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unaamentos isiologa Vegetal


Joaqun Azcon-Bieto Manuel Taln

EDICIN* i MYIRSUATUIUARCK1 ONA

Contenido

\utores Prefacio i. 2. 3. 4. 5. 6. ~. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 5. La fisiologa vegetal y su impacto social. La clula vegetal Gloria Revilla e Ignacio Zurra El agua en la planta Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea Movimientos estomticos y transpiracin Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea Transporte de agua y balance hdrico en la planta Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea Transporte en el floema Amparo Garca Luis y Jos Luis Guardiola Introduccin a la nutricin mineral de las plantas. Los elementos minerales Ildefonso Bonilla Absorcin y transporte de nutrientes minerales Jos Antonio Fernndez v Jos Mara Maldonado Nutricin mineral y produccin vegetal Agustn Gara te e Ildefonso Bonilla La luz y el aparato t'otosinttico Javier De Las Rivas Utilizacin de la energa luminosa en la fotosntesis Javier De luis Rivas Fijacin del dixido de carbono y hiosntesis de fotoasimilados Hiplito Medrana y Jaume Flexas Fotorrespiracn y mecanismos de concentracin del dixido de carbono Hiplito Medrana y Jaume Flexas Fotosntesis en un ambiente cambiante Joaqun Azcn-Bieto, Isabel Fleck. Xavier Arando y Alhert Xamh Fisiologa de la respiracin de las plantas Miguel Ribas-Carb y Miguel'ngel Gonzlez-Meler Asimilacin del nitrgeno y del azufre Jos Mara Maldonado, Elosa Agera y Rafael Prez-Vicente

IX XI 1 17 31 45 65 83 99 113 131 155 173 187 203 217 235

VIII 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30.

Contenido Fijacin biolgica de nitrgeno Pedro M. Aparicio-Tejo, Csar Arrese-Igor y Manuel Becuna Introduccin al metabolismo secundario Mara Teresa Pinol. Javier Palazn y Rosa Mara Cusido Introduccin al desarrollo. Concepto de hormona vegetal Juan Segura Auxilias Manuel Acost Echeverra. Jos Snchez Bravo y Marino Baen Arnao Giberelinas Manuel Taln Citoquininas Juan Segura Etileno, cido abscsico y otros reguladores del desarrollo Lorenzo Zacaras y M." Teresa Lafuente Fotomorfognesis: la luz como factor regulador del crecimiento Jorge Jos Casal Movimientos de las plantas: tropismos y nastias Luisa Moysse y Esther Simn Floracin y su control ambiental Marta Roldan y Jos M. Martnez Zapater Crecimiento y maduracin del fruto Manuel Agusl Germinacin y dormicin de las semillas ngel Malilla Juvenilidad, senescencia y abscisin Miguel ngel Quesada y Victoriano Valpuesta Biotecnologa vegetal: Transformacin gentica de plantas Leandro Pea Fisiologa de las plantas y el estrs Francisco R. Tadeo

Respuestas a los problemas y cuestiones ndice analtico

Autores

ACOSTA, M. Deparlamento de Biologa Vegetal. Facultad de Biologa. Universidad de Murcia.


AGP.RA, E.

CASAL, J. .1.

Departamento de Ecologa. Facultad de Agronoma. Univer sidad de Buenos Aires, Argentina.


CUSIDO, R. M.

Departamento de Biologa Vegetal y Ecologa. Facultad de Ciencias. Universidad de Crdoba. AGUIRREOI.RA. J. Departamento de Fisiologa Vegetal. Facultad de Ciencias. Universidad de Navarra. Pamplona.
AGUST, M.

Departamento de Productos Naturales. Biologa Vegetal y Edafologa. Facultad de Farmacia. Universitat de Barcelona.
FERNNDEZ, J. A.

Departamento de Biologa Vegetal, Facultad de Ciencias, Universidad de Mlaga. FLECK. I. Departamento de Biologa Vegetal, Facultad de Biologa. Universitat de Barcelona.
FU-XAS. J.

Departamento de Produccin Vegetal, Escuela Tcnica Supe rior de Ingenieros Agrnomos, Universidad Politcnica de Valencia.
APARICIO-TEJO, P. M.

Departamento de Produccin Agraria, Universidad Pblica de Navarra. Pamplona.


ARANDA, X.

Departamento de Biologa Ambiental. Facultad de Ciencias, Universitat de les Ules Balears-Institut Meditcrrni d'Estudis A vaneis. Palma de Mallorca.
GRATE. A.

Departamento de Biologa Vegetal, Facultad de Biologa. Universitat de Barcelona. ARSESE-lGOR, C. Departamento de Ciencias del Medio Natural, Universidad Pblica de Navarra, Pamplona. AZCN-BlETO, J. Departamento de Biologa Vegetal. Facultad de Biologa, Universitat de Barcelona.
BAN ARNAO. M.

Departamento de Qumica Agrcola, Geologa y Geoqumica, Facultad de Ciencias, Universidad Autnoma de Madrid.
GARCA LUIS. A.

Departamento de Biologa Vegetal, Escuela Tcnica Superior de Ingenieros Agrnomos. Universidad Politcnica de Valencia.
GONZLP.'/.-MELER. M. A.

Department of Botany. Duke University. Durham, USA. GUARDIOLA, J. L. Departamento de Biologa Vegetal. Escuela Tcnica Superior de Ingenieros Agrnomos. Universidad Politcnica de Valencia.
LAFENTE, M. T .

Departamento de Biologa Vegetal. Facultad de Biologa. Universidad de Murcia.


BF.CANA, M.

Estacin Experimental de Aula Dei. Consejo Superior de In vestigaciones Cientficas, Zaragoza. B :\ILI.A, 1. Departamento de Biologa General. Facultad de Ciencias. Universidad Autnoma de Madrid.

Instituto de Agroqumica y Tecnologa de los Alimentos, Burjasot. Valencia.


MALDONADO, J. M .

Departamento de Biologa Vegetal y Ecologa. Facultad de Biologa, Universidad de Sevilla.

IX

Prefacio

Las plantas, desde el ms insignificante de los vegetales ^sta el mayor de los rboles, estn siempre presentes a nuestro alrededor. Sin embargo, no pueden ser consideM J S simplemente como piezas decorativas de un jarn o de un paisaje, sino que deben ser valoradas, en su >>ta medida, por su contribucin nica al desarrollo de Ja en la Tierra, y por tanto con una repercusin recta en nuestra propia existencia. Las plantas, y los ales en general, constituyen el soporte primordial : el que se asienta la cadena trfica de los ambienminentales y, probablemente, marinos. Por si esto "jera poco, la existencia de las plantas nos permite, adems, respirar el oxgeno de la atmsfera y acceder a parte de los constituyentes vitales de nuestra dieta. ;je nos proporcionan energa, fibra y vitaminas. La po -:lidad de que los alimentos vegetales provengan, en .uro prximo, de plantas transgnicas es actualente motivo de un gran debate social, cuya solucin jebera basarse en una evaluacin cuidadosa de las posi- e> implicaciones de estas plantas sobre la salud y el -edio ambiente. Por lo tanto, es importante conocer funcionan las plantas en los distintos niveles de -.inizacin interna, y cmo se adaptan funcionalmenambiente en el que habitan, de manera que esta -formacin contribuya a aumentar las relaciones bene ficiosas entre el hombre y las plantas. El libro Fundamentos de Fisiologa Vegetal pre: aportar una visin bsica, actualizada y pedaggi;^ del funcionamiento de las plantas, y los vegetales en ral, en niveles de organizacin que van desde el basta la planta entera. La obra est dirigida princi palmente a los estudiantes de la asignatura de Fisiologa ;tal de los diversos centros universitarios en los que >e imparte, y pretende ayudar a introducir por primera al alumno en los diferentes temas de la fisiologa __tal, as como en sus aplicaciones y perspectivas en ciedad actual. Sin embargo, el nivel de informaquc proporciona el libro, aunque fundamental, es iente para que tambin sea til en el estudio de aturas avanzadas relacionadas con la fisiologa ve

getal, dado que los autores de los diferentes captulos son especialistas de los temas que tratan. La obra comprende un total de 30 captulos, cada uno de ellos elaborado por prestigiosos profesores e investi gadores de universidades y centros de investigacin de Espaa (en su mayora) y, tambin, de algunos pases americanos. El captulo de introduccin define el con cepto y el mbito de aplicacin de la fisiologa vegetal, centrndose a continuacin en la clula vegetal. Los as pectos relacionados con las membranas y la pared celu lar se abordan con especial atencin. Los siete captulos siguientes exponen las relaciones hdricas de las plan tas, el transporte de agua y de asimilados, as como la nutricin mineral de las plantas. A continuacin, se pre sentan otros nueve captulos que podran agruparse bajo el ttulo de fotosntesis y metabolismo. Los captulos nueve a trece se centran especficamente en el proceso de la fotosntesis, desde la base fotoqumica hasta su integracin en el medio ambiente cambiante; los si guientes captulos exponen el metabolismo respiratorio, el metabolismo del nitrgeno, incluyendo la fijacin de nitrgeno atmosfrico, y el metabolismo del azufre; fi nalmente, se introduce el metabolismo secundario. Es tos 17 primeros captulos proporcionan al estudiante las bases estructurales y energticas del funcionamiento de la planta, as como el conocimiento necesario para en tender su crecimiento en biomasa a partir del aporte de elementos externos, como el agua, los nutrientes mine rales y el dixido de carbono. A partir del Captulo 18, se exponen, en una serie de once captulos, los fundamentos esenciales que descri ben a la planta como un proceso de desarrollo progra mado, que adeca los cambios cuantitativos asociados con el crecimiento con los cambios cualitativos que la planta experimenta para adoptar su forma, y que final mente la capacitan para obtener alimento, reproducirse y adaptarse a su entorno. Estos captulos, centrados alrededor del desarrollo, abarcan el estudio de las hor monas vegetales, los fitocromos y otros fotorreceptores, los movimientos de las plantas y los procesos de XI

XII

Prefacio

desarrollo que definen el ciclo vital, como la floracin, el crecimiento y la maduracin del fruto, la germina cin de las semillas, y la senescencia de la planta. En estos captulos, se ha prestado una atencin especial a las aplicaciones comerciales de los aspectos relacio nados con el desarrollo, especficamente de las fitohormonas. La introduccin a la biotecnologa vegetal y a la transformacin gentica de plantas es el objeto del Captulo 29. La problemtica y las aplicaciones de las plantas transgnicas se plantean con rigor y seriedad. Finalmente, el ltimo captulo est dedicado al funcio namiento de las plantas en condiciones de estrs, y re laciona e integra los conceptos fisiolgicos que previa mente han aparecido en el libro con las respuestas y adaptaciones de las plantas a diversos tipos de estrs bitico y abitico. Los aspectos pedaggicos se han cuidado con esmero y especial atencin. As, los captulos se han diseado con apartados cuyos ttulos, contenido y distribucin permiten una lectura fcil y atractiva para el alumno. capaz de estimular su inters por conocer mejor la fisio loga de las plantas. Cada captulo se completa con una sucinta lista de bibliografa recomendada, un resumen fi nal y un breve cuestionario de problemas, con sus respec tivas respuestas al final del libro, que el alumno puede utilizar para autoevaluar su nivel de conocimientos.

Por ltimo, los coordinadores de la obra quisiramos agradecer a los autores de los distintos captulos el enorme esfuerzo realizado para intentar sintetizar sus conocimientos, de la forma ms didctica, rigurosa y actualizada posible, en el reducido espacio de que se dispona para cada uno de los temas. Seguro que algu nos aspectos importantes se habrn quedado en el tinte ro, pero esperamos que el lector sepa disculpar tanto las omisiones como los errores que se hayan podido desli zar en el texto, cuya nica responsabilidad habr que buscarla en nosotros mismos. Tambin queremos agra decerles. de manera especial, su colaboracin entusias ta durante todo el largo proceso de elaboracin y revi sin de la obra. No menos agradecidos estamos a nuestra editora, Marisa Alvarez, cuya profesionalidad y paciencia han resultado fundamentales para que esta obra haya visto la luz. Tan slo nos cabe desear a los alumnos de fisiologa vegetal que el estudio de este li bro, junto con las explicaciones de sus profesores, les ayude a descubrir las fascinantes e intrincadas funcio nes vitales de nuestras muy necesarias plantas.
JOAQUN AZCN-BIETO y MANUEL TALN

Febrero, 2000

CAPITULO

LA FISIOLOGA VEGETAL Y SU IMPACTO SOCIAL. LA CLULA VEGETAL


Gloria Revilla e Ignacio Zarra
" Qu es la Fisiologa Vegetal? 2. Las clulas de las plantas. 3. Las membranas son la base de la compartimentacin relular. 4. La pared celular permite la supervivencia en ambientes hipotnicos.

1. QU ES LA FISIOLOGA VEGETAL?
La Fisiologa Vegetal es la ciencia que estudia cmo funcionan las plantas, esto es, qu ocurre en las plantas que las mantiene vivas. Explica a travs de leyes fsicas | qumicas cmo las plantas son capaces de utilizar la energa de la luz para, a partir de sustancias inor.. nicas, sintetizar molculas orgnicas con las que astruir las complejas estructuras que forman el cuer po de la planta. Explica tambin cmo las plantas, si guiendo un programa de desarrollo endgeno, son ca paces de reproducirse y cmo adaptan dicho programa al ambiente particular de cada momento. Pero el aspeeAi ms importante no es el cmulo de procesos fsicos ;. qumicos que tienen lugar en cada punto concreto de la planta y en cada momenlo de su programa de desarrollo, sino cmo se integran dichos procesos en el espacio y en el tiempo y su modulacin por el medio ambiente para llevar a buen trmino el desarrollo del organismo planta.

1.1. Son las plantas las fbricas del futuro?


El hombre, desde el inicio de los tiempos, ha utilizado as plantas para su beneficio como alimento, vestido, material de construccin, fuente de energa, obtencin Je productos teraputicos, ornamento, etc. El mayor co nocimiento, no slo de la diversidad de las plantas, sino tambin de su funcionamiento en los distintos niveles de integracin (molecular, celular, organismo y pobla cin) ha permitido disear mejores estrategias para aumentar su produccin, as como mejorar su calidad. En los ltimos aos hemos asistido al vertiginoso des

pegue de la biologa molecular de las plantas y su apli cacin biotecnolgica (vase Captulo 29). Al menos en teora, cualquier ruta metablica puede someterse a ma nipulacin. para modificar la produccin de los distin tos metabolitos primarios y secundarios. As, se est in vestigando con cierto xito en el enriquecimiento en vitaminas (como el cido ascrbico o vitamina C) de los alimentos vegetales, plantas con ligninas ms fcil mente degradables para reducir la contaminacin in dustrial en la preparacin de pasta de papel, etc. Sin embargo, hay al menos cuatro aspectos que pueden afectar al resultado de estos experimentos: 1) no siem pre es posible predecir el resultado global en el organis mo de la manipulacin puntual de la actividad de una enzima concreta, ya que los distintos mecanismos de control del metabolismo, todava no bien conocidos, pueden afectar al resultado final: 2) la manipulacin del metabolismo primario puede afectar, de forma todava no bien conocida, al crecimiento y desarrollo de la planta; 3) el crecimiento y desarrollo de las plantas na turales y, por supuesto, de las manipuladas gentica mente est afectado por las fluctuaciones ambientales que pueden influir adversamente sobre el objetivo per seguido, y 4) muchas de las aplicaciones de la ingenie ra gentica requieren que el producto objeto de mani pulacin se produzca en el lugar y en el momento adecuado de la vida de la planta, esto es, debe incorpo rarse de forma adecuada en el programa de desarrollo de la planta (vase Captulo 18). Por todo ello, parece evidente que en estos momen tos, el punto crtico en el que se encuentra la Biologa de las Plantas no es tanto el conocer los genes o las reacciones concretas que tienen lugar en las plantas. sino cmo se integran espacial y temporalmente en el

i-unaamentos

de fisiologa

vegetal

programa de desarrollo del organismo. Como hemos in dicado al inicio de este captulo, la integracin tanto espacial como temporal de los distintos procesos que tienen lugar en la planta es el objetivo ltimo de la cien cia que nos ocupa, la Fisiologa Vegetal. En estos momentos, el gran reto que se plantea la Biologa de las Plantas no es slo mejorar los productos agronmicos o forestales, sino la obtencin de nuevos productos o procesos: nuevos polmeros, frmacos, ab sorcin de metales contaminantes (biorremediacin), etc. Sirva como ejemplo la obtencin de patatas trans formadas genticamente para ser capaces de sintetizar una vacuna contra la diarrea, cuyas primeras pruebas clnicas se han llevado a cabo en Estados Unidos en 1997. La distribucin de vacunas mediante frutas y hor talizas para consumo en fresco puede resolver muchos de los problemas que encuentran los programas de va cunacin en los pases del tercer mundo: costes de transporte, conservacin bajo refrigeracin, riesgos de infeccin por agujas hipodrmicas. etc.; sin olvidar que probablemente en los pases desarrollados los nios prefieran comerse la vacuna que recibir un pinchazo.

2.

LAS CLULAS DE LAS PLANTAS

La unidad funcional bsica de las plantas, como en to dos los organismos vivos, es la clula. Por ello, el estu dio de la fisiologa de las plantas es, en gran parte, el estudio de la fisiologa de las clulas de las plantas y su integracin en el organismo. La gran diversidad ecol gica de las plantas est directamente relacionada con la enorme variedad de formas, estructuras y funciones de las clulas individuales que las forman. Esta diversidad hace difcil generalizar las caractersticas de una clula. As. nos encontramos las clulas del xilema que son bioqumicamente inactivas (muertas), pero que cum plen una importante funcin en el transporte del agua (vase Captulo 4). Las clulas del floema, los elemen tos cribosos, son anucleadas y han perdido su sistema de membranas a excepcin de la membrana plasmtica; sin embargo, estn perfectamente adaptadas para per mitir el transporte de asimilados (vase Captulo 5). En cuanto a las clulas del parnquima. que podemos con siderar funcionalmente completas, son el tipo ms co mn de clulas y constituyen aproximadamente el 80 por 100 del total de las clulas que forman la planta. Sin embargo, a pesar de las diferencias, la mayora tiene una organizacin estructural comn. As, en gene ral. las clulas presentan una pared celular que rodea el protoplasto. delimitado externamente por la membrana plasmtica. El material vivo en el interior del protoplasto recibe el nombre de protoplasma. El protoplasma no posee una estructura homognea sino que. inmersas dentro de una masa relativamente indiferenciada (citoplasma), pueden distinguirse estructuras per fectamente diferenciadas y delimitadas por membranas (sencillas o dobles), que cumplen funciones especficas

(orgnulos). A su vez, el citoplasma todava contiene en suspensin distintas estructuras no rodeadas de mem brana, como ribosomas, microtbulos e inclusiones. La fase acuosa del citoplasma recibe el nombre de citosol (Fig. 1-1, Cuadro 1-1). En trminos generales, podemos considerar la clula como una estructura compleja, constituida por distintos compartimentos con funciones diferentes y separados entre s por membranas. La membrana plasmtica esta blece la primera divisin en compartimentos: por una parte, el protoplasma, tradicionalmente identificado con el interior de las clulas; por otra, el espacio exter no o espacio extracelular, aunque no parece adecuado contemplar este espacio como algo externo a la clula ya que. si bien en principio presenta continuidad en el seno del tejido y sirve como va de difusin de diversas sustancias, posee estructuras, como la pared celular, as como sistemas enzimticos cuya sntesis depende de las clulas, adems de cumplir funciones esenciales para las mismas (crecimiento, modificacin de ciertos nutrientes, reacciones defensivas, etc.). Por ello, el espacio extracelu lar debe describirse como un compartimento ms de las clulas, con la peculiaridad de continuarse con el de las clulas adyacentes, recibiendo el nombre de apoplasto. Por otra parte, el espacio rodeado externamente por la membrana plasmtica, el protoplasma, no aparece siempre como un espacio individualizado e indepen diente de las clulas contiguas, sino que puede estar inlerconectado a travs de los plasmodesmos, lo que ori gina un compartimento continuo que recibe el nombre de simplasto. A su vez, el protoplasma est subdividido en distintos compartimentos separados del citoplasma

Figura 1-1. Representacin esquemtica de una clula del parnquima de una planta.

La fisiologa

vegetal y su impacto social. La clula vegetal

Cuadro 1-1. Definiciones de algunos trminos utili zados para describir los componentes celulares
Trmino Protoplasto Apoplasto Definicin Contenido ele la clula, excluida la pared celular Espacio externo a la membrana plasmti ca donde se encuentra la pared celular y que puede presentar continuidad en el seno del tejido Material vivo en el interior del proioplasto Estructuras rodeadas por una o dos mem branas presentes en el interior del pro toplasto Protoplasma. excluidos los orgnulos Espacio constituido por el citoplasma de las distintas clulas que presenta coniinuidad a travs de los plasmodesmos Estructuras presentes en el citoplasma que no estn rodeadas por una mem brana Fase acuosa del citoplasma, excluido el material particulado (inclusiones)

Protoplasma Organillos

Citoplasma S implaste

Figura 1-2. Representacin esquemtica del modelo flui do de membrana, j , cadena hidrfoba de cido graso; , cabeza polar de glicerolipido; , regin hidrofbica y , regin polar de: a) protena intrnseca con dominios transmembrana; b) protena intrnseca que forma un canal polar a travs de la membrana; c) protena intrnseca anclada parcialmente en la membrana; d) protena extrnseca.

Inclusiones

Citosol

por membranas dobles o sencillas, que constituyen los orgnulos (ncleo, plastos, mitocondrias, retculo endoplsmico, aparato de Golgi, vacuolas y microsomas), cada uno de ellos con funciones especficas. Debido a que los distintos orgnulos sern objeto de .-.ludio en captulos posteriores, aqu nos centraremos en dos aspectos de las clulas que sern bsicos para entender los mltiples procesos fisiolgicos que tienen jar en las plantas: las membranas y su papel en la compartimentacin celular (apartado 3) y la pared celu;ar. que confiere caractersticas nicas a las clulas de bs plantas (apartado 4).
3. LAS MEMBRANAS SON LA BASE DE LA COMPARTIMENTACIN CELULAR

formados por dos cadenas de cidos grasos esterificados a dos de los grupos hidroxilo del glicerol. El tercer hidroxilo sirve de unin a distintos grupos que confie ren cierta polaridad a la molcula: azcares (glicolpidos) y esteres fosfato (fosfolpidos) (Fig. 1-3). Los esteroides. como sitosterol, estigmasterol, colesterol, etc., aunque minoritarios, tambin son componentes de las membranas vegetales. La bicapa lipdica est constituida por lpidos polares que presentan una cabeza polar y una cola hidrfoba. Esta caracterstica les permite formar bicapas lipdicas en las que las colas hidrfobas de los cidos grasos se mantienen unidas, mientras que las cabezas polares se orientan hacia la fase acuosa (Fig. 1-2).
' 3.2. Las protenas originan dominios especficos en las membranas

Las membranas son componentes esenciales de las c lulas que permiten su autonoma respecto al medio en que se encuentran, as como la existencia de distintos compartimentos en su interior. El modelo de mosaico Huido propuesto por Singer y Nicholson. y ampliamen te aceptado en nuestros das, establece que las membra nas estn constituidas por una bicapa lipdica en la que as protenas pueden estar tanto embebidas en dicha bi capa como asociadas a su superficie (Fig. 1-2).
3.1. Los I pidos de membrana son antipticos

Los glicerolpidos polares son los principales constitu yentes de las membranas de las clulas vegetales. Estn

Las protenas presentes en las membranas biolgicas se pueden dividir en dos tipos segn el tipo de asociacin que presenten: a) protenas intrnsecas, atrapadas fsi camente en la fase lipdica y que slo podrn solubilizarse mediante tratamientos que disuelvan dicha fase lipdica, y b) protenas extrnsecas, ligadas inicamen te a los grupos polares de los lpidos y que pueden libe rarse fcilmente mediante tratamientos con soluciones de mayor o menor fuerza inica. La estructura qumica y la distribucin espacial de las cadenas laterales de los distintos restos aminoacil que constituyen la cadena peptdica son las responsables no slo de las propieda des fsico-qumicas de la protena, sino tambin de la aparicin en la misma de regiones con caractersticas especficas. As, regiones enriquecidas en aminocidos con cadenas laterales no polares (alanina, leucina, triptfano, etc.) darn lugar a la aparicin de dominios hi drfobos que permiten su anclaje en la membrana. La

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Grupos polares Fosfolpidos Fosfatidil-colina OH H H CH3 Glicolipidos Mono-galactosilHOCH O

OP0CCNCH3 O H H CH 3

Fosfatidil-etanolamina OH H

H HOCH,

0POCCNH2

II
0 H Fosfatidil-glicerol OH H

II
H

Hoi v
H

OP0CCCOH O H OHH

Fosfatidil-serina OH H H

OPOCCNH, O H COOH

Fosfatidil-inositol OH OPO, O OH OH Sulfo-6-deoxiglucosil(sulfolpido)

F i g u r a 1-3. plantas.

E s t r u c t u r a q u m i c a d e l o s g l i c e r o l p i d o s m s f r e c u e n t e s e n c o n t r a d o s e n las m e m b r a n a s d e las c l u l a s d e las

distribucin y extensin de dichos dominios hidrfobos sern las responsables de la localizacin de las prote nas en la membrana (Fig. I-2). As, con frecuencia los dominios hidrfobos pueden extenderse desde la super ficie externa hasta la interna, constituyendo un dominio transmembrana. Por el contrario, aquellas protenas sin dominios hidrfobos pero con dominios cargados elctri camente se asociarn a los grupos polares de los lpidos de membrana para constituir las protenas extrnsecas.

3.3.

La fluidez de las membranas depende de la insaturacin

Las cadenas hidrfobas de los cidos grasos que consti tuyen la fase hidrfoba de las membranas tendrn pro piedades de gel o de lquido, dependiendo de la tem peratura. A bajas temperaturas estarn en fase gel y conforme aumente la temperatura, se producir la tran sicin a fase lquida. La temperatura a la que se produce la transicin gel-lquido recibe el nombre de temperatu ra de cambio de lase (Tc). La funcionalidad de las mem branas biolgicas requiere una cierta fluidez que permi ta el movimienlo transversal y lateral no slo de las

molculas lipdicas, sino tambin de una serie de sus tancias: protenas transportadoras, sustratos y productos de las enzimas asociadas a las membranas, transporte de electrones, etc. Por ello, ser necesario que las mem branas biolgicas se encuentren a una temperatura su perior a su Tt.. Este requisito va a tener una gran impor tancia en la sensibilidad o resistencia de las plantas a bajas temperaturas (vase Captulo 30). La Tc depende de la estructura de las cadenas de los cidos grasos, as como de su disposicin relativa en la unin a la molcu la de gliccrol. La aparicin de dobles enlaces en ees en las cadenas de los cidos grasos (vase Fig. 1-3) provo ca dobleces en la cadena y disminuye el grado de empa quetamiento de la misma lo que hace que su T c sea me nor y permite mantener la fluidez de las membranas a temperaturas ms bajas. Si tenemos en cuenta que las plantas son organismos poiquilotermos, esto es, que no pueden regular su propia temperatura, el aumento de la insaturacin de los cidos grasos de sus membranas ca talizado por las desaturasas les permitir mantener la funcionalidad (fluidez) de sus membranas a temperatu ras ambiente relativamente bajas. As, mediante tcni cas de ingeniera gentica, se ha logrado aumentar la tolerancia de plantas de tmale a bajas temperaturas al

La fisiologa

vegetal y su impacto social. La clula vegetal

crementar la proporcin de cidos grasos insaturados embranas. Las membranas son impermeables a las sustancias polares . idrfoba constituida por las colas de los cidos ; -tablece una barrera a la difusin de las sustan cias polares que separa la fase acuosa en dos, una a cada :- i.i membrana. Hn trminos generales, la per meabilidad de las membranas est relacionada con el . . nte de particin de las distintas sustancias entre iipdica y la fase acuosa. La fase lipdica hidrere a las membranas cierta impermeabilidad las molculas polares, lo que hace necesaria la istencia de mecanismos relativamente especficos transporte que sean susceptibles de regulacin %ea&e Captulo 7). As, los distintos compartimentos -..:<< por membranas podrn mantener ambientes nicos diferentes para poder llevar a cabo los dislinprocesos metablicos. Adems, este ambiente hi po proporciona el medio adecuado para que tcn_ aquellas reacciones en las que participan as hidrfobas (lpidos, cadenas transportadoras de electrones, etc.).

lticas y de transporte diferentes, parece lgico que no slo presenten distinta relacin protena/lpidos, sino tambin distintos tipos de polipptidos segn sus funcio nes especficas. Pero no son stas las nicas diferencias entre las membranas; tambin vara su composicin lip dica, tanto en el tipo de lpidos como en el grado de insaluracin de los cidos grasos (Cuadro 1-2). As, mientras las membranas mitocondriales estn enriquecidas en fosfolpidos, las cloroplsticas lo estn en glicolpidos (prin cipalmente galactolpidos) (vase Captulo 9). En general, cuanto mayor sea la fluidez de las membranas, la activi dad metablica en su fase hidrfoba ser mayor. 3.7. Las membranas permiten el establecimiento de distintos compartimentos en las clulas

: i

Las membranas presentan asimetra

bucin de las protenas, intrnsecas o extrnsev. depende de las interacciones entre dominios espeficos de las mismas y las cadenas hidrfobas de los grasos, y tambin los grupos polares de los lpis de las membranas. La extensin de los dominios os de las protenas les permitirn una mayor o : ?r penetracin en la bicapa lipdica, lo que establcrintas localizaciones en el interior de la membrana las distintas protenas. Mediante diversas tcnicas _ tura, utilizacin de sondas no permeantes. etc.) A podido demostrar asimetra en las membranas. es, la existencia de diferencias entre sus dos mitaB, externa e interna. Esta asimetra no slo se refiere a n a s . sino tambin a los lpidos. As. en los tilacides de cloroplastos de espinaca, mientras el mono. ildiacilglicerol est mayoritariamente localizaB en la mitad externa, el digalactosildiacilglicerol lo s en la interna.

El sistema de membranas de las clulas, al separar dis tintas fases acuosas, establece distintos compartimentos en las clulas: citoplasma, espacio interno de los orgnulos y apoplasto. Esto, unido a la existencia de meca nismos especficos de transporte para cada sustancia se gn el tipo de membrana, permite que se encuentren diferentes concentraciones de metabolitos en los distin tos compartimentos estableciendo ambientes qumicos especializados en los que tendrn lugar las distintas vas metablicas. La estructura y funciones de cada uno de los compartimentos celulares sern objeto de estudio en captulos posteriores. El Cuadro 1-3 resume los com partimentos subcelulares de una clula tpica del mesfilo fotosinttico. La divisin de la clula en pequeos compartimentos tambin puede servir para conseguir altas concentraciones de metabolitos sin necesidad de producir grandes cantidades del metabolito en cuestin.

4.

LA PARED CELULAR PERMITE LA SUPERVIVENCIA EN AMBIENTES HIPOTNICOS

36

Las membranas difieren en su composicin

\iiDque todas las membranas presentes en las clulas n-en la misma estructura bsica, las diferentes mem_..- tienen tambin diferentes proporciones de proinas y lpidos. as como entre los distintos tipos de - protenas. Si tenemos en cuenta que las difeleaes membranas de las clulas tienen funciones cata

Las clulas provistas de pared celular, a diferencia de las clulas desnudas de los organismos animales, no ne cesitan un ambiente isotnico para sobrevivir. La pa red celular les permite acumular solutos en su proloplasto a concentraciones mayores que las presentes en el medio externo (apoplasto). En estas condiciones, el agua tender a entrar en el protoplasto por osmosis (vase Captulo 2), provocando un aumento de volu men por la elasticidad de la membrana plasmtica. El aumento de volumen est limitado por la pared celular que, debido a su resistencia mecnica, ejerce una pre sin sobre el protoplasto que equilibra los potenciales hdricos entre la clula y el medio externo. Aunque la pared celular es una estructura comn a lodos los organismos del reino Planta, su composicin vara entre especies, entre tejidos de una misma espe cie. entre clulas... En la clula vegetal, la pared se va depositando como una serie de capas. As, durante la

Fundamentos de fisiologa vegetal Cuadro 1-2. Composicin lipdica relativa (%) de las membranas vegetales

Lpidos neutros y esterles VI. plasmtica Mitocondria m. externa m. interna Cloroplasto m. externa m. interna tilacoide Tonoplasto 50 0 0

Glicolpidos 1

Fosfolpidos 49 99 99

ndice de maturacin" 144 156 186 94h 263

18

56 84 83 31

29 13 17 51

Representa el nmero de dobles enlaces en 100 resios de cidos rasos Corresponde a las dos membranas de la cubierta del cloroplasto.

divisin celular se deposita la primera capa originando la lmina media, formada fundamentalmente por polisacridos pcticos, que mantiene la unin entre las c lulas adyacentes. Entre la lmina media y la membrana plasmtica, se contina depositando el material que va a constituir la pared celular. Una vez que la placa celu lar est completa, en las clulas hijas tiene lugar el de psito del material que constituye la pared celular primaria, de escaso grosor (0.1-1.0 /mi). Las paredes primarias son de gran importancia en el proceso de ex tensin o expansin celular, pues controlan el creci miento (vanse apartado 4.4 y Captulos 18 y 19). En algunos tipos de clulas especializadas, una vez que de jan de crecer, se depositan nuevas capas de material en la cara interna de la pared, lo que constituye la pared secundaria, ms gruesa que la primaria. La pared celular es una estructura altamente organi zada, formada por una red tridimensional de microfibrillas de celulosa embebida en una matriz constituida por polisacridos (hemicelulosas y pectinas), protenas y fenoles en una solucin ligeramente acida. A diferencia de lo que sugiere su nombre, no es una estructura estti ca sino un compartimento metablico dinmico y man tiene continuidad molecular con la membrana plasmti ca y el citoesqueleto. La pared tiene una gran resistencia mecnica, y defi ne el tamao y la forma de la clula, al controlar en gran parte el crecimiento celular (vase Captulo 18). Tiene tambin un papel importante en la defensa de las plantas frente a organismos potencialmente patgenos, al actuar como barrera fsica y como fuente de molculas con acti vidad biolgica (oligosacarinas), implicadas en el control de mecanismos de defensa (vanse Captulos 22 y 30).

de las paredes de sus clulas. Por tanto, las clulas que realizan diferentes funciones tienen paredes con distin ta composicin y estructura. Sin embargo, en general. podemos considerar que una pared celular est formada mayoritariamenie por polisacridos (celulosa, hemice lulosas y pectinas), que constituyen alrededor del 90 % del peso seco de las paredes celulares primarias y entre el 65 y el 85 % de las secundarias. En !a Figura 1-4 se detallan los azcares constituyentes de dichos polisac ridos y sus estructuras ms frecuentes. Las protenas, tanto estructurales como enzimticas, constituyen hasta un 10 % del peso seco de las paredes, mientras que las ligninas pueden tener una presencia importante (hasta un 35 %) en algunos tipos de paredes secundarias.

4.7.7. La celulosa constituye la fase fibrilar de las paredes celulares de todas las plantas La celulosa est constituida por una larga secuencia li neal de restos de D-glucosa unidos por enlaces /?(l-4) (Fig. 1-5). Cada resto presenta una rotacin de 180 res pecto a los restos contiguos, estabilizada por puentes de hidrgeno intramoleculares. El grado de polimeriza cin medio en paredes secundarias es alto, aproximada mente 104, mientras que en paredes primarias es ms bajo, entre 2.6 y 6 x LO3. Debido a su estructura, las cadenas de celulosa (40-70) se unen por puentes de hi drgeno intermoleculares formando agregados (microfibrillas), en su mayor parte cristalinos, en los que las cadenas individuales de celulosa se disponen de forma paralela. Estas microfibrillas estn separadas entre s unos 30 nm. espacio ocupado por los polisacridos matriciales y lignina o suberina, lo que confiere gran resis tencia mecnica a la pared. Las microfibrillas de celulo sa estn presentes en las paredes de todas las plantas superiores, constituyendo el 30-40 % de peso de las pa redes de tejidos leosos, mientras que en paredes pri marias se encuentran en menor proporcin.

4.1.

Los polisacridos son los c o m p o n e n t e s mayortarios de las paredes

Muchas de las caractersticas fisiolgicas y morfolgi cas de los tejidos vegetales resultan de las propiedades

La fisiologa vegetal y su impacto social. La clula vegetal Cuadro 1-3. Volumen relativo de los principales compartimentos de una clula del mesfilo de hojas de espinaca Volumen relativo (%) 57.2 21.3 4.5 0.7 0.4 Algunas de las funciones ms caractersticas Mantenimiento de la turgencia celular Fotosntesis Metabolismo de azcares, sntesis de sacarosa Respiracin celular Material gentico, replicacin y transcripcin Procesado y transporte de protenas Sntesis de polisacridos estructurales no celulsicos Destoxificacin fotorrespiratoria del glicolato p-oxidacin de cidos grasos, ciclo del glioxilato 16.0 Reacciones que modifican la pared celular

Compartimento Vacuola Cloroplasto

Citosol
Mitocondria Ncleo Retculo endoplsmico Aparato de Golgi Pcroxisomas Glioxisomas Apoplasto

Adaptado de Winicr el al. Plimiu 193: 530-535, 1994.

4.1.2.

Las hemicelulosas entrelazan microfibrillas de celulosa

las

Los polisacridos hemicelulsicos estn constituidos por una cadena lineal relativamente larga sobre la que pueden aparecer cadenas laterales relativamente cortas. En la mayora de las plantas, excepto gramneas, el xiCH,OH HO HO

loglucano es el poli sacando no celulsico ms abun dante, aunque dependiendo de las especies y de los teji dos presenta unidades estructurales diferentes. Est constituido por un eje central de /i(l ->4)glucano idnti co al de la celulosa, pero bastante ms corto. Adems, a diferencia de sta, gran parte de los restos de glucosa estn unidos a restos de xilosa mediante un enlace

OH I CH.OH HO OH OH /'-D-galactopiranosa (Ga


H 0

CH?OH OH -

O -X^OH

OH OH /i-D-glucopiranosa (Glc COOH

/-D-manopranosa (Man)

OH I

-D-galacturonopiranosa (GalU) OH

e-L-arabinofuranosa (Ara) .O. OH

U-'OH
|HO OH c-L-fucopiranosa (Fue) OH OH !<-D-apiofuranosil (Api) OH f H * 0 H COOH HO HO OH /i-D-glucuronopiranosa (Glcll) Figura 1-4. cido /3-L-acrico (AceA) OH HO OH

COOH cido ceto-deoxi-octulosnico (KDO)

Estructura de los principales monosacridos presentes con mayor frecuencia en las paredes celulares.

Fundamentos de fisiologa vegetal

Figura 1-5. Conformacin de las cadenas de |M1 ->4)-D-glucano de las microfibrillas de celulosa mostrando los puentes de hidrgeno intra e intermoleculares (lineas de puntos).

a(l 6) (Fig. 1-6). Estas sustituciones suelen disponer se ordenadamente, de manera que la unidad estructural bsica est formada por 3 restos de glucosa sustituidos, enlazados a un cuarto resto no sustituido (Glc4-Xil,). A su vez, parte de los restos de xilosa pueden llevar uni dos al C-2 cadenas laterales de /?-D-galactosa o, en me nor proporcin, de L-fucosa-c( 1 -2)-D-galactosa. El xiloglucano de las Solanaceae no presenta fucosa y los restos de xilosa se encuentran sustituidos de forma pre dominante por a-L-arabinosa-(l~2)- o ot-L-arabinosa(I -*2)- y /J-D-galactosa-(l -*2)-. En todos los casos los restos de galactosa pueden estar acctilados. El hecho de que los sustituyentes estn distribuidos de una forma precisa a lo largo de la molcula indica que su sntesis esi sometida a un control estricto. Las paredes celula res de gramneas (Poaceae) presentan pequeas canti dades de xiloglucano con una estructura menos regular, menor contenido en xilosa y galactosa y sin fucosa. Las cadenas de xiloglucano pueden unirse mediante puentes de hidrgeno a la celulosa y cubrir las microfi brillas con una monocapa de hemicelulosa. Teniendo en cuenta que, en la mayora de las plantas (excepto gramneas), la celulosa y el xiloglucano estn presentes en la pared celular en cantidades casi iguales, slo una parte del xiloglucano puede enlazarse directamente a la celulosa, mientras que el resto estara situado en los es pacios entre las microfibrillas, pudiendo una molcula de xiloglucano unir 2 o ms microfibrillas para formar la red xiloglucano-celulosa. Los xilanos estn constituidos por una cadena lineal de /i(l-4)-D-xilosa con sustituciones de arabinosa, cido glucurnico y cido metilglucurnico mediante enlaces a( 1 ~2) o a(l -3) (Fig. 1- 6). El tipo y la distri bucin de los sustituyentes son muy variables, depen diendo de su origen. En las paredes primarias de gra mneas, donde el glucuronoarabinoxilano es el polisacrido no celulsico ms abundante, presentan su estructura ms compleja, con un alto contenido en ara binosa. El xilano puede unirse a las microfibrillas de celulosa y representar, en cierta forma, en las gramneas el papel del xiloglucano en dicotiledneas. Sin embar go, las ramificaciones limitan esta unin, por lo que en

paredes primarias de clulas en crecimiento de gram neas es de poca importancia cuantitativa, si bien como las ramificaciones disminuyen conforme avanza la edad de la clula puede tener mayor importancia en c lulas ya maduras. Adems, parte de los restos de arabi nosa se encuentran unidos a cido ferlico, lo que posi bilita la creacin de enlaces entre varias cadenas de xilanos mediante puentes diferulil, cuya formacin aumenta al final del crecimiento. En las paredes prima rias de otras especies, la arabinosa aparece en menor cantidad, pero est presente en cantidades importantes en las paredes secundarias de todas las plantas, aunque en este caso se encuentra una mayor sustitucin por ci do glucurnico o metilglucurnico en los xilanos. Un polisacrido caracterstico de las paredes celula res de las gramneas es el /(l-3). /?(1 -4)glucano o glucano mixto (Fig. I -6). Est formado por una cadena lineal de restos de /i-D-glucosa unidos por enlaces f}(l -4) y /(l *-3) en una relacin aproximada de 2.3. La distribucin de los dos tipos de enlace presenta un cierto orden, de manera que la molcula est formada por bloques de enlaces (1 -4) (2 3) separados por un nico enlace (l-3). Sin embargo, cada 50-80 restos pueden aparecer irregularidades en la secuencia, con sistentes en una serie del orden de 10 restos contiguos unidos por enlaces (1 *4). Otros polisacridos hemicelulsicos presentes en las paredes celulares son los mananos. que constituyen un grupo muy heterogneo en el que la maosa es el com ponente mayoritario. Su cadena central puede estar for mada nicamente por restos de D-manosa unidos por un enlace /(l -4) o presentar restos de D-glucosa in tercalados (glucomananos). Ambos tipos pueden pre sentar sustituciones de D-galactosa unidas por un enlace a(l >6) a los restos de maosa (galactomananos y galactoglucomananos). Aunque su presencia es muy escasa en paredes celulares primarias, los (galacto)mananos tienen importancia cuantitativa como componentes de reserva de algunas semillas, mientras que los (galacto)glucomananos estn presentes en cantidades significativas en paredes secundarias de tejidos lignificados de coniferas (12-15 %) y, en menor cantidad, de angiospermas (3-5 %).

La fisiologa

vegetal y su impacto social. La clula vegetal

-i-D-glucano

t*
;.gIucano

.Dinoxilano

Xilosa
:

Galactosa

Fucosa

cido glucurnico

Arabinosa

Anillo fenlico

gura 1-6. Estructura de los principales polisacridos hemicelulsicos. a) p(1 ->3)(1 ->4)-D-glucano. b) Xiloglucano. c) Glu: "Darabinoxilano. En el caso del xiloglucano, para mayor claridad del esquema, se ha separado por una lnea disconti. = re mayor longitud el enlace glicosdico entre la galactosa y la xilosa de la cadena lateral. Las flechas indican los enlaces .sceptibles de hidrlisis por endo-/i(1-3), (1-4)-D-glucanasa en a) y endo-/-(1-4)-D-glucanasa en b).

3. Las pectinas presentan una gran complejidad estructural - polisacridos pcticos o pectinas son unos de los :meros conocidos ms complejos, constituidos por a mezcla de polmeros cidos y neutros. Estn pre;v en las paredes celulares de todas las plantas, auna*e ^u importancia cuantitativa vara desde alrededor

del 35 % en paredes primarias de dicotiledneas hasta el 5 % en las de gramneas. Se caracterizan por su capa cidad de formar geles y se considera que su presencia en las paredes celulares determina su porosidad, pro porciona superficies cargadas que modulan el pH y el balance inico y sirven como molculas de reconoci miento a seales tales como organismos simbiticos, patgenos e insectos.

10

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Las pectinas acidas estn constituidas por una alta proporcin de restos de cido D-galacturnico unidos mediante un enlace oc(l->4) (Fig. 1-7). Las cadenas constituidas nicamente por cido galacturnico reci ben el nombre de homogalacturonanos y su longitud es muy variable. Los grupos carboxilo de los restos galacturonosil pueden encontrarse esterificados con metanol o libres. Los grupos carboxilo libres pueden estar disociados y dar lugar a la formacin de puentes de Ca2+. que constituyen la estructura conocida como caja de huevos (Fig. 1-7). Sin embargo, las cadenas de homogalacturonano no son muy frecuentes en las paredes celulares ya que nor malmente presentan restos de L-ramnosa intercalados, enlazados en a(l-2). El ramnogalacturonano I (RG I) presenta una mayor proporcin de ramnosa. a menu do en posicin alternante, y son estos restos de ramnosa los puntos de anclaje de las cadenas laterales (Fig. 1-7). As, aproximadamente la mitad de los mismos puede estar unida en posicin C-4 a cadenas constituidas por L-arabinosa y D-galactosa, con un grado de polimeriza cin variable. Debido a que los restos de ramnosa se presentan con una frecuencia variable, dentro de las pectinas hay regiones mucho ms ramificadas que otras. El ramnogalacturonano II (RG II) es un polisacrido relativamente pequeo (grado de polimerizacin aproximado de 60), con una estructura muy compleja ya que es el que presenta mayor nmero de azcares y enlaces diferentes. As, est constituido por cido ga lacturnico, ramnosa, arabinosa y galactosa junto a pe queas cantidades de azcares poco frecuentes como 2-O-metilfucosa, 2-O-metilxilosa, apiosa, 3-C-carboxi5-deoxi-L-xilosa y cido 3-deoxi-mano-octulosnico (KDO). A diferencia del RG I, los restos de ramnosa
A O, .0

pueden presentar enlaces en 3, 3,4 y 2,3,4 o ser termi nales. Tambin se pueden formar enlaces con boro entre cadenas del RG II, posiblemente a travs de la apiosa. Las pectinas de naturaleza neutra estn constituidas por L-arabinosa, D-galactosa o ambas. Los arabinanos estn formados por restos de L-arabinosa unidos mayoritariamente por un enlace a(l -*5), algunos unidos en 2 y 3 a otros restos de arabinosa. Los galactanos estn formados por una cadena de fi{ 1 ->4)-D-galactano con algunas ramificaciones de galactosa enlazadas en 6. Puede haber sustituciones de a(l -*5)arabinano en pro porcin variable en el carbono 3 de los restos de galac tosa, lo que recibe el nombre de arabinogalactano I. El arabinogalactano II es ms abundante y contiene res tos de D-galactosa enlazados en 3. 6, y 3, 6, y de Larabinosa enlazados en 3 y 5. Tanto la arabinosa como la galactosa pueden asociarse a cido ferlico mediante un enlace ster, lo que posibilita la formacin de enla ces entre distintas cadenas mediante puentes diferulil por la accin de las peroxidasas presentes en las pare des celulares.

4.1.4. Las protenas estructurales presentan secuencias repetitivas Las paredes celulares contienen tambin diferentes pro tenas. tanto estructurales como enzimlicas, que en las paredes primarias llegan a constituir el 10 % de su peso. La mayora corresponde a glicoprotenas, aunque el grado de glicosilacin es muy variable, caracterizndo se tambin por la presencia de secuencias repetitivas que pueden ser compartidas entre varias. Entre las pro tenas estructurales. la protena rica en hidroxiproliB

O. JX

tea
c.
Arabinano Arabino galactano

Acido galacturnico (GalU)

Ramnosa (Rha)

Figura 1-7. Estructura de los principales polisacridos pcticos. A) Regin de homogalacturonano formando puentes de calcio. B) Ramnogalacturonano I.

La fisiologa vegetal y su impacto social. La clula vegetal

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na (extensina) es la mejor caracterizada de todas ellas. Esta glicoprotena debe su nombre a la presencia de hidroxiprolina (Hyp) como aminocido mayoritario (~46%), que junto a otros cinco aminocidos (serina, histidina, valina, tirosina y Usina) constituye ms del 90 % de la misma. Est formada por numerosas secuen cias repetidas de serina-(Hyp)4 y tirosina-lisina-tirosina, responsables de su estructura secundaria y terciaria. Los residuos de tirosina pueden formar puentes intra moleculares de isoditirosina, que aumentan la rigidez y el carcter hidrfobo de la molcula. La glicosilacin de la protena tiene lugar a travs de serina e hidroxi prolina, de manera que la serina se encuentra unida a un resto de galactosa, mientras que la hidroxiprolina sirve de anclaje a tri o tetraarabinanos que sirven para estabi lizar la estructura de la protena. Otras protenas rela cionadas son las protenas ricas en prolina y las pro tenas ricas en glicina, mientras que las gramneas contienen protenas ricas en treonina y protenas ricas en histidina, similares a la extensina de dicotiledneas. Todas estas protenas se presentan en diferentes canti dades en las paredes de los diferentes tipos de clulas, por lo que se asume que tienen funciones especficas en cada tipo de clulas. Aunque no hay pruebas directas de cules pueden ser estas funciones, probablemente todas tengan importancia estructural, as como en la morfog nesis (vase Captulo 18). Por el contrario, las protenas-arabinogalactano son protenas solubles que no estn covalentemente enlazadas a la pared celular, por lo que no tienen una funcin estructural y, posiblemen te, participen en la diferenciacin (vase Captulo 18).

to. Si consideramos los polisacridos estructurales, la dotacin de glicanasas presentes en las paredes sera su ficiente para degradarlos casi completamente. Sin em bargo, esto no ocurre in vivo, es decir, la regulacin de su actividad es un imperativo biolgico. Las pruebas experimentales sobre la regulacin de dichas enzimas, la accesibilidad del sustrato, la actividad in vivo de las distintas formas presentes, etc., todava son escasas y no permiten establecer un mecanismo generalizable de regulacin de su actividad. En la pared celular se encuentran tambin las expansinas, protenas de pequeo tamao que inducen la ex tensin de la pared in vitro, probablemente rompiendo los enlaces de hidrgeno entre los polisacridos de la matriz y la celulosa. No tienen actividad hidroltica ni transglicosilasa y son las nicas protenas asociadas a la pared capaces de inducir la extensin de la misma in vitro (vase Captulo 19).
4.1.6. La presencia de lignina proporciona mayor resistencia y rigidez a las paredes celulares una

4.1.5.

La diversidad de las enzimas asociadas a las paredes es una muestra de su dinamismo

Las paredes celulares contienen tambin diferentes ti pos de enzimas que les confieren una alta actividad metablica. Prcticamente todas son glicoprotenas, aun que su grado de asociacin, tipo de accin y funcin pueden ser muy diferentes. Todas ellas son enzimas que utilizan sustratos sencillos (0 2 , H 2 0 2 , H20) compatibles con las condiciones existentes en el apoplasto, con pH ptimo entre 4.0 y 6.0. La misma actividad enzimtica suele estar presente en las paredes con diferente grado de asociacin; as, las mismas enzimas pueden estar so lubles en el apoplasto y enlazadas a las paredes de for ma inica y covalente. Aunque esta diversidad en el grado de asociacin es un hecho generalizable a la ma yora de las enzimas de la pared, no se conoce su signi ficado funcional. El Cuadro 1-4 resume los principales grupos de enzi mas presentes en las paredes. En general, se han detec tado actividades enzimticas capaces de actuar sobre prcticamente todos los componentes estructurales de las paredes celulares, incluidas las de los patgenos, as como sobre distintas sustancias presentes en el apoplas

La lignina es un polmero complejo constituido a partir de los alcoholes aromticos p-cumarlico, coniferlico y sinaplico, unidos entre s por enlaces ter o carbonocarbono (vase Captulo 17). La composicin monomrica, as como el tipo de enlaces entre ellos y su organi zacin en la macromolcula varan entre las diferentes especies. La polimerizacin puede tener lugar mientras estn disponibles tanto precursores activados como es pacio en la pared, de manera, que la molcula tiende a llenar todo el espacio en la pared no ocupado por otras macromolculas, desplazando el agua. La estructura polimrica de la lignina no slo se entrelaza con las microfibrillas de celulosa, sino que tambin se une a las hemicelulosas (arabinoxilano) y pectinas (arabinogalactano) mediante enlaces ster a travs de sus restos hidroxicinmicos. El resultado es una red hidrfoba que rodea los de ms componentes de la pared a la que confiere una ma yor resistencia tanto fsica como qumica, adems de una gran rigidez. Es especialmente abundante (20-30 % del peso de la pared) en clulas conductoras (vasos xilemticos) y estructurales (fibras) con engrosamiento se cundario.
4.2. La estructura de las paredes es el resultado de una serie de redes polimricas entrelazadas

La pared celular es una entidad molecular compleja, formada por distintos componentes capaces de autoensamblarse. A pesar del avance en el conocimiento de la pared celular durante los ltimos 30 aos, la estructura de la pared celular primaria sigue sin conocerse com-

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Fundamentos de fisiologa vegetal Cuadro 1-4. Enzima Principales tipos de enzimas asociadas a las paredes celulares Sustrato Funcin

Oxidorreductasas Peroxidasas Tirosina (protenas ricas en hidroxiproIina)/H 2 0 2 Fcnil esteres (pectinas. arabinoxilano) H 2 0 2 . Monolignoles. H 2 0 2 Malato/NAD"' NADH/O, Monolignoles/0 2 Formacin de puentes de isoditirosina Formacin de puentes difenil Lignificacin Formacin de NADH Formacin de H , 0 2 Lignificacin

Malato dehidrogenasa NADH oxidasa Lacasas Hidrolasas Exo-glicanasas Endo-glicanasas Pectn-metil esterasa Transglicosilasas Xiloglucano endo-transglicosilasa

Hemicelulosas y pectinas Hemicelulosas y pectinas Pogalacturonosil metil esteres

Eliminacin de monosacridos de los extremos no reductores Despolimerizacin Desesterificacin de pectinas

Xiloglucano

Extensin de la pared celular Incorporacin de nuevas cadenas de xiloglucano

pletamente. Desde el primer modelo propuesto por el grupo de Albersheim, los distintos modelos que se fue ron proponiendo al conocerse ms los distintos compo nentes de la pared se basaban en que los polisacridos matriciales estaran unidos entre s por enlaces covalentes y a las microfibrillas de celulosa por puentes de hi drgeno a travs del xiloglucano. Sin embargo, los en laces covalentes entre hemicelulosas y pectinas no se han podido confirmar y los modelos actuales se basan en la existencia de redes independientes pero que interactan entre s: una formada por la unin de celulosa y hemicelulosas (generalmente xiloglucano y, en gram neas, glucuronoarabinoxilano); otra formada por poli sacridos pcticos que estara embebiendo a la anterior y una tercera formada por protenas o fenilpropanoides (Fig. I-8). Sin embargo, aunque se conocen los tipos de dominios estructurales presentes en hemicelulosas y pectinas, no sabemos cmo contribuyen individualmen te al establecimiento y mantenimiento de las redes o cmo influyen en las propiedades de la pared. En los ltimos aos, la utilizacin de tcnicas no destructivas RMN. FTIR) en el estudio de las paredes celulares est itiendo un mayor conocimiento de los tipos de enitre los distintos componentes de la pared, as _ :. -- - .. n de los mismos.

finitivos. la composicin y estructura de su pared sufren cambios continuos, que implican la sntesis e incorpo racin de nuevos componentes (polisacridos, protenas y fenoles) en la misma. En esta seccin trataremos la sntesis de los polisacridos estructurales (celulosa y polisacridos matriciales), ya que la sntesis del resto de los componentes se trata en otros captulos. 4.3.7. La celulosa se sintetiza en la superficie de la membrana plasmtica La sntesis de celulosa en las plantas tiene lugar en la membrana plasmtica, catalizada por un complejo mullienzimtico (roseta), que sintetiza de forma simultnea numerosas cadenas de P-glucano que se asocian para formar una microfbrilla de celulosa cristalina. Estas ro setas se observan por criofractura en el extremo de las microfibrillas en crecimiento y su aparicin en las membranas coincide con la sntesis de celulosa. Sin embargo, aunque la celulosa es una molcula relativa mente simple, y su biosntesis tiene lugar en casi todas las clulas de las plantas, la sntesis in vitro de este pol mero ha tenido un xito muy escaso, probablemente de bido a que la actividad depende de la orientacin de las rosetas en la membrana, por lo que el aislamiento de las membranas provoca la prdida de la capacidad de snte sis de celulosa. De todas formas, se ha podido identifi car la UDP-glucosa. originada a partir de la sacarosa por la accin de la sacarosa sintasa. como el precursor ms probable (Cuadro l -5).

Biognesis de la pared celular

_- ... - ". -- - desde su formacin sta que alcanza su forma y tamao de

La fisiologa

vegetal y su impacto social. La clula vegetal

13

tenidos indican que la cristalizacin de las microfibrillas requiere la unin correcta del producto del gen RSW l en los complejos, mientras que la biosntesis del ^-glucano no la necesita. Por otra parte, la transforma cin del mulante con el gen RSW l restaura el fenotipo normal. Esta complementacin es la primera evidencia de la participacin de un gen en la formacin de las microfibrillas de celulosa. Por otra parte, en plantas de algodn se han identificado dos genes (CelAl y CelA2) que presentan regiones muy conservadas relacionadas con la subunidad cataltica de /J-glicosiltransferasas de bacterias. Aunque la expresin de estos genes presenta una alta correlacin con la velocidad de sntesis de ce lulosa. todava no hay pruebas concluyentes de su inter vencin en este proceso.

4.3.2.
Acido Ramnogalacturonano I poligalacturnico con cadenas de con puentes arabinogalactano de calcio Figura 1-8. Representacin esquemtica de la estructura de la pared celular primaria de una planta dicotilednea. Modelo de redes interdependientes entre los distintos componentes de la pared celular. Adaptado de: Carpita, N. C. y Gibeaut, D. M. Plant J, 3: 1-30, 1993. Xiloglucano

El aparato de Golgi se encarga de la sntesis de los polisacridos matriciales

Por el contrario, la sntesis de celulosa por la bacteria Acetobcicter xylinum ha sido completamente caracteri zada, lo que ha permitido conocer la secuencia genmica que codifica esta protena. Desgraciadamente, la uti lizacin de la secuencia de la subunidad cataltica de la celulosa sintasa de A. xylinum como sonda en las genotecas de cDNA vegetal no ha permitido hasta el mo mento identificar ningn gen homlogo. Sin embargo, recientemente se ha caracterizado un imitante termosensible de Arabidopsis thaliana alterado en la sntesis de celulosa. Este mutante (rswl). a temperatura restric tiva (31 : C) presenta menores niveles de celulosa cristalina que la variedad silvestre al tiempo que acumula |3( I >4)-glucano no cristalino, observndose tambin la disgregacin de los complejos (rosetas) de la celulosa sintasa en la membrana plasmtica. Los resultados obCuadro 1-5. N u c l e t i d o s u t i l i z a d o s c o m o p r e c u r s o res e n la sntesis de los p o l i s a c r i d o s e s t r u c t u r a l e s

Los polisacridos no celulsicos se sintetizan en el aparato de Golgi, se empaquetan en vesculas secretoras y se exportan a la superficie donde se integran con las microfibrillas de celulosa. A pesar de que su estructura es ms compleja que la de la celulosa, se ha conseguido la sntesis in vitro de la mayor parle de ellos, ya que las membranas aisladas retienen gran parte de la actividad de las glicosiltransferasas implicadas, lo que ha permi tido su caracterizacin, al menos parcial. En todos los casos identificados hasta el momento se ha comprobado que se traa de protenas unidas a membranas que utili zan como precursores los nucletidos de los monosacridos (Cuadro 1-5). Sin embargo, aunque las prepa raciones de membranas son capaces de incorporar precursores marcados en polisacridos. no se han carac terizado los productos en todos los casos, por lo que no es posible asegurar qu tipos de glicosiltransferasas es tn aciuando. Las sntesis mejor conocidas son las de los glucanos no celulsicos (xiloglucano, galactomananos y glucano mixto) enire las de hemicelulosas y la del homogalacturonano entre las de pectinas. El xiloglucano se sintetiza por la accin simultnea de glucosil y xilosiltransferasas que utilizan UDP-glu cosa y UDP-xilosa, respectivamente, mientras que el resto de los azcares de las cadenas laterales se une de forma independiente. As, aunque no se tiene mucha in formacin acerca de la unin de galactosa, se sabe que la adicin de fucosa tiene lugar por una fucosiltransferasa que transfiere un resto de fucosa a partir de GDPfucosa al xiloglucano previamente galaclosilado. El glucano mixto, posaerido tpico de las paredes celulares de gramneas, est constituido por restos de glucosa unidos por enlaces [3(1->3) y p(l->4), distri buidos regularmente a lo largo de la molcula. Las membranas aisladas sintetizan, a partir de UDP-gluco sa, un posaerido idntico al producido in vivo: sin embargo, todava no se sabe si una nica glucosiltrans-

Nucletido precursor UDP-glucosa, UDP-xilosa, GDP-fucosa UDP-glucosa UDP-xilosa. UDP-arabinosa, UDP-glucurnico L'DP-galactosa. UDP-galacturnico GDP-glucosa, GDP-manosa

Posaerido xiloglucano celulosa, glucano mixto xilanos pectinas mananos

14

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

ferasa cataliza la formacin de los dos tipos de enlaces, o si se trata de dos glucosiltransferasas, cada una res ponsable de uno de los dos tipos de enlace, que actan de forma coordinada. La sntesis de galactomananos se ha estudiado en endospermo de semillas que lo acumulan como sustan cia de reserva. Interactan dos enzimas, una p(l ->4)manosiltransferasa dependiente de GDP-manosa y una y.{ l -6)-galactosiltransferasa dependiente de UDP-galactosa muy especfica, que regula el grado de sustitu cin y la distribucin de los sustiluyentes a lo largo de la cadena de maano. En cuanto a las pectinas. se ha demostrado que la sntesis de homogalacturonano a partir de UDP-galacturnico tiene lugar en el aparato de Golgi. Por otra par te, tambin se ha identificado una metiltransferasa que. utilizando S-adenosil metionina como donador de los grupos metilo, da lugar a la metil-esterificacin de los restos galacturonosil de las pectinas. En general, las pectinas se sintetizan en el aparato de Golgi con un alto grado de metilesterificacin, que disminuye posterior mente en la pared celular por la accin de pectinmetilesterasas.

proceso irreversible, esto es, en crecimiento (vanse Captulos 18 y 19). En paredes celulares primarias, la red polimrica que mantiene la cohesin de su estructura y le confiere rigi dez es la red celulosa-hemicelulosas que, excepto en gramneas, est constituida por las microfibrillas de ce lulosa unidas entre s por cadenas de xiloglucano me diante puentes de hidrgeno. As, las cadenas de xilo glucano impedirn la separacin de las microfibrillas. La ruptura y el alargamiento de las cadenas de xiloglu cano y la ruptura de los puentes de hidrgeno entre dicho polmero y la celulosa permitiran la separacin de las microfibrillas y, por tanto, la extensin de la

pared.
Sobre la base de lo anteriormente expuesto, se han postulado tres posibles mecanismos que podran estar involucrados en la prdida de rigidez de las paredes pri marias. 1) La accin puntual de una endo-|3(l->4)-Dglucanasa que rompiera la cadena de xiloglucano per mitira la separacin de las microfibrillas. Este meca nismo necesitara la incorporacin de nuevas cadenas de xiloglucano para evitar el progresivo debilitamiento de la estructura. 2) La xiloglucano-endotransglicosilasa (XET), al alargar las cadenas de xiloglucano, permitira una mayor separacin entre las microfibrillas sin debili tar la estructura de la red polimrica. Esta misma enzi ma participara en la incorporacin a la red de las ca denas de xiloglucano sintetizadas de novo. 3) Las expansinas romperan puntualmente los puentes de hi drgeno entre las cadenas de glucano de las microfibri llas y las cadenas de xiloglucano. Al estar la pared so metida a tensin, aunque dichos puentes se volveran a formar de manera espontnea, lo haran en distinta po sicin, contribuyendo a fijar la extensin. Los factores necesarios para que los tres mecanis mos propuestos anteriormente puedan tener lugar, pa recen estar presentes en todas las paredes celulares. Sin embargo, ni la glucanasa ni la XET son capaces de inducir in vitro la extensin de las paredes aisladas, mientras que la expansina s lo hace. Por ello, actual mente se piensa que la expansina es imprescindible para que tenga lugar la extensin de la pared, si bien tanto las glicanasas como la XET cooperaran en la mo dulacin del mecanismo de prdida de rigidez de la pa red celular. Al mismo tiempo que las paredes primarias se ex tienden por la repeticin del ciclo de extensin de la misma, la sntesis de nuevos componentes as como su incorporacin en la estructura de la pared con la forma cin de puentes interpolimricos, puentes diferulil e isoditirosina, catalizada por la accin de las peroxidasas, disminuyen progresivamente su extensibilidad y dan lugar al cese del crecimiento celular. La red de pec tinas, unida por puentes diferulil, y la de protenas ricas en hidroxiprolina, unida por puentes de isoditirosina, se entrelazan con la red celulosa-hemicelulosas y restrin gen la separacin de las microfibrillas y, por tanto, la extensin de la pared.

4.4.

