1,15 1,09 1,04 1,00 0,95 0,92 0,88 0,85 0,82 0,79 0,77 0,74 0,72 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,58 0,57 0,55 0,54 0,52 0,51 0,49 0,48 0,47 0,45 0,44 0,43 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 ,2 2,70 1,92 1,66 1,50 1,38 1,28 1,21 1,14 1,09 1,04 0,99 0,95 0,91 0,88 0,85 0,82 0,79 0,76 0,74 0,72 0,69 0,67 0,65 0,63 0,62 0,60 0,58 0,57 0,55 0,53 0,52 0,51 0,49 0,48 0,47 0,45 0,44 0,43 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,35 ,3 2,52 1,89 1,64 1,48 1,37 1,28 1,20 1,14 1,08 1,03 0,99 0,95 0,91 0,88 0,84 0,82 0,79 0,76 0,74 0,71 0,69 0,67 0,65 0,63 0,61 0,60 0,58 0,57 0,55 0,53 0,52 0,50 0,49 0,48 0,46 0,45 0,44 0,43 0,42 0,41 0,40 0,38 0,37 0,36 0,35 ,4 2,40 1,85 1,62 1,47 1,36 1,27 1,19 1,13 1,08 1,03 0,98 0,94 0,91 0,87 0,84 0,81 0,78 0,76 0,73 0,71 0,69 0,67 0,65 0,63 0,61 0,59 0,58 0,56 0,55 0,53 0,52 0,50 0,49 0,48 0,46 0,45 0,44 0,43 0,42 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35 ,5 2,30 1,82 1,60 1,46 1,35 1,26 1,19 1,13 1,07 1,02 0,98 0,94 0,90 0,87 0,84 0,81 0,78 0,76 0,73 0,71 0,69 0,67 0,65 0,63 0,61 0,59 0,58 0,56 0,54 0,53 0,52 0,50 0,49 0,47 0,46 0,45 0,44 0,43 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35 ,6 2,22 1,80 1,59 1,44 1,34 1,25 1,18 1,12 1,07 1,02 0,97 0,93 0,90 0,87 0,84 0,81 0,78 0,75 0,73 0,71 0,69 0,67 0,65 0,63 0,61 0,59 0,57 0,56 0,54 0,53 0,51 0,50 0,49 0,47 0,46 0,45 0,44 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35 ,7 2,15 1,77 1,57 1,43 1,33 1,24 1,17 1,11 1,06 1,01 0,97 0,93 0,90 0,86 0,83 0,80 0,78 0,75 0,73 0,71 0,68 0,66 0,64 0,63 0,61 0,59 0,57 0,56 0,54 0,53 0,51 0,50 0,49 0,47 0,46 0,45 0,44 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35 ,8 2,10 1,74 1,55 1,42 1,32 1,24 1,17 1,11 1,06 1,01 0,97 0,93 0,89 0,86 0,83 0,80 0,77 0,75 0,73 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,59 0,57 0,56 0,54 0,53 0,51 0,50 0,48 0,47 0,46 0,45 0,43 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35 ,9 2,05 1,72 1,54 1,41 1,31 1,23 1,16 1,10 1,05 1.00 0,96 0,92 0,89 0,86 0,83 0,80 0,77 0,75 0,72 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,59 0,57 0,56 0,54 0,52 0,51 0,50 0,48 0,47 0,46 0,44 0,43 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36 0,35
12
2,00 1,70 1,52 1,40 1,30 1,22 1,15 1,10 1,05 1,00 0,96 0,92 0,89 0,85 0,82 0,80 0,77 0,74 0,72 0,70 0,68 0,66 0,64 0,62 0,60 0,58 0,57 0,55 0,54 0,52 0,51 0,49 0,48 0,47 0,46 0,44 0,43 0,42 0,41 0,40 0,39 0,38 0,37 0,36
M
TABLA DE TRANSFORMACION DE ABSORBANCIAS EN TRANSMITANCIAS % trans 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 ,0 0,35 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,28 0,27 0,26 0,25 0,24 0,24 0,23 0,22 0,21 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,15 0,15 0,14 0,14 0,13 0,12 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,1 0,35 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,28 0,27 0,26 0,25 0,24 0,24 0,23 0,22 0,21 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,15 0,15 0,14 0,14 0,13 0,12 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,2 0,34 0,33 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,27 0,27 0,26 0,25 0,24 0,24 0,23 0,22 0,21 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,15 0,15 0,14 0,14 0,13 0,12 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,3 0,34 0,33 0,32 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,27 0,27 0,26 0,25 0,24 0,23 0,23 0,22 0,21 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,15 0,15 0,14 0,13 0,13 0,12 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,4 0,34 0,33 0,32 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,27 0,26 0,26 0,25 0,24 0,23 0,23 0,22 0,21 0,20 0,20 0,19 0,18 0,18 0,17 0,16 0,16 0,15 0,15 0,14 0,13 0,13 0,12 0,12 0,11 0,11 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,5 0,34 0,33 0,32 0,31 0,31 0,30 0,29 0,28 0,27 0,26 0,25 0,25 0,24 0,23 0,23 0,22 0,21 0,20 0,20 0,19 0,18 0,18 0,17 0,16 0,16 0,15 0,15 0,14 0,13 0,13 0,12 0,12 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 ,6 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,29 0,28 0,27 0,26 0,25 0,25 0,24 0,23 0,22 0,22 0,21 0,20 0,20 0,19 0,18 0,18 0,17 0,16 0,16 0,15 0,14 0,14 0,13 0,13 0,12 0,12 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,00 0,00 ,7 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,29 0,28 0,27 0,26 0,25 0,25 0,24 0,23 0,22 0,22 0,21 0,20 0,20 0,19 0,18 0,18 0,17 0,16 0,16 0,15 0,14 0,14 0,13 0,13 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,00 0,00 ,8 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,29 0,28 0,27 0,26 0,25 0,25 0,24 0,23 0,22 0,22 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,16 0,15 0,14 0,14 0,13 0,13 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0,04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,01 0,00 0,00 ,9 0,34 0,33 0,32 0,31 0,30 0,29 0,28 0,28 0,27 0,26 0,25 0,24 0,24 0,23 0,22 0,22 0,21 0,20 0,19 0,19 0,18 0,17 0,17 0,16 0,16 0,15 0,14 0,14 0,13 0,13 0,12 0,11 0,11 0,10 0,10 0,09 0,09 0,08 0,08 0,07 0,07 0,06 0,06 0,05 0,05 0,04 0.04 0,03 0,03 0,02 0,02 0,01 0,01 0,00 0,00 0,00
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3(b). COLOR DE LOS VINOS (Aplicable a vinos tintos y rosados) 3(b).1. Principio. La intensidad de color se mide por la suma de las absorbancias del vino para un espesor de 1 cm correspondientes a las longitudes de onda de absorbancia mnima (420 nm) del vino tinto. La tonalidad se expresa por el ngulo que forma con el eje de longitudes de onda la cuerda que une los puntos de la curva espectrofotomtrica representativos de las absorbancias correspondientes a las longitudes de onda de 420 y 520 nm. 3(b).2. Material y aparatos. Como en 3(a).2. 3(b).3. Procedimiento. Como en 3(a).3, excepto que las longitudes de onda utilizadas sern de 420 nm y 520 nm. 3(b).4. Clculo. Calcular la intensidad colorante y la tonalidad. 3(b).4.1. Intensidad colorante: 1 I = (A420 + A520) b A420 = absorbancia a 420 nm. A520 = absorbancia a 520 nm. b = espesor en cm de la cubeta. 3(b).4.2. Tonalidad.- La tonalidad se mide por el ngulo cuya tangente es igual a la diferencia del valor numrico de las dos absorbancias A 520-A420. Conocido este valor, se puede determinar el valor del ngulo por tablas expresadas en grados sexagesimales. 3(b).5. Observaciones. Con este mtodo no se determina el color, sino la intensidad y la tonalidad del color, que son caractersticas cromticas convencionales. Por su rapidez y sencillez, es muy prctico para comprobar la evolucin de la materia colorante durante su crianza o aejamiento. 3(b).6. Referencias. 3(b).6.1. Determinacin triestimular del color de los vinos, mtodo simplificado por C.Stella. Comunicacin al O.I.V. nm. 282 (2 febrero 1968). 3(b).6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. AO, 1-14. 1969.
4(a). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD RELATIVA (Mtodo picnomtrico) 4(a).1. Principio. La masa volmica es el cociente de la masa de un cierto volumen de vino o de mosto por este volumen, Se expresa en g por ml y su smbolo es r20. La densidad relativa es el cociente de la masa volmica del vino por la masa volmica del agua. Su smbolo es d simplemente d, cuando no haya posibilidad de confusin. La masa volmica y la densidad relativa de un vino se determinan a 20C. El mtodo picnomtrico consiste en la determinacin ponderal del contenido en alcohol de un destilado por medio de un picnmetro. 4(a).2. Material y aparatos. 4(a).2.1. Picnmetro de vidrio de 50 ml de capacidad, de cuello con dimetro interior de 3,5 mm. Embudo y sifn para picnmetros. 4(a).2.2. Termmetro contrastado dividido en 1/5-1/10 de grado Celsius graduado de 10 a 30 C. 4(a).2.3. Termostato regulado a 20C 0,2 . 4(a).2.4. Balanza con aproximacin de 0,1 mg.
20
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4(a).3. Procedimiento. Lavar bien el picnmetro y enjuagarlo despus con 131085 Etanol 96% v/v PA y luego con Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PAACS-ISO, escurrir bien y secar cuidadosamente con pao de hilo o papel filtro el exterior, y con corriente de aire seco el interior, tapar, dejar en reposo en la caja de la balanza durante 30 minutos aproximadamente, y pesar. Llenar despus con agua a 20 recin destilada, con cuidado de evitar burbujas de aire en el interior del picnmetro. Sumergir en el agua a la temperatura comprobada de 20. Mantener el picnmetro en el termostato durante 30 minutos, y enrasar el nivel del agua con la marca del cuello. Tapar el picnmetro, secar exteriormente con las precauciones expuestas, dejar nuevamente 30 minutos en la caja de la balanza y despus pesar. Vaciar el picnmetro, enjuagar nuevamente, primero con agua y despus con Etanol 96% v/v PA y Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, y secar como anteriormente, llenar con el vino a temperatura de 20 C, aproximadamente, cuidando que no quede ninguna burbuja de aire (en caso de que el vino tenga gas carbnico, se eliminar previamente como luego se indica). Dejar el picnmetro con el vino en el termostato a 20C 0,2 durante 30 minutos, llenar hasta volumen con el vino y pesar.
M
4(a).4. Clculo. 4(a).4.1. Clculo de la densidad relativa a 20C. d20 20 P - P = P - P un volumen de unos 250 ml del vino, en matraz de 1.000 ml. Si el vino est turbio, se filtrar por papel de filtracin rpida, de pliegues y procurando airear lo menos posible, tapando tambin el embudo con vidrio de reloj. Si el enturbiamiento es por suspensin de levadura, la filtracin corriente aludida no lo aclarar, siendo conveniente en este caso, dejar decantar el vino en probeta tapada, durante dos o tres das en sitio fresco. 4(a).6. Referencia. 4(a).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V., A1, 11-26. 1969. 4(b). MASA VOLUMICA Y DENSIDAD RELATIVA (Mtodo areomtrico) 4(b).1. Principio. Determinacin de la masa volmica a partir de la lectura del aremetro que flota introducido en el vino. 4(b).2. Material y aparatos. 4(b).2.1. Aremetro. Los aremetros empleados deben responder a las siguientes normas (I.S.O.): Parte cilndrica sumergible y tallo de seccin circular de 3 mm de dimetro como mnimo. Para
P = peso en g del picnmetro vaco. P = peso en g del picnmetro ms agua a 20C. P = peso en g del picnmetro ms vino a 20C. 4(a).4.2. Clculo de la masa volmica r20. r20 = 0,998203 d20 20 o bien r20 = d20 20 c - 1.000
El valor de c se encuentra en las tablas 4(a).I y 4(a).II. La aproximacin de los resultados ser de 0,0003. Para mayor precisin, se tendr en cuenta el empuje del aire como en 5(a).5. 4(a).5. Observaciones. Si el vino contiene cantidad sensible de gas carbnico, se eliminar todo lo posible agitando
TABLA 4(a). I Clculo de la masa volmica ( r20) a partir de la densidad relativa 20/20 y recprocamente Densidades Correcciones c Densidades Correcciones c Densidades Correcciones c 0,960 1,73 1,120 2,02 0,980 1,76 1,140 2,05 1,280 2,30 1,000 1,80 1,160 2,09 1,300 2,34 1,020 1,84 1,180 2,12 1,320 2,38 1,040 1,87 1,200 2,16 1,340 2,41 1,060 1,91 1,220 2,20 1,360 2,45 1,080 1,94 1,240 2,23 1,380 2,48 1,100 1,98 1,260 2,27 1,400 2,52
TABLA 4(a). II Clculo de la masa volmica ( r15) a partir de la densidad relativa 15/15 y recprocamente Densidades Correcciones c Densidades Correcciones c Densidades Correcciones c 0,960 0,86 1,120 1,01 0,980 0,88 1,140 1,03 1,280 1,15 1,000 0,90 1,160 1,04 1,300 1,17 1,020 0,92 1,180 1,06 1,320 1,19 1,040 0,94 1,200 1,08 1,340 1,21 1,060 0,95 1,220 1,10 1,360 1,22 1,080 0,97 1,240 1,12 1,380 1,24 1,100 0,99 1,260 1,13 1,400 1,25
15
vinos secos, la graduacin ser de 0,983 a 1,003 en milsimas y 0,2 milsimas. Las divisiones de milsimas deben ser de 5 mm como mnimo. Para vinos desalcoholizados y vinos dulces, y eventualmente para mostos, se recomienda un juego de 5 aremetros graduados de 1,000-1,030; 1,0301,060; 1,060-1,090; 1,090-1,120; 1,120-1,150. Estos aparatos estarn graduados en masas volmicas a 20 C, en milsimas y 0,5 milsimas por lo menos. Cada divisin de una milsima ser de 3mm como mnimo. En los aparatos se indicar que las lecturas deben hacerse por la parte superior del menisco. 4(b).2.2. Termmetro contrastado, graduado por lo menos en 1/2 grados. 4(b).2.3. Probeta cilndrica de 36 mm de dimetro interior y 320 mm de altura. 4(b).2.4. Plataforma con tornillos de nivelacin, para mantener vertical la probeta sobre ella colocada. 4(b).3. Procedimiento. Colocar en la probeta descrita 250 ml del vino e introducir el aremetro y el termmetro. El aremetro y especialmente el tallo graduado debern estar limpios y desengrasados. Agitar para uniformar la temperatura. Un minuto despus, hacer la lectura del termmetro. Retirar el termmetro y hacer la lectura de la masa aparente sobre el tallo del aremetro, despus de un minuto de reposo. 4(b).4. Clculo. Calcular la masa volmica referida a 20C. c (_ si t es inferior a 20C) r20 = rt 1.000 (+ si t es superior a 20C) r20= masa volmica referida a 20.
r = lectura del tallo graduado del aremetro. c = valor de la correccin correspondiente a la temperatura del vino en el momento de la lectura. Este valor se encuentra en las tablas 4(b). I y 4(b). II. t = temperatura del vino en el momento de la lectura. Los resultados se obtendrn con una precisin de 0,0003.
t
4(b).5. Observaciones. 20 Si se utilizan aremetros que den d15 4 o d 20, hay que corregir la lectura en las tablas correspondientes, y despus expresar los resultados en d 20 20 o r 20 , empleando las frmulas y tablas siguientes: C 15 d20 20 = d 4 + ;valores de C en la tabla 4(b). III. 1.000 C 15 d20 20 = d15 + ;valores de C en la tabla 4(b). IV. 1.000 C 15 r20 20 = d 4 + ;valores de C en la tabla 4(b). V. 1.000 C 15 r20 20 = d15 + ;valores de C en la tabla 4(b). VI. 1.000 4(b).6. Referencias. 4(b).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A1, 11-26. 4(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: Tables de correspondance entre les diverses tables Alcoomtriques. Socit Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141, 1966.
TABLA 4(b). I Correcciones para referir la masa volmica de los vinos secos a 20
Temperaturas 10 11 12 13 14 15 16 17 GRADOS ALCOHOLICOS 0 1,45 1,35 1,24 1,12 0,99 0,86 0,71 0,55 5 1,51 1,40 1,28 1,16 1,03 0,89 0,73 0,57 6 1,55 1,43 1,31 1,18 1,05 0,90 0,74 0,57 7 1,58 1,47 1,34 1,21 1,07 0,92 0,76 0,59 8 1,64 1,52 1,39 1,25 1,11 0,95 0,78 0,60 9 1,70 1,58 1,44 1,30 1,14 0,98 0,81 0,62 10 1,78 1,65 1,50 1,35 1,19 1,02 0,84 0,65 11 1,88 1,73 1,58 1,42 1,24 1,07 0,87 0,67 12 1,98 1,83 1,66 1,49 1,31 1,12 0,91 0,70 13 2,09 1,93 1,75 1,56 1,37 1,17 0,93 0,74 14 2,21 2,03 1,84 1,64 1,44 1,23 0,99 0,77 15 2,34 2,15 1,94 1,73 1,52 1,29 1,05 0,81
16
M
TABLA 4(b). I Correcciones para referir la masa volmica de los vinos secos a 20
Temperaturas 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0,21 0,43 0,67 0,91 1.16 1,42 1,69 1,97 2,26 2,56 0,22 0,45 0,69 0,93 1,19 1,46 1,74 2,03 2,33 2,64 0,22 0,45 0,70 0,95 1,21 1,49 1,77 2,06 2,37 2,67 0,23 0,46 0,71 0,97 1,23 1,51 1,80 2,09 2,40 2,72 0,23 0,47 0,72 0,99 1,26 1,54 1,83 2,14 2,45 2,77 0,24 0,49 0,74 1,01 1,29 1,58 1,88 2,19 2,50 2,83 0,25 0,50 0,77 1,04 1,33 1,62 1,93 2,24 2,57 2,90 0,25 0,52 0,79 1,07 1,37 1,67 1,98 2,31 2,64 2,98 0,26 0,54 0,82 1,11 1,42 1,73 2,05 2,38 2,73 3,08 0,27 0,56 0,85 1,15 1,47 1,79 2,12 2,46 2,82 3,18 0,29 0,58 0,88 1,20 1,52 1,85 2,20 2,55 2,91 3,28 0,29 0,60 0,91 1,24 1,57 1,92 2,27 2,63 2,99 3,38 GRADOS ALCOHOLICOS 0 0,38 0,19 5 0,39 0,20 6 0,39 0,20 7 0,40 0,21 8 0,41 0,21 9 0,43 0,22 10 0,44 0,23 11 0,46 0,24 12 0,48 0,25 13 0,50 0,26 14 0,52 0,27 15 0,55 0,28
Temperaturas 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
GRADOS ALCOHOLICOS 16 2,47 2,26 2,04 1,82 1,59 1,35 1,10 0,84 0,57 0,29 17 2,60 2,38 2,15 1,91 1,67 1,42 1,15 0,88 0,60 0,30 18 2,75 2,51 2,26 2,01 1,75 1,49 1,21 0,92 0,62 0,32 19 2,90 2,65 2,38 2,11 1,84 1,56 1,27 0,96 0,65 0,33 20 3,06 2,78 2,51 2,22 1,93 1,63 1,33 1,01 0,68 0,35 21 3,22 2,93 2,63 2,33 2,03 1,71 1,39 1,05 0,71 0,36 22 3,39 3,08 2,77 2,45 2,13 1,80 1,45 1,11 0,74 0,38 23 3,57 3,24 2,91 2,57 2,23 1,88 1,52 1,15 0,78 0,39 24 3,75 3,40 3,05 2,69 2,33 1,96 1,59 1,20 0,81 0,41 25 3,93 3,57 3,19 2,81 2,44 2,05 1,66 1,26 0,85 0,43 26 4,12 3,73 3,34 2,95 2,55 2,14 1,73 1,31 0,88 0,44 27 4,31 3,90 3,49 3,07 2,66 2,23 1,80 1,36 0,91 0,46
0,31 0,63 0,95 1,29 1,63 1,99 2,35 2,73 3,11 3,40
0,32 0,65 0,99 1,34 1,70 2,07 2,44 2,83 3,22 3,62
0,34 0,68 1,03 1,39 1,76 2,14 2,53 2,93 3,34 3,75
0,35 0,71 1,07 1,45 1,83 2,22 2,63 3,03 3,45 3,88
0,36 0,73 1,12 1,50 1,90 2,31 2,72 3,14 3,58 4,02
0,38 0,77 1,16 1,56 1,97 2,40 2,82 3,26 3,70 4,16
0,39 0,80 1,21 1,62 2,05 2,49 2,93 3,38 3,84 4,30
0,41 0,83 1,25 1,69 2,13 2,58 3,04 3,50 3,97 4,46
0,43 0,86 1,30 1,76 2,21 2,67 3,14 3,62 4,11 4,61
0,44 0,89 1,35 1,82 2,29 2,77 3,25 3,75 4,25 4,76
0,46 0,93 1,40 1,88 2,37 2,86 3,37 3,85 4,39 4,92
0,48 0,96 1,45 1,95 2,45 2,96 3,48 4,00 4,54 5,07
17
TABLA 4(b). II Correcciones para referir la masa volmica de los vinos dulces a 20
Temperaturas 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0,29 0,57 0,89 1,22 1,61 1,87 2,21 2,56 2,93 3,31 0,32 0,64 0,98 1,34 1,68 2,05 2,42 2,80 3,19 3,57 0,35 0,70 1,08 1,44 1,83 2,22 2,60 3,02 3,43 3,86 0,39 0,76 1,17 1,56 1,98 2,40 2,80 3,25 3,66 4,15 0,42 0,82 1,26 1,68 2,12 2,56 3,00 3,47 3,91 4,41 0,45 0,88 1,34 1,79 2,26 2,71 3,18 3,67 4,14 4,66 0,47 0,93 1,43 1,90 2,40 2,87 3,35 3,89 4,37 4,92 MASAS VOLUMICAS VINOS DE 13 1,000 2,24 2,06 1,87 1,69 1,49 1,25 1,03 0,80 0,54 0,29 1,020 2,58 2,37 2,14 1,93 1,70 1,42 1,17 0,90 0,61 0,33 1,040 2,93 2,69 2,42 2,14 1,90 1,59 1,30 1,00 0,68 0,36 1,060 3,27 2,97 2,67 2,37 2,09 1,75 1,43 1,09 0,75 0,39 1,080 3,59 3,26 2,94 2,59 2,27 1,90 1,55 1,17 0,81 0,42 1,100 3,89 3,53 3,17 2,80 2,44 2,05 1,67 1,27 0,86 0,45 1,120 4,18 3,78 3,40 3,00 2,61 2,19 1,78 1,36 0,92 0,48
Temperaturas 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0,32 0,63 0,97 1,32 1,66 2,02 2,39 2,75 3,16 3,55 0,35 0,69 1,06 1,44 1,81 2,20 2,59 2,89 3,41 3,81 0,38 0,75 1,16 1.54 1,96 2,37 2,78 3,22 3,65 4,10 0,42 0,81 1,25 1,66 2,11 2,54 2,98 3,44 3,89 4,38 0,45 0,87 1,34 1,78 2,25 2,70 3,17 3,66 4,13 4,66 0,48 0,93 1,42 1,89 2,39 2,85 3,35 3,86 4,36 4,90 0,50 0,98 1,51 2,00 2,52 3,01 3,52 4,07 4,59 5,16 MASAS VOLUMICAS VINOS DE 15 1,000 2,51 2,31 2,09 1,88 1,67 1,39 1,06 0,87 0,60 0,32 1,020 2,85 2,61 2,36 2,12 1,86 1,56 1,27 0,98 0,66 0,36 1,040 3,20 2,93 2,64 2,34 2,06 1,72 1,40 1,08 0,73 0,39 1,060 3,54 3,21 2,90 2,56 2,25 1,88 1,53 1,17 0,80 0,42 1,080 3,86 3,51 3,16 2,78 2,45 2,03 1,65 1,26 0,86 0,45 1,100 4,02 3,64 3,27 2,88 2,51 2,11 1,77 1,35 0,91 0,48 1,120 4,46 4,02 3,61 3,19 2,77 2,32 1,88 1,44 0,97 0,51
18
M
19
TABLA 4(b). III Clculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/4 Vinos secos (d15 4 comprendida entre 0,97 y 1,03) Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c 5,1 0,9 12,1 0,6 19,1 0,2 6,1 0,8 13,1 0,6 20,1 0,1 7,1 0,8 14,1 0,5 21,1 0,0 8,1 0,8 15,1 0,5 22,1 0,0 9,1 0,7 16,1 0,4 23,1 -0,1 10,1 0,7 17,1 0,3 24,1 -0,2 11,1 0,7 18,1 0,3 25,1 -0,3
Vinos dulces Densidades 1,000 1,020 0,5 0,4 0,2 0,1 -0,1 -0,2 1,040 0,3 0,2 0,0 -0,1 -0,3 -0,4 1,060 0,1 0,0 -0,2 -0,3 -0,5 -0,6 1,080 0,0 -0,1 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7 1,100 -0,2 -0,3 -0,5 -0,6 -0,8 -0,9 1,120 -0,3 -0,4 -0,6 -0,7 -0,9 -1,0
20
Grados Alcohlicos
10 13 15 17 19 21
0,7 0,6 0,5 0,4 0,2 0,0
M
TABLA 4(b). IV Clculo de la densidad 20/20 a partir de la densidad 15/15 Vinos secos Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c 5,1 0,1 12,1 0,3 19,1 0,9 6,1 0,1 13,1 0,4 20,1 0,9 7,1 0,1 14,1 0,4 21,1 1,0 8,1 0,2 15,1 0,5 22,1 1,0 9,1 0,2 16,1 0,6 23,1 1,1 10,1 0,2 17,1 0,6 24,1 1,2 11,1 0,3 18,1 0,7 25,1 1,2
Vinos dulces Densidades 1,000 1,020 0,4 0,5 0,7 0,8 1,0 1,1 1,040 0,5 0,6 0,8 0,9 1,1 1,2 1,060 0,7 0,8 1,0 1,1 1,3 1,4 1,080 0,8 0,9 1,1 1,2 1,4 1,5 1,100 1,0 1,1 1,3 1,4 1,6 1,7 1,120 1,1 1,2 1,4 1,5 1,7 1,8
Grados Alcohlicos
10 13 15 17 19 21
0,2 0,3 0,5 0,6 0,8 1,0
TABLA 4(b). V Clculo de la masa volmica a 20 C ( r20 ) a partir de la densidad 15/4 Vinos secos Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c 5,1 0,9 12,1 1,2 19,1 1,6 6,1 1,0 13,1 1,2 20,1 1,7 7,1 1,0 14,1 1,3 21,1 1,8 8,1 1,0 15,1 1,3 22,1 1,8 9,1 1,1 16,1 1,4 23,1 1,9 10,1 1,1 17,1 1,5 24,1 2,0 11,1 1,1 18,1 1,5 25,1 2,1
Grados Alcohlicos
10 13 15 17 19 21
1,1 1,2 1,3 1,4 1,6 1,8
21
TABLA 4(b). VI Clculo de la masa volmica a 20 C ( r20 ) a partir de la densidad 15/15 Vinos secos (d 15 comprendida entre 0,97 y 1,03) Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c Grados alcohlicos Correcciones c 5,11 1,81 12,11 2,11 19,11 2,65 6,1 1,9 13,1 2,1 20,1 2,6 7,1 1,9 14,1 2,2 21,1 2,7 8,1 1,9 15,1 2,2 22,1 2,7 9,1 2,0 16,1 2,3 23,1 2,8 10,1 2,0 17,1 2,4 24,1 2,9 11,1 2,0 18,1 2,4 25,1 3,0
15
Grados Alcohlicos
10 13 15 17 19 21
2,0 2,1 2,2 2,3 2,5 2,7
5(a). TITULO ALCOHOMETRICO (1) (Mtodo picnomtrico) 5(a).1. Principio. El ttulo alcohomtrico es igual al nmero de litros de etanol contenidos en 100 l de vino, medidos ambos volmenes a 20 C, y se expresa en grados alcohlicos volumtricos, con una precisin de 0,1C. Se determina por destilacin simple de lquido alcalinizado y medida de la densidad del destilado por picnometra. 5(a).2. Material y aparatos. 5(a).2.1. Aparato de destilacin.- Consta de las siguientes partes: 5(a).2.1.1. Matraz de destilacin de 1.000 ml con rodaje esmerilado. 5(a).2.1.2. Columna rectificadora de 20 cm de largo. 5(a).2.1.3. Disco metlico o de amianto con un orificio de 8 cm de dimetro. 5(a).2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longitud, con circulacin rpida de agua y dispuesto verticalmente.
5(a).2.2. Picnmetro.- Como en 4(a).2.1, de vidrio pyrex. 5(a).2.3. Tara del picnmetro.- Recipiente de vidrio del mismo volumen exterior que el picnmetro. Se llena casi por completo con una solucin de sodio cloruro, de densidad tal que la masa de esta tara sea igual a la masa del picnmetro lleno de un lquido de densidad 1,01. Este recipiente cierra a la llama. Su capacidad exterior debe ser igual a la del picnmetro lleno, con una aproximacin de 1 ml de diferencia. 5(a).2.4. Termostato y accesorios, descritos en 4(a).2. 5(a).2.5. Balanza analtica de 0,1 mg y 100 g de carga. 5(a).3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP 131325 Fenolftalena PA-ACS 211835 Piedra Pmez grnulos QP 5(a).3.1. Lechada de cal. Solucin de 120 g de Calcio Oxido natural escoriforme QP en 1.000 ml de Agua PA-ACS.
22
(1).- Denominacin adoptada para el grado alcohlico por la Oficina Internacional del Vino (O.I.V.).
M
5(a).4. Procedimiento. Para vinos jvenes o espumosos, eliminar previamente el gas carbnico. Agitar 250 ml de vino en un matraz de 500 ml previamente siliconado el interior del matraz por tres gotas de solucin al 1%, de silicona soluble en agua, y despus de bien seco, aadir el vino. 5(a).4.1. Destilacin.- Medir 250 ml de vino en un matraz aforado con cuello de 12 mm de dimetro interior como mximo, y anotar la temperatura. Introducir el vino en un matraz de destilacin que contenga una docena de fragmentos de materia porosa Piedra Pmez grnulos QP. Lavar el matraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Aadir 10 ml de la Lechada de cal. La materia colorante del vino debe virar a la alcalinidad. En el caso de vinos muy cidos, puede comprobarse por toques externos el viraje de la Fenolftalena PA-ACS. Recoger el destilado en el mismo matraz de 250 ml, conteniendo unos 10 ml de Agua PA-ACS, en la que debe sumergirse el pico del tubo afilado, prolongacin del refrigerante. Destilar por lo menos 200 ml. Despus agitar y llenar hasta volumen con Agua PA-ACS, a la misma temperatura que se midi el vino inicialmente. 5(a).4.2. Tarado del picnmetro vaco.- Poner en un platillo de la balanza la tara y en el otro el picnmetro vaco, limpio y seco, y a su lado, las masas necesarias p, para entre ambos equlibrar la balanza. La masa equivalente a la de la tara ser: Masa del picnmetro + m + p m = 0,0012 V. m = masa en g del aire contenido en el picnmetro vaco. V = volumen en ml del picnmetro. 0,0012 g/ml = masa volmica del aire. El volumen del picnmetro se considera, con suficiente aproximacin, que es numricamente igual a la masa de Agua PA-ACS que llene el picnmetro. Para calcular esta masa, colocar el picnmetro lleno de Agua PA-ACS en el platillo de la balanza, si p es la masa que hay que colocar a su lado para equilibrar la de la tara, la masa m ser: m = (p - p) . 0,0012 Operar siempre a 20 exactamente para realizar el enrase, utilizando el termostato. Si se opera a t, para conocer el volumen del picnmetro a 20, hay que multiplicar (p - p) por un factor F, que da la tabla 5 (a). I para picnmetro del vidrio pyrex. Repetir estas operaciones de tara tres veces seguidas. Al cabo de un ao, volver a comprobar la tara del picnmetro. Con balanza monoplato, proceder anlogamente. Primero poner la tara, hacer la lectura correspondiente en la escala de pesos y despus poner el picnmetro vaco. Anotar los pesos p que hay que aadir hasta marcar la pesada que alcanz la tara. Tara = picnmetro + aire + p 5(a).4.3. Determinacin picnomtrica.- Llenar el picnmetro lavado y seco con las precauciones expuestas en 4(a). 3 con el destilado alcohlico a la temperatura ambiente, llevar despus al termostato, agitar el lquido haciendo girar el picnmetro por dos o tres veces, hasta que la temperatura que marca el termmetro del picnmetro sea constante. Enrasar con el borde superior del tubo lateral, secar ste, colocarlo sobre el tapn receptor (para pequeos rebordes) y anotar la temperatura t utilizando una lupa. Secar con el mismo cuidado el exterior del picnmetro y llevarlo al platillo de la balanza. Equilibrar la tara del picnmetro colocada en el otro platillo. 5(a).5. Clculo. Calcular el ttulo alcohomtrico expresado en grados alcohlicos volumtricos. 5(a).5.1. Clculo de la masa volmica aparente. p + m - p r t = volumen del picnmetro a 20 r t = masa volmica aparente. m = masa del aire contenido en el picnmetro vaco. p = diferencia de masa entre la tara y el picnmetro lleno con destilado alcohlico. 5(a).5.2. Clculo de grado alcohomtrico. Calcular el grado alcohlico internacional O.I.V. a 20C utilizando la tabla 5(a). I de masa volmicas a t corregidas del empuje del aire. Buscar sobre la lnea horizontal correspondiente a la cifra de la parte entera de la temperatura, t, la cifra de la masa volumen inmediatamente superior a rt. El grado alcohlico que encabeza la columna donde se encuentra esta cifra ser la parte entera del grado alcohlico a 20C. Determinar la masa volmica r correspondiente a la parte entera de la temperatura, t, utilizando la diferencia tabular que se lee por debajo de la masa volmica inmediatamente superior a rt antes encontrada, y la cifra decimal t, r = rt + (diferencia tabular x parte decimal de t) 10-5. Hallar la parte decimal del grado alcohlico a 20, buscando en las tablas sobre la lnea horizontal que comienza con la cifra de los enteros de la temperatura, t, la masa volmica r que sea inmediatamente superior a r, y dividiendo la diferencia r - r por la diferencia tabular que est a la derecha de la cifra de la masa volmica r. 5(a).6. Referencias. 5(a).6.1 Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A2,1-25. 1969. 5(a).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: Tables de correspondance entre les diverses tables alcoomtriques. Socit Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111-141. 1966.
23
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GRADOS ALCOHOLICOS 2 1 43 1 44 1 44 1 44 1 43 1 44 1 43 1 44 1 44 1 44 1 44 1 44 1 44 1 45 1 44 1 45 1 45 1 45 1 45 1 46 1 46 1 41 1 42 1 42 1 42 1 42 1 43 1 42 1 43 1 41 1 41 1 40 1 41 1 41 1 36 1 37 1 37 1 37 1 38 1 38 1 38 1 38 1 39 1 39 1 39 1 39 1 39 1 40 1 36 1 40 1 36 1 40 1 35 1 40 1 35 1 39 1 35 1 31 1 31 1 31 1 32 1 32 1 32 1 32 1 33 1 33 1 33 1 33 1 34 1 34 1 34 1 35 1 35 1 36 1 36 1 39 1 35 1 30 1 39 1 35 1 29 1 39 1 34 1 30 3 4 5 6 1 25 1 26 1 26 1 26 1 26 1 27 1 27 1 28 1 28 1 29 1 29 1 30 1 30 1 31 1 31 1 31 1 32 1 32 1 33 1 33 1 34 996 65 8 996 57 10 996 47 11 996 36 13 996 23 13 996 10 15 995 95 15 995 80 17 995 63 18 995 45 20 995 25 20 995 05 21 994 84 22 994 62 24 994 38 24 994 14 25 993 89 27 993 62 27 993 35 28 993 07 29 992 78 995 22 9 995 13 10 995 03 11 994 92 12 994 80 14 994 66 14 994 52 16 994 36 17 994 19 18 994 01 20 993 81 20 993 61 21 993 40 23 993 17 23 992 94 25 992 69 25 992 44 27 992 17 27 991 90 29 991 61 29 991 32 993 83 9 993 74 10 993 64 11 993 53 13 993 40 14 993 26 14 993 12 16 992 96 18 992 78 18 992 60 19 992 41 21 992 20 21 991 99 23 991 76 24 991 52 25 991 27 25 991 02 27 990 75 28 990 47 28 990 19 30 989 89 992 49 10 992 39 10 992 29 11 992 18 13 992 05 14 991 91 15 991 76 16 991 60 18 991 42 19 991 23 19 991 04 21 990 83 22 990 61 23 990 38 24 990 14 25 989 89 26 989 63 27 989 36 28 989 08 28 988 80 30 988 50 991 19 9 991 10 1 990 99 12 990 87 13 990 74 14 990 60 16 990 44 16 990 28 18 990 10 19 989 91 20 989 71 21 989 50 22 989 28 23 989 05 25 988 80 25 988 55 26 988 29 28 988 01 28 987 73 29 987 44 30 987 14
TABLA 5 (a). I Masas volmicas aparentes de mezclas hidroalcohlicas (picnmetro Pyrex)
Temperaturas
10
1 50
1 46
11
1 49
1 46
12
1 49
1 46
13
1 49
1 46
14
1 49
1 47
15
1 49
1 46
16
1 49
1 47
17
1 49
1 46
18
1 49
1 46
19
1 49
1 46
20
1 49
1 47
21
1 49
1 47
22
1 49
1 47
23
1 49
1 47
24
1 49
1 47
25
1 49
1 47
26
1 49
1 47
27
1 49
1 48
28
1 50
1 47
29
1 50
1 47
30
999 61 9 999 52 10 999 42 11 999 31 12 999 19 14 999 05 14 998 91 16 998 75 17 998 58 18 998 40 19 998 21 20 998 01 21 997 80 22 997 58 24 997 34 24 997 10 25 996 85 26 996 59 27 966 32 28 996 04 29 995 75
1 50
998 11 8 998 03 10 997 93 11 997 82 12 997 70 14 997 56 14 997 42 16 997 26 17 997 09 18 996 91 19 996 72 20 996 52 21 996 31 22 996 09 24 995 85 24 995 61 25 995 36 26 995 10 28 994 82 28 994 54 29 994 25
1 47
TABLA 5 (a). I (Continuacin) GRADOS ALCOHOLICOS 9 1 16 1 16 1 16 1 18 1 19 1 19 1 20 1 20 1 21 1 22 1 23 1 23 1 24 1 24 1 25 1 26 1 26 1 26 1 27 1 28 1 28 1 26 1 27 1 27 1 28 1 26 1 24 1 24 1 23 1 22 1 22 1 21 1 23 1 23 1 23 1 25 1 25 1 27 1 27 1 28 1 29 1 21 1 20 1 20 1 20 1 20 1 19 1 19 1 18 1 18 1 17 1 17 1 16 1 13 1 14 1 15 1 16 1 17 1 18 1 19 1 20 1 21 1 22 1 23 1 24 1 24 1 26 1 27 1 28 1 16 1 15 1 12 1 16 1 14 1 11 1 15 1 14 1 09 1 14 1 12 1 08 1 13 1 11 1 08 1 04 1 05 1 07 1 07 1 09 1 10 1 11 1 12 1 13 1 14 1 16 1 17 1 17 1 18 1 20 1 20 1 21 1 23 1 23 1 24 1 25 10 11 12
Temperaturas
10
989
1 19
11
989
1 20
12
989
1 21
13
989
1 21
14
989
1 22
15
989
1 23
16
989
1 23
17
989
1 24
18
988
1 24
19
988
1 24
20
988
1 25
21
988
1 25
22
987
1 26
23
987
1 27
24
987
1 27
25
987
1 28
26
986
1 28
27
986
1 29
28
986
1 29
29
986
1 30
30
985
94 10 84 11 73 12 61 13 48 15 33 16 17 17 00 18 82 20 62 20 42 22 20 22 98 24 74 25 49 25 24 27 97 28 96 29 40 29 11 31 80
1 30
988 75 11 988 64 12 988 52 12 988 40 14 988 26 16 988 10 16 987 94 18 987 76 18 987 58 20 987 38 21 987 17 22 986 95 23 986 72 25 986 47 25 986 22 26 985 96 27 985 69 29 985 40 29 985 11 30 984 81 31 984 50
987 59 11 987 48 12 987 36 14 987 22 15 987 07 16 986 91 17 986 74 18 986 56 19 986 37 21 986 16 22 985 94 22 985 72 24 985 48 25 985 23 26 984 97 27 984 70 27 984 43 29 984 14 30 983 84 31 983 53 31 983 22
986 46 12 986 34 13 986 21 15 986 06 15 985 91 17 985 74 18 985 56 19 985 37 20 985 17 21 984 96 23 984 73 23 984 50 24 984 26 16 984 00 27 983 73 27 983 46 29 983 15 29 982 88 31 982 57 31 982 26 32 981 94
985 35 13 985 22 15 985 07 15 984 92 16 984 76 18 984 58 19 984 39 20 984 19 21 983 98 22 983 76 23 983 53 24 983 29 26 983 03 26 982 77 27 982 50 29 982 21 29 981 92 31 981 61 31 981 30 32 980 98 33 980 65
984 27 14 984 13 15 983 98 17 983 81 17 983 64 19 983 45 20 983 25 21 983 04 22 982 82 23 982 59 34 982 35 25 982 10 27 981 23 27 981 56 28 981 28 30 980 98 30 980 68 31 980 37 33 980 04 33 979 71 34 979 37
25
26
TABLA 5 (a). I (Continuacin) GRADOS ALCOHOLICOS 15 99 1 01 1 02 1 03 1 05 1 05 1 07 1 08 1 10 1 11 1 12 1 13 1 14 1 15 1 17 1 17 1 19 1 20 1 20 1 21 1 22 1 17 1 19 1 20 1 21 1 22 1 17 1 15 1 14 1 13 1 12 1 10 1 09 1 10 1 11 1 13 1 14 1 14 1 16 1 17 1 18 1 20 1 21 1 10 1 07 1 08 1 06 1 07 1 05 1 05 1 04 1 05 1 02 1 03 1 01 99 1 00 1 02 1 03 1 05 1 06 1 08 1 09 1 10 1 11 1 13 1 15 1 16 1 17 1 18 1 19 1 20 1 02 99 98 1 00 98 96 99 96 95 98 94 94 16 17 18 91 93 95 96 97 97 1 00 1 02 1 03 1 05 1 06 1 08 1 09 1 11 1 11 1 13 1 14 1 15 1 17 1 18 1 20 981 22 18 981 04 19 980 85 20 980 65 21 980 44 22 980 22 24 979 98 24 979 74 26 979 48 26 979 22 28 978 94 28 978 66 30 978 36 30 978 06 32 977 74 32 977 42 34 977 08 34 976 74 35 976 39 36 976 03 37 975 66 980 24 19 980 05 20 979 85 22 979 63 22 979 41 24 979 17 24 978 93 26 978 67 27 978 40 28 978 12 28 977 84 30 977 54 31 977 23 31 976 92 33 976 59 34 976 25 34 975 91 36 975 55 36 975 19 37 974 82 38 974 44 979 30 21 979 09 22 978 87 23 978 64 24 978 40 25 978 15 26 977 89 27 977 62 28 977 34 29 977 05 30 976 75 31 976 44 32 976 12 33 975 79 34 975 45 34 975 11 36 974 75 37 974 38 37 974 01 39 973 62 39 973 23 978 36 22 978 14 23 977 91 25 977 66 25 977 41 26 977 15 28 976 87 28 976 59 30 976 29 30 975 99 32 975 67 32 975 35 33 975 02 33 974 68 36 974 32 36 973 96 37 973 59 38 973 21 38 972 83 40 972 43 40 972 03
Temperaturas
13
14
10
983
1 02
11
983
1 03
12
982
1 04
13
982
1 06
14
982
1 06
15
982
1 08
16
982
1 09
17
981
1 10
18
981
1 11
19
981
1 12
20
981
1 13
21
980
1 14
22
980
1 16
23
980
1 17
24
980
1 17
25
979
1 19
26
979
1 20
27
979
1 20
28
978
1 22
29
978
1 23
30
978
23 15 08 17 91 17 74 19 55 20 35 21 14 22 92 23 69 24 45 26 19 26 93 27 66 28 38 30 08 30 78 31 47 33 14 33 81 34 47 35 12
1 24
982 21 16 982 05 18 981 87 19 981 68 19 981 49 22 981 27 22 981 05 23 980 82 24 980 58 25 980 33 27 980 06 27 979 79 29 979 50 29 979 21 30 978 91 32 978 59 32 978 27 33 977 94 35 977 59 35 977 24 36 976 88
TABLA 5 (a). I (Continuacin) GRADOS ALCOHOLICOS 21 90 92 93 96 97 99 1 00 1 02 1 04 1 05 1 07 1 08 1 10 1 11 1 13 1 14 1 15 1 17 1 18 1 19 1 21 1 18 1 20 1 21 1 23 1 17 1 15 1 14 1 13 1 11 1 10 1 11 1 13 1 14 1 15 1 18 1 19 1 20 1 22 1 23 1 24 1 08 1 09 1 06 1 08 1 05 1 06 1 03 1 04 1 01 1 03 1 00 1 01 1 02 1 04 1 06 1 08 1 09 1 11 1 12 1 14 1 16 1 18 1 19 1 20 1 22 1 23 1 25 1 26 98 99 1 00 96 97 99 95 95 97 93 94 94 91 91 94 94 97 98 1 00 1 02 1 04 1 06 1 08 1 09 1 11 1 13 1 15 1 16 1 17 1 19 1 20 1 22 1 24 1 25 1 26 1 28 22 23 24
Temperaturas
19
20
10
89
11
90
12
92
13
93
14
96
15
97
16
99
17
1 00
18
1 01
19
1 03
20
1 04
21
1 05
22
1 07
23
1 08
24
1 10
25
1 11
26
1 13
27
1 14
28
1 15
29
30
977 45 24 977 21 25 976 96 26 976 70 26 976 44 28 976 16 29 975 87 30 975 57 31 975 26 32 974 94 33 974 61 34 974 27 34 973 93 36 973 57 36 973 21 38 972 83 38 972 45 39 972 06 40 971 66 41 971 25 42 970 83
1 17
1 17
976 56 25 976 31 27 976 04 27 975 77 29 975 48 29 975 19 31 974 88 31 974 57 32 974 25 34 973 91 34 973 57 35 973 22 36 972 86 37 972 49 38 972 11 39 971 72 40 971 32 40 970 92 41 970 51 43 970 08 42 969 66
975 66 27 975 39 28 975 11 30 974 81 30 974 50 31 974 20 32 973 88 33 973 55 34 973 21 35 972 86 36 972 50 36 972 14 38 971 76 38 971 38 40 970 98 40 970 58 41 970 17 42 969 75 42 969 33 44 968 89 44 968 45
974 75 29 974 46 30 974 16 31 973 85 32 973 53 33 973 20 33 972 87 35 972 52 36 972 16 36 971 80 38 971 42 38 971 04 39 970 65 40 970 25 41 969 84 41 969 43 43 969 00 43 968 57 44 968 13 45 967 68 45 967 22
973 84 32 973 52 31 973 21 33 972 88 34 972 54 35 972 19 35 971 84 36 971 48 38 971 10 38 970 72 39 970 33 40 969 93 41 969 52 41 969 11 42 968 69 44 968 25 44 967 81 44 967 37 46 966 91 46 966 45 47 965 98
972 90 32 972 58 34 972 24 35 971 89 35 971 54 37 971 17 37 970 80 38 970 42 40 970 02 39 969 623 41 969 22 41 968 81 43 968 38 43 967 95 44 967 51 45 967 06 45 966 61 46 966 15 47 965 68 48 965 20 48 964 72
27
28
TABLA 5 (a). I (Continuacin) GRADOS ALCOHOLICOS 27 97 99 1 01 1 03 1 05 1 07 1 09 1 10 1 13 1 14 1 16 1 17 1 19 1 20 1 22 1 24 1 26 1 27 1 29 1 30 1 32 1 27 1 29 1 30 1 32 1 33 1 26 1 25 1 23 1 22 1 20 1 18 1 19 1 21 1 22 1 25 1 26 1 27 1 29 1 31 1 32 1 33 1 35 1 16 1 18 1 14 1 16 1 13 1 14 1 10 1 13 1 09 1 11 1 07 1 09 1 10 1 12 1 14 1 16 1 18 1 19 1 21 1 23 1 25 1 26 1 27 1 30 1 31 1 32 1 34 1 36 1 37 1 05 1 07 1 09 1 03 1 05 1 07 1 01 1 03 1 05 99 1 01 1 03 28 29 30 1 08 1 09 1 12 1 14 1 16 1 17 1 20 1 20 1 23 1 25 1 26 1 27 1 29 1 31 1 32 1 33 1 36 1 36 1 38 1 40 1 40 970 05 39 969 66 40 969 26 40 968 86 42 968 44 42 968 02 43 967 59 43 967 16 45 966 71 45 966 26 46 965 80 46 965 34 47 964 87 48 964 39 49 963 90 50 963 40 50 962 90 50 962 40 52 961 88 52 961 36 53 960 83 969 06 41 968 65 42 968 23 42 967 81 44 967 37 44 966 93 44 966 49 46 966 03 46 965 57 47 965 10 48 964 62 48 964 14 49 963 65 49 963 16 51 962 65 51 962 14 51 961 63 52 961 11 53 960 58 54 960 04 54 959 50 968 05 43 967 62 44 967 18 44 966 74 46 966 28 46 965 82 46 965 36 47 964 89 48 964 41 49 965 92 49 963 43 50 962 93 50 962 43 52 961 91 52 961 39 52 960 87 53 960 34 54 959 80 54 959 26 55 958 71 56 958 15 967 02 45 966 57 46 966 11 46 965 65 47 965 18 48 964 70 48 964 22 49 963 73 50 963 23 50 962 73 51 962 22 52 961 70 52 961 18 53 960 65 53 960 12 55 959 57 54 959 03 55 959 58 56 957 92 57 957 35 57 956 78
Temperaturas
25
26
10
971
94
11
971
96
12
971
99
13
970
1 00
14
970
1 03
15
970
1 04
16
969
1 06
17
969
1 08
18
968
1 09
19
968
1 12
20
968
1 13
21
967
1 15
22
967
1 16
23
966
1 19
24
966
1 20
25
965
1 22
26
965
1 23
27
964
1 24
28
964
1 26
29
963
1 28
30
963
96 35 61 35 26 37 89 37 52 39 13 39 74 40 34 41 93 41 52 43 09 43 66 44 22 44 78 46 32 46 86 47 39 48 91 48 43 49 94 50 44
1 29
971 02 37 970 65 38 970 27 38 969 89 40 969 49 40 969 09 41 968 68 42 968 26 42 967 84 44 967 40 44 966 96 45 966 51 45 966 06 47 965 59 47 965 12 48 964 64 48 964 16 49 963 67 50 963 17 51 962 66 51 962 15
M
5(b). TITULO ALCOHOMETRICO (Mtodo areomtrico) 5(b). 1.Principio. Como en 5(a).1. 5(b).2. Material y aparatos. 5(b).2.1. Aparatos de destilacin.- Como en 5(a).2.1. 5(b).2.2. Aparatos de areometra. 5(b).2.2.1. Alcohmetro. 5(b).2.2.2. Termmetro. 5(b).2.2.3. Probeta. 5(b).3. Reactivos. Como en 5(a).3. 5(b).4. Procedimiento. Las generalidades como en 5(a).4. 5(b).4.1. Destilacin.- Como en 5(a).4.1. 5(b).4.2. Determinacin areomtrica.- Como en 4(b).3, teniendo en cuenta que se utiliza destilado en vez de vino, y que el tallo del aremetro viene graduado en grados alcohlicos aparentes. Hacer al menos tres lecturas del grado alcohlico aparente, sirvindose si es preciso de una lupa. 5(b).5. Clculo. Calcular el grado alcohlico internacional O.I.V. a 20C, utilizando la tabla 5(b).I, aadiendo o restando al grado alcohlico aparente a t la correccin correspondiente. 5(b).6. Referencias. 5(b).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A2, 1-25. 1969. 5(b).6.2. P. Jaulmes, S. Brun: Tables de correspondance entre les diverses tables alcoomtriques. Socit Pharmacie Montpellier, 26: 2, 111, 141, 1966.
TABLA 5 (b). I Correcciones a efectuar sobre el grado alcohlico aparente para corregir la accin de la temperatura Temperaturas 0 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0,84 0,80 0,74 0,67 0,60 0,51 0,42 0,32 0,23 0,11 1 0,87 0,81 0,76 0,69 0,61 0,52 0,43 0,33 0,24 0,12 0,13 0,26 0,41 0,56 0,71 0,86 2 0,88 0,83 0,78 0,70 0,62 0,54 0,45 0,34 0,24 0,12 0,13 0,27 0,42 0,57 0,72 0,88 1,05 1,22 1,40 1,59 Grados alcohlicos aparentes 3 0,92 0,86 0,80 0,73 0,65 0,56 0,46 0,35 0,25 0,13 0,13 0,28 0,43 0,58 0,73 0,91 1,08 1,25 1,44 1,62 4 0,96 0,90 0,84 0,76 0,68 0,58 0,48 0,37 0,26 0,13 0,14 0,28 0,44 0,59 0,75 0,93 1,10 1,28 1,48 1,66 5 1,01 0,96 0,88 0,80 0,71 0,61 0,50 0,39 0,27 0,13 0,14 0,29 0,45 0,61 0,78 0,96 1,14 1,33 1,52 1,71 6 1,08 1,01 0,94 0,85 0,75 0,64 0,53 0,41 0,28 0,14 0,15 0,30 0,47 0,64 0,81 1,00 1,18 1,38 1,58 1,77 7 1,16 1,08 1,00 0,90 0,79 0,68 0,55 0,43 0,30 0,15 0,15 0,32 0,49 0,67 0,84 1,04 1,23 1,44 1,64 1,85 8 1,24 1,16 1,07 0,95 0,85 0,72 0,58 0,46 0,31 0,16 0,16 0,34 0,51 0,70 0,89 1,09 1,28 1,50 1,71 1,93
SUMAR
RESTAR
29
TABLA 5 (b). I (continuacin) Temperaturas 9 1,34 1,44 1,34 1,23 1,10 0,96 0,82 0,66 0,51 0,34 0,17 0,18 0,37 0,56 0,77 0,98 1,19 1,40 1,62 1,85 2,07 2,15 2,23 2,33 2,45 2,55 2,67 2,79 1,24 1,46 1,68 1,92 1,30 1,53 1,75 2,00 1,36 1,60 1,83 2,08 1,43 1,68 1,92 2,17 1,51 1,76 2,02 2,28 1,57 1,85 2,11 2,39 1,65 1,93 2,21 2,50 1,02 1,07 1,12 1,18 1,24 1,32 1,38 0,19 0,40 0,60 0,81 0,20 0,42 0,63 0,85 0,21 0,44 0,67 0,89 0,23 0,46 0,71 0,94 0,24 0,48 0,74 0,99 0,26 0,51 0,78 1,04 0,28 0,54 0,82 1,09 0,71 0,55 0,36 0,18 0,76 0,58 0,39 0,20 0,82 0,63 0,42 0,21 0,88 0,67 0,45 0,23 0,94 0,71 0,47 0,24 1,01 0,76 0,50 0,26 1,08 0,81 0,53 0,28 0,87 0,94 1,01 1,09 1,17 1,26 1,34 1,46 1,32 1,18 1,03 1,59 1,43 1,28 1,11 1,73 1,55 1,38 1,19 1,88 1,68 1,48 1,28 2,04 1,82 1,60 1,39 2,21 1,97 1,72 1,49 2,38 2,13 1,85 1,59 1,58 1,73 1,89 2,06 2,24 2,43 2,63 10 11 12 13 14 15 16 17 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 2,00 0,93 0,17 0,35 0,54 0,73 0,62 0,48 0,33 0,16 0,77 Grados alcohlicos aparentes
SUMAR
1,25 1,15 1,02 0,90
RESTAR
1,14 1,34 1,56 1,78
TABLA 5 (b). I (continuacin) Temperaturas 18 2,84 3,01 2,71 2,40 2,11 1,81 1,51 1,20 0,90 0,60 0,30 0,31 0,60 0,90 1,21 1,51 1,82 2,12 2,43 2,73 2,91 3,04 0,32 0,62 0,94 1,27 1,60 1,90 2,22 2,54 2,85 3,16 0,33 0,65 0,98 1,31 1,65 1,97 2,30 2,63 2,96 3,28 1,26 0,95 0,63 0,31 1,31 0,99 0,65 0,32 1,58 1,64 1,71 1,36 1,02 0,68 0,33 0,34 0,67 1,00 1,35 1,69 2,02 2,36 2,70 3,05 3,38 2,84 2,51 2,20 1,89 2,95 2,63 2,29 1,96 3,08 2,73 2,38 2,03 3,21 2,84 2,47 2,11 1,77 1,40 1,06 0,70 0,34 0,35 0,69 1,03 1,38 1,72 2,06 2,42 2,76 3,11 3,38 3,15 3,29 3,44 3,58 19 20 21 22 23 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 1,44 0,30 0,57 0,86 1,14 1,15 0,85 0,56 0,29 1,44 Grados alcohlicos aparentes 24 3,70 3,32 2,93 2,57 2,19 1,82 1,45 1,09 0,72 0,35 0,36 0,71 1,06 1,42 1,76 2,12 2,47 2,83 3,18 3,46 25 3,82 3,42 3,02 2,64 2,25 1,87 1,49 1,12 0,75 0,36 0,37 0,73 1,08 1,46 1,81 2,18 2,53 2,90 3,25 3,54 26 3,93 3,52 3,10 2,71 2,30 1,91 1,53 1,15 0,76 0,37 0,38 0,74 1,11 1,50 1,86 2,23 2,59 2,96 3,32 3,61
SUMAR
2,56 2,27 1,99 1,71
RESTAR
1,73 2,02 2,31 2,62
30
M
TABLA 5 (b). I (continuacin) Temperaturas 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Grados alcohlicos aparentes 27 4,04 3,61 3,18 2,78 2,36 1,96 1,56 1,17 0,77 0,38 0,38 0,76 1,14 1,53 1,90 28 4,14 3,69 3,25 2,84 2,42 2,01 1,59 1,19 0,79 0,40 0,39 0,78 1,16 1,56 1,94 2,31 2,70 3,07 3,45 3,83 29 4,24 3,78 3,32 2,89 2,47 2,05 1,62 1,21 0,81 0,41 0,39 0,79 1,19 1,58 1,97 2,35 2,74 3,12 3,51 3,89 30 4,43 3,86 3,39 2,94 2,52 2,09 1,64 1,23 0,82 0,42 0,40 0,81 1,21 1,60 2,00 2,39 2,78 3,16 3,56 3,95
30
RESTAR
26 27 28 29
SUMAR
2,28 2,64 3,02 3,39 3,76
6. EXTRACTO SECO TOTAL 6.1. Principio. El extracto seco total o materias secas totales es el conjunto de todas las sustancias que, en condiciones fsicas determinadas, no se volatilizan. Estas condiciones fsicas deben fijarse de tal manera que las sustancias componentes de este extracto sufran el mnimo de alteracin. El extracto seco total se calcula indirectamente conociendo la densidad del residuo sin alcohol, que es el vino cuyo alcohol ha sido evaporado y despus se ha restablecido el volumen primitivo por adicin de agua. 6.2. Procedimiento. Llevar el residuo de la destilacin del alcohol del vino (sin previa neutralizacin) al matraz en donde se midi el vino. Lavar el matraz en donde se destil el vino con varias porciones de agua, y llenar con estas aguas hasta volumen, el matraz con el residuo de la destilacin, a la misma temperatura a la que se enras el vino. Mezclar bien, verter en una probeta y determinar la densidad como en 4(a).
6.3. Clculo. Calcular el extracto seco expresado en g/l a partir de la densidad del residuo sin alcohol utilizando la tabla 6.I. 6.3.1. Determinar la densidad del residuo sin alcohol como en 6.2. 6.3.2. Calcular la densidad 20/20 del residuo sin alcohol segn la frmula de Tabari: dr = dv - da +1 d = densidad 20/20 del residuo sin alcohol. dv = densidad del vino a 20. da = densidad a 20 de la mezcla hidroalcohlica del mismo grado que el vino. 6.3.3. Calcular la densidad del residuo sin alcohol a partir de las masas volmicas.
r
dr = 1,0018 (rv - ra) + 1 rv = masa volmica del vino a 20. ra = masa volmica a 20 de la mezcla hidroalcohlica del mismo grado que el vino. Para valores de rv menores a 1,05 puede tomarse 1 en vez de 1,0018.
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6.4. Observaciones. El extracto seco se expresa por la cantidad de sacarosa que, disuelta en agua hasta 1 l, da una solucin de la misma densidad que el residuo sin alcohol. En la tabla 6. I se encuentra la equivalencia de esta densidad, en extracto, expresada en sacarosa.
6.5. Referencia. 6.5.1. Recueil des Mthodes Internationales d Analyse des Vins. O.I.V. A3, 1-6. 1969.
TABLA 6. I Contenido en extracto seco (g/l) Densidad con dos decimales Tercer decimal de la densidad 0 1 2 3 4 5
Gramos de extracto por litro 1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 0 25,8 51,7 77,7 103,7 129,8 155,9 182,1 208,4 234,7 261,0 287,4 313,9 340,4 366,9 393,6 420,3 447,1 473,9 500,9 527,8 2,6 28,4 54,3 80,3 106,3 132,4 158,6 184,8 211,0 237,3 263,6 290,0 316,5 343,0 369,6 396,2 423,0 449,8 476,6 503,5 5,1 31,0 56,9 82,9 109,0 135,0 161,2 187,4 213,6 239,9 266,3 292,7 319,2 345,7 372,3 398,9 425,7 452,4 479,3 506,2 7,7 33,6 59,5 85,5 111,6 137,6 163,8 190,0 216,2 242,5 268,9 295,3 321,8 348,3 375,0 401,6 428,3 455,2 482,0 508,9 10,3 36,2 62,1 88,1 114,2 140,3 166,4 192,6 218,9 245,2 271,5 298,0 324,5 351,0 377,6 404,3 431,0 457,8 484,7 511,6 12,9 38,8 64,7 90,7 116,8 142,9 169,0 195,2 221,5 247,8 274,2 300,6 327,1 353,7 380,3 406,9 433,7 460,5 487,4 514,3 -
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M
TABLA 6. I (Continuacin) Densidad con dos decimales Tercer decimal de la densidad 6 7 8 9
Gramos de extracto por litro 1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 15,4 41,3 67,3 93,3 119,4 145,5 171,6 197,8 224,1 250,4 276,8 303,3 329,8 356,3 382,9 409,6 436,4 463,2 490,1 517,0 18,0 43,9 69,9 95,9 122,0 148,1 174,3 200,5 226,8 253,1 279,5 305,9 332,4 359,0 385,6 412,3 439,0 465,9 492,8 519,7 20,6 46,5 72,5 98,5 124,6 150,7 176,9 203,1 229,4 255,7 282,1 308,6 335,1 361,6 388,3 415,0 441,7 468,6 495,5 522,4 23,2 49,1 75,1 101,1 127,2 153,3 179,5 205,8 232,0 258,4 284,8 311,2 337,8 364,3 390,9 417,6 444,4 471,3 498,2 525,1 -
TABLA INTERCALAR 4 decimal de la densidad 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Extracto g/l 0,3 0,5 0,8 1,0 1,3 1,6 1,8 2,1 2,3
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7 (a). AZUCARES REDUCTORES (Defecacin plmbica) (Provisional) 7(a).1. Principio. Eliminacin previa de todas las materias reductoras distintas de los azcares por defecacin con plomo acetato neutro, y valoracin basada en la accin reductora sobre solucin cupro-alcalina. Aplicable a vinos blancos y tintos de color no muy intenso. 7(a).2. Material y aparatos. 7(a).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo. 7(a).2.2. Filtro de vidrio G3 con capa fina de amianto de fibra fina y lavado con agua hirviendo. 7(a).2.3. Kitasatos de 500 ml con frasco de seguridad intermedio. 7(a).3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121212 Calcio Carbonato precipitado PA 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA 121360 Hierro III Sulfato x-hidrato PA 131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO 181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV (o preparar con 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO) 131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 182415 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS 7(a).3.1. Solucin de Plomo II Acetato (aproximadamente saturada). Aadir a 250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolucin completa. 7(a). 3.2. Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 7(a).3.3. Calcio Carbonato precipitado PA 7(a).3.4. Solucin Cprica A. Mezclar 40 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO con 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y aadir Agua PA-ACS hasta 1 l. 7(a).3.5. Solucin Tartrato-Alcalina B. Mezclar 200 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACSISO con 150 g de Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO y aadir Agua PA-ACS hasta 1 l. 7(a).3.6. Solucin de Hierro III C. Mezclar 50 g de Hierro III Sulfato x-hidrato PA con 20 g de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y aadir Agua PA-
ACS hasta 1.000 ml. Comprobar esta solucin poniendo en un vaso de vidrio 30 ml de solucin C, 100 ml de Agua PA-ACS y una gota de Hierro II-1, 10 Fenantrolina. La coloracin amarillo-verdosa de esta mezcla debe virar a verde puro con una sola gota de Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En caso contrario, aadir Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV a la solucin hasta conseguir el viraje descrito. Generalmente es necesario aadir 1-3 ml de Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV por l de solucin C. 7(a).3.7. Solucin de Hierro II-1,10 Fenantrolina. Mezclar 0,695 g de Hierro II Sulfato 2-hidrato PA , 100 ml de Agua PA-ACS y 1,485 g de 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS. 7(a).3.8. Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En su defecto preparar disolviendo 3,16 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS hasta 1 l. Comprobar esta solucin por valoracin con una solucin de di-Sodio Oxalato PA-ACS 7(a).4. Procedimiento. 7(a).4.1. Vinos secos.- Llevar 100 ml de vino a un matraz aforado de 125 ml, aadir (V-0,5) ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumen de solucin N/10 utilizada para valorar la acidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Aadir agitando 5 ml de solucin saturada de Plomo II Acetato y 1g de Calcio Carbonato precipitado PA, agitar varias veces y dejar sedimentar por lo menos 15 minutos, enrasar con Agua PA-ACS, aadir 0,6 ml ms de Agua PA-ACS y filtrar. 7(a).4.2. Vinos dulces.- En un matraz aforado de 100 ml colocar un volumen de vino variable segn su riqueza en azcar. Para vinos dulces con masa volmica comprendida entre 1,005 y 1,038, tomar 20 ml de lquido a analizar, diluido al 20%. Para vinos abocados con masa volmica entre 0,997 y 1,006, tomar 20 ml de vino no diluido. Aadir 0,5 g. de Calcio Carbonato precipitado PA, unos 60 ml de Agua PA-ACS y cantidad (0,52,0 ml) de solucin saturada de Plomo II Acetato hasta el lmite del enturbiamiento, agitar y dejar reposar durante 15 minutos por lo menos, agitando de cuando en cuando. Enrasar, aadir 0,2 ml ms de Agua PA-ACS y filtrar. Un ml del filtrado corresponde a 0,04 ml de vino dulce y 0,20 ml de vino abocado. En el Erlenmeyer de 300 ml, poner 20 ml de solucin Cprica A, 20 ml de solucin TartratoAlcalina B, 20 ml de solucin azucarada conteniendo de 10 a 100 mg de azcar reductor. Hacer hervir con reflujo (o con la boca del matraz tapada con un pequeo embudo) durante 3 minutos, enfriar inmediatamente bajo una corriente de Agua PA-ACS hasta refrigeracin completa, dejar posar el Cobre I Oxido (inclinando el Erlenmeyer en un cristalizador con algodn y descansando el
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cuello en el borde), filtrar despus por el filtro G3 con la capa de amianto, ayudando la filtracin con la trompa de vaco. Tener la precaucin de que, en lo posible, haya una capa de lquido sobre el precipitado adherido al fondo, tanto en el filtro como en el Erlenmeyer, para evitar que se oxide. Lavar el precipitado del Erlenmeyer con Agua PA-ACS hirviendo y verter en el filtro, repitiendo tres veces la operacin, agitar cada vez con precacucin de operar rpidamente para no dejar al descubierto el precipitado de Cobre I Oxido. Cambiar el Kitasato y proceder a la disolucin del Cobre I Oxido, aadiendo primero al Erlenmeyer unos 10 ml de solucin C de Hierro III Sulfato, que disuelve rpidamente el precipitado y verter la solucin en el filtro. Disolver el precipitado que queda en el filtro, agitando con varilla de vidrio para facilitar la disolucin. Repetir tres veces estas adiciones y lavar Erlenmeyer y filtro cinco veces con unos 20 ml de Agua PA-ACS fra cada vez. Valorar el Hierro II Sulfato formado, que se encuentra en el lquido del Kitasato, con Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV, aadiendo previamente una gota de solucin de Hierro II1,10-Fenantrolina. Dar por terminada la valoracin cuando el color pase de verde-naranja a verde franco. 7(a).5. Clculo. La cantidad de azcar contenida en la solucin azucarada utilizada se obtiene en la tabla 7(a).I. 7(a).6. Referencias. 7(a).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A4, 8-10, 1969. 7(a).6.2. Jaulmes, P. Analyse des vins, pgs. 170-171, 1951.
TABLA 7 (a). I KMn04 N/10 ml

