Licenciatura / Ingeniería en: Biotecnología

Programa de la asignatura Microbiología y Taxonomía Microbiana

Clave 200920416 190920416 ESAD

Unidad 1 Presentación de la unidad

La importancia de estudiar Taxonomía Microbiana radica en conocer las investigaciones y logros científicos, mediante análisis taxonómicos, donde el alumno desarrollará habilidades para identificar los sistemas de clasificación de microorganismos y como es que llevan a cabo su proliferación de tal manera que se apliquen los conocimientos adquiridos para la elaboración de un ensayo

Propósitos El alumno analizará la forma de nombrar a los microorganismos y su importancia dentro del ámbito ambiental e industrial, donde incorporará los conceptos fundamentales de taxonomía microbiana con el fin de entender el desarrollo cuantitativo de las bacterias, lo cual posteriormente le permita desarrollar habilidades para la investigación, resolución de problemas y toma de decisiones.

Competencia específica

Analizar la taxonomía y crecimiento bacteriano mediante la comprensión de sus fundamentos y beneficios para proponer mejoras a los distintos procesos biotecnológicos.

1.1 Definición de taxonomía La Taxonomía es un área de la ciencia biológica que comprende tres disciplinas diferentes: clasificación, nomenclatura e identificación. La taxonomía se divide en microtaxonomía (su objetivo es identificar, describir y delimitar especies) y macrotaxonomía (su finalidad es construir clasificaciones de los taxones y se auxilia de la microtaxonomía) (Solomon et al., 2008). Para llevar a cabo la clasificación de las bacterias los taxónomos bacterianos se vieron forzados a buscar además de las características estructurales, diferentes tipos de propiedades como las bioquímicas, fisiológicas, ecológicas. Dicha clasificación se basa en

Esto representa un problema adicional para el taxónomo bacteriano. la mayor parte de las bacterias sólo pueden identificarse por lo que hacen y no simplemente por su apariencia. 2008). transliterado como taxis. FCarl Von Linneo (1707-1778) desde la web http://es.. b) Nomenclatura: es la denominación de las unidades definidas y por la clasificación. que proporcionan una posible base objetiva para la definición de especie bacteriana (Tórtora. . asignándole al grupo un nombre en latín. "norma" o "regla") es la ciencia de la clasificación. una descripción. que en una clasificación dada han sido agrupados. 2008). "ordenamiento") es un grupo de organismos emparentados. La taxonomía se divide en tres partes: a) Clasificación: es el agrupamiento ordenado de unidades en grupos dentro de unidades mayores.wikipedia. por lo tanto éste nunca podrá estar seguro de haber llevado a cabo los experimentos adecuados con fines taxonómicos: podría ocurrir que omitiera la realización de ciertos experimentos que indicaran la existencia de agrupamientos significativos dentro de una colección de cepas. "ordenamiento". nomos. taxis. y νοµος. y un "tipo". son las técnicas moleculares para la caracterización genotípica bacteriana. el estudio de estas propiedades funcionales conlleva a la realización de experimentos. de forma que el taxón de una especie es un espécimen o ejemplar concreto.org/wiki/Archivo:Carl_von_Linn%C3%A9. Sin embargo. está tomando auge una nueva alternativa biotecnológica que podría resolver pronto el problema.jpg La Taxonomía (del griego ταξις. a Linneo se le conoce como el Padre de la Taxonomía que es la ciencia encargada de la clasificación y denominación de la gran variedad de especies existentes (Solomon et al.atributos funcionales. En el siglo XVII Carlos Linneo desarrollo un sistema de clasificación para nombrar a los microorganismos como una forma de facilitar la comunicación eficaz entre los microbiólogos. está relacionada con la Sistemática que se refiere a la clasificación o agrupamiento sistemático de los organismos en grupos o categorías llamados taxa (del griego ταξις.