Las paredes celulares primarias son capaces de extenderse

Como hemos visto al inicio del apartado 4 de este cap tulo, la pared celular limita el volumen de las clulas. Sin embargo, las clulas, una vez que se forman por divisin celular, han de crecer, esto es. aumentar irre versiblemente de tamao. As, nos encontramos con la paradoja de que las paredes celulares han de limitar el aumento de volumen del protoplasto, al mismo tiempo que han de permitir el crecimiento de las clulas. ni camente las paredes primarias sern capaces de dismi nuir su rigidez, permitiendo un cierto grado de exten sin por la presin de turgencia, para volver a aumentar su rigidez a continuacin, fijando dicha extensin y evi tando el aumento ilimitado del volumen del protoplasto y, por tanto, su explosin. Adems, la pared no slo controla el crecimiento de la clula, sino que tambin condiciona su direccin. La anisotropa de las paredes. basada fundamentalmente en la disposicin de las microfibrillas de celulosa, ser la responsable de la direc cin del crecimiento. La pared celular primaria est constituida por celulo sa, hemicelulosas, pectinas y una pequea cantidad de protenas estructurales. Dicha pared, inicialmente rgi da. ha de sufrir una serie de modificaciones bioqumi cas que disminuyan su rigidez, aumenten su capacidad de extenderse bajo la accin de la presin de turgencia, que acta como fuerza conductora, y permitan el incremento en volumen del protoplasto. La formacin de nuevos enlaces y la incoiporacin de nuevos compo nentes a la pared la transformar otra vez en una pared rgida, lo que convierte el incremento de volumen en un

La fisiologa vegetal y su impacto social. La clula vegetal Las propiedades fsico-qumicas de las paredes celulares dependen de su composicin

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caja de huevos), actan como sustancias cementantes, uniendo las paredes de las clulas contiguas. Hidratacin y naturaleza hidrfoba. En general, los polisacridos son hidrfilos de tal forma que las pare des, en principio, presentarn una fase acuosa que per mitir el movimiento de los solutos, siempre y cuando su difusin no se vea restringida por la carga elctrica o superen el tamao de los poros. As, las paredes prima rias presentan un contenido en agua de alrededor del 65 %. Sin embargo, las paredes celulares secundarias, segn el patrn de diferenciacin celular que sigan, pueden acumular lignina que, al ser de naturaleza hi drfoba desplaza el agua e impermeabiliza la pared. El depsito de suberina (paredes radiales de las clulas de la endodermis) y cutina (clulas epidrmicas), com puestos de naturaleza hidrfoba, tambin impermeabi liza la pared. La impermeabilidad de las paredes, que impide el trfico de sustancias hidrosolubles entre las distintas clulas, hace necesaria la aparicin de estruc turas especiales como plasmodesmos, punteaduras, pla cas cribosas, etc., que permitan dicho transporte en zo nas localizadas. Resistencia qumica. Las paredes, adems de consti tuir una barrera fsica que limita el acceso de patgenos al protoplasto, contienen estructuras relativamente re sistentes a la degradacin qumica. As, las microfibrillas de celulosa, al presentar un alto grado de empa quetamiento de las cadenas de |i-(l-4)-D-glucano, dificultan la degradacin por celulasas de origen bacte riano. Oti'o polmero resistente a la degradacin enzimtica es la lignina. Las protenas ricas en hidroxip rol i na. insolubles en las paredes celulares por la existencia de puentes de isoditirosina, constituyen una estructura altamente resistente a la degradacin por proteasas debido a la abundancia de restos de hidroxiprolina. La acumulacin de estos compuestos, protenas ricas en hidroxiprolina en paredes primarias y lignina en las secundarias, ofrece una barrera pasiva a la pene tracin de microorganismos. Sin embargo, la pared no slo es una barrera pasiva, sino que tambin puede res ponder activamente a estmulos externos, aumentando la sntesis de protenas ricas en hidroxiprolina, la snte sis de ftoalexinas (vanse Captulos 17 y 30), etc. Resistencia mecnica. Los dos polmeros que confie ren resistencia mecnica a las paredes celulares son la celulosa y la lignina. Consideradas individualmente cada una de las microfibrillas de celulosa, y debido a su estructura de tipo pseudocristalino, ofrecen gran resis tencia mecnica en la direccin de la fibra, mientras que en la direccin perpendicular la resistencia ser m nima. Es decir, el ordenamiento paralelo de las microfi brillas da lugar a una gran resistencia mecnica en la direccin de las microfibrillas. La combinacin de ca pas sucesivas de pared celular, cada una de ellas con

_ . - ..-.ancia relativa de los diversos componentes po. - Je las paredes celulares les confiere diferen r.edades que determinan las funciones de los pos celulares presentes en las plantas (Cua. id. El entramado de redes polimricas que en la pared celular representa un filtro que liifusin de las molculas en funcin de su tama. terminacin experimental del dimetro de los las paredes celulares presenta variaciones rela~erue importantes, no slo entre los distintos tipos .-. sino tambin dependiendo del mtodo utiligeneral, el dimetro de dichos poros oscila 5 y 6.0 nm, que corresponde aproximadamente a abanico de masas moleculares entre 13 y 65 kDa. lente, el tamao de los poros no supone niniccin a la difusin de las molculas de pelao como sacarosa, aminocidos, fitohormo. Sin embargo, tendr una gran importancia en el Je macromolculas como protenas y polisacrirestringir su movilidad a travs de la pared. - -... elctrica. Hn general, las paredes celulares en nargen de su pH fisiolgico (4.5-6.0) tienen una cararia negativa debido a los grupos carboxilo de los acturonosil de las pectinas y glucuronosil de >s. Esta carga elctrica puede contrarrestarse, por las protenas cargadas positivamente y por presencia de cationes, fundamentalmente Ca2*. hedn celular. La zona ms externa de las paredes -. la lmina media, est enriquecida en pectiB que. a travs de la formacin de puentes de calcio i ia& regiones de homogalacturonano (estructura en
: . :-o 1-6. Relacin entre los componentes de las : - :es celulares y las propiedades funcionales de las mismas
niponente ftrfnas ': - -a Propiedades funcionales Porosidad. Carga elctrica. Cohe sin celular Resistencia mecnica en la direc cin en la que estn orientadas las microfibrillas Carcter hidrfobo. mecnica Impermeabilizacin Impenneabilizacin is ricas en ".:JroxiproIina Resistencia qumica Resistencia

.~ina

:na

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ordenamiento paralelo do sus microfibrillas, pero con diferente orientacin entre s, conferir al conjunto de la pared celular una gran resistencia mecnica en las distintas direcciones. Aunque no se conoce el mecanis mo de control de la direccin en que se depositan las microfibrillas sintetizadas de novo por los complejos terminales (rosetas) de la membrana plasmtica, s se sabe que est relacionado con la disposicin de los microtbulos.

PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Defina los conceptos de simplasto y apoplasto. 2. Qu ventajas tienen las plantas cuyas clulas presentan membranas con un mayor porcentaje de cidos grasos insalurados? 3. Qu caractersticas de Jas membranas permiten la compartimentacin celular? 4. Podran sobrevivir las clulas vegetales sin pared celular? 5. Dnde tiene lugar la sntesis de los polisacridos estruc turales de las paredes celulares? 6. Qu papel se ha postulado para las expansinas en el cre cimiento celular?

RESUMEN
Las clulas estn constituidas por distintos comparti mentos con funciones diferentes. Esta compart menta cin est basada en las caractersticas estructurales y funcionales de las membranas. El carcter hidrfobo de las membranas permite separar las fases acuosas de los distintos compartimentos, al mismo tiempo que consti tuye el soporte fsico de aquellas reacciones que no ten dran lugar en presencia de un medio hidrfilo. Ade ms. la diferente dotacin proteica de las distintas membranas de la clula permite diferentes mecanis mos especficos de transporte a travs de las mismas y. en consecuencia, la existencia de ambientes qumicos diferenciados en cada uno de los compartimentos. Este diferente ambiente qumico, a su vez, permite la especializacin metablica de los distintos compartimen tos. Por otra parte, la pared celular de las clulas vegeta les les permite independizarse de las condiciones osm ticas del apoplasto. a la vez que les proporcionan la forma y el tamao. Adems, las diferencias en la com posicin y estructura de las paredes, al condicionar sus propiedades, determinan la funcionalidad de los distin to-- tipos celulares presentes en las plantas. En resumen, podramos decir que mientras que las membranas permiten la especializacin de los distin tos compartimentos celulares, las paredes son uno de los rasgos ms caractersticos de la especializacin ce lular.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
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CAPITULO

EL AGUA EN LA PLANTA
Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea
1. Introduccin. 2. Propiedades del agua. 3. Cuantificacin y terminologa del estado hidrico en la planta. 4. Relaciones hdricas en clulas y tejidos. 5. Medida del potencial hidrico y sus componentes. 6. Movimiento del agua.

1.

INTRODUCCIN

La vida est ntimamente asociada al agua, muy espe cialmente en su estado lquido, y su importancia para los seres vivos es consecuencia de sus propiedades fsi cas y qumicas exclusivas. El agua es la forma en la cual el tomo de H, elemento esencial en todas las mo lculas orgnicas, es absorbido y. posteriormente, asi milado durante la fotosntesis (vanse Captulos 10 y 11). Por tanto, ha de considerarse como un nutriente para la planta, de la misma manera que lo son el C 0 2 o el NO3". No obstante, la cantidad de agua que se requie re para el proceso fotosintetico es pequea y slo cons tituye, aproximadamente, un 0.01 % de la cantidad total utilizada por la planta. La razn de esta baja utilizacin es que la mayora de las funciones en las cuales partici pa son de naturaleza fsica. El agua es un disolvente para muchas sustancias tales como sales inorgnicas, azcares y aniones orgnicos y constituye un medio en el cual tienen lugar todas las reacciones bioqumicas. Las molculas de agua se adsorben en las superficies de las partculas formando capas de hidratacin. que influ yen en las reacciones fsicas y qumicas. El agua, en su forma lquida, permite la difusin y el flujo masivo de solutos y. por esta razn, es esencial para el transporte y distribucin de nutrientes y metabolitos en toda la plan ta. Tambin es importante el agua en las vacuolas de las clulas vegetales, ya que ejerce presin sobre el protoplasma y la pared celular, manteniendo as la turgencia en hojas, races y otros rganos de la planta. Con excep cin de algunos tipos de semillas y unas pocas especies vegetales, la deshidratacin de los tejidos por debajo de un nivel crtico se acompaa de cambios irreversibles en la estructura y, finalmente, de la muerte de la planta.

El agua, que es el componente mayoritario en la planta (aproximadamente un 80-90% del peso fresco en plantas herbceas y ms del 50 % de las partes leo sas) afecta, directa o indirectamente, a la mayora de los procesos fisiolgicos. Por todo ello, la fisiologa vege tal es, en gran medida, el estudio de las relaciones hdri cas.

2.

PROPIEDADES DEL AGUA

El agua es un compuesto muy peculiar. A diferencia de los hidruros de no metales (por ejemplo, el sulfuro de hidrgeno, H,S. o el amonaco, NH,), que son gases a temperatura ambiente, el agua es lquida. La razn de ello y de la mayora de las propiedades poco corrientes del agua es que sus molculas son polares y forman puentes de hidrgeno entre s (Fig. 2-1); esto ocasiona un aumento en las temperaturas de fusin y ebullicin. Se denomina cohesin a la tendencia de las molcu las de agua a permanecer unidas por los puentes de hi drgeno. Esta es la razn de por qu las columnas finas de agua en los vasos xilemticos pueden ascender sin romperse hasta la cima de un rbol; la cohesin impri me a la columna una tensin muy alta (vase Captulo 4). Las molculas de agua son tambin atradas por otras molculas polares y, por tanto, mojan superficies slidas tales como el vidrio o las paredes celulares y forman capas de hidratacin alrededor de iones y de macromolcculas tales como protenas. La cohesin de las molculas de agua hace que se requiera una cantidad de energa muy elevada para pro vocar la evaporacin; sta es la razn de por qu la transpiracin en las hojas tiene un efecto importante de INSTITUTO PROFESIONAL DuocUC BIBLIOTECA SEDE VALPARASO 1 7

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CH = ^

IOO

[2-1]

siendo: Pf, peso fresco de la muestra Ps, peso seco de la muestra, determinado despus de mantenerla en estufa a 80 C durante 24 horas. No obstante, debido a que el peso seco puede experi mentar cambios diarios y estacionales, las determina ciones comparativas del contenido hdrico basadas en el peso seco no son satisfactorias. Igualmente, si se expre sa el contenido hdrico en relacin al peso fresco, per sisten los problemas que conlleva la modificacin del peso seco y, adems, se minimizan los cambios en el contenido hdrico. As, por ejemplo, una reduccin del 85 al 80 % en el contenido hdrico, expresado en fun cin del peso fresco, parece una disminucin muy pe quea y. sin embargo, puede suponer una prdida del 30% en relacin con el contenido hdrico original. Una forma de eliminar estos problemas consiste en expresar el contenido hdrico sobre la base del conteni do hdrico a plena turgencia, es decir, al peso turgente (Pt), pasando a denominarse contenido hdrico relativo (CHR) o el parmetro complementario dficit de saturacin h id rica (DSH): ' ~ ? s 100 , ~ Ps 100

Figura 2-1. Parte superior. Diagrama esquemtico de dos molculas de agua unidas por un puente de hidrgeno. Este puente electrosttico se basa en la naturaleza dipoiar de la molcula: exceso de carga positiva en el H; exceso de carga negativa en el O. El puente posee una energa relati vamente menor (aproximadamente 20 kJ m o l - 1 ) que el enlace covalente (aproximadamente 400 kJ m o l - ' ) . Parte inferior. Estructura del agua en la proximidad de a) 100 C y b) 0 "C. Los puentes de H se indican mediante puntos negros (adaptado de Nobel 1974, Meidner y Sheriff 1976).

CHR =
p

[2-2]

enfriamiento (vase Captulo 3). Por otra parte, el em paquetamiento de las molculas de agua en el estado lquido mediante puentes de hidrgeno es, de hecho, ms eficaz (ms molculas por unidad de volumen) que en el estado slido (hielo). Por ello el agua se expande cuando se congela, y existe riesgo de lesin tisular si se congela el agua celular.

DSH = j ^ - ^

[2-3]

El CHR y el DSH estn relacionados de la siguiente manera: CHR = 100-DSH CHR + DSH = 100 [2-4]

3. CUANTIFICACIN Y TERMINOLOGA DEL ESTADO HDRICO EIM LA PLANTA


Como base para comprender las relaciones planta-agua, se hace necesario definir y determinar el estado hdrico a nivel de clula, de rgano o. incluso, de planta entera.

Por tanto, el CHR adquiere valores comprendidos en el siguiente intervalo: 0 < CHR s; 100 La relacin que existe entre CHR y CH es: [2-5]

3.1.

El contenido hdrico relativo representa la cantidad de agua de un tejido en comparacin con la que podra contener en hidratacin completa

CHR = CH P,

-i - Ps

[2-6]

El estado hdrico de las plantas se puede estudiar en trminos de contenido hdrico (CH), expresado como porcentaje del peso seco:

Determinar el CHR requiere, por tanto, el conoci miento del estado de plena turgencia de la muestra, es decir, del grado de hidratacin mxima de las clulas. La gran ventaja de la plena turgencia es que correspon de a un estado hdrico determinado, independientemen te de la especie vegetal.

El agua en la planta

19

3.2.

La capacidad de las molculas de agua para moverse en un sistema particular se define como potencial hdrico ( ) , que es una medida de la energa libre del agua en el sistema

El potencial hdrico puede expresarse, asimismo, en funcin de la presin de vapor de la atmsfera en equi librio con la de disolucin acuosa, de acuerdo con la expresin: RT P = ln(e/e0) [2-9]

Los conceptos anteriormente descritos (CHR y CH) no permiten determinar el sentido de los intercambios hdricos entre las diferentes partes de una planta ni entre el suelo y la planta. La magnitud que rige los movi mientos del agua y que. de manera ms frecuente, se ha venido utilizando para expresar el estado hdrico de la planta es el potencial qumico /i, es decir, la variacin de la energa libre (energa libre de Gibbs) del agua en un punto, debido a una variacin, en, de moles de agua que entran o salen de este punto, siendo constantes los otros parmetros (temperatura, presin, etc.). De donde:
/< = (o G/d n) [2-7]

Siendo R. la constante de los gases (8.31 J K _ 1 mol '): T, la temperatura absoluta ( K); e y e0, la pre sin de vapor de la atmsfera y de saturacin, respecti vamente. En muchos casos, se suele utilizar indistintamente el volumen molar parcial y el volumen molal parcial del agua. Por definicin, el volumen molar parcial es el aumento en volumen de una cantidad infinita de solu cin molar, V,, cuando se aade un mol de un compo nente A, permaneciendo constante el resto: V, = rV,/7X [2-10]

El agua circula entre dos puntos siempre que su po tencial termodinmico no sea idntico entre dichos puntos. El potencial hdrico, T, utilizando por los fisi logos deriva de esta magnitud. Constituye la resultante de fuerzas de orgenes diversos (osmtica, capilar, de imbibicin, turgente...) que liga el agua al suelo o a los diferentes tejidos del vegetal. El potencial hdrico corresponde desde el punto de vista energtico al trabajo que habra que suministrar a una unidad de masa de agua ligada al suelo, o a los tejidos de una planta, para llevarla de este estado de unin a un estado de referencia, correspondiente al del igua pura (a menudo denominada libre por oposicin a ligada) a la misma temperatura y la presin atmos frica. Como se adopta el valor cero para este potencial de referencia, todos los 4* que caracterizan al agua liga da son negativos, puesto que sera necesario suministrar JII trabajo para llevar este agua a un 4* = 0. La relacin entre 4* y se decribe,

Por el contrario, el volumen molal parcial es el aumento en volumen de una cantidad infinita de solu cin molal. V|, cuando se aade un mol de un compo nente A, permaneciendo constante el resto:
VA = r % / f t i A [2-11]

ido: 4', potencial hdrico de la muestra u. potencial qumico del agua en la muestra . potencial qumico de referencia del agua V, volumen molar del agua. La ecuacin dimensional del 4' corresponde a la de nerga o trabajo, por unidad de volumen, es decir FL L 3 = F/L2. Es la ecuacin dimensional de una prelo que explica que las unidades en las cuales se esa 4* sean, frecuentemente, unidades de presin en unidades SI, la energa se expresa en julios por mecbico, J m - 3 , y la presin en pasales. Pal.

No obstante, en la prctica, hay poca diferencia entre el uso de cantidades molares y molales cuando se des cribe el volumen ocupado por un mol de agua en el sistema ya que, en la mayora de las ecuaciones que describen las relaciones hdricas, se consideran las di soluciones como ideales. Si bien el trmino potencial y, en general, el trata miento ms antiguo que se conoce sobre el uso de los conceptos termodinmicos en plantas corresponde a Tang y Wang (1941), la gran aceptacin de estos con ceptos se debi a la propuesta conjunta de Taylor y Slatyer sobre una terminologa unificada en los estudios de las relaciones planta-suelo-agua, en un congreso so bre Zonas ridas celebrado en Madrid en 1959. En un sistema particular, el potencial hdrico total es la suma algebraica de varios componentes:
4> = y p + 4*, + , + , [2-12]

Siendo 4* 4*s, *Pm y 4*g, respectivamente, compo nentes debidos a fuerzas de presin, osmtica, mlrica y gravitacional. El componente de presin (4^) repre senta la diferencia en presin hidrosttica con la refe rencia y puede ser positivo o negativo. El componente osmtico (4*s) es consecuencia de los solutos disueltos, disminuye la energa libre del agua y es siempre negati vo. Ms bien que referirse al potencial osmtico, que es negativo, muchas veces se utiliza el trmino presin osmtica (fl = 4's). Se puede demostrar que el po-

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vegetal

tendal osmtico se halla relacionado con la fraccin molar del agua ( / ) o su actividad (a,) mediante: RT RT

*. = Y

ln(

-^

Tlna'

[2 13]

"

siendo "/, un coeficiente de actividad que mide la sepa racin del comportamiento ideal por la solucin. A me dida que aumenta la concentracin de solutos, disminuj en Xa y ^s- Aunque ya es igual a 1 en soluciones muy diluidas, la mayora de los sistemas vegetales muestra alguna separacin del comportamiento ideal. Una apro ximacin til de la ecuacin 2-13, razonablemente pre cisa para muchas soluciones biolgicas, es la relacin de van't Hoff: 4*. = -RTcv
[2-14]

R. constante de los gases perfectos V. volumen molar del agua T. temperatura en grados Kelvin HR. humedad relativa: e/e0 (Ta) x 100 [e, presin del vapor de agua en el aire; e (Ta), presin del vapor saturante del vapor de agua en el aire, a la temperatura del aire, Ta].
3.3. El potencial hdrico en las clulas vegetales est determinado, fundamentalmente, por el potencial osmtico Ws) y por el potencial de presin (4^)

El potencial hdrico de la planta (4*), consta de tres componentes:


4> = T + 4*, + 4',,

Siendo cs. la concentracin de soluto expresada como mol m - 3 de disolvente (o, ms precisamente, como mol por 103 kg de disolvente). El potencial osmtico del jugo celular es aproximadamente IMPa (Nota: lMPa = 106 Pa). Utilizando la ecuacin 2-14 y sustitu yendo el valor de RT a 20 C (2437 J m o r 1 ) , da una concentracin total de solutos del jugo celular de -(-10 6 /2437) s 410osmol m~ 3 . El potencial mtrico cs similar a 4*s, excepto que la reduccin de a., es consecuencia de fuerzas en las super ficies de los slidos. La distincin entre 4*s y Kfm es. hasta cierto punto, arbitraria puesto que. frecuentemen te, es difcil decidir si las partculas son solutos o sli dos, de tal manera que, muy a menudo, se suele incluir 4 ' , en 4>, El componente gravitacional (4^) es consecuencia de diferencias en energa potencial debidas a diferencia de altura con el nivel de referencia, siendo positivo si es superior al de referencia, y negativo cuando es inferior: ^ = Pa g h [2-15]

[2-18]

siendo 4*. 4', y M t * M 1 los potenciales de presin, solutos y mtricos. respectivamente, en una clula o tejido vege tal. Para entender la naturaleza y contribucin de los diferentes potenciales componentes del 4*, considere mos una clula adulta (Fig. 2-2) que consta de tres fases distintas: una pared celular elstica, el citoplasma con el ncleo y los organillos y, por ltimo, una vacuola central que contiene una solucin diluida de azcares, iones, cidos orgnicos, etc. (vase Captulo 1). La va cuola. que llega a ocupar entre el 80 y el 90 % del volu men total de tal clula, se halla rodeada por el tonoplasto, que es tambin una membrana semipermeable. Se considera, por tanto, que los intercambios de agua celu lar estn controlados por la vacuola y. adems, que la clula parenquimtica madura se comporta como un
INICIAL Tonoplasto Citoplasma / Plasmalema Pared celular EQUILIBRIO

siendo pa la densidad del agua y h la altura por encima del plano de referencia. Aunque frecuentemente ignora do en sistemas vegetales, * aumenta 0.01 MPa m _ l por encima del nivel del suelo y, por tanto, ha de in cluirse cuando se considera el movimiento en rboles (vase Captulo 4). El potencial hdrico caracteriza, igualmente, el esta do del vapor en el aire, siendo funcin de la humedad relativa: RT HR
[2-16] [2-17]

Jugo vacuolar T , = -0.5 MPa fB = 0 MPa Interior de la clula * - V, - l F p -0.5 = 0.5 + 0

Jugo vacuolar f 8 = -0.5 MPa f p = -0.5 MPa Interior de la clula f = V. - M' 0 = -0.5 0.5

4 = 4.608 TlnHR/l 00
mal a Iff

Figura 2-2. Movimiento del agua entre los distintos com partimentos de una clula vegetal adulta colocada en agua ( = 0) (potencial osmtico del jugo vacuolar, XVS = - 0 . 5 MPa) (adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993).

7 agua en la planta

21

osmmetro. En tal situacin, se desprecia la contribu cin de la matriz (4*m = 0), quedando: = 4 [2-19]

3.3.7.

El potencial osmtico CVS) es negativo y expresa el efecto de los solutos en la disolucin celular

El potencial osmtico est determinado por la concen tracin de sustancias osmticamente activas en la va cuola y es idntico a la presin osmtica del jugo vacuolar (ecuacin 2-14). En una clula vegetal. T, siempre posee valores negativos, que varan con el vo lumen celular, siendo ms prximo a cero en clulas totalmente hidratadas que en las deshidratadas. La de pendencia de 4 / s del volumen celular es, aproximada mente, lineal (Fig. 2-3). Las membranas celulares no son nunca verdadera mente semipermeables sino, ms bien, diferencialmente permeables (vase Captulo 7). La extensin en la cual las molculas de soluto se pueden difundir a su travs se expresa multiplicando por el trmino a. de nominado coeficiente de reflexin, que adquiere valo res entre 0 y 1; para una membrana verdaderamente se mipermeable, c = I. Para una membrana que es igualmente permeable al agua y a los solutos (o si no se encuentra presente ninguna membrana), a = 0. Enton.. s. la ecuacin anterior se hace: T = 4* + &* .

0.9

1.0 1.1 Volumen relativo del protoplasto

Clula plasmolizada Plasmlisis incipiente

Turgente

3.3.2.

El potencial de presin (Yp) es positivo y representa la presin ejercida por el protoplasto contra la pared celular

Cuando el agua entra en la clula, aumenta el volumen racuolar y se ejerce una presin, denominada presin de turgencia, sobre las paredes celulares. Al mismo tiempo, se desarrolla en direccin opuesta una presin gual a la presin de turgencia, es decir, desde las pare. - al interior celular. Esta ltima presin, denominada esin de pared, acta como una presin hidrosttica. jumenta el estado energtico del agua en la clula y representa el potencial de presin celular (4/|1). Natulente, 4V adquiere valores positivos siempre que la . iioIa ejerza una presin sobre las paredes circundan A medida que se pierde el agua de la clula, la vaila se contrae progresivamente, con una cada conco mitante en la turgencia celular y 4*,, (Fig. 2-3). T p se -ace cero en una etapa denominada plasmlisis inci. nte. en la cual la vacuola cesa de presionar sobre las raredes (Fig. 2-3). Ocasionalmente, se ha informado de existencia de valores negativos de T p . como un efecentosa sobre el interior de las paredes como conseencia de la contraccin vacuolar.

Figura 2-3. Diagrama de Hfler. Muestra las interrelaciones entre potencial de presin (1' p ), potencial de solutos ( f j y potencial hdrico CI') a medida que se modifica el vo lumen del protoplasto. Se supone que la clula est sumer gida en agua pura. Al volumen celular en el estado de plas mlisis incipiente se le asigna un volumen relativo de 1.0. En plasmlisis incipiente el potencial de presin es cero. Un 1 0 % de aumento en el volumen celular originar una clula totalmente turgente con un cambio pequeo en el potencial osmtico 01',.), pero con un gran aumento en el potencial de presin (VP). A plena turgencia, el potencial osmtico es contrarrestado por el potencial de presin, y el potencial hdrico de la clula (suma algebraica de " l ' s y 4*,,) es cero (adaptado de Hopkins, 1995).

3.3.3.

El potencial mtrico (Vm) es negativo y expresa el efecto de los microcapilares y las superficies de paredes y componentes celulares en la retencin del agua

Surge como consecuencia de fuerzas que retienen mo lculas de agua por capilaridad, adsorcin e hidratacin, principalmente, en la pared celular y el citoplasma (matriz). En el primer caso, las microfibrillas de celulo sa entrelazadas crean numerosos microcapilares en los que el agua es retenida, fundamentalmente, por tensin superficial. En el citoplasma, el agua es adsorbida en varias macromolculas y coloides. xVm se estim ante riormente como despreciable cuando se consider la c-

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

lula anloga a un osmmetro. Tal suposicin es razona ble en aquellos casos en los que la matriz celular consti tuye una fraccin pequea del volumen celular total. por ejemplo, en clulas jvenes de paredes finas. No obstante, en tejidos con una elevada proporcin de ma triz (por ejemplo, en xerfitas y en mcristemos de mesfitas), Mf,,, no se puede ignorar y. por tanto, el enfoque del osmmetro no es vlido. En cualquiera de los casos. el efecto de 4*,,, se hace ms pronunciado a medida que disminuye el contenido hdrico.

Un factor importante que determina la forma de las curvas en la Figura 2-3 es la elasticidad de las paredes celulares. Si la pared celular es muy rgida, para una determinada prdida de agua, el potencial hdrico y sus componentes cambian rpidamente. La rigidez de la pa red se describe mediante el mdulo de elasticidad promedio de la clula (e) que se puede definir como: g = AP/(AV/V) [2-20]

4. RELACIONES HDRICAS EN CLULAS Y TEJIDOS


Las relaciones hdricas de clulas y tejidos vegetales se pueden describir mediante el diagrama de Hfler (Fig. 2-3), que muestra la interdependencia entre el volumen celular, , 4',, y 4*,,, a medida que la clula pierde agua. Al volumen del protoplasto se le asigna un valor relati vo de 1.0 en la plasmlisis incipiente, condicin en la cual el protoplasto rellena el volumen celular no ejer ciendo presin contra la pared ni tampoco separndose de la misma. Por tanto, la presin turgente (4*.) es cero y el potencial hdrico de la clula es igual a su potencial osmtico (,). En cualquiera de los casos, el potencial hdrico de la clula (4*) viene determinado por la suma algebraica de la presin de turgencia (4*p) y el potencial osmtico (47s) (comprese la ecuacin 2-19 con la Fia. 2-3). Los fenmenos de plasmlisis y de marchitez son aparentemente lo mismo, pero hay algunas diferencias importantes. La plasmlisis se puede estudiar en el la boratorio simplemente sometiendo los tejidos a solu ciones hiperosmticas y observando al microscopio cambios en el volumen del protoplasto. A medida que progresa la plasmlisis, el volumen del protoplasto dis minuye, los plasmodesmos se rompen y el protoplasto se separa de la pared celular. El espacio existente entre la superficie externa del protoplasto (membrana plas mtica) y la pared celular se llena con la solucin exter na. que fcilmente penetra la pared celular. Por esta ra zn, normalmente, la plasmlisis no origina sobre el protoplasto una presin negativa (o tensin) elevada. La plasmlisis constituye, esencialmente, un fenmeno de laboratorio y. con la posible excepcin de condicio nes extremas de dficit hdrico o de salinidad, rara vez, se presenta en la naturaleza. Por otra parte, la marchitez es la respuesta tpica a la deshidratacin en el aire en condiciones naturales. De bido a su extrema tensin superficial, el agua de los pequeos poros de la pared celular ofrece resistencia a la entrada del aire y el protoplasto mantiene el contacto con la pared. Ello tiende a original- elevadas presiones negativas a nivel de la pared. El potencial hdrico de las clulas marchitas se hace an ms negativo, ya que re presenta la suma del potencial osmtico y del potencial de presin (ambos negativos).

Segn la ecuacin [2-20]. un valor alto de e quiere decir que ha de aplicarse una presin elevada para pro ducir un determinado incremento en el volumen celu lar. Dicho de otra manera, cuanto mayor sea el valor de s, tanto ms resistente a la deformacin ser la pared celular. Hay que destacar que este mdulo de elasticidad es diferente del mdulo de elasticidad del material de la pared celular en s mismo y que. adems, depende en parte de la estructura del tejido y de la naturaleza de las interacciones entre las clulas. Normalmente, los valo res de : para las clulas vegetales se encuentran entre 1 y 50 MPa; valores mayores indican clulas relativa mente inelsticas o tejidos con clulas pequeas. Representado la ecuacin [2-20] como: : (AV/V) = AP [2-21]

y suponiendo un valor nominal de .: = 10 MPa. una modificacin en el volumen de un 1 % (AV/V = 0.01) originar un cambio de presin de turgencia (AP) de 0.1 MPa. Para una clula tpica con una presin de turgen cia de 0.3 a 0.5 MPa. esto origina un aumento de un 20 aun 3 0 % en el potencial de presin. Al mismo tiempo. el potencial osmtico, que es proporcional al volumen. slo cambiara un 1 % (vase Fig. 2-3). Por tanto, las alteraciones de potencial de presin constituyen el prin cipal determinante del potencial hdrico a medida que cambia el contenido en agua de las clulas. La tasa de aumento de volumen celular tambin de pende de las propiedades reolgicas de la pared (rela cionadas con su bioqumica) (vase Captulo 1). (I.Y'HdVdt) = 0 ( P - Y) [2-22]

en donde Y es la presin umbral (Pa), o turgencia que ha de superarse antes de que se presente ninguna exten sin. y 0 es la extensibilidad ( s _ l P a ), que describe la tasa con la cual las clulas experimentan expansin irreversible, siempre que se exceda 4V La extensibili dad contrasta con la elasticidad (c). que se refiere a cambios reversibles en las dimensiones celulares. Una consecuencia de la existencia de un mdulo de elasticidad elevado es que las plantas, a diferencia de los animales, no necesitan osmorregular para mante ner la integridad estructural de sus clulas. Para impedir la absorcin continuada de agua y el posible riesgo de lisis de la membrana celular, las clulas animales han

El agua en la planta

23

de gastar continuamente energa metablica para ex cluir solutos y mantener un potencial osmtico apropia do. En las clulas vegetales, dicha funcin es desempe ada por la pared celular (vase Captulo 1). La presin de turgencia que se desarrolla por una pared celular fuerte y relativamente inelslica es normalmente sufi ciente para mantener un potencial hdrico apropiado e impedir un exceso de absorcin de agua. No obstante, y ello es interesante, parece que muchas clulas vegetales mantienen el nivel determinado de presin que es infe rior al mximo posible. Esto sugiere que las clulas han de poseer sensores a la presin que ayuden a regular el contenido de solutos y. por tanto, a mantener la turgen cia en los lmites apropiados. El diagrama de Hofler es apropiado para clulas aisla das. Sin embargo, en cualquier tejido las clulas difieren en tamao, elasticidad de pared y contenido en solutos. Adems, existe un componente de presin provocado por las clulas circundantes. Por tanto, las propiedades de un tejido, aunque se puedan representar mediante este tipo de diagrama, pueden ser muy distintas de las correspondientes a sus clulas componentes. 5. MEDIDA DEL POTENCIAL HDRICO Y SUS COMPONENTES Los tres instrumentos ms importantes que se utilizan para la medida del potencial hdrico y sus componentes son el psicrmetro de termopares. la cmara de presin y la sonda de presin. 5.1. El mtodo psicromtrico determina la presin de vapor relativa del aire en equilibrio con la del tejido

mente la psicrometra de termopares para la determina cin del potencial hdrico y sus componentes es que esta tcnica se puede usar en cualquier parte del sistema suelo-planta. Adems, slo se necesita una pequea porcin de tejido: esto permite muestrear una hoja o raz a medida que se somete la planta a diferentes con diciones. Los psicrmetros de termopares se han utili zado en hojas, tallos, races, nodulos de leguminosas, partes florales, polen y semillas en desarrollo. 5.2. El mtodo de equilibrio de presin o cmara de presin es rpido y es el ms utilizado en el campo Durante muchos aos, fisilogos vegetales y eclogos se han visto limitados en la investigacin del estado h drico de las plantas, debido a la carencia de un mtodo sencillo, rpido, preciso y porttil. Para satisfacer esta necesidad, Scholandcr y cois. (1965) desarrollaron una tcnica que mide el potencial hdrico en unidades de presin. El mtodo consiste en aplicar presin sobre una hoja cottada hasta que aparezca el agua en el extre mo seccionado del tallo o peciolo. Se interpreta que la presin positiva aplicada a la hoja corresponde a la pre sin que equilibra la presin negativa o tensin con la cual el agua estaba retenida en el interior del tallo antes del corte (Fig. 2-4 C) (vase Captulo 4). La cmara de presin mide el potencial matricial del apoplasto o pa red celular. El potencial matricial del apoplasto (T) es similar al potencial hdrico () del simplasto adyacen te, siempre que la resistencia al flujo entre el simplasto y apoplasto no sea grande y que la presin osmtica (n) del agua apoplstica sea prxima a cero, es decir: T = P. - TI = T - * [2-23]

El psicrmetro de termopares se basa en el principio de que la presin de vapor relativa (e/e0) de una solu cin, o muestra de material vegetal, se halla relacionada con su potencial hdrieo (). segn la ecuacin 2-9. La muestra de material vegetal se coloca en una c mara hermticamente cerrada: al cabo de un tiempo de equilibrio generar una presin de vapor relativa, o hu medad relativa en la cmara, equivalente al potencial hdrico del tejido (Fig. 2-4 A). Las medidas de s y Tp se pueden efectuar con los psicrmetros de termopares. eliminando uno de los componentes de la ecuacin = + H'P y midiendo el otro. Corrientemente, se congela y descongela el teji do. rompiendo as las membranas. La rotura impide que se genere turgencia y. si bien la liberacin de solucin celular inunda la pared, los efectos mtricos son peque os y, frecuentemente, se pueden ignorar. En este caso. = 4*s. El T P se calcula a partir de la diferencia entre el del tejido vivo y el del tejido congelado descon gelado. Una de las razones de que se haya utilizado profusa

siendo Pc, la presin aplicada en la cmara de presin. En la prctica, la presin osmtica del agua apoplstica es. ordinariamente, menor de 0.05 MPa, de tal manera que: "F s r s P, [2-24]

Se ha demostrado que, cuando las clulas en el tejido alcanzan una presin de turgencia de cero, Pt. se relacio na con el agua celular de la siguiente manera: 1/Pc = I/TI = (V^ - V)/RTN [2-25]

siendo V\. el volumen hdrico simplstico en la hoja turgente: V, el volumen de agua perdida en la hoja: R, la constante universal de los gases: T. la temperatura en K y N, el nmero de moles de soluto en el simplasto. Se supone que las clulas actan como osmmetros perfectos, y que el agua en el apoplasto no cambia du rante la desecacin de la hoja. Una ventaja de la tcnica de la cmara de presin es

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Tornillo micromtrico

mbolo metlico

Medidor

Cmara psicromtrica cerrada

Unin termopar _ Gota de solucin de f conocido

Tejido de 1 ' desconocido

Tapa

Tapn de goma

Manmetro \ V P. negativo

Columna de agua en el xilema antes de la escisin

Columna de agua despus de la escisin

Columna de agua cuando se ha alcanzado la presin de equilibrio

Cmara

Gas comprimido

Figura 2-4. D i f e r e n t e s m t o d o s p a r a la m e d i d a d e l p o t e n c i a l h d r i c o d e l a p l a n t a . A ) P s i c r o m e t r a . B) S o n d a c e : i = : C m a r a d e p r e s i n ( s e g n Taiz y Z e i g e r , 1991). ( A d a p t a d o d e A z c n - B i e t o y T a l n , 1993.)

que no slo mide rpidamente el potencial hdrico, sino que tambin se puede utilizar para medir la relacin presin-volumen del tejido vegetal. Se ha demostrado que si se aplica presin adicional a una hoja o rama por encima de la presin de equilibrio inicial, se obtiene lquido xilemtico que se puede recoger para determi nar su volumen. Haciendo esto de una manera progresi va, se puede establecer una curva presin-volumen (Fig. 2-5). Una vez que la presin de turgencia alcanza valor cero, la representacin de I /P en funcin de V se

hace lineal, como se indica en la ecuacin -\t~ tas curvas posibilitan la determinacin de un _~ pectro de parmetros hdricos en los tejid potenciales osmticos, ajuste osmtico \ prc elsticas. Con algo de prctica, la cmara de p constituir uno de los instrumentos disponibles apropiados para la investigacin en eL. cas.

El agua en la planta

25

1/P = 1/presin de equilibrio CHR = Contenido hidrco relativo A = I/1!',1011 = 1/potencial osmtico a plena turgencia B = 1/P, = 1/potencial osmtico a turgencia cero C = CHR= Contenido hidrico relativo a turgencia cero D = Vs = Volumen hidrico simplstico E = l I ' = Potencial de presin 1/P

/
CHR Figura 2-5. Curva de presin-volumen utilizada para determinar los componentes del potencial hidrico en plantas. El re cuadro representa los tipos de informacin de relaciones hidricas en tejidos que se pueden obtener a partir de la curva presin-volumen (adaptado de Nilsen y Orcutt, 1996).

5.3.

La sonda de presin es el nico instrumento que puede medir el estado hidrico de clulas individuales

Los mtodos convencionales, tales como la cmara de presin y los psicrmetros, determinan el potencial hi drico promedio del tejido completo, independientemen te de que existan diferentes tipos de clulas. Adems. dichos mtodos requieren equilibrio del llujo hidrico en el interior del tejido y suponen que las membranas ce lulares son idealmente semipermeables a los solutos. En muchos casos, estas suposiciones no han sido com probadas, y esto puede provocar errores, tanto en la me dida como en la interpretacin de los resultados. Ade ms, la cmara de presin y los mtodos psicromtricos no son adecuados para medir la cintica del movimien to del agua ni para evaluar las cantidades de agua trans portadas en las diferentes vas de un tejido complejo. En contraste con estos mtodos, la tcnica de la sonda de presin permite determinar los parmetros de re laciones hidricas a nivel celular. La sonda de presin (Fig. 2-4 B) consta de un microcapilar (dimetro de la punta: 2 a 7 /mi) relleno con aceite de silicona y conec tado a una cmara de presin pequea que contiene un sensor de presin. Cuando el extremo del microcapilar se introduce en la clula, la turgencia celular (*Pp) hace retroceder el aceite en el capilar, formando un menisco a nivel de la

interfaz entre el jugo celular y la capa de aceite. El me nisco se puede situar en un punto concreto mediante un mecanismo manual o electrnico, y entonces se puede eliminar una determinada cantidad para modificar el volumen (V) y la turgencia celulares. Los cambios de volumen celular (AV) se obtienen a partir del dimetro del capilar y la distancia entre dos posiciones del me nisco. mientras que el correspondiente cambio en la presin (AP) se registra mediante el sensor de presin. Cuando se conoce el volumen celular, se puede evaluar el mdulo de elasticidad (E) segn la ecuacin 2-20. Una de las ventajas de la sonda de presin es que la presin de turgencia se puede medir con gran exactitud. Asimismo, la sonda de presin se puede utilizar para determinar el potencial hidrico de clulas individuales a partir de medidas directas de la presin de turgencia celular y del potencial osmtico del jugo extrado.

6. 6.1.

MOVIMIENTO DEL AGUA El m o v i m i e n t o del agua en el suelo depende fundamentalmente de su potencial mtrico

El suelo es un sistema complejo que consta no slo de proporciones variables de partculas de roca y materia orgnica que forman la matriz slida, sino tambin de

26

Fundamentos de fisiologa vegetal

la disolucin del suelo y del aire que ocupa el espacio poroso. El tamao y la naturaleza qumica de las pan culas, en especial su carga elctrica superficial y la ma nera en que se disponen, determinan cunto agua se puede retener en el suelo en contra de la accin de la gravedad y con qu fuerza se retiene. Esta capacidad de retener el agua es una manera de describir el potencial hdrico del suelo y, como ya se mencion anteriormen te, depende en especial de las fuerzas de interfaz, repre sentadas por el potencial mtrico. Puesto que existe poca variacin en la presin hidrosttica en las capas superficiales del suelo (de tal modo que *Fp = presin atmosfrica = ), y se encuentran pocos solutos pre sentes (excepto en suelos salinos), la ecuacin [2-12] se simplifica a: vp
=

_y

[2-26]

Cuando un sucio est totalmente mojado despus de haber drenado por gravedad, estado descrito como capacidad de campo, su potencial hdrico es cero. No obstante, a medida que el suelo se seca, bien por evapo racin en su superficie, o bien porque las races absor ben agua, desciende el potencial mtrico y el potencial hdrico se hace ms negativo. Esto se ilustra en la Figu ra 2-6 donde se representa la relacin entre el *V del suelo y el contenido hdrico. Se denomina porcentaje de marchite/ permanente el contenido hdrico del suelo con el cual las plantas se marchitan. No obstante. con independencia del tipo de suelo, el potencial hdri co en el porcentaje de marchitez permanente es relati vamente uniforme, aproximadamente 1.5 MPa. Aun que existen algunas excepciones, la mayora de las

plantas son incapaces de extraer cantidades importantes de agua cuando el potencial hdrico del suelo se hace inferior a 1.5 MPa. En cierto modo, la capacidad de campo se puede considerar una propiedad del suelo. mientras que el porcentaje de marchitez permanente lo es de la planta. Tradicionalmentc se ha definido como agua disponible la que exista entre la capacidad de campo y el porcentaje de marchitez permanente. Hay que decir, no obstante, que en este margen el agua no est uniformemente disponible. En un suelo que se seca, las plantas empezarn a mostrar signos de dficit hdrico y reduccin del crecimiento mucho antes de que el potencial hdrico del suelo alcance el porcentaje de marchitez permanente. La Figura 2-6 tambin muestra la gran diferencia que existe entre un suelo arenoso y un suelo rico en arcilla. tanto en la capacidad de retener agua como en el agua disponible, diferencia que se refleja en la denominacin dada por jardineros y agricultores como ligero y pe sado. respectivamente. En la capacidad de campo, la arena contiene slo un tercio de la cantidad de agua que posee la arcilla. Cuando tienen el mismo contenido h drico. los suelos arcillosos poseen un potencial hdrico muy inferior al de los arenosos.

6.2. El movimiento del agua en la planta est regido por gradientes de potencial hdrico
Un aspecto general sobre el movimiento del agua en plantas es que es un proceso totalmente pasivo. N existen bombas equivalentes a un corazn animal ni

Porcentaje de marchitez perr-

01

10

20

30

40

50

6 C

Contenido de agua en el suelo 1% peso seco* Figura 2-6. Potenciales mtricos de un suelo arenoso (o) y otro arcilles uncin del contenido m&vao

El agua en la planta

27

tampoco molculas para el transporte activo primario o secundario del agua. El transporte activo de molculas de soluto como, por ejemplo, iones o azcares, puede originar condiciones que causan movimiento del agua: pero esto se considera tambin como un proceso pasivo. Podemos decir que, en general, existen dos tipos de mo vimiento del agua: flujo masivo y difusin. El flujo masivo es el movimiento de molculas de agua y solu tos de manera conjunta y en una direccin, debido a diferencias de presin. Ejemplos de ello son el flujo de agua en tuberas bajo gradiente de presin, la corriente de agua en un ro provocada por la accin de la grave dad. la subida de la savia en el xilema de las plantas provocada por la evaporacin del agua en la parte area (vase Captulo 4), o el transporte de azcares y otros asimilados en los tubos cribosos del floema (vase Ca ptulo 5). Por el contrario, el movimiento del agua entre o ha cia las clulas vivas, o a travs del suelo tiene lugar, de ordinario, mediante difusin: en esle caso, las molcu las de agua se mueven en todas las direcciones, si bien la mayora de ellas en una direccin particular y. por tanto, existe un flujo neto en esa direccin. De hecho, la osmosis es un ejemplo de difusin inducida por una di ferencia de potencial hdrico entre los dos lados de una membrana provocada, normalmente, por diferencias en la concentracin de solutos. La velocidad del movi miento de las molculas de agua en estado lquido me diante difusin es la adecuada para realizar el trans porte en las cortas distancias (mieras) que existen a nivel celular. En el transporte a larga distancia hay que resaltar la mayor importancia del flujo masivo comparado con el movimiento difusivo. As. por ejemplo, se ha estimado que pequeas molculas de solutos en disoluciones acuosas requeriran unos ocho aos para difundirse en una distancia de 1 m. Sin embargo. los solutos y el agua transportada con ellos se pueden mover mediante flujo masivo en el xilema a razn de muchos metros por hora. Una de las razones que ha conducido a una acepta cin generalizada de la determinacin del potencial h drico ha sido el hecho de que el movimiento del agua en la planta se presenta a lo largo de gradientes de dismi nucin de energa libre, expresado de ordinario como diferencias de 4 / . El agua se mueve desde zonas de ma yor a otras de menor potencial hdrico. En el interior de la planta, es ms elevado en las races, disminuyendo progresivamente en el tallo, observndose los valores ms bajos en las hojas (Fig. 2-7). Por tanto, si se mide el en dos puntos de un sistema (por ejemplo, entre suelo y planta, o entre races y ho jas), la direccin del flujo y del gradiente que determina los flujos se puede inferir fcilmente. Adems del movimiento del agua entre la planta y su ambiente, la difusin a lo largo de un gradiente de po tencial hdrico puede explicar tambin el movimiento del agua entre las clulas (Fig. 2-8). Clulas individua-

' I ' aire (226C, 50% HR) -100MPa

raz 0.1 MPaa-0.51 MPa Figura 2-7. Potencial hdrico en el sistema suelo-plantaatmsfera. El valor ms negativo de 4' se encuentra en la atmsfera. En la planta existe : > iradiente, siendo el po tencial ms negativo en las hojas y menos negativo en las races, donde T se aproxima al del suelo.

les en un tejido pueden experimentar diferentes valores de f . y ' dependiendo de las circunstancias especfi cas de cada clula. Xo obstante, el agua fluir a travs de la serie de clulas en tanto en cuanto se mantenga un gradiente continuo de potencial hdrico.

6.3.

El concepto del continuo suelo-plantaatmsfera (SPAC) proporciona un modelo til y unificado del flujo del agua desde el suelo a la atmsfera

Una contribucin importante al estudio de las relacio nes hdricas en las plantas es el tratamiento del movi miento del agua desde el suelo hacia las races, a travs de la planta y hacia el aire, como una serie de procesos estrechamente interrelacionados. Este concepto, cono cido como el continuo suelo-planta-atmsfera o SPAC (Soil-Plant-Atmosphere Continuum). permite consi derar todos los aspeclos de las relaciones hdricas al es tudiar el balance hdrico de las plantas (vase Captu lo 4). El movimiento del agua en el sistema SPAC se considera similar al flujo de electricidad en un sistema conductor y. por tanto, se puede describir como un an logo a la ley de Ohm. es decir.

1:

Fundamentos de fisiologa

vegetal

Vaso xilemtico 'P = -0.1 Gradiente decreciente de potencial hdrico Direccin del flujo de agua

4*, = -0.6 f p = 0.2 f = -0.4

Figura 2-8. Diagrama donde se ilustran las contribuciones del potencial osmtico CPS), potencial de presin ( l I' p ) y potencial hdrico {V) al movimiento del agua entre clulas. La direccin del movimiento del agua viene determinada nicamente por el valor del potencial hdrico entre clulas adyacentes (adaptado de Hopkins, 1995). Los valores de T se expresan en MPa.

Flujo =

diferencia de *V resistencia

[2-27]

Este concepto se puede aplicar al flujo en equilibrio estable a travs de la planta de la manera siguiente:
pl..suelo ra/ rafe ' tallo

r,
ir/
* tallo

r2
w
* hoja

c
'-"hoja

_
hoja '

raire

-I- r
' aire

[2-28]

donde \\, r2 y r 3 constituyen las resistencias en las par tes respectivas ele la va y C corresponde a la concentra cin de vapor de agua. El concepto del continuo proporciona una teora til y unificadora en la cual el movimiento del agua a travs de suelo, races, tallos y hojas, as como su evaporacin hacia el aire, se pueden estudiar en trminos de las fuer zas motrices y las resistencias que actan en cada seg mento. El concepto tambin es iil para analizar la ma nera en que diversos factores del ambiente afectan al movimiento del agua. As, por ejemplo, la sequa en el suelo provoca tanto un aumento en la resistencia al flu

jo de agua hacia las races como una disminucin del potencial hdrico (vase Captulo 4): una aireacin defi ciente y una disminucin de la temperatura del suelo aumentan la resistencia al flujo de agua en las races, y un aumento en la temperatura de la hoja y del aire in crementa la transpiracin al aumentar el gradiente de concentracin de vapor de agua o fuerza motriz desde la hoja al aire (vanse Cuadro 2-1 y Captulo 3). Asi mismo, el cierre de los estomas aumenta la resistencia a la difusin del vapor de agua fuera de las hojas. El concepto del continuo tambin facilita el desarro llo de modelos del movimiento del agua, tal como el ejemplo que se muestra en la Figura 2-9. Los modelos pueden referirse tanto a estomas individuales como a comunidades de rboles. Los investigadores en mode los esperan que, en el futuro, se podr predecir el com portamiento de la planta para un amplio espectro de condiciones ambientales. No obstante, es importante resaltar que esta discu sin elemental sobre el concepto del continuo sueloplanta-atmsfera constituye, por una serie de razones, una simplificacin excesiva. En primer lugar, supone la existencia en la planta de condiciones de equilibrio es table, lo cual rara vez se da. Incluso, en una misma

Cuadro 2-1. Efecto del aumento de temperatura en la concentracin de vapor de agua en las hojas y gradiente de concentracin de vapor desde la hoja al aire para una supuesta humedad relativa constante del 60% a Temperatura TC) Parmetro Concentracin de vapor de agua en el tejido (g-cm - 3 ) Concentracin de vapor de agua en el aire al 60 % de humedad relativa (g-ein" 3 ) Gradiente de concentracin de vapor de agua 10 9.41 5.65 3.76 20 17.31 10.39 6.92 30 30.40 18.24 12.16 1 ,

(g-em~3J
Se supone que la concentracin de vapor de agua del tejido foliar corresponde a la concentracin de vapor de agua a saturacin, puesto que la disminucin provocada por los solutos celulares es slo, aproximada mente, del 3 %.

El agua en la planta

29

y propiedades del agua influyen en la estructura y pro piedades de las protenas, membranas, cidos nucleicos y otros constituyentes celulares. La cuantificacin apro piada del estado hdrico de las plantas depende de los objetivos de la investigacin, pero los conceptos de contenido hdrico relativo y potencial hdrico han resul tado ser los ms tiles. Mientras que el contenido hdri co relativo deriva de la cantidad de agua en un tejido comparada con la contenida en hidratacin completa, el concepto de potencial hdrico se basa en la energa libre del agua y consiguiente capacidad para predecir las di recciones del flujo a lo largo de gradientes decrecientes de energa libre. El potencial hdrico total comprende la influencia de varios potenciales componentes, como son los atribuibles a efectos de los solutos (potencial osmtico), efectos de la presin (potencial de presin o de turgencia) y efectos de las superficies (potencial mtrico). Existen numerosos mtodos para cuantificar el potencial hdrico y sus componentes, siendo los instru mentos ms empleados los psicrmetros, la cmara de presin y la sonda de presin. El movimiento del agua en las plantas est regido por gradientes de potencial hdrico. La integracin del con cepto de potencial hdrico con las vas de flujo corres pondientes ha originado el concepto del continuo sueloplanta-atmsfera. que constituye un modelo til y unifi cado del flujo de agua desde el suelo hasta la atmsfera.

Figura 2-9. Va del flujo de agua en el continuo sueloplanta-atmsfera (SPAC) que se describe utilizando una analoga con un circuito elctrico. R se refiere a resistencia y C, a capacitancia (adaptado de Jones, 1992).

AGRADECIMIENTOS
Deseamos agradecer a Virginia Sobrini Lacruz su va liosa ayuda tcnica en la elaboracin de los manuscritos correspondientes a los Captulos 2, 3 y 4.

planta, especialmente cuando se trata de rboles, el flu jo puede variar entre los diferentes segmentos del conti nuo, ya que las distintas zonas del dosel estn sometidas a diferente rgimen de radiacin y demanda evaporaliva. Por otra parte, el movimiento del agua en la fase lquida es proporcional a la diferencia de potencial h drico, mientras que el movimiento en la fase de vapor es proporcional al gradiente de concentracin de vapor de agua. Por ltimo, en el caso de especies leosas, el tronco tambin sirve como un complejo reservorio de agua que es vaciado y rellenado tanto a lo largo del da como en las diferentes estaciones del ao. En este caso, dicho almacenamiento de agua se puede incorporar en el anlogo elctrico si se consideran los condensadores como parte del sistema (Fig. 2-9). Dada la coherencia que el concepto SPAC da a las relaciones hdricas en plantas, lo incorporaremos tanto al estudiar la transpiracin o prdida de agua en las plantas (Captulo 3) como al considerar la absorcin y transporte del agua (Captulo 4).

PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Una clula vegetal de epidermis de cebolla tiene un inter cambio neto nulo de agua con una solucin de CINa 0.164 M a 25 C. Al estudiar la plasmlisis incipiente (50% de clulas plasmo!izadas), vemos que se presenta en una solucin de CINa 0.307 M, tambin a 25 C. Cal cule los distintos componentes del potencial hdrico de la clula en el estado inicial y al final de la plasmlisis. Consideramos que el *m es despreciable y que las mem branas no son permeables al CINa. 2. Se deja que una hoja marchita que tiene un V de 1.5 MPa absorba agua hasta que su 4* sea de 0.5 MPa y su 4*s de 1.4 MPa. Cul es el mdulo de elasticidad. ;, para esa hoja? 3. Cul es el gradiente de potencial hdrico existente entre una hoja de castao de indias que tiene un *P de 1.0 MPa y la atmsfera que le rodea, si sta tiene a 25 C una humedad relativa del 65%'? 4. En qu medida el concepto de potencial hdrico ayuda a los fisilogos vegetales a explicar los movimientos del aaua?

RESUMEN
El agua es esencial para la supervivencia, el crecimien to y la actividad metablica de las plantas. La estructura

CAPITULO

MOVIMIENTOS ESTOMTICOS Y TRANSPIRACIN


Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea
' Introduccin. 2. Movimientos estomticos. 3. Transpiracin.

INTRODUCCIN

oceso dominante en las relaciones hdricas de una ?ianta es la absorcin de grandes cantidades de agua a -_nir del suelo, su transporte a travs de la misma y la ida eventual de vapor de agua hacia la atmsfera indante debida a la transpiracin. La consecuens la transpiracin es especialmente evidente en los os, donde se pueden requerir varios centenares de jiros de agua para producir un kilogramo de materia con frecuencia, una transpiracin excesiva origina .ciones importantes en la productividad. De hecho. i cuitad para desarrollarse debido a los dficit hIricos producidos por la transpiracin es la causa prin cipal de prdida econmica y fracaso de muchos culti en el mundo. Por ello, desde un punto de vista tanto ico como prctico, la transpiracin es, sin duda, un proceso de considerable importancia. Este captulo estudia el fenmeno de la transpiracin .orno los movimientos estomticos, ya que la prdih de agua a travs de los estomas, o transpiracin esto ca, es el componente mayoritario de la transpira cin.

2. MOVIMIENTOS ESTOMTICOS
Las plantas terrestres se enfrentan con demandas opues:as. Por una parte, la atmsfera se encuentra tan alejala saturacin de agua, que la planta corre peligro . deshidratacin, a pesar de que la cutcula sirve -orno barrera efectiva a la prdida de agua. Por otra parte, una barrera completa bloqueara el intercambio ie O, y C 0 2 , que es esencial para la respiracin y foto sntesis.

La solucin funcional a este dilema es la regulacin temporal de las aberturas estomticas. Por la noche, cuando no hay fotosntesis y. por tanto, no existe de manda por el CO, en el interior de la hoja, las aberturas estomticas se reducen, impidindose la prdida inne cesaria de agua. Por la maana, cuando el suministro de agua es abundante y la radiacin solar favorece la acti vidad fotosinttica, la demanda por el C 0 2 en el inlerior de la hoja es grande, y los poros estomticos estn muy abiertos, disminuyendo la resistencia estomtica a la di fusin del C 0 2 . En estas condiciones, la transpiracin estomtica tambin tiene un aspecto positivo. En pri mer lugar, origina la corriente transpiratoria que trans porta rpidamente los nutrientes minerales desde las races a las partes areas en crecimiento y, en segundo lugar, enfra las hojas cuando el tiempo es caluroso, o la luz, potente. Por tanto, cuando el agua es abundante, los estomas pueden desempear un papel importante en la regulacin trmica. No obstante, en su conjunto, la transpiracin es ms un mal necesario que una ventaja, y la necesidad de obtener C 0 2 entra en conflicto direc tamente con la necesidad de conservar el agua. Muchas plantas, especialmente en habitat secos, mantienen un equilibrio precario entre inanicin y desecacin y, asimismo, el riesgo de embolia en rboles requiere fre cuentemente una disminucin rpida de la transpiracin (vase Captulo 4). Estas son las razones de por qu la capacidad para abrir y cerrar los poros estomticos es esencial, y de por qu los estomas se consideran como vlvulas gobernadas por turgencia, que regulan el inter cambio de gases. Por tanto, los eslomas desempean un papel vital en el mantenimiento de la homeostasis de la planta, y de ah la importancia de conocer, tanto la for ma en que los poros se abren y se cierran, como los factores que controlan estos procesos.

31

32 2.1.

Fundamentos de fisiologa vegetal Los estomas son poros situados en la superficie foliar que permiten el intercambio de gases y cuyo dimetro vara por cambios en la turgencia de las clulas oclusivas gramneas y ciperceas, en forma de pesas de gimnasia. En muchas especies, los eslomas poseen estructuras pro tectoras especiales, o el poro est parcialmente ocluido por ceras que contribuyen a aumentar la resistencia difu siva. Tanto la frecuencia como el tamao pueden variar en funcin de la posicin foliar y las condiciones de crecimiento e, incluso, dentro de una misma especie puede existir un gran componente gentico de variacin entre diferentes cultivares o ecotipos. Los movimientos estomticos dependen de cambios en la presin de turgencia, tanto de las clulas oclusi vas como de las clulas epidrmicas adyacentes. Estas ltimas a veces se modifican para formar clulas acom paantes diferentes. Al conjunto de clulas oclusivas y acompaantes se le denomina aparato estomtico. Los cambios de turgencia pueden resultar bien de una modi ficacin en el potencial hdrico ( ) de las clulas oclu sivas (mecanismo hidropasivo). o bien de cambios activos en el potencial osmtico CPj (mecanismo hidroactivo). Ambos mecanismos conllevan movimiento del agua hacia dentro o fuera de las clulas oclusivas. El dimetro del poro estomtico depende de la forma de las clulas oclusivas que, a su vez. es funcin de las propiedades de las paredes celulares y de su turgencia, en relacin con la turgencia de las clulas circundantes. Los cambios en el tamao del poro se presentan como consecuencia de ciertas propiedades peculiares de las clulas oclusivas: Pueden alterar rpida y reversiblemente su tur gencia (es decir, su contenido hdrico) y. a medida que esto sucede, cambia el volumen de la clula. b) La forma de la clula oclusiva, a turgencia ele vada y baja, depende de las propiedades de la pared. Las microfibrillas de celulosa se dispo nen en las paredes de las clulas oclusivas de forma que la pared interna (prxima al poro) es menos elstica, en sentido longitudinal, que la pared externa. Esto se debe, fundamentalmente, a la orientacin de las microfibrillas. pero tam bin a que, con frecuencia, la pared interna se halla engrosada. De esta manera, cuando aumen tan la turgencia y el volumen celular, la pared externa se alarga ms que la pared interna y las clulas oclusivas adquieren forma de arco (poros abiertos): cuando disminuye la turgencia, las clulas estn ms o menos rectas (poros cerra dos) (Fig. 3-1). c) El arqueado de las clulas oclusivas se produce porque alcanzan un mayor contenido de solutos y, por tanto, una mayor turgencia que las clulas epidrmicas circundantes. Los estudios efectua dos sobre mecanismos estomticos han demos trado que, en muchos casos, las clulas acompa antes poseen una ventaja mecnica sobre las oclusivas, de tal modo, que aumentos iguales de presin en las clulas oclusivas y acompaantes provocan el cierre estomtico. Esto implica que a)

Los estomas se encuentran en las partes areas de prc ticamente toda la flora terrestre, incluyendo esporofitos de musgos, helchos, gimnospermas y angiospermas. Aunque son ms frecuentes en las hojas, tambin se presentan en otros tejidos verdes tales como tallos, fru tos y partes de inflorescencias (por ejemplo, aristas de gramneas y spalos de angiospermas). Tienden a ser ms frecuentes en la superficie inferior de las hojas y. en algunas especies, especialmente de rboles, slo se presentan en la epidermis inferior. Las hojas con esto mas en ambas caras se denominan anliestomticas, y las que los tienen restringidos a la epidermis inferior se denominan hipoestomticas. El estoma consta de un poro rodeado de dos clulas oclusivas o de guarda (Fig. 3-1) en forma de rion o, en

Clulas epidrmicas

Figura 3-1. Disposicin radial de las microfibrillas de celu losa en clulas oclusivas y epidrmicas de estomas en for ma arrionada (a) y de tipo gramnea (b) (segn Meidner y Mansfield, 1968). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

Movimientos

estomticos

y transpiracin

33

d)

el cierre no se puede presentar como una simple respuesta hidrulica a la disminucin del estado hdrico de la hoja y que, normalmente, todos los movimientos estomticos son consecuencia de un proceso activo. Normalmente, las clulas oclusivas difieren del resto de las clulas adyacentes en otras caracte rsticas: no estn comunicadas con las clulas adyacentes por medio de plasmodesmos y. por lo general, los cloroplastos son menos frecuen tes, ms pequeos y de diferente morfologa que los de las clulas del mesfilo. Si se observa al microscopio una tira de epidermis foliar, las c lulas oclusivas suelen ser las nicas clulas ver des prsenles.

No obstante, a pesar de esta presencia generalizada de cloroplastos en las clulas oclusivas, no se ha confir mado que la reduccin fotosinttica del carbono parti cipe directamente en el mecanismo de abertura estomtica. Sin embargo, es bastante probable que la fotofosforilacin y la reduccin de NADP + proporcio nen energa para la abertura estomtica. Algunas orqu deas del gnero Paphiopedilum son peculiares, en el sentido de que sus clulas oclusivas carecen de clorofi la, si bien sus estomas son funcionales. Como se puede observar, las clulas oclusivas son clulas epidrmicas muy especializadas y el problema de cmo los estomas cambian de tamao, se reduce a la cuestin de cmo las clulas oclusivas cambian de turgencia relativa, siendo todo ello consecuencia de cambios activos en su poten cial osmtico. A medida que el estoma se abre, existe un aumento masivo del contenido en solutos de sus clulas oclusivas (de 1.8 a 7.2 pmol en hojas de Vicia fabo). La disminu cin del potencial osmtico conlleva una emigracin r pida de iones especficos hacia las clulas oclusivas, procedentes del tejido y paredes celulares (apoplasto) circundantes. Sin excepcin, el catin dominante es el K + , aunque en halfitas. tambin pueden participar iones N a + . El fenmeno clave que conduce a la absorcin de K + es el bombeo activo de protones hacia fuera de las clu las oclusivas, mediante una ATP hidrolasa protnica (H~-ATPasa) ligada a membrana. El gradiente electroqumico que se desarrolla a travs de las membranas (vase Captulo 7) de Jas clulas oclusivas, como conse cuencia de la salida de protones, permite la difusin pa siva de iones potasio hacia el interior, a lo largo de un gradiente de carga elctrica. De esta manera, la absor cin de K + es un proceso activo secundario, es decir, un proceso pasivo que depende directamente de un pro ceso activo, y se presenta a travs de canales muy selec tivos para el K + en el plasmalema. que se abren a medi da que los potenciales de membrana se hacen ms negativos. Haciendo un anlisis ms detallado, los protones de rivados del agua salen de las clulas oclusivas, quedan

do en el interior iones hidroxilo (OH"), de tal modo que, a medida que disminuye el pH externo, aumentan el pH intracelular y el potencial ele membrana (ms ne gativo en el interior de la clula), lo cual conduce a una entrada de K + (Fig. 3-2). No obstante, esto no puede continuar mucho tiempo; los iones O H " no sirven como anin de equilibrio a largo plazo con el catin K + , ya que el pH intracelular est estrictamente contro lado y, por tanto, deben existir otros aniones que lo equilibren. Cuando los estomas se abren, los niveles de C l - suben considerablemente, aunque no tanto como los niveles de K + . La absorcin de cloruros por parte de las clulas oclusivas tambin tiene lugar a travs de cambios especficos, pero no es provocada por un gra diente elctrico (que favorecera la salida de Cl~), sino por un gradiente de pH. El mecanismo preciso no se conoce an. pero en la Figura 3-2 se ilustran dos posibi lidades: que el Cl ~ se intercambie con el O H - , o que la entrada est ligada a la absorcin de protones (co-transporte con H + ) . No obstante, rara vez es el Cl~ el anin ms importante que equilibre el K~. Normalmente esta funcin la cumple el anin orgnico malato, que deriva del cido mlico (Fig. 3-2). cuya sntesis se asocia a la abertura estomtica de una manera muy peculiar: a medida que aumenta el pH intracelular. se activa la enzima PEP-carboxilasa. Esta enzima fija C 0 2 para producir cido oxalactico, que se puede reducir a ci do mlico (de la misma manera que en las plantas C 4 ) (vase Captulo 12). El cido mlico se ioniza al pH dominante, proporcionando no slo aniones que equili bran el K + . sino tambin iones hidrgeno para la bom ba protnica. Alternativamente, el malato es generado en las clulas oclusivas a partir de hidratos de carbono almacenados, tales como el almidn, aunque en espe cies de Aliium (que carecen de almidn en sus clulas oclusivas), los iones Cl~ proporcionan el contrain para el K + . Segn el modelo quimiosmtico, el estoma se cierra cuando la bomba protnica se desconecta. Con tal de que sus canales especficos permanezcan abiertos, el K i y el Cl ~ se mueve pasivamente fuera de las clulas oclusivas, a lo largo de gradientes electroqumicos. Algo de malato se puede metabolizar en las clulas oclusivas, pero tambin se tiene constancia de que du rante el cierre hay salida de malato. No obstante, hay que decir, que el cierre estomtico no slo depende de la prdida pasiva de iones, sino que tambin constituye un proceso metablico activo. Una cuestin importante y muy debatida se refiere a la fuente energtica para la abertura estomtica, es de cir, de dnde procede el ATP que alimenta la bomba protnica?: todo hace pensar que existen dos y, posible mente. tres fuentes separadas de ATP, que se utilizan en diferente grado, en distintas ocasiones. Una es la fotofosforilacin por parte de los cloroplastos. que funciona a intensidades luminosas medias a elevadas (vase Ca ptulo 10); otra es la fosforilacin oxidativa (respira cin) (vase Captulo 14). que puede actuar en oscuri-

34

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

pH apopistico: desciende

Permanece bajo

Sube . K'

CI-

- Cl

\U

/lalato 2 - -

Malato'

H'-

H'

pH celular 5.2 5 . 6

5.6

5.65.2

Molcula que transporta K"

Primera etapa de la abertura estomtica

b)

Segunda etapa de la abertura estomtica

Cierre estomtico

O D

ATPasa que bombea H' Molcula que transporta Cl"

F i g u r a 3-2.

M o v i m i e n t o d e i o n e s y m e t a b o l i s m o e n las c l u l a s o c l u s i v a s d u r a n t e la a b e r t u r a y el c i e r r e e s t o m t i c o s ( s e g n R i d g e , 1991). ( A d a p t a d o d e A z c n - B i e t o y T a l n , 1993.)

dad; y una tercera (cuya existencia es an incierta) es un fotosistema accionado por la luz azul y muy separa do de la fotosntesis, que podra funcionar a niveles de intensidad luminosa baja, tal como ocurre en la sombra o al amanecer. Existe una fitotoxina, la fusicoccina, que es un terpenoide producido por el hongo Fusicoccum cimygdali, que activa fuertemente la ATPasa de la membrana en todo tipo de vegetales. Su toxicidad se basa en que al activar constantemente la ATPasa de los estomas, stos permanecen abiertos y la planta pierde excesiva agua. Se han hecho anlisis minuciosos de los costes energticos para el mantenimiento de las clulas oclusivas, y para los cambios en la abertura estomtica, pero se sabe poco sobre los procesos que relacionan los mecanismos de percepcin de estmulos (por ejemplo, el fotosistema de la luz azul) y la provisin de energa para realizar cambios en la turgencia de las clulas oclusivas.

de los estomas es la regulacin de la prdida de agua (transpiracin) y la absorcin de CO, (asimilacin fotosinttica del carbono), el estudio de los factores que controlan la abertura estomtica lo vamos a analizar, esencialmente, en relacin con el requerimiento de C0 2 y la conservacin del agua.
2.2.1. La luz y la concentracin intercelular de C02 controlan la abertura estomtica en relacin con la demanda fotosinttica de CO-,

2.2.

