Demostracin del efecto

sinergista y antagonista
en un sistema de rgano
aislado
Integrantes:
Aguilar Contreras Guillermo
Castrejn Snchez Jair Pedro

 DEFINICIONES.

Antagonismo
El antagonismo
consiste en la
disminucin del
efecto observable.
Un frmaco
disminuye la accin
del otro.

 Sinergia

La sinergia es cuando la presencia conjunta

de dos o ms frmacos en el organismo
permite observar un incremento de los
efectos.
La sinergia de suma o adicin es que el efecto
resultante es la suma de los efectos parciales.
La sinergia de potenciacin consiste en que el
efecto observable es ms grande que la suma
de los efectos parciales.

 Ventajas
Reducen tiempo
Reducen Dinero
Reducen Ejemplares
Fcil acceso

Desventajas
Aunque existen paquetes de simulacin
especializados, el diseo y programacin de las
simulaciones es ms complejo.
La interaccin con la simulacin no puede sustituir la
prctica con la realidad, solo es un entrenamiento
para aprender, ensayar hiptesis y poder transferir
los conocimientos a situaciones reales.

Tipo de preparaciones usados para bioensayos

as como usados en el estudio del efecto de un
frmaco sobre un tipo de receptores.
Pero que es un bioensayo?
Un bioensayo, es un proceso experimental
mediante el cual se determinan las
caractersticas y la fuerza de una sustancia, a
travs del estudio de sus efectos sobre
organismos cuidadosamente escogidos y bajo
condiciones especficas de laboratorio.

 En nuestro caso se emplear leon de rata para

determinar el efecto del Carbacol y Atropina en
los receptores colinrgicos presentes en la
preparacin

Sabemos, tambin, que estos receptores se

dividen en:
Nicotnicos
Muscarnicos
Para nuestro caso nos interesa el receptor de tipo
muscarnico ya que aumenta la motilidad en el
aparato digestivo.

 Droga anticolinrgica natural compuesta de

acido tropico y tropina.
Se une a los receptores muscarnicos por medio
de un lugar catinico, como lo hace acetilcolina.

Es decir actan como antagonistas competitivos

 Es amino terciaria lpido soluble

Alcaloide
Vida media de eliminacin de 2.3 horas
Extrado de la belladona y otras plantas de la
familia Solanaceae.
puede interferir en la absorcin de otros
frmacos desde el tracto gastrointestinal
secundario, a la disminucin del vaciado
gstrico y a la motilidad intestinal.

 Tambin llamado carbamilcolina es una

agonista colinrgico.

Se une y activa receptores de acetilcolina.

Es un ester de colina y un compuesto
cuaternario de amonio cargado positivamente.

No se absorbe en el tracto gastrointestinal

Se sabe que estimula tanto a los receptores
muscarnicos as como a los nicotnicos.

 Es una molcula hidroflica compuesta de un

anillo Imidazol y un grupo amino unidos por 2
grupos metilo.
Esta distribuida en forma amplia en todo el
reino animal y forma parte de muchos
venenos y plantas
En tejidos se encuentra en concentraciones
que van de menos de 1 g/g a mas de 100
g/g

 En liquido cefalorraqudeo humano se halla en

cantidades importantes
Desempea actividades fisiolgicas
importantes:

Respuesta de hipersensibilidad inmediata y

alrgicas
Interviene de manera importante en la
regulacin de la secrecin de acido gstrico.
Y recientemente como neurotransmisor.

 Demostrar el efecto concentracin dependiente

del Carbacol en leon de rata
Determinar el tipo de interaccin farmacolgica
de la Atropina sobre la actividad del Carbacol en
leon de rata.

 Diseccin del leon de rata.

Sacrificar la rata
por dislocacin
cervical

Abrir el abdomen
y realizar la
diseccin del leon

Lavar el leon con

disolucin de KHS

Colocar los
segmentos en
disolucin de KHS
con oxigenacin

Cortar segmentos
de
aproximadamente
1 cm

 Montaje de la preparacin
Cada preparacin se
suspender en una
cmara con ayuda
de los ganchos de
nicromel