1. 2008). las clases en filums ó filo (phylum. la “bacteria causante de la fermentación del yogurt” Lactobacillus bulgaricus o L. estos a su vez se constituyen una familia. los microorganismos se identifican comparando las características de las unidades desconocidas y las conocidas. los dos anteriores forman el nombre científico de cada especie. 1. botánico y bacteriológico que se basan en determinados principios comunes mediante el sistema de clasificación de Linneo el cual se denomina “sistema binomial de nomenclatura” donde a cada especie se le asigna un nombre compuesto de dos partes: la primera designa el género. y la segunda. las cuales a su vez se agrupan en ordenes. El epíteto específico siempre debe ir precedido del nombre del género abreviado o completo (Solomon et al.. La forma de nombrar a los microorganismos es mediante la clasificación en grupos de una serie grande de microorganismos. nombre vulgar “perro” y su nombre científico es Canis familiaris o C. los filums forman reinos y los reinos dominios (Fig.1. Los nombres científicos son en latín. 2008). por lo que es preferible usar el nombre vulgar o común ya que suele variar según las localidades. regiones. familiaris.2.1.1. los cuales deben parecerse entre sí con un grado mayor de semejanza que los miembros de otro grupo. el epíteto especifico los cuales se escriben letra cursiva. latrans. o latinizados. 2008). en cualquier lengua. El objetivo del nombre científico es el de poseer un único nombre que deba ser utilizado en todo el mundo.c) Identificación: hace uso del criterio establecido por la clasificación y nomenclatura mencionados. Los nombres científicos no son muy usuales. la “bacteria que causa el cólera” Escherichia coli o E. Nomenclatura Respecto a la Nomenclatura existen códigos como el zoológico. bulgaricus. por ejemplo. . Biología sistemática El sistema binomial de nomenclatura que agrupa a las especies dentro de un género común.. plural phyla que es un tipo de organización). los ordenes en clases. para referirse a un único taxón (Solomon et al. puesto que se escriben en latín es muy difícil su pronunciación.. 2 o Tabla 1) (Solomon et al. coli.

Categoría taxonómico Especie o nivel Características Organismo que solo se puede reproducir con otro de su misma especie Grupo de especies relacionadas. Apoya con imágenes el trabajo de información que realizaste 4. En un documento de texto describe la clasificación taxonómica de dos microorganismos diferentes que tú deberás elegir. Grupo de géneros relacionados. Grupo de clases relacionadas. Ten cuidado de elegir especies diferentes a las de tus compañeros. Sé cuidadoso con la ortografía. Descripción: 1. . Archivo evolutivo En esta actividad ejercitarás el dominio de nomenclatura según la clasificacióntaxonómica de varias clases de microorganismos. Forma para basarse y editar imagen Actividad 1. Grupo de familias relacionadas. 2. Grupo de órdenes relacionadas. Grupo de phyla relacionados Grupo de reinos. Género Familia Orden Clase Filum o Phylum Reino Dominio Niveles o categoría taxonómica Niveles taxonómicos. 3.

Árboles filogenéticos La clasificación moderna a menudo recibe el nombre de sistemática. es una forma de cladograma (Solomon et al 2008). Los cladogramas son importantes herramientas filogenéticas para el estudio de conceptos científicos. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. 3) muestra las relaciones evolutivas entre varias especies u otras entidades que se cree que tienen un ancestro en común. Muchos taxónomos utilizan la sistemática ya que tratan de reconstruir la historia evolutiva o filogenia (producción de los filums) de los organismos.wikimedia. así como aquélla generada por la comparación estructural y molecular de los organismos (Solomon et al. en el que se muestra la relación entre distintas especies según una característica derivada. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional.3. 2008). tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. porque se basa en relaciones evolutivas. Por lo tanto un árbol filogenético (fig. En biología se utilizan árboles parecidos a los genealógicos para representar cómo se encuentran emparentados los organismos vivos. Un cladograma es un diagrama representativo en la clasificación biológica taxonómica de los organismos. Árbol filogenético de la vida Editar de la web http://upload. 1. se les conoce como árboles filogenéticos.org/wikipedia/commons/5/55/Phylogenetic_tree-es. resultado del análisis cladístico de una especie.1.Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos.png .. En los árboles genealógicos se utiliza información proporcionada por los familiares y para los árboles filogenéticos se usa información proveniente de fósiles.

