Licenciatura / Ingeniería en: Biotecnología

Programa de la asignatura Microbiología y Taxonomía Microbiana

Clave 200920416 190920416 ESAD

Unidad 1 Presentación de la unidad

La importancia de estudiar Taxonomía Microbiana radica en conocer las investigaciones y logros científicos, mediante análisis taxonómicos, donde el alumno desarrollará habilidades para identificar los sistemas de clasificación de microorganismos y como es que llevan a cabo su proliferación de tal manera que se apliquen los conocimientos adquiridos para la elaboración de un ensayo

Propósitos El alumno analizará la forma de nombrar a los microorganismos y su importancia dentro del ámbito ambiental e industrial, donde incorporará los conceptos fundamentales de taxonomía microbiana con el fin de entender el desarrollo cuantitativo de las bacterias, lo cual posteriormente le permita desarrollar habilidades para la investigación, resolución de problemas y toma de decisiones.

Competencia específica

Analizar la taxonomía y crecimiento bacteriano mediante la comprensión de sus fundamentos y beneficios para proponer mejoras a los distintos procesos biotecnológicos.

1.1 Definición de taxonomía La Taxonomía es un área de la ciencia biológica que comprende tres disciplinas diferentes: clasificación, nomenclatura e identificación. La taxonomía se divide en microtaxonomía (su objetivo es identificar, describir y delimitar especies) y macrotaxonomía (su finalidad es construir clasificaciones de los taxones y se auxilia de la microtaxonomía) (Solomon et al., 2008). Para llevar a cabo la clasificación de las bacterias los taxónomos bacterianos se vieron forzados a buscar además de las características estructurales, diferentes tipos de propiedades como las bioquímicas, fisiológicas, ecológicas. Dicha clasificación se basa en

está tomando auge una nueva alternativa biotecnológica que podría resolver pronto el problema. taxis. "ordenamiento") es un grupo de organismos emparentados. asignándole al grupo un nombre en latín. que proporcionan una posible base objetiva para la definición de especie bacteriana (Tórtora. de forma que el taxón de una especie es un espécimen o ejemplar concreto. Esto representa un problema adicional para el taxónomo bacteriano. son las técnicas moleculares para la caracterización genotípica bacteriana. 2008). La taxonomía se divide en tres partes: a) Clasificación: es el agrupamiento ordenado de unidades en grupos dentro de unidades mayores. la mayor parte de las bacterias sólo pueden identificarse por lo que hacen y no simplemente por su apariencia. y νοµος. y un "tipo".jpg La Taxonomía (del griego ταξις.org/wiki/Archivo:Carl_von_Linn%C3%A9. 2008). que en una clasificación dada han sido agrupados.atributos funcionales. por lo tanto éste nunca podrá estar seguro de haber llevado a cabo los experimentos adecuados con fines taxonómicos: podría ocurrir que omitiera la realización de ciertos experimentos que indicaran la existencia de agrupamientos significativos dentro de una colección de cepas. . "norma" o "regla") es la ciencia de la clasificación. está relacionada con la Sistemática que se refiere a la clasificación o agrupamiento sistemático de los organismos en grupos o categorías llamados taxa (del griego ταξις. el estudio de estas propiedades funcionales conlleva a la realización de experimentos.wikipedia.. b) Nomenclatura: es la denominación de las unidades definidas y por la clasificación. una descripción. a Linneo se le conoce como el Padre de la Taxonomía que es la ciencia encargada de la clasificación y denominación de la gran variedad de especies existentes (Solomon et al. En el siglo XVII Carlos Linneo desarrollo un sistema de clasificación para nombrar a los microorganismos como una forma de facilitar la comunicación eficaz entre los microbiólogos. nomos. transliterado como taxis. FCarl Von Linneo (1707-1778) desde la web http://es. "ordenamiento". Sin embargo.

