Licenciatura / Ingeniería en: Biotecnología

Programa de la asignatura Microbiología y Taxonomía Microbiana

Clave 200920416 190920416 ESAD

Unidad 1 Presentación de la unidad

La importancia de estudiar Taxonomía Microbiana radica en conocer las investigaciones y logros científicos, mediante análisis taxonómicos, donde el alumno desarrollará habilidades para identificar los sistemas de clasificación de microorganismos y como es que llevan a cabo su proliferación de tal manera que se apliquen los conocimientos adquiridos para la elaboración de un ensayo

Propósitos El alumno analizará la forma de nombrar a los microorganismos y su importancia dentro del ámbito ambiental e industrial, donde incorporará los conceptos fundamentales de taxonomía microbiana con el fin de entender el desarrollo cuantitativo de las bacterias, lo cual posteriormente le permita desarrollar habilidades para la investigación, resolución de problemas y toma de decisiones.

Competencia específica

Analizar la taxonomía y crecimiento bacteriano mediante la comprensión de sus fundamentos y beneficios para proponer mejoras a los distintos procesos biotecnológicos.

1.1 Definición de taxonomía La Taxonomía es un área de la ciencia biológica que comprende tres disciplinas diferentes: clasificación, nomenclatura e identificación. La taxonomía se divide en microtaxonomía (su objetivo es identificar, describir y delimitar especies) y macrotaxonomía (su finalidad es construir clasificaciones de los taxones y se auxilia de la microtaxonomía) (Solomon et al., 2008). Para llevar a cabo la clasificación de las bacterias los taxónomos bacterianos se vieron forzados a buscar además de las características estructurales, diferentes tipos de propiedades como las bioquímicas, fisiológicas, ecológicas. Dicha clasificación se basa en

está relacionada con la Sistemática que se refiere a la clasificación o agrupamiento sistemático de los organismos en grupos o categorías llamados taxa (del griego ταξις. 2008). y νοµος. 2008). transliterado como taxis. está tomando auge una nueva alternativa biotecnológica que podría resolver pronto el problema. una descripción. que en una clasificación dada han sido agrupados. Sin embargo.wikipedia. taxis. "ordenamiento") es un grupo de organismos emparentados. Esto representa un problema adicional para el taxónomo bacteriano.jpg La Taxonomía (del griego ταξις. y un "tipo". nomos. "norma" o "regla") es la ciencia de la clasificación.atributos funcionales. La taxonomía se divide en tres partes: a) Clasificación: es el agrupamiento ordenado de unidades en grupos dentro de unidades mayores. a Linneo se le conoce como el Padre de la Taxonomía que es la ciencia encargada de la clasificación y denominación de la gran variedad de especies existentes (Solomon et al. FCarl Von Linneo (1707-1778) desde la web http://es.org/wiki/Archivo:Carl_von_Linn%C3%A9.. por lo tanto éste nunca podrá estar seguro de haber llevado a cabo los experimentos adecuados con fines taxonómicos: podría ocurrir que omitiera la realización de ciertos experimentos que indicaran la existencia de agrupamientos significativos dentro de una colección de cepas. de forma que el taxón de una especie es un espécimen o ejemplar concreto. el estudio de estas propiedades funcionales conlleva a la realización de experimentos. que proporcionan una posible base objetiva para la definición de especie bacteriana (Tórtora. la mayor parte de las bacterias sólo pueden identificarse por lo que hacen y no simplemente por su apariencia. . asignándole al grupo un nombre en latín. son las técnicas moleculares para la caracterización genotípica bacteriana. En el siglo XVII Carlos Linneo desarrollo un sistema de clasificación para nombrar a los microorganismos como una forma de facilitar la comunicación eficaz entre los microbiólogos. b) Nomenclatura: es la denominación de las unidades definidas y por la clasificación. "ordenamiento".