El control estomtico equilibra dos requisitos contrapuestos: conservacin de agua y obtencin de C 0 2 para la fotosntesis

Los estomas proporcionan a las plantas un mecanismo fundamental para adaptarse a un ambiente continua mente cambiante (vase Captulo 13). permitiendo el intercambio fsico activo entre las parles areas de la planta y la atmsfera. Puesto que el papel ms notable

Bajas concentraciones de C 0 2 intercelular (C,) esti mulan la abertura estomtica, y viceversa. Los estomas responden al C0 2 tanto con luz como en la oscuridad y, por tanto, la respuesta no puede depender nicamente de la fotosntesis. Sin embargo, la manera en que el C0 2 provoca los movimientos estomticos est todava por resolver. Una hiptesis sugiere que, debido a que el CO, es fijado (va PEP-carboxilasa) en las clulas oclu sivas en forma de cido mlico, el nivel de uno o ambos de los productos de disociacin, malato e iones H + (es decir, el pH citoplasmtico), refleja el nivel de C0 2 , e influye en la permeabilidad de las membranas o en el desnivel del gradiente de protones. Otra hiptesis su giere que. en presencia de luz. el C0 2 afecta al grado de fotofosforilacin y al suministro de ATP para el bom beo de protones. El valor de C; se mantiene sorprendentemente cons-

Movimientos

estomticos

y transpiracin

35

tante (alrededor de 230 ppm en especies C 3 y 130 ppm en especies C 4 ) para un amplio espectro de condiciones y tasas folosintticas. Esto ocurre as siempre que la conductancia estomtica vare en proporcin con la tasa de asimilacin, y ha llevado a sugerir que una seal pro cedente del mesfilo controlara la abertura estomtica, Sin embargo, no existe un mecanismo que explique di cha hiptesis y. adems, el descubrimiento de la exis tencia de heterogeneidad en la conductancia estomtica (vase apartado 2.2.3) ha puesto en duda el concepto de la existencia de un valor constante de C La abertura estomtica es estimulada por la luz de dos formas diferentes. En primer lugar, la radiacin l'otosintticamente activa (PAR) inicia la fotosntesis, dis minuyendo el C O , intercelular y. por tanto, estimulan do la abertura estomtica. Este efecto indirecto de la luz se considera importante en las plantas C 4 . pero no en las C 3 . Estas ltimas estn muy influidas por el segundo efecto de la luz, que funciona directamente sobre las clulas oclusivas y es independiente de la concentra cin de C 0 2 . De nuevo, no existe acuerdo sobre la manera en que acta la luz, pero la hiptesis ms sencilla es que pro porciona ATP para el funcionamiento de las bombas de protones. Adems, hay que considerar la participacin de dos sistemas diferentes para la absorcin de luz: uno es el sistema cloroflico ordinario de los cloroplasios (fotosistema PAR), y el otro es un sistema que absorbe la luz azul, basado en un pigmento (probablemente del tipo flavina) unido a la membrana, en el interior de los cloroplastos. Parece ser que el fotosistema PAR domi na a irradiancias medias a elevadas y suministra ATP mediante fotofosforilacin siendo, aparentemente, esencial para una abertura muy amplia a la luz. El fotosistema de la luz azul no estimula tal abertura estom tica amplia, y se satura a irradiancias muy bajas; se en cuentra presente en gramneas (con clulas oclusivas en forma de pesas de gimnasia), pero no en especies con clulas oclusivas en forma arrionada; se ha sugerido que este sistema es responsable de la abertura rpida de los estomas al amanecer. En orqudeas del gnero Paphiopedilum, que se desaiTollan en habitat muy som bros, las clulas oclusivas de forma arrinonada carecen de cloroplastos y, al parecer, su respuesta a la luz est mediada, en gran parte, por el fotosistema de la luz azul. Respuestas rpidas de los estomas a la luz antici pan la demanda fotosinttica de CO, y pueden descri birse, por tanto, como respuestas de antealimenta cin (circuito abierto). Aunque en la mayora de las plantas los estomas se abren en presencia de la luz y se cierran en la oscuridad, ocurre lo contrario en plantas que poseen la va fotosin ttica del metabolismo cido de las Crasulceas (CAM) (vase Captulo 12). En esas plantas, la abertura mxi ma tiene lugar en la oscuridad, especialmente al co mienzo del perodo nocturno. En este caso, se contra rrestan completamente las respuestas normales a la luz. pero el C 0 2 y la humedad continan siendo reguladores

estomticos importantes. Durante la noche, se produce la fijacin y el almacenamiento (como cido mlico vacuolar) de C 0 2 y. por tanto, la C ser baja, estimuln dose la abertura estomtica. Durante el da, cuando se libera cido mlico procedente de las vacuolas y, poste riormente. se descarboxila para dar C 0 2 , los niveles elevados de C O , interno estimularn el cierre estomti co. La elevada humedad atmosfrica nocturna tambin tiende a estimular la abertura estomtica contribuyendo al ajuste fino de los movimientos estomticos.

2.2.2.

Por lo menos tres seales, la diferencia de presin de vapor entre la hoja y el aire, los niveles de cido abscsico en el apoplasto foliar y alguna seal no bien conocida procedente de las races, controlan la abertura estomtica en relacin con el suministro de agua

En la Figura 3-3 se muestran los tipos de comporta miento estomtico que normalmente se presentan en condiciones de sequa o cuando las tasas transpiratorias superan el suministro de agua a las races. El modelo con dos mximos (curva superior de la Fig. 3-3), con cierre estomtico parcial o completo al medioda, es muy corriente en rboles. El dosel de un bosque puede llegar a transpirar una cantidad considerable de agua, especialmente si el aire est seco y la temperatura es elevada. En estos casos, el cierre estomtico al medioda puede impedir la embolia y la cavitacin (vase Captulo 4, apartados 3.4 y 3.5). Muchas plantas herb ceas que se desarrollan en hbilats estacionalmente se cos tambin muestran este modelo con dos mximos al comienzo de la estacin seca. No obstante, al final de la misma, cuando el suelo est ms seco, los estomas slo se abren por la maana, se observa una curva con un solo mximo y la abertura estomtica durante este m ximo es menor al final que al comienzo de la estacin. Se pueden plantear dos interrogantes: qu seal(es)

Da tpico,

24.00

12.00

24.00

Figura 3-3. Respuesta estomtica a diversas condiciones ambientales (segn Salisbury y Ross, 1994). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

36

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

contrarresta(n) la baja concentracin de C O , y la eleva da intensidad luminosa que existen al medioda, e induce(n) el cierre estomtico?, por que, ordinariamente. los estomas se abren menos si el suelo est seco? Con respecto al cierre estomtico al medioda, parece estar controlado por el ambiente externo, principalmen te la humedad relativa del aire y, en cierto grado, la temperatura foliar. Se sabe que los estomas de mu chas especies se cierran en respuesta a un aumento en la diferencia de presin de vapor entre la hoja y el aire. La magnitud de esta respuesta depende de la especie, de las condiciones de crecimiento y, especialmente, del esta do hdrico de la planta, siendo menor la respuesta a tem peratura elevada o en plantas sometidas a sequa. No est claro todava cmo la humedad relativa ejerce este efec to, pero una hiptesis es que afecta a la tasa de prdida de agua a travs de la cutcula y, por tanto, a la turgencia de la epidermis, desencadenndose por ello el cierre esto mtico. Debido a que la respuesta a la humedad es previa a cualquier cambio en el estado hdrico de la hoja, se considera, al igual que en el caso de la luz, como una respuesta de antealimenlacin (circuito abierto). La seal procedente de la hoja que provoca el cierre estomtico en caso de dficit hdrico es el inhibidor del crecimiento cido abscsico (ABA) (vase Captulo 22). Su sistema de control es bastante peculiar. Las ho jas e, incluso, la epidermis superior e inferior de una misma hoja pueden variar su sensibilidad al ABA. Cuando las hojas se marchitan (turgencia cero), se de sencadena la sntesis de ABA en los cloroplastos de las clulas el mesfilo. En un primer momento, esto no tie ne efecto sobre los estomas, pero al cabo de varios ci clos de marchitamiento y recuperacin, los niveles de ABA aumentan y, al final, una cada de la turgencia foliar (no necesariamente hasta el porcentaje de mar chite/) provoca la liberacin del ABA almacenado en las paredes celulares (apoplasto). El ABA puede trans portarse hasta la plasmalema de las clulas oclusivas en las que, incluso en cantidades mnimas, afecta al bom beo de iones y provoca el cierre estomtico. En este caso, el papel del ABA parece ser verdaderamente hor monal. A medida que la hoja se rehidrata, se degrada el ABA apoplstico. En los ltimos aos, adems de conocerse mejor el papel del ABA en la regulacin del consumo de agua por la planta, se ha avanzado considerablemente en el conocimiento de su mecanismo de accin a nivel celu lar. Se ha demostrado que el cierre estomtico inducido por la oscuridad o por el ABA depende del suministro de iones calcio. Muchas hormonas animales utilizan mensajeros secundarios a nivel celular, y parece ser que los iones calcio pueden tener esta funcin con res pecto al ABA. Asimismo, se ha visto que la protena calmodulina, que liga iones calcio, tambin est pre sente en las clulas oclusivas y puede participar en la regulacin de la abertura estomtica. El tratamiento de tiras epidrmicas con inhibidores de la calmodulina provoca un aumento de la abertura estomtica. Por otra

parte, se sabe que en las plantas las ATPasa calcicas estn reguladas por el calcio y la calmodulina, si bien no se ha estudiado suficientemente su funcin en las clulas oclusivas. Como se ha indicado anteriormente, los estomas tienden a cerrarse con la disminucin del potencial h drico foliar. El cierre se produce para un amplio espec tro de 4* y esta relacin se puede modificar por la ex posicin a un estrs previo o por la velocidad de desecacin. No obstante, la conductancia estomtica es relativamente insensible a la fluctuacin diaria del ; esta respuesta es la que cabe esperar si suponemos que, durante el da. es la conductancia estomtica la que controla el potencial hdrico foliar (mediante una alte racin de la tasa transpiratoria), ms bien que al revs. Aunque se ha comprobado que los estomas respon den al estado hdrico foliar a Iravs de electos sobre la acumulacin activa de solutos en las clulas oclusivas (vase apartado 2.1), varios estudios han puesto de ma nifiesto que la respuesta estomtica a la sequa edfica puede estar controlada por otros factores. As. por ejemplo, cuando se modific el estado hdrico foliar de plantas de Helianthus annuus y Nerium oleander, alte rando la transpiracin mediante cambios en la humedad atmosfrica, se encontr que la conductancia foliar es taba ms relacionada con el estado hdrico del suelo que con el de la hoja. Esta hiptesis se ha comprobado tam bin presurizando el sistema radical hasta alcanzar pre sin cero en el xilema (clulas foliares turgentes) y. al mismo tiempo, dejando secar el suelo. De nuevo, la conductancia foliar parece responder mejor al contenido hdrico del suelo que a la turgencia foliar. Por otra parte, si bien se ha observado que la conduc tancia estomtica est mejor relacionada con T p que con *P. es muy posible que dicha relacin sea indirecta y que se realice a travs de un efecto sobre el bombeo de iones en las clulas oclusivas. Finalmente, otro he cho observado normalmente es que, cuando una planta se riega despus de un perodo de sequa, los estomas pueden tai-dar varios das en recuperarse (dependiendo de la intensidad y duracin del estrs), a pesar de que el potencial hdrico foliar se recupere rpidamente.

2.2.3.

La heterogeneidad de la conductancia estomtica, la temperatura y otros factores tambin afectan a la abertura estomtica

Heterogeneidad de la conductancia estomtica. Es tudios realizados sobre el efecto de la aplicacin de ABA en hojas sugirieron que no tena accin inhibidora directa sobre la fotosntesis, aunque la supresin de la abertura estomtica poda ejercer un efecto indirecto, al restringir la difusin de C 0 2 . Ulteriores anlisis de la relacin existente entre tasas de fotosntesis y concentracin de C 0 2 intercelular (C), en hojas a las que se haba suministrado ABA exgeno para provocar cierre

Movimientos

estomticos

y transpiracin

37

estomtico, sugeran que C permaneca constante o, in cluso, aumentaba. Estos resultados no dejaban de ser >orprendentes, ya que lo lgico hubiese sido que C dis minuyera a medida que los estomas se cerraban. Al no ser as, se dedujo que la exposicin breve al ABA poda tener efecto inhibidor directo sobre la fotosntesis, inde pendientemente del cierre estomtico. Actualmente, se sabe que la contradiccin aparente es consecuencia de los errores que surgen cuando se utiliza el mtodo convencional de estimar C a partir de los datos de intercambio gaseoso. La tasa transpiratoria se calcula como un promedio para toda la superficie foliar (vanse apartados 3.1 y 3.2); esto proporciona la base para estimar la conductancia total de la hoja al va por de agua (g w ). A partir de ese valor se calcula la relacin: C, = C - l.6A/g w [3-1]

fotn-espiracin. Un grado elevado de heterogeneidad probablemente conlleva una ineficiencia en el funcio namiento de la hoja, que habra que considerar en rela cin con la productividad vegetal. Por todo ello, la hete rogeneidad del comportamiento estomtico es un aspecto que merece una investigacin ms detallada. Temperatura y otros factores. Muchos estudios so bre las respuestas estomticas a la temperatura han dado resultados contradictorios. A menudo, el efecto de la temperatura se confunde con el efecto de variaciones en la diferencia de presin de vapor entre la hoja y el aire. Por tanto, es necesario efectuar estudios de res puesta a la temperatura en condiciones constantes de dficit de presin de vapor. En general, los estomas tienden a abrirse a medida que aumenta la temperatura. No obstante, la magnitud de la respuesta depende de la presin de vapor. Por ltimo, la abertura estomtica tambin depende de otros muchos factores tales como edad foliar, nutri cin y enfermedades, as como de la influencia de con taminantes gaseosos tales como el O,, el SO, y los xi dos de nitrgeno, probablemente debido a sus efectos sobre la integridad de las membranas. En la Figura 3-4 se resumen los factores ms impor tantes que controlan la abertura estomtica.

>iendo Ca, la concentracin de C 0 2 en el aire exterior a la hoja y A, la tasa de asimilacin neta de CO, (vase tambin Captulo 13). No obstante, este mtodo de estimar C resulta inco rrecto si el comportamiento de los estonias no es unifor me en las diferentes partes de la hoja, obtenindose vass superiores a los reales y dando la impresin de que b fotosntesis disminuye ms de lo que se podra atri buir al cierre estomtico. Estudios hechos con hojas idas de Vitis vinifera y Helianthus annuus, a las que >e les suministraba ABA a travs del peciolo, han de mostrado que el cierre estomtico se produce de forma r.eterognea. Lo mismo se ha observado al inducir el aumento de ABA endgeno mediante sequa edfica en >ecies de Vitis vinifera, Nerium oleander y Eucalipicifolia, explicndose as la aparente inhibicin no estomtica de la fotosntesis mediante el ABA. No obs tante, en el caso de Medicago sativa, se ha observado i cuando el estrs hdrico se impone de manera ccli. :. la actividad de la ribulosa-1,5-bisfosfato carboxilasa-oxigenasa (rubisco) disminuye considerablemente, y a limitacin estomtica de la fotosntesis slo es del 5 . Vemos, por tanto, que la limitacin estomtica de i fotosntesis depende de la especie y de la forma de imponer el dficit hdrico. Ahora bien, por qu responlos estomas de esa manera tan poco uniforme? En muchas hojas, la red de haces vasculares provoca el ais lamiento de zonas de espacios intercelulares y existe ana restriccin en la difusin lateral de C 0 2 entre di chas zonas. Se cree que las hojas con tal anatoma (hererobrica) son proclives al cierre estomtico no uni rme, mientras que esto no ocurre en aquellas que poseen espacios intercelulares bien conectados (homobricas), que proporcionan elevada movilidad gasa. La heterogeneidad del cierre estomtico conduci ra no slo a variaciones en la C sino, tambin, a dife rencias importantes en el metabolismo del carbono, re sultantes de cambios en la fijacin del C 0 2 y en la

3.

TRANSPIRACIN

Se define la iranspiracin como la prdida de agua en la planta en forma de vapor. Aunque una pequea canti dad del vapor de agua se puede perder a travs de aber turas pequeas (denominadas (entcelas) en la corteza del tallo y ramas jvenes, la mayor proporcin (ms del 90 %) se escapa por las hojas. En realidad, el proceso de la transpiracin est muy ligado a la anatoma (Fig. 3-5). Las superficies externas de una hoja tpica de planta vascular estn recubierias de un depsito creo dispuesto en varias capas, denominado cutcula. El componente principal de la cutcula es la cutina. un po lmero heterogneo de cidos grasos hidroxilados de cadena larga (tpicamente, 16 18 carbonos). La for macin de esteres entre grupos hidroxilos y carboxilos de cidos grasos prximos forma un entramado, origi nando una extensa red de polmeros. La red de cutina se halla inmersa en una matriz de ceras cuticulares, que son mezclas complejas de hidro carburos de cadena larga (hasta 37 tomos de carbono), alcoholes, aldehidos y cetonas. Debido a que las ceras cuticulares son muy hidrfobas, ofrecen una resistencia muy elevada a la difusin, tanto de agua lquida como de vapor de agua procedente de las clulas subyacentes. Por tanto, la cutcula sirve para restringir la evapora cin del agua de las superficies externas de las clulas epidrmicas foliares, y protege tanto las clulas epidr micas como las del mesfilo subyacente de una poten cial desecacin letal.

38

Fundamentos

de fisiologa

vegetal Humedad

PAR y luz azul

/
/

Antealimentacin

Realimentacin positiva Contenido hdrico races

Contenido hdrico epidermis y mesfilo Suministro agua

Figura 3-4. Factores que controlan la conductancia esto mtica. PAR, radiacin fotosintticamente activa; T, tem peratura foliar; Ca y ea, concentracin atmosfrica de C 0 2 y presin de vapor de agua, respectivamente (segn Raschke, 1979). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

La integridad de la epidermis y de la cutcula que la recubre es interrumpida por los estomas. El interior de la hoja est constituido por clulas fotosintticas del mesfilo; la disposicin algo dispersa de esta clulas origina un sistema inlerconectado de espacios areos intercelulares. Este sistema puede llegar a ser muy ex tenso. constituyendo en algunos casos hasta un 70 % del volumen foliar total. Los sitios de evaporacin estn localizados tanto en las cavidades sub-estomticas, sobre todo en la pared epidrmica interna prxima al poro estomtico, como en las paredes celulares externas de las clulas epidr
Clulas del mesfilo Cutcula Epidermis superior Parnquima en empalizada

micas. siempre que no exista un engrasamiento secun dario importante (Fig. 3-6). Esto se ha deducido a la vista de la gran diferencia de densidad de vapor creada entre estos puntos, as como por la diferente suberizacin de las paredes de las clulas del mesfilo. Una superficie mojada, expuesta al aire, cede tanto ms vapor de agua por unidad de tiempo y rea cuanto mayor sea el gradiente de presin de vapor entre la superficie y el aire. Por otra parte, la radiacin intensa calienta la superficie foliar lo que origina un gradiente de presin de vapor ms acusado. Por tanto, las propie dades radiativas de la hoja (especialmente su albedo) desempean un papel esencial en la evaporacin del agua en el mesfilo. La transpiracin y el movimiento del agua a travs de la planta se presentan incluso, en condiciones de humedad elevada, cuando el aire est saturado con vapor de agua. A lo largo de la vida de una planta, aproximadamente un 95 % del agua absorbida pasa simplemente a travs de ella y se pierde por transcripcin. No obstante, hay que decir tambin que la evaporacin del agua en las hojas proporciona la mayor parle de la energa para el movimiento del agua, dado que establece el gradiente de potencial hdrico (Captulos 2 y 4).

3.1.

El vapor de agua fluye de la hoja a la atmsfera mediante difusin a travs de los estomas

La transpiracin se puede considerar como un proceso de difusin (vase Captulo 2). Su intensidad depende tanto del suministro de energa para vaporizar el agua,

Xilema

Capa lmite

Epidermis inferior Cutcula Resistencia de la capa lmite Vapor de agua Bajo contenido en vapor de agua CO, alto Capa lmite Clulas oclusivas

Figura 3-5. Ruta del agua a travs de la hoja. El agua fluye desde el xilema hacia las paredes celulares del mesfilo, donde se evapora en los espacios areos en el interior de la hoja. El vapor de agua se mueve por difusin a travs del espacio areo hacia el poro estomtico, y atraviesa la capa lmite de aire en contacto con la superficie de la hoja. El C 0 2 tambin difunde hacia la hoja a travs del estoma, segn un gradiente de concentracin (adaptado de Taiz y Zeiger, 1991).

Movimientos

estomticos

y transpiracin

39

Figura 3-6. Representacin de los trayectos del flujo de vapor de agua entre los espacios areos de la hoja y la atmsfera exterior; es, cavidad subestomtica; m, clulas del mesfilo; se, principales sitios de evaporacin; o, clu la oclusiva; vd, va de difusin hacia el exterior; cp, co rriente principal del agua lquida (segn Meidner y Sheriff, 1976) (adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993).

La temperatura foliar determina el valor de Ch y e h , dado que la concentracin de vapor en las cavidades subestomticas se considera similar a la del aire satura do (Cuadro 2-1). Con respecto a C a y e a , dependen tanto de la temperatura como de la humedad relativa del aire. La ecuacin anterior se puede expresar tambin en trminos de diferencia de potencial hdrico (A) entre la hoja y el aire. Si consideramos una situacin en la que el aire tenga una humedad relativa (HR) del 5 0 % y una temperatura de 20 C, su f ser 94.1 MPa (ecua cin 2-17). Naturalmente, el 4* de la atmsfera se hace ms negativo, tanto con el aumento del dficit de saturacin de vapor en la atmsfera como con el aumento de la temperatura. El valor tan negativo del potencial hdrico en la atmsfera, en comparacin con los valores de potencial hdrico normalmente encontrados en los tejidos vegetales, indica que el mayor gradiente de po tencial hdrico en todo el sistema se presenta en el seg mento hoja-aire. Este hecho destaca la importancia de un control preciso, pero flexible, del flujo de vapor de agua en ese trayecto de la va.

como del gradiente de concentracin o presin de vapor y la magnitud de las resistencias. La Fuerza motriz para el movimiento de agua lquida a travs del tejido es la diferencia de potencial hdrico (A*?), pero la fuerza motriz para el movimiento del vapor de agua es el gradiente de concentracin o presin de vapor que, ade ms de elevado, frecuentemente es constante. Por tanto. lo que determina el flujo variable de vapor de agua en la transpiracin es la resistencia a la difusin de vapor hacia el exterior o resistencia difusiva (r) (s m~.). (Frecuentemente se utiliza 1/r = conductancia, g, m s _ 1 ) . La transpiracin difiere de la evaporacin en que el escape del vapor de agua est controlado, en gran medida, por las resistencias foliares a la difusin, las cuales no participan en la evaporacin de una superficie de agua libre. Utilizando la ley de Ohm. que es un an logo elctrico a la ley de Fick de la difusin, tendremos:
T =

3.2.

La resistencia estomtica a la difusin limita la tasa transpiratoria

Las resistencias relacionadas con la transpiracin re quieren una atencin especial. La resistencia foliar (rh) se refiere al flujo de vapor a travs de los estomas y la cutcula. Se considera que rh consta de dos resistencias conectadas en paralelo: l/rh = l/rc. + l/rB En el caso de hojas anfiestomlicas:
'/ r h
=

[3-3]

* Arara superior "r

' .' r cara inferior

L-'^J

C^_C r + ra

273^e PT

j L

^^

rh + ra [3-2b]

T = (C - CJ gw

siendo T, la transpiracin (g m~2 s l); Ch y C, la con centracin de vapor de agua (g m - 3 ) ; rh y ra, las resis tencias al vapor de agua de la hoja y de la capa lmite (vase apartado 3.2); gw, = l/(r h + r a ). conductancia total al vapor de agua; eh y e.,. la presin de vapor (mbar) de las superficies evaporantes en el interior de la hoja (h) y en el aire (a). El trmino 273 pJPT (en el que pv es la densidad del vapor de agua en g m - 3 ; P, es la presin atmosfrica en mbar y T, la temperatura absolu ta en K) convierte la concentracin de vapor en pre sin de vapor.

La resistencia estomtica (re) depende del nmero de estomas por unidad de rea foliar, as como de su geometra y del grado de abertura. Las variaciones en la abertura estomtica se producen como consecuencia de cambios en la turgencia de las clulas oclusivas (vase Movimientos Estomticos, apartado 2). La resistencia cuticular (r c ), depende de las caractersticas de la cut cula foliar. Una r. elevada se asocia con cutculas grue sas o enriquecidas con materiales hidrfobos; no es controlada por la planta como lo es re y disminuye con el aumento de la temperatura y de la humedad relativa. Cuando se compara con los valores mnimos de re, rc es de 1 a 2 rdenes de magnitud superior (Cuadro 3-1). Por tanto, durante el da. la transpiracin cuticular es des preciable en relacin con la transpiracin estomtica. La importancia ecolgica de rc es ms aparente durante la noche, cuando los estomas se cierran, las xerfitas alcanzan valores mucho ms elevados de rc que las mesfitas. mostrando as tasas inferiores de transpiracin cuticular.

40

Fundamentos de fisiologa vegetal

Cuadro 3-1. Resistencias (r) al transporte de agua en hojas con saturacin luminosa y 22 C (segn Holmgren, Jarvis y Jarvis, 1965). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

Resistencias al transporte de vapor de agua (sm _l ) Estonia Cutcula (abierto) Especie vegetal Helianthus aniums Lumiuin galeobdolon Circaea lutetiana Acer platanoides Queris robur Betula verrueosa 3700 9000 8500 38 000 8300 38 1060 1610 1470 670 92 55 73 61 69 69 80 Capa lmite

figuran: rea foliar, estructura y exposicin foliares, re sistencia estomtica y capacidad de absorcin del siste ma radical. Las interacciones complejas entre estos fac tores se pueden describir en funcin de sus efectos sobre los componentes de resistencia y energa en la ecuacin 3-2. El hecho importante es que un cambio en uno de los factores que afectan a la transpiracin no produce, necesariamente, un cambio proporcional en la tasa transpiratoria porque la intensidad est controlada por ms de un factor, y hay que tener en cuenta, ade ms, que el factor controlador vara constantemente. Un buen ejemplo puede ser el efecto del viento. Si inicialmente las hojas estn ms fras que el aire, el viento puede aumentar la transpiracin; si estn ms calientes, al enfriarlas, puede disminuirla. En la Figura 3-7 se in dica el entramado complejo de la interaccin de facto res que determina la intensidad transpiratoria.

Adems de las dos resistencias mencionadas, el va por de agua que difunde fuera de la hoja encuentra una tercera resistencia, la de la capa lmite de aire relativa mente en calma, casi saturado de vapor de agua, que cubre la superficie foliar: la resistencia de la capa lmite o capa estacionaria (ra). que es proporcional al grosor de la capa de aire quieto (d) en contacto con la superficie foliar: ra = d/D [3-5]

3.4.

El m t o d o gravimtrico y el d e m e d i d a d e la prdida d e vapor de agua son los m s utilizados para cuantificar la transpiracin

siendo D. el coeficiente de difusin del vapor de agua al aire (aproximadamente 0.24 cm2 s - 1 ). La velocidad del viento afecta extraordinariamente al grosor de la capa lmite, de lal forma que disminuye con el aumento de la velocidad. Por tanto, tambin se ha sugerido la siguiente expresin para calcular ra:

ra = \3yfij

[3-6]

siendo 1 el ancho de la hoja y u la velocidad del viento. Ordinariamente, ra vara entre 10 y 100 s irT i para un espectro normal de velocidades del viento y formas fo liares. En la mayora de las plantas la resistencia estomtica es la que normalmente limita la tasa transpiratoria. Nota: El inverso de la resistencia total al vapor de agua (l/[r h + r j ) es la conductancia total al vapor de agua (g,,). 3.3. La interaccin entre factores ambientales y endgenos determina la intensidad transpiratoria

El mtodo gravimtrico consiste en determinar el peso que pierde la planta debido a la transpiracin. Se parte de la planta bien regada en maceta, teniendo la precau cin de cubrir la superficie del suelo con material im permeable. Este mtodo puede utilizarse tambin en condiciones de campo, usando los denominados lismetros que consisten en grandes recipientes rellenos de suelo (a veces varios metros cbicos), que se apoyan sobre dispositivos de pesada y cuyo conjunto se entierra en el suelo. El lismetro se suele considerar como el instrumento ms apropiado y exacto para estudios de campo, especialmente en cultivos, pero es caro y no porttil. Para cuantificar la transpiracin mediante el estudio de la prdida de vapor de agua, se encierra una hoja o

Los factores ambientales ms importantes que afectan a la transpiracin son: radiacin, dficit de presin de va por del aire, temperatura, velocidad del viento y sumi nistro de agua. Entre los factores de la propia planta

Factores 1 indirectos

Suelo

Figura 3-7. Interaccin de factores que afectan a la trans piracin (segn Ridge, 1991). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

Movimientos

estomticos

y transpiracin

41

rama en una cmara transparente dotada con flujo de aire. La transpiracin se estima como la diferencia de contenido hdrico entre el aire que entra y sale de la cmara. Tambin se pueden medir la temperatura, el contenido en anhdrido carbnico y otros parmetros, simultaneando las medidas de transpiracin con las de abertura estomtica y de tasas fotosintlicas (vase Ca ptulo 13). Este mtodo se puede utilizar para estudios en condiciones de campo, encerrando rboles comple tos o un conjunto de plantas en el interior de una cubier ta de plstico. Los mtodos de intercambio de gases. bien a pequea escala en el laboratorio, o en condicio nes de campo, estn limitados a estudios a corto plazo. El hecho de encerrar una planta puede, a largo plazo. alterar significativamente el microclima que rodea las hojas. Condiciones tales como temperatura, humedad y flujo del aire han de registrarse y controlarse cuidadosa mente. No obstante, las cmaras y los sistemas de medi da pueden hacerse muy porttiles y. en la actualidad, se dispone de un gran nmero de instrumentos comercia les que se pueden utilizar en estudios de campo. Una tcnica que, probablemente, ser de gran valor en el fu turo se basa en la determinacin de la intensidad transpiratoria a partir de estimaciones de la velocidad del flujo de savia (vase Captulo 4). La transpiracin en ecosistemas naturales a gran es cala es difcil de medir y. normalmente, se estima de forma indirecta. Aqu el investigador calcula esencial mente un balance hdrico. considerando tanto los apor tes (precipitacin) como las prdidas (almacenamiento en el suelo, drenaje, escorrenta, etc.). Se considera que la transpiracin equivale a la diferencia entre aportes y prdidas.

absorcin neta de C 0 2 (/<mol m

2 2

s ') s_1)

tasa transpiratora (mmol H 2 0 m~

En lo que se refiere a una comunidad o cultivo, la WUE (tambin denominada eficiencia en el uso del agua de la productividad. WUE p ) es el total de mate ria seca producida por unidad de agua consumida en la evapotranspiracin (evaporacin del suelo y transpi racin de las plantas): WUE p = materia seca o rendimiento del cultivo (kg h a - ' ) agua consumida en evapotranspiracin (kg h a - 1 ) [3-8] En este ltimo caso, la falta frecuente de datos sobre materia seca de races hace que los resultados se calcu len leniendo en cuenta nicamente la materia seca de los rganos areos. Por ello, algunos autores han pro puesto utilizar el trmino eficiencia transpiratora ms bien que eficiencia en el uso del agua, para referir se al total de la produccin de materia seca por unidad de agua transpirada. A nivel de la hoja se ha visto que tanto los factores ambientales como los de la propia planta influyen en la eficiencia transpiratoria. El factor ambiental ms im portante es la humedad atmosfrica. Un aumento en el dficit de presin de vapor de la atmsfera (disminu cin de la humedad relativa) elevar la transpiracin sin un aumento simultneo en la fotosntesis, lo cual con duce a una disminucin en la eficiencia transpiratoria. Por tanto, una elevada temperatura del aire, a travs de su efecto en el dficit de presin de vapor, reducir la eficiencia transpiratoria. Asimismo, las plantas propias de regiones fras tendrn mayor eficiencia transpirato ria que las plantas propias de regiones clidas, debido a la menor demanda evaporaliva en la regin Ira. Los dficit hdricos. al originar cierre estomtico, aumenta rn la eficiencia transpiratoria, si bien un incremento simultneo en la resistencia interna a la absorcin de C 0 2 pueda impedir tal aumento y, por tanto, hacer que los dficit hdricos afecten muy poco o casi nada a la eficiencia transpiratoria. Por lo general, la eficiencia transpiratoria de especies C 4 suele ser el doble de la de las especies C 3 . Esta dife rencia aumenta con la temperatura en el intervalo com prendido entre 20 y 35 C. El mayor valor en las espe cies C 4 se debe, fundamentalmente, a las mayores tasas de fotosntesis y crecimiento, sobre todo en condiciones de intensidad luminosa y temperatura elevadas (vanse Captulos 12 y 13). Se ha desarrollado una tcnica que permite conocer la eficiencia transpiratoria de una manera integrada, a lo largo de todo el desarrollo y en condiciones de cam po. La tcnica de discriminacin isotpica del carbo-

3.5.

La eficiencia en el uso del agua es una medida de la efectividad de los estomas en maximizar la fotosntesis reduciendo, al mismo tiempo, la prdida de agua

Existe un inters considerable en relacionar la produc cin vegetal con las medidas de prdida de agua por evaporacin correspondientes a la zona en que se desa rrollan las plantas. Lgicamente, en sistemas maneja dos por el nombre, pertenecientes a ambientes con es casez de agua, existe una manifiesta necesidad de maximizar el crecimiento teniendo en cuenta la canti dad de agua disponible. La eficiencia en el uso del agua, WUE (Water Use Efficiency) se refiere precisa mente a un parmetro de produccin. Un objetivo im portante de investigacin en este rea es alcanzar una elevada WUE manteniendo alta la productividad. La eficiencia en el uso del agua es un parmetro que se puede considerar a diferentes niveles, y es necesario tener precaucin a la hora de su utilizacin. En lo que se refiere a la hoja, la WUE (tambin denominada eficiencia en el uso del agua de la fotosntesis. WUEph) es:

42

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

no se basa en que la primera enzima que participa en la fijacin de CO, en especies C 3 , la rubisco (vase Cap tulo 11). discrimina fuertemente en contra del istopo pesado 1 3 CO, (1 %) comparado con el istopo ms abundante ' 2 C 0 2 (99 %), mientras que la difusin a tra vs de los estomas slo discrimina dbilmente en contra del | 3 C 0 2 . Por tanto, con los estomas abiertos (y resis tencias a la difusin bajas) hay una mayor discrimina cin en contra del 1 3 CO, que cuando existe una limita cin difusiva frente a la asimilacin de C 0 2 por cierre estomtico. La teora predice una relacin lineal entre el grado de discriminacin por el l 3 C (A) y la concen tracin interna de CO,, ya que: A = (4.4 + 22.6 pi/p.) x 1(T 3 siendo, p; = presin parcial interna del C 0 2 pa = presin parcial externa del C 0 2 Puesto que la eficiencia transpiratoria est tambin relacionada con la concentracin de CO, en el interior de las hojas, existe una relacin lineal de tipo negativo entre la discriminacin por el 13 C(A) y la eficiencia transpiratoria. Se trata, por tanto, de una tcnica franca mente til para estudiar diferencias genotpicas en la eficiencia transpiratoria. La tcnica consiste en anali zar, mediante espectrometra de masas, la relacin de abundancia molar relativa de 1 3 C a 1 2 C en hojas viejas de plantas de la misma edad y pertenecientes a diversos genotipos. Las desigualdades que se presenten estarn relacionadas con diferencias en la eficiencia transpira toria durante la acumulacin de carbono atmosfrico a lo largo de toda la vida de la hoja. Por esto se le deno mina eficiencia transpiratoria intrnseca o integrada. Por el contrario, el mtodo basado en determinar la eficiencia transpiratoria mediante intercambio de gases en un determinado momento de la vida de la planta ser vir para obtener la denominada eficiencia transpiratoria instantnea o actual. Es decir, en este ltimo caso, para tener una idea integrada de toda la vida de la planta, hara falta realizar dichas medidas a lo largo del da y en diferentes momentos del desarrollo, lo cual, teniendo en cuenta las limitaciones de la metodologa del intercambio de gases, adems de difcil slo permi tira seguir simultneamente un nmero muy limitado de individuos. Todo ello pone de manifiesto el inters actual por la determinacin de la composicin isotpica del carbono para estimar la eficiencia transpiratoria de una manera cmoda e integrada. [3-9]

diacin solar proporciona la fuente de energa para la transpiracin, siendo la evaporacin del agua en la hoja la que establece el gradiente de potencial hdrico en la planta. La intensidad transpiratoria depende del sumi nistro de energa, del gradiente de presin de vapor y de la magnitud de las resistencias. La resistencia difusiva al movimiento del vapor de agua desde la hoja al aire tiene tres componentes: cuticular, estomtico y de capa lmite. La resistencia cuticular es, ordinariamente, muy elevada y, por tanto, la mayor parle del vapor se mueve a travs de los estomas. Las variaciones en la abertura estomtica se producen como consecuencia de cambios en la turgencia de las clulas oclusivas. La regulacin de la abertura estomtica es muy compleja, ya que los estomas responden a una diversidad de influencias am bientales (por ejemplo, luz, humedad, temperatura, con centracin de CO,) y endgenas (tales como produc cin y liberacin de hormonas en raz y hoja. etc.). Todos estos factores actan a travs de complejos siste mas de antealimentacin y realimentacin. Debido a que. con frecuencia, el agua es un recurso limitante de la produccin vegetal, existe un inters considerable en determinar la eficiencia en el uso del agua en relacin con la fotosntesis y la productividad. Normalmente, la eficiencia en el uso del agua vara en los diferentes tipos fotosintticos de acuerdo al siguien te orden: C 3 < C 4 < CAM, existiendo tambin dife rencias importantes entre especies dentro de cada tipo.

PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Una planta de alubia creci bajo una campana de vidrio. con atmsfera saturada de vapor de agua a 25 'C. Al inci dir la radiacin solar sobre la planta, su temperatura aument 10 C por encima de la del aire que se mantuvo a 25 "C. Otra planta similar creci a la sombra a 25 C y con una humedad relativa del 70%. Cul de las dos plantas transpir ms? Los valores de las resistencias a la difusin de agua fueron r., = 0.5 s cm ~ \ rc = I s cm _ ' y rc = 45 s cm '. Suponemos que la resistencia del mesfilo (rm) es despreciable. Las concentraciones de vapor de agua de saluracin a 25 y 35 C son 23 x 1 0 - 6 y 40 x 10 _ " g H 2 0 cm '. respectivamente. 2. Seleccione aquellos factores que pueden aumentar la tasa transpiratoria. Para cada factor seleccionado, indique c mo acta para estimular la transpiracin. a) Viento fuerte. b) Baja velocidad del viento. c) Humedad relativa baja. d) Humedad relativa elevada. e) Temperatura foliar por encima de la temperatura am biente. f) Temperatura foliar por debajo de la temperatura am biente. g) Estomas cerrados. h) Estomas muy abiertos. 3. Cules de las siguientes propiedades o caractersticas: 1) se encuentran ordinariamente en las clulas oclusivas, y

RESUMEN
La transpiracin, es decir, la prdida de vapor de agua en las plantas, es un proceso controlado, tanto por fac tores fsicos extemos, como factores fisiolgicos. La ra

CAPITULO

TRANSPORTE DE AGUA Y BALANCE HIDRICO EN LA PLANTA


Manuel Snchez-Daz y Jone Aguirreolea
1. Introduccin. 2. Absorcin de agua por las raices. 3. Flujo hdrico a travs del xilema. 4. Movimiento del agua en la hoja. 5. Balance hdrico. 6. Dficit hdricos y crecimiento vegetal.

1.

INTRODUCCIN

2.1.

En una plaa en crecimiento activo, existe una fase de agua lquida continua que se extiende desde la epider mis de la raz hasta las paredes celulares del parnquima foliar. Generalmente, se acepta que el movimiento de agua desde el suelo al aire, a travs de toda la planta. se puede explicar por la existencia de gradientes de potencial hdrico a lo largo de la va (Captulo 2). De bido a que el aire en los espacios intercelulares del parnquima lagunar en el mesfilo foliar est prctica mente a presin de vapor de saturacin, mientras que el aire exterior rara vez est saturado de agua, el vapor de agua se mueve desde el interior de la hoja a la at msfera exterior, siguiendo un gradiente decreciente de potencial hdrico. Este proceso, denominado transpiracin. es la fuerza motriz ms importante para el movimiento del agua a travs de la planta (Fig. 4-1 y Captulos 2 y 3).

El agua entra con mayor rapidez a travs de aquellas regiones de la raz que ofrecen menos resistencia

2.

ABSORCIN DE AGUA POR LAS RAICES

Para mantener la turgencia de la parte area, as como para posibilitar las actividades bioqumicas hasta un ni vel que asegure la supervivencia, el agua perdida en la planta mediante transpiracin ha de reponerse conti nuamente. Muchas plantas pueden absorber la humedad atmosfrica en forma de niebla o roco, pero la absor cin foliar de agua es insignificante comparada con la absorcin a travs de las races.

El agua entra en las races en respuesta a un gradiente de potencial hdrico en el xilema. establecido por la transpiracin. Claramente, el agua entrar con mayor ra pidez a travs de aquellas regiones de la raz que ofrez can menor resistencia, dependiendo de una diversidad de factores y de la especie de que se trate. Experimentos realizados con races primarias jve nes han demostrado que la regin meristemtica es re lativamente impermeable al agua. En esta regin, las clulas no estn vacuoladas y contienen citoplasma denso: asimismo, en la proximidad del pice radicular el tejido vascular no est diferenciado y, por tanto, si el agua llegase a entrar libremente no podra ascender. El mximo de absorcin se presenta en la zona radical pr xima a la regin meristemtica. pero distal a la regin de intensa suberizacin y lignificacin (Fig. 4-2). Aumentos en la tasa transpiratoria pueden provocar un desplaza miento de la zona de mxima absorcin hacia la base de la raz (Fig. 4-3). Los pelos radicales pueden absorber agua, pero no son esenciales, puesto que las plantas cultivadas en un medio hidropnico. as como las plantas acuticas, sue len carecer de ellos y tampoco estn presentes en las races adventicias de bulbos, cormos o rizomas. Sin em bargo. se sabe que los pelos sirven para fijar las races primarias jvenes a medida que penetran en el suelo y, asimismo, segregan golas de lquido conforme enveje cen. Ambos efectos, a travs de sus consecuencias en la 45

46

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Traqueida de nervio foliar -30.0

-3.0

1
o -0.3 -

-0.03

Suelo " " 'I" = 0 Agua pura

Figura 4-1. (A) Circulacin del agua a travs de la planta, desde las raices a las hojas; en la escala de la izquierda se indican los potenciales hdricos aproximados en los diferentes puntos. (B) Rutas alternativas para el agua; la lnea gruesa indica la va ms importante. Tambin se muestra el transporte fioemtico (segn Ridge, 1991). (Adap. de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

rizosfera, pueden inlluir indirectamente en la absorcin de agua y nutrientes. En especies leosas, la mayor par le del sistema radical consta de races viejas muy suberificadas. Probablemente, gran parte del agua absorbida por estas races penetrar a travs de las numerosas li suras que se originan en la peridermis y f'elodcrmis que rodea el tejido vascular secundario. Se ha observado que en races de Pinus tcela L. y Lirioendron tutipifera L.. a mitad del verano, aproximadamente un 33 9 5 del conjunto de las races est suberificado. Dado que en esa poca tiene lugar el mximo de transpiracin, se deduce, que la mayor parte del agua entrara a travs de las races suberificadas. Esto puede ser de especial sig nificado para muchas plantas en invierno, o durante pe rodos de sequa, cuando existe escaso desarrollo de nuevas races y se halla limitado el crecimiento de las ya existentes.

2.2.

El movimiento radial del agua en la raz tiene lugar a travs del apoplasto y del simplasto

El valor de *PS de la solucin del suelo rara vez es infe rior a 0.1 MPa. Puesto que la transpiracin genera fcilmente un valor de 4* para el xilema radical de 0.5 MPa hasta 2 a 3 MPa en la hoja, el gradiente

de potencial hdrico entre la disolucin del suelo y los elementos xilemticos puede ser muy acentuado. En consecuencia, el agua se mover a travs de la raz en respuesta al gradiente de potencial. El agua que entra en una raz primaria ha de atrave sar. primero, la epidermis e hipodermis (donde se en cuentre presente) y una capa cortical parenquimtica de 5 a 10 clulas de grosor, con numerosos espacios inter celulares llenos de aire. Seguidamente, pasa a la endodermis con la banda de Caspari y, una vez en su inte rior. se mueve a travs de una capa de periciclo. de varias clulas de grosor, antes de alcanzar el tejido vas cular (vase tambin Captulo 7). Tericamente, existen tres vas anatmicamente di ferentes a travs de las cuales podra moverse el agua. En primer lugar, la ruta externa al citoplasma vivo, es decir, el continuo de paredes celulares externo a la membrana celular: esta va se denomina apoplasto. El apoplasto de la raz reprsenla, aproximadamente, un 10% del volumen de la misma y equivale al espacio libre. En segundo lugar, existe la posibilidad de que el agua atraviese la pared celular y el plasmalema, para entrar luego en el citoplasma. Posteriormente, se move ra a lo largo del continuo citoplasmtico a travs de los plasmodesmos que conectan el citoplasma con las c lulas adyacentes. Esta ruta, que representa la porcin viva de la clula, se denomina va del simplasto. Final-

Transporte

de agua y balance hdrico en la planta Absorcin de agua mm3 cm"' h ' 7 6 5 4 3 2

47

La suberizacin y lignificacin reducen la permeabilidad

Entrada lenta de agua e iones debido a disminucin en la permeabilidad

1 0

Metaxilema maduro Absorcin lenta de agua e iones ii 0 1

Comienzo de suberizacin y lignificacin de la endodermis Estela Crtex Protoxilema inmaduro Regin de alargamiento
:

"^
Absorcin rpida de agua e iones Relativamente impermeable al agua

5-

oema primario inmaduroRegin meristemticaCaliptra-

0 -

Figura 4-2. Localizacin de tejidos primarios en una raz en crecimiento y absorcin relativa a diferentes distancias del pice. Las distancias del pice a las que se presentan las diferentes fases de maduracin dependen de la especie y tasa de crecimiento de la raz (segn Kramer, 1993). (Adap tado de Kramer y Boyer, 1995.)

Tensin: 0 = - 0 . 2 5 MPa I |=-0.13 MPa Figura 4-3. Absorcin relativa de agua a lo largo de dife rentes zonas de raz de Vicia faba en funcin de la intensi dad transpiratona. La tensin xilemtica medida a baja in tensidad transpiratoria fue - 0.13 MPa, y - 0 . 2 5 MPa a alta intensidad transpiratoria. Cuando la transpiracin es baja, la mayor absorcin de agua se presenta cerca del pice de la raz. Cuando es alta, el aumento de tensin desva la zona de absorcin hacia regiones ms bsales (adaptado de Brouwer, 1965).

mente, existe la posibilidad de que el agua atraviese tanto el plasmalema como el tonoplasto, de tal manera. que la vacuola pasara a ser una parte integral de la va de transporte. La velocidad relativa del flujo a travs de cada una de las posibles vas variar inversamente con el nivel de resistencia encontrado. Tanto mediante ensayos experimentales, como con predicciones basadas en modelos matemticos, se ha intentado demostrar la ruta del apoplasto o del simplasto-vacuola. Debido a que el agua fluye en la planta des de regiones con mayor a otras con menor potencial h drico. existir un considerable movimiento de agua entre cada uno de estos compartimentos hasta que los valores de potencial hdrico, en las diferentes partes del sistema, alcancen el equilibrio. Si bien existen opiniones diversas con respecto al movimiento del agua a travs del crtex. hay acuerdo sobre el hecho de que el movimiento del agua a travs de la endodermis ha de ser a travs de la ruta simplstica, ya que la banda de Caspari. impregnada de lignina y suberina, impide el movimiento del agua a travs del apoplasto (Fig. 4-1). Adems, en las clulas endodnnicas ms viejas, la superficie de las paredes internas est recubierta por laminillas de suberina que pueden pre sentar tambin un engrasamiento generalizado. Existen poros en estas paredes engrosadas, a travs de los cua les pasan los plasmodesmos para conectar el citoplasma endodrmico con el citoplasma del periciclo. El movi miento del agua a travs de la va simplstica en la en dodermis contribuye significativamente a la resistencia de la raz; la muerte de las races conduce a una reduc cin en la resistencia al movimiento de agua. Una vez

que el agua ha atravesado la barrera endodrmica y el cilindro central, las resistencias encontradas sern com parables a las del crtex: el agua continuar desplazn dose a travs del cilindro central hasta que, finalmente, penetre en los vasos y traqueidas xilemticos para mo verse hacia la parte area. 2.3. Cuando la transpiracin es muy baja, la absorcin de agua a consecuencia de una absorcin activa de iones en la raz origina la presin de raz Si el tallo de una planta herbcea bien desarrollada se corta a ras del suelo, es frecuente que aparezca lquido xilemtico en la superficie de corte. La exudacin de dicho lquido, que puede persistir durante varias horas, indica la presencia de una presin positiva en el xilema. La magnitud de esta presin se puede medir adaptando un manmetro a la superficie de corte. A esta presin se le denomina presin radical, ya que las fuerzas que originan la exudacin se originan en la raz. Igualmente, cuando una planta se desarrolla en con diciones de muy baja transpiracin, con el sistema radi cal en un medio bien aireado, hmedo y caluroso, fre cuentemente aparecern gotitas de lquido en los pices y mrgenes de las hojas. Estas gotitas, a las que se les denomina golas de gutacin. salen a travs de los hida-

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Fundamentos

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vegetal

todos. La fuerza responsable de la gutacin surge en las races y se debe a la presin radical. Se ha propuesto que la presin radical se desarrolla como consecuencia de una disminucin en el valor del de la savia del xilema radical. Ello se debe al trans porte activo de iones inorgnicos y materiales orgni cos hacia los vasos y traqueidas xilcmticas a partir del parnquima xilemtico circundante (vase Captulo 7). Por tanto, el agua se mover a travs de la raz en res puesta al gradiente de potencial hdrico desarrollado. En otras palabras, la raz se comporta como un osmmetro, al favorecer la entrada de agua en los vasos xilemticos y originar una presin hidrosttica en el interior del cilindro central. Se ha intentado atribuir una funcin importante a la presin radical. Una presin de 0.1 MPa podra hacer subir al agua casi 10 m y, por eso, se propuso la presin radical como mecanismo para explicar la ascensin del agua en la planta; no obstante, hay datos contrarios. En primer lugar, no se ha demostrado la existencia de pre sin radical en todas las especies. En segundo lugar, se presenta con una periodicidad circadiana, mxima du rante la noche y mnima durante el da; adems, suele ser estacional, alta durante la primavera y mnima o no detectable en el verano cuando la prdida transpiratoria es mayor. Finalmente, se puede demostrar que en pero dos de transpiracin activa, las columnas de agua xilemtica estn sometidas a tensin y nunca presentan una presin positiva. Las races sometidas a fro, anaerobiosis o venenos metablicos no presentan presin radical, probablemente porque en tales condiciones cesa el trans porte de solutos al xilema. No obstante, si se corta el sistema radical, la transpiracin no se afectar hasta pa sado un tiempo considerable y podr incluso, aumentar. Se ha sugerido, por otra parte, que en el caso de que se haya presentado cavitacin debido a una transpi racin rpida, sequa, congelacin o cualquier otra anomala, la presin radical podra volver a funcionar y. por tanto, restablecera la continuidad de las columnas de agua en el xilema. Sin embargo, visto en su conjun to, es muy probable que la presin radical sea una con secuencia fortuita de la acumulacin de iones en el xile ma. sin ningn papel esencial en el equilibrio hdrico total de la planta.

existencia de la flora terrestre dependi de la evolucin de un sistema vascular conductor de agua.

3.1.

El transporte de agua en el xilema depende del gradiente de potencial hdrico y de las caractersticas anatmicas de los vasos y traqueidas

La sugerencia de que el xilema era el tejido a travs del cual el agua ascenda en el tallo se hizo por primera vez hace ms de 250 aos. En angiospermas, el agua se mueve primordialmente a travs de vasos, elementos que durante la maduracin pierden su citoplasma, desa rrollan paredes perforadas y se fusionan en hileras para formar tubos largos. Estos vasos pueden tener muchos metros de longitud y oscilan, dependiendo de la espe cie, entre 20 y 700 //m de dimetro. En gimnospermas, el elemento conductor es la traqueida. Las traqueidas son ms cortas ( < 5 mm) y estrechas ( < 30 /mi) que los vasos: poseen paredes terminales adelgazadas, que se superponen con las clulas contiguas, y punleaduras re forzadas, tanto en las paredes laterales como termina les, a travs de las cuales Huye el agua. Las clulas de vasos y traqueidas pierden el citoplasma durante su ma duracin y poseen paredes celulares muy lignificadas y relativamente rgidas. Existen conexiones frecuentes en tre las hileras adyacentes de clulas a travs de punteaduras en las paredes laterales. Los vasos y las traquei das se extienden hacia las races y hojas, donde se ramifican repetidamente. Debido a que los vasos y traqueidas han perdido su citoplasma, la resistencia al flujo de agua en el xilema es baja. Si bien es conveniente considerar el xilema como un sistema de conductos, a travs del cual se mue ve el agua, debido a la presencia de numerosas paredes transversales perforadas, se trata ms bien de tubos in terrumpidos a intervalos frecuentes. Como se explicar posteriormente, estas paredes trasversales parecen ser, en determinadas circunstancias, esenciales para el fun cionamiento continuado del sistema de transporte.

3.2.

El transporte de agua en el xilema se produce por flujo masivo

3.

FLUJO HDRICO A TRAVS DEL XILEMA

La supervivencia de las plantas terrestres depende de que una cantidad suficiente de agua sea absorbida por el sistema radical y ascienda a travs del tallo y ramas. para reemplazar la prdida por transpiracin en las ho jas. Adems, el sistema a travs del cual se mueve el agua ha de permitir una lasa de transporte relativamente rpida. La difusin del agua de una clula a otra, tal como se describi anteriormente (vase Fig. 2-8). es un proceso demasiado lento como para suministrar agua suficiente a la parte superior de la planta; en realidad, la

El flujo masivo a travs de los vasos xilemticos (vase Captulo 2. apartado 6.2), se puede analizar utilizando la ecuacin de Hagen-Poiseuille, que demostr que cuando un fluido est sometido a presin en un capilar. el flujo total por conducto o caudal, qv (m J s ~ ' ) . es funcin de la viscosidad del lquido,>/ (Pa s), del gra diente de presin hidrosttica, AP (Pa), del radio del capilar, r(m), y de la longitud del mismo. I (m):

Transporte

de agua y balance hdrico en la planta

49

Desde otro punto de vista se puede indicar que el caudal es inversamente proporcional a la resistencia del capilar al flujo (R): AP R = qv [4-2]

mm s~ ' en las especies de duramen con poros en anillos (Froximis. Ulmiis). En especies herbceas, la corriente de agua xilemtica puede llegar a alcanzar velocidades de hasta 28 mm s"' (lOOrnh - 1 ). Estos valores son infe riores a los esperados como consecuencia, en parte, de la resistencia al flujo en las membranas de las punteaduras.

La ecuacin 3-1 se aplica al movimiento del agua en los vasos xilemticos porque es provocado por la dife rencia de tensin entre el suelo y las hojas. El punto importante a destacar es, por tanto, que el flujo es di rectamente proporcional a la cuarta potencia del ra dio. Las consecuencias de esta relacin se pueden vis lumbrar comparando las tasas de flujo para una traqueida de 40 /mi de dimetro (r = 20 /mi) y un vaso de 200 fim de dimetro (r = 100 /mi). Aunque el di metro relativo del vaso sea slo 5 veces superior al de la traqueida, la velocidad relativa del flujo ser 625 (es decir, 5 4 ) veces la de la traqueida. La elevada velocidad del flujo en los vasos mayores se presenta debido a que la velocidad del flujo de agua no es uniforme en toda la seccin del conducto. La velocidad del flujo de las mo lculas situadas en la proximidad de la pared del con duelo se reduce por friccin, debido a fuerzas de adhe sin entre el agua y la pared del conducto. A medida que aumenta el dimetro del conducto, la proporcin de molculas en la proximidad de la pared y, por tanto, suje tas a fuerzas de friccin disminuir. Dicho de otra mane ra, las molculas que se mueven ms rpidamente en el centro del conducto constituyen la mayor proporcin del conjunto, aumentando as la velocidad total del flujo. Se ha encontrado coincidencia con la ley de HagenPoiscuille en el caso de la vid, que posee vasos xilem ticos grandes y abiertos. Especies como el roble, que poseen poros en forma de anillo, dan tambin valores prximos a los tericos, mientras que especies con po ros difusos, tales como el haya, dan valores considera blemente inferiores a los previstos. Se ha desarrollado una serie de mtodos de cuantificacin del flujo xilemtico. La forma ms directa es medir la cantidad total de agua que pasa a travs del tallo, entre el sistema radical y la parte superior de la planta. Las medidas en plantas intactas fueron realiza das por primera vez por Huber y Schmidt (1932), quie nes disearon el mtodo del pulso calorfico, que mide la velocidad del flujo de agua en el xilema. Para calcular la cantidad total de agua, ha de conocerse el rea conductora real, lo cual generalmente es imposi ble, puesto que no se conoce qu vasos participan en el transporte. Para superar esta limitacin, se puede utili zar la tcnica del flujo en masa de equilibrio estable. basada en la capacidad calorfica especfica del agua. existiendo dos mtodos principales de medida: el de ca lentamiento continuo y el de equilibrio calorfico. Las velocidades mximas del flujo observadas en tallos de diferentes rboles oscilan desde 0.3-0.8 mm s ~ ' en co niferas y 0.2 - 1.7 mm s~' en especies de duramen con poro difuso (Populus, Acer) hasta valores de 1.1-12.1

3.3.

La ascensin del agua en la planta se puede explicar mediante la teora de la tensin-cohesin

Para ser aceptable, cualquier teora sobre la ascensin del agua en la planta ha de explicar cmo llega a las partes superiores de los rboles ms altos. Especies de Sequoia de California, de Pseudotsuga menziesii del noroeste del Pacfico o de Eucalyptus en Australia pue den alcanzar alturas superiores a los 100 m. Cuando se aade a su altura la profundidad de penetracin de las races en el suelo, resulta claro que, en casos extremos, el agua ha de subir aproximadamente 120 m. Si bien en los ltimos 100 aos se han propuesto mu chos mecanismos para explicar la ascensin de la savia, actualmente se acepta la teora de la tensin-cohesin de agua. Cuando el agua se halla confinada en tubos con dimetro estrecho y paredes humedecibles (tales como los vasos y traqueidas xilemticas). al aplicar un tirn desde la parte superior, la tensin se transmitir a travs de la columna de agua sin que se pierda el con tacto con la pared del tubo (fuerzas de adhesin). En otras palabras, en el interior de tales tubos, las colum nas de agua se comportan como si todas las molculas estuviesen conectadas, y una tensin aplicada a cual quier parte de la columna se transmite a travs de la misma. Si se aplica una tensin (presin negativa) a un extremo de tal columna, el agua se mover hacia la fuente de la tensin. Los vasos y traqueidas encierran columnas de agua continuas, en forma de hilos frecuentemente entrelaza dos, que se extienden desde los nervios foliares hasta el xilema de las races ms pequeas. La transpiracin crea un gradiente de potencial hdrico a travs del mesfilo foliar, que provoca que el agua desaparezca en los extremos de los nervios foliares. La prdida de agua a ese nivel crea una tensin en las columnas del xilema, cuya magnitud depende de la intensidad transpiratoria. El fluido xilemtico es una solucin muy diluida de sa les y su potencial osmtico no es inferior a 0.1 0.2 MPa; de esta manera, el potencial hdrico en el xilema reflejar, esencialmente, la tensin existente. Por lanto, la reduccin en el potencial hdrico a nivel de la superficie transpirante foliar ser transmitida a travs del xilema hasta las races, donde provocar que el agua fluya desde el suelo hacia el interior (vase apartado 2.2), variando la velocidad de absorcin con el nivel de tensin desarrollado. En tales condiciones, se reara un flujo en masa continuo desde el suelo, va races, tallos y hojas, hasta la atmsfera exterior (Fig. 4-1). INSTITUTO PROFESIONAL DuocUC BIBLIOTECA SEDE VALPARASO

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de fisiologa

vegetal

En condiciones ideales, una columna de agua podra soportar, sin romperse, una tensin de 100 a 200 MPa. En el xilenia. tales condiciones ideales no existen pero, para tubos similares en dimetro y composicin a los \ asos \ traqueidas, se han aplicado tensiones de has ta 35 MPa antes de que se presente rotura en la co lumna. La columna ser tanto menos estable cuanto mayor sea su dimetro > cuando la tensin se hace ex cesiva. se presentar cavitacin con formacin de bur bujas de aire i \ ase apartado 3.4). Se ha calculado que para que suba el agua en rboles bajo condiciones de mxima transpiracin, se necesita una tensin com prendida entre - 0.015 y 0.02 MPa por metro de al tura. Este valor representa la tensin necesaria para contrarrestar el efecto hidrosttico de la gravedad, as como para superar la resistencia al flujo en el interior de - ios conductos xilemticos. Por tanto, en los arbole- mas altos ( < 120 m), una tensin de 2.4 MPa ( 0.02 x 120) sera suficiente para subir el agua des de el suelo a la copa. En especies herbceas, son fre cuentes valores de potencial hdrico de 0.5 a 1.0 MPa. y en rboles de tamao moderado, valores de 2.0 a 3.0 MPa en condiciones de elevada transpira cin. En algunas especies desrticas, se han medido va l ires de potencial hdrico foliar de 10 MPa e inferio res. A medida que aumenta la tensin xilemtica, los tejidos superficiales pierden agua y el dimetro del tallo disminuye. Por la noche, cuando los estomas se cierran y la prdida transpiratoria es baja, a medida que van desapareciendo las tensiones, el tallo vuelve a su di metro original. Queda claro, por tanto, que las fuerzas necesarias para el transporte de agua son compatibles con la arquitectura del sistema vascular, y las hojas pue den continuar funcionando a tensiones superiores a las que se necesitan para satisfacer las demandas transpiratonas de, incluso, las especies forestales ms alias. Debido a que todo el agua de una planta est conecta da, las fuerzas cohesivas en el xilema son operativas, tanto lateral como verticalmente. Por tanto, si algunos de los elementos xilemticos se llegasen a bloquear me diante burbujas de aire (vase cavilacin y embolia). (apartado 3.4). o si la continuidad vertical de las colum nas de agua se interrumpiese mediante un corte pro fundo. el agua se movera lateralmente alrededor del obstculo y continuara a travs de los elementos xile mticos no lesionados.

se presentan en la naturaleza. Una vez iniciada la for macin de burbujas, stas se extienden rpidamente formando una embolia en el interior del vaso o traqueida, que se detiene en las membranas de las punleaduras. El xilema, sin embargo, minimiza los efectos de la em bolia: por una parte, las punteaduras actan como vl vulas complicadas que se cierran cuando la presin aumenta en uno de los vasos y, por otra parte, el agua puede moverse lateralmente a travs de las punteadu ras. evitando el conducto bloqueado (Fig. 4-4). A me nos que la lesin sea repentina y muy extensa, no se afectar la cantidad total de agua transportada. En mu chas especies herbceas, la interconexin entre los ele mentos individuales del tejido vascular puede ser tan extensa que la oclusin de una parte del mismo no ten dr, prcticamente, efecto sobre el movimiento total del agua. Sin embargo, la entrada de aire puede actuar como un estmulo para la formacin de tilosas, blo quendose de esta forma el interior de los vasos xilem ticos. Esto provoca la prdida irreversible de la funcin xilemtica en el leo ms viejo. En rboles viejos, una porcin considerable del xile ma puede no ser funcional debido a embolias o depsito de materiales que interrumpen la continuidad de la co lumna de agua. Se ha demostrado que, en algunas espe cies de rboles canadienses, hasta un 40 % del volumen del tronco puede estar ocupado por gases pero, afortu nadamente, hay un gran exceso de xilema en relacin con la cantidad de agua que se transporta. En especies de rboles con poros en forma de anillos, casi todo el transporte de agua se halla confinado al anillo anual ms externo (el ms joven) del xilema secundario. mientras que en especies de coniferas de poro difuso, varios de los anillos anuales ms externos pueden parti cipar en el transporte de agua. I lasta mediados de los aos setenta se supona que la cavitacin era relativamente rara y que no afectaba se riamente al flujo de agua en el xilema. No obstante, las ideas empezaron a cambiar cuando se aplic a plantas enteras un mtodo de deteccin de fenmenos ele cavi tacin. Este mtodo de deteccin acstica depende del hecho de que una liberacin brusca de la presin duran te la cavitacin hace que vibren las paredes celulares, produciendo un chasquido audible que se puede de tectar con un micrfono y un equipo de amplificacin apropiado. El uso de detectores ultrasnicos sensibles en la regin de 0.1 -1.0 MHz mejora el mtodo de detec cin, ya que la falta de ruido ambiental en esa gama de frecuencia facilita su utilizacin en campo. Para que esta tcnica posea valor como indicadora de disfuncin xilemtica, es necesario demostrar que los fenmenos que se detectan se presentan en los elementos xilemti cos ms importantes, en lugar de en fibras o traqueidas pequeas. Esto no se ha demostrado an suficientemen te y existen datos de que muchos fenmenos acsticos se originan, frecuentemente, en elementos no conducto res. Debido a las dificultades que existen con la detec cin acstica como indicador de la embolia xilemtica,

3.4.

Las columnas de agua en el xilema se hacen muy inestables a medida que aumenta la tensin, pudindose originar pequeas burbujas de aire (cavitacin) que se fusionan y originan burbujas mayores que provocan obstruccin (embolia)

A pesar de la fuerza de cohesin, el agua del xilema se puede romper (cavitar) bajo las tensiones extremas que
.

'

Transporte de agua y balance hdrico en la planta

51

es ms seguro utilizar la prdida de conductividad hidrulica como una medida bsica de embolismo.

3.5.

La cavitacin y las embolias son frecuentes en condiciones de estrs hdrico, congelacin e infeccin por algunos patgenos

Parece ser que los tactores responsables de la cavila cin son fundamentalmente: a) El dficit hdrico asociado a tasas elevadas de transpiracin y altas tensiones xilemticas. espe cialmente en hojas y ramas pequeas. Aparente mente. diminutas burbujas de aire se filtran a travs de las finas membranas de las punteaduras que separan un conducto cmbolizado del contiguo. Las burbujas actan como origen o n cleos de una ulterior cavitacin y cuanto ms grandes sean los poros, ms probable es la for macin de burbujas. El tamao de los poros se relaciona con el dimetro de los vasos o traqueidas. de tal manera que. aunque el flujo de agua es ms fcil y rpido a travs de conductos an chos. existe, sin embargo, mayor riesgo de cavi tacin. El desarrollo de dficit hdricos durante el da es la causa principal de embolia durante la poca de crecimiento de la planta. Lct congelacin del xilema en el invierno condu ce. cuando ms adelante se presenta la descon gelacin, a la formacin de numerosas burbujas de aire, con lo que se extiende la embolia. Existe tambin un tercer factor, posiblemente de cierta importancia. Se ha observado que la em bolia inducida por el patgeno es la causa ms importante de la disfuncin provocada en el xi lema por el hongo casame de la grafiosis (Ceratacystis ulii), que ha devastado la mayora de los olmos en Europa y Norteamrica. Esto po dra ser tambin cierto en el caso de otros pat genos que ocasionan marchitamiento rpido. El motivo de que los patgenos provoquen embo lia no est an claro, pero una sugerencia intere sante es que al liberar en la savia del xilema compuestos tales como el cido oxlico, dismi nuye la tensin superficial. Eslo facilitara la aparicin de ncleos de aire a nivel de las mem branas de las punteaduras.

/;)

c)

Figura 4-4. Embolismo: burbujas de aire que se originan en el xilema y se presentan en los elementos vasculares o traqueidas. (A) La diferencia de presin que se origina a partir de una embolia causa el sellado del toro de las pun teaduras circundantes. (B) La tensin superficial impide que la burbuja atraviese las perforaciones. El agua contina fluyendo rodeando el elemento bloqueado.