es/GruposInv/myco-ual/galer13. Árbol monofilético tomado de la web http://www. se han reunido por conveniencia de los investigadores.En la figura se explica a manera de árbol filogenético el origen evolutivo de la vida en el planeta. . los cuales han sido incluidos en otros grupos.ual. 2008).. Árbol monofilético tomado de la web http://www.ual. Debido al origen evolutivo de las especies estas pueden tener diferentes formas de árboles filogenéticos y estos pueden ser: Monofiléticos: es un grupo de organismos que tiene un antepasado común con todos y cada uno de sus descendientes. 5. de acuerdo a las características morfológicas de dichos organismos estos van desde las formas sencillas como las bacterias hasta las más complejas como las plantas y animales (Solomon et al.htm Polifilético: si contiene organismos de varios clados. simplemente.htm Parafilético: si faltan algunos de los descendientes.es/GruposInv/myco-ual/galer13. es decir. que no proceden de un antepasado común cercan.

Árbol monofilético tomado de la web http://www. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. En esta actividad profundizarás en el conocimiento de las relaciones que existen dentro del árbol filogenético enfocado a las bacterias patógenas y especies de microorganismos que causan enfermedades comunes en México. 1.2. Agrega una nueva entrada y redacta tu listado de 4 especies de bacterias que causan enfermedades en México colocando entre paréntesis que enfermedad provocan. Actividad 2.es/GruposInv/myco-ual/galer13. Dirígete a la base de datos y a continuación: 1. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad.htm Para reforzar lo visto anteriormente sobre árboles filogenéticos realizar la actividad 2. las células hijas resultantes serán genéticamente idénticas a la célula original. De este modo tiene lugar la "duplicación . Revisa y comenta las aportaciones de tus compañeros(as). bipartición. Responde a la pregunta ¿Cuál es la relación entre ellas? tomando en cuenta su distancia filogenética y metabolismo. 2.ual. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional. 3. incluye inmersamente la división de una bacteria en dos células hijas en un proceso llamado fisión binaria. Bacterias fichadas. Crecimiento individual y poblacional El crecimiento bacteriano implica un aumento ordenado en el número de células (población) y de los componentes celulares de un organismo del estado inmaduro al estado adulto.

1 m Centímetro 1 cm = 0. El sistema de unidades de medida que incluye al metro junto a sus múltiplos y submúltiplos se llama Sistema Métrico Decimal (Tabla 2). Respecto al tamaño de las bacterias que son microscópicas. fase exponencial. absorción de nutrientes).001 mm 1 mm = 1000 µm 1 µm = 0. fase estacionaria y fase de declive o muerte. 2008). hablemos primero cuando medimos la longitud de un objeto. depredación y lisis viral (Tórtora.local" de la población bacteriana. turbidez.01 m Longitudes microscópicas Micrómetro 1µm = 0. si el número de supervivientes supera la unidad. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son móviles. por métodos indirectos e individuales (conteo de colonias). La unidad de medida de la longitud es el metro (m). Las dos células hijas creadas tras la división no sobreviven necesariamente (Brooks. Múltiplo miriámetro 1 mam = 10. (oxigeno).4. 2011) Sin embargo.000 m hectómetro 1 hm = 100 m Submúltiplos Metro m Decímetro 1 dm = 0. presión osmótica. Las bacterias son procariotas (no tienen núcleo definido ni presentan orgánulos membranosos internos). 2008). nutrientes (CHONSP) y bióticos como la competencia por los nutrientes. Temperatura en ° C.000 m kilómetro 1 km = 1. La medición de una curva del crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo ha sido tema de estudio de los microbiólogos.5 a 5 µm) y diversas formas incluyendo esferas (cocos). barras (bacilos) y hélices (espirilos) (Fig. la población bacteriana experimenta un crecimiento exponencial. poseen una pared celular compuesta de peptidoglucano estructura básica de la pared celular de las bacterias. y de esta manera podrá aplicar los conocimientos a nivel industrial y ambiental dichos microorganismos para un beneficio específico tomando en cuenta factores del ambiente tanto abióticos como pH. estamos viendo cuantas veces entra una unidad de medida en el largo del objeto.001 mm = 1 × 10-3 . la molécula es un copolímero formado por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina y el Ácido N-acetilmurámico unidos mediante enlaces β-1. o por métodos indirectos y en bloque (número más probable (NMP). O2. Los procesos fundamentales empleados para ello son la enumeración bacteriana (recuento celular) por métodos directos e individuales (microscopía). El objeto de estudio del biotecnólogo es reconocer de manera teórica el crecimiento bacteriano en un cultivo que conlleva a resumirse en cuatro fases diferentes: fase Log. métodos directos y masivos (biomasa). Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriología (rama de la microbiología) (Tórtora. 7). Las células bacterianas son microorganismos unicelulares que presentan un tamaño de unos pocos micrómetros (0.