4,0 4,2 4,4 4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 5,8 6,0 6,2 6,4 6,6 6,8 7,0 7,2 7,4 7,6 7,8 8,0 8,2 8,4 8,6 8,8 9,0 9,2 9,4 9,6 9,8 10,0 10,2 10,4 10,6 10,8 11,0 11,2 11,4 11,6 11,8
Azcar invertido mg
12,4 13,0 13,6 14,3 14,9 15,5 16,2 16,8 17,5 18,1 18,8 19,4 20,1 20,7 21,4 22,0 22,7 23,4 24,1 24,7 25,5 26,1 26,8 27,5 28,1 28,8 29,5 30,1 30,8 31,5 32,2 32,9 33,6 34,3 35,0 35,6 36,4 37,0 37,7 38,4
KMn04 N/10 ml
12,0 12,2 12,4 12,6 12,8 13,0 13,2 13,4 13,6 13,8 14,0 14,2 14,4 14,6 14,8 15,0 15,2 15,4 15,6 15,8 16,0 16,2 16,4 16,6 16,8 17,0 17,2 17,4 17,6 17,8 18,0 18,2 18,4 18,6 18,8 19,0 19,2 19,4 19,6 19,8
Azcar invertido mg
39,1 39,7 40,5 41,2 42,0 42,6 43,3 44,1 44,7 45,5 46,3 47,0 47,6 48,4 49,1 49,8 50,5 51,3 52,1 52,7 53,5 54,2 55,0 55,7 56,4 57,2 57,9 58,7 59,4 60,1 61,0 61,6 62,4 63,2 64,0 64,8 65,4 66,2 67,1 67,8
KMn04 N/10 ml
20,0 20,2 20,4 20,6 20,8 21,0 21,2 21,4 21,6 21,8 22,0 22,2 22,4 22,6 22,8 23,0 23,2 23,4 23,6 23,8 24,0 24,2 24,4 24,6 24,8 25,0 25,2 25,4 25,6 25,8 26,0 26,2 26,4 26,6 26,8 27,0 27,2 27,4 27,6 27,8
Azcar invertido mg
68,7 69,3 70,1 70,9 71,6 72,4 73,2 74,1 74,9 75,6 76,4 77,2 78,0 78,7 79,5 80,3 81,1 81,9 82,7 83,5 84,4 85,2 86,0 86,7 87,5 88,4 89,2 90,0 90,9 91,6 92,5 93,3 94,1 95,0 95,8 96,6 97,3 98,2 99,1 99,9
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7(b). AZUCARES REDUCTORES (Defecacin mercrica) (Provisional) 7(b).1. Principio. Eliminacin previa de todas las materias reductoras distintas de los azcares por defecacin con mercurio II acetato, y valoracin por la accin reductora de los azcares sobre la solucin cupro-alcalina. Aplicable a vinos jvenes, de color intenso y ricos en azcar, o cuando se va a realizar una valoracin polarimtrica. Este mtodo proporciona la menor prdida de azcares reductores. 7(b).2. Material y aparatos. 7(b).2.1. Aparato generador de cido sulfhdrico. Filtrar el gas producido por la accin del cido clorhdrico diluido sobre el hierro II sulfuro por paso a travs de lana de vidrio y lavado en un frasco lavador con agua. 7(b).2.2. Dispositivo para eliminar el exceso de cido sulfhdrico. Eliminar el cido sulfhdrico en exceso despus de la precipitacin del exceso de mercurio, mediante aspiracin conectada al tubo lateral de un Kitasato, en el que se encuentra el lquido a tratar. Tapar el matraz con un tapn atravesado por un tubo que se sumerge en el lquido. Humedecer el aire aspirado que entra en el tubo por borboteo en un matraz de un litro lleno hasta la mitad de agua. 7(b).3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 171321 1,10 -Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 131325 Fenolftalena PA-ACS 121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA 131426 Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS 181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV (o preparar con 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 181694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 182415 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 182159 Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV 131706 di-Sodio Oxalato PA-ACS 141783 Zinc metal, polvo PRS 7(b).3.1. Solucin de Mercurio II. Mezclar 240 g de Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS con 240 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y aadir Agua PA-ACS hasta 1 litro. Hervir hasta disolucin
completa, enfriar y aadir Agua PA-ACS hasta 1 litro. 7(b).3.2. Solucin de Sodio Hidrxido 4N aproximadamente. Tomar Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV y diluir convenientemente. Esta solucin debe poder neutralizar exactamente un volumen igual al suyo, de la solucin de Mercurio II en presencia de Fenolftalena PA-ACS. Se debe comprobar esta correspondencia antes de su empleo, en particular si se observa un depsito en la solucin de Mercurio II y si es necesario diluir la solucin sdica. 7(b).3.3. Zinc metal, polvo PRS. Para eliminar el exceso de Mercurio. 7(b).3 (4,5,6,7,y 8). Como 7 (a). 3 (4,5,6,7 y 8). 7(b).4. Procedimiento. 7(b).4.1. Vinos secos y dulces, en los que se propone determinar el azcar y la desviacin polarimtrica. Colocar 100 ml de vino en una cpsula de 10-12 cm de dimetro y adicionar (V-0,5) ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV, siendo V el volumen de Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV empleado para valorar la acidez total de 10 ml de vino, como en 20.4. Evaporar en bao de agua hirviendo con corriente de aire caliente sobre la superficie del lquido, hasta reducir el volumen a 50 ml, aproximadamente. Llevar a un matraz de 100 ml, lavar tres veces la cpsula con Agua PAACS, aadir 5 ml de solucin de Mercurio II y, agitando, 5 ml de solucin de Sodio Hidrxido que se corresponde, volumen a volumen, con la de Mercurio II (solucin de Sodio Hidrxido 4N aproximadamente), dejar reaccionar 5 minutos por lo menos; aadir 2 ml de solucin de Mercurio II Acetato y enrasar a 100 ml. Filtrar y recoger el filtrado en un Kitasato de 500 ml. Tratar el filtrado con una corriente de Acido Sulfhdrico para precipitar el Mercurio en forma de Sulfuro negro (este tratamiento puede detenerse cuando el precipitado tome color negro). Despus se hace barbotar aire (previamente saturado de vapor de agua) a travs del lquido, hasta que haya perdido todo su olor a Acido Sulfhdrico (5-10 minutos) y se filtra. Un ml del filtrado corresponde a 1 ml de vino. Este lquido se emplea sin dilucin cuando se trata de vino seco o con unos 5 g/l de azcar. Con vino ms rico en azcar conviene diluir despus del examen polarimtrico y antes del anlisis qumico. 7(b).4.2. Vinos secos y dulces en los que solamente se va a realizar el anlisis del azcar por el mtodo qumico y no por polarografa. Tomar 20 ml de vino sin diluir o diluido segn norma anterior, aadir 20 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de solucin de Mercurio II Acetato y aadir, agitando, 1 ml de la solucin sdica. Dejar actuar 5 minutos por lo menos, aadir
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1 ml de solucin de Mercurio II, enrasar con agua y filtrar. Tratar con Acido Sulfhdrico y aire hmedo barbotando en la forma antes expuesta, y filtrar. Continuar como en 7(a). 4 despus de la defecacin. 7(b).5. Observaciones. En los anlisis de azcar por el mtodo qumico, para vinos no muy ricos en azcar, en vez de eliminar el exceso de mercurio por el cido sulfhdrico, es ms prctico eliminarlo mediante la adicin de Zinc metal, polvo PRS, de la siguiente forma: Aadir 1 g de Zinc metal, polvo PRS al lquido filtrado, agitar durante 2 horas de cuando en cuando, y filtrar. 7(b).6. Referencias. 7(b).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A4, 6-8. 1969. 7(b).6.2. Jaulmes, P. Analyse des vins, pg. 176, 1951. 7(c). AZUCARES REDUCTORES (Valoracin) 7(c).1. Principio. Eliminacin de las materias reductoras distintas de los azcares reductores por defecacin, y posterior valoracin basada en la accin reductora de los azcares sobre una solucin cupro-alcalina. 7(c).2. Material y aparatos. 7(c).2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo. 7(c).2.2. Material necesario para volumetra. 7(c).2.3. Bao de agua. 7(c).3. Reactivos. 131808 Acido Ctrico anhidro PA-ACS 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 211835 Piedra Pmez grnulos QP 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 7(c).3.1. Solucin Cupro-Alcalina: Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PAACS; 50 g de Acido Ctrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO en 300-400 ml de Agua
TABLA 7(c).I Azcares reductores, expresados en mg ml sodio tiosulfato 0,1N 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Primera cifra decimal 0 0,0 3,2 6,4 9,7 13,0 16,4 19,8 23,2 26,6 30,0 33,4 36,8 40,3 43,8 47,3 50,8 54,3 58,0 61,8 65,5 69,4 73,3 77,2 81,2 85,2 89,2 1 0,3 3,5 6,7 10,0 13,3 16,7 20,1 23,5 26,9 30,3 33,7 37,2 40,7 44,2 47,7 51,2 54,7 58,4 62,2 65,9 69,8 73,7 77,6 81,6 85,6 89,6 2 0,6 3,8 7,1 10,4 13,7 17,1 20,5 23,9 27,3 30,7 34,1 37,5 41,0 44,5 48,0 51,5 55,0 58,8 62,5 66,3 70,2 74,1 78,0 82,0 86,0 90,0 3 1,0 4,2 7,4 10,7 14,0 17,4 20,8 24,2 27,6 31,0 34,4 37,9 41,4 44,9 48,4 51,9 55,4 59,1 62,9 66,7 70,6 74,5 78,4 82,4 86,4 90,4 4 1,3 4,5 7,7 11,0 14,4 17,8 21,2 24,6 28,0 31,3 34,8 38,2 41,7 45,2 48,7 52,2 55,8 59,5 63,3 67,1 71,0 74,9 78,8 82,8 86,8 90,8 5 1,6 4,8 8,1 11,4 14,7 18,1 21,5 24,9 28,3 31,7 35,1 38,6 42,1 45,6 49,1 52,6 56,2 59,9 63,7 67,5 71,4 75,3 79,2 83,2 87,2 91,2 6 1,9 5,1 8,4 11,7 15,0 18,4 21,8 25,2 28,6 32,0 35,4 38,9 42,4 45,9 49,4 52,9 56,5 60,3 64,0 67,8 71,7 75,6 79,6 83,6 87,6 91,6 7 2,2 5,4 8,7 12,0 15,4 18,8 22,2 25,6 29,0 32,4 35,8 39,3 42,8 46,3 49,8 53,3 56,9 60,7 64,4 68,2 72,1 76,0 80,0 84,0 88,0 92,0 8 2,6 5,7 9,0 12,3 15,7 19,1 22,5 25,9 29,3 32,7 36,1 39,6 43,1 46,6 50,1 53,6 57,3 61,0 64,8 68,6 72,5 76,4 80,4 84,4 88,4 92,4 9 2,9 6,1 9,4 12,7 16,1 19,5 22,9 26,3 29,7 33,0 36,5 40,0 43,5 47,0 50,5 54,0 57,6 61,4 65,1 69,0 72,9 76,8 80,8 84,8 88,8 92,8
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PA-ACS caliente. Mezclar la solucin de Acido Ctrico y la de Sodio Carbonato. Aadir a continuacin la solucin de Cobre II Sulfato y completar el volumen con Agua PA-ACS hasta un litro. 7(c).3.2. Solucin de Potasio Yoduro al 30%. Conservar en frasco topacio. 7(c).3.3. Solucin de Acido Sulfrico al 25% en volumen. 7(c).3.4. Solucin de Engrudo de Almidn de 5 g/l; contendr 200 g/l de Sodio Cloruro PAACS-ISO para asegurar su conservacin. Esta solucin debe ser mantenida diez minutos en ebullicin en el momento de su preparacin. 7(c).3.5. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. 7(c).4. Procedimiento. Poner en el Erlenmeyer de 300 ml, 25 ml de la solucin Cupro-Alcalina y 25 ml del vino previamente defecado segn 7(a) o 7(b). Este volumen aadido no debe contener ms de 60 mg de azcares reductores. Aadir algunos granos de Piedra Pmez grnulos QP, y llevar a ebullicin, que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener exactamente durante diez minutos la ebullicin. Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua fra. Aadir 10 ml de la solucin de Potasio Yoduro al 30%, 25 ml de la solucin de Acido Sulfrico al 25% y 2 ml de Engrudo de Almidn. A continuacin, valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los 25 ml del vino previamente defecados por igual volumen de Agua PA-ACS y tratar como se ha indicado antes para la muestra. 7(c).5. Clculo. La cantidad de azcar, expresada en azcar invertido contenida en la muestra analizada, se obtiene en la tabla 7(c).1 en funcin del n - n de ml de tiosulfato utilizado. Siendo: n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N utilizados en la valoracin de la muestra. n = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato 0,1 N utilizados en la prueba en blanco. Expresar el contenido del vino en g de azcar invertido por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecacin del volumen de la muestra analizada.
8. GLICEROL (Glicerina) 8.1. Principio. La glicerina separada del vino, previa defecacin, por extraccin con acetona, se oxida con cido perydico a formaldehdo. La reaccin coloreada del formaldehdo con la fluoroglucina permite la determinacin espectrofotomtrica a 480 nm. La presencia de sorbitol y de manitol son causa de error en la determinacin de glicerina. 8.2. Material y aparatos. 8.2.1. Aparato de destilacin. Compuesto de las siguientes partes: 8.2.1.1. Matraz esfrico de 500 ml. 8.2.1.2. Columna rectificadora. 8.2.1.3. Columna Widmer con camisa de aislamiento. 8.2.1.4. Termmetro con escala de 0-110 C. 8.2.1.5. Refrigerante. 8.2.2. Frascos con tapn esmerilado de 1 l y de 60 ml. 8.2.3. Matraz aforado de 50 ml. 8.2.4. Matraz aforado de 200 ml. 8.2.5. Matraces con tapn esmerilado de 60 ml. 8.2.6. Matraces aforados de 100 ml. 8.2.7. Kitasato o recipiente para vaco de 250 ml. 8.2.8. Filtro de porosidad nmero 4. 8.2.9. Filtros de papel Schleicher et Schull 1574 de 12,5 cm de dimetro o similar. 8.2.10 Espectrofotmetro con cubetas de 1 cm de espesor interior. 8.3. Reactivos. 131007 Acetona PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 181059 Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV 131074 Agua PA-ACS 211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP 131188 Bario Hidrxido 8-hidrato PA-ISO Fluoroglucina 0,2% 141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 211456 Piedra Pmez grnulos QP 121523 Potasio meta-Peryodato PA 181691 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 8.3.1. Bario Hidrxido 8-hidrato PA-ISO. 8.3.2. Arena de Mar lavada, grano fino QP 8.3.3. Acetona PA-ACS-ISO 8.3.4. Sodio Hidrxido 1N SV. 8.3.5. Piedra Pmez grnulos QP 8.3.6. Acido Sulfrico 0,5 mol/l (IN) SV 8.3.7. Solucin 0,05 M de Acido Perydico. En un matraz aforado de 1 l, introducir 11,5 g de Potasio meta-Peryodato (KIO4) y aproximadamente unos 800 a 850 ml de Agua PA-ACS. Si la sal utilizada es K2H3IO6 se pesan 15,2 g. Aadir en seguida 15 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y calentar muy ligeramen-
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7(c).6. Referencia. 7(c).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V. A 4e 29-31.
M
te en bao de agua hasta disolucin completa. Enfriar a la temperatura ordinaria y llenar hasta volumen. 8.3.8. Solucin de Fluoroglucina 0,2%. Esta solucin debe ser renovada cada 15 das. 8.3.9. Solucin madre de Glicerina. Diluir unos 20 ml de Glicerina PRS-CODEX a 100 ml. Determinar despus la concentracin exacta de esta solucin midiendo su ndice de refraccin, y despus, por diluciones convenientes y sucesivas, llevar su concentracin a 0,1 g por l. 8.4. Procedimiento. Extraer los polioles y valorar la glicerina. 8.4.1. Separacin de polioles.- Introducir en un matraz de 100 ml, de tapn esmerilado, 5 g de Bario Hidrxido 8-hidrato PA-ISO (no pulverizar), 5 g de Arena de Mar lavada, grano fino QP y 10 ml de vino, que se deja deslizar por la pared del matraz. Si el vino contiene ms de 120 g de azcar por litro, se opera slo con 5 ml. Agitar enrgicamente durante 30 segundos y dejar en reposo, agitando de cuando en cuando. Aadir despus 50 ml de Acetona PA-ACS-ISO y agitar otra vez durante 30 segundos. Llevar el matraz a un termostato a 45C durante 5 minutos, agitando enrgicamente cada minuto. Filtrar la solucin caliente por un crisol filtrante de porosidad nmero 4 dispuesto sobre Kitasato de vidrio en el que se han puesto 40 ml de Agua PAACS y 5 ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. Lavar el residuo tres veces con Acetona PA-ACSISO, removiendo el precipitado con una esptula. Escurrir despus el precipitado lo ms posible. Trasvasar despus este precipitado al matraz del aparato destilador, enjuagando bien el Kitasato con Acetona PA-ACS-ISO. Destilar la Acetona con llama fuerte, hasta que el termmetro marque 100C, y destilar despus 20 ml ms de Agua PA-ACS. Aadir al residuo de la destilacin an caliente, 5 ml de Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV, dejar enfriar y trasvasar a matraz aforado de 50 ml. Se enrasa con las aguas de lavado del matraz, agitar y filtrar por filtro de papel. 8.4.2. Valoracin de la glicerina.- Esta operacin hay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguientes a la separacin de los polioles. Llevar una alcuota de 5 ml del filtrado anterior a matraz aforado de 100 ml y enrasar con Agua PAACS. Introducir 20 ml de esta dilucin en un matraz de 60 ml con tapn esmerilado. Aadir 10 ml de solucin de Acido Perydico 0,05 M. Agitar y dejar en reposo 5 minutos. Aadir despus sucesiva y rpidamente, deslizando a lo largo de la pared, las siguientes soluciones: 10 ml de Sodio Hidrxido 1mol/l (1N) SV y 10 ml de solucin de Fluoroglucina. Agitar despus de la adicin de cada una de las soluciones. Llevar rpidamente la mezcla de soluciones a la cubeta del espectrofotmetro y medir la absorbancia a 480 nm en un minuto, porque la coloracin violeta que se obtiene es muy fugaz. Ajustar el espectrofotmetro de forma que la solucin obtenida, al sustituir en las operaciones anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PAACS, d una densidad ptica 0. 8.4.3. Obtencin de la curva patrn. Diluir 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ml de solucin inicial de glicerina de 0,1 g por l, a 200 ml. Tomar despus 20 ml de cada una de estas diluciones y 20 ml de la solucin inicial, y llevar a fras-
TABLA 8.I FACTORES DE CORRECCION PARA EL CONTENIDO EN GLICERINA DE VINOS QUE CONTENGAN AZUCARES Contenido en azcar g/l 5 10 20 30 40 50 60 70 Contenido en azcar g/l 80 90 100 110 120 130 140 150
Factor 1,020 1,030 1,045 1,060 1,073 1,086 1,099 1,111
Factor 1,123 1,134 1,145 1,156 1,168 1,180 1,191 1,202
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cos de 60 ml con tapn esmerilado y tratar como en 8.4.2 para los 20 ml de la dilucin del filtrado. Medir despus las densidades pticas correspondientes, ajustando el espectrofotmetro como en 8.4.2. Esta escala corresponde a riquezas en glicerina en 0,2 ml de vino, que varan de 0 a 2 mg 8.5. Clculo. Calcular el contenido en glicerina expresado en g/l. P Glicerina = 50 f g/l V P = peso en g de glicerina obtenido de la curva patrn. V = volumen en ml de la muestra de vino. f = 1 para contenido de azcar en vinos inferiores a 5 g/l. f = valor del factor de correccin segn la tabla 8.I para contenidos de azcar en vinos superiores a 5 g/l. 8.6. Referencia. 8.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9, 1969. 9. 2,3-BUTANODIOL 9.1. Principio. El 2,3-butanodiol separado del vino, previa defecacin, por extraccin con acetona, se oxida con cido perydico a acetaldehdo. La reaccin coloreada del acetaldehdo con el sodio nitroprusiato y la piperidina permite la determinacin espectrofotomtrica a 570 nm. 9.2. Material y aparatos. 9.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10), como 8.2. (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10). 9.3. Reactivos. 131007 Acetona PA-ACS-ISO Acido Peryodico 0,05 M 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 181059 Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV 131074 Agua PA-ACS 211160 Arena de Mar lavada, grano fino QP 121188 Bario Hidrxido 8-hidrato PA 124551 2,3-Butanodiol PA 211456 Piedra pmez granulos QP 162377 Piperidina PS 121523 Potasio meta-Peryodato PA 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS 181691 Sodio Hidroxido 1 mol/l (1N) SV 121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA 9.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7), como 8.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7). 9.3.8. Solucin de Sodio Acetato al 27%.
9.3.9. Solucin de Sodio Nitroprusiato al 2%. Conservar en la oscuridad y renovar semanalmente. 9.3.10. Solucin de Piperidina al 10%. Renovar cada 15 das. 9.3.11. Solucin madre de 2,3-Butanodiol. Utilizar 2,3-Butanodiol rectificado, desechando el primero y el ltimo tercio. Pesar con exactitud 2 g y disolverlos en 1.000 ml. Diluir esta solucin hasta 1/10. 9.4. Procedimiento. Extraer los polioles y valorar el 2,3-Butanodiol. 9.4.1. Separacin de polioles. Como en 8.4.1. 9.4.2. Valoracin del 2,3-Butanodiol. Esta operacin hay que realizarla antes de las 2 o 3 horas siguientes a la separacin de los polioles. Llevar a un matraz de 60 ml con tapn esmerilado 5 ml del filtrado, 5 ml de solucin de Sodio Acetato al 27% y 10 ml de solucin de Acido Perydico 0,05M. Agitar y dejar 2 minutos en contacto. Aadir deslizando por las paredes del frasco: 5 ml de solucin de Sodio Nitroprusiato al 2% y 5 ml de la solucin de Piperidina al 10%. Agitar despus de la adicin de cada una de las soluciones. Llevar inmediatamente la solucin a la cubeta de 1 cm y hacer la lectura en el espectrofotmetro a 570 nm. La coloracin violeta que se obtiene con la reaccin alcanza el mximo de intensidad a los 30-40 segundos y despus disminuye rpidamente. Ajustar el espectrofotmetro de forma que la solucin obtenida al sustituir en las operaciones anteriores los 5 ml de filtrado por 5 ml de Agua PAACS d una densidad ptica 0. 9.4.3. Obtencin de la curva patrn. Diluir 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ml de la solucin inicial hasta 100 ml. Tomar 5 ml de cada una de estas diluciones y tratarlas como en 9.4.2 para los 5 ml del filtrado inicial. Determinar inmediatamente las densidades pticas mximas correspondientes, ajustando el espectrofotmetro como en 8.4.2. Esta curva proporciona valores de contenido en 2,3-Butanodiol en 5 ml de vino que varan de 0 a 0,7 mg. 9.5. Clculo. 9.5.1. Vinos con contenido en azcar inferior a 5 g/l. La cantidad de 2,3-butanodiol en g/l de vino es igual a la cantidad de 2,3-butanodiol en mg contenido en 5 ml del filtrado. 9.5.2. Vinos cuyo contenido en azcar est comprendido entre 5 y 120 g/l. La cantidad calculada segn 9.5.1 se corrige sumando o restando el factor encontrado en la tabla 9.I. 9.5.3. Vinos con contenidos en azcar superiores a 120 g/l.- (La defecacin se realiza sobre 5 ml de vino). La cantidad calculada segn 9.5.1 se corri-
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M
ge como en 9.5.2, utilizando slo la mitad del contenido en azcar. El resultado multiplicado por 2 es el contenido en 2,3-butanodiol en g/l de vino. 9.6. Referencia. 9.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A21, 1-9. 1969.
TABLA 9.I Correcciones a realizar para expresar el contenido en 2,3-butanodiol de vinos con azcares Contenido en azcar, g/l
10 -0,035 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,01 +0,02 +0,02 +0,02 20 -0,035 -0,03 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,01 +0,02 +0,03 +0,03 +0,04 +0,05 30 -0,035 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 40 -0,035 -0,03 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,08 +0,10 50 -0,035 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 60 -0,035 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,14 70 -0,035 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 +0,01 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,14 +0,15 80 -0,035 -0,03 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,04 +0,05 +0,07 +0,08 +0,10 +0,12 +0,13 +0,15 +0,17
Butanodiol g/l
0- 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 1,8 1,9 2,0
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TABLA 9.I Correcciones a realizar para expresar el contenido en 2,3-butanodiol de vinos con azcares Contenido en azcar, g/l
Butanodiol g/l 0 - 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 1,8 1,9 2,0 90 -0,035 -0,03 -0,03 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,04 +0,05 +0,06 +0,08 +0,09 +0,11 +0,13 +0,15 +0,17 +0,19 100 -0,035 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 -0,01 0,00 +0,01 +0,03 +0,04 +0,05 +0,07 +0,09 +0,10 +0,12 +0,14 +0,16 +0,18 +0,20 110 -0,035 -0,03 -0,02 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,03 +0,04 +0,05 +0,07 +0,09 +0,11 +0,13 +0,15 +0,18 +0,20 +0,22 120 -0,035 -0,03 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,06 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0,16 +0,19 +0,21 +0,24 130 -0,035 -0,03 -0,02 -0,01 0,00 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,09 +0,11 +0,13 +0,15 +0,17 +0,20 +0,23 +0,26 140 -0,035 -0,03 -0,02 -0,02 0,00 0,00 +0,01 +0,03 +0,04 +0,06 +0,07 +0,09 +0,11 +0,13 +0,16 +0,18 +0,21 +0,24 +0,27 150 -0,035 -0,03 -0,02 -0,01 0,00 +0,01 +0,02 +0,03 +0,05 +0,07 +0,08 +0,10 +0,12 +0,14 +0 17 +0 19 +0,22 +0,25 +0,28
10(a). SACAROSA (Mtodo cualitativo colorimtrico) 10(a).1. Principio. El vino se defeca por plomo acetato, magnesio y potasio permanganato a pH = 8-9. Se trata el defecado a 100C con difenilamina en medio clorhdrico y actico. El producto de condensacin obtenido en presencia de sacarosa se extrae por cloroformo que se colorea de azul. 10(a).2. Material y aparatos. 10(a).2.1. Bao de agua con temperatura controlada. 10(a).3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 121828 Difenilamina PA
121086 211276 131466 131527 131716 131252
Etanol absoluto PA Magnesio Oxido QP Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Potasio Permanganato PA-ACS-ISO Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO
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10(a).3.1. Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACSISO. 10(a).3.2. Magnesio Oxido QP. 10(a).3.3. Potasio Permanganato al 2%. 10(a).3.4. Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO. 10(a).3.5. Reactivo de Difenilamina. A 10 ml de solucin de Difenilamina PA al 10% en Etanol absoluto PA, aadir 20 ml de Acido Actico glacial PA-ACSISO y 70 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO.
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Para comprobar la pureza de este reactivo aadir 2 ml de reactivo de Difenilamina y 2 ml de Agua PA-ACS, calentar en bao de agua hirviendo durante 5 minutos. Enfriar la solucin bruscamente por inmersin en agua fra y extraer con 1 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO, no debiendo presentar el lquido extrado coloracin azul. 10(a).4. Procedimiento. Disolver en 10 ml de Agua PA-ACS 100 a 200 mg de Magnesio Oxido QP y unos 200 mg de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO. Llevar al bao de agua que se mantiene a 90-95C durante 3 a 5 minutos. Aadir 2 ml del vino que debe estar limpio y con una riqueza en azcar inferior al 1%. Diluir la muestra si la riqueza en azcar es superior a la indicada como lmite. Comprobar si la dosis de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO es suficiente y no excesiva, lo que disminuira la sensibilidad de la reaccin. Para ello aadir gota a gota, al lquido que sobrenada, una solucin concentrada de Plomo II Acetato, hasta que no se acuse enturbiamiento al caer la gota sobre el lquido. Aadir entonces solucin saturada de Sodio Sulfato para eliminar el exceso de Plomo. Aadir 0,5 ml de la solucin de Potasio Permanganato y mantener la mezcla en el bao de agua a 90-95 durante 10 minutos. Enfriar bruscamente por inmersin en agua fra, y filtrar. Puede aparecer una dbil coloracin amarilla, pero no influye en la reaccin. Poner en un tubo de ensayo 2 ml del lquido filtrado, aadir 2 ml del reactivo de Difenilamina; mantener en bao de agua hirviendo, durante 5 minutos exactamente. Enfriar por inmersin en agua fra, aadir 1 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO y observar la coloracin que se forma. 10(a).5. Expresin de los resultados. Los vinos secos no adicionados con sacarosa pueden dar una coloracin gris-azulada muy ligera, pero, en presencia de sacarosa, aparece una franca coloracin azul. Los vinos ricos en azcar dan una coloracin amarillo oro en ausencia de sacarosa, pero en presencia de sta, la coloracin es verde franco. Los resultados son sensibles para riquezas de sacarosa desde 0,2 mg. 10(a).6. Referencia. 10(a).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A-S, 1-2. 1969. 10(b). SACAROSA (Mtodo cuantitativo) 10(b).l. Principio. La sacarosa se determina por la diferencia de los poderes reductores antes y despus de la hidrlisis clorhdrica del lquido procedente de la defecacin del vino. 10(b).2. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 10(b).2.1. Acido Clorhdrico 35% PA-ISO. 10(b).3. Procedimiento. Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml cada uno el mismo volumen del lquido de defecacin, segn las normas indicadas para el anlisis de azcares. La defecacin se realiza como en 7(b) con eliminacin previa del alcohol. Aadir a cada matraz un volumen de Acido Clorhdrico 35% PA-ISO a razn de 0,3 ml por 10 ml de lquido azucarado. En uno de los matraces aadir inmediatamente 0,3 ml de Sodio Hidrxido 12N (disolver Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada), por cada 10 ml de lquido azucarado procediendo a la valoracin de los azcares reductores. Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a bao de agua hirviendo durante 2 minutos. Aadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidrxido 12N que al otro matraz y valorar. 10(b).4. Clculo. La diferencia entre las cantidades de azcares reductores encontrada en los resultados de estas dos valoraciones, multiplicada por 0,95 da la riqueza en sacarosa de la muestra en estudio. Este resultado se expresa en g por l de vino, teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmente en el curso de la defecacin y del volumen de la muestra de vino que se someti a la defecacin. 10(b).5. Referencia. 10(b).5.l. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A5, 4, 1969.-80 11. CENIZAS 11.1. Principio. Se denominan cenizas de un vino, al conjunto de los productos de incineracin del residuo de evaporacin de un volumen conocido del vino, realizada de manera que se puedan obtener todos los cationes (excepto amonio) en forma de carbonatos y otras sales minerales anhidras.
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11.2. Materiales y aparatos. 11.2.1. Horno elctrico regulable. 11.2.2. Bao de agua y bao de arena. 11.2.3. Lmpara de infrarrojo. 11.2.4. Cpsula de platino o de cuarzo de 70 mm de dimetro y 25 mm de altura, fondo plano. 11.3. Procedimiento. Colocar 20 ml de vino en una cpsula tarada en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con precaucin en bao de agua, despus de evaporar hasta consistencia siruposa, continuar el calentamiento sobre bao de arena con moderacin y durante una media hora. Es conveniente ayudar a la evaporacin con la aplicacin de rayos infrarrojos hasta carbonizacin. Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cpsula al horno elctrico a 525C 25 y con aireacin continua. Despus de 5 minutos de carbonizacin completa, sacar la cpsula del horno, dejar enfriar y aadir 5 ml de agua que se evaporan en bao de agua, y llevar de nuevo al horno a 525C. Si la combustin de las partes carbonosas no se consigue en 15 minutos, volver a comenzar la operacin de adicin de agua, evaporacin y recalcinacin. Cuando se trate de un vino rico en azcares, se recomienda adicionar unas gotas de aceite puro vegetal al extracto, antes de comenzar la calcinacin para impedir el desbordamiento de la masa del contenido. La duracin de la primera carbonizacin deber ser en este caso 15 minutos. Despus de enfriar en el desecador cpsula y cenizas, se pesan. 11.4. Clculo. Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l. Cenizas = 50 P g/l P = peso en g de las cenizas contenidas en 20 ml de vino. Dar los resultados con una aproximacin de 0,03 g/l. 11.5. Referencias. 11.5.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A6, 1. 1969. 11.5.2. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos, pg. 106. Ministerio de Agricultura, 1956.
disolver en el mismo y en caliente, las cenizas, y empleando el anaranjado de metilo como indicador. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. Bao de agua. 12.2.2. Pipeta de 10 ml. 12.2.3. Varilla de vidrio. 12.2.4. Bureta de valoraciones. 12.3. Reactivos. 181061 Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV 171432 Anaranjado de Metilo solucin 0,1% RE 181693 Sodio Hidrxido 0,1mol/l (0,1N) SV 12.3.1. Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV. 12.3.2. Anaranjado de Metilo solucin 0,1% RE. 12.3.3. Sodio Hidrxido 0,1mol/l (0,1N) SV. 12.4. Procedimiento. Aadir a las cenizas ya pesadas, 10 ml de Acido Sulfrico 0,05mol/l (0,1N) SV y llevar la cpsula a un bao de agua hirviendo durante un cuarto de hora, frotando varias veces el fondo de la cpsula con una varilla de vidrio para activar la disolucin de las partculas difciles de disolver. Aadir en seguida dos gotas de Anaranjado de Metilo solucin 0,1% RE y valorar el exceso de Acido Sulfrico con Sodio Hidrxido 0,1mol/l (0,1N) SV, hasta que el indicador vire a amarillo. 12.5. Clculo. Calcular la alcalinidad de las cenizas expresadas en meq/l o en g/l de potasio carbonato. Alcalinidad de las cenizas = 5 (10 - V) meq/l Alcalinidad de las cenizas = 0,345 (10 - V) g/l de potasio carbonato. V = volumen en ml de sodio hidrxido 0,1N utilizados. Dar los resultados con una aproximacin de 0,5 g por l en potasio carbonato. 12.6. Referencia. 12.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A7, 1-2, 1969. 13. FOSFATOS 13.1. Principio. Oxidacin del vino, evaporacin e incineracin. Pre-cipitacin del cido fosfrico en cido ntrico al estado de amonio fosfomolibdato. Esta sal se disuelve por accin de un exceso de sodio hidrxido 0,5N en presencia de formaldehdo. Valoracin del exceso de sodio hidrxido por cido clorhdrico 0,5N en presencia de fenolftalena.
12. ALCALINIDAD DE CENIZAS
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12.1. Principio. Se denomina alcalinidad total de cenizas la suma de los cationes, diferentes del amonio, combinados con los cidos orgnicos del vino. La valoracin se funda en la volumetra con cido sulfrico, valorando en retorno despus de
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13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Cpsula de slice de 70 mm de dimetro. 13.2.2. Bao de arena. 13.2.3. Horno de mufla. 13.2.4. Erlenmeyer de 500 ml. 13.2.5. Vasos de precipitados y elementos para volumetra. 13.2.6. Agitador mecnico. 13.3. Reactivos. 181022 Acido Clorhdrico 0,5 mol/l (0,5N) SV 121737 Acido Ntrico 53% PA 131074 Agua PA-ACS 131134 Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO 131135 Amonio Nitrato PA-ACS-ISO 171327 Fenolftalena solucin 1% RE 131328 Formaldehdo 36,5-38% p/v estabilizado con metanol PA-ACS 181692 Sodio Hidrxido 0,5mol/l (0,5N) SV 13.3.1. Solucin de Acido Ntrico al 25% (d 1,153). Aadir a 440 ml de Acido Ntrico 53% PA Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 13.3.2. Solucin de Amonio Nitrato. Aadir, a 340 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, Agua PAACS hasta 1.000 ml. 13.3.3. Solucin de Amonio Molibdato. Aadir, a 30 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 13.3.4. Solucin de lavado. 50 g de Amonio Nitrato PA-ACS-ISO, 40 ml de Acido Ntrico al 25% y Agua PA-ACS hasta 1 l. 13.4. Procedimiento. Evaporar a sequedad 100 ml de vino en cpsula de cuarzo en sucesivas adiciones. Aadir despus 4 ml de Acido Ntrico 53% PA y calentar progresivamente en el bao de arena y despus en el horno de mufla. Aadir a las cenizas 2 ml de Acido Ntrico 53% PA y evaporar a sequedad en el bao de agua para insolubilizar la slice. Aadir 10 ml de Acido Ntrico al 25%; remover y arrastrar las cenizas a un filtro; lavar la cpsula y filtro con 5 ml del mismo cido y despus con 20-30 ml de Agua PA-ACS. Recoger el filtrado en un Erlenmeyer de unos 500 ml, adicionar 25 ml de solucin de Amonio Nitrato de 340 g por l y agitar. Despus aadir de una vez 80 ml de solucin de Amonio Molibdato 3% y agitar mecnicamente durante 12 minutos a razn de 200 sacudidas por minuto. Decantar y filtrar por papel. Lavar luego el precipitado con 75 ml de lquido de lavado dos veces. Cada lavado no debe durar ms de 10 minutos. Lavar 8 veces ms con Agua PA-ACS. Colocar el filtro y el precipitado en un vaso con 50 ml de Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. Aadir 12,5 ml de Formaldehdo 36,5-38% p/v, estabilizado con metanol PA-ACS neutralizado en presencia de Fenolftalena solucin 1% RE, para disolver el precipitado de Fosfomolibdato. Escurrir el filtro y extender sobre la pared del vaso, por encima del lquido de la solucin. Valorar el exceso de sodio hidrxido con Acido Clorhdrico 0,5 mol/l (0,5N) SV, hasta decoloracin de la Fenolftalena, habiendo sumergido al final nuevamente el filtro. 13.5. Clculo. Calcular el contenido en fosfatos expresado en meq de cido fosfrico (considerado como tricido), o en g de P 0 por l de vino. Fosfatos = 0,577 (50 - V) meq de cido fosfrico. Fosfatos = 0,01365 (50 - V) g de P205 por l de vino. V = volumen en ml de solucin de cido clorhdrico 0,5N. Dar los resultados con una aproximacin de 0,01 g/l.
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13.6. Referencia. 13.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A16, 1-2 1969. 14. CALCIO (Mtodo complexomtrico) 14.1. Principio. Valoracin del calcio por complexometra sobre la solucin ntrica o clorhdrica de las cenizas del vino. 14.2. Material y aparatos. 14.2. (1, 2, 3 y 4) como 11.2. (1, 2, 3 y 4). 14.2.5. Matraces Erlenmeyer de 1.000 ml. 14.2.6. Matraces Erlenmeyer de 100 ml. 14.3. Reactivos. 182318 Acido Clorhdrico 0,25 mol/l (0,25N) SV 182120 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido EDTA Na 2) (o preparar con 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO) Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfnico, Sal Sdica (CALCON) 131074 Agua PA-ACS 182241 Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV (o preparar con 121212 Calcio Carbonato precipitado PA) 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 131687 Sodio Hidrxido 97% lentejas PA-ACS-ISO 14.3.1. Acido Clorhdrico 0,25 mol/l (0,25N) SV. 14.3.2. Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto aadir a 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS hasta 1.000 ml y disolver.
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14.3.3. Leja de Sodio Hidrxido al 40%. Aadir a 40 g de Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO Agua PA-ACS hasta 100 ml. 14.3.4. Indicador de Calcon. Mezclar 1 g de Acido a-Hidroxi-1-(2-Hidroxi-1-Naftilazo)-4-Naftalensulfnico, Sal Sdica con 100 g de Sodio Cloruro PA. 14.3.5. Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver 5,05 g de Calcio Carbonato precipitado PA en la cantidad necesaria de Acido Clorhdrico diluido y completar a 1 litro. Valorar esta solucin por medio de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV en presencia de Calcon en la forma que luego se describe. 14.4. Procedimiento. Evaporar a sequedad en bao de agua hirviendo 50 ml de vino colocados en cpsulas preferentemente de platino. Incinerar el residuo como en 11. Disolver las cenizas en 8 ml de Acido Clorhdrico 0,25 mol/l (0,25N) SV, llevar a un matraz aforado de 50 ml; lavar varias veces la cpsula con Agua PA-ACS vertindola en el matraz. Enrasar y agitar. Tomar 20 ml de la solucin de cenizas y calentar hasta ebullicin, en un Erlenmeyer de unos 100 ml. Dejar enfriar y despus aadir 0,5 ml de solucin de Sodio Hidrxido al 40%, 10 ml de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV y 100 mg aproximadamente de indicador Calcon. Si el color de la mezcla es rojo-vinoso, aadir Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exceso hasta aparicin de color azul-violeta. Evitar una cantidad de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV en exceso relativamente grande, que enmascara el punto de viraje. Valorar el exceso de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV aadiendo Calcio Cloruro 0,05 mol/l (0,05M) SV. El indicador Calcon virar de azul violeta a rojo-vinoso al final de la reaccin. 14.5. Clculo. Calcular el contenido en calcio como iones Ca en meq/l, o como iones Ca expresados en g/l. Calcio = (10 - V) 5 meq/l de ion Ca. Calcio = (10 - V) 0,1 g/l de ion Ca.
14.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A26, 2-3, 1969.
15. MAGNESIO 15.1. Principio. Valoracin del magnesio por complexometra sobre la solucin ntrica o clorhdrica de las cenizas del vino. 15.2. Material y aparatos. 15.2. (1, 2, 3 y 4), como 11.2. (1, 2, 3 y 4). 15.2. (5 y 6), como en 14.2. (5 y 6). 15.3. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 182120 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV 181397 Magnesio Cloruro 0,l mol/l (0,1M) SV (diluir o preparar como se indica en 15.3.4) 211276 Magnesio Oxido QP (*) 171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 171730 Solucin Tampn pH 10 RE (o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO, 121129 Amonaco 25% (en NH3) PA y 131074 Agua PA-ACS) 15.3.1 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV. Como en 14.3.2. 15.3.2. Solucin Tampn pH 10 RE. En su defecto preparar disolviendo 50 g de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en 350 g de Amonaco 25% (en NH3) PA y aadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 15.3.3. Indicador Negro de Eriocromo T. Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS, con 100 g de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO. 15.3.4. Solucin de Magnesio Cloruro 0,05M. En un matraz aforado de 1 l introducir 500 ml de Magnesio Cloruro 0,1mol/l (0,1M) SV, diluir y enrasar con Agua PA-ACS o preparar disolviendo 2,25 g de Magnesio Oxido QP en la cantidad necesaria de Acido Clorhdrico diluido y llevar despus el volumen a 1 litro. Valorar esta solucin con Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV (15.3.1) en presencia de Negro de Eriocromo T (15.3.3) como se indica a continuacin. 15.4. Procedimiento. Tomar 20 ml de la solucin de cenizas antes preparada, llevar a ebullicin en un Erlenmeyer de unos 100 ml, dejar enfriar y aadir 10 ml de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV, 5 ml de Solucin Tampn pH 10 RE, 50 mg aproximadamente de indicador Negro de Eriocromo T. Valorar despus el exceso de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV
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V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M. 14.6. Referencias. 14.6.1. Castino, M. Determinazione complessometrica del Calcio o del Magnesio nei vini. Rivista de Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960.
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con la solucin de Magnesio Cloruro 0,05M. El indicador vira del azul al rojo vinoso. 15.5. Clculo. Calcular el contenido en magnesio expresado en meq/l o en g/l de iones Mg. Magnesio = (V - V) x 5 meq/l Magnesio = (V - V) x 0,06075 g/l de iones Mg. V = volumen en ml de calcio cloruro 0,05M utilizado para valorar el exceso de cido EDTA Na2 0,05M en la determinacin del calcio (14.4). V = volumen en ml de solucin de magnesio cloruro 0,05M. (*) El magnesio xido del comercio est generalmente carbonatado, aun puro, por lo que debe calcinarse. Tomar 5 g en cpsulas de platino; llevar al rojo durante ms de 30 minutos. Dejar enfriar y pesar los 2,25 g. 15.6. Referencias. 15.6.1. Castino, M. Determinazione complessometrica del Calcio o del Magnesio nei vini. Rivista di Viticoltura e di Enologia di Conegliano, 9, 1960. 15.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V., A26, 2-3, 1969. 121085 Etanol 96% v/v PA 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BTH PA-ACS-ISO 141076 Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS 211934 Hierro metal, granulado fino QP 121534 Potasio Tiocianato PA 141699 Sodio metal, barras PRS (o 121237 Carbn Activo polvo PA o 142367 Manganeso IV Oxido 85% precipitado PRS) 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA 16.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 16.3.2. Hidrgeno Perxido de 10 volmenes. Usese Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS y diluir convenientemente. 16.3.3. Eter Dietlico. Destilar el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO antes de su empleo o bien mantenerlo en presencia de Sodio metal, barras PRS o Carbn Activo polvo PA o Manganeso IV Oxido 85% precipitado PRS. 16.3.4. Solucin de Potasio Tiocianato. Aadir a 200 g de Potasio Tiocianato PA Agua PA-ACS hasta 1litro, y disolver. 16.3.5. Solucin de Hierro III Cloruro de 0,1 g de Hierro metal, granulado fino QP por litro. Disolver 0,1 g de Hierro metal, granulado fino QP en 10 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO y 30 ml de Agua PA-ACS. Aadir 1 ml de Acido Ntrico 60% PA-ISO y hervir. Enfriar y aadir Agua PA-ACS hasta 1 litro. Tambin puede prepararse la siguiente solucin de Hierro. Disolver 0,863 g de Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA-ACS-ISO, 0,863 g de Amonio Cloruro PAACS-ISO (*) y 10 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO en 100 ml de Agua PA-ACS y diluir hasta 1.000 ml. (*). En el original indica amonio, entendemos se trata de Amonio Cloruro. 16.3.6. Etanol de 20. Usese Etanol 96% v/v PA y diluir convenientemente. 16.4. Procedimiento. 16.4.1. Determinacin del hierro total. (Frrico + ferroso). 16.4.1.1. Vinos blancos o poco coloreados. Colocar 10 ml de vino en un tubo de 200 x 20 mm, aadir 1 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO, 5 gotas de Hidrgeno Perxido y 1 ml de solucion de Potasio Tiocianato. A la aparicin del color aadir 20 ml de Eter Dietlico, agitar para mezclar las dos fases sin emulsionar y dejar decantar 5 minutos. Determinar la absorbancia del lquido decantado en espectrofotmetro colormetro a 508 nm. Ajustar el espectrofotmetro a cero, utilizando como prueba en blanco 10 ml de vino acidulados con 1 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO y diluidos con 1 ml de Agua PA-ACS. De esta forma se compen-
16. HIERRO (Mtodo colorimtrico del sulfocianuro)
16.1. Principio. El hierro oxidado por el agua oxigenada se combina con el ion sulfocinico en medio clorhdrico. El color rojo se compara con escala patrn o se mide por espectrofotometra. Para los vinos tintos, el hierro sulfocianuro se extrae con ter. Para valorar solamente el hierro trivalente, se suprime la adicin del agua oxigenada. 16.2. Material y aparatos. 16.2.1. Espectrofotmetro o colormetro para lectura a 508 nm de longitud de onda. 16.2.2. Tubos de 200 x 20 mm. 16.2.3. Bola de decantacin de 50 ml. 16.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131036 Acido Nitrico 60% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO 131365 Amonio Hierro lll Sulfato 12-hidrato PA-ACS-ISO
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sa la influencia del color del vino y de la posible aparicin de color o del reavivado del vino, ambas coloraciones debidas a la acidez aadida al vino. Obtener una curva, procediendo en la forma anteriormente descrita y utilizando en vez de 10 ml de vino mezclas de 5 ml de alcohol de 20 y porciones de 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 ml, completadas hasta 5 ml con Agua PA-ACS. Estas mezclas contendrn, respectivamente, 5,10, 15, 20 y 25 mg/l de hierro. 16.4.1.2. Vinos tintos.- Como en 16.4.1.1, pero utilizando slo 0,2 ml de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO. El exceso de acidez dificulta la extraccin del hierro sulfocianuro por el ter. 16.4.2. Determinacin del hierro trivalente. Como en 16.4.1, pero sin adicionar Hidrgeno Perxido. 16.5. Clculo. Calcular el contenido en hierro expresado en mg/l por comparacin de la absorbancia con la curva patrn. 16.6. Observaciones. En lugar del ter algunos autores (16.7.2) recomiendan el empleo del etilo acetato, que no tiene el inconveniente de la posible presencia de perxidos; sin embargo, en algunos vinos de intenso color de nuestro pas se ha observado extraccin de parte de la materia colorante con el etilo acetato, lo que no sucede con el ter. 16.7. Referencias. 16.7.1. Ribereau-Gayon, J., y Peynaud, E. Analyse et Controle des Vins, pg. 194, 1958. 16.7.2. Jaulmes, P.; Brun, S.; Tour, C.; Cabanis, J.C. Dosage direct du fer dans les vins. Socit Pharmacie Montpellier, 24:2, 1964. 17. COBRE 17.1. Principio. El sodio dietilditiocarbamato reacciona con el cobre (reaccin de Delepine), dando la sal correspondiente a este metal y coloracin amarilla oro, cuya intensidad se mide por colorimetra o espectrofotometra. Para evitar interferencias debidas a la presencia de hierro y otros cationes polivalentes presentes en el vino se emplea la sal disdica del cido etilendiaminotetraactico, que forma complejos solubles y muy estables a pH = 8. Tambin puede utilizarse el amonio citrato para evitar la interferencia del hierro. 17.2. Material y aparatos. 17.2.1. Espectrofotmetro o colormetro con filtro para longitud de onda de 420 nm.
17.2.2. Bola de decantacin de unos 100 ml. 17.3. Reactivos. 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO (Acido EDTA Na2 2-hidrato) (o 131120 di-Amonio Hidrgeno Citrato PA-ACS) 131074 Agua PA-ACS 121129 Amonaco 25% (en NH3) PA 131245 Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO 131091 Metanol PA-ACS-ISO 131668 Sodio Dietilditiocarbamato 3-hidrato PA-ACS 17.3.1. Solucin acuosa al 0,1% de Sodio Dietilditiocarbamato. 17.3.2. Suspensin de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica al 20%, o bien solucin acuosa de Amonio Citrato al 20%. 17.3.3. Solucin amoniacal al 15%. Diluir convenietemente el Amonaco 25% (en NH3) PA con Agua PA-ACS. 17.3.4. Metanol PA-ACS-ISO. 17.3.5. Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO. 17.3.6. Agua bidestilada en vidrio. Utilizarla tambin para la preparacin de reactivos. 17.4. Procedimiento. Poner en una bola de decantacin 10 ml del vino, aadir 5 ml de una suspensin del Acido EDTA Na2 2-hidrato (o 5 ml de solucinde Amonio Citrato) y llevar a pH 8 con la solucin amoniacal. Aadir 1 ml de reactivo de Sodio Dietilditiocarbamato y 5 ml de Metanol PA-ACS-ISO (para evitar emulsin), y agitar durante 1 minuto. Extraer varias veces con Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO (agitando cada vez durante 1 minuto) hasta recoger 20 ml, cuidando que no pasen restos de agua, pues stos dan enturbiamiento con el Carbono Tetracloruro PA-ACS-ISO. Si pasa alguna gota, filtrar por papel de filtro puro, quedando las trazas de agua en el papel. Determinar la absorbancia en el espectrofotmetro a 420 nm de longitud de onda. Para la prueba en blanco utilizar los mismos reactivos en las mismas proporciones, sustituyendo el volumen de vino por otro igual de Agua bidestilada en aparato de vidrio. La curva que previamente ser construida a partir de lecturas correspondientes a escala de diferentes riquezas de cobre es una lnea recta, por obedecer a la ley de Lamber-Beer. En el intervalo en que se opera con 1 ml de reactivo pueden valorarse 10 ppm de cobre; para valores superiores, se aadirn 2 ml o se toma menor volumen de muestra. 17.5. Clculo. El valor obtenido para la absorbancia a 420 nm
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se lleva a la curva patrn y se expresa el correspondiente contenido en cobre en ppm. 17.6. Referencia. 17.6.1. Garoglio, P. G., y Stella, C. Methodi ufficiali di analisi per i mosti, i vini e gli aceti, pg. 75, 1958. 18. POTASIO (Fotometra de llama) 18.1. Principio. Se utiliza una solucin de referencia con 100 mg de potasio por litro y con diversos aniones, cationes y materia orgnica en proporciones tales que den un compuesto similar a un vino diluido a 1/10 con agua. 18.2. Material y aparatos. 18.2.1. Fotmetro de llama y accesorios. 18.2.2. Pipetas de 10 ml. 18.2.3. Matraces aforados de 1.000 ml. 18.3. Reactivos. 131808 Acido Ctrico anhidro PA-ACS 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS Alilo Isotiocianato 121221 Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA 121085 Etanol 96% v/v PA 141339 Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 211794 Magnesio Cloruro 50% MgCl2 QP 121486 Potasio Hidrgeno Tartrato PA 131621 Sacarosa PA-ACS 131965 Sodio di-Hidrgeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS 141859 Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 18.3.1. Solucin de referencia. Disolver 481,3 mg de Potasio Hidrgeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS muy caliente y mezclar con una solucin de 10 ml de Etanol 96% v/v PA, 700 mg de Aido Ctrico anhidro PA-ACS, 300 mg de Sacarosa PA-ACS, 1.000 mg de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX, 20 mg de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS, 10 mg de Calcio Cloruro anhidro 95% polvo PA y 10 mg de Magnesio Cloruro 50% MgCl2 polvo QP en 400 ml de Agua PA-ACS. Completar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. Aadir dos gotas de Alilo Isotiocianato para conservacin ms segura de la solucin. 18.3.2. Solucin de dilucin. Igual que la anterior, cambiando el Potasio Hidrgeno Tartrato PA por 383 mg de Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO. Para preparar la solucin de referencia, comenzar por disolver 481,3 mg de Potasio Hidrgeno Tartrato PA en medio litro de Agua PA-ACS muy caliente y mezclar esta solucin con los otros componentes, previamente disueltos en 400 ml de Agua PA-ACS; enrasar despus a 1 litro exactamente. Para la conservacin ms segura de esta solucin se aaden 2 gotas de Alilo isotiocianato. Con vinos dulces, aadir una cantidad de Sacarosa PA-ACS igual a la dcima parte de la que contenga el vino. Aadir a la solucin de referencia una cantidad de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS equivalente al contenido en sodio del vino cuando este contenido sea superior al equivalente a 20 mg de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS. En el caso del fraude por adicin de 1 g/l de Sodio Salicilato, aadir 100 mg de Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX por litro de la solucin de referencia y de dilucin. El Sodio Salicilato tiene una influencia muy marcada en el resultado del anlisis. 18.4. Procedimiento. Regular el aparato y establecer una curva de calibracin con la solucin de referencia pura y con diversas diluciones de la solucin de referencia diluida a 1/20, 1/10, 1/5, 1/2, con la solucin de dilucin. Diluir el vino a 1/10 con agua y hacer la determinacin en el fotmetro. Si la lectura no queda comprendida entre los valores 40 y 100 de la escala del galvanmetro, diluir convenientemente el vino con solucin de dilucin. 18.5. Clculo. Calcular el contenido en potasio expresado en g/l con una aproximacin de 0,02 g/l. Potasio = 10 L g/l L = valor correspondiente a la lectura de la escala del galvanmetro en la curva de calibracin. 18.6. Referencia. 18.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A8, 1-6, 1969. 19. SODIO (Fotometra de llama) 19.1. Principio. Como en 18.1, referido a sodio. 19.2. Material y aparatos. Como en 18.2. 19.3. Reactivos. 131808 Acido Ctrico anhidro PA-ACS 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS Alilo Isotiocianato
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121221 121085 141339 211794 131621 131659 141859
Calcio Cloruro anhidro 95%, polvo PA Etanol 96% v/v PA Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX Magnesio Cloruro 50% MgCl2 QP Sacarosa PA-ACS Sodio Cloruro PA-ACS-ISO Sodio Salicilato (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX
19.3.1. Solucin de referencia.- Como en 18.3.1, sustituyendo los 20 mg de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 1-hidrato PA-ACS por 50,84 mg de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO. 19.3.2. Solucin de dilucin.- Como en 18.3.2, suprimiendo los 50,84 mg de Sodio Cloruro PAACS-ISO. 19.4. Procedimiento. Como en 18.4. Para la curva de calibracin, utilizar la solucin de referencia diluida a 1/20, 1/10, 1/2, 3/4. 19.5. Clculo. Calcular el contenido en sodio expresado en g/l con una aproximacin de 0,05 g/l. 19.6. Referencia. 19.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A25, 1-2, 1969. 20. ACIDEZ TOTAL 20.1. Principio. La acidez total de un vino se considera como la suma de los cidos titulables cuando se lleva el vino a pH = 7 por adicin de un licor alcalino valorado. El cido carbnico y el anhdrido sulfuroso libre y combinado no se consideran comprendidos en la acidez total. El gas carbnico se elimina previamente del vino por agitacin en fro y con vaco parcial. 20.2. Material y aparatos. 20.2.1. Potencimetro con electrodo de vidrio. 20.2.2. Agitador magntico. 20.2.3. Puente con solucin saturada de ClK para evitar la introduccin del electrodo de calomelanos en el vino. 20.2.4. Kitasato de un litro. 20.2.5. Pipeta de 20 ml. 20.2.6. Vaso de 100 ml de capacidad. 20.2.7. Bureta de 50 ml. 20.3. Reactivos. 171495 Potasio Cloruro solucin saturada RE 171694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) RE 20.3.1. Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) RE.
20.4. Procedimiento. Poner 50 ml de vino en un Kitasato de 1l de capacidad, conectar al vaco agitando al mismo tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se aprecia a los pocos momentos. Observar atentamente el momento en que dejan de desprenderse las burbujas, desconectar del vaco. Tomar 20 ml del vino sin CO2 y llevar a un vaso de unos 100 ml de capacidad, introducir el electrodo de vidrio en el vino y el de calomelanos en vaso lateral con Potasio Cloruro solucin saturada RE. Disponer un puente de la misma solucin en tubo de vidrio con los extremos uno en cada vaso estableciendo contacto. Poner en marcha el agitador y aadir desde bureta Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) RE al vino hasta que la aguja del potencimetro marque pH = 7, manteniendo el agitador en marcha durante la operacin, que no debe durar ms de cinco minutos. 20.5. Clculo. Calcular la acidez total expresada en meq/l con una aproximacin de 0,1 meq/l o en g de cido tartrico. V Acidez total = 10 - 0,35 V - 0,25 V meq/l 2 V Acidez total = 0,75 ( - 0,035 V - 0,025 V) g/l 2 de cido tartrico. V = volumen en ml de sodio hidrxido 0,1N. V = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para la oxidacin de anhdrido sulfuroso libre (21.-). V = volumen en ml de yodo 0,01N utilizado para la oxidacin del anhdrido sulfuroso combinado (21.-). 20.6. Referencias. 20.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. A10, 1-3, 1969. 20.6.2. Jaulmes, P. La mesure de lacidit total des vins. Annal des Falsifications et des Fraudes, 556, 1955. NOTA: Organismos como la American Society of Enologist y la Association of Official Analytical Chemist, aconsejan que el punto de viraje sea a pH 8,2 en lugar de 7,0 por tratarse de una valoracin de cidos dbiles con una base fuerte.
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21. ACIDEZ VOLATIL 21.1. Principio. La acidez voltil est constituida por la parte de cidos grasos pertenecientes a la serie actica que se encuentra en los vinos, ya sea en estado libre o de sal. Se determina mediante la separacin de los cidos voltiles por arrastre con vapor de agua y rectificacin de los vapores. Se debe evitar con precaucin la presencia de gas carbnico en el destilado. La acidez del anhdrido sulfuroso libre y combinado arrastrados con el destilado no deben comprenderse en la acidez voltil, por lo que hay que restar la equivalencia de su acidez de la del destilado, as como la del cido srbico eventualmente presente. Para estas correcciones se sigue la norma Jaulmes (21.7.2), en la que se considera como completa la influencia de SO2 libre y slo la mitad de la del combinado. 21.2. Material y aparatos. 21.2.1. Aparato para destilacin aislada (fig.21.I). 21.2.1.1. Matraz de generador de vapor de 3.500 ml. El agua condensada en el tubo de unin del matraz con el barbotador se purga por el purgador (c). 21.2.1.2. Barbotador (b).- Tubo cilndrico de 3 cm de dimetro y 27 cm de altura. Este tubo reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de dimetro, con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) por el que entra el vapor en el barbotador debe llegar a 1 cm del fondo. 21.2.1.3. Columna rectificadora (e) .- Constituida por un tubo cilndrico de 20 mm de dimetro y 50 cm de altura, conteniendo una hlice de tela de acero inoxidable nmero 100 plegada, con 15 mm de paso. 21.2.1.4. Refrigerante de West (f).- De 40 cm de longitud activa, colocado verticalmente. 21.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131066 Acido L (+)-Tartrico PA-ACS-ISO 171073 Agua de Cal solucin saturada RE (o 171071 Agua de Barita solucin saturada RE) 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO 181694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV 21.3.1. Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. 21.3.2. Solucin de Fenolftalena al 1% en Etanol 96% v/v PA. Usese Fenolftalena PA-ACS y diluir convenientemente. 21.3.3. Solucin de Yodo 0,01N. Diluir Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y determinar el factor. 21.3.4. Almidn soluble RE. 21.4. Procedimiento. Alimentar el generador de vapor con Agua de Cal solucin saturada RE o Agua de Barita solucin saturada RE limpia, mantenindolo lleno hasta unos 2/3 de su volumen. Poner en el barbotador 20 ml del vino exento de gas carbnico como en 20.4. Aadir al vino unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartrico PAACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor, manteniendo abierta la salida del tubo purgador del vapor; despus de cerrar sta, calentar el barbotador. Durante la operacin se regula el calentamiento de forma que el volumen de lquido en el barbotador no pase sensiblemente de los 20 ml iniciales. Destilar en unos 12-15 minutos 250 ml. Valorar con Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia de dos gotas de Fenolftalena como indicador. Valorar el sulfuroso libre en este destilado, aadiendo al terminar la anterior valoracin una gota de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente y valorar el SO2 libre con solucin de Yodo 0,01N, aadiendo tambin 2 ml de Almidn soluble RE como indicador y un cristal de Potasio Yoduro PA-ISO. Para determinar el Acido Sulfuroso combinado con el Acetaldehdo, aadir 20 ml de solucin saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACSISO (el lquido toma un color rosa plido) y valorar nuevamente con solucin de Yodo 0,01N. 21.5. Clculo. Calcular la acidez voltil expresada en meq/l, con una aproximacin de 0,2 ml, o en g/l de cido sulfrico o de cido actico, con una aproximacin de 0,1 g/l. Acidez voltil = 5 (V - V/10 - V/20) meq/l 0,49 Acidez voltil = (V - V/10 - V/20) g/l de 2 cido sulfrico. 0,6 Acidez voltil = (V - V/10 - V/20) g/l de 2 cido actico. V = volumen en ml de sodio hidrxido 0,1N. V= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la oxidacin del anhdrido sulfuroso libre. V= volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la
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oxidacin del anhdrido sulfuroso combinado con el acetaldehdo. 21.6. Observaciones. En la destilacin del vino para la determinacin de la acidez voltil el cido srbico pasa casi en su totalidad al destilado, junto con el cido actico, falseando el resultado del anlisis. Para corregir el resultado, determinar el cido srbico en el destilado como en 29, procediendo en la siguiente forma simplificada: tomar 0,5 ml del destilado de la acidez voltil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, aadir 1,5 ml de la solucin (a), dejar la cubeta al aire durante unos minutos y medir despus la absorbancia en el espectrofotmetro a 256 nm. Graduar el espectrofotmetro con 0,5 ml de la solucin (b) y 1,5 ml de la solucin (a). 21.7. Referencias. 21.7.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V. All, 1-4, 1969. 21.7.2. Jaulmes, P. Analyse des Vins, 2a. ed., 1951.
22. ACIDO SORBICO EN EL DESTILADO PARA ACIDEZ VOLATIL 22.1. Principio. En la destilacin del vino para la determinacin de la acidez voltil el cido srbico pasa casi en su totalidad al destilado junto con el cido actico, falseando el resultado del analsis. Para valorar este cido srbico se parte de una muestra de 0,5 ml de destilado (lo que no supone un error sensible) y se valora por espectrofotometra en el ultravioleta. 22.2. Material y aparatos. 22.2.1. Espectrofotmetro ultravioleta. 22.2.2. Cubetas de cuarzo de 1 cm. 22.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml. 22.3. Reactivos. 141055 Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX 131074 Agua PA-ACS 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 121531 Potasio Sorbato PA 121638 Sodio Hidrgeno Carbonato PA
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Figura 21.I.- Aparato para destilacin aislada
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22.3.1. Solucin a): Mezclar 0,5 g de Sodio Hidrgeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y aadir Agua PAACS hasta un litro. 22.3.2. Solucin b): Llevar 20 mg de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX a matraz de un litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a un litro. En vez de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse 26,8 g de Potasio Sorbato PA. 22.4. Procedimiento. Tomar 0,5 ml del destilado de la acidez voltil, llevar a la cubeta de 1 cm de espesor interno, aadir 1,5 ml de la solucin a), dejar la cubeta al aire durante unos minutos y medir despus la absorbancia en el espectrofotmetro a 256 nm. Graduar el espectrofotmetro con 0,5 ml de la solucin b) y 1,5 ml de la solucin a). 22.5. Clculo. Un gramo de cido srbico corresponde a 8,92 ml de solucin normal y a 0,438 g de cido sulfrico. Para todo vino adicionado con 200 mg de cido srbico por litro la correccin sustractiva que corresponde hacer a la acidez voltil es de 1,7 meq o 0,088 g del cido sulfrico o 0,107 g de cido actico por litro de vino. 22.6. Referencia. 22.6.1.Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. All, 3. 23. ACIDEZ FIJA 23.1. Principio. Se considera convencionalmente como acidez fija la diferencia entre acidez total y acidez voltil, ambas expresadas en cido tartrico. No es necesario hacer las correcciones por eventual presencia de anhdrido sulfuroso combinado y libre. 24(a). ACIDO TARTARICO TOTAL (Mtodo del calcio racemato) 24(a).1. Principio. Adicin al vino de cido tartrico levgiro que en unin con el cido tartrico dextrgiro del vino y en presencia de solucin de calcio, forman en condiciones determinadas calcio racemato insoluble. En el mtodo adoptado se determinan las condiciones de precipitacin del calcio racemato, fijando la solubilidad del calcio tartrato levgiro (que tambin se forma) y las del calcio racemato en funcin del pH y de la riqueza en iones de calcio. Con estos datos se ha fijado un pH conveniente para que precipite el calcio racemato y se solubilice el tartrato levgiro. 24(a).2. Material y aparatos. 24(a).2.1. Vaso cilndrico de 600 ml. 24(a).2.2. Filtros de porosidades nmeros 4 y 2. 24(a).2.3. Kitasato y trompa de agua para vaco. 24(a).2.4. Material accesorio para una volumetra. 24(a).3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS Amonio D(-)-Tartrato 121212 Calcio Carbonato precipitado PA 24(a).3.1. Solucin de Calcio Acetato de 10 g de Calcio por litro. Mezclar en matraz aforado de 1.000 ml 25 g de Calcio Carbonato precipitado PA con 40 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y enrasar con Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 24(a).3.2. Calcio Racemato cristalizado. En un vaso, introducir 20 ml de una solucin de Acido L(+)-Tartrico de 5 g por litro, 100 ml de Agua PAACS, 20 ml de una solucin de Amonio Tartrato levgiro de 6,126 g por litro y 6 ml de la solucin de Calcio Acetato. Dejar precipitar durante dos horas. Recoger el precipitado sobre un filtro de porosidad nmero 4, lavando y arrastrando cuatro veces. Secar en estufa a 70 hasta peso constante. Se obtienen unos 340 mg de Calcio Racemato cristalizado. Conservar en frasco tapado. 24(a).3.3. Licor de precipitacin. Introducir en matraz aforado de 1.000 ml 150 g de Amonio D(-)Tartrato levgiro, 8,8 ml de solucin de Calcio de 10 g/l y enrasar con Agua PA-ACS. Por ser el Calcio Racemato ligeramente soluble en este licor, conviene saturarlo antes de su empleo, aadiendo 5 g de Calcio Racemato a un litro de este licor. Agitar durante 12 horas y filtrar. 24(a).4. Procedimiento. 24(a).4.1. Precipitacin del Racemato.- En un vaso cilndrico de 600 ml introducir 500 ml de licor de precipitacin y 10 ml de vino. Mezclar y dejar precipitar durante 24 horas. 24(a) 4.2. Valoracin gravimtrica.- Filtrar sobre filtro poroso nmero 2, tarado y puesto sobre el Kitasato, recogiendo el precipitado. Lavar el vaso en el que se ha efectuado la precipitacin y arrastrar las ltimas partculas de precipitado con el lquido ya filtrado. Secar en estufa a 70 hasta peso constante. 24(a).5. Clculo. Calcular el cido tartrico expresado en g/l de vino o en g de potasio bitartrato. Acido tartrico = 28,84 x P g/l
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Acido tartrico = 36,15 x P g de potasio bitartrato. P = peso en g del calcio racemato, cristalizado con cuatro molculas de agua. 24(a).6. Referencia. 24(a).6.1. Jaulmes, P.; Brum, S.; Cabanis, J. Comunicacin nmero 304 de Mtodos de Anlisis de Vinos. 0. I. V., 1969. 24(b). ACIDO TARTARICO TOTAL (Mtodo complexomtrico) 24(b).1. Principio. Como en 24(a).1. 24(b).2. Material y aparatos. 24(b).2. (1, 2, 3, 4) como 24 (a) .2. (1, 2, 3, 4). 24(b).3. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 182120 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV (Acido EDTA Na2 0,05M SV) (o preparar con 131669 Acido EDTA Na2 2-hidrato PA-ACS-ISO) 131074 Agua PA-ACS 211276 Magnesio Oxido QP 171439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 181691 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 272172 Tampn, Solucin pH 9,00 0,02 (20C) ST (o preparar con 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO, 121129 Amonaco 25% (en NH3) PA y Agua PA-ACS) 24(b).3.1. Solucin Tampn pH 9,00 0,02 (20C) ST, o preparar mezclando 54 g de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO, 350 ml de Amonaco 25% (en NH3) PA y completar con Agua PA-ACS hasta un litro. 24(b).3.2. Indicador de Negro de Eriocromo T. Mezclar 1 g de Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS con 100 g de Sodi Cloruro PA-ACS-ISO. 24(b).3.3. Solucin de Magnesio 0,05M. Disolver 2,25 g de Magnesio Oxido QP (para asegurar que no est carbonatado se recomienda calcinar 5 g de Magnesio Oxido QP al rojo en horno elctrico durante 30 minutos, enfriar y pesar 2,25 g). Hacer la disolucin en cantidad necesaria de Acido Clorhdrico diluido (10%) y luego se enrasa a un litro. Valorar esta solucin con Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV en presencia de Negro de Eriocromo T. 24(b).3.4. Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV. En su defecto disolver 18,61 g de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO en 1 litro de Agua PA-ACS.
24(b).3.5. Acido Clorhdrico diluido a 1/5 (v/v). Diluir Acido Clorhdrico 35% PA-ISO con Agua PAACS. 24(b).3.6. Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. 24(b).4. Procedimiento. Disolver en 10 ml de Acido Clorhdrico diluido el precipitado de Racemato recogido sobre el crisol filtrante. Lavar el crisol filtrante con unos 50 ml de Agua PA-ACS. Aadir un volumen de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV suficiente para neutralizar la solucin (unos 20-22 ml). Aadir despus 5 ml de Solucin Tampn pH = 9, 5 ml de sal de magnesio 0,05M y 50 mg de indicador Negro de Eriocromo T. Valorar con Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 0,05 mol/l (0,05M) SV. 24(b).5. Clculo. Acido tartrico en g/l de vino = (V - 5) 3,75. Acido tartrico expresado en g/l de potasio bitartrato = (V - 5) 4,70. V = volumen en ml de cido EDTA Na2 0,05M. La expresin de los resultados ser en potasio bitartrato y con una aproximacin de 0,5 miliequivalentes por litro, o de 0,05 g / l. 25. ACIDO LACTICO 25.1. Principio. Aislamiento del cido lctico mediante columna de resinas cambiadoras de aniones, oxidacin a acetaldehdo y valoracin colorimtrica por la reaccin coloreada del acetaldehdo con la piperidina. 25.2. Material y aparatos. 25.2.1. Espectrofotmetro y accesorios. 25.2.2. Tubo de vidrio o bureta de 10-11 mm de dimetro y 30 cm de longitud con llave en la parte inferior. 25.2.3. Lana de Vidrio, lavada QP. 25.2.4. Resina Lewatit MP 600 (*) (aninica fuerte l) 25.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131034 Acido L(+)-Lactico 85% PA-ACS 182105 Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV 131074 Agua PA-ACS 121248 Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA 211376 Lana de Vidrio lavada QP 162377 Piperidina PS Resina Lewatit MP 600 (aninica fuerte I) 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 181691 Sodio Hidrxido 1mol/l (1N) SV 121705 Sodio Nitroprusiano 2-hidrato PA 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO 141717 Sodio Sulfito anhidro PRS
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25.3.1. Solucin de Cerio IV Sulfato 0,1M en Acido Sulfrico 0,7N. Disolver en fro 40,431 g de Cerio IV Sulfato 4-hidrato PA en 350 ml de Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV exactamente valorado. No calentar, pues se formara un cerio IV xido insoluble. Llevar la solucin a 1.000 ml con Agua PA-ACS. 25.3.2. Solucin valorada de Sodio Hidrxido 2,5N. Disolver Sodio Hidrxido lentejas PA-ACSISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentracin indicada y determinar el factor. 25.3.3. Solucin de Sodio Acetato al 27%. Disolver 270 g de Sodio Acetato anhidro PA-ACS en Agua PA-ACS y completar 1.000 ml. 25.3.4. Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV. 25.3.5. Solucin de Sodio Nitroprusiato al 2%. Disolver 2 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA en Agua PA-ACS, despus completar a 100 ml. Conservar tapado en la oscuridad. La solucin no debe tener ms de ocho das. 25.3.6. Solucin de Piperidina al 10%. Llevar a un matraz de 100 ml, 10 ml de Piperidina PS y enrasar a 100 ml con Agua PA-ACS. (*). En el original indica resina cambiadora de aniones. Consideramos apropiada la aninica fuerte I. 25.4. Procedimiento. 25.4.1. Preparacin de la columna de resinas aninicas. Colocar Lana de Vidrio lavada QP en el fondo del tubo o bureta 25.2.2, formando tapn de 2-3 mm de altura proximadamente, aadir Agua PAACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapn de Lana de Vidrio, lavada QP. Aadir despus la Resina Lewatit MP 600, que estar conservada en Acido Actico glacial al 30%, agitar esta suspensin y aadir rpidamente un volumen de unos 10 ml. Dejar sedimentar y despus depositar en la superficie un tapn de Lana de Vidrio lavada QP que se conduce a travs del lquido sin resinas con una varilla de vidrio. La Resina Lewatit MP 600 no sirve ms que para una sola vez. 25.4.2. Aislamiento del Acido Lctico. Abrir la llave inferior de la columna y dar salida al Acido Actico diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapn de lana superior. Aadir unos 10 ml de Acido Actico al 0,5%, vaciar hasta igual altura y repetir estos lavados cuatro veces. Despus del ltimo lavado, y con llave cerrada, adicionar 10 ml del vino y sealar la altura alcanzada, con lpiz graso. Dejar salir goteando el vino a razn de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por minuto). Vaciar hasta el nivel del tapn de Lana de Vidrio lavada QP superior. Llenar de nuevo la columna con Acido Actico al 0,5% hasta la seal de lpiz graso. Dejar salir a la misma velocidad que la vez anterior y lavar despus en la misma forma siete veces, cada vez con 10 ml de Agua PA-ACS. Al terminar el ltimo lavado, cerrar la llave cuando el nivel del lquido se encuentre un poco ms arriba del tapn de Lana de Vidrio lavada QP superior. Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluir los cidos fijados en el cambiador de aniones mediante adiciones de solucin de Sodio Sulfito 0,5M (prepararlo disolviendo Sodio Sulfito anhidro PRS en Agua PA-ACS), hasta la seal trazada en el tubo. Resulta prctico, para realizar esta operacin, colocar un frasco con la solucin de Sodio Sulfito unido por el cuello a la columna mediante un manguito de caucho y con unas pinzas para regular la cada del lquido en la bureta o tubo. Puestos as en comunicacin los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrir las pinzas del caucho de unin y la llave inferior, dejando caer el lqudo a la bureta hasta unos 10 cm de altura, y sin que queden huecos vacos. Se regula la salida del lquido a la proporcin de 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz receptor hasta el enrase. 25.4.3. Valoracin del Acido Lctico. Introducir 10 ml del eluido en un tubo de ensayo de paredes que no sean gruesas y de unos 50 ml de capacidad con tapn. Aadir 10 ml del reactivo de Cerio IV Sulfato. Agitar e introducir el tubo de ensayo en un termostato a 65C durante 10 minutos exactamente. Inmediatamente despus de la inmersin en el lquido, destapar durante unos segundos, para dar salida al aire dilatado. Cerrar rpidamente con el tapn para evitar prdidas del Acetaldehdo formado. Despus de 10 minutos, retirar y enfriar el tubo con agua corriente hasta la temperatura de 20C. Aadir 5 ml de la solucin de Sodio Hidrxido 2,5N, mezclar bien y filtrar. Tomar 15 ml del filtrado y verterlos en probeta de tapn esmerilado de 50 ml de capacidad, que contenga 5 ml de solucin de Sodio Acetato al 27% y 2 ml de Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV. Aadir adems 5 ml de solucin de Sodio Nitroprusiato y mezclar bien. Aadir despus 5 ml de solucin de Piperidina, mezclar rpidamente, introducir en seguida en la cubeta del espectrofotmetro de 10 mm de espesor. Medir la coloracin producida, que vara, de verde a violeta, con relacin al aire a la longitud de onda de 570 nm. Esta coloracion aumenta al principio, pero disminuye en seguida rpidamente. Tomar como valor definitivo el valor mximo de la lectura de absorbancia. Si el eluido es muy rico en Acido Lctico y la densidad ptica es muy elevada, diluir el eluido con solucin de Sodio Sulfato al 7,1%. 25.4.4. Curva patrn. Tomar 10 ml de una solucin de Acido Lctico 1N exacta, y aadir 10 ml de Sodio Hidrxido 1mol/l (1N) SV y completar a un litro con solucin de Sodio Sulfato al 7,1%. Tomar 5, 10, 15, 20 y 25 ml, respectivamente, e introducir cada alcuota en un matraz aforado de 100 ml. Enrasar con solucin de Sodio Sulfato al 7,1%.
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Mezclar bien, tomar 10 ml de las soluciones as obtenidas y determinar los valores de las absorbancias respectivas. Las diferentes soluciones corresponden a eluido del vino conteniendo 0,45; 0,90; 1,35; 1,80 y 2,25 g/l de Acido Lctico. La representacin grfica de las absorbancias de estas soluciones en funcin de la riqueza en Acido Lctico, es una recta. 25.5. Clculo. Llevar los valores de absorbancia obtenidos a la curva patrn y deducir los correspondientes contenidos en cido lctico expresados en g/l. 25.6. Observaciones. Si el vino tiene ms de 250 mg por litro de sulfuroso total, el resultado puede ser errneo, por la presencia de cido aldehdo sulfuroso. En determinaciones de precisin, conviene realizar una correccin en la forma siguiente: Tomar 15 ml de eluido y llevar a probeta de tapn esmerilado, en la que se habr aadido 5 ml de sodio acetato al 27% y 2 ml de cido sulfrico 1,55N (77,5 ml de cido sulfrico 2N diluidos a 100 ml con agua destilada). Aadir 5 ml de sodio nitroprusiato al 2% y 5 ml de piperidina al 10%. Mezclar y hacer la determinacin espectrofotomtrica a 570 nm que da el factor de correccin: L = L - C x 0,25 L = contenido real de cido lctico expresado en g/l. L = contenido aparente de cido lctico expresado en g/l. C = factor de correccin en g/l. 25.7. Referencia. 25.7.1. Rebelein, M. Deutsche Lebens-mittel Rudshan, 2: 36-41, 1961, y 59: 131, 1963. 26. ACIDO CITRICO 26.1. Principio. El cido ctrico es fijado junto con los otros cidos del vino por una resina cambiadora de aniones. Despus se procede a la elucin, la que se realiza fraccionadamente y separando el cido citromlico que es causa de error en la valoracin del cido ctrico. El cido ctrico es transformado por oxidacin cuidadosa en acetona, la que se separa por destilacin. El etanal arrastrado se oxida a cido actico y se valora sola la acetona por yodometra.
26.2. Material y aparatos. 26.2.1. Columna cambiadora de aniones. En una bureta de llave de 25 ml de capacidad, colocar un tapn de Lana de Vidrio, lavada QP en el fondo y verter 20 ml de Resina Dowex 1 x 2. Someter la Resina a dos ciclos completos de regeneracin con pasos alternos de Acido Clorhdrico 1mol/l (1N) SV y Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. Lavar despus con 50 ml de Agua PA-ACS, agitando la Resina Dowex cuando los primeros ml de Agua PA-ACS pasan por la columna para despegarla del fondo de la bureta. Saturar la Resina de iones acetato, mediante el paso de 250 ml de una solucin de Acido Actico 4N. Lavar luego con 100 ml de Agua PA-ACS. 26.2.2. Aparato para la oxidacin. Aparato compuesto de matraz de cuello largo, atravesado lateralmente por el tubo afilado de embudo con llave, y en comunicacin con refrigerante, segn dimensiones y forma del diseo (fig. 26.I). 26.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121793 Hierro II Sulfato 2-hidrato PA 211376 Lana de Vidrio, lavada QP 131413 Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS 211456 Piedra Pmez grnulos QP 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 182114 Potasio Permanganato 0,01 mol/l (0,05N) SV Resina DOWEX 1 x 2 (50-100 mallas) 181691 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 182158 Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV 182159 Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV 26.3.1. Resina Dowex 1 x 2 (50-100 mallas) 26.3.2. Solucin de Acido Actico 4N. Diluir Acido Actico glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS a la concentracin indicada y determinar el factor. 26.3.3. Solucin de Acido Actico 2,5N. Diluir Acido Actico glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS a la concentracin indicada y determinar el factor. 26.3.4. Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV. 26.3.5. Acido Sulfrico diluido al 1/5 (v/v). Diluir Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 26.3.6. Solucin Tampn pH = 3,2-3,4. En un matraz aforado de 1 l introducir 150 g de Potasio diHidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido
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orto-Fosfrico (d = 1,689) y enrasar con Agua PAACS. (Diluir Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta obtener la densidad indicada) 26.3.7. Solucin de Manganeso Sulfato de 50 g/l. Disolver Manganeso II Sulfato 1-hidrato PA-ACS en Agua PA-ACS. 26.3.8. Piedra Pmez grnulos QP. 26.3.9. Potasio Permanganato 0,01 mol/l (0,05N) SV. 26.3.10. Acido Sulfrico diluido a 1 (v/v). 26.3.11. Solucin de Potasio Permanganato 2N. Disolver Potasio Permanganato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS, ajustar a la concentracin indicada y determinar el factor. 26.3.12. Solucin de Hierro II Sulfato de 40 g por 100. 26.3.13. Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV. 26.3.14. Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV. 26.3.15. Solucin de Sodio Tiosulfato 0,02N. Diluir exactamente 1:5 de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor. 26.3.16. Almidn soluble RE. 26.4. Procedimiento. 26.4.1. Separacin de los cidos ctrico y citromlico. Hacer pasar 25 ml del vino a travs de la columna cambiadora de aniones Dowex 1 x 2 en forma actica a razn de 3 ml cada dos minutos. Lavar la columna con 20 ml de Agua PA-ACS en tres veces. Eluir los cidos con 200 ml de solucin de Acido Actico 2,5N que se hace pasar por la columna a la misma velocidad. En esta fraccin de eluido se encuentra, entre otros cidos, el cido citromlico que interesa eliminar. Eluir los cidos ctricos y tartricos haciendo pasar a travs de la columna 100 ml de Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV y recoger el eluido en el matraz del aparato de oxidacin y destilacin descrito 26.4.2. Oxidacin. En el matraz que contiene ya el eluido anterior, aadir Acido Sulfrico diluido al 1/5 (unos 20 ml) para llevar el pH a 3,2-3,8, 25 ml de Solucin Tampn pH = 3,2-3,4, 1 ml de solucin de Manganeso II Sulfato y algunos gramos de Piedra Pmez grnulos QP. Tapar y conectar el matraz con el refrigerante, calentando hasta ebullicin. Separar los primeros 50 ml destilados. Colocar Potasio Permanganato 0,01 mol/l (0,05N) SV en el embudo lateral de llave, y verter en el matraz a razn de una gota por segundo, cayendo en el eluido en ebullicin. El destilado se recoge en frasco de 500 ml de tapn esmerilado que contiene unos ml de Agua PA-ACS. Continuar la oxidacin hasta que la coloracin parda del lquido acuse un exceso de permanganato. 26.4.3. Separacin de la acetona. Si el volumen del destilado es inferior a 90 ml, completar con Agua PA-ACS hasta este volumen: aadir despus 4,5 ml de Acido Sulfrico al 1/3 y 5 ml de una solucin de Potasio Permanganato 2N. Si el volumen del destilado excede de los 90 ml, completar a 180 ml con Agua PA-ACS y utilizar la dosis doble de reactivos. En estas condiciones (medio Acido Sulfrico 0,5N y Potasio Permanganato 0,1N), el alcohol etlico es oxidado a cido actico y la acetona permanece intacta. Tapar el frasco, dejar en reposo durante 45 minutos a la temperatura ambiente. Al cabo de este tiempo se destruye el exceso de permanganato adicionando solucin de Hierro II Sulfato. Destilar despus y recoger 50 ml aproximadamente de destilado en un frasco de tapn esmerilado que contenga 5 ml de Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV.
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Figura 26.l
26.4.4. Valoracin de la acetona, aadir al contenido del frasco 25 ml de Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV, si la dosis de Acido Ctrico es superior a 0,5-0,6 g/l ser necesario aadir ms solucin de Yodo, hasta que quede color amarillento que indicar este exceso. Duplicar o triplicar las dosis de Yodo hasta llegar a este punto, pero si la riqueza en Acido Ctrico es mayor de 1,5 g, comenzar otra vez el anlisis con slo 10 ml de vino. Dejar en contacto el Yodo aadido durante 20 minutos permaneciendo el frasco tapado. Aadir 8 ml de Acido Sulfrico al 1/5 y valorar el exceso de yodo con Sodio Tiosulfato 0,02N en presencia de Almidn soluble RE. Hacer una valoracin en blanco en las mismas condiciones sustituyendo los 50 ml de destilado por 50 ml de Agua PA-ACS. 26.5. Clculo. Calcular el contenido en cido ctrico expresado en g/l. V - V Acido ctrico = 0,64 g/l V V = volumen en ml de la muestra de vino. V = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizado en la valoracin en blanco. V = volumen en ml de sodio tiosulfato 0,02N utilizado en la valoracin del yodo en exceso. 26.6. Referencia. 26.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V., A29, 1-3, 1969. 27. SULFATOS 27.1. Principio. Precipitacin del bario sulfato en el vino, previamente desprovisto de anhdrido sulfuroso por ebullicin al abrigo del aire. 27.2. Material y aparatos. 27.2.1. Matraz cnico (Erlenmeyer) de 500 ml, provisto de ampolla con llave de 100 ml y de desprendimiento de vapor, atravesando ambos el tapn. El matraz se coloca sobre disco metlico de 15 cm de dimetro con abertura circular de 8 cm de dimetro. 27.2.2. Vaso cilndrico de 400 ml. 27.2.3. Bao de agua o plancha caliente a 60C. 27.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 182108 Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV 131074 Agua PA-ACS
131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO 27.3.1. Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV. 27.3.2. Bario Cloruro, 100 g de Bario Cloruro 2hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PA-ACS. 27.3.3. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 27.4. Procedimiento. 27.4.1. Eliminacin del anhdrido sulfuroso del vino. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solucin para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml del vino por la ampolla de llave evitando que la ebullicin se pare durante esta adicin. Continuar la ebullicin hasta reducir el volumen del lquido a unos 100 ml, eliminando as todo el SO2. 27.4.2. Precipitacin de Bario Sulfato. Llevar el residuo de la evaporacin anterior a un vaso de 400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total a 200 ml. Aadir 5 ml de Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) y llevar a ebullicin. Adicionar gota a gota 10 ml de solucin de Bario Cloruro, con la precaucin de no parar la ebullicin y dejar reposar en caliente, colocando el vaso sobre placa a 60 durante cuatro horas y en bao de agua hirviendo durante dos horas. En el caso de pequeas cantidades de precipitado, se recomienda un segundo reposo en fro durante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PA-ACS caliente hasta que no d reaccin con Plata Nitrato PAACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado a crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, despus de enfriar en un desecador, pesar. 27.5. Clculo. Calcular el contenido de sulfatos expresado en meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximacin de 0,05 g/l. Sulfato = 85,68 P meq/l. Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato. P = peso de las cenizas en g. 27.6. Referencias. 27.6.1. Deibner, P.; Bernard, P. Industries Alimentaires et Agricoles, 71: 1, 23 y 5, 427,1954. 27.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. 0. I. V., A14, 1-4. 1969.
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28(a). ANHIDRIDO SULFUROSO (Mtodo Paul) 28(a).1. Principio. Liberacin de sulfuroso libre por acidificacin del vino, arrastre por corriente de aire, oxidacin por barboteo en agua oxigenada neutra y valoracin con sodio hidrxido del cido sulfrico formado. Liberacin por ebullicin moderada del sulfuroso combinado, que queda en el vino despus de la extraccin del sulfuroso libre, y anlogo tratamiento que en la determinacin del sulfuroso libre. El sulfuroso total es la suma del sulfuroso libre y el sulfuroso combinado. Puede determinarse acidificando el vino y calentando y procediendo como en los dos casos anteriores. 28(a).2. Material y aparatos. Utilizar el aparato representado en la figura 28(a).I. 28(a).2.1. Matraz de 100 ml o de 250 ml. 28(a).2.2. Tubo barbotador provisto de bola hueca en un extremo con unos 20 orificios de 0,2 mm de dimetro alrededor del crculo mximo horizontal. 28(a).2.3. Refrigerante que condense vapores y deje pasar el gas en recorrido seguro. 28(a).2.4. Frasco con agua y con tapn atravesado por el tubo que comunica con el barbotador para hacer vaco, y otro tubo sumergido en el agua para acusar la intensidad del vaco por la depresin de la columna de agua en el interior del tubo, depresin que debe mantenerse entre 20-30 cm. El gasto de vapor ser de 40 l/h. 28(a).2.5. Bao de agua regulable a 10C. 28(a).3. Reactivos. 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 251170 Azul de Metileno (C.I. 52015) DC 121085 Etanol 96% v/v PA 141076 Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 181693 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 28(a).3.1. Acido Fosfrico aI 25% (p/v). Diluir convenientemente Acido orto-Fosfrico 85% PAACS-ISO con Agua PA-ACS. 28(a).3.2. Hidrgeno Perxido de 0,3 volmenes
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Figura 28(a).I. Las dimensiones estn indicadas en mm. Los dimetros interiores de los cuatro tubos concntricos que constituyen el refrigerante son 45, 34, 27 y 10 mm
