IDENTIFICACION DE LOS CROMOSOMAS POLITENICO EN LAS GLANDULAS SALIVALES DE LA FASE LARVARIA DE DROSOPHILA MELANOGASTER

Del Castillo Falcón Victor Manuel, Jiménez Pedraza Montserrat, Romero Rosales Ma. Guadalupe, Romo Bonilla Jorge Armando, Valdez Hernández Marysol. Profesor: Héctor Martin Abundis Manzano.
Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autónoma de México. Apartado Postal 21630. Coyoacán; México DF, 04000.

INTRODUCCION Las células de las glándulas salivares de los insectos del orden de los Dípteros presentan núcleos que se hallan en una interfase permanente. Durante el crecimiento y desarrollo de las larvas de estos insectos, la división celular se detiene en algunos tejidos pero las células continúan su crecimiento por incremento de volumen. Este proceso ocurre, por ejemplo, en los tubos de Malpighi, en las células nutricias de los ovarios, en el epitelio intestinal y en las células de las glándulas salivares. En las células de tejidos mencionados, los cromosomas sufren rondas repetidas de duplicaciones pero sin separarse, proceso conocido como endomitosis. Esto lleva a la producción de cromosomas constituidos por varios cientos o aún miles de hebras. Durante este proceso de politenización o politenia, los cromosomas incrementan tanto su longitud como su diámetro. De hecho, la
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longitud de los cromosomas de Drosophila en una metafase es del orden de 7,5μ mientras que el largo total de los cromosomas en un núcleo de las glándulas salivares es de alrededor de 2.000μ; tienen 1.000 moléculas de DNA. Además del cambio en el tamaño, los cromosomas politénicos presentan otras dos características. En primer lugar, los cromosomas homólogos están asociados entre sí en toda su extensión. Esta condición, denominada apareamiento somático es propia de la mitosis de la mayoría de los Dípteros. La otra característica peculiar es que los cromosomas muestran un patrón particular de bandeo transversal que consiste en zonas más oscuras, llamadas bandas, que alternan con zonas claras, llamadas interbandas. Cuando se observan al microscopio óptico se identifican como bandas oscuras y claras transversales alternantes.4

Fueron observados por 1ra vez por Balbiani en 1881 hasta que en 1930 se descubrió su importancia citogenética. melanogaster el patrón de bandeo no se distingue en aquellas regiones heterocromáticas presentes en región centromérica de todos sus cromosomas (n=4). otras aparecen como una serie de puntos. Cromosoma politénicos de Drosophila melanogaster. Ya que dos miembros del complemento haploide de esta especie son metacéntricos (los cromosomas II y III) y dos son acrocéntricos (cromosoma sexual X o Y y el cromosoma IV). Hay aproximadamente 5000 bandas y 5000 interbandas en total en el genoma de Drosophila melanogaster. La imagen fue obtenida mediante contraste de fase. o cambios en el genoma debido a reordenamientos cromosómicos. las bandas sirven como marcadores para localizar varias características genéticas (lugar de los genes. los cromosomas politénicos en esta especie aparecen como cinco brazos 2 desiguales que irradian del cromocentro: un brazo correspondiente al cromosoma X. La flecha señala el extremo del cromosoma X. duplicaciones de bandas y translocaciones) y se han utilizado en diversos estudios genéticos y evolutivos. Éste bandeo es reproducible de núcleo a núcleo. En algunos casos se puede visualizar un sexto brazo muy pequeño que representa el cromosoma IV. • Conocer e identificar la existencia de cromosomas politénicos en células glandulares salivales de Drosophila Melanogaster así como conocer su importancia en el campo de la genética. los dos brazos del cromosoma II y los dos brazos del cromosoma III (3L y 3R). .Aunque la mayoría de las bandas son continuas a través del cromosoma. por ejemplo deleciones. En D. Debido a que el patrón de bandeo que presentan los cromosomas politénicos es un reflejo constante de las secuencias de ADN. El cromocentro se halla en el ángulo superior derecho. OBJETIVOS • Conocer y practicar las técnicas más usuales en la citogenética. formando un patrón constante de tal manera que los cromosomas pueden ser identificados y mapeados en toda su longitud. La imagen ampliada (B) muestra las bandas y las interbandas con mayor detalle. utilizando material biológico. Las regiones heterocromáticas están asociadas formando un cromocentro.