Biología sistemática El sistema binomial de nomenclatura que agrupa a las especies dentro de un género común.2. los dos anteriores forman el nombre científico de cada especie. los microorganismos se identifican comparando las características de las unidades desconocidas y las conocidas. estos a su vez se constituyen una familia. bulgaricus. El objetivo del nombre científico es el de poseer un único nombre que deba ser utilizado en todo el mundo. el epíteto especifico los cuales se escriben letra cursiva. regiones. por lo que es preferible usar el nombre vulgar o común ya que suele variar según las localidades. Los nombres científicos son en latín. y la segunda. 2008).1. . las cuales a su vez se agrupan en ordenes.. familiaris. por ejemplo. 1.c) Identificación: hace uso del criterio establecido por la clasificación y nomenclatura mencionados.. Los nombres científicos no son muy usuales. nombre vulgar “perro” y su nombre científico es Canis familiaris o C. la “bacteria causante de la fermentación del yogurt” Lactobacillus bulgaricus o L. las clases en filums ó filo (phylum. latrans. La forma de nombrar a los microorganismos es mediante la clasificación en grupos de una serie grande de microorganismos. 1.1. los filums forman reinos y los reinos dominios (Fig. en cualquier lengua. El epíteto específico siempre debe ir precedido del nombre del género abreviado o completo (Solomon et al..1. botánico y bacteriológico que se basan en determinados principios comunes mediante el sistema de clasificación de Linneo el cual se denomina “sistema binomial de nomenclatura” donde a cada especie se le asigna un nombre compuesto de dos partes: la primera designa el género. puesto que se escriben en latín es muy difícil su pronunciación. la “bacteria que causa el cólera” Escherichia coli o E. 2008). Nomenclatura Respecto a la Nomenclatura existen códigos como el zoológico. para referirse a un único taxón (Solomon et al. plural phyla que es un tipo de organización). los cuales deben parecerse entre sí con un grado mayor de semejanza que los miembros de otro grupo. 2 o Tabla 1) (Solomon et al. o latinizados. coli. 2008). los ordenes en clases.

Grupo de clases relacionadas. 3. Grupo de familias relacionadas. Género Familia Orden Clase Filum o Phylum Reino Dominio Niveles o categoría taxonómica Niveles taxonómicos. Grupo de órdenes relacionadas. . Sé cuidadoso con la ortografía. Descripción: 1. 2. Forma para basarse y editar imagen Actividad 1. Ten cuidado de elegir especies diferentes a las de tus compañeros. Grupo de géneros relacionados.Categoría taxonómico Especie o nivel Características Organismo que solo se puede reproducir con otro de su misma especie Grupo de especies relacionadas. Grupo de phyla relacionados Grupo de reinos. Archivo evolutivo En esta actividad ejercitarás el dominio de nomenclatura según la clasificacióntaxonómica de varias clases de microorganismos. En un documento de texto describe la clasificación taxonómica de dos microorganismos diferentes que tú deberás elegir. Apoya con imágenes el trabajo de información que realizaste 4.

En biología se utilizan árboles parecidos a los genealógicos para representar cómo se encuentran emparentados los organismos vivos. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. En los árboles genealógicos se utiliza información proporcionada por los familiares y para los árboles filogenéticos se usa información proveniente de fósiles.Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos.org/wikipedia/commons/5/55/Phylogenetic_tree-es. 1. Un cladograma es un diagrama representativo en la clasificación biológica taxonómica de los organismos. Árboles filogenéticos La clasificación moderna a menudo recibe el nombre de sistemática. en el que se muestra la relación entre distintas especies según una característica derivada. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional.png . es una forma de cladograma (Solomon et al 2008). Muchos taxónomos utilizan la sistemática ya que tratan de reconstruir la historia evolutiva o filogenia (producción de los filums) de los organismos..wikimedia.3. se les conoce como árboles filogenéticos. 2008). tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. porque se basa en relaciones evolutivas. Los cladogramas son importantes herramientas filogenéticas para el estudio de conceptos científicos. resultado del análisis cladístico de una especie. 3) muestra las relaciones evolutivas entre varias especies u otras entidades que se cree que tienen un ancestro en común. Por lo tanto un árbol filogenético (fig. Árbol filogenético de la vida Editar de la web http://upload.1. así como aquélla generada por la comparación estructural y molecular de los organismos (Solomon et al.