por 100. Diluir convenientemente Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS con Agua PA-ACS. 28(a).3.3. Sodio Hidrxido 0,01N. En un matraz aforado diluir a 1:10, Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin obtenida 0,01N. 28(a).3.4. Indicador. Mezclar 100 mg de Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS, 50 mg de Azul de Metileno (C.I. 52015) DC y 100 ml de Etanol de 50. Diluir convenientemente Etanol 96% v/v PA con Agua PA-ACS. 28(a).4. Procedimiento. 28(a).4.1. Anlisis del anhdrido sulfuroso libre. En el matraz de 100 ml del aparato poner 10 ml del vino y aadir 5 ml de Acido Fosfrico al 25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio. Si la riqueza en SO2 del vino es pequea, se emplea el matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de vino. Sumergir el matraz en un bao de agua a 10C. Colocar 2-3 ml de Hidrgeno Perxido de 0,3 volmenes y dos gotas del reactivo Indicador en el barbotador y neutralizar el Hidrgeno Perxido con Sodio Hidrxido 0,01N. Adaptar el barbotador al aparato y hacer barbotar el aire (o nitrgeno) durante 12-15 minutos. Arrastrar el anhdrido sulfuroso libre y despus oxidar a H2SO4. Retirar el barbotador y valorar el cido formado con solucin de Sodio Hidrxido 0,01N. 28(a).4.2. Anlisis del anhdrido sulfuroso combinado. Despus de terminar la valoracin del anhdrido sulfuroso libre, colocar en el barbotador ya limpio, los 2-3 ml de Hidrgeno Perxido neutralizado y con las dos gotas del indicador. Calentar con llama pequea hasta llevar a la ebullicin el vino que qued en el matraz despojado del anhdrido sulfuroso libre por la determinacin anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo del matraz, que descansar sobre chapa metlica perforada con orificio de 30 mm de dimetro, para evitar la pirogenacin de las materias extractivas del vino sobre las paredes del matraz. Mantener el paso del aire o nitrgeno durante la ebullicin, que durar 12-15 minutos, tiempo que se considera suficiente para arrastrar todo el sulfuroso combinado, y despus oxidarlo. Continuar como en 28(a).4.1 a partir de Colocar 2-3 ml de Hidrgeno Perxido.... 28(a).4.3. Anhdrido sulfuroso total. Puede determinarse por la suma anhdrido sulfuroso libre ms anhdrido sulfuroso combinado, pero tambin puede determinarse directamente, actuando desde un principio con corriente de aire y con calor. 28(a).5. Clculo. Calcular el contenido en anhdrido sulfuroso expresado en mg/l con una aproximacin de 10 mg/l.
Anhdrido sulfuroso = 32 V mg/l. V = volumen en ml de sodio hidrxido 0,01N. 28(a).6. Observaciones. Para vino sensiblemente picado (con ms de 2 g/l de acidez actica) puede arrastrarse con el anhdrido sulfuroso, cidos voltiles, especialmente cuando la corriente de aire es intensa. Corregir determinando la acidez voltil presente en el lquido del barbotador, operando de la siguiente forma: Despus de la neutralizacin con el sodio hidrxido al valorar la acidez, aadir un cristal de 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO y llevar el contenido del barbotador al aparato de determinacin de la acidez voltil por destilacin en corriente de vapor. Restar despues del resultado anterior la parte de acidez correspondiente a los cidos voltiles. 28(a).7. Referencias. 28(a).7.1. Paul, F. Mitteilungen Klosternenberg, A: 8, 21, 1958. 28(a).7.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V., A17, 1-8, 1969. 28(b). ANHIDRIDO SULFUROSO (Mtodo Ripper doble) 28(b).1. Principio. Valoracin yodomtrica del SO2 operando directamente con el vino. Para evitar el error introducido por la recombinacion del sulfuroso liberado de su combinacin con los aldehdos, durante la valoracin volumtrica, se hace una segunda valoracin, despus de nueva liberacin del SO2 recombinado. 28(b).2. Material y aparatos. 28(b).2.1. Erlenmeyer de 500 ml y material para una volumetra. 28(b).3. Reactivos. Acetaldehdo 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO (Acido EDTA Na2 2-hidrato) 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121428 Mercurio II Yoduro rojo PA 182159 Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV 182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV 28(b).3.1. Sodio Hidrxido 4N. En un matraz aforado diluir a 4:5, Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 4N obtenida.
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28(b).3.2. Acido Sulfrico al 1/10 en volumen (180 g/l). Diluir convenientemente Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 28(b).3.3. Engrudo de almidn preparado de la siguiente forma: Pesar 2,5 g de Almidn soluble RE y triturarlo en un mortero junto con 10 mg de Mercurio II Yoduro rojo PA. Llevar a un vaso y aadir un volumen de Agua PA-ACS suficiente para poder hervir la suspensin con fluidez. Llevar despus sta a matraz con 1 litro de Agua PA-ACS en ebullicin, que se mantiene durante 10 minutos. El lquido obtenido estar limpio y si es necesario se filtra. 28(b).3.4. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. 28(b).3.5. Sodio Tiosulfato 0,01N. En un matraz aforado diluir a 1:5, Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,01N obtenida. 28(b).3.6. Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO. 28(b).4. Procedimiento. Colocar en el Erlenmeyer de 500 ml, 50 ml del vino, 3 ml de Acido Sulfrico al 1/10, 5 ml de Engrudo de Almidn y 30 mg de Acido Etilendiaminotetraacetico Sal Disodica 2-hidrato PA-ACS-ISO (con el fin de evitar la oxidacin del SO2 libre durante la valoracin). Homogeneizar la solucin y aadir con bureta Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV hasta coloracin azul del almidn, que primero ser fugaz, y netamente persistente despus, durante 10-15 segundos, considerndola entonces aceptable. Sea V el volumen del yodo empleado. Aadir 8ml de solucin de Sodio Hidrxido 4N, agitar una sola vez y dejar en contacto durante 5 minutos. Despus verter, de un solo golpe y agitando enrgicamente, 10 ml de Acido Sulfrico a 1/10. Se valora inmediatamente con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V el volumen en ml de solucin de yodo empleado. Se aade despus 20 ml de Sodio Hidrxido 4N, se deja en contacto durante 5 minutos despus de haber agitado una sola vez. Se diluye con 200 ml de Agua PA-ACS bien fra, agitar despus enrgicamente y aadir 30 ml de Acido Sulfrico al 1/10 y valorar con Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV el SO2 liberado. Sea V el volumen en ml de la solucin de yodo empleado. Con estas valoraciones se corrige el error que puede originarse por la recombinacin de parte del SO2 ya liberado de los aldehdos, con el mismo aldehdo que estar presente en el lquido que se valora. Tambin es posible causa de error, y especialmente cuando se trate de vinos tintos ricos en color y extractos, el consumo de yodo por estas sustancias; para corregir este error se opera de la manera siguiente: Adicionar a 50 ml del vino, colocados en un Erlenmeyer de 300 ml, un exceso de Acetaldehdo para que sea capaz de combinarse con todo el SO2 libre; dicha cantidad puede ser de unos 5 ml de solucin de Acetaldehdo, de 7 g por litro. Se tapa el matraz y despus de un reposo de 30 minutos, como mnimo, se aaden 3 ml de Acido Sulfrico diluido al 1/10 y despus los de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV necesarios hasta el viraje de almidn. Sea V el volumen en ml necesarios. La presencia de cido ascrbico tambin puede ser causa de error. Descontar el yodo correspondiente, considerando que 1 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV es consumido por 4,4 mg de cido ascrbico. 28(b).5. Clculo. SO2 libre = 32 (V - V) mg/l. SO2 combinado = 32 (V + V) mg/l. SO2 total = 32 (V + V + V - V) mg/l. Con aproximacin de 10 mg/l. 28(b).6. Observaciones. Para vinos pobres en SO 2, es conveniente emplear yodo ms diluido, solucin 0,02N, reemplazando entonces el coeficiente 32 por el de 12,8 en los clculos. En los vinos tintos es conveniente, para apreciar el viraje, iluminar con luz amarilla el fondo del Erlenmeyer donde est el vino. Hay dispositivos sencillos a base de simple bombilla con filtro preparado con solucin de potasio cromato, o bien con luz amarilla de lmpara de vapor de sodio. Cuando haya un inters especial en la determinacin del SO2 libre, debe dejarse la muestra en reposo durante 4 das, al abrigo del aire y a temperatura de 20C. El anlisis se realizar tambin a 20C. 28(b).7. Referencias. 28(b).7.1. Jaulmes, P. y Dienziede. Mthode Ripper double danalyse de SO2. Bol.. O. I. V., 274. 52-54, 1959. 28(b).7.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V., A17, 7. 1969.
29. ACIDO SORBICO 29.1. Principio. El cido srbico arrastrado por el vapor de agua (constante de volatilidad 0,59), se valora en el destilado por espectrofotometra en el ultravioleta. 29.2. Material y aparatos. 29.2.1. Espectrofotmetro ultravioleta y cubetas de cuarzo de 1 cm de espesor.
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29.2.2. Matraces aforados de 20 ml y de 1 litro. 29.2.3. Pipetas de 0,5 ml y 1,5 ml. 29.3. Reactivos. 141055 Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX (o 121531 Potasio Sorbato PA) 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 121638 Sodio Hidrgeno Carbonato PA 29.3.1. Solucin (a) (destinada a catalizar la oxidacin del cido sulfuroso por el aire). Mezclar 0,5 g de Sodio Hidrgeno Carbonato PA con 0,001 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y aadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 29.3.2. Solucin (b) de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX de 20 mg/l. Introducir 20 mg de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX en un matraz aforado de 1 litro que contenga 900 ml de Agua PA-ACS caliente, agitar, dejar enfriar y enrasar a 1 litro. En vez de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX puede emplearse 26,8 mg de Potasio Sorbato PA. 29.4. Procedimiento. Destilar como en 21.4, 20 ml de vino adicionado de 1-2 g de Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO. Recoger 320-330 ml de destilado para conseguir la ms completa extraccin del Acido Srbico (USPNF) PRS-CODEX, que requiere unos 100 ml ms que los necesarios para la acidez voltil. Tomar 5 ml del destilado, colocar en un matraz aforado 20 ml y enrasar con la solucin (a). Llenar con esta mezcla una cubeta de cuarzo de 1 cm de espesor. Dejar la cubeta al aire durante unos minutos. Determinar la absorbancia a 256 nm. Para la prueba en blanco, sustituir los 5 ml de destilado por 5 ml de Agua PA-ACS. Para obtener la curva patrn, determinar la absorbancia de soluciones que contengan 0,5, 1, 2,5 y 5 mg/l de Acido Srbico (USP-NF) PRSCODEX obtenidas diluyendo con Agua PA-ACS la solucin (b). La grfica correspondiente a estos valores es una lnea recta. 29.5. Clculo. Calcular el cido srbico expresado en mg/l. Acido srbico = 0,2 . C . V mg/l.
29.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V., A30, 1-3, 1969. 30. CLORUROS 30.1. Principio. Determinacin directa de cloruros por potenciometra utilizando el electrodo Ag/AgCl. 30.2. Material y aparatos. 30.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar 2mV. 30.2.2. Agitador magntico. 30.2.3. Electrodo Ag/AgCl, con una solucin saturada de potasio nitrato como electrolito. 30.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml. 30.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO Potasio Cloruro (mx. 0,005% de Br) 30.3.1. Solucin patrn de cloruros.- Disolver 2,1027 g de Potasio Cloruro (mx. 0,005% de Br) puro para anlisis (mximo 0,005% de bromo) previamente desecado, en Agua PA-ACS hasta 1 litro. 1 ml de esta solucin contiene 1 mg de ion Cloro. 30.3.2. Solucin de Plata Nitrato.- Disolver 4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en una solucin al 10% v/v de Etanol 96% v/v PA en Agua PAACS, hasta un litro. 1 ml de esta solucin corresponde a 1 mg de ion Cloro. 30.3.3. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 30.4. Procedimiento. 30.4.1. Determinacin del potencial del punto de equivalencia. Introducir 5,0 ml de la solucin patrn de cloruros en un vaso de 150 ml. Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PAACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (30.3.3). Introducir los electrodos. Aadir 10 ml de la solucin de Plata Nitrato, agitando moderadamente: adicionar los cuatro primeros ml en fracciones de 1 ml y leer las correspondientes lecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, en fracciones de 0,2 ml y continuar adicionando en fracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de 10 ml. Despus de cada adicin esperar unos treinta segundos antes de hacer la correspondiente lectura en milivoltios. Llevar los valores as obtenidos sobre un papel milimetrado en funcin de los correspondientes ml de solucin de Plata Nitrato y a partir del punto singular de la curva obtenida determinar el potencial del punto de equivalencia. Para comprobar el potencial del punto de equivalencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la
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C = contenido en mg/l de cido srbico determinado por comparacin con curva patrn. V = volumen en ml de destilado. 29.6. Referencias. 29.6.1. Jaulmes, P.; Mestres, R. y Mandrou, B. Annales des Falsifications et de lExpertise Chimique, 111, 1961.
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solucin patrn de cloruros, 95 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. Introducir el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el potencial del punto de equivalencia. Repetir esta operacin hasta obtener una buena concordancia de resultados. Este control debe efectuarse antes de determinar la concentracin de cloruros en cada serie de muestras a analizar. 30.4.2. Determinacin. Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vino. Aadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1,0 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuacin siguiendo el procedimiento descrito anteriormente hasta alcanzar el potencial del punto de equivalencia. 30.5. Clculo. La cantidad de cloruros se determina mediante las expresiones: 0,02 n en g de ion cloro. 0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro. 0,0329 n en g de sodio cloruro por litro. Siendo: n = volumen, en ml, de solucin de plata nitrato necesario para alcanzar el potencial del punto de equivalencia. 30.6. Referencia. 30.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A 15j. 31. ACIDO BENZOICO 31.1. Principio. Extraccin por el ter del cido benzoico presente en el vino. Tratamiento del extracto por la mezcla nitro-sulfrica y formacin del cido 3,5dinitrobenzoico, que es extrado con ter y despus recogido por la mezcla acetona-alcohol. La adicin de sodio hidrxido da origen a una coloracin violeta. Esta reaccin es sensible, especfica y cuantitativa, siempre que se opere en condiciones que aseguren la transformacin del cido benzoico en compuesto coloreado medible en el espectrofotmetro a 570 nm. 31.2. Material y aparatos. 31.2.1. Espectrofotmetro que permita lecturas a 570 nm. 31.2.2. Ampolla de decantacin de 250 ml. 31.2.3. Matraces de 100 ml aforados. 31.2.4. Cpsulas. 31.2.5. Bao de agua. 31.2.6. Matraces aforados de 50 ml. 31.2.7. Erlenmeyer de 50 ml. 31.3. Reactivos. 131007 Acetona PA-ACS-ISO 121014 Acido Benzoico PA 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 121085 Etanol 96 v/v PA 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 131524 Potasio Nitrato PA-ISO 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO 31.3.1. Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 31.3.2. Mezcla Acetona-Etanol: Mezclar 1.000 ml de Acetona PA-ACS-ISO con 1.000 ml de Etanol absoluto PA. 31.3.3. Mezcla Nitro-Sulfrico: Aadir a 10 g de Potasio Nitrato PA-ISO, 100 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 31.3.4. Solucin Sodio Hidrxido-Etanol al 5%. Aadir a 5 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACSISO (sin Na2 CO3) 50 ml de Agua PA-ACS. Despus de fra la mezcla se aade Etanol 96% v/v PA hasta 100 ml. La solucin debe quedar limpia. 31.4. Procedimiento. Vinos secos o con riqueza en azcar de 100 g/l. Aadir a 10 ml de vino puestos en ampolla de decantacin 2 ml de Acido Sulfrico al 25% y 25 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, dos veces seguidas. Decantar y filtrar el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, por papel seco, llevarlo a matraz aforado de 50 ml y enrasar. Poner 20 ml de la solucin de Eter Dietlico en Erlenmeyer de 50 ml, evaporar aspirando los vapores mediante vaco, permaneciendo el Erlenmeyer sumergido en bao de agua fra. Aadir al residuo 5 ml de la mezcla Nitrosulfrica cuidando de empapar bien todo el residuo. Llevar despus al bao de agua hirviendo durante 35 minutos y agitando de cuando en cuando, sobre todo al principio. Enfriar en agua fra, aadir 5 ml de Agua PAACS, seguir enfriando y verter el contenido en una ampolla de decantacin de 250 ml. Enjuagar el Erlenmeyer con 5 ml de Agua PA-ACS, volver a verter el contenido en la ampolla y aadir 30 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACSISO. Agitar cinco minutos. Eliminar la fase acuosa despus de cuidadosa decantacin y lavar el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACSISO con 5 ml de Agua PA-ACS. Decantar con cuidado (un lavado ms prolongado originara prdidas de dinitrobenzoico en la fase acuosa, por lo que es preferible decantar bien, que volver a lavar). Filtrar el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm
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de BHT PA-ACS-ISO por filtro revestido con Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO, lavar el filtro en seguida con 10 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Evaporar el filtrado en una pequea cpsula a 35, arrastrar con tres adiciones de 5 ml de Acetona-Etanol, cada vez (previamente enfriado en nevera). Recoger todos estos lquidos en un tubo de ensayo de tapn esmerilado y aforado a 15 ml. En un tubo de ensayo de tapn esmerilado y con trazo de aforo a 15 ml, poner de 0,5 a 5 ml de la anterior solucin. Este volumen debe variar con la riqueza supuesta, para obtener la reaccin coloreada con el cido dinitrobenzoico originado por 0,1 a 0,5 mg de Acido Benzoico PA. El mtodo es vlido entre 0,03 y 1 mg, si se utiliza aparato capaz de medir absorbancias superiores a 1,5. Diluir el volumen de lquido puesto en el tubo, con la mezcla Acetona-Etanol fra, hasta 14,7 ml y aadir despus 0,3 m Sodio Hidrxido lentejas PAACS-ISO diluido al 5% en Agua PA-ACS, agitar y sumergir en hielo fundente. Hacer la determinacin en cubeta de 1/2-1 cm a 570-580 nm despus de 30 minutos y antes de 70 minutos a partir del momento de la mezcla. Utilizar como solucin compensadora para comparacin una mezcla de 14,5 de Acetona-Etanol con 0,3 ml de Sodio Hidrxido al 5%. Para obtener la curva patrn, preparar una solucin valorada de 50 mg de Acido Benzoico PA en 100 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Diluir esta solucin a 1/10 con Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PAACS-ISO y tratar 10 ml de esta solucin de 50 mg por litro, como se ha indicado antes para la muestra. La densidad de ptica vara linealmente con la cantidad de Acido Benzoico. 31.5. Clculo. Llevar la absorbancia obtenida a la curva patrn y expresar el correspondiente contenido de cido benzoico en mg/l. 31.6. Referencia. 31.6.1. Spanyar, E,; Kerel, E. y Kiszel, M. Zeitschrift fr Lebenmittel Untersuchung und Forschung, 1958. 32. BROMO TOTAL
32.2. Material y aparatos. 32.2.1. Cpsula de slice de 7 cm de dimetro. 32.2.2. Bao de agua. 32.2.3. Horno elctrico, recomendable con regulador automtico, para regular a 525. 32.2.4. Espectrofotmetro o colormetro capaces para lectura a 584 nm. 32.3. Reactivos. 182119 Acido Actico 2 mol/l (2N) SV 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP 142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX 121489 Potasio Bromuro PA 171615 Rojo de Fenol RE-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 181693 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 182158 Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV 131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 32.3.1. Solucin de Sodio Hidrxido al 50%. Disolver Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 32.3.2. Lechada de Cal 4N (224 g de Calcio Oxido natural escoriforme QP por litro con Agua PA-ACS). 32.3.3. Solucin de Rojo de Fenol. Mezclar 0,24 g de Rojo de Fenol RE-ACS y 24 ml de Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. Aadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. 32.3.4. Solucin Tampn pH = 4,65. Mezclar 500 ml de Acido Actico 2 mol/l (2N) SV, 250 ml de Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV y 250 mI de Agua PA-ACS. 32.3.5. Solucin oxidante. A 2 g de Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX aadir Agua PA-ACS hasta un litro. Preparar esta solucin 48 horas antes de su empleo y slo ser vlida hasta quince das. 32.3.6. Solucin reductora. Aadir a 25 g de Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Agua PA-ACS hasta un litro. 32.3.7. Solucin valorada de Potasio Bromuro. Aadir a 1,489 g de Potasio Bromuro PA Agua PAACS hasta un litro. Esta solucin contiene 1 g de Bromuro por litro. En el momento de su empleo se hacen dos diluciones sucesivas a 1/10 y se tendr la solucin a emplear que contiene 10 microgramos de Bromo por ml. 32.4. Procedimiento. Adicionar 0,5 ml de Sodio Hidrxido al 50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N a 50 ml del vino colocados en una cpsula de cuarzo de 7 cm de dimetro. Esta adicin proporciona un soporte infusible que permite una buena combustin del carbn. Si el vino es muy cido conviene aadir antes sodio hidrxido para llevarlo a pH 10 por lo menos.
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32.1. Principio. Saponificacin cuidadosa, para evitar prdidas, de los steres del cido brmico, eventualmente presentes en el vino, transformacin del rojo de fenol en azul de bromofenol, y valoracin colorimtrica o espectrofotomtrica.
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Si el vino contiene compuestos orgnicos de bromo o antispticos bromados, dejar por lo menos 24 horas la muestra de vino alcalinizada, tapando la cpsula con un vidrio de reloj, con el fin de saturar los steres del cido bromoactico, que son muy voltiles. Evaporar el lquido de la cpsula en bao de agua, calentar el residuo con pequea llama o en bao de arena para eliminar las ltimas trazas de agua. Incinerar hasta cenizas blancas en el horno elctrico regulado a 525C, sin pasar de esta temperatura para evitar prdidas por sublimacin. Para facilitar la obtencin de cenizas blancas, retirar la cpsula despus de 15 minutos de incineracin, dejar enfriar y humedecer las cenizas an grisceas con unas gotas de Agua PA-ACS, evaporar y volver al horno, repitiendo esta operacin las veces necesarias hasta conseguir cenizas blancas. Aadir a las cenizas 5 ml de Agua PA-ACS hirviendo y remover con una varilla, llevar a pH 4,64,5 con Acido Sulfrico diluido 1:10 y ajustar con Acido Sulfrico diluido a 1/100 y completar con Agua PA-ACS hasta 10 ml. Para calcular la cantidad de Agua PA-ACS a aadir, tomar el volumen final igual a 10,2 ml, por considerar el aumento de volumen Agua PA-ACS ms Acido Sulfrico, equivalente a 0,2 ml, que habr sido arrastrado en la precipitacin de los 334 mg de Calcio Sulfato hidratado, formado al reaccionar parte del Acido Sulfrico con la Lechada de Cal 4N aadida. Las restantes causas de pequea variacin de volumen (como las del H2SO4 al pasar a Na2SO4 y K2SO4), se consideran sin sensible influencia. Triturar con varilla de vidrio el calcio sulfato precipitado y remover bien. Diluir, si es necesario, la solucin de cenizas hasta un contenido en bromo del vino de 1 mg/l, aproximadamente. Para comprobar cualitativamente si el contenido en bromo del vino es superior o inferior a 1 mg/l, tomar 1 ml de la solucin de cenizas del vino, poner en tubo de ensayo y aadir una gota de solucin tampn pH 4,65, una gota de solucin Rojo de Fenol y una gota de solucin Cloramina T. Despus de un minuto exactamente, detener la reaccin aadiendo una gota de solucin de Sodio Tiosulfato. Si la solucin es amarilla, amarillo-parda o amarillo-verdosa, el contenido en bromo es aproximadamente inferior a 1 mg/l, y si es azul, violeta o violeta fugaz, el contenido en bromo es superior a 1 mg/l, siendo necesario diluir la solucin. Decantar el lquido y trasvasar a un tubo de ensayo. Poner en tubo de ensayo 5 ml de la solucin de cenizas y aadir 0,25 ml de Solucin Tampn, 0,25 ml de Rojo de Fenol y 0,25 ml de Cloramina T. Despus de un minuto exactamente, paralizar la reaccin con 0,25 ml de solucin de Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO. Determinar la absorbancia con fotocolormetro o espectrofotmetro mediante medida a 584 nm. Para obtener la curva patrn, tomar la solucin de Potasio Bromuro con 10 mg de Bromo por litro, alcuotas de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50; 2,00 y 2,50 ml y llevar a 5 ml con Agua PA-ACS. El contenido en bromo de estas soluciones es, respectivamente, 0,5; 1; 1,5; 2,0; 2,5; 3; 4 y 5 mg/l. Tratar cada una de estas soluciones de 5 ml como la solucin de cenizas y hacer las correspondientes determinaciones en el espectrofotmetro a 584 nm. 32.5. Clculo. Calcular el contenido en bromo expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor de dilucin. 32.6. Referencias. 32.6.1. Jaulmes, P., y Bruns, S. Valoration du brome dans les vins. Annales des Falsifications et de Fraudes. 1952. 32.6.2. Saldoval, J. A., e Hidalgo, T. Medida espectrofotomtrica de reacciones coloreadas muy fugaces. Boletn I. N. I. A. 19, 60, 40. 33. BROMO ORGANICO 33.1. Principio. El coeficiente de dilucin del cido monobromoactico entre el ter y el agua acidulada con cido sulfrico (que anula la ionizacin) es prximo a 5. Los steres del cido monobromoactico son menos solubles en el agua que el mismo cido, por lo que es ms fcil su extraccin por el ter. Tres lavados con un volumen de ter igual al del vino son suficientes para extraer todo el bromo orgnico. 33.2. Material y aparatos. 33.2. (1; 2; 3 y 4) como 32.2. (1; 2; 3 y 4). 33.2.5. Ampollas de decantacin de 50 y 500 ml. 33.3. Reactivos. 182119 Acido Actico 2 mol/l (2N) SV 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 181061 Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV 131074 Agua PA-ACS 211234 Calcio Oxido natural escoriforme QP 142323 Cloramina T 3-hidrato (BP, F. Eur.) PRS-CODEX 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 121489 Potasio Bromuro PA 171615 Rojo de Fenol RE-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 181693 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV
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182158 Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV 131721 Sodio Tiosulfato 5-hidrato PA-ACSISO 33.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7) como 32.3. (1; 2; 3; 4; 5; 6 y 7). 33.3.8. Acido Sulfrico 96% PA-ISO 33.4. Procedimiento. Colocar en una ampolla de decantacin 20-200 ml de vino (segn la riqueza supuesta), aadir 5 g de Acido Sulfrico 96% PA-ISO por litro de vino, se aade despus un volumen de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO igual al volumen de vino, agitar y decantar cuidadosamente el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Repetir tres veces esta operacin. Filtrar el Eter Dietilico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, evaporar en fro en cpsula de cuarzo que contenga 0,5 ml de Sodio Hidrxido al 50% y 1 ml de Lechada de Cal 4N. Despus de unas 24 horas de saponificacin de los steres, durante las que permanece la cpsula tapada con un vidrio de reloj, incinerar progresivamente el residuo a la temperatura de 550C. Arrastrar y disolver las cenizas como en 32, realizando tambin en igual forma la valoracin colorimtrica del bromo. 33.5. Clculo. Calcular el contenido en bromo expresado en mg/l a partir de la correspondiente curva patrn. 34. ACIDOS MONOBROMOACETICO Y MONOCLOROACETICO DE ORIGEN ORGANICO (Mtodo cualitativo) (Provisional) 34.1. Principio. Siendo fraudulenta la presencia de compuestos orgnicos monohalogenados, es suficiente para investigar el fraude un anlisis cualitativo. Extraccin de compuestos monohalogenados en medio cido con ter y transformacin por adicin de amonio en glicocola y sal de amonio por combinacin del halgeno desplazado. Separacin cromatogrfica y revelado con plata nitrato, obtenindose una mancha blanca para la plata cloruro y otra negra para la plata bromuro. 34.2. Material y aparatos. 34.2.1. Frascos de tapn esmerilado que ajuste perfectamente, de 500 ml de capacidad. 34.2.2. Ampolla de decantacin de 250 ml. 34.2.3. Agitador mecnico de unas 150 agitaciones por minuto. 34.2.4. Papel Watman nmero 1 para cromatografa. 34.2.5. Pipetas, micropipetas de 0,2 ml capilares divididas en milsimas.
34.2.6. Secador de aire. 34.2.7. Campana o recipiente para cromatografa y accesorios. 34.2.8. Pulverizador todo de vidrio y pulverizacin fina. 34.2.9. Campana de luz infrarroja. 34.3. Reactivos. 131007 Acetona PA-ACS-ISO 121050 Acido Piroglico PA 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121118 Amonio Bromuro PA 131121 Amonio Cloruro PA-ACS-ISO 121129 Amonaco 25% (en NH3) PA 121085 Etanol 96% v/v PA 131313 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO 34.3.1. Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 34.3.2. Solucin de Acido Sulfrico: solucin en Agua PA-ACS al 1/3 en volumen. 34.3.3. Amonaco 25% (en NH3) PA (sin cloruros). 34.3.4. Mezcla Acetona PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS en la proporcin 100/20 en volumen. 34.3.5. Revelador de Plata Nitrato. Mezclar 85 mg de Plata Nitrato PA-ACS-ISO, 1 ml de Agua PA-ACS, 5 ml de Amonaco 25% (en NH3) PA y Etanol 96% v/v PA hasta 200 ml. 34.3.6. Revelador de Acido Piroglico. Disolver 13 mg de Acido Piroglico PA en 200 ml de Etanol 96% v/v PA. La solucin puede durar tres das si se conserva fra y al abrigo de la luz. 34.3.7. Solucin testigo de Cloro. Disolver 100 mg de Amonio Cloruro PA-ACS-ISO en Agua PAACS y enrasar a 1.000 ml. 34.3.8. Solucin testigo de Bromo. Disolver 100 mg de Amonio Bromuro PA en Agua PA-ACS y enrasar a 1.000 ml. 34.4. Procedimiento. 34.4.1. Extraccin del compuesto halogenado. Tomar 100 ml de vino, llevar el matraz de 500 ml con tapn esmerilado, aadir 5 ml de Acido Sulfrico 1/3 y, acto seguido, 100 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar brevemente hasta formacin de ligera emulsin, destapar unos momentos el frasco y observar la facilidad de separacin. A veces, como especialmente sucede con vino de prensa, la separacin es difcil, siendo necesario nueva adicin de Acido Sulfrico 1/3 y de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Observar si hay facilidad de separacin y llevar el frasco a un agitador mecnico, agitando durante tres horas. Poner en ampolla de decantacin de
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250 ml de capacidad con el fin de separar el vino de la fraccin etrea; eliminar el Eter Etlico por completo filtrando rpidamente por ligera capa de algodn. Aadir inmediatamente 10 ml de Amonaco 25% (en NH3) PA, agitar fuertemente durante tres minutos, con el fin de iniciar la formacin del aminocido correspondiente (glicocola) y evitar la de otros compuestos. En este momento se forma la sal de amonio por combinacin del halgeno desplazado. Dejar reposar 24 horas para que la reaccin sea completa y proceder a la cromatografa. 34.4.2. Anlisis cromatogrfico.- Depositar con micropipeta sobre papel Whatman nmero 1 para cromatografa (28 x 15 cm) a lo largo de una lnea paralela al borde inferior y situada a 2,5 cm de este borde, 0,02 ml de soluciones testigo de Cl y de Br, y de 0,02 a 0,06 ml, segn el contenido en halogenado, de las muestras de vino, separando cada aplicacin 2 cm por lo menos. Enrollar el papel y colocar en el fondo de la cubeta con el disolvente y en la cmara o campana de cromatografa. Retirar el papel de la cubeta cuando el frente del lquido ascendente se encuentre a 1 cm del borde superior del papel, y dejar secar. Pulverizar con la solucin de Plata Nitrato y, estando hmedo el papel, pulverizar nuevamente con solucin de Acido Piroglico. Para mayor uniformidad del revelado, conviene desecar el papel con lmpara infrarroja. La mancha correspondiente al Cl es de color blanco y tiene un Rf de 0,29, y la mancha correspondiente al Br es de color marrn y tiene un Rf de 0,59. 34.5. Referencia. 34.5.1. Morales, J., y Vega, R. Comunicacin de los Mtodos Internacionales de Anlisis. O. I. V., nmero 245, 1967. 35. INDICE DE PERMANGANATO 35.1. Principio. Valoracin con una solucin de permanganato del poder reductor en fro de las sustancias polifenlicas del vino. Como todos los componentes fenlicos del vino, a igual concentracin no reducen la misma cantidad de permanganato, se trata de una valoracin global que da un ndice, al que se denomina ndice de permanganato; I Mn. Constituye una expresin del contenido en sustancias fenlicas que estn en relacin con los caracteres gustativos de dureza, astringencia o aterciopelado sin que la relacin sea absoluta. Es una determinacin especial para vinos tintos; en blancos es poco apreciable y se presta a confusiones por consumo de permanganato por otros componentes del vino, que aqu tiene una influencia relativa ms marcada. 35.5. Clculo. Calcular el ndice de permanganato o el ttulo de materias oxidables en fro del vino por permanganato expresado en meq/l. Indice de permanganato = 5 (V-V). Materias oxidables en fro = 5 (V-V) meq/l. V = volumen en ml de solucin de potasio permanganato 0,01N para oxidar el vino. V = volumen en ml de solucin de potasio permanganato 0,01N gastados en la prueba testigo. 35.6. Referencia. 35.6.1. Ribereau-Gayon et Peynaud. Analyse et Contrle des Vins. pgina 320, 1958. 35.2. Material y aparatos. Los elementos necesarios para una volumetra. 35.3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 251246 Carmn de Indigo (C.I. 73015) DC 121085 Etanol 96% v/v PA 121515 Potasio Hidrxido lentejas 85% PA 181529 Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV 35.3.1. Solucin de Potasio Permanganato 0,01N. Se conserva mal. Preparar a partir de Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:10, Potasio Permanganato 0,02 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,01N obtenida. 35.3.2. Indicador de Indigo. Preparar una solucin de 3 g/l de Carmn de Indigo (C.I. 73015) DC. Filtrar, tomar 50 ml de esa solucin, aadir 50 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. Mezclar bien. 35.4. Procedimiento. Colocar en un vaso de 50 ml del Indicador de Indigo antes indicado y aadir 2 ml del vino. Inmediatamente adicionar gota a gota la solucin de Potasio Permanganato 0,01N, y al final, cada vez ms lentamente, hasta desaparicin completa del color azul y aparicin de amarillo oro. En vinos nuevos, el viraje es menos neto, por lo que conviene tomar slo 1 ml de muestra. Hacer la prueba testigo para eliminar el permanganato por sustancias no polifenoles, sustituyendo los 2 ml de vino por 2 ml de una solucin de Acido L(+)-Tartrico de 5 g/l, neutralizada hasta la mitad con solucin de Potasio Hidrxido y encabezada hasta 10 de Etanol 96% v/v PA.
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36(a). DETERMINACION DE PRESENCIA DE VINO PROCEDENTE DE HIBRIDOS PRODUCTORES DIRECTOS (Mtodo cualitativo)
36(b). DETERMINACION DE PRESENCIA DE VINO PROCEDENTE DE HIBRIDOS PRODUCTORES DIRECTOS (Provisional) 36(b).1. Principio. Determinacin de malvina en vinos tintos secos por cromatografa de papel. La fase mvil es la solucin Britten-Robinson, en las condiciones del mtodo. Observacin del cromatograma a la luz de Wood de 366 nm. Como escala de comparacin se emplea una serie de manchas de soluciones de pinacianol, que da fluorescencia similar a la de la malvina, aunque con coloracin verdosa en vez de la roja ladrillo de la malvina, pero con intensidades de la fluorescencia proporcionales a las dosis aplicadas, haciendo comparativos los resultados. 36(b).2. Material y aparatos. 36(b).2.1. Fuente de luz de Wood (366 nm). 36(b).2.2. Cmara o campana para cromatografa y accesorios (soporte, pinzas, etc.). 36(b).2.3. Papel Arches para cromatografa. 36(b).3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131015 Acido Brico PA-ACS-ISO 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1-Dietilcarbocianina) 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 36(b).3.1. Solucin Britten-Robinson. Mezclar 3,92 g de Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO, 2,40 g de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y 4,48 g de Acido Brico PA-ACS-ISO y aadir Agua PA-ACS hasta 1.000 ml. El pH de esta solucin es 1,81. 36(b).3.2. Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1-Dietilcarbocianina). 36(b).3.3. Etanol 96% v/v PA neutro. Destilar Etanol 96%v/v PA rectificado en presenia de Sodio Hidrxido lentejas PA (5 g/l). 36(b).4. Procedimiento. Hacer aplicaciones con micropipeta de 50 ul de vino cada una, sobre papel a 2 cm del borde inferior, de tal forma que aparezcan manchas rectangulares de 2 cm de base por 0,5 cm de los bordes. Aplicar 12 gotas de 4 ul en cada punto, secando cada vez con corriente de aire a temperatura no superior a 30. Llenar la cubeta hasta una altura de 2 cm con la solucin Britten-Robinson. Sumergir el papel slo 1 cm y retirarlo cuando el lquido llegue a 1 cm del
36(a).1. Principio. Transformacin de la malvina, por la accin controlada de un oxidante apropiado, en una sustancia que a la luz de Wood acusa viva fluorescencia de color verde muy sensible. 36(a).2. Material y aparatos. 36(a).2.1. Lmpara que emita luz fluorescente de 366 nm de longitud de onda (luz de Wood). 36(a).2.2. Tubos de ensayo. 36(a).3. Reactivos. 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 131074 Agua PA-ACS Amonaco (gas) 121085 Etanol 96% v/v PA 131703 Sodio Nitrito PA-ACS 36(a).3.1. Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV. 36(a).3.2. Sodio Nitrito al 1%. Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada. 36(a).3.3. Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amonaco (gas) 36(a).4. Procedimiento. 36(a).4.1. Vinos tintos.- Para vinos tintos introducir en el tubo de ensayo: 1 ml de vino, una gota de Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV, y 1 ml de Sodio Nitrito al 1%. Agitar y esperar dos minutos, despus aadir 6 ml de Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amonaco (gas). Agitar, esperar cinco minutos, filtrar y observar el filtrado a la luz de Wood. Si hay malvina se apreciar la fluorescencia color verde. 36(a).4.2. Vinos rosados o claretes.- Introducir en el tubo de ensayo 5 ml de vino, cinco gotas de Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV y 1 ml de Sodio Nitrito al 1%. Agitar, esperar dos minutos y aadir despus Etanol 96% v/v PA con el 5% de Amonaco (gas). Agitar y observar a la luz de Wood (366 nm). 36(a).5. Clculo. La intensidad de la fluorescencia verde es muy sensible y puede acusar netamente la presencia de una dosis de 0,2% de hbrido Oberlein en el vino, siendo la tolerancia admitida hasta un 2% de riqueza de hbrido Oberlein. 36(a).6. Referencia. 36(a).6.1. Ribereau-Gayon, J.; Peynaud, E. Analyse et Contrle des Vins, pg. 320, 1958.
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borde superior. Ayudar a la desecacin con corriente de aire no superior a 30 y terminar la desecacin al ambiente. Para obtener una escala patrn preparar una soIucin en Etanol 96% v/v PA neutro de Pinacianol o Azul de Quinaldina (Yoduro de 1,1-Dietilcarbocianina) de 0,5 g/l y diluir a 1/10. Tomar alcuotas de 0,3; 0,4; 0,6; 0,8; 1,2; 1,7; 2,4; 3,5 y 5 ml y completar con Etanol 96% v/v PA hasta 5 ml. A estas mezclas les corresponde un contenido convencional de hbrido de 3; 4; 6; 8; 12; 17; 24; 35 y 50%, respectivamente. Aplicar cada una de estas mezclas como anteriormente. Secar las manchas, recortar y pegar mediante una cola celulsica (aplicar en pequeas dosis para que no desborde) a lo largo del borde de una tira de cartulina negra. Renovar la escala cada 30 o 45 das, pues pierde intensidad, por lo que hay que conservarla al abrigo de la luz. Observar las manchas del cromatograma a la luz de Wood (366 nm) en cmara oscura y hacer rpidamente la comparacin con la escala. Para comprobar la eficacia de la lmpara se hace el siguiente ensayo: Lavar por capilaridad con Etanol 96% v/v PA el papel Arches de cromatografa. Aplicar solucin alcohlica de Pinacianol de 1 mg/l en cantidad tal que la mancha sea visible y la misma cantidad diluida a la mitad de una mancha no visible en las mismas condiciones de observacin. Regular la distancia de la lmpara a la hoja para conseguir este efecto. 36(b).5. Clculo. Si al observar el cromatograma del vino a la luz de Wood en las condiciones expuestas se aprecian manchas de color rojo ladrillo y fluorescentes de un Rf = 0,55 0,09 ser clara manifestacin de presencia de malvina. Para el anlisis cuantitativo, comparar con la escala patrn. La intensidad del color de cada mancha de la escala testigo de solucin de pinacianol ser valorada por el nmero de mg de pinacianol por litro de solucin alcohlica con que se ha hecho la mancha sobre el papel. Con esta definicin convencional de la intensidad del color de las manchas puede establecerse tambin, por comparacin de estas manchas con las correspondientes a las de cromatogramas de vinos con mezcla conocida de hbrido, un coeficiente proporcional a la riqueza de ste presente en los mismos. La sensibilidad de las manchas pueden acusar el 1% de hbrido Oberlein (elegido como patrn). La dosis correspondiente al valor 2 de la escala convencional, o sea el 2% de hbrido Oberlein, es la mxima tolerada provisionalmente por la Convencin Internacional. 36(b).6. Referencias. 36(b).6.1. Dorier y Verelle. Comunication a la Socit des Experts-Chemistes de France. 6 enero 1965. 36(b).6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A18, 1-4, 1969. 37. METANOL (Alcohol Metlco) (Mtodo del cido cromotrpico) 37.1. Principio. Oxidacin del alcohol metlico a formaldehdo por potasio permanganato en presencia de cido fosfrico y medida espectrofotomtrica de la reaccin coloreada del formaldehdo con cido cromotrpico. Coloracin violeta especfica del formaldehdo. 37.2. Material y aparatos. 37.2.1. Matraces aforados de 50 ml. 37.2.2. Bao de agua con regulacin a 60-75. 37.2.3. Espectrofotmetro que permita lectura a 575 nm. 37.2.4. Matraz esfrico de cuello largo, de 500 ml y refrigerante con alargadera. 37.3. Reactivos. 171024 Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato RE 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131091 Metanol PA-ACS-ISO 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 131698 Sodio Disulfito PA-ACS 141717 Sodio Sulfito anhidro PRS 37.3.1. Solucin de Potasio Permanganato. Disolver 3 g de Potasio Permanganato PA-ACS-ISO y 15 ml de Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS. Preparar mensualmente. 37.3.2. Solucin de Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato. Solucin al 5%. Filtrar si no queda clara. Preparar semanalmente. 37.3.3. Solucin al 2% p/v de Sodio Sulfito anhidro PRS. 37.4. Procedimiento. Diluir o ajustar la muestra hasta una concentracin total de alcohol de 5-6% en volumen. Utilizando 50 ml de muestra, destilar en destilador simple, recogiendo 40 ml de destilado en bao de hielo. Diluir hasta 50 ml con Agua PAACS (si se ha determinado previamente el alcohol, el destilado puede ajustarse a 5-6% de concentra-
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cin de alcohol y utilizarse para esta prueba). Si hay ms de 0,05% de metanol por volumen, diluir hasta aproximadamente esa concentracin con Etanol 96% v/v PA previamente diluido al 5,5% con Agua PA-ACS. Para muestras que contengan menos de 0,05% de metanol, poner 200 ml de destilador eficiente de fraccionamiento, colocar el sistema de destilacin reflujo total durante 15 minutos y luego destilar lentamente a elevada proporcin de reflujo (por lo menos 20:1). Recoger 10 ml de destilado y diluir hasta 160 ml con Agua PA-ACS. Pipetear 2 ml de solucin de Potasio Permanganato en un matraz aforado de 50 ml. Enfriar en bao de hielo, aadir 1 ml de muestra diluida y fra y dejar 30 minutos en bao de hielo. Decolorar con un poco de Sodio Disulfito PA-ACS seco (*) y aadir 1 ml de solucin de Acido Cromotrpico. Aadir lentamente con agitado y en bao de hielo 15 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y colocar 15 minutos en bao de agua caliente (60-75). Enfriar, aadir una cantidad suficiente de Agua PA-ACS para llevar aproximadamente a la marca de 50 ml, mezclar y diluir hasta volumen con Agua PA-ACS a la temperatura ambiente. Leer la absorbancia a 575 nm utilizando como reactivo en blanco Etanol al 5,5% tratado anlogamente a la forma descrita. Tratar solucin patrn de Metanol PA-ACS-ISO, que contenga 0,025% por volumen de Metanol PA-ACS-ISO, en Etanol al 5,5% simultneamente en la misma forma, y leer la absorbancia (la temperatura del patrn y de la muestra no debe diferir en ms de 1, ya que la temperatura afecta a la intensidad del color). 37.5. Clculo. Calcular el contenido en metanol expresado en porcentaje. A Metanol = 0,025 F A A = absorbancia de la muestra. A = absorbancia de la solucin patrn de metanol. F = factor de dilucin de la muestra. 37.6. Observaciones. Si el color de la muestra es demasiado intenso, diluir con reactivo en blanco. No diluir ms de tres veces porque la relacin de cido cromotrpico a metanol se reduce demasiado. 37.7. Referencia. 37.7.1. Association of Official Agricultural Chemists. Official Methods of Analysis, pg.138, 1965. (*). En el original indica NaHSO3 seco. El Sodio Bisulfito como tal frmula slo existe en solucin acuosa y por tanto debe entenderse Sodio Disulfito, seco, de frmula Na2S2O5.
38. NITROGENO (Mtodo Kjeldhal) 38.1. Principio. Transformacin del nitrgeno orgnico en amonio sulfato por ataque con cido sulfrico en ebullicin en presencia de sustancias catalizadoras que acortan el tiempo de la mineralizacin y adicin de sal potsica que eleve el punto de ebullicin. Destilacin por ebullicin de vapor recogiendo el destilado en volumen conocido de solucin de cido sulfrico. Valoracin con solucin de sodio tiosulfato, del yodo liberado por el cido sulfrico al aadir al destilado solucin de potasio yoduro-potasio yodato. 38.2. Material y aparatos. 38.2.1. Aparato micro-Kjeldhal. 38.3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 182102 Acido Sulfrico 0,01 mol/l (0,02N) SV 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 122726 Cobre II Sulfato anhidro PA 171327 Fenolftalena solucin 1% RE Papel Tornasol 131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO 131540 Potasio Yodato PA-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 141625 Selenio metal, polvo PRS 182415 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 38.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 38.3.2. Catalizador de Selenio. Mezclar bien pulverizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal, polvo PRS. 38.3.3. Fenolftalena solucin 1% RE y Papel Tornasol. 38.3.4. Acido Sulfrico 0,01 mol/l (0,02N) SV. 38.3.5. Potasio Yoduro solucin al 4%. Disolver Potasio Yoduro PA en Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada. 38.3.6. Potasio Yodato solucin al 5%. Disolver Potasio Yodato PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada. 38.3.7. Solucin de Sodio Tiosulfato 0,02N. En un matraz aforado diluir a 1:5 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,02N obtenida. 38.3.8. Solucin concentrada de Almidn soluble RE. 38.4. Procedimiento. Poner en el matraz Kjeldhal 50 ml de vino, evaporar a ebullicin lenta hasta unos 10 ml, aadir 10 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y 0,6 g de
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la mezcla pulverizada y bien uniformada de Cobre II Sulfato anhidro PA, Selenio metal, polvo PRS y Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, continuar calentando primero lentamente y despus enrgicamente, hasta decoloracin, y proseguir unos minutos ms. Si es necesario se van aadiendo nuevas dosis de Acido Sulfrico 96% PA-ISO de 5 en 5 ml. Enfriar, pasar el contenido a matraz aforado de 100 ml arrastrando el residuo con pequeas porciones de Agua PA-ACS para enjuagar varias veces el matraz, comprobando que los ltimos lavados no dan trazas de reaccin cida al papel de tornasol. Tomar una alcuota de 20 ml y llevar al matraz del aparato de destilacin, adicionando unas gotas de Fenolftalena solucin 1% RE. En un vaso cilndrico de unos 200 ml, se aaden 10 ml de Acido Sulfrico 0,01 mol/l (0,02N) SV. Aadir al matraz solucin de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV (4%) en cantidad suficiente para viraje de la Fenolftalena solucin 1% RE y se encaja rpidamente en su sitio. Conectar el aparato de destilacin con el generador de vapor de agua y comenzar el arrastre del amonaco pasando al refrigerante y recogiendo el destilado en la Solucin Sulfrica. Despus de 15-20 minutos, comprobar con papel tornasol si una gota del destilado no acusa reaccin alcalina. En este caso separar el vaso y proceder a la valoracin. Aadir al vaso con el Acido Sulfrico 0,01 mol/l (0,02N) SV 4 ml de Potasio Yoduro al 4% y 2 ml de Potasio Yodato al 5%. Mezclar con una varilla y despus de 20 minutos valorar el yodo liberado con solucin de Sodio Tiosulfato 0,02N empleando como indicador 5-10 ml de solucin de Almidn. 38.5. Clculo. Calcular el nitrgeno expresado en meq/l o en mg/l. 10 - V Nitrgeno = x 100 meq/l 50 10 - V Nitrgeno = x 100 x 14 mg/l 50 V = volumen en ml de solucin de sodio tiosulfato 0,02N. 39(a). FLUOR (Provisional) 39(a).1. Principio. Incineracin de 525 del vino en presencia de un exceso de calcio o magnesio, destilacin en corriente de vapor del cido fluorhdrico a 135140, valoracin del cido destilado a pH 3,6 por solucin de torio nitrato en presencia de alizarina sodio suifonato. 39(a).2. Material y aparatos. 39(a).2.1. Aparato de Truhaut, que consta de generador de vapor, barbotador de pared doble, ampolla para la introduccin de la solucin sulfrica de las cenizas magnticas, refrigerante de retorno y refrigerante de West para la salida del destilado (figura 39.I.). 39(a).2.2. Cpsula de platino o nquel para las cenizas. 39(a).2.3. Horno elctrico regulable para 525. 39(a).2.4. Matraz de 250 ml. 39(a).2.5. Dos cpsulas de porcelana iguales, de unos 10 cm de dimetro. 39(a).2.6. Material para volumetra. 39(a).3. Reactivos. 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 171024 Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato RE 131057 Acido Sulfanlico PA-ACS 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171168 Azul de Bromotimol solucin 0,04% RE 211376 Lana de Vidrio lavada QP 131394 Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS 211276 Magnesio Oxido QP 141801 Plata Sulfato PRS 171634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE 181694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV Tetracloroetano Torio Nitrato 4-hidrato 39(a).3.1. Solucin Tampn de pH = 3,1. Mezclar 100 ml de Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE, 303 ml de Agua PA-ACS y 97 ml de Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV. 39(a).3.2. Solucin de Torio Nitrato 0,01N. Disolver 1,3806 g de Torio Nitrato 4-hidrato, en un litro de Agua PA-ACS. 39(a).3.3. Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. 39(a).3.4. Acido Sulfrico al 1/10. Diluir convenientemente Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 39(a).3.5. Azul de Bromotimol solucin 0,04% RE. 39(a).3.6. Magnesio Oxido al 1/10. Suspensin de Magnesio Oxido QP en Agua PA-ACS.
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39(a).3.7. Magnesio Acetato al 1/10. Disolver Magnesio Acetato 4-hidrato PA-ACS en Agua PAACS. 39(a).3.8. Solucin Spadns. Aadir a 0,02 g de Spadns, Agua PA-ACS hasta 100 ml. El Spadns resulta de la combinacin del Acido Sulfanlico PAACS con el Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato RE. Su proceso de preparacin es laborioso. Se encuentra preparado por Eastman-Kodak. 39(a).3.9. Plata Sulfato PRS. 39(a).4. Procedimiento. 39(a).4.1. Incineracin.- Poner 20 ml de vino en cpsula de platino o de nquel, aadir 2 ml de suspensin de Magnesio Oxido al 1/10 y 4 ml de Magnesio Acetato al 1/10. Evaporar, desecar y calcinar en el horno a 550C. 39(a).4.2. Destilacin.- Colocar en el barbotador del aparato Truhaut 20 ml de Acido Sulfrico 96%
PA-ISO diluido al 50% en Agua PA-ACS, 0,5 g de Lana de Vidrio lavada QP y 0,5 g de Plata Sulfato PRS, con el fin de retener el Acido Clorhdrico. Llevar el barbotador a 146C por ebullicin del Tetracloroetano (punto de ebullicin 146) en la doble pared (A) y forzar la corriente de vapor de agua a la velocidad de 5 g por minuto. Conviene calentar previamente el Tetracloroetano en la doble pared del aparato antes de que barbote el vapor en el lquido, por haberse observado que as se evitan la formacin de burbujas de espuma, que son un peligro por posible desborde y paso al refrigerante de salida. Se contina la destilacin hasta recoger unos 100 ml de destilado. Con estas operaciones queda el aparato desprovisto de posible presencia de flor. Disolver las cenizas en el menor volumen posible de Acido Sulfrico al 1/10 e introducir en el barbota-
REFRIGERANTE LIEBIG-WEST 40 cm, BOCAS 14/23
Figura 39.I. Aparato de Truhaut
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El barbotador (C) tiene una pared doble (A) donde se hierve el tetracloroetano a 146. El tubo de entrada de vapor de agua rodea (E) la pared interna y penetra en su interior, prolongndose verticalmente hasta casi el fondo. El refrigerante de retorno para condensar los vapores de tetracloroetano se conecta en (B). La ampolla (F), con llave y tapn esmerilado, se ajusta a la boca del barbotador y el tubo penetra hasta la misma altura que el punto de entrada del tubo de vapor de agua. La salida del destilado comunica con refrigerante de West, vertical que se prolonga por alargadera tubular cuyo pico se sumerge en el agua que contiene el matraz receptor.
REFRIGERANTE DE BOLAS DE REFUERZO 30 CM. BOCAS 14 / 23
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dor, enfriando previamente el lquido del barbotador antes de verter en l la solucin sulfrica de cenizas. Proseguir la destilacin con el barboteo de vapor, comenzando por calentar previamente, como se ha indicado, el Tetracloroetano contenido en la doble pared. Recoger unos 100 ml de destilado en un matraz de 250 ml que contenga 5 ml de Agua PA-ACS, de forma que quede sumergido el pico de la alargadera del refrigerante. 39(a).4.3. Valoracin.- Descarbonatar el destilado por agitacin en fro y con vaco neutralizar con Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV en presencia de Azul de Bromotimol solucin 0,04% RE como indicador. Llevar despus a una cpsula de porcelana blanca bien limpia, siendo recomendable frotar previamente su interior con pasta silcea y enjuagarla con Agua PA-ACS. Aadir a 50 ml del destilado 1 ml de solucin acuosa de Spadns y 1 ml de Solucin Tampn de pH = 3,1. Aadir con microbureta solucin de Torio Nitrato 0,01N hasta viraje a rojo violeta. Para apreciar el punto del viraje se compara la tonalidad del color con la de una valoracin testigo hecha en otra cpsula igual y con el mismo volumen de Solucin Tampn, 1 ml de Spadns y 0,05 ml de solucin de Torio Nitrato. Se ha observado que con 0,1 ml de Torio Nitrato es ms clara la comparacin de colores. Restar del volumen de Torio Nitrato gastado en el lquido problema los 0,05 y 0,1 ml aadidos al testigo. 39(a).5. Clculo. Equivalencia: 1 ml de solucin de torio nitrato 0,01N < > 0,19 mg de flor. Expresar los resultados en mg de flor por litro y con una aproximacin de unos 0,5 mg. 39(a).6. Referencia. 39(a).6.1. Fabr, R.; Trumant, A.; Bouquet, A., y Bernuchon, J. (1960-1965), Cont. Rendu Aca. Sciences.1965, 240, pg. 211; 1959, 248, pg. 504. 39(b). FLUOR 39(b).1. Principio. Determinacin directa del flor total por potenciometra utilizando un electrodo inico especfico. Para eliminar las posibles causas de error se le adiciona al vino una solucin tampn. 39(b).2. Material y aparatos. 39(b).2.1. pH-metro con escala que permita apreciar 0,1 mV. 39(b).2.2. Electrodo selectivo de flor. 39(b).2.3. Electrodo de referencia de calomelanos. 39(b).2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml. 39(b).2.5. Recipientes de plstico de 50-100 ml de capacidad para mezclas y matraces en material de plstico para conservar las soluciones patrn. 39(b).2.6. Pipetas de precisin graduadas en microlitros. 39(b).2.7. Agitador magntico. 39(b).3. Reactivos. 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131675 Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO 39(b).3.1. Solucin patrn de fluoruros 102M conteniendo 190 mg de F por litro. Pesar 0,4198 g de Sodio Fluoruro PA-ACS-ISO (desecado durante cuatro horas a 106C antes de su utilizacin), disolver y enrasar a un volumen de 1.000 ml. 39(b).3.2. Solucin Tampn de Acido orto-Fosfrico 0,75 M. Diluir convenientemente Acido ortoFosfrico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. 39(b).4. Procedimiento. 39(b).4.1. Verificacin del electrodo y determinacin de su pendiente. A partir de la solucin 3.1 preparar, mediante diluciones, soluciones de concentraciones conocidasde 103M, 104M y 105M, que contienen, respectivamente, 19; 1,9 y 0,19 mg de F por litro. Tomar dos vasos de precipitados; en uno de ellos colocar 25 ml de la disolucin 103M de F , adicionar 5 ml de solucin Tampn de Acido ortoFosfrico y determinar su potencial agitando de forma moderada mientras dure la medida. En el otro vaso, poner 25 ml de disolucin 104M de F , 5 ml de solucin Tampn de Acido orto-Fosfrico y determinar su potencial, agitando como anteriormente. La diferencia entre los dos potenciales es la pendiente del electrodo (S) y cuyo valor debe ser, aproximadamente, 59 mV. 39(b).4.2. Determinacin. Tomar 25 ml de vino, adicionar 5 ml de la solucin Tampn y determinar su potencial (E1). A continuacin, y en el mismo vaso, adicionar un ml de disolucin 103M de F y determinar su potencial (E2) Si el salto de potencial es pequeo, indica que la concentracin de F es muy alta y hay que diluir la muestra hasta que el salto alcanzado est comprendido alrededor de 20-40 mV. Los volmenes de muestra y solucin Tampn pueden ser modificados en funcin de la forma y disposicin de los electrodos utilizados. 39(b).5. Clculo. La cantidad de flor, expresada en mg/l, nos viene determinada por la frmula:
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V.C CF- = E 25 [(antilog ) - 1] S Siendo: CF- = concentracin, en mg/l, de F en el medio. V = volumen, en ml, de solucin patrn de fluoruro aadida. C = concentracin, en mg/l, de la solucin patrn adicionada. S = pendiente del electrodo. E = diferencia de los potenciales E1 y E2 obtenidos en 39(b).4.2. Este valor se deber multiplicar por el factor de dilucin correspondiente, en caso de haber sido necesario efectuarla. 39(b).6. Observaciones. 39(b).6.1. Todas las soluciones deben conservar una temperatura prxima a 25C 1C durante la medida . 39(b).7. Referencias. 39(b).7.1. H. E. Haller y C. H. Junge, 1974, O. I. V. 317/FV/518 y 133/FV/439. 39(b).7.2. Deschreider, A., y Mme. R. Meaux, 1974. Determination des fluor dans les vins et eaux minerales naturelles au moyen dune electrode ionique specifique. 40. HIDROXIMETILFURFURAL (Provisional) 40.1. Principio. El hidroximetilfurfural se produce al calentar en exceso los mostos para su concentracin, desulfitacin o pasterizacin. La presencia de hidroximetilfurfural en ciertos vinos dulces se considera como indicio de la adicin de mostos. Este mtodo est basado en la reaccin de Winckler (formacin de un complejo rojo para la accin del hidroximetilfurfural sobre la p-toluidina y cido barbitrico). Se utiliza para los vinos blancos y tintos, previa extraccin con ter etlico en los segundos. 40.2. Material y aparatos. 40.2.1. Espectrofotmetro y accesorios (cubeta para 1 cm de espesor del lquido). 40.2.2. Matraces aforados. 40.2.3. Embudo de decantacin con tapn esmerilado y de 100 ml de capacidad. 40.2.4. Cpsula de porcelana de unos 10 cm de dimetro. 40.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO Acido Barbitrico
131090 2-Propanol PA-ACS-ISO 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 162378 P-Toluidina PS 40.3.1. Reactivo de p-Toluidina. Disolver 10 g de p-Toluidina PS en 50 ml de 2-Propanol PA-ACSISO. Llevar a matraz aforado de 100 ml, aadir 10 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y completar hasta el enrase con 2-Propanol PA-ACS-ISO. Este reactivo dura 4 das. 40.3.2. Reactivo de Acido Barbitrico. Se introduce en matraz aforado de 100 ml, 0,5 g de Acido Barbitrico desecado a 105C y unos 70 ml de Agua PA-ACS. Se calienta ligeramente en bao de agua, se enfra y enrasa con Agua PA-ACS. 40.4. Procedimiento. Llevar 10 ml del vino a embudo de decantacin y aadir 12 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. Agitar durante 3 minutos, decantar el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO a cpsula de porcelana que contenga 2 ml de Agua PA-ACS, repetir cuatro veces la extraccin del residuo del embudo con otros 12 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez y decantar igualmente a la cpsula. Dejar evaporar el ter en medio ambiente. Al residuo de evaporacin aadir Agua PA-ACS hasta 10 ml, agitar y tomar 2 ml para anlisis. Mezclar los 2 ml tomados con 5 ml de Reactivo de p-Toluidina y un 1 ml de Acido Barbitrico llevndolos inmediatamente a la cubeta del espectrofotmetro (de un cm de espesor del lquido) y hacer rpidamente la lectura de la absorbancia a 546 nm. Emplear como lquido de referencia el Agua PA-ACS en lugar de Acido Barbitrico, o sea, 3 ml de Agua PA-ACS ms 5 ml de Reactivo de p-Toluidina. 40.5. Clculo. Determinar el contenido en hidroximetilfurfural expresado en mg/l por comparacin con la correspondiente curva patrn teniendo en cuenta el factor de dilucin. 40.6. Observaciones. En el caso de vinos turbios centrifugar previamente. Si hay presencia de CO2 eliminarlo agitando el vino en un matraz. 40.7. Referencias. 40.7.1. Sandoval, J. A.; Hidalgo, T. Puesta a punto de un mtodo para anlisis cuantitativo espectrofotomtrico de hidroximetilfurfural en los vinos. Boletn I. N. I. A., 16: 4. 454-469,1967. 40.7.2. Amerine, M. A. Hydroximethyl-furfural in California Wines. Food Research. 13: 264-269, 1948.
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41. DETERMINACION CUALITATIVA DE ACIDO SORBICO, BENZOICO, p-CLOROBENZOICO, SALICILICO, p-HIDROXIBENZOICO Y SU ESTER ETILICO 41.1. Principio. Extraccin con ter etlico de los antispticos del vino previamente acidificados. Separacin por cromatografa de capa fina. Identificacin a la luz ultravioleta y reveladores especficos. 41.2. Material y aparatos. 41.2.1. Extractor en continua de Palkin (figura 41.I) que comporta un tubo A de 55 cm de longitud y 3,8 cm de dimetro. La parte superior va unida a un refrigerante de bolas mediante boca esmerilada 34-25. A 30 cm de la base y formando un ngulo de 60 se encuentra un tubo lateral acodado a los 13 cm, formando un ngulo de 120. Este tubo lateral termina en una junta esmerilada 24/40 en bisel, lo que permite su unin a un matraz de 50 ml que se calienta sobre una placa. En el tubo A se introducen bolitas de vidrio y el tubo interior (B) de 48,5 cm de longitud y 1,2 cm de dimetro, terminando en una placa de vidrio poroso. 41.2.2. Agitador mecnico (ver 41.6.1). 41.2.3. Erlenmeyer de 500 ml de boca esmerilada. 41.2.4. Bao Mara. 41.2.5. Estufa elctrica (200 C). 41.2.6. Embudos de separacin de 500 ml. 41.2.7. Cpsulas de porcelana de 70-80 cm de dimetro. 41.2.8. Equipo de cromatografa de capa fina. 41.2.9. Placas de vidrio de 20 x 20 cm. 41.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 121014 Acido Benzoico PA 182108 Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV Acido p-Clorobenzoico 163231 Acido 4-Hidroxibenzoico PS 141045 Acido Saliclico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 141055 Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX 131057 Acido Sulfanlico PA-ACS 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO Acido Tiobarbitrico 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 121085 Etanol 96% v/v PA 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm BHT PA-ACS-ISO 132063 n-Hexano PA-ACS 131252 Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO 164542 4-Nitroanilina PS 122006 n-Pentano PA Polvo de Poliamida para Cromatografa 131500 Potasio Dicromato PA-ISO Revelador F 254 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS 131647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA-ISO 182159 Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV 131703 Sodio Nitrito PA-ACS 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO 131091 Metanol PA-ACS-ISO 41.3.1. Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 41.3.2. Metanol PA-ACS-ISO. 41.3.3. Etanol 96% v/v PA 41.3.4. Acido Sulfrico 96% PA-ISO diluido a 20% (v/v) con Agua PA-ACS. 41.3.5. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO. 41.3.6. Polvo de Poliamida para cromatografa Macherey-Nagel o Merck. 41.3.7. Revelador F 254 Merck o equivalente. 41.3.8. Solventes: n-Pentano PA: 10 partes. n-Hexano PA-ACS: 10 partes. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO: 3 partes. 41.3.9. Soluciones patrones. Preparar soluciones de 0,1 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA con los Acidos Srbico (USP-NF) PRS-CODEX, p-Clorobenzoico, Saliclico (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX, 4-Hidroxibenzoico PS y sus steres. Preparar una solucin de 0,2 g por 100 ml en Etanol 96% v/v PA con el Acido Benzoico PA. 41.3.10. Preparacin de las placas. 10 g de Poliamida con el 3% de indicador fluorescente se homogenizan durante 20 segundos en agitador mecnico con 35 ml de Metanol PA-ACS-ISO y 25 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PAACS-ISO. Las placas impregnadas se secan durante 1 hora a 80C. 41.3.11. Solucin hidroalcohlica conteniendo 0,15 g por 100 de Potasio Dicromato PA-ISO (41.6.2). 41.3.12. Solucin saturada de Acido Tiobarbitrico en Etanol 96% v/v PA (0,1% aproximadamente) (41.6.2). 41.3.13. Solucin de 0,5 g de 4-Nitroanilina en 100 ml de Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV (41.6.3). 41.3.14. Solucin de Sodio Nitrito al 5% (41.6.3). Disolver Sodio Nitrito PA-ACS en Agua PA-ACS. 41.3.15. Solucin de Sodio Acetato al 20% (41.6.3). Disolver Sodio Acetato anhidro PA-ACS en Agua PA-ACS. 41.3.16. Solucin de Sodio Carbonato al 15% (41.6.3). Disolver Sodio Carbonato 10-hidrato PAISO en Agua PA-ACS. 41.3.17. Reactivo de Pauly. Disolver 4,5 g de Acido Sulfanlico PA-ACS en 45 ml de Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV (calentando, diluir la solucin a 500 ml en Agua PA-ACS, 10 ml de la solucin diluida se enfran con hielo), se le aaden 10 ml de solucin acuosa de Sodio Nitrito al 4,5% tambin fra. El
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reactivo resultante se mantiene durante 15 minutos a 0C (a esta temperatura es estable de 1 a 3 das) y se le aade un volumen igual de solucin acuosa de Sodio Carbonato al 10% en el momento de pulverizar las placas (41.6.4). 41.4. Procedimiento. Acidular 100 ml de vino o mosto con 10 ml de Acido Sulfrico al 20%.
Extraer tres veces con 20 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez, reuniendo las soluciones etreas; o bien, durante 6 horas en el extractor continuo de Palkin con 175 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO a una velocidad de reflujo de 500-600 ml/hora. Los extractos etreos se desecan con 6 g de Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO durante 12 horas. Filtrar y el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO se evapora a sequedad en bao Mara 40-45. El residuo se disuelve en un ml Etanol absoluto PA tomando cantidades de 5 a 10 l para cromatografa. Mediante el tratamiento de los extractos etreos con 5 ml de Sodio Hidrxido 2,5N (diluir a 1:1 Sodio Hidrxido 5 mol/l (5N) SV con Agua PA-ACS) y acidulado de nuevo con 5 ml de Acido Sulfrico al 20% se obtendr en los cromatogramas las manchas correspondientes a los cidos liberados por efecto de la saponificacin. Para obtener el desarrollo de los cromatogramas, depositar la muestra en forma de manchas puntuales de 5-10 l. El desarrollo se lleva a cabo en cmara saturada con el eluyente y a temperatura ambiente. Dejar migrar el solvente hasta una altura de unos 15 cm (una hora y media a dos horas y media). Retirar la placa de la cubeta y dejar secar a la temperatura ordinaria. 41.5. Clculo. Observacin a la luz ultravioleta (360 nm). Los conservadores aparecen de abajo arriba en el siguiente orden: cido 4-hidroxibenzoico, steres del cido 4-hidroxibenzoico, cido saliclico, cido p-clorobenzoico, cido benzoico y cido srbico. Para detectar el cido srbico pulverizar primeramente el cromatograma con la solucin 41.3.11 y seguidamente con la 41.3.12. Calentar la placa a 80C, 5-10 minutos. La mancha de cido srbico aparece de color rojo sobre fondo ocre. Para detectar los cidos saliclico y 4-hidroxibenzoico y ster etlico del cido 4-hidroxibenzoico, pulverizar la placa con una mezcla compuesta de 2 ml de 41.3.13 ms 3-5 gotas de 41.3.14 ms 8 ml de 41.3.15, aadindolos en este orden. Una vez seca la placa aparecen las manchas correspondientes a los tres componentes citados de color amarillo. La materia colorante propia de los vinos toma colores que van del amarillo al naranja. Pulverizar de nuevo con la solucin 41.3.16. La manchas del cido 4-hidroxibenzoico toman color rojo; las del ster etlico del cido 4-hidroxibenzoico, color rosa, y las del acido saliclico, amarillo limn. Los distintos componentes de la materia colorante toman colores que van desde distintos tonos de ocre al pardo y tambin verde y azulado.
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Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin
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Para detectar los cidos 4-hidroxibenzoico y saliclico y el ster etlico del cido 4-hidroxibenzoico se utiliza empleando el reactivo 41.3.17. 41.6. Observaciones. 41.6.1. Para el anlisis cualitativo. 41.6.2. Para detectar el cido srbico. 41.6.3. Para detectar los cidos saliclico y 4-hidroxibenzoico y ster etlico del cido 4-hidroxibenzoico. 41.6.4. Para detectar los cidos 4-hidroxibenzoico y saliclico y el ster etlico del cido 4-hidroxibenzoico. 42. INVESTIGACION DE DERIVADOS MONOHALOGENADOS DEL ACIDO ACETICO 42.1. Principio. Extraccin de los derivados monohalogenados del cido actico con ter etlico previamente acidificado. Formacin de tioindigo, de color rojo, que se extrae con cloroformo. El mtodo permite detectar de 1,5 a 2 mg/l de cido monocloroactico y las cantidades correspondientes de otros derivados monohalogenados. 42.2. Material, aparatos y reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO Acido Tiosaliclico 131074 Agua PA-ACS 131252 Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 131503 Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS 181692 Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV 182158 Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV 131716 Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO 42.2.1. Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 42.2.2. Acido Sulfrico (1 + 4) (v/v) . Diluir Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 42.2.3. Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO desecado en estufa a 105C. 42.2.4. Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. 42.2.5. Acido Tiosaliclico (2 Mercaptobenzoico) al 3% (p/v) en Sodio Hidrxido 1,5N (diluir Sodio Hidrxido 2 mol/l (2N) SV con Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada). 42.2.6. Potasio Ferricianuro al 2% (preparar inmediatamente antes de usar). Disolver Potasio Hexacianoferrato lll PA-ACS en Agua PA-ACS. 42.2.7. Triclorometano estabilizado con etanol PA-ACS-ISO. 42.2.8. Bao de agua. 42.2.9. Estufa elctrica. 42.2.10. Embudos de separacin. 42.2.11. Cpsulas de porcelana 70-80 mm . 42.2.12. Tubos de 150 x 15 mm con tapn esmerilado. 42.2.13. Tubos de 150 x 15 mm con llave inferior. 42.3. Procedimiento. Introducir en un Erlenmeyer de 500 cc y boca esmerilada 100 ml de vino, 5 ml de Acido Sulfrico (1+5) y, agitando, 100 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO, continuando en un agitador durante una hora. Separar en embudo de decantacin y descartar la capa inferior. Aadir 8-10 g de Sodio Sulfato anhidro PA-ACS-ISO al extracto ter, agitando vigorosamente. Verter el ter en otro embudo de 500 ml, agregando sucesivamente: 5,0, 2,5 y 2,5 ml de Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV, agitando un minuto cada vez y reuniendo las tres capas inferiores alcalinas obtenidas en un tubo con tapn esmerilado, en el cual se habr vertido previamente 1 ml de la solucin de Acido Tiosaliclico. Agitar enrgicamente durante treinta segundos y transferir el contenido del tubo a una cpsula de porcelana, evaporando durante una hora en bao de agua (90-100C), tiempo que habr de respetarse aun cuando el agua se evapore mucho antes. Si se formara una costra sobre la superficie, es conveniente romperla con una varilla fina de vidrio, lo que facilitar la evaporacin. Pasado este tiempo, llevar la cpsula con el residuo seco a la estufa mantenida a 200C durante treinta minutos exactamente, pasados los cuales se retira y se deja enfriar a la temperatura ambiente. Aadir 2 ml de Agua PA-ACS que disolver la mayor parte del extracto y recoger en un tubo con llave en su parte inferior; agregar otros 2 ml de Agua PA-ACS para lavar la cpsula y, por ltimo, 3 ml de solucin de Potasio Ferricianuro, recogiendo todo ello con los primeros, agitando bien el tubo durante treinta segundos para facilitar la oxidacin. Conviene asegurarse de que todo el residuo se disolvi bien en los 4 ml de Agua PA-ACS antes de aadir la solucin de Potasio Ferricianuro. En presencia de un derivado monohalogenado se desarrollar una coloracin rojo-anaranjado (apenas perceptible para contenidos inferiores a 0,1 mg). Agregar 3 ml de Triclorometano estabilizado con etanol PAACS-ISO; agitar alternativamente tres-cuatro veces y decantar. Si el extracto clorofrmico inferior se colorea de rojo-fucsia o rosado, indica la presencia de derivados monohalogenados del cido actico. 42.4. Referencias. 42.4.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A 35h. 42.4.2. Cabezuco, Gorostiza y Garrido: Determinacin de derivados monohalogenados del cido actico. Instituto de Fermentaciones (1971, ATA, vol. II, nm. 1, pginas 145-151).
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43. GRADO ALCOHOLICO EN POTENCIA 43.1. Principio. Es el volumen en litros de alcohol susceptible de obtenerse por fermentacin total de los azcares contenidos en 100 litros de vino. 43.2. Material y aparatos. Como en 7(a).2 o 7(b).2. 43.3. Reactivos. Como en 7(a).3 o 7(b).3. 43.4. Procedimiento. Como en 7(a) o 7(b). 43.5. Clculo. N-1 Grado alcohlico en potencia = 17 donde: N = g/l de azcares reductores de la muestra. 44. GRADO ALCOHOLICO TOTAL 44.1. Principio. Se considera el grado alcohlico total como la suma del grado alcohlico adquirido determinado segn 5(a) o 5(b), y del grado alcohlico potencial, determinado segn 43. 44.2. Clculo. Grado alcohlico total = Grado alcohlico adquirido + + Grado alcohlico potencial. 45. COLORANTES SINTETICOS 45.1. Principio. Concentracin mediante ebullicin, extraccin con ter etlico y fijacin de colorantes sintticos bsicos y cidos sobre lana y posterior confirmacin por cromatografa en papel. 45.2. Material y aparatos. 45.2.1. Hebras de lana blanca previamente desengrasadas con Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 45.2.2. Hebras de lana blanca mordentadas. Disolver 1 g de Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX y 1,2 g de Potasio Hidrgeno Tartrato PA en 500 ml de Agua PA-ACS. Introducir en esta solucin 10 g de hebras de lana blanca, previamente desengrasadas con Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO y secas, agitar durante una hora y dejar reposar de
dos a tres horas; transcurrido dicho tiempo, secar a temperatura ambiente. 45.2.3. Papel para cromatografa Whatman nmero 1 o similar. 45.2.4. Erlenmeyer de 50 ml de capacidad. 45.2.5. Ampolla de decantacin de 200 ml de capacidad. 45.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 131082 1-Butanol PA-ACS-ISO 121085 Etanol 96% v/v PA 141101 Aluminio Sulfato 18-hidrato escoriforme (BP, F. Eur.) PRS-CODEX 141128 Amonaco 20% (en NH3) PRS 132770 Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 121486 Potasio Hidrgeno Tartrato PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 45.3.1. Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 45.3.2. Sodio Hidrxido al 5%. Disolver Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 45.3.3. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. 45.3.4. Acido Actico diluido, 1/18 (v/v). Diluir Acido Actico glacial PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. 45.3.5. Acido Clorhdrico diluido 1/10 (v/v). Diluir Acido Clorhdrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS. 45.3.6. Amonaco 20% (en NH3) PRS. 45.3.7. Solvente nmero 1 para cromatografa de colorantes de carcter bsico: 1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml Acido Actico glacial PA-ACS-ISO . . . 10 ml Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml 45.3.8. Solvente nmero 2 para la cromatografa de colorantes de carcter cido: 1-Butanol PA-ACS-ISO . . . . . . . . . . . 50 ml Etanol 96% v/v PA . . . . . . . . . . . . . . 25 ml Amonaco 20% (en NH3) . . . . . . . . . . 10 ml Agua PA-ACS. . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 ml 45.4. Procedimiento. 45.4.1. Determinacin de colorantes de carcter bsico. Poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebullicin hasta que el vino se reduzca a un tercio de su volumen. Enfriar y neutralizar con la solucin de Sodio Hidrxido al 5% hasta claro viraje del color natural del vino. Extraer dos veces, con 30 ml de Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO cada vez, y juntar las dos fases etreas; en ellas se encuentran eventualmente los colorantes bsicos; el residuo de la extraccin debe ser conservado con objeto de investigar los colo-
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rantes cidos. Lavar dos veces el Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO empleado en la extraccin con 5 ml de Agua PA-ACS, con el objeto de eliminar el Sodio Hidrxido; a continuacin, aadir 5 ml de Acido Actico diluido a la fase etrea; la presencia de un colorante bsico colorea la fase cido-acuosa; la presencia de este colorante puede confirmarse por su fijacin sobre lana mordentada. La fase cido-acuosa obtenida se alcaliniza con Amonaco 20% (en NH3) PRS previamente diluido al 5% con Agua PA-ACS; aadir 0,5 g de lana mordentada y llevar a ebullicin durante un minuto; aclarar la lana bajo el chorro de agua fra; de permanecer coloreada, el vino contiene un colorante bsico. 45.4.1.1. Caracterizacin por cromatografa de papel. A partir de la fase actico-acuosa que contiene el colorante bsico, concentrar hasta 0,5 ml. Si el colorante ha sido fijado sobre lana, aadir a sta 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y llevar a ebullicin, y una vez retirada la lana previamente escurrida, concentrar la solucin hasta 0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografa 20 microlitros de la anterior solucin concentrada a 3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior. Introducir dicho papel en una cubeta que contenga el solvente 45.3.7. de forma que su borde inferior est sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejar secar al aire cuando se haya alcanzado una altura del frente del solvente comprendido entre 20 o 25 cm. Identificar el colorante por medio de soluciones de colorantes sintticos bsicos depositados simultneamente sobre el cromatograma. 45.4.2. Determinacin de colorantes de carcter cido. Partir del residuo de vino concentrado a un tercio y neutralizado despus de su extraccin con Eter Dietlico estabilizado con 6 ppm de BHT PA-ACS-ISO; si no se realiz la determinacin de colorante de carcter bsico, poner 200 ml de vino en un Erlenmeyer de 500 ml y llevar a ebullicin hasta que el vino se reduzca a un tercio de su volumen. En uno u otro caso, aadir 3 ml de Acido Clorhdrico diluido (45.3.5) y 0,5 g de lana blanca; hervir durante cinco minutos, decantar el lquido y lavar la lana con Agua PA-ACS abundante. En el Erlenmeyer que contiene la lana, aadir 100 ml de Agua PAACS y 2 ml de Acido Clorhdrico diluido (45.3.5); hervir durante cinco minutos, decantar el lquido cido y repetir esta operacin hasta que el lquido de lavado sea incoloro. Despus de haber lavado bien la lana, para eliminar completamente el lquido cido aadir 50 ml de Agua PA-ACS y 10 gotas de Amonaco 20% (en NH3) PRS; llevar a ebullicin suave durante diez minutos a fin de disolver la materia colorante artificial que eventualmente se haya fijado sobre la lana. A continuacin, retirar la lana del Erlenmeyer, llevar el volumen de lquido a 100 ml y hervir hasta evaporacin completa del Amonio Hidrxido; una vez conseguida dicha evaporacin, aadir 2 ml de Acido Clorhdrico diluido (45.3.5) (comprobar que el lquido haya adquirido reaccin francamente cida, llevando una gota de ste sobre el papel indicador). Poner en el Erlenmeyer 60 mg de lana blanca y llevar a ebullicin durante cinco minutos; retirar la lana y aclararla bajo el chorro de agua fra. Si despus de esta operacin la lana toma coloracin roja, cuando se trata de vino tinto, o amarilla, si se trata de vino blanco, confirma la presencia de materia colorante orgnica artificial de naturaleza cida. Si la coloracin adquirida es dbil o dudosa, repetir el tratamiento con Amonaco 20% (en NH3) PRS y hacer una segunda fijacin sobre una hebra de lana de 30 mg. Si transcurrida esta segunda fijacin se obtiene una coloracin rosa, aunque sea dbil, se deduce la presencia de colorante cido. Recurrir para un anlisis ms completo a nuevas fijaciones-eluciones (hasta 4 o 5), operando siempre de forma idntica a la empleada para la segunda fijacin hasta que se obtenga una coloracin roscea que, aunque sea plida, no ofrece lugar a dudas. 45.4.2.1. Caracterizacin por cromatografa de papel. Aadir sobre la hebra de lana coloreada 10 ml de Agua PA-ACS, 10 gotas de Amonaco 20% (en NH3) PRS y llevar a ebullicin; retirar la lana previamente escurrida y concentrar la solucin amoniacal hasta 0,5 ml. Depositar sobre papel de cromatografa 20 microlitros de la anterior solucin concentrada, a 3 cm del borde lateral y a 2 cm del borde inferior; introducir dicho papel en una cubeta que contenga el solvente 45.3.8 de forma que su borde inferior est sumergido en el solvente 1 cm. Retirar y dejar secar al aire cuando se haya alcanzado una altura del frente del solvente comprendida entre 20 o 25 cm. Identificar el colorante por medio de soluciones de colorantes sintticos cidos depositados simultneamente sobre el cromatograma. 45.5. Referencia. 45.5.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. A43k, pginas 1-6. 46. MERCURIO 46.1. Principio. Oxidacin de la materia orgnica con cido ntrico y crmico, reduccin de las sales mercricas por accin de Sn2+, volatilizacin del Hg metlico, arrastre del mismo por corriente de aire y determinacin de su absorbancia a 253,7 nanmetros. Este mtodo es aplicable a concentraciones de mercurio superiores a 0,05 mg/l.
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46.2. Material y aparatos. 46.2.1. Espectrofotmetro de absorcin. 46.2.2. Lmpara de mercurio. 46.2.3. Aparato para la reduccin del ion mercrico a mercurio metal y posterior arrastre de ste con corriente de aire (figura 46.1). 46.2.4. Matraces de reaccin de forma cnica de 100 ml de capacidad. 46.2.5. Bomba peristltica accionada con motor provisto de vaciador de velocidad. 46.2.6. Llave de purga en T de tefln. 46.2.7. Tubo flexible de tign de 1/8 pulgada de dimetro interior y un metro, aproximadamente, de longitud. 46.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 471058 Acido Sulfrico 95-98% (mx 0,0000005% de Hg) PA-ACS-ISO
131074 Agua PA-ACS 471153 Cromo VI Oxido (mx 0,000005% de Hg) PA-ACS 471303 Estao ll Cloruro (mx 0,000005% de Hg) PA-ACS-ISO 121925 Hidroxilamonio Sulfato PA 313186 Mercurio solucin patrn Hg = 1,000 0,002 g/l AA 251450 Parafina P. F. 55-60 C en pastilla DC 46.3.1. Acido Sulfrico 95-98% (mximo 0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO, exento de mercurio. 46.3.2. Mercurio II Oxido amarillo PA-ACS. 46.3.3. Cromo VI Oxido (mx 0,000005% Hg) PA-ACS exento de mercurio. 46.3.4. Cromo VI Oxido (mx 0,000005% Hg) PA-ACS exento de mercurio. 46.3.5. Solucin de Acido Crmico al 5%. Llevar a un vaso de 500 ml 25 g de Cromo VI Oxido y
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Figura 46.l. Esquema de la instalacin
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disolverlos en 25 ml de Agua PA-ACS. Aadir lentamente y agitando Acido Sulfrico concentrado hasta enrasar a 500 ml cuando la solucin est fra. 46.3.6. Solucin reductora.- Solucin al 40% de Estao II Cloruro en Agua PA-ACS, acidulada con Acido Sulfrico. 46.3.7. Solucin patrn.- Mercurio solucin patrn Hg = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,080 g de 131426 Mercurio ll oxido amarillo PA en 100 ml de 131019 Acido Clohdrico 35% PA-ISO a 1000 ml. En ambos casos, mediante dilucin 1/1.000 se obtiene la solucin de 1 mg/l. 46.4. Procedimiento. 46.4.1. Preparacin de la muestra. Tomar 1 ml de muestra y colocarla dentro de un matraz cnico. Aadir 2 ml de Acido Ntrico 70% PAACS-ISO. Cerrar con pelcula de Parafina P. F. 5560C en pastilla DC y dejarlo en digestin durante sesenta minutos a temperatura ambiente. Aadir 5 ml de Acido Crmico al 5%, refrigerando durante la adicin en bao de hielo. Tapar el matraz y dejarlo durante sesenta minutos, agitando cada diez minutos. Transcurrido este tiempo, aadir 15 ml de Agua PA-ACS, enfriando durante la adicin con bao de hielo. Una vez fros los matraces, aadir 2 g, aproximadamente, de Hidroxilamonio Sulfato PA, agitar y acoplar los matraces al aparato de medida. Aadir 10 ml de solucin reductora. Continuar como en 46.4.3. 46.4.2. Construccin de la curva patrn. A partir de 46.3.7, tomar 0; 5; 10; 15; 20 y 25 ml. Tratarlas a continuacin como se indica en 46.4.1. Estas soluciones contienen 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 y 0,5 partes por milln de Hg. Anotar las absorbancias obtenidas frente a las concentraciones correspondientes. 46.4.3. Determinacin. Efectuar la lectura de la absorbancia de la muestra. Una vez preparada segn 46.4.1. 46.5. Referencias. 46.5.1. A. Bouchard: Determination of mercury aftersoon temperature digestion by flamaless atomic absorption. Atom. Absorpt. Newsletter, vol. 12, nmero 5 (115-117), 1973. 46.5.2. A. Garca de Jaln y J. Fras: Un mtodo para la determinacin de mercurio en vinos mediante espectrofotometra de absorcin atmica sin llama. Ministerio de Agricultura. Abril 1972. 47. PLOMO 47.1. Principio. Determinacin del plomo por A. A. despus de una concentracin previa con objeto de conseguir resultados suficientemente precisos. 47.2. Material y aparatos. 47.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 47.2.2. Lmpara de plomo. 47.2.3. Cpsula de platino de 100 ml de capacidad o similar. 47.2.4. Bao de arena. 47.2.5. Mufla con circulacin de aire. 47.2.6. Matraces de 10; 100 y 1.000 ml de capacidad. 47.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 47.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 47.3.2. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 47.3.3. Acido Ntrico al 1%. Diluir Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. 47.3.4. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 131473 Plomo ll Nitrato PA enrasando a 1.000 ml con Acido Ntrico al 1%. 47.4. Procedimiento. 47.4.1. Preparacin de la muestra. Poner 100 ml de la muestra en una cpsula de platino y llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena. Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el bao de arena. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO, evaporar en el bao de arena e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PA-ACS, una vez disueltas filtrar y recoger el filtrado en un matraz de 10 ml, lavando la cpsula y el filtro con Agua PA-ACS hasta el enrase. 47.4.2. Construccin de la curva patrn.- A partir de la solucin patrn 47.3.4, tomar alcuotas de 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 y 1 ml, y llevar a 100 ml con Acido Ntrico al 1% (v/v). El contenido en plomo de estas soluciones es, respectivamente, 2; 4; 6; 8 y 10 ppm Anotar las absorbancias obtenidas frente a las concentraciones correspondientes. 47.4.3. Determinacin.- Efectuar la lectura directa de la muestra preparada segn 47.4.1 a 283,3 nm. 47.5. Clculo. Calcular el contenido en plomo, expresado en ppm mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor de dilucin.
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48. RELACION P/ 48.1. Principio. Estimacin de los contenidos relativos de glucosa y fructosa, en mostos, vinos dulces y mistelas, mediante el establecimiento de la relacin entre azcares reductores y desviacin polarimtrica a 20C. 48.2. Material y aparatos. 48.2.1. Como en 7(a).2; 7(b).2, o 7(c).2. 48.2.2. Polarmetro con luz monocromtica amarilla (lmpara de vapor de sodio) y tubo de 20 cm. 48.3. Procedimiento. 48.3.1. Determinar el contenido en azcares reductores segn el mtodo 7(a), 7(b) o 7(c). 48.3.2. Medida de la desviacin polarimtrica. Una vez verificado el correcto reglaje del polarmetro, comprobando la correspondencia del valor cero con la existencia de un campo luminoso uniforme, ajustndolo si es necesario, introducir en el tubo del polarmetro el lquido de defecacin, sin diluir, incoloro y limpio, utilizando para la determinacin de azcares reductores, evitando la formacin de burbujas de aire. Anotar la temperatura del lquido que debe ser lo ms prxima posible a 20C. Efectuar la lectura de la desviacin polarimtrica varias veces sucesivas, tomando la media de los resultados obtenidos. 48.4. Clculo. Determinar el poder rotatorio y la relacin P/ aplicando las frmulas siguientes: 20 = t+ t (t - 20) x K P/20 (expresado con su correspondiente signo) siendo: P = g/l de azcares reductores. p/t -
TABLA I K 0,006 0,007 0,008 0,009 0,012 0,012 0,013 0,014 0,022 0,042
1,19 1,41 1,73 2,24 2,64 3,20 4,06 5,56 8,8 21
49. ANHIDRIDO CARBONICO (Mtodo aprobado pero no publicado en el B.O.E.) 49.1. Principio. Despus de la oxidacin en fro del anhdrido sulfuroso por el hidrgeno perxido en presencia del ion de cobre II, el anhdrido carbnico desplazado del vino por una solucin tampn de fosfato y cido fosfrico es arrastrado en fro en circuito cerrado por una corriente de aire mediante una pequea bomba de circulacin hacia una solucin valorada de bario hidrxido. El exceso de esta base se determina inmediatamente con una solucin valorada de cido clorhdrico en presencia de un indicador mixto de timolftalena-fenolftalena. Aplicable a contenidos inferiores a 6 g/l. 49.2. Material y aparatos. 49.2.1. Aparato de vidrio para extraccin del CO2 en circuito cerrado (fig. l) compuesto de: - un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola antiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5); - dos barboteadores (2) y (3); - una bomba (4) que garantice la circulacin del aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo). 49.3. Reactivos. 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 141076 Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS
t = poder rotatorio en divisiones sacarimtricas

