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CITOLOGIA Y BIOQUIMICA
UAP - 2013
Diferencia
Trasudados Exudados
Producido por incremento de la presin hidrosttica en los capilares pleurales o disminucin de la presin onctica del plasma
CAUSAS
Trasudados Entre
Exudados
Pancreatitis AR LES Infecciones (TBC, bacteriana, viral, fngica) Infarto (miocardio/pulmonar; embolia) Neoplasia
Cirrosis heptica
Sndrome nefrtico
Examen Fsica (Ph, color, Coagulacin, aspecto del sobrenadante) Exmen Citolgico Exmen Qumico Papanicolaou Exmen Bacteriolgico (directo, Bk, cultivo para grmenes comunes, cultivos para Bk y hongos) Otros exmenes (tinta china, ADA, marcadores tumorales)
LQUIDO CEFALORRAQUDEO
El LCR, es el lquido seroso contenido en los ventrculos cerebrales, espacio subaracnoideo y conducto medular. Se forma principalmente en los plexos coroideos y espacio subaracnoideo. Su volumen en adulto es de unos 150 ml y en recin nacido de 10 a 60 ml. Se renueva cada 2-4 horas y la velocidad a la que se forma es de unos 21 ml /h.
LQUIDO LCR
Funcin de sostn
Funcin de disminuir el peso total cerebral Funcin de detoxificacion cerebral Funcin de transporte de segundos mensajeros y Homeostasis del sistema nervioso
ANALISIS QUIMICO
Glucosa
Los niveles de glucosa en ayunas en LCR son habitualmente de 50 a 80 mg/dl, el 60% del valor del plasma. Los resultados deben compararse con los niveles del plasma sobre todo despues de 4 horas de ayuno. La relacion normal de glucosa en LCR/ plasma varia de 0,3 a 0.9
Protenas totales
Cerca del 80 % de las protenas del LCR derivan del plasma. Un aumento de estas en el LCR sirven como indicador til no especifico de enfermedad.
1.
Mtodos turbidimtrico,
2. Mtodos Colorimtrico
Como el mtodo de Lowry, mtodo de fijacin a colorantes con azul de Coomassie (CBB) o de Ponceau S, y el mtodo modificado de Biuret.El mtodo CBB es Moder. popular debido a que es rpido, altamente sensible y puede ser utilizado en muestras de pequeo tamao.
Basados en TCA o SSA y sulfato de sodio para la precipitacin de protenas son simples rpidos y no requieren equipos especiales. en presencia de MTX el mtodo con TCA presenta valores elevados
CONCENTRACIONES
Concentraciones de Proteinas
Proteinas prealbumina
En plasma
Conc LCR mg/L 17.3
Y LCR
Relac Plas-ma/LCR 14
albumina
transferrina ceruloplasmina Ig G Ig A 2 macroglobulina fibrinogeno Ig M Lipoproteina
155.0
14.4 1.0 12.3 1.3 2.0 0.6 0.6 0.6
236
142 366 802 1.346 1.111 1.940 1.167 6.213
VALORES REFERENCIALES
Refer LCR Unidades Convenc 15-45 mg/dl 2-7% 56-76% 2-7% 4-12% 8-18% 3-12%
PARAMETROS
PARMETROS ASPECTO NORMAL Agua de roca VIRAL Claro u opalescente + Normal 40 Normal centenas mononucleares BACTERIANA Turbio TBC Claro u opalescente ++ 40 centenas mononucleares
1. TURBIDEZ Presencia de grmenes: > 10 5 UFC Pleocitosis: ms de 200 leucocitos / L Existencia de hemates: ms de 400 / L Nivel elevado de protenas
2. COGULOS POR FIBRINGENO Puncin traumtica o meningitis purulenta. No aparece en Hemorragia Subaracnoidea
3. VISCOSIDAD AUMENTADA: Meningitis criptococcica o metstasis menngea 4. EXISTENCIA DE GLBULOS DE GRASA DE DIVERSOS TAMAOS EN EL LCR: embolismo graso en el cerebro
RECUENTO DIFERENCIAL
Tipo clula Previa citocentrifugacion y secadas al aire muestras teidas con Wright pueden obtenerse el sedimento y ser visualizadas a aumento x 100 para su contaje. Linfocitos Monocitos Neutrfilos Hastiositos Clulas ependimale Eosinofilos Adultos (%) 62 +-34 36 +-20 2+-5 Raros raras raros Neonatos (%) 20+-18 72+-22 3+-5 5+-4 raras raros
CAUSAS DE INCREMENTO
Neutrfilos en LCR
meningitis bacteriana
LQUIDO PLEURAL
El lquido pleural se encuentra en el espacio que rodea los pulmones. En una variedad de enfermedades, una cantidad anormal de lquido pleural se acumula en estos rganos. Se necesita una muestra de lquido pleural para este examen. Para obtener informacin sobre cmo obtener la muestra, ver toracocentesistoracocentesis.
