Bacilos Gram

A famlia Enterobacteriaceae contem a maioria dos bacilos Gram- clinicamente importantes Apesar da sua complexidade menos de 20 espcies so responsveis por cerca de 95% das infeces Encontram-se no solo, na gua, na vegetao e fazem parte da flora intestinal normal de muitos animais, incluindo os humanos So responsveis por cerca de 30-35% de todas as septicemias, por mais de 70% das infeces do tracto urinrio e por muitas das infeces intestinais Os organismos: - so sempre patognicos (p.ex. Salmonella tiphi, Shigella, Yersinia pestis) - so comensais (p.ex. Escherihia colli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis) - so comensais mas tornam-se patognicos quando adquirem factores de virulncia atravs de bacterifagos, plasmdeos ou ilhas de patogenicidade (p. ex. E. coli associada gastroentrite) Transmisso das infeces: - reservatrio animal (ex. Salmonella, Yersinia) - portador humano (S. tiphi, Shigella) - proliferao dos agentes comensais em indivduos imunodeprimidos (p.ex. E. coli) Caractersticas comuns: - Bacilos Gram- Antignio comum das Enterobacteriacea - No esporulados - Crescem rapidamente em meios no selectivos como o agar-sangue ou em meios selectivos como o MAC (excepo Kleibsiella granulomatosis, que no cresce em meios tradicionais) - Catalase positivos - Oxidase negativos (importante na sua deteco; excepo Plesiomonas shigelloides) - Requerimentos nutricionais simples - Fermentam a glicose - Reduzem os nitratos a nitritos Podem: - Mveis ou imveis (a maioria so mveis com excepo de Klebsiella, Shigella e Yersinia; as mveis so pertricas) - Aerbios, anaerbios ou anaerbios facultativos - Algumas estirpes podem fermentar a lactose (p.ex. E. coli, Klebsiellam, Enterobacter, Citrobacter e Serratia) - Os agentes comensais so inibidos pelos sais biliares, ao passo que os patognicos oferecem resistncia aos mesmos - Ter cpsula (Escherichia, a maioria das Klebsiella, e algumas Enterobacter) - Possuir fmbrias

Antignios: - LPS: polissacardeo O (aglutinvel por IGM e especifico da espcie) + antignio comum s Enterobacteriaceae + lipdeo A - Antignio comum s Enterobacteriaceae aparece tambm como um glicolpido livre na membrana externa Classificao Serolgica: - Polissacardeo O: algutinvel por IgM; reaces cruzadas entre gneros prximos (p.ex. Salmonella e Citrobacter, Escherichia e Shigella) - Antignio capsular K: termo-lbeis; inibem a aglutinao dos Atg O e H - Protenas flagelares H: algutinveis por IgG, termo-lbeis, podem estar ausentes ou sofrer variao antignica de estarem presentes em duas fases Patognese e Imunidade: - Endotoxina (partilhado pelas bactrias Gram- aerbias e algumas anaerbias; a sua actividade depende do lipdeo A do LPS; responsvel por muitos dos efeitos sistmicos das infeces por bastrias Gram-: libertao de citoquinas, leucocitose, trombocitopenia, CID, febre, diminuio da circulao perfrica, choque, morte) - Cpsula - Variao fsica de antignios: e expresso dos antignios K e H est sob controlo gentico do organismo, podendo cada um deles ser alternadamente expresso ou mesmo no expresso, o que protege a clula da morte mediada por anticorpos) - Sistemas de secreo tipo III - O ferro um importante factor de crescimento para a bactria, estando ligado protena heme (hemoglobina ou mioglibina) ou a protenas quelantes (p. ex. transferrina ou lactoferrina). Bactrias produzem os seus prprios siderforos ou compostos quelantes do ferro (enterobactina, aerobactina), ou atravs da produo de hemolisina que liberta o ferro da clula hospedeira

E. coli:
Gnero: Escherichia 5 espcies: E. coli clinicamente a mais importante - septicemias, gastroenterites, meningite neonatal, infeces urinrias Presente no nosso tracto gasto-intestinal A maioria das infeces por ela provocadas (salvo as gastroenterites e as meningites neonatais) so endgenas E. coli responsvel pela gastroenterite e pelas infeces urinrias possuem factores de virulncia especializados: Adesinas: permitem que a bactria permanecia nos tractos gastrointestinal e urinrio uma vez que capaz de aderir s clulas, no sendo eliminada na urina nem com a motilidade intestinal. Adesinas especializadas: antignios factores de colonizao (CFAI, CFAII, CFAIII), fmbrias agregativas de aderncia (AAFI, AAF III), pilli formadores de feixes (Bfp), antignio do plasmdeo de invaso (Ipa), fmbrias Dr, pilli P, intimina