3.6.

Las embolias se pueden eliminar por presin positiva en el xilema debida a la presin de raz

El aire en una embolia vuelve de nuevo a la solucin cuando la presin en el xilema sube hasta alcanzar la presin atmosfrica o ligeramente por debajo. Con fre

cuencia. esto ocurre por la noche en las plantas herb ceas. debido al fenmeno denominado presin de raz o radical (vase apartado 2.3). Durante la noche los poros estomticos se cierran y. en gran medida, la trans piracin se detiene pero, en las races, contina la ab sorcin activa de iones y el flujo osmtico de agua ha cia el interior. Los iones acumulados difunden hacia la
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Fundamentos de fisiologa vegetal

savia xilemtica diluida y el agua sigue fluyendo hacia dentro, aumentando gradualmente la presin hidrosttica hasta que se hace positiva. Por lo general, las presiones radicales son pequeas (0.1-0.2 MPa), pero en plantas herbceas bastan para inducir el rellenado de los conductos embolizados. En rboles no se desarrollan presiones radicales positivas durante la estacin de crecimiento y, por eso, es vital que no se prsenle embolia a gran escala. Eslo, aparen temente, se consigue mediante cierre de estomas y re duccin de la lasa transpiratoria, pero a costa de reducir el suministro de C O , para la fotosntesis. No obstante, en las pequeas ramas perifricas, donde se experimen tan las presiones xilemticas ms negativas, es corrien te la embolia masiva que, a veces, origina su muerte. La recuperacin de la embolia en invierno provocada por la congelacin se debe, al menos en parte, al creci miento de nuevas clulas xilemticas en primavera. No obstante, en algunas plantas leosas, especialmente abe dul y vid, se desarrollan grandes presiones radicales en primavera, que fuerzan el aire fuera del xilema embolizado. Esta subida de la savia es tan pronunciada que se pueden observar gotas de fluido durante varios das (llo ro) sobre los extremos cortados de las ramas podadas. producindose espuma a medida que se expulsa el aire. La susceptibilidad a la cavitacin, la tolerancia a la embolia y la capacidad de recuperacin han sido, indu dablemente, los factores ms imporianlcs que han in fluido en el tipo y distribucin de las plantas terrestres, especialmente, con su tolerancia a la sequa y congela cin. La importancia del embolismo no se haba puesto de manifiesto hasta hace poco, pero, indudablemente, va a constituir un rea clave de invesiigacin en el futuro.

paredes celulares a partir de las clulas adyacentes ( T = , + ^ p + Pm; en la pared celular P = 0 y 4 \ = > 0.1 MPa; por consiguiente, el valor de * vendr dado por el valor de 4 / m ). Se establece as un gradiente de potencial hdrico a travs del mesfilo, de manera que las clulas que bordean los espacios intercelulares poseen un potencial ms bajo que las ms alejadas. El agua se mover a lo largo de este gradiente hasta que, finalmente, el agua perdida por transpiracin sea reem plazada por agua procedente de las superficies de agua libre en los terminales de los nervios. La prdida de agua en los elementos xilemticos origina una tensin en las columnas de agua del xilema que se puede trans mitir hasta las races (Figs. 4-1 y 4-5).

5.

BALANCE HDRICO

4. MOVIMIENTO DEL AGUA EN LA HOJA


A nivel de los nudos del tallo se originan ramificacio nes del sistema vascular, que pasan a travs del peciolo hasta el limbo foliar. Dentro del limbo, las ramificacio nes son extensas y. a menudo, se anastomosan termi nando como elementos xilemticos aislados con sus ex tremos abiertos, en tal nmero que ninguna clula de la hoja se encuentra a ms de dos o tres clulas de distan cia de los nervios. Es precisamente a travs de esta in trincada y extensa red de elementos xilemticos como el agua y los nutrientes minerales se mueven en la hoja. Las paredes celulares estn compuestas de celulosa y otras macromolculas (vase Captulo I). Debido a sus propiedades y a su organizacin estructural, estas mol culas, muy hidrfilas, confieren a las paredes celulares un potencial malricial muy negativo. Las molculas de agua transpiradas por la hoja se liberan previamente en la atmsfera foliar, mediante evaporacin a nivel de los espacios microcapilares en el interior de las paredes ce lulares. La reduccin del contenido hdrico de estas pa redes por debajo del nivel de saturacin disminuye su potencial hdrico; por tanto, el agua fluye hacia estas

El uso de trminos tales como balance hdrico y economa del agua destaca que las relaciones hdricas en las plantas se pueden considerar bajo el prisma de un presupuesto en el cual el balance o estado hdrico (Ca ptulo 2) viene controlado por las intensidades relativas de absorcin y prdida de agua. El balance hdrico se puede calcular a partir de las determinaciones cuantitativas de la absorcin de agua y de la transpiracin. No obstante, las medidas necesarias son an inexactas y difciles de obtener, especialmente en condiciones de campo. Por tanto, es frecuente hacer una estimacin indirecta del balance hdrico a travs de su efecto en el contenido hdrico (mejor, contenido hdrico relativo) o potencial hdrico de la planta. Un balance negativo siempre se manifestar por una dismi nucin de la turgencia y el potencial hdrico de los teji dos. El estado hdrico de las plantas puede ser muy va riable en una escala temporal que vaya de minutos a meses. De hecho, en muchas especies arbreas es fre cuente que se presenten grandes variaciones estaciona les en el contenido de los troncos. Segn el habitat y las caractersticas funcionales de la planta, es posible distinguir dos tipos diferentes de balance hdrico: plantas hidroestables y plantas hidrolbilcs. Las plantas hidroestables son aquellas que man tienen un contenido hdrico favorable, variando muy poco su balance hdrico durante el da. Pertenecen a este grupo especies acuticas, suculentas, plantas de sombra (escifitas o escifilas), algunas gramneas y rboles de regiones hmedas. Sus estomas responden con gran sensibilidad a la falta de agua, y los sistemas radicales son. en general, extensos y eficientes. Las fluctuaciones diarias y estacionales en el potencial os mtico y en el potencial hdrico son reducidas. Las plantas hidrolbiles toleran la prdida de gran des cantidades de agua con el consiguiente aumento en la concentracin del jugo celular. Muchas especies her bceas de hbitats soleados (helifitas o hclifilas), gra mneas esteparias, as como muchas leosas, especial mente especies colonizadoras, son hidrolbiles y todas

Transporte

de agua y balance hdrico en la planta

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Pared celular Ncleo

Figura 4-5. Tensin (presin negativa) en la columna de agua. La evaporacin en el interior de la hoja origina que el agua se retraiga en el interior de los espacios existentes entre las clulas del mesfilo. A medida que el agua se retrae, la tensin superficial resultante tira del agua existente en las clulas adyacentes. Dado que la columna de agua es continua, a tensin es transmitida a travs de la misma hacia las raices y el agua del suelo.

las plantas poiquilohdricas (vase apartado 6.2.2) lo son en grado extremo. Tales plantas pueden tolerar grandes fluctuaciones en el potencial hdrico as como la marchitez temporal. La recuperacin de estas situa ciones adversas es rpida, gracias a su elevada relacin raz/parte area y a la eficacia de los sistemas de trans porte de agua.

5.1.

En plantas con buena disponibilidad de agua en el suelo, conforme aumenta la transpiracin durante el da, el potencial hdrico puede disminuir debido al retraso en la absorcin

Diariamente, los estomas de plantas bien regadas se abren poco despus del amanecer y el aumento de la demanda evaporativa crea los gradientes de concentra cin de vapor de agua necesarios para que tenga lugar la transpiracin (vase Captulo 3). Ordinariamente, a medida que aumenta la transpira cin. la prdida de agua excede la absorcin (Fig. 4-6). Ello es debido a que existe una resistencia considerable al flujo de agua desde el suelo al xilema radical y. por otra parte, a que hay un volumen apreciablc de agua fcilmente disponible en las clulas parenquimticas turgentes de la hoja y del tallo que abastecen la deman da transpiratoria.

A medida que se retira agua de las clulas del mesfilo durante la transpiracin, disminuye el 4* foliar. En das muy despejados, el potencial hdrico foliar muestra una variacin temporal similar al de la radiacin solar. No obstante, el equilibrio entre la prdida transpiratoria de agua y su restauracin es extraordinariamente din mico, y pequeos cambios en las condiciones ambien tales pueden provocar grandes variaciones en el foliar en slo unos minutos. Esto es especialmente ma nifiesto en das parcialmente nubosos, con plantas que se desarrollan en suelos muy hmedos. Al pasar del sol radiante a la sombra, la temperatura de la hoja disminu ye rpidamente debido al enfriamiento convectivo y transpiratoro. reducindose, por tanto, el gradiente de concentracin de vapor de agua entre la hoja y el aire (ecuacin 3-2). La recuperacin al anochecer del poten cial hdrico foliar en plantas bien regadas sigue la re duccin en la radiacin solar, pero el foliar puede presentar un comportamiento ligeramente diferente al de la maana debido a los mayores dficit de presin de vapor, caractersticos del anochecer. Por lo general, la resistencia al flujo de agua es me nor entre las clulas parenquimticas y las superficies evaporantes que a nivel de la absorcin en las races. Por tanto, la causa del retraso en la absorcin, en condi ciones de buena disponibilidad de agua, es la resisten cia elevada en las membranas de las clulas radicales. En el caso de los rboles, una consecuencia del retraso

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

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La estructura de la raz, la presencia de una endodermis con paredes celulares impermeables, as como cualquier factor que afecte tanto al movimiento del agua a travs de las membranas celulares radicales como a la capacidad de acumulacin de iones son. to dos ellos, factores que afectan al grado de retraso en la absorcin. Ello, a su vez, condiciona el gradiente de potencial hdrico, necesario para mover el agua a travs de la planta a una velocidad suficiente para satisfacer las prdidas transpiratorias.

12 Tiempo (h)

5.2.

Figura 4-6. Relacin entre absorcin de agua y transpira cin en el fresno (datos de Kramer, 1937). (Adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993.)

En condiciones de sequa, disminuye considerablemente el potencial hdrico de \a planta y puede presentarse ajuste osmtico

entre absorcin y transpiracin es que. durante el da. cuando las tasas transpiratonas son elevadas, el agua tiende a salir de las clulas situadas en las proximidades de la va principal hacia el xilema funcional. Esto pro voca una reduccin en el volumen de las clulas do nantes, y los troncos se pueden encoger durante el da e hinchar durante la noche a medida que las clulas se rehidratan. Bajo ciertas condiciones ambientales, el retraso en la absorcin se hace tan acentuado que las plantas se mar chitan, incluso teniendo agua en el sucio. Es el caso, por ejemplo, de la temperatura baja del suelo, su efecto ms importante es el aumento de la resistencia hidruli ca de las membranas celulares en las races. La existen cia de fro en la raz, combinada con temperaturas folia res elevadas, vientos fuertes y aire seco (factores que estimulan la transpiracin) suelen matar a la planta por desecacin. El peligro es grande en ambientes alpinos. si bien las plantas procedentes de ambientes clidos y tropicales son muy susceptibles a esta forma de lesin. Una escasa aireacin del suelo, especialmente cuan do se combina con condiciones que favorecen la trans piracin, tambin puede provocar lesin por dese cacin. La falta de oxgeno conlleva respiracin anaerbica en las races y reduce el suministro de ATP. Los productos finales de este proceso, as como la presencia de otros iones txicos en el ambiente reductor que ro dea la raz, tienden a lesionar las clulas radicales y aumentan su resistencia hidrulica. Adems, la limita cin de ATP restringe la capacidad de las races para absorber activamente iones y mantener el bajo poten cial hdrico que es necesario para incorporar agua del suelo. Por tanto, una de las consecuencias de los suelos inundados es la desecacin. En las plantas adaptadas a la inundacin, el oxgeno puede difundir desde las par tes areas a las races, a travs de espacios areos gigan tes interconectados (aernquima), de tal manera que las races permanecen oxigenadas incluso en suelos total mente anaerobios.

A medida que un suelo se seca y su potencial hdrico va tomando valores cada ve/ ms negativos, las plantas han de disminuir su potencial hdrico con el fin de man tener el gradiente de potencial necesario para la absor cin de agua. Tericamente, esto puede ocurrir de dos maneras: disminuyendo el potencial osmtico (por acu mulacin de solutos), o disminuyendo la turgencia (me diante simple deshidratacin). En los suelos sometidos a sequa, el mecanismo ms importante es la disminu cin del potencial osmtico, bien mediante una estimu lacin de la acumulacin de iones inorgnicos, o bien mediante un aumento en los niveles de solutos orgni cos. Tal ajuste osmtico u osmorrcgulacin puede im pedir la prdida de turgencia de la raz. El potencial hdrico de la planta experimenta una os cilacin ms o menos tpica, con valores ms elevados al amanecer y al anochecer y menores al medioda, cuando es mximo el desequilibrio entre transpiracin \ absorcin. La amplitud de csla tendencia aumenta con el grado de sequa en el suelo. Existe por tanto, durante el da. un dficit hdrico provocado por transpiracin. resistencia elevada en las races y lesin en el xilema por embolia y cavilacin. Por la noche, cuando cesa la transpiracin, los dficit hdricos diurnos se eliminan gradualmente y, con el tiempo, el potencial hdrico de la planta alcanza un cierto equilibrio con el potencial hdrico del suelo (Fig. 4-7). Cuando las altas tasas de transpiracin acentan el gradiente de potencial hdrico en la planta, disminuye el potencial hdrico de la raz y, finalmente, la turgencia. En csla situacin se puede presentar encogimiento de la raz, lo cual provoca no slo una reduccin en el creci miento de la misma sino, tambin, la prdida de contac to con las partculas de suelo. En estas condiciones, la absorcin se hace cada vez ms difcil debido a un aumento en la resistencia hidrulica del suelo. Cuando el potencial hdrico del suelo desciende por debajo de un nivel crtico, cesa la absorcin y la plaa muere. El efecto en las plantas de eslos ciclos diarios de potenciales hdricos bajos depende no slo del grado de recuperacin del xilema y de la cavitacin, sino, tam-

Transporte

de agua y balance hdrico en la planta

55

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(no osmorregulacin) - -1

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4 5 Tiempo (das)

bien, de si se presenta o no osmorregulacin en las hoas. Si sta no tiene lugar, inevitablemente la cada del potencial hdrico foliar provocar una disminucin de la turgencia, que desencadenar el cierre estomtico y la reduccin de la expansin celular. Dicho comporta miento se ilustra mediante la lnea central discontinua en la Figura 4-7. siendo la turgencia foliar la distancia entre esta lnea y la del potencial hdrico foliar. La lnea continua inferior muestra lo que sucede cuando hay os morregulacin: la turgencia foliar se mantiene constan te hasta el da 4 5 de sequa edfica y la marchitez no se presenta hasta el da 7. En condiciones de campo, el dficit de presin de vapor de la atmsfera puede llegar a desempear un pa pel ms importante que el contenido hdrico del suelo en la determinacin del estado hdrico de la planta. Asi mismo, otro factor relevante es la extensin del sistema radical, al condicionar la capacidad de absorcin de agua por parte de la planta.

6.1.

Los dficit hdricos tienen efectos qumicos e hidrulicos y afectan a la mayora de los procesos fisiolgicos y bioqumicos de la planta

ci) Efectos qumicos e hidrulicos de los dficit hdricos La prdida de agua en un tejido vegetal tiene los si guientes efectos que pueden influir en el metabolismo de la planta: Reduccin del potencial hdrico o la actividad del agua celular. Disminucin de la presin turgente. Concentracin de molculas, a medida que dismi nuye el volumen celular con la reduccin de la turgencia. Alteracin de relaciones espaciales en el plasmalema, tonoplasto y membranas de orgnulos, de bido a los cambios de volumen. Cambio en la estructura o configuracin de las macromolculas como consecuencia de la elimi nacin del agua de hidratacin o modificacin de la estructura de esa agua. No obstante, resulta difcil entender cmo los posi bles efectos de estrs suaves sobre la actividad hdrica, estructura macromolccular o concentracin de molcu las en el citoplasma, pueden ser los sensores primarios del estrs. El sensor, en teora, respondera a la presin de turgencia o tamao celular. Al menos en clulas en crecimiento, los pequeos cambios de turgencia pueden reducir la expansin celular, con el consiguiente aumento de materiales de pared no utilizados u otras

6.

DFICIT HIDRICOS Y CRECIMIENTO VEGETAL

El dficit hdrico es el factor ms importante que causa la reduccin en el crecimiento de la planta (vase tam bin Captulo 30). A menudo, en das calurosos y solea dos, se presentan dficit hdricos transitorios al medio da debido a que. temporalmente, la prdida de agua excede la absorcin. Por el contrario, los dficit hdri cos permanentes a largo plazo son provocados por una disminucin en la disponibilidad de agua en el suelo (vase apartado 5). Los dficit hdricos afectan prcti camente a todos los aspectos del desarrollo de la planta.

56

Fundamentos de fisiologa vegetal

sustancias que afecten, a su vez, al metabolismo. Se ha demostrado tambin que la turgencia puede afectar di rectamente al transporte de iones a travs de la partici pacin de sensores que responden a la dilatacin de las membranas. As y todo, la mayora de los efectos de los dficit hdricos son, probablemente, secundarios y consecuen cia de la actuacin de respuestas reguladoras de la plan ta. Se tiene constancia de que los reguladores de creci miento participan en la integracin de las diferentes respuestas (vase Captulo 18). Aunque los dficit h dricos afectan a los niveles de giberelinas y auxinas, no se ha demostrado que estos reguladores tengan un papel importante en la respuesta al estrs. Igualmente, la pro duccin de ctileno es estimulada por muchos estreses; esta estimulacin se ha implicado en una serie de res puestas, como son abscisin de hojas y frutos, epinastia, cierre estomtico y disminucin de la asimilacin (va se Captulo 22). La reduccin en el suministro de citoquininas a consecuencia de la sequa se ha relacionado con respuestas tales como senescencia foliar y cierre estomtico (vase Captulo 21). Sin embargo, es el ci do abscsico (ABA) el que desempea, a veces en con juncin con iones C a 2 + , el papel ms importante en la integracin de las respuestas de la planta, tanto al estrs hdrico. como a un amplio espectro de otros estreses ambientales, como la salinidad y temperaturas eleva das. De hecho, la participacin del ABA en el cierre estomtico en respuesta a la sequa ya se ha indicado en el apartado 2.2.2 del Captulo 3. Por otra parte, las con centraciones de ABA aumentan rpidamente en plantas estresadas (esta subida tiende a ser una funcin de ms que del potencial hdrico total, ) ; por otra parte, existe una correspondencia estrecha entre las respecti vas respuestas a los dficit hdricos y al ABA suminis trado exgenamente. Estas observaciones, cuando se combinan con la informacin obtenida a partir de mu anles deficientes en ABA. proporcionan una prueba convincente de que el ABA participa en la adaptacin a los dficit hdricos y otros estrs (vanse Captulos 22 y 30).

suaves puede continuar la sntesis de materiales de la pared celular, de tal modo que el retraso en el creci miento durante un estrs corto, se puede superar tras la recuperacin. La divisin celular, aunque resulta afec tada por el estrs hdrico. normalmente es menos sensi ble que la expansin celular. Adems de una inhibicin del crecimiento, los dficit hdricos modifican el desa rrollo y la morfologa vegetal. As, por ejemplo, la dife rente sensibilidad a la sequa de las races y las partes areas conduce a grandes aumentos en la relacin raz/parte area. Otros efectos sobre el desarrollo ve getativo incluyen la reduccin del ahijamiento en gra mneas y la terminacin precoz del crecimiento en ex tensin de especies perennes, con la formacin de yemas en reposo. Los dficit hdricos tambin provocan la abscisin de hojas y frutos, especialmente tras la de saparicin del estrs. Asimismo, no slo disminuye el tamao de las hojas como consecuencia de una dismi nucin de la expansin y divisin celulares, sino que tambin, al menos en el trigo, se reduce la proporcin de clulas epidrmicas que constituyen los estomas y aumenta el nmero de tricomas. Los dficit hdricos tambin afectan al desarrollo re productor. necesitndose, en algunas especies, un pe rodo de sequa para estimular la iniciacin floral o pro vocar la emergencia de yemas florales ya diferenciadas (vase Captulo 25). En condiciones de sequa se ade lanta la floracin en anuales y se retrasa en perennes. As. por ejemplo, en el trigo, dficit hdricos moderados adelantan la floracin hasta en una semana, aunque con disminucin en el nmero de espiguillas, la fertilidad del polen y la formacin de granos. El efecto de los dficit hdricos en el comportamiento y heterogeneidad de la conductancia estomtica ya se ha considerado anteriormente (Captulo 3). La disminu cin en la tasa transpiratoria se acompaa siempre de una disminucin en la absorcin de C 0 2 y, por tanto, de la fotosntesis. Los dficit hdricos tambin afectan a la fotosntesis a travs de sus consecuencias en los proce sos enzimticos. transporte electrnico y contenido en clorofila (vase Captulo 30). La regulacin de la transpiracin tambin es impor tante desde el punto de vista del balance energtico de la hoja, en el cual desempean un papel crucial los mo vimientos foliares (vase Captulo 24). Asimismo, la transpiracin se reduce como consecuencia de la inhibi cin del crecimiento de la parte area (vase apartado anterior). Por el contrario, suele aumentar la capacidad absorbente de las races por unidad de superficie, al re sultar el crecimiento de la raz menos afectado por el csircs hdrico. Prcticamente todos los aspectos del metabolismo y la estructura fina celular se ven afectados por los dficit hdricos (Cuadro 4-1). Entre los cambios ms caracte rsticos hay que citar: incremento de las reacciones degradativas en relacin con las sintticas, disminucin de la sntesis de protenas, aumento en la concentracin de aminocidos libres, especialmente prolina (que pue-

b)

Efectos de los dficit hdricos en procesos fisiolgicos v metablleos

El efecto ms importante de. incluso, un estrs hdrico suave es la reduccin del crecimiento, siendo especial mente sensible la expansin celular. Se sabe que la pre sin de turgencia de las clulas en crecimiento propor ciona la fuerza motriz para la expansin celular, pero la tasa real de extensin es controlada por la variacin en el potencial hdrico CV) y la extensibilidad ( 0 ) (ecua cin 2-22). Es probable que, en aquellos casos en que se afecta el crecimiento de la parte area sin que simult neamente se observen cambios en su estado hdrico, la modulacin de esa alteracin pueda incluir alguna(s) seal(es) desde la raz a la parte area. Durante estrs

Transporte de agua y balance hdrico en la planta Cuadro 4-1. Sensibilidad a los dficit hdricos de procesos o parmetros vegetales (adaptado de Azcn-Bieto y Taln, 1993) Sensibilidad al estrs Muy sensible Relativamente insensible

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'1' del tejido que afecta al proceso Proceso o parmetro afectado Crecimiento celular (-) Sntesis de pared (-) Sntesis de protenas (-) Formacin de protoclorofila (-) Nivel de nitrato reductasa (-) Acumulacin de ABA ( + ) Nivel de citoquininas (-) Abertura estomtica (-) Asimilacin de CO,(-) Respiracin (-) Acumulacin de prolina ( + ) Acumulacin de azcares ( + ) 0 MPa 1.0 MPa 2.0 MPa Observaciones Tejido en crecimiento rpido Tejido en crecimiento rpido Hojas ahiladas

Depende de la especie Depende de la especie

La longitud de las linca horizontales representa el margen de niveles de estrs en el cual un proceso empieza a afectarse. Las lneas discontinuas significan deducciones basadas en datos ms imprecisos. Los signos ( + ) O () indican aumento o disminucin en el parmetro o proceso.

de llegar a un I % de la materia seca foliar en algunas especies), glicina betana. di y poliaminas y azcares, lo cual comporta cambios importantes en las correspon dientes actividades enzimticas. Muchos de estos cam bios se pueden considerar como adaptativos pero, fre cuentemente, es difcil distinguir entre cambios que son consecuencia de lesin celular o lisular de los que re presentan autntica aclimatacin (vase Captulo 30). Los tejidos sometidos a estrs hdrico presentan una disminucin en los grupos -SH, y un aumento en la acti vidad peroxidasa y en la formacin de perxido de hi drgeno. Se ha comprobado tambin que disminuye el potencial reductor, lo que sugiere que los tejidos some tidos a estrs hdrico poseen un mayor estado de oxida cin. Ello provocara deshidrogenacin de las protenas y, por tanto, formacin de puentes disulfuro a partir de grupos -SH. De esta manera, las protenas adquiriran un estado ms oxidado y, con ello perderan su activi dad. Este proceso de deshidrogenacin, a diferencia de una mera deshidratacin. hara posible que las protenas fuesen inactivadas o activadas, dependiendo del estado metablico de los tejidos. Existen evidencias de que un factor importante en la lesin mediante desecacin es la lesin qumica debida a radicales libres (especialmen te. radicales de oxgeno). El radical superxido ( 0 7 ) as como otros radicales de oxgeno se pueden producir mediante una serie de reacciones en las clulas, como la autooxidacin de una serie de compuestos reducidos y la reaccin de Mehler en los cloroplastos en los que el 0 2 . en lugar del C 0 2 . termina siendo el ltimo acep-

tor para el transporte electrnico (tal como puede ocu rrir cuando la asimilacin es bloqueada por el estrs h drico). Una vez formado, el O J experimenta una reduc cin para formar el radical hidroxilo (OH), muy lesivo, que puede originar peroxidacin de lpidos y perxido de hidrgeno (vanse Captulos 10 y 30). Por otra pane, la sequa puede inducir la transcrip cin de RNA mensajeros que codifican un gran nmero de protenas, las cuales no son sintetizadas en condicio nes de ptima disponibilidad de agua. En los casos estu diados, muchas de estas protenas (shock proteins) son tambin inducidas por el ABA (vase Captulo 22). En este sentido, parece haber dos importantes cuestiones no dilucidadas del todo. Todas las protenas del estrs hdrico son inducidas por acumulacin de ABA en res puesta a la sequa? La activacin de genes inducibles por el ABA depende de una activacin previa de los genes por la prdida de turgencia?

6.2.

En situaciones d e salinidad, sequa o congelacin, en que resulta difcil conseguir agua, las plantas presentan caractersticas especiales que les p e r m i t e n sobrevivir

Siempre que el potencial hdrico del suelo desciende considerablemente, se hace ms difcil absorber agua y las plantas se exponen al peligro de desecacin. El pro blema se presenta con los suelos salinos, los suelos con-

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

gelados y, naturalmente, los suelos secos de las zonas ridas. En todas estas situaciones las plantas adquieren caractersticas especiales que les permiten sobrevivir. Consideremos, en primer lugar, los aspectos relaciona dos con la escasez de agua en el suelo. 6.2.2. 6.2.7. Aridez y sequa no significan lo mismo

de evaporacin y transpiracin, incluso las llu vias frecuentes pueden no suministrar agua sufi ciente como para restablecer la cantidad perdi da, lo que afecta tambin al rendimiento. Existen dos tipos de mecanismos para tolerar la sequa: evitacin y tolerancia a los dficit hdricos en la planta

Una regin rida es aquella en la que las precipitacio nes son escasas o nulas y la humedad atmosfrica es muy baja. Sin embargo, una regin puede tener un vo lumen total de precipitacin anual que en otra sera su ficiente para sostener un tapiz vegetal continuo y, no obstante, ser rida; en el segundo caso, el agua precipi tada, aunque escasa, es aprovechada ntegramente, al menos, durante el perodo vegetativo; en el primerease intervienen factores ajenos a la precipitacin que limi tan considerablemente el aprovechamiento del agua. Entre estos factores destaca como ms importante la temperatura, que condiciona directamente la intensidad de la evaporacin. Las temperaturas bajas atenan la aridez y pueden hacerla desaparecer desde el punto de vista biolgico; por el contrario, las temperaturas eleva das. al intensificar la evaporacin, pueden causar aridez an en el caso de un mayor volumen de precipitacin. En consecuencia, se deduce que la nocin de aridez es relativa y su determinacin hay que hacerla combinan do los datos de precipitacin con los de temperatura. Desde el punto de vista tanto meteorolgico como ambiental, podemos definir la sequa como la falta o insuficiencia de precipitacin durante un perodo largo, que provoca un desequilibrio hidrolgico considerable y, por tanto, restriccin en el suministro de agua. Se presenta cuando la evaporacin y la transpiracin exce den la precipitacin durante un tiempo considerable, y constituye el azar fsico ms grave que afecta principal mente a los cultivos, dado que la vegetacin natural se halla ms adaptada a esos habitat. Existen cuatro tipos bsicos de sequa: Sequa permanente. Caracteriza a los climas ms secos. La escasa vegetacin est adaptada a la aridez y es imposible una agricultura de alto rendimiento sin riego continuo. b) Sequa estacional. Se presenta en aquellos cli mas que tienen estaciones anuales lluviosas y secas bien definidas. En estas condiciones, con viene ajustar la siembra de manera que los culti vos se desarrollen durante la estacin lluviosa. c) Sequa impredecible. Se refiere a un fallo anormal en la precipitacin; se puede presentar prcticamente en cualquier lugar, pero es ms caracterstica de climas hmedos y subhmedos. Ordinariamente, es breve e irregular y slo afecta a un rea reducida. el) Sequa no aparente. Cuando por temperaturas altas y vientos fuertes se inducen tasas elevadas a)

Las especies difieren entre s en el grado y perodo de tolerancia a la sequa; generalmente, estas caractersti cas guardan relacin inversa con la produccin de biomasa. Los diferentes mecanismos de respuesta de la planta que permiten aumentar la tolerancia a la sequa. tales como el comportamiento estomtico, los cambios morfolgicos en la hoja, la osmorregulacin y las alte raciones en la relacin raz/parte area ocasionan, al mismo tiempo, reduccin en su capacidad de produc cin. En un contexto agronmico, un cultivar ms resis tente a la sequa es aquel que presenta una mayor pro duccin bajo estas condiciones que otro menos tolerante. Tambin se busca un cierto grado de estabili dad en la produccin de un ao a otro como criterio de tolerancia a la sequa. Por el contrario, en ecosistemas naturales, una especie tolerante a la sequa es aquella que tiene la capacidad de sobrevivir y reproducirse en un ambiente relativamente seco. En este caso, la tole rancia a la sequa no se basa, necesariamente, en una productividad elevada. Por tanto, los mecanismos que favorecen la tolerancia a la sequa en tpicos monoculti vos pueden ser diferentes de los que se han selecciona do en ecosistemas naturales. Las plantas que pueden vivir en ambientes secos se denominan xerfitas y la adaptacin de una especie ve getal a estos climas se conoce como xerofilia. Las xer fitas se presentan slo en situaciones de aridez, porque su capacidad competitiva en lugares secos es mayor que la de otras especies. Existen grandes diferencias en la capacidad de las plantas para tolerar la sequa. Algunas de estas diferen cias son consecuencia de adaptaciones en la planta en tera, tales como sistemas radicales dispersos y profun dos; otras adaptaciones tienen lugar a nivel de rgano. tales como hojas muy cutinizadas y buen control esto mtico de la transpiracin, mientras que otras, como el ajuste osmtico y la tolerancia a la desecacin se produ cen a nivel celular. Las plantas de las regiones ridas se clasifican, en funcin de las caractersticas de los diferentes nichos ecolgicos que ocupan, de la siguiente forma: las que escapan, las que evitan y las que toleran la sequa. Sin embargo, a la vista de la dificultad frecuente para cata logar una determinada especie vegetal en uno de los tres grupos, quizs uno de los enfoques ms tiles sea centrarse en los mecanismos que contribuyen a la tole rancia a la sequa, reconociendo que una planta puede poseer varios. Estos mecanismos se pueden clasificar en dos tipos importantes: 1) evitacin del estrs: es de-

Transporte de agua y balance hdrico en la planta

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cir, aquellos mecanismos que minimizan la presencia de dficit hdricos lesivos, y 2) tolerancia al estrs; es decir, aquellas adaptaciones fisiolgicas que permiten que las plantas continen funcionando, a pesar de la presencia de dficit hdricos en las mismas (vase Cap tulo 30).

quedando los nervios centrales y peciolos como espi nas; puede producir varios lotes de hojas al ao y duran te los perodos desprovistos de hojas, existen clulas verdes en el tallo que mantienen una tasa fotosintetica baja. Reduccin de la transpiracin. A partir de la ecuacin de la transpiracin (ecuacin 3-2). y suponiendo que los estomas estn abiertos (con lo cual se puede ignorar la resistencia cuticular), hay dos posibilidades para redu cir la transpiracin: bien disminuir el gradiente de con centracin o presin de vapor de agua, o bien aumentar considerablemente la resistencia de la capa lmite (ra). La reduccin del gradiente de concentracin o pre sin de vapor se consigue, fundamentalmente, median te modificaciones que disminuyen el gradiente trmico entre las hojas y el aire. Las hojas pequeas disipan el calor ms fcilmente que las grandes, mediante corrien tes de conveccin. Las hojas dispuestas paralelamente a los rayos solares, al igual que aquellas de color verde claro o brillante, absorben menos radiacin. Otro meca nismo que reduce eficazmente el gradiente de presin de vapor es el desprendimiento de aceites voltiles, pro duciendo el olor aromtico tpico de muchas especies mediterrneas. Los aceites aumentan la densidad media del gas en la capa lmite, y esto disminuye la tasa a la cual se difunde el vapor de agua a su travs, de la mis ma manera que si hubiese aumentado la humedad del aire. Una modificacin estructural muy corriente en xerlias. que aumenta la resistencia de la capa lmite por encima de los poros estomticos, es la disposicin de los estomas en el fondo de criptas (p. ej.. Nerium oleander). lo cual dificulta considerablemente el intercambio de gases y, por tanto, de vapor de agua. Asimismo, mu chas xerfitas poseen estomas confinados a una sola su perficie de la hoja y cuando desciende la turgencia fo liar. las hojas se enrollan encerrando los estomas en una cmara hmeda y protegida. Almacenamiento de agua. En algunas plantas, el alma cenamiento de agua combinado con una tasa transpiratoria baja permiten la supervivencia durante muchos meses sin lluvia. El almacenamiento de agua es muy importante en su culentas desrticas que pueden sobrevivir durante va rios meses o, incluso, un ao o dos sin agua adicional, siendo su caracterstica ms manifiesta la presencia en hojas o tallos de tejido almacenador de agua muy vacuolizado. En dichas suculentas, la prdida de agua me diante transpiracin es despreciable, debido a su cutcu la gruesa y al cierre estomtico durante el da. Las plantas de este tipo tambin suelen tener sistemas radi cales superficiales y ampliamente extendidos, que ab sorben el agua cuando la superficie del suelo se moja ocasionalmente con lluvias. En algunas especies, el agua se almacena en rganos subterrneos, como en las races enormes de Welwitschia y Pachypodium hispinosum del desierto sudafricano. En el caso de Adansonia

a) 1.

Evitacin de los dficit hdricos en la planta Escape a la sequa

Las plantas que poseen este mecanismo, como regla ge neral, no son resistentes a la sequa. La supervivencia en los perodos secos slo requiere la produccin, debi damente programada, de semillas u rganos especial mente protegidos de la desecacin. En esta categora se incluyen las plantas vasculares anuales de vida corta (terfitas) que germinan despus de lluvias muy inten sas y que rpidamente completan su ciclo de desarrollo. pasan la estacin seca en forma de semillas y no sufren lesiones por desecacin. Una adaptacin, aunque me nos extrema, se encuentra en muchas plantas de cultivo. en las que los cultivares ms tolerantes a la sequa son frecuentemente los que primero florecen y maduran. evitndose as lo peor de la estacin seca. Muchas de estas especies anuales adelantan la floracin si se las somete a un dficit hdrico de forma prematura. Otro grupo de plantas que poseen mecanismos para escapar a la sequa son algunas gefitas que poseen r ganos subterrneos repletos de agua (rizomas, tubrcu los, bulbos) y que pueden sobrevivir durante perodos de sequa al estar protegidos de una prdida excesiva de agua. Cuando empieza la estacin lluviosa brotan inme diatamente, utilizando los hidratos de carbono almace nados, floreciendo y fructificando en poco tiempo. 2. Conservacin del agua

La forma ms corriente de regular el equilibrio hdrico y mantener la turgencia es reducir la prdida de agua o almacenarla. Entre los mecanismos ms frecuentes he mos de considerar: Cierre estomtico rpido y completo. Capacidad para cerrar los estomas rpida y completamente antes de que las clulas se lesionen por desecacin. Cutcula gruesa y muy impermeable. Posesin de una cutcula gruesa y muy impermeable, recubierta frecuen temente por capas creas o resinosas. En algunas xerfitas, la resistencia cuticular al vapor de agua (rc) puede llegar a ser de 120 s cm l: esto quiere decir que una vez cerrados los estomas, la planta pierde muy poca agua. Prdida de hojas. Un buen ejemplo es el de la especie Follquieria splendens que vive en el desierto de Sono ra; esta planta produce hojas despus de las lluvias, pero las pierde cuando se limita el suministro de agua,

60

Fundamentos de fisiologa vegetal

digikitci, el agua se almacena en cantidades considera bles en sus enormes troncos (varios metros de dimetro). Las plantas CAM, con su ciclo estomtico invertido y cutculas gruesas, son especialmente eficaces porque limitan la prdida de agua en condiciones de estrs (vase Captulo 12). A medida que el agua disponible en el suelo se reduce, los estomas permanecen abiertos durante perodos cada vez ms cortos, llegando un mo mento en que se cierran por completo. En esta situa cin. las suculentas sobreviven reciclando el C 0 2 respi ratorio, y sus cutculas gruesas evitan, prcticamente. toda prdida de agua. As, por ejemplo, en el caso de una especie de Echinocactus se ha encontrado que, al cabo de seis aos sin agua, la prdida de peso fue menor de un 30 %.

3.

Mantenimiento de la absorcin de agua

Muchas plantas que tienen xito en habitat secos depen den del desarrollo de un sistema radical profundo y ex tenso que puede obtener agua de un volumen muy gran de de suelo o de una capa fretica profunda. En el caso de algunas especies (Acacia), las races pueden penetrar hasta 30 m antes de ramificarse en un suelo hmedo. Frecuentemente, estas freatfitas no poseen adaptacio nes especiales que reduzcan la prdida de agua en las partes areas pero, por lo general, la raz que atraviesa el suelo muy seco suele estar cubierta de capas subero sas impermeables que restringen la prdida de agua. Algunas bromeliccas epfitas, especialmente espe cies de Tillandsia, consiguen agua a partir del roco o el vapor de agua del aire. Estas especies se desarrollan fundamentalmente en desiertos costeros en los que hay muy poca precipitacin, pero s nieblas y rocos fre cuentes, y poseen en ambas superficies foliares pelos especiales que absorben el agua.

dependientes de la misma, tales como expansin y cre cimiento celulares, abertura eslomtica, fotosntesis. etc. Por otra parle, retrasa el enrollamiento foliar y mantiene el crecimiento de la raz. Tambin se ha de mostrado que, en condiciones limitantes de agua, el rendimiento es superior en aquellas variedades que ajustan osmticamente; los elevados rendimientos se asociaron con mayor desarrollo de la raz y mejor ex traccin del agua. Ordinariamente, el ajuste osmtico se presenta en plantas sometidas a un estrs lento. Los solutos que participan varan pero, por lo general, ade ms de iones inorgnicos (especialmente K + y Cl solutos orgnicos cargados elctricamente que se acu mulan en la vacuola, se sintetizan y acumulan en el ci toplasma molculas orgnicas sin carga especfica, que no parece que afecten a las funciones de las protenas Estas molculas reciben el nombre de solutos compatibles (tambin denominados citosolutos u osmolitos entre las angiospermas. los ms frecuentes son el amino o. estrictamente, mino cido prolina y com puestos de amonio cuaternario como la betana. Asi por ejemplo, en Hordetun vulgare, la prolina se acu mula en el citoplasma en proporcin al grado de se qua en cl suelo y. en condiciones de sequa extrema. puede aparecer incluso en las vacuolas. Se ha obs> do que en condiciones de sequa tambin se acum otras sustancias, como azcares reductores, sacar. pinitol. Mdulo de elasticidad elevado. El desarrollo adicional de tejidos estructurales en muchas plantas xeromrficas origina clulas inextensibles con un mdulo de elasticidad () elevado (vase Captulo 2). Esta caracterstic.: permite a las clulas tolerar altas concentraciones os mticas, con la capacidad consiguiente de mantener la turgencia hasta valores muy bajos de T . 2. Tolerancia a la desecacin

b)

Tolerancia a ios dficit hdricos en la planta

Existen varias maneras mediante las cuales las plantas mantienen la actividad fisiolgica a medida que dismi nuye el contenido o el potencial hdrico: 1. Mantenimiento de la turgencia

Ajuste osmtico. Cuando disminuye el potencial os mtico de los tejidos en respuesta al desarrollo de dfi cit hdricos internos, es importante separar el compo nente resultante de una concentracin pasiva de solutos. debida a deshidratacin del tejido, del originado por una acumulacin activa de los mismos. Es a este ltimo caso de osmorregulacin al que se le denomina ajuste osmtico, para diferenciarlo de un mecanismo similar al que se da en presencia de salinidad. El ajuste osmtico posibilita as el mantenimiento, en condiciones de sequa, de la turgencia y de los procesos

La tolerancia a la desecacin se refiere a la capac del protoplasma para soportar una gran prdida de a siendo esta caracterstica adaptativa y tpica de ca; pecie. Los dficit hdricos provocan prdida progn de la turgencia protoplsinica y aumento en la cor tracin de solutos. El resultado final de estos dos E tos es la alteracin en la funcin celular y la aparicin de lesiones en las estructuras protoplsmicas (membra nas en particular). Las plantas varan extraordir: mente en relacin al grado de deshidratacin que den tolerar. En el caso de plantas poiquilohdi (algas, liqenes, musgos, algunos helchos, semii ciertas plantas superiores; estas ltimas nicamente du rante su etapa vegetativa), el protoplasma puede >op : tar la deshidratacin casi completa, deshidratnd rehidratndose de forma simultnea, sin sufrir lesic La mayora de las regiones ridas tiene una gran a dancia en liqenes que. en algunos casos. re; las nicas plantas capaces de vivir en reas en la> q o t

i ranspone

ae agua y oaiance manco en ia piania

o i

aunque nunca llueve, puede existir una humedad at mosfrica elevada y abundante roco, capaces de acti var su metabolismo. Existe un nmero reducido de plantas vasculares en las que los tejidos vegetativos muestran una capacidad notable para tolerar la desecacin. Estas plantas que resucitan no poseen mecanismos especiales que im pidan la prdida de agua o aumenten su absorcin: su adaptacin principal a la sequa es la tolerancia a la desecacin, y poseen una bioqumica celular especializa da que lo permite. En algunas especies, las enzimas, las membranas celulares y los pigmentos fotosintticos se mantienen indemnes en el estado desecado. En otras, se pierden algunos pigmentos y enzimas e incluso las membranas pueden desorganizarse, pero rpidamente >on reparadas o resintetizadas tras la hidratacin. Hay que decir, no obstante, que la mayora de las plantas terrestres son homeohdricas. Si bien durante alguna etapa de su ciclo vital (semilla, rizomas o tallos sin hojas) pueden soportar potenciales hdricos muy ba jos, durante la mayor parte del desarrollo, su protoplasma no puede tolerar potenciales hdricos bajos sin sufrir lesiones. Las semillas de las plantas homeohdricas, al final de su desarrollo, se desecan hasta un contenido hdrico de un 10% o menos. Hace aos se descubri que la desecacin se acompaa de un aumento en el nivel de ABA. el mismo regulador que se acumula en las hojas cuando disminuye la turgencia (vase aparta do 6.1), esto provoca cambios esenciales para una dese cacin segura, es decir, reversible. El cambio ms importante parece ser la activacin de un gen responsa ble de la sntesis de una protena de deshidratacin . -pecfica, cuya caracterstica principal es que no tiene regiones hidrfobas. Los murantes del maz que no sintetizan esta protena poseen semillas que no desecan. sino que germinan en la mazorca, un fenmeno deno minado viviparismo que se presenta naturalmente en muchas plantas alpinas y de la tundra. Se sabe que esta protena se sintetiza tambin en races y hojas de planmas sometidas a una deshidratacin lenta. Como ya se ha mencionado en este apartado, existe una serie de solutos especialmente eficaces a la hora de proteger las protenas ciloplsmicas y las membranas celulares de la desecacin. Los dficit hdricos. al igual que otros estreses ambientales, tienden a desviar el po l i c i a l redox celular a un estado ms oxidado y a aumentar las concentraciones de radicales libres, cam bios ambos, lesivos (vase Captulo 30). No obstante, las plantas poseen una serie de mecanismos antioxidantes que las protegen contra la produccin de radica les de oxgeno, como son: a) reductores solubles en agua, tales como los compuestos que contienen tiol (p. ej.. glutatin) y el ascorbato, y b) vitaminas solubles en grasas, tales como a-tocoferol y /^-caroteno: y c) antio xidantes enzimticos tales como la catalasa y superxido-dismutasa. Aunque hay datos que sugieren que las diferencias en tolerancia a la sequa pueden radicar en una expresin diferencial de estas enzimas, se requiere

ms investigacin antes de formular unas conclusiones claras.

6.2.3.

La eficiencia en el uso del agua y la tolerancia a la sequa no suelen estar relacionadas

Cuando el suministro de agua es limitado, resulta im portante considerar la eficiencia en el uso del agua. WUE (Water Use Efftciency), en trminos de materia seca producida por unidad de agua utilizada en la evapotranspiracin (vase Captulo 3). Frecuentemente. WUE y tolerancia a la sequa se toman como sinni mos, si bien, en la mayora de los casos, no tienen rela cin entre s. La WUE se refiere a un parmetro de pro duccin. y un objetivo importante de la investigacin en esta rea consiste en alcanzar una elevada WUE manteniendo, al mismo tiempo, una elevada productivi dad. Por el contrario, al analizar la resistencia a la se qua, el nfasis se pone, como hemos visto anteriormen te. en la supervivencia durante un perodo de bajo suministro de agua. De hecho, la capacidad para sobre vivir a intensos dficit hdricos suele estar negativa mente relacionada con la productividad. Actualmente, hay gran inters en la posibilidad de aumentar la tolerancia a la sequa y la eficiencia en el uso del agua mediante mejora vegetal y manejo ms adecuado de los cultivos. Un objetivo deseable, aunque difcil de conseguir, sera que se pudiesen obtener com binaciones de caractersticas que aumentasen la tole rancia a la deshidratacin y la eficiencia en el uso del agua, sin prdidas en el rendimiento.

6.2.4.

Las halfitas toleran la salinidad porque alcanzan potenciales hdricos muy bajos mediante osmorregulacin

En la mayora de los suelos, el potencial osmtico no es lo suficientemente bajo como para inhibir la absorcin de agua por las races, desencadenando un dficit hdri co importante en la planta. No obstante, existen situa ciones en las que la concentracin de sales en el suelo llega a ser tan elevada que impide o disminuye la absor cin de agua, provocando una condicin denominada sequa osmtica. Este efecto de los solutos disucltos es similar al de un dficit hdrico edfico. Algunas plantas que se desabollan en suelos salinos se pueden ajustar osmticamente y, de esa manera, impiden la prdida de turgencia. No obstante, a esta sequa osmtica hay que aadir el electo de iones especficos, cuando se acumulan en las clulas concentraciones lesivas de Na + , Cl~ o S O 4 - . En condiciones no salinas, el citosol contiene 100-200 mM de K + y I 111M de Na + , un ambiente inico en el cual pueden funcionar ptimamente muchas enzimas. Una relacin anormalmente elevada de Na + a K + y al-

62

Fundamentos de fisiologa vegetal

tas concentraciones de sales totales, inactivan las enzi mas e inhiben la sntesis de protenas. La fotosntesis es inhibida cuando concentraciones elevadas de N a ' y Cl~ se acumulan en los cloroplastos. Puesto que el transporte electrnico fotosinttico pare ce ser poco sensible a las sales, es posible que se vean ms afectados el metabolismo del carbono o la fotofosforilacin. Enzimas extradas de especies tolerantes a la salinidad (halfitas) son tan sensibles a la presencia del NaCl como las enzimas de especies sensibles (glicfitas). Por tanto, la resistencia de las halfitas a las sales no es consecuencia de un metabolismo resistente a la salinidad. Las plantas evitan la lesin por sales mediante exclu sin de iones en las hojas o mediante su compartimentacin en las vacuolas. En el caso de plantas sensibles. la resistencia a niveles moderados de salinidad en el suelo depende de la capacidad de las races para impe dir la absorcin de iones potencialmenle dainos (vase Captulo 7). Los iones Na ' pueden entrar en las races pasivamente (siguiendo un gradiente decreciente de po tencial electroqumico) y, por tanto, las clulas de las races han de utilizar energa para un transporte activo que devuelva el Na" a la solucin externa. Por el con trario, la membrana plasmtica de la raz es muy poco permeable al Cl~. Algunas halfitas pertenecientes a los gneros Tamarix y Atriplex no excluyen los iones a travs de la raz, sino que, por el contrario, poseen gln dulas salinas en las superficies de las hojas. Los iones son transportados a estas glndulas, en las que las sales cristalizan y dejan de ser lesivas. Cuando las sales son excluidas de las hojas, las plan tas utilizan sustancias orgnicas para disminuir el po tencial osmtico del citoplasma y la vacuola y, as, con seguir disminuir el potencial hdrico foliar. Entre estos componentes orgnicos que no interfieren en el meta bolismo celular a concentraciones elevadas se encuen tran la glicina betana, la prolina, el sorbitol, la sacaro sa. etc. La cantidad de carbono utilizada para la sntesis de estos solutos orgnicos puede ser elevada. En la ve getacin natural esta desviacin del carbono no afecta a la supervivencia, pero en cultivos puede reducir la pro duccin. Muchas halfitas absorben iones y los acumulan en las hojas. No obstante, estos iones son secuestrados en las vacuolas de las clulas foliares, con lo que contribu yen al potencial osmtico celular sin lesionar las enzi mas cloroplsticas y citoslicas sensibles a la salinidad. En estas hojas, se mantiene el equilibrio hdrico entre el citoplasma y la vacuola acumulndose en el citoplasma compuestos orgnicos como prolina o sacarosa. Debido a que el volumen del citoplasma en una clula adulta vacuolada es pequeo comparado con el volumen de la vacuola, la cantidad de carbono necesaria para la snte sis de compuestos orgnicos es mucho menor en estas plantas que en las que excluyen sales. La exposicin a NaCl o ABA induce la sntesis de protenas. Especialmente importante parece ser una

protena de bajo peso molecular denominada osmotina. asociada a un aumento en la tolerancia al NaCl. En cul tivo de tejidos ha sido posible aclimatar clulas de plan tas de naranjo y tabaco para tolerar concentraciones elevadas de sales. Durante esta aclimatacin se han de lectado, mediante electroforesis en gel, varias protenas sintetizadas de novo. Si se tratan las clulas con concen traciones bajas de ABA, antes de exponerlas a concen traciones elevadas de sales, aumenta extraordinaria mente su capacidad de aclimatacin. Adems, el ABA estimula la sntesis de una o ms protenas que, aparen temente, son las mismas que se inducen durante la acli matacin al NaCl. De esta manera, parece posible que el ABA pueda desempear algn papel en la aclimata cin. En plantas intactas, las elevadas concentraciones de sales aumentan los niveles de ABA en las hojas. Esta respuesta a la salinidad es similar al aumento en la pro duccin de ABA por las races y su transporte a la parte area, ya descrito anteriormente en relacin con el dfi cit hdrico cdfico (vase tambin Captulo 22).

6.2.5. Las plantas expuestas a temperaturas muy bajas experimentan sequa por congelacin
Es frecuente observar que, despus de un perodo de exposicin a temperaturas muy bajas, las hojas pertene cientes a especies vivaces de alta montaa se marchitan irremisiblemente. Esto ocurre as porque experimentan sequa por congelacin, situacin que se presenta cuando el suelo congelado, o xilema congelado y blo queado, impide que el agua alcance las hojas. Incluso con los eslomas cerrados, las hojas pueden perder sufi ciente cantidad de agua a travs de la cutcula como para disminuir la turgencia. Por tanto, en regiones fras, las especies vivaces suelen poseer caractersticas xerofticas como cutculas gruesas y posibilidad de cierre estomtico completo, combinadas con capacidad para tolerar la desecacin parcial. Por otra pane, el paso del agua desde las clulas vi vas hacia los espacios intercelulares, una especie de deshidraiacin controlada, suele ser esencial para so brevivir a la congelacin, al impedir la formacin de cristales de hielo en el interior de las clulas. En los espacios intercelulares se pueden formar grandes crista les de hielo, retornando el agua a las clulas cuando aqullos se funden. De esta manera, la capacidad para tolerar la congelacin se acompaa de cambios en la bioqumica celular que se desarrollan lentamente du rante el otoo, en un proceso que se describe como aclimatacin ai fro (vase Captulo 30). Al igual que en los casos de tolerancia a la salinidad y a la sequa, es importante destacar el papel que de sempean los solutos compatibles que aparecen en mu chas plantas durante la aclimatacin al fro y que, en este caso, reciben el nombre de crioprotectores.

Transporte

de agua y balance hdrico en la planta

63

La aclimatacin al fro puede ser inhibida por factotales como la elevada fertilizacin nitrogenada o la poda, que estimulan el crecimiento de la planta. Las tas varan en su grado de aclimatacin y no todas pueden lograr resistencia a la congelacin. Ello es de mporlancia considerable en agricultura. As. por ejem plo. los cereales de invierno, que producen hasta un ms que las variedades de primavera, no se puesembrar en muchas regiones ms fras debido a su imitada tolerancia al fro. Si se pudiese aumentar su .rancia, el impacto sera enorme en la produccin mundial de alimentos.

5.2.6. En condiciones naturales, las plantas se encuentran sometidas a estrs mltiples


La mayor parte de la investigacin sobre el efecto de - factores ambientales en las plantas se ha centrado, lasta ahora, en las respuestas y adaptaciones a factores -lados del ambiente pero, en condiciones naturales, - plantas se encuentran sometidas a estreses mltiples -.mse Captulos 13 y 30). Hay que tener en cuenta cue los efectos de los factores ambientales en interac cin no suelen ser aditivos. As, por ejemplo, en la sspecie mediterrnea Nerium oleando; la lesin por luz intensa o fotoinhibicin aumenta extraordinarianente cuando se acompaa de dficit hdricos. Si bien la caracterstica ms importante de una regin rida es que la precipitacin es escasa o nula y la humead atmosfrica es muy baja, hay otros factores para los . jales tambin se requiere la adaptacin, por ejemploelevadas temperaturas, altas intensidades luminosas, re ducida disponibilidad de nutrientes, etc. Por otra parte, condiciones ambientales, como se qua. salinidad, inundacin, altas temperaturas, alta de manda de evaporacin en la atmsfera y fro, pueden conducir o asociarse a prdida de turgencia en el tejido vegetal. Parece, por tanto, probable que las respuestas a estos estreses ambientales puedan ser generales y co munes a las observadas en el caso de estrs hdrico i vase Captulo 30). De hecho, las investigaciones so bre protenas de choque (shock proteins) revelan la existencia de protenas comunes, independientemente de la especie vegetal o del tipo de estrs.

RESUMEN
La absorcin de agua por las races depende de la natu raleza y las propiedades hidrulicas del sistema radical. as como de las propiedades y el estado hdrico del sue lo y, en general, de las condiciones ambientales. La ab sorcin de agua en plantas con transpiracin baja puede

ser de origen osmtico, pero en plantas con transpira cin intensa es, en gran medida, un fenmeno pasivo. La absorcin de agua debida a fuerzas osmticas es res ponsable de la presin de raz. El transporte de agua en la planta est regido por los gradientes de potencial hdrico y por las caractersticas anatmicas del xilema que controlan las propiedades hidrulicas. La capacidad del flujo en capilares seme jantes a conductos xilemticos aumenta a razn de la cuarta potencia del radio. Por tanto, elementos xilem ticos amplios poseen un caudal muy alto. Las tensiones elevadas, la congelacin del agua en el xilema o la ac cin de ciertos patgenos pueden inducir ruptura de las columnas de agua y embolias en los conductos xi lemticos. Se considera que la formacin de embolias bajo tensin est relacionada con el tamao de los po ros en las punteaduras. La susceptibilidad a la cavita cin y la tolerancia al embolismo son factores que han influido en el tipo y la distribucin de las plantas terres tres en relacin con la tolerancia a la sequa y la conge lacin. A medida que aumenta la transpiracin, la prdida de agua excede su absorcin, lo que origina una disminu cin del potencial hdrico. La causa de dicho retraso en la absorcin es la resistencia elevada a nivel de las membranas de las clulas radicales. Cuando la radia cin solar es variable, el potencial hdrico foliar flucta durante el da, incluso con buena disponibilidad de agua. En condiciones de sequa, disminuye considera blemente el potencial hdrico. si bien su variacin diaria se puede reducir a medida que se anula la transpiracin como consecuencia del cierre estomtico. Segn su ha bitat y caractersticas funcionales, existen plantas hidroestables, que varan muy poco su balance hdrico durante el da, y plantas hidrolbiles que toleran gran des variaciones en el potencial hdrico. El dficit hdri co es el factor ms importante causante de la reduccin en el crecimiento: se puede producir en diferentes situa ciones: sequa, bajas temperaturas edficas, salinidad y escasa aireacin del suelo, en combinacin con factores que estimulan la transpiracin. Las especies difieren entre s en el grado, los mecanismos y el perodo de tolerancia a la sequa. En muchos casos se acumulan solutos (ajuste osmtico) y aparecen protenas especfi cas que son inducidas rpidamente bajo los efectos del estrs. En general, los mecanismos que permiten mayor tolerancia a la sequa ocasionan reduccin en la capaci dad de produccin. La relacin entre las caractersticas hdricas de la planta y los fenmenos metablicos, la naturaleza de los sensores primarios, los cambios en la expresin gnica que caracterizan la adaptacin de las plantas a los diferentes estrs ambientales relacionados con prdida de turgencia, as como los efectos de la in teraccin entre factores ambientales mltiples son as pectos de creciente atencin en la investigacin.

64

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

PROBLEMAS Y CUESTIONES
1. Con los datos disponibles calcular el potencial hdrico. expresado en MPa, en las siguientes zonas del SPAC: suelo, raz, hoja y atmsfera.
- Aire HR = 38% Temperatura = 25 C

3.

4.

Hoja

Plasmlisis incipiente en manitol 1 m Volumen de plasmlisis = 9 1 % del volumen actual Presin de turgencia actual = 0.73 MPa

Explique cmo es posible que el agua se mueva hasta la paite superior de un rbol de 100 m de alto pero, en cam bio, una bomba mecnica no puede succionar agua hasta una altura superior a 10.3 m. Qu es lo que impide que se rompa la columna de agua en un rbol? En qu condi ciones se puede romper la columna de agua y, si se rom pe. cmo se restablece? Cul se puede considerar como mejor mecanismo para tolerar el estrs hdrico: un aumento o una disminucin del mdulo de elasticidad, ?

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
1. A/.cn-Bieto. J.. Taln, M. (eds.): Fisiologa y Bioqu mica Vegetal. McGraw-Hill-Interamericana, Madrid. 1993. Brouwcr. R.: Water Movement across thc Root. Symp Soc Exp Biol, 19: 131-149. 1965. Hopkins, W. G. (ed.): Introduction to Plant Physiohgy. John Wiley & Sons. Irte, Nueva York, 1995. Kozlowski, T. T. y Pallardy. S. G. (eds.): Physiohgy of Woody Plas. Academic Prcss. Nueva York, 1997. Kramer. P. J.. y Boyer, J. S. (eds.): Water Relations of Plants and Soils. Academic Press, Nueva York, 1995. Kramer. P. J.: The relation between rate of transpira ron and rate of absorplion of water in plants. AmJ Bot. 24: 10-15. 1937. Larcher. W.: Physiological Plant Ecology. (3. a ed.). Springer-Verlag, Berln. 1995. Milburn. J. A.: Water Flow in Plants. Longman, Nueva York, 1979. Morgan, J. M.: Osmoregulation. Aun Rev Plant Physiol, 35: 299-319. 1984. Ridge, I.: Plant Physiology. Hodder and Stougthon. Londres. 1991.

Suelo Regado a capacidad de campo

2.
Ra2 Jugo celular congela a -1.51 ( Presin de turgencia 1.7 MPa

3. 4.

Considrese m no sustituible por M R = 8.31 J "K"' mor'

5. 6.

2.

Sugiera explicaciones para las afirmaciones siguientes: a) Las plantas en maceta expuestas al sol se pueden mar chitar si se riegan al medioda con agua muy fra. b) Las plantas de jardn o en maceta que se desarrollan de forma natural en habitat sombros con frecuencia se marchitan a pleno sol. incluso si el suelo est h medo. c) Muchas plantas de jardn son ms susceptibles a la sequa y se desarrollan con ms dificultad en lugares con viento que en zonas protegidas.

7. 8. 9. 10.

CAPITULO

TRANSPORTE EN EL FLOEMA
Amparo Garca Luis y Jos Luis Guardiola
1. El floema como sistema conductor. 2. Estructura del floema. 3. Sustancias transportadas en el floema. 4. El movimiento de fotoasimilados. Fuentes y sumideros. 5. Mecanismo de transporte. 6. Longevidad e inactivacin de los t u b o s cribosos.

1.

EL FLOEMA COMO SISTEMA CONDUCTOR

La necesidad de un sistema de transporte a larga distan cia para el movimiento de las sustancias orgnicas es consecuencia de la especializacin funcional. En los or ganismos fotosintticos ms primitivos, unicelulares o lalfitos. todas las clulas realizan la fijacin fotosinttica del carbono por lo que los lugares de sntesis y de utilizacin estn muy prximos y el transporte no repreNenta un problema. En las plantas vasculares, por el contrario, los fotoasimilados producidos en las hojas vase Captulo 11) se transportan a otros rganos (fru tos, races y zonas de almacenamiento) a distancias que oscilan entre unos centmetros y varias decenas de me tros. Ni los procesos de difusin, ni el transporte clula a clula permiten mover con eficacia las sustancias a distancias tan considerables. En la cuanta en que este transporte tiene lugar, solamente es posible si los solu tos recorren aquellas distancias arrastrados por el agua en el lumen de conductos especializados, al igual que los elementos minerales absorbidos por las races se .ransporlan en sentido acrpeto en los vasos del xilema arrastrados por la corriente transpiratoria, o la glucosa -e distribuye en los organismos animales en el plasma de la sangre.

la corteza del leo en la zona del cmbium vascular, y este autor comprob que la eliminacin de un anillo de corteza alrededor de la base del tallo no tiene un efecto inmediato en el transporte ascendente de agua en el xi lema. por lo que la planta no se marchita, al mismo tiempo que provoca un hinchamienlo caracterstico de la corteza en la regin inmediatamente por encima del anillado (Fig. 5-1). En 1928, Masn y Maskell demostraron que este tra tamiento interrumpe el transporte baspeto de azcares (fundamentalmente sacarosa) que tiene lugar en la capa ms interna de la corteza, constituida por el floema se cundario. lo que provoca la acumulacin de carbohidra tos por encima de la regin anillada y su agotamiento por debajo de ella. Como Hartig haba demostrado que los elementos cribosos forman un conducto celular con tinuo que, cuando se corta, secreta un fluido con un contenido en azcares de hasta el 33%, y stos son nu merosos en el floema, se supuso que el transporte tiene lugar en su lumen. Estas observaciones permitieron establecer la fun cin del floema en el transporte de los azcares y otras sustancias orgnicas y minerales, y determinar algunas de las caractersticas del transporte, como son: la existencia de un conducto constituido por clu las vivas; la elevada concentracin de azcares en la solu cin de transporte; la presin positiva, superior a la atmosfrica, a la que se encuentra ese contenido; y el sentido baspeto del transporte, opuesto a la co rriente transpiratoria, en la base del tallo, extremos que han sido confirmados posteriormente uti lizando tcnicas ms precisas.

1.1.

Los experimentos de anillado permitieron establecer que los fotoasimilados se transportan en el floema

Los estudios sobre el transporte de los fotoasimilados -c remontan a los experimentos de anillado realizados por M. Malpighi a mediados del siglo XVII. En el tron co y las ramas de las plantas leosas es factible separar

65

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Figura 5-1. A) Diagrama de los experimentos de Malpighi. La separacin de un anillo de corteza en el tallo o la base de una rama de una planta leosa (izquierda) interrumpe el transporte baspeto de nutrientes y hormonas provocando la prolifera cin de los tejidos inmediatamente por encima del corte (derecha). B) En la prctica agrcola, esta operacin, denominada anillado, se realiza con cuchillas, c o m o la mostrada en la fotografa, que con un corte circular eliminan un anillo de corteza de la anchura deseada. La acumulacin de carbohidratos en la porcin distal de la rama respecto al corte aumenta el cuajado y el crecimiento del fruto. Si la anchura del anillo no es excesiva, el callo cicatricial que se forma a partir de la parte superior permite la regeneracin de los tejidos eliminados restableciendo las conexiones vasculares. C) Aspecto de una rama de melocotonero mostrando el leo intacto en la regin recin anillada. Inmediatamente sobre el anillo se aprecia la cicatriz del anillado realizado el ao anterior.

1.2.

Las tcnicas autorradiogrficas demuestran que el transporte se realiza en los elementos cribosos

La funcin de los tubos cribosos en el transporte de fotoasimilados es una conclusin lgica de los experi mentos descritos, pero no queda demostrada de un modo fehaciente y, durante algn tiempo, fue cuestio nada por consideraciones anatmicas y ultraestructurales. Su dimetro, que normalmente no supera los 10 /mi. es considerablemente menor que el de los elementos traqueales o los vasos sanguneos de los animales, lo que, unido a la presencia de citoplasma, aumenta consi derablemente la resistencia al movimiento de los Hui dos en su lumen y reduce su capacidad de transporte. Adems, en las primeras observaciones ultraesiructurales, las placas cribosas se mostraban obturadas por calo sa y diversos componentes citoplasmticos, lo que re sulta incompatible con la funcin propuesta. La demostracin de que el transporte tiene lugar en el lumen fue posible con la disponibilidad de marcadores radiactivos a partir de la dcada de los cuarenta, me diante el uso de tcnicas autorradiogrficas. Despus de la exposicin de una hoja durante un tiempo corto a una

atmsfera con l 4 C0 2 , los fotoasimilados marcados que se transportan en el peciolo o el tallo se inmovilizan mediante una congelacin rpida (p. cj.. sumergiendo el tejido en nitrgeno lquido) y se visualizan incubando secciones ultrafinas del tejido con una capa de emulsin fotogrfica (Fig. 5-2). Si el tiempo transcurrido desde la presentacin del l 4 C0 2 hasta la fijacin es suficiente mente corto, la radiactividad se localiza exclusivamen te en los elementos cribosos (y en sus clulas de com paa), demostrando as su funcin como canal de transporte de los fotoasimilados. Cuando el tiempo de transporte se prolonga, la radiactividad se encuentra tambin en las clulas del parnquima en la vecindad de los elementos cribosos. Adems de su funcin en el transporte longitudinal a larga distancia, los elementos cribosos proporcionan fotoasimilados y otras sustancias a los tejidos que los rodean, lo que permite el manteni miento de sus funciones vitales. Por ltimo, el sellado de las placas cribosas con calo sa que se apreciaba en las primeras observaciones ultraestructurales, se considera un artefacto provocado por la manipulacin de las muestras. Los elementos cri bosos son estructuras muy lbiles y extremadamente sensibles a cualquier manipulacin, que provoca rpi-

Transporte en el floema

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I,

Seccin longitudinal

Figura 5-2. Demostracin microautorradiogrfica del :ransporte en el lumen de los tubos cribosos del tallo de Vicia faba. Tras la exposicin de una hoja a una atmsfera con , 4 C0 2 durante 35 minutos, los fotoasimilados radiacti vos (puntos negros) se localizan nicamente en el lumen de os tubos cribosos. Reproducido de Eschrich, W. y Fritz, F. 1972). (En Microautoradiography and Electrn Prob Analysis. Their Application to Plant Physiology. Luttge, U. ed.), Springer Verlag.)

dos cambios degenerativos y prdida de su funcionali dad. Esta labilidad hace muy difcil las investigaciones sobre su funcionamiento y la caracterizacin de su ultraestructura. No obstante, la mejora de las tcnicas de microscopa electrnica ha permitido establecer que, en condiciones naturales, los poros de las placas cribosas isln normalmente abiertos.
Figura 5-3. Placa cribosa en la pared de separacin de dos elementos cribosos. A) Vista frontal de una placa cri bosa de Cucumis mel al microscopio ptico. B) Seccin transversal de una placa cribosa de Cucrbita mxima ob servada con microscopio electrnico. En la preparacin, fijada por inmersin en nitrgeno lquido, se observan los poros rodeados por un depsito de calosa pero abiertos y libres de protena floemtica, que se encuentra en el lu men celular en forma dispersa. Se observan plastos con almidn en los elementos de los tubos. Reproducido de Anderson, R. y Cronshaw, J., J Ultraestr Res, 29:50-59, 1970.