1. los cuales deben parecerse entre sí con un grado mayor de semejanza que los miembros de otro grupo. nombre vulgar “perro” y su nombre científico es Canis familiaris o C. para referirse a un único taxón (Solomon et al.. o latinizados.1. Nomenclatura Respecto a la Nomenclatura existen códigos como el zoológico. latrans. El epíteto específico siempre debe ir precedido del nombre del género abreviado o completo (Solomon et al. puesto que se escriben en latín es muy difícil su pronunciación. La forma de nombrar a los microorganismos es mediante la clasificación en grupos de una serie grande de microorganismos. 1. por lo que es preferible usar el nombre vulgar o común ya que suele variar según las localidades.. Los nombres científicos no son muy usuales. . el epíteto especifico los cuales se escriben letra cursiva. bulgaricus. la “bacteria que causa el cólera” Escherichia coli o E. y la segunda.2. la “bacteria causante de la fermentación del yogurt” Lactobacillus bulgaricus o L. los dos anteriores forman el nombre científico de cada especie. botánico y bacteriológico que se basan en determinados principios comunes mediante el sistema de clasificación de Linneo el cual se denomina “sistema binomial de nomenclatura” donde a cada especie se le asigna un nombre compuesto de dos partes: la primera designa el género. coli.. 1. 2008). las clases en filums ó filo (phylum. El objetivo del nombre científico es el de poseer un único nombre que deba ser utilizado en todo el mundo. regiones.c) Identificación: hace uso del criterio establecido por la clasificación y nomenclatura mencionados. estos a su vez se constituyen una familia. familiaris. Biología sistemática El sistema binomial de nomenclatura que agrupa a las especies dentro de un género común. 2008). los ordenes en clases. plural phyla que es un tipo de organización). las cuales a su vez se agrupan en ordenes. los filums forman reinos y los reinos dominios (Fig. los microorganismos se identifican comparando las características de las unidades desconocidas y las conocidas. 2 o Tabla 1) (Solomon et al.1. por ejemplo. 2008). en cualquier lengua. Los nombres científicos son en latín.

Género Familia Orden Clase Filum o Phylum Reino Dominio Niveles o categoría taxonómica Niveles taxonómicos. Apoya con imágenes el trabajo de información que realizaste 4. Descripción: 1. 2. En un documento de texto describe la clasificación taxonómica de dos microorganismos diferentes que tú deberás elegir. . Forma para basarse y editar imagen Actividad 1. Sé cuidadoso con la ortografía. Ten cuidado de elegir especies diferentes a las de tus compañeros. Grupo de órdenes relacionadas.Categoría taxonómico Especie o nivel Características Organismo que solo se puede reproducir con otro de su misma especie Grupo de especies relacionadas. Grupo de clases relacionadas. Grupo de phyla relacionados Grupo de reinos. Archivo evolutivo En esta actividad ejercitarás el dominio de nomenclatura según la clasificacióntaxonómica de varias clases de microorganismos. 3. Grupo de familias relacionadas. Grupo de géneros relacionados.

resultado del análisis cladístico de una especie. Por lo tanto un árbol filogenético (fig. así como aquélla generada por la comparación estructural y molecular de los organismos (Solomon et al. 3) muestra las relaciones evolutivas entre varias especies u otras entidades que se cree que tienen un ancestro en común.png . 2008). En biología se utilizan árboles parecidos a los genealógicos para representar cómo se encuentran emparentados los organismos vivos.org/wikipedia/commons/5/55/Phylogenetic_tree-es.. Árboles filogenéticos La clasificación moderna a menudo recibe el nombre de sistemática. porque se basa en relaciones evolutivas. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. En los árboles genealógicos se utiliza información proporcionada por los familiares y para los árboles filogenéticos se usa información proveniente de fósiles. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. se les conoce como árboles filogenéticos.1. Un cladograma es un diagrama representativo en la clasificación biológica taxonómica de los organismos.3.wikimedia. en el que se muestra la relación entre distintas especies según una característica derivada. es una forma de cladograma (Solomon et al 2008). Los cladogramas son importantes herramientas filogenéticas para el estudio de conceptos científicos.Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos. Árbol filogenético de la vida Editar de la web http://upload. 1. Muchos taxónomos utilizan la sistemática ya que tratan de reconstruir la historia evolutiva o filogenia (producción de los filums) de los organismos. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional.