Es importante distinguir el crecimiento individual de células y el crecimiento de poblaciones de células: Crecimiento individual: es el incremento de una célula respecto al tamaño y peso.wikipedia. que está dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas. es usualmente un preludio a la división celular Crecimiento poblacional: es el incremento en el número de células como una consecuencia del crecimiento y división celular El crecimiento microbiano se divide principalmente en cuatro etapas que son (fig. tras la duplicación del ADN. También presentan reproducción sexual o parasexual (intercambian fragmentos de ADN) (Tórtora.001 m 1 µm = 0.000 001 m = 1 × 106 m 1 m = 10 dm = 100 cm = 1 1 m = 1 000 000 µm mm Conversiones para determinar las diferentes longitudes Morfología de las bacterias.jpg Generalmente el crecimiento de las bacterias es porque se reproducen ya sea por bipartición o fisión binaria (forma asexual). la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias.org/wiki/Archivo:Morfolog%C3%ADa_bacteriana. 2008). Editar desde la web http://es.mm decámetro 1 dam = 10 m Milímetro 1 mm = 0. 8): .

Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan diferentes que las células sean genéticamente incapaces de sobrevivir. la potencia será 24 lo cual equivale a 2x2x2x2 = 16.Etapas del crecimiento bacteriano Tórtora et al. (2007) a) Fase Lag.que es la base de los logaritmos de Neper. b) Fase Exponencial. 2008). y obviamente se requerirá más tiempo para que éstas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el aumento de células (Tórtora.“y” (xy). es decir crece muy rápidamente en el tiempo. las células microbianas no tienen muchos metabolitos y enzimas. a) Fase Lag o de Rezago. b) fase exponencial. o hasta que se acumule tal cantidad de metabolitos tóxicos que se inhiba el crecimiento. Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante (tasa = relación entre la cantidad y la frecuencia de un fenómeno). si la base x es igual a 2 y el exponente y es igual a 4. En esta fase las células se encuentran en un estado de crecimiento sostenido.X a un determinado –exponente. debido a las condiciones desfavorables que representaba el cultivo previo. El crecimiento continuará hasta que uno o más nutrimentos se agoten. Para el caso del crecimiento microbiano por razones y resultados experimentales la base de potencia que se considera es el número –e. pero éste material es en sí catalítico y la masa aumenta de manera exponencial. el cual es un número importantísimo en la naturaleza que vale e = 2. En este lapso de tiempo se forman las enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento (Tórtora. El nutrimento limitante para los organismos aerobios suele ser el oxígeno: cuando la concentración bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 ml es necesario incrementar el ingreso de . 2008). En esta fase. Este periodo consiste en la adaptación de las células microbianas a su nuevo ambiente. por lo tanto sus potencias se escriben y = ex o x = ey . por lo que sólo unas cuantas mutantes podrán subsistir. c) fase estacionaria y d) fase de declinación o muerte.7182818284. Matemáticamente exponencial se refiere elevar un número o -base. por ejemplo.

