TEMA 1. CLULA VEGETAL.

PARED CELULAR CLULA VEGETAL Caractersticas ms notables: - Vacuola - Plastos - Pared celular Principales diferencias metablicas con clulas animales: - Fotosntesis - Metabolismo mitocondrial: rutas particulares en plantas - Membranas celulares: * Composicin lipdica y fluidez * Bombas electrognicas: H+-ATPasas PARED CELULAR Rodea al protoplasto Espesor: 0,1-10 m Composicin: 90 % carbohidratos 10 % protenas Participa activamente en el crecimiento, forma y metabolismo de la clula. Cuando se elimina la pared los protoplastos resultantes tienen forma esfrica (ver suspensin de protoplastos) Reconocimiento celular Permite la supervivencia en ambientes hipotnicos

ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR La pared celular se forma en tres capas: Lmina media pared celular primaria pared celular secundaria

Suspensin de proto-plastos. Los protoplastos pierden su forma original y adoptan una forma esfrica

Fotografa al microscopio electrnico de la unin de dos clulas vegetales sin pared celular secundaria. La lamina media es compartida por dos clulas vecinas. La pared primaria se situa entre la membrana plasmtica y la lmina media

PARED CELULAR SECUNDARIA

Composicin variable Ausente en algunos tipos celulares Generalmente: aumenta el contnido en celulosa, disminuye el contnido de pectinas y se sintetizan nuevos compuestos, particulares de cada tipo celular, como suberina o cutina, lignina,

COMPOSICIN QUMICA DE LA PARED CELULAR

LMINA MEDIA Se inicia durante la divisin celular Compartida por dos clulas vecinas: Formada por pectinas de dos tipos Acidas: Homogalacturonano Ramnogalacturonanos Neutras: Arabinogalactanos Galactanos PARED PRIMARIA Se inicia al trmino de la divisin celular Formada por tres redes: Pectinas Celulosa-hemicelulosas Protenas

Homogalacturonano: Polmero de (cido Dgalacturnico)200 con enlaces (14). Aprox. 100 nm de longitud

RAMNOGALACTURONANO I Polmero de cido D-galactu-rnico y ramnosa con enlaces (12) y (14) Longitud desconocida Arabinanos, galactanos y arabinogalactanos en algunos restos de ramnosa

RAMNOGALACTURONANO ii Esqueleto de cido D-galacturnico con enlaces (14) con gran diversidad de azcares y enlaces

Hemicelulosas
Xiloglucanos (plantas no gramineas): eje central de (14)-glucano idntico al de la celulosa con xilosas en (1,6). Algunas xilosas estn unidas a galactosas u otros azcares.

Glucano mixto ( (1,3), (1,4) glucano) en gramineas: glucano lineal con regiones de (14) unidas por enlaces (13). Las gramineas tambin tienen xilanos. Las regiones (14)-glucano de las hemicelulosas estn unidas a las regiones (14)-glucano de las microfibrillas de celulosa por puentes de hidrgeno.

Celulosa

Polmero de D-glucosa con enlaces (14) Los glucanos estn extendidos

36 glucanos unidos por puentes de hidrgeno forman una microfibrilla Las microfibrillas tienen gran resistencia en sentido longitudinal La orientacin de las microfibrillas condiciona la forma de la clula

Protenas (10%):

Las proteinas estructurales de la pared celular son glicoprotenas Se denominan por el aminocido dominante: protenas ricas en hidroxiprolina (HPRPs), protenas ricas en prolina (PRPs) y protenas ricas en glicina (GRPs). Las HPRPs son las mejor caracterizadas: regiones repetitivas -ser-(hyp)4- y tir-lis-tir-

Fenoles:

Los fenoles de la pared celular mas abundantes son: cido sinpico, ac. ferlico, ac. cafeico y ac. cumrico

MODELO DE CARPITA La pared celular est formada por tres redes independientes: hemicelulosascelulosas, pectinas y protenas. Las hemicelulosas estructurales mas importantes en las paredes celulares del tipo I son xiloglucanos y en las del tipo II (1-3, 1-4) y glucano mixto glucuronoarabinoxilanos El contenido en pectinas de las paredes celulares del tipo II es baja Enlaces en la red de pectinas: puentes de calcio, puentes de boro y enlaces fenlicos Enlaces en la red de hemicelulosas-celulosas: puentes de hidrgeno y enlaces fenlicos Enlaces en la red de protenas: puentes isoditirosina y enlaces Una proporcin alta de polmeros no celulsicos estn conectados a las microfibrillas por puentes fenlicos.

TIPO I

TIPO II

FORMACIN DE LA PARED CELULAR

Sntesis de pectinas y hemicelulosas tiene lugar por diversas glucano trans-ferasas del aparato de Golgi. El cido homogalacturnico (HG) se metila por una pectinmetilesterasa que acepta el grupo metilo de una molcula de S-adenosil metionina (SAM) Los dictiosomas fusionan sus membranas con la membrana plasmtica y vierten las cadenas de polisacridos en la pared celular. All, otra enzima desmetila el HG, y los grupos carboxilos libres forman puentes de calcio. Las molculas de ramnogalacturonano II forman in situ puentes de boro. Los fenoles, en reacciones catalizadas por peroxidasas, generan uniones fenlicas entre polisacridos de la misma o diferente red. que colaboran en la estabilidad de la pared celular

Sntesis de celulosa
Se desconoce el mecanismo exacto de la sntesis de celulosa y, a pesar de su enorme uso, an no se ha podido reproducir in vitro con rendimientos superiores al 10%. No obstante, los resultados obtenidos en los ltimos aos con el aislamiento y anlisis de mutantes que tienen algn tipo de alteracin en el contenido de celulosa, y el uso de inhibidores especficos de la sntesis de celulosa apuntan a pronta solucin. La celulosa sintetasa se localiza en la membrana plasmtica. Cataliza la polimerizacin de la glucosa con enlaces (1,4), la formacin de la estructura microfibrilar y la orientacin con que se deposita en la pared celular. Acepta glucosa de uridindifosfoglucosa (UDPG) y lo transfiere a un glucano incipiente. El UDPG es suministrado directamente al centro activo de la enzima por una sacarosa-fosfato sintasa que acta de forma inversa, es decir, hidroliza sacarosa-fosfato y libera UDPG (substrato de la celulosa sintetasa) y fructosa. La iniciacin de la cadena se realiza sobre un grupo hidroxilo de una molcula de sitosterol (lpido de la membrana plasmtica). Una hiptesis curiosa, considera que la sntesis de celulosa, (1,4)-glucano) y calosa, ((1,3)glucano,.son catalizadas por una sola enzima: la calosa sintetizada, denominada calosa accidental, formara parte de la respuesta de defensa de la planta frente a organismos patgenos. En condiciones normales, la enzima unira D-glucosas con enlaces (1,4), mientras que, un aumento de la concentracin de ion calcio, causada durante la penetracin del patgeno, hara que la enzima comenzase a formar enlaces (1,3).entre D-glucosas.

calosa -1,3

-1,4 celulosa

GLUCANO SINTETASA
Membrana plasmtica

fructosa + UDPG Sacarosa-P

Sobre el l grupo hidroxilo se une la primera glucosa de la cadena (1,4)-glucano

PARED CELULAR
Izquierda. Fotografa ((microscpio electrnico) de la pared celular con complejos terminales (celulosa sintetasa) adoptando forma de roseta. Derecha: estructura propuesta para cada una de estas rosetas con 36 centros activos

PROPIEDADES DE LA PARED CELULAR

pH: 4,5-6,0 Debido a H+-ATPasas de la membrana plasmtica Porosidad Tamao de los poros: 3,5-6,0 nm Molculas con p.m. 13-65 kDa Carga elctrica Carga neta negativa a pH 4,5-6,0 Debida a: grupos carboxilos de pectinas (carga negativa) y grupos amino de algunas protenas (carga positiva) Hidratacin Contenido en agua: Paredes primarias: 65% debido a la naturaleza hidrfila de los polmeros Disminuye en paredes secundarias por la naturaleza hidrfoba de sus componentes (lignina, suberina, etc Resistencia qumica alta Debida al empaquetamiento de las cadenas (1,4)-glucanos de la celulosa (acceso restringido de enzimas a enlaces susceptibles de degradacin) y a la estabilidad de otros enlaces (puentes fenlicos, puentes isoditirosina Resistencia mecnica Mxima en la direccin de la fibra de celulosa Debida a la estructura cristalina (fibrilar) de la celulosa

FISIOLOGA DE LA PARED CELULAR

Condiciona la forma y tamao de la clula Interviene en procesos de reconocimiento celular: planta-planta (polinizacin), planta-simbionte y planta-patgeno Permite la supervivencia en ambientes hipotnicos Es un compartimento metablico Las paredes celulares secundarias son una barrera pasiva a la entrada de patgenos en la planta La degradacin de paredes celulares es crucial en algunos procesos de desarrollo: abscisin de rganos y maduracin de frutos.