Exotoxinas: toxinas termo-lbeis (LTI, LTII), toxinas termo-estveis (STa e STb), toxinas Shiga (Stx-1, Stx-2), hemolisinas Septicemia: - Originam-se a partir de infeces do tracto urinrio e do tracto gastrointestinal, que disseminam atravs do sangue - Mortalidade aumentada em pacientes imunodeprimidos ou cuja infeco primria se deu no abdmen ou no SNC Infeces Urinrias: - A maioria devem-se a passagem de E. coli do clon para a uretra, ascendendo para a bexiga, rim ou prstata - Capazes de produzir adesinas (plilsP, fmbrias Dr, e AAFI, AAFIII) e hemolisinas (lise de eritrcitos e outros tipos clulas com libertao de citoquinas e estimulao da resposta inflamatria) Meningite Neonatal: - S. coli e Streptococci do grupo B causam a maioria das infeces no SNC em crinaas com idade inferior a 1 ms - cerca de 75% da E. coli possui o Atg K1 (normalmente presentes no tracto gastrointestinal de mulheres grvidas e de recm-nascidos) Gastroenterites: As estirpes de E. coli que causam gastroenterites esto subdivididas em 5 grandes grupos: EPEC: - afecta sobretudo crianas em pases empobrecidos - diarreia - Sistema de Secreo III; Ilha de patogenicidade LEE; bactria adere inicialmente a um pedestal atravs de ligaes fracas pelos seus pilli formadores de feixes, intruduz o receptor Tir das intiminas; destruio das microvilosidades no local de ligao da bactria ETEC: - afecta crianas em pases em desenvolvimento e viajantes dos mesmos (diarreia do viajante) - LTI e LTII; subunidades B de LTI ligam-se ao receptor GM1 (recptor da toxina colrica diagnstico diferencial da clera), subunidade A interage com protena Gs da membrana, estimulao da adenilcclase, aumento do AMPc, aumento da produo de clorido e diminuio da absoro de Na+ e de clorido - Sta e STb; s a STa est associada com a doena humana, liga-se a um receptor acoplado guanilcclase, aumento da produo de GMPc com hipersecreo de fluidos - so tambm necessrios factores de colonizao, para alm das toxinas EHEC: - Quadro clnico de diarreia que evolui colite hemorrgica, podendo originar Sndrome Hemoltico-Urmico (HUS)

- Toxina Shiga (Stx1 e Stx2); ligao das subunidades B a GB3 nas vilosidades intestinais (Stx1) e nas clulas endoteliais renais (Stx2); subunidade A internalizada e clivada em 2 molculas; A1 liga-se ao rRNA 28S na subunidade ribossomal 60S, impedindo a ligao da aminoacil transferase e impedindo a sntese proteica. No endotlio renal a ligao leva activao de plaquetas e deposio de trombina, que perturba a filtrao glomerular e leva a falncia renal aguda (HUS) - As toxinas Shiga estimulam ainda a lubertao de Citoquinas inlfamatrias - Ao contrrio da maioria das E. coli muitas estirpes 0157 no fermentam o sorbitol (Col sorbitol negativas) EIEC: - Diagnstico diferencial de Shigella - Diarreia por Ulcerao do clon - Destoem as clulas do clon, invandindo-as, lisando o vacolo fagoctico e replicando no citoplasma da clula, movendo-se atravs de caudas de actina para invadir clulas vizinhas EAEC: - Diarreia em crianas de pases em desenvolvimento e em viajantes para esses pases - Fmbrias formadoras de feixes permitem a adeso da bactria, levando a um aumento da secreo de muco, que encurrala a bactria sobre o epitlio do intestino delgado, com encurtamento das microvilosidades, infiltado mononuclear e hemorragia