2.

ESTRUCTURA DEL FLOEMA

La presencia de elementos cribosos es la caracterstica distintiva del floema. Junto a stos se encuentran, en proporcin variable, clulas parenquimticas, fibras y, en algunas especies, laticferos. Solamente los elemen tos cribosos estn implicados directamente en el trans porte. No obstante, algunas clulas parenquimticas estn estrechamente relacionadas con los elementos cri bosos, interviniendo en la regulacin de su metabolis mo y en la carga de los fotoasimilados. En el floema de las angiospermas. el canal de trans porte es el tubo criboso, serie longitudinal de elemen tos cribosos unidos por sus paredes terminales, profun damente perforadas formando las placas cribosas (Fig. 5-3). Cada una de las clulas del tubo criboso recibe el nombre de elemento de los tubos. En el floema prima rio. el tubo criboso se forma a partir de los elementos del procambium. y su diferenciacin procede en sentido acropeto de modo gradual hasta la inmediata vecindad

de los meristemos apicales. En el floema secundario, los tubos cribosos se originan por la diferenciacin si multnea de una serie longitudinal de derivadas fusifor mes del cmbium. que se extienden del pice del tallo y las hojas hasta el extremo de la raz. Caractersticamen te. los elementos de los tubos tienen entre 100 y 500 /mi de longitud y 5 a 20 fim de espesor. En las gimnospermas y las pteridfitas, los elemen tos cribosos, notablemente alargados, no estn ordena-

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

dos en filas. Estos elementos, que reciben el nombre de clulas cribosas. estn inlerconeclados por reas cribosas en las paredes laterales adyacentes (Fig. 5-4). En el sistema axial de la planta (tallos, races, pecio los y pednculos), los tubos cribosos se ordenan parale lamente respecto al eje de los rganos. En el floema secundario del tallo de las angiospermas. los tubos cri bosos representan entre el 20 y el 80 % de la seccin transversal del tejido. En los rganos laterales (hojas y frutos), los tubos cribosos forman con frecuencia un re tculo intensamente anastomosado. En las hojas, los te jidos vasculares se asocian a otros tipos celulares, for mando las venas, y frecuentemente estn rodeados por una o varias filas de clulas muy compactas que consti tuyen la vaina del haz. La distancia intervenal tiene un valor medio de 130 /nn. lo que facilita el transporte des de las clulas del mesfilo a los elementos cribosos.

2.1.

La estructura de los elementos cribosos est adaptada para el transporte

Observados con el microscopio electrnico, los ele mentos cribosos parecen casi desprovistos de conteni do. en marcado contraste con la estructura rica en orgnulos de las clulas parenquimticas vecinas. Esta estructura, aparentemente muy simple, es el resultado de un proceso de diferenciacin a partir de las derivadas

del cambium que resulla en su adaptacin para el flujo de una solucin en sentido longitudinal. La diferenciacin de esta estructura tiene lugar en una secuencia bien definida. Las derivadas del cam bium tienen un ncleo prominente, abundantes mitocondrias, plastos, ribosomas y dictiosomas, un retculo endoplsmico bien desarrollado y una vacuola clara mente distinguible rodeada por el tonoplasto. El primer signo de diferenciacin es la presencia de plasmodesmos muy destacados en las regiones en que se formarn reas cribosas. Los poros se forman por el ensancha miento gradual de las punteaduras, que se rellenan tran sitoriamente con calosa (/?l-3 glucano), mientras la pa red se engruesa considerablemente por el depsito de capas ricas en celulosa con propiedades refractivas ca ractersticas (capa nacarada). El tonoplasto se degra da, por lo que desaparece la vacuola. Finalmente se abren los poros por la disolucin de la calosa, degenera el ncleo y desaparecen los dictiosomas y los ribosomas. Los elementos cribosos maduros carecen, por tanto. de muchas de las estructuras celulares, habiendo perdi do la informacin gentica y la capacidad de sntesis de protenas. De pared a menudo engrosada, pero nunca lignificada, tienen plasmalema y conservan mitocondrias modificadas, plastos y algo de retculo endopls mico liso, que se sita siempre en posicin parietal. En la mayor parte de las angiospermas se encuentran pre sentes distintas formas filamentosas o globulares de una protena denominada protena P; esta protena no se encuentra en gimnospermas ni en ciertas monocotiledneas (Fig. 5-5). Caracterstica distintiva de los elementos cribosos maduros, y de la que deriva su nombre, es la presencia de reas cribosas. regiones con numerosos poros de gran dimetro (Fig. 5-3). Son particularmente promi nentes en las paredes transversales de los elementos de los tubos cribosos (placas cribosas) en que los poros, de un dimetro entre 0.1 y 5 im. ocupan cerca del 50 % de la superficie de la pared. Aunque en algunas prepara ciones estos poros estn obturados por calosa hoy se considera que estn normalmente despejados, como se indic anteriormente, permitiendo la continuidad citoplsmica entre los elementos cribosos contiguos.

2.2.

Clulas parenquimticas especializadas se asocian a los elementos cribosos

Figura 5-4. reas cribosas en las paredes laterales de las clulas cribosas del floema inmaduro de la raz de Picea abies. Algunas de ellas todava presentan el ncleo y pe queas vacuolas. Reproducido de Sieve Elements. Comparative Structure, Induction and Development, Behnke, H. D. y Sjolund, R. E. (eds.), Springer-Verlag, 1990, por cortesa del Dr. Schulz.

Los elementos de los tubos normalmente se asocian a clulas parenquimticas especializadas denominadas clulas de compaa, que se originan mediante una di visin longitudinal desigual de las iniciales del cam bium. previa a la diferenciacin del elemento del tubo. Estas clulas, de citoplasma muy denso, numerosas mitocondrias y con todos los orgnulos y estructuras subcelulares (Fig. 5-5), estn unidas al elemento del tubo correspondiente por numerosas conexiones plasmods-

Transporte en el floema

69

La interdependencia entre ambos tipos de clulas se re fleja en su muerte simultnea, mientras las clulas parenquimticas vecinas sobreviven, por lo que es frecuente considerarlas como un complejo tubo criboso-clula de compaa. Las clulas de compaa desempean funciones metablicas, como la sntesis de protenas, que no puede realizar el elemento criboso. Adems, es probable que sus numerosas mitocondrias proporcionen ATP a los elementos cribosos. En las venas menores de las hojas, las clulas de compaa tienen un dimetro mayor que los tubos cribosos, y se cree que estn impli cadas en la carga de Ibtoasimilados; en el tallo, por el contrario, las clulas de compaa son mucho menores que los elementos del tubo. En gimnospermas. estas funciones las desempean las clulas albuminosas. A diferencia de las clulas de compaa, no proceden de la misma clula madre que los elementos cribosos.

2.3.
Figura 5-5. Micrografia electrnica de la seccin longitudi nal de elementos de los tubos (SE) y clulas de compaa (CC) de Acerpseudoplatanus. Los poros de la placa cribosa estn obturados por calosa, mientras que la protena floemtica est dispersa en el lumen de los elementos cribosos. En stos y en las clulas de compaa, de citoplasma ms denso, se observan plastos (P), mitocondrias (M) y membranas de retculo endoplsmico liso. Reproducido de Wooding, F. B. P. en Phloem, Oxford University Press, 1971.

En las venas menores de las hojas hay diversos tipos de clulas de compaa

micas, ensanchadas por el lado del elemento criboso y con varias ramificaciones por el lado de la clula de compaa (Fig. 5-6). Estos plasmodesmos permiten el intercambio rpido y eficaz de sustancias entre las dos clulas.

Figura 5-6. Plasmodesmo ramificado entre un tubo criboso (ST) y su clula de compaa. Reproducido de Russin, W. A. y Evert, R. F., Amer J Botany 72:1232-1247, 1985.

En las venas menores de las hojas, se distinguen varios tipos de clulas de compaa que difieren en su ultraesliuctura y en la frecuencia de conexiones plasmodsmicas con las clulas vecinas, excepcin hecha del tubo criboso con el que siempre estn profusamente conecta das. Las clulas de compaa ordinarias son de paredes lisas, tienen varias vacuolas de pequeo tamao y cloroplastos con membranas tilacoidales (Fig. 5-7). Las clulas de transferencia son un tipo especializa do de clulas de compaa que se caracteriza por la pre sencia de numerosas invaginaciones en la pared celular. especialmente en las zonas que no estn en contacto con el elemento criboso (Fig. 5-8). Estas invaginacio nes aumentan considerablemente la superficie de la membrana plasmtica y, de este modo, la capacidad de tales clulas para acumular sustancias desde el apoplasto. Por lo dems, sus caractersticas citolgicas son si milares a las de las clulas de compaa ordinarias. Estos dos tipos de clulas de compaa presentan muy pocas conexiones plasmodmicas con las clulas parenquimticas vecinas, por lo que el complejo tubo criboso-clula de compaa no posee conexin simplstica con las restantes clulas del mesfilo. Las clulas intermediarias, de mayor tamao que las clulas de compaa ordinarias, presentan numero sas conexiones plasmodsmicas con las clulas vecinas, en particular con las de la vaina del haz, de tal modo que se establece una continuidad simplstica entre las clulas del mesfilo y los elementos conductores. Otras caractersticas de estas clulas son sus paredes lisas, la presencia de numerosos laberintos de retculo endopls mico y la ausencia de cloroplastos y de granos de almi dn. La configuracin de las venas menores en una espe-

70

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Figura 5-7. Micrografa de la seccin transversal de una vena menor de la hoja de Beta vulgaris. Las clulas de com paa (CC), de mayor tamao que los elementos cribosos (S), tienen un citoplasma denso en el que se observan cloroplastos y paredes de espesor uniforme. Se observan en la preparacin clulas del parnquima floemtico (PhP) y del parnquima vascular (VP). La vena est rodeada por las c lulas de la vaina (BS). Reproducido de Evert, R. F. y Mierwa, R. J 1986. (En Cronshaw, J., Lucas, W. J. y Giaquinta, R. T. (eds.), Phloem Transpon. Alan R. Liss, New York.)

Figura 5-8. Micrografa electrnica de una seccin trans versal del floema de la hoja de remolacha azucarera. Las clulas de compaa (CC), de mayor tamao que los ele mentos de los tubos (SE), tienen numerosas invaginacio nes en las paredes. Reproducido de W o o d i n g , F. B. P. en Phloem, Oxford University Press, 1971.

ci guarda relacin con su clasificacin taxonmica: adems, esta caracterstica est asociada con el modo de incorporacin de los azcares de transporte al lubo criboso. Las clulas intermediarias se encuentran en es pecies de familias poco evolucionadas {Cucurbitacecie. Hydrongeaeeae y Lamiaceae, entre otras). En stas, los azcares se incorporan al tubo criboso por el simplasto (vase ms adelante) y los azcares de la familia de la rafinosa representan entre el 20 y el 8 0 % del total transportado. En las especies en que el complejo tubo criboso - clula de compaa no posee conexiones simplsticas. la sacarosa, que es la forma casi exclusiva del transporte de azcares en estas especies, se incorpora a aqul desde el apoplasto. Se ha descrito la presencia de clulas de transferencia en familias originarias de zonas templadas y ridas en que predominan las plantas her bceas. entre ellas algunas con numerosas especies cul tivadas (Fabaceae, Asteraceae, Balsaminaceae, Boraginaceue y Geraniaceae, entre otras). El aislamiento simplslico del complejo tubo criboso-clula de com-

paa y la formacin de clulas de transferencia se han producido evolutivamente en esta secuencia. La relacin entre la configuracin de las venas meno res y la taxonoma no es estricta, y en la familia Scrophulariaceae se encuentran especies con los tres tipos de configuracin descritos. Adems, en una misma planta pueden encontrarse al mismo tiempo clulas de transferencia y clulas intermediarias.

3. SUSTANCIAS TRANSPORTADAS EN EL FLOEMA


La naturaleza de las sustancias que se transportan en el floema se ha dilucidado analizando su contenido. Como las sustancias son arrastradas en el lumen del tubo cri boso por un flujo de agua, toda sustancia en solucin ser transportada. Para determinar su composicin, es necesario disponer de un volumen suficiente de fluido de floema no contaminado.

Transporte en el floema

71

3.1.

El fluido del floema se obtiene cortando los tubos cribosos

mo el contenido de los tubos cribosos se encuentra etido a una presin positiva, se libera cuando aqu- se cortan. De este modo, es posible obtener un voen apreciable de fluido del floema en Fraxinus sp., as sp., diversas cucurbitceas y muchas palmas. que tal exudacin se mantiene durante algunas horas aun das (Fig. 5-9). En otros casos, el volumen de ido obtenido es muy pequeo debido al sellado rpi do de los tubos cortados por calosa. Este sellado puede itarse aplicando un agente quelante (p. ej., EDTA) en i superficie de corte, ya que la sntesis de calosa precilones calcio. De este modo, aumenta considerablelente el volumen de exudado obtenido. El principal inconveniente de este procedimiento de .ncin es que el Huido recolectado est contamina do por el contenido de otras clulas que resultan tam-ii afectadas por el corte. Adems, el corte del tubo boso causa la extravasacin rpida de su contenido y, no consecuencia, una disminucin abrupta de la prc :n de turgencia, lo que provoca la entrada de agua . sde las clulas vecinas y la dilucin de su contenido.

tremo del estilete contina exudando durante varios das, obtenindose as fluido sin contaminar de un nico elemento criboso (Fig. 5-10). La insercin del estilete no desencadena el mecanismo de sellado de los tubos cribosos. El volumen de fluido que se obtiene de este modo es de hasta 5 //L por hora, cantidad muy pequea desde el punto de vista analtico pero considerable des de el punto de vista celular. Representa aproximada mente 50.000 veces el volumen de un elemento criboso. lo que significa que ste se rellena diez veces por se gundo! Este valor demuestra la eficacia de los elemen tos cribosos para el transporte de un fluido en sentido longitudinal.

3.3.

Composicin del fluido del floema

3.2.

Los fidos permiten obtener fluido de floema sin contaminar

E^ posible obtener fluido del floema sin contaminar por el contenido de las clulas vecinas con la colaboracin :n oluntaria de los fidos. Estos insectos insertan su es tilete (piezas bucales) directamente en el interior de un elemento criboso, y se alimentan del Huido del floema jue circula pasivamente por su tubo digestivo. Si se jorta el estilete evitando que el fido se mueva, el cx-

La composicin del fluido del floema es muy variable. dependiendo de la especie, edad y estado fisiolgico del tejido que se analiza. Presenta, sin embargo, una serie de caractcristicas comunes en todos los casos, como son: un pH prximo a 8, superior al pH del citosol de las clulas del parnquima y mucho mayor que el pH del fluido de xilema, que oscila entre 5 y 6; un elevado contenido en materia seca, normalmente entre el 10 y el 25 %; un bajo peso molecular de las sustancias disuel tas. que determina un potencial osmtico muy negativo de la solucin, entre I y 3 MPa; y una viscosidad elevada, hasta dos veces superior a la del agua. Los azcares son el componente mayoritario del Hui do del floema, ya que representan normalmente entre el 80 y el 9 0 % de la materia seca total. En cantidades menores se encuentran protenas, aminocidos y ami das. cido mlico y diversos aniones y cationes inorg nicos. Tambin se encuentran fosfatos de nucletidos, fundamentalmente ADP y ATP y. en concentraciones muy bajas, diversas hormonas vegetales, incluyendo auxinas, citoquininas, giberelinas y cido abscsico. (Cuadro 5-1). El marcado isotpico ha permitido de mostrar que la mayor parte de estas sustancias se trans porta realmente en el lumen de los tubos cribosos. pero en algunos casos son componentes que se movilizan como consecuencia del corte del tubo criboso. Se cree que las protenas del exudado, que incluyen varias enzi mas y, mayoritariamente. protena P, no se mueven en el tubo criboso intacto.

3.3.7.

Los azcares del floema no tienen carcter reductor

Figura 5-9. Exudacin de fluido de floema en el tallo de Ricinus communis provocada por una incisin en la crte la. Esta exudacin se produce aun cuando el tallo presenta un dficit hdrico acusado (fotografa de la derecha), lo que prueba la capacidad de los elementos cribosos para mante ner la turgencia en estas condiciones. Reproducido de Milburn, J. A., Planta, 117:303-319, 1974.

Sacarosa es normalmente el azcar ms abundante, en ocasiones el nico, del fluido del floema. Se encuen tran, asimismo, cantidades variables de azcares de la serie de rafinosa (rafinosa, estaquiosa y verbascosa; Fig. 5-11). Desde el punto de vista estructural y biosinttico, estos azcares derivan de la sacarosa por la adi cin de molculas de galactosa, y son particularmente

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Figura 5-10. Extremo del canal maxilar de un fido en el lumen de un tubo criboso (A) y exudacin en el extremo de un estilete cortado (B). Reproducido de Z i m m e r m a n n , M. H. y Milburn, J . A. en Transport in Plants. I. Phloem Transport Encyclopedia o f Plant Physiology, New Series, Vol.1. Springer-Verlag, Berlin, 1975 y Kollmann, R. y Dorr, I. Zeitschrift Pflanzenphysiology, 55:131-141, 1966.

abundantes en las plantas con clulas intermediarias en las venas de las hojas; en las cucurbitceas, la estaquiosa es el azcar mayoritario en el floema. En algunas familias se transportan, junto a sacarosa, alditoles como manitol (en la familia Oleaceo), sorbitol (especies le osas de la familia Rosaceae) o dulcitol (Cetastraceae). Una caracterstica de estos compuestos es su carcter no reductor, ya que los carbonos anomricos (grupos aldehido y cetona) estn combinados formando un enla ce glucosdico. No se encuentran azcares reductores, y se considera que las pequeas cantidades de fructosa y glucosa detectadas a veces en el Huido del floema pro ceden de la contaminacin de la muestra o de la hidrli sis de la sacarosa durante la extraccin. No se conoce la razn por la que estos azcares no se incorporan a los tubos cribosos.

solucin se equilibra elctricamente por la contribucin de aniones orgnicos, particularmente malato. El catin ms abundante es invariablemente potasio; su concen tracin oscila entre 50 y 100 mM. por lo que contribuye significativamente al potencial osmtico del fluido. En concentraciones menores se encuentran magnesio y so dio. Fosfato y cloruro son los aniones ms abundantes. La concentracin de algunos iones, como calcio y hierro, es siempre muy baja. El ion nitrato, que es la forma en que se transporta el nitrgeno en el xilema de muchas plantas, no se incorpora al floema.
3.3.3. El nitrgeno se transporta de aminocidos en forma

3.3.2.

El potasio es el elemento ms abundante

mineral

En todos los casos se encuentran cantidades variables, pero significativas, de cationes y aniones inorgnicos. El contenido en cationes es siempre ms elevado, y la

En el fluido del floema se encuentra gran nmero de aminocidos. Los ms abundantes son glutamato o aspartato. bien en forma libre o como amidas (glutamina y asparagina). sta es tambin la forma en que se trans porta el nitrgeno en el xilema de muchas especies. El contenido en aminocidos del fluido del floema vara ampliamente con la especie y el estado de desa rrollo. Normalmente, su concentracin oscila entre el

Transporte en el floema Cuadro 5-1. Composicin qumica y caractersticas del exudado de floema de Ricinus commun/'sy de Yucca flaccida. Tomado de Hall, S. M. y Baker, D. A., Planta, 106:131-140, 1972; y de Van Die, J . y Tammes, P. M. L. En: Z i m m e r m a n n , M. H., y M i l b u r n , A. J. (eds.), Transport in Plants. I. Phloem Transport. Encyclopedia of Plant Physiology, New Series, Vol. 1. Springer-Verlag. Berln, pp. 196-222, 1975 Yucca flaccida 17.1-19.1 15.0-18.0 0.4-0.8 Trazas 0.05-0.08 Tra/as 0.05-0.08 ca. 7.0

73

Ricinus Materia seca total (9 i Sacarosa (%) Azcares reductores (glucosa fructosa) (%) Hexosas-fosfato Aminocidos y amidas (molar) Urcidos Protena total (',?) cidos orgnicos (mEq L~ ') Fosfato (mEq L " ' ) Sulfato (mKq I." 1 ) Cloruro (mEq L _ l ) Nitrato (mEq L ~ ' ( Bicarbonato (mEq L ~ ' ) Potasio (mEq - L~ ') Sodio (mEq L " ' ) Calcio (mEq - L ~ ' ) Magnesio (mEq L~ ') Amonio (mEq L _ 1 ) Auxinas (milimolar) Cibcrclinas (milimolar) Citoquininas (milimolar) ATP (milimolar) pH Conductividad Potencial osmtico Viscosidad

communis

10-12.5 8.0-10.6 Ausentes 0.037

0.15-0.22 30-47 7.4-11.4 0.5-1.0 10-19 Ausente 1.7 60-122 2-12 1.0-4.6 9-10 1.6 0.6 x 10 4 0.67 x 10 s 0.52 x I 0 ~ 4 0.40-0.60 8.0-8.2 1.32 mS - m " 1 (a 18 O - 1 . 4 2 a - 1 . 5 2 MPa 1.34 x I 0 ~ 3 N - s - m " 2 (a 20 C)

8.0-8.2

0.2 y el 0.5 %, pero durante la senescencia de las hojas ~aedc aumentar hasta el 5 %.

3.3.4. En el fluido del floema se encuentran sustancias no producidas por las plantas Algunas molculas orgnicas de sntesis se incorporan \ tubo criboso y se distribuyen de este modo por la planta. Entre ellas se encuentran sustancias con efecto -erbicida o plaguicida que, por el hecho de transportar. en el floema, reciben el nombre de sistmicos. Tambin se han detectado partculas virales. El floees, en muchos casos, la va de expansin de los virus rn la planta.

4. EL MOVIMIENTO DE FOTOASIMILADOS. FUENTES Y SUMIDEROS ransporte en el floema tiene lugar desde las fuentes > s sumideros. Las fuentes son rganos en que los azcares se incor.iii al tubo criboso. Ello implica la sntesis de formas :e iransportc, comnmente sacarosa, y la disponibili

dad de carbohidratos en cantidad superior a la necesaria para cubrir las necesidades metablicas. stos pueden proceder directamente de la fotosntesis (p. ej., en las hojas adultas) o de la movilizacin de reservas acumu ladas anteriormente. Los sumideros son rganos importadores de car bohidratos, en los que se produce la salida de azcares del tubo criboso. Estos azcares pueden ser utilizados en el metabolismo y el crecimiento (sumideros consun tivos) o almacenarse como reservas (sumideros de al macenamiento). En algunos sumideros, las reservas tie nen la misma estructura qumica que el azcar de transporte. Ejemplos caractersticos son muchos frutos, los entrenudos de la caa de azcar y la raz napiforme de remolacha, que acumulan grandes cantidades de sa carosa. En otros casos, las sustancias acumuladas son diferentes a la forma de transporte, y pueden ser de me nor peso molecular (glucosa es el azcar ms abundante del fruto de la vid) o de peso molecular ms elevado (almidn es la forma de almacenamiento en los tu brculos de patata y en los cotiledones y el endospermo de muchas semillas). El hecho de que, en algunos casos, el transporte ten ga lugar hacia rganos con una concentracin de saca rosa superior a la de los rganos fuente (las hojas) de muestra que. ms que la concentracin, es la capacidad de acumular o tomar azcares de los tubos cribosos el

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Fundamentos CH.OH HOCH HOCH HCOH HCOH CH2OH D-manitol

de fisiologa

vegetal CH2OH HCOH HOCH HCOH HCOH CH?OH D-sorbitol

I I

Ajugosa

>

Figura 5-11. Estructura qumica de los azcares y algunos hexitoles (manitol y sorbitol) transportados en el floema. Caracterstica comn de estas sustancias es su carcter no reductor.

La transicin de sumidero a fuente ha sido bien estu diada en las hojas. En las hojas simples de las dicotile dneas, se inicia cuando la hoja no ha completado an su expansin. Inicialmente, las regiones marginales de la hoja, de ms edad, comienzan a exportar azcares, mientras que las zonas bsales, ms jvenes, actan to dava como sumideros. En estos momentos, estas regio nes reciben azcares tanto desde las zonas marginales como, por el pecolo, del resto de la planta. Cuando la hoja alcanza una superficie de aproximadamente la mi tad de la definitiva, se completa la transicin y se con vierte en exportadora neta. Esta transicin implica cam bios bioqumicos y estructurales. Aumenta la actividad de las enzimas que sintetizan sacarosa y disminuye la de las enzimas degradativas. Por tanto, se produce un aumento de la concentracin de ese azcar. Al mismo tiempo, se produce un cambio en el comportamiento del floema, que acumula sacarosa en vez de liberarla, lo que coincide en muchos casos con el aislamiento simplslico de los tubos cribosos. Un proceso similar ocu rre en la raz napiforme de muchas plantas bienales. Durante el primer ao, de crecimiento vegetativo, estas plantas acumulan carbohidratos de reserva en la raz. Durante el segundo ao. en que tiene lugar la floracin y fructificacin, los carbohidratos de la raz se movili zan hacia el tallo. Estos cambios en el comportamiento se traducen en cambios en el sentido del transporte. En el tallo de las plantas bienales, es baspeto (del tallo hacia la raz) du rante el primer ao y acrpeto (de la raz hacia el tallo) durante el segundo. En el pecolo de las hojas se obser va un cambio similar en el sentido del transporte ligado al desarrollo, inicialmente hacia la lmina y posterior mente hacia el tallo. No existe, por tanto, una polaridad en el transporte del floema.
4.2. Las relaciones entre fuentes y sumideros dependen de la distancia y las conexiones vasculares

factor que determina que un rgano se comporte como fuente o como sumidero.
4.1. La posicin de fuentes y sumideros vara durante la ontogenia

Durante las etapas iniciales de su formacin, todos los rganos actan como sumideros, y su desarrollo depen de de los carbohidratos que reciben del resto de la plan ta. Posteriormente, algunos rganos presentan un cam bio en su conducta y se comportan como fuentes, convirtindose en exportadores netos de carbohidratos. Otros rganos, por el contrario, no pasan nunca a fuen te. Son los llamados sumideros irreversibles. Los frutos son un ejemplo caracterstico de este comportamiento. A pesar del elevado contenido en sacarosa de muchos de ellos, sta no puede ser recuperada por la planta ma dre en ninguna circunstancia.

El movimiento de los l'otoasimlados en la planta est determinado por la situacin de las fuentes y los sumi deros. En general, los sumideros son alimentados desde las fuentes ms prximas; as, los pices caulares y las hojas en desarrollo reciben la mayor parte de los metabolitos desde las hojas situadas en la regin apical del vastago, mientras que las races los reciben desde las hojas ms bsales. Las hojas situadas en las regiones centrales del tallo exportan tanto hacia el pice del mis mo como hacia las races (Fig. 5-12). Esto determina que el movimiento neto de los azcares sea acrpeto en las regiones apicales y baspeto en las regiones b sales. Los flujos de transporte cambian durante la on togenia de la planta al hacerlo la posicin de las fuen tes y los sumideros, y pueden ser manipulados experimentalmente. De este modo, la ablacin de las hojas de la regin apical del tallo aumenta el transpor-

Transporte en el floema

75

Figura 5-12. Direcciones predominantes del transporte de os fotoasimilados en la planta. Durante el desarrollo vege tativo, el transporte tiene lugar hacia los pices del tallo y la raz. Durante la fructificacin, los frutos acumulan la -nayor parte de los azcares exportados desde las hojas arximas.

Figura 5-13. Distribucin de la radiactividad en las hojas en desarrollo del pice del tallo de tabaco despus de la presentacin de una hoja adulta (de color negro en la figura) con U C 0 2 . El grado de sombreado indica la canti dad relativa de " C acumulado. Las hojas, numeradas se gn el orden en que se formaron, se han dibujado sobre la espiral gentica; obsrvese la filotaxis 3/8. Reproducido de Shiroga ef al., Can J Botany 39:855-864, 1961.

te hacia el pice desde las hojas situadas en posicin ms basal. El movimiento de los fotoasimilados es facilitado por la existencia de conexiones vasculares directas entre los rganos. Como en el tallo los tubos cribosos estn pr jimos a la superficie y orientados longitudinalmente respecto al eje del mismo, las relaciones nutricionales son ms intensas entre los rganos situados en el mismo ortstico que entre rganos ms prximos pero situa dos en ortsticos distintos. Un ejemplo de la importan cia de este factor en el transporte se presenta en la Fi gura 5-13. Cuando se presenta una hoja adulta prxima al pice del tallo con "C0 2 , los azcares marcados se acumulan en los primordios foliares del mismo ortsti co y de ortsticos vecinos, pero apenas en los primor dios formados en la parle opuesta del tallo.

4.3.

N o hay una relacin especfica entre fuentes y sumideros

Los elementos conductores del floema forman una red muy compleja que interconecta los distintos rganos de la planta. Junto a los flujos principales de transporte

descritos coexisten otros, normalmente de menor im portancia cuantitativa, pero que. en determinadas cir cunstancias, pueden convertirse en la ruta preponderan te del transporte. No existe una relacin especfica entre fuentes y sumideros, y un sumidero puede ser suminis trado simultnea o alternativamente desde varias fuen tes. El movimiento tangencial de los solutos en el tallo es posible por la existencia de interconexiones, denomina das anastomosis, que son particularmente abundantes en los nudos. Estas interconexiones permiten la transfe rencia lateral de sustancias entre haces conductores y tubos cribosos, lo que facilita el movimiento de un lado a otro de la planta. Normalmente, el transporte por las anastomosis es de pequea cuanta, pero aumenta con siderablemente cuando el transporte en sentido longitu dinal es bloqueado por alguna circunstancia (p. ej.. una lesin). Ello es esencial para la supervivencia de las monocotiledneas perennes (palmas), que no presentan crecimiento secundario y en las que el sistema conduc tor permanece funcional durante varias decenas de aos, pues permite paliar el bloqueo del transporte en una regin del tallo. Un hecho repetidamente observado y confirmado mediante la utilizacin de marcadores es que parte de

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

itoasimilados producidos en las hojas de la regin apical del tallo se transporta a la raz, al mismo tiempo que desde las hojas ms bsales se exportan fotoasimilados hacia el pice del tallo. En la regin central del tallo se produce, por tanto, el movimiento simultneo de sustancias en sentido opuesto (Fig. 5-14). Este transporte bidireccional ha sido muy estudiado en relacin con el mecanismo de movimiento de las sustancias en los tubos cribosos, aceptndose actualmente que tiene lugar por haces conductores o tubos cribosos diferentes, pero que en un tubo criboso todas las sustancias se mue ven en el mismo sentido.

4.4.

Los sumideros compiten por los fotoasimilados disponibles

La fotosntesis impone un lmite al desarrollo de la planta, y los sumideros compiten por una disponibili dad limitada, aunque no fija, de fotoasimilados. Una reduccin en el nmero de sumideros aumenta el trans porte de sustancias hacia los restantes, y es la base de prcticas hortcolas como el aclareo (la eliminacin de parte de los frutos en desarrollo aumenta la velocidad de crecimiento y el tamao final de los restantes) o el despuntado (al eliminar el pice de los brotes, se re duce el consumo de melabolitos en el desarrollo vege tativo, lo que favorece los procesos reproductivos como

el cuajado del fruto y la formacin de semillas). Por el contrario, la eliminacin de las flores y de los frutos en desarrollo aumenta la cantidad de metabolitos dis ponible para el desarrollo vegetativo de la planta y, de este modo, su velocidad de crecimiento y el porte de la planta. La distribucin de la materia seca (fotoasimilados fundamentalmente) entre los distintos sumideros se de nomina particin, parmetro de considerable impor tancia en la determinacin de la productividad de las especies cultivadas. La mayor productividad de los cul tivares ms modernos se debe a un aumento en la pro porcin de fotoasimilados acumulados en las partes aprovechables, normalmente los frutos y semillas, ms que a un aumento en la fotosntesis total de la planta, y este efecto es resultado de procesos de seleccin y me jora desarrollados mediante procedimientos empri cos. La comprensin de la regulacin de la particin facilitara, sin duda, el desarrollo de variedades pro ductivas. La particin de metabolitos entre los distintos rga nos depende, adems de los factores de posicin y dis tancia a las fuentes mencionadas anteriormente, de su fuerza como sumidero, que es la capacidad para atraer y acumular (o utilizar) metabolitos. No se conoce con precisin la naturaleza de los factores que determinan la fuerza de los sumideros, si bien hay pruebas de la impli cacin de factores anatmicos y metablicos. As. el

Sacarosa

t
En la regin central del tallo, sacarosa y fluorescena se transportan en sentido opuesto

Tubos .cribosos.

Obtencin del fluido de floema utilizando fidos Anlisis del exudado Algunas muestras con sacarosa Algunas muestras con fluorescena Algunas muestras con ambas sustancias

Fluorescena

Dentro de ubo criboso, los dos compuestos se mueven en el mismo sentido

Figura 5-14. A) D i s p o s i t i v o e x p e r i m e n t a l p a r a d e m o s t r a r el t r a n s p o r t e b i d i r e c c i o n a l en el f l o e m a . B) E x p l i c a c i n p a r a la p r e s e n c i a s i m u l t n e a d e a m b a s s u s t a n c i a s en el e x u d a d o d e u n e l e m e n t o c r i b o s o , c o m p a t i b l e c o n el t r a n s p o r t e u n i d i r e c c i o nal d e t o d a s las s u s t a n c i a s e n el m i s m o .

Transporte en el floema

77

tamao final del fruto en el manzano est directamente relacionado con el nmero de clulas del fruto, factor ste que se determina durante las fases iniciales de su ontogenia. Por otro lado, imitantes de maz que no sin tetizan almidn en el endospermo tienen granos de me nor tamao que las lneas normales. La fuerza como sumidero de los rganos vara con el tiempo y es modificada, en ocasiones drsticamente. por la presencia de sumideros alternativos en la planta. Este electo a veces es debido a un fenmeno de compe tencia por los metabolitos disponibles, pero tambin hay mecanismos de regulacin de naturaleza hormonal que permiten que un sumidero influya y controle otros sumideros. De este modo se explica la detencin del crecimiento de la raz en algunas especies, como tomate y pepino, cuando se inicia la fructificacin. Los sumideros tambin influyen en las fuentes, y un aumento en la demanda de fotoasi mi lados aumenta la fotosntesis en las hojas y la movilizacin de las reser vas, mientras que la eliminacin de los sumideros tiene el efecto contrario. El control de las fuentes por los su mideros implica distintas seales, como cambios en la turgencia, en los niveles de carbohidratos y de hormo nas. La particin de los fotoasimilados en la planta es un proceso regulado de modo complejo por la interaccin entre sumideros, de stos con las fuentes y. probable mente, por la va de transporte.

5.1.

La carga de los tubos cribosos puede tener lugar desde el apoplasto o por va simplstica

El movimiento de la sacarosa en las hojas, desde las clulas del mesfilo hasta el parnquima lloemtico, tiene lugar por los plasmodesmos a favor de un gradien te de concentracin. El paso de este punto al interior del tubo criboso precisa acoplamiento de energa, ya que la concentracin de los azcares es mucho mayor en el tubo criboso que en las clulas del mesfilo. Esta incor poracin puede tener lugar por los plasmodesmos. si guiendo la denominada ruta simplstica o, como alter nativa. es posible que la sacarosa sea liberada al apoplasto (paredes celulares), desde donde es incorpo rada al complejo tubo criboso-cclula de compaa (ruta apoplstica). Como se seal en el apartado 2.3, la ruta de incoiporacin est relacionada con la estructura de las clulas de compaa, el aislamiento simplstico del complejo tubo criboso-clula de compaa y la natura leza de los azcares transportados.

5.7.7.

La carga apoplstica implica dos procesos de transporte a travs de membranas

5.

MECANISMO DE TRANSPORTE

El movimiento de fotoasimilados en la planta compren de tres procesos: (i) En las fuentes, los azcares se transportan del lugar de sntesis a las venas menores donde se incorporan a los tubos cribosos. proceso que se denomina carga del floema. El transporte de los azcares hasta el haz conductor es un proce so a coila distancia que. en las hojas, rara vez implica un recorrido superior a tres o cuatro ve ces el dimetro de las clulas (varias dcimas de milmetro). En algunos rganos, este despla zamiento lateral puede ser de unos pocos cent metros. Los azcares y las sustancias incorporadas al tubo criboso son exportados en su lumen hacia los sumideros. Es un transporte a larga distancia. de hasta varios metros en ocasiones. En los sumideros se produce la descarga del floema, proceso inverso al de carga, y las sus tancias liberadas se incorporan a las clulas.

b)

c)

En la carga del floema por la ruta apoplstica. la mol cula de sacarosa ha de atravesar el plasmalema en dos ocasiones: al ser liberada al apoplasto y. de nuevo, al incorporarse al complejo tubo criboso-cclula de compa a (Fig. 5-15). No se conoce con precisin el lugar ni el modo de liberacin de la sacarosa al apoplasto. Por consideracio nes anatmicas, es probable que tenga lugar en la inme diata vecindad de los tubos cribosos, desde las clulas de la vaina o del parnquima floetntico, mediante un proceso de difusin facilitada estimulado por la presen cia de K* en concentraciones relativamente bajas. Des de el apoplasto. la sacarosa se incorpora al complejo tubo criboso-clula de compaa mediante un cotransportc con protones. En este proceso, el movimiento de protones a favor de su gradiente de potencial qumico proporciona la energa para el movimiento de sacarosa contra su gradiente de concentracin (al ser una mol cula sin carga, el gradiente de potencial qumico viene dado por el gradiente de concentracin). Diversas observaciones experimentales prueban que ste es el mecanismo probable de carga en especies como Vicia faba, Beia vulgas y Zea mays. en las que el complejo tubo criboso-clula de compaa no posee conexiones simplsticas y transporta sacarosa. En estas especies: a) Se encuentra sacarosa en el apoplasto de las ho jas. b) Cuando se aade sacarosa marcada al apoplasto de las hojas, este azcar se incorpora a los tubos

Estos procesos estn relacionados mccansticamcnte, pues la carga y la descarga de los tubos cribosos produ cen la fuerza para el movimiento del agua a larga dis tancia que tiene lugar en su lumen.

78

Fundamentos

de fisiologa

vegetal Clula de la vaina Elemento criboso

Clulas del mesfilo

Sacarosa

- ADP + Pi *- Sacarosa Clula de compaa

Figura 5-15. Modelo del mecanismo de carga apoplstica del floema. La sacarosa se difunde (linea de trazos) por el simplasto desde el mesfilo hasta las clulas de la vaina, donde se libera al apoplasto. De all, es incorporada al elemento criboso y la clula de compaa en contra de su gradiente de concentracin mediante un cotransporte con protones. El gradiente de protones necesario es producido por una bomba de protones (ATP-asa de membrana).

c)

cribosos y se exporta desde las hojas de modo similar a la sacarosa endgena. La aplicacin de cido paracloromcrcuribencenosulfnico (PCMBS), reactivo no permeante (y que, por tanto, no se incorpora al citoplasma) que bloquea el transporte de sacarosa a travs de las membranas, inhibe el transporte desde las hojas tanto de la sacarosa endgena como de la aplicada exgenamente (Fig. 5-16).

nosa, estaquiosa y otros azcares, de mayor peso mole cular. que pasaran por los plasmodesmos al tubo criboso pero no podran retornar al mesfilo. lo que requeri ra que el lmite de exclusin de los plasmodesmos entre las clulas de la vaina y las clulas intermediarias fuera inferior al valor normal (el lmite de exclusin de los plasmodesmos es normalmente del orden de 1000

Este comportamiento es compatible con la existencia de una etapa apoplstica en la carga del floema.

VICIA FABA

COLEUS BLUMEI

5.1.2.

En plantas con clulas intermediarias la carga es probablemente simplstica

CONTROL

En especies con clulas intermediarias como Coleas blumei, Ipomea tricolor y Cucrbita pepo, la incorpora cin de los oloasimilados en las venas menores y la exportacin desde las hojas es insensible a la aplicacin del inhibidor PCMBS (vase Fig. 5-16). lo que indica que los azcares producidos en la fotosntesis no se in corporan al tubo criboso desde el apoplasto. Como en estas especies las clulas intermediarias presentan nu merosas conexiones citopiasmticas con las clulas de la vaina, se supone que esla incorporacin tendra lugar por los plasmodesmos en el simplasto. No se conoce con certeza cmo se produce la incor poracin de los azcares en los tubos cribosos de estas plantas. En ellos se encuentra, junio a sacarosa, una ele vada proporcin de azcares de la serie de ralinosa. Se cree que la comparlirnentacin de la sntesis de estas sustancias podra aportar energa para la carga de los azcares en los tubos cribosos con una concentracin mayor que la que presentan en las clulas del mesfilo. De acuerdo con el esquema de la Figura 5-17, la sacaro sa. sintetizada en el mesfilo, se desplazara por los plasmodesmos a favor de gradiente hasta las clulas in termediarias. En stas, se utilizara en la sntesis de rafi-

+PCMBS

Figura 5-16. Efecto de la infiltracin con PCMBS en la acu mulacin de fotoasimilados en las venas menores de Vicia fabay de Coleus blumei. Autorradiografas realizadas a los 10 min {Vicia) y 20 min {Coleus) desde la presentacin con " C 0 2 . La acumulacin en las venas menores, que provoca las regiones blancas en la autorradiografa, es inhibida por PCMBS en Vicia (carga apoplstica) pero no en Coleus (car ga simplstica). Reproducido de Bourquin, S. ef al., Plant Physiol, 92:97-102, 1990 y Turgeon, R. y Gowan, E., Plant Physiol, 94:1244-1249, 1990.

Transporte en el floema Clulas del mesfilo Clula de la vaina

79

Elemento criboso Rafinosa Estaquiosa

, |
Sacarosa t. --CO, Sacarosa Sacarosa -----Sacarosa
Gal

Rafinosa Gal Estaquiosa Clula intermediaria

C02 Apoplasto

Figura 5-17. Modelo del mecanismo de carga simplastica del floema. La sacarosa se mueve por difusin (linea de trazos) hasta la clula intermediaria, donde se utiliza en la sntesis de rafinosa, estaquiosa, etc., mantenindose de este m o d o el gradiente de concentracin necesario para su movimiento. Los azcares sintetizados (y tambin sacarosa) pasan al elemen to criboso, pero no difunden hacia la vaina porque el canal de estos plasmodesmos es demasiado estrecho.

Da; el peso molecular de rafinosa y estaquiosa es, res pectivamente, 504 y 666 Da). Segn este esquema, que en varios aspectos no ha sido confirmado experimentalmente, la sntesis de oligosacridos mantendra el gradiente de difusin nece sario para el transporte de sacarosa y otros precursores. El mecanismo de trampa molecular descrito provocara la acumulacin de azcares y generara la turgencia ne cesaria para el transporte en el tubo criboso.

su utilizacin en la respiracin y la sntesis de compo nentes estructurales de las clulas en crecimiento. Este tipo de descarga se da en el pice del tallo y la raz y en la mayor parle de las hojas en desarrollo. En algunos rganos de reserva la descarga es apoplstica * En el parnquima de reserva del tallo de la caa de az car (Sacclmrum officinantm) y la raz de remolacha azucarera (Beta vulgaris). la sacarosa se libera al apo plasto desde el complejo tubo criboso-clula de compa a. En la raz de remolacha, esta sacarosa se acumula en las clulas del parnquima. mantenindose as el gradiente de concentracin necesario para su descarga continuada. En el tallo de la caa de azcar, la sacarosa liberada al apoplasto es hidrolizada por una invertasa de pared, lo que mantiene el gradiente necesario para su descarga. La glucosa y la fructosa se incorporan a las clulas del parnquima. donde se utilizan en la sntesis de sacarosa. Esta sacarosa, igual que en la raz de remo lacha. se almacena en las vacuolas de estas clulas. 5.2.2.

5.2.

No hay un mecanismo de descarga nico

Los fotoasimilados transportados en los tubos cribosos se descargan en los sumideros, donde se incorporan en las clulas. Los sumideros son de naturaleza muy varia da. pues incluyen rganos vegetativos en crecimiento pices del tallo y raz; hojas en desarrollo), rganos de almacenamiento y reproductivos (frutos y semillas). Esta variabilidad funcional se acompaa de diferencias marjadas en la estructura de los tejidos en los puntos de descarga y en el grado de conexin plasmodcsmica con las clulas de transporte. Del mismo modo que en el proceso de carga, estas Jiferencias estructurales determinan la existencia de stintos mecanismos de descarga (Fig. 5-18).

5.2.3.

En las semillas en desarrollo la descarga es simplastica, seguida una etapa apoplstica

por

5.2.1.

La descarga en los rganos es simplastica

vegetativos

En ios rganos vegetativos en crecimiento, el floema primario, en diferenciacin continua, presenta numesas conexiones plasmodsmicas con las clulas indiferenciadas del procambium y las del parnquima ve nias. La descarga de los fotoasimilados es predomimenle simplastica, movindose la sacarosa a favor ie un gradiente de concentracin mantenido merced a

La descarga de los tubos cribosos en los frutos y en las cubiertas seminales tiene lugar en el simplasto. En al gunos frutos, los azcares liberados pueden transportar se por el simplasto varias filas de clulas, a una distan cia de hasta varios centmetros, hasta su acumulacin cu las vacuolas de tejidos especializados. La mayor pane de los azcares descargados en las cubiertas seminales se uliliza en el desarrollo del em brin. Este no tiene conexiones plasmodsmicas con los tejidos maternos, por lo que los azcares, despus de

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

VASO LEOSO

TUBO CRIBOSO CLULA FUENTE CO?

CLULA DE COMPAA I Agua

Sacarosa = -0.1 MPa = -0.6 MPa T - -0.7 MPa , = -1.2 MPa ' p = +0.2 MPa <r = - 1 MPa

Transporte a larga distancia (hasta varios metros)

t,
Hexosas \lnv. Sacarosa-- Sacarosa"* Sacarosa SUMIDERO 4' s = -0.1 MPa f p = -0.3MPa f = -0.4 MPa Hexosas

Los azcares son arrastrados por la corriente de agua provocada por la diferencia en T entre la fuente y el sumidero CLULA DEL SUMIDERO , = -0.5 MPa H' = +0.2 MPa * = -0.3 MPa

Figura 5 - 1 8 . T i p o s d e d e s c a r g a e n los s u m i d e r o s : 1, d e s c a r g a s i m p l s t i c a ; 2, d e s c a r g a a p o p l s t i c a ; 3, d e s c a r g a a p o p l s t i c a c o n h i d r l i s i s p o r la i n v e r t a s a d e p a r e d (Inv.); 4 , d e s c a r g a s i m p l s t i c a s e g u i d a p o r l i b e r a c i n al a p o p l a s t o .

un transporte simplstico en las cubiertas, son liberados al apoplasto en la cavidad seminal de donde son toma dos por las clulas del embrin o del endospermo. La eliminacin quirrgica del embrin permite recuperar las sustancias liberadas y estudiar el proceso de liberacin. Aunque en un sentido estricto no se estudia la descar ga de los tubos cribosos, esta tcnica, denominada de la cubierta seminal vaca (empty oville teclinique), ha permitido determinar con precisin las caractersticas del transporte a los embriones en desarrollo. De este modo, se ha probado que, en soja y en haba, la sacarosa se libera al apoplasto mediante un proceso mediado por un transportador y dependiente de energa metablica. En el maz, por el contrario, se liberan hexosas por un proceso pasivo. En ambos casos, la incorporacin a las clulas del embrin es un proceso activo.

Figura 5-19. D i a g r a m a e s q u e m t i c o d e t r a n s p o r t e e n los t u b o s c r i b o s o s . La a c u m u l a c i n d e a z c a r e s ( s a c a r o s a ) en las f u e n t e s p r o v o c a la a c u m u l a c i n d e a g u a p o r u n p r o c e s o o s m t i c o y el a u m e n t o d e la p r e s i n d e t u r g e n c i a . La p r e s i n d i s m i n u y e en los s u m i d e r o s d e b i d o a la s a l i d a d e l o s a z c a r e s , q u e se a c o m p a a d e la s a l i d a d e a g u a . La d i f e r e n cia d e p r e s i n p r o v o c a el m o v i m i e n t o d e l a g u a d e la f u e n t e al s u m i d e r o , y l o s a z c a r e s s o n a r r a s t r a d o s p a s i v a m e n t e p o r el a g u a . El a g u a t r a n s p o r t a d a en l o s t u b o s c r i b o s o s se recicla en el x i l e m a . L o s I n t e r c a m b i o s e n t r e f l o e m a y x i l e m a e s t n r e g u l a d o s p o r las d i f e r e n c i a s en p o t e n c i a l h i d r i c o ; en las f u e n t e s , el p o t e n c i a l h i d r i c o es m a y o r en los v a s o s l e o s o s q u e en l o s t u b o s c r i b o s o s , m i e n t r a s q u e e n l o s s u m i d e ros o c u r r e lo c o n t r a r i o .

5.3.

El m o v i m i e n t o en los tubos cribosos es un flujo msico provocado por un gradiente de presin

Los solutos se mueven a lo largo del tubo criboso como consecuencia de un flujo msico provocado por dife rencias de presin hidrosttica (turgencia) entre los ex tremos del tubo en las fuentes y los sumideros. Los as pectos ms salientes del mecanismo de transporte se presentan en la Figura 5-19. La elevada concentracin osmtica en el interior de los tubos cribosos. debida a la acumulacin de azca res, provoca la entrada de agua y, como consecuencia. se produce una reaccin elstica de las paredes que

ejerce una presin sobre el contenido del lubo criboso. Esta presin es mayor en las fuentes que en los sumide ros debido a la mayor concentracin de solutos en aqu llas. y la diferencia de presin as generada provoca el movimiento del agua y el arrastre de solutos. De este modo, el agua se incorpora a los tubos cribosos en las fuentes y sale de ellos en los sumideros, y el movimien to del agua se mantiene en tanto lo hace la diferencia de presiones que. a su vez, depende de la diferencia de concentracin. sta es mantenida por la incorporacin continuada de solutos en las fuentes y su descarga en los sumideros. La interrupcin de la carga o la descarga conduce, en un lapso de tiempo breve, a que se igualen las concentraciones y a la detencin del transporte. El movimiento de los solutos en el tubo criboso es. por tanto, un proceso pasivo que no requiere el aporte directo de energa metablica. El transporte es energizado por la incorporacin de azcares en el tubo cribo-

Transporte en el floema

81

so; un mismo mecanismo de acumulacin proporciona la energa para la incorporacin de azcares contragra diente, y genera la presin que provoca su movimiento longitudinal por un flujo msico. El agua transportada recircula en el xilema. En las fuentes, el potencial hdrico (vase Captulo 2) en los tubos cribosos es muy bajo debido a la elevada concen tracin osmtica, lo que le permite tomar agua del xile ma. La salida de solutos en los sumideros aumenta el potencial hdrico en los tubos cribosos. lo que permite ceder agua al xilema. En todo caso, la elevada concentra cin osmtica en el tubo criboso mantiene en todos los puntos del recorrido una presin hidrosttica positiva, que se mantiene incluso cuando la planta tiene un dficit hdri co muy acusado y las hojas estn marchitas (Fig. 5-9). Este mecanismo de transporte, propuesto inicialmente por Munch en 1930. ha sido cuestionado frecuente mente por diversas razones (an en textos recientes se cita como hiptesis de Munch). pero tanto las observa ciones experimentales como los anlisis tericos son congruentes con este mecanismo de transporte que hoy es generalmente aceptado. Los clculos tericos, a par tir de los valores del potencial hdrico y del potencial osmtico, as como las medidas experimentales directas utilizando micromanmetros conectados al estilete de los fidos, indican que el gradiente de presin en el in terior de los tubos cribosos oscila entre 0.02 y 2.0 MPa m"'. Estos gradientes son suficientes para el mo vimiento de la solucin a una velocidad de entre 25 y 300 cm Ir', valor encontrado en la mayor parte de las determinaciones experimentales (Cuadro 5-2). Para ello es necesario que los poros de las placas cribosas estn abiertos, como confirman las preparaciones cuando la fijacin se realiza adecuadamente (Fig. 5-3). De acuer do con el modelo, no es posible el movimiento bidireccional en el lumen de un tubo criboso; su existencia, por otro lado, no ha sido probada en ningn caso de modo inequvoco. Todos los solutos se mueven a la misma velocidad en el sentido marcado por el gradiente de concentraciones, determinado fundamentalmente por los azcares.

Cuadro 5-2. Velocidades determinadas experimentalmente para el transporte de solutos en el floema. (Extractado de datos recopilados por Crafts y Crisp, 1971)

Especie Suli.x sp. Glycine max. Cuan hila pepo Gossypium hirsutum Heracleum mantegazzianum Trtieum aestivum (hoja) Melaseqiiflia glyptostroboides Beta vulgaris Phaseolus vulgaris Saccharurn officinarum Trtieum aestivum (tallo) Cucrbita sp.

Velocidad (cm ir1) 1.5-100 17-7200* 30-88 35-40 35-70 39-57 48-60 50-135 60-80 60-360 87-190 88-300

* La cifra de 7200 cm h ' no corresponde probablemente a transpone en el floema.

6. 6.1.

LONGEVIDAD E INACTIVACIN DE LOS TUBOS CRIBOSOS La longevidad de los tubos cribosos oscila de unos pocos das a varios aos

En la mayor parte de las plantas, la vida de los tubos cribosos es muy corta; los elementos del protofloema son funcionales unos das o unas pocas semanas, mien tras que los del metafloema y el floema secundario lo son durante unos pocos meses. La detencin del trans porte en el tubo criboso se acompaa de la incorpora cin de calosa, la desaparicin del plasmalema y del contenido citoplsmico. y finalmente, las paredes celu lares son aplastadas como consecuencia de las presio-

nes ejercidas por el crecimiento. En las plantas peren nes, el transporte se mantiene por la diferenciacin con tinua de nuevos tubos cribosos debido a la actividad del cambium. Esta renovacin continua de los elementos conductores impide, por otro lado, la reduccin progre siva de la capacidad del sistema de transporte que se producira si aqulla no tuviera lugar, ya que estas clu las son incapaces de repararse y cualquier agresin a las mismas determina su muerte y la inactivacin funcional de la regin del tubo criboso afectada. En algunas especies, no obstante, los tubos cribosos permanecen funcionales durante varios aos. Ejemplos de longevidad prolongada se encuentran en el floema secundario de algunas gimnospermas y dicotiledneas, como Vits y Tilia. En Vitis, al cesar el transporte en el otoo, las placas cribosas se cubren de calosa, que se moviliza al principio de la primavera al reanudarse el transporte. Notable al respecto es el caso de algunas palmas, en que los tubos cribosos permanecen funcionales durante decenas de aos. Debido a la ausencia de actividad del cambium no hay sustitucin de los elementos conducto res en estas plantas, y cualquier agresin resulta en una inactivacin irreversible de los elementos afectados. Esta situacin es compensada por el elevado nmero de elementos conductores y su distribucin por toda la sec cin del tallo. Estos elementos estn profundamente interconectados. por lo que en caso de una lesin local, el transporte se deriva hacia los elementos ms prximos, bordeando la regin lesionada.

6.2.

La inactivacin d e los t u b o s cribosos reduce las prdidas cuando hay una lesin

El contenido de los tubos cribosos se encuentra someti do a presin, por lo que cualquier lesin provoca extra-

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Fundamentos

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vegetal

vasacin. Si sta fuera prolongada, representara una prdida insoportable para la planta, pero con la excep cin de algunos casos notables, cesa normalmente al cabo de unos pocos minutos. Aun en muchas especies de dicotiledneas, la exudacin es inapreciable, por lo que no es posible obtener fluido del floema por este procedimiento. La detencin de la exudacin se debe a la existencia de un mecanismo muy eficaz de taponamiento de las placas cribosas. que dificulta gradualmente y al final imposibilita el transporte a travs de las ms prximas a la lesin. Dos factores contribuyen al taponamiento de los poros. Inicialmente, la protena floemtica se mo viliza como consecuencia del flujo asociado a la libera cin instantnea de la presin en la lesin, desplazndo se hacia la misma y acumulndose en el lumen y alrededor de los poros. Ello es seguido, en ocasiones de inmediato, por el depsito de calosa, que contribuye al sellado definitivo y permanente de las placas cribosas. Como la acumulacin de protena floemtica en los poros depende del aumento brusco de flujo provocado por la liberacin de presin, resulta comprensible que este mecanismo de taponamiento no sea desencadenado por los fidos, ya que stos apenas alteran el flujo en el tubo criboso. Tampoco se deposita en este caso calosa, lo que permite obtener exudado de los estiletes durante varios das. Estas observaciones parecen indicar que el depsito de calosa es desencadenado por la liberacin de la presin.

tubo criboso se mueve a lo largo del mismo por un pro ceso de flujo msico (movimiento de la solucin) a fa vor de un gradiente de presin generado por diferencias de concentracin. La descarga de los solutos en los su mideros mantiene este gradiente de concentracin y de termina la direccin del transporte en la planta.

PROBLEMAS Y CUESTIONES
Que caractersticas determinan que un rgano se com porte como fuente o como sumidero? 2. El fluido de floema se mueve en el lumen de los tubos cribosos impulsado por la presin generada en las fuen tes, de modo similar a como lo hace el agua en las tube ras de nuestras casas. Para que suba hasta las viviendas. es necesario aplicar energa mediante el uso de bombas que generan la presin necesaria. Cmo se aplica la energa en el caso del transporte en el floema? (considere por separado la situacin en los procesos de carga apoplslica y simplstica). 3. En el caso de que se produzca una reduccin transitoria en el contenido en azcares de un rgano que acta como fuente (p. ej., al sombrear una hoja adulta), se conviene en sumidero? 4. Un rgano que exporta carbohidratos y, por tanto, se comporta como fuente, exporta tambin otras sustancias (p. ej., elementos minerales)? 1.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA
1. 2. Baker. D. A.. Milburn. J. A. (eds.): Transpon ofPhotoassimilates. Longman. Essex, 1989. Behnke. H. D.. Sjolund. R. E. (eds.): Sieve Elements. Comparative Structure, Induction ana Development. Springer Verlag. Berln. 1990. Crafts. A. S.. y Crisp, C. E.: Phloem Transpon in Plas. W. H. Freeman. San Francisco. California. 1971. Giaquinta, R. T.: Phloem loading of sucrose. Ann Rev Piant Physiol, 34:347-387. 1983. Guardiola. J. L.. y Garca Luis. A.: Fisiologa Vegetal I: Nutricin y Transporte, pp. 295-350. Editorial Sntesis, Madrid. 1990. Guardiola, J. L., y Garca Luis. A.: Transporte de az cares y otros asimilados. En: Fisiologa y Bioqumica Vegetal. Azcn-Bieto, J. y Taln, M. (eds.), pp. 149171. McGraw-Hill-Interamericana, Madrid, 1993. Hall J. I... Baker. D. A. Oparka, K. L.: Transpon of photoassimilales. J Exp Boianv (special issue), 47:11191333, 1996. Patrick, J. W.: Phloem unloading: sieve elemenl unloading and post-sieve element transpon. Ann Rev Plant Physiol Plant Mol Biol, 48:191-222, 1997. Taiz. L., y Zeiger, E.: Plant Pliysiology (2nd ed.). pp. 251-285. Sinauer Associates I n c , Sundcrland, Mass.. 1998. Van-Bel A. J. E.: Strategies of phloem loading. Ann Rev Plant Physiol Plant Mol Biol, 44:253-281. 1993. Zamski, E., y Schaffer. A. A.: Photoassimilate Distrihution in Plas and Crops. Source-sink Relationships. Marcel Dekker, Nueva York. 1996.

RESUMEN
El floema es un sistema conductor continuo, fuertemen te interconectado, constituido por clulas vivas, que se extiende por lodos los rganos de la planta y hasta unas pocas clulas de distancia del extremo del pice del ta llo y de la raz. En el floema de las angiospermas, el canal de transporte es el tubo criboso, serie longitudi nal de clulas (elementos de los tubos) con las paredes terminales modificadas en forma de placas cribosas. con perforaciones de un dimetro considerablemente mayor que los plasmodesmos. En las gimnospermas, los elementos conductores son las clulas cribosas. A diferencia de los tubos cribosos, no estn alineadas en filas longitudinales, y estn interconectadas mediante reas cribosas ubicadas normalmente en las paredes la terales. El transporte tiene lugar de las zonas productoras de carbohidratos (fuentes) a las zonas de acumulacin (su mideros). La incorporacin en la fuente implica el transporte lateral (desde los cloroplastos de la hojas) hasta el haz vascular, y su ingreso en las clulas o tubos cribosos mediante un proceso activo y selectivo. La acumulacin de solutos en el interior del tubo criboso provoca el descenso del potencial hdrico y la entrada pasiva de agua, que dilata las paredes generndose as una presin que impulsa la solucin. El contenido del

3. 4. 5.

6.

7.

8.

9.

10. 11.

CAPITULO

INTRODUCCIN A LA NUTRICIN MINERAL DE LAS PLANTAS. LOS ELEMENTOS MINERALES


Ildefonso Bonilla
1. Introduccin. 2. Soluciones nutritivas. 3. Elementos esenciales. 4. Elementos beneficiosos. 5. Otros elementos.

1.

INTRODUCCIN

I ;is necesidades nutricionales de las plantas se estudian de forma separada en dos grandes grupos: nutrientes or gnicos e inorgnicos. Los primeros representan entre el 90 y 95 % del peso seco de las plantas y estn consti tuidos por los elementos carbono, oxgeno e hidrgeno obtenidos a partir del C 0 2 de la atmsfera (vase Cap tulo 11) y del agua del suelo I vase Captulo 4). El res tante 5-10%. constituye la denominada fraccin mine ral y es el objetivo preferente de estudio de este captulo y de los dos siguientes, en los que destacaremos, en pri mer lugar, el papel de estos elementos minerales en el metabolismo de las plantas y la razn de su esencialidad (Captulo 6): su absorcin, asimilacin y transporte (Captulo 7); y. por ltimo, su relacin con la produc cin agrcola, incluyendo los sntomas y el diagnstico de las alteraciones nutricionales (Captulo 8). Evidente mente, el inters prctico por la nutricin mineral de las plantas est ntimamente relacionado con este ltimo tema y, desde mediados del siglo pasado, ha dirigido los estudios sobre el mismo, sentando las bases de la nutricin mineral de las plantas. El efecto benfico que produce sobre el crecimiento de las plaas la adicin al suelo de elementos minera les, como cenizas de plantas o cal, as como el efecto lxico que productos como la sal ejercen sobre los mis mos cultivos son aspectos conocidos en la agricultura desde hace ms de 2000 aos. Sin embargo, hasta hace 150 aos, todava era materia de conlroversia cientfica definir si los elementos minerales cumplan una funcin de nutriente en el crecimiento de las plantas. A finales del siglo xviu. De Saussure (1767-1845), que estudi tanto la fotosntesis como la absorcin de nutrienles, introdujo nuevas tcnicas y mtodos muy cuidadosos que le convirtieron en uno de los pioneros en el anlisis

elemental de plantas e introductor de la idea de que al gunos, pero no necesariamente todos los elementos. pueden ser indispensables. Surge as el conccplo de elemento esencial para el crecimiento de las plantas. En la misma poca, S. Sprengel (1787-1859) en Ale mania y J. B. Boussingaull en Francia enunciaron, el primero, que un suelo puede ser improductivo desde el punto de vista agrcola por ausencia exclusiva de un elemento esencial, convirtindose as en el precursor de la ley del mnimo; el segundo, por su parte, estudi la relacin entre los efectos de fertilizar los suelos, la ab sorcin de nutrientes y el rendimiento de los cultivos. Boussingault fue. adems, el descubridor de que las le gumbres tienen la capacidad de fijar el nitrgeno at mosfrico. hecho posteriormente avalado por la identi ficacin de las bacterias fijadoras en los nodulos de las races de estas plantas (vanse Captulos 8 y 16). Es slo a partir de la mitad del siglo xix que comienza a configurarse una visin armnica de los problemas nu tricionales de las plantas. Surgen figuras como Justus von Liebig (1803-1873), que enuncia nuevamente la ley del mnimo de manera que muchos le atribuyen esta ley. y .1. Sachs. famoso botnico alemn que, en 1880, demostr por primera vez que las plantas podan crecer y desarrollarse en soluciones nutritivas totalmente ca rentes de suelo, lo que determinara loda una forma de investigacin, an hoy vigente, en el estudio de los re querimientos de nutrientes: los cultivos hidropnicos. Sin embargo, el establecimiento de la nutricin mineral de las plantas como disciplina cientfica es principal mente el resultado del trabajo de recopilacin y armoni zacin de von Liebig, que reuni toda la informacin existente en su poca de forma estructurada, siendo cla ve tambin su contribucin a la eliminacin definitiva de la teora aristotlica del humus (1848). Este hecho condujo a un rpido aumento en el uso de fertilizantes

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vegetal

minerales. Al final del siglo XIX. especialmente en Europa, grandes cantidades de potasa, superfosfato y, posteriormente, nitrgeno inorgnico fueron usadas en agricultura y en horticultura para mejorar el crecimien to y la productividad de los cultivos. Las conclusiones de Licbig fueron que los elementos minerales tales como N, P. K, Ca, Mg. Si, Na y Fe eran totalmente esenciales para el crecimiento de las plantas; sin embargo, se llegaba a dicha conclusin ms por la observacin y especulacin que por la precisin de los experimentos realizados. El hecho de que la teora de los elementos minerales estuviese basada en estos de fectuosos cimientos fue una de las razones para el gran nmero de estudios acometidos a finales del siglo dieci nueve. A partir de estas y otras extensas investigaciones sobre composicin mineral de diferentes especies de plantas crecidas en diferentes suelos, se lleg a la con clusin, a principios del siglo XX, de que ni la presencia ni ia concentracin de un elemento mineral son criterios de esencialidad. Las plantas tienen una capaci dad limitada para la absorcin selectiva de aquellos mi nerales que no son necesarios para su crecimiento y que pueden llegar a ser txicos. En consecuencia, la compo sicin mineral de los diferentes suelos en que crecen las plantas no sirve para establecer si un elemento mineral es esencial o no. Una vez reconocido esto, se realizaron ex perimentos en agua y arena con omisin de determinados elementos minerales. Mediante tcnicas sencillas fueron posibles una caracterizacin ms precisa de la esencia lidad de los elementos minerales y una mejor compren sin de su papel en el metabolismo de las plantas. El avance en estas investigaciones estuvo y est, es trechamente relacionado con el desarrollo de la qumica analtica, particularmente con la purificacin de los reactivos qumicos y de los mtodos de medida. Esta relacin se refleja fielmente en la cronologa con que se descubri la esencialidad de los distintos micronutrientes a lo largo de la primera mitad del siglo XX, en compara cin con el estudio aislado del Fe en el siglo anterior. El trmino elemento mineral esencial (que tambin denominaremos en este captulo nutriente mineral. aunque ms estrictamente un nutriente es la forma qu mica del elemento mineral esencial en que es disponi ble para la planta u organismo vegetal) fue propuesto por Arnon y Stout (1934). Estos investigadores defien den que para que un elemento pueda ser considerado esencial debe cumplir estos tres criterios: 1. 2. Una planta ser incapaz de completar su ciclo vi tal en ausencia del elemento mineral considerado. La funcin que realice dicho elemento no podr ser desempeada por otro mineral de reemplazo o de sustitucin. El elemento deber estar directamente implicado en el metabolismo por ejemplo, como compo nente de una molcula esencial de la planta. o deber ser requerido en una fase metablica pre cisa. tal como una reaccin enzimtica.

De acuerdo con esta estricta definicin, aquellos ele mentos minerales que compensen los efectos txicos de otros elementos o aqullos que, simplemente, reempla cen a nutrientes minerales en algunas de sus funcioneespecficas menores, tales como el mantenimiento de la presin osmtica, no son esenciales, pero pueden ser des critos como elementos beneficiosos (vase apartado 4i Todava resulta difcil generalizar qu elementos son esenciales para el crecimiento normal de las plantas Esto es particularmente obvio cuando comparamos las necesidades de plantas superiores y el conjunto de otro> organismos fotosintticos, como las algas, o no fotosintticos, como los hongos. Para las plantas superiores est bien definida la necesidad de 17 elementos mine rales. aunque la esencialidad del nquel se restringe a un nmero limitado de plantas. Tambin el sodio y el silicio, muy abundantes en la biosfera, se comportan como esenciales para algunas especies de plantas (Cua dro 6-1). Dadas las continuas mejoras en las tcnicas analticas y en la purificacin de compuestos qumicos, esta lista podra muy bien extenderse en un futuro e incluir ele mentos minerales hoy no reconocidos como esenciales. pero que podran serlo en muy bajas concentraciones en las plantas, como es el caso de los micronutrientes. La mayora de estos micronutrientes corresponde a consti tuyentes enzimticos y, en consecuencia, slo son nece sarios en muy pequeas cantidades. En contraste, los denominados macronutrientes son elementos consti tuyentes de biomolculas estructurales, tales como pro tenas. lpidos o carbohidratos, o actan como osmolitos. Estas diferencias en su funcin quedan reflejadas en las distintas concentraciones medias que estos nutrientes presentan en el anlisis de mineralizacin de un determi nado vegetal (Cuadro 6-2) para conseguir su crecimiento adecuado (vase Captulo 8). Tales valores pueden variar considerablemente dependiendo de la especie, la edad de la planta y la concentracin mineral de otros elementos (Cuadro 8-2).