ual. Árbol monofilético tomado de la web http://www.htm Polifilético: si contiene organismos de varios clados.es/GruposInv/myco-ual/galer13. se han reunido por conveniencia de los investigadores. que no proceden de un antepasado común cercan. . los cuales han sido incluidos en otros grupos..htm Parafilético: si faltan algunos de los descendientes. simplemente. 2008). de acuerdo a las características morfológicas de dichos organismos estos van desde las formas sencillas como las bacterias hasta las más complejas como las plantas y animales (Solomon et al.ual. 5. es decir.es/GruposInv/myco-ual/galer13. Debido al origen evolutivo de las especies estas pueden tener diferentes formas de árboles filogenéticos y estos pueden ser: Monofiléticos: es un grupo de organismos que tiene un antepasado común con todos y cada uno de sus descendientes.En la figura se explica a manera de árbol filogenético el origen evolutivo de la vida en el planeta. Árbol monofilético tomado de la web http://www.

Revisa y comenta las aportaciones de tus compañeros(as). Dirígete a la base de datos y a continuación: 1.ual. De este modo tiene lugar la "duplicación . incluye inmersamente la división de una bacteria en dos células hijas en un proceso llamado fisión binaria. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional. 2. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos. 1.es/GruposInv/myco-ual/galer13. 3. Agrega una nueva entrada y redacta tu listado de 4 especies de bacterias que causan enfermedades en México colocando entre paréntesis que enfermedad provocan.htm Para reforzar lo visto anteriormente sobre árboles filogenéticos realizar la actividad 2. las células hijas resultantes serán genéticamente idénticas a la célula original.Árbol monofilético tomado de la web http://www. Responde a la pregunta ¿Cuál es la relación entre ellas? tomando en cuenta su distancia filogenética y metabolismo.2. En esta actividad profundizarás en el conocimiento de las relaciones que existen dentro del árbol filogenético enfocado a las bacterias patógenas y especies de microorganismos que causan enfermedades comunes en México. Crecimiento individual y poblacional El crecimiento bacteriano implica un aumento ordenado en el número de células (población) y de los componentes celulares de un organismo del estado inmaduro al estado adulto. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. Actividad 2. Bacterias fichadas. bipartición.

4. nutrientes (CHONSP) y bióticos como la competencia por los nutrientes. O2. La medición de una curva del crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo ha sido tema de estudio de los microbiólogos. fase estacionaria y fase de declive o muerte. la molécula es un copolímero formado por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina y el Ácido N-acetilmurámico unidos mediante enlaces β-1. Respecto al tamaño de las bacterias que son microscópicas. turbidez. (oxigeno). 2008). Las dos células hijas creadas tras la división no sobreviven necesariamente (Brooks.001 mm = 1 × 10-3 .01 m Longitudes microscópicas Micrómetro 1µm = 0. o por métodos indirectos y en bloque (número más probable (NMP). si el número de supervivientes supera la unidad. 7). Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son móviles. estamos viendo cuantas veces entra una unidad de medida en el largo del objeto. Los procesos fundamentales empleados para ello son la enumeración bacteriana (recuento celular) por métodos directos e individuales (microscopía). Temperatura en ° C. depredación y lisis viral (Tórtora. 2011) Sin embargo. hablemos primero cuando medimos la longitud de un objeto.000 m kilómetro 1 km = 1. por métodos indirectos e individuales (conteo de colonias). Las bacterias son procariotas (no tienen núcleo definido ni presentan orgánulos membranosos internos).000 m hectómetro 1 hm = 100 m Submúltiplos Metro m Decímetro 1 dm = 0. Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriología (rama de la microbiología) (Tórtora. El sistema de unidades de medida que incluye al metro junto a sus múltiplos y submúltiplos se llama Sistema Métrico Decimal (Tabla 2). la población bacteriana experimenta un crecimiento exponencial. barras (bacilos) y hélices (espirilos) (Fig. y de esta manera podrá aplicar los conocimientos a nivel industrial y ambiental dichos microorganismos para un beneficio específico tomando en cuenta factores del ambiente tanto abióticos como pH.local" de la población bacteriana. La unidad de medida de la longitud es el metro (m). El objeto de estudio del biotecnólogo es reconocer de manera teórica el crecimiento bacteriano en un cultivo que conlleva a resumirse en cuatro fases diferentes: fase Log. Múltiplo miriámetro 1 mam = 10. 2008). poseen una pared celular compuesta de peptidoglucano estructura básica de la pared celular de las bacterias.001 mm 1 mm = 1000 µm 1 µm = 0. presión osmótica.1 m Centímetro 1 cm = 0. absorción de nutrientes). Las células bacterianas son microorganismos unicelulares que presentan un tamaño de unos pocos micrómetros (0. métodos directos y masivos (biomasa).5 a 5 µm) y diversas formas incluyendo esferas (cocos). fase exponencial.