RELAJACIN DE PARED CELULAR

Xiloglucano-endotransgli-cosilasa (XET): alarga cadenas de xiloglucano Expansinas: rompen puentes de hidrgeno entre celulosa y hemicelulosas El ordenamineto paralelo de las microfibrillas de celulosa provoca una gran resistencia mecnica en la direccin de las microfibrillas. Cuando la pared celular se relaje la clula se elongar en la direccin perpendicular a la microfobrilla

ABSORCIN DE AGUA POR LA RAZ

VA DE ENTRADA DE AGUA: ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA RAIZ

CLULA VEGETAL Caractersticas ms notables: - Vacuola - Plastos - Pared celular Principales diferencias metablicas con clulas animales:
Corte transversal de raz primaria transversal de raz primaria -Corte Fotosntesis - Metabolismo mitocondrial: rutas particulares en plantas La raz primaria es la formada cada ao por el meristemo Membranas celulares: primario radicular * Composicin lipdica y fluidez La raz primaria es la principal va de entrada del agua. * Bombas electrognicas: H+* Epidermis permeable con pelos radicales -ATPasas * Corteza con clulas unidas por plasmodesmos * Endodermis con Banda de Caspari * Periciclo donde se originan las races laterales * Cilindro central con los vasos del xilema y floema

Rodea al protoplasto Espesor: 0,1-10 m

pared celular primaria Las races laterales se originan en el periciclo y avanzan a travs de la estructura primaria de la raz

pared celular secundaria

ABSORCIN RADICULAR DE AGUA La solucin salina del suelo accede al apoplasto de la corteza La composicin de la solucin salina del apoplasto de la corteza es semejante a la del suelo (algunos iones se concentran debido a las cargas elctricas de la pared celular La banda de Caspari obliga a la solucin salina a pasar a travs de la membrana plasmtica de las clulas de la corteza Las clulas de la corteza estn comunicadas por plasmodesmos entre s y con las clulas del periciclo la membrana plasmtica de las clulas corticales funciona como una gran superficie de absorcin

La Banda de Caspari es un depsito de suberina (sustancia impermeable) en las paredes celulares superiores, inferiores y tangenciales. La solucin salina del apoplasto tiene que atravesar una membrana plasmtica para acceder al cilindro central por el simplasto.

1. Actividad en las clulas de la corteza: ajuste osmtico (osmorregulacin) A medida que el suelo se seca (suelo), las clulas de la corteza han de mantener un potencial hdrico an ms bajo aumentando su presin osmtica El aumento de la presin osmtica de las clulas de la corteza se logra de dos formas: * Acumulando iones desde el apoplasto * Aumentando la concentracin de solutos orgnicos. Si elcontenido hdrico del suelo desciende por debajo del PMP, las clulas no absorben agua e incluso pueden perderla.

 La acumulacin excesiva de iones altera la estructura de las protenas al no permitir que se forme una capa de hidratacin. Los solutos compatibles mantienen intacta la protena al permitir que una capa muy ordenada de molculas de agua se unan a ella.

Tipos de solutos compatibles Iminocidos: Prolina Compuestos de sulfonio terciario: dimetilsulfoniopropionato Compuestos de amonio cuaternario: sulfato de colina Azcares alcohol: pinitol, manitol

2. Actividad en el cilindro central:

La concentracin de oxgeno en las clulas del cilindro central es baja desciende su capacidad acumulativa los solutos salen pasivamente al apoplasto del cilindro central, ocupado en su mayora por las clulas conductoras del xilema.

TRANSPORTE DE AGUA POR LA PLANTA XILEMA

Las clulas del xilema forman un tejido estructural y funcionalmente complejo, el cual, asociado al floema, se extiende de manera continua por todo el cuerpo de la planta. Tiene por misin la conduccin de agua (xilema primario) y soporte (xilema secundario). El xilema comunica la zona de absorcin de agua (raz) con la de evaporacin (hojas). El floema transporta savia elaborada desde el lugar donde se produce (fuentes) hasta donde se consume (sumideros). Las clulas conductoras del xilema son las traqueidas (Gimnospermas) y los elementos de los vasos (Angiospermas). Las traqueidas son ms delgadas y largas que los elementos de los vasos. Las traqueidas se comunican longitudinalmente por pares de punteaduras mientras que los elementos de los vasos lo hacen por placas perforadas.

elementos de los vasos

traqueidas

Dos elementos de tubos cribosos del xilema Las clulas conductoras del xilema se alinean longitudinalmente formando largos haces conductores que recorren la planta desde la raz hasta la parte area. Estos haces se ramifican enormemente en las hojas, donde puede haber transporte de iones hacia y desde el floema En las hojas puede haber translocacin de solutos desde el floema hacia el xilema.

Hoja de Eucalyptus crenulata con una gran ramificacin de los haces.

Las clulas xilemticas se comunican por punteaduras de la pared celular. Tipos de punteaduras: Simples: no hay ningn desarrollo de la pared secundaria. Areoladas: la pared secundaria se desarrolla sobre la cavidad de la punteadura formando un techo arqueado con un poro estrecho en el centro.

Lmina media Apertura interna Pared primaria Apertura externa Cmara Pared secundaria

 Generalmente cada punteadura de una clula tiene otra complementaria de la clula vecina, constituyendo ambas una unidad morfolgica y estructural, son las punteaduras bilaterales, que pueden ser: Simples: si ambas son simples Areoladas: si ambas son areoladas Semiareoladas: si una es simple y la otra areolada Ciegas: no existe la complementaria

Simple

Areolada

Semiareolada

La punteadura con Toro es un tipo especial de punteadura bilateral areolada: La membrana de la punteadura (lamina media + pared primaria) est engrosada en la parte central, este engrosamiento biconvexo es el denominado TORO (en general tiene un dimetro mayor que la apertura de la punteadura). El toro se desplaza por diferencias de presin.

Punteadura con toro Toro

Formacin de clulas conductoras del xilema

Al inicio de la diferenciacin celular se forma una pared celular secundaria muy gruesa que posteriormente se lignifica. Los orgnulos subcelulares desaparecen posteriormente. La membrana plasmtica desaparece en los ltimos estados de la diferenciacin. El proceso de engrosamiento y lignificacin de las paredes celulares puede ser de diferentes formas: anular (A), helicoidal (B), etc El proceso de engrosamiento y lignificacin de sus paredes celulares puede ser de diferentes formas (izquierda): anular (A), helicoidal (B), etc La pared celular secundaria muy engrosada evita el colapso del conducto xilemtico cuando aparezca una tensin elevada en su interior (necesaria para subir el fluido xilemtico a las zonas de evaporacin hojas-).

Floema
(mg/L) Materia seca Aminocidos K Ca P Fe 185 13 1,5 0,02 4,03 0,008

Xilema
(mg/L) 12 0,7 0,09 0,018 0,07 0,002

Composicin de los fluidos del xilema (savia bruta) y floema (savia elaborado) El xilema transporta una solucin diluida de sales minerales absorbidas del suelo y aminocidos transportados desde el floema. El floema transporta una solucin concentrada de substancias elaboradas por la planta e iones transportados desde el xilema Potencial hdrico de la hoja La evaporacin de agua desde las paredes celulares del mesfilo provoca un gradiente de potencial hdrico entre el exterior y el interior de la hoja. Este gradiente se transmite al xilema foliar puesto que el agua forma un sistema continuo en el apoplasto de la hoja (una buena parte ocupada por el xilema), es decir est repleto de agua.

B (A) Clula guarda

xilema

floema

Pelcula de agua

Difusin al exterior (a) Evaporacin al espacio areo (b)

A medida que las molculas de agua se evaporan, y difunden al exterior, la superficie de evaporacin forma un menisco (a, b, c) que se va haciendo cada vez ms cncavo. Un menisco tiene una tensin inversamente proporcional al radio de la superficie curva. El agua sube por las paredes celulares de los tubos del xilema por tensin capilar: una combinacin de fuerzas de adhesin, cohesin y tensin superficial.

PRESIN DE RAZ Cuando los estomas estn cerrados: * No se genera tensin en el xilema * Si la actividad osmtica de las clulas de la corteza continua, la presin osmtica del cilindro central causa una toma de agua que genera una presin positiva en el xilema. A esta presin se le denomina presin de raz. La presin de raz es positiva, es decir, se ejerce sobre las paredes del xilema. La presin de raz vara entre especies. Generalmente, las plantas herbceas tienen mayores presiones de raz que las leosas. La presin de raz es la responsable de la exudacin de exudados del apoplasto foliar, proceso conocido como gutacin y que es posible observar en plantas herbaceas antes de que los estomas se abrfan al amanecer (fotografa arriba izquierda). La presin de raz puede eliminar posibles embolias que aparezcan en plantas, principalmente en plantas herbceas o leosas jvenes (ver cavitacin).

Determinacin experimental de la cohesin del fluido xilemtico Se llena el tubo con el fluido xilemtico que se obtenga de la planta. Se centrifuga el tubo. Aparecen dos fuerzas * En los extremos del tubo: impide la salida de fluido (A). * En el centro del tubo: rompe la continuidad del fluido (en el centro del tubo las dos fuerzas tienen igual intensidad y sentido opuesto (B) Se obtienen fuerzas de cohesin alrededor de -30 MPa. Determinacin experimental de la cohesin del fluido xilemtico 1. La tensin del xilema provoca que el agua retroceda desde la escisin. 2. El tallo seccionado se introduce en una cmara y se aplica presin. 3. Cuando aparezca el agua en el extremo cortado, la presin aplicada coincidir con la existente en el xilema.

La tensin medida en el xilema es suficiente para ascender el fluido xilemtico LA CAVITACIN ES LA PRINCIPAL OBJECIN DE LA TEORA DE LA TENSIN-COHESIN La cavitacin es la rotura de las columnas de fluido xilemtico en el interior del xilema. Cuando la cavitacin se extiende por el xilema de la planta se produce una embolia. La cavitacin es frecuente en algunas condiciones de estrs: Dficit hdrico asociado a elevadas tasas de transpiracin: diminutas burbujas de aire se filtran a travs de las finas membranas de las punteaduras y pueden producir una embolia. Congelacin: El problema se asocia a la descongelacin (disminucin del volumen) Patgenos: Aumentan la presin osmtica del fluido xilemtico reduciendo la cohesin (hongo de la grafiosis del olmo Ceratocystis ulmi-).