La cmara debe
contener 10 mL de
sol. KHC con
burbujeo

Dejar estabilizar por

20 minutos con un
lavado intermedio

El tejido se somete a
una tensin inicial de
1g

Realizar 1
estimulacin con 0.1
mL Carbacol (Cch)
1x10-4 M

Lavar a los 10
minutos con solucin
de KHS

Realizar 2
estimulacin a los 20
min de la 1

Cuando alcance la
meseta agregar 0.1
mL de las dems
disoluciones de Cch

Adicionar al tejido 0.1

mL Cch (1 x 10-6)

Curva de contraccin

Concentraciones de
dis. 3x10-6, 1x10-5,
3x10-5 y 1x10-4

Al terminar de
evaluar se lava el
tejido con KHS

Una vez estable el

tejido

Agregar 0.1mL de
Cch (1 x 10-4M)

Alcanzado la
meseta agregar
Atropina (Atp) 1x106

Una vez terminada

la estimulacin
realizar lavado con
KHS

Conc. De las dems

dis.: 1x10-5, 5x10-5
y 1x10-4

E ir agregando
sucesivamente
0.1mL de las dems
disoluciones de Atp

Estando estable el
tejido, adicionar
0.1mL de Atp 1x10-6

Transcurridos 5
minutos agregar
0.1mL de la disolucin
de Cch 1x10-6

Una vez que se

alcanza la meseta
agregar las dems
disoluciones de Cch

Terminada la
estimulacin lavar el
tejido.

Concentracin de las
dis. Restantes: 3x106, 1x10-5, 3x10-5 y
1x10-4

Resultados
Estimulacin.

6.00

Entrada Analgica

3.00

0.00

-3.00

25.00

30.00
minutos

35.00

40.00

 Curva de contraccin
03:08:58 p.m.

Cch3x10-5, 03:08:58 p.m.

Stock 1x10-4, 01:45:19 p.m., 03:08:58 p.m.
PARTE 2 Cch 3x10-6, 03:08:58 p.m. Cch 1x10-5, 03:08:58 p.m.
Cch 1x10-3, 01:42:17 p.m., 03:08:58 p.m.

01:49:13 p.m.Lavado, 03:08:58 p.m.

Entrada Analgica

9.00

6.00

3.00

0.00

50.00

55.00

60.00
minutos

65.00

 Curva de relajacin
PARTE 3 01:51:52 p.m.Carbacol, 03:08:58 p.m
01:56:30 p.m.1x10-5 M, 03:08:58 p.m.
02:00:09 p.m.10-4 M, 03:08:58 p.m.
01:49:13 p.m.Lavado, 03:08:58 p.m.
01:54:14 p.m.10-6 M Atropina, 03:08:58 p.m.
01:58:05 p.m.5x10-5 M, 03:08:58 p.m.

PARTE 4 02:04:59 p.m.1x10-6 atropina, 03:08

3.00

Entrada Analgica

0.00

-3.00

-6.00

70.00

75.00

80.00
minutos

85.00

 Curva de contraccin + atropina

02:11:00 p.m.Cch 3x10-6, 03:08:58 p.m.
02:09:05 p.m.Cch 1x10-6, 03:08:58 p.m.

02:14:47 p.m.Cch 1x10-5, 03:08:58 p.m.

02:18:28 p.m.Cch 3x10-5, 03:08:58 p.m. 02:21:00 p.m.Cch 1x10-3, 03:08:58 p.m.
3.00

Entrada Analgica

0.00

-3.00

-6.00

85.53

89.53

93.53
minutos

97.53

Estimulacin
PARTE 1

Media basal (g) Media efecto (g)

Mefecto Mbasal
(g)

% Efecto

1.04226
Cch 1x10-4

0.09140

1.13366
0.82643

Cch 1x10-4

0.16053

0.98696
Promedio

0.934345

100 % efecto

Curva de contraccin

Curva de relajacin

Curva de contraccion + atropina

PARTE2

Media efecto
(g)

Efecto real
(g)

% Efecto

PARTE 3

Media
efecto (g)

Efecto real
(g)

% Efecto

PARTE 4

Media
efecto (g)

Efecto real
(g)