Tasa de crecimiento: es el cambio del número de células o masa por unidad de tiempo Generación: intervalo para la formación de dos células provenientes de una. el cual puede ser desde minutos. dicha pérdida se compensa exactamente por la formación de nuevas células a través de crecimiento y división. por lo que un número pequeño de sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses o años. misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido. Esta fase representa el decremento de células debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad. Tasa de crecimiento y tiempo de generación El crecimiento microbiano que es el cambio en el número de células por unidad de tiempo determinada. la cifra de células viables se mantiene constante. . 2008).oxígeno mediante agitación o burbujeo. el crecimiento lineal sólo implica que se está aumentando en solo una unidad la masa con respecto al tiempo. por lo que el crecimiento disminuye progresivamente (Tórtora. lo cual se debe a que. la tasa de difusión de oxígeno no puede satisfacer las demandas aun en un medio aireado. observándose recambio celular (Tórtora. El tiempo juega un papel muy importante para que la célula se divida en dos. Para comprender lo anterior debemos considerar que. si se cuentan también las muertas (Tórtora. 2008). 2008). una vez que la mayoría de las células ha muerto. c) Fase Estacionaria. Así. 1. Por lo general.1. A diferencia del crecimiento exponencial. Dicha persistencia puede deberse a que las células consiguen crecer gracias a los nutrimentos liberados por las células que mueren y se lisan. lo cual se comprueba cuando una célula es incapaz de producir una colonia en cualquier medio. aunque en realidad en el conteo aumente poco a poco el número de células. Por lo general en esta fase se observa recambio celular. De lo anterior se deriva que designar a una célula microbiana como muerta no implica su destrucción física. para una célula microbiana. la tasa de mortalidad disminuye bruscamente. aunque existe una pérdida lenta de células por muerte. pero cuando la concentración alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml. La duración de esta fase depende de la naturaleza del microorganismo y de las condiciones del medio. muerte significa la pérdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse).2. horas y hasta días. d) Fase de Declinación y/o Muerte. Ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulación de metabolitos tóxicos el crecimiento cesa por completo después de un periodo de decrecimiento en la tasa de crecimiento.

Se puede definir también como la cantidad de tiempo requerida para completar un ciclo de división. las bacterias del suelo se encuentran en condiciones de crecimiento próximas a la fase estacionaria (en la que se produce una cierta sincronización del cultivo) y.2. Los cultivos sincrónicos son muy difíciles de mantener por lo que su importancia está principalmente ligada a los estudios básicos de biología microbiana. 2008). Factores externos Condiciones ambientales o culturales: pH. De lo anterior se deriva que. la tasa de crecimiento de las células (medida en gramos de biomasa producida por hora). como ocurre en la curva del crecimiento. y el valor que esta toma se interpreta como los gramos de biomasa producidos por cada gramo de biomasa preexistente creados en una hora. Factores internos Capacidad metabólica 1. . azufre y otros microelementos. por consiguiente.Tiempo de generación: tiempo que tarda una población en duplicarse. Crecimiento exponencial: durante el crecimiento exponencial. Factores que influyen en el crecimiento a. Crecimiento exponencial y sincrónico El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos los individuos de dicha población. se puede obtener multiplicando la constante de la tasa de crecimiento por la concentración de biomasa. Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1. en la naturaleza.2. O2. cuando el crecimiento no es limitado por los nutrimentos. obtendremos una línea recta como representación de esta fase (Tórtora. Sin embargo. CO2 y tiempo. 12:1. durante cierto tiempo las poblaciones naturales probablemente se comporten como relativamente sincrónicas (Tórtora. Crecimiento sincrónico: todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase del crecimiento celular. b. El crecimiento se denomina exponencial porque la biomasa se incrementa exponencialmente con respecto al tiempo. si graficamos el logaritmo de la concentración de la biomasa (o celular) en función del tiempo. 2008). T° (en escala centígrada = grados centígrados ° C). La constante de la tasa de crecimiento es la tasa a la cuál las células producen más células. disponibilidad de H2O.