La ruptura de la continuidad (a) del fluido xilemtico (cavitacin) se extiende rpidamente en el interior de una clula conductora dando lugar a una embolia (b) Las punteaduras areoladas confinan la burbuja dentro de la clula conductora (c) Se restablece el flujo a travs de las clulas conductoras vecinas La actividad del cambium vascular, junto con la capacidad de flujo de las clulas del xilema (mayor de la que realmente tiene lugar) y las punteaduras areoladas, son mecanismos que la planta utiliza para atenuar los efectos dainos de la cavitacin

NUTRICIN MINERAL DE PLANTAS

Composicin mineral de la planta

El contenido hdrico de las plantas es muy variable. Se suele utilizar la diferencia del peso seco fresco (PF) y seco (PS) para cuantificar el contenido hdrico: Races: 71-93 % Tallos: 48-94% Hojas: 77-98% Frutos: 84-94% Semillas: 5-11% (algunas maz- llegan al Madera recin cortada: 50%

85%)

El peso del residuo obtenido despus de secar un tejido u rgano vegetal, denominado peso seco (PS), est constituido por: Compuestos orgnicos (85-95% del PS): Formados por C, H y O Fotosintetizados a partir de CO2 y H2O Fraccin mineral ( 5-15% del PS) Minerales esenciales (13), beneficiosos y otros ELEMENTOS ESENCIALES Criterios de esencialidad: Ser indispensable. Su deficiencia impide que la planta complete su ciclo vital Ser insustituible. No puede reemplazarse por otro elemento con propiedades similares. Ej. El sodio, que es semejante el potasio, no puede reemplazarlo completamente Participar directamente en el metabolismo de la planta .

ELEMENTO

TIPO

PLANTAS SUPERIORES +

PLANTAS INFERIORES + (excepcin: Calcio en hongos) + (excepcin: Boro en hongos)

Nitrgeno, Fsforo, Azufre, Potasio, Macronutrientes Magnesio, Calcio Hierro, Manganeso, Zinc, Cobre, Boro, Cloro, Molibdeno, Micronutrientes Sodio, Silicio, Cobalto iodo, Vanadio

Elementos beneficiosos

FUNCIONES DE LOS ELEMENTOS ESENCIALES Estructural: forma parte de la estructura de protenas, cidos nucleicos, etc Ejemplo: el N forma parte de la estructura de los aminocidos Metablica: participa en la regulacin metablica como cofactor enzimtico, estructura del centro activo de un enzima, etc Ejemplo: el Mg es necesario en muchas reacciones de fosforilacin catalizadas por quinasas Osmorreguladora: participa en el ajuste osmtico necesario en muchos procesos: apertura de estomas, actividad de las clulas de la corteza radical, etc Ejemplo: el in K participa en la apertura de los estomas.
+

ABSORCIN DE NUTRIENTES

El agua y los minerales son absorbidos del suelo a travs del sistema radical. El CO2 penetra por los estomas El agua de la niebla y el roco, junto con minerales disueltos en ella, pueden entrar a la planta a travs de las hojas (absorcin foliar), especialmente bajo condiciones de sequa,

El suelo es el principal reservorio de los nutrientes minerales: contiene partculas de material orgnico e inorgnico Los minerales se adsorben a la superficie de las partculas del suelo y no son lixiviados Los minerales no lixiviados y disueltos en agua pueden ser absorbidos por las races

Intercmbio inico: los cationes con mayor atraccin pueden desplazar a los que se encuentran adsorbidos La capacidad de adsorcin e intercambinico del suelo (CAI) condiciona su volumen de reservas minerales La CAI depende: Tipo de suelo: Superf./volumen cargas expuestas CAI reserva mineral Tipo de in: la movilidad de algunos iones, como fosfato) y sulfato es baja

 La raz absorbe eficazmente minerales del suelo: Gran superficie de absorcin: Los pelos radicales aumentan la superficie de la raz en contacto con el suelo Gran capacidad de penetracin Plasticidad en el desarrollo: El crecimiento de las races se adapta al medio Diferentes minerales se absorben en distintas zonas de la raz primaria. Existe una Asimetra transversal y longitudinal de los transportadores de nutrientes minerales en la membrana: Calcio: en zona apical Hierro: algunas plantas en zona apical y otras a lo largo de toda la raiz Potasio, nitrato, amonio y fosfato: en toda la raz (la absorcin de nitrato es ms rpida en la zona de elongacin y la de amonio en la zona apical Los nutrientes del suelo se mueven junto con el agua hacia la superficie de la raz mediante flujo en masa Las races necesitan un aporte continuo de nutrientes y estos, especialmente los macronutrientes se pueden agotar en las inmediaciones de la raz. La disponibilidad de los nutrientes vara con el pH del suelo: En pH alcalinos: disminuye concentracin de, H2PO , Fe En pH cidos : aumenta la concentracin de Al DISPONIBILIDAD DE ELEMENTOS MINERALES NITRGENO El nitrgeno se absorbe preferentemente como in 3nitrato (NO ). Tambin se absorbe en menor medida como in + amonio (NH4 ) Las plantas con dficit de nitrgeno crecen poco y las hojas sufren una clorosis homogenea (empezando por las hojas mas adultas ) +NO
3+ 42+ 2+

y Ca

(txico a baja concentracin)

3-

NO

3-

El dficit de nitrgeno provoca la sntesis de antocianos Las leguminosas pueden crecer en suelos carentes de nitratos

FSFORO El fosforo se absorbe como in fosfato (H2PO4 ). Las plantas con dficit de fosforo crecen poco, los frutos no maduran, y las hojas son sufren clorosis, normalmente uniforme. La concentracin de H2PO4 desciende en suelos alcalinos (pH > 7,5) La movilidad del in fosfato en el suelo es muy baja Las micorrizas mejoran la absorcin de minerales, especialmente de fosfato AZUFRE
2-

El azufre se absorbe como in sulfato (SO4 ) Una parte del sulfato absorbido se utiliza en el metabolismo sin reducirse y otra parte se reduce, 22primero a in sulfito (SO3 ), luego a in sulfuro (S ) y por ltimo se incorpora en aminocidos azufrados Las hojas de plantas con dficit de azufre son mas estrechas y amarillentas (clorosis uniforme hacia la base). Los sntomas aparecen en las hojas mas jvenes Dficit de azufre en plantas monocotiledneas (arriba) y dicotiledneas (abajo):

CALCIO El calcio se absorbe como in clcico (Ca

2+ 2+

).

El Ca se acompleja con fosfato y no est disponible a pH mayor de 7.5. Las plantas con dficit de Ca son enanas y tienen hojas con clorosis intervenal y malformaciones (mrgenes doblados y necrticos). Los sntomas carenciales de calcio aparecen en las zonas ms jvenes de la planta: hojas ms jvenes y yemas caulinares.
2+

HIERRO El hierro se absorbe como in 2+ 3+ ferroso (Fe ). El Fe se reduce a 2+ Fe por una enzima ligada a la membrana plasmtica que utiliza al NADPH como fuente de electrones. En suelos alcalinos el hierro precipita como Fe(OH)3 y las plantas que crecen sobre estos suelos suelen tener dficit de hierro. MAGNESIO El magnesio se absorbe como in magnesio (Mg Las plantas con dficit de hierro o magnesio carecen de clorofila (clorosis intervenal) Planta sana (izquierda) y con dficit de Mg (derecha
2+)

POTASIO El potasio se absorbe como in potasio (K+) Las plantas con dficit de potasio tienen los mrgenes de las hojas clorticos y enseguida se mueren (clorosis-necrosis marginal). El desarrollo de los frutos tambin es anmalo Los sntomas aparecen en las zonas ms jvenes de la planta Es frecuente la coloracin azulprpura en los mrgenes de la hoja

MICORRIZAS
Las micorrizas son asociaciones simbiticas entre races de plantas y hongos Mejoran la toma de algunos nutrientes, especialmente fosfato Aparecen en el 80% de Angiospermas y 100% de Gimnospermas Existen dos tipos de micorrizas: ectomicorrizas o micorrizas ectotrficas y endomicorrizas o vesiculoarbusculares (VAM)

Ectomicorriza La concentracin nutrientes minerales en el suelo de, principalmente fosfato, suele limitar el crecimiento de plantas. El crecimiento de la planta micorrizada (izquierda) es mayor que el de la planta no micorrizada (derecha)..

Ectomicorriza

ECTOMICORRIZAS Una gran masa de micelio penetra en las ms capas ms externas de la raz donde tiene una vida intercelular Las hifas forman una envoltura densa que rodea toda la raz. Tambin se llaman micorrizas laminares Aparecen en Gimnospermas y Angiospermas leosas ENDOMICORRIZAS (vesiculoarbusculares) Debe su nombre a las estructuras que forman el hongo en el interior de las clulas de la raiz: las hifas penetran ms profundamente en el crtex y desarrollan en el interior de las clulas una densa red que forma unas vesculas. El hongo no sobrepasa la banda de Caspari Solo una pequea masa de micelio (10% de la masa de la raz) penetra en las clulas de la raz Aparece en la mayora de las Angiospermas herbaceas

TRANSPORTE A TRAVS DE MEMBRANAS

Al igual que las clulas animales, las clulas vegetales estn cubiertas de una membrana, denominada plasmalema, formada por una bicapa lipdica en la que se encuentran protenas (intrinsecas y extrnsecas. La vacuola tambin estn cubierta de una membrana, denominada tonoplasto, con una composicin semejante

Membrana de una clula animal (eritrocito)

MEMBRANAS BIOLGICAS Las membranas biolgicas estn constitudas por mosaicos fluidos de lpdos y protenas (intrnsecas o integrales y extrnsecas o perifricas) Muchas protenas de las membranas estn glicosiladas

Los lpidos de membrana son glicolpidos con dos partes bien diferentes en su molcula: Cabeza hidrfila (zona polar): formada por el alcohol y el carbohidrato Cola lipofila (zona apolar): formada por el cido graso. Los lpidos forman una bicapa con las colas hacia dentro y las cabezas hacia fuera

Otros lpidos de membrana engloban a molculas con doble naturaleza hidfilalipofila: colesterol, camposterol, sitosterol y stigmasterol.