htm Parafilético: si faltan algunos de los descendientes. . 5. Árbol monofilético tomado de la web http://www. 2008). Debido al origen evolutivo de las especies estas pueden tener diferentes formas de árboles filogenéticos y estos pueden ser: Monofiléticos: es un grupo de organismos que tiene un antepasado común con todos y cada uno de sus descendientes.htm Polifilético: si contiene organismos de varios clados.En la figura se explica a manera de árbol filogenético el origen evolutivo de la vida en el planeta. de acuerdo a las características morfológicas de dichos organismos estos van desde las formas sencillas como las bacterias hasta las más complejas como las plantas y animales (Solomon et al.. Árbol monofilético tomado de la web http://www.es/GruposInv/myco-ual/galer13. los cuales han sido incluidos en otros grupos.ual. es decir. se han reunido por conveniencia de los investigadores.ual. que no proceden de un antepasado común cercan. simplemente.es/GruposInv/myco-ual/galer13.

1. Revisa y comenta las aportaciones de tus compañeros(as). En esta actividad profundizarás en el conocimiento de las relaciones que existen dentro del árbol filogenético enfocado a las bacterias patógenas y especies de microorganismos que causan enfermedades comunes en México. De este modo tiene lugar la "duplicación . 2. Actividad 2. 3. Crecimiento individual y poblacional El crecimiento bacteriano implica un aumento ordenado en el número de células (población) y de los componentes celulares de un organismo del estado inmaduro al estado adulto. Responde a la pregunta ¿Cuál es la relación entre ellas? tomando en cuenta su distancia filogenética y metabolismo. el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad. bipartición. incluye inmersamente la división de una bacteria en dos células hijas en un proceso llamado fisión binaria. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. Agrega una nueva entrada y redacta tu listado de 4 especies de bacterias que causan enfermedades en México colocando entre paréntesis que enfermedad provocan.ual. Bacterias fichadas. Dirígete a la base de datos y a continuación: 1.htm Para reforzar lo visto anteriormente sobre árboles filogenéticos realizar la actividad 2. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional.2. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos.Árbol monofilético tomado de la web http://www.es/GruposInv/myco-ual/galer13. las células hijas resultantes serán genéticamente idénticas a la célula original.

La medición de una curva del crecimiento exponencial de las bacterias en un cultivo ha sido tema de estudio de los microbiólogos. Múltiplo miriámetro 1 mam = 10. hablemos primero cuando medimos la longitud de un objeto. Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriología (rama de la microbiología) (Tórtora.001 mm 1 mm = 1000 µm 1 µm = 0. barras (bacilos) y hélices (espirilos) (Fig. fase estacionaria y fase de declive o muerte. y de esta manera podrá aplicar los conocimientos a nivel industrial y ambiental dichos microorganismos para un beneficio específico tomando en cuenta factores del ambiente tanto abióticos como pH. poseen una pared celular compuesta de peptidoglucano estructura básica de la pared celular de las bacterias. estamos viendo cuantas veces entra una unidad de medida en el largo del objeto.01 m Longitudes microscópicas Micrómetro 1µm = 0.local" de la población bacteriana.5 a 5 µm) y diversas formas incluyendo esferas (cocos). (oxigeno). la población bacteriana experimenta un crecimiento exponencial. o por métodos indirectos y en bloque (número más probable (NMP). 2011) Sin embargo.1 m Centímetro 1 cm = 0.000 m hectómetro 1 hm = 100 m Submúltiplos Metro m Decímetro 1 dm = 0. si el número de supervivientes supera la unidad. La unidad de medida de la longitud es el metro (m). métodos directos y masivos (biomasa). absorción de nutrientes). Temperatura en ° C.4. turbidez. depredación y lisis viral (Tórtora. Las bacterias son procariotas (no tienen núcleo definido ni presentan orgánulos membranosos internos). 2008). fase exponencial. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son móviles. Los procesos fundamentales empleados para ello son la enumeración bacteriana (recuento celular) por métodos directos e individuales (microscopía). O2. la molécula es un copolímero formado por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina y el Ácido N-acetilmurámico unidos mediante enlaces β-1.001 mm = 1 × 10-3 . 7). El sistema de unidades de medida que incluye al metro junto a sus múltiplos y submúltiplos se llama Sistema Métrico Decimal (Tabla 2). nutrientes (CHONSP) y bióticos como la competencia por los nutrientes. 2008). Las dos células hijas creadas tras la división no sobreviven necesariamente (Brooks.000 m kilómetro 1 km = 1. presión osmótica. Las células bacterianas son microorganismos unicelulares que presentan un tamaño de unos pocos micrómetros (0. por métodos indirectos e individuales (conteo de colonias). Respecto al tamaño de las bacterias que son microscópicas. El objeto de estudio del biotecnólogo es reconocer de manera teórica el crecimiento bacteriano en un cultivo que conlleva a resumirse en cuatro fases diferentes: fase Log.