a tC (un grado polarimtrico = 4,615 divisiones sacarimtricas). 20 = poder rotatorio en divisiones sacarimtricas a20C. t = temperatura del lquido en el momento de la lectura. K = coeficiente variable con la naturaleza de los azcares, dado por la tabla I en funcin del valor P / t .
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48.5. Referencias. 48.5.1. J. Blouin. Manual practique danalyse des Mots et Vins. 1977. 48.5.2. J. Ribereau Gayon, E. Peynaud. Sciences et Techniques du Vin. Tome I. 1972.
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121677 Sodio di-Hidrgeno Fosfato 2-hidrato PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO 182157 Sodio Hidrxido 0,4 mol/l (0,4N) SV 171739 Timolftalena RE 49.3.1. Solucin de Sodio Hidrxido 0,2N: En un matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio Hidrxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS. 49.3.2. Solucin de Bario Cloruro de 90 g de BaCl2. 2H20 por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 49.3.3. Solucin de Bario Hidrxido. Mezclar 2 volmenes de la solucin de Bario Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solucin de Sodio Hidrxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite la carbonatacin. 49.3.4. Solucin tampn: Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida 400 g de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 2-hidrato PA y aadir 50 ml de Acido orto-Fosfrico (d 20C = 1,63): Diluir Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que corresponde a, aproximadamente, 79,4% y completar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente hervida. 49.3.5. Sodio Hidrxido al 50% (p/p). Solucin acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g de Sodio Hidrxido lentejas 97% PA-ACS-ISO en 100 g de solucin. Utilizarla 15 das despus de su preparacin para lograr la decantacin del eventual Na2CO3. Esta solucin debe ser transparente. 49.3.6. Hidrgeno Perxido en solucin de 10 volmenes. Esta solucin contiene 30,4 g de H2O2 por litro y libera 10 veces su volumen de oxgeno por descomposicin cataltica con MnO2 en medio alcalino. 49.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO, pulverizado. 49.3.8. Disolver 1 g de Fenolftalena PA-ACS y 0,5 g de Timolftalena RE en Etanol 96% v/v PA, neutro y completar hasta 100 ml. 49.3.9. Acido Clorhdrico 0,2N. En un matraz aforado diluir a 1:5 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,2N obtenida. 49.4. Procedimiento. 49.4.1. Vinos que contienen menos de 4 g de CO2 por litro. La botella de vino se debe mantener en posicin horizontal durante una noche a 0C. Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamente medidos de solucin de Bario Hidrxido. Introducir en el matraz (1) algunos cristales de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de Hidrgeno Perxido de 10 volmenes. Poner, con cuidado, en un matraz previamente enjuagado y enfriado a 0C, 50 ml de vino. Colocar el matraz (1) en el circuito y esperar 10 minutos. Conectar la bomba, e introducir mediante la bureta (5) 20 ml de solucin tampn. Dejar en funcionamiento 30 minutos. Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 ml de la solucin de Bario Hidrxido; valorarla con Acido Clorhdrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 el nmero de ml gastados. Es indispensable valorar diariamente el Bario Hidrxido utilizando 150 ml. Sea V1 el nmero de ml de Acido Clorhdrico 0,2N necesarios. 49.4.2. Vinos que contienen ms de 4 g de CO2 por litro. La botella debe mantenerse en posicin horizontal a 0C durante una noche. Abrir la botella con precaucin. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml del vino por 50 ml de Sodio Hidrxido al 50% haciendo resbalar suavemente la solucin por el cuello de la botella. Cerrar sta inmediatamente y homogeneizar su contenido agitndola; colocarla seguidamente en un bao de agua a 20C. Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de solucin de Bario Hidrxido. Introducir en el matraz (1) unos cristales de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de Hidrgeno Perxido de 10 volmenes. Introducir lentamente la pipeta en la botella para evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml del vino y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y dejarlo reposar 10 minutos. El volumen del vino tomado se deber reducir a 25 ml, si ste contiene ms de 8 g/l de anhdrido carbnico. Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1) con una bureta (5), 40 ml de solucin tampn. Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos. Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 ml de la solucin de Bario Hidrxido. Valorarla con Acido Clorhdrico 0,2N en presencia de indicador mixto. Sea V2 el nmero de ml utilizados. Sea V1 el nmero de ml de Acido Clorhdrico 0,2N consumidos para valorar 150 ml de solucin de Bario Hidrxido. 49.5. Clculo. 49.5.1. Para vinos que contienen menos de 4 g de CO2 por litro. Cantidades de CO2 en gramos por l en el vino. CO2(g/l) = 0,088 (V1- 3V2). 49.5.2. Para vinos que contienen ms de 4 g de CO2 por litro. Medir el volumen de lquido que queda en la botella y aadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para la determinacin. Sea V el volumen total as determinado. Calcular seguidamente el factor de correccin f, necesario para tener en cuenta los 50 ml de Sodio Hidrxido al 50% introducidos en la botella:
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V f = V - 50 Si la muestra para la determinacin es de 50 ml, la cantidad de anhdrido carbnico en g/l es (2V1 6V2) . 0,088 . f. Este resultado debe multiplicarse por 2 si la toma de muestra es de 25 ml. 49.6. Referencias. 49.6.1. Jaulmes (P.), Meth. An. 1972, n 422; Ann. Fals. Exp. chim. 1973, n 708, 96-109. 49.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.
50. ETANAL (Mtodo aprobado pero no publicado en el B.O.E.) 50.1. Principio. El etanal se determina en el vino, previamente decolorado con carbn, midiendo a 570 nm la coloracin verde o violeta que da con el sodio nitroprusiato y la piperidina. 50.2. Material y aparatos. 50.2.1. Espectrofotmetro capaz de efectuar lecturas a 570 nm. 50.3. Reactivos. 131015 Acido Brico PA-ACS-ISO 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131064 Acido Sulfuroso solucin 6% PA-ACS 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121237 Carbn Activo polvo PA Etanal 171327 Fenolftalena solucin 1% RE 162377 Piperidina PS 182415 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA 181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV 50.3.1. Solucin de Piperidina al 10% (v/v). Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS. 50.3.2. Solucin de Sodio Nitroprusiato al 0,4% (p/v). En un matraz aforado de 250 ml disolver 1 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado. Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS. 50.3.3. Carbn Activo polvo PA. 50.3.4. Acido Clorhdrico diluido al 25% (v/v) (aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemente Acido Clorhdrico 35% PA-ISO con Agua PA-ACS. 50.3.5. Solucin alcalina. Disolver 8,75 g de Acido Brico PA-ACS-ISO en 400 ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. Completar hasta un litro con Agua PA-ACS. 50.4. Procedimiento. 50.4.1. Determinacin del Etanal. Colocar 25 ml de lquido a analizar en un Erlenmeyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbn Activo polvo PA. Agitar enrgicamente durante algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para obtener un filtrado claro. 2 ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlenmeyer de 100 ml y se adiciona agitando 5 ml de solucin de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solucin de Piperidina, mezclar y colocar inmediatamente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La
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Figura 1
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coloracin obtenida que vara del verde al violeta, se mide a 570 nm con relacin al aire. Esta coloracin aumenta para disminuir seguidamente con rapidez. Elegir como valor definitivo la mxima absorbancia que se obtiene al cabo de unos 50 segundos. La cantidad de Etanal contenido en el lquido analizado se deduce de una curva patrn. 50.4.2. Construccin de la curva patrn. Solucin patrn de Etanal combinado con el Anhdrido Sufuroso. Tomar Acido Sulfuroso solucin 6% PA-ACS, valorar en SO 2 determinar su cantidad exacta midindola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV. En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumen de esta solucin que corresponda a 1.500 mg de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado recientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante. Enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS, mezclar y dejar durante la noche. La cantidad exacta de esta solucin patrn de Etanal combinada con el SO2 debe determinarse como sigue: En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de solucin patrn de Etanal, adicionar 20 ml del Acido Clorhdrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV en presencia de solucin de Almidn soluble RE hasta coloracin azul dbil. Aadir unas gotas de Fenolftalena solucin 1% RE y la suficiente solucin alcalina hasta la desaparicin de la coloracin azul y aparicin de color rosa. Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo 0,05 mol/l (0,1) SV hasta coloracin azul dbil. Siendo n el volumen gastado, la solucin patrn de Etanal combinado con el SO2 contiene: 44,05 n mg de Etanal por litro. Preparacin de la curva patrn: En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solucin patrn. Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corresponden a cantidades de Etanal prximas a 40-80120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las diluciones debe calcularse a partir del contenido en Etanal de la solucin patrn determinada anteriormente. Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de cada una de estas soluciones como se indica anteriormente. La representacin grfica de las absorbancias de estas soluciones en funcin de la cantidad de Etanal es una recta que no pasa por el origen. 50.5. Clculo Calcular el contenido en Etanal mediante comparacin con la correspondiente curva patrn. 50.6. Observaciones. Si, de forma excepcional, el lquido a analizar contiene Etanal libre, no combinado con el SO2 ser necesario, antes de empezar a determinar el Etanal total, pasarlo previamente al estado de combinacin con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una parte del lquido a analizar un pequeo exceso de SO2 libre y esperar algunas horas antes de proceder a la determinacin. 50.7. Referencias. 50.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit. Rdsch 1970. 66, 5-6. 50.7.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A-37, 1978. 51. PRESION DEL ANHIDRIDO CARBONICO 51.1. Principio. Medida de la presin gaseosa de un recipiente cerrado hermticamente mediante un aparato adecuado que disponga de un manmetro. 51.2. Material y aparatos. 51.2.1. Equipo manomtrico que conste de las siguientes partes: 51.2.1.1. Aguja perforadora del tapn o del recipiente, hueca, con vlvula que obture el orificio de entrada de gas a la misma y sistema estanco de adaptacin al tapn o recipiente. 51.2.1.2. Conducto que ponga en comunicacin la aguja con el manmetro. 51.2.1.3. Manmetro que permita lecturas de hasta 10 kg/cm2. 51.3. Procedimiento. Mantener la muestra en reposo durante dos horas al menos. Llevar la temperatura aproximadamente a 20C y perforar el tapn o el recipiente segn el caso. Abrir la vlvula con lo que el gas pasa al manmetro. Leer la presin que indica el manmetro. 51 4. Expresin de los resultados. La presin se expresar en atmsferas a 20C. 1 atm. = 760 mm de Hg = 1.034 kg/cm2 52. ANTISEPTICOS Y ANTIFERMENTOS (Mtodo microbiolgico) 52.1. Principio. Comparacin del desarrollo, en vino problema y testigo, de las levaduras contenidas en lminas de agar-extracto de levadura glucosado, tras permanecer sumergidas 48 horas en ellos. 52.2. Material y aparatos. 52.2.1. Hematmetro.
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52.2.2. Cajas Petri. 52.2.3. Portaobjetos rayados en zig-zag. 52.2.4. Varilla en forma de U de unos 0,5 cm de dimetro. 52.2.5. Tubos de ensayo aforados a 10 ml. 52.2.6. Tubos capaces de contener portaobjetos normales de microscopa. 52.2.7. Autoclave. 52.2.8. Microscopio. 52.2.9. Estufa de cultivo. 52.3. Reactivos y medios de cultivo. 141792 Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 131074 Agua PA-ACS Etanal 403687 Extracto de levadura CULTIMED 121341 D(+)-Glucosa PA 52.3.1. Solucin acuosa de Etanal de 6,9 g/l (1 ml de esta solucin combina 10 mg de SO2). 52.3.2. Mosto de 10 B. peptonado al 1 por 1.000. Esterilizar en autoclave a 112C durante 20 minutos. 52.3.3. Agar-extracto de levadura glucosado: Extracto de levadura CULTIMED. . . . . 5 g D(+)-Glucosa PA . . . . . . . . . . . . . . . . 20 g Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX . 17,5 g Agua PA-ACS . . . . . . . . . . . . . . . . 1.000 g Una vez fundido en bao de agua, distribuir a razn de 10 ml por tubo y esterilizar a 120C durante 20 minutos. 52.3.4. Capa de levadura: Saccharomyces bayanus. 52.4. Procedimiento. 52.4.1. Preparacin del vino problema: Si la dosis de SO2 libre es superior a 15 mg/l, proceder a combinacin del exceso mediante la solucin acuosa de Etanal, dejando transcurrir 24 horas, desde su adicin. Comprobar de nuevo que el contenido de SO2 libre es inferior a 15 m/l. 52.4.2. Preparacin del vino testigo: Utilizar un vino de caractersticas lo ms parecidas posibles al vino problema, especialmente en grado alcohlico. Respecto al SO2 libre se proceder como en 52.4.1 52.4.3. Siembra del Agar (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX y formacin de la pelcula: Una vez fundidos en bao de agua los tubos con 10 ml de agar-extracto de levadura glucosado y cuando la temperatura baja a 45-50C, sembrar, tras conteo con hematmetro, 5 millones de levaduras/ml (50 millones por tubo) de un cultivo de 72 horas en mosto peptonado de 10 B. Tras homogeneizar rpidamente los tubos sembrados, verter su contenido sobre los portaobjetos rayados, situados en posicin inclinada, apoyados sobre un brazo de la varilla en U colocada dentro de la caja Petri; el agar fundido deslizar uniformemen-
te sobre la superficie de cada portaobjeto, formando una lmna de agar. Acto seguido colocar horizontalmente los portaobjetos apoyando sobre los dos brazos de la varilla en U y dejar en reposo durante un par de horas. 52.4.4. Formacin de colonias: Asegurada la solidificacin del medio sembrado, sumergir completamente los portaobjetos en los tubos que contienen el vino problema y el vino testigo. Tapar no hermticamente los tubos y mantener en la estufa de cultivo a 25C durante 48 horas. Finalizado este perodo eliminar el vino de los tubos, dejando los portaobjetos en el interior de ellos en contacto con el aire y a 25C. 52.4.5. Observacin microscpica: Observar las lminas inmediatamente despus de sacadas del vino. Si no se aprecia desarrollo de colonias incubar en estufa a 25C y repetir la observacin microscpica a las 24, 48 y 72 horas si es necesario. En los vinos de alto grado alcohlico puede retrasarse an ms el desarrollo de las colonias, como se comprueba en el vino testigo. 52.5. Interpretacin de los resultados. La presencia franca de colonias indica la ausencia de antispticos y antifermentos. 52.6. Referencia. 52.6.1. Mtodo biolgico espaol-argentino para la investigacin de la presencia de antispticos en los vinos. E. Feduchy An. INIA. Serv. Tecnol. agr. N 2. 1975.
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Productos derivados de la uva: Zumos de uva
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METODOS DE ANALISIS 1. GRADO BRIX 1.1. Principio. Medida del ndice de refraccin y conversin en grados Brix mediante las tablas adjuntas. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Refractmetro provisto del equipo necesario para mantener la temperatura a 20C. 1.2.2. Matraces o recipientes de vidrio que cierren hermticamente. 1.3. Procedimiento. Colocar el refractmetro en un lugar iluminado con luz difusa o frente a una fuente de luz artificial. Circular agua a temperatura constante a 20C a travs de los prismas del refractmetro. Ajustar el instrumento colocando unas gotas de agua destilada entre los prismas. El ndice de refraccin deber ser 1,3330; si no es as corregir adecuadamente la lectura. Situar el zumo de uva en un envase hermticamente cerrado en un bao a 20C y esperar a que alcance dicha temperatura. Tomar con una pipeta un poco de zumo de uva y poner unas gotas entre los prismas del refractmetro. Medir el ndice de refraccin. 1.4. Expresin de los resultados. A partir del valor obtenido del ndice de refraccin se obtiene el grado Brix mediante la tabla I. 1.5. Observaciones. 1.5.1. Si se emplea otra temperatura para medir el ndice de refraccin, utilizar la tabla II para la correccin de temperatura a 20C . 1.6. Referencias. Official Methods of Analysis, AOAC-1984.
TABLA I Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,3330 1,3331 1,3332 1,3333 1,3334 1,3335 1,3336 1,3337 1,3338 1,3339 1,3340 1,3341 1,3342 1,3343 1,3344 1,3345 1,3346 1,3347 1,3348 1,3349 1,3350 1,3351 1,3352 1,3353 1,3354 1,3355 1,3356 Grado Brix 0,009 0,078 0,149 0,253 0,288 0,358 0,428 0,498 0,567 0 637 0,707 0,776 0,846 0,915 0,985 1,054 1,124 1,193 1,263 1,332 1,401 1,470 1,540 1,609 1,678 1,747 1,815 n 20 1,3357 1,3358 1,3359 1,3360 1,3361 1,3362 1,3363 1,3364 1,3365 1,3366 1,3367 1,3368 1,3369 1,3370 1,3371 1,3372 1,3373 1,3374 1,3375 1,3376 1,3377 1,3378 1,3379 1,3380 1,3381 1,3382 1,3383 Grado Brix 1,885 1,954 2,023 2,092 2,161 2,230 2,299 2,367 2,436 2,505 2,574 2,642 2,711 2,779 2,848 2,917 2,985 3,053 3,122 3,190 3,259 3,327 3,395 3,463 3,532 3,600 3,668 n 20 1,3384 1,3385 1,3386 1,3387 1,3388 1,3389 1,3390 1,3391 1,3392 1,3393 1,3394 1,3395 1,3396 1,3397 1,3398 1,3399 1,3400 1,3401 1,3402 1,3403 1,3404 1,3405 1,3406 1,3407 1,3408 1,3409 1,3410 Grado Brix 3,736 3,804 3,872 3,940 4,008 4,076 4,144 4,212 4,279 4,347 4,415 4.483 4,550 4,618 4,686 4,753 4,821 4,888 4,956 5,023 5,091 5,158 5,225 5,293 5,360 5,427 5,494 n 20 1,3411 1,3412 1,3413 1,3414 1,3415 1,3416 1,3417 1,3418 1,3419 1,3420 1,3421 1,3422 1,3423 1,3424 1,3425 1,3426 1,3427 1,3428 1,3429 1,3430 1,3431 1,3432 1,3433 1,3434 1,3435 1,3436 1,3437 Grado Brix 5,562 5,629 5,696 5,763 5,830 5,897 5,964 6,031 6,098 6,165 6,231 6,298 6,365 6,432 6,498 6,565 6,632 6,698 6,765 6,831 6,898 6,964 7,031 7,097 7,164 7,230 7,296
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TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,3438 1,3439 1,3440 1,3441 1,3442 1,3443 1,3444 1,3445 1,3446 1,3447 1,3448 1,3449 1,3450 1,3451 1,3452 1,3453 1,3454 1,3455 1,3456 1,3457 1,3458 1,3459 1,3460 1,3461 1,3462 1,3463 1,3464 1,3465 1,3466 1,3467 1,3468 1,3469 1,3470 1,3471 1,3472 1,3473 1,3474 1,3475 1,3476 1,3477 1,3478 1,3479 1,3480 1,3481 1,3482 1,3483 1,3484 1,3485 1,3486 1,3487 1,3488 1,3489 Grado Brix 7,362 7,429 7,495 7,561 7,627 7,693 7,759 7,825 7,891 7,957 8,023 8,089 8,155 8,221 8,287 8,352 8,418 8,484 8,550 8,615 8,681 8,746 8,812 8,878 8,943 9,008 9,074 9,139 9,205 9,270 9,335 9,400 9,466 9,531 9,596 9,661 9,726 9,791 9,856 9,921 9,986 10,051 10,116 10,181 10,246 10,331 10,375 10,440 10,505 10,570 10,634 10,699 n 20 1,3490 1,3491 1,3492 1,3493 1,3494 1,3495 1,3496 1,3497 1,3498 1,3499 1,3500 1,3501 1,3502 1,3503 1,3504 1,3505 1,3506 1,3507 1,3508 1,3509 1,3510 1,3511 1,3512 1,3513 1,3514 1,3515 1,3516 1,3517 1,3518 1,3519 1,3520 1,3521 1,3522 1,3523 1,3524 1,3525 1,3526 1,3527 1,3528 1,3529 1,3530 1,3531 1,3532 1,3533 1,3534 1,3535 1,3536 1,3537 1,3538 1,3539 1,3540 1,3541 Grado Brix 10,763 10,828 10,892 10,957 11,021 11,086 11,150 11,215 11,279 11,343 11,407 11,472 11,536 11,600 11,664 11,723 11,792 11,856 11,920 11,984 12,048 12,112 12,175 12,240 12,304 12,368 12,431 12,495 12,559 12,623 12,686 12,750 12,813 12,877 12,940 13,004 13,067 13,131 13,194 13,258 13,321 13.384 13,448 13,551 13,574 13,637 13,700 13,763 13,826 13,890 13,953 14,016 n 20 1,3542 1,3543 1,3544 1,3545 1,3546 1,3547 1,3548 1,3549 1,3550 1,3551 1,3552 1,3553 1,3554 1,3555 1,3556 1,3557 1,3558 1.3559 1,3560 1,3561 1,3562 1,3563 1,3564 1,3565 1,3566 1,3567 1,3568 1,3569 1,3570 1,3571 1,3572 1,3573 1,3574 1,3575 1,3576 1,3577 1,3578 1,3579 1,3580 1,3581 1,3582 1,3583 1,3584 1,3585 1,3586 1,3587 1,3588 1,3589 1,3590 1,3591 1,3592 1,3593 Grado Brix 14,079 14,141 14,204 14,267 14,330 14,393 14,456 14,518 14,581 14,644 14,707 14,759 14,832 14,894 14,957 15,019 15,082 15.144 15,207 15,269 15,332 15,394 15,456 15,518 15,581 15,643 15,705 15,767 15,829 15,891 15,953 16,016 16,078 16,140 16,201 16,263 16,325 16,387 16,449 16,511 16,573 16,634 16,696 16,758 16,819 16,881 16,943 17,004 17,065 17,127 17,189 17,250 n 20 1,3594 1,3595 1,3596 1,3597 1,3598 1,3599 1,3600 1,3601 1,3602 1,3603 1,3604 1,3605 1,3606 1,3607 1,3608 1,3609 1,3610 1,3611 1,3612 1,3613 1,3614 1,3615 1,3616 1,3617 1,3618 1,3619 1,3620 1,3621 1,3622 1,6223 1,3624 1,3625 1,3626 1,3627 1,3628 1,3629 1,3630 1,3631 1,3632 1,3633 1,3634 1,3635 1,3636 1,3637 1,3638 1,3639 1,3640 1,3641 1,3642 1,3643 1,3644 1,3645 Grado Brix 17,311 17,373 17,434 17,496 17,557 17,618 17,679 17,741 17,802 17,863 17,924 17,985 18,046 18,107 18,168 18,229 18,290 18,351 18,412 18,473 18,534 18,595 18,655 18,716 18,777 18,837 18,898 18,959 19,019 19,080 19,141 19,201 19,262 19,322 19,382 19,443 19,503 19,564 19,624 19,684 19,745 19,805 19,865 19,925 19,985 20,045 20,106 20,166 20,226 20,286 20,346 20,406
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TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,3646 1,3647 1,3648 1,3649 1,3650 1,3651 1,3652 1,3653 1,3654 1,3655 1,3656 1,3657 1,3658 1,3659 1,3660 1,3661 1,3662 1,3663 1,3664 1,3665 1,3666 1,3667 1,3668 1,3669 1,3670 1,3671 1,3672 1,3673 1,3674 1,3675 1,3676 1,3777 1,3678 1,3679 1,3680 1,3681 1,3682 1,3683 1,3684 1,3685 1,3686 1,3687 1,3688 1,3689 1,3690 1,3691 1,3692 1,3693 1,3694 1,3695 1,3696 1,3697 Grado Brix 20,466 20,525 20,585 20,645 20,705 20,765 20,825 20,884 20,944 21,004 21,063 21,123 21,183 21,242 21,302 21,361 21,421 21,480 21,540 21,599 21,658 21,718 21,777 21,836 21,895 21,955 22,014 22,073 22,132 22,192 22,251 22,310 22,369 22,428 22,487 22,546 22,605 22,664 22,723 22,781 22,840 22,899 22,958 22,017 23,075 23,134 23,193 23,251 23,310 23,369 23,427 23,486 n 20 1,3698 1,3699 1,3700 1,3701 1,3702 1,3703 1,3704 1,3705 1,3706 1,3707 1,3708 1,3709 1,3710 1,3711 1,3712 1,3713 1,3714 1,3715 1,3716 1,3717 1,3718 1,3719 1,3720 1,3721 1,3722 1,3723 1,3724 1,3725 1,3726 1,3727 1,3728 1,3729 1,3730 1,3731 1,3732 1,3733 1,3734 1,3735 1,3736 1,3737 1,3738 1,3739 1,3740 1,3741 1,3742 1,3743 1,3744 1,3745 1,3746 1,3747 1,3748 1,3749 Grado Brix 23,544 23,603 23,661 23,720 23,778 23,836 23,895 23,953 24,011 24,070 24,128 24,186 24,244 24,302 24,361 24,419 24,477 24,535 24,593 24,651 24,709 24,767 24,825 24,883 24,941 24,998 25,056 25,114 25,172 25,230 25,287 25,345 25,403 25,460 25,518 25,576 25,633 25,691 25,748 25,806 25,863 25,921 25,978 26,035 26,093 26,150 26,207 26,265 26,322 26,379 26,436 26,493 n 20 1,3750 1,3751 1,3752 1,3753 1,3754 1,3755 1,3756 1,3757 1,3758 1,3759 1,3760 1,3761 1,3762 1,3763 1,3764 1,3765 1,3766 1,3767 1,3768 1,3769 1,3770 1,3771 1,3772 1,3773 1,3774 1,3775 1,3776 1,3777 1,3778 1,3779 1,3780 1,3781 1,3782 1,3783 1,3784 1,3785 1,3786 1,3787 1,3788 1,3789 1,3790 1,3791 1,3792 1,3793 1,3794 1,3795 1,3796 1,3797 1,3798 1,3799 1,3800 1,3801 Grado Brix 26,551 26,608 26,665 26,722 26,779 26,836 26,893 26,950 27,007 27,064 27,121 27,178 27,234 27,291 27,348 27,405 27,462 27,518 27,575 27,632 27,688 27,745 27,802 27,858 27,915 27,971 28,028 28,084 28,141 28,197 28,253 28,310 28,366 28,422 28,479 28,535 28,591 28,648 28,704 28,760 28,816 28,872 28,928 28,984 29,040 29,096 29,152 29,208 29,264 29,320 29,376 29,432 n 20 1,3802 1,3803 1,3804 1,3805 1,3806 1,3807 1,3808 1,3809 1,3810 1,3811 1,3812 1,3813 1,3814 1,3815 1,3816 1,3817 1,3818 1,3819 1,3820 1,3821 1,3822 1,3823 1,3824 1,3825 1,3826 1,3827 1,3828 1,3829 1,3830 1,3831 1,3832 1,3833 1,3834 1,3835 1,3836 1,3837 1,3838 1,3839 1,3840 1,3841 1,3842 1,3843 1,3844 1,3845 1,3846 1,3847 1,3848 1,3849 1,3850 1,3851 1,3852 1,3853 Grado Brix 29,488 29,544 29,600 29,655 29,711 29,767 29,823 29,878 29,934 29,929 30,045 30,101 30,156 30,212 30,267 30,323 30,378 30,434 30,489 30,544 30,600 30,655 30,711 30,766 30,821 30,876 30,932 30,987 31,042 31,097 31,152 31,207 31,262 31,317 31,372 31,428 31,482 31,537 31,592 31,647 31,702 31,757 31,812 31,867 31,922 31,976 32,031 32,086 32,140 32,195 32,250 32,304
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TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,3854 1,3855 1,3856 1,3857 1,3858 1,3859 1,3860 1,3861 1,3862 1,3863 1,3864 1,3865 1,3866 1,3867 1,3868 1,3869 1,3870 1,3871 1,3872 1,3873 1,3874 1,3875 1,3876 1,3877 1,3878 1,3879 1,3880 1,3881 1,3882 1,3883 1,3884 1,3885 1,3886 1,3887 1,3888 1,3889 1,3890 1,3891 1,3892 1,3893 1,3894 1,3895 1,3896 1,3897 1,3898 1,3899 1,3900 1,3901 1,3902 1,3903 1,3904 1,3905 Grado Brix 32,359 32,414 32,468 32,523 32,577 32,632 32,686 32,741 32,795 32,849 32,904 32,958 33,013 33,067 33,121 33,175 33,230 33,284 33,338 33,392 33,446 33,500 33,555 33,609 33,663 33,717 33,771 33,825 33,879 33,933 33,987 34,040 34,094 34,148 34,202 34,256 34,310 34,363 34,417 34,471 34,524 34,578 34,632 34,685 34,739 34,793 34,846 34,900 34,953 35,007 35,060 35,114 n 20 1,3906 1,3907 1,3908 1,3909 1,3910 1,3911 1,3912 1,3913 1,3914 1,3915 1,3916 1,3917 1,3918 1,3919 1,3920 1,3921 1,3922 1 3923 1,3924 1,3925 1,3926 1,3927 1,3928 1,3929 1,3930 1,3931 1,3932 1,3933 1,3934 1,3935 1,3936 1,3937 1,3938 1,3939 1,3940 1,3941 1,3942 1,3943 1,3944 1,3945 1,3946 1,3947 1,3948 1,3949 1,3950 1,3951 1,3952 1,3953 1,3954 1,3955 1,3956 1,3957 Grado Brix 35,167 35,220 35,274 35,327 35,380 35,434 35,487 35,540 35,593 35,647 35,700 35,753 35,806 35,859 35,912 35,965 36,019 36,072 36,125 36,178 36,231 36,284 36,337 36,389 36,442 36,495 36,548 36,601 36,654 36,706 36,759 36,812 36,865 36,917 36,970 37,023 37,075 37,128 37,180 37,233 37,286 37,338 37,391 37,443 37,495 37,548 37,600 37,653 37,705 37,757 37,810 37,862 n 20 1,3958 1,3959 1,3960 1,3961 1,3962 1,3963 1,3964 1,3965 1,3966 1,3967 1,3968 1,3969 1,3970 1,3971 1,3972 1,3973 1,3974 1,3975 1,3976 1,3977 1,3978 1,3979 1,3980 1,3981 1,3982 1,3983 1,3984 1,3985 1,3986 1,3987 1,3988 1,3989 1,3990 1,3991 1,3992 1,3993 1,3994 1,3995 1,3996 1,3997 1,3998 1,3999 1,4000 1,4001 1,4002 1,4003 1,4004 1,4005 1,4006 1,4007 1,4008 1,4009 Grado Brix 37,914 37,967 38,019 38,071 38,123 38,175 38,228 38,280 38,332 38,384 38,436 38,488 38 540 38 592 38,644 38,696 38,784 38,800 38,852 38,904 38,955 39,007 39,059 39,111 39,163 39,214 39,266 39,318 39,370 39,421 39,473 39,525 39,576 39,628 39 679 39 731 39,782 39,834 39,885 39,937 39,988 40,040 40,091 40,142 40,194 40,245 40,295 40,348 40,399 40,450 40,501 40,553 n 20 1,4010 1,4011 1,4012 1,4013 1,4014 1,4015 1,4016 1,4017 1,4018 1,4019 1,4020 1,4021 1,4022 1,4023 1,4024 1,4025 1,4026 1,4027 1,4028 1,4029 1,4030 1,4031 1,4032 1,4033 1,4034 1,4035 1,4036 1,4037 1,4038 1,4039 1,4040 1,4041 1,4042 1,4043 1,4044 1,4045 1,4046 1,4047 1,4048 1,4049 1,4050 1,4051 1,4052 1,4053 1,4054 1,4055 1,4056 1,4057 1,4058 1,4059 1,4060 1,4061 Grado Brix 40,604 40,655 40,706 40,757 40,808 40,860 40,911 40,962 41,013 41,064 41,115 41,166 41,217 41,268 41,318 41,369 41,420 41,471 41,522 41,573 41,623 41,674 41,725 41,776 41,826 41,877 41,928 41,978 42,029 42,080 42,130 42,181 42,231 42,282 42,332 42,383 42,433 42,484 42,534 42,585 42,635 42,685 42,736 42,786 42,836 42,887 42,937 42,987 43,037 43,088 43,138 43,188
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94
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TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,4478 1,4479 1,4480 1,4481 1,4482 1,4483 1,4484 1,4485 1,4486 1,4487 1,4488 1,4489 1,4490 1,4491 1.4492 1,4493 1,4494 1,4495 1,4496 1,4497 1,4498 1,4499 1,4500 1,4501 1,4502 1,4503 1,4504 1,4505 1,4506 1,4507 1,4508 1,4509 1,4510 1,4511 1,4512 1,4513 1,4514 1,4515 1,4516 1,4517 1,4518 1,4519 1,4520 1,4521 1,4522 1,4523 1,4524 1,4525 1,4526 1,4527 1,4528 1,4529 Grado Brix 62,590 62,633 62,677 62,720 62,763 62,806 62,849 62,893 62,936 62,979 63,022 63,065 63,108 63,152 63,195 63,238 63,281 63,324 63,367 63,410 63,453 63,496 63,539 63,582 63,625 63,668 63,711 63,754 63,797 63,840 63,882 63,925 63,968 64,011 64,054 64,097 64,139 64,182 64,225 64,268 64,311 64,353 64,396 64,439 64,481 64,524 64,567 64,609 64,652 64,695 64,737 64,780 n 20 1,4530 1,4531 1,4532 1,4533 1,4534 1,4535 1,4536 1,4537 1,4538 1,4539 1,4540 1,4541 1,4542 1,4543 1,4544 1,4545 1,4546 1,4547 1,4548 1,4549 1,4550 1,4551 1,4552 1,4553 1,4554 1,4555 1,4556 1,4557 1,4558 1,4559 1,4560 1,4561 1,4562 1,4563 1,4564 1,4565 1,4566 1,4567 1,4568 1,4569 1,4570 1,4571 1,4572 1,4573 1,4574 1,4575 1,4576 1,4577 1,4578 1,4579 1,4580 1,4581 Grado Brix 64,823 64,865 64,908 64,950 64,992 65,035 65,078 65,120 65,163 65,205 65,248 65,290 65,333 65,375 65,417 65,460 65,502 65,544 65,587 65,629 65,672 65,714 65,756 65,798 65,841 65,883 65,925 65,967 66,010 66,052 66,094 66,136 66,178 66,221 66,263 66,305 66,347 66,389 66,431 66,473 66,515 66,557 66,599 66,641 66,683 66,725 66,767 66,809 66,851 66,893 66,935 66,977 n 20 1,4582 1,4583 1,4584 1,4585 1,4586 1,4587 1,4588 1,4589 1,4590 1,4591 1,4592 1,4593 1,4594 1,4595 1,4596 1,4597 1,4598 1,4599 1,4600 1,4601 1,4602 1,4603 1,4604 1,4605 1,4606 1,4607 1,4608 1,4609 1,4610 1,4611 1,4612 1,4613 1,4614 1,4615 1,4616 1,4617 1,4618 1,4619 1,4620 1,4621 1,4622 1,4623 1,4624 1,4625 1,4626 1,4627 1,4628 1,4629 1,4630 1,4631 1,4632 1,4633 Grado Brix 67,019 67,061 67,103 67,145 67,186 67,228 67,270 67,312 67,354 67,396 67,437 67,479 67,521 67,563 67,604 67,646 67,688 67,729 67,771 67,813 67,854 67,895 67,938 67,979 68,021 68,063 68,104 68,146 68,187 68,229 68,270 68,312 68,353 68,395 68,436 68,478 68,519 68,561 68,602 68,643 68,685 68,726 68,768 68,809 68,850 68,892 68,933 68,974 69,016 69,057 69,098 69,139 n 20 1,4634 1,4635 1,4636 1,4637 1,4638 1,4639 1,4640 1,4641 1,4642 1,4643 1,4644 1,4645 1,4646 1,4647 1,4648 1,4649 1,4650 1,4651 1,4652 1,4653 1,4654 1,4655 1,4656 1,4657 1,4658 1,4659 1,4660 1,4661 1,4662 1,4663 1,4664 1,4665 1,4666 1,4667 1,4668 1,4669 1,4670 1,4671 1,4672 1,4673 1,4674 1,4675 1,4676 1,4677 1,4678 1,4679 1,4680 1,4681 1,4682 1,4683 1,4684 1,4685 Grado Brix 69,181 69,222 69,263 69,304 69,346 69,387 69,428 69,469 69,510 69,551 69,593 69,634 69,675 69,716 69,757 69,798 69,839 69,880 69,921 69,962 70,003 70,044 70,085 70,126 70,167 70,208 70,249 70,290 70,331 70,372 70,413 70,453 70,494 70,535 70,576 70,617 70,658 70,698 70,739 70,780 70,821 70,861 70,902 70,943 70,984 71,024 71,065 71,106 71,146 71,187 71,228 71,268
95
TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,4686 1,4687 1,4688 1,4689 1,4690 1,4691 1,4692 1,4693 1,4694 1,4695 1,4696 1 4697 1 4698 1,4699 1,4700 1,4701 1,4702 1,4703 1,4704 1,4705 1,4706 1,4707 1,4708 1,4709 1,4710 1,4711 1,4712 1,4713 1,4714 1,4715 1,4716 1,4717 1,4718 1,4719 1,4720 1,4721 1,4722 1,4723 1,4724 1,4725 1,4726 1,4727 1,4728 1,4729 1,4730 1,4731 1,4732 1,4733 1,4734 1,4735 1,4736 1,4737 Grado Brix 71,309 71,349 71,390 71,431 71,471 71,512 71,552 71,593 71,633 71,674 71,714 71,755 71,795 71,836 71,876 71,917 71,957 71,998 72,038 72,078 72,119 72,159 72,199 72,240 72,280 72,320 72,361 72,401 72,441 72,482 72,522 72,562 72,602 72,643 72,683 72,723 72,763 72,803 72,843 72,884 72,924 72,964 73,004 73,044 73,084 73,124 73,164 73,204 73,244 73,285 73,325 73,365 n 20 1,4738 1,4739 1,4740 1,4741 1,4742 1,4743 1,4744 1,4745 1,4746 1,4747 1,4748 1,4749 1,4750 1,4751 1,4752 1,4753 1,4754 1,4755 1,4756 1,4757 1,4758 1,4759 1,4760 1,4761 1,4762 1,4763 1,4764 1,4765 1,4766 1,4767 1,4768 1,4769 1,4770 1,4771 1,4772 1,4773 1,4774 1,4775 1,4776 1,4777 1,4778 1,4779 1,4780 1,4781 1,4782 1,4783 1,4784 1,4785 1,4786 1,4787 1,4788 1,4789 Grado Brix 73,405 73,445 73,485 73,524 73,564 73,604 73,644 73,684 73,724 73,764 73,804 73,844 73,884 73,924 73,963 74,003 74,043 74,083 74,123 74,162 74,202 74,242 74,282 74,321 74,361 74,401 74,441 74,480 74,520 74,560 74,599 74,633 74,678 74,718 74,758 74,797 74,837 74,876 74,916 74,956 74,995 75,035 75,074 75,114 75,153 75,193 75,232 75,272 75,311 75,350 75,390 75,429 n 20 1,4790 1,4791 1,4792 1,4793 1,4794 1,4795 1,4796 1,4797 1,4798 1,4799 1,4800 1,4801 1,4802 1,4803 1,4804 1,4805 1,4806 1,4807 1,4808 1,4809 1,4810 1,4811 1,4812 1,4813 1,4814 1,4815 1,4816 1,4817 1,4818 1,4819 1,4820 1,4821 1,4822 1,4823 1,4824 1,4825 1,4826 1,4827 1,4828 1,4829 1,4830 1,4831 1,4832 1,4833 1,4834 1,4835 1,4836 1,4837 1,4838 1,4839 1,4840 1,4841 Grado Brix 75,469 75,508 75,547 75,587 75,626 75,666 75,705 75,744 75,784 75,823 75,862 75,901 75,941 75,980 76,019 76,058 76,098 76,137 76,176 76,215 76,254 76,294 76,333 76,372 76,411 76,450 76,489 76,528 76,567 76,607 76,646 76,685 76,724 76,763 76,802 76,841 76,880 76,919 76,958 76,997 77,036 77,075 77,113 77,152 77,191 77,230 77,269 77,308 77,347 77,386 77,425 77,463 n 20 1,4842 1,4843 1,4844 1,4845 1,4846 1,4847 1,4848 1,4849 1,4850 1,4851 1,4852 1,4853 1,4854 1,4855 1,4856 1,4857 1,4858 1,4859 1,4860 1,4861 1,4862 1,4863 1,4864 1,4865 1,4866 1,4867 1,4868 1,4869 1,4870 1,4871 1,4872 1,4873 1,4874 1,4875 1,4876 1,4877 1,4878 1,4879 1,4880 1,4881 1,4882 1,4883 1,4884 1,4885 1,4886 1,4887 1,4888 1,4889 1,4890 1,4891 1,4892 1,4893 Grado Brix 77,502 77,541 77,580 77,619 77,657 77,696 77,735 77,774 77,812 77,851 77,890 77,928 77,967 78,006 78,045 78,083 78,122 78,160 78,199 78,238 78,276 78,315 78,353 78,392 78,431 78,469 78,508 78,546 78,585 78,623 78,662 78,700 78,739 78,777 78,816 78,854 78,892 78,931 78,969 79,008 79,046 79,084 79,123 79,161 79,199 79,238 79,276 79,314 79,353 79,391 79,429 79,468
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TABLA I (Continuacin) Conversin de Indice de Refraccin a Grados Brix n 20 1,4894 1,4895 1,4896 1,4897 1,4898 1,4899 1,4900 1,4901 1,4902 1,4903 1,4904 1,4905 1,4906 1,4907 1,4908 1,4909 1,4910 1,4911 1,4912 1,4913 1,4914 1,4915 1,4916 1,4917 1,4918 1,4919 1,4920 1,4921 1,4922 1,4923 1,4924 1,4925 1,4926 1,4927 1,4928 1,4929 1,4930 1,4931 1,4932 1,4933 1,4934 1,4935 1,4936 1,4937 1,4938 1,4939 1,4940 1,4941 1,4942 1,4943 1,4944 1,4945 Grado Brix 79,506 79,544 79,582 79,620 79,659 79,697 79,735 79,773 79,811 79,850 79,888 79,925 79,964 80,002 80,040 80,078 80,116 80,154 80,192 80,231 80,269 80 307 80 345 80,383 80,421 80,459 80,497 80,534 80,572 80,610 80,648 80,686 80,724 80,762 80,800 80,838 80,876 80,913 80,951 80,989 81,027 81,065 81,103 81,140 81,178 81,216 81,254 81,291 81,329 81,367 81,405 81,442 n 20 1,4946 1,4947 1,4948 1,4949 1,4950 1,4951 1,4952 1,4953 1,4954 1,4955 1,4956 1,4957 1,4958 1,4959 1,4960 1,4961 1,4962 1,4963 1,4964 1 4965 1 4966 1,4967 1,4968 1,4969 1,4970 1,4971 1,4972 1,4973 1,4974 1,4975 1,4976 1,4977 1,4978 1,4979 1,4980 1,4981 1,4982 1,4983 1,4984 1,4985 1,4986 1,4987 1,4988 1,4989 1,4990 1,4991 1,4992 1,4993 1,4994 1,4995 1,4996 1,4997 Grado Brix 81,480 81,518 81,555 81,593 81,631 81,668 81,706 81,744 81,781 81,819 81,856 81,894 81,932 81,969 82,007 82,044 82,082 82,119 82,157 82,194 82,232 82,269 82,307 82,344 82,381 82,419 82,456 82,494 82,531 82,569 82,606 82,643 82,681 82,718 82,755 82,793 82,830 82,867 82,905 82,942 82,979 83,016 83,054 83,091 83,128 83,165 83,202 83,240 83,277 83,314 83,351 83,388 n 20 1,4998 1,4999 1,5000 1,5001 1,5002 1,5003 1,5004 1,5005 1,5006 1,5007 1,5008 1,5009 1,5010 1,5011 1,5012 1,5013 1,5014 1,5015 1,5016 1,5017 1,5018 1,5019 1,5020 1,5021 1,5022 1,5023 1,5024 1,5025 1,5026 1,5027 1,5028 1,5029 1,5030 1,5031 1,5032 1,5033 1,5034 1,5035 1,5036 1,5037 1,5038 1,5039 1,5040 1,5041 1,5042 1,5043 1,5044 1,5045 1,5046 1,5047 1,5048 1,5049 Grado Brix 83,425 83,463 83.500 83,537 83,574 83,611 83,648 83,685 83,722 83,759 83,796 83,833 83,870 83,907 83,944 83,981 84,018 84,055 84,092 84,129 84,166 84,203 84,240 84,277 84,314 84,351 84,333 84,424 84,461 84,498 84,535 84,572 84,609 84,645 84,682 84,719 84,756 84,792 84,829 84,866 84,903 84,939 84,976 85,013 85,049 85,086 85,123 85,159 85,195 85,233 85,269 85,306 n 20 1,5050 1,5051 1,5052 1,5053 1,5054 1,5055 1,5056 1,5057 1,5058 1,5059 1,5060 1,5061 1,5062 1,5063 1,5064 1,5065 1,5066 1,5067 1,5068 1,5069 1,5070 1,5071 1,5072 1,5073 1,5074 1,5075 1,5076 1,5077 1,5078 1,5079 Grado Brix 85,343 85,379 85,416 85,452 85,489 85,525 85,562 85,598 85,635 85,672 85,703 85,744 85,781 85,817 85,854 85,890 85,927 85,963 86,000 86,036 86,072 86,109 86,145 86,182 86,218 86,254 86,291 86,327 86,363 86,399
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TABLA Il GRADO BRIX Temp. C 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 0 0,50 0,46 0,42 0,37 0,33 0,27 0,22 0,17 0,12 0,06 5 0,54 0,49 0,45 0,40 0,35 0,29 0,24 0,18 0,13 0,06 10 0,58 0,53 0,48 0,42 0,37 0,31 0,25 0,19 0,13 0,06 15 0,61 0,55 0,50 0,44 0,39 0,33 0,26 0,20 0,14 0,07 20 0,64 0,58 0,52 0,46 0,40 0,34 0,27 0,21 0,14 0,07 25 0,66 0,60 0,54 0.48 0,41 0,34 0,28 0,21 0,14 0,07 30 0,68 0,62 0,56 0,49 0,42 0,35 0,28 0,21 0,14 0,07 40 0,72 0,65 0,58 0,51 0,44 0,37 0,30 0,22 0,15 0,08 50 0,74 0,67 0,60 0,53 0,45 0,38 0,30 0,23 0,15 0,08 60 0,76 0,69 0,61 0,54 0,46 0,39 0,31 0,23 0,16 0,08 70 0,79 0,71 0,63 0,55 0,48 RESTAR 0,40 0,32 0,24 0,16 0,08
21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
0,06 0,13 0,19 0,26 0,33 0,40 0,48 0,56 0,64 0,72
0,07 0,13 0,20 0,27 0,35 0,42 0,50 0,57 0,66 0,74
0,07 0,14 0,21 0,28 0,36 0,43 0,52 0,60 0,68 0,77
0,07 0,14 0,22 0,29 0,37 0,44 0,53 0,61 0,69 0,78
0,07 0,15 0,22 0,30 0,38 0,45 0,54 0,62 0,71 0,79
0,08 0,15 0,23 0,30 0,38 0,46 0,55 0,63 0,72 0,80
0,08 0,15 0,23 0,31 0,39 0,47 0,55 0,63 0,72 0,80
0,08 0,15 0,23 0,31 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,08 0,16 0,24 0,31 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,08 0,16 0,24 0,32 0,40 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
0,08 0,16 0,24 0,32 0,40 SUMAR 0,48 0,56 0,64 0,73 0,81
2. DENSIDAD 2.1. Principio. La densidad (20/20C) del lquido a analizar se determina por medio del picnmetro. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Estufa. 2.2.2. Desecador. 2.2.3. Bao a 20C. 2.2.4. Balanza analtica sensible a 0,1 mg. 2.2.5. Picnmetro Reischauer de 50 ml o similar. El picnmetro Reischauer consiste en un matraz de 50 ml de capacidad, cerrado con un capuchn esmerilado provisto de un cuello de 6 cm de longitud y 4 mm de dimetro interior. 2.2.6. Erlenmeyer de 500 ml. 2.2.7. Embudo de 10 cm de dimetro. 2.2.8. Tubos capilares. 2.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 502612 DERQUIM Mezcla crmica Papel de filtro
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2.4. Procedimiento. Si el lquido a analizar contiene una apreciable cantidad de gas carbnico, conviene eliminar completamente ste agitando fuertemente en un Erlenmeyer y filtrarlo a continuacin por medio de un filtro cubierto de un vidrio de reloj. 2.4.1 Determinacin del peso del picnmetro vaco: Limpiar el picnmetro con Mezcla crmica DERQUIM, caliente si es necesario; despus enjuagar cuidadosamente con Agua PA-ACS. Secar durante tres horas en la estufa a 105108C. Enfriar en desecador hasta temperatura ambiente y expresar el resultado con cuatro cifras decimales. 2.4.2. Determinacin del peso del picnmetro lleno de agua. Llenar el picnmetro hasta la marca con Agua PA-ACS. Tapar y ponerlo en un bao de agua a 20C durante veinte minutos. Estando la temperatura equilibrada, enrasar el picnmetro (siempre sumergido en el bao de agua) con la ayuda de un capilar. Secar la parte vaca del cuello del picnmetro por medio del papel de filtro. Colocar el tapn, retirar el picnmetro del bao de agua y secar cuidadosamente. El peso
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del picnmetro lleno de agua debe ser determinado con una precisin de cuatro cifras decimales. 2.4.3. Determinacin del peso del picnmetro lleno de muestra: Despus de haber vaciado el picnmetro, lavar varias veces con la muestra y proceder como en 2.4.2., sustituyendo el Agua PA-ACS por zumo de uva. 2.5. Clculos. Calcular la densidad 20/20C aplicando la siguiente frmula: c-a d = b-a Siendo: a = Peso picnmetro vaco. b = Peso picnmetro lleno de agua hasta la marca. c = Peso picnmetro lleno de lquido para analizar hasta la marca. La densidad obtenida debe expresarse con una precisin de cuatro cifras decimales. 2.6. Referencias. Federation Internationale des Producteurs de Jus de Fruits. Mtodo nmero 1, 1968. 3. pH 3.1. Principio. Medida potenciomtrica a 20C, previa eliminacin del dixido de carbono por agitacin en fro y con vaco parcial. 3.2. Material y aparatos. 3.2.1. pH-metro. 3.2.2. Electrodo/s para medida de pH. 3.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 131481 Potasio Hidrgeno Ftalato PA-ISO 272168 Tampn, Solucin pH 4,00 0,02 (20C) ST 272170 Tampn, Solucin pH 7,00 0,02 (20C) ST 3.3.1. Tampn, Solucin pH 4,00 0,02 (20C) ST o prepararla disolviendo 10,211 g de Potasio Hidrgeno Ftalato PA-ISO (KHC6H 4O 4) (secado una hora a 105C) en un litro de Agua PAACS a 20C. 3.4. Procedimiento. Introducir un volumen adecuado de muestra en un kitasato. Conectar a vaco agitando al mismo tiempo el matraz, hasta eliminacin del gas carbnico. Tomar un volumen de muestra exento de dixido de carbono y determinar el pH. 3.5. Expresin de los resultados. Expresar el pH medido a 20C con uno o dos decimales, segn la precisin del aparato. 3.6. Observaciones. 3.6.1. Antes de cada nueva medida, limpiar los electrodos con agua destilada y secarlos con papel de filtro. 3.6.2. El electrodo de calomelanos debe ser llenado de tiempo en tiempo de solucin saturada de ClK. 3.6.3. El electrodo de vidrio debe ser conservado en agua y el de calomelanos en solucin saturada de ClK. Los electrodos combinados deben ser conservados en solucin saturada de ClK. 3.6.4. El calibrado se hace con ayuda de las soluciones tampones siguiendo las indicaciones particulares del fabricante del aparato. 3.7. Referencias. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits. Mtodo nmero 11, ao 1968. 4. ACIDEZ TOTAL 4.1. Principio. Valoracin potenciomtrica a pH=8,1 de la acidez del zumo de uva, previa eliminacin del dixido de carbono. 4.2. Material y aparatos. 4.2.1. pH-metro con electrodo/s para medidas de pH. 4.2.2. Agitador magntico. 4.3. Reactivos. 171694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) RE 4.4. Procedimiento. Tomar 20 ml del zumo de uva, exento de dixido de carbono, obtenido como en 3.4, y llevar a un vaso de unos 100 ml de capacidad. Poner en marcha el agitador y valorar con solucin 4.3 hasta pH 8,1 a 20C. Mantener en marcha el agitador durante la operacin, que debe durar, como mnimo, cinco minutos. 4.5. Clculos. Calcular la acidez total expresada en meq/l, con una aproximacin de 0,1 meq/l, o en gramos de cido tartrico/l.
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V Acidez total (meq/l) = 10 2 V Acidez total (g ac.tartrico/l) = 0,75 2 Siendo: V= Volumen, en ml, de solucin de Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) RE 4.6. Referencias Recuil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins O.I.V. A 10 (1969), 1-3.
181969 Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV 5.3.1. Sodio Hidrxido 0,05 mol/l (0,05N) SV 5.3.2. Solucin de Fenolftalena al 1% en Etanol 96% PA. Usese Fenolftalena PA-ACS y diluir convenientemente. 5.3.3. Solucin de Yodo 0,01N. Diluir Yodo 0,01 mol/l (0,02N) SV con Agua PA-ACS a 1:1 y determinar el factor. 5.3.4. Almidn soluble RE. 5.4. Procedimiento Alimentar el generador de vapor con Agua de Cal solucin saturada RE o Agua de Barita solucin saturada RE limpia, mantenindolo lleno hasta unos 2/3 de su volumen. Poner en el borboteador 20 ml de zumo de uva exento de gas carbnico, como en 3.4. Aadir al zumo de uva unos 0,5 g de Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO, poner en marcha el generador de vapor, manteniendo abierta la salida del tubo purgador del vapor; despus de cerrar ste, calentar el borboteador. Durante la operacin se regula el calentador de forma que el volumen del lquido en el borboteador no pase sensiblemente de los veinte ml iniciales. Destilar en unos doce-quince minutos 250 ml. Valorar con Sodio Hidrxido 0,05 mol/l (0,05N) SV en presencia de dos gotas de Fenolftalena como indicador. Valorar el dixido de azufre libre en este mismo destilado, aadiendo al terminar la valoracin anterior una gota de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO, para acidular nuevamente, valorando el dixido de azufre libre con solucin de Yodo 0,01N, aadiendo tambin 2 ml de Almidn soluble RE como indicador y un cristal de Potasio Yoduro PA-ISO. Para determinar el dixido de azufre combinado con el Acetaldehdo, aadir 20 ml de solucin saturada de di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PAACS-ISO (el liquido toma un color rosa plido) y valorar nuevamente con solucin de Yodo 0,01N. 5.5. Clculos. Calcular la acidez voltil expresada en meq/l o en g de cido actico/l. Acidez voltil (meq/l)=5(V/2-V/10-V/20) Acidez voltil (g/l cido actico)=0,3(V/2V/10-V/20) Siendo: V = Volumen en ml utilizados de solucin de sodio hidrxido 0,05N. V = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la oxidacin del dixido de azufre libre. V = Volumen en ml de yodo 0,01N utilizado en la oxidacin del dixido de azufre combinado con el acetaldehdo.
5. ACIDEZ VOLATIL 5.1. Principio. Separacin de los cidos voltiles del zumo de uva por arrastre con vapor de agua, evitando la presencia de dixido de carbono en el destilado. Valoracin con solucin de sodio hidrxido, descontando los contenidos de cido srbico y de dixido de azufre libre y total. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Aparato para destilacin (ver figura 21.I pg. 52). 5.2.1.1. Matraz generador de vapor de 3.500 ml (a). El agua condensada en el tubo de unin del matraz con el borboteador, se purga por el purgador (c). 5.2.1.2. Borboteador (b). Tubo cilndrico de 3 cm de dimetro y 27 cm de altura. Este tubo reposa sobre un disco de amianto de 15 cm de dimetro con un orificio central de 29 mm. El tubo (d) por el que entra el vapor en el borboteador debe llegar a 1cm del fondo. 5.2.1.3. Columna rectificadora (e). De 20 mm de dimetro y 50 cm de altura. 5.2.1.4. Refrigerante de West (f). De 40 cm de longitud til, colocado verticalmente. 5.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131066 Acido L(+) Tartrico PA-ACS-ISO 171073 Agua de Cal solucin saturada RE (o 171071 Agua de Barita solucin saturada RE) 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121085 Etanol 96% PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 131644 di-Sodio tetra-Borato 10-hidrato PA-ACS-ISO 182153 Sodio Hidrxido 0,05 mol/l (0,05N) SV
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5.6. Observaciones. 5.6.1. La determinacin de la acidez voltil se efectuar inmediatamente despus de la apertura del envase. 5.6.2. En la destilacin del zumo de uva para la determinacin de la acidez voltil, el cido srbico pasa casi en su totalidad al destilado, falseando el resultado del anlisis. Efectuar la correccin. 100 mg de cido srbico equivalen a 0,892 meq = 0,0535 g de cido actico. 5.6.3. La correccin de la acidez voltil se realiza segn la norma Jaulmes, descontndose Ia totalidad del contenido en dixido de azufre libre y la mitad del contenido de dixido de azufre total. 6. SOLIDOS SOLUBLES El contenido en slidos solubles expresado en g/l se calcula a partir del valor de la densidad, obtenida segn el mtodo oficial nmero 2 y utilizando la tabla adjunta.
TABLA 6.1 Estracto seco total (g/l) Densidad relativa con dos decimales Tercer decimal de la densidad relativa 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Gramos por litro del extracto 1,00 1,01 1,02 1,03 1,04 1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,17 1,18 1,19 1,20 1,21 0 25,8 51,7 77,7 103,7 129,8 155,9 182,1 208,4 234,7 261,0 287,4 313,9 340,4 366,9 393,6 420,3 447,1 473,9 500,9 527,8 555,0 2,6 28,4 54,3 80,3 106,3 132,4 158,6 184,8 211,0 237,3 263,6 290,0 316,5 343,0 369,6 396,2 423,0 449,8 476,6 503,5 530,5 557,7 5,1 31,0 56,9 82,9 109,0 135,0 161,2 187,4 213,6 239,9 266,3 292,7 319,2 345,7 372,3 398,9 425,7 452,4 479,3 506,2 533,3 560,4 7,7 33,6 59,5 85,5 111,6 137,6 163,8 190,0 216,2 242,5 268,9 295,3 321,8 348,3 375,0 401,6 428,3 455,2 482,0 508,9 536,0 563,1 10,3 36,2 62,1 88,1 114,2 140,3 166,4 192,6 218,9 245,2 271,5 298,0 324,5 351,0 377,6 404,3 431,0 457,8 484,7 511,6 538,7 565,8 12,9 38,8 64,7 90,7 116,8 142,9 169,0 195,2 221,5 247,8 274,2 300,6 327,1 353,7 380,3 406,9 433,7 460,5 487,4 514,3 541,4 568,5 15,4 41,3 67,3 93,3 119,4 145,5 171,6 197,8 224,1 250,4 276,8 303,3 329,8 356,3 382,9 409,6 436,4 463,2 490,1 517,0 544,1 571,2 18,0 43,9 69,9 95,9 122,0 148,1 174,3 200,5 226,8 253,1 279,5 305,9 332,4 359,0 385,6 412,3 439,0 465,9 492,8 519,7 546,8 573,9 20,6 46,5 72,5 98,5 124,6 150,7 176,9 203,1 229,4 255,7 282,1 308,6 335,1 361,6 388,3 415,0 441,7 468,6 495,5 522,4 549,6 576,6 23,2 49,1 75,1 101,1 127,2 153,3 179,5 205,8 232,0 258,4 284,8 311,2 337,8 364,3 390,9 417,6 444,4 471,3 498,2 525,1 552,3 579,3
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TABLA 6.1 (Continuacin) Densidad relativa con dos decimales Tercer decimal de la densidad relativa 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Gramos por litro del extracto 1,22 1,23 1,24 1,25 1,26 1,27 1,28 1,29 1,30 1,31 1,32 1,33 1,34 1,35 582,0 609,3 636,6 664,0 691,4 719,1 746,7 774,4 802,3 830,2 858,3 886,5 914,8 943,1 584,8 612,1 639,4 666,8 694,2 721,9 749,5 777,2 805,0 833,1 861,2 889,4 917,7 587,5 614,8 642,1 669,5 697,0 724,7 752,3 780,0 807,8 835,9 864,0 892,2 920,5 590,2 617,5 644,9 672,3 699,8 727,4 755,1 782,8 810,6 838,7 866,8 895,0 923,3 593,0 620,3 647,4 675,0 702,5 730,2 757,8 785,6 813,4 841,5 869,6 897,9 926,2 595,7 623,0 650,3 677,7 705,3 732,9 760,6 788,3 816,2 844,3 872,4 900,7 929,0 598,4 625,7 653,1 680,5 708,1 735,7 763,4 791,1 819,0 847,1 875,3 903,5 931,8 601,1 628,4 655,8 683,2 710,8 738,5 766,1 793,9 821,8 849,9 878,1 906,4 934,7 603,9 631,2 658,6 686,0 713,6 741,2 768,9 796,7 824,6 852,7 880,9 909,2 937,5 606,6 633,9 661,3 688,7 710,4 744,0 771,7 799,5 827,4 855,5 883,7 912,0 940,3
TABLA DE INTERPOLAR 4 decimal de la densidad relativa 1 2 3 4 5 6 7 8 9
g/l del extracto seco 0,26 0,52 0,78 1,04 1,30 1,56 1,82 2,08 2,34
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M
7. AZUCARES TOTALES Y REDUCTORES 7.1. Principio. Eliminacin previa de todas las materias reductoras distintas de los azcares por defecacin, inversin y posterior valoracin basada en la accin reductora de los azcares sobre una solucin cupro-alcalina. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Material necesario para volumetras. 7.2.2. Bao de agua. 7.2.3. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo. 7.3. Reactivos 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131018 Acido Ctrico 1-hidrato PA-ACS-ISO 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 131505 Potasio Hexacianoferrato III 3-hidrato PA-ACS 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 172174 Reactivo de Luff-Schoorl RE 131648 Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO 181723 Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV 121787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA 7.3.1. Solucin de Acido Sulfrico al 25 % en volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 7.3.2. Acido Clorhdrico 35% PA-ISO. 7.3.3. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. 7.3.4. Solucin de Potasio Hidrxido al 30%. Disolver unos gramos de Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO en el volumen conveniente de Agua PA-ACS. 7.3.5. Solucin de Potasio Yoduro al 30%. Usese Potasio Yoduro PA-ISO, disuelto con Agua PAACS hasta la concentracin deseada. Conservar en frasco topacio. 7.3.6. Solucin de Almidn al 1%. Disolver 1 g de Almidn soluble RE con Agua PA-ACS, enrasando a 100 ml. 7.3.7. Solucin de Carrez I: Disolver 150 g de Potasio Hexacianoferrato III 3hidrato PA-ACS en un litro de Agua PA-ACS. 7.3.8. Solucin de Carrez II: Disolver 300 g de Zinc Sulfato 7-hidrato PA en un litro de Agua PA-ACS. 7.3.9. Reactivo de Luff-Schoorl RE, o bien prepararlo de la siguiente forma: Disolver 50 g de Acido Ctrico 1-hidrato PA-ACSISO en 500 ml de Agua PA-ACS y 143,7 g de Sodio Carbonato anhidro PA-ACS-ISO en 350 ml de Agua PA-ACS tibia; cuando se haya enfriado, mezclar con cuidado ambas soluciones. Disolver 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS. Aadir a la solucin anterior y enrasar con Agua PA-ACS hasta 1 l. 7.3.10. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV. 7.3.11. Solucin de Fenolftalena: Disolver 0,1 g de Fenolftalena PA-ACS en 100 ml de Etanol 96% v/v PA. 7.4. Procedimiento. 7.4.1. Preparacin de la muestra: Tomar con pipeta 25 ml de la muestra en matraz aforado de 500 ml. Aadir 150 ml de Agua PA-ACS y 5 ml de la solucin Carrez I; mezclar y aadir 5 ml de la solucin Carrez II. Mezclar y enrasar con Agua PA-ACS. Dejar en reposo diez minutos y filtrar. 7.4.2. Inversin de los azcares: Tomar con pipeta 25 ml de la muestra preparada segn (7.4.1.) y llevar a un matraz de 100 o 200 ml, segn la dilucin a emplear. Diluir con Agua PA-ACS hasta 75 ml y aadir 5 ml de Acido Clorhdrico 1-hidrato PAACS-ISO. Antes de 5 minutos llevarlo a 67-70C en un bao de agua, mantenerlo durante cinco minutos a esa temperatura. Comprobar la temperatura con un termmetro introducido en la disolucin. Enfriar inmediatamente el matraz a 20C, quitar el termmetro y aclararlo. Neutralizar el contenido con solucin de Potasio Hidrxido al 30%, utilizando Fenolftalena como indicador. Aadir unas gotas de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO hasta que el color de la Fenolftalena desaparezca. Enrasar el matraz con Agua PA-ACS. 7.4.3. Determinacin de los azcares totales: La solucin de la muestra no debe contener ms de 50 mg de azcares reductores. Tomar con pipeta 25 ml de la muestra preparada segn (7.4.2.) sobre un matraz que contenga 25 ml de la solucin de Luff-Schoorl (7.3.9.). Aadir al matraz unas perlas de vidrio y conectar el refrigerante de reflujo. Calentar el matraz con llama potente durante dos minutos y mantener a ebullicin durante diez minutos exactos. Enfriar inmediatamente en agua. Cuando est completamente fro, aadir 10 ml de la solucin de Potasio Yoduro (7.3.5.) y, con cuidado, 25 ml de la solucin de Acido Sulfrico (7.3.1.). Aadir 2 ml de la solucin de Almidn (7.3.6.) y valorar el contenido del matraz con solucin de Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV (7.3.10.) hasta obtener una coloracin blanca cremosa. Si se hubieran empleado menos de 5 ml en la valoracin, repetir la determinacin utilizando una dilucin de la muestra ms adecuada. Realizar en paralelo una determinacin en blanco, empleando 25 ml de Agua PA-ACS.
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7.4.4. Azcares reductores: Para la determinacin de azcares reductores seguir el mismo procedimiento suprimiendo la inversin (7.4.2.). 7.5. Clculos. Sea D la diferencia entre lo gastado de Sodio Tiosulfato por el blanco y lo gastado por la muestra. La concentracin de azcares totales expresados en glucosa se obtiene del valor D en la tabla, interpolando en caso necesario y multiplicando por el factor de dilucin. 7.6. Referencias. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits. Mtodo nmero 4. Ao 1985.
8. ACIDO ASCORBICO 8.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del cido ascrbico por cromatografa de lquidos de alta eficacia, detectndolo en el ultravioleta a 268 nm. 8.2. Material y aparatos. 8.2.1. Equipo de filtracin de muestra y disolvente para eliminar partculas superiores a 0,5 mm. 8.2.2. Cromatgrafo de lquidos equipado con detector de ultravioleta de longitud de onda variable y registrador. 8.2.3. Columna NH 2 - Lichorsob de 250 x 4,6 mm fr 10 mm o similar. 8.3. Reactivos. 263093 Acetonitrilo-gradiente HPLC 131013 Acido L(+)-Ascrbico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 8.3.1. Solucin patrn de Acido Ascrbico de 300 mg/l, preparada con Acido L(+) - Ascrbico PA-ACS-ISO y Agua PA-ACS y conservada en matraz color topacio. 8.3.2. Solucin A: Tampn fosfato pH 3,5. Disolucin 0,005M de Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4): Filtrar esta solucin con (8.2.1.). 8.3.3. Solucin B: Acetonitrilo-gradiente HPLC. 8.4. Procedimiento. 8.4.1. Condiciones cromatogrficas orientativas: Fase mvil: Tampn Potasio di-Hidrgeno Fosfato/Acetonitrilo-gradiente HPLC: 60/40 (v/v). Flujo : 1 ml/minuto. 8.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatgrafo entre 10 y 20 ml de la solucin patrn (7.3.1.) y calcular el factor de respuesta. Co Factor de respuesta (F) = Ap Siendo: Co = Concentracin en mg/l de cido ascrbico. Ap = Area del pico en el cromatograma de la solucin patrn. 8.4.3. Determinacin: Homogeneizar. Filtrar mediante (8.2.1.) e inyectar de 10 a 20 ml en el cromatgrafo. 8.5. Clculos. El contenido de cido ascrbico, expresado en
Tabla 7,1 Para 25 ml de reactivo de Luff-Schoorl D = ml de Tiosulfato 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 mg de Glucosa 2,4 4,8 7,2 9,7 12,2 14,7 17,2 19,8 22,4 25,0 27,6 30,3 33,0 35,7 38,5 41,3 44,2 47,1 50,0 53,0 56,0 59,1 62,2 Diferencia 2,4 2,4 2,5 2,5 2,5 2,6 2,6 2,6 2,6 2,6 2,7 2,7 2,7 2,7 2,8 2,9 2,9 2,9 3,0 3,0 3,0 3,1
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M
mg/l (sin decimales), se obtendr mediante la siguiente frmula: Acido ascrbico (mg/l) = F x Ac Siendo: F = Factor de respuesta. Ac = Area del pico del cido ascrbico en la muestra. 8.6. Observaciones. 8.6.1. La determinacin del cido ascrbico se realizar inmediatamente despus de la apertura del envase. 8.6.2. Con este mtodo no se determina cido dehidroascrbico. Co Factor de respuesta (F) = Ap Siendo: Co = Concentracin en g/l del patrn. Ap = Area del pico patrn en el cromatograma. 9.4.3. Determinacin: Filtrar la muestra mediante los equipos del apartado (9.2.1.) e inyectar una cantidad conocida en la columna. 9.5. Clculos El contenido en glucosa y fructosa, expresado en g/l, se obtiene mediante la siguiente frmula: Glucosa (g/l) = F1 x A1 x f Fructosa (g/l) = F2 x A2 x f Siendo: F1 = Factor de respuesta de la glucosa. F2 = Factor de respuesta de la fructosa. f = Factor de dilucin. A1 = Area del pico de glucosa en la muestra. A2 = Area del pico de fructosa en la muestra. 9.6. Observaciones. Los factores de respuesta deben calcularse varias veces durante una sesin. Es pues recomendable tener termostatizado el detector. 10. NITROGENO TOTAL 10.1. Principio. Digestin del producto con cido sulfrico concentrado, en presencia de catalizador, en la cual se transforma el nitrgeno orgnico en iones amonio, que en medio fuertemente bsico es desplazado en forma de amonaco, y recogido sobre cido brico. La posterior valoracin con cido clorhdrico permite el clculo de la cantidad inicialmente presente de nitrgeno orgnico y amoniacal en la muestra. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Aparato Kjeldahl. 10.3. Reactivos. 131015 Acido Brico PA-ACS-ISO 182107 Acido Clorhdrico 0,05 mol/l (0,05N) SV 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 122726 Cobre II Sulfato anhidro PA 121085 Etanol 96% v/v PA 9.4.2. Calibrado: inyectar en el cromatgrafo una cantidad conocida de la solucin patrn y calcular los factores de respuesta.
9. RELACION GLUCOSA-FRUCTOSA 9.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin de glucosa y fructosa por cromatografa de lquidos de alta eficacia con detector de ndice de refraccin. 9.2. Material y aparatos. 9.2.1. Equipos de filtracin de muestra y disolventes para eliminar partculas superiores a 0,5 mm. 9.2.2. Cromatgrafo de lquidos equipado con detector de ndice de refraccin y registrador. 9.2.3. Columna Sugar-Pack u otra columna que permita la separacin de glucosa y fructosa. 9.2.4. Horno para columna. 9.3. Reactivos. 124559 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdico Clcica PA 131074 Agua PA-ACS 212236 Agua Desionizada QP 121211 Calcio Acetato x-hidrato PA 142728 D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRS-CODEX 121341 D(+)-Glucosa PA 9.3.1. Soluciones patrn de Glucosa y Fructosa al 10% (p/v). Preparar ambas soluciones disolviendo 10 g de D (-)-Fructosa (F.Eur., BP, USP) PRSCODEX y D(+)-Glucosa PA en 100 ml de Agua PAACS. 9.4. Procedimiento. 9.4.1. Condiciones cromatogrficas orientativas para la columna Sugar-Pack: Fase mvil: Solucin de 20 mg/l de Calcio Acetato x-hidrato PA o Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdico Clcica PA en Agua Desionizada QP y Agua PA-ACS. Flujo : 0,4-0,5 ml/min. Temperatura del horno : 90-95 C.
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171327 Fenolftalena solucin 1% RE Papel Tornasol 131532 Potasio Sulfato PA-ACS-ISO 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 141625 Selenio metal polvo PRS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 171759 Verde de Bromocresol indicador RE-ACS 10.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 10.3.2. Catalizador de selenio. Mezclar bien pulverizados 80 g de Potasio Sulfato PA-ACS-ISO, 20 g de Cobre II Sulfato anhidro PA y 5 g de Selenio metal polvo PRS. 10.3.3. Fenolftalena solucin 1% RE y Papel Tornasol. 10.3.4. Indicador: Pesar 105 mg de Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS y 150 mg de Verde de Bromocresol indicador RE-ACS y disolver a 100 ml con Etanol 96% v/v PA. 10.3.5. Solucin de Acido Brico al 1%. Pesar 10 g de Acido Brico PA-ACS-ISO, disolver con Agua PA-ACS, aadir 10 ml del indicador (10.3.4.) y enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS. 10.3.6. Solucin de Sodio Hidrxido al 40%. Disolver Sodio Hidrxido 97% lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS hasta la concentracin deseada. 10.3.7. Acido Clorhdrico 0,05 mol/l (0,05N) SV. 10.4. Procedimiento. Poner en el matraz Kjeldahl 5-10 ml de zumo de uva y aadir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. Evaporar hasta consistencia siruposa. Aadir 10 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y 7 g de catalizador (10.3.2.), continuar calentando primero lentamente y despus enrgicamente hasta decoloracin, proseguir unos minutos ms. Si es necesario se van aadiendo nuevas dosis de Acido Sulfrico 96% PA-ISO de 5 en 5 ml. Enfriar el matraz a temperatura ambiente, adicionar unas gotas de Fenolftalena solucin 1% RE y llevarlo al aparato de destilacin. En un vaso cilndrico de unos 200 ml aadir 25 ml de Acido Brico PA-ACSISO (10.3.5.). Aadir al matraz solucin de Sodio Hidrxido (10.3.6.) en cantidad suficiente para viraje de la Fenolftalena solucin 1% RE. Conectar el aparato de destilacin con el generador de vapor de agua y comenzar el arrastre del Amonaco recogiendo el destilado en la solucin de Acido Brico (10.3.5.). Despus de quince-veinte minutos, comprobar con Papel de Tornasol si una gota del destilado no acusa reaccin alcalina. En este caso separar el vaso y proceder a la valoracin. Valorar con Acido Clorhdrico 0,05 mol/l (0,05N) SV (10.3.7). 10.5. Clculo. El contenido en nitrgeno expresado en mg/l vendr por la siguiente frmula:
700 (V1- V0) Nitrgeno (mg/l) = V Siendo: V = Volumen, en ml, utilizados de muestras. V1 = Volumen, en ml, de solucin de cido clorhdrico empleado en la valoracin. V0 = Volumen, en ml, de solucin de cido clorhdrico empleado en el blanco. 10.6. Observaciones. Para efectuar el procedimiento Kjeldahl podrn utilizarse sistemas automticos o semiautomticos, adaptndose a las especificaciones del equipo. 10.7. Referencias. Recueil des Methodes Internationales dAnalyse des Vins. O. I. V. A. (40). 1969.
11. ETANOL 11.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del etanol por cromatografa gaseosa. 11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Cromatgrafo de gases equipado con detector de ionizacin de llama. 11.2.2. Columna cromatogrfica. Columna de 2 m de longitud y 2 mm de dimetro interno, relleno de Porapak Q 80-100 mallas o cualquier otra columna que permita la separacin y cuantificacin del etanol. 11.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 351085 Etanol 96% v/v CG 354457 2-Propanol CG 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Condiciones cromatogrficas: Las condiciones cromatogrficas orientativas para la columna de Porapak son: Gas portador nitrgeno 35 ml/min.; temperatura del horno: 130 C; temperatura del inyector y del detector: 180 C. 11.4.2. Calibrado. 11.4.2.1. Patrn interno: Solucin al 10% (v/v) de 2-Propanol CG en Agua PA-ACS 11.4.2.2. Solucin patrn: Preparar una solucin de Etanol 96% v/v CG-Agua PA-ACS que contenga el porcentaje de Etanol que se supone tiene la muestra. 11.4.2.3. Solucin de calibrado: A 100 ml de la solucin patrn (11.4.2.2.) se le ha de aadir 1 ml de la solucin del patrn interno (11.4.2.1.) y se inyecta 1 microlitro en el cromatgrafo. 11.4.2.4. Muestra problema: A 100 ml de la muestra aadir 1 ml de la solucin patrn interno (11.4.2.1.) e inyectar 1 microlitro en el cromatgrafo.
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11.5. Clculos. Calcular el factor de respuesta y la concentracin de etanol en la muestra, aplicando las frmulas siguientes: Ci x Ap Factor de respuesta (FR) = Ai Concentracin en la muestra Aim (% en volumen) = FR x Apm Siendo: Ci = Porcentaje en volumen del etanol en la solucin patrn. Ap = Area del patrn interno en la solucin patrn. = Area del etanol en la solucin patrn. Ai Aim = Area del etanol en la muestra problema. Apm = Area del patrn interno en la muestra problema. 11.6 Observaciones. La determinacin de etanol se efectuar inmediatamente despus de la apertura del envase. 12. INDICE DE FORMOL 12.1. Principio. Valoracin de la acidez de los compuestos formados por la reaccin del formaldehdo con los aaminocidos. 12.2. Material y aparatos. pH metro. 12.3. Reactivos. 131328 Formaldehdo 36,5-38% p/v estabilizado con metanol PA-ACS 141076 Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS 182155 Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV 12.3.1. Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV. 12.3.2. Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS. 12.3.3. Solucin de Formaldehdo. Llevar el Formaldehdo 36,5-38% p/v estabilizado con metanol PA-ACS, a pH 8,1 mediante la solucin de Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.), utilizando el pH-metro. Comprobar cada hora. 12.4. Procedimiento. Poner 25 ml de zumo de uva en un vaso de precipitados y neutralizar con Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV (12.3.1.) hasta pH 8,1, utilizando el pH-metro. Aadir 10 ml de la solucin de Formaldehdo (12.3.3.) y mezclar. Al cabo de un minuto efectuar la valoracin potenciomtrica de la solucin problema con la solucin de Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV hasta pH 8,1. Si se hubieran utilizado ms de 20 ml de la solucin de Sodio Hidrxido 0,25 mol/l (0,25N) SV, deber realizarse de nuevo la valoracin empleando 15 ml de solucin de Formaldehdo, en lugar de 10 ml. Si la muestra contiene Anhdrido Sulfuroso, aadir algunas gotas de Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS antes de la neutralizacin. 12.5 Expresin de los resultados. El ndice de formol de la muestra analizada es igual a la cantidad de solucin alcalina utilizada en la valoracin expresada en ml de sodio hidrxido 0,1N y que corresponden a 100 ml de zumo de uva. 12.6. Referencias. Federation Internationale des Producteurs de Jus de Fruits. Analyses F.I.P.J.F. No. 30 Ao 1984. 13. PROLINA 13.1. Principio. Determinacin cuantitativa de la prolina por reaccin con ninhidrina en medio cido. 13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Tubos de ensayo con tapn de rosca. 13.2.2. Espectrofotmetro o colormetro que permita efectuar lecturas a 517 nm. 13.3. Reactivos. 131030 Acido Frmico 98% PA-ACS 131074 Agua PA-ACS 141897 Eter mono-Metlico del Etilenglicol PRS 132362 Ninhidrina PA-ACS 131090 2-Propanol PA-ACS-ISO 13.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metlico del Etilenglicol PRS 13.3.2. Acido Frmico 98% PA-ACS 13.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO-Agua PA-ACS 1:1 (v/v). 13.4. Procedimiento. Diluir la muestra hasta que contenga de 5 a 50 mg/l de prolina. Tomar 0,5 ml de muestra diluida e introducirla en un tubo de ensayo con tapn de rosca, aadir 0,25 ml de Acido Frmico 98% PAACS y 1 ml de solucin de Ninhidrina al 3%. Cerrar hermticamente el tubo e introducirlo en un bao de agua hirviendo durante catorce o quince minutos, aadiendo mientras se enfra 5 ml de solucin de 2-Propanol PA-ACS-ISO- Agua PA-ACS 1:1 (v/v). A continuacin efectuar la lectura de la absorcin a 517 nm despus de cinco minutos y antes
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de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo el procedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS en vez de la solucin problema. 13.5. Interpretacin de los resultados. Calcular el contenido en prolina por comparacin con una curva patrn que comprenda concentraciones entre 5 y 50 mg/l. 13.6. Referencias. C.S. Dugh J. of Food Science 34 (1969). 228. 14. ACIDO SORBICO 14.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del cido srbico por cromatografa de lquidos de alta eficacia y deteccin en ultravioleta a 230 nm. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Equipos de filtracin de muestra y de solventes, para eliminar partculas superiores a 0,5 mm. 14.2.2. Cromatgrafo de lquidos equipado con detector de ultravioleta de longitud de onda variable y registrador. 14.2.3. Columna C-18 de 250x4,6 mm de 10 mm o similar. 14.3. Reactivos. 141055 Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX 131074 Agua PA-ACS 261091 Metanol HPLC 122333 di-Potasio Hidrgeno Fosfato 3-hidrato PA 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 14.3.1. Solucin patrn de 50 mg/l de Acido Srbico (USP-NF) PRS-CODEX en Metanol HPLC. 14.3.2. Solucin tampn de fosfatos de pH = 6,6. Disolver 2,5 g de di-Potasio Hidrgeno Fosfato 3-hidrato PA (K2HPO4.3H2O) y 2,5 g de Potasio diHidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO (KH2PO4) en un litro de Agua PA-ACS. Filtrar esta solucin con (12.4.1.). 14.3.3. Metanol HPLC. 14.4. Procedimiento. 14.4.1. Condiciones cromatogrficas orientativas: Fase mvil: Metanol HPLC-tampn fosfato 10:90 (v/v). Flujo : 1 ml/min. 14.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatgrafo entre 10 y 20 ml de la solucin patrn (14.3.1.) y calcular el factor de respuesta.
Co Factor de respuesta (F) = Ap Siendo: Co = Concentracin en mg/l de cido srbico. Ap = Area del pico en el cromatograma de la solucin patrn. 14.4.3. Determinacin: Poner 10 ml de zumo de uva en un matraz de 50 ml y enrasar con Metanol HPLC. Homogeneizar. Filtrar con 14.2.1. e inyectar entre 10 y 20 l en el cromatgrafo. 14.5. Clculos. El contenido en cido srbico expresado en mg/l se obtendr mediante la siguiente frmula: Acido Srbico (mg/l) = F x A1 x f Siendo: F = Factor de respuesta. A1 = Area del pico del cido srbico en la muestra. f = Factor de dilucin de la muestra. 14.6. Observaciones. La sensibilidad puede aumentarse efectuando lecturas a 250 nm. 14.7. Referencias. T. Stijve and Hischenhuber-Deutsche Lebensmittel-Rundschau 80, Jahrf/Heft 3/1984. 15. ACIDO BENZOICO 15.1 Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del cido benzoico por cromatografa de lquidos de alta eficacia y deteccin en el ultravioleta a 230 nm. 15.2. Material y aparatos. Como en 14.2. 15.3. Reactivos. 121014 Acido Benzoico PA 131074 Agua PA-ACS 261091 Metanol HPLC 122333 di-Potasio Hidrgeno Fosfato 3-hidrato PA 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 15.3.1. Solucin patrn de Acido Benzoico PA en Metanol HPLC de 50 mg/l. 15.3.2. Como en 14.3.2. 15.3.3. Como en 14.3.3. 15.4 Procedimiento. Como en 14.4., siendo en este caso Co la concentracin en mg/l de Acido Benzoico en la solucin patrn (15.3.1.).
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15.5. Clculos. El contenido en cido benzoico expresado en mg/l se obtendr mediante la siguiente frmula: Acido benzoico (mg/l) = F x A1 x f Siendo: F = Factor de respuesta. A1 = Area del pico del cido benzoico en la muestra. f = Factor de dilucin de la muestra. 15.6. Observaciones. La sensibilidad puede aumentarse efectuando lecturas a 217 nm. 15.7. Referencias. Como en 14.7. 16. HIDROXIMETILFURFURAL 16.1 Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del hidroximetilfurfural por cromatografa de lquidos de alta eficacia y deteccin en el ultravioleta a 285 nm. 16.2. Material y aparatos. 16.2.1. Equipos de filtracin de muestra y de solventes, para eliminar partculas superiores a 0,5 m. 16.2.2. Cromatgrafo de lquidos equipado con detector ultravioleta de longitud de onda variable y registrador. 16.2.3. Columna C-18 de 200 x 4,6 mm de 5 m o similar. 16.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS Hidroximetilfurfural 261091 Metanol HPLC 16.3.1. Solucin patrn: Solucin de 20 mg/l de Hidroximetilfurfural recientemente destilado en Metanol HPLC. 16.4. Procedimiento. 16.4.1. Condiciones cromatogrficas orientativas: Fase mvil: Agua Destilada y Desionizada. tiempo de retencin aproximado: 7 minutos. Flujo 1 ml/min. 16.4.2. Calibrado: Inyectar en el cromatgrafo 20 l de la solucin patrn (16.3.1.) y calcular el factor de respuesta. Co Factor de respuesta (F) = Ap 17. CENIZAS 17.1 Principio. Incineracin del residuo obtenido tras la evaporacin del zumo de uva realizada de manera que se puedan obtener todos los cationes (excepto amonio) en forma de carbonatos y otras sales minerales anhidras. 17.2. Material y aparatos. 17.2.1. Cpsulas de platino o cuarzo, de unos 80 mm de dimetro, con fondo plano. 17.2.2. Bao de agua y arena. 17.2.3. Horno elctrico regulable. 17.2.4. Balanza analtica con sensibilidad de 0,1 mg. 17.3. Procedimiento. Poner 25 ml de zumo de uva en cpsula tarada. Evaporar con precaucin en bao de agua (17.2.2.) hasta consistencia siruposa. Aadir al residuo unas gotas de aceite de oliva, calentar lentamente en bao de arena (17.2.2.), hasta que la mayor parte de la sustancia orgnica est carbonizada. Introducir la cpsula en el horno (17.2.3.) a 525 C hasta que el residuo est blanco (generalmente a las seis u ocho horas). Enfriar enseguida la cpsula en un desecador (unos treinta minutos) y pesar rpidamente. Puede, ocurrir, a veces, que el carbono no se quema completamente. En este caso, humidificar las cenizas con Agua PA-ACS, evaporar de nuevo y calcinar. Si fuera necesario, repetir esta operacin varias veces. 17.4. Clculos. El contenido en cenizas, expresado en gramos por litro, vendr dado por la siguiente frmula: Cenizas (g/l) = 40 x P Siendo: Co = Concentracin, en mg/l, de hidroximetilfurfural. Ap = Area del pico en el cromatograma de la solucin patrn. 16.4.3. Determinacin: Inyectar en el cromatgrafo 20 l de la muestra filtrada. 16.5. Clculos. El contenido en hidroximetilfurfural expresado en mg/l se obtendr mediante la siguiente frmula: Hidroximetilfurfural (mg/l) = F x A1 x f Siendo: F = Factor de respuesta A1 = Area del pico de HMF en la muestra f = Factor de dilucin de la muestra.
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Siendo: P = Peso en g de las cenizas contenidas en 25 ml de zumo de uva. 17.5. Observaciones. Un ligero color marrn rojizo de las cenizas, posiblemente de Fe2O3 es aceptado y no requiere un posterior tratamiento. 17.6. Referencias. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits. Mtodo N 9. Ao 1962. 18. MATERIAL MINERAL INSOLUBLE EN ACIDO CLORHIDRICO AL 10% 18.1. Principio. Tratamiento de las cenizas con cido clorhdrico al 10%, en las condiciones que se especifica en el mtodo. 18.2. Material y aparatos. 18.2.1. El mismo que en (17.2.). 18.2.2. Papel de filtro, sin cenizas, de porosidad media o crisol filtrante nmero 3. 18.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO 18.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 18.3.2. Solucin de Acido Clorhdrico al 10% (p/p). 18.3.3. Solucin de Plata Nitrato de 100 g/l. Disolver Plata Nitrato PA-ACS-ISO con Agua PAACS hasta la concentracin deseada. 18.4. Procedimiento. Aadir a las cenizas totales en la misma cpsula que se ha utilizado para su preparacin, de 15 a 25 ml de la solucin de Acido Clorhdrico (18.3.2.). Llevar la cpsula y mantener a ebullicin durante diez minutos. Recubrir la cpsula con vidrio de reloj, para impedir cualquier proyeccin. Dejar enfriar y filtrar el contenido de la cpsula a travs del papel del filtro o crisol (18.2.2.). Lavar el papel de filtro o crisol con Agua PA-ACS hasta que las aguas de lavado estn exentas de Acido Clorhdrico, lo que se comprueba con la solucin de Plata Nitrato (18.3.3.). Evaporar cuidadosamente e incinerar en el horno regulado a 525 C durante una hora. Dejar enfriar la cpsula o el crisol y pesar con una precisin de 0,001 g. Repetir las operaciones de incineracin hasta que la diferencia de masa entre dos determinaciones sucesivas sea inferior a 0,001 g.
18.5. Clculos. El contenido en cenizas insoluble en cido, expresadas en mg/l, vendr dado por la siguiente expresin: Cenizas insolubles mg/l = (P1-P0) x 40 Siendo: P0 = Peso, en mg, de la cpsula vaca o el crisol vaco. P1 = Peso, en mg, de la cpsula o crisol con las cenizas insolubles en cido. 18.6. Referencias. Instituto de Racionalizacin y Normalizacin del Trabajo, UNE 34-096-81. 19. FOSFORO TOTAL 19.1. Principio. Transformacin de los compuestos fosforados y posterior valoracin espectrofotomtrica como fosfomolibdovanadato. 19.2. Material y aparatos. 19.2.1. Espectrofotmetro o colormetro de efectuar lecturas a 400 nm. 19.2.2. Cpsula de platino, cuarzo o similar. 19.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131134 Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO 122352 Amonio meta-Vanadato PA 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 19.3.1. Solucin patrn de fosfatos. Disolver 0,2397 g de Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACSISO (KH2PO4), desecado previamente en estufa durante dos horas a 105 C, en Agua PA-ACS y enrasar a 250 ml. 19.3.2. Solucin de Amonio Molibdato. Disolver 60 g de Amonio Molibdato 4-hidrato PA-ACS-ISO en 900 ml de Agua PA-ACS caliente, enfriar y enrasar a 1 litro. 19.3.3. Solucin de Amonio meta-Vanadato. Disolver 1,5 g de Amonio meta-Vanadato PA en 690 ml de Agua PA-ACS caliente, aadir 300 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO, enfriar y enrasar a 1 litro. 19.3.4. Solucin de metamolibdovanadato. Aadir lentamente la solucin de Amonio Molibdato (19.3.2.) sobre la solucin de Amonio meta-Vanadato (19.3.3.), agitando. Conservar la solucin en frascos de polietileno.
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19.3.5. Solucin de Acido Clorhdrico. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en (1 + 3) (v/v). 19.3.6. Solucin de Acido Clorhdrico. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS en (1 + 9) (v/v). 19.4. Procedimiento. 19.4.1. Curva de calibrado. A partir de la solucin patrn (19.3.1.) preparar una serie de soluciones que contengan 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30 y 0,35 mg de P2O5/10 ml respectivamente. A continuacin poner alcuotas de 10 ml de cada solucin en matraz aforado de 50 ml. Rpidamente aadir a cada matraz 5 ml del reactivo de Metamolibdovanadato (19.3.4.), mezclar, enrasar y tapar. Dejar reposar al menos treinta minutos. Efectuar las lecturas de los patrones frente a la solucin 0,00 antes de una hora, a 400 nm. Representar grficamente concentraciones frente a absorbancias ledas. 19.4.2. Preparacin de la muestra. Tomar 25 ml de zumo de uva y obtener las cenizas segn mtodo oficial nmero 17. Disolver las cenizas en 10 ml de solucin de Acido Clorhdrico (19.3.5.) y evaporar en bao de agua. Disolver el residuo obtenido en 10 ml de solucin de Acido Clorhdrico (19.3.6.) calentar en bao mara y transferir a matraz de 100 ml, enfriar y enrasar con Agua PA-ACS. Agitar y filtrar para eliminar las materias insolubles presentes. 19.4.3. Determinacin. Tomar 10 ml de filtrado y continuar como en la curva de calibrado (19.4.1.). Si el contenido de P2O5 en las cenizas es superior a 3,5 mg, llevar a matraz aforado superior a 100 ml o efectuar diluciones hasta que el contenido de P2O5 en la alcuota sea menor a 0,35 mg. 19.5. Clculos. El contenido en mg de P2O5 en 100 ml de muestra se obtendr mediante la curva de calibrado, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas. Para expresar el resultado como mg de P en 100 ml de muestra, multiplicar el resultado anterior por 0,437. 19.6. Referencias. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14 edicin, 1984. 20. SULFATOS 20.1. Principio. Previa eliminacin del dixido de azufre por ebullicin, se precipitan los iones sulfato como Bario Sulfato, se calcina y se pesa. 20.2. Material y aparatos. 20.2.1. Matraz Erlenmeyer de 500 ml provisto de ampolla con llave de 100 ml y tubo de desprendimiento de vapor, atravesando ambos el tapn. El matraz se coloca sobre disco metlico de 15 cm de dimetro con abertura circular de 8 cm de dimetro. 20.2.2. Bao de agua y plancha caliente. 20.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 182108 Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV 131074 Agua PA-ACS 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO 20.3.1. Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV. 20.3.2. Bario Cloruro. 100 g de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en 1.000 ml de Agua PAACS. 20.3.3. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 20.4. Procedimiento. 20.4.1. Eliminacin del dixido de azufre del zumo de uva. Introducir en el Erlenmeyer del aparato descrito 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. Hervir esta solucin para eliminar el aire del aparato. Introducir 100 ml de zumo de uva por la ampolla de llave evitando que la ebullicin se pare durante esta adicin. Continuar la ebullicin hasta reducir el volumen del lquido a unos 100 ml eliminando todo el dixido de azufre. 20.4.2. Precipitacin de Bario Sulfato. Llevar el residuo de la evaporacin anterior a un vaso de 400 ml, enjuagando el matraz con la cantidad de Agua PA-ACS suficiente para llevar el volumen total a 200 ml. Aadir 5 ml de Acido Clorhdrico 2 mol/l (2N) SV y llevar a ebullicin. Adicionar gota a gota 10 ml de solucin de Bario Cloruro, con la precaucin de no parar la ebullicin y dejar reposar en caliente, colocando el vaso sobre placa a 60C durante cuatro horas y en bao de agua hirviendo durante dos horas. En el caso de pequeas cantidades de precipitado, se recomienda un segundo reposo en fro durante 12 horas. Filtrar por filtro sin cenizas, lavar el vaso y precipitado con Agua PAACS caliente hasta que no d reaccin con Plata Nitrato PA-ACS-ISO, llevar el filtro cuidadosamente plegado a crisol de porcelana tarado, desecar, calcinar y, despus de enfriar en un desecador, pesar. 20.5. Clculos. Calcular el contenido de sulfatos expresado en meq/l o en g/l de potasio sulfato con una aproximacin de 0,05 g/l. Sulfato = 85,68 P meq/l. Sulfato = 7,465 P g/l de potasio sulfato. P = peso de las cenizas en g. 20.6. Referencias. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V., A 14, 1-4. 1969.
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21. ANHIDRIDO SULFUROSO 21.1. Principio. Liberacin del sulfuroso libre por acidificacin del zumo de uva, arrastre por corriente de aire, oxidacin por borboteo en agua oxigenada neutra y valoracin con sosa del cido sulfrico formado. Liberacin por ebullicin moderada del sulfuroso combinado, que queda en el zumo de uva despus de la extraccin del sulfuroso libre y anlogo tratamiento que en la determinacin del sulfuroso libre. El sulfuroso total es la suma del sulfuroso libre y el sulfuroso combinado. Puede determinarse acidificando el zumo de uva y calentando y procediendo como en los dos casos anteriores. Este mtodo es aplicable para contenidos en anhdrido sulfuroso superiores a 10 mg/l. 21.2. Material y aparatos. Como en 28 (a).2. de Mtodos de Anlisis de Vinos pg. 59. 21.3. Reactivos. Como en 28 (a).3. de Mtodos de Anlisis de Vinos pg. 59. 21.4. Procedimiento. 21.4.1. Anlisis del anhdrido sulfuroso libre. En el matraz de 100 ml del aparato, poner 10 ml de zumo de uva y aadir 5 ml de Acido Fosfrico al 25%, colocando acto seguido el matraz en su sitio. Si la riqueza en SO2 del vino es pequea, se emplea el matraz de 250 ml y se ponen 20-25 ml de uva. Sumergir el matraz en un bao de agua a 10 C. Colocar 2-3 ml de Hidrgeno Perxido de 0,3 volmenes y dos gotas del reactivo indicador en el matraz B y neutralizar el Hidrgeno Perxido con Sodio Hidrxido 0,01N. Adaptar el matraz B al aparato y hacer borbotear aire (o, nitrgeno) durante 12-15 minutos. Retirar el matraz B y valorar el cido sulfrico formado con Sodio Hidrxido 0,01 N. 21.4.2. Anlisis de anhdrido sulfuroso combinado. Despus de terminar la valoracin del anhdrido sulfuroso libre, colocar en el matraz B, ya limpio, los 2-3 ml de Hidrgeno Perxido neutralizado y con las dos gotas del indicador. Calentar con llama pequea hasta llevar a la ebullicin el zumo de uva que qued en el matraz despus de la determinacin anterior. Aplicar el fuego directo sobre el fondo del matraz, que descansar sobre chapa metlica perforada con orificio de 30 mm de dimetro, para evitar la pirogenacin de los azcares del zumo de uva sobre las paredes del matraz. Mantener el paso del aire o nitrgeno durante la ebullicin que durar 12-15 minutos, tiempo que se considera suficiente para arrastrar todo el sulfuroso combinado y despus oxidarlo. Retirar el matraz B
y valorar el cido sulfrico formado con Sodio Hidrxido 0,01N. 21.4.3. Anhdrido sulfurososo total. Puede determinarse por la suma del anhdrido sulfuroso libre ms el anhdrido sulfuroso combinado, pero tambin puede determinarse directamente, actuando desde un principio con corriente de aire o nitrgeno y con calor. 21.5. Clculos. Calcular el contenido en anhdrido sulfuroso expresado en mg/l, con una aproximacin de 10 mg/l. 320 V1 Anhdrido sulfuroso = mg/l V2 Siendo: V1 = Volumen, en ml, de NaOH 0,01N gastados en la valoracin. V2 = Volumen, en ml, de muestra para el anlisis. 21.6. Referencias. 21.6.1. Paul, F. Mitteinlungen Klosternenberg, A : 8, 21, 1958. 21.6.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. O.I.V., A17, 1-8, 1969. 22. POTASIO 22.1. Principio. El potasio se determina por fotometra de llama previa adicin de litio cloruro, para evitar la ionizacin parcial de los metales en la llama. 22.2. Material y aparatos. 22.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 22.2.2. Material de uso normal en laboratorio. 22.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 141392 Litio Cloruro PRS 313190 Potasio solucin patrn K = 1,000 0,002 g/l AA 22.3.1. Potasio solucin patrn K = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,907 g de 131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO en un litro de Agua PA-ACS. 22.3.2. Solucin de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS. 22.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3; 5 y 7 mg/l preparadas a partir de la solucin de Potasio, previa adicin de la cantidad necesaria de Litio Cloruro PRS, para que el Litio se encuentre en una proporcin de aproximadamente 2.000 mg/l.
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22.4. Procedimiento. Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 200 ml con Agua PA-ACS (previa adicin de la cantidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuentre en una proporcin de aproximadamente 2.000 mg/l), leyndose en fotometra de llama frente a las soluciones de referencia a 766-770 nm. 22.5. Clculos. El contenido de potasio se calcula a partir del valor obtenido en el espectrofotmetro por comparacin con la curva patrn, teniendo en cuenta la dilucin efectuada. Los resultados se expresan en mg de Potasio/ 100 ml de la muestra. 22.6. Observaciones. Puede utilizarse una solucin de 40 g/l de cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en este caso la concentracin adecuada de cloruro de cesio en las disoluciones de la muestra y patrones entre 0,1-0,4%. 22.7. Referencias. 22.7.1. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits, Mtodo nm. 33. Ao 1984. 23. SODIO 24. ARSENICO 23.1. Principio. El Sodio se determina por fotometra de llama previa adicin de litio cloruro, para evitar la ionizacin parcial de los metales en la llama. 23.2. Material y aparatos. 23.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 23.2.2. Material de uso normal en laboratorio. 23.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 141392 Litio Cloruro PRS 313192 Sodio solucin patrn Na = 1,000 0,002 g/l AA 23.3.1. Sodio solucin patrn Na = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 2,542 g de 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO (NaCl) en un litro de Agua PA-ACS. 23.3.2. Solucin de Litio Cloruro: Disolver 37,3 g de Litio Cloruro PRS en 100 ml de Agua PA-ACS. 23.3.3. Soluciones de Potasio de 0; 1; 2; 3 y 5 mg/l preparadas a partir de la solucin de Sodio, previa adicin de la cantidad necesaria de Litio Cloruro PRS, para que el Litio se encuentre en una proporcin de aproximadamente 2.000 mg/l. 23.4. Procedimiento. Tomar 1 ml de la muestra y llevar a 100 ml (ver 23.6.2.) con Agua PA-ACS (previa adicin de la can24.1. Principio. La muestra se somete a una digestin cida con una mezcla de cido ntrico y sulfrico. La determinacin del arsnico se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica, con generador de hidruros. 24.2. Material y aparatos. 24.2.1. Material de uso normal en laboratorio. 24.2.2. Matraces Kjeldahl de 250 ml. 24.2.3. Espectrofotmetro de absorcin atmica equipado con sistema generador de hidruros. 24.2.4. Lmpara de descarga sin electrodos. 24.2.5. Fuente de alimentacin para lmpara de descarga sin electrodos. 24.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313171 Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 123314 Sodio Borohidruro PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO tidad necesaria de Litio Cloruro PRS para que el Litio se encuentre en una proporcin de aproximadamente 2.000 mg/l), leyndose en fotometra de llama frente a las soluciones de referencia a 589 nm. 23.5. Clculos. El contenido de sodio se calcula a partir del valor obtenido en el espectrofotmetro por comparacin con la curva patrn, teniendo en cuenta la dilucin efectuada. Los resultados se expresan en mg de sodio/l de la muestra. 23.6. Observaciones. 23.6.1. Puede utilizarse una solucin de 40 g/l de cloruro de cesio en lugar de cloruro de litio, siendo en este caso la concentracin adecuada de cloruro de cesio en las disoluciones de la muestra y patrones entre 0,1 y 0,4%. 23.6.2. Efectuar las diluciones necesarias para que la muestra est en el rango de la curva. 23.7. Referencias. 23.7.1. Federation International des Producteurs de Jus de Fruits, Mtodo nm. 33. Ao 1984. 23.7.2. Mtodos Associations of Official Analytical Chemist. Ed. 1984.
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24.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 24.3.2. Disolucin de Acido Clorhdrico al 32% v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 24.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico al 1,5%. Disolver 15 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml. 24.3.4. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 24.3.5. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 24.3.6. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1% (p/v): Pesar 1 g de Sodio Hidrxido lentejas PAACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 24.3.7. Disolucin de Sodio Borohidruro al 3% (p/v): Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo hasta 100 ml con la solucin de Sodio Hidrxido al 1%. 24.3.8. Disolucin de EDTA Sal Disdica 2-hidrato al 1%. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS. 24.3.9. Disolucin de Potasio Hidrxido al 20%. Pesar 23,5 g de Potasio Hidrxido 85% lentejas PAISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 24.3.10. Disolucin de Acido Sulfrico al 20% (v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO (24.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 24.3.11. Disolucin de Acido Sulfrico al 1% (v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 24.3.12. Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsnico III Oxido EQP en 2,5 ml de Potasio Hidrxido al 20% (24.3.9.), neutralizar con Acido Sulfrico al 20% (24.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfrico 1% (24.3.11.). 24.3.13. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin patrn de Arsnico (24.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 24.3.14. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (24.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 24.4. Procedimiento. 24.4.1. Preparacin de la muestra: En un matraz Kjeldahl, de 250 ml introducir 2 g de muestra con 20 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullicin hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la solucin resultante. 24.4.2. Preparacin de los patrones de trabajos y del blanco. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml
de la solucin de Arsnico (24.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solucin contiene 10 nanogramos de Arsnico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra. 24.4.3. Condiciones del espectrofotmetro: Encender la fuente de alimentacin de las lmparas de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para que se estabilice la energa de la lmpara. Encender el espectrofotmetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la celda a 900 C, esperando hasta que se alcanza dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del generador de hidruros segn las especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de argn de acuerdo con las caractersticas del aparato. 24.4.4. Determinacin: Las determinaciones de la concentracin de Arsnico se realizan por el mtodo de adicin de patrones, por medio de medidas duplicadas en el espectrofotmetro en las condiciones especificadas en (24.4.3.), aadiendo al matraz de reaccin 3 ml de la solucin (24.3.8.). Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de Arsnico. Lavar los matraces antes y despus de cada uso, con Acido Clorhdrico 1,5% (24.3.3.). Al construir la grfica de adicin hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las mismas condiciones anteriores, pero aadiendo 3 ml de la solucin blanco. En estas condiciones el lmite de deteccin de la tcnica es de 5 ng. 25. HIERRO 25.1. Principio. Determinacin del hierro por absorcin atmica previa mineralizacin de la muestra. 25.2. Material y aparatos. 25.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 25.2.2. Lmpara de hierro. 25.2.3. Los utilizados para el plomo en (26.2.3.), (26.2.4.) y (26.2.5.). 25.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313182 Hierro solucin patrn Fe = 1,000 0,002 g/l AA 25.3.1. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 25.3.2. Acido Ntrico al 1%. Diluir Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la concentracin indicada. 25.3.3. Acido Sulfrico 96% PA-ISO.
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25.3.4. Hierro solucin patrn Fe = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1g de 131365 Amonio Hierro III Sulfato 12-hidrato PA en 50 ml de la solucin de Acido Ntrico (1+1) y diluir hasta 1.000 ml con Acido Ntrico 1% (v/v). 25.4. Procedimiento. 25.4.1. Preparacin de la muestra. Como en (26.4.1.). 25.4.2. Curva de calibrado. A partir de la solucin patrn (25.3.4.), preparar una serie de soluciones conteniendo de 0,5 a 5,0 mg de hierro por litro, con Acido Ntrico al 1% (v/v). 25.4.3. Determinacin. Igual que para el Plomo. Efectuar las lecturas a 248,3 nm. 25.5. Clculos. Obtener el contenido de hierro de la muestra por interpolacin a partir de la curva de calibrado y teniendo en cuenta las diluciones efectuadas. 26. PLOMO 26.1. Principio Determinacin del plomo por absorcin atmica previa mineralizacin de la muestra. 26.2. Material y aparatos. 26.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 26.2.2. Lmpara de plomo. 26.2.3. Cpsulas de platino, cuarzo o similar. 26.2.4. Bao de arena o placa calefactora. 26.2.5. Horno elctrico (mufla) con dispositivo de control de temperatura. 26.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 26.3.1. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 26.3.2. Acido Ntrico al 1% en Agua PA-ACS. 26.3.3. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1000 ml con Acido Ntrico al 1%. 26.3.4. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 26.4 Procedimiento. 26.4.1. Preparacin de la muestra.- Poner 100 ml de la muestra en una cpsula de platino o cuarzo y llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena. Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el bao de arena. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450C. Transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el bao de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrn rojizo en stas, posiblemente de Fe 2O3 es aceptado y no requiere un posterior tratamiento. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS, una vez disueltas filtrar y recoger en un matraz de 10 ml, lavando la cpsula y el filtro con Agua PAACS hasta el enrase. 26.4.2. Curva patrn.- Diluir alcuotas apropiadas de la solucin patrn con Acido Ntrico al 1% para obtener una curva de concentraciones 2; 4; 6; 8 y 10 mg/l. 26.4.3. Determinacin.- Operar segn las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solucin est muy concentrada, diluirla con Acido Ntrico al 1%. 26.5. Clculos. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor dilucin. 26.6. Referencias. 26.6.1. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pg. 134 (I), 1976. 27. ESTAO 27.1. Principio. Determinacin de estao por absorcin atmica, previa digestin cida. 27.2. Materiales y aparatos. 27.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 27.2.2. Lmpara de estao. 27.2.3. Material de uso normal en laboratorios. 27.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 212236 Agua Desionizada QP 313180 Estao patrn Sn = 1,000 0,002 g/l AA 27.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 27.3.2. Solucin de Acido Clorhdrico 7N. Diluir Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PAACS hasta la concentracin deseada. 27.3.3. Agua Desionizada 27.3.4. Estao solucin patrn Sn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de
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141304 Estao metal, granalla PRS en 100 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO y diluir hasta 1.000 ml con Agua Desionizada. 27.4. Procedimiento. 27.4.1. Preparacin de la muestra.- Medir de 1 a 5 ml de la muestra directamente en un Erlenmeyer. Aadir 25 ml de solucin de Acido Clorhdrico 7N. Llevar a ebullicin y mantenerla a fuego lento durante cinco minutos. Enfriar y transferir cuantitativamente a un matraz de 50 ml, enrasando con Agua PAACS. Agitar y filtrar con papel Watman nmero 1. 27.4.2. Curva de calibrado.- A partir de la solucin patrn de Estao, preparar una serie de soluciones conteniendo 50; 100; 150 y 250 mg/l de Estao. 27.4.3. Determinacin.- Operar segn las especificaciones del aparato usando una llama reductora de xido nitroso-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 286 nm. 27.5. Clculos. Obtener el contenido de estao de la muestra por interpolacin a partir de la curva de calibrado.
con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones que contengan de 1 a 5 mg de Cobre. 28.4.3. Determinacin.- Igual que para el Plomo. Medir a 324,7 nm. 28.5 Clculo. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrn las concentraciones de Cobre de la muestra, teniendo en cuenta el factor de dilucin. 29. ZINC 29.1. Principio. Determinacin del zinc por absorcin atmica, previa mineralizacin de la muestra. 29.2. Material y aparatos. 29.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 29.2.2. Lmpara de zinc. 29.2.3. Los utilizados para el Plomo en (26.2.3.), (26.2.4.) y (26.2.5.). 29.3 Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA 29.3.1. Los utilizados para el Plomo en (26.3.1.), (26.3.2.) y (26.3.4.). 29.3.2. Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141783 Zinc metal, polvo PRS en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico diluido con Agua PA-ACS (1:1) y diluir a un litro con Acido Ntrico al 1% (v/v). 29.4. Procedimiento. 29.4.1. Preparacin de la muestra.- Como para el Plomo (26.4.1.). 29.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (29.3.2.), con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones de 0,5 a 1 mg/l. 29.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. La lectura se efectuar a 213,5 nm. 29.5 Clculo. Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentracin o dilucin.
28. COBRE 28.1. Principio Determinacin del cobre por absorcin atmica, previa mineralizacin de la muestra. 28.2. Material y aparatos. 28.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 28.2.2. Lmpara de cobre. 28.2.3. Los utilizados para el Plomo, en (26.2.3.), (26.2.4.) y (26.2.5.). 28.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313178 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 28.3.1. Los utilizados para el plomo en (26.3.1.), (26.3.2.) y (26.3.4.) 28.3.2. Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 1:1. Diluir despus a un litro con Acido Ntrico al 1%. 28.4 Procedimiento. 28.4.1. Preparacin de la muestra.- Como para el Plomo en (26.4.1.). 28.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn de Cobre
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Productos derivados de la uva: Vinagres
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1. EXTRACTO TOTAL 1.1. Principio. El extracto seco total se define como el conjunto de todas las sustancias que, en condiciones fsicas determinadas, no se volatilizan. En estas condiciones fsicas deben fijarse de tal manera que las sustancias componentes del extracto sufran el mnimo de alteracin. El mtodo est basado en una evaporacin del vinagre en bao de agua con secado posterior en estufa regulable a 100 - 105C. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Balanza con aproximacin de 0,001 g. 1.2.2. Estufa con ventilacin de aire regulable de 100 a 105C. 1.2.3. Desecador de vidrio con cido sulfrico concentrado o gel de slice (slice amorfa impregnada con sustancia reveladora) como sustancia desecadora. 1.2.4. Bao de agua. 1.2.5. Cpsulas de fondo plano de 5 cm de dimetro construidas en platino, nquel o cuarzo. 1.2.6. Pipetas aforadas de 10 ml con doble enrase. 1.3. Procedimiento. Agitar la muestra y filtrar a travs de un papel de filtro plegado (tipo jarabe). Medir 10 ml del vinagre filtrado en una cpsula previamente tarada. Evaporar en bao de agua hirviente durante 30 minutos y mantener en la estufa durante dos horas y media a 105C. Dejar secar la cpsula en el interior del desecador y, una vez fra, pesar en la balanza de precisin. 1.4. Clculo. El valor del extracto total del vinagre , en porcentaje, se hallar mediante la frmula siguiente: Extracto total: (M - m) 10 en la que: M = masa, en gramos, de la cpsula con el extracto seco. m = masa, en gramos, de la cpsula vaca. 1.5. Referencias. 1.5.1. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33.101. 1.5.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. 11a. ed., pgina 519, 30.061. 2. ACIDEZ TOTAL (Grado actico) 2.1. Principio. La acidez total se define como la totalidad de los cidos voltiles y fijos que contiene el vinagre expresada en gramos de cido actico por 100 ml de vinagre. La determinacin se efecta mediante una volumetra de neutralizacin en presencia de solucin alcohlica de fenolftalena como indicador. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Bureta de 50 ml graduada en dcimas de ml. 2.2.2. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase. 2.2.3. Matraces Erlenmeyer de 250 ml de capacidad. 2.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 181692 Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV 2.3.1. Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV. 2.3.2. Solucin indicadora de Fenolftalena. Se disuelven 10 g de Fenolftalena PA-ACS en Etanol 96% v/v PA y se completa a un litro con el mismo solvente. 2.4. Procedimiento. Medir 10 ml de vinagre, previamente filtrado, en un Erlenmeyer de 250 ml. Diluir con 100 o 150 ml de Agua PA-ACS recin hervida y fra hasta conseguir una solucin dbilmente coloreada. Aadir seis gotas de la solucin indicadora de Fenolftalena y agregar Sodio Hidrxido 0,5 mol/l (0,5N) SV contenido en la bureta gota a gota y agitando hasta viraje del indicador. 2.5. Clculo. El valor de la acidez total o grado actico del vinagre en porcentaje se hallar mediante la frmula siguiente: Acidez total o grado actico = a x 10 x 0,0300 en la que : a =volumen, en ml, de sodio hidrxido 0,5N. 2.6. Referencias. 2.6.1. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33.101. 2.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. 11a. ed , pgina 520, 30. 068. 3. ACIDEZ FIJA 3.1. Principio. La acidez fija se define como la totalidad de los cidos fijos que contiene el vinagre, expresada en gramos, de cido actico por 100 ml de vinagre.
