CROMATOGRAFA EN PAPEL Y CAPA FINA

MSc. EDINELDO LANS CEBALLOS Jorge Arturo Cordero. Roger Antonio Gmez Darwin Taboada Fabio Armando petro Ivn Daro lvarez Jeile Berrio Jos Eduardo Salazar

RESUMEN Una de las operaciones fundamentales de la qumica es el fraccionamiento y separacin de los componentes de las mezclas, la cromatografa es un mtodo que nos sirve para la separacin de algunos productos de sntesis, que se encuentran en mezclas complejas o la de sustancias de origen natural, que se presentan en cantidades muy pequea ( del orden de partes por milln) o tambin en casos de componentes con propiedades fsica y qumica muy similares , por ejemplo compuestos homlogos, los mtodos cromatograficos separan los componentes de las mezclas con base en las diferencias de otras propiedades , tales como, diferencias de velocidades de migracion entre los distintos componentes de mezcla, capacidad de absorcin, reparto, peso molecular, afinidad de intercambio de iones. PALABRAS CLAVES: cromatografa, afinidad, intercambio ionico, eluyente. Abstract One of the fundamental operations of the chemical is the fractionation and separation of components of mixtures, chromatography is a method that serves to separate some synthesis products which are complex mixtures of chemicals or natural , occurring in very small quantities (of the order of parts per million) or in cases of components with physical and chemical properties similar, for example homologous compounds, methods chromatographic separating components of mixtures based on differences other properties, such as differences in migration rates between the various components of a mixture, absorption, distribution, molecular weight, ion exchange affinity. Keywords: chromatography, affinity, ion exchange, eluent .

INTRODUCCION Unas de las clasificaciones de cromatografas es la cromatografa en papel y capa fina que se han utilizado en el estudio de algunos constituyentes de los productos naturales, en bioqumica y en el anlisis de sustancias inorgnicas, como por ejemplo determinacin de azucares, flaviones, aminocidos, actividad enzimtica, anlisis de elemento de trazas y diferenciacin de estado de oxidacin de un elemento. La separacin en cromatografa en papel se producen, fundamentalmente en procesos de reparto de las sustancia que se van a separar entre el solvente mvil y el agua de hidratacin del papel, intervienen fenmenos de absorcin, cuando la sustancia puede formar puente de hidrogeno con el grupo hidroxilo de la celulosa del papel y procesos de intercambio inico cuando se emplea los papeles transformados en intercambiadores de iones, mediante la introduccin de grupos inicos . MATERIALES Y REACTIVOS Beaker de 100 mL Pipetas de 5 y 10 mL Pera de succion Frasco lavador Universidad de Crdoba (Montera - Colombia). Facultad de Ciencias Bsicas Programa de Qumica Analtica III

Vidrio de reloj Capilares Papel filtro Soporte para placa cromatografica Cmara para cromatografa en capa fina Metanol Acetona Tetracloruro de carbono PARTE EXPERIMENTAL Cortamos tres tiras de papel filtro, trazamos una lnea gruesa con un rotulador en un extremo de cada una de ellas, y colocamos cada tira en un vaso en los que previamente habrs un par de dedos de agua, alcohol y cetona, respectivamente. Al cabo de un rato se observa que el disolvente asciende por el papel filtro arrastrando consigo diversos componentes de la tinta del rotulador. Si el soporte cromatogrfico es una tiza nos encontramos ante una cromatografa de columna. Posteriormente realizamos la determinacin del punto de fusin y la conductividad

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ANLISIS Y DISCUSIONES La muestra problema a separar fueron dos manchas de marcadores de diferentes colores , los componentes de estas muestras se separaron utilizando diferentes eluyentes, presentando diferentes resultados en cuanto al distancia recorrida y a la velocidad que la recorre, en cada uno de ellos. eluyente Color mancha Agua Amarillo azul Acetona Amarillo azul Metanol Amarillo azul Tetracloruro Amarillo de carbono azul X(cm) 2.5 2 2.6 3 3.3 3.5 0 0 Rf 2.5 2 2.6 3 3.3 3.5 0 0

