IDENTIFICACION DE LOS CROMOSOMAS POLITENICO EN LAS GLANDULAS SALIVALES DE LA FASE LARVARIA DE DROSOPHILA MELANOGASTER

Del Castillo Falcón Victor Manuel, Jiménez Pedraza Montserrat, Romero Rosales Ma. Guadalupe, Romo Bonilla Jorge Armando, Valdez Hernández Marysol. Profesor: Héctor Martin Abundis Manzano.
Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autónoma de México. Apartado Postal 21630. Coyoacán; México DF, 04000.

INTRODUCCION Las células de las glándulas salivares de los insectos del orden de los Dípteros presentan núcleos que se hallan en una interfase permanente. Durante el crecimiento y desarrollo de las larvas de estos insectos, la división celular se detiene en algunos tejidos pero las células continúan su crecimiento por incremento de volumen. Este proceso ocurre, por ejemplo, en los tubos de Malpighi, en las células nutricias de los ovarios, en el epitelio intestinal y en las células de las glándulas salivares. En las células de tejidos mencionados, los cromosomas sufren rondas repetidas de duplicaciones pero sin separarse, proceso conocido como endomitosis. Esto lleva a la producción de cromosomas constituidos por varios cientos o aún miles de hebras. Durante este proceso de politenización o politenia, los cromosomas incrementan tanto su longitud como su diámetro. De hecho, la
1

longitud de los cromosomas de Drosophila en una metafase es del orden de 7,5μ mientras que el largo total de los cromosomas en un núcleo de las glándulas salivares es de alrededor de 2.000μ; tienen 1.000 moléculas de DNA. Además del cambio en el tamaño, los cromosomas politénicos presentan otras dos características. En primer lugar, los cromosomas homólogos están asociados entre sí en toda su extensión. Esta condición, denominada apareamiento somático es propia de la mitosis de la mayoría de los Dípteros. La otra característica peculiar es que los cromosomas muestran un patrón particular de bandeo transversal que consiste en zonas más oscuras, llamadas bandas, que alternan con zonas claras, llamadas interbandas. Cuando se observan al microscopio óptico se identifican como bandas oscuras y claras transversales alternantes.4

• Conocer e identificar la existencia de cromosomas politénicos en células glandulares salivales de Drosophila Melanogaster así como conocer su importancia en el campo de la genética. . El cromocentro se halla en el ángulo superior derecho. Debido a que el patrón de bandeo que presentan los cromosomas politénicos es un reflejo constante de las secuencias de ADN. melanogaster el patrón de bandeo no se distingue en aquellas regiones heterocromáticas presentes en región centromérica de todos sus cromosomas (n=4). En algunos casos se puede visualizar un sexto brazo muy pequeño que representa el cromosoma IV. Éste bandeo es reproducible de núcleo a núcleo. formando un patrón constante de tal manera que los cromosomas pueden ser identificados y mapeados en toda su longitud.Aunque la mayoría de las bandas son continuas a través del cromosoma. Cromosoma politénicos de Drosophila melanogaster. Ya que dos miembros del complemento haploide de esta especie son metacéntricos (los cromosomas II y III) y dos son acrocéntricos (cromosoma sexual X o Y y el cromosoma IV). La imagen ampliada (B) muestra las bandas y las interbandas con mayor detalle. o cambios en el genoma debido a reordenamientos cromosómicos. En D. Las regiones heterocromáticas están asociadas formando un cromocentro. utilizando material biológico. Fueron observados por 1ra vez por Balbiani en 1881 hasta que en 1930 se descubrió su importancia citogenética. La flecha señala el extremo del cromosoma X. por ejemplo deleciones. los dos brazos del cromosoma II y los dos brazos del cromosoma III (3L y 3R). otras aparecen como una serie de puntos. La imagen fue obtenida mediante contraste de fase. las bandas sirven como marcadores para localizar varias características genéticas (lugar de los genes. duplicaciones de bandas y translocaciones) y se han utilizado en diversos estudios genéticos y evolutivos. los cromosomas politénicos en esta especie aparecen como cinco brazos 2 desiguales que irradian del cromocentro: un brazo correspondiente al cromosoma X. Hay aproximadamente 5000 bandas y 5000 interbandas en total en el genoma de Drosophila melanogaster. OBJETIVOS • Conocer y practicar las técnicas más usuales en la citogenética.