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3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Bao de agua. 3.2.2. Bureta de 10 ml de capacidad graduada en dcimas de ml. 3.2.3. Pipeta aforada de 10 ml con doble enrase. 3.2.4. Cpsulas de 200 ml de capacidad. 3.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 181694 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 3.3.1. Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. 3.3.2. Disolucin indicadora de Fenolftalena PAACS al 1% en Etanol 96% v/v PA. 3.4. Procedimiento. Medir 10 ml de vinagre previamente filtrado y llevarlo a una cpsula de porcelana. Evaporar a sequedad en bao de agua. Aadir de 5 a 10 ml Agua PA-ACS recientemente hervida y volver a evaporar a sequedad, repitiendo esta operacin cinco veces ms. Aadir, aproximadamente, 180 ml de Agua PA-ACS recientemente hervida y fra, aadir seis gotas de la solucin indicadora de Fenolftalena y agregar Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV contenido en la bureta, gota a gota y agitando, hasta viraje del indicador. 3.5. Clculo. El valor de la acidez fija del vinagre, expresado en gramos de cido actico por 100 ml, se hallar mediante la frmula siguiente: Acidez fija = a x 10 x 0,00600 en la que: a = volumen, en ml de sodio hidrxido 0,1N. 3.6. Referencias. 3.6.1. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33.101. 3.6.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. 11a. ed., pgina 520, 30.069. 4. ACIDEZ VOLATIL 4.1. Principio. Se define convencionalmente como valor de la acidez voltil de un vinagre la diferencia entre los valores de su acidez total y fija, expresadas ambas en gramos de cido actico por 100 ml de vinagre. 4.2. Clculo. El valor de la acidez voltil del vinagre, expresado en gramos de cido actico por 100 ml, se hallar mediante la frmula siguiente:
At - Af = acidez voltil en la que : At = acidez total o grado actico, expresado en gramos de cido actico por 100 ml. Af = acidez fija de la misma muestra de vinagre, expresada en gramos de cido actico por 100 ml. 4.3. Referencias. 4.3.1. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33.101. 4.3.2. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. 11a. ed., pgina 520, 30.070. 5. SULFATOS 5.1. Principio. Precipitacin del bario sulfato en medio cido. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Vasos de precipitado de 250 ml. 5.2.2. Bao de agua. 5.2.3. Estufa. 5.2.4. Desecador. 5.3. Reactivos. 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 131074 Agua PA-ACS 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 171461 Plata Nitrato solucin 0,1% p/v RE 5.3.1. Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV. 5.3.2. Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO. 5.4. Procedimiento. A 100 ml de muestra en vaso de precipitado de 250 ml aadir 2 ml de Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV, calentar a ebullicin e ir aadiendo gota a gota 10 ml de Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO (1 g /100 ml de BaCl2.2H2O) sin que deje de hervir la solucin. Continuar hirviendo cinco minutos manteniendo el volumen constante, aadiendo Agua PAACS caliente siempre que sea necesario. Dejar en reposo hasta que el sobrenadante est claro (una noche es suficiente, aunque no conviene sobrepasar ese tiempo). Filtrar por papel sin cenizas de poro fino, lavar con Agua PA-ACS caliente hasta que no d reaccin con Plata Nitrato solucin 0,1% p/v RE las aguas del lavado, secar, calcinar, enfriar en desecador y pesar. 5.5. Clculo. La proporcin de sulfatos = 7,465 P g/l de K2SO4 siendo; P = peso, en g, del producto de la calcinacin. 5.6. Referencias. 5.6.1. A. O. A. C. Official Methods of Analysis. 11a. ed. (1970).
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5.6.2. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33-104-73. 6. ACETILMETILCARBINOL (ACETOINA) 6.1. Principio. Determinacin cuantitativa de la acetona por cromatografa de gases. 6.2. Material y aparatos. 6.2.1. Equipo de cromatografa de gases compuesto por: 6.2.1.1. Detector de ionizacin de llama. 6.2.1.2. Horno con temperatura regulable. 6.2.1.3. Registrador. 6.2.1.4. Gases: Aire-nitrgeno. 6.2.1.5. Columna: FFAP 2,5% sobre Chromosorb G (HP), aadindose un 0,5 de un reductor de colas (p. e., Carbowax 1.500) y de dimensiones 2 m de longitud y 1/8 de pulgada de dimetro externo de la columna. 6.2.2. Microjeringa de 1 a 10 l. 6.3. Reactivos. Acetona 131074 Agua PA-ACS 121884 1-Pentanol PA 121086 Etanol absoluto PA 142400 Calcio Hidrxido polvo 90% (USP) PRS-CODEX 6.3.1. Acetona. 6.3.2. 1-Pentanol PA. 6.3.3. Etanol absoluto PA. 6.3.4. Calcio Hidrxido polvo 90 % (USP) PRSCODEX. 6.4. Procedimiento. 6.4.1. Disolucin patrn. 6.4.1.1. De Acetona: A partir de Acetona purificada de su posible contenido en Diacetilo mediante destilacin, obtener soluciones de Acetona que cubran un rango de concentraciones de 10 a 500 mg/l en Agua PA-ACS. 6.4.1.2. De patrn interno: Aadir 2 ml de 1-Pentanol PA en 100 ml de Solucin Hidroalcohlica al 50%. 6.4.2. Determinacin. 6.4.2.1. Condiciones cromatogrficas. Gas portador: Nitrgeno (flujo de 12,5 mg/min.). Temperatura horno: 70 C. Temperatura inyector: 180 C. Inyeccin : 4 o 2 l. Patrn interno: 1-Pentanol PA. 6.4.2.2. Mtodo operatorio. A cada una de las soluciones patrn de Acetona preparadas en 6.4.1.1., aadir solucin de 1-Pentanol PA de tal forma que a las soluciones que contengan de 10 a 50 mg/l de Acetona se le aadan 15 l y a las que contengan de 50 a 500 mg/l se le aadan 35 l e inyectarlas a continuacin, obteniendo la curva de calibrado (se deben efectuar dos curvas de calibrado, una que cubra el rango de 0-50 mg/l de Acetona y otra de 50 a 300 mg/l). La inyeccin de la muestra puede efectuarse directamente del vinagre, una vez aadido el patrn interno, pero teniendo en cuenta que el tiempo de retencin es elevado y la concentracin del actico es muy grande, obliga a esperar un largo perodo de tiempo entre dos inyecciones sucesivas. Para evitar esta dificultad, deben neutralizarse a pH = 7 las muestras, preferiblemente con Calcio Hidrxido polvo, 90% (USP) PRS-CODEX para evitar variaciones de volumen. Tngase en cuenta que la concentracin de Acetona en el medio neutro puede variar con tiempo, por lo que la neutralizacin debe hacerse inmediatamente antes de inyectar en el cromatgrafo. 6.5. Clculo. Los cromatogramas obtenidos de las distintas soluciones patrn permiten representar grficamente la relacin existente entre el cociente: Area del pico de la acetona Area del pico del alcohol n-amlico La relacin de reas obtenida para la muestra se compara con la curva de calibrado (concentracin de acetona /relacin de reas ), obtenindose la cantidad de acetona de la muestra. 6.6. Referencia. 6.1.1. E. F. Gorostiza, M. L. Gil de la Pea y M. C. Gmez Cordobs. Instituto de Fermentaciones Industriales. 7. CENIZAS 7.1. Principio. Se denominan cenizas de un vinagre el conjunto de los productos de incineracin del residuo de evaporacin de un volumen conocido del vinagre, realizada de manera que se puedan obtener todos los cationes en forma de carbonatos y otras sales minerales anhidras. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Horno elctrico regulable. 7.2.2. Bao de agua y bao de arena. 7.2.3. Lmpara de infrarrojo. 7.2.4. Cpsula de platino o de cuarzo de 70 mm de dimetro y 25 mm de altura, fondo plano.
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7.3. Procedimiento. Colocar 20 ml de vinagre en una cpsula tarada en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con precaucin en bao de agua hasta consistencia siruposa, continuar el calentamiento sobre bao de arena con moderacin y durante una media hora. Es conveniente ayudar a la evaporacin con la aplicacin de rayos infrarrojos hasta carbonizacin. Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cpsula al horno elctrico a 525 25 C y con aireacin continua. Despus de cinco minutos de carbonizacin completa, sacar la cpsula del horno, dejar enfriar y aadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evaporan en bao de agua, y llevar de nuevo al horno a 525C. Si la combustin de las partes carbonosas no se consigue en 15 minutos, volver a comenzar la operacin de adicin de Agua PA-ACS, evaporacin y recalcinacin. Despus de enfriar en el desecador, pesar la cpsula con las cenizas. 7.4. Clculo. Calcular el contenido en cenizas expresado en g/l. Cenizas = 50 P g/l. P = peso, en g, de las cenizas contenidas en 20 ml de vinagre. Dar los resultados con una aproxinacin de 0,03 g/l. 7.5. Referencias. 7.5.1. Recueil des Mthodes Internationales d'Analyse des Vins. O. I. V., AGI, 1969. 7.5.2. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos, Ministerio de Agricultura, 1971, pg. 66. 8. INDICE DE OXIDACION 8.1. Principio. Oxidacin con potasio permanganato de las sustancias voltiles fcilmente oxidables de los vinagres. 8.2. Materiales y aparatos. 8.2.1. Matraz de destilacin de 250 ml de capacidad provisto de dispositivo de entrada de vapor de agua para destilacin por arrastre de vapor. 8.2.2. Matraz Erlenmeyer de 50 ml de capacidad provisto de boca esmerilada y tapn. 8.2.3. Matraz aforado de 50 ml de capacidad. 8.2.4. Refrigerante de serpentn de 25 cm de capacidad til. 8.2.5. Caldern generador de vapor. 8.2.6. Pipeta aforada con doble enrase de 10; 20; 25 y 50 ml de capacidad.
8.2.7. Bureta de 50 ml de capacidad graduada en dcimas de ml. 8.3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn Soluble RE 181528 Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 181722 Sodio Tiosulfato 1mol/l (1N) SV 8.3.1. Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV 8.3.2. Disolucin valorada de Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV. En un matraz aforado diluir a 1:1 Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,5N obtenida. 8.3.3. Disolucin de Potasio Yoduro PA-ISO al 50%. Ver 8.6.2. Disolver Potasio Yoduro PA-ISO en Agua PA-ACS y ajustar a la concentracin indicada. 8.3.4. Disolucin indicadora de Almidn. Disolver 5 g de Almidn soluble RE en 20 ml de Agua PA-ACS y se vierte en 1 ml de Agua PA-ACS hirviente. Se contina la ebullicin durante cinco minutos y se deja enfriar antes de su empleo. Conviene guardarla en frascos esterilizados. 8.3.5. Disolucin de Acido Sulfrico al 50% en volumen. Diluir Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 8.4. Procedimiento. Ajustar el vinagre a 4 g por 100 de acidez total, expresada en cido actico. Tomar 50 ml de vinagre, con la acidez debidamente ajustada, e introducir en el matraz de destilacin. Pasar a su travs una corriente de vapor de agua procedente del caldern descrito, a una velocidad regulada, de manera que cuando se hayan recogido 50 ml de destilado se conserven en el matraz de destilacin aproximadamente 45 ml. Comprobar que la temperatura del destilado no sobrepase 25C. Pasar los 50 ml del destilado al matraz Erlenmeyer de 500 ml. Aadir 10 ml de la solucin de Acido Sulfrico 96% PAACS y 25 ml Potasio Permanganato 0,2 mol/l (1N) SV. Mantener el matraz durante una hora en el bao de agua a 25C. Trascurrido ese tiempo, aadir 20 ml de la disolucin de Potasio Yoduro. Tapar el matraz y mezclar bien su contenido. Inmediatamente valorar el yodo liberado con la dilolucin de Sodio Tiosulfato 1 mol/l (1N) SV. Simultneamente, a la muestra de vinagre llevar, en las mismas condiciones, un blanco en que el destilado se sustituya por 50 ml de Agua PAACS. 8.5. Clculo. El valor del ndice de oxidacin de hallar mediante la frmula siguiente:
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a -b I = x grado actico del vinagre original 8 donde: I = ndice de oxidacin. a = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 mol/l (1N) SV consumido en la valoracin de la muestra en blanco. b = volumen, en ml, de sodio tiosulfato 1 moll (1N) SV consumido en la valoracin de la muestra de vinagre diluido. 8.6. Observaciones. 8.6.1. Si el ndice de oxidacin resulta mayor que 15, ha de repetirse la determinacin, usando 25 ml del vinagre ajustando a 4 grados acticos, aadiendo 25 ml de agua. Repetir esta reduccin a la mitad hasta que el ndice de oxidacin sea menor que 15. Calcular el ndice de oxidacin, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas. 8.6.2. Esta disolucin no se debe usar si presenta color amarillento. 8.7. Referencias. 8.7.1. Instituto de Racionalizacin del Trabajo. Una norma espaola 33-102-73. 8.7.2. Mtodos Oficiales de Anlisis de la Association of Official Agricultural Chemists de Estados Unidos (ed. 1970). 9. METANOL (Alcohol Metlico), METODO DEL ACIDO CROMOTROPICO 9.1. Principio. Como en 37.1 de los mtodos oficiales de anlisis de vinos. 9.2. Material y aparatos. Como en 37.2 de los mtodos oficiales de anlisis de vinos y matraz aforado de 25 ml. 9.3 Reactivos. 171024 Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato RE 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 131698 Sodio Disulfito PA-ACS 141717 Sodio Sulfito anhidro (BP, F. Eur.) PRS-CODEX 9.3.1. Como 37.3.1 de los mtodos oficiales de anlisis de vinos. 9.3.2. Idem. 9.3.3. Idem. 9.3.4. Etanol 96% v/v PA. 9.4. Procedimiento. Tomar 25 ml de vinagre, destilar en destilador simple y recoger 15 ml de destilado en matraz aforado de 25 ml sumergido en bao de hielo. Aadir el Etanol 96% v/v PA suficiente para que una vez enrasado a 25 ml con Agua PA-ACS la concentracin del Etanol 96% v/v PA sea del 5-6% (9.6.1.). Continuar como en 37.4. de los mtodos oficiales de anlisis de vinos. 9.5.Clculo. Como en 37.5 de los mtodos oficiales de anlisis de vinos. 9.6. Observaciones. 9.6.1. En vinagres normales suele ser suficiente aadir 1,5% de Etanol 96% v/v PA. 9.7. Referencia. 9.7.1. Association of Official Agricultural Chemists Official Methods of Analysis,1965, pgina 138. 10 (a). ACIDO TARTARICO (Mtodo cualitativo) 10 (a).1. Principio. Precipitacin del cido tartrico en forma de potasio bitartrato. 10 (a).2. Material y aparatos. 10 (a).2.1. Centrfuga. 10 (a).3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131494 Potasio Cloruro PA-ACS-ISO 121526 di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA 131729 Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO 10 (a).3.1. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. 10 (a).3.2. Solucin de Precipitacin. Disolver 300 g de Potasio Cloruro PA-ACS-ISO; 5,75 g de Potasio Sodio Tartrato 4-hidrato PA-ACS-ISO y 1,25 g de di-Potasio Oxalato 1-hidrato PA y enrasar a 1.000 ml con Agua PA-ACS. A baja temperatura la solucin deposita pequeos cristales, por lo que se debe calentar ligeramente antes de emplearse. 10 (a).3.3. Etanol 96% v/v PA. 10 (a).4. Procedimiento. Poner en un tubo de centrfuga 10 ml de vinagre,
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0,4 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO, 7,5 ml de la solucin de Precipitacin y 2 ml de Etanol 96% v/v PA. Agitar con una varilla de vidrio hasta que aparezca un enturbiamiento cristalino aproximadamente a los diez segundos. Mantener el tubo durante una hora a 8C aproximadamente. Al cabo de este tiempo agitar enrgicanente el contenido del tubo con una varilla de vidrio, con la precaucin de mezclar bien con la solucin que sobrenada. Dejar en reposo aproximadamente a 8C durante una hora. Transcurrido este tiempo centrifugar. 10 (a).5. Interpretacin de resultados. La aparicin de precipitado indica la presencia de cido tartrico en la muestra. 10 (a) .6. Referencia. 10 (a).6.1. Recueil des Mthodes Internationales d'Analyse des Vins. O. I. V. A-12-h.
10 (b). ACIDO TARTARICO (Mtodo cuantitativo) 10(b).1 Principio. Aislamiento del cido tartrico mediante columna de resinas cambiadoras de aniones y posterior valoracin colorimtrica. 10(b).2. Material y aparatos. 10(b).2.1. Resinas aninicas de basicidad fuerte (III Merck o equivalente). Las resinas deben de encontrarse en forma de acetato. Para ello deben estar al menos veinticuatro horas en contacto con una solucin de cido actico al 30 %. 10(b).2.2. Columnas de vidrio de 10-11 mm de dimetro y 30 cm de longitud con llave en la parte inferior. 10(b).3. Reactivos. 131008 Acido Acetico glacial PA-ACS-ISO 181061 Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV 181059 Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N)SV 182105 Acido Sulfrico 1mol/l (2N) SV 131066 Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 122352 Amonio meta-Vanadato PA 141339 Glicerina (USP,BP,F. Eur.) PRS-CODEX 211376 Lana de Vidrio, lavada QP Resina Lewatit MP 600 (aninica fuerte I) 131633 Sodio Acetato anhidro PA-ACS 181691 Sodio Hidrxido 1mol/l 1N SV 121700 Sodio meta-Peryodato PA 121716 Sodio Sulfato anhidro PA 10(b).3.1. Acido Actico al 30 % (v/v).- Introducir 300 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO en un matraz aforado y completar a 1.000 ml con Agua PA-ACS.
10(b).3.2. Acido Actico al 0,5 % (v/v).- Introducir 5 ml de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO en un matraz aforado y completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS 10(b).3.3. Solucin de Sodio Sulfato al 7,1 % (0,5N).- Disolver 71 g de Sodio Sulfato anhidro PA y completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS. 10(b).3.4. Reactivo Vandico.- Disolver 10 g de Amonio meta-Vanadato PA en 150 ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. Pasar esta solucin a un matraz aforado de 500 ml, aadir seguidamente 200 ml de una solucin de Sodio Acetato anhidro PA diluido al 27 % en Agua PA-ACS y llevar luego a 500 ml con Agua PA-ACS. 10(b).3.5. Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV. 10(b).3.6. Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV. 10(b).3.7. Solucin de Acido Perydico 0,1N (0,05M).- Introducir 10,696 g de Sodio meta-Peryodato PA en un matraz aforado de 1.000 ml, aadir 50 ml de Acido Sulfrico 0,5 mol/l (1N) SV y completar hasta 1.000 ml con Agua PA-ACS. 10(b).3.8. Solucin de Glicerina al 10 %.- Pesar 10 g de Glicerina (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX, bidestilada y llevarla a 100 ml con Agua PA-ACS. 10(b).3.9. Solucin de Acido Tartrico de 1 g por l.- En un matraz aforado de 500 ml disolver 500 mg de Acido L(+)-Tartrico PA-ACS-ISO en 6,6 ml de Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV y enrasar con solucin de Sodio Sulfato al 7,1% a 500 ml. 10(b).4. Procedimiento. 10(b).4.1. Preparacin de las columnas de resinas aninicas. Colocar en el fondo de la columna [10(b).2.2.] Lana de Vidrio lavada QP formando tapn de 2-3 mm de altura, aproximadamente, y aadir Agua PA-ACS hasta una altura de unos 5 mm sobre el tapn de Lana de Vidrio lavada QP. Aadir la Resina Lewatit MP 600 aninica (*) conservada en Acido Actico al 30 %, agitar esta suspensin y agregar rpidamente un volumen de unos 10 ml, evitando la formacin de burbujas de aire, depositando en la superficie un tapn de Lana de Vidrio lavada QP, que se conduce con una varilla de vidrio con el fin de no remover las resinas en los sucesivos lavados anteriores en su superficie. Las resinas solamente pueden servir para una sola vez. 10(b).4.2. Aislamiento del Acido Trtarico.- Abrir la llave inferior de la columna y dar salida al Acido Actico diluido hasta unos 2-3 ml por encima del tapn superior de Lana de Vidrio lavada QP. Aadir seguidamente unos 10 ml de Acido Actico al 0,5% y vaciar hasta igual altura; efectuar estos lavados cuatro veces. Despus del ltimo lavado y con la llave cerrada, adicionar 10 ml de vinagre a analizar y sealar la altura alcanzada con un lpiz graso, abrir a continuacin la llave y dejar salir vinagre goteando a razn de 1-1,5 gotas por segundo (25-30 ml por minuto) hasta un poco por encima del tapn supe-
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rior de Lana de Vidrio lavada QP. Llenar de nuevo la columna con Acido Actico al 0,5 % hasta la seal del lpiz graso y dejar salir a la misma velocidad que la vez anterior y lavar despus en la misma forma siete veces con 10 ml de Agua PA-ACS. Al terminar el ltimo lavado, cerrar la llave cuando el nivel del lquido se encuentre un poco ms arriba del tapn superior de Lana de Vidrio lavada QP. Colocar un matraz receptor aforado de 100 ml. Eluir los cidos fijados en el cambiador de aniones, mediante adiciones de solucin de Sodio Sulfato [10(b).3.3.] hasta la seal trazada en el tubo. Para hacer esta operacin resulta prctico colocar un frasco con solucin de Sulfato unido por el cuello a la columna mediante un manguito de caucho y con unas pinzas para regular la cada del lquido en la bureta o tubo. Puestos as en comunicacin los dos aparatos (frasco y bureta o tubo), abrir las pinzas del caucho de unin y la llave inferior, dejando caer el lquido a la bureta unos 10 cm de altura y sin que queden huecos vacos. Regular la salida del lquido en la proporcin de 2-3 gotas por segundo, para llenar el matraz receptor hasta el enrase. 10(b).4.3. Determinacin del cido Tartrico.- En dos matraces cnicos de 100 ml (A) y (B) introducir 20 ml del eluido. El matraz (A) sirve para la medida y el matraz (B), en el cual el Acido Tartrico es destruido por el Acido Perydico, constituye el testigo. Aadir al matraz (A) 2 ml de Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Sulfrico 0,05 mol/l (0,1N) SV y 1 ml de Glicerina (USP,BP,F.Eur) PRS-CODEX al 10%. En el matraz (B), aadir 2 ml de Acido Sulfrico 1 mol/l (2N) SV, 5 ml de Acido Perydico 0,1N, esperar quince minutos y aadir 1 ml de Glicerina al 10 % para destruir el exceso de Acido Perydico. Esperar dos minutos. Verter a continuacin, agitando, primero en el matraz (B) e inmediatamente despus en el matraz (A), 5 ml del Reactivo Vandico. Disparar inmediatamente un cronmetro e introducir el contenido de dichos matraces en las cubetas de caras paralelas de 10 mm de espesor del espectrofotmetro. Al cabo de un minuto y treinta segundos medir la densidad ptica a 490 nm del lquido procedente del matraz (A) (medida) despus de haber reglado el aparato para obtener la transmisin al 100 % con la cubeta conteniendo el lquido testigo (B). 10(b).5. Clculo 10(b).5.1. Preparacin de la curva patrn.Tomar 10; 20; 30; 40 y 50 ml de la solucin 10(b).3.9. e introducir cada alcuota en un matraz aforado de 100 ml. Enrasar con solucin de sodio sulfato al 7,1%. Las diferentes diluciones corresponden a eluidos del vinagre conteniendo 1; 2; 3; 4 y 5 g de cido tartrico por litro. En dos matraces (A) y (B) de 100 ml poner 20 ml de cada una de estas soluciones y tratarlas idnticamente igual a los eluidos del vinagre anteriormente descrito. La representacin grfica de las densidades pticas de estas soluciones est en funcin de la cantidad de cido tartrico. Para ello es recomendable y ms preciso partir de concentraciones 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 y 1 g/l de cido tartrico. 10(b).5.2. Comprobar los valores obtenidos en el ensayo con los correspondientes de la curva patrn. 10(b).6. Referencia. 10(b).6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. A12h. (*). En el original indica Resina cambiadora de aniones, entendemos que es apropiada la Resina Lewatit MP 600 aninica fuerte I. 11. COBRE 11.1. Principio. Determinacin directa por espectrofotometra de absorcin atmica. 11.2. Material y aparatos. Espectrofotmetro de absorcin atmica, con lmpara especfica de cobre. 11.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 313178 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 + 0002 g/l AA 11.3.1 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0002 g/l AA o preparar disolviendo 1000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (1 + 1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO previamente diluido al 1 % (v/v) con Agua PA-ACS. 11.3.2. Soluciones que contengan de 1 a 10 mg/l de Cobre.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn con Acido Actico al 5 % en Agua PA-ACS. 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Calibrado del aparato.- Ajustar el aparato a una longitud de onda de 324,7 nm en condiciones tales que se obtenga una respuesta lineal al introducirse las series de patrones preparados. 11.4.2. Determinacin.- Efectuar la lectura directa de la absorbancia. 11.5. Interpretacin de los resultados. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos, hallar mediante la curva de patrn las concentraciones de cobre de la muestra.
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11.6. Referencias. 11.6.1 G. Charlot et D. Bezier: Analyse quantitative minerale. El Masson, Pars (1955), 749-752. 11.6.2. H.E. Parker: Atomic Absorption Newsletter (1963), 13 11.6.3. Standart Conditions for Zn and Cu. Analytical Methods for atomic absorbtion spectrophotometry Perkin-Elmer. 11.6.4. F. Rousselet: Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin. Ed. Paris (1968), pgs 59-144. 12. CLORUROS 12.1. Principio. Determinacin directa de cloruros por potenciometra utilizando el electrodo Ag/AgCl. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. pH-metro con escala que permita apreciar 2 mV. 12.2.2. Agitador magntico. 12.2.3. Electrodo Ag/AgCl con una solucin saturada de potasio nitrato como electrolito. 12.2.4. Microbureta graduada en 1/100 de ml. 12.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131459 Plata Nitrato PA-ACS-ISO Potasio Cloruro (mx. 0,005% de Br) 12.3.1. Solucin patrn de Cloruros.- Disolver 2,1027 g de Potasio Cloruro (mx. 0,005% de bromo), para anlisis, previamente desecado en Agua PA-ACS hasta 1 litro; 1 ml de esta solucin contiene 1 mg de ion Cloro. 12.3.2. Solucin de Plata Nitrato.- Disolver 4,7912 g de Plata Nitrato PA-ACS-ISO en Etanol al 10% (v/v) hasta un litro. Diluir Etanol 96% v/v PA con Agua PA-ACS. 1 ml de esta solucin corresponde a 1 mg de ion Cloro. 12.3.3. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 12.4. Procedimiento. 12.4.1. Determinacin del potencial del punto de equivalencia.- Introducir 5,0 ml de la solucin patrn de Cloruros en un vaso de 150 ml. Diluir aproximadamente a 100 ml con Agua PA-ACS y acidificar con 1,0 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACSISO (12.3.3.). Introducir los electrodos. Aadir la solucin de Plata Nitrato agitando moderadamente. Los cuatro primeros ml se adicionan en fracciones de 1 ml y se leen las correspondientes lecturas en milivoltios; los dos siguientes ml, en fracciones de 0,2 ml y se contina adicionando en fracciones de 1 ml hasta que se hayan alcanzado un total de
10 ml. Despus de cada adicin se debe esperar unos treinta segundos antes de hacer la correspondiente lectura en minivoltios. Los valores as obtenidos se llevan sobre un papel milimetrado en funcin de los correspondientes ml de solucin de Plata Nitrato, y a partir del punto singular de la curva obtenida, determinar el potencial del punto de equivalencia. Para comprobar el potencial del punto de equivalencia, llevar a un vaso de 150 ml, 5,0 ml de la solucin patrn de Cloruros, 95 ml de Agua PAACS y 1 ml de Acido Ntrico 70 % PA-ACS-ISO. Introducir el electrodo y valorar agitando, justamente hasta el potencial del punto de equivalencia. Repetir esta operacin hasta obtener una buena concordancia con los resultados. Este control debe efectuarse antes de determinar la concentracin de cloruros en cada serie de muestras a analizar. 12.4.2. Determinacin.- Llevar a un vaso de 150 ml, 50,0 ml de vinagre. Aadir 50 ml de Agua PA-ACS y 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. Valorar a continuacin, siguiendo el procedimiento descrito anteriormente, hasta alcanzar el potencial del punto de equivalencia. 12.5. Clculo. La cantidad de cloruros se determina mediante las expresiones: 0,02 n en gramos de ion cloro. 0,5633 n en miliequivalentes por litro de ion cloro. 0,0329 n en gramos de sodio cloruro por litro. Siendo: n = volumen en ml de solucin de plata nitrato necesario para alcanzar el potencial del punto de equivalencia. 12.6. Referencia. 12.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyse des Vins. OIV A-15j. 13. GRADO ALCOHOLICO 13.1. Principio. Separacin del alcohol por destilacin, oxidacin del mismo por potasio dicromato y determinacin del contenido por valoracin del exceso de dicromato. 13.2. Material y aparatos. Como en los apartados 5(a).2.1; 5(a).2.1.1; 5(a).2.1.2; 5(a).2.1.3 y 5(a).2.1.4 de los Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. 13.3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO
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131074 Agua PA-ACS 131368 Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato PA-ISO 211229 Calcio Hidrxido natural, polvo QP 171321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS 131362 Hierro II Sulfato 7-hidrato PA-ACS-ISO 131500 Potasio Dicromato PA-ISO 131527 Potasio Permanganato PA-ACS-ISO 13.3.1. Solucin de Potasio Dicromato.- Disolver 33,608 g de Potasio Dicromato PA-ISO en una cantidad suficiente de Agua PA-ACS y completar hasta un litro a 20 C. Esta solucin corresponde al grado alcohlico internacional O.I.V. 1 ml de esta solucin oxida 7,8934 mg de alcohol. 13.3.2. Solucin de Amonio Hierro II Sulfato.Disolver 135 g de Amonio Hierro II Sulfato 6-hidrato PA-ISO y 20 ml de Acido Sulfrico 96 % PA-ISO en una cantidad de Agua PA-ACS suficiente y completar hasta 1 litro, un volumen de esta solucin corresponde a medio volumen de solucin de Potasio Dicromato cuando est recientemente preparada. Esta solucin se oxida lentamente, por lo que debe ser valorada frecuentemente en la misma que se realiza la determinacin del alcohol, sustituyendo la disolucin alcohlica por Agua PA-ACS. 13.3.3. Solucin de Potasio Permanganato.Disolver 1,088 g de Potasio Permanganato PAACS-ISO en una cantidad suficiente de Agua PAACS y completar hasta 1 litro. 13.3.4. Solucin de Acido Sulfrico diluido.- A 500 ml de Agua PA-ACS aadir, poco a poco y agitando, 500 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. Despus de enfriado, completar hasta 1 litro con Agua PA-ACS. 13.3.5. Reactivo de Hierro II orto-Fenantrolina.Disolver 0,695 g de Hierro II Sulfato 7-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS, aadir 1,485 g de 1,10-Fernantrolina 1-hidrato RE-ACS. Calentar para favorecer la disolucin. 13.3.6. Lechada de cal 4N.- Desler en la concentracin conveniente, Calcio Hidrxido natural, polvo QP con Agua PA-ACS. 13.4 Procedimiento. 13.4.1. Destilacin.- Medir 200 ml de vinagre en matraz aforado y anotar la temperatura. Introducir el vinagre en el matraz de destilacin que contenga unos fragmentos de material poroso. Lavar el matraz cuatro veces con 5 ml de Agua PA-ACS. Alcalinizar con un ligero exceso de Lechada de cal 4N. Recoger el destilado en el matraz aforado de 100 ml. Enrasar con Agua PA-ACS a la misma temperatura que se midi el vinagre inicialmente. 13.4.2. En un matraz Erlenmeyer, con tapn esmerillado, de 250 ml, poner 20 ml de solucin valorada en Potasio Dicromato, 20 ml de Acido Sulfrico diluido y agitar. Aadir 10 ml de destilado exactamente medidos. Tapar el Erlenmeyer, agitar y esperar por lo menos treinta minutos, agitando de vez en cuando. 13.4.3. Valoracin.- Valorar el exceso de Dicromato con la solucin de Amonio Hierro II Sulfato. Cuando la coloracin verde de la solucin vire a verde azulado, aadir cuatro gotas de reactivo de 1,10-Fenantrolina. Detener la adicin de solucin de Amonio Hierro II cuando el lquido vire a marrn. A menudo se puede llegar a pasar el viraje, siendo entonces necesario volver al punto preciso adicionando solucin de Potasio Permanganato. Un dcimo del volumen empleado de esta solucin se resta del volumen de empleado de Hierro II Sulfato. Hacer una prueba en blanco sustituyendo los 10 ml de destilado por Agua PA-ACS. 13.5. Clculo. n - n Grado alcohlico = n Siendo: n = volumen, en ml, gastados en la valoracin. n = volumen, en ml, gastados en la prueba en blanco. 13.6. Observaciones. Si el grado alcohlico del vinagre es superior a 0,8, repetir la oxidacin utilizando 10 ml de destilado diluido a 1/2. 13.7. Referencia. 13.7.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des vins. O. I. V. A-2-16. 14. ARSENICO 14.1. Principio. Reduccin del arsnico a arsenamina gaseosa que reacciona con plata dietilditiocarbamato (disuelto en piridina), dando un complejo de color rojo. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Aparato Quickfit (figura I) 14.2.2. Espectrofotmetro o colormetro que permita lecturas a 538 nm. 14.3. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfurico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS Arsnico 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 131303 Estao II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 131457 Piridina PA-ACS
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Figura 14.1
122382 Plata Dietilditiocarbamato PA 131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO Zinc metal, granulado, exento de Arsnico. 14.3.1. Solucin de Plata Dietilditiocarbamato PA.- Disolver 1.000 g de este reactivo en 200 ml de Piridina PA-ACS. Esta solucin puede conservarse algunas semanas. 14.3.2. Plomo II Acetato en algodn.- Impregnar el algodn hidrfilo en solucin acuosa de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO al 10%, escurrir el lquido en exceso y desecar al vaco. 14.3.3. Solucin acuosa de Potasio Yoduro PAISO al 15%. 14.3.4. Solucin acuosa de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO al 2% 14.3.5. Solucin de Estao Cloruro.- Disolver 0,33 g de Estao II Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en 100 cc de Acido Clorhdrico al 32% (d=1,16). Diluir Acido Clorhdrico 35 % PA-ISO con Agua PAACS. 14.3.6. Zinc metal granulado, exento de Arsnico. 14.3.7. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 14.3.8. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 14.3.9. Solucin de 100 mg/l de Arsnico.
14.4. Procedimiento. 14.4.1. Preparacin de la muestra.- En un matraz Kjeldahl de 500 ml, introducir 100 ml de vinagre con 100 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO, para evitar las prdidas de As. Llevar a ebullicin hasta reducir el volumen a 10 ml, aadir 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y continuar la ebullicin adicionando Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO gota a gota hasta la total decoloracin. Despus de la expulsin de los vapores nitrosos dejar enfriar, diluir con 10 ml de Agua PA-ACS y calentar hasta casi sequedad. Una vez fro el matraz, trasvasar el residuo al matraz de valoracin utilizando 40 ml de Agua PA-ACS. 14.4.2. Valoracin.- Poner en el tubo en U, 3 ml de la solucin de Plata Dietilditiocarbamato. Colocar en la parte superior del tubo intermedio del aparato el algodn impregnado en Plomo II Acetato al 10 % con objeto de retener el sulfhdrico y la fosfamina que puedan desprenderse al mismo tiempo que la arsenamina. Introducir la muestra preparada en el Erlenmeyer de 100 ml del aparato descrito y aadir sucesivamente 10 ml de la solucin de Estao II Cloruro, 5 ml de la solucin de Potasio Yoduro y 1 ml de la solucin de Cobre II Sulfato. Despus de quine minutos aadir 5 g de Zinc granulado y cerrar rpidamente el aparato. Colocarlo en la oscuridad y dejar pasar vapores por lo menos durante una hora. 14.4.3. Preparacin de la curva de patrn.- A partir de una solucin 14.3.9, preparar soluciones que contengan 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11; 12 mg de Arsnico por litro. 14.5. Clculo. Calcular el contenido en arsnico utilizando la correspondiente curva patrn. 14.6. Observaciones. 14.6.1. Interfiere en la determinacin el antimonio cuyo complejo absorbe a 510 nm. 14.6.2. La Ley de Lambert-Beer se cumple entre las concentraciones de 0 y 15 microgramos de As. 14.6.3. Este mtodo tiene un lmite de deteccin de 0,2 microgramos. 14.7. Referencias. 14.7.1. Vasak, V y Sedivec, V (1952) Chem. Listy 46, 341, citado por M.D. Garrido, M.L. Gil y C. Llaguno. An. Bromatologa XXVI-2 (1974), 167-176. 14.7.2. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. O. I. V. A-34f. 15. ZINC 15.1. Principio. Determinacin directa por espectrofotometra de absorcin atmica.
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15.2. Material y aparatos. 15.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 15.2.2. Lmpara de zinc. 15.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 131036 Acido Ntrico 60% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 + 0,002 g/l AA 15.3.1. Zinc solucin patrn Zinc = 1,000 + 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de zinc puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 60% PA-ISO (1+1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico al 1% (v/v) (diluir Acido Ntrico 60% PA-ISO con Agua PA-ACS). 15.4. Procedimiento. 15.4.1. Preparacin de la muestra.- No se necesita preparacin especial. En caso de elevada concentracin, realizar una o varias diluciones hasta quedar dentro del rango de medida. 15.4.2. Determinacin.- Diluir partes alcuotas de la solucin (15.3.1.) con Acido Actico al 5% (diluir Acido actico glacial PA-ACS-ISO con Agua PAACS) para obtener soluciones de 0, 0,5, 1, 1,5 y 2 ppm. Aspirar las soluciones patrn y a continuacin la muestra, anotando las absorbancias obtenidas a 213,8 nm. 15.5. Interpretacin de resultados. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos, hallar las concentraciones de zinc de la muestra. 15.6. Referencias. 15.6.1. H. E. Parker, Atomic Absorptions Newsletter (1963), 13. 15.6.2. Standart conditions for Zn and Cu. Analytical Methods for atomic absorption spectrophotometry Perkin-Elmer. 16. PROLINA 16.1. Principio. Determinacin cuantitativa de la prolina por reaccin con ninhidrina en medio cido. 16.2. Material y aparatos. 16.2.1. Tubos de ensayo con tapn de rosca. 16.2.2. Espectrofotmetro o colormetro que permita efectuar lecturas a 517 nm. 16.3. Reactivos. 131030 Acido Frmico 98% PA-ACS 131074 Agua PA-ACS 141897 Eter mono-Metlico del Etilenglicol PRS 132362 Ninhidrina PA-ACS 131090 2-Propanol PA-ACS-ISO 16.3.1. Ninhidrina al 3% en Eter mono-Metlico del Etilenglicol PRS. 16.3.2. Acido Frmico 98% PA-ACS. 16.3.3. 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS 1:1 (v/v) 16.4. Procedimiento. Diluir la muestra hasta que contenga de 0,05 a 0,5 milimoles/ml de prolina. Tomar 1/2 ml de muestra diluida e introducirla en un tubo de ensayo con tapn de rosca, aadir 0,25 ml de Acido Frmico 98% PA-ACS y 1 ml de solucin de Ninhidrina al 3%. Cerrar hermticamente el tubo e introducirlo en un bao de agua hirviendo durante catorce o quince minutos. Enfriarlo a unos 200C de cinco a diez minutos, aadiendo mientras se enfra 5 ml de solucin de 2-Propanol PA-ACS-ISO - Agua PA-ACS 1:1 (v/v). A continuacin efectuar la lectura de la absorcin a 517 nm despus de cinco minutos y antes de treinta minutos. Efectuar un blanco siguiendo el procedimiento anterior, pero usando 0,5 ml de Agua PA-ACS en vez de la solucin problema. 16.5. Interpretacin de resultados. Calcular el contenido en prolina por comparacin con una curva patrn que comprenda concentraciones entre 0,05 y 0,50 milimoles/ml. 16.6. Referencia. 16.6.1. C.S.Ough J. of Food Science 34 (3), pg. 228 (1969). 17. ACIDO ACETICO DE SINTESIS 17.1. Principio. Separacin del cido actico mediante extraccin con ter iso-proplico y medida de su contenido en C14 mediante espectrofotometra de centelleo lquido. 17.2. Material y aparatos. 17.2.1. Pipeta automtica de 100 l. 17.2.2. Pipeta aforada de 10 ml. 17.2.3. Viales para conteo, de vidrio con bajo contenido en potasio, dotados de un sistema de cierre de material plstico para evitar el ataque del cido actico. 17.2.4. Extractor lquido-lquido en continuo, con capacidad para 2 litros de muestra y 3,5 litros de disolvente orgnico. 17.2.5. Columna rectificadora de 1 cm de longitud y 3 cm de dimetro interno, rellena de anillos
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rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerrada al vaco. 17.2.6. Columna de destilacin fraccionada de 40 cm de longitud y 3 cm de dimetro interno, rellena de anillos rasching (0,7 x 0,4 cm) con camisa aislante cerrada al vaco y llave de salida a los 20 cm. 17.2.7. Espectrofotmetro de centelleo lquido. 17.3. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO Butil-PBD. 131314 Eter Di-iso-Proplico estabilizado con ~50 ppm de BHT PA-ACS Tolueno marcado con C14 17.3.1. Eter Di-iso-Proplico estabilizado con ~ 50 ppm de BHT PA-ACS. 17.3.2. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. 17.3.3. Tolueno marcado con C14. 17.3.4. Solucin de 8 g/l de Butil-PBD en Tolueno para centelleo. 17.4. Procedimiento. 17.4.1. Extraccin y purificacin del cido actico.- Extraer 2 litros de vinagre de 5 grados acticos (o la cantidad correspondiente si se trata de vinagres de otra graduacin) en continuo con 3,5 litros de Eter Di-iso-Proplico estabilizado con ~ 50 ppm de BHT PA-ACS durante 24 horas al menos con lo que se obtiene un extracto que debe contener aproximadamente el 70% de cido actico presente en el vinagre. Eliminar el disolvente por destilacin en la columna 17.2.5. y rectificar el residuo en la columna 17.2.5. Recoger, por la salida situada en el centro de la columna, la fraccin que destila a 114 despreciando las primeras gotas de destilado. El destilado debe tener una riqueza de cido actico mayor del 95% en peso. 17.4.2. Medidas espectrofotomtricas. 17.4.2.1. Fondo: En un vial se introducen 10,5 g de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO y 10 ml del lquido del centelleo (17.3.4.). 17.4.2.2. Muestra problema: Introducir, en los viales de conteo, 10,5 g de cada destilado y 10 ml de lquido de centelleo (17.3.4.) Preparar al menos 2 viales por cada muestra problema y uno para el fondo de Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. Cada vial se lee 300 minutos como mnimo. Una vez efectuado el conteo aadir a cada vial un volumen de patrn interno (17.3.3.) que d aproximadamente 40.000 dpm y contar durante 4 minutos. 17.5. Clculo. Actividad especfica (dpm C14/g de C) = A1 - A2 siendo:
cpm(M) A1 = 0,4 x E1 x g x e cpm(F) A2 = 0,4 x E2 x g x c cpm (M+P) - cpm(M) E1 (Eficacia de la muestra) = dpm (P) cpm (F+P) - cpm(F) E2 (Eficacia del fondo ) = dpm (P) g= gramos de la muestra o fondo en el vial. c= gramos de cido actico por gramo de muestra o de fondo. cpm (M+P) = cuentas por minuto de la muestra ms el patrn. cpm (F+P) = cuentas por minuto del fondo ms el patrn. cpm (M) = cuentas por minuto de la muestra. cpm (F) = cuentas por minuto del fondo. dpm (P) = desintegraciones por minuto del patrn.
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Productos Derivados de la Uva: Orujo, Heces y Las.
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METODOS DE ANALISIS 1. CONTENIDO ALCOHOLICO EN ORUJOS, HECES Y LIAS. 1.1. Principio. Se determina por destilacin de la muestra alcalinizada y medida del contenido alcohlico por alcohometra. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Aparato de destilacin.- Consta de las siguientes partes: 1.2.1.1. Matraz de destilacin de 1.000 ml con rodaje esmerilado. Se puede utilizar de boca ancha o de boca estrecha. 1.2.1.2. Columna de rectificacin de 20 cm de largo. 1.2.1.3. Disco metlico o de amianto con un orificio de 8 cm de dimetro. 1.2.1.4. Refrigerante de West de 40 cm de longitud con circulacin rpida de agua. 1.2.2. Equipo de medida. 1.2.2.1. Alcohmetros. 1.2.2.2. Termmetros.- Graduados en grados y dcimas de grado y comprendiendo el intervalo de 0 a 30. 1.2.2.3. Probeta cilndrica de 36 mm de dimetro y 320 mm de altura. 1.2.3. Granatorio. 1.2.4. Matraz aforado de 200 ml. 1.2.5. Vaso de precipitados. 1.3. Reactivos. 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 211234 Calcio Oxido natural, escoriforme QP 171748 Tornasol tintura RE 1.3.1. Lechada de Cal. Solucin de 120 g de Calcio Oxido natural, escoriforme QP en 1.000 ml de Agua PA-ACS. 1.3.2. Acido Sulfrico al 10%. Diluir Acido Sulfrico al 96% PA-ISO con Agua PA-ACS. 1.4. Procedimiento. El producto a analizar es vertido en un vaso de precipitados donde es agitado para su homogeneizacin y al mismo tiempo para favorecer la expulsin de CO2 que pueda contener. En el caso de orujos, el muestreo se realiza de forma que la muestra sea lo ms homognea posible. Pesar 200 g de muestra homogeneizada y vaciar en el matraz de destilacin, aadiendo 200 ml de Agua PA-ACS, parte de los cuales se utilizan para enjuagar el vaso que ha contenido la muestra y a continuacin se aade Lechada de Cal hasta neutralizar el exceso (10 ml aproximadamente). Destilar a continuacin recogiendo 200 ml, o bien las tres cuartas partes de este volumen (150 ml). Aadir al destilado ms gotas de Tornasol tintura RE y comprobamos que el destilado toma color azul, de franca alcalinidad, debida al NH3 que contiene. Seguidamente, con una pipeta se adiciona Acido Sulfrico al 10% en cantidad suficiente para que el destilado vire a rojo, aadiendo un poco ms (0,5 ml) para que el medio quede francamente cido. Completar con Agua PA-ACS el contenido de los 200 ml del matraz y se procede a una segunda destilacin, como si de un vino se tratase. El destilado recogido de esta segunda destilacin est ya en condiciones para determinar su grado alcohlico por aerometra y efectuar la correccin a 20 C. 1.5. Expresin de los resultados. El resultado se puede expresar: - cm3 de alcohol absoluto / 100 g de muestra. 1.6. Referencias. 1.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. O. I. V. 1969, A2 1-19. 1.6.2. De Bernadi, P.; Garca Viana, E. 1969. Determinacin de grado alcohlico de heces y las. Estacin Enolgica de Requena.
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Figura 1.1
Aguardientes compuestos: Whisky
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METODOS DE ANALISIS 1. OBTENCION DEL DESTILADO 1.1. Principio. Destilacin de la muestra en condiciones determinadas. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad de fondo redondo y boca esmerilada. 1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar. 1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth, (20-30 cm de longitud) o similar. 1.2.3. Matraces aforados de 100 y 200 ml de capacidad. 1.2.5. Manta elctrica o mechero de gas. 1.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 1.4. Procedimiento. 1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol. Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que antes de enrasar se mantiene en bao de agua de 20C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiando el interior del cuello del matraz de posibles gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse que queden burbujas de aire adheridas a las paredes del matraz. Pasar cuantitativamente el volumen medido al matraz de destilacin, lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-ACS cada vez, aadiendo las aguas de lavado al matraz de destilacin. Cuando se trate de bebidas siruposas, por su gran contenido en azcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Proceder a la destilacin. Es conveniente aadir bolitas de vidrio para facilitar la ebullicin suave. En algunos casos, si se teme la formacin de espuma, aadir un antiespuma inerte (como silicona). El matraz de recogida del destilado es el mismo en que se efectu la medida. Se le aaden 10 ml de Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado, de forma que el destilado resbale por la pared sin salpicadura, dentro de un bao de hielo o agua fra a menos de 10C. El refrigerante debe ir dotado de una alargadera que penetre por lo menos 4-6 cm en el cuello del matraz. Cuando se hayan recogido aproximadamente 190 ml, llevar el matraz tapado al bao de agua a 20C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo bao, enrasarse con Agua PA-ACS mediante pipeta. Tapar el matraz e invertirlo varias veces para homogeneizar su contenido, antes de proceder a la determinacin del etanol. 1.4.2. Muestras con ms de 60% de etanol. El procedimiento anteriormente descrito, difiere nicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con agua hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS dentro del bao de agua a 20C. 1.5. Observaciones. 1.5.1. El sistema de destilacin debe comprobarse en ambos casos como sigue: Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohlica al 10% en volumen 5 veces sucesivas. Determinar en la ltima destilacin el ttulo alcohomtrico del destilado que no debe ser menor de 9,9% en volumen de etanol. 1.5.2. La destilacin debe efectuarse procurando que el flujo del destilado sea uniforme. 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estar comprendido entre 45 y 90 minutos. 1.6. Referencia. 1.6.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-112-75. 2. FURFUROL 2.1. Principio. Destilacin y posterior medida espectrofotomtrica de su absorcin a 277 nm. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml. 2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml. 2.2.3. Espectrofotmetro ultravioleta visible. 2.2.4. Aparato de destilacin por arrastre de vapor, segn figura I.
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Figura 2.1
2.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol v/v 96% PA 141334 Furfuraldehdo PRS 2.3.1. Disolucin patrn de furfurol (furfuraldehdo) de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehdo PRS recogiendo solamente la fraccin de punto de ebullicion, 161,2C. De este destilado tomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 ml enrasando con Etanol 96% v/v PA. Tomar 5 ml de esta disolucin y diluir con alcohol al 50% en volumen en un matraz aforado de 500 ml. 2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de (2.3.1.) obtener disoluciones de 0; 1 ;2; 3; 4 y 5 mg/l de Furfuraldehdo PRS. 2.4. Procedimiento. 2.4.1. Preparacin de la muestra. Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.) recogiendo 200 ml. Si se observa turbidez en el destilado aadir un volumen conocido de Etanol 96 % v/v PA, hasta lograr total limpidez en el destilado. 2.4.2. Determinacin. Leer la absorbancia en el espectrofotmetro a 277 nm, comparando con las lecturas efectuadas a las disoluciones de referencia o bien calculando la absorbancia de una disolucin que contenga 1 mg/l de Furfuraldehdo PRS (valor aproximado 0,15). 2.5. Clculo. El contenido en furfuraldehdo se obtiene mediante la frmula: A Furfuraldehdo (mg/l) = x F A Siendo: A = Absorbancia de la muestra. A = Absorbancia de una disolucin que contiene 1 mg/l de furfuraldehdo. F = Factor de dilucin. 2.6. Observaciones. 2.6.1. La disolucin de referencia se debe preparar inmediatamente antes de efectuar la medida. 2.7. Referencia. 2.7.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-109-74. 3. EXTRACTO SECO 3.1. Principio. Evaporacin de la muestra a 105 C y pesada posterior del residuo.
3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Estufa de aire regulable de 95C a 105C. 3.2.2. Cpsulas de platino o cuarzo de fondo plano, de 77 mm de dimetro interno y 18 mm de altura. 3.2.3. Desecador de vidrio que contenga cido sulfrico concentrado o gel de slice como sustancias desecadoras. 3.2.4. Bao de agua. 3.2.5. Balanza analtica. 3.3. Procedimiento. Medir 25 ml de muestra a 20C. Evaporar a sequedad, en las cpsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en bao de agua hirviente y mantener en la estufa a 105 C durante 30 minutos. Dejar enfriar las cpsulas en el interior del desecador y una vez fras pesar en la balanza. 3.4. Clculo. El valor del extracto total de la muestra, en gramos por litro, se hallar mediante la frmula siguiente: Extracto total (g/l) = ( M - m ) x 40 Siendo: M = Peso, en g, de la cpsula con el extracto seco. m = Peso, en g de la cpsula vaca. 3.5. Referencia. 3.5.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-106-74. 4. ESTERES 4.1. Principio. Reaccin cuantitativa de los steres con hidroxilamina en solucin alcalina, formacin de cido hidroxmico, acidificacin, formacin de un complejo coloreado con iones frricos y medida del color desarrollado a 525 nm. 4.2. Material y aparatos. 4.2.1. Espectrofotmetro o colormetro que permita lecturas a 525 nm. 4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y dimetro interno 2,5 cm. 4.3. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO 131914 Hidroxilamino Cloruro PA-ACS-ISO 141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO
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4.3.1. Disolucin de Hidroxilamina Clorhidrato 2M. Conservar en nevera. 4.3.2. Disolucin de Sodio Hidrxido 3,5N. 4.3.3. Disolucin de Hidroxilamina Clorhidrato 1M en Sodio Hidrxido 1,75 N. Mezclar inmediatamente antes de su uso, volmenes iguales del reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas. 4.3.4. Disolucin de Acido Clorhdrico 4N. 4.3.5. Disolucin de Hierro Tricloruro 0,37M. Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matraz aforado de 500 ml. Aadir 12,5 ml de Acido Clorhdrico 4N y enrasar con agua. 4.4. Procedimiento. 4.4.1. Construccin de la curva patrn. 4.4.1.1. Solucin patrn. Pesar 5 g de Etilo Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con alcohol de 50 (preparar a partir de Etanol 96% v/v PA y Agua PA-ACS). 4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y 300 mg/l de Etilo Acetato. Tomar de la solucin (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml introducindolos en matraces de 250 ml de capacidad y completar con alcohol de 50 hasta el enrase. 4.4.1.3. Solucin de referencia. Tomar 4 ml de la solucin (4.3.3.) y 2 ml de la disolucin (4.3.4.) mezclndolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y aadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones (4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensayo (4.2.2.), 2 ml de cada una de las soluciones (4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.). Agitar y dejar reaccionar entre uno y 20 minutos. Aadir 2 ml de la disolucin de Acido Clorhdrico 4N y mezclar. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro 0,37 M a cada uno de los matraces, tanto al de la solucin de referencia como a los de las soluciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimtricas a una longitud de onda de 525 nm. Obtener las grficas de calibrado mediante la representacin de las diferencias de absorcin de las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solucin de referencia, en funcin de la concentracin de Etilo Acetato. 4.4.2. Preparacin de la muestra. Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el mtodo oficial n 1. 4.4.3. Determinacin. Introducir en un tubo (4.2.2.) 2 ml del destilado y 4 ml de disolucin de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre 1 y 20 minutos. Aadir 2 ml de la disolucin de Acido Clorhdrico (4.3.4.) y mezclar. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colorimtrica a 525 nm inmediatamente, tomando como blanco la solucin de referencia preparada de la siguiente forma: Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolucin de Hidroxilamina Clorhidrato (4.3.3.) y 2 ml de la solucin de Acido Clorhdrico (4.3.4.), mezclar y aadir 2 ml de destilado. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar. 4.5. Clculo. A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenido en steres expresados en etilo acetato, mediante las grficas de calibrado. 4.6. Observaciones. 4.6.1. El mismo blanco puede ser usado para una serie de muestras de distinto contenido en steres, pero de semejente graduacin alcohlica. 4.7. Referencias. 4.7.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1975-9053-59. 4.7.2. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-111-77. 5. ALCOHOLES SUPERIORES 5.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin de los alcoholes superiores al etanol, por cromatografa de gases. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Cromatgrafo de gases equipados con detector de ionizacin de llama. 5.2.2. Columna cromatogrfica.- Columna de 4 m de longitud de 1/8 de dimetro interno rellena de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W 80-100 mallas, lavado a los cidos. 5.2.3. Microjeringas de 1 ml. 5.3. Reactivos. 5.3.1. Patrones cromatogrficos: 351082 1-Butanol CG 354330 iso-Butanol CG 353851 2-Butanol CG 354539 2-Metil-1-Butanol CG 351079 3-Metil-1-Butanol CG 352516 4-Metil-2-Pentanol CG 351885 1-Propanol CG 5.3.2. Etanol pureza cromatogrfica. 5.4. Procedimiento. 5.4.1. Condiciones cromatogrficas.- Las condiciones cromatogrficas orientativas son: Gas portador nitrgeno 20 ml/min., temperatura del horno 35C, temperatura del inyector y del detector 150C. 5.4.2. Calibrado. 5.4.2.1. Patrn interno : Solucin de 5 g/l en etanol de 40 de 4-Metil-2-Pentanol.
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5.4.2.2. Solucin patrn: Preparar una solucin en etanol de 40 en las proporciones que se indican en la Tabla 1. 5.4.2.3. Solucin de calibrado: A 10 ml de la solucin patrn (5.4.2.2.) se le aade 1 ml de la solucin del patrn interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1 ml en el cromatgrafo. 5.4.3. Muestra problema.- A 10 ml de la muestra llevada a 40C se le aade 1 ml de patrn interno (5.4.2.1.) e inyectar 1 mlitro en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado. 5.5. Clculo. Una vez identificados los picos por sus retenciones relativas al patrn interno se calculan los factores de respuesta para cada uno de ellos y las concentraciones en la muestra problema aplicando las frmulas: Ci x Ap Factor de respuesta (Fr) = Ai Aim Concentracin en la muestra (mg/l) = Fr x x f Apm Siendo: Ci = Concentracin del compuesto en la solucin patrn. Ap = Area del patrn interno en la solucin patrn. Ai = Area del compuesto en la solucin patrn. Aim = Area del compuesto en la muestra problema. Apm = Area del patrn interno en la muestra problema. f = Factor de dilucin de la muestra. El contenido en alcoholes superiores vendr dado por la suma de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresar en mg/100 ml de alcohol absoluto. 5.6. Referencia. 5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists
TABLA 1 Compuesto Concentracin (mg/l) 2-Butanol 10 1-Propanol 125 iso-Butanol 175 1-Butanol 15 2-Metil-1-Butanol 100 3-Metil-1-Butanol 300 6. METANOL 6.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del alcohol metlico por cromatografa gaseosa. 6.2. Material y aparatos. Como en (5.2.). 6.3. Reactivos. Etanol pureza cromatogrfica. Metanol pureza cromatogrfica 352516 4-Metil-2-Pentanol CG
6.4. Procedimiento. 6.4.1. Condiciones cromatogrficas. Como en (5.4.1.) 6.4.2. Calibrado. 6.4.2.1. Patrn interno.- Como en (5.4.2.1.). 6.4.2.2. Solucin patrn.- Preparar una solucin de Metanol, en Etanol a 40 C, de concentracin similar a la esperada en la muestra. 6.4.2.3. Solucin de calibrado.- A 10 ml de la solucin patrn (6.4.2.2.) se le aade 1 ml de la solucin del patrn interno (6.4.2.1.), y se inyecta 1 ml en el cromatgrafo. 6.4.3. Muestra problema. Como en (5.4.3.). 6.5. Clculo. Como en (5.5.). 7. GRADO ALCOHOLICO 7.1. Principio. Se determina por destilacin del producto y medida de la densidad del destilado por areometra. Para bebidas con un contenido en extracto seco menor o igual a 600 mg en 100 ml, se efectuar directamente, sin destilacin. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Aparatos de destilacin como en (1.2.). 7.2.2. Alcohmetro con graduacin de 0,1 de d 20/20 debidamente contrastado.
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7.2.3. Termmetro con graduacin de 0,1C. 7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de dimetro interior y 320 mm de altura. 7.2.5. Bao termosttico a 20C. 7.3. Procedimiento. 7.3.1. Obtencin del destilado.- Segn mtodo oficial n 1 en el caso de bebidas con extracto seco, sea mayor de 600 mg/100 ml. 7.3.2. Determinacin areomtrica.- Limpiar y secar el alcohmetro antes de su empleo. Dejar que el alcohmetro, termmetro, probeta y muestra, alcancen en el bao termostatizado la temperatura de 20C. Aclarar 2 o 3 veces con la muestra la probeta que contiene el termmetro. Echar la muestra en la probeta hasta un volumen conveniente, inclinarla unos 45 para evitar la agitacin y las burbujas (al introducir luego el alcohmetro, el nivel del lquido debe estar justo por debajo del borde de la probeta). Tapar la probeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturas de la probeta y del lquido. Secar el lquido de la parte exterior de la probeta (no poner las manos sobre la probeta para no calentar el lquido contenido). Introducir el alcohmetro en el lquido de arriba a abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma temperatura y que se distribuya cualquier cambio de temperatura en todo el lquido. Mantener el bulbo del alcohmetro en el lquido, secar el vstago, dejarlo en reposo de modo que slo unas pocas dcimas de grados estn mojadas. Leer en el alcohmetro, luego en el termmetro. Para leer en la escala del alcohmetro situar el ojo justo debajo del plano de la superficie del lquido, levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual perpendicular al alcohmetro, hasta que la superficie vare de elipse a una lnea recta. Anotar el punto en que esta lnea intersecciona con la escala del alcohmetro, siendo sta la lectura del alcohmetro. Levantarlo ligeramente por encima de dicha lectura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el alcohmetro y en el termmetro, comprobando as las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohmetro con aproximacin de 0,05 y la del termmetro con 0,1. Sacar el alcohmetro y secarlo. Invertir la probeta con la muestra varias veces para que se equilibre trmicamente todo el conjunto. Volver a atemperar el alcohmetro, secar el vstago y realizar nuevas lecturas en el alcohmetro y en el termmetro. Los valores calculados son vlidos si tienen aproximacin de 0,1 grados alcohlicos, si no fuera as, realizar lecturas adicionales y calcular la media. 7.4. Clculo. 7.4.1. Muestras con extracto seco mayor de 600 mg en 100 ml: El grado alcohlico real es el ledo en el destilado obtenido segn (7.3.1.). Si en la obtencin del destilado, 100 ml de muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida, debe ser multiplicada por 2. 7.4.2. Muestras con extracto seco menor o igual a 600 mg en 100 ml: Para obtener el grado alcohlico real, adicionar al grado alcohlico aparente (ledo directamente en la muestra sin destilar) 0,2 grados alcohlicos por cada 100 mg de extracto/100 ml. 7.5. Referencia. 7.5.1. Association of Official Analytical Chemist. Edicin 1980-9015-9. 8. ALDEHIDOS 8.1. Principio. Reaccin de los aldehdos con sodio bisulfito. Oxidacin del cido sulfuroso con yodo y valoracin del exceso de yodo con sodio tiosulfato. 8.2. Material y aparatos. 8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en dcimas de mililitro. 8.3. Reactivos 131074 Agua PA-ACS 211642 Sodio Hidrgeno Sulfito solucin 40% p/v QP 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV 182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV 8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV. 8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. 8.3.3. Disolucin de Sodio Bisulfito 0,05N. Preparar esta disolucin a partir de Sodio Hidrgeno Sulfito solucin 40% p/v QP y Agua PA-ACS. 8.4. Procedimiento. Poner 100 ml del destilado (obtenido segn Mtodo Oficial 1) en un matraz de 500 ml. Aadir 100 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la disolucin (8.3.3.) calculado de modo que equivalga por lo menos a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. Dejar el matraz bien tapado, durante 30 minutos agitando de vez en cuando. Aadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. Valorar el exceso de Yodo aadido con Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV, hasta decoloracin completa. Debe hacerse simultneamente un ensayo en blanco, para comprobar en cada serie de ensayos la estabilidad de las disoluciones de Yodo y Tiosulfato por ser tan diluidas.
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8.5. Clculo. El contenido en aldehdos, expresado como acetaldehdo, vendr dado por la siguiente frmula: 1,1 x 100 Aldehdos (mg/100 ml - V1 ) x = (V 2 de etanol absoluto) A Siendo: V1 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en la muestra. V2 = Volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en el blanco. A = Grado alcohlico. 8.6. Observaciones. 8.6.1. La disolucin de sodio bisulfito tiene mayor tiempo de estabilidad si se le aade un 10 % de alcohol. En cualquier caso esta solucin es estable como mximo una semana. 8.7. Referencias. 8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980-9052. 8.7.2. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-107-74. 9. ACIDEZ VOLATIL 9.1. Principio. Se define convencionalmente como la diferencia entre los valores de la acidez total y fija, expresadas ambas en mg de cido actico por 100 ml de alcohol absoluto. 9.2. Material y aparatos. 9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en dcimas. 9.2.2. pH-metro. 9.2.3. Cpsulas de platino o porcelana. 9.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 181693 Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV 9.3.1. Disolucin de Sodio Hidrxido 0,01N. Diluir a 1:10 en matraz aforado Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV con Agua PA-ACS. 9.3.2. Etanol absoluto PA.
a 100C durante 30 minutos. Disolver y transferir el residuo con varias porciones de alcohol (llevando previamente a pH 8,2) de una graduacin similar a la muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA en total. Valorar con la disolucin de Sodio Hidrxido (9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro. 9.5. Clculo. V1 x 1,2 x 100 9.5.1. Acidez total (en = mg/100 ml de etanol absoluto) A Siendo : V1 = Volumen, en ml de sodio hidrxido empleados en (9.4.1.). A = Grado alcohlico de la muestra. V2 x 1,2 x 100 9.5.2. Acidez fija (en = mg/100 ml de etanol absoluto) A Siendo: V2 = Volumen, en ml, de sodio hidrxido empleados en (9.4.2.) A = Grado alcohlico de la muestra. 9.5.3. El valor de la acidez voltil, expresado en mg de cido actico por 100 ml de etanol absoluto, vendr dado por la frmula: Acidez voltil = Acidez total - Acidez fija. 9.6. Referencia. 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1980-9046-9045. 10. CENIZAS (Materia mineral total) 10.1. Principio. Se denominan cenizas de un whisky, al conjunto de los productos de incineracin del residuo de evaporacin de un volumen conocido del whisky. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Horno elctrico regulable. 10.2.2. Bao de agua y bao de arena. 10.2.3. Lmpara de infrarrojo. 10.2.4. Cpsula de platino o de cuarzo de 77 mm de dimetro interno y 18 mm de altura, fondo plano. 10.2.5. Balanza analtica. 10.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS
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9.4. Procedimiento. 9.4.1. Acidez Total. Valorar 50 ml de la muestra con la disolucin de Sodio Hidrxido (9.3.1.), a pH 8,2 utilizando el pHmetro. 9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al bao mara, en una cpsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla
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10.4. Procedimiento. Colocar 25 ml de whisky en una cpsula tarada en balanza que aprecie 1/10 de mg. Evaporar con precaucin en bao de agua hasta consistencia siruposa, continuar el calentamiento sobre bao de arena con moderacin y durante una media hora. Es conveniente ayudar a la evaporacin con la aplicacin de rayos infrarrojos hasta carbonizacin. Cuando ya no se desprendan vapores, llevar la cpsula al horno elctrico a 525C 25C y con aireacin continua. Despus de cinco minutos de carbonizacin completa, sacar la cpsula del horno, dejar enfriar y aadir 5 ml de Agua PA-ACS, que se evapora en bao de agua, y llevar de nuevo al horno a 525 C. Si la combustin de las partes carbonosas no se consigue en quince minutos, volver a comenzar la operacin de adicin de Agua PA-ACS, evaporacin y recalcinacin. Despus de enfriar en el desecador, pasar la cpsula con las cenizas. 10.5. Clculo. El contenido en cenizas vendr dado por la siguiente frmula: Cenizas (g/l) = 40 x P Siendo: P = Peso, en gramos, de las cenizas contenidas en 25 ml de whisky. 10.6. Referencias. 10.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. O.I.V., AGI, 1969. 10.6.2. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos, Ministerio de Agricultura, 1971, pg 66. 11. PLOMO 11.1. Principio. Determinacin del plomo por A.A., previa mineralizacin de la muestra. 11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 11.2.2. Lmpara de plomo. 11.2.3. Cpsulas de platino, cuarzo o similar. 11.2.4. Bao de arena o placa calefactora con regulacin de temperatura o estufa con control de temperatura en el rango de 50 a 150C. 11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de vitrina de extraccin de humos. 11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de capacidad. 11.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 11.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 11.3.2. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 11.3.3. Acido Ntrico al 1% v/v en Agua PA-ACS. 11.3.4. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000 ml con Acido Ntrico al 1%. 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Preparacin de la muestra.- Poner 100 ml de la muestra en la cpsula (11.2.3.) y llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena (11.2.4.). Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el bao de arena o placa. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el bao de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrn-rojizo en las cenizas (posiblemente de Hierro III Oxido) es aceptado y no requiere un tratamiento posterior. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS. Llevar la solucin a un matraz de 10 ml, lavar la cpsula con Agua PA-ACS y aadir las aguas del lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente. 11.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir alcuotas apropiadas de la solucin patrn (11.3.4.) con Acido Ntrico al 1% (v/v) para obtener una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l. 11.4.3. Determinacin.- Operar segn las especificaciones del aparato; usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solucin est muy concentrada diluirla con Acido Ntrico al 1%. 11.5 Clculo. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor de concentracin o dilucin. 11.6. Referencia. 11.6.1. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pg 134 (I), 1976. 12. ZINC 12.1. Principio. Determinacin del Zinc por A.A. previa mineralizacin de la muestra.
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12.2. Material y aparatos. 12.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 12.2.2. Lmpara de Zinc. 12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.), (11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.). 12.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA 12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.), (11.3.2.) y (11.3.3.). 12.3.2. Zinc solucin patron Zn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc metal , granalla PRS en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1% (v/v). 12.4. Procedimiento. 12.4.1. Preparacin de la muestra.- Como en (11.4.1.). 12.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (12.3.2.), con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones de 0,5; 1; 1,5 y 2 mg/l. 12.4.3. Determinacin.- Igual que para el Plomo. La lectura se efectuar a 213,8 nm. 12.5 Clculo. Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentracin o dilucin. 12.6. Referencia. 12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963), 13. 13. COBRE 13.1. Principio. Determinacin del cobre por A.A., mineralizacin por cenizas a 450C y concentracin previa a la lectura con objeto de conseguir resultados suficientemente precisos. 13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 13.2.2. Lmpara de cobre. 13.2.3. Los utilizados para el plomo en (11.2.3.), (11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.). 13.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS
313178 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.), (11.3.2.) y (11.3.3.). 13.3.2. Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1% (v/v). 13.4. Procedimiento. 13.4.1. Preparacin de la muestra.- Como en (11.4.1.). 13.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (13.3.2.) con Acido Ntrico del 1% para obtener soluciones que contengan de 1 a 5 mg de cobre/l. 13.4.3. Determinacin.- Igual que para el plomo. Medir a 324,7 nm. 13.5. Clculo. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrn las concentraciones de cobre de la muestra. 13.6. Referencias. 13.6.1. H. E. Parker: Atomic Absorption Newsletter (1963),13. 13.6.2. F. Rousselet: Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin. Ed. Pars (1968), pg 59-144. 14. ARSENICO 14.1. Principio. La muestra se somete a una digestin cida con una mezcla de cido ntrico y sulfrico. La determinacin del arsnico se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica, con generador de hidruros. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g. 14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de capacidad. 14.2.3. Pipetas de doble aforo. 14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml. 14.2.5. Espectrofotmetro de absorcin atmica equipado con sistema generador de hidruros. 14.2.6. Lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.7. Fuente de alimentacin para lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.8. Registro grfico. 14.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraactico sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO
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131037 131058 131074 313171 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO Acido Sulfrico PA-ISO Agua PA-ACS Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 123314 Sodio Borohidruro PA 131687 Sodio Hidrxido 97%, lentejas PA-ACS-ISO 14.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO (d= 1,19 g/ml). 14.3.2. Disolucin de Acido Clorhdrico 32% v/v. Disolver 32 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO (d= 1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico 1,5% v/v. Disolver 15 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO (d=1,19 mg/l) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml. 14.3.4. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 14.3.5. Acido Sulfrico 96% PA-ISO (d=1,84). 14.3.6. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1%. Pesar 1 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.7. Disolucin de Sodio Borohidruro al 3%. Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo hasta 100 ml con Sodio Hidrxido al 1%. 14.3.8. Disolucin de Acido Etilendiaminotetraactico al 1%. Pesar un gramo de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACSISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS. 14.3.9. Disolucin de Potasio Hidrxido al 20%. Pesar 20 g de Potasio Hidrxido 85% lentejas PAISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.10. Disolucin de Acido Sulfrico al 20% (v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.11. Disolucin de Acido Sulfrico al 1% (v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.12. Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsnico III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidrxido al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfrico al 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfrico 1% (14.3.11.). 14.3.13. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin patrn de Arsnico (14.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.3.14. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (14.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.4. Procedimiento. 14.4.1. Preparacin de la muestra. En un matraz Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con 20 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullicin hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la solucin resultante. 14.4.2. Preparacin del blanco y patrones de trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la solucin de Arsnico (14.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solucin contiene 10 nanogramos de Arsnico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra. 14.4.3. Condiciones del espectrofotmetro. Encender la fuente de alimentacin de las lmparas de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para que se estabilice la energa de la lmpara. Encender el espectrofotmetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la celda a 900C, esperando hasta que se alcanza dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del generador de hidruros segn las especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de Argn de acuerdo con las caractersticas del aparato. Encender el registrador. 14.4.4. Determinacin.- Las determinaciones de la concentracin de Arsnico se realizan por el mtodo de adicin de patrones, por medio de medidas duplicadas en el espectrofotmetro en las condiciones especificadas en (14.4.3.), aadiendo al matraz de reaccin 3 ml de la solucin (14.4.1.), ms 3 ml de la solucin (14.3.2.), y 10 ml de la solucin (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de Arsnico. Lavar los matraces antes y despus de cada uso, con Acido Clorhdrico 1,5% (14.3.3.). Al construir la grfica de adicin hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las mismas condiciones anteriores, pero aadiendo 3 ml de la solucin blanco. En estas condiciones el lmite de deteccin de la tcnica es de 5 ng.
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Aguardientes compuestos: Ron
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METODOS DE ANALISIS 1. OBTENCION DEL DESTILADO 1.1. Principio. Destilacin de la muestra en condiciones determinadas. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad de fondo redondo y boca esmerilada. 1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar. 1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de longitud) o similar. 1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de capacidad. 1.2.5. Manta elctrica o mechero de gas. 1.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 1.3.1. Agua PA-ACS 1.4 Procedimiento. 1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol. Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que antes de enrasar se mantiene en bao de agua a 20C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiando el interior del cuello del matraz de posibles gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse que queden burbujas de aire adheridas a las paredes del matraz. Pasar cuantitativamente el volumen medido al matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PAACS cada vez, aadiendo las aguas del lavado al matraz de destilacin. Cuando se trate de bebidas siruposas, por su gran contenido en azcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Proceder a la destilacin. Es conveniente aadir bolitas de vidrio para facilitar la ebullicin suave. En algunos casos, si se teme la formacin de espuma, aadir un antiespumante inerte (como silicona). El matraz de recogida del destilado es el mismo en que se efectu la medida. Se le aaden 10 ml de Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado, de forma que el destilado resbale por la pared sin salpicadura, dentro de un bao de hielo o agua fra, a menos de 10 C. El refrigerante debe ir dotado de una alargadera que penetra por lo menos 4-6 cm en el cuello del matraz. Cuando se hayan recogido aproximadamente 190 ml, llevar el matraz tapado al bao de agua a 20C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo bao, enrasar con Agua PA-ACS mediante pipeta. Tapar el matraz e invertirlo varias veces para homogeneizar su contenido antes de proceder a la determinacin del etanol. 1.4.2. Muestras con ms del 60% de etanol. El procedimiento anteriormente descrito difiere nicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS dentro del bao de agua a 20C. 1.5 Observaciones. 1.5.1. El sistema de destilacin debe comprobarse en ambos caso como sigue: Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohlica al 10% en volumen cinco veces sucesivas. Determinar en la ltima destilacin el ttulo alcohomtrico del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de etanol. 1.5.2. La destilacin debe efectuarse procurando que el flujo del destilado sea uniforme. 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estar comprendido entre cuarenta y cinco y noventa minutos. 1.6. Referencia. 1.6.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-112-75. 2. FURFUROL (Furfuraldehdo) 2.1. Principio. Destilacin y posterior medida espectrofotomtrica de su absorcin a 277 nm. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Pipetas de doble enrase de 1,5 y 25 ml. 2.2.2. Matraces aforados de 100, 200 y 500 ml. 2.2.3. Espectrofotmetro ultravioleta visible. 2.2.4. Aparato de destilacin por arrastre de vapor, segn figura 1. 2.3. Reactivos 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 141334 Furfuraldehdo PRS 2.3.1. Disolucin patrn de Furfuraldehdo de aproximadamente 116 mg/l. Destilar Furfuraldehdo PRS recogiendo solamente la fraccin del punto de ebullicin 161,2C. De este destilado tomar 1 ml, llevarlo a un matraz aforado de 100 ml, enrasando con Etanol al 95% en volumen. Tomar 5 ml de esta disolucin y diluir con Etanol al 50% en volumen en un matraz aforado de 500 ml. 2.3.2. Disoluciones de referencia. A partir de (2.3.1.) obtener disoluciones de 0, 1, 2, 3, 4 y 5 mg/l de Furfuraldehdo.
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2.6. Observaciones. 2.6.2. La disolucin de referencia se debe preparar inmediatamente antes de efectuar la medida. 2.7. Referencia. 2.7.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-109-74. 3. EXTRACTO SECO REDUCIDO 3.1. Principio. Evaporacin de la muestra a 105C y pesada posterior del residuo, y aplicacin de una frmula emprica. 3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Estufa de aire regulable de 95C a los 105C. 3.2.2. Crisoles de platino o cuarzo de fondo plano, de 77 mm de dimetro interno y 18 mm de altura. 3.2.3. Desecador de vidrio que contenga cido sulfrico concentrado o gel de slice como sustancia desecadora. 3.2.4. Bao de agua. 3.2.5. Balanza analtica. Figura 2.1 3.3. Procedimiento. Medir 25 ml de muestra a 20C. Evaporar a sequedad, en las cpsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en bao de agua hirviente y mantener la estufa a 105C, durante treinta minutos. Dejar enfriar las cpsulas en el interior del desecador y una vez fras pesar en la balanza de precisin. 3.4. Clculo. El valor del extracto total de la muestra, en gramos por litro, se hallar mediante la frmula siguiente: Extracto total (g/l) = (M-m)x40 Siendo: M = peso, en g, de la cpsula con el extracto seco. m = peso, en g, de la cpsula vaca. El extracto seco reducido se calcula mediante la frmula siguiente: Extracto seco reducido = ESR en (g/l) Extracto seco total = EST en (g/l) Azcares totales = AT en (g/l) = sacarosa + azcares reductores ESR = EST - AT 3.5. Referencia. 3.5.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-106-74.
2.4. Procedimiento. 2.4.1. Preparacin de la muestra. Destilar 25 ml de la muestra en el aparato descrito en (2.2.4.), recogiendo 200 ml. Si se observa turbidez en el destilado, aadir un volumen conocido de Etanol 95% hasta lograr total limpidez en el destilado. 2.4.2. Determinacin. Leer la absorbancia en el espectrofotmetro a 277 nm, comparando con las lecturas efectuadas a las disoluciones de referencia o bien calculando la absorbancia de una disolucin que contenga 1 mg/l de Furfuraldehdo PRS (valor aproximado 0,15). 2.5. Clculo. El contenido en Furfuraldehdo se obtiene mediante la frmula: A Furfuraldehdo (mg/l) = x F A Siendo: A = absorbancia de la muestra. A = absorbancia de una disolucin que contiene 1 mg/l de Furfuraldehdo. F = factor de dilucin.
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4. ESTERES 4.1. Principio. Reaccin cuantitativa de los steres con hidroxilamina en solucin alcalina, formacin de cido hidroxmico, acidificacin, formacin de un complejo coloreado con iones frricos y medida del color desarrollado a 525 nm. 4.2. Material y aparatos. 4.2.1. Espectrofotmetro o colormetro que permita lectura a 525 nm. 4.2.2. Tubos de ensayo de longitud 20 cm y dimetro interno 2,5 cm. 4.3. Reactivos 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 131318 Etilo Acetato PA-ACS-ISO 131914 Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO 141358 Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 4.3.1. Disolucin de Hidroxilamonio Cloruro 2M. Diluir convenientemente Hidroxilamonio Cloruro PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. Conservar en nevera. 4.3.2. Disolucin de Sodio Hidrxido 3,5 N. Diluir convenientemente Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS. 4.3.3. Disolucin de Hidroxilamonio Cloruro 1M en Sodio Hidrxido 1,75N: mezclar inmediatamente antes de su uso, volmenes iguales del reactivo (4.3.1.) y (4.3.2.). Desechar a las seis horas. 4.3.4. Disolucin de Acido Clorhdrico 4N. Diluir convenientemente Acido Clorhdrico 35% PA-ISO en Agua PA-ACS. 4.3.5. Disolucin de Hierro III Cloruro 0,37M. Disolver 50 g de Hierro III Cloruro 6-hidrato, trozos PRS en unos 400 ml de Agua PA-ACS en un matraz aforado de 500 ml. Aadir 12,5 ml de Acido Clorhdrico 4N y enrasar con agua. 4.4. Procedimiento. 4.4.1. Construccin de la curva patrn. 4.4.1.1. Solucin patrn. Pesar 5 g de Etilo Acetato PA-ACS-ISO y llevar a un litro con Etanol 96% v/v PA convenientemente diluido en Agua PA-ACS hasta concentracin 50. 4.4.1.2. Soluciones de 50, 100, 150, 200, 250 y 300 mg/l de Etilo Acetato PA-ACS-ISO. Tomar de la solucin (4.4.1.1.), 2,5; 5,0; 7,5; 10,0; 12,5 y 15,0 ml introducindolos en matraces de 250 ml de capacidad y completar con Etanol de 50 hasta el enrase. 4.4.1.3. Solucin de referencia. Tomar 4 ml de la solucin (4.3.3.) y 2 ml de la disolucin (4.3.4.) mezclndolas en un tubo de ensayo (4.2.2.). Mezclar y aadir 2 ml de una cualquiera de las soluciones (4.4.1.2.). Introducir en una serie de tubos de ensayo (4.2.2.), 2ml de cada una de las soluciones (4.4.1.2.) y 4 ml de (4.3.3.). Agitar y dejar reaccionar entre uno y veinte minutos. Aadir 2 ml de la disolucin de Acido Clorhdrico 4N y mezclar. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro 0,37M a cada uno de los matraces, tanto al de la solucin de referencia como a los de las soluciones (4.4.1.2.). Efectuar las lecturas colorimtricas a una longitud de onda de 525 nm. Obtener las grficas de calibrado mediante la representacin de las diferencias de absorcin de las soluciones (4.4.1.2.), respecto a la solucin de referencia, en funcin de la concentracin de Etilo Acetato. 4.4.2. Preparacin de la muestra. Destilar siguiendo el procedimiento descrito en el mtodo oficial nmero 1. 4.4.3. Determinacin. Introducir en un tubo (4.2.2.), 2 ml del destilado y 4 ml de disolucin de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.), agitar y dejar reaccionar entre uno y veinte minutos. Aadir 2 ml de la disolucin de Acido Clorhdrico (4.3.4.) y mezclar. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro (4.3.5.) Efectuar la lectura colorimtrica a 525 nm inmediatamente, tomando como blanco la solucin de referencia preparada de la siguiente forma: Introducir en un tubo (4.2.2.) 4 ml de la disolucin de Hidroxilamonio Cloruro (4.3.3.) y 2 ml de la solucin de cido clorhdrico (4.3.4.), mezclar y aadir 2 ml del destilado. Aadir 2 ml de la disolucin de Hierro III Cloruro (4.3.5.) y mezclar. 4.5 Clculo. A partir de las lecturas obtenidas se halla el contenido en steres, expresados en mg de etilo acetato por 100 ml de alcohol absoluto, mediante las grficas de calibrado. 4.6. Observaciones. 4.6.1. El mismo blanco, puede ser usado para una serie de muestras de distinto contenido en steres, pero de semejante graduacin alcohlica. 4.7. Referencias. 4.7.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1975-9053-59 4.7.2. Instituto Espaol de normalizacin. UNE 33-111-77.
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5. ALCOHOLES SUPERIORES 5.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin de los alcoholes superiores al etanol por cromatografa de gases. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Cromatgrafo de gases equipado con detector de ionizacin de llama. 5.2.2. Columna cromatogrfica. Columna de 4 m de longitud de 1/8 de dimetro interno rellena de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W 80-100 mallas, lavado a los cidos. 5.2.3. Microjeringas de 1 l. 5.3. Reactivos. 5.3.1. Patrones cromatogrficos: 131082 1-Butanol PA-ACS-ISO 354330 iso-Butanol CG 353851 2-Butanol CG 354539 2-Metil-1-Butanol CG 351079 3-Metil-1-Butanol CG 4-Metil-2-Pentanol (patrn interno) 351885 1-Propanol CG 5.3.2. Etanol pureza cromatogrfica. 5.4. Procedimiento. 5.4.1. Condiciones cromatogrficas. Las condiciones cromatogrficas orientativas son: gas portador nitrgeno 20 ml/min., temperatura del horno 85C, temperatura del inyector y del detector 150C. 5.4.2. Calibrado. 5.4.2.1. Patrn interno : Solucin de 5 g/l en etanol de 40 C 4-Metil-2-Pentanol. 5.4.2.2. Solucin patrn: Preparar una solucin en alcohol de 40 en las proporciones que se indican en la tabla 1. 5.4.2.3. Solucin de calibrado: A 10 ml de la solucin patrn (5.4.2.2.) se le aade 1 ml de la solucin patrn interno (5.4.2.1.) Y se inyecta 1 l en el cromatgrafo. 5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra llevada a 40C se le aade 1 ml de patrn interno (5.4.2.1.) e inyectar un litro en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado. 5.5. Clculo. Una vez identificados los picos por sus retenciones relativas al patrn interno se calculan los factores de respuesta para cada uno de ellos y las concentraciones en la muestra problema aplicando las frmulas. Ap Factor de respuesta ( Fr ) = Ci x Ai Aim Concentracin en la muestra (mg/l) = Fr x x f Apm Siendo: Ci = concentracin del compuesto en la solucin patrn. Ap = rea del patrn interno en la solucin patrn. Ai = rea del compuesto en la solucin patrn. Aim = rea del compuesto en la muestra problema. Apm = rea del patrn interno en la muestra problema. f = factor de dilucin de la muestra. El contenido en alcoholes superiores vendr dado por la sumo de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresar en mg/100 ml de alcohol absoluto. 5.6. Referencia. 5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980, 9075. TABLA 1 Compuesto Concentracin (mg/l) 2-Butanol 10 1-Propanol 125 iso-Butanol 175 1-Butanol 15 2-Metil-1-Butanol 100 3-Metil-1-Butanol 300 6. METANOL (Alcohol Metlico) 6.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del metanol por cromatografa gaseosa. 6.2. Material y aparatos. Como en 5.2. 6.3. Reactivos. Metanol pureza cromatogrfica. 4-Metil 2-Pentanol (Patrn interno). Etanol pureza cromatogrfica. 6.4. Procedimiento. 6.4.1. Condiciones cromatogrficas.- Como en 5.4.1. 6.4.2. Calibrado. 6.4.2.1. Patrn interno. Como en 5.4.2.1. 6.4.2.2. Solucin patrn. Preparar una solucin
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de Metanol en Etanol a 40, de concentracin similar a la esperada en la muestra. 6.4.2.3. Solucin de calibrado. A 10 ml de la solucin del patrn interno (6.4.2.2.), se le aade 1 ml de la solucin del patrn interno (6.4.2.1.) y se inyecta 1 l en el cromatgrafo. 6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3. 6.5. Clculo. Como en 5.5. 6.6. Referencia. Como en 5.6. 7. GRADO ALCOHOLICO 7.1. Principio Se determina por destilacin del producto y medida de la densidad del destilado por areometra. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Aparatos de destilacin como en 1.2. 7.2.2. Alcohmetro con graduacin de 0,1 de d 20/20 debidamente contrastado. 7.2.3. Termmetro con graduacin de 0,1C. 7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de dimetro interior y 320 mm de altura. 7.2.5. Bao termosttico a 20C. 7.3. Procedimiento. 7.3.1. Obtencin del destilado. Segn mtodo oficial nmero 1. 7.3.2. Determinacin areomtrica. Limpiar y secar el alcohmetro antes de su empleo. Echar el destilado en la probeta, inclinarla unos 45 para evitar la agitacin y las burbujas. Tapar la probeta con la palma de la mano, e invertirla 3 o 4 veces para igualar las temperaturas de la probeta y el lquido. Dejar que el alcohmetro, termmetro, probeta y destilado, alcance en el bao termostatizado la temperatura de 20C. Introducir el alcohmetro en el lquido de arriba a abajo 5 o 6 veces, de manera que alcance la misma temperatura y que se distribuya cualquier cambio de temperatura en todo el lquido. Mantener el bulbo del alcohmetro en el lquido, secar el vstago, dejarlo en reposo de modo que slo unas pocas dcimas de grados estn mojadas. Leer en el alcohmetro, luego en el termmetro. Para leer en la escala del alcohmetro situar el ojo justo debajo del plano de la superficie del lquido, levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual perpendicular al alcohmetro, hasta que la superficie vare de elipse a una lnea recta. Anotar el punto en que esta lnea intersecciona con la escala del alcohmetro, siendo sta la lectura del alcohmetro. Levantarlo ligeramente por encima de dicha lectura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el alcohmetro y en el termmetro, comprobando as las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohmetro con aproximacin de 0,05 y la del termmetro con 0,1. Sacar el alcohmetro y secarlo. Invertir la probeta con la muestra varias veces (el termmetro quede en su sitio), para que se equilibre trmicamente todo el conjunto. Volver a atemperar el alcohmetro, secar el vstago y realizar nuevas lecturas en el alcohmetro y en el termmetro. Los valores calculados son vlidos si tienen aproximacin de 0,1 grado alcohlico, si no fuera as, realizar lecturas adicionales y calcular la medida. 7.4. Clculo. El grado alcohlico real es el ledo en el destilado obtenido segn 7.3.1. Si en la obtencin del destilado, 100 ml de muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida, debe ser multiplicada por 2. 7.5. Referencia. 7.5.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1980-9015-9. 8. ALDEHIDOS 8.1. Principio. Reaccin de los aldehdos con sodio bisulfito. Oxidacin del cido sulfuroso con yodo y valoracin del exceso de yodo con sodio tiosulfato. 8.2. Material y aparatos. 8.2.1. Bureta de 25 ml graduada en dcimas de ml. 8.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 211642 Sodio Hidrgeno Sulfito solucin 40% p/v QP 182160 Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV 182161 Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV 8.3.1. Sodio Tiosulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV. 8.3.2. Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV 8.3.3. Disolucin de Sodio Bisulfito 0,05N. Diluir convenientemente Sodio Hidrgeno Sulfito solucin 40% p/v QP en Agua PA-ACS. 8.4. Procedimiento. Poner 100 ml del destilado (obtenido segn Mtodo oficial nmero 1) en un matraz de 500 ml de Agua PA-ACS y un exceso de la disolucin (8.3.3.) calculado de modo que equivalga, por lo menos, a 25 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. Dejar el matraz, bien tapado, durante treinta minutos, agitando de vez en vez. Aadir 50 ml de Yodo 0,025 mol/l (0,05N) SV. Valorar el exceso de yodo aadido con Sodio Tio-
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sulfato 0,05 mol/l (0,05N) SV hasta decoloracin completa. Debe hacerse simultneamente un ensayo en blanco, para comprobar en cada serie de ensayos la estabilidad de las soluciones de Yodo y Tiosulfato por ser tan diluidas. 8.5. Clculo. El contenido en aldehdos, expresado como acetaldehdo, vendr dado por la siguiente frmula: 1,1 x 100 Aldehdos (mg/100 ml - V1) x de alcohol absoluto) = (V2 A Siendo: V1 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en la muestra. V2 = volumen, en ml, de sodio tiosulfato gastado en el blanco. A = grado alcohlico. 8.6. Observaciones. 8.6.1. La solucin de sodio bisulfito tiene mayor tiempo de estabilidad si se le aade un 10% de alcohol. En cualquier caso esta solucin es estable, como mximo una semana. 8.7. Referencias. 8.7.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980-9052. 8.7.2. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-107-74. 9. ACIDEZ VOLATIL 9.1. Principio. Se define convencionalmente como la diferencia entre los valores de la acidez total y fija, expresadas ambas en mg de cido actico por 100 ml de alcohol absoluto. 9.2. Material y aparatos. 9.2.1. Bureta de 10 ml graduada en dcimas. 9.2.2. pH-metro. 9.2.3. Cpsulas de platino o porcelana. 9.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO
con la disolucin de Sodio Hidrxido (9.3.1.) a pH 8,2 utilizando el pH-metro. 9.4.2. Acidez fija. Evaporar, al bao Mara, en una cpsula (9.2.3.), 50 ml de la muestra, desecarla a 100 C durante treinta minutos. Disolver y transferir el residuo con varias porciones de Etanol absoluto PA (llevando previamente a pH 8,2) de una graduacin similar a la muestra usando 50 ml de Etanol absoluto PA en total. Valorar con la disolucin de Sodio Hidrxido (9.3.1.) a pH = 8,2 utilizando el pH-metro. 9.5. Clculo. V1 x 1,2 x 100 9.5.1. Acidez fija (en mg/100 ml de etanol absoluto) = A Siendo: V1 = volumen, en ml, de sodio hidrxido empleados en 9.4.1. A = grado alcohlico de la muestra. V2 x 1,2 x 100 9.5.2. Acidez fija ( en mg/100 ml de etanol absoluto) = A Siendo: V2 = volumen, en ml, de sodio hidrxido empleados en 9.4.2. A = grado alcohlico de la muestra. 9.5.3. El valor de la acidez voltil, expresado en mg de cido actico por 100 ml de etanol absoluto, vendr dado por la frmula : Acidez voltil = acidez total - acidez fija. 9.6. Referencia. 9.6.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1980-9046-9048. 10. AZUCARES REDUCTORES 10.1 Principio. Eliminacin previa de todas las materias reductoras distintas de los azcares reductores por defecacin y posterior valoracin basada en la accin reductora de los azcares sobre una solucin cupro-alcalina. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigeracin de reflujo. 10.2.2. Material necesario para volumetra. 10.2.3. Bao de agua. 10.3. Reactivos. 131808 Acido Ctrico anhidro PA-ACS 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO
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9.3.1. Disolucin de Sodio Hidrxido 0,01N. Diluir convenientemente Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 9.3.2. Etanol absoluto PA. 9.4. Procedimiento. 9.4.1. Acidez total. Valorar 50 ml de la muestra
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131074 171096 121212 131270 211835 131466 131542 122032 131659 181691 181723 Agua PA-ACS Almidn soluble RE Calcio Carbonato precipitado PA Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO Piedra Pmez grnulos QP Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Potasio Yoduro PA-ISO Sodio Carbonato 1-hidrato PA Sodio Cloruro PA-ACS-ISO Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 25% y 2 ml de Engrudo de Almidn. A continuacin valorar con Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV. Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los 25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PAACS y tratar como se ha indicado para la muestra. 10.5. Clculo. La cantidad de azcar, expresada en azcares reductores contenida en la muestra analizada, se obtiene en la tabla adjunta en funcin del nmero n - n de ml de tiosulfato utilizado. Siendo: n = volumen, en ml, de solucin de sodio tiosulfato 0,1 N, utilizados para la valoracin de la muestra. n = volumen, en ml, de solucin de sodio tiosulfato 0,1 N, utilizados en la prueba en blanco. Expresar el contenido en gramos de azcares reductores por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecacin del volumen de la muestra analizada. 10.6. Referencia. 10.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. O. I. V. A4e 106-107 (defecacin y 126-127 (valoracin).
10.3.1. Solucin de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO (aproximadamente saturada). Aadir a 250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO, Agua PA-ACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolucin completa. 10.3.2. Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. 10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA. 10.3.4. Solucin cupro-alcalina. Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Ctrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PAACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en 300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la solucin de Cobre Sulfato y completar el volumen con Agua PA-ACS hasta un litro. 10.3.5. Solucin de Potasio Yoduro al 30%. Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO con Agua PA-ACS. Conservar en frasco topacio. 10.3.6. Solucin de Acido Sulfrico al 25 % en volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfrico 96% PA-ISO en Agua PA-ACS. 10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1mol/l (0,1N) SV. 10.3.8. Engrudo de almidn de 5 g/l. Diluir convenientemente 5 g de Almidn soluble RE en 1 l de Agua PA-ACS; contendr 200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurar su conservacin. Esta solucin debe ser mantenida diez minutos en ebullicin en el momento de su preparacin. 10.4. Procedimiento. 10.4.1. Defecacin plmbica. Llevar 100 ml de ron a un matraz aforado de 125 ml. Aadir agitando 5 ml de solucin saturada de Plomo II Acetato y 1 g de Calcio Carbonatado precipitado PA, agitar varias veces y dejar sedimentar, por lo menos quince minutos, enrasar con Agua PA-ACS, aadir 0,6 ml ms de Agua PA-ACS y filtrar. 10.4.2. Valoracin. Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solucin cuproalcalina y 25 ml de ron previamente defecado. Aadir unos gramos de Piedra Pmez granulos QP y llevar a ebullicin, que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptando a Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener exactamente durante diez minutos la ebullicin. Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua fra. Aadir 10 ml de la solucin de Potasio Yoduro al 30%, 25 ml de la solucin de Acido Sulfrico al
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ml sodio tiosulfato 0,1N
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TABLA 10.I Azcares reductores expresados en mg de glucosa Primera cifra decimal 0 0,0 3,2 6,4 9,7 13,0 16,4 19,8 23,2 26,6 30,0 33,4 36,8 40,3 43,8 47,3 50,8 54,3 58,0 61,8 65,5 69,4 73,3 77,2 81,2 85,2 89,2 1 0,3 3,5 6,7 10,0 13,3 16,7 20,1 23,5 26,9 30,3 33,7 37,2 40,7 44,2 47,7 51,2 54,7 58,4 62,2 65,9 69,8 73,7 77,6 81,6 85,6 89,6 2 0,6 3,8 7,1 10,4 13,7 17,1 20,5 23,9 27,3 30,7 34,1 37,5 41,0 44,5 48,0 51,5 55,0 58,8 62,5 66,3 70,2 74,1 78,0 82,0 86,0 90,0 3 1,0 4,2 7,4 10,7 14,0 17,4 20,8 24,2 27,6 31,0 34,4 37,9 41,4 44,9 48,4 51,9 55,4 59,1 62,9 66,7 70,6 74,5 78,4 82,4 86,4 90,4 4 1,3 4,5 7,7 11,0 14,4 17,8 21,2 24,6 28,0 31,3 34,8 38,2 41,7 45,2 48,7 52,2 55,8 59,5 63,3 67,1 71,0 74,9 78,8 82,8 86,8 90,8 5 1,6 4,8 8,1 11,4 14,7 18,1 21,5 24,9 28,3 31,7 35,1 38,6 42,1 45,6 49,1 52,6 56,2 59,9 63,7 67,5 71,4 75,3 79,2 83,2 87,2 91,2 6 1,9 5,1 8,4 11,7 15,0 18,4 21,8 25,2 28,6 32,0 35,4 38,9 42,4 45,9 49,4 52,9 56,5 60,3 64,0 67,8 71,7 75,6 79,6 83,6 87,6 91,6 7 2,2 5,4 8,7 12,0 15,4 18,8 22,2 25,6 29,0 32,4 35,8 39,3 42,8 46,3 49,8 53,3 56,9 60,7 64,4 68,2 72,1 76,0 80,0 84,0 88,0 92,0 8 2,6 5,7 9,0 12,3 15,7 19,1 22,5 25,9 29,3 32,7 36,1 39,6 43,1 46,6 50,1 53,6 57,3 61,0 64,8 68,6 72,5 76,4 80,4 84,4 88,4 92,4 9 2,9 6,1 9,4 12,7 16,1 19,5 22,9 26,3 29,7 33,0 36,5 40,0 43,5 47,0 50,5 54,0 57,6 61,4 65,1 69,0 72,9 76,8 80,8 84,8 88,8 92,8 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