2. SOLUCIONES NUTRITIVAS
Establecida la posibilidad de utilizar soluciones nutritivas sencillas a mediados del siglo xix, J. Sachs dise una solucin acuosa muy simple, constituida por 6 sales inorgnicas (Cuadro 6-3), que permitira a las plantas crecer y madurar en ausencia de suelo. Variaciones so bre este sistema han dado lugar a los cultivos hidropnicos. herramienta principal a la hora de establecer la esencialidad de los nutrientes. Por otra parte, la gran pureza que en estos momentos puede conseguirse en la sntesis de sales inorgnicas, con una bajsima concen tracin de impurezas, hace que el control sobre la com posicin de soluciones de dichas sales sea muy preciso. Hace un siglo, estas impurezas bastaban para cubrir las necesidades de microelementos y dificultaba enorme mente el estudio de la nutricin mineral. Las soluciones

3.

Introduccin a la nutricin mineral de las plantas. Los elementos minerales

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Cuadro 6-1. Clasificacin Macroelementos esenciales o macronutrientes Microelementos esenciales o micronuirientes Elementos beneficiosos

Elementos esenciales y beneficiosos para plantas, algas y hongos Elementos C. 0. H. N, P, S. K. Mg, Ca Fe, Mn, Zn. Cu. B. Mo, Cl. Ni Na. Si. Co. I, V. ... Plantas superiores Algas y hongos + Excepto Ca para los hongos -1- Excepto B para los hongos y las algas, con la excepcin de las diatomeas +

+ +

Adaptado de Marschner (1995).

de Hoagland y Arnon (1950) y de Hcwitt (1966) marca ron un hilo en la investigacin de este campo (Cuadro 6-4). Actualmente, lo ms habitual es hacer crecer las plantas sobre un sustrato normalmente inerte, del tipo arena de cuarzo, vermiculita o perlita. que no aporta nutrientes a la planta y que sirve como soporte fsico de la misma. En los cultivos de hidroponia pura no existe ese sustrato; la planta se suele sujetar sobre una superfi cie plstica agujereada y las races, que exhiben un de sarrollo muy superior a la situacin anterior, se hallan inmersas en la solucin nutritiva. En este caso es nece sario un dispositivo de aireacin, del tipo bomba de pe cera, para evitar la anoxia. Cada vez resultan ms utilizadas distintas variacio nes de la denominada nutrient film technique, tcnica Je lmina nutritiva, en la cual las races estn continua mente baadas por una fina pelcula de solucin nutritiva recirculante, que discurre por el fondo de unos canales

plsticos y donde no existen problemas de anoxia, por que el oxgeno disuclto se repone cada vez que se bom bea la solucin a la cabecera del dispositivo (Fig. 6-1). La utilizacin de los cultivos hidropnicos con fines de explotacin agrcola y sus modificaciones, como la fertilizacin en riego por goteo o la fertirrigacin en cultivos hortcolas y plantas ornamentales principal mente, sern objeto de estudio en el Captulo 8.

3. 3.1.

E L E M E N T O S ESENCIALES Los e l e m e n t o s presentes en m a y o r cantidad en las plantas se d e n o m i n a n macroelementos o macronutrientes

Tradicionalmente: los elementos esenciales se dividen en dos categoras: 1) los macronutrientes y, 2) los micronutrientes, elementos traza u oligoelementos. Esta

Cuadro 6-2. Elementos esenciales en la mayora de las plantas, formas de absorcin y concentraciones que se consideran adecuadas. Las formas preferentes de absorcin se resaltan en negrita

Concentracin en peso seco Elemento Molibdeno Nquel Cobre Cinc Manganeso Hierro Boro Cloro Azufre foro i nesio Calcio tasio Nitrgeno Oxgeno T-irbono -:eno Smbolo qumico Mo Ni Cu Zn Mn Fe B Cl S P Mg Ca K N 0 C B Formas de absorcin Ni 2 ' Cu*, C u 2 ' Zn2 + Mn2 + 3+ Fe , F e 2 T H,B0 3 Cl H,PO,. HPO; Mg2 + Ca 2J K+ Peso atmico 95.95 58.70 63.54 65.38 54.94 55.85 10.82 35.46 32.07 30.98 24.32 40.08 39.10 14.01 16.00 12.01 1.01 ,/tmol g _ l 0.001 -0.001 0.10 0.30 1.0 2.0 2.0 3.0 30 60 80 125 250 1000 30 000 40 000 60 000 mg k g ' 1 (ppm) 0.1 ~0.1 6 20 50 100 20 100 % 0,1 0.2 0.2 0.5 1.0 1.5 45 45 6 N. relativo tomos res pecto al Mo 1 1 100 300 1000 2000 2000 3000 30 000 60 000 80 000 125 000 250 000 I 000 000 30 000 000 40 000 000 60 000 000

Moo:

so;

No3_. N H ;
02, H,0 H,0

co,

acto 011 Epstein (1972). Salisbury y RSS (1992) y Marschner (1995).

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Fundamentos de fisiologa vegetal Cuadro 6-3. Composicin de la solucin nutritiva de Sachs (1860) (mM) concentracin aproximada 9.9 1.6 2.0 3.7 4.3 Trazas

Sales Nitrato potsico Fosfato calcico Sulfato magnsico Sulfato calcico Cloruro sdico Sulfato ferroso

Frmula K N03 Ca 3 ( P 0 4 ) 2 Mg S 0 4 7 H , 0 CaS04 NaCl Fe S 0 4

distincin no tiene implicacin cualitativa ya que todos ellos son igualmente esenciales, sino que refleja, exclu sivamente, las concentraciones relativas encontradas en los tejidos o que son requeridas en las soluciones nutri tivas. Los seis elementos que estudiaremos a continua cin (N, P, K, S, Ca, y Mg) constituyen, junto con H, C y O, la totalidad de macroelemenlos. En gran parte, pero no de forma exclusiva, estn implicados en la es tructura de las molculas, y su nombre hace referencia a que se necesitan en grandes cantidades: su presencia en los tejidos est siempre por encima del 0.1 % (30 /xmol g~ ' de peso seco) (Cuadro 6-2). Al contrario de lo que sucede con los micronutrientes, estn perfecta mente definidos desde mediados del siglo xix.

Nitrgeno Despus del agua, el nitrgeno es el nutriente ms im portante en el desarrollo de la planta dada su abundan cia en las principales biomolculas de la materia viva; si a esto aadimos que los suelos suelen ser ms defi cientes en nitrgeno que en cualquier otro elemento, no resulta extrao que sea, junto con el P y el K, el elemen to clave en la nutricin mineral. Las formas inicas pre

ferentes de absorcin de nitrgeno por la raz son el nitrato (NO^) y el amonio (NH4 ) (vanse Captulos 7 > 15). Existe tambin la posibilidad de conseguir N 2 at mosfrico fijado simbiticamente por leguminosas y al gunas otras familias de plantas gracias a microorganis mos de gneros como Rhizobium y Frcuikici (vase Captulo 16) y tambin por la absorcin de amoniaco (gas) que se introduce en la planta a travs de estomas: ambos terminan convirtindose en amonio. La asimila cin tanto de nitrato como de amonio se estudia amplia mente en el Captulo 15. No resulta fcil fijar el estado nutricional de las plantas en lo que se refiere al nitrge no, dado que la presencia del ion nitrato se ve regulada por aspectos como la desnitrificacin hasta formas ga seosas de N. la inmovilizacin microbiana y la lixivia cin, mientras que el ion amonio se ve afectado por su volatilizacin en forma de amoniaco, su absorcin por el coloide arcilloso-hmico del suelo y la nitrificacin. La mayor parte del N del suelo se encuentra en la fraccin de nitrgeno orgnico, no asimilable por las plantas. De ah la importancia de los procesos de mincralizacin del N en el suelo habitualmenle controlados por microorganismos, por lo que es muy difcil dictami nar el potencial nutritivo de N en el suelo, an ms si consideramos los procesos mencionados de desnitrifi-

Cuadro 6-4.

Composicin de la solucin de Hoagland y Arnon (1950) modificada ligeramente Concentracin (mM) 2.5 0.5 2.5 I.O 0.00039 0.0046 0.00016 0.0234 0.000051 0.179 Concentracin (mg L ') 103 105 118 33 25 15 10 0.25 0.25 0.025 0.01 0.0052 0.50

Sales Nitrato calcico Fosfato potsico Nitrato potsico Sulfato magnsico Sulfato de cinc Sulfato manganoso Sulfato cprico Acido brico Acido molbdico Sequestrene (Fe)

Frmula Ca ( N 0 3 ) , KH2 P 0 4 KNO3 Mg S 0 4 Zn S 0 4 Mn S 0 4 Cu S 0 4 H3 B 0 3 Mo 0 4 H , Fe

Elementos Ca N K S Mg P Fe B Mn Zn Cu Mo Cl

Introduccin

a la nutricin

mineral

de las plantas. Los elementos

minerales

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Un exceso de nitrgeno se manifiesta por un exceso de follaje con un rendimiento pobre en frutos, como su cede en cultivos tan diferentes como los de ctricos y patatas. En general, existe un desarrollo radicular mni mo frente a un desarrollo foliar grande, con la consi guiente elevacin en la proporcin parte area-raz, jus to lo inverso de lo que sucede en condiciones de deficiencia (Fig. 6-2). Tambin, en algunos cultivos, el exceso de nitrgeno determina un retardo en la flora cin y formacin de semillas.

Fsforo
Figura 6-1. Vista general de los invernaderos de Solar Oasis en Tucson (Arizona). En primer trmino, cultivos cre cidos con la tcnica de nutrient film. En segundo tr mino, cultivos crecidos en solucin nutritiva sin soporte inerte (fotografa de Bonilla, 1986).

cacin y lixiviacin. Esta ltima determina el enorme impacto ambiental que los nitratos de origen agrcola ejercen en la contaminacin de los acuferos subterr neos. En la planta, el N se distribuye en tres grupos: ms del 50 % se halla en compuestos de elevado peso mole cular (protenas y cidos nucleicos): el resto, en forma de N orgnico soluble (aminocidos, amidas, aminas...) y N inorgnico (principalmente iones nitrato y amonio). Su contenido en el total del peso seco de la planta oscila entre el l .5 y el 5 %. Los sntomas de deficiencia (vase Captulo 8) de N son los caractersticos de un elemento muy mvil: clo rosis en las hojas adultas que, con frecuencia, caen de la planta antes de ser necrticas (Fig. 6-2). Algunas plan tas, como tomate y ciertas variedades de maz, mues tran una coloracin purprea causada por la acumula cin de pigmentos antocianos.

Figura 6-2. Impacto de la deficiencia de nitrgeno en ei cultivo de remolacha azucarera (Befa vulgaris). El N junto con el K y el B son los principales factores nutricionales li mitantes del cultivo.

El fsforo es disponible para la planta como ion fosfato y se absorbe preferentemente como H2PO" en suelos con un pH inferior a 7 y como anin divalente HPO4 ~ en suelos bsicos, con pH por encima de 7. En contraste con el nitrgeno, el fsforo no se encuentra en forma reducida en las plantas, sino que permanece como fos fato ya sea en forma libre o como un compuesto org nico, principalmente como ster fosfrico con grupos hidroxilos, o formando enlaces anhdridos ricos en energa, como es el caso del ATP o del ADP. Desempe a, por tanto, un papel clave en la fotosntesis, la respi racin y en todo el metabolismo energtico. Asimismo, el fsforo tiene un papel estructural im portante en muchas molculas y estructuras celulares. como en el caso de los enlaces dister presentes en los cidos nucleicos y en los fosfolpidos, los cuales son fundamentales en las estructuras membranosas (vase Captulo 1). Con todo, una parte importante del fosfato en la planta se encuentra en forma inica libre: el 75 % en las vacuolas y el 25 % restante, en la matriz y los organillos citoplasmlicos. en equilibrio con los ciclos metablicos. El fosfato se redistribuye fcilmente en la mayora de las plantas de un rgano a otro, acumulndose en las hojas jvenes y en las flores y semillas en desarrollo: en consecuencia, los sntomas de deficiencia se presentan primero en las hojas adultas. Las plantas deficientes presentan enanismo y, en contraste con las deficientes en N, un color verde intenso, tomando un color pardus co a medida que mueren. La madurez se ve retardada en comparacin con la de las plantas control aunque en muchas especies, es la relacin del P con el N la que regula la maduracin: el exceso de nitrgeno la retarda y la abundancia de fsforo la acelera (Fig. 6-3). El fsforo en exceso determina, al contrario que en el caso del nitrgeno, un gran desarrollo de las races en relacin con la parte area, lo que determina una baja proporcin parte area-raz. Un factor muy importante que facilita la absorcin de fsforo en condiciones naturales es la presencia de micorrizas, que son asociaciones simbiticas entre hon gos del suelo y las races de las plantas (vanse Cap tulos 7 y 8 para ms detalles).

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

100 - 80 - 60 40 - 20

0.1 0.5 1 1.5 mEq de H2PCV litro solucin nutritiva o Amonio a los 2 meses de cultivo Amonio a los 3 meses de cultivo Riqueza final de sacarosa Figura 6-3. La interrelacin P y N, observada en varios cul tivos, queda aqu reflejada por los niveles de N expresado como NHj" en savia. Existe una acumulacin de NH4" en el estado deficiente de P que retrasa la maduracin y la rique za en sacarosa (Bonilla y col., 1980, Anal. Edaf. Agrobiol, XXXIX, 217-237). Figura 6-4. Deficiencia de K en el cultivo de remolacha azucarera. Como puede observarse, el K constituye junto con el N y el P el principal nutriente de los cultivos; por esta razn, estos tres macroelementos estn siempre presentes en los fertilizantes.

Potasio

Junto con el P y el N, constituye el contenido principal de los fertilizantes de mxima comercializacin debido a la importancia de estos tres elementos (Fig. 6-4). Su comportamiento, a pesar de su naturaleza catinica. es muy similar al que presentan el fsforo y el nitrgeno, redistribuyndose con suma facilidad de los rganos maduros a los juveniles dada su solubilidad y baja afini dad por los ligandos orgnicos, de los que fcilmente se intercambia. Es el catin ms abundante en la vacuola y el citoplasma, donde puede alcanzar concentraciones de 100 mM y entre 2000-5000 ppm en el xilema, p. ej., en remolacha azucarera. Desempea, por tanto, un papel clave en la osmorregulacin que tiene lugar en los pro cesos de apertura y cierre estomticos (Fig. 6-5, vase Captulo 3), as como en las nastias y tactismos (vase Captulo 24). Por otra parte, el K es activador de ms de 50 siste mas enzimticos, entre los que destacan oxidorreductasas, deshidrogenasas, transferasas. sinletasas y quinasas. Aunque puede ser sustituido en algunos casos, pues slo es necesario para el cambio conformacional de la apoenzima, dadas las altas concentraciones necesarias, a veces resulta difcil considerar un sustituto in vivo. La deficiencia de K en los cultivos se traduce en una mayor susceptibilidad al ataque de patgenos en la raz y a una debilidad de los tallos que hace a las plantas especialmente sensibles a la accin del viento, las llu vias, etc...., principalmente en el caso de monocotiledneas. En dicotiledneas, los primeros sntomas de clorosis aparecen tambin en hojas adultas que poste-

riormente se hacen necrticas; se retrasa el crecimiento y se producen prdida de turgencia y marchitamiento. mucho ms acusados cuando hay dficit hdrico. En condiciones de exceso de K se incrementa su con sumo, salvo en semillas, y ese consumo de lujo puede interferir en la absorcin y disponibilidad fisiolgica de Ca y Mg.
Azufre

El azufre se absorbe en forma de anin sulfato (SO^ - ) y, as, se transporta por el xilema. Tambin puede ser absorbido por los estomas de las hojas bajo la forma de dixido de azufre (S0 2 ), contaminante atmosfrico re sultante de la combustin del carbn, la madera y el petrleo. El S0 2 reacciona con el agua en el interior de las clulas formando bisulfito (HS0 3 ), que desplaza el magnesio de la clorofila y disminuye, en consecuencia, la fotosntesis. El S como sulfato forma parte de sulfolpidos y heteropolisacridos y, en forma reducida (reduc cin que tiene lugar mayoritariamente en los cloroplastos (vase Captulo 15)), se encuentra en aminocidos como la cistena y la metionina. Igualmente, se integra en diver sas coenzimas como la tiamina, la biotina y la coenzima A, compuesto clave en la activacin de cidos orgnicos y, por tanto, en los procesos de sntesis y degradacin de cidos grasos y en la respiracin celular. Los grupos -SH son clave en multitud de reacciones enzimticas determi nando segn su forma, oxidada o reducida, la actividad de las mismas. Finalmente, en los ltimos aos, una protenas de bajo peso molecular pero con un elevado nmero de aminocidos azufrados (cistena principalmente), las fitoquelatinas. han cobrado un gran inters por formar com plejos con metales pesados (Cd, Cu, Pb, ...) consti tuyndose en uno de los principales mecanismos de de-

Introduccin

a la nutricin

mineral de las plantas. Los elementos minerales

89

7 ;;/////-//

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Figura 6-5. El mecanismo de apertura y cierre de los esto c a s est asociado con una variacin de la concentracin de <" en la vacuola de las clulas de guarda. Durante la aper a r a del estoma se han observado incrementos de hasta 0.5 '.' en la concentracin de K*. En la figura se reflejan dos -modalidades segn sea el anin que compensa la carga ca onica del K". A) implica bombas de protones y transporte : e K y C I . B) implica transporte de K~ y malato. PEP: fosfoenolpiruvato; OAA: oxalacetato.

rensa de las plantas frente a estos agentes, txicos en su . yora. Las deficiencias en azufre son poco habituales dado que la presencia de sulfates en el suelo resulta suficien:e. En caso de producirse, en la planta aparece una clo rosis en las hojas muy generalizada, que incluye los haE - vasculares. La redistribucin desde los tejidos maduros es, en muchas especies, peor que la observada rara el fsforo y el potasio, por lo que los sntomas de iiciencia suelen apreciarse en primer lugar en las hois ms jvenes. Las plantas presentan un menor creci miento, se hacen rgidas y quebradizas y, a nivel eclu. son los cloroplastos los orgnulos ms afectados. El margen de normalidad en contenido de azufre para muchos cultivos se encuentra en un quinceavo del peso tv>tal del nitrgeno. Calcio El calcio se absorbe como ion di valente, Ca2 + ; es abun dante en la mayora de los suelos y rara vez se comporta . >mo un factor limitante, salvo en suelos cidos con uvias abundantes donde resulta necesario el aporte de -les calcicas, principalmente carbonates, que elevan el ?H. Es mucho ms mvil en el apoplasto que en el simplasto, por lo que aquellos rganos que reciben el agua mcipalmente por esta va pueden presentar problemas ;n el suministro del catin. En los cultivos hidropni-. la deficiencia en Ca se caracteriza por un pobre ;e<arrollo radicular. Los sntomas de deficiencia son vempre ms evidentes en tejidos jvenes y zonas men^temticas de races, tallos y hojas. Existen dos razoes principales que explican este hecho: por un lado, la

divisin celular se ve afectada por la deficiencia de cal cio y en los tejidos mencionados el ndice mittico es alto; por otro, la lmina inedia que se forma entre dos clulas hijas, uno de cuyos principales componentes es el pectato calcico, puede verse alterada. Existe un hecho muy curioso respecto al calcio y es que su concentracin intracelular es muy baja, del or den de 1 amolar (/M), aunque se absorbe en grandes cantidades y su presencia en la planta es similar a la que puede tener el fsforo, el azufre o el magnesio, lo que puede significar hasta el 1 % de materia seca. La mayor parte de Ca se localiza extracelularmenle en la pared celular, en los pectatos de la lmina media como hemos indicado y en las membranas (vase Captulo 1). En el interior de la clula, el calcio se encuentra en las vacuo las donde, dado el pH cido de las mismas, puede preci pitar como sales de oxalato, fosfato, carbonato, sulfa to. etc., segn las especies. Sin embargo, en el citosol, su concentracin sigue siendo muy baja, pues si bien activa algunas enzimas, muchas otras son inhibidas frente a concentraciones de Ca por encima de 1 IM (Fig. 6-6) (vase tambin Captulo 7). Adems, las co rrientes citoplasmticas tambin se ven inhibidas con concentraciones por encima de ese valor, as como la formacin de sales de calcio insolubles con ATP y otros fosfatos orgnicos. El calcio se requiere tambin para la integridad y funcionalidad de las membranas y, recientemente, se ha visto implicado como segundo mensajero en el funcio namiento de algunas hormonas y en respuestas me dioambientales. Como segundo mensajero, est impli cado en la fosforilacin de algunas protenas, de manera que el Ca puede desempear un importante pa pel en la actividad y regulacin de algunas enzimas (vase Captulo 18). Su unin reversible a una pequea protena citoslica. la calmodulina, le permite ejercer una importante funcin como modulador enzimtico y desempear un papel fundamental en el mundo de las seales celulares y en el desarrollo vegetal, como ya se ha demostrado en la clula animal.

Citoplasma -ATP ATP-

ADP + Pi

Figura 6-6. Regulacin de la concentracin intracelular de Ca 2 + , que se acumula principalmente en la vacuola en for ma de oxalato, carbonato, etc., pero tambin en el retculo endoplasmtico (RE) y en el cloroplasto. Concentraciones de Ca 2 - en el citosol superiores a 1 ; M pueden inhibir la accin de muchas enzimas.

90

Fundamentos de fisiologa vegetal

Magnesio

El magnesio no es casi nunca factor limitante para las plantas, salvo en suelos muy cidos o arenosos. Se ab sorbe como ion divalente, Mg2 + , y se comporta como un elemento muy mvil tanto en la planta como en la clula. Las hojas adultas son las primeras en expresar situaciones de deficiencia, al emigrar el Mg a las hojas ms jvenes. Aqu, la clorosis es muy tpica porque se dispone de forma intervenal; por alguna razn, las clu las del mesfilo prximas a los vasos retienen la cloro fila ms tiempo. Aproximadamente, el 20 % del Mg to tal de las hojas se encuentra en los cloroplastos, aunque slo entre el 10 % y el 20 % se presenta en las molcu las de clorofila (Fig. 6-7). El resto se encuentra locali zado en forma inica soluble en el espacio intratilacoidal y al iluminarse el cloroplasto, pasa al estroma donde activa enzimas tan importantes como la rubisco, la fosfoenol-piruvato carboxilasa y la glulamato sintasa. La asignacin fotosinttica del carbono y el nitrgeno de pende. en gran medida, de la concentracin de Mg2 + en el cloroplasto. Tambin interviene en el metabolismo energtico de la planta al formar complejos con el ATP, ya que las ATPasa utilizan como sustrato los complejos Mg-ATP. Incluso, la propia fosforilacin del ATP a partir del ADP necesita Mg2 + . Esa propiedad de establecer uniones tanto inicas como, especialmente, covalentes caso de la clorofi la lleva al magnesio a estar presente en procesos cla ves, como la unin y estabilizacin de las subunidades del ribosoma y, por tanto, en la biosntesis de protenas, e incluso en la transcripcin del mensaje gentico por la activacin de la RNA polimerasa. Por esta razn, un aumento en la proporcin de nitrgeno soluble no pro teico puede ser un parmetro de diagnstico qumico de la deficiencia de magnesio.
3.2. Los elementos tambin esenciales pero presentes en cantidades mnimas, se denominan microelementos o micronutrientes

de las soluciones nutritivas pueden cubrir cumplida mente las necesidades de las plantas y dems organis mos folosintticos. El desarrollo de las tcnicas analti cas ha incrementado, por un lado, la sensibilidad para la deteccin de elementos en varios rdenes de magnitud y, por otro, la pureza con la que actualmente pueden conseguirse las sales empleadas en las soluciones nutri tivas; todo ello puede depararnos sorpresas en el futuro. El ltimo micronutriente aceptado como tal ha sido el Ni en 1987.

Hierro

Los ocho elementos esenciales restantes (Fe, Mn, Zn, Cu, B, Mo, Cl y Ni) se agrupan bajo la denominacin de micronutrientes, elementos traza u oligoelementos. Re sultan tan esenciales como cualquier macroelemento y, en consecuencia, deben cumplir los mismos requisitos que satisfacen los macroelementos. Su nombre hace re ferencia a la baja concentracin con la que se encuen tran en los tejidos, inferior al 0.1 %o (menos de 3 //mol g _ 1 de peso seco) (Cuadro 6-2). A diferencia de lo sucedido con los macroelementos, los micronutrientes no han sido conocidos en su totali dad, con la excepcin del Fe, hasta bien entrado el siglo XX. Esto es as porque, dadas las bajas concentraciones requeridas para alcanzar la normalidad, las impurezas de las sales utilizadas habitualmente en la constitucin

Entre todos los micronutrientes, el hierro es el requeri do en mayor cantidad; de hecho, para algunas plantas se le llega a considerar macronutriente. El hierro puede ser absorbido como F e 3 - (Fe III) y ms fcilmente, dada su mayor solubilidad, como Fe 2+ o ion ferroso (Fe II) (vanse Captulo 7, apartado 8, y Captulo 8). Su deficiencia en suelos calizos es muy habitual por que la solubilidad del Fe es muy baja a pH bsico. De hecho, fue una de las primeras esencialidades en esta blecerse por lo frecuente de sus deficiencias y la especi ficidad de sus sntomas. Las plantas deficientes en Fe se caracterizan por una clorosis intervenal en las hojas j venes seguida, en ocasiones, por clorosis en las venas, confiriendo un aspecto amarillento a la totalidad de la hoja. En casos extremos, la hoja puede llegar a ponerse casi blanca, como sucede a veces en los ctricos. El hierro se acumula en las hojas ms antiguas y es relativamente inmvil en el floema por la formacin de xidos o fosfatos frricos, aunque cl tema no est sufi cientemente claro. Una forma estable y abundante de hierro es la que se acumula en los cloroplastos; cerca del 80 % del hierro de las hojas se localiza en estos orgnulos como fitoferritina. La deficiencia de Fe modifica la estructura de los cloroplastos dando lugar a la llamada clorosis frrica, uno de los signos ms caractersticos de aqulla. Cultivos como los ctricos son especialmente sensibles a esta deficiencia dado el pH bsico en el que son habituales y slo la formacin de quelatos (com plejos orgnicos con hierro, vase Captulo 8) es capaz de solucionar el problema de la absorcin del hierro en estas circunstancias. La importancia del Fe en la planta, al igual que en los animales, radica en dos importantes funciones: Forma parte de los grupos catalticos de muchas enzimas redox del tipo hem o protenas, como son: citocromos (tanto mitocondriales como cloroplsticos), catalasas. peroxidasas. etc., que presentan un grupo hierro-porfirina como ncleo prosttico, cl grupo hemo (Fig. 6-7). El Fe se encuentra unido a grupos tilicos de la cisterna en otras protenas, hierro-azufre, las sulfoferro protenas. Estas protenas son clave en la fo tosntesis, como es el caso de la ferredoxina. la ni-

Introduccin
Succinil CoA +glcna

a la nutricin

mineral de las plantas. Los elementos

minerales

91

COOH CH 2 COOH CH 2 CH2 3 mato ALA-deshidratasa (2 de ALA) X 2H ? 0 I CH2NH2 Urgeno I sintetasa + < ^ Urgeno III c o s i n t e t a s a ^

-dicetoriato// Aminocido

H Porfobilingeno (PBG) Ac.rt-aminolevulinico (ALA)

Fe porfirina (Hemo

Citocromos Citocromo c oxidasa Cata lasa Peroxidasa Leghemoglobina

Pr

Pr

Protoporfiringeno IX Protoclorofilida *LU2---1

Mg protoporfirina

Clorofila - g u r a 6-7. T a n t o el Fe c o m o el M g d e s e m p e a n u n p a p e l c l a v e e n la s n t e s i s d e la m o l c u l a d e c l o r o f i l a . A p a r t i r d e la p r o t o p o r f i r i n a e n c o n t r a m o s Fe c o m o c o n s t i t u y e n t e d e l g r u p o h e m o e n l o s s i s t e m a s r e d o x , p e r o n o d e la c l o r o f i l a .

trito reductasa y la sulfito reductasa; en la fijacin de nitrgeno caso de la nitrogenasa y en la respiracin. Los estados redox Fe 3 + /Fe 2 + expli can su presencia en estos sistemas enzimticos, tanto de un tipo como de otro, al actuar como trans portador de electrones en los mismos (Fig. 6-8). Existe, adems, otra razn para la esencialidad del Fe e resulta exclusiva del mundo vegetal, y es su papel rn la biosntesis de la molcula de clorofila, ya que rela actividad del sistema enzimtico encargado de la formacin del cido -aminolevulnico (ALA), pre. rsor de las porfirinas, y el paso de protoporfirina-Mg i protoclorofilida (Fig. 6-7). ^ganeso El manganeso existe en varios estados de oxidacin. figurando distintos xidos en el suelo que resultan msolubles y siendo absorbido, principalmente, como

catin divalente (Mn2~) despus de la reduccin de es tos xidos en la superficie de las races. El sntoma ms significativo de la deficiencia en manganeso es la clorosis intervenal asociada con el de sarrollo de pequeas manchas necrticas. Esta deficien cia puede constituir un factor limitante en suelos cidos con pH por debajo de 6 y con un alto contenido orgnico. Con el microscopio electrnico se observa que la deficiencia en manganeso produce, especficamente, una desorganizacin de las membranas del tilacoide, y tambin de las membranas del ncleo y de las mitocondrias, aunque de forma no tan acusada en estos dos lti mos casos. Aunque el Mn activa numerosas enzimas, slo ha po dido demostrarse su presencia en dos. La primera es el complejo manganeso-protena que transporta los elec trones desde el agua al fotosistema II, el cual requiere no menos de cuatro tomos de Mn por centro de reac cin (vanse Captulos 9 y 10). As, por ejemplo, en los heterocistos, clulas especializadas en la fijacin del ni trgeno en las cianobacterias filamentosas, no existe Ib-

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

-: xx ; ^
CysS S S Cys
1

CysS

SCys

, NADP" (Fotosntesis) Nitrito reductasa Sulfito reductasa N2 reduccin GOGAT

Figura 6-8. La otra forma de presencia del Fe es como constituyente de protenas sin grupo hemo en donde el Fe est unido a restos de cistena, caso de numerosas enzi mas (protenas sulfofrricas).

los 9 y 10), y la enzima citocromo c oxidasa, una enzi ma respiratoria que cataliza la transferencia de electro nes hasta el oxgeno en las crestas mitocondriales (va se Captulo 14). Por otra parte, el Cu es componente del complejo enzimlico fenolasa, que oxida fenoles, y se relaciona con la biosntesis de lignina, ya que forma algunos de sus precursores. En este sentido, entre los primeros signos de la deficiencia de Cu estn la reduc cin en la lignificacin y una acumulacin de fenoles, al igual que sucede en la deficiencia de B. Cinc El Zn es absorbido como catin divalente, Zn2 4 , proba blemente, la mayora de las veces, en forma de quelato. Su disponibilidad es mayor a pH bajo (cido). La deficiencia de Zn produce clorosis intervenales fciles de observar en el maz, la juda, el sorgo y rbo les frutales, lo que se ha relacionado con un papel esta bilizador del Zn sobre la molcula de clorofila. Las alteraciones ms tpicas son la disminucin en el creci miento de las hojas y el acortamiento en la longitud de los entrenudos. especialmente en especies leosas. Esta reduccin del tallo se ha relacionado con la produccin de cido indolactico (AIA), una de las auxinas ms habituales (vase Captulo 19). Hay una clara relacin entre los niveles de Zn y la concentracin de auxinas que. incluso, llega a disminuir antes de que se manifies te la deficiencia de cinc en la planta. Existen pruebas de su papel en la sntesis del triptfano. aminocido pre cursor de la hormona. Por otra parte, el Zn es necesario para la actividad de, al menos, ochenta sistemas enzimticos (normalmente formando parte de su estructura. aunque no sufre cambios en su estado de oxidacin). por ejemplo, la NADH-deshidrogenasa (vase Captulo 14), la alcohol-deshidrogenasa, que cataliza el paso de acetaldehdo a etanol en la fermentacin alcohlica, y las cinco anhidrasas carbnicas, descritas hasta el mo mento. que aceleran la hidratacin reversible del dixi do de carbono a bicarbonato en la fotosntesis (Fig. 6-9) (vanse tambin Captulos 7 y 12). Junto con el Cu. constituye algunos tipos de superxido dismutasas (SOD), presentes en distintos orgnulos y en el cito plasma de la clula vegetal c implicadas en la defensa contra los radicales superxidos (vase Captulo 30). Por ltimo, cabe destacar su participacin en la estabi lidad del ribosoma y su presencia en la RNA polimerasa. lo que le convierte en un regulador de la expresin gnica. Molibdeno El molibdeno existe en el suelo principalmente como sales de molibdalo (MoO2,-) o (HMo0 4 ), y como MoS2 molibdenita, uno de los principales minerales que lo contiene. Es el nico microelemento que aumen ta su solubilidad con el pH. En la primera forma, el

tosistema II ni, en consecuencia, manganeso. En segun do lugar, el manganeso se encuentra formando parte de la Mn-SOD (Mn superxido dismutasa), una de las isoenzimas de la SOD presente en las mitocondrias y los peroxisomas y, de forma ms irregular, en los cloroplastos. As, por ejemplo, existe en el tabaco pero no se encuentra en el guisante. Junto con otras formas que contienen Fe, Cu o Zn, constituye un conjunto de enzi mas implicadas en la defensa de la planta contra la pre sencia de radicales superxido OJ formados en diver sas reacciones enzimticas (vase Captulo 30). El Mn est igualmente implicado como activador de muchas enzimas respiratorias del ciclo de Krebs (descarboxilasas y deshidrogenasas). aunque puede ser reemplazado en ellas como es el caso de la isocilralo deshidrogenasa por otros cationes divalentes, princi palmente el Mg2 + . Asimismo, est implicado en la ac tividad de la arginasa, enzima clave del ciclo de la urea que escinde la arginina en urea y ornitina, y en la enzi ma mlica dependiente de NAD en plantas C 4 (vase Captulo 12). Con lodo, las deficiencias de Mn pueden suplirse con Mg 2 ", y el problema estriba en no superar determinados lmites que produciran efectos competitivos con el Fe. Cobre Rara vez presentan las plantas deficiencias de Cu debi do, principalmente, a la escasa necesidad del mismo y a que est disponible en la mayora de los suelos. En con secuencia, slo a travs de experimentos con soluciones nutritivas y en condiciones controladas, podemos cono cer los resultados de los estados deficientes. El Cu es absorbido como catin divalente (Cu 2 - ) en suelos aireados o como ion cuproso (Cu - ) en suelos pobres en oxgeno o con alto contenido en agua, como los suelos inundados de los manglares. La forma divalente forma quelatos fcilmente con varios componen tes del suelo e igual sucede en soluciones nutritivas, lo que se debe vigilar para evitar estados de toxicidad. La esencialidad del Cu se explica por su presencia en diversas protenas y enzimas implicadas en procesos de oxidacin/reduccin. Dos sistemas clave en este senti do son la plastocianina, una protena cloroplstica in volucrada en el transporte electrnico de la fotosntesis entre el fotosistema II y el fotosistema I (vanse Captu

Introduccin TASC. rficie foliar Clula del mesfilo Clula de la vaina

a la nutricin

mineral de las plantas. Los elementos

minerales

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PLANTAS C, Superficie foliar Clula del mesfilo

..Cloroplasto. Rubisco

/ \ CO,
- Acido Ca
EPfc 3 X HCOi Casa 0AA

Aire CO,

Vaina .'AS CAM 5'..perficie foliar Cloroplasto (Rubisco Clula del mesfilo HCO^\ t f CA ) - Malato -C02 Vacuola Da MICROALGAS Espacio periplsmico Cloroplasto Pirenoide Estroma

Malato-

_^r Malato Noche

HCO, CA? CO,

bisco

HCOi

^ E P - OAA Casa

\
Rubisco- PGA

Citosol = gura 6-9. Papel de la anhidrasa carbnica (CA) en plantas Ca, C3, CAM y microalgas. Todas las formas de CA conocidas presentan Zn c o m o componente estructural. Basado en Badger y Price, 1994, Plant Mol Biol, 45: 369-392.

Jeno presenta valencia 6 + , mientras que en las les de sulfuro se presenta como Mo4 + . Su funcin en antas deriva principalmente de su participacin en iones de tipo redox como constituyente de sistena> enzimticos esenciales para las plantas superiores, gas y cianobacterias. Debido a los mnimos requerimientos de Mo, se sabe a) poco de las formas en que se absorbe y transforma .-. la clula vegetal. A pesar de esos bajsimos requeri. -tos y de que resulta extrao encontrar situaciones de deficiencia, salvo en zonas del Este y Sur de Estados Luidos y Australia en cultivos como la coliflor y el brsu esencialidad es indudable. Forma parte de una una clave en la asimilacin del nitrato como es la nitrato reductasa, responsable de la reduccin de ra tos a nitritos (vase Captulo 15). Asimismo, forma rarte de la enzima nitrogenasa. fundamental en la fijan biolgica del nitrgeno y presente en todos los mi croorganismos capaces de realizar este proceso de fija. MI. tanto en forma libre como en simbiosis (vase pitillo 16). Tambin est implicado en la degrada cin de bases pricas como la adenina y guanina, como constituyente de la enzima xantn deshidrogenasa oxiasa, responsable del catabolismo de aqullas. Por lti mo, parece estar implicado en la formacin del ABA al -er parte estructural de la enzima que genera el cido abscsico (vase Captulo 22).

Boro A pesar de haber sido definido como esencial hace ms de 75 aos, el boro es probablemente el microelemento peor comprendido respecto a su papel fisiolgico y bio qumico en las plantas. Presenta, con la posible excep cin del carbono, la qumica ms interesante y diversa de los elementos, lo que unido a que slo parece ser esencial en plantas vasculares, diatomeas y cianobacte rias filamentosas fijadoras de nitrgeno, pero no en bac terias en general, algas verdes, hongos y animales, hace que no resulte extrao el inters que, todava hoy, des pierta su estudio. Dado que el 95 % del boro se encuentra en las pare des celulares, se piensa en un papel bsicamente estruc tural para el microelemento. El hecho de que las monocotiledneas presenten menos requerimientos de B y, al mismo tiempo, una fraccin de pectinas inferior a la existente en dicotiledneas hace presuponer que el B est unido preferentemente a esta importante frac cin de la pared. La capacidad de establecer enlaces ster entre el boro y los grupos cis-dioles explicara la necesidad del microelemento en la estabilidad de la pared. Al no formar parte estructural de ningn sistema enzimtico o coenzimtico, ya que no posee cambio de valencia, se pens que el B podra estar implicado de

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

forma directa en el funcionamiento de los mismos. Sin embargo, se ha demostrado que la deficiencia de B libe ra de inhibicin a la 6-P-gluconato deshidrogenasa al disminuir la concentracin de complejos formados en tre B y 6-P-gluconato, todo lo cual determina una pre ponderancia de la va de las pentosas sobre la gluclisis en el metabolismo de la glucosa, con la consiguiente acumulacin de compuestos fenlicos, que son extre madamente txicos tanto en la raz como en los tallos, incluso a concentraciones de 1 /;M, lo que explicara por s solo el estrs que sufre la planta en condiciones de deficiencia de boro. Adems, sta se acompaa de un incremento en los niveles de auxinas (AIA), por una inhibicin de la indolactico oxidasa producida por la acumulacin de fenoles, cido calcico y clorognico principalmente. Por otra parte, el boro se ha visto relacionado con los principales procesos de la fisiologa vegetal: divisin y crecimiento celular, germinacin, regulacin hormonal,

etctera. As, las plantas con deficiencia en boro pre sentan una amplia gama de sntomas dependiendo de la edad y el tipo de planta. Uno de los primeros signos de la deficiencia de B es, por ejemplo, la inhibicin en el crecimiento y desarrollo de las races, tanto primarias como secundarias. La divisin celular en los tallos y en las hojas jvenes cesa, y esto se sigue de necrosis y muerte de los meristemos, lo que se relaciona con su posible papel en la sntesis de uracilo precursor del ARN. Si a esto aadimos que estimula el alargamiento del tubo polnico y la germinacin, podemos compren der por qu los sntomas de deficiencia en boro resultan tan espectaculares; es el caso del llamado mal de cora zn de la remolacha azucarera, donde se produce una raz prcticamente hueca que impide la acumulacin de sacarosa (Fig. 6-10). Actualmente, existen datos sobre una relacin B/Ca que debe desempear un importante papel no slo a nivel estructural, sino tambin a nivel de transduccin de seales.

Figura 6-10. A) Cultivo de juda (Phaseolus vulgaris): la forma deficiente en B presenta menor desarrollo radicular y menor porte. Crecidas en condiciones de fijacin de N 2 atmosfrico e inoculadas con Rhizobium, tambin puede observarse un menor nmero de nodulos en la planta deficiente. B) El cultivo de vid (Vitis vinifera) se ve claramente afectado por la deficiencia de B, tanto en la floracin como en la maduracin del fruto y la produccin de azcar. C) El cultivo de remolacha azucarera (Beta vulgaris) es uno de los ms sensibles a la deficiencia de B, presentando el llamado mal de corazn, con races prcticamente huecas que arruinan la produccin. Las plantas estn crecidas con solucin nutritiva en tiestos tipo Riviera.

Introduccin

a la nutricin

mineral

de las plantas. Los elementos

minerales

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Cloro

El ion cloruro es ubicuo en la naturaleza y altamente soluble. Aunque es esencial para las plantas en su cate gora de micronutriente, su presencia, relacionada con ms de 130 compuestos orgnicos descritos en las mis mas. alcanza habitualmente concentraciones de macronutriente. Casi todas las plantas absorben entre 10 y 100 \eces ms Cl" del que necesitan. Por otra parte, su so lubilidad es alta y en Ibrma de anin se transporta va tanto xilema como floema. Esta alta movilidad le con fiere dos funciones principales: 1) Mantenimiento del gradiente de pH existente entre el citosol y la vacuola por activacin de la Mg, Mn ATPasa del tonoplasto (Fig. 6-11). 2) Como soluto osmticamente activo de gran im portancia. As, est implicado en el mecanismo de apertura/cierre de estomas junto con el pota sio (Fig. 6-5) y en diversos movimientos o nastias (vanse Captulos 3 y 24). Sin embargo, el papel principal que presenta el Cl" : - su implicacin en la fotolisis del agua con emisin de eno en el fotosistema II, demostrado muy tempraente por Warburg en 1944, aunque el mecanismo preciso es todava desconocido (vanse Captulos 9 y 10). En cualquier caso, su presencia es imprescindible para la estabilidad del cloroplasto, probablemente como lector de la oxidacin de los componentes lipoprois de las membranas tilacoides. Las deficiencias de cloro son raras en la naturaleza la su disponibilidad y elevada solubilidad en los sues; normalmente, slo pueden ser observadas en estu- realizados, muy cuidadosamente, con soluciones ntritivas. En deficiencia de Cl 7 el desarrollo de las races se ve muy reducido en su longitud, aunque se engrasen en las zonas apicales. Las hojas presentan un desarrollo reducido, con manchones clorticos y necr llegando a presentar, a menudo, un color broncea do eeneralizado.

uel

i: nquel ha sido aadido recientemente a la lista de E ementes esenciales para las plantas. Es un elemento lico (Ni) abundante en la naturaleza y siempre pre
Vacuola -HM+R-NH2*-RNH3*

sente en los tejidos vegetales, aunque con valores muy bajos de 0.05 a 5.0 mg kg~' de peso seco. Una de las principales dificultades para establecer su papel esen cial son los bajos requerimientos que se han estimado en. aproximadamente, 200 /g para el ciclo vital com pleto de una planta, cantidad que puede encontrarse contenida, en muchos casos, en la semilla. Ante necesi dades tan bajas, no resulta extrao que aunque no haya sido aadido de manera expresa a los medios de cultivo, las propias impurezas de las otras sales hayan cubierto las necesidades de las plantas estudiadas. Los datos provienen de estudios realizados en cerea les y legumbres, principalmente aquellas que desarro llan nodulos determinados como la juda y la soja (va se Captulo 16). En estas leguminosas, la forma de transporte del NH fijado en los nodulos de la raz son los ureidos, cido alantoico y citrulina, principalmente, los cuales se transportan va xilema hasta las hojas y, tambin, va floema pasan de las hojas ms viejas a las ms jvenes y a las semillas en desarrollo. El metabo lismo de dichos ureidos implica la formacin de urea y sta slo puede hidrolizarse en presencia de ureasa, en zima que contiene Ni. Si el metal no se encuentra pre sente, la concentracin de urea aumenta y se comporta como un compuesto txico que produce necrosis en las puntas de las hojas. Dado que la degradacin de las ba ses pricas (adenina, guanina) ocurre va ureidos en las plantas, parece probable que todas las plantas, y no slo las leguminosas, presenten y, en consecuencia, necesi ten Ni para su funcionamiento. En este sentido, los experimentos realizados en cebada, aunque obligan a llegar a la tercera generacin para que se obtengan se millas incapaces de germinar y con importantes anor malidades estructurales, demuestran para el Ni el pri mer criterio de la esencial idad de un nutriente. Tambin, en algunas microalgas verde-azules (cianobacterias), como Oscillatoria, concentraciones de 0.05 /M de Ni resultan ptimas para el crecimiento con in dependencia de la fuente de nitrgeno presente en el medio. Asimismo, diversas bacterias presentan una cla ra dependencia de la presencia de Ni. siendo la mejor conocida la que presenta Rhizobium, especie en la que el Ni forma parte de la enzima hidrogenasa, responsa ble de la recuperacin del hidrgeno implicado en el proceso de fijacin de nitrgeno (Captulo 16).
4. ELEMENTOS BENEFICIOSOS

*-opH6
:

gura 6-11. Relacin existente entre la presencia de KCI y i actividad ATPasa en clulas de la raz. En la membrana : asmtica (MP), la ATPasa se ve activada por la presencia de K,+ y en el tonoplasto (To) por C l " .

Adems de los 17 elementos esenciales descritos, algu nas plantas presentan requerimientos adicionales. Dado que estos elementos suplementarios no son necesarios para la generalidad de las plantas, no se pueden consi derar elementos esenciales y se definen como elementos beneficiosos. Otra posibilidad es que el elemento en cuestin sea capaz de suplir, al menos parcialmente, la falta de otro elemento esencial, o aumentar la tolerancia en los excesos de absorcin de algn otro u otros ele-

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de fisiologa

vegetal

memos, como sera el caso del Si frente a concentracio nes elevadas de Mn o Fe, habituales en suelos cidos donde el silicio reduce los sntomas de toxicidad de es tos elementos.

Sodio
Se encuentra como catin monovalente, N a 4 , y algunas plantas lo contienen en concentraciones ms propias de un macronutriente, p. ej., las halfitas. Sin embargo, esto se debe a un mecanismo adaplativo de control os mtico, aunque en general se tiende a absorber selecti vamente ms potasio que sodio. Existen pruebas de su esencialidad a niveles de micronutriente en Atriplex y algunas otras plantas pertenecientes al grupo de la C 4 , donde parece que interviene en el acoplamiento del transporte de metabolitos, cido pirvico, entre el mesfilo y la vaina. Algo similar ocurre en las plantas CAM, pero no resulta esencial para plantas con fotosn tesis tipo C 3 . En cianobacterias (microalgas verde-azu les) existe un requerimiento especfico de N a - , impli cado en procesos clave como la fotosntesis, el transporte ele HCOj" y CO,, la absorcin y asimilacin de nitratos y fosfatos y la fijacin de nitrgeno en espe cies filamentosas con heterocistos.

vitamina B 1 2 . no parece esencial en vegetales, salvo para leguminosas en condiciones de fijacin de nitrge no en simbiosis, si bien es el microorganismo el verda dero receptor de ese elemento. En el alga Euglena tam bin resulta esencial; su deficiencia determina un descenso en la sntesis de RNA y DNA. por alteracio nes en la sntesis de timina y ribsidos. Si en un princi pio se pens que podra ser esencial en formas fijadoras de nitrgeno, concretamente en cianobacterias, hoy se sabe que se requiere como otros bioelementos, pero no resulta esencial.

Aluminio
Se encuentra a muy bajas concentraciones en forma so luble aunque es un elemento muy abundante en la cor teza terrestre. A pH inferior a 5 se solubiliza y puede afectar de forma muy negativa a un gran nmero de plantas. Es una de las principales consecuencias de las denominadas lluvias acidas en muchas zonas de Europa Central. Sin embargo, en pequeas dosis puede ser alta mente beneficioso porque, al igual que sucede en el caso del Si, reduce la toxicidad producida por el exceso de Ca, Mg o P.

Silicio
El silicio es el segundo elemento ms abundante en la corteza terrestre. No resulta, pues, extrao que muchas plantas lo absorban en grandes cantidades. El Si puede significar entre el 1 y el 2 % de la materia seca del maz e, incluso, porcentajes superiores en pastos y hasta el 16 % en las cenizas de Equisetum arvense. Resulta muy difcil realizar experimentos de deficiencia de Si dada su ubicuidad, incluso en el laboratorio por el material de boro-silicato que se utiliza habitualmente. Numero sos trabajos demuestran su esencialidad en gramneas, donde en forma de xido hidratado (SiO, nH 2 0) se acumula en la pared aumentando su impermeabilidad y la resistencia al ataque de hongos, no slo por constituir una barrera fsica, sino por configurar compuestos silico-orgnicos que son muy estables frente a las enzimas de los patgenos (vanse Captulo 8 y Fig. 8-8). Ese aumento de la resistencia mecnica de los tejidos en cereales disminuye el denominado encamado de los mismos. Asimismo, las algas diatnicas necesitan Si para configurar sus cubiertas, convirtindose en esen cial el Si para este grupo, al igual que sucede con el boro, tambin con valor de excepcin.

Selenio
Aunque el selenio es generalmente txico para la mayo ra de las plantas, existe un grupo de ellas, las denomi nadas plantas selenferas, cuyo gnero ms representa tivo es el Astragalus, que lo acumulan. Con varios cientos de especies, la diferencia entre ellas a la hora de acumular Se es muy grande. Existen especies, como A. racemosus, capaces de acumular Se por encima del 0.5 % del peso seco, lo que las convierte en peligrosas para el ganado, que puede envenenarse de forma mortal con ellas. Sin embargo, no est definitivamente estable cido que el Se resulte esencial en estas plantas. El Se desplaza al azufre y configura seleno-aminocidos del tipo de selenometionina y selenocistena. El primero de stos, en su forma reticulada, es el principal depsito de Se en las plantas acumuladoras. En bacterias se ha ob servado la presencia de seleno-protenas que contienen estos aminocidos, que resultan esenciales al igual que en animales, estando implicados en procesos de xidoreduccin.

Titanio
El titanio no cumple ninguno de los tres criterios esta blecidos por Amon (1939) sobre la esencialidad de los elementos; sin embargo, se ha podido comprobar cmo, por ejemplo, en pimiento (Capsicum annuum L.) bajo la forma de Ti (IV) incrementa la absorcin de nutrientes

Cobalto
Aunque el Co resulta esencial en animales por su pre sencia en el ncleo de corrina de la cianocobalamina,

Introduccin a la nutricin mineral de las plantas. Los elementos minerales y. en consecuencia, la produccin de biomasa. Tiene tambin un efecto activador de pigmentos fotosintticos, con una acumulacin de Fe 2 ~ (hierro activo) hasta cinco veces superior a la presentada en los organillos de las plantas sin tratar. 3. 4. Enuncie los 17 elementos esenciales para las plantas su periores e indique, al menos, una razn de su esencialidad para 2 macroelementos y 3 microelementos. Las deficiencias de Fe, Mg y N producen, todas ellas. clorosis: sin embargo, existen diferencias muy marcadas entre la que est producida por Fe y la que se produce por Mg y N. Defina estas diferentes tipologas de cloro sis y explique sus posibles causas. En estos momentos existen 17 elementos definidos como esenciales para el crecimiento de las plantas cree posible que algn otro elemento pueda aadirse a esta lista en el futuro? Razone la respuesta. Puede la cantidad de algn oligoelemento existente en el suelo provocar situaciones de toxicidad en la planta? Razone la respuesta. Qu microelemento es necesario para configurar la es tructura funcional de la nitrato reductasa y de la nitrogenasa? Explique el posible papel del Ca como segundo mensa jero en la clula vegetal. Cite tres elementos beneficiosos dando, al menos, una razn de por qu lo son. Cul es la razn por la que deben airearse las solucio nes nutritivas empleadas en el crecimiento de plantas mantenidas sin soporte mecnico?

97

5.

OTROS ELEMENTOS

5.

Existen pruebas suficientes que demuestran la esencialidad del iodo (I) y el vanadio (V) en algas marinas y hongos, y en algas de agua dulce, respectivamente; sin embargo, en plantas superiores, estos datos son ms va gos. En los ltimos aos se ha prestado un inters espe cial a las tierras raras cerio (Ce), y lantano (La), princi palmente. La mezcla de ambos elementos en dosis de micronulrientes se utiliza con aparente xito en China como fertilizante foliar en diversos cultivos.

6. 7. 8. 9.

RESUMEN En este captulo, se pasa revista al conjunto de elemen tos o nutrientes que se consideran esenciales para las plantas. Esta parte central de la Fisiologa Vegetal se denomina nutricin mineral de las plantas y es una de las que ms contribuye a la comprensin del funciona miento de stas. Sin embargo, es una de las partes ms complejas dado que su estudio implica no solamente a fisilogos vegetales sino tambin a bioqumicos, qumi cos inorgnicos, especialistas del suelo, microbilogos y eclogos. Hemos visto en primer lugar, las razones que definen a un elemento como esencial, haciendo una resea especial de las soluciones nutritivas como herra mienta habitual de trabajo a la hora de definir tales ele mentos. Se explican las causas por las cuales se ha estable cido una divisin entre macroelementos y microelementos en funcin, no cualitativa, sino cuantitativa, de las ne cesidades especficas de las plantas. Asimismo, se resu men las razones de orden fisiolgico, bioqumico o mo lecular que hacen esenciales a dichos bioelementos. Por ltimo, se distinguen las diferencias con los denomina dos elementos beneficiosos y se hace un estudio deta llado de los mismos, al igual que de un pequeo grupo de otros elementos implicados en la mejora de la pro duccin vegetal.

10.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA 1. Barcel, J., Nicols, G., Sabater, B., Snchez Tams, R.: Nutricin mineral. En: Fisiologa Vegetal, 6.a ed. pp. 150-167. Ediciones Pirmide. S. A. Madrid. 1992. 2. Clarkson, D. T.:Factors affecting mineral nutrient acquisilion by plants. Ann Rev Plant Physiol, 36: 77-115. 1985. 3. Epstein. E.: Mineral Nutrition of Plas: Principies and Perspectives. John Wiley and Sons, Inc., Nueva York, 1972. 4. Gil, F.: Nutricin mineral. En: Elementos de Fisiolo ga Vegetal, 1.a ed. pp. 249-283. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid. Barcelona, Mxico. 1995. 5. Guardiola. J. L.. Garca Luis, A.: Absorcin, transporte y metabolismo de los elementos minerales. En: Fisio loga Vegetal I: Nutricin y Transporte, 1.a ed. pp. 201294. Editorial Sntesis, S. . Madrid. 1990. 6. Hopkins. W. G.: Plants and inorganic nutrients. En: Introducon to Plant Physiology. pp. 66-80. John Wiley & Sons, INC. Nueva York, 1995. 7. Marschner, H.: Mineral Nutrition in Higher Plants. 2.a ed. American Press. Londres, 1995. 8. Mengcl. K Kirkby. E. A.: Principies of Plant Nutrition, 4." ed. International Potash Institute, Suiza. 1987. 9. Salisbury. F. B., Ross, C. W.: Mineral nutrition. En: Plant Physiology, 4.a ed. pp. 96-113. Wadsworth Inter national. California, 1992. 10. Taiz. L.. Zeiger. E.: Mineral nutrition. En: Plant Physiology. pp. 100-119. The Benjamin/Cummings Publishing Company. INC. California. 1991.

PROBLEMAS Y CUESTIONES 1. Cundo se considera que un elemento es esencial para las plantas? 2. Cul es la diferencia entre elemento esencial y benefi cioso?

CAPITULO

ABSORCIN Y TRANSPORTE DE NUTRIENTES MINERALES


Jos Antonio Fernndez y Jos Mara Maldonado
1. Introduccin. 2. Criterio termodinmico para distinguir entre transporte activo y pasivo. 3. Cinticas del transporte activo y pasivo. 4. Energtica de las membranas vegetales. 5. Papel de las bombas primarias en la generacin del potencial de membrana. 6. Transporte secundario de iones. 7. Homeostasis del potencial de membrana y del pH y calcio libre del cito plasma. 8. Sistemas redox del plasmalema. 9. Flujo de iones en la raz.

1.

INTRODUCCIN

A excepcin del carbono, las plantas terrestres toman los componentes esenciales de su biomasa del suelo. A-f. macronulrientes y micronuirientes son incorporaJos desde la solucin salina del suelo hasta el interior de las clulas, donde son almacenados, metabolizados o transportados a otras clulas, tejidos u rganos. Una caracterstica que comparten todas las clulas is es su capacidad de mantener en su interior iones y molculas notablemente fuera del equilibrio. En gran medida, esa propiedad se debe a las caractersticas es tructurales y funcionales de la membrana plasmtica, plasmalema en las clulas vegetales (vase Captulo I). :l plasmalema es algo ms que una doble capa lipdica mesta por distintos tipos de fosfolpidos y estero.ontiene distintos tipos de protenas, algunas de cuas con una marcada actividad enzimtica, a travs de ales existe un continuo trfico de iones que permias clulas incorporar y acumular nutrientes, excluir wnes o sustancias txicas, o intervenir en distintas res:_estas a estmulos hormonales o medioambientales. No todos los iones se transportan a travs del plasmade la misma forma o a travs del mismo tipo de na. Algunos son transportados y acumulados en - -Jiciones cercanas al equilibrio, otros se transportan cumulan muy por encima o muy por debajo del o. En el primer caso se habla de transporte pasidifusivo; en el segundo, de transporte activo.

motriz. Un ion es transportado de forma activa si su movimiento se realiza en contra de dicha fuerza, para lo cual las clulas vivas emplean energa metablica. Sa ber calcular la fuerza ion motriz es imprescindible para distinguir ambos tipos de transporte. Como se ver ms adelante, la fuerza ion motriz es la diferencia entre el potencial de membrana de las clulas y el potencial de Nernst para el ion problema.

2.1.

La ecuacin de Nernst expresa asimetras de concentracin de iones en trminos de voltaje

Los iones tienden a moverse cuando hay una fuerza que los empuja. La energa asociada a un ion (j) depende, aparte de sus caractersticas intrnsecas, de su concen tracin (C|) y de las condiciones elctricas donde se en cuentre (\i). La suma de esos tres componentes se deno mina potencial electroqumico (fi) y cuantifca la capacidad de trabajo que un ion posee: /7| = if + RT In C + zFtft donde /(* es el potencial qumico en condiciones estn dar, R es la constante de la ecuacin general de los ga ses (8.31 J K ' mol"'), Tes la temperatura absoluta (K), z es la carga del ion. F es la constante de Faraday (96.5 J mol"1 mV ') y i// es el campo elctrico donde el ion se encuentra. Si se tienen dos compartimentos e e i y el ion est en equilibrio termodinmico. los potenciales elec troqumicos en ambos compartimentos son iguales (Fig. 7-1):

CRITERIO TERMODINMICO PARA DISTINGUIR ENTRE TRANSPORTE ACTIVO Y PASIVO ion se mueve de forma pasiva si lo hace a favor de la - fsica que acta sobre l. denominada fuerza ion

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Cl", un potencial de -116 mV mantendra una asimetra 100/1. Es evidente que un compartimento cargado ne gativamente (interior con respecto al exterior) tiende a acumular iones positivos y a excluir negativos.
2.2. La fuerza ion motriz es la diferencia entre el potencial de membrana y el potencial de Nernst

Figura 7-1. Esquema de dos compartimentos, uno exte rior e y otro interior i, separados por una membrana semipermeable, a travs de la cual el ion j puede fluir hasta alcanzar el equilibrio termodinmico.

por tanto, puede escribirse que:


% + RTlnC]

+ iFf = tf + RT In O + zF\j/e

En los sistemas vivos, la mayora de los iones no est en equilibrio. La magnitud de la desigualdad puede calcu larse a partir de la diferencia entre el potencial electro qumico de un ion en los dos compartimentos involu crados. El gradiente de potencial electroqumico sera la diferencia entre ambos compartimentos: A/ij = luf + RT\n q + zFrf/1} - [/(* + RT ln q + zFjf] Agrupando los trminos elctricos y de concentra cin, se tiene:

Agrupando los trminos elctricos a la izquierda y los de concentracin a la derecha, la expresin anterior puede simplificarse: zF{x/' - i//') - RT (ln q - lnCj) y por tanto. Ef = _ i n -1 1 zF C, Esta ecuacin es de las mas citadas en la literatura biolgica y se denomina ecuacin de Nernst. La dife rencia i//1 i//c es el potencial de membrana con el cual el ion j estara en equilibrio; se denomina potencial de Nernst y se abrevia Ef Al objeto de facilitar los clculos, es frecuente encontrar la ecuacin escrita con logaritmos decimales:

A/J = izF(f - rn -

RTlf

La ecuacin de Nernst permite expresar un cociente de concentraciones como un potencial elctrico, y vice versa. As. RT ln q/C\ en esta ltima ecuacin puede sustituirse por su valor expresado en trminos elctri cos: Ef zF, es decir:

Afi. = IzFW - fl - [i? ZF1


donde i//' i/e es la diferencia de potencial elctrico que existe entre ambos compartimentos o potencial de membrana (Em) y puede medirse independientemente. Finalmente, la expresin quedara como: AfiJF = z(Em Ef)

Ef =

^2.303 log10S

As, para un ion catin monovalente (: = + l),ya una temperatura de 20 "C, RT/zF vale 25.2 mV y, multipli cado por 2.303, vale 58 mV. Esta ecuacin puede leerse de izquierda a derecha o de derecha a izquierda. En el primer caso, si se tiene un potencial de referencia, puede calcularse la asimetra de un ion cuando est en equilibrio en ambos comparti mentos. En el segundo caso esta ecuacin permite, a partir de una asimetra de concentracin, calcular un potencial con el cual el ion j estar en equilibrio ter modinmico. Ntese que una variacin de diez veces en la asimetra de un ion monovalente significa una varia cin de 58 mV en el potencial de Nernst. Es ilustrativo pensar que una asimetra 1/100 para un catin monova lente. como el K+. estara en equilibrio con un potencial de 116 mV. En cambio, una asimetra similar se mantiene para un catin bivalente, como el Ca:+, con slo 58 mV. Para un anin monovalente como el

El gradiente de potencial electroqumico para un ion, o fuerza ion motriz, expresado en mV (AfUF), es la diferencia entre el potencial de membrana (Em) y el po tencial de Nernst (Ef) para el ion, multiplicado por la carga. Vase que cuando el potencial de Nernst para un ion y el potencial de membrana son iguales, el gradien te de potencial electroqumico es cero y el ion est en equilibrio. Para un catin monovalente, si Em es ms negativo que Ef, la fuerza ion motriz es negativa y cl ion tiende a entrar en el compartimento i. Por el con trario, si Ef es mas negativo que Em, la fuerza ion mo triz adquiere valor positivo, el ion se acumula en i por encima de su valor de equilibrio y la fuerza fsica que lo empuja se dirige hacia fuera (Fig. 7-2). El transporte pasivo o difusivo de un ion se produce a favor del gradiente de potencial electroqumico o fuer za ion motriz. El transporte pasivo implica, as mismo,

Absorcin

y transporte

de nutrientes

minerales

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A
>,/F 1

V/ AH,/F +

Figura 7-2. El gradiente de potencial electroqumico para el ion j o fuerza ion motriz es la diferencia entre el poten cial de membrana ( m ) y el potencial de Nernst ( f ^ ) , multi plicada por la carga del ion (z). Cuando esta variable ad quiere un valor positivo, el ion est sometido a una fuerza fsica que tiende a sacarlo del compartimento i. Cuando tiene valor negativo, el ion se ve empujado a entrar en i.

que el ion tiende a acumularse en las clulas en una concentracin prxima al equilibrio para un potencial de membrana determinado. La razn para ello es que el transporte pasivo tiende a igualar el potencial de Nernst del ion que se mueve (?) al potencial de membrana (Em). Una variacin en la concentracin externa o inter na determina una nueva reorganizacin de las concen traciones a ambos lados de la membrana hasta alcanzar. de nuevo, el equilibrio. En una situacin real, por ejemplo, una clula de la raz, la concentracin de un determinado ion en el suelo cambia continuamente debido a dilucin, adsorcin. transporte y movilizacin. Dentro de la clula, al mis mo tiempo, la concentracin tambin cambia debido principalmente al transporte (dentro o fuera de la clu la) o al metabolismo. En una clula viva, el equilibrio para un ion es una situacin dinmica en la que el ion fluye continuamente a travs del plasmalema. Es importante tener en cuenta, no obstante, que hay muy pocos iones que se comporten de esa forma. Un ejemplo podra ser el del K+, cuando hay cantidad sufi ciente en el suelo. En todas las plantas y para casi todos los iones, el potencial de membrana siempre es ms ne gativo que el potencial de Nernst. lo que los sita fuera del equilibrio. En el caso del transporte activo, el ion se mueve en sentido opuesto al de la fuerza fsica que acta sobre l. es decir, en contra del gradiente de potencial electroqu mico o fuerza ion motriz. La existencia de este tipo de transporte es esencial para las clulas vegetales, ya que un correcto funcionamiento de las principales rutas metablicas requiere concentraciones internas de muchos iones muy por encima o por debajo de la concentracin interna de equilibrio. 3. CINTICAS DEL TRANSPORTE ACTIVO Y PASIVO A finales de la dcada de los cincuenta, uno de los pio neros del estudio del transporte de iones en plantas, En-

manuel Epstein. observ que. en races de cebada, el K~ se transportaba de dos formas distintas en funcin de la concentracin externa. Cuando la concentracin exter na de KC1 era inferior a 0.2-0.5 mM, incrementos en la concentracin externa de K+ generaban un incremento muy rpido de la tasa de incorporacin que, no obstan te. se saturaba a medida que la concentracin externa de K+ creca. La velocidad de incorporacin se incremen taba de nuevo slo si se aadan concentraciones de K+ bastante ms altas, y segua creciendo hasta una con centracin de KC1 de 50 mM. Este lipo de cintica de incorporacin se denomin bifsica (Fig. 7-3). Basndose en el estudio cintico de la incorporacin de K~, Epstein propuso la existencia de dos mecanis mos de transporte. El primero, que denomin de tipo 1, sera capaz de extraer K~ del suelo a concentraciones muy bajas y sera saturable. El segundo, que funciona ra a concentraciones de R* altas, se denomin de tipo 2 (Fig. 7-3). Este ltimo, con el margen habitual de con centraciones en el suelo, presentara una cintica prcti camente lineal y se saturara slo a concentraciones muy altas de K*. Una de las contribuciones ms impor tantes de Epstein fue aplicar el modelo de anlisis de la cintica enzimtica al iransporte inico. As observ que la cintica descrita para el mecanismo 1 se ajustaba a una curva de Michaelis-Menten: v = * U S/(KM + S) donde v y V.x seran la velocidad de incorporacin y la mxima velocidad de incorporacin del ion, respectiva mente; KM sera la concentracin inica en el medio ex terno que produce una velocidad de incorporacin igual a la mitad de la mxima y S sera la concentracin del ion en el medio externo. La evidente analoga con los sistemas enzimticos sugera que el transporte inico de tipo I podra estar mediado por protenas de membrana que tendran una relacin de especificidad por los iones similar a la que existe entre un enzima y el sustrato. En lugar de catalizar su transformacin en producto, las protenas de transporte catalizaran el trnsito de los iones de un lado al otro de las membranas. Este tipo de

50mM[K] Figura 7-3. Cintica bifsica de incorporacin de K*en ra ces de cebada. Para este tipo de plantas el cambio de cinti ca tiene lugar entre 0.2 y 0.5 m M .