La
muestra de lquido se coloca en un portaobjetos de un microscopio y se mezcla con un colorante violeta, llamado tincin de Gram. Un tcnico de laboratorio especializado utiliza un microscopio para buscar bacterias en el portaobjetos.
Normalmente , 1 a 15 ml Producido por la pleural parietal Reabsorbido por la pleural visceral Proceso continuo por filtracin del endotelio capilar
Proceso continuo por filtracin del endotelio capilar Velocidad depende de:
ANATOMA DE LA PLEURA
La pleura es una fina membrana que recubre el pulmn con sus cisuras, el mediastino, el diafragma y la pared costal, de forma separada en cada hemitrax.
Clsicamente se establece la distincin entre pleura parietal y pleura visceral, pero en realidad se trata de una membrana continua, y la transicin entre ambas pleuras se encuentra en el hilio pulmonar. Histologa: constituida por una capa mesotelial monocelular, sustentada sobre una membrana basal y una o ms capas fibroelsticas, con sus correspondientes vasos sanguneos y linfticos.
La clula mesotelial, de origen mesodrmico, no se limita a cumplir la funcin de revestimiento, sino que desarrolla una amplia actividad metablica, en estrecha relacin con el pulmn vecino, pudiendo producir diferentes protenas, fundamentalmente colgeno y elastina.
EXUDADO VS TRASUDADO
Clsicamente los derrames pleurales se clasifican en trasudados o como exudados.
Los trasudados son consecuencia de un aumento de la presin microvascular o de la disminucin de la presin onctica de la sangre o de la combinacin de ambos: las protenas son inferiores a la mitad de los valores hallados en suero, clsicamente menos de 3 g/dl. La glucosa no est disminuida La LDH no est aumentada Recuento de leucocitos por debajo de 1000/mm3 Colesterol inferior a una cuarta parte del valor srico.
Los exudados son consecuencia de un aumento de la permeabilidad de la superficie pleural en general por inflamacin de diversa causa.
LDH LPL
<0.6
<0.3 >12 g/l
>0.6
>0.3 <12 g/l
Causas
Si el derrame pleural es un trasudado no hay que investigar ms, pero si es un exudado, se debe investigar su etiologa.
TRASUDADO: Insuficiencia cardaca Hipoproteinemias ( desnutricin, nefrosis ) Mixedema. EXUDADO: Infecciones ( neumonas de diversa etiologa, abscesos supra e infra diafragmticos, tuberculosis, infecciones micticas, complicaciones infecciosas del SIDA) Tumorales ( tumores parenquimatosos pulmonares, mesotelioma , tumores metastticos, linfomas, tumores ovricos) Enfermedades sistmicas ( lupus sistmico, ,artritis reumatoide, dermatomiositis, polimiositis, esclerodermia, vasculitis ,derrames pleurales secundarios a lesiones cardacas ) Digestivas ( pancreatitis aguda y los pseudoquistes pancreticos, perforaciones del tubo digestivo esofgicas o de estmago, peritonitis, manipulaciones quirrgicas )
CRITERIOS DE LIGHTS
1
Protenas Totales
1.
LDH
Exudados 99%
98 % 99 %
98 %
TOMA DE MUESTRA
Citolgico: EDTA Qumico: Tubo simple o tubo con anticoagulante para enzimas heparina Bacteriolgico: Tubo o frasco estril con heparina
RECUENTO DIFERENCIAL
Tomar Muestra para recuento Azul de metileno nuevo 0.5 % en solucin fisiolgico
CENTRIFUGADO
Centrifugar a 600 rpm por 10 minutos. Decantar el sobrenadante. Resuspender el precipitado en vortex Hacer cuatro frotices en metanol o etanol
Turbidez:
Si el lquido es hemorrgico se debe medir su hematocrito. Si ste es superior al 50% del hematocrito de sangre perifrica es diagnstico de hemotorax. Un lquido hemorrgico sugiere la presencia de una neoplasia, un traumatismo o una embolizacin pulmonar.