SELECTIVIDAD DE LAS MEMBRANAS Los lpidos de membrana forman barreras hidrofobas que repelen molculas cargadas elctricamente o polares (agua, azcares, etc). Las membranas contienen protenas que facilitan el transporte de tales molculas. Las protenas transportadoras son especficas para molculas con alguna funcin en la planta (otras substancias, sin funcin conocida en la planta pero relacionadas estructuralmente pueden ocasionalmente utilizarlos). FLUIDEZ DE LAS MEMBRANAS La fluidez permite el desplazamiento lateral o transversal de las protenas. La fluidez vara con: Temperatura: aumenta con la temperatura. Estructura de los lpidos: La fluidez aumenta con la longitud y grado de insaturacin de la cola. TRANSPORTE A TRAVS DE MEMBRANAS Atendiendo a la naturaleza de la molcula transportada hay dos tipos de transporte Transporte facilitado para molculas polares o con carga elctrica Transporte no facilitado para molculas apolares n Tipos de transporte Las molculas apolares (lipfilas) difunden a travs de las membranas biolgicas. El transporte facilitado puede ser de dos tipos: Por bombas electrognicas Por canales inicos Por carriers (transportadores Bombas electrognicas Transporte facilitado por carriers Transporte no facilitado Transporte facilitado por canales

 Atendiendo a la necesidad de energa existen dos tipos de transporte: Transporte pasivo: a favor de gradiente de potencial electroqumico (desde zonas con alto potencial electroqumico a zonas con potencial ms bajo). El movimiento del in libera una energa equivalente a la diferencia de potencial electroqumico. Transporte activo: en contra de gradiente de potencial electroqumico (desde zonas con potencial electroqumico bajo a zonas con potencial mas alto). Se necesita aplicar al in una fuerza equivalente a la diferencia de potencial electroqumico y por tanto el transporte activo est acoplado a una fuente de energa. Potencial electroqumico Se aplica a molculas con carga elctrica e incluye un componente qumico (concentracin) y otro elctrico (carga elctrica).

+
campo elctrico

+ + + + + + + + +

+ + + + +

+ + + + + + + + +

Cuando una membrana separa dos compartimentos con diferente campo elctrico (potencial de membrana) los aniones se concentran pasivamente en el compartimento con carga positiva y los cationes en el de carga negativa. ECUACIN DE NERNST T: temperatura absoluta F: constante de Faraday (96.500 C/V) z: valencia del in ln: logaritmo neperiano [ion]e: concentracin del in dentro clula [ion]i: concentracin del in exterio clula Eion: (Ei Ee): potencial de Nernst o potencial de membrana (diferencia de campo elctrico) cuando el in est en el equilibrio R: constante universal de los gases La ecuacin de Nernst se puede simplificar: A 25C, R.T/F = 25 mV Ln X = 2,303. log X La ecuacin de Nernst se puede leer en ambos sentidos: Izquierda-Derecha: Un potencial de membrana [(Ei Ee)] establece un gradiente de concentracin [logCe /Ci] de un in de carga z en el equilibrio. Derecha-Izquierda: Un gradiente de concentracin [logCe/C i] de un in de carga z establece un potencial de membrana en el equilibrio [(Ei Ee)] E = 58 . n . logC e /C i
N

FUERZA ION MOTRIZ Cuando el n no est en equilibrio, existe una diferencia de potencial electroqumico (i-e) que es la fuerza necesaria para mover al in en contra de gradiente. Se denomina fuerza in motriz porque es la energa liberada al moverse el in a favor de potencial, es decir porque es la fuerza que mueve al in espontneamente: i-e = R.T.lnci + z.Ei.F - R.T.lnce + z.Ee.F i-e = R.T.lnci/ce + z.F.(Ei Ee). R.T.lnci/ce se expresa en funcin del potencial de Nernst (E ) R.T.lnci/ce = -E .z.F
N N

i-e = - E .z.F + z.F. E

N M N

i-e = z.F.(E E )

TRANSPORTE ACTIVO EN CLULAS VEGETALES Tipos de transporte activo Transporte activo primario: acoplado directamente a la hidrlisis de ATP o pirofosfato Transporte activo secundario: acoplado al movimiento a favor de gradiente de potencial electroqumico de protones Molculas movidas por transporte activo primario: Protones Iones de calcio: Molculas orgnicas Tipos de transportadores activos primarios: ATPasas: hidrlizan ATP (tipos P y V) Pirofosfatasas: hidrlizan pirofosfato Transportadores ABC: hidrlizan ATP Localizacin celular de los transportadores activos primarios (bombas electrognicas) en las clulas vegetales Membrana plasmtica * H -ATP asas: Sacan H+ del citoplasma * Ca -H -ATP asas: sacan Ca del citoplasma al tiempo que incorporan H+ desde el apoplasto. Tienen una contribucin escasa al potencial de 2+ membrana. Son tiles en la regulacin de [Ca ] citosolico Tonoplasto * H+-ATP asas: meten H+ en la vacuola * H+-pirofosfatasas: meten H+ en la vacuola
2+ + 2+ +

BOMBAS ELECTROGNICAS Las ATPasas mayoritarias son del tipo H -ATPasas, protenas de membrana que hidrolizan ATP en el lado citoplasmtico y mueven protones en contra de gradiente. Las ATPasas causan: * Aumento del pH citoslico y descenso del pH del apoplasto y vacuola
citoplasma +

* Potencial de membrana: el citoplasma se carga negativamente en relacin con el apoplasto o la vacuola

2+

apoplasto

Tambin existen Ca -ATPasas que utilizan la energa liberada en la hidrlisis 2+ del de ATP para sacar iones Ca + citoplasma al apoplasto y meter meter H + al citoplasma desde el apoplasto (no se incluye la salida de protones en la figura)

apoplasto

citoplasma

Transportadores ABC Deben su nombre a su denominacin inglesa: (ATP-binding cassette -ABC) y fueron inicialmente descritos en microorganismos y en clulas animales Son protenas de una gran familia que transportan activamente molculas orgnicas, especialmente los aniones grandes, utilizando la energa liberada en la hidrlisis de ATP Forman un intermediario fosforilado durante la catlisis (al igual que las H+-ATP sintasas del tipo P). Son inhibidas por ortovanadato. TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO La acumulacin de todos las dems molculas (todas menos protones, iones calcio y molculas transportadas por transportadores ABC) tiene lugar mediante transporte activo secundario Fuente energtica: la liberada en la entrada pasiva de protones en el citoplasma Tipos de transporte activo secundario: Cotransporte (simporte): la molcula se mueve en la misma direccin que los protones Ej.: NO3 , Cl , H2PO4 Antiporte: la molcula se mueve en + direccin opuesta a los protones . Ej.: Na Los transportadores que realizan transporte activo secundario son los carriers

cotransporte

antiporte

TRANSPORTE PASIVO SECUNDARIO El nico tipo de transporte pasivo secundario es uniporte. Los iones se mueven atrados por diferente campo elctrico al de su carga. Debido a que el transporte activo primario causa un citoplasma negativo y un apoplasto y vacuola positivos, los cationes entran en la clula y los aniones salen. Los transportadores que realizan transporte pasivo secundario son los canales inicos. Los canales K son los ms abundantes en la membrana plasmtica y en el tonoplasto. Las substancias transportadas pueden o no unirse a las subunidades de las protenas transportadoras Los canales tienen puertas gates que se abren y cierran en respuesta a diferentes estmulos. Los estmulos mas frecuentes son el voltaje (A) (se debe alcanzar un determinado valor de potencial de membrana) y los ligandos (B) (molculas que se unen a los ligandos y provocan su abertura o cierre. El movimiento por los canales inicos rpido A B
+

uniporte

Estructura propuesta recientemente del canal K en la membrana plasmtica de clulas oclusivas de Arabidopsis thaliana (AtCNGC2)

Resumen de la entrada y salida de iones en clulas vegetales

(Diferentes iones salen y entran simultneamente en las clulas. Solo se comenta el movimiento de los iones ms importantes. De todos ellos, solo K+, Na+, y Cl- tienen las mayores permeabilidades y alcanzan las mayores concentraciones dentro de las clulas) vegetales)

Los H salen de la clula por transporte activo 2+ y primario. En menor medida, el ion Ca algunas molculas orgnicas tambin se mueven por transporte activo primario. Los cationes K y Na entran por mecanismo + uniporte (el K es el nico que se encuentra generalmente cerca del equilibrio (concentrado en el interior), incluso en concentraciones externas muy bajas. Los cationes Na , Ca , Mg salen de la clula por transporte activo secundario (antiporte) Los aniones NO3 , Cl , H2PO4 , SO4 y Cl entran por transporte activo secundario (cotransporte).
2+ 2+ 2+ + +

FIJACIN DE CO2 Tres grupos de plantas segn el metabolismo fijador de CO2: Plantas C3 (metabolismo C3). ( 95% de las especies). El CO2 penetra por los estomas y se fija en el mesfilo mediante el Ciclo de Calvin . Plantas C4 (metabolismo C4). Aprox. 3% de especies. Tienen dos tipos de clulas fotosintticas: mesfilo (CO2 + fosfoenolpirvico (PEP) C4 y vaina del haz (C4 CO2 + PEP) Plantas CAM (metabolismo CAM). Semejante a las C4: Noche : CO2 + PEP C4 Ciclo de Calvin Da : C4 CO2 + PEP) Las algas toman CO2 en forma de in bicarbonato y una anhidrasa carbnica acumula CO2 en el entorno de la rubisco (enzima fijador de CO2 del ciclo de Calvin). CICLO DE CALVIN Proceso de fijacin de CO2, en el estroma que es el principal consumidor de ATP/NADPH. Es cclico por que la fijacin conlleva destruccin del substrato fijador. El carbono entra como CO2 y sale como triosas fosfato, generalmente reducidas (fosgliceraldehido). Consta de carboxilacin, regeneracin. tres fases: reduccin y

Fase

de carboxilacin.