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11. PLOMO 11.1. Principio. Determinacin del plomo por A.A., previa mineralizacin de la muestra. 11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 11.2.2. Lmpara de plomo. 11.2.3. Cpsulas de platino, cuarzo o similar. 11.2.4. Bao de arena o placa calefactora con regulacin de temperatura o estufa con control de temperatura en el rango de 50 a 150 C. 11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de vitrina de extraccin de humos. 11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1000 ml de capacidad. 11.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 11.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 11.3.2. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 11.3.3. Acido Ntrico al 1% en Agua PA-ACS (v/v). 11.3.4. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,589 g de 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000 ml con Acido Ntrico al 1%. 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Preparacin de la muestra. Poner 100 ml de la muestra en la cpsula (11.2.3.), llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena (11.2.4.). Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el bao de arena o placa. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450 C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el bao de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrn-rojizo en las cenizas (posiblemente de Fe2O3 ) es aceptado y no requiere un tratamiento posterior. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS. Llevar la solucin a un matraz de 10 ml, lavar la cpsula con Agua PA-ACS y aadir las aguas de lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente. 11.4.2. Construccin de la curva de patrn. Diluir alcuotas apropiadas de la solucin patrn (11.3.4.) con Acido Ntrico al 1% (v/v) para obtener una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l. 11.4.3. Determinacin. Operar segn las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solucin est muy concentrada diluirla con Acido Ntrico al 1%. 11.5. Clculo. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor de concentracin o dilucin. 11.6. Referencia. 11.6.1. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pg 134 (I), 1976. 12. ZINC 12.1. Principio. Determinacin del zinc por A.A. previa mineralizacin de la muestra. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 12.2.2. Lmpara de zinc. 12.2.3. Los utilizados para el plomo en 11.2.3., 11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6. 12.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA 12.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1., 11.3.2. y 11.3.3. 12.3.2. Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc metal granalla PRS en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1% (v/v). 12.4. Procedimiento. 12.4.1. Preparacin de la muestra. Como en 11.4.1. 12.4.2. Construccin de la curva patrn. Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (12.3.2.) con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones de 0,2; 1; 1,5 y 2 mg/l. 12.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. La lectura se efectuar a 213,8 nm. 12.5. Clculo. Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zn para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentracin o dilucin.
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12.6. Referencia. 12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963),13. 13. COBRE 13.1. Principio. Determinacin del cobre por A.A., mineralizacin por cenizas a < 450 C y concentracin previa a la lectura con objeto de conseguir resultados suficientemente precisos. 13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 13.2.2. Lmpara de cobre. 13.2.3. Los utilizados para el plomo, en 11.2.3., 11.2.4., 11.2.5. y 11.2.6. 13.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 313193 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 13.3.1. Los utilizados para el plomo en 11.3.1., 11.3.2. y 11.3.3. 13.3.2. Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1% (v/v). 13.4. Procedimiento. 13.4.1. Preparacin de la muestra. Como en 11.4.1. 13.4.2. Construccin de la curva patrn. Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (13.3.2.) con Acido Ntrico del 1%, para obtener soluciones que contengan de 1 a 5 mg de Cu/l. 13.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. Medir a 324,7 nm. 13.5. Clculo. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrn las concentraciones de cobre de la muestra. 13.6. Referencia. 13.6.1. H. E. Parker Atomic Absorption Newsletter (1963),13. 13.6.2. F. Rousselet Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin. Edicin Pars (1968), pginas 59-144.
14. ARSENICO 14.1. Principio. La muestra se somete a una digestin cida con una mezcla de cido ntrico y sulfrico. La determinacin del arsnico se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica, con generador de hidruros. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de 0,1 g. 14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de capacidad. 14.2.3. Pipetas de doble aforo. 14.2.4. Matraces Kjedahl de 250 ml. 14.2.5. Espectrofotmetro de absorcin atmica equipado con sistema generador de hidruros. 14.2.6. Lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.7. Fuente de alimentacin para lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.8. Registrador grfico. 14.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO 131036 Acido Ntrico 60% PA-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313171 Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 123314 Sodio Borohidruro PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 14.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 14.3.2. Disolucin de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1000 ml. 14.3.4. Acido Ntrico 60% PA-ISO. 14.3.5. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 14.3.6. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1%. Pesar 1 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.7. Disolucin de Sodio Borohidruro al 3%. Pesar 3 g de Sodio Borohidruro PA y disolverlo hasta 100 ml con Sodio Hidrxido al 1%. 14.3.8. Disolucin al 1% de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS. 14.3.9. Disolucin de Potasio Hidrxido al 20%. Pesar 20 g de Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO
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y disolverlo con Agua PA-ACS hasta el volumen de 100 ml. 14.3.10. Disolucin de Acido Sulfrico al 20% (v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.11. Disolucin de Acido Sulfrico al 1% (v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.12. Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsnico III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidrxido al 20% (14.3.9), neutralizar con Acido Sulfrico al 20% (14.3.10), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfrico 1% (14.3.11.). 14.3.13. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (14.3.12.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.3.14. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 0,1mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (14.3.13.) en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.4. Procedimiento. 14.4.1. Preparacin de la muestra. En un matraz Kjeldahl, de 250 ml, introducir 10 ml de muestra con 20 ml de Acido Ntrico (14.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfrico (14.3.5.). Llevar a ebullicin hasta reducir el volumen a 5ml Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la solucin resultante. 14.4.2. Preparacin del blanco y patrones de trabajo. En un matraz Kjedahl, introducir 5 ml de la solucin de Arsnico (14.3.14.), y someterlo al mismo tratamiento que la muestra. Un ml de la solucin contiene 10 nanogramos de Arsnico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra. 14.4.3. Condiciones del espectrofotmetro. Encender la fuente de alimentacin de las lmparas de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para que se estabilice la energa de la lmpara. Encender el espectrofotmetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la celda a 900C, esperando hasta que se alcance dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del generador de hidruros segn las especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de argn de acuerdo con las caractersticas del aparato. Encender el registrador. 14.4.4. Determinacin. Las determinaciones de la concentracin de Arsnico se realizan por el mtodo de adicin de patrones por medio de medidas duplicadas en el espectrofotmetro en las condiciones especificadas en 14.4.3., aadiendo al matraz de reaccin 3 ml de la solucin 14.4.1., ms 3 ml de la solucin 14.3.2. y 10 ml de la solucin 14.3.8. Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As. Lavar los matraces antes y despus de cada uso, con Acido Clorhdrico (14.3.3.). Al construir la grfica de adicin hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las mismas condiciones anteriores, pero aadiendo 3 ml de la solucin blanco. En estas condiciones el lmite de deteccin de la tcnica es de 5 ng. 15. SACAROSA 15.1. Principio. La sacarosa se determina por la diferencia de los poderes reductores antes y despus de la hidrlisis clorhdrica del lquido procedente de la defecacin del ron. 15.2. Reactivos 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 15.2.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 15.2.2. Sodio Hidrxido 12 N. Diluir convenientemente Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS 15.3 Procedimiento. Poner en dos matraces Erlenmeyer, de 200 ml cada uno, el mismo volumen del lquido defecado segn el mtodo oficial nmero 10. Aadir a cada matraz 0,3 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO, por cada 10 ml de lquido defecado. En uno de los matraces aadir inmediatamente 0,3 ml de Sodio Hidrxido 12 N, por cada 10 ml de lquido defecado, procediendo a la valoracin de los azcares reductores segn el mtodo oficial nmero 10. Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a bao de agua hirviendo durante 3 minutos. Aadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidrxido 12 N que al otro matraz y valorar como en el caso anterior. 15.4. Clculo. La diferencia entre las cantidades de azcares reductores encontrada en los resultados de estas dos valoraciones, multiplicada por 0,95 de la riqueza en sacarosa de la muestra de estudio. Este resultado se expresa en g/l de ron teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmente en el curso de la defecacin y del volumen de la muestra de ron que se someti a la defecacin. 15.5. Referencia. 15.5.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. O. I. V. AS, 4, 1969.
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Aguardientes compuestos: Ginebra
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METODOS DE ANALISIS 1. OBTENCION DEL DESTILADO 1.1. Principio. Destilacin de la muestra en condiciones determinadas. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad, de fondo redondo y boca esmerilada. 1.2.2. Alargadera tipo Kjedahl o similar. 1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de longitud) o similar. 1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de capacidad. 1.2.5. Manta elctrica o mechero de gas. 1.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 1.3.1. Agua PA-ACS. 1.4. Procedimiento. 1.4.1. Muestras con menos de 60% de etanol. Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que antes de enrasar se mantiene en bao de agua a 20C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiando el interior del cuello del matraz de posibles gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse que queden burbujas de aire adheridas a las paredes del matraz. Pasar cuantitativamente el volumen medido al matraz de destilacin lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-ACS cada vez, aadiendo las aguas de lavado al matraz de destilacin. Cuando se trate de bebidas siruposas, por su gran contenido en azcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente con tres proporciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Proceder a la destilacin. Es conveniente aadir bolitas de vidrio para facilitar la ebullicin suave. En algunos casos, si se teme la formacin de espuma, aadir un antiespumante inerte (como silicona). El matraz de recogida del destilado es el mismo en que se efectu la medida. Se le aaden 10 ml de Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado, de forma que el destilado resbale por la pared sin salpicadura, dentro de un bao de hielo o agua fra a menos de 10C. El refrigerante debe ir dotado de una alargadera que penetre, por lo menos, 4-6 cm en el cuello del matraz. Cuando se hayan recogido, aproximadamente, 190 ml, llevar el matraz tapado al bao de agua a 20C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo bao, enrasar con Agua PA-ACS mediante pipeta. Tapar el matraz e invertirlo varias veces para homogeneizar su contenido antes de proceder a la determinacin del etanol. 1.4.2. Muestras con ms del 60% de etanol. El procedimiento anteriormente descrito difiere nicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua PA-ACS hasta alcanzar un volumen de, aproximadamente, 230 ml. El destilado se recoge en matraz aforado de 200 ml y se enrasa con Agua PA-ACS dentro del bao de agua a 20C. 1.5. Observaciones. 1.5.1. El sistema de destilacin debe comprobarse en ambos casos como sigue: Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohlica al 10% en volumen cinco veces consecutivas. Determinar en la ltima destilacin el ttulo alcoholimtrico del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de etanol. 1.5.2. La destilacin debe efectuarse procurando que el flujo del destilado sea uniforme. 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estar comprendido entre cuarenta y cinco y noventa minutos. 1.6. Referencia. 1.6.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-112-75. 2. FURFUROL (Furfuraldehdo) 2.1. Principio. El furfurol se combina con la anilina en presencia del cido actico para dar un compuesto de color rojo. 2.2. Reactivos. 131008 Acido Actico glacial PA-ACS-ISO 141156 Anilina PRS 2.2.1. Acido Actico glacial PA-ACS-ISO. 2.2.2. Anilina PRS recientemente destilada. Al destilar debe pasar, como mnimo, un 95% entre 183C y 185C. 2.3. Procedimiento. Poner 10 ml de destilacin de ginebra (obtenido segn el mtodo oficial nmero 1) o la ginebra directamente, si no contiene ni extracto ni color, en un tubo de tapn esmerilado. Aadir 0,5 ml de Anilina PRS y 2 ml de Acido Actico glacial PA-ACSISO. Agitar. 2.4. Clculo. Si antes de veinte minutos no aparece ninguna coloracin rosa salmn, la muestra se considera exenta de furfurol.
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2.5. Referencia. 2.5.1. Codex Oenologique International. OIV. 3. EXTRACTO SECO 3.1. Principio. Evaporacin de la muestra a 105C y pesada posterior del residuo. 3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Estufa de aire regulable de 95C a 105C. 3.2.2. Cpsulas de platino o cuarzo de fondo plano, de 77 mm de dimetro interno y 18 mm de altura. 3.2.3. Desecador de vidrio que contenga 141058 Acido Sulfrico 95-98% (USP-NF,BP) PRSCODEX o 211335 Gel de Slice 3-6 mm con indicador QP. 3.2.4. Bao de agua. 3.2.5. Balanza analtica. 3.3. Procedimiento. Medir 25 ml de muestra a 20C. Evaporar a sequedad, en cpsulas correspondientes previamente desecadas y taradas, en bao de agua hirviente y mantener la estufa a 105C durante treinta minutos. Dejar enfriar las cpsulas en el interior del desecador y una vez fras pesar en la balanza. 3.4. Clculo. El valor del extracto total de la muestra, en gramos por litro, se hallar mediante la frmula siguiente: Extracto total (g/l) = (M - m) x 40 Siendo: M = Peso en g de la cpsula con el extracto seco. m = Peso en g de la cpsula vaca. 3.5. Referencia. 3.5.1. Instituto Espaol de Normalizacin. UNE 33-106-74. 4. BASES NITROGENADAS 4.1. Principio. Fijacin del amonaco y las bases nitrogenadas mediante cido fosfrico, seguida de una primera destilacin. Liberacin del amonaco y las bases nitrogenadas con sodio hidrxido, segunda destilacin y posterior valoracin con cido clorhdrico del segundo destilado. El lmite de deteccin del mtodo es de 1 mg/l.
4.2. Material y aparatos. 4.2.1. Matraz de 200 ml de capacidad. 4.2.2. Segn (1.2.2.), (1.2.3.), (1.2.4.) y (1.2.5.). 4.3. Reactivos. 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 121660 Acido orto-Fosfrico 50% PA 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 171688 Sodio Hidrxido solucin 10% p/v RE 4.3.1. Acido orto-Fosfrico 50% PA. 4.3.2. Sodio Hidrxido solucin 10% p/v RE. 4.3.3. Solucin de Acido Clorhdrico 0,01N. Diluir convenientemente Acido Clorhdrico 35% PAISO en Agua PA-ACS. 4.3.4. Solucin de Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS, disolver con 50 ml de Etanol absoluto PA al 90% de volumen. 4.4. Procedimiento. En un matraz de 200 ml, introducir 50 ml de muestra, adicionar 40 ml de Agua PA-ACS y dos gotas de Acido orto-Fosfrico 50% PA; destilar y desechar los primeros 80 ml. Enfriar el matraz y al residuo fro adicionar 2 ml de Sodio Hidrxido solucin 10% p/v RE (o 20 ml de solucin de sodio hidrxido al 1%, si hay proyecciones). Destilar de nuevo recogiendo alrededor de 7 ml de destilado en un tubo de ensayo en el que previamente se han introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gota de solucin de Rojo de Metilo, procurando que el destilado caiga en el fondo del tubo con la ayuda de una alargadera. Valorar a continuacin con una solucin de Acido Clorhdrico 0,01N hasta que el indicador vire a rojo. 4.5. Clculo. Nitrgeno (mg de nitrgeno/litro) = 2,8 n. Siendo: n = volumen, en ml, de solucin de cido clorhdrico, 0,01N gastados en la valoracin. 4.6. Referencia. 4.6.1. Codex Oenologique International. OIV, 1978, pg. 17. 5. ALCOHOLES SUPERIORES 5.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin de los alcoholes al etanol, por cromatografa de gases. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Cromatgrafo de gases equipado con detector de ionizacin de llama.
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5.2.2. Columna cromatogrfica. Columna de 4 m de longitud de 1/8 de dimetro interno rellena de Carbowax 1500 al 15% sobre Chromosorb W 80-100 mallas, lavado a los cidos. 5.2.3. Microjeringas de 5 l. 5.3. Reactivos. 5.3.1. Patrones cromatogrficos: 353851 2-Butanol CG 351885 1-Propanol CG 354330 iso-Butanol CG 131082 1-Butanol PA-ACS-ISO 354539 2-Metil-1-Butanol CG 351079 3-Metil-1-Butanol CG 352516 4-Metil-2-Pentanol CG 5.3.2. Etanol pureza cromatogrfica. 5.4. Procedimiento. 5.4.1. Condiciones cromatogrficas. Las condiciones cromatogrficas orientativas son : Gas portador nitrgeno 20 ml/min., temperatura del horno 85C, temperatura del inyector y del detector 150C. 5.4.2. Calibrado. 5.4.2.1. Patrn interno: Solucin de 5 g/l en Etanol de 40 de 4-Metil-2-Pentanol. 5.4.2.2. Solucin patrn: Preparar una solucin en alcohol de 40 en las proporciones que se indican en la tabla 1. 5.4.2.3. Solucin de calibrado: A 10 ml de la solucin patrn (5.4.2.2.) se le aade 1 ml de la solucin patrn interno (5.4.2.1.) y se inyecta 1l en el cromatgrafo. 5.4.3. Muestra problema. A 10 ml de la muestra llevada a 40 se le aade 1 ml de patrn interno (5.4.2.1.) e inyectar un l en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado. 5.5. Clculo. Una vez identificados los picos por sus retenciones relativas al patrn interno se calculan los factores de respuesta para cada uno de ellos y las concentraciones en la muestra problema aplicando las frmulas: Ap Factor de respuesta (Fr) = Ci x Ai Aim Concentracin en la muestra (mg/l) = Fr x x f Apm Siendo: Ci = concentracin del compuesto en la solucin patrn. Ap = rea del patrn interno en la solucin patrn. Ai = rea del compuesto en la solucin patrn. TABLA 1 Compuesto Concentracin (mg/l) 2-Butanol 10 1-Propanol 125 2-Metil-1-Propanol 175 1- Butanol 15 2-Metil-1-Butanol 100 3-Metil-1-Butanol 300 Aim = rea del compuesto en la muestra problema. Apm = rea del patrn interno en la muestra problema. f = factor de dilucin de la muestra. El contenido en alcoholes superiores vendr dado por la suma de los valores individuales obtenidos de cada uno de ellos y se expresar en mg/100 ml de alcohol absoluto. 5.6. Referencia. 5.6.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980, 9075.
6. METANOL (Alcohol Metlico) 6.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del metanol por cromatografa gaseosa. 6.2. Material y aparatos. Como en 5.2. 6.3. Reactivos 6.3.1. Metanol pureza cromatogrfica 6.3.2. 4-Metil-2-Pentanol (patrn interno) 6.3.3. Etanol pureza cromatogrfica 6.4. Procedimiento. 6.4.1. Condiciones cromatogrficas. Como en 5.4.1. 6.4.2. Calibrado. 6.4.2.1. Patrn interno. Como en 5.4.2.1. 6.4.2.2. Solucin patrn. Preparar una solucin de Metanol pureza cromatogrfica a 40C, de concentracin similar a la esperada en la muestra. 6.4.2.3. Solucin de calibrado. A 10 ml de la solucin patrn (6.4.2.2.) se le aade 1 ml de la solucin del patrn interno (6.4.2.1.) y se inyecta 1 l en el cromatgrafo. 6.4.3. Muestra problema. Como en 5.4.3.
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6.5. Clculo. Como en 5.5. 6.6. Referencia. 6.6.1. Association of Official Agricultural Chemists 1980, 9075. 7. GRADO ALCOHOLICO 7.1. Principio. Se determina por destilacin del producto y medida de la densidad del destilado por areometra. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Aparatos de destilacin como en 1.2. 7.2.2. Alcohmetro con graduacin de 0,1C de d 20/20 debidamente contrastado. 7.2.3. Termmetro con graduacin de 0,1C. 7.2.4. Probeta transparente de 36 mm de dimetro interior y 320 mm de altura. 7.2.5. Bao termosttico a 20C. 7.3 Procedimiento. 7.3.1. Obtencin del destilado. Segn mtodo oficial nmero 1. 7.3.2. Determinacin areomtrica. Limpiar y secar el alcohmetro antes de su empleo. Echar el destilado en la probeta, inclinar a unos 45 para evitar la agitacin y las burbujas. Tapar la probeta con la palma de la mano, e invertirla tres o cuatro veces para igualar las temperaturas de la probeta y del lquido. Dejar que el alcohmetro, termmetro, probeta y destilado, alcance en el bao termostatizado la temperatura de 20C. Introducir el alcohmetro en el lquido de arriba a abajo cinco o seis veces, de manera que alcance la misma temperatura y que se distribuya cualquier cambio de temperaturas en todo el lquido. Mantener el bulbo del alcohmetro en el lquido, secar el vstago, dejarlo en reposo de modo que slo unas pocas dcimas de grados estn mojadas. Leer en el alcohmetro, luego en el termmetro. Para leer en la escala del alcohmetro situar el ojo justo debajo del plano de la superficie del lquido, levantar lentamente la cabeza manteniendo la visual perpendicular al alcohmetro, hasta que la superficie vare de elipse a una lnea recta. Anotar el punto en que esta lnea intersecciona con la escala del alcohmetro, siendo sta la lectura del alcohmetro. Levantarlo ligeramente por encima de dicha lectura y dejarlo en reposo de nuevo. Volver a leer en el alcohmetro y en el termmetro, comprobando as las primeras lecturas. Hacer la lectura del alcohmetro con aproximacin de 0,05 y la del termmetro con 0,1. Sacar el alcohmetro y secarlo. Invertir la probeta con la muestra varias veces (el termmetro queda en su sitio), para que se equilibre trmica-
mente todo el conjunto. Volver a atemperar el alcohmetro, secar el vstago y realizar nuevas lecturas en el alcohmetro y en el termmetro. Los valores calculados son vlidos si tienen aproximacin de 0,1 grado alcohlico, si no fuera as, realizar lecturas adicionales y calcular la media. 7.4. Clculo. El grado alcohlico real es el ledo en el destilado segn 7.3.1. Si en la obtencin del destilado, 100 ml de muestra se destilaron hasta 200 ml, la lectura obtenida, debe ser multiplicada por 2. 7.5. Referencia. 7.5.1. Association of Official Analytical Chemists. Edicin 1980-9015-9 8. SACAROSA 8.1. Principio. La sacarosa se determina por la diferencia de los poderes reductores antes y despus de la hidrlisis clorhdrica del lquido procedente de la defecacin de la ginebra. 8.2. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 8.2.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 8.2.2. Sodio Hidrxido 12N. Diluir convenientemente Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS 8.3. Procedimiento. Poner en dos matraces Erlenmeyer de 200 ml cada uno, el mismo volumen del lquido defecado segn el mtodo oficial nmero 10. Aadir a cada matraz 0,3 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACSISO por cada 10 ml de lquido defecado. En uno de los matraces, aadir inmediatamente 0,3 ml de Sodio Hidrxido 12N, por cada 10 ml de lquido defecado, procediendo a la valoracin de los azcares reductores, segn el mtodo oficial nmero 10. Llevar el otro matraz con el contenido sin neutralizar a bao de agua hirviendo durante tres minutos. Aadir entonces el mismo volumen de Sodio Hidrxido 12N que al otro matraz y valorar como en el caso anterior. 8.4. Clculo. La diferencia entre las cantidades de azcares reductores encontrada en los resultados de estas dos valoraciones, multiplicadas por 0,95, da la riqueza en sacarosa de la muestra de estudio.
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Este resultado se expresa en g/l de ginebra, teniendo presentes las diluciones efectuadas eventualmente en el curso de la defecacin y del volumen de la muestra de ginebra que se someti a la defecacin. 8.5. Referencia. 8.5.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. OIV, A5, 4. 1968. 9. ACIDEZ TOTAL 9.1. Principio. La acidez total de la ginebra se considera como la suma de los cidos titulables cuando se lleva la ginebra a pH=7 por adicin de un licor alcalino valorado. El cido carbnico no se considera comprendido en la acidez total. El gas carbnico se elimina previamente de la ginebra por agitacin en fro y con vaco parcial. 9.2. Material y aparatos. 9.2.1. Potencimetro con electrodo de vidrio. 9.2.2. Agitador magntico 9.2.3. Kitasato de un litro. 9.3. Reactivos 131074 Agua PA-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 9.3.1. Disolucin de Sodio Hidrxido 0,01N recientemente preparada. 9.4. Procedimiento. Poner 150 ml de ginebra en un Kitasato de 1 l de capacidad, conectar al vaco agitando al mismo tiempo el matraz. El desprendimiento de CO2 se aprecia a los pocos momentos. Observar atentamente el momento en que dejan de desprenderse las burbujas, desconectar del vaco. Tomar 100 ml de la ginebra sin CO2 y llevar a un vaso de unos 250 ml de capacidad, introducir el electrodo del vidrio en la ginebra. Poner en marcha el agitador procurando que no se formen burbujas y aadir desde bureta solucin de Sodio Hidrxido (9.3.1.) a la ginebra hasta que la aguja del potencimetro marque pH=7, manteniendo el agitador en marcha durante la operacin, que no debe durar ms de cinco minutos. 9.5. Clculo. Calcular la acidez total expresada en meq/l con una aproximacin de 0,1 meq/l o en mg de cido actico. Acidez total = 6 v mg cido actico /l v = volumen en ml de sodio hidrxido 0,01N. 9.6. Referencias. 9.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. OIV, A 10, 1 3, 1969. 9.6.2. Jaulmes, P.: La mesure de lacidit total des Vins. Annal des Falsifications et des Fraudes, 556, 1955. 10. MATERIAS REDUCTORAS (Azcares reductores) 10.1. Principio. Eliminacin previa de todas las materias reductoras distintas de los azcares por defecacin y posterior valoracin basada en la accin reductora de los azcares sobre una solucin cupro-alcalina. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Erlenmeyer de 300 ml con refrigerante de reflujo. 10.2.2. Material necesario para volumetra. 10.2.3. Bao de agua. 10.3. Reactivos. 131808 Acido Ctrico anhidro PA-ACS 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121212 Calcio Carbonato precipitado PA 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 211835 Piedra Pmez grnulos QP 131466 Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 122032 Sodio Carbonato 1-hidrato PA 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 181691 Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 10.3.1. Solucin de Plomo II Acetato 3-hidrato (aproximadamente saturada). Aadir a 250 g de Plomo II Acetato 3-hidrato PA-ACS-ISO Agua PAACS caliente hasta 0,5 l y agitar hasta disolucin completa. 10.3.2. Sodio Hidrxido 1 mol/l (1N) SV. 10.3.3. Calcio Carbonato precipitado PA. 10.3.4. Solucin cupro-alcalina. Disolver por separado: 25 g de Cobre II Sulfato 5-hidrato PAACS-ISO en 100 ml de Agua PA-ACS; 50 g de Acido Ctrico anhidro PA-ACS en 300 ml de Agua PAACS y 388 g de Sodio Carbonato 1-hidrato PA en 300-400 ml de Agua PA-ACS caliente. Mezclar la solucin de Cobre Sulfato y completar el volumen con Agua PA-ACS hasta 1 l. 10.3.5. Solucin de Potasio Yoduro al 30%. Diluir convenientemente Potasio Yoduro PA-ISO en Agua PA-ACS. Conservar el frasco en topacio. 10.3.6. Solucin de Acido Sulfrico 25% en volumen. Diluir convenientemente Acido Sulfrico 96% PA-ISO en Agua PA-ACS.
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10.3.7. Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. 10.3.8. Engrudo de almidn de 5 g/l; contendr 200 g/l de Sodio Cloruro PA-ACS-ISO para asegurar su conservacin. Esta solucin debe ser mantenida diez minutos en ebullicin en el momento de su preparacin. 10.4. Procedimiento. 10.4.1. Defecacin plmbica. Llevar 100 ml de ginebra a un matraz aforado de 125 ml. Aadir agitando 5 ml de solucin saturada de Plomo II Acetato 3-anhidro PA-ACS-ISO y 1 g de Calcio Carbonato precipitado PA, agitar varias veces y dejar sedimentar, por lo menos quince minutos, enrasar con Agua PA-ACS, aadir 0,6 ml ms de agua y filtrar. 10.4.2. Valoracin. Poner en el Erlenmeyer de 300 ml 25 ml de la solucin cupro-alcalina y 25 ml de ginebra previamente defecado. Aadir unos gramos de Piedra Pmez QP y llevar a ebullicin, que debe ser alcanzada en dos minutos, adaptando el Erlenmeyer al refrigerante de reflujo y mantener exactamente durante diez minutos la ebullicin. Enfriar inmediatamente bajo corriente de agua fra. Aadir 10 ml de la solucin de Potasio Yoduro al 30%, 25 ml de la solucin de Acido Sulfrico al 25% y 2 ml de Engrudo de Almidn. A continuacin
ml sodio tiosulfato 0,1N
valorar con Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. Efectuar una prueba en blanco, sustituyendo los 25 ml de muestra, por igual volumen de Agua PAACS y tratar como se ha indicado para la muestra. 10.5. Clculo. La cantidad de azcar, expresada en azcares reductores contenida en la muestra analizada, se obtiene en la tabla adjunta en funcin del nmero n-n de ml de tiosulfato utilizado. Siendo: n = volumen, en ml, de solucin de sodio tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados en la valoracin de la muestra. n = volumen, en ml, de solucin de sodio tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) utilizados para la prueba en blanco. Expresar el contenido en gramos de azcares reductores por litro, teniendo en cuenta las diluciones efectuadas en el curso de la defecacin del volumen de la muestra analizada. 10.6. Referencia. 10.6.1. Recueil des Mthodes Internationales dAnalyses des Vins. OIV, A4e, 106-107 (defecacin) y 126-127 (valoracin).
Primera cifra decimal 0 0,0 3,2 6,4 9,7 13,0 16,4 19,8 23,2 26,6 30,0 33,4 36,8 40,3 43,8 47,3 50,8 54,3 58,0 61,8 65,5 69,4 73,3 77,2 81,2 85,2 89,2 1 0,3 3,5 6,7 10,0 13,3 16,7 20,1 23 5 26,9 30,3 33,7 37,2 40,7 44,2 47,7 51,2 54,7 58,4 62,2 65,9 69,8 73,7 77,6 81,6 85,6 89,6 2 0,6 3,8 7,1 10,4 13,7 17,1 20,5 23,9 27,3 30,7 34,1 37,5 41,0 44,5 48,0 51,5 55,0 58,8 62,5 66,3 70,2 74,1 78,0 82,0 86,0 90,0 3 1,0 4,2 7,4 10,7 14,0 17,4 20,8 24,2 27,6 31,0 34,4 37,9 41,4 44,9 48,4 51,9 55,4 59,1 62,9 66,7 70,6 74,5 78,4 82,4 86,4 90,4 4 1,3 4,5 7,7 11,0 14,4 17,8 21,2 24,6 28,0 31,3 34,8 38,2 41,7 45,2 48,7 52,2 55,8 59,5 63,3 67,1 71,0 74,9 78,8 82,8 86,8 90,8 5 1,6 4,8 8,1 11,4 14,7 18,1 21,5 24,9 28,3 31,7 35,1 38,6 42,1 45,6 49,1 52,6 56,2 59,9 63,7 67,5 71,4 75,3 79,2 83,2 87,2 91,2 6 1,9 5,1 8,4 11,7 15,0 18,4 21,8 25,2 28,6 32,0 35,4 38,9 42,4 45,9 49,4 52,9 56,5 60,3 64,0 67,8 71,7 75,6 79,6 83,6 87,6 91,6 7 2,2 5,4 8,7 12,0 15,4 18,8 22,2 25,6 29,0 32,4 35,8 39,3 42,8 46,3 49,8 53,3 56,9 60,7 64,4 68,2 72,1 76,0 80,0 84,0 88,0 92,0 8 2,6 5,7 9,0 12,3 15,7 19,1 22,5 25,9 29,3 32,7 36,1 39,6 43,1 46,6 50,1 53,6 57,3 61,0 64,8 68,6 72,5 76,4 80,4 84,4 88,4 92,4 9 2,9 6,1 9,4 12,7 16,1 19,5 22,9 26,3 29,7 33,0 36,5 40,0 43,5 47,0 50,5 54,0 57,6 61,4 65,1 69,0 72,9 76,8 80,8 84,8 88,8 92,8
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0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
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11. PLOMO 11.1. Principio Determinacin del plomo A.A., previa mineralizacin de la muestra. 11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 11.2.2. Lmpara de plomo. 11.2.3. Cpsulas de platino, cuarzo o similar. 11.2.4. Bao de arena o placa calefactora con regulacin de temperatura o estufa con control de temperatura en el rango de 50 a 150C. 11.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de vitrina de extraccin de humos. 11.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de capacidad. 11.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 11.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 11.3.2. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO. 11.3.3. Acido Ntrico al 1% en Agua PA-ACS. 11.3.4. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000 ml con Acido Ntrico al 1%. 11.4 Procedimiento. 11.4.1. Preparacin de la muestra. Poner 100 ml de la muestra en la cpsula (11.2.3.) llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena (11.2.4.). Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar el residuo en el bao de arena o placa. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450C, transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el bao de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrn-rojizo en las cenizas (posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere un tratamiento posterior. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS. Llevar la solucin a un matraz de 10 ml, lavar la cpsula con Agua PA-ACS y aadir las aguas del lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente. 11.4.2. Construccin de la curva patrn. Diluir alcuotas apropiadas de la solucin patrn (11.3.4.) con Acido Ntrico al 1% (v/v) para obtener una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l. 11.4.3. Determinacin. Operar segn las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solucin est muy concentrada diluirla con Acido Ntrico al 1%. 11.5. Clculo. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuente el factor de concentracin o dilucin. 11.6. Referencia. 11.6.1. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pg. 134 (I), 1976. 12. ZINC 12.1. Principio. Determinacin del zinc por A.A. previa mineralizacin de la muestra. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 12.2.2. Lmpara de zinc. 12.2.3. Los utilizados para el Pb en (11.2.3.), (11.2.4.) (11.2.5.) y (11.2.6.) 12.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA 12.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.), (11.3.2.) y (11.3.3.) 12.3.2. Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc metal granalla PRS en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1 % (v/v). 12.4. Procedimiento. 12.4.1. Preparacin de la muestra. Como en (11.4.1.). 12.4.2. Construccin de la curva patrn. Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (12.3.2.), con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones de 0,5; 1; 1,5 y 2 mg/l. 12.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. La lectura se efectuar a 213,8 nm. 12.5 Clculo. Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zn para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentracin o dilucin.
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12.6. Referencia. 12.6.1. H. E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963), 13. 13. COBRE 13.1. Principio. Determinacin del cobre por A.A., mineralizacin por cenizas a 450C y concentracin previa a la lectura con objeto de conseguir resultados suficientemente precisos. 13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Espectrofotmetro de A.A. 13.2.2. Lmpara de cobre. 13.2.3. Los utilizados para el plomo, en (11.2.3.), (11.2.4.), (11.2.5.) y (11.2.6.). 13.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313178 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 13.3.1. Los utilizados para el plomo en (11.3.1.), (11.3.2.) y (11.3.3.) 13.3.2. Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de HNO3 (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1 % (v/v). 13.4. Procedimiento. 13.4.1. Preparacin de la muestra. Como en (11.4.1.). 13.4.2. Construccin de la curva patrn. Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (13.3.2.), con Acido Ntrico del 1% para obtener soluciones que contengan de 1 a 5 mg de Cobre/l. 13.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. Medir a 324,7 nm. 13.5 Clculo. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrn las concentraciones de cobre de la muestra. 13.6 Referencias. 13.6.1. H. E. Parker: Atomic Absorption Newsletter (1963),13 13.6.2 F. Rousselet: Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin. Ed Paris (1968), pg. 59-144
14. ARSENICO 14.1. Principio. La muestra se somete a una digestin cida con una mezcla de cido ntrico y sulfrico. La determinacin del arsnico se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica, con generador de hidruros. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g de 0,1 g. 14.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de capacidad. 14.2.3. Pipetas de doble aforo. 14.2.4. Matraces Kjeldahl de 250 ml. 14.2.5. Espectrofotmetro de absorcin atmica equipado con sistema generador de hidruros. 14.2.6. Lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.7. Fuente de alimentacin para lmpara de descarga sin electrodos. 14.2.8. Registrador grfico. 14.3. Reactivos. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313171 Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 123314 Sodio Borohidruro PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 14.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 14.3.2. Disolucin de Acido Clorhdrico. Disolver 32 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico. Disolver 15 ml de Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml. 14.3.4. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO 14.3.5. Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 14.3.6. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1%. Pesar 1 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.7. Disolucin de Sodio Borohidruro al 3%. Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo hasta 100 ml con Sodio Hidrxido al 1%. 14.3.8. Disolucin al 1 % de Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO. Pesar 1 g de Acido Etilendiaminotetra-actico PAACS-ISO y disolverlo hasta 100 ml con Agua PAACS. 14.3.9. Disolucin de Potasio Hidrxido al 20%. Pesar 20 g de Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-
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ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.10. Disolucin de Acido Sulfrico al 20% (v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO (14.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.11. Disolucin de Acido Sulfrico al 1% (v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 14.3.12. Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsnico III Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidrxido al 20% (14.3.9.), neutralizar con Acido Sulfrico al 20% (14.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfrico 1% (14.3.11.). 14.3.13. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin patrn de Arsnico (14.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.3.14. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (14.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 14.4. Procedimiento. 14.4.1. Preparacin de la muestra. En un matraz Kjeldahl, de 250 ml introducir 10 ml de muestra con 20 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. Llevar a ebullicin hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la solucin resultante. 14.4.2. Preparacin del blanco y patrones de trabajo. En un matraz Kjeldahl, introducir 5 ml de la solucin de Arsnico (14.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solucin contiene 10 nanogramos de Arsnico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra. 14.4.3. Condiciones del espectrofotmetro. Encender la fuente de alimentacin de las lmparas de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para que se estabilice la energa de la lmpara. Encender el espectrofotmetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la celda a 900C, esperando hasta que se alcance dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del generador de hidruros segn las especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de Argn de acuerdo con las caractersticas del aparato. Encender el registrador. 14.4.4. Determinacin.- Las determinaciones de la concentracin de Arsnico se realizan por el mtodo de adicin de patrones, por medio de medidas duplicadas en el espectrofotmetro en las condiciones especificadas en (14.4.3.), aadiendo al matraz de reaccin 3 ml de la solucin (14.4.1.), ms 3 ml de la solucin (14.3.2.), y 10 ml de la solucin (14.3.8.). Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de Arsnico. Lavar los matraces antes y despus de cada uso, con Acido Clorhdrico (14.3.3.). Al construir la grfica de adicin hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las mismas condiciones anteriores, pero aadiendo 3 ml de la solucin blanco. En estas condiciones el lmite de deteccin de la tcnica es de 5 ng.
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Aguardientes compuestos: Ans
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1. OBTENCION DEL DESTILADO 1.1. Principio. Destilacin de la muestra en condiciones determinadas. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Matraz de 500 a 1.000 ml de capacidad de fondo redondo y boca esmerilada. 1.2.2. Alargadera tipo Kjeldahl o similar. 1.2.3. Refrigerante tipo Dimroth (20-30 cm de longitud) o similar. 1.2.4. Matraces aforados de 100 y 200 ml de capacidad. 1.2.5. Manta elctrica o mechero de gas. 1.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 1.3.1. Agua PA-ACS 1.4. Procedimiento. 1.4.1. Muestras con menos del 60% de Etanol. Medir 200 ml de muestra en un matraz aforado que antes de enrasar se mantiene en bao de agua a 20C durante media hora. Enrasar con pipeta, limpiando el interior del cuello del matraz de posibles gotas adheridas con papel de filtro. Debe evitarse que queden burbujas de aire adheridas a las paredes del matraz. Pasar cuantitativamente el volumen medido al matraz de destilacin, lavando tres veces consecutivas el matraz aforado de 200 ml con 20 ml de Agua PA-ACS cada vez, aadiendo las aguas del lavado al matraz de destilacin. Cuando se trate de bebidas siruposas, por su gran contenido en azcar, el lavado debe efectuarse consecutivamente con tres porciones de 50 ml de Agua PA-ACS. Proceder a la destilacin. Es conveniente aadir bolitas de vidrio para facilitar la ebullicin suave. En algunos casos, si se teme la formacin de espuma, aadir un antiespumante inerte (como silicona). El matraz de recogida del destilado es el mismo en que se efectu la medida. Se le aaden 10 ml de Agua PA-ACS y se dispone ligeramente inclinado, de forma que el destilado resbale sin salpicadura por la pared del matraz, que debe estar dentro de un bao de hielo o agua fra, a menos de 1C. El refrigerante debe ir dotado de una alargadera que penetra por lo menos 4-5 cm en el cuello del matraz. Cuando se hayan recogido aproximadamente 190 ml, llevar el matraz tapado al bao de agua a 20C. Cuando se alcance dicha temperatura, dentro del mismo bao, enrasar con Agua PA-ACS mediante pipeta. Tapar el matraz e invertirlo varias veces para homogeneizar su contenido antes de proceder a la determinacin del etanol. 1.4.2. Muestras con ms del 60% del Etanol. El procedimiento anteriormente descrito difiere nicamente en que la muestra se mide en matraz aforado de 100 ml, que se lava varias veces con Agua PA-ACS hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 230 ml. El destilado se recoge en matraz aforado de 200 ml, y se enrasa con Agua PA-ACS dentro del bao de agua a 20C. 1.5. Observaciones. 1.5.1. El sistema de destilacin debe comprobarse en ambos caso como sigue: Destilar 200 ml de una mezcla hidroalcohlica al 10 por 100 en volumen cinco veces sucesivas. Determinar en la ltima destilacin el ttulo alcohomtrico del destilado, que no debe ser menor del 9,9% en volumen de etanol. 1.5.2. La destilacin debe efectuarse procurando que el flujo del destilado sea uniforme. 1.5.3. El tiempo de recogida del destilado estar comprendido entre 45 y 90 minutos. 1.5.4. El destilado podr tener aspecto lechoso como consecuencia de la emulsin de los aceites esenciales. 1.6. Referencias. 1. Mtodos Oficiales de anlisis del ron, ginebra y whisky. 2. PESO ESPECIFICO DEL ACEITE ESENCIAL NATURAL (En materia prima)
2.1. Principio. Se basa en la determinacin de la densidad relativa del aceite esencial respecto al agua a la misma temperatura. Se determinar esta densidad relativa a 25C para evitar la posible solidificacin de la muestra. 2.2. Material y aparatos. 2.2.1. Bao de agua termostatizado a 25 0,1C. 2.2.2. Picnmetro de 50 ml, segn figura adjunta (fig. 2.1.). 2.2.3. Termmetro de 10C- 30C, graduado en dcimas de grado. 2.2.4. Tubo capilar. 2.2.5. Balanza analtica. 2.3. Procedimiento. 2.3.1. Llenar completamente el picnmetro con agua recientemente destilada, tapar y colocar en 2.2.1., de forma que el nivel del agua del bao est ligeramente por encima del nivel de enrase del picnmetro.
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2.3.2. Despus de treinta minutos quitar el tapn y con 2.2.4. ajustar el nivel del agua hasta que la parte inferior del menisco sea tangente con la seal de enrase del picnmetro. 2.3.3. Sacar el picnmetro del bao. Con un pequeo rollo del papel de filtro secar el interior del cuello del picnmetro y el tapn. Introducirlo en bao a temperatura ambiente durante quince minutos para acelerar la atemperacin del lquido. Pasado este tiempo sacar el picnmetro del bao, secarlo cuidadosamente, dejarlo otros quince minutos a temperatura ambiente y pesar. 2.3.4. Vaciar el picnmetro, enjuagar con acetona y secar completamente con corriente de aire. Dejar quince minutos a temperatura ambiente, tapar y pesar. Segn lo descrito: Pa = Peso aparente del agua = Peso del picnmetro lleno - Peso del picnmetro vaco. 2.3.5. Del mismo modo que con el agua, se procede con el lquido problema, siendo: Pw = Peso del picnmetro lleno - Peso del picnmetro vaco.
2.4. Clculos: Pa Peso especfico : P 25/25 = Pw 2.5. Observaciones. Para evitar la solidificacin de la muestra, es conveniente que la temperatura de la habitacin est prxima a los 25 C. 2.6. Referencias. 1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 13 edicin, 1984 : 9.020-9.022. 3. PUNTO DE FUSION DEL ACEITE ESENCIAL NATURAL (En materia prima) 3.1. Principio. Observacin, con un sistema adecuado, de la temperatura a la que se produce la fusin del aceite esencial, previamente congelado. Como el aceite esencial no es un compuesto puro, no tendr punto de fusin fijo, sino que fundir en un rango determinado desde que se observan los primeros sntomas en los cristales hasta que la muestra se vuelve completamente lquida. 3.2. Material y aparatos. 3.2.1. Agitador. 3.2.2. Termmetro de 10C- 30C, graduado en dcimas de grado. 3.2.3. Tubos capilares de vidrio. 3.2.4. Lupa o lente de aumento. 3.2.5. Vaso de precipitado de 1.000 ml, forma baja. 3.3. Procedimiento. Se dispone de un sencillo sistema de medida consistente en un agitador magntico con placa de calefaccin variable, un vaso de precipitado de 600 ml, un termmetro y una lupa. Preparar un tubo capilar cerrado en su extremo, donde se hace llegar una gota del aceite esencial con la ayuda de otro tubo capilar ms fino. Introducir la punta del tubo capilar en un bao de hielo, durante dos horas, para que se congele. Llevar el vaso aproximadamente a la mitad con agua destilada e introducir la punta del capilar y el termmetro de forma que queden al menos 30 milmetros por debajo de la superficie. Empezando 8-10C por debajo del punto de fusin de la muestra, calentar suavemente para incrementar la temperatura del bao 0,5C/minuto, aproximadamente, agitando simultneamente el agua del bao con ayuda del agitador. Anotar la temperatura a la que se produce la fusin completa de la muestra, que se observar con la ayuda de una lupa o lente de aumento.
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Figura 2.l
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3.4. Resultado. El punto de fusin del aceite esencial ser la media aritmtica de tres determinaciones sucesivas que debern coincidir en un rango de 0,5C. 3.5. Referencias. 1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14 edicin, 1984: 28.014. 4. GRADO ALCOHOLICO 4.1. Principio. Destilacin del producto y posterior medida de la densidad del destilado por areometra. 4.2. Material y aparatos. 4.2.1. Aparato de destilacin como en el Mtodo Oficial nmero 1. 4.2.2. Alcohmetro graduado en dcimas de grado de d 20/20, debidamente contrastado. 4.2.3. Termmetro graduado en dcimas de grado centgrado. 4.2.4. Probeta transparente de 36 mm de dimetro interior y 320 mm de altura. 4.2.5. Bao termosttico a 20C. 4.3. Procedimiento. 4.3.1. Obtencin del destilado: Segn Mtodo Oficial nmero 1. 4.3.2. Determinacin areomtrica: Limpiar y secar el alcohmetro antes de su empleo. Verter el destilado debidamente homogeneizado en la probeta. Introducir el alcohmetro y el termmetro en el lquido. Esperar veinte minutos para que el termmetro, el alcohmetro y el destilado adquieran la temperatura del bao termosttico. Alcanzada esta temperatura, sacar el termmetro, secar el vstago del alcohmetro y dejarlo introducir en el destilado con un ligero movimiento de rotacin. Anotar el grado alcohlico ledo. Repetir estas operaciones varias veces. Las lecturas obtenidas son vlidas si tienen aproximacin de 0,1 grados alcohlicos. Si no fuera as, realizar lecturas adicionales y calcular la media. 4.4. Clculos. El grado alcohlico es la lectura obtenida en 4.3.2., expresada en grados y dcimas de grado de alcohol. Si en la obtencin del destilado 100 ml de muestra se destilaron a 200 ml, la lectura hay que multiplicarla por dos. Nota: No quedando claro el prrafo anterior, interpretamos: En el caso de muestras de ms de 60% de alcohol, slo se toman 100 ml que se diluyen a 200 ml por lo cual, hay que multiplicar la lectura por dos. 4.5. Referencias. 1. Official Methods of Analysis of the AOAC, 14 edicin, 1984 : 9.023-9.024. 5. AZUCARES TOTALES 5.1. Principio. Dilucin previa de la muestra, inversin y posterior valoracin basada en la accin reductora de los azcares sobre una solucin cuproalcalina. 5.2. Material y aparatos. 5.2.1. Erlenmeyer de 250 ml con boca esmerilada. 5.2.2. Refrigerante de reflujo de 30 cm de longitud til. 5.2.3. Material necesario para volumetra. 5.2.4. Bao de agua con termostato. 5.3. Reactivos. 131018 Acido Ctrico 1-hidrato PA-ACS-ISO 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 141270 Cobre II Sulfato 5-hidrato (USP, BP) PRS-CODEX 171327 Fenolftalena solucin 1% RE 131542 Potasio Yoduro PA-ISO 121647 Sodio Carbonato 10-hidrato PA 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 181693 Sodio Hidrxido 0,1mol/l (0,1N) SV 181723 Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV 5.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO. 5.3.2. Solucin de Sodio Hidrxido 12N, preparada a partir de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACSISO y Agua PA-ACS. 5.3.3. Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV. 5.3.4. Solucin cuproalcalina: Disolver por separado 25 g de Cobre II Sulfato 5hidrato (USP,BP) PRS-CODEX (SO4Cu.5H2O) en 100 ml de Agua PA-ACS, 50 g de Acido Ctrico 1-hidrato PA-ACS-ISO en 300 ml de Agua PA-ACS y 388 g de Sodio Carbonato 10-hidrato PA en 300-400 ml de agua caliente. Mezclar cuidadosamente las soluciones de Acido Ctrico y Sodio Carbonato. Aadir enseguida la solucin de Cobre Sulfato y llevar a un litro. 5.3.5. Solucin de Potasio Yoduro al 30% (p/v), preparada a partir de Potasio Yoduro PA-ISO y Agua PA-ACS.
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Conservar en frasco topacio. Es aconsejable no preparar ms de lo que se vaya a consumir diariamente. 5.3.6. Solucin de Acido Sulfrico al 25% en volumen, preparada a partir de Acido Sulfrico 96% PA-ISO. 5.3.7. Engrudo de almidn de 5 g/l. Para preparar esta solucin mantenerla en ebullicin durante diez minutos. Aadir 200 g de Sodio Cloruro PAACS-ISO por litro para asegurar su conservacin. 5.3.8. Solucin de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. 5.4. Procedimiento. Pipetear 10 ml de ans ( o el volumen adecuado en funcin del contenido en azcares) en un matraz de 500 ml, enrasndose con Agua PA-ACS (solucin A). En un matraz de 200 ml se pipetean 25 ml de la solucin A, enrasndose con Agua PA-ACS. Se realiza la inversin de la forma siguiente: En un matraz de 50 ml pipetear 20 ml de solucin B. Se aaden 3 ml de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO, llevndose durante cinco minutos a un bao a 75C. Se saca y se deja enfriar. Se aade Fenolftalena solucin 1% RE y se neutraliza con solucin de Sodio Hidrxido 12N hasta cerca del punto de viraje y posteriormente con solucin de Sodio Hidrxido 0,1 mol/l (0,1N) SV hasta viraje. Se enrasa con Agua PA-ACS y se procede al anlisis de los azcares reductores totales (solucin M). En un Erlenmeyer se ponen 25 ml de la solucin cuproalcalina y 25 ml de la solucin M, se somete a ebullicin con refrigerante de reflujo manteniendo la ebullicin diez minutos; se enfra rpidamente, se aaden 2 ml de almidn, 10 ml de solucin de Potasio Yoduro y 25 ml de Acido Sulfrico al 25%, valorndose inmediatamente con solucin de Sodio Tiosulfato 0,1 mol/l (0,1N) SV. Se repite la valoracin con un blanco, sustituyendo los 25 ml de solucin M por 25 ml de Agua PA-ACS. 5.5. Clculos. Sea D la diferencia entre lo gastado por el blanco y lo gastado por la muestra. La concentracin de azcares totales en la muestra se obtiene a partir del valor D en la tabla, interpolando en cada caso necesario y multiplicando el valor obtenido por 40 (factor de dilucin). Concentracin azcares totales gramos/litros = Valor obtenido en tabla x 40. 5.6. Observaciones. 5.6.1. En el caso de haber tomado un volumen
distinto de ans, tener en cuenta para los clculos el factor de dilucin. 5.7. Referencias 1. Recueil des mthodes internationales d'analyse des vins OIV A4-126-127.
D = ml Mg Diferencia de tiosulfato 1 2,4 2,4 2 4,8 2,4 3 7,2 2,5 4 9,7 2,5 5 12,2 2,5 6 14,7 2,6 7 17,2 2,6 8 19,8 2,6 9 22,4 2,6 10 25,0 2,6 11 27,6 2,7 12 30,3 2,7 13 33,0 2,7 14 35,7 2,7 15 38,5 2,8 16 41,3 2,9 17 44,2 2,9 18 47,1 2,9 19 50,0 3,0 20 53,0 3,0 21 56,0 3,0 22 59,1 3,1 23 62,2 6. ANETOL 6.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del anetol por cromatografa de gases. 6.2 Material y aparatos. 6.2.1. Cromatgrafo de gases equipado con detector de ionizacin de llama. 6.2.2. Columna de acero inoxidable de 3 m de longitud de 1/8 pulgadas de dimetro interno, rellena de SE 52 al 4% sobre Chromosob. AW. DMCS, de 100-120 mallas. 6.2.3. Microjeringa de 1 l. 6.3. Reactivos. 131074 Agua PA-ACS 121086 Etanol absoluto PA 142961 L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX Trans-anetol
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M
6.3.1. Trans-anetol patrn con un contenido en cis-anetol menor de 0,5%. 6.3.2. L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX 6.3.3. Etanol absoluto PA. 6.4. Procedimiento. 6.4.1. Curva de calibrado. 6.4.1.1. Patrn interno. Pesar 0,25 g de L(-)-Mentol (USP, BP, F. Eur.) PRS-CODEX y llevar a un matraz aforado de 100 ml, disolver en 40 ml de Etanol absoluto PA y enrasar con Agua PA-ACS. 6.4.1.2. Solucin patrn. Pesar 1 g de anetol y disolver en 400 ml de Etanol absoluto PA, enrasar a 1 litro con Agua PA-ACS. Ese patrn debe estar en el momento de su utilizacin recientemente preparado. 6.4.1.3. Solucin de calibrado. A partir de la solucin 6.4.1.2. preparar soluciones que contengan 0,1; 0,25; 0,50; 0,75 y 1 g/l en alcohol de 40C. A 100 ml de estas soluciones se le aade 5 ml de la solucin 6.4.1.1. Estas soluciones se inyectan en el cromatgrafo obteniendo la curva de calibrado, representndose: Area del Patrn frente a concentraciones. Area del patrn interno 6.4.2. Condiciones cromatogrficas aproximadas. Temperatura del horno: 130C. Temperatura del inyector: 220C. Temperatura del detector: 220C. 6.4.3. Preparacin de la muestra: Tomar 100 ml del destilado, segn mtodo 1. Aadir 5 ml de patrn interno e inyectar en el cromatgrafo. 6.5. Clculos. Aim 6.5.1. Calcular la relacin y llevar a la curva Apm de calibrado, obtenindose el valor de la concentracin de anetol en la muestra problema. 6.5.2. Tambin se puede emplear un patrn de concentracin fija de anetol, calculndose el factor de respuesta y la concentracin de la muestra aplicando las frmulas siguientes: Ap Fr = Ci Ai Aim Concentracin de la muestra g/l = Fr x x f Apm Siendo : Ci = Concentracin del anetol en la solucin patrn, que ser similar a la esperada en la muestra problema. Ap = Area del patrn interno en la solucin patrn. Ai = Area del anetol en la solucin patrn. Aim = Area del anetol en la muestra problema. Apm = Area del patrn interno en la muestra problema. F = Factor de dilucin de la muestra. Se debe realizar el clculo de la concentracin en anetol de la muestra con un patrn de riqueza aproximada a la esperada. En caso de no conocerse sta, se debe efectuar una inyeccin previa para fijar el nivel de anetol refirindola al patrn de 1g/l y una vez evaluado se inyectar un patrn, si fuese necesario, de concentracin prxima a la de la muestra, obteniendo el resultado final por referencia a este segundo patrn. 6.6. Referencias. 1. Jos Ramn Garca Hierro y Gertrudis Marn Esteban. Informe del Laboratorio Arbitral de la Subdireccin General de Laboratorios Agrarios.
7. METANOL 7.1. Principio. Separacin, identificacin y cuantificacin del metanol por cromatografa gaseosa. 7.2. Material y aparatos. 7.2.1. Cromatgrafo de gases equipado con detector de ionizacin de llama. 7.2.2. Columna cromatogrfica. Columna de 4 m de longitud, de 1/8 pulgadas de dimetro interno, rellena de Carbowax 1500, al 15% sobre Chromosorb W, 80-100 mallas, lavada a los cidos. 7.2.3. Microjeringas de 1 l. 7.3. Reactivos. 7.3.1. Metanol pureza cromatogrfica 7.3.2. 352516 4-Metil-2-Pentanol CG 7.3.3. Etanol pureza cromatogrfica 7.4. Procedimiento. 7.4.1. Obtencin del destilado como en el mtodo oficial nmero 1. 7.4.2. Condiciones cromatogrficas: Las condiciones cromatogrficas orientativas son: Gas portador; nitrgeno, 20 ml/min, temperatura del horno, 85C; temperatura del inyector y del detector, 150C.
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7.4.3. Calibrado: 7.4.3.1. Patrn interno: Solucin de 5 g/l de 4-Metil-2-Pentanol CG en etanol de 40C. 7.4.3.2. Solucin Patrn: preparar una solucin de metanol en etanol de 40, de concentracin similar a la esperada en la muestra. A 10 ml de esta solucin aadir 1 ml de la solucin de patrn interno 7.4.3.1. e inyectar 1 l en el cromatgrafo. 7.4.4. Muestra problema: A 10 ml del destilado de ans llevado a 40, se le aade 1 ml de patrn interno 7.4.4.1. e inyectar 1 l en las mismas condiciones en que se hizo para el calibrado. 7.5. Clculos. Calcular el factor de respuesta y la concentracin de metanol aplicando las siguientes frmulas: Ap Factor de respuesta (Fr) = Ci Ai Aim Concentracin de la muestra (mg/l) = Fr f , Apm siendo: Ci = Concentracin del metanol en la solucin patrn. Ap = Area del patrn interno en la solucin patrn. Ai = Area del metanol en la solucin patrn. Aim = Area del metanol en la muestra problema. Apm = Area del patrn interno en la muestra problema. f = Factor de dilucin de la muestra.
7.6. Referencias. 1. "Official Methods of Analysis of the A.O.A.C" 14 edicin, 1984 : 5.008-5.011. 8. BASES NITROGENADAS 8.1. Principio. Fijacin de las bases nitrogenadas y del amonaco mediante el cido fosfrico en el destilado de la muestra. Liberacin de stos mediante solucin de sodio hidrxido y valoracin con cido clorhdrico. El lmite de deteccin de este mtodo es de 1 mg/l. 8.2. Material y aparatos. 8.2.1. Destilador simple con dispositivos para adicin (figura 8.1.). 8.2.2. Probeta de 100 ml de capacidad. 8.2.3. Tubos de ensayo de boca esmerilada de 30 ml de capacidad. 8.2.4. Bureta de 25 ml de capacidad. 8.2.5. Pipetas de 50 ml de capacidad. 8.2.6. Matraz de 50 ml. 8.3. Reactivos. 182107 Acido Clorhdrico 0,05 mol/l (0,05N) SV 121660 Acido orto-Fosfrico 50% PA 131074 Agua PA-ACS 121085 Etanol 96% v/v PA 171617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO
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Figura 8.l Destilador simple con dispositivo para adicin
M
8.3.1. Acido orto-Fosfrico 50% PA (d= 1,34 g/ml). 8.3.2. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1%, preparada a partir de Sodio Hidrxido lentejas PAACS-ISO y Agua PA-ACS. 8.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico 0,01N, preparada a partir de Acido Clorhdrico 0,05 mol/l (0,05N) SV y Agua PA-ACS. 8.3.4. Disolucin de Rojo de Metilo: Pesar 0,1 g de Rojo de Metilo RE-ACS y disolver en 50 ml de Etanol 90% v/v, preparado por dilucin previa de Etanol 96% v/v PA. 8.3.5. Agua Destilada PA (pH 6,5-7,5). 8.4. Procedimiento. Obtener el destilado de 100 ml de muestra, operando segn mtodo de anlisis nmero 1. En un matraz de fondo redondo de 250 ml introducir 60 ml del destilado, 40 ml de Agua PA-ACS y 2 gotas de Acido orto-Fosfrico 50% PA; destilar, recogiendo los primeros 80 ml del destilado en 8.2.2. y desecharlos. Enfriar el matraz y al residuo fro aadir 20 ml de disolucin de Sodio Hidrxido al 1%. Destilar de nuevo, recogiendo alrededor de 10 ml de destilado en un tubo de ensayo, en el que previamente se han introducido 2 ml de Agua PA-ACS y una gota de disolucin de Rojo de Metilo, procurndose que el destilado caiga en el fondo del tubo con la ayuda de una alargadera. Valorar a continuacin con disolucin de Acido Clorhdrico 0,01N hasta viraje del indicador. Efectuar el mismo procedimiento sobre un blanco de etanol al 40%. 8.5. Clculos. Concentracin de bases nitrogenadas expresadas como hidrxido de amonio (mg/l) = 2,8 (v - v'). Siendo: v = Volumen, en mililitros, de disolucin de Acido Clorhdrico 0,01N gastados en la valoracin. v' = Volumen, en mililitros, de disolucin de Acido Clorhdrico 0,01 N gastados en el blanco. 8.6. Referencias. 1. "Codex Oenologique International, O.I.V.", 1978, pgina 17 9. ACEITES ESENCIALES 9.1. Principio. Extraccin de los aceites esenciales y cuantificacin. 9.2. Material y aparatos. 9.2.1. Embudos de decantacin de 500 ml. 9.2.2. Desecador con dispositivos para hacer vaco o rotavapor. 9.2.3. Matraces de 100 ml de forma corazn con boca adecuada para adaptar al rotavapor. 9.3. Reactivos 131074 Agua PA-ACS Anetol Patrn 132770 Eter Dietlico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 122006 n-Pentano PA 131659 Sodio Cloruro PA-ACS-ISO 121716 Sodio Sulfato anhidro PA 9.3.1. n-Pentano PA. 9.3.2. Sodio Cloruro PA-ACS-ISO. 9.3.3. Eter Dietlico estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO. 9.3.4. Anetol Patrn. 9.4. Procedimiento. Tomar 40 ml de ans e introducir en un embudo de decantacin aadiendo 160 ml de Agua PAACS, 40 g de ClNa y 60 ml de n-Pentano PA. Agitar y dejar decantar durante unos diez minutos. Una vez separadas las fases, tomar la correspondiente al Pentano. Aadir Sodio Sulfato anhidro PA. Filtrar. Llevar al rotavapor para evaporar el Pentano, sin que la temperatura del bao alcance los 30 C. Disolver el residuo obtenido en 5 ml de Eter Dietlico estabilizado con ~6 ppm de BHT PAACS-ISO e inyectar en el cromatgrafo en las mismas condiciones del mtodo nmero 6. Normalizar esta inyeccin obteniendo el porcentaje de Anetol. 9.5 Clculos. El contenido en aceites esenciales totales expresado en gramos por litro vendr dado por la siguiente frmula: 100 Aceites esenciales (g/l) = A B Siendo : A = Contenido de anetol, expresado en g/l, obtenido en el mtodo 6. B = Contenido en porcentaje de anetol obtenido en la normalizacin. 9.6. Referencias. 1. "Dosaje des huilles essentielles totales dans les liqueurs anisss". A. Maurel. Annales des Falsifications et L'Expertise Chimique et Toxicologuique, 1941 2. Informe interno del Grupo de Trabajo de Mtodos Oficiales de anlisis del Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentacin.
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10. HIDROXIMETILFURFURAL Y FURFURAL 10.1. Principio. Separacin y cuantificacin por cromatografa lquido-lquido de hidroximetilfurfural y furfural. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Cromatgrafo lquido-lquido con detector U.V. 10.2.2. Columna Sherisorb ODS 5 de 20 x 0,46 cm o columna similar de fase reserva. 10.2.3. Microjeringa de 25 o 50 l o cualquier sistema de inyeccin adecuado segn loop e inyector. 10.2.4. Equipo de filtracin de disolventes para cromatografa lquido-lquido con filtro de 0,45 m o similar. 10.2.5. Equipo de filtracin de muestras con filtros de 0,5 m o similar. 10.3. Reactivos. 261091 Metanol HPLC 141334 Furfuraldehdo PRS Hidroximetilfurfural 131509 Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO 122333 di-Potasio Hidrgeno Fosfato 3-hidrato PA 10.3.1. Metanol HPLC. 10.3.2. Solucin tampn de Potasio di-Hidrgeno Fosfato PA-ACS-ISO y di-Potasio Hidrgeno Fosfato 3-hidrato PA. Disolver 1,25 g de KH2PO4 y 1,25 g de K2HPO4 en agua hasta un litro. 10.3.3. Hidroximetilfurfural patrn y Furfuraldehido recientemente destilado. 10.4. Procedimiento. 10.4.1. Condiciones cromatogrficas orientativas: Fase mvil. Solucin de metanol al 10% (v/v) en disolucin tampn (10.3.2.). Flujo: 0,8 ml/mn. Longitud de onda. 285 nm. Tiempo de retencin aproximado: Siete minutos para Hidroximetilfurfural y diez minutos para el Furfural. 10.4.2. Soluciones patrn: Prepara soluciones de Hidroximetilfurfural y Furfural en Metanol de concentraciones aproximadas a 5 mg/l. 10.4.3. Diluir 5 ml de la muestra en Metanol a 25 ml. Filtrar e inyectar directamente. 10.5. Clculos. Calcular la concentracin de Hidroximetilfurfural
y Furfural expresada en mg/l, mediante las siguientes frmulas. Am Hidroximetilfurfural o Furfural (mg/l) = x C Ap Siendo: Am = Area de la muestra. Ap = Area del patrn externo. C = Concentracin en mg/l del patrn. 10.6. Observaciones. 10.6.1. Observacin. - La preparacin del patrn de Hidroximetilfurfural debe efectuarse cada da. Para evitar esta preparacin se puede utilizar el mismo patrn, pero controlando su riqueza actual, midiendo la absorbancia en U.V. a 284 nm, empleando la siguiente frmula: A c = x 100 Exl Siendo: c = Concentracin en moles/l de Hidroximetilfurfural. E = Coeficiente de absorcin Molar, 1,82 x 104. l = Longitud de paso de la cubeta en cm. A = Absorbancia del patrn a 284 nm. 11. ARSENICO 11.1. Principio. La muestra se somete a una digestin cida con una mezcla de cido ntrico y sulfrico. La determinacin del arsnico se realiza por espectrofotometra de absorcin atmica, con generador de hidruros. 11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Balanzas con exactitud de 0,001 g y de 0,1 g 11.2.2. Matraces aforados de 50 y 100 ml de capacidad. 11.2.3. Pipetas de doble aforo. 11.2.4. Matraces "Kjeldahl" de 250 ml. 11.2.5. Espectrofotmetro de absorcin atmica equipado con sistema generador de hidruros. 11.2.6. Lmpara de descarga sin electrodos. 11.2.7. Fuente de descarga sin electrodos. 11.2.8. Registrador grfico. 11.3. Reactivos. Se utilizan solamente reactivos de grado de pureza para anlisis y Agua Destilada. 131020 Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO 131669 Acido Etilendiaminotetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO
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M
131036 131058 131074 313171 Acido Ntrico 60% PA-ISO Acido Sulfrico 96% PA-ISO Agua PA-ACS Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 131515 Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO 123314 Sodio Borohidruro PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-ACS-ISO 11.3.1. Acido Clorhdrico 37% PA-ACS-ISO (d=1,19 g/ml). 11.3.2. Disolucin de Acido Clorhdrico. Disolver 32 ml de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml. 11.3.3. Disolucin de Acido Clorhdrico. Disolver 15 ml de Acido Clorhdrico 37% PAACS-ISO (d=1,19 g/ml), con Agua PA-ACS hasta un volumen de 1.000 ml. 11.3.4. Acido Ntrico 60% PA-ISO (d=1,40 g/ml). 11.3.5. Acido Sulfrico 96% PA-ISO (d=1,84 g/ml). 11.3.6. Disolucin de Sodio Hidrxido al 1%. Pesar 1 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-ACSISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 11.3.7. Disolucin de Sodio Borohidruro al 3%. Pesar tres gramos de Sodio Borohidruro y disolverlo hasta 100 ml con Sodio Hidrxido al 1%, preparada a partir de Sodio Hidrxido lentejas PAACS-ISO y Agua PA-ACS. 11.3.8. Disolucin al 1 % de Acido Etilendiamino-tetraactico Sal Disdica 2-hidrato PA-ACS-ISO (EDTANa2). Pesar 1 g de EDTANa2 y disolverlo hasta 100 ml con Agua PA-ACS. 11.3.9. Disolucin de Potasio Hidrxido al 20%. Pesar 20 g de Potasio Hidrxido 85% lentejas PA-ISO y disolverlo con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 11.3.10. Disolucin de Acido Sulfrico al 20% (v/v). Diluir 20 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO (11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 11.3.11. Disolucin de Acido Sulfrico al 1% (v/v). Diluir 1 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO (11.3.5) con Agua PA-ACS hasta un volumen de 100 ml. 11.3.12. Arsnico solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA o disolver 0,132 g de 241151 Arsnico Oxido EQP-ACS en 2,5 ml de Potasio Hidrxido al 20% (11.3.9.), neutralizar con Acido Sulfrico al 20% (11.3.10.), diluir hasta 100 ml con Acido Sulfrico 1% (11.3.11.). 11.3.13. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 10 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin patrn de Arsnico (11.3.12.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 11.3.14. Solucin patrn de Arsnico de concentracin 0,1 mg/l. Pipetear 1 ml de la solucin de Arsnico (11.3.13.), en un matraz aforado de 100 ml. Diluir hasta el enrase con Agua PA-ACS. 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Preparacin de la muestra. En un matraz "Kjeldahl", de 250 ml introducir 4 g de muestra con 20 ml de Acido Ntrico 60% PA-ISO (11.3.4.) y 5 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO (11.3.5.). Llevar la ebullicin hasta reducir el volumen a 5 ml. Dejar enfriar y disolver con Agua PA-ACS en un matraz de 50 ml la solucin resultante. 11.4.2. Preparacin del blanco y patrones de trabajo. En un matraz "Kjeldahl", introducir 5 ml de la solucin de Arsnico (11.3.14.) y someterlo al mismo tratamiento que la muestra. 1 ml de la solucin contiene 10 nanogramos de arsnico. Preparar un blanco con todos los reactivos utilizados siguiendo el tratamiento dado a la muestra. 11.4.3. Condiciones del espectrofotmetro. Encender la fuente de alimentacin de las lmparas de descarga sin electrodos con el tiempo suficiente para que se estabilice la energa de la lmpara. Encender el espectrofotmetro, ajustar la longitud de onda a 193,7 nm, colocando la rejilla de acuerdo con las condiciones del aparato. Encender el generador de hidruros, colocando la temperatura de la celda a 900C, esperando hasta que se alcance dicha temperatura. Se ajustan las condiciones del generador de hidruros segn las especificaciones del aparato. Ajustar el flujo de argn de acuerdo con las caractersticas del aparato. Encender el registrador. 11.4.4. Determinacin. Las determinaciones de la concentracin de Arsnico se realizan por el mtodo de adicin de patrones, por medio de medidas duplicadas en el espectrofotmetro en las condiciones especificadas en (11.4.3.), aadiendo al matraz de reaccin 3 ml de la solucin (11.4.1.), ms 3 ml de la solucin (11.3.2.), y 10 ml de la solucin (11.3.8.). Como patrones internos se usan 10, 20 y 50 ng de As. Lavar los matraces antes y despus de cada uso, con Acido Clorhdrico (11.3.3.). Al construir la grfica de adicin hay que descontar el valor de absorbancia del blanco obtenido en las mismas condiciones anteriores, pero aadiendo 3 ml de la solucin blanco.
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12. PLOMO 12.1. Principio Determinacin del plomo por absorcin atmica. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 12.2.2. Lmpara de plomo. 12.2.3. Cpsulas de platino, cuarzo o similar (de 150 ml de capacidad, aproximadamente) 12.2.4. Bao de arena o placa calefactora con regulacin de temperatura o estufa con control de temperatura en el rango de 50 a 150C. 12.2.5. Mufla. Conveniente tenerla dentro de vitrina de extraccin de humos. 12.2.6. Matraces de 10, 100 y 1.000 ml de capacidad. 12.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO Acido Ntrico al 1% 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313189 Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 12.3.1. Acido Sulfrico 96% PA-ISO (d= 1,835 g/ml). 12.3.2. Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (d= 1,413 g/ml). 12.3.3. Acido Ntrico al 1% en Agua PA-ACS. 12.3.4. Plomo solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,598 g de 131473 Plomo II Nitrato PA-ACS enrasando a 1.000 ml con Acido Ntrico al 1%. 12.4. Procedimiento. 12.4.1. Preparacin de la muestra.- Pesar 20 g de la muestra en la cpsula (12.2.3.); llevarla a evaporacin hasta consistencia siruposa en bao de arena (12.2.4.). Aadir a continuacin 2 ml de Acido Sulfrico 96% PA-ISO y carbonizar lentamente el residuo en el bao de arena o placa. Seguidamente introducir la cpsula en la mufla y mantenerla durante dos horas a 450C; transcurrido dicho tiempo, sacarla y dejarla enfriar. Aadir 1 ml de Agua PA-ACS, evaporar en el bao de arena o placa e introducir en la mufla, repitiendo esta operacin hasta obtener cenizas blancas. Un ligero color marrn-rojizo en las cenizas (posiblemente de Fe2O3) es aceptado y no requiere un tratamiento posterior. Disolver a continuacin las cenizas con 1 ml de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO y 2 ml de Agua PAACS. Llevar la solucin a un matraz de 10 ml, lavar la cpsula con Agua PA-ACS y aadir las aguas del lavado hasta el enrase, filtrando posteriormente. 12.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir
alcuotas apropiadas de la solucin patrn (12.3.4.) con Acido Ntrico al 1% (v/v) para obtener una curva de concentraciones 2, 4, 6, 8 y 10 mg/l. 12.4.3. Determinacin. Operar segn las especificaciones del aparato, usando llama de aire-acetileno. Medir las absorbancias de la muestra y patrones a 283 nm. Si la solucin est muy concentrada diluirla con Acido Ntrico al 1%. 12.5. Clculos. Calcular el contenido en plomo, expresado en mg/l mediante comparacin con la correspondiente curva patrn y teniendo en cuenta el factor de concentracin o dilucin. 12.6. Referencia. 1. Mtodos Oficiales de Anlisis de Vinos. Ministerio de Agricultura, pg. 134 (I), 1976. 13. ZINC 13.1. Principio. Determinacin del zinc por absorcin atmica previa mineralizacin de la muestra. 13.2. Material y aparatos. 13.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 13.2.2. Lmpara de zinc. 13.2.3. Los utilizados para el Pb en (12.2.3.), (12.2.4.) (12.2.5.) y (12.2.6.) 13.3. Reactivos. 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO Acido Ntrico al 1% 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313193 Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA 13.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.), (12.3.2.) y (12.3.3.) 13.3.2. Zinc solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de 141782 Zinc metal granalla PRS en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1 % (v/v). 13.4. Procedimiento. 13.4.1. Preparacin de la muestra.- Como en (12.4.1.). 13.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (13.3.2.), con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones de 0,5; 1; 1,5 y 2 mg/l. 13.4.3. Determinacin. Igual que para el plomo. La lectura se efectuar a 213,8 nm.
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13.5. Clculo. Partiendo de los valores de absorbancias obtenidos, hallar las concentraciones de Zinc para la muestra, teniendo en cuenta el factor concentracin o dilucin. 13.6. Referencia. 1. H.E. Parker. Atomic Absorption Newsletter (1963), 13. 14. COBRE 14.1 Principio Determinacin del cobre por absorcin atmica previa mineralizacin de la muestra. 14.2. Material y aparatos. 14.2.1. Espectrofotmetro de absorcin atmica. 14.2.2. Lmpara de Cobre. 14.2.3. Los utilizados para el plomo, en (12.2.3.), (12.2.4.), (12.2.5.) y (12.2.6.). 14.3. Reactivos 131037 Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO Acido Ntrico al 1% 131058 Acido Sulfrico 96% PA-ISO 131074 Agua PA-ACS 313178 Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 14.3.1. Los utilizados para el plomo en (12.3.1.), (12.3.2.) y (12.3.3.) 14.3.2. Cobre solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA o preparar disolviendo 1,000 g de Cobre puro en el mnimo volumen necesario de Acido Ntrico 70% PA-ACS-ISO (1:1) y diluir a 1 litro con Acido Ntrico del 1 % (v/v). 14.4. Procedimiento. 14.4.1. Preparacin de la muestra.- Como en (12.4.1.). 14.4.2. Construccin de la curva patrn.- Diluir partes alcuotas de la solucin patrn (14.3.2.), con Acido Ntrico al 1% para obtener soluciones que contengan de 1 a 5 mg de Cobre/litro. 14.4.3. Determinacin.- Igual que para el plomo. Medir a 324,7 nm. 14.5. Clculo. Partiendo de los valores de absorbancia obtenidos para la muestra, hallar mediante la curva patrn las concentraciones de Cobre de la muestra. 14.6 Referencias. 1. H.E. Parker: "Atomic Absorption Newsletter" (1963).13. 2 F. Rousselet: "Spectrophotometrie par absorption atomique Boudin". Ed Paris (1968), pg. 59-144.
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Sidras: Sidras y otras bebidas derivadas de la Manzana
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METODOS DE ANALISIS 1. ELIMINACION DEL ANHIDRIDO CARBONICO 1.1. Principio. Desgasificacin de la sidra mediante agitacin y filtracin. 1.2. Material y aparatos. 1.2.1. Matraz Erlenmeyer. 1.2.2. Papel de filtro. 1.2.3. Embudo. 1.3. Procedimiento. El volumen de sidra que vaya a utilizar, previamente llevada a 17-20C, verterlo en un matraz Erlenmeyer de capacidad doble del volumen utilizado. Agitar durante diez minutos y filtrar a continuacin a travs de un embudo cubierto de papel de filtro seco. 2. GRADO ALCOHOLICO ADQUIRIDO Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo 1 y proceder como se indica en los mtodos oficiales de vinos nmero 5(a) ("Boletn Oficial del Estado" de 22 de julio de 1977) y 5(b) ("Boletn Oficial del Estado" del 23 de julio de 1977). 3. AZUCARES REDUCTORES Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo nmero 1 y proceder como se indica en los mtodos oficiales de vinos nmeros 7(a) y 7(b) ("Boletn Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977) y 7(c) ("Boletn Oficial del Estado" de 30 de agosto de 1979). 4. ANHIDRIDO SULFUROSO Proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmeros 28(a) y 28(b) ("Boletn Oficial del Estado" de 26 de julio de 1977). 5. METANOL (Alcohol Metlico) Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo nmero 1 y proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmero 37 ("Boletn Oficial del Estado" de 27 de julio de 1977). 6. ACIDEZ VOLATIL Proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmero 21 ("Boletn Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977). 7. EXTRACTO SECO TOTAL Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo nmero 1 y proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmero 6 ("Boletn Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977). 8. CENIZAS Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo nmero 1 y proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmero 11 ("Boletn Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977). 9. HIERRO Eliminar el anhdrido carbnico como se indica en el mtodo nmero 1 y proceder como se indica en el mtodo oficial de vinos nmero 16 ("Boletn Oficial del Estado" de 23 de julio de 1977). 10. ETANAL 10.1. Principio. El etanal se determina en la sidra, previamente decolorada con carbn, midiendo a 570 nm, la coloracin verde o violeta que da con el sodio nitroprusiato y la piperidina. 10.2. Material y aparatos. 10.2.1. Espectrofotmetro capaz de efectuar lecturas a 570 nm. 10.3. Reactivos. 131015 Acido Brico PA-ACS-ISO 131019 Acido Clorhdrico 35% PA-ISO 121064 Acido Sulfuroso solucin 6% PA 131074 Agua PA-ACS 171096 Almidn soluble RE 121237 Carbn Activo polvo PA Etanal 171327 Fenolftalena solucin 1% RE 162377 Piperidina PS 182415 Sodio Hidrxido 1mol/l (1N) SV 121705 Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA 181772 Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV 10.3.1. Solucin de Piperidina al 10% (v/v). Preparar antes de cada medida la mezcla de 2 ml de Piperidina PS con 18 ml de Agua PA-ACS.
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10.3.2. Solucin de Sodio Nitroprusiato al 0,4% (p/v). En un matraz aforado de 250 ml, disolver 1 g de Sodio Nitroprusiato 2-hidrato PA, pulverizado. Completar hasta el enrase con Agua PA-ACS. 10.3.3. Carbn activo polvo PA. 10.3.4. Acido Clorhdrico diluido al 25% (v/v) (aproximadamente 102 g/l). Diluir convenientemente Acido Clorhdrico 35% PA-ISO con Agua PAACS. 10.3.5. Solucin alcalina. Disolver 8,75 g de Acido Brico PA-ACS-ISO en 400 ml de Sodio Hidrxido 1mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS. 10.4. Procedimiento. 10.4.1. Determinacin de etanal. Colocar 25 ml de lquido a analizar en un erlenmeyer de 100 ml, adicionar unos 2 g de Carbn Activo polvo PA. Agitar enrgicamente durante algunos segundos, dejar reposar durante 2 minutos y filtrar sobre un filtro de pliegues de poro fino para obtener un filtrado claro. Dos ml de filtrado incoloro se colocan en un Erlenmeyer de 100 ml y se adiciona, agitando, 5 ml de solucin de Sodio Nitroprusiato y 5 ml de solucin de Piperidina; mezclar y colocar inmediatamente la mezcla en la cubeta de lectura de 10 mm de espesor. La coloracin obtenida que vara del verde al violeta, se mide a 570 nm con relacin al aire. Esta coloracin aumenta para disminuir seguidamente con rapidez. Elegir como valor definitivo la mxima absorbancia que se obtiene al cabo de unos 50 segundos. La cantidad de etanal contenido en el lquido analizado se deduce de una curva patrn. 10.4.2. Construccin de la curva patrn. Solucin patrn de Etanal combinado con el Anhdrido Sulfuroso. Tomar Acido Sulfuroso 6% PA, valorar en SO2 y determinar su cantidad exacta midindola con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV. En un matraz aforado de 1 litro colocar el volumen de esta solucin que corresponda a 1.500 mg de SO2. Introducir en el matraz, ayudados con un embudo, alrededor de 1 ml de Etanal destilado recientemente y recogido sobre una mezcla refrigerante. Enrasar a un litro con Agua PA-ACS, mezclar y dejar durante la noche. La cantidad exacta de esta solucin patrn de Etanal combinada con el SO2 debe determinarse como sigue: En un Erlenmeyer de 500 ml, colocar 50 ml de solucin patrn de Etanal, adicionar 20 ml del Acido Clorhdrico diluido y 100 ml de Agua PA-ACS. Oxidar el SO2 libre con Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV en presencia de Almidn soluble RE hasta coloracin azul dbil. Aadir unas gotas de Fenolftalena solucin 1%
RE y la suficiente solucin alcalina hasta la desaparicin de la coloracin azul y aparicin de color rosa. Valorar el SO2 combinado al Etanal con el Yodo 0,05 mol/l (0,1N) SV hasta coloracin azul dbil. Siendo n el volumen gastado, la solucin patrn de Etanal combinado con el SO2 contiene : 44,05 n mg de Etanal por litro. Preparacin de la curva patrn: En matraces aforados de 100 ml colocar sucesivamente 5-10-15-20 y 25 ml de la solucin patrn. Enrasar con Agua PA-ACS. Estas diluciones corresponden a cantidades de Etanal prximas a 40-80120-160 y 200 mg/l. La cantidad exacta de las diluciones debe calcularse a partir del contenido en Etanal de la solucin patrn determinada anteriormente. Proceder a la medida del Etanal sobre 2 ml de cada una de estas soluciones como se indica anteriormente. La representacin grfica de las absorbancias de estas soluciones en funcin de la cantidad de Etanal es una recta que no pasa por el origen. 10.5. Clculo. Calcular el contenido en etanal mediante comparacin con la correspondiente curva patrn. 10.6. Observaciones. Si, de forma excepcional, el lquido a analizar contiene etanal libre, no combinado con el SO2 ser necesario, antes de empezar a determinar el etanal total, pasarlo previamente al estado de combinacin con el SO2. Para efectuar esto, adicionar a una parte del lquido a analizar un pequeo exceso de SO2 libre y esperar algunas horas antes de proceder a la determinacin. 10.7. Referencias. 10.7.1. H. Rebelein (1970), Dtsch. Lebensmit. Rdsch 1970. 66, 5-6. 10.7.2. Recueil des Mthodes Internationales d'Analyses des Vins. O. I. V. A-37, 1978. 11. ANHIDRIDO CARBONICO 11.1. Principio. Despus de la oxidacin en fro del anhdrido sulfuroso por el hidrgeno perxido en presencia del ion de cobre II, el anhdrido carbnico desplazado de la sidra por una solucin tampn de fosfato y cido fosfrico es arrastrado en fro en circuito cerrado por una corriente de aire mediante una pequea bomba de circulacin hacia una solucin valorada de bario hidrxido. El exceso de esta base se determina inmediatamente con una solucin valorada de cido clorhdrico en presencia de un indicador mixto de timolftalena-fenolftalena. Aplicables a contenidos inferiores a 6 g/l.
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11.2. Material y aparatos. 11.2.1. Aparato de vidrio para extraccin del CO2 en circuito cerrado (fig. 1) compuesto de: - un matraz de 250 ml (1) provisto de una bola antiespuma sobre la que va adaptada una bureta (5); - dos barboteadores (2) y (3); - una bomba (4) que garantice la circulacin del aire en el circuito (2 a 10 burbujas por segundo). 11.3. Reactivos. 181021 Acido Clorhdrico 1 mol/l (1N) SV 131032 Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO 131074 Agua PA-ACS 131182 Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO 131270 Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO 121085 Etanol 96% v/v PA 131325 Fenolftalena PA-ACS 141076 Hidrgeno Perxido 30% p/v (100 vol.) PRS 121677 Sodio di-Hidrgeno Fosfato 2-hidrato PA 131687 Sodio Hidrxido lentejas PA-AC-ISO 182157 Sodio Hidrxido 0,4 mol/l (0,4N) SV 171739 Timolftalena RE 11.3.1. Solucin de Sodio Hidrxido 0,2N : En un matraz aforado diluir exactamente a 1:1 Sodio Hidrxido 0,4 mol/l (0,4N) SV con Agua PA-ACS. 11.3.2. Solucin de Bario Cloruro de 90 g de BaCl2.2H2O por litro. Disolver Bario Cloruro 2-hidrato PA-ACS-ISO en Agua PA-ACS. 11.3.3. Solucin de Bario Hidrxido. Mezclar 2 volmenes de la solucin de Bario Cloruro de 90 g/l con 1 volumen de solucin de Sodio Hidrxido 0,2N. Conservar en recipiente que evite la carbonatacin. 11.3.4. Solucin tampn: Disolver en Agua PA-ACS recientemente hervida 400 g de Sodio di-Hidrgeno Fosfato 2-hidrato PA y 50 ml de Acido orto-Fosfrico (d 20 C = 1,63) : Diluir Acido orto-Fosfrico 85% PA-ACS-ISO con Agua PA-ACS hasta la densidad indicada que corresponde a, aproximadamente, 79,4% y completar hasta 1 l con Agua PA-ACS recientemente hervida. 11.3.5. Sodio Hidrxido al 50% (p/p). Solucin acuosa (d = 1,525) que contenga 50 g de Sodio Hidrxido lentejas PA-AC-ISO en 100 g de solucin. Utilizarla 15 das despus de su preparacin para lograr la decantacin del eventual CO3Na2. Esta solucin debe ser transparente. 11.3.6. Hidrgeno Perxido en solucin de 10 volmenes. Esta solucin contiene 30,4 g de H2O2 por litro y libera 10 veces su volumen de oxgeno por descomposicin cataltica con MnO2 en medio alcalino. 11.3.7. Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO, pulverizado. 11.3.8. Disolver 1 g de Fenolftalena PA-ACS y 0,5 g de Timolftalena RE en Etanol 96% v/v PA neutro, y completar hasta 100 ml. 11.3.9. Acido Clorhdrico 0,2 N. En un matraz aforado diluir a 1:5 Acido Clorhdrico 1mol/l (1N) SV con Agua PA-ACS y determinar el factor de la solucin 0,2N obtenida. 11.4. Procedimiento. 11.4.1. Sidras que contienen menos de 4 g de CO2, por litro. La botella de sidra se debe mantener en posicin horizontal durante una noche a 0C. Colocar en el barboteador (2) 150 ml exactamente medidos de solucin de Bario Hidrxido. Introducir en el matraz (1) algunos cristales de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de Hidrgeno Perxido de 10 volmenes. Poner, con cuidado, en un matraz previamente enjuagado y enfriado a 0C, 50 ml de sidra. Colocar el matraz (1) en el circuito y esperar 10 minutos. Conectar la bomba, e introducir mediante la bureta (5) 20 ml de solucin tampn. Dejar en funcionamiento 30 minutos. Parar la bomba y tomar del barboteador (2), 50 ml de la solucin de Bario Hidrxido; valorarla con Acido Clorhdrico 0,2N con indicador mixto. Sea V2 el nmero de ml gastados. Es indispensable valorar diariamente el Bario Hidrxido utilizando 150 ml. Sea V1 el nmero de ml de Acido Clorhdrico 0,2N necesarios. 11.4.2. Sidras que contienen ms de 4 g de CO2 por litro. La botella debe mantenerse en posicin horizontal a 0C durante una noche. Abrir la botella con precaucin. Para botellas de 750 ml sustituir 50 ml de sidra por 50 ml de Sodio Hidrxido al 50% haciendo resbalar suavemente la solucin por el cuello de la botella. Cerrar sta inmediatamente y homogeneizar su contenido agitndola; colocarla seguidamente en un bao de agua a 20 C. Colocar en el barboteador (2) 300 ml exactos de solucin de Bario Hidrxido. Introducir en el matraz (1) unos cristales de Cobre II Sulfato 5-hidrato PA-ACS-ISO y 5 ml de Hidrgeno Perxido de 10 volmenes. Introducir lentamente la pipeta en la botella para evitar desprendimiento de CO2 y tomar 50 ml de la sidra y echarlos al matraz. Conectarlo al aparato y dejarlo reposar 10 minutos. El volumen de la sidra tomado se deber reducir a 25 ml, si sta contiene ms de 8 g/l de anhdrido carbnico. Conectar la bomba, e introducir en el matraz (1) con una bureta (5), 40 ml de solucin tampn. Ponerla en funcionamiento durante 30 minutos. Parar la bomba y tomar del barboteador (2) 50 ml de la solucin de Bario Hidrxido. Valorarla con Acido Clorhdrico 0,2N en presencia de indica-
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dor mixto. Sea V2 el nmero de ml utilizados. Sea V1 el nmero de ml de Acido Clorhdrico 0,2N consumidos para valorar 150 ml de solucin de Bario Hidrxido. 11.5. Clculo. 11.5.1. Para sidras que contienen menos de 4 g de CO2 por litro. Cantidades de CO2 en gramos por l en la sidra. CO2 (g/l) = 0,088 (V1 - 3V2). 11.5.2. Para sidras que contienen ms de 4 g de CO2 por litro. Medir el volumen de lquido que queda en la botella y aadir 50 o 25 ml de la muestra tomada para la determinacin. Sea V el volumen total as determinado. Calcular seguidamente el factor de correccin f, necesario para tener en cuenta los 50 ml de Sodio Hidrxido al 50% introducidos en la botella: V f = V - 50 Si la muestra para la determinacin es de 50 ml, la cantidad de anhdrido carbnico en g/l es (2V1 - 6V2) x 0,088 x f. Este resultado debe multiplicarse por 2 si la toma de muestra es de 25 ml. 11.6. Referencias. 11.6.1. Jaulmes (P.), Metch. An. 1972, n 422; Ann. Fals. Exp. Chim. 1973, n708, 96-109. 11.6.2. Recueil des Mthodes Internationales d'Analyse des Vins. O. I. V. A-39, 1978.
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Figura l
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Relacin de reactivos y productos auxiliares que se utilizan en los mtodos analticos. Productos derivados de la Uva, Aguardientes y Sidras.
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NOTA: Algunos de los reactivos recomendados en los mtodos analticos previamente descritos han modificado su cdigo y mejorado su calidad. Adems se han producido nuevas incorporaciones. Por favor, consulte este anexo antes de efectuar su pedido. Es la versin actualizada de la oferta de productos suministrables en Mayo de 1999.
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REACTIVOS Y PRODUCTOS AUXILIARES QUE HAN CAMBIADO DE CDIGO O DE CALIDAD ANTERIOR 263093 Acetonitrilo gradiente HPLC 171024 Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato RE 124559 Acido Etilendiaminoteraactico Sal Disdica Clcica PA 171096 121118 171432 171168 351082 354330 353851 351086 351085 141897 171321 171327 141334 261091 351091 351079 352516 164542 171439 251450 121884 171495 351885 354457 171615 171617 171634 171730 171739 171748 171759 121787 Almidn soluble RE Amonio Bromuro PA Anaranjado de Metilo solucin 0,1% RE Azul de Bromotimol solucin 0,04% RE 1-Butanol CG iso-Butanol CG 2-Butanol CG Etanol absoluto CG Etanol 96% CG Eter mono-Metlico del Etilenglicol PRS 1,10-Fenantrolina 1-hidrato RE-ACS Fenolftalena solucin 1% RE Furfuraldehdo PRS Metanol HPLC Metanol CG 3-Metil-1-Butanol CG 4-Metil-2-Pentanol CG 4-Nitroanilina PS Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) RE-ACS Parafina P.F. 55-60C en pastilla DC 1-Pentanol PA Potasio Cloruro solucin saturada RE 1-Propanol CG 2-Propanol CG Rojo de Fenol RE-ACS Rojo de Metilo (C.I. 13020) RE-ACS Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RE Tampn solucin pH 10 RE Timolftalena RE Tornasol tintura RE Verde de Bromocresol RE-ACS Zinc Sulfato 7-hidrato PA ACTUAL 221881 Acetonitrilo (HLPC-gradiente) PAI 121024 Acido Cromotrpico Sal Disdica 2-hidrato PA 144559 Acido Etilendiaminoteraactico Sal Clcica Disdica (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 121096 Almidn de Patata soluble PA 131118 Amonio Bromuro PA-ACS 281432 Anaranjado de Metilo solucin 0,1% RV 281168 Azul de Bromotimol solucin 0,04% RV 361082 1-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI 361089 iso-Butanol (UV-IR-HPLC) PAI 123851 2-Butanol PA 361086 Etanol absoluto (UV-IR-HPLC) PAI 361085 Etanol 96% (UV-IR-HPLC) PAI 131897 Eter mono-Metlico del Etilenglicol PA-ACS 131321 1,10-Fenantrolina 1-hidrato PA-ACS 281327 Fenolftalena solucin 1% RV 131334 Furfural estabilizado con ~0,1% de BHT PA-ACS 361091 Metanol (UV-IR-HPLC prep.) PAI 321091 Metanol (PAR) PAI 131079 3-Metil-1-Butanol PA-ACS 162516 4-Metil-2-Pentanol PS A10369 4-Nitroanilina, 98% 131439 Negro de Eriocromo T (C.I. 14645) PA-ACS 253211 Parafina P.F. 56-58C en lentejas DC 131884 1-Pentanol PA-ACS 281495 Potasio Cloruro solucin saturada RV 361885 1-Propanol (UV-IR-HPLC) PAI 321090 2-Propanol (PAR) PAI 131615 Rojo de Fenol PA-ACS 131617 Rojo de Metilo (C.I. 13020) PA-ACS 281634 Sodio Acetato 1 mol/l (1M) RV 281730 Solucin Tampn pH 10 RV 121739 Timolftalena PA 281748 Tornasol tintura RV 131759 Verde de Bromocresol PA-ACS 131787 Zinc Sulfato 7-hidrato PA-ACS
185
186
ACETALDEHIDO A13752 3-HIDROXI-2-BUTANONA dmero,98% (ACETOINA dmero) 131007 ACETONA PA-ACS-ISO 221881 ACETONITRILO (HPLC-gradiente) PAI 131008 ACIDO ACETICO glacial PA-ACS-ISO ACIDO ACETICO 2 mol/l (2N) 131013 ACIDO L(+)- ASCORBICO PA-ACS-ISO A10934 ACIDO BARBITURICO, 98+% 121014 ACIDO BENZOICO PA 131015 ACIDO BORICO PA-ACS-ISO 131808 ACIDO CITRICO anhidro PA-ACS 131018 ACIDO CITRICO 1-hidrato PA-ACS-ISO 131020 ACIDO CLORHIDRICO 37% PA-ACS-ISO 131019 ACIDO CLORHIDRICO 35% PA-ISO 182107 ACIDO CLORHIDRICO 0,05 mol/l (0,05N) SV 182318 ACIDO CLORHIDRICO 0,25 mol/l (0,25N) SV 181022 ACIDO CLORHIDRICO 0,5 mol/l (0,5N) SV 181021 ACIDO CLORHIDRICO 1 mol/l (1N) SV 182108 ACIDO CLORHIDRICO 2 mol/l (2N) SV A15135 ACIDO 4-CLOROBENZOICO, 98+% 121024 ACIDO CROMOTROPICO SAL DISODICA 2-hidrato PA 144559 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL CALCICA DISODICA (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 131669 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL DISODICA 2-hidrato PA-ACS-ISO 182120 ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL DISODICA 0,05 mol/l (0,05N) SV 131030 ACIDO FORMICO 98% PA-ACS 131032 ACIDO orto-FOSFORICO 85% PA-ACS-ISO 121660 ACIDO orto-FOSFORICO 50% PA A13700 ACIDO 4-HIDROXIBENZOICO, 99% 131034 ACIDO L(+)- LACTICO PA-ACS 131037 ACIDO NITRICO 69% PA-ACS-ISO 131036 ACIDO NITRICO 60% PA-ISO 121737 ACIDO NITRICO 53% PA ACIDO NITRICO AL 1% ACIDO PERYODICO 0,05 M 121050 ACIDO PIROGALICO PA 141045 ACIDO SALICILICO (RFE, USP, BP, Ph. Eur) PRS-CODEX 141055 ACIDO SORBICO (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 131057 ACIDO SULFANILICO PA-ACS 471058 ACIDO SULFURICO 95-98% (mx 0,0000005% Hg) PA-ACS-ISO 131058 ACIDO SULFURICO 96% PA-ISO 182102 ACIDO SULFURICO 0,01 mol/l (0,02N) SV 181061 ACIDO SULFURICO 0,05 mol/l (0,1N) SV 181059 ACIDO SULFURICO 0,5 mol/l (1N) SV 182105 ACIDO SULFURICO 1 mol/l (2N) SV
131064 ACIDO SULFUROSO solucin 6% PA-ACS 131066 ACIDO L(+)- TARTARICO PA-ACS-ISO ACIDO TIOBARBITURICO A13401 ACIDO TIOSALICILICO,98% 141792 AGAR (USP) PRS-CODEX 131074 AGUA PA-ACS 171071 AGUA DE BARITA solucin saturada RE 171073 AGUA DE CAL solucin saturada RE 212236 AGUA DESIONIZADA QP ALILO iso-TIOCIANATO 121096 ALMIDON DE PATATA soluble PA 141101 ALUMINIO SULFATO 18-hidrato (RFE, BP,Ph. Eur.) PRS-CODEX AMONIACO GAS PA 121129 AMONIACO 25% (en NH3) 141128 AMONIACO 20% (en NH3) PRS 131118 AMONIO BROMURO PA-ACS 131121 AMONIO CLORURO PA-ACS-ISO 131120 di-AMONIO HIDROGENO CITRATO PA-ACS 131368 AMONIO HIERRO (II) SULFATO 6-hidrato PA-ISO 131365 AMONIO HIERRO (III) SULFATO 12-hidrato PA-ACS-ISO 131134 AMONIO MOLIBDATO 4-hidrato PA-ACS-ISO 131135 AMONIO NITRATO PA-ACS-ISO 121146 di-AMONIO TARTRATO PA 132352 AMONIO meta-VANADATO PA-ACS 281432 ANARANJADO DE METILO solucin 0,1% RV A13482 trans-ANETOL,98%+ 141156 ANILINA PRS 211160 ARENA DE MAR lavada, grano fino QP A16992 ARSENICO POLVO -100 mesh, 99,99% 313171 ARSENICO solucin patrn As = 1,000 0,002 g/l AA 281168 AZUL DE BROMOTIMOL solucin 0,04% RV 251170 AZUL DE METILENO (C.I. 52015) DC 131182 BARIO CLORURO 2-hidrato PA-ACS-ISO 131188 BARIO HIDROXIDO 8-hidrato PA-ACS-ISO 2,3-BUTANODIOL 361082 1-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI 131082 1-BUTANOL PA-ACS-ISO 361089 iso-BUTANOL (UV-IR-HPLC) PAI 123851 2-BUTANOL PA A13159 BUTIL-PBD (2-(4-Bifenil)-5(4-tert-butilfenil)-1,3,4-oxadiazol 121211 CALCIO ACETATO x-hidrato PA 121212 CALCIO CARBONATO precipitado PA 121221 CALCIO CLORURO anhidro, polvo PA CALCIO CLORURO 0,5 mol/l (0,05M)
M
142400 CALCIO HIDROXIDO polvo, (RFE,USP, BP. Ph. Eur.) PRS-CODEX 211229 CALCIO HIDROXIDO natural, polvo QP 211234 CALCIO OXIDO natural, trozos QP 124537 CALCON (C.I. 15705) PA 121237 CARBON ACTIVO polvo PA 131245 CARBONO TETRACLORURO PA-ACS-ISO 251246 CARMIN DE INDIGO (C.I. 73015) DC 121248 CERIO (IV) SULFATO 4-hidrato PA 142323 CLORAMINA T 3-hidrato (RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 313178 COBRE solucin patrn Cu = 1,000 0,002 g/l AA 141266 COBRE METAL, polvo PRS 122726 COBRE (II) SULFATO anhidro PA 131270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato PA-ACS-ISO 141270 COBRE (II) SULFATO 5-hidrato (RFE, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 471153 CROMO (VI) OXIDO (mx. 0,000005% de Hg) PA-ACS 502612 DERQUIM MC MEZCLA CROMICA 121828 DIFENILAMINA PA 313180 ESTAO solucin patrn Sn = 1,000 0,002 g/l AA 141304 ESTAO metal granalla PRS 471303 ESTAO (II) CLORURO (mx. 0,000005% de Hg) PA-ACS 131303 ESTAO (II) CLORURO 2-hidrato PA-ACS ETANAL (ACETALDEHIDO) 121086 ETANOL ABSOLUTO PA 361086 ETANOL ABSOLUTO (UV-IR-HPLC) PAI 361085 ETANOL 96% v/v (UV-IR-HPLC) PAI 121085 ETANOL 96% v/v PA 132770 ETER DIETILICO estabilizado con ~6 ppm de BHT PA-ACS-ISO 131314 ETER DI-iso-PROPILICO estabilizado con ~50 ppm de BHT PA-ACS 131897 ETER mono-METILICO DEL ETILENGLICOL PA-ACS 131318 ETILO ACETATO PA-ACS-ISO 403687 EXTRACTO DE LEVADURA Ingrediente CULTIMED 131321 1,10-FENANTROLINA 1-hidrato PA-ACS 131325 FENOLFTALEINA PA-ACS 281327 FENOLFTALEINA solucin 1% RV A13034 FLUOROGLUCINOL DIHIDRATO, 98% (FLUOROGLUCINA) 131328 FORMALDEHIDO 37-38% p/p estabilizado con metanol PA-ACS 142728 D (-)-FRUCTOSA (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 131334 FURFURAL estabilizado con ~ 0,1% de BHT PA-ACS 141339 GLICERINA (RFE,USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 121341 D (+) - GLUCOSA PA 132063 n-HEXANO PA-ACS 141076 HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v (100 vol.) estabilizado PRS 131914 HIDROXILAMONIO CLORURO PA-ACS-ISO 121925 HIDROXILAMONIO SULFATO PA A12475 5-(HIDROXIMETIL)-2FURALDEHIDO, 97% 313182 HIERRO solucin patrn Fe = 1,000 0,002 g/l AA 211934 HIERRO metal, granulado fino QP 141358 HIERRO (III) CLORURO 6-hidrato trozos PRS 121793 HIERRO (II) SULFATO ~2-hidrato PA 131362 HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato PA-ACS-ISO 121360 HIERRO (III) SULFATO x-hidrato PA 211376 LANA DE VIDRIO, lavada QP 141392 LITIO CLORURO PRS 131394 MAGNESIO ACETATO 4-hidrato PA-ACS 211794 MAGNESIO CLORURO QP ~50% MgCl2 polvo MAGNESIO CLORURO 0,1 mol/l (0,1M) 211276 MAGNESIO OXIDO QP 142367 MANGANESO (IV) OXIDO precipitado PRS 131413 MANGANESO (II) SULFATO 1-hidrato PA-ACS 142961 L(-)-MENTOL (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX 131426 MERCURIO (II) OXIDO amarillo PA-ACS 121428 MERCURIO (II) YODURO rojo PA 313186 MERCURIO solucin patrn Hg = 1,000 0,002 g/l AA 361091 METANOL (UV-IR-HPLC prep.) PAI 321091 METANOL (PAR) PAI 131091 METANOL PA-ACS-ISO 2-METIL-1-BUTANOL 131079 3-METIL-1-BUTANOL PA-ACS 162516 4-METIL-2-PENTANOL PS 131439 NEGRO DE ERIOCROMO T (C.I. 14645) PA-ACS 132362 NINHIDRINA PA-ACS A10369 4-NITROANILINA, 98% PAPEL DE FILTRO (Ver Tarifa Panreac, Filtracin MN) 91187 PAPEL DE TORNASOL neutro (rollo) 253211 PARAFINA P.F. 56-58C en lentejas DC 122006 n-PENTANO PA 131884 1-PENTANOL PA-ACS 211835 PIEDRA POMEZ grnulos QP PINACIANOL O AZUL DE QUINALDINA (YODURO DE 1,1-DIETIL CARBOCIANINA) 162377 PIPERIDINA PS 131457 PIRIDINA PA-ACS
187
132382 PLATA DIETILDITIOCARBAMATO PA-ACS 131459 PLATA NITRATO PA-ACS-ISO PLATA NITRATO solucin 0,1% p/v 141801 PLATA SULFATO PRS 313189 PLOMO solucin patrn Pb = 1,000 0,002 g/l AA 131466 PLOMO (II) ACETATO 3-hidrato PA-ACS-ISO 131473 PLOMO (II) NITRATO PA-ACS 816610.1 POLIAMIDA PARA CROMATOGRAFIA 313190 POTASIO solucin patrn K = 1,000 0,002 g/l AA 121489 POTASIO BROMURO PA POTASIO CLORURO (mx 0,005% de Br) 131494 POTASIO CLORURO PA-ACS-ISO 281495 POTASIO CLORURO solucin saturada RV 131500 POTASIO DICROMATO PA-ISO 131505 POTASIO HEXACIANOFERRATO (II) 3-hidrato PA-ACS 131503 POTASIO HEXACIANOFERRATO (III) PA-ACS 122333 di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO 3-hidrato PA 131509 POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO PA-ACS-ISO 131481 POTASIO HIDROGENO FTALATO PA-ISO 121486 POTASIO HIDROGENO TARTRATO PA 121515 POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas PA 131524 POTASIO NITRATO PA-ISO 121526 di-POTASIO OXALATO 1-hidrato PA 131527 POTASIO PERMANGANATO PA-ACS-ISO 182114 POTASIO PERMANGANATO 0,01 mol/l (0,05N) SV 181529 POTASIO PERMANGANATO 0,02 mol/l (0,1N) SV 181528 POTASIO PERMANGANATO 0,2 mol/l (1N) SV 121523 POTASIO meta-PERYODATO PA 131729 POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidrato PA-ACS-ISO 121531 POTASIO SORBATO PA 131532 POTASIO SULFATO PA-ACS-ISO 121534 POTASIO TIOCIANATO PA 131540 POTASIO YODATO PA-ACS-ISO 131542 POTASIO YODURO PA-ACS-ISO 361885 1-PROPANOL (UV-IR-HPLC) PAI 131090 2-PROPANOL PA-ACS-ISO 321090 2-PROPANOL (PAR) PAI 172174 REACTIVO DE LUFF-SCHOORL RE A12130 RESINA DOWEX 1X2-100(Cl) RESINA LEWATIT MP 600 (aninica fuerte I)
816710 131615 131617 131621 141625 313192 141669 131633 281634 131644 123314 131648 122032 131647 131659 131668 131698 131675 121638 131965 121677 131687 171688 182153 171694 181693 181694 182155
181692 181691 182415 182158 182159 131703 121705 131706 131700 141859 131716 141717 131721
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INDICADOR FLUORESCENTE UV254 ROJO DE FENOL PA-ACS ROJO DE METILO (C.I.13020) PA-ACS SACAROSA PA-ACS SELENIO METAL polvo PRS SODIO solucin patrn Na = 1,000 0,002 g/l AA SODIO METAL, barras en atmsfera de argn PRS SODIO ACETATO anhidro PA-ACS SODIO ACETATO 1 mol/l (1M) RV di-SODIO tetra-BORATO 10-hidrato PA-ACS-ISO SODIO BOROHIDRURO PA SODIO CARBONATO anhidro PA-ACS-ISO SODIO CARBONATO 1-hidrato PA SODIO CARBONATO 10-hidrato PA-ISO SODIO CLORURO PA-ACS-ISO SODIO DIETILDITIOCARBAMATO 3-hidrato PA-ACS SODIO DISULFITO PA-ACS SODIO FLUORURO PA-ACS-ISO SODIO HIDROGENO CARBONATO PA SODIO di-HIDROGENO FOSFATO 1-hidrato PA-ACS SODIO di-HIDROGENO FOSFATO 2-hidrato PA SODIO HIDROXIDO lentejas PA-ACS-ISO SODIO HIDROXIDO solucin 10% p/v RE SODIO HIDROXIDO 0,05 mol/l (0,05N) SV SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) RE SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV SODIO HIDROXIDO 0,1 mol/l (0,1N) SV SODIO HIDROXIDO 0,25 mol/l (0,25N) SV SODIO HIDROXIDO 0,4 mol/l (0,4N) SODIO HIDROXIDO 0,5 mol/l (0,5N) SV SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N) Indicador: Azul de Bromofenol SV SODIO HIDROXIDO 1 mol/l (1N) Indicador: Fenolftalena SV SODIO HIDROXIDO 2 mol/l (2N) SV SODIO HIDROXIDO 5 mol/l (5N) SV SODIO NITRITO PA-ACS SODIO NITROPRUSIATO 2-hidrato PA di-SODIO OXALATO PA-ACS SODIO meta-PERYODATO PA-ACS SODIO SALICILATO (RFE, USP, BP, Ph. Eur.) PRS-CODEX SODIO SULFATO anhidro PA-ACS-ISO SODIO SULFITO anhidro PRS SODIO TIOSULFATO 5-hidrato PA-ACS
M
182160 SODIO TIOSULFATO 0,05 mol/l (0,05N) SV 181723 SODIO TIOSULFATO 0,1mol/l (0,1N) SV 181722 SODIO TIOSULFATO 1 mol/l (1N) SV 281730 SOLUCION TAMPON pH 10 RV 272168 TAMPON SOLUCION pH 4,00 0,02 (20C) ST 272170 TAMPON SOLUCION pH 7,00 0,02 (20C) ST 272172 TAMPON SOLUCION pH 9,00 0,02 (20C) ST TETRACLOROETANO 121739 TIMOLFTALEINA PA TOLUENO MARCADO CON C14 162378 p-TOLUIDINA PS TORIO NITRATO 4-hidrato 281748 TORNASOL TINTURA RV 131252 TRICLOROMETANO estabilizado con etanol PA-ACS-ISO 131759 VERDE DE BROMOCRESOL PA-ACS 181969 YODO 0,01 mol/l (0,02N) SV 182161 YODO 0,025 mol/l (0,05N) SV 181772 YODO 0,05 mol/l (0,1N) SV 141782 ZINC METAL, granalla PRS 313193 ZINC solucin patrn Zn = 1,000 0,002 g/l AA A17368 ZINC, ALAMBRE, 0,25 mm, 99,99+% 141783 ZINC METAL, polvo PRS 131787 ZINC SULFATO 7-hidrato PA-ACS
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Aditio Aditivos y coadyuvantes tecnolgicos para uso alimentario industrial