que está dirigida por la ADN-polimerasa que se encuentra en los mesosomas. Es importante distinguir el crecimiento individual de células y el crecimiento de poblaciones de células: Crecimiento individual: es el incremento de una célula respecto al tamaño y peso.mm decámetro 1 dam = 10 m Milímetro 1 mm = 0. Editar desde la web http://es. tras la duplicación del ADN.000 001 m = 1 × 106 m 1 m = 10 dm = 100 cm = 1 1 m = 1 000 000 µm mm Conversiones para determinar las diferentes longitudes Morfología de las bacterias. También presentan reproducción sexual o parasexual (intercambian fragmentos de ADN) (Tórtora.jpg Generalmente el crecimiento de las bacterias es porque se reproducen ya sea por bipartición o fisión binaria (forma asexual).001 m 1 µm = 0. la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias. es usualmente un preludio a la división celular Crecimiento poblacional: es el incremento en el número de células como una consecuencia del crecimiento y división celular El crecimiento microbiano se divide principalmente en cuatro etapas que son (fig. 2008).wikipedia.org/wiki/Archivo:Morfolog%C3%ADa_bacteriana. 8): .

El crecimiento continuará hasta que uno o más nutrimentos se agoten.que es la base de los logaritmos de Neper. Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante (tasa = relación entre la cantidad y la frecuencia de un fenómeno). Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan diferentes que las células sean genéticamente incapaces de sobrevivir. el cual es un número importantísimo en la naturaleza que vale e = 2. o hasta que se acumule tal cantidad de metabolitos tóxicos que se inhiba el crecimiento. En esta fase las células se encuentran en un estado de crecimiento sostenido. por ejemplo. En esta fase. (2007) a) Fase Lag. la potencia será 24 lo cual equivale a 2x2x2x2 = 16. por lo tanto sus potencias se escriben y = ex o x = ey . 2008). b) fase exponencial. c) fase estacionaria y d) fase de declinación o muerte. a) Fase Lag o de Rezago.7182818284.Etapas del crecimiento bacteriano Tórtora et al. b) Fase Exponencial. y obviamente se requerirá más tiempo para que éstas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el aumento de células (Tórtora. Para el caso del crecimiento microbiano por razones y resultados experimentales la base de potencia que se considera es el número –e. En este lapso de tiempo se forman las enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento (Tórtora. las células microbianas no tienen muchos metabolitos y enzimas. es decir crece muy rápidamente en el tiempo.X a un determinado –exponente. El nutrimento limitante para los organismos aerobios suele ser el oxígeno: cuando la concentración bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 ml es necesario incrementar el ingreso de .“y” (xy). Este periodo consiste en la adaptación de las células microbianas a su nuevo ambiente. si la base x es igual a 2 y el exponente y es igual a 4. 2008). Matemáticamente exponencial se refiere elevar un número o -base. pero éste material es en sí catalítico y la masa aumenta de manera exponencial. por lo que sólo unas cuantas mutantes podrán subsistir. debido a las condiciones desfavorables que representaba el cultivo previo.