RubP est en forma de dos ismeros cetoenlico: Rub cetoenlica (ms estable y mayoritaria) y RubP dienlica. La enzima RuBP-carboxilasa-oxigenasa (RubisCO) cataliza la fijacin de CO2 sobre la forma dienlica de la RuBP:

 Estructura de RuBisCO
Las rubiscos de plantas tienen 16 subunidades: 8 grandes codificadas por DNA nuclear contienen los centros activos (8 por molcula) y 8 pequeas codificadas por DNA cloroplstico. Subunidades grande y pequea de rubisco de Nicotiana tabaccum: alfahlices (rosa) y betaplega-mientos (amarillos). Las rubiscos de organismos fotosintticos mas primitivos son menos complejas (4+4 2+2).

Activacin de RuBisCO
La rubisco se activa con luz e inactiva (protege sus centros activos) en oscuridad. La activacin consta de dos pasos: 1. Carbamilacin: unin de un CO2 (diferente al que se va a fijar) a un resto NH2 de una lisina de la rubisco (aparecen cargas negativas superficiales)

2. Unin de iones Mg2+: El in magnesio orienta los dos substratos de la reaccin: CO2 y RuBP. Las condiciones que permiten la activacin de rubisco (pH alcalino y alta concentracin de magnesio) se dan en el estroma cuando los cloroplastos reciben luz. Puede ser que RuBP se una al centro activo antes de que rubisco se haya activado. Si ocurre as, la rubisco se inactiva y no se activar si antes no se separa el azcar del centro activo. Recientemente se ha comprobado que la enzima rubisco activasa interviene en el proceso de activacin de la rubisco al eliminar el azucar unido al centro activo y permitir la carbamilacin y posterior unin de magnesio:

Mecanismo de la reaccin
La Rubisco activa tiene unido un Mg2+ (verde) y un CO2). El in Mg2+ deja libre el plano opuesto al de la proteina (superior) La RuBP se un al Mg2+ por su lado superior a travs de dos oxgenos del C2 El CO2 se fija travs de un tomo de oxgeno al magnesio por el mismo lado. Se forma un enlace entre el C2 de la forma dienlica de RuBP y el C del CO2 formandose un intermediario de 6C (cetoarabinitolbifosfato CAB) que se rompe y forma 2 molculas de cido 3fosfoglicrico (PGA). La enzima tambin cataliza la incorporacin de O2 al C2 del azcar: (ver apartado de fotorrespiracin). Ac. Fosfogliclico PG- (x2) O2 RuBP CO2 Ac. 3-Fosfoglicerico (PGA) + CO2 Ruta del glicolato

Fase de reduccin. La reduccin de PGA ocurre en dos pasos:

Activacin de PGA: reaccin con ATP para formar bifosfoglicerato (BPGA) * Reaccin catalizada por PGA-quinasa 2+ * PGA-quinasa se activa con ATP, Mg y PGA . * Las condiciones de activacin de PGA-quinasa se dan en el estroma cuando los cloroplastos reciben luz. Reduccin de BPG a gosfogliceraldehdo (GAP): * Reaccin catalizada por GAP-deshidrogenasa, nica enzima del ciclo que consume NADPH. * PGA-quinasa se activa por ferredoxina-tiorredoxina (LUZ).
MECANISMO DE ACTIVACIN FERREDOXINA-TIORREDOXINA

Permite la activacin por luz de enzimas con alta proporcin de aminocidos azufrados: GAP-deshidrogenasa, sedoheptulosa bifosfatasa, fructosa bifosfatasa y fosforibulosaquinasa. Los electrones de PSI reducen los puentes disulfuro de los enzimas a travs de dos protenas: ferredoxina y tiorredoxina. Al quedar libres los grupos tilicos las enzimas se desagregan y exponen los centros activos.

DESTINO DEL CARBONO FIJADO Y REDUCIDO

GAP isomerasa establece un equilibrio entre el GAP formado y dihidroxiacetona fosfato (DHAP). Cualquiera de las dos triosas fosfato puede: Salir al citosol mediante el translocador fosfato para intervenir en la sntesis de sacarosa : GAP DHAP
estroma

citoplasma

Pi

Permanecer en el estroma e intervenir en la regeneracin de la rubisP o en la sntesis de almidn.

Fase de regeneracin
El carbono contenido en triosas fosfato reducidas (GAP/DHAP) se utiliza ntegramente en formar un compuesto de cinco carbonos RuBP). 1. Actividad aldolsica: GAP + DHAP 2. Actividad fructosa-bifosfatasa: FBP fructosa 6-fosfato (F6P) fructosa bifosfato (FBP)

La enzima fructosa-bifosfatasa: * Se regula por el mecanismo ferredoxina-tiorredoxina). * Es una isoforma diferente de la isoforma citoplasmtica

3. Actividad transcetolasa: Transfiere grupos glicoaldehido (2C) desde F6P a GAP: F6P + GAP xilulosa-5-fosfato (X5P) + + eritrosa-4-fosfato (E4P)

4. Actividad X5P-isomerasa: X5P ribulosa 5 fosfato (R5P) 5. Actividad fosforibulosa quinasa: R5P + ATP ribulosa bifosfato (RuBP)

La enzima fosforibulosa-quinasa se regula por el mecanismo ferredoxina-tiorredoxina 6. Actividad aldolsica. E4P + GAP sedoheptulosa bifosfato (SBP)

7.

Actividad tiorredoxina

SBP-bifosfatasa: SBP

regulada

por

el

mecanismo

ferredoxina-

sedoheptulosa-7-fosfato (S7P) 2 xilulosa-5-fosfato (X5P)

8. Actividad transcetolsica: S7P + GAP La xilulosa-5-fosfato se metaboliza a ribulosa-bifosfato de la forma descrita anteriormente. RENDIMIENTO ENERGTICO DEL CICLO DE CALVIN La Fijacin de 6 CO2 requiere: 18 ATP (12 ATP para reducir 12 PGA y 6 ATP para fosforilar 6 R5P). 12 NADPH para reducir 12 BPGA . Coste energtico por vuelta: 3 ATP y 2 NADPH

ATP/NADPH = 1,5

REGULACIN DEL CICLO DE CALVIN

La fijacin de CO2 depende de la disponibilidad de CO2 y luz PAR Para una [CO2]atm, un aumento de DFF provoca: Activacin de rubisco Sntesis ATP/NADPH Activacin ferredoxina/tiorredoxina

Velocidad de carboxilacin

Velocidad de regeneracin

RuBP

RuBP

CuandoV arboxilacin = Vregeneracin [RuBP] constante Las triosas fosfato reducidas salen al citoplasma e intervienen en la sntesis de sacarosa SNTESIS DE SACAROSA Ocurre en el citoplasma a partir de triosas fosfato reducidas. 1. La aldolasa condensa GAP y DHAP para formar fructosa bifosfato (FBP). 2. La fructosa-bifosfatasa elimina un fosfato de FBP (reaccin irreversible) La fructosa-bifosfatasa citoplasmtica se regula por Fructosa-2,6-bifosfato (F2,6BP), acoplando la actividad del ciclo de Calvin con el destino citoplasmticoa del carbono fijado: LUZ Fructosa-2,6-bifosfato (F2,6BP)

Ciclo de Calvin 1. Fosfoglucoisomerasa 2. Fosfoglucomutasa F6P

fructosa-bifosfatasa

Fructosa-6-fosfato

G6P

G1P

3. UDPG-pirofosforilasa G1P + UTP 4. Sacarosa-fosfato sintasa UDPG + F6P sacarosa-fosfato UDPG

5: sacarosa fosfatasa sacarosa-fosfato

sacarosa

La sacarosa-fosfato sintasa es una enzima que acopla la actividad del ciclo de Calvin, a travs de la concentracin de F6P y Pi, con la sntesis de sacarosa (se activa con G6P- proviene de F6P- y Pi):

fotosntesis F6P fosfato libre

G6P

actividad sacarosa-P sintasa

sintesis
sacarosa

Las concentraciones de G6P y Pi estn relacionadas, puesto que las triosas fosfato, precursoras de G6P, se intercambian por fosfato libre (Pi) a travs del transportador fosfato: G6P Pi La regulacin de sacarosafosfatasa (SPS) se consigue por fosforilacin de aminocidos especficos a travs de dos enzimas, una SPS-quinasa y una SPSfosfatasa que aaden o eliminan respectivamente un grupo fosfato a SPS. La forma fosforilada de SPS es menos activa que la no fosforilada: SPS se activa con G6P, porque G6P inhibe SPS-quinasa, y se inhibe por Pi, porque Pi inhibe SPS-fosfatasa.

ALMIDN Es una mezcla de dos polmeros: Amilosa: (1-4)-glucano lineal Amilopectina: eje central (1-4)-glucano con ramificaciones (1-4)en C6 (2).

glucano

Amilosa

Amilopectina

Es la forma mayoritaria de almacenamiento de carbono reducido.

METABOLISMO DE ALMIDN Da: sntesis a partir del exceso de carbono reducido que permanece en el cloroplasto y no se utiliza en regenerar RuBP. Noche: hidrlisis para mantener niveles basales de intermediarios del ciclo de Calvin suministro de y mantener la el

carbohidratos fotosntesis.

cuando

cesa

la

SNTESIS DE ALMIDN La sntesis de almidn comienza cuando la F6P se convierte primero en G6P y luego en G1P mediante actividad fosfoglucoisomerasa y fosfoglucomutasa respectivamente (ver reacciones en sntesis de sacarosa). G1P se activa al reaccionar con adenosintrifosfato (ATP) mediante actividad ADPglucopirofosforilasa: G1P + ATP ADP-glucosa

Los dos tipos de almidon sintasa agregan unidades de glucosa con enlace (1,4) a un glucano incipiente : (glucano)n + ADP-glucosa (glucano)n+1

Las enzimas ramificantes aaden unidades de glucosa con enlaces (1,6) a cadenas de amilasa.