PANREAC QUIMICA, S.A., fabrica adems de los reactivos para anlisis PANREAC, una lnea de aditivos y coadyuvantes tecnolgicos para uso alimentario industrial, que cumplen las especificaciones de pureza prescritas por The Food Chemicals Codex 4 ed., complementadas con las exigencias especficas fijadas por la legislacin espaola y comunitaria de la CEE. En la relacin que sigue se indica denominacin del producto, frmula y nmero de identificacin. Para mayor informacin, solicite nuestro catlogo ADITIO 1995.
190
M
Cdigo Producto 201003 204333 201007 201008 202342 201013 202422 202034 201014 201808 201018 201020 202019 202785 202512 201669 201030 201029 201032 202344 202042 201034 202368 202051 202591 203389 202786 202345 201810 201055 201883 201058 201065 201066 201792 202035 202043 201081 201103 201130 201129 201119 201121 201116 201127 201126 201140 203464 204109 202357 203977 ACEITE DE VASELINA ACETOFENONA ACETONA ACIDO ACETICO GLACIAL ACIDO ADIPICO ACIDO L(+)-ASCORBICO ACIDO DL-ASPARTICO ACIDO L-ASPARTICO ACIDO BENZOICO ACIDO CITRICO anhidro ACIDO CITRICO 1-hidrato ACIDO CLORHIDRICO 37% ACIDO CLORHIDRICO 35% ACIDO DECANOICO ACIDO ESTEARICO (Mezcla de cidos grasos) ACIDO ETILENDIAMINOTETRAACETICO SAL di-SODICA 2-hidrato ACIDO FORMICO 98% ACIDO FORMICO 85% ACIDO orto-FOSFORICO 85% ACIDO FUMARICO ACIDO L-GLUTAMICO ACIDO L(+)-LACTICO ACIDO LAURICO ACIDO DL-MALICO ACIDO MIRISTICO ACIDO NlCOTINlCO ACIDO OCTANOICO ACIDO PALMITICO ACIDO PROPIONICO ACIDO SORBICO ACIDO SUCCINICO ACIDO SULFURICO 95-98% ACIDO TANICO ACIDO L(+)-TARTARICO AGAR DL-ALANINA L-ALANINA ALCOHOL BENCILICO ALUMINIO POTASIO SULFATO 12-hidrato AMONIACO 30% (en NH3) AMONIACO 25% (en NH3) AMONIO CARBONATO AMONIO CLORURO AMONIO HIDROGENO CARBONATO di-AMONIO HIDROGENO FOSFATO AMONIO di-HIDROGENO FOSFATO AMONIO SULFATO L-ARGININA L-ASPARAGINA anhidra BENZOILO PEROXIDO humectado con aprox. 25% de agua D (+)-BIOTINA Sinnimos Frmula N. de identificacin
C 8H 8O CH3COCH3 CH3COOH (CH2CH2COOH)2 C6H8O6 C4H7NO4 C4H7NO4 C6H5COOH C6H8O7 C6H8O7.H2O HCl HCI C10H20O2 C18H36O2
E-260 E-355 E-300
E-210 E-330 E-330 E-507 E-507
Na2H2C10H12N2O8.2H2O HCOOH HCOOH H3PO4 HOOCCHCHCOOH C5H9NO4 CH3CHOHCOOH C12H24O2 C4H6O5 CH3(CH2)12COOH C8H16O2 CH3CH2COOH C6H8O2 HOOCCH2CH2COOH H2SO4 (CHOH)2(COOH)2 C3H7NO2 C3H7NO2 C6H5CH2OH AIK(SO4)2.12H2O NH4OH NH4OH ~(NH4)3(CO3)2H+NH2COONH4 NH4Cl NH4HCO3 (NH4)2HPO4 NH4H2PO4 (NH4)2SO4 C6H4N4O2 C4H8N2O3 C14H10O4
E-236 E-236 E-338 E-297 E-620 E-270 E-296 E-375
E-280 E-200 E-363 E-513 E-334 E-406
(Amonio Bicarbonato)
E-522 E-527 E-527 E-503i E-510 E-503ii E-342ii E-342i E-517
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Cdigo Producto 201089 201082 201429 204233 201211 201212 201213 201219 201221 201215 201232 201214 202824 201818 201224 201228 201227 201226 201225 202400 201230 203238 201235 201237 202416 204441 203922 203645 202825 201286 201254 201877 201303 201086 201085 202695 201318 201319 202047 202728 202060 201339 202329 201922 201340 iso-BUTANOL 1-BUTANOL BUTANONA 2-ter-BUTIL-4-METOXIFENOL CALCIO ACETATO x-hidrato CALCIO CARBONATO precipitado tri-CALCIO di-CITRATO 4-hidrato CALCIO CLORURO anhidro escoriforme CALCIO CLORURO anhidro polvo CALCIO CLORURO 2-hidrato escoriforme CALCIO CLORURO 2-hidrato polvo CALCIO CLORURO 6-hidrato CALCIO CLORURO solucin 45% (en CaCl2.2H2O) CALCIO ESTEARATO CALCIO FORMIATO tri-CALCIO FOSFATO CALCIO HIDROGENO FOSFATO anhidro CALCIO HIDROGENO FOSFATO 2-hidrato CALCIO bis (di-HIDROGENO FOSFATO) 1-hidrato CALCIO HIDROXIDO polvo CALCIO LACTATO 5-hidrato CALCIO PROPIONATO CALCIO SULFATO 2-hidrato CARBON ACTIVO polvo CARBOXIMETILCELULOSA SAL SODICA (baja viscosidad) CARBOXIMETILCELULOSA SAL SODICA (media viscosidad) CARBOXIMETLCELULOSA SAL SODICA (alta viscosidad) L-CISTINA 2,6-Di-ter-BUTIL-4-METILFENOL 1,2 DICLOROETANO DICLOROMETANO estabilizado con amileno 1-DODECANOL ESTAO (II) CLORURO 2-hidrato ETANOL absoluto ETANOL 96% v/v ETANOL 70% v/v ETILO ACETATO ETILO S-(-)-LACTATO L-FENILALANINA D(-)-FRUCTOSA GELATINA 80-100 Blooms GLICERINA GLICERINA 87% GLICERINA tri-ACETATO GLICINA
Sinnimos
Frmula C4H10O
N. de identificacin
(Metiletilcetona) (BHA, Butildroxianisol)
C 4H 8O C11H16O2 Ca(CH3COO)2.xH2O CaCO3 Ca3(C6H5O7)2.4H2O CaCl2 CaCl2 CaCl2.2H2O CaCl2.H2O CaCl2.6H2O
E-320 E-263 E-170i E-333iii E-509 E-509 E-509 E-509 E-509 E-509 E-470a E-238 E-341iii E-341ii E-341ii E-341i E-526 E-327 E-282 E-516
~Ca(C18H35O2)2 C2H2CaO4 ~Ca3(PO4)2 CaHPO4 CaHPO4.2H2O (Calcio Difosfato) CaH4(PO4)2.H2O Ca(OH)2 Ca(CH3CHOHCOO)2.5H2O CaSO4.2H2O
E-466 E-466 E-466 E-921 E-321
(BHT, Butilhidroxitoluol)
C6H12N2O4S2 C15H24O ClCH2ClCH2 CI2CH2 C12H26O SnCl2.2H2O CH3CH2OH CH3CH2OH CH3CH2OH CH3COOC2H5 C5H10O3 C9H11NO2 C6H12O6
E-512
192
(Glicerol) (Glicerol)
C3H8O3 C3H8O3 C9H14O6 H2NCH2COOH
E-422 E-422 E-1518 E-640
M
Cdigo Producto 201341 203140 202061 201076 201362 202045 202198 201375 202046 203385 201396 202029 201399 201927 201395 201404 201410 201413 202067 201091 203332 203209 201479 201487 201490 201492 201494 201522 201513 201505 201480 201512 Sinnimos Frmula C6H12O6 C6H12O6.H2O E-414 H2O2 FeSO4.7H2O C6H9N3O2 C6H10ClN3O2.H2O C12H22O11.H2O C6H13NO2 C10H16 MgCl2.6H2O ~Mg(C18H35O2)2 Mg3(PO4)2.5H2O N. de identificacin
202333 201509 201486 201515 201524 201855 201729 201531 201532 201533 201537 201540 201542
D(+)-GLUCOSA D(+)-GLUCOSA 1-hidrato GOMA ARABIGA polvo HIDROGENO PEROXIDO 30% p/v (100 vol.) estabilizado HIERRO (II) SULFATO 7-hidrato L-HISTIDINA L-HISTIDINA mono-CLORHIDRATO 1-hidrato LACTOSA 1-hidrato L-LEUCINA D-(+)-LIMONENO MAGNESIO CLORURO 6-hidrato MAGNESIO ESTEARATO tri-MAGNESIO di-FOSFATO (Magnesio 5-hidrato orto-fosfato) MAGNESIO HIDROGENO FOSFATO 3-hidrato MAGNESIO HIDROXI CARBONATO 5-hidrato (Magnesio Carbonato) MAGNESIO SULFATO 7-hidrato MANGANESO (ll) CLORURO 4-hidrato MANGANESO (ll) SULFATO 1-hidrato D(-)-MANITA (Manitol) METANOL METILO 4-HIDROXIBENZOATO PARAFINA 51- 53C lentejas POTASIO ACETATO POTASIO BROMATO POTASIO CARBONATO tri-POTASIO CITRATO 1-hidrato POTASIO CLORURO POTASIO DISULFITO tri-POTASIO FOSFATO 1-hidrato POTASIO HEXACIANOFERRATO (II) 3-hidrato (Potasio Ferrocianuro) POTASIO HIDROGENO CARBONATO (Potasio Bicarbonato) di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO anhidro (di-Potasio ortoFosfato) di-POTASIO HIDROGENO FOSFATO 3-hidrato POTASIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Potasio orto-Fosfato) POTASIO HIDROGENO TARTRATO POTASIO HIDROXIDO 85% lentejas POTASIO NITRATO POTASIO NITRITO POTASIO SODIO TARTRATO 4-hidrato POTASIO SORBATO POTASIO SULFATO POTASIO SULFITO POTASIO TARTRATO 1/2-hidrato POTASIO YODATO POTASIO YODURO
E-511 E-470b
MgHPO4.3H2O
E-343ii E-504ii E-518
MgSO4.7H2O MnCl2.4H2O MnSO4.H2O C6H14O6 CH3OH C8H8O3 CH3COOK KBrO3 K2CO3 K3C6H5O7.H2O KCl K2S2O5 K3PO4.H2O K4Fe(CN)6.3H2O KHCO3
E-421 E-218 E-261 E-924 E-501i E-332ii E-508 E-224 E-340iii E-536 E-501ii
K2HPO4 K2HPO4.3H2O KH2PO4 (COO)2KH(CHOH)2 KOH KNO3 KNO2 NaK(COO)2(CHOH)2.4H2O CH3(CHCH)2COOK K2SO4 K2(COO)2(CHOH)2.1/2H2O KIO3 KI
E-340ii E-340ii E-340i E-336i E-525 E-252 E-249 E-337 E-202 E-515i E-336ii
193
Cdigo Producto 203646 201545 201090 201633 201632 203865 201637 201648 202032 201647 201655 201656 201659 201698 202363 201681 201680 201665 201638 201654 201679 201678 201965 201677 201709 201687 201686 203307 201702 201703 201711 201710 201684 201716 201715 201717 201720 201719 201721 203064 201733 202475 202101 202049 202048 201786 201788 201787 L-PROLINA 1,2-PROPANODIOL 2-PROPANOL SODIO ACETATO anhidro SODIO ACETATO 3-hidrato SODIO L(+)-ASCORBATO SODIO BENZOATO SODIO CARBONATO anhidro SODIO CARBONATO 1-hidrato SODIO CARBONATO 10-hidrato tri-SODIO CITRATO 2-hidrato tri-SODIO CITRATO 51/2-hidrato SODIO CLORURO SODIO DISULFITO SODIO DODECILO SULFATO
Sinnimos
Frmula C5H9NO2 CH2OHCHOHCH3 CH3CH2CH2OH CH3COONa CH3COONa.3H2O C6H7NaO6 C6H5COONa Na2CO3 Na2CO3.H2O Na2CO3.10H2O Na3C6H5O7.2H2O Na3C6H5O7.51/2H2O NaCl Na2S2O5
N. de identificacin
E-262i E-262i E-301 E-211 E-500i E-500i E-500i E-331iii E-331iii E-223
(Lauril Sulfato Sdico)
194
tri-SODIO FOSFATO 1-hidrato tri-SODIO FOSFATO 12-hidrato SODIO HIDROGENO di-ACETATO (Sodio Diacetato) SODIO HIDROGENO CARBONATO (Sodio Bicarbonato) di-SODIO HIDROGENO CITRATO 11/2 Hidrato di-SODIO HIDROGENO FOSFATO (di-Sodio anhidro orto-Fosfato) di-SODIO HIDROGENO FOSFATO 12-hidrato SODIO di-HIDROGENO FOSFATO (mono-Sodio 1-hidrato orto-Fosfato) SODIO di-HIDROGENO FOSFATO 2-hidrato di-SODIO di-HlDROGENO PIROFOSFATO SODIO HIDROXIDO lentejas SODIO HIDROXIDO escamas SODIO LACTATO sol. 50% p/p SODIO NITRATO SODIO NITRITO tetra-SODIO PIROFOSFATO anhidro (tetra-Sodio Difosfato) tetra-SODIO PIROFOSFATO (tetra-Sodio 10-hidrato Difosfato) SODIO POLIFOSFATO SODIO SULFATO anhidro SODIO SULFATO 10-hidrato SODIO SULFITO anhidro SODIO TARTRATO anhidro SODIO TARTRATO 2-hidrato SODIO TIOSULFATO 5-hidrato D(-)-SORBITA (Sorbitol) TALCO lavado TIERRA SILICEA purificada y calcinada TITANIO (IV) OXIDO L-TRIPTOFANO VAINILLINA ZINC OXIDO ZINC SULFATO 1-hidrato ZINC SULFATO 7-hidrato
C12H25NaO4S Na3PO4.H2O Na3PO4.12H2O CH3COONaCH3COOH NaHCO3 C6H6Na2O7.11/2H2O Na2HPO4 Na2HPO4.12H2O NaH2PO4.H2O NaH2PO4.2H2O H2Na2O7P2 NaOH NaOH C3H5NaO3 NaNO3 NaNO2 Na4P2O7 Na4P2O7.10H2O (NaPO3)6 Na2SO4 Na2SO4.10H2O Na2SO3 Na2(COO)2(CHOH)2 Na(COO)2(CHOH)2.2H2O Na2S2O3.5H2O C6H14O6
E-339iii E-339iii E-262ii E-500ii E-331ii E-339ii E-339ii E-339i E-339i E-450i E-524 E-524 E-325 E-251 E-250 E-450iii E-450iii E-452i E-514i E-514i E-221 E-335ii E-335ii E-420i E-553b E-171
TiO2 C11H12N2O2 C8H8O3 ZnO ZnSO4.H2O ZnSO4.7H2O
195
Editado por: PANREAC QUIMICA, S.A. 045 -16 - 500 - 9/99 Diseo: Pere Duran Inpresin: Centre Telemtic Editorial, Dep. Legal: B.43107-83
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Metodos Analisis Derivados Uva Aguardientes y Sidras