Cultivos de una cepa silvestre de Drosophila melanogaster con larvas de tercer estadio.Cubreobjetos . del gado.1 vaso de precipitado de 50 ml. Se observaron las células de las glándulas con un núcleo claramente definido. 6. Separamos las glándulas salivales del resto de los órganos por la forma característica de sacos alargados que aparentan estar formados por una red. Las glándulas salivales generalmente tienen un cuerpo graso largo. 7. La disección comenzó localizando primero las mandíbulas las cuales se distinguen claramente por su forma y color negro. . Las glándulas salivales están rodeadas por tejido adiposo opaco. Generalmente estas larvas se encuentran en las paredes del frasco de cultivo. Equipo .1 platina de vidrio. 8. se quito la mayor cantidad de este tejido con ayuda de las agujas con el fin de que la preparación quedara mas limpia.Portaobjetos . Se eligió a una que se encontraba activa. 9.MATERIAL Y METODO Material biológico • Proporcionado por el maestro. Las glándulas salivales son órganos pares localizados cerca de extremo anterior de larva. Colocamos la punta de 3 4. Se saco con una aguja de disección una larva de tercer estadio de Drosophila . para poder desgarras así a la larva. .Microscopio estereoscopio . 2.Microscopio óptico. Se coloco la larva en una platina de vidrio.Pipeta Pasteur METODOS 1. se transportaron con las agujas a un portaobjetos y se les agrego unas gotitas de Aceto – orceina. Las glándulas generalmente se quedan adheridas a la región mandibular. unido a ellas. . Se jalaron en sentido opuesto las 2 agujas al mismo tiempo. . Una vez separadas las glándulas salivales. una de las agujas en las mandíbulas y la punta de la otra aguja en la región media del cuerpo de la larva. 1. Fig. 5. esto para no dejar que se seque la larva y así poder realizar la disección. la cual se reconoció por ser proporcionalmente más grande que las de 1° y 2° estadios. 3. se le añadió una mínima cantidad de agua. .Reactivo de Aceto – orceina .

Y se observaron los cromosomas en el microscopio óptico a 40 X y con ayuda del aceite de inmersión se pudieron apreciar a 100X. Fig.10. se realizo un aplastado de las células colocando suavemente el dedo pulgar sobre el cubreobjetos y se presionó lo más fuertemente posible. 2. 1. Para poder apreciar los cromosomas politénicos. Imagen donde se aprecian las células de las glándulas salivares con su núcleo claramente definido En esta imagen apreciamos los cromosomas politénicos obtenidas de las glándulas salivales de larvas de Drosophila. RESULTADOS En esta sección se dan a conocer los resultados obtenidos en esta práctica. vistas al microscopio óptico (100x) se observan zonas cromáticas obscuras correspondientes a las bandas y zonas claras correspondientes a las interbandas de los cromosomas. Observación de los cromosomas politénicos a través del microscopio óptico. Se utilizo aceite de inmersión para tener una mayor nitidez de las estructuras 4 . Fig. Vista esquemática de la estructura de una larva de Drosophila melanogaster donde puede observarse la localización de las glándulas salivales. 2. 11. Tinción de las glándulas salivales con reactivo de aceto orceina Células de las glándulas salivales con núcleo claramente definido Fig.