 La sntesis de almidn se regula a travs del efecto de gliceraldehdo-fosfato y glucosa-6-fosfato sobre la enzima ADPglucopirofosforilasa

FOTORRESPIRACIN
Consumo de O2 por actividad oxigenasa de rubisco y formacin de CO2 en la ruta del glicolato. La ruta del glicolato requiere la participacin de cloroplastos, peroxisomas y mitocondrias. De forma global:
10 RuBP + 10 O2 + 2 ATP + 2,5 NADPH La relacin entre car-boxilacin y oxigenacin de rubisco depende sobre todo de la relacin O2/CO2. 0,9 RuBP + 0,5 CO2 + 2 ADP + 2,5 NADP + 2 Pi
+

La temperatura afecta a la fotorrespiracin a travs del efecto que tiene sobre la solubilidad de gases en lquidos. Aunque la solubilidad de los dos gases (O2 y CO2) disminuye conforme aumenta la temperatura, la solubilidad de CO2 disminuye ms que la de O2 y, por tanto si aumenta la temperatura el cociente O2/CO2 tambin aumenta: Tra O2/CO2 Fotor.

El significado fisiolgico de la fotorrespiracin es dudoso: disipacin de ATP/NADPH en condiciones de alta iluminacin y baja [CO2]?

METABOLISMO C4
El metabolismo C4 disminuye la tasa de fotorrespiracin al acumular CO2 en el entorno de la rubisco.

mesfilo En las plantas con metabolismo C4, los cloroplastos del mesfilo tienen mas grana ya que debe aumentar el flujo acclico de electrones (necesitan reducir OAA malato). Por el contrario, los de la vaina del haz tienen menos grana por conseguir NADPH del malato importado.

vaina del haz

Las plantas C4 economizan agua al abrir menos los estomas para tomar la misma cantidad de CO2.

METABOLISMO CAM
El metabolismo CAM disminuye la tasa de fotorrespiracin al acumular CO2 en el entorno de la rubisco.

El metabolismo CAM economiza agua: Permiten que el ciclo de Calvin se desarrolle con los estomas cerrados El CO2 entra durante la noche (tra. baja).

TRANSPIRACIN
CARACTERSTICAS GENERALES Definicin: prdida de vapor de agua desde la planta Funciones fisiolgicas: Regula el contenido hdrico Refrigera la planta Genera tensin en el xilema Fases: Evaporacin en las paredes celulares del mesfilo y difusin del vapor de agua a la atmsfera Tipos (vas de difusin del vapor de agua): Cuticular, Lenticular, Estomtica Magnitud: Maz: 200 kg de agua por ciclo de vida rbol de envergadura media: 5.000 kg de agua por mes Cuantificacin: 300-600 gramos de agua transpirada por gramo de materia seca producida) PRINCIPALES TIPOS DE TRANSPIRACIN

Los tipos de transpiracin en plantas hacen referencia a las vas de difusin del vapor de agua: A. Cutcula B. Lenticelas C. Estomas

2 INTERACCIONES ENTRE TRANSPIRACIN Y BALANCE ENERGTICO DE LA HOJA La transpiracin (evaporacin de agua es un mecanismo de refrigeracin por dos motivos: 1. El agua que permanece lquida va estando cada vez ms fra 2. La evaporacin de agua es un proceso endergnico que las plantas utilizan para disipar un exceso de energa mediante su conservacin como calor latente de vaporizacin

aire circundante

reflexin / reirradiacin

conveccin evaporacin de agua (calor latente)

radiacin solar

planta absorcin (fotosntesis)

FLUJO DE AGUA TRANSPIRADA T: tasa de transpiracin * Tasa total de transpiracin (T) (g.s-1) *Tasa de transpiracin especfica (Te): por unidad de superficie foliar (g. m-2.s-1) Ch y Ca: concentraciones de vapor de agua ( g.m-3) en la cmara subestomtica y el aire respectivamente rh y ra: resistencias (s. m-1) a la transferencia de vapor de agua de la hoja y la capa lmite respectivamente gw: conductancia de la fase gaseosa para la transferencia del vapor de agua (m. s-1). [Ch -Ca] T= T = [Ch -Ca].gw [rh+ra] Te = [Ch - Ca].gw

3 RESISTENCIA A LA TRANSPIRACIN Es la que encuentra el vapor de agua en su salida a la atmsfera: depende de la va de difusin. La resistencia total -RT- es la suma de dos resistencias parciales que actan en serie: externa (capa lmite de la atmsfera -Ratm-) y endgena (planta -Rplanta -). RT = Ratm + Rplanta La resistencia de la capa lmite refleja los efectos de la capa de aire, de espesor variable (generalmente < 5 mm) adyacente a la superficie foliar. La resistencia de la capa lmite aumenta con: * tamao de la hoja * criptas estomticas (depresiones de la epidermis donde se localizan los estomas) * enrollamiento de las hojas Ratm = 1,3 x 1/u donde u es la velocidad del aire * velocidad del viento

Cutcula Clulas guarda Cripta

Arriba : hoja de Adelfa con estomas en criptas del envs. Derecha: hoja de Ficus con estomas localizados en criptas del envs

Resistencia de la Planta La difusin del vapor de agua puede darse a travs de toda la superficie area de la la planta: lenticelas en la estructura secundaria del tallo y cutcula o estomas en la hoja. Por tanto la resistencia de la planta es la de tres resistencias parciales que actan en paralelo. La resistencia total de tres resistencias que actan en paralelo se calcula mediante: 1 1 1 1 = + + Rplanta Rlenticular Rcuticular Restomas Cuando la planta est en su poca de de desarrollo, la prdida de agua por lenticelas es, comparada con la prdida por las hojas, muy pequea, y por esta razn no la tenemos en cuenta a la hora de calcular el flujo total de agua transpirada. No obstante la resistencia de las lenticelas puede ser un factor importante, que determine la supervivencia de la planta, cuando la resistencia estomtica y cuticular sean altas (estomas cerrados y cutculas gruesas y cerosas).

4 La resistencia de la hoja se suele limitar es la suma de dos resistencias parciales que actan en paralelo: cutcula RC y estomas RE 1 = Rplanta Restomas 1 + Rcuticular 1

La resistencia de los estomas (B) es la ofrecida por los ostiolos. Est modulada por factores ambientales: luz, CO2, temp.,suelo, La resistencia de la cutcula (RC) depende de su grosor y de la proporcin de ceras (A). Tambin est modulada por algunas condiciones ambientales (HR)

(A)

(B)

Arriba: estoma cerrado (A) y abierto (B). Derecha: cutcula del haz de una hoja. La pared celular est en contacto con la primera capa de la cutcula, compuesta de una mezcla de ceras y cutina. Algunas especies refuerzan la impermeabilidad de la cutcula con una capa de cera epicuticular

Estoma de la hoja Pelargonium hortorum

de

Epidermis de Serjania comunis, donde se distinguen: clulas epidrmicas normales, pelos glandulares y estomas

5 CARACTERSTICAS DE LAS CLULAS OCLUSIVAS Volumen celular ms pequeo que el resto de clulas epidrmicas Ausencia de plasmodesmos con clulas vecinas: la va del simplasto est interrumpida

Citoplasma con abundantes orgnulos subcelulares La mayora de las especies tienen cloroplastos Membrana plasmtica funcional: actividad +H-ATPasa

Las paredes celulares de las clulas oclusivas tienen: * micelacin radial (las microfibrillas de celulosa se orientan perpendicularmente al eje mayor de la clula * engrosamiento en la parte del ostiolo

MOVIMIENTO ESTOMTICO

La actividad H+-ATPasa del plasmalema y tonoplasto (figura de la derecha no se representa la H+-ATPasa del tonoplasto, -ver leccin de transporte celular-) utiliza la energa del enlace fosfato del ATP para sacar H+ al apoplasto.

Los canales potasio permiten la entrada de K+ en las clulas oclusivas

ESTOMA A CERRADO

Acumulacin de in potasio En respuesta al gradiente de potencial electroqumico creado por actividad ATPasica

La micelacin radial motiva que la presin de turgor expanda la pared celular externa en sentido perpendicular al de las microfibrillas de celulosa. El mayor grosor de la pared celular interna impide que crezca de igual forma que la externa. La clula oclusiva se arquea.

A travs de los canales potasio Los aniones cloruro y malato actan de acompaantes Aumento de su presin osmtica Absorcin de agua Presin de turgor ESTOMA ABIERTO

FACTORES QUE INFLUYEN EN LA TRANSPIRACIN Factores exgenos: Humedad relativa Temperatura Viento CO2 Luz Potencial hdrico del suelo Factores endgenos: Tipo de planta Orientacin de la hoja Superficie de de la hoja: enrollamiento y criptas Raz

Humedad relativa: * Afecta al gradiente de concentracin de vapor de agua entre el espacio areo de la hoja y la atmsfera: HR Flujo de agua transpirada Temperatura: * Sobre la solubilidad del vapor de agua en aire: Tra. Csat HR Flujo de agua transpirada * Sobre la apertura de estomas: a travs del efecto sobre los enzimas que participan en la acumulacin de potasio (ver a continuacin) y en la formacin y consumo de CO2.