la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias. es usualmente un preludio a la división celular Crecimiento poblacional: es el incremento en el número de células como una consecuencia del crecimiento y división celular El crecimiento microbiano se divide principalmente en cuatro etapas que son (fig. Es importante distinguir el crecimiento individual de células y el crecimiento de poblaciones de células: Crecimiento individual: es el incremento de una célula respecto al tamaño y peso. que está dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas.mm decámetro 1 dam = 10 m Milímetro 1 mm = 0.000 001 m = 1 × 106 m 1 m = 10 dm = 100 cm = 1 1 m = 1 000 000 µm mm Conversiones para determinar las diferentes longitudes Morfología de las bacterias.wikipedia. 2008). Editar desde la web http://es.org/wiki/Archivo:Morfolog%C3%ADa_bacteriana.jpg Generalmente el crecimiento de las bacterias es porque se reproducen ya sea por bipartición o fisión binaria (forma asexual). También presentan reproducción sexual o parasexual (intercambian fragmentos de ADN) (Tórtora. 8): . tras la duplicación del ADN.001 m 1 µm = 0.

Este periodo consiste en la adaptación de las células microbianas a su nuevo ambiente. b) Fase Exponencial. 2008).que es la base de los logaritmos de Neper. En esta fase. En este lapso de tiempo se forman las enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento (Tórtora. 2008). Matemáticamente exponencial se refiere elevar un número o -base.Etapas del crecimiento bacteriano Tórtora et al. el cual es un número importantísimo en la naturaleza que vale e = 2. (2007) a) Fase Lag. En esta fase las células se encuentran en un estado de crecimiento sostenido. es decir crece muy rápidamente en el tiempo. por lo que sólo unas cuantas mutantes podrán subsistir. por ejemplo. por lo tanto sus potencias se escriben y = ex o x = ey . El nutrimento limitante para los organismos aerobios suele ser el oxígeno: cuando la concentración bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 ml es necesario incrementar el ingreso de . las células microbianas no tienen muchos metabolitos y enzimas. Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan diferentes que las células sean genéticamente incapaces de sobrevivir. si la base x es igual a 2 y el exponente y es igual a 4.7182818284. c) fase estacionaria y d) fase de declinación o muerte. Para el caso del crecimiento microbiano por razones y resultados experimentales la base de potencia que se considera es el número –e. El crecimiento continuará hasta que uno o más nutrimentos se agoten.X a un determinado –exponente. pero éste material es en sí catalítico y la masa aumenta de manera exponencial. la potencia será 24 lo cual equivale a 2x2x2x2 = 16. debido a las condiciones desfavorables que representaba el cultivo previo. Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante (tasa = relación entre la cantidad y la frecuencia de un fenómeno). y obviamente se requerirá más tiempo para que éstas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el aumento de células (Tórtora. a) Fase Lag o de Rezago. b) fase exponencial.“y” (xy). o hasta que se acumule tal cantidad de metabolitos tóxicos que se inhiba el crecimiento.

