PRÁCTICA 2

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE MnO 4-

1.- FUNDAMENTO TEÓRICO. 1.1.- Introducción Un método espectrofotométrico está basado en la medida directa de la absorción de radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la Absorbancia, y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de interés en dicha muestra. Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda características de la radiación electromagnética. En este proceso, la radiación es transferida temporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intensidad de la radiación. Dicha disminución, debida a la absorción experimentada por el analito, puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia, A, la más comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se define por la expresión: A = log P0 P

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donde A es la Absorbancia, P0 la potencia del haz de radiación incidente y P la potencia de dicho haz tras atravesar la muestra. 1.2.- Ley de Beer De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie absorbente, c, y con la longitud de la trayectoria de la radiación en el medio absorbente o camino óptico, b. Esto es: A = log P0 = a b c P

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donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Cuando la concentración c se expresa en moles por litro, y b en centímetros, la constante de proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo ε , y, puesto que la absorbancia es una magnitud adimensional, tendrá unidades de L cm-1 mol-1. En este caso, la ley de Beer adquiere la forma:

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A= ε b c 2-1

3. (o de otro parámetro relacionado con la energía de la radiación utilizada).. la columna del "color" indica la porción del espectro que es absorbida. por ejemplo. El máximo de absorbancia obtenido en el espectro de absorción de un analito. y por tanto cabe esperar que presente un máximo de absorbancia en la zona de longitud de onda en la banda de 435-480 nm 2-2 .1. Así. nos dará la longitud de onda que proporciona la mayor sensibilidad posible. λ. absorben radiación electromagnética perteneciente al espectro visible. el cual puede dividirse en varias zonas según se muestra en la tabla siguiente: {PRIVADO }Longitud de Onda. Todas las disoluciones que presentan color. mientras que la correspondiente al "color complementario" indica la porción de radiación electromagnética que no absorbe la muestra y que por tanto es transmitida a través de ella y puede ser captada por el ojo humano (color de la disolución). λ (nm) 380-435 435-480 480-490 490-500 500-560 560-580 580-595 595-650 650-780 Color Color Complementario Violeta Azul Azul-verdoso Verde-azulado Verde Verde-amarillo Rojo Anaranjado Rojo Verde-amarillo Amarillo Anaranjado Rojo Púrpura Violeta Azul Azul-verdoso Verde-azulado En dicha tabla. y por tanto será la que se utilizará en el análisis espectrofotométrico de dicho analito. una disolución de color amarillo absorbe la radiación de color azul.Espectros de absorción Un espectro de absorción es una representación gráfica de la absorbancia de un analito (o de otra magnitud equivalente) en función de la longitud de onda de la radiación.

. Según la ley de Beer.Obtención del espectro de absorbancia.. mediante "comparación". 3... De esta manera se obtiene la Curva de Calibración. Con una pipeta graduada. Añadir poco a poco. 1 matraz aforado de 100 mL. En dicha etapa se mide la absorbancia de varias muestras de concentración conocida.MATERIAL Y REACTIVOS... Para llevar a cabo la etapa de calibración.OBJETIVO DE LA PRÁCTICA.. tomar 1 mL de la disolución 0.1. las cuales serán utilizadas para. calcular la concentración de una muestra problema tras medir su absorbancia. frente a la concentración de dichas muestras.1M de KMnO 4 y verterlo en un vaso de precipitado de 100 mL. se representa la absorbancia de las muestras de concentración conocida (llamadas patrones) a la longitud de onda de máxima absorbancia. es preciso realizar una etapa previa de calibración.1. 2. 4.MATERIAL. y agitando cuidadosamente. Disolución KMnO4 0. cuya expresión matemática puede ser obtenida mediante un tratamiento de ajuste estadístico por mínimos cuadrados.en una muestra problema mediante espectroscopía de absorción molecular UV-VIS. 2 vasos de precipitado de 100 mL.2. Determinación cuantitaviva de la concentración de MnO 4. 2 pipetas graduadas. el resultado obtenido será una línea recta.Análisis Cuantitavivo Para llevar a cabo el análisis cuantitativo de una especie mediante la espectroscopía de absorción molecular. A.REACTIVOS. 3 matraces aforados de 25 mL.4. agua 2-3 .1M Muestra problema 4.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL. 2 cubetas para espectrofotómetro 1 frasco de agua destilada 1 pipeteador 3. 3.1.