% Efecto

Cch 1x10-6

0.54260

0.02711

2.90

Cch 1x10-4

1.31542

0.84910

90.88

Atp 1x10-6

0.39179

0.00

Cch 3x10-6

0.59353

0.07804

8.35

Atp 1X10-6

0.76128

0.29496

31.57

Cch 1x10-6

0.40722

0.01543

1.65

Cch 1x10-5

0.72832

0.21283

22.78

Atp 1X10-5

0.53336

0.06704

7.18

Cch 3x10-6

0.43139

0.0396

4.24

Cch 3x10-5

1.10359

0.58810

62.94

Atp 5X10-5

0.48737

0.02105

2.25

Cch 1x10-5

0.49017

0.09838

10.53

Cch 1x10-4

1.31211

0.79662

85.26

Atp 1X10-4

0.47115

0.00483

0.52

Cch 3x10-5

0.53530

0.14351

15.36

Cch 1x10-3

0.82858

0.43679

46.75

Basal

media de
atropina

Lavado

Basal

0.51549

Basal

0.46632

CURVA DE CONTRACCIN

Cch (M)

%Efecto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

1.00E-06

2.90

97.10

-6.00

0.03

-1.52

3.00E-06

8.35

91.65

-5.52

0.09

-1.04

1.00E-05

22.78

77.22

-5.00

0.30

-0.53

3.00E-05

62.94

37.06

-4.52

1.70

0.23

1.00E-04

85.26

14.74

-4.00

5.78

0.76

El mtodo sigmoidal es el que tienen mejor factor de correlacin (R2) por lo que la

DE50 la calculamos como 10 , tanto para la curva de contraccin, como para la

curva de relajacin, y curva contraccin + Atropina, respectivamente
Curva de contraccin (HILL)
1.00
y = 1.1683x + 5.4318
R = 0.9929

DE50

Log (E/Emax-E)

0.50

-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0.00
0.00
-0.50

-1.00

-1.50

Log C (Cch)

-2.00

2.24x10-5 M

CURVA DE RELAJACIN

Atp

%Efecto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

0.10

-0.1

2.17

0.34

12.93

1.11

43.45

1.64

191.31

2.29

-4.00
1*10^-4

90.88

9.12
-6.00

1*10^-6

31.57

68.43
-5.00

1*10^-5

7.18

92.82
-4.30

5*10^-5

2.25

97.75
-4.00

1*10^-4

0.52

99.48

Curva de relajacin
-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0
0.00

-0.5

log (E/Emax-E)

y = -0.9097x - 5.7313
R = 0.9619

DE50
-1

-1.5

-2

Log C (Atp)

-2.5

5.009x10-7 M

CURVA DE CONTRACCIN + ATROPINA

Cch

%Efecto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

59.606

1.775

22.585

1.354

8.4967

0.93

5.5104

0.741

1.139

0.056

-6.00
1*10^-6

0.0

100
-6.00

1*10^-6

1.65

98.35

3*10^-6

4.24

95.76

1*10^-5

10.53

89.47

-5.52
-5.00
-4.52

3*10^-5

15.36

84.64
-3.00

1*10^-3

46.75

53.25

Curva de contraccin + Atropina

-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0.2
0.00
0
-0.2

Log (E/Emax-E)

y = 0.5535x + 1.6901
R = 0.9672

-0.4

-0.6
-0.8
-1
-1.2
-1.4
-1.6
-1.8

Log C (Cch)

-2

DE50

8.84x10-4 M

ESTIMULACIN
PARTE 1

Media basal Media efecto MefectoMbasal

(g)
(g)
(g)

Cch 1x10-4

0.68010

2.51

1.83

Cch 1x10-4

0.78293

2.41

1.63

Promedio

1.73

% Efecto

100 % efecto

CURVA DE CONTRACCION
PARTE2

Media
efecto
(g)

Efecto
real (g)

CURVA DE RELAJACION

CURVA DE CONTRACCION +
ATROPINA

%
Media Efecto
Media
Efecto
PARTE 3 efecto (g) real (g) % Efecto PARTE 4 efecto (g) real (g)
Efecto