Así. la tasa de difusión de oxígeno no puede satisfacer las demandas aun en un medio aireado. El tiempo juega un papel muy importante para que la célula se divida en dos. el crecimiento lineal sólo implica que se está aumentando en solo una unidad la masa con respecto al tiempo. 2008). 2008). c) Fase Estacionaria. Tasa de crecimiento y tiempo de generación El crecimiento microbiano que es el cambio en el número de células por unidad de tiempo determinada. muerte significa la pérdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse). misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido. 1. Dicha persistencia puede deberse a que las células consiguen crecer gracias a los nutrimentos liberados por las células que mueren y se lisan. el cual puede ser desde minutos. Por lo general. para una célula microbiana. Para comprender lo anterior debemos considerar que. si se cuentan también las muertas (Tórtora. dicha pérdida se compensa exactamente por la formación de nuevas células a través de crecimiento y división. lo cual se debe a que. Tasa de crecimiento: es el cambio del número de células o masa por unidad de tiempo Generación: intervalo para la formación de dos células provenientes de una. Ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulación de metabolitos tóxicos el crecimiento cesa por completo después de un periodo de decrecimiento en la tasa de crecimiento. aunque en realidad en el conteo aumente poco a poco el número de células. Esta fase representa el decremento de células debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad. lo cual se comprueba cuando una célula es incapaz de producir una colonia en cualquier medio. La duración de esta fase depende de la naturaleza del microorganismo y de las condiciones del medio. De lo anterior se deriva que designar a una célula microbiana como muerta no implica su destrucción física. horas y hasta días.1. aunque existe una pérdida lenta de células por muerte. la tasa de mortalidad disminuye bruscamente. . la cifra de células viables se mantiene constante.oxígeno mediante agitación o burbujeo. por lo que el crecimiento disminuye progresivamente (Tórtora. 2008). pero cuando la concentración alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml. una vez que la mayoría de las células ha muerto.2. por lo que un número pequeño de sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses o años. A diferencia del crecimiento exponencial. d) Fase de Declinación y/o Muerte. Por lo general en esta fase se observa recambio celular. observándose recambio celular (Tórtora.

b. 12:1. Crecimiento sincrónico: todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase del crecimiento celular.2. por consiguiente. CO2 y tiempo. Factores externos Condiciones ambientales o culturales: pH. Se puede definir también como la cantidad de tiempo requerida para completar un ciclo de división. disponibilidad de H2O. 2008). como ocurre en la curva del crecimiento. . La constante de la tasa de crecimiento es la tasa a la cuál las células producen más células. en la naturaleza. El crecimiento se denomina exponencial porque la biomasa se incrementa exponencialmente con respecto al tiempo. De lo anterior se deriva que. Factores que influyen en el crecimiento a. cuando el crecimiento no es limitado por los nutrimentos. T° (en escala centígrada = grados centígrados ° C). si graficamos el logaritmo de la concentración de la biomasa (o celular) en función del tiempo.2. Factores internos Capacidad metabólica 1. durante cierto tiempo las poblaciones naturales probablemente se comporten como relativamente sincrónicas (Tórtora. y el valor que esta toma se interpreta como los gramos de biomasa producidos por cada gramo de biomasa preexistente creados en una hora. Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1. la tasa de crecimiento de las células (medida en gramos de biomasa producida por hora). O2. Sin embargo.Tiempo de generación: tiempo que tarda una población en duplicarse. azufre y otros microelementos. obtendremos una línea recta como representación de esta fase (Tórtora. Crecimiento exponencial: durante el crecimiento exponencial. Los cultivos sincrónicos son muy difíciles de mantener por lo que su importancia está principalmente ligada a los estudios básicos de biología microbiana. Crecimiento exponencial y sincrónico El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos los individuos de dicha población. se puede obtener multiplicando la constante de la tasa de crecimiento por la concentración de biomasa. 2008). las bacterias del suelo se encuentran en condiciones de crecimiento próximas a la fase estacionaria (en la que se produce una cierta sincronización del cultivo) y.