1. Existen varios métodos para contar las células o estimar la masa de éstas (Brooks. El conteo en placas es el método más utilizado.3. Conteo de células viables: una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. se necesitan al menos 106 bacterias/ml para que sean observadas al microscopio ∗ No distinguen células vivas de muertas. Dispositivo graduado para el conteo de células bacterianas Tomado de la web para editar 2). 2011). contando el número de colonias uno puede calcular el número de células viables en la muestra. hemocitómetro. Pueden ser: Diseminación en placa (siembra en placa por extensión). no es práctico para un gran número de muestras. Limitaciones: ∗ Es muy cansado. Se asume que cada colonia surgió de una simple célula.2. cámara de Neubauer. . Recuento de células 1) Conteo de células al microscopio: se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido: Cámara de Petroff-Hausser. Se mide por cambios sucesivos en el número de células o por el peso de la masa de las células. Formas de visualizar el crecimiento bacteriano Caja petri autoría nuestra de practica en el laboratorio (crecimiento bacteriano colonias blancas) y Tubos de ensaye color amarillo indica presencia de colonia A. Determinación del crecimiento Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos. ∗ No es muy sensible.

1. Métodos indirectos 1. cuya cuantía depende a su vez de la forma y tipo de agrupaciones de la cepa. Determinación del nitrógeno total: técnica de micro-Kjeldahl. sin partículas extrañas. pero el sedimento se seca antes de ser pesado (105oC. Determinación del peso seco: como el anterior. Forma de contar células bacterianas en placas de agar Imagen para editar tomada de la web 1. 3. proteínas. 1 mg de peso seco equivale a unas 5x109 bacterias. Producción de ácidos. . entre otros. debido al líquido intercelular retenido. Determinación de un componente característico: peptidoglucano. ∗ Inconvenientes: grandes errores. Medida de consumo de nutrientes o de producción de algún metabolito por unidad de tiempo. intensidad del empaquetamiento. Medida de masa microbiana Métodos directos: estos métodos requieren preparaciones limpias. etc. ∗ Inconvenientes: método tedioso (requiere mucho tiempo) y con bastantes errores: es difícil pesar menos de 1 mg con exactitud en las balanzas habituales de laboratorio. Ejemplos: consumo de oxígeno (QO2) y consumo de carbónico (QCO2). hasta peso constante. ADN. toda la noche).2.Método de vaciado en placa. 4. 2.4. determinados por el respirómetro de Warburg. Determinación del peso húmedo: ∗ se tara (calibrar hasta que la balanza especifique el peso real) un tubo de centrífuga ∗ se centrifuga el cultivo y se elimina el sobrenadante ∗ se determina el peso del sedimento. Las medidas de peso seco suelen representar el 10-15% de los valores de peso húmedo. ARN.

5.2. en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba. por lo tanto. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de SO4H2 al 1%}. Posee mayor sensibilidad que el espectrofotómetro. y se cuenta el número de células en varias celdillas (normalmente en 16. Cámara de recuento de Petroff-Hauser: Consiste en un portaobjetos especial con una graduación en superficie y unas medidas muy concretas: excavación con 0. origen de la turbidez. O sea.O. la luz dispersada directamente por la preparación. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de H2SO4 (ácido sulfúrico) al 1%}.). origen de la turbidez. en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba. se deja reposar sobre la plataforma del microscopio durante unos minutos. Se trata de una serie de patrones de turbidez previamente calibrados. y lo que se mide es pues. Medida del número de individuos Métodos directos 1.02 mm de profundidad área de 1 mm2. Métodos turbidimétricos (ópticos).O. Mide la densidad óptica (D. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. equivalentes a uno de los cuadros grandes). = A = -logT/100 donde T= transmitancia C) Nefelómetro: Es un aparato similar al anterior.2. La muestra. la muestra se distribuye en 16X25 = 400 celdillas (cuadros pequeños). dividida en un retículo de 25 cuadrados grandes cada cuadrado grande está subdividido a su vez en 4x4 = 16 cuadrados pequeños. Medición de luz transmitida: • Escala de MacFarland: Se trata de una serie de patrones de turbidez (no son claros o transparentes como el agua) previamente calibrados. • • 1. La base común de estos métodos consiste en la medición de la cantidad de luz dispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano. D. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. pero el dispositivo sensor está situado en ángulo recto respecto de la dirección de la luz incidente. Se anota el número n de células observadas . Espectrofotómetro: Este aparato es de uso habitual en cualquier laboratorio de Microbiología o Bioquímica. una vez dispensada entre el porta y el cubre. por lo tanto. 3. es decir la absorbancia.