Salmonella:
Gnero Salmonella com duas espcies: Salmonella entrica e Shingella bongori O seu aparecimento no homem sempre patognico Transmisso por ingesto de gua ou alimentos contaminados Os serotipos S. typhi e S. paratyphi esto altamente adaptados a humanos e no provocam doena em hospedeiros no humanos Outros serotipos s provocam doena em hospedeiros no humanos Outros serotipos no so especficos quanto ao hospedeiro - Possuem 2 sistemas de secreo SPI1 e SPI2. SPI1 insere nas clulas M das placas de Peyer do intestino delgado as protenas bacterianas Sips ou Ssps, do que resulta um pregueamento da membrana celular por rearranjo da actina. Esta membrana pregueada envolve a bactria e captura a Salmonella, que se replica no interior do fagossoma, levando a morte da clula hospedeira, e espalhando-se para invadir as clulas vizinhas - Medeiam a produo de prostaglandinas e estimulam a andenilciclase levando a secreo activa - Possuem um gene de tolerncia ao cido (ATR), o que lhes permite sobreviver ao pH cido do estmago e do fagossoma - So catalase e superoxido dismutase positivas, o que lhes permite resistir morte intracelular Geralmente so mveis

Produzem cido e gs a partir de glicose a manitol So urease negativas So lactose e sacarose negativas Geralmente produzem H2S Os seus antignios capsulados so do tipo Vi Provas bioqumicas de excluso: - colnias lactose negativas com H2S - Kliger + ureia (KU) ou TSI + ureia Podem provocar: - gastroenterite (geralmente por S. typhimurium e S. enteritidis, que so salmonelas adaptas aos animais mas que acidentalmente afectam o homem): hemoculturas negativas, coprocultura (sementeira em meios selectivos MAC, SS, caldo tetrationato pois as bactrias patognicas esto em minoria no meio da flora intestinal) - septicemia (sobretudo as espcies S. typhi, S. paratyphi e S. cholerasuis, sendo este risco mais elevados em crianas, idosos e imuno-deprimidos) - colonizao assintomtica - febre entrica (febre tifide, causada pela S. typhi; febre paratifide, causada pela S. paratyphi, S. schottmuelleri, S. hirschfeldii; ao contrrio das outras infeces por Salmonella, as bactrias responsveis pela febre entrica passam atravs das clulas epiteliais do intestino e so capturadas por macrfagos, multiplicando-se aps serem transportadas para o fgado, bao e medula ssea) Diagnstico: hemocultura (durante a primeira semana, na primeira fase da doena, quando as bactrias andam em circulao antes de entrar nas placas de Peyer e no sistema mononuclear-monoctico); reaco de Widal (na segunda semana; pesquisa de anticorpos antiantignios O, H e Vi); Coprocultura (comprovao da cura, vo sendo eliminadas pelo tracto intestinal; portador da bastria aquele que continua a eliminar a bactria aps um ano de ter tido a dona)

Shigella
Gnero Shigella com quatro espcies: S. dysenteria, S. flexneri, S. boydii, S. sonnei Quando presente sempore patognica Transmisso: gua contaminada, comida, mosca, pessoa a pessoa (via oral fecal) S sonney a causa mais comum de shigelose no mundo industrial, ao passo que S. flexneri a causa mais comum de shigelose nos pases em desenvolvimento Geralmente limitada ao tracto gasto-intestinal (raramente invade o sangue) Inicialmente invadem clulas M das Placas de Peyer do Intestino delgado. Sistema de secreo tipo III que introduz nas clulas epiteliais e nos macrfagos 4 tipos de

protenas: IpaA, IpaB, IpaC e IpaD. Estas protenas induzem o pregueamento da membrana clulas, capturando a bactria no interior da clula. A shigella lisa o vacolo fagoctico e replica no interior do citoplasma da clula hospedeira, usando os filamentos de actina para se movimentar e passar para clulas vizinhas atravs de junes de hiato. Assim, a Shigella est protegida do sistema imunitrio. A Shigella induz apoptose das clulas, induzindo a libertao de IL-1, atraindo polimorfonucleados, distabilizando a integridade da parede intestinal e permitindo bactria atingir clula epiteliais localizadas mais profundamente. A S. dysenteria produzem a exotoxina Shiga, que actua de modo semelhante s produzidas pela EHEC: Inicialmente provoca diarreia, mediado pela enterotoxina, evoliundo para dores severas no estmago e tenesmo com abundante pus e sangue nas fezes.