Formas de visualizar el crecimiento bacteriano Caja petri autoría nuestra de practica en el laboratorio (crecimiento bacteriano colonias blancas) y Tubos de ensaye color amarillo indica presencia de colonia A. 2011). Pueden ser: Diseminación en placa (siembra en placa por extensión). cámara de Neubauer. .2.1. contando el número de colonias uno puede calcular el número de células viables en la muestra. Existen varios métodos para contar las células o estimar la masa de éstas (Brooks. Se mide por cambios sucesivos en el número de células o por el peso de la masa de las células.3. Determinación del crecimiento Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos. se necesitan al menos 106 bacterias/ml para que sean observadas al microscopio ∗ No distinguen células vivas de muertas. no es práctico para un gran número de muestras. Se asume que cada colonia surgió de una simple célula. hemocitómetro. Conteo de células viables: una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. ∗ No es muy sensible. Dispositivo graduado para el conteo de células bacterianas Tomado de la web para editar 2). Limitaciones: ∗ Es muy cansado. El conteo en placas es el método más utilizado. Recuento de células 1) Conteo de células al microscopio: se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido: Cámara de Petroff-Hausser.

Forma de contar células bacterianas en placas de agar Imagen para editar tomada de la web 1. proteínas. sin partículas extrañas. Medida de consumo de nutrientes o de producción de algún metabolito por unidad de tiempo. Determinación del peso húmedo: ∗ se tara (calibrar hasta que la balanza especifique el peso real) un tubo de centrífuga ∗ se centrifuga el cultivo y se elimina el sobrenadante ∗ se determina el peso del sedimento. 2. debido al líquido intercelular retenido. 1 mg de peso seco equivale a unas 5x109 bacterias. ADN. hasta peso constante. ∗ Inconvenientes: grandes errores. pero el sedimento se seca antes de ser pesado (105oC. 3. Métodos indirectos 1. Determinación del nitrógeno total: técnica de micro-Kjeldahl.4. 1. Ejemplos: consumo de oxígeno (QO2) y consumo de carbónico (QCO2). . ∗ Inconvenientes: método tedioso (requiere mucho tiempo) y con bastantes errores: es difícil pesar menos de 1 mg con exactitud en las balanzas habituales de laboratorio. determinados por el respirómetro de Warburg. entre otros. ARN.Método de vaciado en placa. 4. Las medidas de peso seco suelen representar el 10-15% de los valores de peso húmedo. toda la noche). etc. Producción de ácidos. Determinación de un componente característico: peptidoglucano. intensidad del empaquetamiento. Determinación del peso seco: como el anterior. Medida de masa microbiana Métodos directos: estos métodos requieren preparaciones limpias.2. cuya cuantía depende a su vez de la forma y tipo de agrupaciones de la cepa.

O sea. D. Se trata de una serie de patrones de turbidez previamente calibrados. origen de la turbidez. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de H2SO4 (ácido sulfúrico) al 1%}. Métodos turbidimétricos (ópticos). la muestra se distribuye en 16X25 = 400 celdillas (cuadros pequeños).O. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de SO4H2 al 1%}. la luz dispersada directamente por la preparación. se deja reposar sobre la plataforma del microscopio durante unos minutos. es decir la absorbancia. Se anota el número n de células observadas . en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba. y se cuenta el número de células en varias celdillas (normalmente en 16. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. La muestra. equivalentes a uno de los cuadros grandes). en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba.). • • 1. y lo que se mide es pues. Posee mayor sensibilidad que el espectrofotómetro. pero el dispositivo sensor está situado en ángulo recto respecto de la dirección de la luz incidente.02 mm de profundidad área de 1 mm2. Medida del número de individuos Métodos directos 1. una vez dispensada entre el porta y el cubre. La base común de estos métodos consiste en la medición de la cantidad de luz dispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. origen de la turbidez. Medición de luz transmitida: • Escala de MacFarland: Se trata de una serie de patrones de turbidez (no son claros o transparentes como el agua) previamente calibrados. Espectrofotómetro: Este aparato es de uso habitual en cualquier laboratorio de Microbiología o Bioquímica. = A = -logT/100 donde T= transmitancia C) Nefelómetro: Es un aparato similar al anterior. por lo tanto. 3. por lo tanto. dividida en un retículo de 25 cuadrados grandes cada cuadrado grande está subdividido a su vez en 4x4 = 16 cuadrados pequeños. Mide la densidad óptica (D.2.5. Cámara de recuento de Petroff-Hauser: Consiste en un portaobjetos especial con una graduación en superficie y unas medidas muy concretas: excavación con 0.O.2.