1 02

Fundamentos

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protenas recibi el nombre de transportadores (carriers) o permeasas y su actividad se asoci a un trans porte activo. El mecanismo de tipo 2. mucho menos especfico y mucho ms dependiente de la concentracin exlerna, se asoci a un transporte pasivo (difusivo). No obstante. algunos autores de la poca, usando mtodos ms finos. fueron capaces de resolver en ms de una cintica el componente lineal y llamaron a la cintica, en su con junto, multifsica, que pareca sugerir un esquema ms complejo. Gracias a los estudios de Epstein, por primera vez se habl de afinidad en referencia a los sistemas de trans porte, variable de extraordinaria importancia para ex plicar correctamente el uso de los recursos minerales del suelo, la competencia y la productividad de las es pecies vegetales.

4.1.

La bomba primaria que energetiza al plasmalema es una ATPasa de protones

Las clulas vegetales no tienen bombas Na+-K+. La bomba primaria del plasmalema es una bomba de pro tones que los saca del citoplasma y los vierte al exterior consumiendo ATP (ATP fosfohidroiasa de protones o H+-ATPasa) (Fig. 7-4). La energa metablica, en el caso de las membranas vegetales, se acumula en forma de asimetra en la concentracin de H+ y como diferen cia de potencial elctrico entre el citoplasma y el exte rior, es decir, como gradiente de potencial electroqu mico de protones o fuerza H* motriz: AflM-/F = Em - *}, En el caso de las clulas vegetales, el componente elctrico es mucho ms importante que la asimetra de concentracin por dos razones. En primer lugar, en el funcionamiento de la H+-ATPasa no existe un flujo aso ciado de otro ion que compense, ni siquiera parcialmen te como en clulas animales, el dficit de carga positiva del citoplasma. Esto hace que el potencial de membrana de las clulas vegetales sea muy negativo, entre 160 y 250 mV segn la especie. En segundo lugar, la asi metra de protones que genera la bomba se disipa par cialmente debido a la capacidad amortiguadora del me dio externo, por un lado, y a los mecanismos de homeostasis del pH del citoplasma, por otro (Fig. 7-5). En la literatura bioqumica, las H+-ATPasa del plas malema se denominan de tipo P porque forman una unin covalente con el fosfato, proveniente del ATP, durante cada ciclo de bombeo de H+ al exterior. Debido a la particular unin con el Pi durante la catlisis, las H+-ATPasas del plasmalema son sensibles a la presen cia de ortovanadato, ya que este ion bloqueara el lugar de unin para el fosfato. En vesculas aisladas del plas malema. la presencia de concentraciones de este ion del orden micromolar (/.<M) inhibe la actividad de la bom-

4.

ENERGTICA DE LAS MEMBRANAS VEGETALES

El transporte de iones, ya sea pasivo o activo, requiere energa, fsica en el primer caso y metablica en el se gundo. En una clula, la fuente de energa es el metabo lismo, que produce energa qumica y poder reductor. La energa metablica se transforma en energa til para el transporte de iones en las membranas a travs de la actividad de las bombas primarias. Estas bombas son protenas de membrana que mueven iones (masa y carga) en contra de su gradiente de potencial electroqu mico, utilizando energa metablica y generando gra dientes tanto de concentracin como elctricos. El transporte de iones que tiene lugar a travs de las bom bas primarias se denomina transporte primario. Debi do a la capacidad de las bombas primarias para generar diferencias de potencial elctrico al tiempo que catali zan la hidrlisis del ATP. las bombas primarias reciben el nombre de electroenzimas. La bomba primaria de las clulas animales es la bom ba Na*-K+ que impulsa la salida de 3 iones Na+ y la entrada de 2 iones KT consumiendo ATP. La energa contenida en el enlace rico en energa del ATP se acu mula en la membrana generando al mismo tiempo un gradiente de concentracin de iones Na+ y K ' y cargan do la membrana negativamente en su interior. La entra da de K+ compensa parcialmente el dficit de carga po sitiva del citoplasma producido por la salida de Na', y eso hace que la actividad de la Na+-K+ ATPasa de las clulas animales sea poco electrognica (Fig. 7-4). La energa acumulada asociada al Na* puede expresarse, por tanto, como el gradiente de potencial electroqu mico para el Na+ o fuerza NaT motriz en la que el componente asociado a la asimetra de concentracin de Na* es ms importante que el componente elc trico.

3Na'

ATP

2IC

ADP+Pi

Figura 7-4. Bomba Na~-K~ de clulas animales y bomba de l-r (hT-ATPasa) en clulas vegetales. En las clulas ani males la salida de carga positiva asociada al Na ' se compen sa parcialmente por la entrada de K". En clulas vegetales, el bombeo de H ' no est acoplado al flujo de ningn otro ion.

Absorcin

y transporte

de nutrientes

minerales

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Plasmalema Citosol cido mlico

Tonoplasto

Vacuola

bomba de sodio es simultneo al funcionamiento de la H+-ATPasa de la membrana citoplasmtica y la bomba es electroneutra. es decir, no contribuye al Em. Su fun cin est relacionada con la disminucin de la concen tracin interna de Na", que entra de forma pasiva a tra vs de los canales de K+. Por ltimo, el alga verde marina Acetubularia, en lu gar de una bomba de protones, tiene como sistema para energetizar al plasmalema una CF-ATPasa que em plea ATP en el transporte electrognico de Cl~. Aun que esta bomba ha sido bien caracterizada desde el pun to de vista funcional, an permanece oscuro el sistema de reciclado del Cl". Algunos autores sugieren que la salida de Cl~ del citoplasma se produce coincidiendo con despolarizaciones peridicas que, espontneamen te, ocurren en esta especie y parecen coincidir con dis minuciones en la turgencia. Otros sostienen que el Cl~ es acumulado en vesculas intracelulares y liberado al medio por exocitosis.

^igura 7-5. Flujo de protones y regulacin del pH cito: asmtico de una clula vegetal. 1) H "-ATPasa de tipo P, ; : m b a primaria que transforma energa metablica (ATP) - fuerza protn motriz (A/i H F) en el plasmalema. 2) H ' -~ D asa, tipo V, del tonoplasto. 3) Pirofosfatasa. 4) Sistema ; r cotransporte (simporte). 5) Sistema de transporte inver 30 o antiporte. 6) Canal aninico permeable al malato. 7) Fosfoenolpiruvato carboxilasa. 8) Enzima mlica.

4.2.

Las bombas primarias del tonoplasto son una ATPasa de protones y una pirofosfatasa

-_. si bien in vivo la inhibicin es mucho ms pequea iebido probablemente a la escasa permeabilidad de las branas a este ion. Por esta razn, cuando se preten;. una inhibicin de la bomba se usan inhibidores de la acin, cianuro o azida por ejemplo, que cortan el -^ministro de ATP a la bomba, incluso en clulas fototicas iluminadas. Es importante destacar que la acad de la H+~ ATPasa y, en consecuencia, el E, de _> clulas vegetales, sean fotosintticas o no, se man tiene en oscuridad; por tanto, igual que en las clulas mmales, el ATP que usan proviene mayoritariamcntc metabolismo respiratorio (vase Captulo 14) . Vdems de la HT-ATPasa, las plantas poseen en el -lasmalema un segundo tipo de bomba primaria. Se traE una Ca2+-H+ ATPasa, que saca Ca2+ del citoplas ma al tiempo que incorpora H* en un proceso igualmenpendiente de ATP. Esta bomba es tambin del tipo que el bombeo de Ca2+ requiere la formacin de un mediano fosfatado durante la catlisis. La contri- acin de esta bomba a la acumulacin de energa en el : jsmalema es muy pequea ya que, adems de ser me dectrognica que la H*-ATPasa, es mucho menos a que sta. Su funcin es evacuar Ca2* del citoplas ma. para mantener su concentracin en torno a 0.1 /M en este compartimento celular. Algunos hongos, cuando se adaptan a un medio alca lino y con Na*, expresan una bomba primaria en la que ijo de salida de Na* est acoplado a la entrada de H~ con consumo de ATP. El funcionamiento de esta

El tonoplasto es la membrana que delimita la vacuola. Aunque se sabe desde hace mucho que la vacuola es el compartimento donde las clulas vegetales almacenan agua y solutos (vanse Captulos I y 2), hace relativa mente poco tiempo que se conocen los mecanismos, asociados al tonoplasto, responsables de dicha funcin. La fuerza que impulsa la acumulacin de agua y la gnesis de turgencia en las clulas vegetales es osmti ca (vase Captulo 2). A su vez, el origen del potencial osmtico es la acumulacin de iones, principalmente K+, en la vacuola. La energa que se emplea en el tono plasto para mover iones est asociada a la actividad de bombas primarias. En el tonoplasto existen dos tipos de bomba primaria, ambos bombean protones hacia el in terior de la vacuola; por esta razn, el lumen vacuolar es tpicamente cido y positivo. Medidas directas del pH de la vacuola con microelectrodos indican que se encuentra alrededor de 5, aunque hay organismos vege tales que pueden llegar a tener un pH de 1, como es el caso del alga parda marina Desmarestia, que acumula gran cantidad de SO 2 / en forma de cido sulfrico. El potencial de membrana que soporta el tonoplasto es mucho menor que el soportado por el plasmalema y os cila, segn especies, entre 5 y 20 mV (dentro de la va cuola positivo). De las dos bombas de protones del tonoplasto, una tiene actividad ATPasa y la otra, pirofosfatasa. La H 4 ATPasa de la vacuola difiere de la (P) H+-ATPasa del plasmalema en su estructura, mecanismo de reaccin y relacin con los inhibidores. Se denomina de tipo V y se parece mucho a otras bombas de protones presentes en las endomembranas de las clulas eucariolas. Mien tras que las H*-ATPasa de tipo P, presentes en el pas-

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de fisiologa

vegetal

malema, son un polipptido simple de unos 100 kDa, las ATPasa del tipo V se componen de un complejo que atraviesa la membrana proporcionando un poro para los protones y una Traccin externa, fcilmente separable de la primera, donde reside la capacidad de hidrolizar ATP. Se parecen a las ATPasa que existen en tilacoides y en la membrana interna de la mitocondria y, por eso, se cree que tienen un origen comn. La pirofosfatasa de la vacuola (H*-PPasa) tambin cataliza el transporte de H+ al interior de la vacuola, pero usa pirofosfato (PP) como fuente de energa. Esta enzima, exclusiva de las plantas, se compone de un po lipptido simple de unos 80 kDa y su actividad requiere la presencia indispensable de Mg2*, K* y H*. El papel fisiolgico de la H"-PPasa est an por determinar. Porqu existen dos bombas primarias en una membra na con (aparentemente) la misma funcin? Algunos autores sugieren que sirve para acumular la energa aso ciada al PP como fuerza protn motriz en el tonoplasto, lo que ayudara a estabilizar los niveles citoplasmticos de PP; en equilibrio con la actividad de otras enzimas relacionadas. Otros piensan que la H+-PP,asa de la va cuola transportara K* adems de H+ al lumen vacuolar con lo que su funcin sera diferente.

E_ (mV)

Componente difusivo (E)

Eliminacin del CN"

Compone--; metablicc -250 -2 min Figura 7-6. Registro continuo del potencial de membrana (,) de una clula vegetal medido con un microelectrod: que se introduce en A. La adicin de 0.1 m M de NaCN deter mina una despolarizacin del plasmalema de unos 90 m . c o m o consecuencia de la inhibicin de la respiracin. E efecto es reversible, ya que, tras lavar el cianuro, el Em vuel ve a su valor de reposo. Este experimento permite observa los dos componentes del Em en clulas vegetales, uno de pendiente directamente del metabolismo y otro difusivo que depende de la asimetra de iones positivos y negativos dentro y fuera de la clula, potencial de difusin (ED) que puede calcularse mediante la ecuacin de Goldman.

5.

PAPEL DE LAS BOMBAS PRIMARIAS EN LA GENERACIN DEL POTENCIAL DE MEMBRANA

En todas las clulas vivas, el potencial de membrana es siempre negativo en el citoplasma con respecto al me dio externo. La adicin de inhibidores de la actividad de la H*-ATPasa o de la respiracin produce, en clulas vegetales, una despolarizacin parcial del plasmalema (Fig. 7-6). Al potencial residual que queda cuando la bomba primaria est inhibida se denomina potencial de difusin (D) y es reflejo de la asimetra de todos los iones entre el citoplasma y el exterior de las clulas. Los iones que ms contribuyen al ED son tres: K+, Na* y Cl ' aunque en la mayora de las plantas la contribucin del K* es la ms importante debido a la mayor permea bilidad de las membranas vegetales al K+ con respecto a cualquier otro ion. El potencial de difusin puede cal cularse a partir de la asimetra de estos tres iones me diante la ecuacin de Goldman: RT
*"
'''K* "T" ".Na'^-Na

+ Pa Qr
"+" " c T ^ C I "

" K ' t-K* i~' Xa "'-Na'

donde P K -, PNa- y Pa- son las permeabilidades de la membrana para el K+, Na* y Cl ~, respectivamente. El origen del potencial de difusin es la asimetra de los iones que impone la actividad de la H*-ATPasa en cl plasmalema. El dficit de carga positiva en el interior de las clulas tiende a ser compensado por flujos pasi

vos de iones que tendern a estar en equilibrio. El ion cuya permeabilidad es mayor presentar una mayor ve locidad de difusin a travs de la membrana y, por tan to. es el que responder ms rpidamente a variaciones en la fuerza ion motriz. En una hipottica membrana semipermeable para el K*, Na* y Cl ~, donde la permea bilidad relativa sea 1, 0.1 y 0.01, la actividad de una H*-ATPasa que genere un potencial de membrana de 100 mV permitira, en el equilibrio, acumular 100 veces la concentracin externa de K+ y Na* y excluir 100 veces la concentracin interna de Cl~. El potencial de membrana se mide de dos formas: mediante cationes lipoflicos o directamente mediante microelectrodos. En el primer caso se trata de aadir al medio de ensayo, que contiene las clulas cuyo poten cial se quiere medir, una sustancia a la que las membra nas sean permeables y que, adems, est cargada positi vamente. Tal ion se distribuir a ambos lados de la membrana hasta alcanzar el equilibrio. Conociendo la cantidad que ha quedado fuera de la clula y la que se ha incorporado, se aplica la ecuacin de Nernst para calcular el potencial de membrana. Uno de los cationes lipoflicos mas usados es el TPP* (tetrafenilfosfonio), cuya concentracin se mide por potenciometra o mar cndolo con un istopo radiactivo. Esta tcnica se em plea en clulas procariotas o en orgnulos procedentes de clulas eucariotas. La principal limitacin de este mtodo para calcular el Em de clulas eucariotas reside en que, una vez incorporado al citoplasma, el catin lipoflico tiende a acumularse, a su vez, en los distintos orgnulos segn el E, de cada uno de ellos. La ecua-

Absorcin

y transporte

de nutrientes

minerales

105

de clulas vegetales es la localizacin de los microelec trodos. En plantas, la vacuola ocupa muchas veces ms del 90 % del volumen del citoplasma, lo que haca pen sar a muchos autores que lo que medan era la diferen cia de potencial entre la vacuola y el exterior, y no entre el citoplasma y el medio externo. Al final de la dcada de los ochenta, el uso frecuente de microelectrodos de pH demostr que. en casi todos los casos, los microe lectrodos se situaban en el citoplasma, ya que ste era ligeramente alcalino, en torno a un pH de 7.3 frente al pH cido, en torno a 5. que se mide en la vacuola.

6.

TRANSPORTE SECUNDARIO DE IONES

Plasmalema

Tonoplasto

Figura 7-7. Medida del potencial de membrana en clulas .egetales mediante microelectrodos. Tanto stos (1) como el electrodo de referencia (3) se llenan de KCI 0.5 M y se conec tan a un voltmetro de alta impedancia (2). El microelectrodo -a de atravesar la pared celular y alojarse en el plasmalema en contacto con el citoplasma sin tocar el tonoplasto.

El transporte secundario consume la energa acumulada en las membranas por las bombas primarias. El consu mo de energa debido a la actividad del transporte se cundario se refleja en la despolarizacin de la membra na. A diferencia del transporte primario, que genera una diferencia de potencial elctrico y es. por tanto, electrognico. el transporte secundario disipa la diferencia de potencial acumulada en la membrana y es, por tanto, electrofortico. El transporte secundario de iones se establece a travs de dos tipos de protenas de membra na: canales inicos, en el caso del transporte pasivo, y transportadores (carriers). en el caso del transporte activo.

6.1.

El flujo pasivo de iones tiene lugar a travs de canales

cin de Nernst no puede aplicarse en este caso y han de usarse sistemas ms complejos y menos fiables para calcular el Em. El segundo mtodo consiste en la medida directa del E mediante microelectrodos (Fig. 7-7). Estos se fabri.an calentando un capilar de vidrio y estirndolo hasta jue el dimetro de la punta alcanza entre 0.2 y 0.6 /tm. El interior se llena de una solucin 0.5 M de KCI. Fuera Je la clula, e inmerso en el medio de ensayo, se sita jn electrodo de referencia, lleno con la misma solucin solidificada con agar al 3 % . El microelectrodo y el electrodo de referencia se conectan a un voltmetro de illa impedancia que medir directamente el potencial Je membrana. A principios de siglo, los microelectro dos se hacan a mano y se insertaban dentro de clulas egetales gigantes; por eso. Chara y Nitella son tan po-ulares en experimentos de electrofisiologa. Hoy da s microelectrodos se fabrican con aparatos espcciallente diseados, que permiten estandarizar, tanto la forma, como el dimetro de la punta. Adems, el uso de nicromanipuladores acoplados a microscopios permite i medida de potenciales de membrana en un nmero .reciente de especies y tipos celulares. Un problema clsico que surge cuando se mide el Em

Los canales son protenas que funcionan como poros selectivos en la membrana. Su distribucin es prctica mente universal en las membranas de todas las clulas y organillos celulares. En plantas se han descrito hasta la fecha distintos tipos de canales para K+, para Ca2+ y para CT~. Recientemente se han descubierto canales para el agua, denominados acuaporinas, especialmente abundantes en membranas sometidas a un flujo grande de agua. Los canales inicos no slo aparecen en el plasmalema, sino que tambin estn presentes en el to noplasto, retculo endoplsmico, mitocondria, membra na interna del cloroplasto y membrana tilacoidal. Un canal de K* tpico estara constituido por cuatro subunidades de entre 65 y 100 kDa que formaran el poro y que contendran un filtro de selectividad y sensores a distintos tipos de estmulos. A finales de los aos setenta, dos investigadores ale manes. Neher y Sakmann, usaron una tcnica nueva para el estudio de los flujos inicos en las membranas. Se trataba de, en vez de insertar electrodos muy finos dentro de las clulas, adherir un electrodo de punta roma a la superficie de stas. La tcnica se denomin patch-clamp y su aplicacin a clulas vegetales requie re disgregar las clulas del tejido y eliminar la pared

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Fundamentos

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celular mediante un tratamiento con diversas enzimas celulolticas. Se obtiene entonces una clula vegetal sin pared que se denomina protoplasto. La adhesin firme del electrodo a la superficie del protoplasto se llama sellado y se detecta por la alta re sistencia que presenta al paso de la corriente elctrica, que se sita alrededor de I0y ohmios (GQ). Mediante esta tcnica es posible medir la corriente asociada al (lujo de iones a travs de la pequea superficie que que da sellada por el electrodo y que se debe a la actividad de unos pocos canales. Tambin es posible, haciendo un agujero en la membrana del protoplasto, registrar el paso de la corriente a travs de todo el plasmalema (Fig. 7-8). Los experimentos de patch-clamp revelan que los ca nales estn abrindose y cerrndose continuamente a una velocidad altsima (Fig. 7-9). A esta propiedad de abrirse y cerrarse se denomina gating y la probabilidad de apertura refleja la actividad del canal. El flujo de iones a travs de los canales es, pues, un proceso dis continuo. La cantidad de iones que Huyen a travs de un canal cuando est abierto, est determinada por su con ductancia y por la magnitud de la fuerza ion motriz. La

representacin grfica de la intensidad de corriente que atraviesa los canales en funcin del voltaje que se apli ca da lugar a las denominadas curvas 1-V (intensidadvoltaje), cuya pendiente es una medida de la conductan cia del canal (Fig. 7-9). Asumiendo que el flujo de iones a travs de la doble capa lipdica de las membranas es prcticamente nulo, la permeabilidad de una membrana para un determinado ion es un valor integrado del nme ro de canales, su conductancia y su actividad (gating). Tanto en el plasmalema como en el tonoplasto, los ca nales ms abundantes son los de K*. A diferencia de los canales de K+ de clulas animales, los de las plantas son permeables a un gran nmero de cationes monovalentes. Por ejemplo, en Nitelkt, en orden decreciente, los canales de K+ son permeables a Rb+. NH, Na+, Li+ y Cs+. La actividad de los canales es sensible a una serie de estmulos ambientales o fisiolgicos. En el plasmalema existen canales amnicos que responden a la turgencia y a la hiperpolarizacin, de forma que cuando la mem brana sobrepasa un determinado valor negativo de Em o la turgencia es demasiado alta, los canales aninicos se abren, dejan escapar una cierta cantidad de Cl~ que despolariza la membrana, se libera K+ y, como conse cuencia, se elimina agua. La concentracin de Ca2+ en el citoplasma es determinante para la regulacin de los canales tanto del plasmalema como del tonoplasto. Un incremento en la concentracin de Ca2+ libre en el cito plasma de las clulas oclusivas, como respuesta a oscu ridad o al ABA, induce el ciee de canales de entrada de K* y la apertura de canales de salida de K+ y de canales aninicos, lo que determina la prdida de tur gencia de las clulas oclusivas y, en consecuencia, el cierre del estoma (vase Captulo 3). El mximo de Ca2* que induce el cierre de los estomas puede estar ocasionado por la activacin de protenas G, inositol1,4,5-trifosfato (IP3) o ABA, ya que inducen la entrada de Ca2+ en el citoplasma y, en el caso del IP la libera cin de Ca2+ de la vacuola (vanse Captulos 18 y 22).

6.2.

El transporte activo secundario tiene lugar a travs de transportadores

Figura 7-8. Esquema de la configuracin de la pipeta y del protoplasto en un experimento de patch-clamp. La pipeta debe quedar firmemente adherida al exterior de la clula (sellado) tras lo cual, succionando o tirando, se puede acce der al interior de la clula (A) o retirar una pequea porcin del plasmalema (B). En el primer caso se registra la activi dad de los sistemas de transporte de toda la clula y, en el segundo, la actividad de los que se encuentran incluidos en el pequeo trozo que se retira.

Adems de las bombas primarias y de los canales ini cos. los transportadores (carriers) son el tercer gran grupo de protenas de membrana que intervienen en el trfico de iones en la clula. Su funcin es incorporar o liberar iones o molculas en contra del gradiente de po tencial electroqumico; por lo tanto, transportan los iones de forma activa, empleando para ello la energa acumulada en la membrana por la actividad de las bom bas primarias. En el caso de las plantas, esta energa se acumula como fuerza protn motriz (A/IH+/F) y son, por tanto, protones los iones que impulsan el transporte ac tivo secundario en la clula vegetal. Segn sea el sentido del flujo del ion motriz con res pecto al ion que se transporta, se distinguen dos mode los funcionales de transportador: cotransporte o simpor-

I
IIMULJIIM
. -

Absorcin 100 ms

y transporte

de nutrientes

minerales

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j 4pA

KpA)

250 mM

M^m.O-AiL^Wv^a^U^wjil4UUij\

-* y'rnrriTnrnr^-^r^nrr
/

40

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120 160 EJmV)

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-12--

)mV

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ra 7-9. Registro continuo de la intensidad de corriente asociada al flujo de K' a travs de un pequeo trozo de plasmaa durante un experimento de patch-clamp. La intensidad de corriente que atraviesa los canales es proporcional a la - terencia de potencial elctrico que se aplica a ambos lados de la membrana. En este caso, se trata de un canal reversible. presentacin grfica de la intensidad de corriente que atraviesa los canales, en funcin del voltaje aplicado, da lugar a las curvas l-V, cuya pendiente es un estimador de la conductancia del canal.

transporte invenido o antiporte. En el primer caso. : entrada a la clula del ion motriz impulsa la entrada ie un ion o molcula en contra del gradiente de poten-lectroqumico. En el segundo caso, la entrada en la I ala del ion motriz impulsa la salida de la clula de un . o una molcula en contra del gradiente de potencial jctroqumico. Desde el punto de vista energtico, es mprescindible que la energa asociada al ion motriz sea -nayor que la energa necesaria para mover el ion que se transporta. El balance energtico entre ambos iones de terminar, a su vez. la estequtometra entre ambos. Veamos un ejemplo: El NO: en plantas es incorporado a las clulas en cotransporte con protones (vase Captulo 15). Si la c lula tiene un potencial de membrana de -200 mV. un pH citoplasmtico de 7.3 y una concentracin citoplasmtica de NO, de 1 mM y la situamos en un medio que . iiviene 0.1 mM de NO, a pH 7.3. se necesitarn dos protones para que la incorporacin de una molcula de \ . sea termodinmicamente posible. En esas condi ciones, la fuerza asociada al ion motriz. A iHJF, es igual a nz(, - Ef, ), siendo n el nmero de H~ impli cados en el transporte. Si el pH dentro y fuera de la clula es el mismo, - vale cero y /H+/F es igual al

potencial de membrana: 200 mV. En cambio, el po tencial del Nernst para el NOj es +58 mV, con lo que la fuerza ion motriz que acta sobre este ion ser +258 mV. Un solo protn ser, en estas condiciones, incapaz de impulsar el transporte de NOj. Sin embargo, dos protones duplicaran la fuerza protn motriz, siendo ya ms que suficiente para que el N07 se incorpore. Los principales nutrientes que necesitan las plantas se incorporan en cotransporte con protones. As parecen incorporarse, segn el mecanismo de alta afinidad (o mecanismo 1 segn la terminologa de Epstein), NO,, NH. H,PO;, SO;-. Cl". K+ y algunas molculas ms grandes como acetato, glucosa o algunos aminocidos. De esta forma se transporta la sacarosa al interior de las clulas del floema, siendo este mecanismo esencial para la carga del mismo. Debido al sentido en el que se orienta la fuerza pro tn motriz, los sistemas de transporte invertido o anti porte son especialmente abundantes en el tonoplasto. En esa membrana, el flujo de salida de H* est acoplado al flujo de entrada de IC y Na1". No obstante, el proceso de exclusin de Na* del citoplasma parece estar tam bin asociado a la existencia de un antiporte H+-Na+ en el plasmalcma.

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de fisiologa

vegetal

6.3.

La fuerza IMa+ motriz puede ser una fuente alternativa de energa para el transporte secundario

Aunque el ion motriz universal en plantas es el H+, se ha descubierto recientemente que el Na""" acta como ion motriz en determinado tipo de organismos vegeta les. En cianobacterias el NOj se incorpora impulsado por el gradiente electroqumico para el Na*. Chara y Nitella presentan mecanismos de transporte de K+, de alta afinidad, en cotransporte con Na*. En Nitella, urea y usina se transportan de la misma forma. En el trigo se ha aislado un gen, denominado HKTI. que codifica una protena que incoipora K+ en cotransporte con Na+. La importancia fisiolgica de estos sistemas de trans porte est aun por determinar, pero parecen aprovechar el gradiente de potencial electroqumico favorable a la entrada de Na+ para impulsar la incorporacin de deter minados nutrientes. En algas y hongos, estos sistemas se expresan cuando el medio es alcalino y rico en Na* y parecen conferir a las plantas una cierta resistencia a la salinidad, no se sabe bien si por s mismos o porque su funcionamiento depende de la existencia en el plasmalema de un sistema de bombeo de Na* al exterior impul sado, a su vez. por protones.

Figura 7-10. Modelos de incorporacin de carbono en plantas acuticas. Deshidratacin externa de HCO, y difu sin de C 0 2 a travs del plasmalema en Potamogetn y Phyllariopsis (A). Cotransporte HC0 3 -H' en las bandas aci das de Chara (B) y antiporte HCO,-CI de Ulva (C).

aclimata a un pH de 9, desarrolla un sistema de incorpo racin directa de HCOJ que consiste en un antiporte. donde la entrada de HCO est impulsada por la salida de C l _ del citoplasma (Fig. 7-10).

7. 6.4. Algunas plantas acuticas incorporan el carbono inorgnico para la fotosntesis a travs de transportadores

HOMEOSTASIS DEL POTENCIAL DE MEMBRANA Y DEL pH Y CALCIO LIBRE DEL CITOPLASMA

La fuente de carbono inorgnico para la fotosntesis de las plantas terrestres es el C0 2 , pero las plantas acuti cas estn expuestas a otras formas de carbono inorgni co en funcin del pH donde viven. A medida que el pH del medio aumenta, el CO, disuclto en agua se hidrata y forma HCO^. A un pH poco mayor de 8, prcticamente el 100 % del carbono inorgnico disponible para la fo tosntesis es H C O T . Para tener acceso a esta fuente de carbono, algunas plantas dulceacucolas alcalfilas y plantas marinas desarrollan estrategias diversas. Algu nas segregan al espacio periplsmico la enzima anhidrasa carbnica (CA), que cataliza la interconversin de COo en HCO"; el bicarbonato es deshidratado exter namente y el C 0 2 difunde a travs del plasmalema al citoplasma. Este parece ser el caso del alga parda mari na Phyllariopsis o de la angiosperma dulccacucola Po tamogetn (Fig. 7-10). En Characeas el HCO^ se incor pora al citoplasma en cotransporte con H*. el HCO, es deshidratado internamente en una reaccin catalizada por la CA interna y los O H - que se generan se liberan al exterior, a favor del gradiente de potencial electro qumico, a travs de canales amnicos. Los mecanis mos de incorporacin de HCO y de liberacin de OH ~ estn separados espacialmente, lo que da lugar a regio nes acidas y regiones alcalinas. En Monoraphidium el sistema de transporte de HCO^ parece estar estimulado por luz azul. Por ltimo, el alga marina Ulva, cuando se

Los desajustes en el balance de cargas asociadas al flujo de iones se compensan con variaciones en la actividad de la bombas primarias y en la actividad de los canales de K ' y C P (canales aninicos). Cuando la membrana se despolariza, debido al transporte masivo de un ion, se incrementa la actividad de la H*-ATPasa del plasmalema, ya que bombea protones en contra de una menor fuerza protn motriz. Al mismo tiempo, se abren cana les de salida de K*. lo que permite una rpida repolari zacin de la membrana. En cambio, cuando la membra na se hiperpolariza. el funcionamiento de la H~-ATPasa del plasmalema se ralcntiza (bombea protones en con tra de una mayor fuerza protn motriz) y se abren cana les aninicos, lo que permite una salida de iones negati vos, principalmente Cl~. que despolariza parcialmente la membrana. El pH del citoplasma de las clulas vegetales es muy constante y no parece diferir mucho entre especies. Las bombas primarias situadas tanto en el plasmalema como en el tonoplasto evacan protones del citoplasma de forma continua (vase Fig. 7-5). Una buena parte de los protones que se liberan al apoplasto o al lumen vacuolar vuelve al citoplasma a travs de los sistemas de transporte activo secundario del plasmalema y tono plasto. El dficit citoplasmtico de H + originado por la dilucin en el apoplasto. o por la diversa estequiometra de los transportadores, es compensado con la sntesis de cidos orgnicos de bajo peso molecular como, por ejemplo, el cido mlico. As, una lcali nizacin del

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y transporte

de nutrientes

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citoplasma estimulara la carboxilacin del fosfoenolpiruvato (PEP) para formar oxalacetato que sera reduci do a mlico. La disociacin del cido mlico generara protones y malalo, que entrara a la vacuola de forma pasiva. A su vez, una bajada de pH inhibira la activi dad fosfoenolpiruvato carboxilasa y activara la de la enzima mlica. que catalizara la descarboxilacin del _:ido mlico. El Ca2* acta como mensajero secundario en un gran ero de respuestas de las clulas vegetales a estmu- ambientales y fisiolgicos, mediados o no por hor monas. Para que un mximo en la concentracin del libre en el citoplasma genere una respuesta, la conacin basal en reposo debe ser baja y constante. En - clulas vegetales se han descrito tres sistemas de r.insporte activo de Ca2+ que mantienen dicha concen::acin en torno a 0.1 /.iM. Se trata de la bomba de Ca2* Jel plasmalema, descrita en el apartado 4.1. un antipor te Ca2+-H+ localizado en el tonoplasto y una ATPasa que cataliza la acumulacin de Ca2* en el retculo endoolsmico (RE) con consumo ATP. Estos tres sistemas evacan Ca2* del citoplasma y lo acumulan en las va cuolas o el RE o lo sacan al exterior (Fig. 7-11). Distin tos estmulos como oscuridad o ABA en clulas oclusias (vase Captulo 3) o auxinas en coleptilos de

avena (vase Captulo 19). inducen directa o indirecta mente. va IP, por ejemplo, una abertura de los canales de Ca2* situados en el plasmalema, las vacuolas y el RE. lo que permite un rpido flujo pasivo de Ca2* que ocasiona un aumento de varios rdenes de magnitud en la concentracin de Ca2* del citoplasma.

8. SISTEMAS REDOX DEL PLASMALEMA


Adems de energa qumica en forma de ATP. el plas malema acumula energa procedente del poder reductor acumulado en el citoplasma. En el plasmalema de las clulas vegetales existen protenas con actividad deshidrogenasa capaces de oxidar NAD(P)H. Los electrones provenientes de la oxidacin del NAD(P)H endgeno son transportados a la parte externa del plasmalema a travs de una serie de protenas que tienen como grupos prostticos FAD y citocromo b. El funcionamiento de esta minicadena de transporte de electrones del plasmalema da lugar a una salida de protones al exterior, ya sea a travs de un mecanismo acoplado a alguno de sus componentes o indirectamente por activacin de la H"ATPasa. El aceptor final de electrones puede ser 0 : , como en el caso de las deshidrogenasas solubles, o cualquier otro agente oxidado, porque la transferencia de electrones en la parte externa del plasmalema es muy inespecfica. Este mecanismo es una bomba redox. que puede catalogarse como un mecanismo primario de transporte, ya que acumula en la membrana poder re ductor proveniente de la actividad metablica, como di ferencia de potencial elctrico y, posiblemente, como asimetra de la concentracin de protones. La actividad reductora del plasmalema se relaciona con la capacidad de movilizar determinados iones que son insolubles cuando estn oxidados, como el hierro o el manganeso (vase Captulo 6). En plantas sometidas a dficit de hierro se observa un incremento en la capacidad reduc tora del plasmalema de las clulas de la epidermis radi cular. al tiempo que se liberan al exterior determinadas molculas que secuestran el hierro y lo concentran cer ca de la zona de absorcin de la raz.

9.

FLUJO DE IONES EN LA RAZ

gura 7-11. Trfico de Ca 2 ' en una clula vegetal. 1) H*- _ D asa que energetiza el plasmalema e impone un gra; inte de potencial electroqumico para H* y un potencial : membrana ( f ) negativo en el citoplasma con respecto exterior. 2) Ca -ATPasa del plasmalema. 3) y 4) Distintos : :s de canales de Ca2*. 5) l-T-ATPasa de la vacuola. 6) Anti_ : i e Ca2*-hT del tonoplasto. 7) y 8) Canales de Ca2" del to: olasto; el signo + y el lnsP 3 significan que los canales se : van por voltaje y por inositol 1-4-5 trifosfato. 9) Canal de en el cloroplasto. 10) Ca2*-ATPasa del retculo endoplsmico.

Los iones alcanzan la zona de absorcin de la raz por difusin a travs de la solucin salina del suelo, son arrastrados por el movimiento del agua hacia la raz o entran en contacto con las zonas de absorcin a medida que la raz crece. Los nutrientes minerales se distribu yen por toda la planta a travs del xilema. impulsados por la corriente ascendente de agua que genera el flujo de transpiracin (vase Captulo 3). As, de la misma forma que el agua debe transportarse radialmente en la raz para alcanzar el xilema, los iones siguen un camino similar. Al igual que el agua, el transporte radial de

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Fundamentos

de fisiologa

vegetal Banda de Caspari

Endodermis Xilema

Zona de mxima absorcin Zona de elongacin Zona meristemtica Cofia o caliptra

Floema Periciclo

Figura 7-12. Esquema de las vas simplstica y apoplstica para la incorporacin de nutrientes a travs de la raz. En la primera, los iones son incorporados a travs de los pelos radicales u otras clulas de la epidermis y transportados clula a clula hasta los elementos conductores del xilema. La va apoplstica contempla la posibilidad de un transporte extracelulai de los iones hasta la endodermis, donde la existencia de una banda impermeable en el apoplasto, la banda de Caspari obliga al paso a travs del plasmalema. Una vez en el periciclo, los iones pueden seguir la va extracelular hasta los elemen tos conductores del xilema.

iones por la raz tiene lugar a travs del apoplasto y del simplasio (vase Captulo 4). Las clulas vegetales esln separadas por la pared ce lular, que forma una matriz porosa continua denomina da espacio libre aparente, espacio periplsmico o apoplasto. Agua, iones y molculas de pequeo tama o pueden difundir libremente a travs del apoplasto. de forma que, en teora, un ion puede viajar radialmcnte en la raz por esta va (Fig. 7-12). A lo largo de este recorrido, los iones pueden ser absorbidos por las clu las tanto de la epidermis como del crtex. La existencia de la banda de Caspari en las clulas de la endodermis supone una barrera infranqueable en el camino hacia el xilema: tanto agua como nutrientes deben obligatoria mente atravesar el plasmalema de las clulas que com ponen la endodermis. La permeabilidad, selectividad y afinidad de los canales y transportadores localizados en el plasmalema de las clulas de la endodermis determi nan, en ltima instancia, qu solutos y a qu velocidad se incorporan o se liberan. Otra va posible para la entrada de iones es la simplstica (Fig. 7-12). En este caso, los iones son primero incorporados a las clulas de la epidermis o. incluso. del crtex y luego son transportados, clula a clula, a travs del crtex, la endodermis y el periciclo hasta el xilema. El transporte de una clula a otra incluira el paso a travs del plasmalema, la pared celular, la lmi na media que comparten ambas clulas o. de forma al ternativa, los iones pueden transportarse de una clula a otra a travs de los plasmodesmos, que son conexiones tubulares (de 20 a 60 nm de dimetro) entre clulas, que atraviesan la pared celular y la lmina media y que ponen en contacto los citoplasmas de dos clulas adya centes en la mayora de las plantas. Dentro de los plas

modesmos hay otro tubo que parece estar ocluido, de nominado desmotbulo, formado por membranas del retculo endoplsmico, que se extendera as de una c lula a otra. La densidad de plasmodesmos es muy alta. unos 15 por /m2 y, cuantitativamente, parecen ser la va principal para el transporte transcelular de agua e iones. La existencia de micorrizas (vase Captulo 8) con fiere a las plantas cierta ventaja para la absorcin y el transporte de iones. En primer lugar, los sistemas de transporte del hongo tienen, con frecuencia, una mayor afinidad para determinados iones. En tal caso, una plan ta con micorrizas puede extraer del suelo algunos nu trientes a concentraciones ms bajas de lo que sera ca paz una raz sin ellas. Tal es el caso del fosfato. En segundo lugar, las micorrizas representan una conside rable extensin de la zona de absorcin, que no queda ra ya reducida a la porcin subapical, con pelos radicu lares, de la raz. Por ltimo, la distribucin intrarradical de las hifas del hongo, especialmente en el caso de las endomicorrizas, proporciona una va rpida de trans porte de agua c iones hasta el xilema como alternativa a la simplstica y la apoplstica. Una vez que los iones alcanzan la proximidad del xilema deben ser vertidos a los elementos conductores de ste, es decir, vasos y traqueidas. El vertido se reali za desde las clulas del periciclo o desde las clulas vivas del xilema. El mecanismo de secrecin de iones desde estas clulas es an materia de debate. Algunos autores piensan que los iones se vierten a la relativa mente diluida solucin del xilema de forma pasiva, im pulsados por un gradiente de potencial electroqumico favorable. Este parece ser el caso del K + , Cl~, Na+, SO;~ y NO3". Otros autores sugieren que la secrecin de iones al xilema incluye algn tipo de transporte activo,

Absorcin

y transporte

de nutrientes

minerales

111

Cuadro 7-1. Clasificacin energtica y funcional de los sistemas de transporte en plantas


Tipo Canales Caractersticas Pasivo (difusivo) Secundario Electrofortico Cintica Lineal (Saturable slo a altas concentra ciones) Saturable Michaelis-Mentcn Energa que se usa Fsica Fuerza ion motriz A/7/F Ejemplos Canales de K"\ C T y Ca2+ en plasmalema y endomembranas

Transportadores (carriers) Cotransporte (simporte) Antiporte Bombas inicas

Activo Secundario Electrofortico

Indirectamente energa metablica Fuerza H + o Na + motriz A/WFoA/W/F

Sistemas de incorporacin

de

NO, , NH;. H,PO;, so; ,


H C O j , C l " , K + , aminocidos, glucosa y acetato. Sistemas de exclusin de Na + H + -ATPasa de plasmalema y tonoplasto Ca 2 + -ATPasa N a ' -H + -ATPasa de hongos H + -PPi asa del tonoplasto Cl~-ATPasa de Acetabularia Bombas redox

Activo Primario Electrognico

Saturable Michaelis-Menten

Energa metablica ATP o NAD(P)H en bombas redox

ya que los inhibidores de la respiracin parecen inhibir tambin dicha secrecin.

RESUMEN (Cuadro 7-1) El transporte de iones en las clulas vegetales puede ser pasivo o activo. En el primer caso, los iones fluyen a favor de la fuerza fsica que acta sobre ellos y atravie san las membranas a travs de poros selectivos denomi nados canales, siendo la cintica del transporte prc ticamente lineal. El transporte activo requiere la aplica cin de energa metablica. Dicha energa se acumula en las membranas vegetales en forma de fuerza protn motriz debido a la actividad de bombas inicas que sacan H" del citoplasma hacia el exterior o lo vierten a la vacuola consumiendo ATP o pirofosfato. De forma secundaria, la energa acumulada en las membranas se utiliza para el movimiento de iones en contra de gra diente mediante cotransporte o antiporte. Los siste mas de transporte activo tienen cintica de tipo Michae lis-Mentcn (vase Cuadro 7-1, que resume los sistemas de transporte en plaas). De esta forma, se incorporan, a travs de las clulas de la raz, los principales nutrien tes que necesitan las plantas para mantener su biomasa y crecer.

citoplasmtica terica que predice la ecuacin de Nernst. asumiendo que el potencial de Nernst es igual al plen es cial de membrana (m): C\ (t) = tr:-'Fm El experimen to se realiz a 25 C y el Em, medido separadamente, es - 110 mV (dentro negativo). Considrese R = 8.31 J K"' mol"1 y F = 96.5 J mol" 1 mV '. Los datos proceden de Higinbotham el al. Pla Physiol. 42:37-46, 1957. Du rante la redaccin del captulo, un desafortunado error extravi parte de los resultados de la tabla. Podra com pletarla?
Ion K* Na* Mg2+ Ca2* NO; Cl H,PO;,

q
i i 0.25 1 o 1 1 0.25

q
75 8 3 2 28 7 21 0.25

A/J/F qct) Fuerza ion motriz 73 73 Equilibrio Hacia dentro

- 111 - 0 -53 -58

+68

+117 0.03

Hacia fuera

sof

PROBLEMAS Y CUESTIONES 1. La tabla presenta la concentracin en el citoplasma (C) de una serie de iones en equilibrio con su concentracin extema (CJ). expresada en mM. en clulas de raz de gui sante. El potencial de Nernst (*) y la fuerza ion motriz (A/L/F) se expresan en mV. C\ (t) es la concentracin

2. Usando los valores de la tabla anterior proponga un mo delo de transporte para el Na" y para el HO'y 3. Identifique el ion (o iones) motriz(ces) en el plasmalema y tonoplasto de las clulas vegetales. 4. Explique las diferencias funcionales entre transportado res, canales y bombas inicas. Ponga un ejemplo de cada tipo. 5. Origen y componentes del potencial de membrana (E,) en las clulas vegetales.

CAPITULO

NUTRICIN MINERAL Y PRODUCCIN VEGETAL


Agustn Grate e Ildefonso Bonilla
ntroduccin. 2. Diagnstico de nutricin. 3. Suministro de nutrientes en la produccin agrcola. 4. Interaccin planta croorganismo. 5. Problemas de nutricin en condiciones de estrs. 6. Gentica y nutricin. 7. Nutricin mineral y su -acin con enfermedades y plagas.

INTRODUCCIN
. 'inprensin de cmo las plantas adquieren y asimi_r. los nutrientes minerales para su crecimiento y desai es parte central de la Fisiologa Vegetal, como is visto en los Captulos 6 y 7. Por aadidura, la -eior comprensin de la nutricin mineral de las plani sido la base de la gran expansin de la agricultura - -dema, que slo podr mejorar a travs de un conoci- ento ms profundo de los procesos implicados. Dada l -aturaleza tan compleja de la nutricin mineral de las Santas, los estudios en este campo no slo implican a bilogos vegetales, sino tambin a bioqumicos, qui l c o s . edaflogos, microbilogos y eclogos. En con.iicia. aspectos aparentemente tan dispares como 'utilizantes, micorrizas, quelatos, salinidad o fijacin \ \ atmosfrico, debern tratarse de forma armni. _. para conseguir una mayor y mejor produccin de los .ultivos con el menor impacto negativo posible sobre el ~.edio ambiente.

11.

Contenido de nutrientes minerales y crecimiento vegetal

El crecimiento de las plantas depende de varios factoss, que van desde la regulacin gnica hasta los factoss edafoclunticos. Para una especie vegetal y en un Mente determinado, los factores de crecimiento ms mportantes son la luz, el agua, el C 0 2 y los nutrientes nerales. Al aumentar cualquiera de estos factores, se rroduce un incremento de la produccin vegetal, siendo enor la respuesta conforme se sigue aumentando la .anudad de factor aplicado. Mitscherlich (1920) intent dar forma matemtica a ^ denominada ley del mnimo, enunciada por Liebig en

1840, y a la ley de los tres puntos de Sachs, en las que se explica cmo cualquier factor limitante ambiental del crecimiento tendr una respuesta mnima, ptima o m xima sobre la planta. Mitscherlich estableci una rela cin matemtica entre el nutriente aplicado y el rendi miento de la cosecha para indicar que, en la zona de deficiencia, el efecto positivo del aporte de un nutriente es tanto mayor cuanto ms grave es la deficiencia del nutriente de partida. El modelo general de relaciones en tre el crecimiento o produccin de una planta y el conte nido de nutrientes minerales se recoge en la Figura 8-1. Las curvas de respuesta de la produccin al aporte de nutrientes presentan distintas pendientes: los oligoelementos presentan la curva de mayor pendiente, mien tras que el nitrgeno muestra la de menor (Fig. 8-2). Este comportamiento refleja la diferente demanda de las plantas de cada nutriente en particular. No obstante, las curvas reales de respuesta del crecimiento al aporte de nutrientes no presentan una pendiente constante ni son siempre asintticas. debido a la existencia de inte racciones con otros factores de crecimiento. Todos es tos planteamientos son igualmente vlidos en el mbito agrcola, en el que la nutricin mineral tiene una in fluencia definitiva en la cosecha. La produccin de biomasa total, peso total de la planta (ndice biolgico), est directamente relacionada con el contenido de nu trientes. si bien en agricultura la cosecha se determina por la produccin de materia seca de determinados r ganos o tejidos (ndice de cosecha), por ejemplo, de tubrculos o granos. Si consideramos la planta de remo lacha azucarera (Beta vulgaris), el rendimiento agrcola (ndice de cosecha) ser mayor cuanto mayor sea el peso de la raz y su concentracin de sacarosa. La con secucin de un ndice biolgico elevado podra afectar negativamente a dicho rendimiento, ya que. por ejem plo, un gran desarrollo foliar puede restar peso y rique za en sacarosa a la raz.

113

114

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Nitrgeno IV Intervalo de suficiencia I / Intervalo de deficiencia Intervalo de toxicidad Concentracin de nutrientes minerales en tejido vegetal Figura 8-1. Relacin entre el crecimiento vegetal y el con tenido de nutrientes minerales en la planta. I, Parte ascen dente de la curva en la que hay un crecimiento marcado frente a pequeas aportaciones del nutriente. II, Los incre mentos en el crecimiento y en el contenido del nutriente estn estrechamente relacionados. El intervalo l-ll es el de la deficiencia. III, Zona en la que el crecimiento no est limi tado por el nutriente y en la que el contenido del mismo se incrementa notablemente. Es la zona de suficiencia del nu triente. IV, Parte final en la que el contenido excesivo de nutriente produce toxicidad y reduccin del crecimiento. (Adaptado de Marschner, 1995.) Figura 8-2. Curvas de produccin vegetal en funcin de la concentracin de distintos nutrientes en la planta. (Adapta do de Marschner, 1995.) Aporte de nutrientes (kg ha"')

1.2.

Factores que afectan al contenido mineral de las plantas

El contenido de nutrientes esenciales en los tejidos ve getales viene determinado por varios factores, entre los que podemos destacar: a) la dotacin gnica de la plan ta: b) la disponibilidad de nutrientes en el suelo o medio de cultivo, y c) el momento fenolgico o edad de la planta y el rgano o tejido vegetal que se considere. Dotacin gnica de la planta. Los contenidos mine rales varan entre las especies vegetales, incluso cuando se hacen las comparaciones usando los mismos rganos y de la misma edad fisiolgica. Estas variaciones se ba san fundamentalmente en diferencias en el metabolis mo y en la constitucin de la planta, por ejemplo, las diferencias en la demanda genotpica de B y Ca de la pared celular. El contenido de boro en materia seca de hojas recientemente maduras, crecidas en las mismas condiciones, es de 3.0 /(g g ~ i en trigo y 5.0 /ig g~ l en arroz, pero llegan a 25 g g ~ ' en soja y hasta 34 g g _ l en girasol. En el Cuadro 8-2. que se explica ms adelante, se pueden apreciar las diferencias en el contenido de nutrientes de distintas especies vegetales. En un epgrafe posterior se tratan aspectos genticos de las plantas que tienen que ver con la adaptacin de distin tas variedades de una misma especie al estrs nutricional. Disponibilidad de nutrientes en el suelo. El suelo es el soporte natural de las plantas del que las races toman el agua y los nutrientes minerales. El desarrollo ptimo de un cultivo est genticamente controlado, al igual que su capacidad de captar nutrientes del medio exter no. Este potencial de desarrollo viene limitado funda-

mentalmente por la disponibilidad de nutrientes del me dio y, tambin, por otros factores de estrs que se co mentan ms adelante en este captulo. El conocimiento de la cantidad total de un nutriente en el suelo resulta irrelevante en la mayora de los ca sos. Para el hierro, por ejemplo, tenemos cantidades to tales de Fe elevadas en casi todos los suelos, ya que es el cuarto elemento ms abundante de la corteza terres tre y. sin embargo, la concentracin de Fe 3 + libre en la disolucin del suelo, salvo contadas ocasiones, es infe rior a I O - 9 M. Igual sucede con otros elementos y, en consecuencia, la planta slo puede captar del suelo una parte de la cantidad total de nutrientes presentes, que se denomina forma disponible o asimilable. Momento fenolgico y rgano de la planta. La edad fisiolgica de la planta y la parte de la planta son, des pus del aporte de nutrientes, los factores ms impor tantes que afectan al contenido de nutrientes minerales en el tejido vegetal. Normalmente hay un descenso del contenido mineral en peso seco de la planta segn sta va envejeciendo, con excepcin del Ca y, a veces, el B y el Fe. Esta tendencia a la baja est provocada princi palmente por el aumento relativo del porcentaje de peso seco del material estructural, pared celular y lignina, y de los compuestos de reserva, como el almidn. Por ejemplo, en cebada cultivada en campo con un suminis tro adecuado de potasio, el contenido de K en la parle area pasa desde el 5-6 % en la planta joven hasta cerca del 1 % en la maduracin. En este caso, la disminucin se debe exclusivamente a un efecto de dilucin, ya que la concentracin de K en el extracto acuoso de tejido (jugo vacuolar) permanece constante a lo largo del ci clo, con un valor aproximado de 100 /tM. El reparto de fotoasimilados o fotosintetizados es fundamental para el ndice de cosecha y est relacionado con la distribu cin fuente-sumidero (source-sink). Se llama fuente a los tejidos fotosintticos, hojas y tallos, en los que se producen hidratos de carbono, los fotoasimilados, y sumidero, a los rganos reproductores, los de reserva y los pices de crecimiento, que son consumidores ne tos de fotoasimilados (vase Captulo 5). En los culti-

Nutricin

mineral

y produccin

vegetal

115

s en los que se cosechan frutos, semillas o tubrculos, . fectos del aporte de nutrientes en el ndice de cosedva son, a menudo, reflejo de las limitaciones del sumi dero. ocasionadas por un aporte deficiente o excesivo -ranie un perodo crtico del desarrollo, como el inicio ie la floracin, la polinizacin o el inicio de la tuberizaLos rganos reproductores y de reserva presentan anos contenidos minerales estables en comparacin con ios rganos vegetativos, que reflejan mejor las fluctuaes en el aporte externo de nutrientes. En este senti. la hoja es el rgano que mejor representa el estado ie nutricin de la planta, de ah que sea el ms utilizado en el anlisis vegetal.

slo de los que puede haber en un momento dado, sino tambin del ritmo de incorporacin de los nutrientes a la disolucin del suelo. Los mtodos de extraccin de nutrientes asimilables del suelo normalmente consisten en la agitacin del mismo con sustancias qumicas extractoras, como cidos o agentes quelantes. En la diso lucin que obtenemos despus de la extraccin, se de terminan los distintos nutrientes.

2.2.

Anlisis foliar

2.

DIAGNSTICO DE NUTRICIN

El diagnstico del estado nutritivo de las plantas se rea.. principalmente, con fines agrcolas y. tambin, rara investigar problemas de nutricin mineral. Puede idirse en dos etapas: la primera es la de obtencin de datos, fundamentalmente por anlisis qumico de mate rial vegetal (anlisis foliar), que puede complementar te con el anlisis del suelo. La segunda etapa es la de interpretacin de resultados, en la que se comparan los Jatos del anlisis con unos valores de referencia. Esta comparacin se puede hacer segn distintos criterios, que dan lugar a los diferentes mtodos de diagnstico.

2.1.

Anlisis del suelo

El anlisis del suelo permite evaluar su potencial nutricional, es decir, su capacidad para suministrar nutrien tes a la planta durante un ciclo de cultivo. La determi nacin de la composicin y propiedades del suelo, como pH, textura (composicin centesimal de las part culas slidas del suelo en funcin de su dimetro), EC (conductividad elctrica) y materia orgnica, nos pro porciona una informacin bsica para conocer el po tencial agrcola de un suelo, ya que tales propiedades marcan las condiciones en las que tendrn lugar los pro cesos fisicoqumicos relacionados con la disponibilidad de nutrientes. Los nutrientes minerales que loman las races de las plantas se encuentran en disolucin y en equilibrio con los nutrientes de la fase coloidal del suelo, compuesta, sobre todo, por las arcillas y las sustancias hmicas. Cuando la concentracin de un ion en la disolucin del suelo disminuye debido a la absorcin radicular, este ion es repuesto desde los coloides edficos. Por tanto, tenemos un proceso dinmico regulado por factores di versos, que dificulta el diagnstico del potencial nutricional de los suelos, si tenemos en cuenta, adems, la gran variedad de sucios existente. El anlisis del suelo debe suministrar informacin de los nutrientes disponibles o asimilables por la planta, no

El empleo del anlisis qumico del material vegetal con el fin de realizar un diagnstico de nutricin, se basa en la asuncin de que existe una relacin entre el creci miento de las plantas y el contenido de los nutrientes en la materia vegetal seca o fresca. En general, el estado nutricional de una planta se re fleja mejor por el contenido de los elementos de las ho jas que por el de otros rganos (vase apartado 1.2). No obstante, distintos factores, como el tipo de elemento, la edad y la especie vegetal, pueden hacer recomenda ble un muestreo de otro rgano o paite de la planta. El empleo de hojas jvenes es slo aconsejable para nutrientes que presentan un grado reducido de movili dad desde las hojas adultas hacia zonas de nuevo desa rrollo. La situacin es otra para los elementos K, N y Mg. puesto que sus contenidos permanecen estables en hojas jvenes expandidas. Para estos nutrientes mvi les. las hojas adultas son las que mejor indican el estado nutricional de la planta. Si se sospecha que pueden exis tir problemas de toxicidad, las hojas adultas son las ms recomendables para el anlisis foliar. El anlisis mineral de la hoja o de un tejido vegetal se realiza en tres etapas: 1. La toma de muestra vegetal es clave para la validez de todo el diagnstico de nutricin. Es necesario establecer un procedimiento normali zado de muestreo que asegure un material vege tal comparable y que considere los factores que afectan al contenido de nutrientes de rganos y tejidos. La normalizacin del muestreo debe rea lizarse por cultivos, dada las diferencias existen tes, por ejemplo, entre un frutal y una hortaliza. La preparacin de la muestra, previa al anli sis qumico, contempla los siguientes pasos: a) el transporte al laboratorio, generalmente en enva ses plsticos: b) el lavado de la muestra con agua destilada, sobre todo si se trata de muestras de planta desarrolladas en condiciones de campo, manchadas con polvo o rociados foliares; y c) el secado y molido si, como sucede normalmente, el anlisis se hace a partir de material seco. El anlisis foliar, propiamente dicho, consiste en una mineralizacin de la materia orgnica ve getal por va seca o por va hmeda. En la va seca, la muestra de hoja se reduce a cenizas en

2.

3.

116

Fundamentos de fisiologa vegetal

un horno-mufla y, posteriormente, stas sufren una digestin acida, para finalmente realizar el anlisis de nutrientes en el extracto resultante. En la va hmeda, el tejido vegetal se trata con una mezcla de cidos, sulfrico, ntrico y clorh drico, fundamentalmente, para acabar con la me dida analtica de los nutrientes. Los nutrientes metlicos se determinan por espectrometra de absorcin atmica (Fe, Cu, Mn. Zn y Mo), de emisin por llama (K. Na, Ca y Mg), o de plasma inducido (todos ellos), mientras que los no met licos (N. P y B) se analizan por colormetra. Ac tualmente existen otros mtodos capaces de me dir conjuntamente aniones y cationes, entre los que podemos destacar la cromatografa lquida (HPLC) y la electroforesis capilar. Existe un procedimiento normalizado recogido en los M todos Oficiales de Anlisis (1993).

bas son criterios importantes en el diagnstico nutii< nal. Como norma general, los sntomas visibles de b deficiencia de un nutriente son ms especficos que de su toxicidad. El diagnstico puede ser especialmente complica.: en cultivos agrcolas y en condiciones de campo, cua: do se encuentra ms de un nutriente en un nivel cente, o cuando se producen simultneamente la de: ciencia de un nutriente y la toxicidad de otro. TambU se complica el diagnstico basado en los sntomas bles con la presencia de plagas y enfermedades, o pee otros daos provocados, por ejemplo, por el uso de ro ciados foliares.

2.3.2.

Diagnstico foliar. Nivel crtico e intervalo de suficiencia

2.3.

M t o d o s de diagnstico

Los mtodos de diagnstico pueden ser cualitativos, por observacin de los sntomas visibles de alteraciones nutricionalcs, o cuantitativos, basados en los resultados del anlisis qumico del material vegetal, por compara cin con normas o valores de referencia.

2.3.7.

Sntomas visibles de nutricionales

alteraciones

Las alteraciones nutricionales que reducen ligeramente el crecimiento y la produccin no presentan sntomas visibles claros. Normalmente, los sntomas se hacen pa tentes cuando la deficiencia nutricional es aguda y el ritmo de crecimiento y la produccin disminuyen signi ficativamente. Adems, muchas especies vegetales na turales, sobre todo las adaptadas a lugares pobres en nutrientes, ajustan su crecimiento al nutriente limitante, con lo que no se desarrollan sntomas visibles. Con objeto de diferenciar los sntomas de alteracio nes nutricionales de otros sntomas, es importante con siderar que los causados por alteraciones nutricionales tienen siempre un patrn de distribucin simtrico: las hojas de una planta en posiciones iguales o similares, de la misma edad fisiolgica, presentarn una distribucin de sntomas casi idntica. El diagnstico del estado nutricional de una planta basado en los sntomas visibles requiere una aproxima cin sistemtica, como se resume en el Cuadro 8-1. Los sntomas aparecen, preferentemente, en hojas jvenes o viejas, en funcin de la capacidad del nutriente para movilizarse por el floema, La clorosis (amarilleamiento de las hojas) y la ne crosis (manchas de color variable, normalmente de ma rrn a negro), as como el patrn de distribucin de am

La comparacin de los resultados del anlisis foliar cor la norma o referencia se viene haciendo de distintas ma neras. Algunas implican una mera comparacin entre concentraciones de un solo elemento y su norma, pe otras usan relaciones entre dos elementos o. incluso. son multicomponentes. En el primer caso, se encuen tran los mtodos tradicionales de Nivel Crtico (NC) j de Intervalo de Suficiencia (1S), y en el segundo, el m todo DRIS. El Nivel Crtico (NC) es el ms extendido y se basa en la comparacin de la concentracin de un nutriente. obtenida por anlisis foliar, con un valor de referencia que se denomina nivel crtico, y que normalmente su pone el 9 0 % del mximo de cosecha en peso seco. El problema es que los valores de referencia no son uni versales y, en consecuencia, no pueden aplicarse direc tamente a los mismos cultivos de distintas zonas geo grficas. Los mtodos tradicionales presentan serian limitaciones ya que las concentraciones de los nutrien tes sufren fluctuaciones con distintos factores, como los ms arriba mencionados. Parece ms lgico y realista utilizar un intervalo de valores de referencia, en lugar de un valor aislado. El Intervalo de Suficiencia (IS). tiene la misma base que el mtodo del nivel crtico, solo que aqu la compa racin de nuestro dato analtico se hace frente a un in tervalo de concentraciones del nutriente que no impli can reduccin en la produccin. En el Cuadro 8-2 se muestran intervalos de concen tracin de nutrientes adecuados o suficientes (IS), para distintas especies vegetales. Los intervalos de macronutrientes son de rdenes de magnitud similares en las distintas especies. El calcio es una excepcin, pues pre senta un contenido sustancialmente menor en monocoliledneas. En todas las especies, el intervalo es relati vamente estrecho para el N, ya que los contenidos de lujo de N tienen efectos desfavorables en el crecimiento y la composicin de la planta. En hoja de manzano, por ejemplo, un contenido de N mayor del 2.4 % afecta a menudo negativamente tanto al color como al al mace-

Nutricin mineral y produccin vegetal Cuadro 8-1. Sntomas visibles de alteraciones nutricionales Deficiencia nutricional N(S) Mg(Mn) K Mg(Mn)

117

Parte de la planta

Sntoma predominante

Uniforme ,ls Clorosis \ Intervenal o en manchas Hojas adultas <^ .__/ Bordes y puntas Necrosis<: Intervenal

Hojas jvenes

y pices

Uniforme Clorosis ' \ Intervenal o en manchas -Necrosis (o clorosis) Deformaciones

Fe (S) Zn (Mn) Ca, B. Cu


Vio (7.n. B)

Toxicidad nutricional / Manchas Necrosis \ Bordes y punas Clorosis, necrosis Adaptado de Marscliner. 1995. Mn (B) B. salinidad Toxicidad inespecfica

Hojas adultas

naje de los frutos. Los contenidos de mieronutrientes en los intervalos de adecuacin varan por un factor de 2, o mayor. El Mn es el nutriente que muestra el intervalo ms amplio.
2.3.3. Relacin entre nutrientes. Mtodo DRIS (Diagnosis and Recommendation Integrated System)

Existen numerosas interacciones especficas e inespecficas entre los nutrientes minerales de las plantas que afectan a las concentraciones de nutrientes y a la pro duccin vegetal. As, con contenidos bajos de P en maz, un aumento de N en la hoja bandera del 2.1 al 2.9 % tiene poco efecto en la produccin y, sin embar go, con altos contenidos en P, la produccin crece cuan do el porcentaje de N en la hoja bandera pasa del 3.0 c/c. Las interacciones entre dos nutrientes son importan tes cuando los contenidos de ambos se encuentran cer canos al inlervalo de deficiencia. El aumento del aporte de uno de los nutrientes estimula el crecimiento, lo que podra provocar o inducir la deficiencia del otro por un efecto de dilucin. En principio, estas interacciones inespecficas son vlidas para cualquiera de los nutrien tes minerales de las plantas. Por tanto, las relaciones ptimas entre nutrientes son frecuentemenic tan impor tantes como los contenidos absolutos. Por ejemplo, una relacin N/S prxima a 17 se considera adecuada para la nutricin azufrada de trigo y soja. Sin embargo, las

relaciones ptimas consideradas de forma aislada son insuficientes, porque pueden conseguirse cuando am bos nutrientes se encuentren en intervalos deficientes, o bien, en los de toxicidad. Dada la importancia de la relacin de nutrientes en el anlisis de la planta con fines de diagnstico, se ha in troducido un nuevo concepto Sistema integrado de diagnstico y recomendacin (DRIS). El sistema se basa en la recogida del mayor nmero posible de datos respecto a los contenidos de nutrientes minerales en la planta (hasta ahora, macronutrientes), y el uso de esos datos para el clculo de relaciones ptimas entre nu trientes (ndices nutritivos o relaciones normalizadas), por ejemplo, las relaciones N/P, N/K, etc. Los ndices de nutrientes calculados por DRIS son menos sensibles a los cambios que se producen durante la maduracin de la hoja y la ontognesis, pero dependen en cierto grado de la localizacin. Por ejemplo, el ndice N/P para hoja bandera de maz tiene un valor medio de 10.13, pero es de 8.91 en Sudfrica y de 11.13 en el sudoeste de Estados Unidos. Las relaciones normalizadas o ndices nutritivos son valores medios obtenidos a partir de varios miles de ex perimentos de campo. Actualmente, el uso de modelos informatizados facilita la obtencin y manejo de estos ndices. Para determinados cultivos y en ciertas condi ciones (lugares de alta produccin, sistemas de cultivo a gran escala), una elevada inversin econmica en as pectos analticos puede resultar rentable, ya que el DRIS permite una interpretacin ms fina de los rcsul-

118

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

Cuadro 8-2.

Intervalos de suficiencia de la concentracin de nutrientes en tejidos vegetales de distintos tipos de planta


Contenidos (% en peso seco) Contenidos (mg Mg Mn Zn kg ' peso seco) Cu B Mo

Especie (rgano) Trigo (loda la parte area) Maz (hoja madura) a Remolacha (hoja madura) Algodn (hoja madura) Tomate (hoja madura) Alfalfa (parte area superior) Manzano (hoja madura) Naranjo (hoja madura) Abeto (acculas de l-2 aos)

Ca

3.0-4.5 2.7-3.5 4.0-6.0 3.6-4.7 4.0-5.5 3.5-5.0

0.3-0.5 0.4-0.7 0.35-0.6 0.3-0.5 0.4-0.65 0.3-0.6

2.9-3.8 2.5-3.5

0.4-1.0 0.7-1.0

0.15-0.3 0.20-0.5

30-100 30-300 40-100 35-100 40-100 30-100 35-100 25-125 50-500

20-70 20-150 20-80 25-80 30-80 25-70 20-50 25-60 15-60

5-10 5-25 7-15 8-20 6-12 6-15 5-12 6-15 4-10

5-10 8-25

0.1-0.3 0.5-1.0

3.5-6.0" 0.7-2.0 0.30-0.70 1.7-3.5 3.0-6.0 2.5-3.8 0.6-1.5 3.0-4.0 1.0-2.5 0.35-0.8 0.35-0.8 0.3-0.8

40-100 0.25-1.0 20-80 40-80 35-80 30-50 30-70 15-50 0.6-2.0 0.3-1.0 0.5-2.0 0.1-0.3 0.2-0.5 0.04-0.2

2.2-2.8 0.18-0.30 1.1-1.5 2.4-3.5 0.15-0.3 1.2-2.0

1.3-2.2 0.20-0.35 3.0-7.0 0.25-0.7

1.35-1.7 0.13-0.25 0.5-1.2

0.35-0.8 0.1-0.25

(al De Jones el ni. 1991. (b) Contenido de Na por debajo de 1.5 "i. Adaptado de Marscliner. H.. 1995.

tados y, por tanto, una adecuada recomendacin de abo nado, como se ha podido comprobar para remolacha azucarera, maz y frutales. Sin embargo, con otras con diciones ambientales, los resultados obtenidos con el DRIS han sido menos favorables y, sin duda, no es el mtodo ms recomendable en sistemas de produccin con una diversidad amplia de cultivos anuales, o para sistemas de produccin reducida y de cultivo a pequea escala.

2.4.

