UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA FACULTAD DE INGENIERA CIENCIAS Y ADMINISTRACIN DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA

IIQ 434 MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO CURVA DE CRECIMIENTO Y PRODUCCION DE BIOMASA

Integrantes:

Solhzetniczi Fritz Pea Alejandro Parra Mena Sebastin Rocha Mella Alejandra Rubio Valenzuela

Profesores: Carrera:

Dr. Csar Burgos Daz Paulina Torres Corales Ingeniera Civil en Biotecnologa

31 de Julio de 2013

RESUMEN 1 INTRODUCCION 2 OBJETIVOS

Realizar una curva de crecimiento de Escherichia coli, valorando el aumento de la biomasa por densidad ptica. Evaluar el efecto de diferentes factores sobre crecimiento de E. coli.

3 MATERIALES Y METODOS
3.1 MATERIALES
5 Matraces de 100 ml con 50 ml de medio TSB Cultivo de E. coli Tubos con 1 ml de 0,85 NaCl Espectrofotmetro (OPTIZEN) Bao de agua a 37C Pipeta de 1 ml, estril Solucin de cloranfenicol Solucin de amoxicilina
tengo solo el de amoxicilina se diluyo 200 ul/ml de amoxicilina en 10 ml de cloruro de sodio al 085%. la amoxicilina venia en pastilla

Hielo

3.2 METODOLOGA
1. Se inocularon los matraces con 5 ml de cultivo de E. coli. 2. Se incubaron los matraces a 37C en un bao de agua con agitacin. 3. Se tom 1 ml de cada matraz cada 15 minutos, a fin de medir la absorbancia en un espectrofotmetro a una longitud de onda de 580 nm. Datos que fueron graficados. 4. Se realizaron diluciones de 5. Cuando los cultivos se encontraron en la fase exponencial de crecimiento, a las 11:30 am, 2 horas de incubacin: el cultivo 1 (blanco) est sin tratamiento, el cultivo 2 (control) se continu midiendo, incubando a 37C; al cultivo 3 (bacteriosttico) se le agregaron 200 ug/ml de cloranfenicol y se incub a 37C; al

cultivo 4 (bactericida) se le agregaron 200 ug/ml de amoxicilina. Tambin se deba medir la absorbancia de un cultivo 5 en hielo a 0C, pero debido a que el matraz se rompi un poco antes de llegar a la fase de crecimiento exponencial, estos datos no sern presentados. 6. Se realiz un grfico de la absorbancia en funcin del tiempo hasta los 150-180 min.

4 RESULTADOS

1.35 1.15 0.95

Absorbancia

0.75

Blanco (0,001) Control Cloranfenicol Amoxicilina

0.55
0.35 0.15 -0.05

50

100

150

200

250

300

350

Tiempo (minutos) Grfico 1. Variacin de la absorbancia cada 30 minutos a 37C en muestras de cultivo de E. coli: sin tratamiento, muestra control, con cloranfenicol y amoxicilina. En el siguiente grafico se observan muestras con diferentes tipos de crecimiento que son

5 DISCUSIN Y CONCLUSIN
La muestra control tuvo un crecimiento exponencial ya que posee los nutrientes necesarios y no tena inhibidores que impidiera el crecimiento ptimo de la bacteria en cultivo. Al minuto 300 hay un decrecimiento de el cultivo bacteriano esto se puede deber a la falta de nutriente por la alta demanda debido al crecimiento de las masa bacterianas.

6 REFERENCIAS