Fig.Microscopio estereoscopio . una de las agujas en las mandíbulas y la punta de la otra aguja en la región media del cuerpo de la larva. . 3. Las glándulas salivales son órganos pares localizados cerca de extremo anterior de larva.Cubreobjetos .1 vaso de precipitado de 50 ml. se le añadió una mínima cantidad de agua. 8.Portaobjetos . . Se eligió a una que se encontraba activa. 1. 5. la cual se reconoció por ser proporcionalmente más grande que las de 1° y 2° estadios.Cultivos de una cepa silvestre de Drosophila melanogaster con larvas de tercer estadio. Equipo . Se saco con una aguja de disección una larva de tercer estadio de Drosophila . se transportaron con las agujas a un portaobjetos y se les agrego unas gotitas de Aceto – orceina. Se observaron las células de las glándulas con un núcleo claramente definido. para poder desgarras así a la larva. 6.Reactivo de Aceto – orceina . Una vez separadas las glándulas salivales. Las glándulas salivales generalmente tienen un cuerpo graso largo. 9. Se coloco la larva en una platina de vidrio.MATERIAL Y METODO Material biológico • Proporcionado por el maestro. . . 7. Las glándulas generalmente se quedan adheridas a la región mandibular. Separamos las glándulas salivales del resto de los órganos por la forma característica de sacos alargados que aparentan estar formados por una red. del gado. se quito la mayor cantidad de este tejido con ayuda de las agujas con el fin de que la preparación quedara mas limpia. La disección comenzó localizando primero las mandíbulas las cuales se distinguen claramente por su forma y color negro. Generalmente estas larvas se encuentran en las paredes del frasco de cultivo.Microscopio óptico.Pipeta Pasteur METODOS 1.1 platina de vidrio. 2. Se jalaron en sentido opuesto las 2 agujas al mismo tiempo. . esto para no dejar que se seque la larva y así poder realizar la disección. Las glándulas salivales están rodeadas por tejido adiposo opaco. unido a ellas. Colocamos la punta de 3 4.

11. Para poder apreciar los cromosomas politénicos. Se utilizo aceite de inmersión para tener una mayor nitidez de las estructuras 4 . Tinción de las glándulas salivales con reactivo de aceto orceina Células de las glándulas salivales con núcleo claramente definido Fig. 2. vistas al microscopio óptico (100x) se observan zonas cromáticas obscuras correspondientes a las bandas y zonas claras correspondientes a las interbandas de los cromosomas.10. Imagen donde se aprecian las células de las glándulas salivares con su núcleo claramente definido En esta imagen apreciamos los cromosomas politénicos obtenidas de las glándulas salivales de larvas de Drosophila. Observación de los cromosomas politénicos a través del microscopio óptico. se realizo un aplastado de las células colocando suavemente el dedo pulgar sobre el cubreobjetos y se presionó lo más fuertemente posible. Vista esquemática de la estructura de una larva de Drosophila melanogaster donde puede observarse la localización de las glándulas salivales. 1. Y se observaron los cromosomas en el microscopio óptico a 40 X y con ayuda del aceite de inmersión se pudieron apreciar a 100X. Fig. Fig. RESULTADOS En esta sección se dan a conocer los resultados obtenidos en esta práctica. 2.