La mayora de trasudados tienen una concentracin inferior a 106 leucocitos / ml mientras que en la mayora de los exudados es superior a 106 leucocitos / ml .En derrames paraneumnicos es frecuente encontrar concentraciones superiores a 109 leucocitos / ml .
Los neutrfilos tienen como factor quimiotctico a la interleukina 8 (IL8) que se correlaciona con el nmero de neutrfilos por lo que la IL8 est elevada en los empiemas.
Los neutrfilos predominan en neumonas, pancreatitis, embolismo pulmonar, absceso subfrnico, tuberculosis en estadios precoces , LES, DP asbestsico, DP maligno en fase inicial
Puede ser til su determinacin ante la sospecha de leucemia linftica crnica o linfoma. Mediante anticuerpos monoclonales se puede hacer la separacin en OKT4 y OKT8 sin claro valor diagnstico.
En lquidos con menos de 2 x 106 leucocitos / ml es til concentrar las clulas antes de la tincin por medio de centrifugacin a 28-30 g, decantacin del sobrenadante y posterior resuspensin del botn celular, o por citocentrifugacin.
PROTEINAS TOTALES
Los enlaces peptdico de la protenas reaccionan en un medio alcalino con el Ion cuprico del reactivo de Biuret, estabilizado tartrato, para formar un complejo de color violeta cuya mxima absorcin se da a 540 nm.
NaOH Complejos cupro-proteicos 540 nm.
Cobre + protenas LP
LDH
Lactato + NAD
Abs: 340 nm
Ph neutro
ANALISIS QUIMICO LP
Glucosa.
se han observado disminucin de los niveles de glucosa peritoneal en un 30-60 % en peritonitis TBC y en un 50% en carcinomatosis abdominal.
Amilasa
su actividad es similar al de la sangre en peritoneo, si su valor se eleva por encima de 3 veces el valor del suero es buena evidencia de ascitis relacionada con el pncreas, como en la pancreatitis aguda, seudoquiste pancretico o en traumatismo.
CONCEPTO DE ASCITIS Acumulacin de lquido libre, producido por ultrafiltracin del plasma, en el interior de la cavidad peritoneal. La causa ms frecuente es la cirrosis heptica
Aumenta la permeabilidad capilar Aumenta la presin hidrosttica Disminuye la presin coloidosmtica Se obstruye el drenaje linftico
EXAMEN BIOQUIMICO
Bilirrubina
En el liquido ascitico un valor mayor de 6.0 mg/dl y una relacin de bilirrubina en el LA/suero > 1.0 sugiere un coleperitoneo por ruptura de vescula biliar
PROTEINAS TOTALES
Los enlaces peptdico de la protenas reaccionan en un medio alcalino con el Ion cuprico del reactivo de Biuret, estabilizado tartrato, para formar un complejo de color violeta cuya mxima absorcin se da a 540 nm.
NaOH Complejos cupro-proteicos 540 nm.
Cobre + protenas LP
Piruvato + NADH + H
LDH
Lactato + NAD
Abs: 340 nm
Ph neutro
ANALISIS QUIMICO LP
Glucosa.
se han observado disminucin de los niveles de glucosa peritoneal en un 30-60 % en peritonitis TBC y en un 50% en carcinomatosis abdominal.
Amilasa
su actividad es similar al de la sangre en peritoneo, si su valor se eleva por encima de 3 veces el valor del suero es buena evidencia de ascitis relacionada con el pncreas, como en la pancreatitis aguda, seudoquiste pancretico o en traumatismo.
Lactato
Una relacin de LD en LA/suero >0.6 tiene una sensibilidad del 80% en derrames malignos. para el diagnostico precoz de PBE con precisin diagnostica del 74% un valor de corte de la relacin LA/suero de 0.4.
LQUIDO SINOVIAL
El lquido sinovial o sinovia es un fluido viscoso y claro que se encuentra en las articulaciones. Tiene la consistencia de la clara de huevo. Su composicin es la de un ultrafiltrado del plasma, con la misma composicin inica. El lquido contiene pocas protenas y clulas pero es rico en cido hialurnico sintetizado por los sinoviocitos de tipo B. El liquido sinovial reduce la friccin entre los cartlagos y otros tejidos en las articulaciones para lubricarlas y acolcharlas durante el movimiento.