medir la absorbancia de cada una de las 2-4 . 4. Selecciona la longitud de onda correspondiente al máximo de absorbancia. Después de poner a punto el espectrofotómetro. preparar una disolución de KMnO 4 0.Debido al color púrpura de la disolución de MnO 4-. toma una de las cubetas y..A continuación llena la otra cubeta con la disolución previamente preparada. y siguiendo el mismo procedimiento experimental. con la ayuda del profesor. 4.Selecciona en el espectrofotómetro una longitud de onda 10 nm superior a la anterior y repite el proceso anteriormente descrito.destilada hasta que la disolución resultante presente un color similar al de la muestra problema. Para ello. Sobre un papel milimetrado representa el espectro de absorción del KMnO 4 en la forma A vs. 2. prepara. toma una cantidad de la disolución de KMnO 4 0. tres disoluciones patrón de KMnO4 de concentraciones 2 x 10-5 M. . podemos predecir la zona del espectro en la que se obtendrá la máxima absorbancia. Dicha longitud de onda será la utilizada en el análisis cuantitativo del MnO4-.01M. 6 x 10-5 M y 1 x 10-4 M. .Repite de nuevo todo el proceso hasta alcanzar una longitud de onda 20 nm por encima del límite superior del intervalo de longitudes de onda correspondiente al espectro de absorción del MnO4-. sitúala en el portacubetas y espera unos segundos hasta que la lectura de absorbancia se estabilice. B. Anota el valor de absorbancia obtenido para esta longitud de onda.. sitúala en el portacubetas del espectrofotómetro y ajusta la lectura al cero de Absorbancia.Preparación de la recta de calibrado A. seleccionar una longitud de onda 20 nm por debajo del límite inferior del intervalo correspondiente. B. utilizando los matraces aforados de 25 ml. . 3. . Es decir. Viértelo en el matraz aforado de 100 ml y enrasa hasta la marca con agua destilada. λ. A partir de esta disolución de KMnO 4 0. Siguiendo el procedimiento ya conocido.1M en un vaso de precipitado y pipetea el volumen necesario."Hacer el blanco" para dicha longitud de onda. tras llenarla con agua destilada (es el blanco para este caso particular).01 M.Medición de los patrones y obtención de la curva de calibrado A. Con la disolución preparada se obtendrá el espectro de absorción como sigue: . En un matraz aforado de 100 ml. C.

mediante interpolación del valor de absorbancia obtenido . Para ello. Mediante un ajuste de regresión por mínimos cuadrados. representar gráficamente.. Matemáticamente: M M nm 2-5 . 4.Longitud de onda seleccionada: .Matemáticamente.RESULTADOS EXPERIMENTALES .Concentración de MnO 4. la curva de calibrado en la forma: A vs. después de cada medida: .Limpiar la cubeta con agua destilada varias veces .en la muestra problema: a. Con las absorbancias anotadas para cada una de las disoluciones patrón.Ecuación de la recta de calibrado: . calcular la ecuación de la recta obtenida. Siguiendo el procedimiento conocido.disoluciones patrón a la longitud de onda seleccionada. mediante la utilización de la ecuación de la recta de calibrado 5. Calcular la concentración de dicha muestra mediante dos métodos: .Llenar la cubeta con la nueva disolución patrón y medir B.Gráficamente.Limpiar la cubeta con la nueva disolución patrón una vez . en un papel milimetrado.Medición de la muestra problema A. 4. c C. Gráficamente: b. Recordar que antes de la medición de cada patrón debe hacerse el blanco. La medición de la absorbancia de los tres patrones debe realizarse en orden creciente de concentraciones y utilizando una misma cubeta.. B. medir la absorbancia de la muestra problema.Desechar la disolución patrón ya medida .