Otros mtodos de anlisis y de diagnstico de nutricin

El contenido total de un nutriente en hoja es lo que con mayor frecuencia se delermina en el anlisis vegetal, si bien existen otros mtodos de estudio para conocer el estado nutricional de las plantas, como son: a) la frac cin de nutrientes, b) el anlisis de savia y c) los mto dos histolgicos y bioqumicos. Fraccin de nutrientes. La determinacin de slo una parte o fraccin del contenido total de un nutriente en hoja, por ejemplo, la que es soluble en agua o en un cido diluido o en un agente quelante. en ocasiones, re fleja mejor el estado nutricional de la planta. En el an lisis de planta como base para una recomendacin de abonado, esta afirmacin es aplicable para el nitrato, que es la forma principal del N de reserva en muchas especies vegetales. Las limitaciones ms importantes que puede tener este mtodo tienen que ver con las es

pecies que reducen el nitrato preferentemente en las ra ces, como algunos miembros de las rosceas. o cuando el N amoniacal se aade y se absorbe antes de ser nitrificado en el suelo. Esta situacin podra darse en suelos con alto contenido en N orgnico y con altas tasas de mineralizado!! durante los perodos en los que el culti vo tiene una elevada demanda de nitrgeno. La deter minacin de una fraccin definida de nutriente puede ofrecer no slo una mejor caracterizacin de las reser vas almacenadas en planta (p. ej N-nitrato o S-sulfato), sino tambin la disponibilidad fisiolgica del nutrienie en el tejido. Por ejemplo, la extraccin de Fe(II) de hojas con cidos diluidos o agentes quelantcs. para caracterizar la denominada fraccin activa de Fe, puede mejorar la relacin entre el contenido de Fe y el de clorofilas en hojas de plantas cultivadas en campo. Anlisis de savia. De los mtodos propuestos para la extraccin de savia, destacaremos dos: la savia de pre sin y el exudado de xilema. En el primer mtodo, los tejidos conductores, tallos y pecolos, se someten a pre sin en un medio ter etlico y, posteriormente, por de cantacin del medio acuoso, se obtiene lo que se deno mina savia. Ms bien se trata de un jugo de tejidos conductores, en el que adems del fluido de xilema ten dremos contenidos celulares, sobre lodo vacuolares, de las muestras prensadas. La savia de xilema se obtiene por decapitacin de la planta a unos 2 3 cm por encima del comienzo de la raz y la subsiguiente recoleccin del exudado que fluye

Nutricin mineral y produccin vegetal del corte. Aqu, el lquido que extraemos es ms diluido que en la savia de presin. La hoja, por anlisis foliar, proporciona informacin sobre lo que ha ocurrido hasta el momento del mues tre, pero difcilmente reflejar alteraciones ocasiona les que pueden afectar a los sumideros. En cambio, la savia informa de lo que est ocurriendo en la planta en el momento preciso de la toma de muestra. Se ha utili zado en el estudio de antagonismos nitrato-cloruro, cal cio-potasio, en el anlisis de N-nitrato como indicador de fertilizacin nitrogenada en cultivo de remolacha, etc. En cultivos leosos, el nivel de N orgnico en savia corresponde a N proteico y de aminocidos que, junto a los azcares tanto reductores como totales, nos informa de las reservas del cultivo. El anlisis de savia permite. por tanto, un diagnstico precoz de nutricin y, eventualmente, la introduccin de medidas de correccin en el abonado o en el riego, con el fin de mejorar la pro duccin en el mismo ciclo de cultivo. 3. SUMINISTRO DE NUTRIENTES EN LA PRODUCCIN AGRCOLA

119

Mtodos histoqurnicos y bioqumicos. Las altera ciones nutricionales estn generalmente relacionadas eon cambios tpicos en la estructura fina de la clula, de sus orgnulos y del tejido. Los estudios con microsco pio ptico de las modificaciones en la anatoma y mor fologa de la hoja pueden ser tiles para el diagnstico de las deficiencias de Ca. Cu, B y Mo. Los mtodos enzimticos relacionados con enzimas marcadoras ofrecen otra aproximacin para conocer el Estado nutricional de las plantas. Estos mtodos se ba>an en el hecho de que la actividad de ciertas enzimas . - menor o mayor (dependiendo del nutriente) en teji dos normales que en los deficientes. Ejemplos se han jado para el Cu y la ascorbato oxidasa. el Zn y la aldo-a o la anhidrasa carbnica y para el Mo y la nitrato i aictasa. Se realizan bien por determinacin de la acti vidad actual de la enzima en el tejido despus de la ex:raccn, bien por determinacin de la actividad induci dle de la enzima despus de que el tejido se haya : hado con el nutriente en cuestin, como con la acli idad peroxidasa con el Fe o la nitrato reductasa con Para dcicrminar el estado nutricional de Mn, se ruede utilizar la actividad superxido dismutasa (SODen hojas como marcador bioqumico. Tambin pueden emplearse mtodos bioqumicos rara determinar el estado nutricional de macronutrienLa acumulacin de pulrescina (vase Captulo 22) .-i plantas deficientes en K se ha utilizado como indicat bioqumico de los requerimientos de K de la alfalfa. actividad inducible de nitrato reductasa puede ser lizada como indicador del estado nutricional de N. En principio, el potencial de los mtodos bioqumi_ -. biofsicos y enzimticos est en la resolucin de gn caso particular de alteracin nutricional y sirve _ s como complemento que como alternativa al anli- loliar. dado el problema de la calibracin de estos -todos.

Las previsiones medias de las Naciones Unidas (ONU) estiman que la poblacin mundial alcanzar los 6100 millones de habitantes en el ao 2000. El crecimiento demogrfico con el incremento del nivel de vida harn que la demanda de alimentos y otros productos agrco las aumente a un ritmo anual del 3.1 %. Durante los l timos aos, la produccin de alimentos creci a razn de una tasa anual media del 3.2 % en los pases en vas de desarrollo y del 2 % en los pases desarrollados. La FAO (Organizacin de Agricultura y Alimentos de la ONU) indica que un tercio de ese incremento se debi a una expansin de la superficie cultivada y dos tercios, al aumento especfico del rendimiento de los cultivos. Evidentemente, para mantener e, incluso, incrementar estos resultados se necesita, adems de mejorar las prcticas agrcolas, un mayor empleo de fertilizantes que sea. a su vez, respetuoso con el medio ambiente y no implique una contaminacin del mismo. El otro gran factor limitante es el agua. Actualmente, aunque slo el 15 % del total de la tierra arable del mundo es de regado, sta produce el 36 % del rendi miento total de las cosechas. Una utilizacin adecuada de los fertilizantes implica que los cultivos tengan un suministro suficiente de agua. Por tanto, existe una rela cin estrecha entre ambos aportes. La agricultura repre senta aproximadamente el 75 % de todo el consumo de agua. En consecuencia, el riego puede ser muy caro y su control, complejo. Problemas como el de la salinidad, la erosin, la excesiva utilizacin de agua fretica y su contaminacin o las inundaciones causadas en muchos casos por una deforestacin desmesurada, son aspectos que condicionan la utilizacin del agua para riego en agricultura. En sntesis, el crecimiento y el rendimiento de los cultivos estn regulados, aparte de por las condiciones ambientales y las nuevas variedades de planta, por la disponibilidad de agua y nutrientes. As, por ejemplo, en el cultivo de cereales, bsicos en la alimentacin, hemos pasado de 1.2 ton/ha/ao de mediados del siglo XX a 2.5 ton/ha/ao en la actualidad. La aplicacin de macro y micronutrientes ha contri buido de forma sustancial al enorme incremento de la produccin de alimentos que ha tenido lugar en los lti mos cien aos. Sin embargo, en los pases desarrolla dos, el uso excesivo de fertilizantes ha generado graves problemas de contaminacin de nutrientes. En estos lu gares. se ha hecho prioritario mantener el equilibrio de nutrientes en el suelo y nutrientes en el cultivo, de for ma que se minimicen las prdidas al medio ambiente y, tambin, obtener cultivares de alta eficiencia para sue los con altos niveles de nutrientes. En cambio, en los pases en vas de desarrollo, el principal factor limitante de la produccin agrcola es la baja fertilidad de los suelos. Aqu, el objetivo de alcanzar una mayor produc cin est relacionado con impulsar los mtodos de diag-

120

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

nstico de las deficiencias y toxicidades de suelos no fertilizados, con la incorporacin de una cantidad mni ma de fertilizantes y a un coste bajo, y con el desarrollo de cultivares con alta eficiencia de nutrientes para sue los deficientes, o cultivares tolerantes frente a toxicida des naturales. La preocupacin de los pases desarrolla dos por la contaminacin impide, en ocasiones, contemplar la necesidad urgente de fertilizantes y de estudios de fertilidad que tienen los pases en vas de desarrollo para producir ms alimentos por hectrea, como alternativa a la obtencin de nueva tierra cultiva ble, por ejemplo, por tala y quemado de reas forestales.
Figura 8-3. Esquema de un sistema de fertirrigacin. Tan ques A, B y C para las disoluciones de nutrientes, que sor entre 100 y 1000 veces superiores a las requeridas por los cultivos. Suele existir un cuarto tanque con cido ntrico c cido fosfrico, con la misin de desobturar goteros y con trolar el pH de la disolucin nutritiva. El inyector permite la mezcla de los fertilizantes con el agua de riego, dando lugar a la disolucin nutritiva que se desea. Las electrovlvulas regulan y distribuyen el flujo de disolucin hacia los gote ros. Se sitan medidores de control del pH y conductividac elctrica (EC).

3.1.

Nuevas tcnicas de produccin agrcola. Fertirrigacin

La fertirrigacin es una tcnica de cultivo que ofrece la posibilidad de realizar una fertilizacin da a da, en funcin del proceso fotosinttico y exactamente a la medida de un cultivo, de un sustrato y de un agua de riego definidos y para unas condiciones ambientales de terminadas. La tcnica permite una dosificacin ade cuada de fertilizantes y fitosanitarios en un sistema de riego localizado, que ofrece numerosas ventajas frente al riego tradicional en cuanto a la cantidad y a la calidad de agua que utiliza. En Espaa se estima que existen unas 300 000 ha de superficie fertirrigada. un 6 % de la superficie total de regado, de las que ms de 50 000 ha lo son de inverna dero, correspondiendo a Almera prcticamente la mi tad de esta superficie, el mejor exponente de esta nueva tcnica de riego y fertilizacin. En estos momentos, so mos el segundo pas del mundo despus de Estados Unidos que, con 900 000 ha. ocupa el primer lugar. Normalmente, la fertirrigacin se utiliza en cultivos in tensivos, de elevado coste y rendimiento, en instalacio nes bajo cubierta plstica, aunque tambin puede hacer se en campo abierto. Los componentes fundamentales de un sistema de cultivo con fertirrigacin son: el sus trato de cultivo (orgnico o inorgnico), la disolucin fertilizante, el sistema de riego (bomba de agua, filtros, inyectores, electrovlvulas, goteros, ...) y la planta (Fi gura 8-3). Se utilizan sustratos artificiales distintos del suelo debido a: 1) la necesidad de transportar plantas; 2) la existencia de factores limitantes para la continuidad de los cultivos intensivos en un suelo natural, como agota miento, salinizacin y enfermedades; y 3) la posibilidad de un mayor control del ambiente radicular, en aspectos relacionados con el suministro de agua y nutrientes. Los sustratos ms utilizados son turbas, arena, lana de roca o rock-wool, peiiita y otros materiales alternativos. como corteza de pino, fibra de coco, escorias de fundi cin. etc. El cabezal de riego en un sistema de fertirrigacin consta de distintos mdulos para la mezcla y dosificajin I izantes con el agua de riego, con ayuda

de un programa de tiempos y diluciones, como se ob serva en la Figura 8-3. Los distintos tipos de disolucin fertilizante que se utilizan en fertirrigacin tienen como modelo las disoluciones nutritivas que se emplean en hidropona (como la que se menciona en el Cuadro 6-4). Actualmente, se comercializan nuevos fertilizantes para ser utilizados especficamente en fertirrigacin que deben ser solubles. Lgicamente, en el diseo de las disoluciones se tienen en cuenta los contenidos sali nos del agua de riego, las interacciones con el sustrato y las necesidades del cultivo. La fertirrigacin permite un mejor aprovechamiento de los fertilizantes, dada la precisin en la incorpora cin de los mismos cerca de las races, disminuyendo las prdidas por lixiviacin y volatilizacin. Se puede conseguir una adecuacin continua del abonado a las necesidades del cultivo. Algo parecido sucede con el gasto de agua, ya que se necesitan menores cantidades para mantener hmeda la raz, lo que implica una re duccin en las prdidas por percolacin y por evapora cin, as como una distribucin controlada del agua en la zona radicular. Tambin existe la posibilidad de adi cionar a los cultivos, a travs del agua de riego, otros productos como fitosanitarios, bioestimulantes, etc. Po demos resumir que, con esta tcnica de cultivo, conse guimos una disminucin de la contaminacin difusa del suelo y las aguas freticas y un incremento en el rendi miento de los cultivos. Los inconvenientes principales de la fertirrigacin son el elevado coste de la instalacin y el mantenimien to del sistema, adems de una cualificacin tcnica del agricultor para el buen uso del mismo. Adems, se pro ducen distintos residuos, como las disoluciones de ferti lizantes desechadas, los plsticos y los sustratos de cul tivo, que tienen una vida comercial corta.

Nutricin

mineral

y produccin

vegetal

121

3.2. Macro y micronutrientes. Quelatos Los fertilizantes que se emplean en fertirrigacin han de ser solubles en agua o, directamente, lquidos. La industria ha desarrollado una serie de productos para ser utilizados en los sistemas de riego, de mayor calidad y variedad respecto a los fertilizantes tradicionales. Los fertilizantes slidos de macronutrientes, adems de ser perfectamente solubles, han de cumplir dos obje tivos: a) ser compatibles entre s, sin que originen reac ciones cruzadas que den lugar a precipitaciones indeseadas. Normalmente, se preparan dos disoluciones concentradas, separando las sales calcicas de las de fos fato y sulfato y, b) la concentracin salina que propor cionan al mezclarse con el agua de riego no debe supe rar los valores crticos de salinidad de cada cultivo. En fertirrigacin, ms que en ningn otro sistema de cultivo, se hace necesaria la aplicacin de micronutrienles, ya que las races de las plantas, confinadas en el bulbo de goteo, slo van a poder explorar una peque a parte del sustrato, cuyo contenido en micronutrientes puede ser insuficiente para el buen desarrollo del culti vo. Adems, los fertilizantes de macronutrientes que se emplean en fertirrigacin son ms puros que los tradi cionales y contienen menos micronutrientes como im purezas. Es decir, los micronutrientes se aportan en mer cantidad y, sin embargo, se requieren en mayor -edida, dado que el sistema asegura el suministro de elementos mayores. En consecuencia, es ms probable . los oligoelementos se constituyan como factores li antes de la produccin. Las sales solubles de micro- jtrientes, sobre todo las de hierro, tienden a precipitar no hidrxido de Fe, pudiendo interferir con otros mi entes como el fsforo, con lo que no estarn disponi- _N para la planta y provocar, adems, la obturacin de - goteros. Un quelato es un tipo de complejo en el que un ion -etlico (Fe, Cu. Zn, Mn, etc.) se une por varios puntos a .-j molcula orgnica (agente quclante), de manera que n quelado cambia sus propiedades y normalmente, a-.menta su estabilidad en disolucin. Los quelatos ms ados son derivados poliaminocarboxlicos, siendo -OTA (cido ctiln-diamino-carboxlico) el agente -'-.rante ms conocido, si bien hay otros que forman n.elatos con Fe ms estables, como el EDDHA (cido n-diamino-di-ortohidroxi-feiiilaclico) (Fig. 8-4). a la actualidad, se recomienda el uso exclusivo de .-elatos solubles o en disolucin para la aplicacin de trientes metlicos. En el vademcum de producisanitarios y nutricionales de 1996, aparecen 153 Txluctos frricos con distintos agentes quelantes o "'.piejos orgnicos y ninguna sal inorgnica de Fe. *r- el resto de los metales, tambin existe una mayora utilizantes a base de complejos y quelatos y slo -' - pocos productos inorgnicos. Incluso los nutrieny Mo se comercializan como complejos con dife=--"es materiales orgnicos. aplicacin de Fe como quelato frrico es la mejor

Figura 8-4. f r m u l a desarrollada de la molcula del quela to Fe-EDDHA (EDDHA = cido etiln-diamino-di-ortohidroxi-fenilactico).

forma de corregir la clorosis frrica, si bien puede resul tar algo cara. En nuestro pas se est utilizando con xito en cultivos sensibles a la clorosis y de alto valor aadido, o en invernaderos con tecnologa de fertirrigacin. 4. INTERACCIN PLANTAMICROORGANISMO Existe una regin del suelo definida como rizosfera donde se ponen de manifiesto numerosas interacciones entre las races de la planta y los microorganismos del suelo, especialmente bacterias y hongos. Estas interac ciones raz-microorganismos resultan, a veces, tremen damente complejas e implican en muchos casos la inva sin de la raz por dichos microorganismos, o bien permanecen libres en el suelo. En cualquier caso, las interacciones pueden producir un beneficio a la planta o bien lesiones o enfermedades. Durante aos, estos siste mas han atrado la atencin de los microbilogos; pero, con la excepcin de los organismos fijadores de nitr geno. no es hasta estos ltimos aos que ha surgido un inters similar en los fisilogos vegetales. En este senti do, el estudio de las micorrizas ha demostrado su im portante papel en la nutricin mineral de numerosas fa milias de plantas, tanto de inters agrcola como, principalmente, en silvicultura. El objetivo actual de alcanzar y mantener una agricultura sostenible se basa especialmente en el mejor conocimiento de estos dos aspectos de la interaccin planta-microorganismos que son la fijacin biolgica del nitrgeno en simbiosis y las micorrizas, comentados a continuacin. 4.1. Fijacin biolgica del nitrgeno

Como ya se dijo en el Captulo 6, las plantas toman preferentemente el nitrgeno como NO-J" y tambin, aunque de forma secundaria, como NH4' (vase tam bin Captulo 15). Sin embargo, gracias a las asociado-

122

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

nes simbiticas de determinados organismos, algunas plantas, principalmente leguminosas, son capaces de reducir el N 2 atmosfrico y asimilarlo. Aunque este as pecto se trata de forma exhaustiva en el Captulo 16, en este apartado se describe la proyeccin agrcola de la fijacin de N 2 . El nitrgeno junto con el dficit hdrico son los facto res limitantes ms importantes de la produccin agrcola. En consecuencia, el nitrgeno inorgnico se ha converti do en el principal fertilizante utilizado con resultados verdaderamente espectaculares. As. por ejemplo, con slo un aumento del 10% en la superficie cultivada, en 25 aos se duplic la produccin de cereales en el mun do, al pasar de un aporte nitrogenado de 8 kg/ha/ao empleados al finalizar la Segunda Guerra Mundial a 125 kg/ha/ao utilizados en la dcada de los setenta. Actualmente, se vienen utilizando un promedio de 150 kg/ha/ao en los pases del primer mundo. Frente a los mtodos industriales, principalmente el mtodo de Haber-Bosch, para la obtencin de fertili zantes nitrogenados, que resultan muy caros desde el punto de vista energtico y, potencialmente, contami nantes tanto de las aguas como del suelo, la fijacin biolgica del nitrgeno se presenta como una alternati va econmicamente rentable y ecolgicamente limpia. La fijacin total de nitrgeno en la biosfera se eleva a 275 millones de toneladas anuales; de ellas, 175 mi llones se fijan biolgicamente, existe una fijacin in dustrial de 70 millones y una fijacin espontnea del orden de unos 30 millones. As, la fijacin biolgica supone algo ms del 60 %, de la cual la mitad corres ponde a la simbiosis del sistema Rhizobi/-legumino sas. Desde hace ms de veinte siglos, las leguminosas se vienen utilizando empricamente en la cuenca del Mediterrneo y en otros lugares para restaurar la fer tilidad de los suelos mediante la rotacin de los cultivos. Una mirada a la produccin mundial de legumi nosas indica que, frente a la produccin anual de 200 millones de toneladas, seran necesarias, al finalizar el siglo, 500 millones de toneladas para alimentar a la po blacin mundial. Sin embargo, la produccin de legu minosas en los ltimos aos slo ha crecido en un 20 % debido, entre otras causas, a su complicada nutricin nitrogenada. Los principales sistemas simbiticos son los si guientes: a) Simbiosis Rhizobium-leguminosas. Es la ms es tudiada y, en consecuencia, la mejor conocida, aunque presenta todava toda una serie de pro blemas de orden ecofisiolgico, bioqumico y molecular que an se desconocen, y que podran mejorar claramente la produccin. Actualmente, el aislamiento de mutantes ms eficaces de Rhizobium y los adelantos en gentica molecular es tn arrojando mayor luz a la comprensin del proceso y una mayor rentabilidad en la produc cin de leguminosas (Fig. 8-5 A). Podemos esta-

Figura 8-5. A) Detalle de los nodulos resultantes de la sim biosis entre la planta de guisante {Pisum sativum) y Rhizobium leguminosarum. (Fotografa de L. Bolaos, 1992.) B) Anabaena, cianobacteria filamentosa con heterocistos, clu las especializadas donde se realiza la fijacin biolgica del nitrgeno. Microscopia de fluorescencia, x 1000. (Fotografa de I. Bonilla, 1986.)

b)

blecer un promedio del nitrgeno fijado por esta modalidad de entre 50-250 kg/ha/ao. Simbiosis Fninkia-no leguminosas. Frankia es una bacteria filamentosa que establece simbiosis con plantas no leguminosas todas ellas leosas. por lo que tiene una gran importancia en las reas forestales y en la regeneracin de suelos pobres. La biologa de Frankia es mucho peor conocida que la de Rhizobium ya que, contraria mente a lo sucedido con la anterior, no fue aisla da y cultivada in viiro hasta 1968 por el grupo de J. Torrey de la Universidad de Harvard. La sim biosis que establece con las plantas del gnero Casuarina es la mejor conocida de este tipo. Son plantas originales de Australia y Sureste asiti co, rboles de crecimiento rpido que pueden servir de cortavientos en las regiones de predesierto, para la proteccin de los cultivos contra la arena. Tambin sirven para fijar suelos erosio nados y dunas. Con unas 70 especies, actual mente estn aclimatadas a todas las regiones tro-

Nutricin mineral y produccin vegetal picales y subtropicales. Existe tambin simbio sis de Fmnkict con otras plantas, siempre leo sas, de diversos rdenes como Rosales, Fgales y Myricales, etc. Podemos establecer un prome dio de nitrgeno fijado por esta modalidad de entre 30-230 kg/ha/ao. Simbiosis cianobacterias-Azolla. Ya 2000 aos a. de C , en los arrozales chinos y vietnamitas, se utilizaba el helcho acutico Azolla que estable ce una simbiosis con cianobactcrias fijadoras de nitrgeno, principalmente del gnero Anabaena (Fig. 8-5B). Tanto en simbiosis como en forma libre, estas cianobacterias aportan a los arrozales unos 30 kgN/ha/ao; sin embargo, estudios ac tuales indican que la inoculacin previa en los arrozales incrementa un 14% el rendimiento de grano, lo que equivale a 450 kg de grano ha ao. Podemos establecer un promedio de nitrgeno fijado por esta modalidad de simbiosis de entre 10-200 kg/ha/ao.

123

c)

4.2.

Micorrizas

Muy probablemente, de todas las interacciones entre u t a s y microorganismos, la de mayor proyeccin nulonal sea la que se presenta entre las races y los .ongos del suelo, en una forma de mutualismo que co-ocemos como micorriza. A diferencia de lo que suce.:? con la fijacin biolgica de dinilrgeno. donde slo unas pocas familias, principalmente leguminosas, preentan la asociacin simbitica, se han observado mico-rizas en ms del 80 % de las especies estudiadas, inclu endo prcticamente todas las plantas de inters ola y forestal. Originalmente descubiertas en el siglo xix por el bo.o alemn Frank. sle observ que la inoculacin micorrizas estimulaba la germinacin y el creciento de las plntulas. Aunque no fueron aceptados en i incipio, los estudios actuales han venido a confir- j r estos resultados con rboles, tanto en Estados Uni- como en Australia y en la antigua URSS, donde se . obtenido aumentos en el crecimiento de un 30 a un i en semillas inoculadas frente a controles sin ino...ar. Similares resultados se han conseguido en plancomo el maz. Sabemos que el papel benfico de las jorrizas se debe a que aumenta considerablemente la na en que la raz es capaz de absorber nutrientes raies, al establecerse una interaccin de las hilas con lo* pelos radiculares de la planta (Fig. 8-6). Existen dos venias de micorrizas: eetom i corrizas y endomicorrizas. Las ectomicorrizas estn restringidas a muy pocas riimilias (slo el 3 % de las fanergamas); son propias as templadas y aparecen mayormente en rboles ustos, como pinos (Fig. 8-6 C) y hayas (Fagceas). Suelen ser cortas y muy ramificadas y las hifas del hon. penetran slo en el espacio libre radicular (hasta la -^.nda de Caspari), pero no en el interior de las clulas,

formando una red intercelular en el apoplasto que se denomina red de Hartig (Fig. 8-6 A). Las endomicorrizas se encuentran en especies de casi todas las familias de angiospermas y en la mayora de las gimnospermas. excepto las pinceas. Son. sin duda, las ms abundantes, encontrndose en todos los climas y continentes a excepcin de la Antrtida. Pre sentan tres tipos, de los cuales el ms numeroso es el de las micorrizas vesculo-arbusculares (VA). A diferencia de las ectomicorrizas, los hongos de las micorrizas VA, miembros de la familia Eudogonaceae, parecen pene trar de manera directa en el citosol de las clulas corti cales, donde configuran esas formas arbusculares y ve sicales que dan nombre a este tipo de micorrizas. Las hifas se ven rodeadas de una membrana plasmtica invaginada de las clulas corticales (Fig. 8-6 B). Tanto en unas como en otras micorrizas, la planta suministra azcares para mantener el metabolismo del hongo y ste, por su parte, mejora la capacidad de la raz para absorber iones de difusin lenta o iones que la planta requiere en cantidades elevadas, como fosfato, amonio, nitrato y potasio (vase Captulo 7). Muchas comunidades de rboles no creceran sin la ayuda de las micorrizas. como sucede en numerosos suelos poco fr tiles o en rboles crecidos en terrenos que no son los suyos originarios, como es el caso de rboles europeos introducidos en Amrica, que no crecen hasta que no son inoculados con los hongos tomados de sus suelos originarios. Como puede verse, se trata de una relacin simbitica y mutualista. con un claro beneficio mutuo, donde el hongo recibe nutrientes orgnicos de la planta. y sta ve mejorada su capacidad de absorcin de agua y sales minerales. Zonas muy degeneradas ambicntalmente. como mr genes de carreteras, o contaminadas por rellenos indus triales, mineros, sanitarios, etc., son regeneradas ms fcilmente gracias a la introduccin de plantas micorrizadas. Las micorrizas as como la fijacin biolgica de dinitrgeno se han configurado como dos de las es trategias cientficamente aceptadas para una agricultura sostenible.

5.

PROBLEMAS DE PRODUCCIN EN CONDICIONES DE ESTRS

La incapacidad de desplazamiento es una caracterstica diferencial de las plantas que condiciona de forma ab soluta su relacin con el medio ambiente, y hace que su desarrollo dependa de la capacidad adaptativa que pre senten frente a condiciones externas variables, como la luz, la temperatura o la disponibilidad de agua y sales minerales (vase Captulo 13). En consecuencia, las variaciones ambientales producen situaciones di versas de estrs a las cuales se enfrentan las plantas con mayor o menor xito segn se lo permita la flexi bilidad adaptativa de su genoma. Como se ver con ms detalle en el Captulo 30, en-

124

Fundamentos

de fisiologa

vegetal Hifas externas Vasos del floema del hongo Vasos del xilema , percc|0

Tejido vascular Endodermis \ Clulas corticales

Clamidospora

Pelo radical Apresorio j Red de Hartig (hifas intercelulares) Manto formado por hifas del hongo Clulas epidrmica; Esporocarpo

Figura 8-6. A) Las ectomicorrizas se caracterizan por el manto de hifas que el hongo produce cubriendo la raz. El hongo se desarrolla mtercelularmente configurando la llamada red de Hartig. Slo un 3 % de las plantas superiores forma estas micorrizas, principalmente rboles: pinos, hayas, robles,... B) Las endomicorrizas no forman como las anteriores un manto externo de hifas, sino que se desarrollan en el interior de la raz, nter e intracelularmente, dando lugar a los elementos morfolgicos tpicos de la infeccin: vesculas y arbsculos. Representan la mayor parte de las micorrizas, ya que el 9 6 % de las plantas existentes en la naturaleza las poseen. (A y B adaptados de C. Azcn de Aguilar y J. M. Barea, Biologa Vegetal, Libros de Investigacin y Ciencia, 1988.) C) Corte lateral de una plntula de 4 cm de tamao, de Pinus contorta, mostrando un desarrollo espectacular de sus races colonizadas por micorrizas. (Adaptado de Brock, Microbiologa.)

Nutricin

mineral

y produccin

vegetal

125

tre las causas ms frecuentes de estrs en las plantas destacan: el estrs hdrico. tambin tratado en el Cap tulo 4; las bajas temperaturas: la salinidad y la acidez de los suelos, este ltimo aspecto en estrecha relacin con los metales pesados. Nosotros estudiaremos en este apartado, dada su importancia, la relacin existente en tre las condiciones de salinidad y acidez y basicidad de los suelos con la produccin agrcola.

150

5.1,

Salinidad

La salinidad es. quizs, el problema de contaminacin ms antiguo de los suelos agrcolas. Las sales presentes en el agua de riego se acumulan a un ritmo ms o menos acelerado y determinan la degradacin y la prdida del valor agrcola de los suelos. Este problema es ms acu ciante en zonas ridas y semiridas. donde las precipita ciones son insuficientes para lavar las sales solubles aportadas al suelo. La historia de las grandes civiliza ciones es. en gran medida, la historia de la agricultura de irrigacin, y sta no puede perdurar ilimitadamente sin un control adecuado del equilibrio entre la salinidad de las aguas de riego, la salinidad nativa del suelo y la capa cidad de drenaje del mismo, para permitir que el exceso de sales sea lixiviado de la zona radicular de los cultivos. La salinidad de un suelo viene determinada por la conductividad elctrica (EC) de su fase acuosa. Un sue lo agrcola debe presentar un valor de EC inferior a 2 miliSiemens (mS). lo que representa un porcentaje me nor del 10% de la salinidad del agua del mar. valor suficiente para que slo las plantas tolerantes a la salini dad puedan desarrollarse en estas condiciones. La utili zacin de nuevas variedades y, sobre todo, de nuevas tecnologas de riego est permitiendo mejorar estos ni veles de tolerancia. Un problema todava ms grave que el exceso de sa les es la carga de sodio (sodicidad), con efectos directos sobre la estructura del suelo, especialmente cuando ste es arcilloso, lo que provoca un descenso de la permea bilidad y, con ello, un menor desarrollo radicular, con los consiguientes problemas en la absorcin de nutrien tes, principalmente K, Ca y P. Por tanto, el efecto negativo de la salinidad en los cultivos se debe a dos tipos de estrs: (I) el estrs hdri co, al reducirse la absorcin de agua por el efecto os mtico; y (2) la toxicidad inica relacionada con la ex cesiva absorcin de sodio, que desencadena un desequi librio inico en la planta (Fig. 8-7). En el primer caso (1), existe una respuesta de la planta en el sentido de incrementar la produccin intracelular de sustancias so lubles, como betana, prolina, sacarosa, manitol, glicerol, etc., que disminuyen el potencial hdrico intracelu lar y facilitan la entrada del agua; de lo contrario, no slo no entrara agua del medio exterior, sino que sta tendera a salir de las clulas radiculares, secndose la planta. Hortalizas, legumbres y frutales son cultivos es pecialmente sensibles a la salinidad. En el segundo caso

-0.92

-1.84

4* <MPa>

Figura 8-7. Respuesta del crecimiento de distintas espe cies de planta frente a un incremento en la salinidad y en el potencial osmtico. I, Halfitas. II, Cultivos halfilos rela cionados con I, como la remolacha azucarera. III, Cultivos tolerantes a la salinidad, como la cebada. IV, Especies sen sibles, como el guisante. (Adaptado de Marschner, 1995.)

(2), el Na puede desplazar el Ca de las membranas celu lares, modificando la absorcin de nutrientes como el K. Sin embargo, se ha observado que si existe un aporte suplementario de Ca, el proceso de captacin de K fun ciona bien, en detrimento del Na que compite con el K por medio de un mecanismo de baja afinidad. As. pues. la fertilizacin con Ca mejora la produccin agrcola al incrementar la absorcin de K y reducir el eflujo de nitrato y fosfato e. incluso, del propio K. Recientemen te se ha propuesto que el efecto positivo del Ca se debe a su capacidad para reactivar las acuaporinas. prote nas que forman canales de agua en las membranas y que permiten el paso libre de agua en respuesta a cambios de la presin osmtica e hidrosttica. Estas acuaporinas se ven rpidamente inactivadas ante la presencia de NaCI y aunque todava se sabe muy poco sobre la regu lacin de las mismas, se ha observado que su apertura depende de fosforilacin que, en ltimo trmino, viene regulada por la concentracin de Ca intracelular. Las estrategias ms habituales que han seguido las plantas halfilas (halfitas) para adaptarse al crecimiento en zonas salinas pueden resumirse en las siguientes: a) Disminucin de la absorcin de Na", mediante desarrollo de transportadores muy especficos para K + . Presencia de bombas de extrusin de Na + en Ja membrana plasmtica de las clulas del crtex.

b)

126

Fundamentos

de fisiologa

vegetal

c)

d) e)

El sodio ser bombeado activamente fuera de la clula mientras que su entrada ser pasiva; es el caso de Agropyrwn junceiforme, Excrecin de NaCl por glndulas secretoras (hidatodos) en las hojas, como sucede en los gne ros Atriplex, Tumaris, Spartina, etc. Acumulacin de exceso de sodio en las vacuolas. Sustitucin parcial del K + por el N a + en las fun ciones especficas del K~ en el citoplasma.

Frecuentemente, las plantas silvestres adaptadas a la salinidad poseen una o varias de estas estrategias para poder desarrollarse en situaciones de estrs salino. Ac tualmente, se conocen genes resistentes a la salinidad en levaduras, como los genes TRK1, que codifican un transportador altamente selectivo de K. ~ frente a Na ' , y genes ENA, que codifican una bomba de extrusin de Na + . Se intenta conseguir plantas transgnicas que in corporen algunos de estos genes de levaduras que las conviertan en plantas altamente resistentes a la salinidad.

5.2.

Acidez y basicidad

La mayora de las plantas crece en suelos que tienen un pH variable entre 4 y 8. En los extremos de este interva lo se producen situaciones de estrs a las que se han adaptado diversas especies. Los mecanismos de compe tencia han marcado, seguramente, la presencia de dos tipos de plantas: basfilas, aquellas que viven en suelos con valores de pH entre 8 y 9; y acidfilas, las que viven en suelos con un pH inferior a 4. El hecho de que exista una estrecha relacin entre el pH bsico y la presencia de Ca, y viceversa, hace que se haya hablado indistintamente de plantas cald clas o basfilas por un lado y calcfugas o acidfilas por el otro. Esto no siempre es correcto pues pueden existir suelos con un pH elevado, como los suelos de serpentina, con bajos contenidos en Ca. Si considera mos especficamente la presencia de calcio, en las plantas calcfugas, tpicas de suelos pobres en Ca. la concentracin intracelular de Ca sera baja. Sin embar go, las plantas caldclas toleraran altas concentracio nes de Ca en el suelo y, por tanto, muy probablemente tendran tambin altos requerimientos del mismo que mantendran en disolucin en el mbito intracelular (vacuola y RE) gracias a la formacin de malato cal cico. Asimismo, el Ca desempea un papel an no bien comprendido en la simbiosis /?/!/r?/m/H-leguminosa que favorece el desarrollo de los nodulos radiculares. Es probable que las caractersticas del suelo, como la textura del mismo, tengan una influencia ms marcada sobre el crecimiento de las plantas que la propia con centracin de H " per se, aunque el pH incide ele forma importante en la solubilidad de numerosos elementos, que estarn o no disponibles para la planta segn el pH del suelo. As, los metales como el Fe y el Cu son menos solubles en suelos alcalinos que en suelos ci

dos. lo que impide, por ejemplo, el desarrollo de plantas calcfugas en suelos calcreos, al no poder utilizar el Fe que en esos suelos se encuentra escasamente dispo nible. provocndose severas clorosis que no manifies tan las plantas caletelas. En la misma lnea, el anin ortofosfato dicido (H2PC>4 ) se absorbe con mayor fa cilidad a valores de pH entre 5.5 y 6.5, mientras que en suelos bsicos se encuentra mayoritariamente como HPO|~, que se absorbe peor. Por otra parte, la disponibilidad de elementos noci vos para la planta, como el aluminio y los metales pesa dos. aumenta conforme disminuye el pH del suelo. En el caso de Al. el incremento de las lluvias acidas en Europa Central ha determinado serios problemas de to xicidad por Al, al alterarse la absorcin de fsforo y calcio por las plantas. Aunque no se conocen con exac titud los mecanismos por los que las plantas toleran los efectos de estos metales pesados, existen pruebas de c mo resisten su presencia. As, algunas plantas acumulan el metal en la pared celular, evitando de esta forma su presencia en el interior celular. En otros casos, los me tales pesados son absorbidos en cantidades muy peque as aunque su concentracin externa sea muy grande. De forma complementaria pueden existir sistemas acti vos de extrusin de metales. Muy a menudo se encuen tra una compartimentacin, siendo las vacuolas su prin cipal lugar de acumulacin. En combinacin con alguno de los citados, existe toda una serie de mecanis mos de formacin de quelatos que tiene en las fitoquelatinas su principal expolente. Las fitoquelatinas son pequeos pplidos ricos en cistena: entre 2 y 8 restos de cistena situados en posicin central respecto a un cido glutmico y una glicocola en los extremos amono y carboxi terminales, respectivamente. Los grupos-SH de las cisternas constituyen los puentes por los que se unen a los distintos metales. Las fitoquelatinas se indu cen en presencia de metales pesados, y su papel es simi lar al de las metalotioninas de los animales. Las plantas que presentan algunos de los rasgos que implican tolerancia a los metales pesados tienden a ser excluidas de los suelos normales por las no tolerantes. dado que stas son ms vigorosas y presentan una mayor tasa de crecimiento. Sin embargo, las especies o varieda des tolerantes son muy tiles al poder crecer en suelos cidos y o afectados por la presencia de metales pesados.

6. GENTICA Y NUTRICIN
La condicin de tolerancia a un determinado estrs nutricional como la salinidad, alcalinidad, niveles txicos o deficientes, etc.. unida a los requerimientos especfi cos de elementos esenciales, se encuentra bajo control gentico, siendo ste uno de los campos de investiga cin en fisiologa vegetal que ms necesita la aporta cin de las nuevas tecnologas. Podemos trazar una divisin entre plantas ineficien tes y plantas eficientes. El estudio de las plantas inefi-

cientes se basa principalmente en trabajos con imitantes obtenidos en laboratorio. As. tenemos imitantes de soja ineficientes respecto del Fe, mulantes de maz inefi cientes para el Mg y lmales respecto al B. Mutantes de estas plaas por ejemplo, de la soja injertadas so bre raz normal, no manifestaron los sntomas de cloro sis que produce la ausencia de Fe, al ser la raz la que regula la eficiencia en la absorcin y utilizacin del Fe. Por otra parte, las plantas eficientes pueden encontrarse de forma natural en habitat pobres en nutrientes, o con cantidades txicas de metales pesados, salinos, alcali nos, etc., es decir, en unas condiciones que podran de terminar la muerte de otras especies e. incluso, de otras variedades de la misma especie. Esto quiere decir que se ha producido un mecanismo adaplativo. regulado por la seleccin natural. En plantas cultivadas de valor agr cola, se han obtenido variedades resistentes por selec cin dirigida. Los mecanismos propuestos para explicar las varia ciones genticas que justifican el comportamiento, tan to de las formas eficientes como de las ineficientes, frente a un estrs nutricional se pueden agrupar en tres grandes categoras: Modificacin de la absorcin radicular, por cambios en la morfologa de la raz o del meca nismo de absorcin y transporte de iones. As, por ejemplo, en las plantas resistentes al arsenalo, el mecanismo de tolerancia va ligado a una supresin del sistema de absorcin de fosfato de alta afinidad, el cual le vale al arsenato para ser transportado dentro de la clula. La hiptesis ms aceptada es que existe un gen supresor de la sntesis del transportador en las especies toleran tes, pero es inexistente en las no tolerantes. b) Alteracin del movimiento de los nutrientes a travs de las races, de su liberacin al xilema, y tambin, de la distribucin de los nutrientes en la parte area. As, en casos de deficiencia, una capacidad elevada de redistribucin desde las hojas y partes senescentes hacia las zonas de crecimiento de especies eficientes sera muy im portante para la supervivencia frente a otras ine ficientes, de baja capacidad distributiva. De igual forma, la capacidad de movilizar reservas de Ca, P, etc., desde la vacuola hacia el citoplasma, de terminara la eficiencia de unas plantas frente a otras en situaciones de deficiencias nutricionales. c) Cambios en la utilizacin de nutrientes en el me tabolismo y en el crecimiento. Existen diferen cias entre especies que, sometidas a estados de deficiencia, son capaces de realizar un metabolis mo normal frente a baja concentracin de nutrien tes. As sucede, por ejemplo, entre distintas varie dades de tomate, que pueden ofrecer cosechas normales con concentraciones muy bajas de K. Otra posible adaptacin es la capacidad de sustituir un elemento por otro. Los casos mejor conocidos son la a)

sustitucin de Na por K en algas halfilas, as como las plantas del gnero Astragaius, capaces de reemplazar el azufre por selenio en los denominados selcnoaminocidos. Estas potencialidades genticas se han aprovechado para obtener plantas de inters agrcola capaces de de sarrollarse en zonas tanto deficientes como txicas en nutrientes o metales pesados. Actualmente, frente a las tcnicas clsicas de seleccin tradicional, se estn utili zando tcnicas de cultivos in vitro y de ingeniera gen tica que nos permitirn en un futuro muy prximo rege nerar suelos contaminados o con altos niveles de estrs, gracias a la utilizacin de plantas transgnicas capaces de desarrollarse en esas condiciones limitantes para plantas normales.

7.

NUTRICIN MINERAL Y SU RELACIN CON ENFERMEDADES Y PLAGAS

La nutricin mineral puede aumentar o disminuir la re sistencia o la tolerancia de las plantas a las plagas y enfermedades. Mientras que la resistencia se relaciona con la habilidad del husped para limitar la penetracin. el desarrollo y la reproduccin del patgeno invasor o para limitar la alimentacin de las plagas, la tolerancia se caracteriza por la habilidad de la planta husped para mantener su crecimiento a pesar de la infeccin o el ataque de una plaga. Aunque la resistencia y la toleran cia estn controladas genticamente, tienen una in fluencia considerable los factores ambientales. La nu tricin mineral puede considerarse un factor ambiental que puede manipularse con relativa facilidad. Una nutricin mineral equilibrada asegura un creci miento ptimo de la planta y, al mismo tiempo, permite una resistencia ptima de la misma, aunque pueda ha ber algunas excepciones. Con respecto a la tolerancia, hay una norma general por la que las plantas que sufren una deficiencia nutricional presentan una menor tole rancia a plagas y enfermedades. La tolerancia puede aumentarse por el aporte del nutriente deficitario, ya que una planta que crece de forma ms vigorosa tiene mayor capacidad de compensar la prdida de fotoasimilados. o la disminucin de superficie foliar producida por una infeccin.

7.1.

Enfermedades fngicas, bacterianas y vricas

Las enfermedades de las plantas pueden ser causadas por hongos, bacterias y virus, siendo las ms importan tes las fngicas. La germinacin de esporas de hongos en la superficie de hoja o raz se estimula por la presen cia de exudados. La velocidad de flujo y la composicin de los exudados dependen de la concentracin celular. Por ejemplo, la concentracin de aminocidos y azca res es grande en hojas con deficiencia de potasio. Tam-

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Fundamentos de fisiologa vegetal

bien se acumulan aminocidos cuando el aporte de N es excesivo. La salida de fotoasimilados al apoplasto de pende de la permeabilidad de la membrana plasmtica, y puede aumentar en condiciones de deficiencia de Ca y B. que aumentan la permeabilidad de la membrana, y con la deficiencia de K, que desacopla la sntesis de polmeros. La mayora de los parsitos slo tiene acceso a las clulas epidrmicas, que poseen un alto contenido de compuestos fenlicos y flavonoides (vase Captulo 17), que se caracterizan por sus propiedades fungistticas. El metabolismo de compuestos fenlicos est rela cionado, entre otros, con el Cu y el B. La invasin del apoplasto por hongos, y tambin por bacterias, tiene que ver con la emisin de enzimas pectolticas que di suelven la lmina media de la pared celular (Fig. 8-8). La actividad de estas enzimas est fuertemente inhibida por el catin Ca2 \ No obstante, las enzimas pcticas u otras toxinas fngicas tambin pueden aumentar la per meabilidad de la membrana, y provocar as la salida de K + o de H + que, a su vez, pueden desencadenar reac ciones de hipersensibilidad como necrosis localizadas. Otro mecanismo de defensa, como parte de la res puesta a la infeccin, es la produccin de radicales superxido, que contribuirn a la respuesta de hipersensi bilidad, a la lignificacin de la pared celular o a la muerte del patgeno. Dado el papel de Cu, Zn, Mn y Fe en la generacin y destruccin de los radicales superxido, estos nutrientes, como constituyentes de las superxido dismutasas (SOD), estarn relacionados con la resistencia de la planta en los supuestos planteados. La lignificacin y la acumulacin y depsito de slice en las clulas epidrmicas pueden formar una barrera fsica frente a la penetracin de las hilas (Fig. 8-8). Es tos procesos, relacionados con la nutricin mineral, procuran la principal resistencia estructural de las plan tas frente a las plagas y enfermedades, sobre todo en las gramneas y en la endodermis de la raz. El N y el K afectan a la resistencia de los cultivos a las enfermedades y tienen mucha importancia como fertilizantes. As como el K, al aumentar su nivel en hoja, aumenta la resistencia de la planta frente a parsi tos tanto facultativos (Fusarium) como obligatorios (Puccinia). el N presenta respuestas diferentes: en par sitos facultativos, el incremento de N aumenta la resis tencia, mientras que en obligatorios el mayor aporte de N disminuye la resistencia (Cuadro 8-3). La planta defi ciente en N es la ms resistente a los parsitos obligato rios, ya que stos se nutren de los asimilados de clulas vivas, mientras que los facultativos, que son semisaprfitos, prefieren tejidos senescentes. Por tanto, todo lo que apoya la actividad metablica de la clula husped y retrasa la senescencia de la planta aumenta la resisten cia o tolerancia a los parsitos facultativos. Los cultivos con deficiencia de K son muy sensibles a los ataques fngicos. La aplicacin de fertilizantes potsicos a estos cultivos disminuye drsticamente la incidencia de ambos tipos de parsito, obligatorio y fa

cultativo. En plantas deficientes en K, la sntesis de compuestos de alto peso molecular (protenas, alrnidt y celulosa) se desacopla, con lo que se acumulan com puestos de bajo peso molecular que favorecen la in\ sin y el crecimiento de los hongos. Una aplicacin de K por encima del nivel ptimo no produce una mayor resistencia de la planta frente a las enfermedades y pue de, por el contrario, crear competencia con el calcio o e magnesio y provocar alteraciones fisiolgicas que con duzcan a una mayor susceptibilidad de la planta. El contenido de Ca en los tejidos afecta a la inciden cia de parsitos en dos formas: a) el Ca es esencial para la estabilidad de las biomembranas; cuando la concen tracin de Ca es baja, se favorece la salida de compues tos de bajo peso molecular, como azcares, al apoplasto y b) se necesitan poligalacturonatos de calcio para esta bilizar la lmina media de la pared celular (Fig. 8-8). Muchos hongos y bacterias invaden los tejidos median te la produccin de enzimas pectolticas tipo poligalacturonasas, que disuelven la lmina media. El Ca inhibe drsticamente la actividad de estas enzimas. Los tejidos vegetales bajos en Ca. respecto de los normales en Ca. son ms susceptibles a las enfermedades parasitarias tambin durante el almacenado. Esto es muy importan te para los frutos carnosos frente a las distintas podre dumbres. Un remedio eficaz es dar a los frutos un trata miento de calcio antes del almacenado. Hay numerosas referencias de los efectos de los micronutrientes sobre las enfermedades parasitarias de las plantas. De los mecanismos de defensa propuestos, el del metabolismo de fenoles y la sntesis de lignina es el mejor conocido en relacin, al menos, con el B, el Mn y el Cu. El cobre ha sido y es utilizado ampliamente como fungicida, en unas dosis 100 veces superiores a las que requiere la planta como nutriente. 7.2. Plagas Las plagas son animales (insectos, arcnidos, nematodos. etc.) que, al contrario que las bacterias y los hon gos, tienen sistemas digestivo y excretor, y su dieta es menos especfica. Factores como el color de las hojas pueden ser importantes para el reconocimiento u orien tacin de la plaga. Los mecanismos de resistencia de las plantas son: a) fsicos, como el color, propiedades de superficie, o pelos; b) mecnicos, como la fibra o la slice y, c) qumicos o bioqumicos, como el contenido de estimulantes, toxinas o repelentes. En general, las plantas jvenes o de crecimiento rpi do tienen mayor probabilidad de ser atacadas por las plagas que las plantas viejas o de crecimiento lento. Por tanto, se encuentran buenas correlaciones entre la apli cacin de N y el ataque de plagas. Sin embargo, los cultivos suficientes en K sufren menos ataques que los deficientes en K. El contenido en aminocidos es ms importante que el de azcares frente a los insectos chu padores. Un incremento del contenido de aminocidos

i \ Ui

;I.M./M

Espora fngica (Si02)r T Compuestos fenlicos


\

Cutcula

Citoplasma

'

'

1*

Pared celular (Celulosa, lignina.. Lmina media (Pectatos de Ca)

' # 1 Vacuola j >-_ _ __.,_

Vacuola . J

Ca

Ca

Ca ~~. Ca ~^ Ca ^ Ca ~^ Ca ~^ Ca ~^ Ca ^ ^ Ca
=igura 8-8. Esquema de la penetracin de una hifa fngica desde la superficie foliar hacia las clulas epidrmicas apoplasto) y algunos de los factores que afectan al crecimiento del hongo y que estn relacionados con la nutricin mineral. (Adaptado de Marschner, 1995.)

es tpico de un aporte alto de N o de una anomala en la sntesis de protenas, como la debida a ciertas deficien cias de K, S o Zn. Cualquier alteracin nutricional que disminuya la presencia de K o produzca directamente el -.ncremento de aminocidos, disminuir la resistencia del cultivo a las plagas. Las relaciones planta-plaga son complejas y las observaciones de un caso no se pueden extrapolar para otras plantas y otros ecosistemas. As. se ha descrito que aportes elevados de N no aumenta ban la susceptibilidad de pinos al ataque de insectos herbvoros, posiblemente debido a que el aporte de N no slo aumentaba el N de la planta, sino que tambin aumentaba el contenido de diterpenoides, que actan como aleloqumicos (compuestos del metabolismo se cundario que interaccionan con otros organismos) (va se Captulo 17). Las clulas epidrmicas que contienen depsitos de slice actan como una barrera mecnica frente a insectos mordedores y chupadores. Los rocia dos foliares con compuestos de silicio reducen la inci dencia de los ataques, por ejemplo, de fidos. Cabe recordar que los insectos actan como vectores de virosis, lo que supone una amenaza aadida a la de
Cuadro 8-3.

una plaga de insectos chupadores. En muchas ocasio nes, el estado nutricional de la planta va a influir indi rectamente en la enfermedad vrica a travs de los vec tores, que son hongos o insectos, sobre todo fidos, responsables del 60 % de las virosis.
7.3. Aplicacin de fertilizantes y su relacin con plagas y enfermedades

La adicin de fertilizantes en condiciones de campo afecta a las plagas y enfermedades directamente, a tra vs del estado nutritivo de la planta, c indirectamente, por producir alteraciones, por ejemplo, en la recepcin de la luz y en la humedad del cultivo. Adems, la poca de aplicacin (calendario de fertilizacin) y el lipo de compuesto empleado son factores importantes, funda mentalmente para el N. En la mayora de los casos, el abonado nitrogenado se aade en dos fracciones, en otoo y en primavera. As. el nitrgeno aplicado a ce reales en zonas de clima templado al comienzo del ciclo de cultivo, normalmente en otoo (abonado de semen-

Efectos de la concentracin de nitrgeno y potasio sobre el grado de patogenicidad de parsitos en diversos cultivos

Nivel de N Patgeno Enfermedades Parsitos obligatorios Puccinia ssp./roya Erysiphe graminUmildeu Parsitos facultativos Alternara ssp./moteado de hoja Fusarium avv.v/w/mi. podredumbre y marchitamiento Xanrhamonas ssp... moteado y marchitamiento
Diferente intensidad ( + -> + -f Adaptuilo ilo Marscbner, 1995.

Nivel de K Bajo + ++ + Alto

Bajo

Alto

+ + +++ +++ +++

+++ +++ + + +

++++ +++ + ++++ ++++

+ + + + +

130

Fundamentos de fisiologa vegetal PROBLEMAS Y CUESTIONES


1. 2. 3. Seale los principales factores que afectan al contenido mineral de un tejido vegetal. En funcin de qu factor se presentan los sntomas vi sibles de deficiencia en hojas de distinta edad? Defina nivel crtico e intervalo de suficiencia de un nu triente. Qu elemento presenta el intervalo de suficien cia ms amplio? Indique las caractersticas del anlisis de savia y los in convenientes de las medidas enzimticas para una reco mendacin de abonado. Defina quelato. sealando sus principales propiedades. Que formas se conocen de simbiosis en la fijacin bio lgica del nitrgeno? Qu diferencias esenciales pre sentan? Defina micorrizas y explique los dos tipos de micorrizas ms habituales. Qu dos tipos de esles produce la salinidad? Qu relacin existe entre la toxicidad de los metales pesados y el pH de los suelos? Defina plantas resistentes y tolerantes a las enfermeda des.

tera), favorece el ahijado y el desarrollo del aparato ve getativo, lo que a su vez favorece la incidencia de enfer medades. sobre lodo de ataques fngicos. En estos su puestos se requiere el uso de productos qumicos para el control de plagas y enfermedades para proteger el culti vo y obtener una cosecha rentable. La aplicacin del abonado nitrogenado en primavera (abonado de cober tera), cuando la planta est formada, permite una mejor utilizacin del fertilizante y disminuye la aparicin de enfermedades, con lo que la necesidad de productos plaguicidas disminuye respecto al abonado de semente ra en otoo. La aplicacin de plaguicidas recupera las cosechas de los cultivos fertilizados con nitrgeno. Por otra parte, la forma del N aplicado al suelo puede tener implicaciones en los patgenos de la parte area de la planta. As, la solubilidad de la slice depende de varios factores, y aumenta conforme disminuye el pH del suelo. En consecuencia, el contenido de slice de la planta no slo depende de la fertilizacin silcea, sino tambin de la forma de fertilizante nitrogenado aadi do. El sulfato de amonio acidifica el suelo, mientras que el nitrato calcico lo alcaliniza. Por tanto, la aplicacin de fertilizantes minerales puede sustituir, o al menos reducir, la demanda de plaguicidas.

4.

5. 6.

7. 8. 9. 10.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA RESUMEN


1. 2. Alloway. B. J.: Heavy Metis in Soils. 2.a ed. Blackie Academic & Professional. Londres, 1995. Cadahia, C : Fertirrigacin. Cultivos Hortcolas y Or namentales. 1.a ed. Editorial Mundi-Prensa. Madrid. Barcelona, Mjico, 1998. Francois, L. E., Maas, E. V.: Crop response to salt stress. En: Handbook of Plant and Crop Stress, pp. 149-182. M. Pessarakli (ed.). M. Dekker Inc. \ Y . 1994. Hubber. D. M.: The role of nutrition in the takc-all disease of wheat and other small grains. En: Soilborne Plant Puthogens: Management of Diseases with Muero and Microelenients. AW Engelhard (ed.). APS Press. The American Phytophathological Society. St Pal. Minnessota. 1989. Jones. J. B. Jr. Wolf, B.. Milis, H. A.: Plant Analysis Handbook. Methods of Plant Analysis and Interpretation. Micro-Macro Publishing Athens. GA, USA. 1991. Loneragan, J. F.: Plant nutrition in the 20,h and pers pectivas for the 2P' century. Plant and Soil. 196: 163174. 1997. Marschner. H.: Mineral Nutrition in Higher Plants. 2." ed. American Press. Londres. 1995. Ministerio de Agricultura. Pesca y Alimentacin: Mto dos Oficiales de Anlisis. Suelos. Aguas. Fertilizantes y Planta. Ed. MAPA. Madrid. 1993. Thompson, J. P.: What is the potential for management of mycorrhizas in agriculture? En: Management of Mycorrhiza in Agriculture, Horticulture and Forestry. pp. 191-200. A. D. Robson. L. K. Abbott and N. Malajczuk (cds.). Kluwer Academic Publishers. Dordiecht. 1993. Varios autores: Biologa Vegetal. 1.a ed. Libros de In vestigacin y Ciencia. Prensa Cientfica. S. A. Barcelo na. 1988.

El presente captulo estudia la relacin existente entre los contenidos en la planta de los diferentes elementos esenciales descritos en el Captulo 6 y la produccin vegetal. Establecer la concentracin de nutrienies ade cuada para conseguir cosechas excelentes en calidad y cantidad es un apartado clave c imprescindible para po der realizar un diagnstico que refleje el estado nutricional de un cultivo y formular la recomendacin de abonado correspondiente. La eleccin del tejido o ma terial adecuado as como las condiciones de la toma de muestra y la representatividad de sta son tratadas de forma exhaustiva, dada la importancia del tema. De igual forma, la existencia prioritaria de monocultivos en la agricultura moderna obliga a contemplar aspectos como fertilizantes, quclatos y enfermedades y plagas ms habituales en los cultivos. Por otra parte, el impacto ambiental negativo que se est produciendo por el uso abusivo de productos qu micos en la agricultura obliga a presentar nuevas tcni cas de produccin ms respetuosas con el medio am biente, como son la fertirrigacin, muy adecuada para la produccin de hortalizas y de plantas ornamentales. Asimismo, estudiamos las bases cientficas para una agricultura sostenible, donde destacamos la fijacin biolgica del nitrgeno y las micorrizas. Por ltimo, estudiamos tambin la produccin en condiciones de estrs (salinidad y metales pesados), es trechamente relacionada con el uso agrcola e indus trial, as como la incidencia que la dotacin gnica tiene sobre todos estos agentes.

3.

4.

5.

6.

7. 8.

9.

10.

CAPITULO

LA LUZ Y EL APARATO FOTOSINTETICO


Javier De Las Rivas
1 Luz y fotosntesis. 2. Energa luminosa y pigmentos. 3. Estructuracin del aparato fotosinttico vegetal. 4. Elementos del aparato fotosinttico en los tilacoides. 5. Gentica y origen del aparato fotosinttico vegetal.

1. 1.1.

LUZ Y FOTOSNTESIS La luz solar es la fuente principal de energa para la biosfera

La luz es la fuente primaria de energa para la vida so bre la Tierra. La biosfera en la que vivimos es un siste ma cerrado y en equilibrio dinmico constante. Ser sisreina cerrado significa termodinmicamente que no intercambia materia con el exterior, pero s recibe ener ga. Esta energa extraterrestre es esencial para la di nmica tanto geolgica como biolgica de este planeta. que alberga algo tan genuino como es la vida. El Sol es el astro del que recibimos prcticamente la totalidad de esa energa extraterrestre. La radiacin solar que lle ga a la Tierra abarca una amplia franja del espectro radialivo electromagntico y. dentro de ella, una parte significativa (aproximadamente un 40%) es la radia cin luminosa, normalmente llamada luz. Se puede comprobar la fuerza de la luz solar compa rando su intensidad con la intensidad de una luz artifi cial. Por ejemplo, un da de sol proporciona al aire libre unos 2000 /<mol de fotones de luz por metro cuadrado por segundo (2000 /(mol m ~ 2 s ~', en potencia unos 1000 W m - 2 ) . Por contraste, una lmpara con una bombilla de 100 vatios situada a un metro de una mesa de un metro cuadrado nos proporciona unos 20 /(moles de fotones por segundo (20 fimol m - 2 s ~ \ 10 W m - 2 de luz). La distancia hasta el Sol son muchos miles de millones de metros, pero su luz es 100 veces ms intensa que la de la lmpara. La Figura 9-1 presenta desglosados los valores de in tensidad y la proporcin de los distintos componentes de la radiacin solar: radiacin gamma (y), ultravioleta (UV), luminosa (VIS) e infrarroja (IR. calor). El total de energa radiante solar que alcanza nuestro

planeta es enorme. Esta energa es considerada una constante (llamada constante solar) y se suele expresar como energa recibida por unidad de tiempo y por uni dad de rea perpendicular a la radiacin. Se puede esti mar que la energa total que llega a la superficie de la Tierra en un da (8 horas de radiacin en toda su superfi cie) es equivalente a la energa contenida en 300 000 mi llones de toneladas de carbn, es decir, unos 100 000 000 millones en un ao. El consumo energtico mundial anual equivale a unos 10 000 millones de toneladas de carbn, es decir, es inferior en cuatro rdenes de magni tud ( x 104) a la energa que nos llega del Sol.

1.2.

La luz es un conjunto de ondas electromagnticas que vemos y que comprende longitudes de onda de 400 a 700 n m

El espectro electromagntico est constituido por ondas electromagnticas de distinta frecuencia, v (o longitud de onda. X = 1/v), abarcando desde las ondas de mayor longitud y menor energa, como las ondas de radio y televisin, hasta las ondas de menor longitud y mayor energa, como los rayos gamma (vase Fig. 9-2). La radiacin luminosa ocupa una pequea franja del es pectro, que va desde los 400 a los 700 nm, y se sita entre las radiaciones ultravioletas (UV) y las infrarro jas (IR), y constituye la llamada radiacin 'otosintticamente activa (PAR). La radiacin luminosa tambin se llama radiacin vi sible (VIS) porque el ojo humano es un rgano sensible foto-detector que nos permite ver esa radiacin. La luz blanca est constituida por la conjuncin de todas las radiaciones luminosas de distinto color: luz violeta. azul, verde, amarilla, naranja y roja (vase Fig. 9-2). La

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Fundamentos

de fisiologa

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auttrofos, tambin llamados fotoergnicos o fotosintticos, son capaces de absorber y utilizar la energa lumi nosa. Cualquier fuente de luz visible (por ejemplo, una lmpara incandescente o fluorescente) sirve a los orga nismos fotosintticos para hacer fotosntesis. Por ello. no hay nada especfico o misterioso en que el Sol los haga crecer. Simplemente usan su luz; si bien, la luz solar tiene una intensidad y un espectro difciles de al canzar o imitar con iluminacin artificial. Entre los organismos fotosintticos. los vegetales son el grupo principal y ms abundante. Por ello, la fotosn tesis es un proceso distintivo del reino vegetal, que de termina en buena parte los rasgos caractersticos de la estructura y la fisiologa de las plantas. El tipo de foto sntesis que realizan los vegetales se caracteriza por la formacin de oxgeno (0 2 ) como subproducto despren dido a la atmsfera. Este tipo de fotosntesis se denomi na fotosntesis oxignica y no est restringido a las plantas superiores, pues ocurre tambin en algas y en organismos procariotas como las cianobacterias. Existe tambin la modalidad de fotosntesis anoxignica, que realizan ciertas bacterias que viven en condiciones anaerobias. La similitud de los procesos fotosintticos funda mentales es bastante grande entre ambas modalidades de fotosntesis. Por el carcter de este libro, en la expo sicin de la fotosntesis nos referiremos exclusivamente a la oxignica. Al observar la organizacin global de los seres vivos en la biosfera, se comprueba que el origen y el desarro llo de los sistemas biolgicos se sustentan en la existen cia de los mencionados organismos auttrofos fotosin tticos, los nicos que asimilan la energa radiante solar. Por esta capacidad, los vegetales y sus antepasa dos en la evolucin son los que han fundamentado y permitido el desarrollo de otras formas de vida no autotrofas. Los ms antiguos restos de vida encontrados en la Tierra corresponden precisamente a antepasados de cia nobacterias, que son organismos procariotas fotosintti cos. Estudios zoolgicos y ecolgicos muestran que prcticamente toda cadena trfica se sustenta en siste mas vegetales como uno de sus pilares. Los organismos fotosintticos transforman en biomasa la energa solar que absorben y asimilan. Anualmen te, en la Tierra se almacena, por fotosntesis, el equiva lente energtico a 80 000 millones de toneladas de carbn, lo cual corresponde a la asimilacin de unas 10 toneladas de carbono de azcares y otras fuentes de materia orgnica. De la biomasa vegetal, aproxima damente la mitad es sintetizada por el ecosistema te rrestre (cultivos agrcolas, bosques, sabanas y matorra les), mientras que la otra mitad es producida en las capas superiores de lagos y ocanos por los ecosiste mas acuticos (fitoplancton y macrfitas). La energa acumulada en esta biomasa es luego distribuida, ms o menos directamente, al resto de los organismos vivos.

Figura 9-1. Valores de intensidad (en W t r r 2 ) y propor cin relativa (en %) de los principales componentes de la radiacin electromagntica solar que llega a la Tierra: ra diacin g a m m a , ultravioleta (UV), luminosa (luz) e infrarro ja (calor).

luz blanca se puede descomponer en todo el arco cro mtico de luces de color por difraccin a travs de un prisma cristalino. Un compuesto o sustancia con color absorbe la luz del color complementario a la luz del color que muestra, es decir, ese compuesto es del color de la luz no absorbida, que es la que vemos reflejada o transmitida.
1.3. Las plantas son organismos auttrofos fotosint ticos

Mediante un nico y complejo proceso fisiolgico de nominado fotosntesis, determinados organismos vivos

La luz y el aparato fotosinttico A, Longitud de onda (cm)


10-'

133

10

10 !

10 6

Rayos Rayos gamma Rayos X UV

10Rayos sol a la tierra IR

10 2

10

Ondas radio

700 nm j r a 9-2. Espectro de ondas electromagnticas indicando la escala de longitud de onda. La radiacin luminosa ocupa una ;ea franja del espectro, que va desde los 400 a los 700 n m , y se sita entre las radiaciones ultravioleta (UV) e infrarroja (IR).

1.4.

La fotosntesis es un proceso biolgico de foto-absorcin y foto-asimilacin donde se distinguen dos fases

fotosntesis es un proceso biolgico complejo en el E pueden distinguirse dos fases bien diferenciadas. jna primera de absorcin y conversin de energa y otra . gunda de toma y asimilacin de elementos constituti8 de la materia orgnica (C, H. O, N, S, etc.). La ener ga luminosa es absorbida por biomolculas fotosen sibles y transformada en una forma de energa bioqu mica estable. Los elementos constitutivos son tomados Je fuentes minerales inorgnicas (agua. H 2 0; dixido de carbono, CO,; nitratos, NO^; sulfatos, SO^, etc.) e incorporados en biomolculas orgnicas metabolizables (vase Captulo 6). Ambas fases, la toma de ener ga y la toma de elementos, estn perfectamente coordi nadas e interrelacionadas. Clsicamente, estas fases se llamaron fase luminosa y fase oscura: pero esta nomen clatura puede inducir a error, ya que actualmente sabe mos que la luz es un factor esencial en toda la fotosnte sis como elemento de regulacin y control de ambas fases. As se puede decir que existe una foto-absorcin de energa y una foto-asimilacin de los elementos esenciales. La primera fase es un proceso de conversin de ener ga luminosa en energa electroqumica. Se inicia con la absorcin de la luz por ciertos complejos pigmento-pro tena denominados antenas, cosechadoras de luz

(LHC, Lighi Harvesting Complexes), y la posterior ca nalizacin de la energa de los fotones hacia los centros de reaccin de los folosistemas, donde la energa se transforma en una corriente de electrones entre molcu las xido-reductoras. Las reacciones de xido-reduc cin producen, en ltimo trmino, dos biomolculas es tables (NADPH y ATP) que se van acumulando. Estas biomolculas son tiles como fuente de energa asimi ladora, ya que proporcionan poder de reduccin (el NADPH) y poder de enlace (el ATP) necesarios para la siguiente fase. En la segunda fase de la fotosntesis, se sucede toda una serie de reacciones de asimilacin de elementos ne cesarios para la construccin biomolecular: C, H, O, N, S, etc. El elemento esencial y mayoritario en la materia orgnica es el carbono. El carbono, en la fotosntesis, es tomado del dixido de carbono (C0 2 ) del aire. El pro ceso de fijacin y asimilacin fotosinttica del carbono se estudia en los Captulos 11 y 12.

1.5.

Las reacciones fotosintticas pueden expresarse en una ecuacin global que incluye los componentes esenciales del proceso

Le ecuacin global de la fotosntesis es: n H 2 0 + n C0 2 ( + luz)- n 0 2 + (CH 2 0) n