1. para una célula microbiana. La duración de esta fase depende de la naturaleza del microorganismo y de las condiciones del medio. la tasa de difusión de oxígeno no puede satisfacer las demandas aun en un medio aireado. 2008). la cifra de células viables se mantiene constante. misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido. muerte significa la pérdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse).2. Dicha persistencia puede deberse a que las células consiguen crecer gracias a los nutrimentos liberados por las células que mueren y se lisan. observándose recambio celular (Tórtora. por lo que un número pequeño de sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses o años. El tiempo juega un papel muy importante para que la célula se divida en dos. Tasa de crecimiento: es el cambio del número de células o masa por unidad de tiempo Generación: intervalo para la formación de dos células provenientes de una. 2008). dicha pérdida se compensa exactamente por la formación de nuevas células a través de crecimiento y división. lo cual se comprueba cuando una célula es incapaz de producir una colonia en cualquier medio. si se cuentan también las muertas (Tórtora. A diferencia del crecimiento exponencial. una vez que la mayoría de las células ha muerto. Por lo general en esta fase se observa recambio celular. Así. pero cuando la concentración alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml. 1. el crecimiento lineal sólo implica que se está aumentando en solo una unidad la masa con respecto al tiempo. Tasa de crecimiento y tiempo de generación El crecimiento microbiano que es el cambio en el número de células por unidad de tiempo determinada. la tasa de mortalidad disminuye bruscamente. aunque en realidad en el conteo aumente poco a poco el número de células. por lo que el crecimiento disminuye progresivamente (Tórtora. 2008). Para comprender lo anterior debemos considerar que. Ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulación de metabolitos tóxicos el crecimiento cesa por completo después de un periodo de decrecimiento en la tasa de crecimiento. el cual puede ser desde minutos. horas y hasta días. c) Fase Estacionaria. Por lo general. aunque existe una pérdida lenta de células por muerte.oxígeno mediante agitación o burbujeo. De lo anterior se deriva que designar a una célula microbiana como muerta no implica su destrucción física. . lo cual se debe a que. d) Fase de Declinación y/o Muerte. Esta fase representa el decremento de células debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad.

Crecimiento sincrónico: todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase del crecimiento celular. 2008). Los cultivos sincrónicos son muy difíciles de mantener por lo que su importancia está principalmente ligada a los estudios básicos de biología microbiana. b. y el valor que esta toma se interpreta como los gramos de biomasa producidos por cada gramo de biomasa preexistente creados en una hora. 2008). Factores que influyen en el crecimiento a. como ocurre en la curva del crecimiento. O2. Crecimiento exponencial y sincrónico El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos los individuos de dicha población. si graficamos el logaritmo de la concentración de la biomasa (o celular) en función del tiempo. en la naturaleza. Crecimiento exponencial: durante el crecimiento exponencial. se puede obtener multiplicando la constante de la tasa de crecimiento por la concentración de biomasa.2. De lo anterior se deriva que.Tiempo de generación: tiempo que tarda una población en duplicarse. obtendremos una línea recta como representación de esta fase (Tórtora. T° (en escala centígrada = grados centígrados ° C). disponibilidad de H2O. la tasa de crecimiento de las células (medida en gramos de biomasa producida por hora). El crecimiento se denomina exponencial porque la biomasa se incrementa exponencialmente con respecto al tiempo. Factores internos Capacidad metabólica 1.2. Sin embargo. azufre y otros microelementos. durante cierto tiempo las poblaciones naturales probablemente se comporten como relativamente sincrónicas (Tórtora. cuando el crecimiento no es limitado por los nutrimentos. Factores externos Condiciones ambientales o culturales: pH. Se puede definir también como la cantidad de tiempo requerida para completar un ciclo de división. La constante de la tasa de crecimiento es la tasa a la cuál las células producen más células. . CO2 y tiempo. las bacterias del suelo se encuentran en condiciones de crecimiento próximas a la fase estacionaria (en la que se produce una cierta sincronización del cultivo) y. 12:1. por consiguiente. Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1.