Cada vez que por un orificio (30 mm diámetro) pasa una partícula (p./ml). que detecta el número y el tamaño de las partículas que van pasando. Por debajo de este valor el número de células vistas en el campo del microscopio es muy pequeño y poco significativo estadísticamente. ej. Métodos indirectos: Son métodos que miden el número de bacterias viables (que no equivale al de totales). la concentración de bacterias por mililitro será: n·At/Ac· 1/v 3. bacteria) se interrumpe la corriente. Este método se emplea más frecuentemente en Virología. Recuento proporcional de Wright: Se mezcla la suspensión bacteriana problema con una cantidad conocida de bolitas de látex o de hematíes (células sanguíneas = sangre). . Se observa con un microscopio dotado de un juego de ocular y objetivo que delimitan un área de campo (Ac). y se fija y tiñe por algún colorante. Es una sofisticada modificación en la que las partículas a contar se marcan previamente con un anticuerpo monoclonal anticuerpo homogéneo producido por una célula híbrida producto de la fusión de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoralu otro ligando específico hacia alguna molécula de superficie. Ventajas: es un método muy rápido Inconvenientes: sólo sirve para suspensiones relativamente concentradas (>10x106 céls. Sobre esta excavación se extiende la muestra con asa de siembra o con micropipeta. Si en dicho campo se cuentan n bacterias. hay que inmovilizarlas previamente. En bacterias móviles. la concentración celular es fácil de establecer: n x 25 x 50 x 1000 = concentración en células/ml. Recientemente se ha introducido la citometría de flujo activada por fluorescencia (FACS). lo cual es recogido por un dispositivo de registro electrónico. (El tamaño detectado es función de la intensidad del pulso de voltaje al paso de la partícula). unidos a su vez a un fluorocromo.. 4. La concentración bacteriana se deduce de la proporción de bacterias y partículas observadas en el mismo campo microscópico. Entonces. con una mezcla de alcohol y agua. entre los dos polos de una corriente eléctrica. Contadores electrónicos de partículas (tipo Coulter): Se hace pasar una suspensión bacteriana por un tubo capilar. una molécula que emite fluorescencia al incidir sobre ella un haz de luz láser. 2. Recuento en preparaciones teñidas: Se dispone de un porta con una excavación circular (de área At) con un volumen conocido (v).en esas 16 celdillas.

Recuento de viables en placa: Como esta técnica será explicada al alumno en clase. 8. y además la realizará en las prácticas.5. Método del número más probable: Su fundamento estriba en la distribución de Poisson: una distribución aleatoria de partículas en una serie de muestras iguales. Recuento sobre filtros de nitrocelulosa: Se usa para suspensiones diluidas de bacterias. porque llega haber ocasiones en donde no crece nada.edu/biology/profs/massol/manual/p4nmpenumeracion. Entonces. • Precauciones: ∗ para minimizar los errores estadísticos de muestreo (para que los resultados san concretos y creibles). el filtro se deposita sobre la superficie de un medio de cultivo sólido. tras el tiempo de incubación adecuado se anota la proporción obtenida de muestras donde no se haya dado crecimiento. en función del número medio de partículas presentes en una suspensión (presencia y ausencia de microorganismos). Posteriormente. Conteo de numero más probable (NMP) para bacterias Editar de la web http://www. . Se hace pasar un gran volumen de suspensión a través de una membrana de nitrocelulosa estéril. Las colonias se forman sobre el filtro y se cuentan. Es una de las técnicas de recuento más usadas en la rutina del laboratorio de Microbiología. se recomienda sembrar 5 placas de cada dilución. Determinación de la proporción células viables/células totales: Si se está interesado en conocer esa proporción se recurre a una técnica de microcultivos en cubreobjetos: hay que seguir periódicamente la evolución del crecimiento de células individuales y determinar la proporción de aquellas células no viables (visibles al microscopio. P0 (x = 0). deduciéndose la concentración original en función del volumen de suspensión que se hizo pasar por el filtro.uprm. según la distribución de Poisson: P0= e—m y por lo tanto es fácil calcular el valor de m: m = -lnP0 Figura 12.pdf 6. que retiene las bacterias. ∗ hay que usar pipetas nuevas en cada dilución ∗ contar las placas donde existan entre 50 y 300 colonias 7. pero incapaces de crecer). remitimos a las pertinentes explicaciones "en vivo". La técnica consiste en sembrar alícuotas de la suspensión original problema sobre un medio líquido o sólido adecuado.