Diagnstico: coprocultura, sementeira em meios selectivos (MAC, SS), kliger + ureia ou TSI + ureia

Yersinia
O gnero Yersinia contm 11 espcies, sendo que a Y. pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis so as espcies patognicas para humanos mais conhecidas. Y. pestis altamente virulento causando doena sistmica com elevada taxa de mortalidade Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis so principalmente patognios entricos e que raramente se isolam do sangue So intracelulares facultativas Invadem clulas epiteliais, macrfagos e sistema monoctico-fagocitrio As espcies patognicas do gnero Yersinia so resistentes morte por fagocitose atravs do seu sistema de secreo do tipo III: em contacto com as clulas fagocticas as bactrias secretam protenas para o interior da clula fagoctica que desfosforilam vrias protenas necessrias fagocitose (gene YopH), induzem citotoxicidade ao disromperem filamentos de actina (gene YopE) e iniciam a apoptose em macrfagos (gene YopJ/P). O sistema de secreo tipo III tambm suprime a produo de citoquinas, diminuindo assim a resposta inflamatria infeco. Y. pestis contm dois plasmdeos adicionais que codificam genes de virulncia: gene F1 que codifica uma cpsula proteica anti-fagoctica e o gene do activador do plasminognio (Pla), que degrada os factores do complemento C3b e C5a, impedindo, deste modo, a opsonizao e a migrao fagoctica, respectivamente. O gene Pla tambm degrada a fibrina, permitindo que a Y. pestis se espalhe rapidamente. Existem ainda outros factores de virulncia que conferem Y. pestis resistncia ao soro e a capacidade de absorver ferro orgnico por um mecanismo independente de sideroforos

As manifestaes clnicas da Y. pestis so a Peste Buvnica (por picada de mosca, originando febre alta e adenopatias) e a Peste Pneumnica (inicialmente com febre e mal estar mas posteriormente com sintomatologia pulmonar, podendo o contgio ocorrer de pessoa para pessoa atravs de aerossis) Cerca de dois teros das infeces por Y. enterocolitica so enterocolites, originando febre, diarreia e dor abdominal, envolvendo sobretudo o leo terminal e com adenopatia dos ndulos linfticos mesentricos, podendo mimetizar uma apendicite aguda. Y. pseudotuberculosis pode originar um quadro clnico semelhante. Os organismos Yersinia podem crescer a 4C, podendo, por isso, crescer em meios ricos em produtos de sangue armazenados no frigorfico.

Klebsiella
Os membros do gnero Klebsiella tm uma cpsula proeminente, pelo que as colnias isoladas ttm um aspecto mucide As espcies mais frequentemente isoladas so K. pneumoniae e K. oxytoca, que podem originar pneumonia lobar primria (com destruio necrtica dos espaos alveolares, formao de cavidades e hemopstises). Os alcolicos e pessoas com funo pulmonar comprometida tm risco acrescido de ter pneumonia devido sua incapacidade de limpar as secrees orais aspiradas do seu tracto respiratrio baixo. Podem ainda causar infeces do tracto urinrio. K. granulomatis o agente do granuloma inguinal, uma doena granulomatosa que afecta as reas genitais e inguinais. O diagnstico laboratorial de K. granulomatis faz-se atravs da colorao de Wright ou Giemsa. So sensveis s Tetraciclinas, eritromicina e trimetoprimsulfamethoxazole

Proteus:
P. mirabilis um organismo comensal Responsvel por infeces do tracto urinrio pois produz uma grande quantidade de ureas (urease positivos) e, que transforma a ureia em dixido de carbono e amnia. Este processo aumenta o pH urinrio e facilita a fornao de pedras renais. O aumento da alcalinidade da urina tambm txico para o epitlio urinrio. So lactose negativos Certas estirpes partilhas atg especficos com algumas rickettsias Os pilli de P. mirabilis podem diminuir a sua virulncia ao aumentar a fagocitose por parte das bactrias. Provocam ainda bacteremias, penumonia, infeces localizadas e infeces nosocomiais Apresentam crescimento invasor em meios slidos

Meios que impedem o crescimento invasor: - sais biliares ou detergente - menor teor de NaCl (Cled pobre em electrlitos) - aumento da concentrao de agar

Enterobacter, Citrobacter; Morganella, Serratia

As infeces por estes organismos so raras em indivduos imunocompetentes, sendo mais comuns em crianas no erodo neonatal e em imunodeprimidos. A teraputica com antibiticos pode no ser eficaz uma vez que estes organismos so frequentemente resistentes a mltiplos antibiticos