Las bandas oscuras se debe al apretado enrollamiento de la fibra. teñir y esparcir cromosomas completos en un portaobjetos en una sola operación y proporciona una forma de comparar cromosomas individuales dentro de un conjunto de cromosomas. Esta técnica permite fijar. que por lo general se pudieron observar de . dando origen a una cadena politenica de alrededor de 1000 moléculas de doble hélice de DNA. Estos cromosomas constan más de un millón de capas de la misma cromatida y aparecen como bandas oscuras que se alternan con regiones interbandas mas claras. Belling). que se querían Fig 3. los cuales presentan un tamaño gigante. 5 Los cromosomas gigantes son estructuras similares a cables con muchas cadenas de DNA. El tamaño de este cromosoma se debe el tipo de crecimiento de los tejidos glandulares los cuales crecen por agrandecimiento en vez de por duplicación de células individuales. Una de las técnicas as utilizadas para la observación microscópica de los cromosomas gigantes es el frotis con acetoorceina (fue aplicado por primera vez por J. Las bandas oscuras se llaman cromómeros. las regiones claras entre bandas se deben a un enrollamiento mas laxo. Una característica de los cromosomas gigantes es su continuo estado de sinapsis somática. También se observaron regiones ensanchadas y difusas que se conocen como “puffs” cromosómicos.Aplastamiento de las células de la glándula salival de larva drosophila DISCUSION Painter uso por primera vez los cromosomas de las glándulas salivales de Drosophilas. es por eso que también se les denomina Cromosomas Gigantes ya que van desde 150 a 200 veces mas que el tamaño de un cromosoma común. los cromosomas se duplican al menos unas 9 veces.. CONCLUSION Se logro conocer y llevar a cabo la técnica citogenética mas empleada en el reconocimiento de cromosomas politénicos o cromosomas gigantes.principales observar. Conforme la larva se desarrolla.

Las células politénicas son incapaces de dividirse por mitosis y tienden a morir. este fenómeno se le llama apareamiento somático y se considera que los cromosomas se hallan en la interfase permanente c) Explique brevemente la forma en la que se generan los cromosomas Politénicos. b) ¿Cuál es su función? Cuando un cromosoma se convierte en politénico. Con este procedimiento que incluye la adición de aceto– orceina se pudieron observar e identificar cromosomas gigantes en células de glándulas salivales de Drosophila. Otra característica es que los pares 6 . recto y túmulos excretores de Malpighi) y en algunas especies de protozoos y de vegetales. homólogos se hallan asociados como en la profase meiótica. dando lugar a cromosomas gigantes. Este cromosoma queda unido por el cromocentro. que es la zona de fusión de las regiones heterocromatínicas situadas alrededor de los centrómeros de los pares cromosómicos d) ¿Qué es un Puff y un anillo de Balbiani. Los cromosomas politénicos tienen principales usos: • La localización de genes.una manera relativamente fácil y sencilla al microscopio. a) ¿En qué tipos de organismos se pueden observar los cromosomas politénicos? Son cromosomas que se replican varias veces sin que se produzca una separación realde las cromátidas con lo que el cromosoma se alarga y se hace más grueso. • La identificación de cambios estructurales en los cromosomas. Los puffs son manifestaciones visibles de actividad génica (de trascripción que da lugar a RNA). existe alguna diferencia? Cada fenómeno de desespiralización da lugar a lo que denominamos puffs debido a su apariencia. tubo digestivo. También hay regiones distendidas llamadas anillos de balbiani que corresponden a regiones de síntesis de ARN y se piensa que los genes activos están presentes en las bandas distendidas. e) En Genética ¿Qué utilidad tiene los cromosomas politénicos? En distintos tejidos de larvas de algunas moscas (glándulas salivales.000 fibras de ADN. La presencia de estos cromosomas se da como consecuencia de múltiples replicaciones de material cromosómico que no se separa. Un cromosoma politénico (gigante) en drosophila tiene alrededor de 1. el ADN se replica por endocitosis. las cromátidas hijas no se separan y quedan alineados lado con lado.

Conceptos de genética. BIBLIOGRAFIA W.cienciaybiologia. http://www.es/esr/pp/tch2. Madrid 1999.agro.cl/docenci a/dpan/genetica/clase6/6Sexta. Ed prentice hall 5ª ed. A medida que progresa el desarrollo de drosophila revela actividad génica diferencial donde se observa un característico patron de formación de puffs que se relaciona con la activación génica. pp.Los cromosomas politénicos son estructuras muy grandes que facilitan el aprendizaje de la organización genética y sus relaciones con la función genética.uniovi. Kulg et al.p df BIBLIOGRAFIA 7 . 43-45.uchile.com/ bgeneral/organizacion-materialgenetico.htm http://www. pdf http://www.