% Efecto

Cch 1x10-6 0.71462 0.01912

1.11

Cch 1x10-4 2.23568 1.68115

97.21

Atp 1x10-6 0.70486

0.04941

2.86

Cch 3x10-6 0.75579 0.06029

3.49

Atp 1X10-6

1.6137 1.05917

61.24

Cch 1x10-6 0.81511

0.15966

9.23

Cch 1x10-5 1.22203 0.52653

30.45 Atp 1X10-5 0.63818 0.08365

4.84

Cch 3x10-6 0.8821

0.22665

13.11

Cch 3x10-5 2.11611 1.42061

82.14 Atp 5X10-5 0.58917 0.03464

2.00

Cch 1x10-5 0.98612

0.33067

19.12

Cch 1x10-4

91.15 Atp 1X10-4 0.55843 0.00390

0.23

Cch 3x10-5 1.04067

0.38522

22.27

Cch 1x10-3 2.32267

1.66722

96.40

2.2719 1.57640

Lavado
Basal

0.69550

Basal

0.55453

Basal

0.65545

CURVA DE CONTRACCION
Cch

%Efeto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

1*10^-6

1.11

98.89

-6

89.09

1.95

3*10^-6

3.49

96.51

-5.523

27.65

1.442

1*10^-5

30.45

69.55

-5

2.28

0.359

3*10^-5

82.14

17.86

-4.523

0.217

-0.66

1*10^-4

91.15

8.85

-4

0.097

-1.013

Curva de contraccin
1.5
-7

-6

-5

-4

-3

-2

-1

0
1

Log (E/Emax-E)

0.5

0
y = 1.6051x + 7.6251
R = 0.9742

-0.5

-1

-1.5

-2

LOG C (Cch)

-2.5

DE50

1.77x10-5 M

CURVA DE RELAJACION
Log C
%Efecto

Emax-E

E/Emax-E

Log E/Emax-E

0.029

-1.54

0.63

-0.20

19.66

1.29

49

1.69

433.78

2.64

Atp
-4.00
1*10^-4

97.21

2.79
-6.00

1*10^-6

61.24

38.76

-5.00
1*10^-5

4.84

95.16
-4.30

5*10^-5

2.0

98.0
-4.00

1*10^-4

0.23

99.77

Curva de relajacin
-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0.5
0.00
0

Log (E/Emax-E)

-0.5

-1
y = -1.2972x - 7.615
R = 0.954
-1.5

-2

-2.5

Log C (Atp)

-3

DE50

1.347x10-6 M

CURVA DE CONTRACCION + ATROPINA

Cch

%Efecto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

9.83423619

0.992740634

6.62776506

0.821367106

4.23012552

0.626353255

3.49034576

0.542868451

0.0373444

-1.427774533

-6.00
1*10^-6

2.86000

97.14000
-6.00

1*10^-6

9.23

90.77000

3*10^-6

13.11

86.89000

1*10^-5

19.12

80.88000

-5.52
-5.00

-4.52
3*10^-5

22.27000

77.73000
-3.00

1*10^-3

96.4

3.60000

Curva de contracin+ Atropina

-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

2
0.00
1.5

DE50
Log (E/Emax-E)

0.5
y = 0.8113x + 3.5898
R = 0.897
0

-0.5

-1

Log C (Cch)

-1.5

3.76*10-5 M

ESTIMULACIN

PARTE 1

Media basal (g) Media efecto (g)

Mefecto Mbasal
(g)

% Efecto

2.07415
Cch 1x10-4

0.51810

2.59225
2.01265

Cch 1x10-4

0.53975

2.55240

Promedio

2.0434

100 % efecto

Curva de contraccin

PARTE2

Curva de relajacin

Curva de contraccion + atropina

Media Efecto real

Media Efecto real
Media Efecto real
% Efecto PARTE 3
% Efecto PARTE 4
% Efecto
efecto (g)
(g)
efecto (g)
(g)
efecto (g)
(g)

Cch 1x106
0.58233

0.02579

1.26

Cch 1x104
1.63005

57.15

Atp 1x106
0.53473

0.03647

1.78

0.57104

27.95

Cch 1x106
0.63474

0.13648

6.68

1.16784

Cch 3x106
0.64652

0.08998

4.40

Atp 1X106
1.03325

Cch 1x105
0.83725

0.28071

13.74

Atp 1X105
0.60455

0.14234

6.97

Cch 3x106
0.67776

0.1795

8.78

Cch 3x105
2.06713

1.51059

73.93

Atp 5X105
0.53379

0.07158

3.50

Cch 1x105
0.76394

0.26568

13.00

98.81

Atp 1X104
0.47715

0.73

Cch 3x105
0.83529

0.33703

16.49

Cch 1x103
1.84816

1.3499

66.06

Cch 1x104
2.57554

2.01900

Lavado
Basal

0.55654

Basal

0.46221

0.01494

Basal

0.49826

CURVA DE CONTRACCION
Cch

%Efeto

Emax-E

Log C

E/Emax-E

Log E/Emax-E

1*10^-6

1.26

98.74

-6

78.3650794

1.894122578

3*10^-6

4.4

95.6

-5.523

21.7272727

1.337005216

1*10^-5

13.74

86.26

-5

6.27802038

0.797822721

3*10^-5

73.93

26.07

-4.523

0.35263087

-0.452679675

1*10^-4

98.81

1.19

-4

0.01204332

-1.919253938

Curva de contraccin
2.5
-7

-6

-5

-4

-3

-2

-1

2
1.5

Log (E/Emas-E)

y = 1.8848x + 9.1102
R = 0.95

0.5

0
-0.5
-1
-1.5
-2

Log C (Cch)