LQUIDO SINOVIAL
Condiciones muestra Fraccin:
Liquido sinovial en frasco estril tapa rosca
Condiciones paciente
Muestra tomada por el mdico especialista bajo sus condiciones especficas. Enviar inmediatamente a temperatura ambiente al laboratorio indicando la hora de la toma
LQUIDO SINOVIAL
Tcnica Parmetros
Microscopa Fsico
Espectrofotometra.
Color Aspecto Cogulo
de fibirna
Citolgico
Recuento
Qumico
Test
de mucina
Valores de referencia
Tcnica Parmetros
Microscopa Fsico Espectrofotometra.
Color Aspecto Cogulo de fibirna Recuento de leucocitos Recuento de eritrocitos y morfologa Glucosa Protenas Test de mucina
Citolgico
Qumico
LIQUIDO SINOVIAL
ES UN DIALIZADO DEL PLASMA SANGUNEO EN EL CUAL LOS SINOVIOCITOS SEGREGAN HIALURONATO, UN GLUCOSAMINGLICANO DE ALTO PESO MOLECULAR RESPONSABLE DE LA VISCOSIDAD DE LA SINOVIA.
LIQUIDO SINOVIAL
TCNICA DE LA PUNCIN
CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS
GLUCOSA
VN: INFERIOR A 2,5 G/DL. VN: 3,5 MG/G. VN: ENTRE 20 Y 40 MG/DL. VN:7,4.
ANLISIS AL FRESCO
PERMITE
LQUIDO PERICRDICO
El Pericardio es un saco que envuelve el corazn, una capa adherida al epicardio (pericardio visceral) y otra fibrosa que lo separa de los rganos del mediastino anterior (pericardio parietal), ambas separadas por un espacio virtual, que contiene una pequea cantidad de lquido seroso.
En el espacio pericardico existe normalmente de 10-50 ml de liquido producido por un proceso trasudativo semejante al pleural. El lquido pericrdico es un ultrafiltrado plasma, proveniente de los vasos de las serosas. Su formacin est influida por la presin osmtica (retiene lquido gracias a las protenas), por la presin hidrosttica (saca lquido de los capilares) y la permeabilidad capilar.
EXUDADO VS TRASUDADO
Exudado
Trasudado Lquido no inflamatorio que se origina por alteracin de los factores sistmicos que afectan a la regulacin de la reabsorcin o formacin de los lquidos serosos ( presin hidrosttica u osmtica )
Lquido inflamatorio cuya formacin produce por un aumento en la permeabilidad capilar, por lesin de estructuras de la superficie de la cavidad.
El 45% de los taponamientos cardiacos asociados al VIH son idiopaticos mientras que las infecciones tuberculosas y bacterianas se corresponden con el 20% de los casos
QUIMICO
Protenas Un valor mayor de3.0 g/dl con una sensibilidad del 97% pero una especificidad solo 22%. Glucosa valores menores de 60 mg/dl tiene una precision del 36% para dx de exudado PH Si es < 7.10 se da en enf. Reumaticas o purulentas. Si PH es de 7.2-7.4 se da en uremia, neoplasia o TBC. LD > 300 U/dl O relacion LD LP/suero > 0.6 con la elevacion de nivel de proteinas totales del pericardio > 3.0 g/DL O relacion de proteinas totales lP/suero > 0.5 diferenciarian el exudado del trasudado. ADA La actividad de adenosina deaminasa en la pericarditis tbc tiene sensibilidad del 93% y espcif 97% con un valor de corte de 40 U/l.
LIQUIDO AMNIOTICO
SIRVE EN EL CRECIMIENTO Y DESARROLLO DEL FETO, LE PROTEGE, LE PERMITE MOVERSE, PARTICIPA EN LA HOMEOSTASIS HIDROELECTROLTICA
VOLUMEN
SEMANA 12 SEMANA 22 34 SEMANA 40 SEMANA 50 ML 500 ML 1000 ML 600 ML
COMPOSICION
PERMITE SOSPECHAR MALFORMACIONES FETALES. INVESTIGA LA MADUREZ PULMONAR MEDIANTE UNA AMNIOCENTESIS TARDA.
BILIRRUBINA
DETERMIA
CREATININA
DETERMINA
PICRATO ALCALINO