Diagnstico laboratorial:
Colheita do produto biolgico: - Urina (no caso de infeces urinrias) - Fezes (em caso de gastroentrites) - Hemocultura - LCR (em caso de meningite) Tcnica de Gram Exame cultural: - Crescem bem na maioria dos meios: agr-sangue, agr chocolate, brain-heart, Cled, triglicolato - Meios selectivos (sobretudo nas coproculturas): Mac Conkey, agar salmonella-shigella (SS), gelose de Hektoen (Salmonella e Shigella), gelose de xilose-lisina-desoxicolato (Salmonella e Shigella) caldo tetrationato (Salmonella), gelose CIN (selectivo para Yersinia), agar mc Conkey sorbitol para E. coli 0157:H7 - incubao em atmosfera de aerobiose surante 18h-24h a 35C, Yersinia 25-30C durante 48H Provas bioqumicas: - Com testes geralmente comercializados (qualquer sistema comercial de identificao pode ser utilizado para a identificao das Enterobacteriaceae e podem-se obter resultados dentro de 4 a 24 horas, consoante o sistema utilizado) - Em alternativa utilizao dos testes comercializados, a maioria das Enterobactericias pode ser identificado presuntivamente utilizando um nmero reduzido de substractos Prova da Fermentao da Glicose Aps incubao, a libertao de compostos cidos, resultantes da fermentao do hidrato de carbono, faz descer o pH o que conduz mudana da cor original do meio, pois est presente um indicador de pH (reaco positiva). Em alguns casos, a produo de cido acompanhada pela produo de gs (CO2) que visvel, pois o meio lquido que estava dentro do tubo de Durham substitudo por gs em forma de bolhas.

As culturas que no so capazes de fermentar o hidrato de carbono no conduzem mudana de cor do meio nem apresentam produo de gs (reaco negativa). Prova da reduo dos Nitratos: A reduo dos nitratos pode ser determinada semeando-se o microrganismo num caldo de nitratos. Este meio um caldo nutritivo suplementado com 0,5% de nitrato de potssio (KNO3) como fonte de nitratos. Por outro lado, este meio pode ter 0,1% de agar o que lhe permite ser semi-slido de modo a impedir a difuso do oxignio para o meio e assim favorecer um ambiente anaerbio necessrio para a reduo dos nitratos. Aps incubao (24 a 48 h a 37 C), a cultura examinada para a presena de ies nitrito no meio. A capacidade do microrganismo para reduzir os nitratos a nitritos determinada pela adio de dois reagentes: soluo A - c. sulfanlico e soluo B - naftilamina. Os nitritos presentes no meio vo reagir com esses reagentes produzindo uma mudana de cor imediata para vermelho. Prova da desaminao da fenilalanina Esta prova pode ser usada para distinguir bactrias, pois as que produzem a enzima desaminase da fenilalanina desaminam este aminocido produzindo cido fenilpirvico. Quando o reagente cloreto de ferro adicionado ao meio de cultura reage com o cido fenilpirvico, formando um composto verde. Nas culturas em que no ocorrer a desaminao da fenilalanina no h mudana de cor aps a adio do reagente. Prova da descarboxilao da lisisna A descarboxilao da lisina pode ser detectada semeando a bactria num meio de cultura contendo esse aminocido, glicose e um indicador de pH (prpura de bromocresol). Antes da incubao deve ser colocado leo mineral no caldo para impedir o oxignio de atingir as bactrias e inibir a reaco. Os cidos produzidos pelas bactrias a partir da fermentao da glicose vo inicialmente baixar o pH do meio e causar a mudana de cor do indicador de pH de prpura para amarelo. O pH cido activa ento a enzima que causa descarboxilao da lisina a aminas e a subsequente neutralizao do meio que muda de amarelo para prpura outra vez. Prova das Oxdases: A capacidade das bactrias produzirem esta enzima pode ser determinada pela adio do reagente das oxdases (dihidrocloreto de tetrametil p-fenilenodiamina). Este reagente de cor rosa age como um substrato artificial, fornecendo electres e consequentemente ficando oxidado, tornando-se um composto escuro (castanho-negro) na presena de oxdase e de oxignio livre. Aps a adio do reagente o desenvolvimento da colorao rosa depois castanha e finalmente negra na superfcie das colnias indicativo da produo de citocromo oxdase e representa uma prova positiva. Se no houver mudana de cor ou se as colnias apresentarem uma colorao rosa ligeira indicativo da ausncia de actividade da oxdase e uma prova negativa.