es el orden en ascendente-descendente en función de la complejidad de los conceptos o proposiciones tratados en la arborización del MMCC. 2. al construirlo describirás en él las relaciones entre los conceptos de la microbiología relacionados con las fases de crecimiento bacteriano y sus formas de medirlo.. además de la morfología bacteriana.. Concepto o idea original Palabras clave Conectores Conectivos y palabras de conexión Conceptos en diferentes niveles en este caso puedes desarrollarlo mínimo en tres niveles De esta manera a partir del concepto o idea de origen ocurre: 1. . 4. 3. Un mundo raro… Esta actividad representa uno de los mayores retos pues implica crear un mapa conceptual (MMCC) en el cual reflejarás tu dominio de los temas anteriormente vistos. 3. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. En un documento de texto o archivo de imagen plasma un mapa conceptual que contenga las siguientes características: El mapa conceptual debe presentar una estructura arborescente que incluya los siguientes aspectos: 1. Desprendimiento de conceptos secundarios 2.Actividad 3. Enlaces cruzados.son puentes entre proposiciones dentro de la arborización.conectores son palabras o preposiciones insertas entre dos conceptos y son útiles para producir nuevas proposiciones o enunciados con sentido. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional. Jerarquización. Conectores y proposiciones. 4. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos. 5. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad..

interlineado 1. Para ello enfocarás tus conocimientos en un agente patógeno que ha traído consecuencias fatales a la especie humana.Evidencia de Aprendizaje Mi extinción Esta actividad implica que exteriorices en un cuerpo de ideas e información todo lo que haz profundizado en conocimientos de esta asignatura. (2007) Microbiología ambiental. Graw Hill / Interamericana Bibliografía complementaria . Tipo de letra Arial 11. Contenido sin ningún signo de plagio. 2. Como colofón incursionarás en algunas ideas que te permitan desarrollar las tuyas propias acerca de la diferencia que existe entre un microorganismo y un virus. G. Para cumplir esta evidencia de aprendizaje elabora un documento de texto que contenga un ensayo de las propuestas teóricas sobre el virus del VIH y la forma de eliminarlo y la diferencia que existe entre el Virus VIH con respecto a una bacteria. 4. Pidello. Corpus Willey. el Virus del VIH. desarrollo. bibliografía y ligas de web consultadas. (2011) Ecología microbiana. M. así como propuestas científicas actuales para combatirlo. para el cual investigarás algunas teorías que lo caracterizan. 3. Una extensión por lo menos de una cuartilla. Corpus.J.15. conclusiones. A. con los siguientes elementos: 1. introducción. Que incluya Nombre del tema (original). (2009) Microbiología Mc. Fuentes de consulta Bibliografía básica González.

. Segunda Edición. W. Séptima Edición Elsevier Spicer. P. Elsevier .Tortora.2009 Microbiología médica. G. Pearson Education Murray. 2009 Microbiología Clínica Y Enfermedades Infecciosas. et al 2007 Introducción a la microbiología.

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