hemocitómetro.3. Conteo de células viables: una célula viable es definida como aquélla que es capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultivo. Pueden ser: Diseminación en placa (siembra en placa por extensión). 2011). Dispositivo graduado para el conteo de células bacterianas Tomado de la web para editar 2). Recuento de células 1) Conteo de células al microscopio: se emplea un dispositivo graduado con 25 cuadrados cuyo volumen y área es conocido: Cámara de Petroff-Hausser. Formas de visualizar el crecimiento bacteriano Caja petri autoría nuestra de practica en el laboratorio (crecimiento bacteriano colonias blancas) y Tubos de ensaye color amarillo indica presencia de colonia A. Determinación del crecimiento Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos. Limitaciones: ∗ Es muy cansado. contando el número de colonias uno puede calcular el número de células viables en la muestra. . no es práctico para un gran número de muestras. Existen varios métodos para contar las células o estimar la masa de éstas (Brooks. cámara de Neubauer.1. Se asume que cada colonia surgió de una simple célula.2. Se mide por cambios sucesivos en el número de células o por el peso de la masa de las células. se necesitan al menos 106 bacterias/ml para que sean observadas al microscopio ∗ No distinguen células vivas de muertas. El conteo en placas es el método más utilizado. ∗ No es muy sensible.

cuya cuantía depende a su vez de la forma y tipo de agrupaciones de la cepa. Métodos indirectos 1. 1 mg de peso seco equivale a unas 5x109 bacterias. ∗ Inconvenientes: método tedioso (requiere mucho tiempo) y con bastantes errores: es difícil pesar menos de 1 mg con exactitud en las balanzas habituales de laboratorio. Las medidas de peso seco suelen representar el 10-15% de los valores de peso húmedo.2. Medida de masa microbiana Métodos directos: estos métodos requieren preparaciones limpias. Determinación del nitrógeno total: técnica de micro-Kjeldahl.Método de vaciado en placa. hasta peso constante. proteínas. Determinación de un componente característico: peptidoglucano. Determinación del peso seco: como el anterior. Determinación del peso húmedo: ∗ se tara (calibrar hasta que la balanza especifique el peso real) un tubo de centrífuga ∗ se centrifuga el cultivo y se elimina el sobrenadante ∗ se determina el peso del sedimento. pero el sedimento se seca antes de ser pesado (105oC. ARN.4. ∗ Inconvenientes: grandes errores. Producción de ácidos. toda la noche). Ejemplos: consumo de oxígeno (QO2) y consumo de carbónico (QCO2). Medida de consumo de nutrientes o de producción de algún metabolito por unidad de tiempo. determinados por el respirómetro de Warburg. 4. Forma de contar células bacterianas en placas de agar Imagen para editar tomada de la web 1. ADN. 1. debido al líquido intercelular retenido. entre otros. sin partículas extrañas. 3. 2. . etc. intensidad del empaquetamiento.

= A = -logT/100 donde T= transmitancia C) Nefelómetro: Es un aparato similar al anterior. Posee mayor sensibilidad que el espectrofotómetro. en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba. La muestra. una vez dispensada entre el porta y el cubre. O sea. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de SO4H2 al 1%}.). y se cuenta el número de células en varias celdillas (normalmente en 16. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. pero el dispositivo sensor está situado en ángulo recto respecto de la dirección de la luz incidente. origen de la turbidez. Cámara de recuento de Petroff-Hauser: Consiste en un portaobjetos especial con una graduación en superficie y unas medidas muy concretas: excavación con 0. Métodos turbidimétricos (ópticos). se deja reposar sobre la plataforma del microscopio durante unos minutos.02 mm de profundidad área de 1 mm2. Medición de luz transmitida: • Escala de MacFarland: Se trata de una serie de patrones de turbidez (no son claros o transparentes como el agua) previamente calibrados. La base común de estos métodos consiste en la medición de la cantidad de luz dispersada o transmitida a través de un cultivo bacteriano. en cada tubo se origina un precipitado de SO4Ba. la muestra se distribuye en 16X25 = 400 celdillas (cuadros pequeños).5. Se anota el número n de células observadas .2. equivalentes a uno de los cuadros grandes). por lo tanto. • • 1.2. Para cada cepa bacteriana hay que establecer la equivalencia entre la turbidez de cada tubo y la masa o la concentración de bacterias (en céls/ml) que genera una turbidez similar. y lo que se mide es pues. 3. Medida del número de individuos Métodos directos 1. Espectrofotómetro: Este aparato es de uso habitual en cualquier laboratorio de Microbiología o Bioquímica. por lo tanto.O. origen de la turbidez. la luz dispersada directamente por la preparación. Se trata de una serie de patrones de turbidez previamente calibrados. Consiste en varios tubos de vidrio herméticamente cerrados que contienen {1% de Cl2Ba + cantidades crecientes de H2SO4 (ácido sulfúrico) al 1%}. D.O. dividida en un retículo de 25 cuadrados grandes cada cuadrado grande está subdividido a su vez en 4x4 = 16 cuadrados pequeños. es decir la absorbancia. Mide la densidad óptica (D.