Efecto del viento sobre la transpiracin Aire calmado ostiolo El viento aumenta tasa de agua transpirada por abierto unidad de superficie foliar al disminuir la rext (resistencia de la capa estacionaria)

ostiolo cerrado

rext limitacin flujo

rh

rh

Con aire calmado (rext grande):

Estomas abiertos:

restomas

pequea

rhoja

pequea La rext limita la transpiracin. rh (estomas cerrados)

Estomas cerrados: aunque la la

rext

es grande,

restomas

es an mayor

La

rhoja (

Viento rext

rrestomas) limita la transpiracin

Con viento:
La

o transpiracin (cuando los estomas estn cerrados restomas limita el flujote agua

rext es siempre baja (con estomas abiertos cerrados) restomas controla la

Efecto de la concentracin de CO2 sobre la transpiracin Los estomas se cierran cuando se hace pasar sobre la hoja una concentracin alta de CO2 (igual o superior a la atmosfrica) y se abren cuando disminuye dicha concentracin El efecto del CO2 est relacionado con la acidificacin del citosol de las clulas CO2 oclusivas: cesa la formacin de malato, comienza la degradacin de malato y se inactivan las ATPasas de membrana CO2 Efecto de la luz sobre la transpiracin Dos vas de respuesta: a la radiacin fotosintticamente activa (PAR) y radiacin azul. Radiacin PAR clulas oclusivas CO2 Los estomas de todas las plantas, excepto las CAM, se abren por el da y se clulas mesfilo cierran por la noche

El ciclo de Calvin desarrollado por el da en los Abertura estomtica cloroplastos de las clulas oclusivas y mesfilo causa un descenso de la concentracin de CO2 en los espacios areos del mesfilo estomas abiertos Radiacin azul El fotorreceptor sensible a la radiacin azul probablemente tenga estructura de flavina. El mecanismo de transduccin de la luz azul es menos conocido aunque recientemente se ha propuesto un papel clave a unas protenas denominadas fotropinas

8 Efecto del potencial hdrico del suelo sobre la transpiracin Los estomas permanecen abiertos ante dficits hdricos moderados Cuando el del suelo alcanza un valor crtico, comienza la sntesis de cido abscsico (ABA) El ABA inhibe las ATP-asas de la membrana de las clulas oclusivas cierre de estomas Los estomas permanecen cerrados hasta que no se reponga el potencial hdrico del suelo

Resumen del control de la abertura-cierre de estomas

Los estomas controlan la entrada de CO2, que se va a fijar por fotosntesis, y la prdida de vapor de agua, que va a ser repuesta por el agua absorbida. Estos dos factores, concentracin de CO2 en los espacios areos de la hoja y cantidad de agua disponible en el suelo (suelo) regulan a abertura y cierre de estomas. Cuando un estoma se cierra en respuesta a uno de estos factores, CO2 y suelo, se vuelve insensible al otro. Es decir si se cierra en respuesta a una alta concentracin de CO2, no se vuelve a abrir hasta que no se reduzca dicha concentracin, y se cierra en respuesta a un dficit hdrico en el suelo, no se vuelve a abrir hasta que se reponga el agua del suelo. La luz ejerce dos respuestas en los estomas: la de la luz fotosintticamente activa (PAR) sobre la concentracin de CO2 y la de la luz azul sobre, probablemente, la actividad ATPasica de las clulas oclusivas. La primera luz del da inicia la fotosntesis en las clulas del mesfilo y el CO2 acumulado (no fijado) durante la noche comienza a fijarse. A diferencia de las clulas adyacentes, las clulas guarda de la mayora de las plantas tienen cloroplastos y tambin contribuyen a reducir la concentracin de CO2 se los estomas. La respuesta a la luz azul est mediada por un fotorreceptor cuya estructura, aunque tiene algunos aspectos aun desconocidos, puede tratarse de una flavina. El suelo ejerce su efecto sobre los estomas mediante una fitohormona, cido abscsico (ABA), que se sintetiza en respuesta a una cada del turgor de la planta. Esta fitohormona es reconocida por receptores de las clulas oclusivas que, una vez activados, inician una va de transduccin (lectura de

9 . .

Regulacin temporal del movimiento estomtico

Las plantas, con excepcin de las plantas con metabolismo CAM, abren los estomas al amanecer, cuando el potencial hdrico de la hoja es alto y la temperatura baja (la solubilidad del vapor de agua en el aire es baja). A medioda, cuando el potencial hdrico de la hoja desciende y la temperatura aumenta (la solubilidad del vapor de agua en el aire aumenta), los estomas pueden llegar a perder agua directamente a travs de la cutcula de las clulas oclusivas, cerrndose parcialmente. Los estomas se reabren despus del medioda, cuando el potencial hdrico de la hoja se recupera y la temperatura comienza a descender. El dficit hdrico de las hojas se restaura por la noche, cuando los estomas estn cerrados. Las plantas con metabolismo CAM abren los estomas cuando comienza a anochecer. Ello se debe a una ruta adicional de fijacin de dixido de carbono en el mesfilo: la actividad fosfoenolpiruvatocarboxilasa (PEP-carboxilasa) del citoplasma 2del mesfilo une un in bicarbonato (HCO ) sobre PEP y forma un dicido de cuatro carbonos, cido oxalactico (OAA), que posteriormente se reduce a cido mlico y se introduce en la vacuola. En consecuencia, la concentracin de CO2 en el mesfilo desciende y los estomas se abren. Por el da, el anin malato sale de la vacuola y se descarboxila en el citoplasma. La concentracin de CO2 aumenta y ello trae consigo dos importantes consecuencias: los estomas se cierran y el CO2 comienza a fijarse en el ciclo de Calvin. El ambiente en donde se desarrollan las plantas con metabolismo CAM es seco y muy caluroso durante el da, por lo que, si los estomas estuviesen abiertos para captar CO2, no podran recuperar el agua perdida. Sin embargo, esta ruta de carboxilacin de PEP y descarboxilacin de malato les permite realizar el ciclo de Calvin con los estomas cerrados.

FOTOFOSFOLIRACIN
Sntesis de ATP en cloroplastos utilizando la energa absorbida en los fotosistemas. Es el resultado del acoplamiento energtico al transporte de electrones cclio o acclico inducido por la luz LUZ ADP + Pi + cloroplastos ATP En ocasiones se habla de fotosforilacin cclica y acclica. Fotosforilacin acclica. En los fotosistemas I y II Est acoplada a la fotlisis del agua y a la sntesis NADPH. Fotosforilacin cclica. En el fotosistema I. Es independiente de la fotlisis del agua y de la formacin de NADPH.

Hiptesis de Mitchell
LUZ a

clorofilas

energa redox

Canal Fotosinttico Transportador de e

ATP
energa electroqumica (gradiente de H+) Factor de Acoplamiento (ATP-sintasa)

La energa albergada en el gradiente de H entre el lumen y el estroma es igual a la + + diferencia de potencial electroqumico de H (H ) en ambos compartimentos. A esta energa tambien se la llama fuerza proton-motriz (fpm) porque es la que movera + espontneamente los H . La fpm depende del gradiente de pH (gradiente de potencial qumico) entre el lumen y el estroma y del potencial de membrana (gradiente de potencial elctrico)

fpm (milivoltios) = 60. pH + E

Las tres principales Iinterrogantes que plantea la la hiptesis de Mitchell son: 1. Dnde y cmo se acopla el transporte de electrones a la acumulacin de protones? 2. Cunto vale el pH entre el lumen y el estroma? y, en consecuencia qu valor tiene la fpm cundo se ilumina el cloroplasto? 3. Cul es la relacin estequiomtrica H+/ATP? cuntos H+ tienen que abandonar el lumen para forma una molcula de ATP?

 Procesos y lugares de acoplamiento de energa redox (transporte de electrones) y energa electroqumica: Fotlisis de agua en el lumen Translocacin de protones en el citcromo b6/f Cuando se iluminan cloroplastos el pH es 3- 3,5 unidades y E 3omV. fpm (milivoltios) = 60. pH + E
M M

fpm (milivoltios) 210 mV

La razn de que cuando se iluminan cloroplastos una variacin de pH tan grande provoque un potencial de membrana tan bajo es el movimiento simultaneo de iones acompaantes: Entrada de Mg
2+

al estroma (necesaria para activar la rubisco).

Entrada de in Cl al lumen (necesaria para activar la protena OEC). El calor de formacin del ATP es 50 kJ/mol 518 mV La relacin estequiomtrica H /ATP que se deduce de la fpm (inferior a 1/3 del calor de formacin) es: H+/ATP = 3:1
+

Estructura de la ATP-sintasa
Consta de dos partes: CFo-CF1. CFo es el componente lipfilo. Constituido por 4 tipos de subunidades diferentes que forman un canal por el que circulan los protones CF1 es el componente hidrfilo cataltico que se localiza hacia el estroma. CF1 et constitudo por cinco subunidades peptdicas: 33111 CF1 tiene 1 centro activo en cada par . La subunidad intercambia protones entre el lumen y el estroma (acepta protones del lumen y los deja en el estroma). Las subunidades y estabilizan la unin de CF1 a CFo. CF0 CF1

Mecanismo de actividad de la ATP-sintasa

(modelo del lado alternante)
Cada CF1 tiene tres centros catalticos. Cada uno de ellos est en una de tres posibles conformaciones Nunca se repite al mismo tiempo la misma conformacin en dos centros

Conformacin O (open): se libera el ATP recin sintetizado Conformacin L (loose): se unen los substratos de la reaccin (ADP y P) Conformacin T (tight): se sintetiza ATP pero queda atrapado en el centro de reaccin El intercmbio de protones por la subunidad provoca cambios en su conformacin que se transmiten a los centros activos situados en un par

FOTOSNTESIS
Proceso mediante el cual los organismos con nutricin fotoauttrofa sntetizan molculas orgnicas a partir de materia inorgnica (agua y dixido de carbono) utilizando la energa radiante del sol .