Rta/: La cromatografa en capa es uno de los mtodos ms verstiles de anlisis cromatogrfico para la separacin e identificacin de sustancias qumicas. Es un instrumento de separacin sencillo, rpido y efectivo para el anlisis cualitativo y cuantitativo para una gran gama de productos qumicos, tamaos y soportes para satisfacer todas sus necesidades de aplicacin. Las finas capas de la placa combinan la robustez con la homogeneidad de la superficie, proporcionando un rendimiento de separacin inigualable. Esta tcnica posee importantes ventajas sobre otros mtodos cromatogrfico, pues no requiere de purificaciones exhaustivas, utiliza cantidades mnimas de solventes, es un mtodo rpida y, adems, por ser un sistema abierto, permite analizar distintas muestras y diferentes analitos en forma simultnea, lo que se traduce en economa, menor tiempo, materiales y reactivos. En comparacin con cromatografa de capa fina, tiene mayor poder de resolucin. As, muestras multicomponentes no son fcilmente separadas en una placa debido a la capacidad restringida de la placa. 3. Mencione las ventajas y desventajas cromatografa de tipo preparativo y analtico. de

A estos resultados le sumamos el hecho de que el tiempo de elucin en cada uno de las muestras (Agua, Acetona, Metanol, Tetracloruro de carbono) son diferentes, consecuencia de diferentes factores de carcter fisicoqumico como por ejemplo, la afinidad existente entre el componente de inters y la fase estacionaria, la interacciones electrostticas entre la fase estacionaria y el analito, sin olvidar la importancia de la compatibilidad o dependencia del eluyente con el componente que se va a separar y en que se va a separar. Estos parmetros fueron los determinantes en la rapidez de elucin de las manchas en la placa utilizando acetona como eluyente y por el contrario, cuando utilizamos tetracluroro de carbono el desplazamiento fue mnimo, casi nulo y los otros eluyentes, posean velocidades intermedias. CUESTIONARIO 1. que son las series eluotropicas y mezclas equieluotrpicas, y explique qu tiene que ver estos conceptos con la practica realizada? Rta/: Series eluotropicas es la ordenacin de los disolventes de acuerdo a su capacidad relativa para desplazar solutos o componentes de una mezcla sobre un determinado disolvente. Son usadas como guas en la elucin del solvente para la separacin de una mezcla concreta. Las mezclas equieluotrpicas es la combinacin de varias series eluotropicas. Est muy relacionado ya que se pudo observar cmo se desplazaba el solvente por medio de capilaridad tanto en cromatografa de papel como en capa fina. 2. Que es la cromatografa en capa delgada de alta eficiencia (HPTLC) y cules son sus ventajas y desventajas con respecto a la cromatografa en capa fina. Universidad de Crdoba (Montera - Colombia). Facultad de Ciencias Bsicas Programa de Qumica Analtica III

Rta/: Desventaja tipo preparativo La placa debe quedar libre de grumos y rugosidades, que afectaran al desarrollo del proceso cromatogrfico. Tiempo de separacin para el proceso cromatogrfico muy extenso en comparacin a otro tipo de cromatografa. La placa se estropea por accin del aire o de la luz lo cual dificulta el proceso cromatogrfico. Ventajas tipo preparativo La cromatografa preparativa comprende un amplio campo de aplicaciones, desde el aislamiento de 1 g de muestra para identificacin espectroscpica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una mezcla de 100 g. Las placas utilizadas en cromatografa preparativa son placas grandes, de aproximadamente 20x20 cm. que permiten separar aproximadamente 1 g de mezcla utilizando unos 35 g de adsorbente en comparacin a otro tipo de cromatografas que implementan placas pequeas en los cuales la separacin no es tan eficiente. Desventaja cromatografa analtica Cromatografa analtica se emplea para determinar la existencia y posiblemente tambin la concentracin de un analito en una muestra. Ventaja analtica En cromatografa analtica se necesita un flujo normal de trabajo entre 0.5 y 1.5 mL/min, en comparacin con otra cromatografa como por ejemplo preparativa que emplea un flujo normal de 10 Ml/min.

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CONCLUSIN La tcnica de cromatografa en capa fina tiene numerosas ventajas, aparte de ser rpida, sencilla, es de bajo costo y utiliza poca cantidad de muestra. En esta prctica logramos conocer y aplicar la cromatografa por capa fina, sus caractersticas y los factores que influyen en la separacin, adems de aprender a calcular los valores del factor de retencin para poder deducir la relacin que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan con las de los eluyente que se utilizan con ellas. BIBLIOGRAFA SKOOG, WEST, HOLLER, Fundamentos de qumica analtica, octava edicin, editorial THOMSON, 2005. Pg. 1014. Harris DC. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 ed. Barcelona: Reverte S.A; 2001 ANEXOS

Imagen 1: Placas cromatograficas de capa fina y la tinta

Imagen 2: Placas cromatograficas sumerjidas en tres soluciones.

Imagen 3: Placas despus de la separacion

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