hay que inmovilizarlas previamente. ej. Es una sofisticada modificación en la que las partículas a contar se marcan previamente con un anticuerpo monoclonal anticuerpo homogéneo producido por una célula híbrida producto de la fusión de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoralu otro ligando específico hacia alguna molécula de superficie. La concentración bacteriana se deduce de la proporción de bacterias y partículas observadas en el mismo campo microscópico. que detecta el número y el tamaño de las partículas que van pasando. Este método se emplea más frecuentemente en Virología. 4. entre los dos polos de una corriente eléctrica. Si en dicho campo se cuentan n bacterias. Se observa con un microscopio dotado de un juego de ocular y objetivo que delimitan un área de campo (Ac). bacteria) se interrumpe la corriente. Entonces. .. 2. Cada vez que por un orificio (30 mm diámetro) pasa una partícula (p. Recientemente se ha introducido la citometría de flujo activada por fluorescencia (FACS). la concentración celular es fácil de establecer: n x 25 x 50 x 1000 = concentración en células/ml. la concentración de bacterias por mililitro será: n·At/Ac· 1/v 3. Contadores electrónicos de partículas (tipo Coulter): Se hace pasar una suspensión bacteriana por un tubo capilar. una molécula que emite fluorescencia al incidir sobre ella un haz de luz láser. En bacterias móviles. Ventajas: es un método muy rápido Inconvenientes: sólo sirve para suspensiones relativamente concentradas (>10x106 céls. Por debajo de este valor el número de células vistas en el campo del microscopio es muy pequeño y poco significativo estadísticamente. y se fija y tiñe por algún colorante. Recuento proporcional de Wright: Se mezcla la suspensión bacteriana problema con una cantidad conocida de bolitas de látex o de hematíes (células sanguíneas = sangre). (El tamaño detectado es función de la intensidad del pulso de voltaje al paso de la partícula). Métodos indirectos: Son métodos que miden el número de bacterias viables (que no equivale al de totales)./ml). Sobre esta excavación se extiende la muestra con asa de siembra o con micropipeta. unidos a su vez a un fluorocromo.en esas 16 celdillas. con una mezcla de alcohol y agua. lo cual es recogido por un dispositivo de registro electrónico. Recuento en preparaciones teñidas: Se dispone de un porta con una excavación circular (de área At) con un volumen conocido (v).

Entonces. Las colonias se forman sobre el filtro y se cuentan. tras el tiempo de incubación adecuado se anota la proporción obtenida de muestras donde no se haya dado crecimiento. Método del número más probable: Su fundamento estriba en la distribución de Poisson: una distribución aleatoria de partículas en una serie de muestras iguales. • Precauciones: ∗ para minimizar los errores estadísticos de muestreo (para que los resultados san concretos y creibles). . ∗ hay que usar pipetas nuevas en cada dilución ∗ contar las placas donde existan entre 50 y 300 colonias 7. según la distribución de Poisson: P0= e—m y por lo tanto es fácil calcular el valor de m: m = -lnP0 Figura 12. Se hace pasar un gran volumen de suspensión a través de una membrana de nitrocelulosa estéril. Recuento sobre filtros de nitrocelulosa: Se usa para suspensiones diluidas de bacterias. el filtro se deposita sobre la superficie de un medio de cultivo sólido. La técnica consiste en sembrar alícuotas de la suspensión original problema sobre un medio líquido o sólido adecuado. y además la realizará en las prácticas. 8. en función del número medio de partículas presentes en una suspensión (presencia y ausencia de microorganismos). Determinación de la proporción células viables/células totales: Si se está interesado en conocer esa proporción se recurre a una técnica de microcultivos en cubreobjetos: hay que seguir periódicamente la evolución del crecimiento de células individuales y determinar la proporción de aquellas células no viables (visibles al microscopio. deduciéndose la concentración original en función del volumen de suspensión que se hizo pasar por el filtro. Recuento de viables en placa: Como esta técnica será explicada al alumno en clase. Conteo de numero más probable (NMP) para bacterias Editar de la web http://www. se recomienda sembrar 5 placas de cada dilución. Posteriormente. que retiene las bacterias. pero incapaces de crecer). P0 (x = 0). porque llega haber ocasiones en donde no crece nada.pdf 6. remitimos a las pertinentes explicaciones "en vivo". Es una de las técnicas de recuento más usadas en la rutina del laboratorio de Microbiología.uprm.edu/biology/profs/massol/manual/p4nmpenumeracion.5.