Recuento en preparaciones teñidas: Se dispone de un porta con una excavación circular (de área At) con un volumen conocido (v). 2.. Se observa con un microscopio dotado de un juego de ocular y objetivo que delimitan un área de campo (Ac). una molécula que emite fluorescencia al incidir sobre ella un haz de luz láser. con una mezcla de alcohol y agua. En bacterias móviles. 4./ml). La concentración bacteriana se deduce de la proporción de bacterias y partículas observadas en el mismo campo microscópico. Métodos indirectos: Son métodos que miden el número de bacterias viables (que no equivale al de totales). y se fija y tiñe por algún colorante. Ventajas: es un método muy rápido Inconvenientes: sólo sirve para suspensiones relativamente concentradas (>10x106 céls. Entonces. . bacteria) se interrumpe la corriente. ej. la concentración de bacterias por mililitro será: n·At/Ac· 1/v 3. la concentración celular es fácil de establecer: n x 25 x 50 x 1000 = concentración en células/ml. Es una sofisticada modificación en la que las partículas a contar se marcan previamente con un anticuerpo monoclonal anticuerpo homogéneo producido por una célula híbrida producto de la fusión de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoralu otro ligando específico hacia alguna molécula de superficie. Sobre esta excavación se extiende la muestra con asa de siembra o con micropipeta.en esas 16 celdillas. Este método se emplea más frecuentemente en Virología. Cada vez que por un orificio (30 mm diámetro) pasa una partícula (p. Si en dicho campo se cuentan n bacterias. que detecta el número y el tamaño de las partículas que van pasando. lo cual es recogido por un dispositivo de registro electrónico. entre los dos polos de una corriente eléctrica. Contadores electrónicos de partículas (tipo Coulter): Se hace pasar una suspensión bacteriana por un tubo capilar. unidos a su vez a un fluorocromo. Por debajo de este valor el número de células vistas en el campo del microscopio es muy pequeño y poco significativo estadísticamente. hay que inmovilizarlas previamente. (El tamaño detectado es función de la intensidad del pulso de voltaje al paso de la partícula). Recuento proporcional de Wright: Se mezcla la suspensión bacteriana problema con una cantidad conocida de bolitas de látex o de hematíes (células sanguíneas = sangre). Recientemente se ha introducido la citometría de flujo activada por fluorescencia (FACS).

según la distribución de Poisson: P0= e—m y por lo tanto es fácil calcular el valor de m: m = -lnP0 Figura 12. tras el tiempo de incubación adecuado se anota la proporción obtenida de muestras donde no se haya dado crecimiento. Recuento de viables en placa: Como esta técnica será explicada al alumno en clase. el filtro se deposita sobre la superficie de un medio de cultivo sólido. y además la realizará en las prácticas.5. Posteriormente. remitimos a las pertinentes explicaciones "en vivo".pdf 6. que retiene las bacterias. Es una de las técnicas de recuento más usadas en la rutina del laboratorio de Microbiología. deduciéndose la concentración original en función del volumen de suspensión que se hizo pasar por el filtro. se recomienda sembrar 5 placas de cada dilución. P0 (x = 0). Determinación de la proporción células viables/células totales: Si se está interesado en conocer esa proporción se recurre a una técnica de microcultivos en cubreobjetos: hay que seguir periódicamente la evolución del crecimiento de células individuales y determinar la proporción de aquellas células no viables (visibles al microscopio. Método del número más probable: Su fundamento estriba en la distribución de Poisson: una distribución aleatoria de partículas en una serie de muestras iguales. Recuento sobre filtros de nitrocelulosa: Se usa para suspensiones diluidas de bacterias. en función del número medio de partículas presentes en una suspensión (presencia y ausencia de microorganismos). Entonces. . pero incapaces de crecer). Conteo de numero más probable (NMP) para bacterias Editar de la web http://www. 8. Las colonias se forman sobre el filtro y se cuentan.uprm.edu/biology/profs/massol/manual/p4nmpenumeracion. La técnica consiste en sembrar alícuotas de la suspensión original problema sobre un medio líquido o sólido adecuado. ∗ hay que usar pipetas nuevas en cada dilución ∗ contar las placas donde existan entre 50 y 300 colonias 7. Se hace pasar un gran volumen de suspensión a través de una membrana de nitrocelulosa estéril. • Precauciones: ∗ para minimizar los errores estadísticos de muestreo (para que los resultados san concretos y creibles). porque llega haber ocasiones en donde no crece nada.