Prova da Urease: A presena de urease detecta-se quando o microrganismo cresce num meio com ureia (meio de ureia de Christensen) que contm tambm o indicador de pH, vermelho de fenol. Quando a ureia desdobrada pela urease, a amnia acumula-se no meio tornando-o alcalino. Este aumento de pH faz com que o indicador de pH passe de amarelo a rosa, sendo uma reaco positiva para a presena de urease. A ausncia da colorao rosa indica uma reaco negativa. No entanto, basta que ocorra o aparecimento de uma zona do meio rosa para se considerar a reaco positiva; apenas os microrganismos que produzem precocemente urease tm capacidade para modificar a cor de todo o meio para rosa forte. Prova de Kligler Iron Agar ou de Triple Sugar Iron Agar Esta prova , geralmente, usada para diferenciar os diferentes gneros das Enterobacteriaceae e para distinguir esta famlia de outros bacilos Gram negativo de origem intestinal. Esta diferenciao feita atendendo s diferenas na fermentao dos hidratos de carbono presentes no meio e produo de sulfureto de hidrognio (H2S). Tanto o meio agar TSI (triple sugar iron) como o agar Kligler Iron contm glicose em pequena concentrao (0,1%), lactose em concentrao superior (1%), o indicador de pH, vermelho de fenol, para detectar a produo de cidos resultantes da fermentao dos hidratos de carbono, tiossulfato de sdio, substrato para a produo de H2S, e sulfato de ferro para a deteco desse produto final. A diferena entre estes dois meios diferenciais que o TSI possui mais um acar, a sacarose, em concentrao igual da lactose (1%). Ambos os meios so inoculados por picada, no cilindro e por estria, na rampa. essencial que as culturas sejam observadas aps 18 a 24 h de incubao para evitar que os hidratos de carbono sejam completamente utilizados e que ocorra degradao das peptonas, formando produtos finais alcalinos. na rampa que se faz a leitura da lactose e da sacarose, no fundo do cilindro a da glicose e no meio do cilindro a de H2S. Aps incubao podem ser determinadas as actividades fermentativas, a produo de gs e a produo de H2S, podendo ocorrer vrios resultados: Cilindro cido (amarelo) e rampa alcalina (vermelha): S a glicose foi fermentada. Os microrganismos degradam, preferencialmente, a glicose em primeiro lugar, mas como este substrato est presente em concentrao mnima, a quantidade de cido produzida limitada e rapidamente oxidada na superfcie da rampa. Por outro lado, as peptonas do meio so tambm usadas na produo de substncias alcalinas. No cilindro, a reaco cida mantida devido tenso reduzida do oxignio e ao crescimento mais lento dos microrganismos. O indicador, vermelho de fenol, muda para amarelo devido persistncia da formao de cido no cilindro. Cilindro cido (amarelo) e rampa cida (amarela): Ocorreu a fermentao da lactose e/ou da sacarose, para alm da glicose. Como as duas primeiras substncias esto presentes em altas concentraes so substratos para a actividade fermentativa contnua com manuteno da reaco cida (cor amarela) em todo o meio (rampa e cilindro). Produo de gs:

Nota-se pela ocorrncia de fracturas no meio de cultura. Produo de H2S: Ocorre enegrecimento, principalmente na zona intermdia do cilindro. Isto deve-se ao facto do microrganismo em estudo ser capaz de produzir sulfureto de hidrognio (H2S), que se conjuga com um composto de ferro existente no meio, dando origem a sulfureto de ferro que, sendo insolvel, precipita. Cilindro alcalino (vermelho) e rampa alcalina (vermelha) ou inalterado (tijolo): No ocorreu fermentao dos hidratos de carbono presentes no meio, nem produo de gs ou de H2S. As peptonas do meio podem ser catabolizadas sob condies anaerbias e/ou aerbias, resultando num pH alcalino devido produo de amnia. Se s ocorrer degradao aerbia das peptonas, a reaco alcalina s evidenciada na superfcie da rampa. Se houver degradao aerbia e anaerbia das peptonas, a reaco alcalina visvel em todo o meio. Provas de sensibilidade aos antimicrobianos: - Como todos os Gram- apresentam maior resistncia penicilina, sendo mais sensveis s quinolonas e s estreptomicinas - Enterobacter, Citrobacter; Morganella, Serratia apresentam resistncia a vrios antibiticos Serodiagnstico: - Identificao antignica (atg O, atg K ou Vi, atg H) - R. de Widal