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A N A L I T I C O S

Productos derivados de la uva, aguardientes y sidras

Productos derivados de la uva: Vinos

Orujos, Heces y Las

Aguardientes compuestos: Whisky

160 161 161 163 163 164 164

Sidras: Sidra y otras bebidas derivadas de la manzana

Productos derivados de la uva: Vinos

Figura 3(a).I. Diagrama de cromaticidad de la C.I.E.

0,7 0,6 0,5 0,4 0,2 0,0

0,2 0,3 0,5 0,6 0,8 1,0

1,1 1,2 1,3 1,4 1,6 1,8

2,0 2,1 2,2 2,3 2,5 2,7

TABLA 5 (a). I Masas volmicas aparentes de mezclas hidroalcohlicas (picnmetro Pyrex)

2,28 2,64 3,02 3,39 3,76

TABLA INTERCALAR 4 decimal de la densidad 1 2 3 4 5 6 7 8 9

TABLA 7 (a). I KMn04 N/10 ml

Factor 1,020 1,030 1,045 1,060 1,073 1,086 1,099 1,111

Factor 1,123 1,134 1,145 1,156 1,168 1,180 1,191 1,202

121086 211276 131466 131527 131716 131252

12. ALCALINIDAD DE CENIZAS

16. HIERRO (Mtodo colorimtrico del sulfocianuro)

121221 121085 141339 211794 131621 131659 141859

Figura 21.I.- Aparato para destilacin aislada

REFRIGERANTE LIEBIG-WEST 40 cm, BOCAS 14/23

Figura 39.I. Aparato de Truhaut

REFRIGERANTE DE BOLAS DE REFUERZO 30 CM. BOCAS 14 / 23

Figura 41.l. Extractor continuo de Palkin

Figura 46.l. Esquema de la instalacin

1,19 1,41 1,73 2,24 2,64 3,20 4,06 5,56 8,8 21

t = poder rotatorio en divisiones sacarimtricas

Productos derivados de la uva: Zumos de uva

TABLA DE INTERPOLAR 4 decimal de la densidad relativa 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Productos derivados de la uva: Vinagres

Productos Derivados de la Uva: Orujo, Heces y Las.

Aguardientes compuestos: Whisky

Aguardientes compuestos: Ron

ml sodio tiosulfato 0,1N

Aguardientes compuestos: Ginebra

Aguardientes compuestos: Ans

Figura 8.l Destilador simple con dispositivo para adicin

Sidras: Sidras y otras bebidas derivadas de la Manzana

Aditio Aditivos y coadyuvantes tecnolgicos para uso alimentario industrial

E-260 E-355 E-300

E-210 E-330 E-330 E-507 E-507

E-236 E-236 E-338 E-297 E-620 E-270 E-296 E-375

E-280 E-200 E-363 E-513 E-334 E-406

E-522 E-527 E-527 E-503i E-510 E-503ii E-342ii E-342i E-517

(Metiletilcetona) (BHA, Butildroxianisol)

C 4H 8O C11H16O2 Ca(CH3COO)2.xH2O CaCO3 Ca3(C6H5O7)2.4H2O CaCl2 CaCl2 CaCl2.2H2O CaCl2.H2O CaCl2.6H2O

E-466 E-466 E-466 E-921 E-321

C3H8O3 C3H8O3 C9H14O6 H2NCH2COOH

E-422 E-422 E-1518 E-640

E-343ii E-504ii E-518

(Lauril Sulfato Sdico)

TiO2 C11H12N2O2 C8H8O3 ZnO ZnSO4.H2O ZnSO4.7H2O

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