-2.5

DE50

1.467x10-5 M

CURVA DE RELAJACION
Log C
%Efecto

Emax-E

E/Emax-E

Log E/Emax-E

0.74978128

-0.125065408

2.57781753

0.411252173

13.3472023

1.125390243

27.5714286

1.440459269

135.986301

2.133495162

Atp
-4.00
1*10^-4

57.15000

42.85000

-6.00
1*10^-6

27.95

72.05000
-5.00

1*10^-5

6.97

93.03000
-4.30

5*10^-5

3.50000

96.50000
-4.00

1*10^-4

0.73

99.27000

Curva de relajacin
-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0
0.00

-0.5

Log (E/Emax-E)

DE50
-1
y = -0.7759x - 5.0214
R = 0.9294
-1.5

-2

Log C (Atp)

-2.5

3.375x10-7 M

CURVA DE CONTRACCIN + ATROPINA

Log C
%Efecto

Emax-E

E/Emax-E

Log E/Emax-E

13.9700599

1.14519827

10.3895216

1.01659555

6.69230769

0.8255759

5.06428138

0.70451783

0.51377536

-0.28922673

Cch
-6.00
1*10^-6

1.78000

98.22000
-6.00

1*10^-6

6.68

93.32000

3*10^-6

8.78

91.22000

1*10^-5

13

87.00000

-5.52
-5.00
-4.52

3*10^-5

16.49000

83.51000
-3.00

1*10^-3

66.06

33.94000

Curva de contraccin + Atropina

-7.00

-6.00

-5.00

-4.00

-3.00

-2.00

-1.00

0.4
0.00
0.2

DE50
log (E/Emax-E)

-0.2

-0.4
y = 0.4829x + 1.6413
R = 0.9605

-0.6

-0.8

-1

-1.2

Log C (Cch)

-1.4

3.99*10-4 M

DE50

Canal 1

Canal 2

Canal 3

Promedio

Curva de contraccin

2.24 x 10-5 M

1.77 x 10-5 M

1.47 x 10-5 M

1.83 x 10-5 M

Curva de relajacin

5.01 x 10-7 M

1.35 x 10-6 M

3.38 x 10-7 M

7.30 x 10-7 M

Curva de contraccion +
atropina

8.84 x 10-4 M

3.76 x 10-5 M

3.99 x 10-4 M

4.40 x 10-4 M

Numero de veces que disminuye el efecto del

carbacol

Canal 1

Canal 2
39.46

Canal 3
2.12

2.71

 Como se hablo al principio, las caractersticas

de cada frmaco empleado darn lugar a un
efecto, es decir, en el caso del Carbacol se
sabia que tendra accin en los receptores
muscarnicos provocando la motilidad del
musculo liso en el leon, por el lado contrario la
atropina tendr el efecto contrario, disminuir la
motilidad del leon.
Como se observo durante toda la prctica,
efectivamente se apreciaba el efecto de ambos
frmacos.

Lo interesante es cuando estuvieron juntos en la

prueba contraccin+ Atropina, en este caso,
aunque se ve el efecto de la contraccin, pero es
evidente que la presencia de la Atropina (actuando
de antagonista) evita que el musculo liso se vea
estimulado por la presencia del Carbacol.
Por ltimo se puede decir que los sistemas
simulados son una buena herramienta, pero no
sustituyen completamente a la forma impredecible
de un sistema aislado de rgano.

 http://www.osman.es/ficha/12355

http://canalh.net/webs/sgonzalez002/Farmaco/INTERACCI
ONES.htm
http://www.rcim.sld.cu/revista_18/articulos_htm/
simulacioncomputarizada.htm
http://qf-info.foroperu.org/t45-avance-demecanismo-de-la-atropina