4. tu formación exige que desde esta etapa todo producto o tarea que reportes sea totalmente original y propio de tu iniciativa y creatividad. 3. Enlaces cruzados. Un mundo raro… Esta actividad representa uno de los mayores retos pues implica crear un mapa conceptual (MMCC) en el cual reflejarás tu dominio de los temas anteriormente vistos. 2.conectores son palabras o preposiciones insertas entre dos conceptos y son útiles para producir nuevas proposiciones o enunciados con sentido. 3..es el orden en ascendente-descendente en función de la complejidad de los conceptos o proposiciones tratados en la arborización del MMCC. 4. Concepto o idea original Palabras clave Conectores Conectivos y palabras de conexión Conceptos en diferentes niveles en este caso puedes desarrollarlo mínimo en tres niveles De esta manera a partir del concepto o idea de origen ocurre: 1. para que en lo sucesivo esta actitud se proyecte directamente en tu práctica profesional. al construirlo describirás en él las relaciones entre los conceptos de la microbiología relacionados con las fases de crecimiento bacteriano y sus formas de medirlo. Nota: Te exhortamos atentamente a abstenerte de cualquier acción de plagio o copia de contenidos. Conectores y proposiciones. Desprendimiento de conceptos secundarios 2.Actividad 3. Jerarquización. 5. además de la morfología bacteriana.. . el facilitador puede detectar esta situación sin dificultad.son puentes entre proposiciones dentro de la arborización.. En un documento de texto o archivo de imagen plasma un mapa conceptual que contenga las siguientes características: El mapa conceptual debe presentar una estructura arborescente que incluya los siguientes aspectos: 1.

Corpus. A. Para cumplir esta evidencia de aprendizaje elabora un documento de texto que contenga un ensayo de las propuestas teóricas sobre el virus del VIH y la forma de eliminarlo y la diferencia que existe entre el Virus VIH con respecto a una bacteria. Como colofón incursionarás en algunas ideas que te permitan desarrollar las tuyas propias acerca de la diferencia que existe entre un microorganismo y un virus. 4. conclusiones. Graw Hill / Interamericana Bibliografía complementaria . desarrollo. Para ello enfocarás tus conocimientos en un agente patógeno que ha traído consecuencias fatales a la especie humana. Contenido sin ningún signo de plagio. interlineado 1.Evidencia de Aprendizaje Mi extinción Esta actividad implica que exteriorices en un cuerpo de ideas e información todo lo que haz profundizado en conocimientos de esta asignatura. el Virus del VIH. Que incluya Nombre del tema (original). G. bibliografía y ligas de web consultadas.15.J. 3. 2. para el cual investigarás algunas teorías que lo caracterizan. con los siguientes elementos: 1. Una extensión por lo menos de una cuartilla. Fuentes de consulta Bibliografía básica González. (2007) Microbiología ambiental. Pidello. Corpus Willey. (2009) Microbiología Mc. M. introducción. Tipo de letra Arial 11. (2011) Ecología microbiana. así como propuestas científicas actuales para combatirlo.

Segunda Edición. G. 2009 Microbiología Clínica Y Enfermedades Infecciosas. Pearson Education Murray. W.2009 Microbiología médica. Séptima Edición Elsevier Spicer. P. et al 2007 Introducción a la microbiología. Elsevier ..Tortora.

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