es por eso que también se les denomina Cromosomas Gigantes ya que van desde 150 a 200 veces mas que el tamaño de un cromosoma común. Las bandas oscuras se llaman cromómeros. que por lo general se pudieron observar de . También se observaron regiones ensanchadas y difusas que se conocen como “puffs” cromosómicos. 5 Los cromosomas gigantes son estructuras similares a cables con muchas cadenas de DNA. que se querían Fig 3.. Esta técnica permite fijar.principales observar. los cuales presentan un tamaño gigante. dando origen a una cadena politenica de alrededor de 1000 moléculas de doble hélice de DNA. Las bandas oscuras se debe al apretado enrollamiento de la fibra. CONCLUSION Se logro conocer y llevar a cabo la técnica citogenética mas empleada en el reconocimiento de cromosomas politénicos o cromosomas gigantes.Aplastamiento de las células de la glándula salival de larva drosophila DISCUSION Painter uso por primera vez los cromosomas de las glándulas salivales de Drosophilas. Estos cromosomas constan más de un millón de capas de la misma cromatida y aparecen como bandas oscuras que se alternan con regiones interbandas mas claras. teñir y esparcir cromosomas completos en un portaobjetos en una sola operación y proporciona una forma de comparar cromosomas individuales dentro de un conjunto de cromosomas. Belling). Una característica de los cromosomas gigantes es su continuo estado de sinapsis somática. El tamaño de este cromosoma se debe el tipo de crecimiento de los tejidos glandulares los cuales crecen por agrandecimiento en vez de por duplicación de células individuales. las regiones claras entre bandas se deben a un enrollamiento mas laxo. Una de las técnicas as utilizadas para la observación microscópica de los cromosomas gigantes es el frotis con acetoorceina (fue aplicado por primera vez por J. los cromosomas se duplican al menos unas 9 veces. Conforme la larva se desarrolla.

homólogos se hallan asociados como en la profase meiótica. Un cromosoma politénico (gigante) en drosophila tiene alrededor de 1. el ADN se replica por endocitosis.una manera relativamente fácil y sencilla al microscopio. e) En Genética ¿Qué utilidad tiene los cromosomas politénicos? En distintos tejidos de larvas de algunas moscas (glándulas salivales. dando lugar a cromosomas gigantes. Los cromosomas politénicos tienen principales usos: • La localización de genes. tubo digestivo. Con este procedimiento que incluye la adición de aceto– orceina se pudieron observar e identificar cromosomas gigantes en células de glándulas salivales de Drosophila. b) ¿Cuál es su función? Cuando un cromosoma se convierte en politénico. • La identificación de cambios estructurales en los cromosomas. este fenómeno se le llama apareamiento somático y se considera que los cromosomas se hallan en la interfase permanente c) Explique brevemente la forma en la que se generan los cromosomas Politénicos. a) ¿En qué tipos de organismos se pueden observar los cromosomas politénicos? Son cromosomas que se replican varias veces sin que se produzca una separación realde las cromátidas con lo que el cromosoma se alarga y se hace más grueso. Las células politénicas son incapaces de dividirse por mitosis y tienden a morir. Este cromosoma queda unido por el cromocentro. recto y túmulos excretores de Malpighi) y en algunas especies de protozoos y de vegetales. La presencia de estos cromosomas se da como consecuencia de múltiples replicaciones de material cromosómico que no se separa. Los puffs son manifestaciones visibles de actividad génica (de trascripción que da lugar a RNA).000 fibras de ADN. existe alguna diferencia? Cada fenómeno de desespiralización da lugar a lo que denominamos puffs debido a su apariencia. También hay regiones distendidas llamadas anillos de balbiani que corresponden a regiones de síntesis de ARN y se piensa que los genes activos están presentes en las bandas distendidas. las cromátidas hijas no se separan y quedan alineados lado con lado. Otra característica es que los pares 6 . que es la zona de fusión de las regiones heterocromatínicas situadas alrededor de los centrómeros de los pares cromosómicos d) ¿Qué es un Puff y un anillo de Balbiani.

A medida que progresa el desarrollo de drosophila revela actividad génica diferencial donde se observa un característico patron de formación de puffs que se relaciona con la activación génica.htm http://www. 43-45. pp.cienciaybiologia.Los cromosomas politénicos son estructuras muy grandes que facilitan el aprendizaje de la organización genética y sus relaciones con la función genética. pdf http://www.com/ bgeneral/organizacion-materialgenetico.p df BIBLIOGRAFIA 7 .uchile.uniovi.agro. Ed prentice hall 5ª ed.es/esr/pp/tch2. Kulg et al. Conceptos de genética. http://www. BIBLIOGRAFIA W.cl/docenci a/dpan/genetica/clase6/6Sexta. Madrid 1999.

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