Jerarquización. Enlaces cruzados. 2.es el orden en ascendente-descendente en función de la complejidad de los conceptos o proposiciones tratados en la arborización del MMCC. 3.son puentes entre proposiciones dentro de la arborización. al construirlo describirás en él las relaciones entre los conceptos de la microbiología relacionados con las fases de crecimiento bacteriano y sus formas de medirlo. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos.. Desprendimiento de conceptos secundarios 2. Concepto o idea original Palabras clave Conectores Conectivos y palabras de conexión Conceptos en diferentes niveles en este caso puedes desarrollarlo mínimo en tres niveles De esta manera a partir del concepto o idea de origen ocurre: 1.. además de la morfología bacteriana. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. 5. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional. En un documento de texto o archivo de imagen plasma un mapa conceptual que contenga las siguientes características: El mapa conceptual debe presentar una estructura arborescente que incluya los siguientes aspectos: 1. 4.. . tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. Conectores y proposiciones. Un mundo raro… Esta actividad representa uno de los mayores retos pues implica crear un mapa conceptual (MMCC) en el cual reflejarás tu dominio de los temas anteriormente vistos. 4.Actividad 3. 3.conectores son palabras o preposiciones insertas entre dos conceptos y son útiles para producir nuevas proposiciones o enunciados con sentido.

M. Pidello. desarrollo.Evidencia de Aprendizaje Mi extinción Esta actividad implica que exteriorices en un cuerpo de ideas e información todo lo que haz profundizado en conocimientos de esta asignatura. (2011) Ecología microbiana. para el cual investigarás algunas teorías que lo caracterizan. (2009) Microbiología Mc. el Virus del VIH. interlineado 1.J. 4. Corpus Willey. Contenido sin ningún signo de plagio. 2. bibliografía y ligas de web consultadas. Que incluya Nombre del tema (original). Para cumplir esta evidencia de aprendizaje elabora un documento de texto que contenga un ensayo de las propuestas teóricas sobre el virus del VIH y la forma de eliminarlo y la diferencia que existe entre el Virus VIH con respecto a una bacteria. así como propuestas científicas actuales para combatirlo. Corpus. G. 3. con los siguientes elementos: 1. Graw Hill / Interamericana Bibliografía complementaria . introducción. Para ello enfocarás tus conocimientos en un agente patógeno que ha traído consecuencias fatales a la especie humana.15. Fuentes de consulta Bibliografía básica González. conclusiones. Como colofón incursionarás en algunas ideas que te permitan desarrollar las tuyas propias acerca de la diferencia que existe entre un microorganismo y un virus. A. Tipo de letra Arial 11. (2007) Microbiología ambiental. Una extensión por lo menos de una cuartilla.

Segunda Edición. Elsevier . P. et al 2007 Introducción a la microbiología. 2009 Microbiología Clínica Y Enfermedades Infecciosas.. W.2009 Microbiología médica.Tortora. G. Pearson Education Murray. Séptima Edición Elsevier Spicer.

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