La fontosntesis consta de dos fases: Fase luminosa: la energa radiante del sol es absorbida por los pigmentos fotosintticos y utilizada en la sntesis de ATP y NADPH Fase de sntesis: el ATP y NADPH son utilizados en la fijacin de CO2 (ciclo de Calvin) y otros procesos metablicos (reduccin de nitratos, reduccin de sulfatos)

ECUACIN GENERAL DE LA FOTOSNTESIS

2n H20 + n CO2

Fotn a

Cn[H2O]n + n O2 + n H20

cloroplasto

La lnea de puntos separa las dos fases de la fotosntesis, hacia arriba la fase luminosa y hacia abajo la fase de sntesis. El ATP y el NADPH unen ambas fases: 2nH2O n/2O2 + 2nH+ + 2ne +nH2O
-

n NADP

nNADPH

ADP + P ATP

n CO2

C [H O]
n

CUANTIFICACIN DE LA FOTOSNTESIS
Mediante cualquier componente de la ecuacin general: Consumo de CO2 Formacin de O2 y materia orgnica Utilizacin de luz (luz absorbida o luz emitida por fluorescencia). Las clulas vegetales tambin respiran: los resultados obtenidos al cuantificar la fotosntesis (consumo de CO2 y formacin de O2) son indicativos de la fotosntesis neta (FN). La concentracin de dixido de carbono depende de la actividad fotosinttica y mitocondrial (consumo y formacin de CO2) La fotosntesis real (FR) es la que resulta despus de corregir la fotosntesis neta sumndole lo que le resta la respiracin:

CO2

FR = FN + R, donde R representa la intensidad de los procesos contrarios a la fotosntesis

RESPIRACIN

FOTOSNTESIS

PUNTO DE COMPENSACIN La fotosntesis est limitada por uno de los factores de la ecuacin general (CO2, o luz). En la representacin de la fotosntesis neta frente a uno de los factores anteriores, CO2 (izquierda) o luz (derecha), la fotosntesis neta no se anula cuando el factor limitante vale cero

Se define punto de compensacin como el valor del factor limitante, CO2 o luz, que anula la fotosntesis neta. El punto de compensacin refleja la eficacia de los procesos contrarios a la fotosntesis, formadores de O2 y consumidores de C02: las plantas A que no fotorrespiran (C4) tienen puntos de compensacin ms pequeos que las plantas que fotorrespiran (C3). El punto de compensacin de luz vara entre plantas adaptadas a mucha o poca luz: las plantas de sombra tienen mayores puntos de compensacin de luz, y se saturan antes(con densidades de flujo fotnico mas bajas) que las plantas de luz La pendiente de la curva (derecha) en la fase lineal es la capacidad cuntica mxima de la hoja (fotones absorbidos por molcula de CO2 fijada).

LOCALIZACIN DE LA FOTOSNTESIS
Existen dos tipos de fotosntesis Fotosntesis oxignica: Tiene lugar en los cloroplastos, utiliza el agua como fuente de electrones y forma O2. Fotosntesis anoxignica: utiliza una fuente de electrones distinta del agua y no forma O2. La hoja es un rgano especializado en la fotosntesis: Cada clula del mesfilo tiene muchos cloroplastos. En una Angiosperma hay 15-20 cloroplastos por clula del mesfilo) La hoja es un superficie/volumen alta rgano con una relacin

La hoja tiene grandes y numerosos espacios areos ( 35%). La hoja est muy vascularizada

CLOROPLASTOS
Son plastidios especializados en la funcin fotosinttica Dimetro: 5-15 m Los cloroplastos constan de tres partes: Cubierta. Doble membrana. Separa el estroma del citosol. Estroma. Matriz hidrosoluble con enzimas y substratos de la fase de sntesis. Contiene ADN. Tilacoides. Membranas cerradas que delimitan dos espacios: exterior (estroma) e interior (lumen tilacoidal). Se originan al invaginarse la membrana interna

La fase luminosa se desarrolla en los tilacoides mientras que la fase de sntesis ocurre en el estroma.

ESTROMA Ttiene un plsmido circular (130.000-160.000 pares de bases) y toda la maquinaria bioqumica necesaria para replicarlo y transcribirlo. Los ribosomas del cloroplasto son 70S. Las protenas del cloroplasto pueden ser codificadas por DNA del nucleo, del cloroplasto o de los dos (origen mixto). Es frecuente la existencia de una seal peptdica de trnsito (TS) para atravesar la cubierta del cloroplasto. Algunas protenas sintetizadas en el citoplasma pasan al estroma y actan como factores reguladores de la traduccin en el estroma.

TILACOIDES Los pueden encontrarse: Apilados: la cara externa de uno est en contacto con la cara externa de otro. Un grupo de tilacoides apilados se llama pila y el conjunto de pilas de un cloroplasto se llama grana. No apilados: la cara externa en contacto con el estroma.

Los tilacoides apilados y no apilados tienen distinta composicin y participan de distinta forma en la fotosntesis

ORIGEN DE LOS CLOROPLASTOS Los organismos fotosintticos evolucionaron a partir de un ancestro unicelular, resultado de la simbiosis entre dos clulas: una procariota fotosinttica (cianobacteria?) y otra eucaritica no fotosinttica. El origen endosimbitico de los cloroplastos se basa hechos:

1. Maquinaria bioqumica (enzimas) y gentica (ribosomas). 2. La membrana externa de la cubierta es estructural y funcionalmente anloga a una membrana plasmtica, aunque con una mayor permeabilidad. FORMACIN DE LOS CLOROPLASTOS Las clulas vegetales tienen varios tipos de plastos con diferentes funciones (leucoplastos, amiloplastos, cromoplastos y cloroplastos)

Todos los plastos proceden de un proplastidio comn presente en clulas sin diferenciar La formacin de uno u otro plasto se puede alterar variando las condiciones de crecimiento El paso de etioplasto a cloroplasto requiere luz

LUZ

PROPLASTIDIO

OBSCURIDAD

Etioplasto. La membrana interna se invagina y las membranas forman una estructura prolamelar

Cloroplasto. La membrana interna se invagina y se originan los tilacoides que posteriormente se agrupan en pilas

PIGMENTOS FOTOSINTTICOS Un pigmento es cualquier sustancia que absorbe luz. El color de un pigmento es el resultado de la longitud de onda reflejada (no absorbida). Las clorofilas son verdes porque absorben en el azul y rojo Los pigmentos fotosintticos utilizan la energa absorbida en ejecutar un trabajo metablico: sntesis de molculas

Existen tres tipos de pigmentos fotosintticos:

CLOROFILAS (a) CAROTENOIDES (b) FICOBILINAS (C)

DISTRIBUCIN DE LOS PIGMENTOS FOTOSINTTICOS Clorofilas: en todos los organismos con fotosntesis oxignica Carotenoides: en todos los organismos fotosintticos Ficobilinas: en tres familias de algas: Cianoficeas (pprocariotas) y Feoficeas (eucariotas) y Criptoficeas (eucariotas).

CLOROFILAS Hay tres tipos de clorofilas: Clorofila a. Est presente en todos los organismos con fotosntesis oxignica. Clorofila b. Aparece en fanergamas, musgos, helechos y algunas familias de algas eucariotas y procariotas (proclorofitas) Clorofila c. (varios tipos c1, c2). No tiene fitol. Est presente en aquellas familias de algas que no contienen clorofila b.

ESTRUCTURA DE LAS CLOROFILAS La molcula de clorofila tiene dos partes Cabeza: * Macrociclo plano formado por cuatro anillos pirrlicos con un tomo de magnesio * Hidrfila * Responsable del color (absorbe dos tipos de fotones: azules y rojos) Cola: Cadena de fitol (C20H39OH) Lipfila Estabiliza la molcula en el tilacoide BIOSNTESIS DE CLOROFILAS

Glutamato cido -amino-levulnico Porfobilingeno Uroporfitingeno Protoporfirina Mg-Protoporfirina Protoclorofilida OBSCURIDAD PROTOCLOROFILA a CLOROFILA a

LUZ

CAROTENOIDES Dos tipos de carotenoides Carotenos. Formados por C y H. Sin oxgeno Xantofilas: Carotenos oxidados

Xantfilas -caroteno BIOSNTESIS DE CAROTENOIDES Los carotenoides son diterpenos que se sintetizan a partir del cido mevalnico va Geranil-Geranil-pirofosfato

La oxidacin de carotenos da lugar a xantfilas

los las

FICOBILINAS Estn presentes en tres familias de algas: cianoficeas (procariotas), algas rojas y criptofitas (eucariotas) Tienen estructura abierta tetrapirrlica, aunque cuando se unen a protenas adoptan una estructura semicerrada Los principales tipos son: Ficoeritrinas Ficocianinas Las ficobilinas se unen a protenas para formar ficobiliprotenas. Las apoprotenas (parte proteica de la ficobiliproteina) son trmeros de dos subunidades peptdicas: (-)3. Los principales tipos de ficobiliprotenas son: Ficoeritroprotenas (Absorcin max. 550 nm) Ficocianoprotenas (Absorcin max. 630 nm) Aloficocianoprotenas (tipo especial de ficocianoprotena max. 645 nm)

(Absorcin

 Las ficobiliprotenas se asocian en complejos proteicos llamados ficobilisomas El centro del ficobilisoma est prximo al centro de reaccin del PSII Los ficobilisomas substituyen al LHCII

FUNCIONES DE LOS PIGMENTOS FOTOSINTTICOS Las clorofilas y los ficobilinas solo tienen funciones fotosintticas: Clorofilas: pigmentos accesorios y centros de reaccin Ficobilinas: pigmentos accesorios Los carotenoides tienen funciones fotosintticas y no fotosintticas: Funciones fotosintticas: pigmentos accesorios Funciones no fotosintticas: Proteccin de las clorofilas y coloracin de tejidos

ESPECTRO DE ABSORCIN EL espectro de absorcin representa la DFF absorbida por una molcula a diferentes longitudes de onda. Se realiza con un espectrofotmetro que contiene una fuente de luz asociada a un prisma polarizador, que selecciona una determinada longitud de onda, un fotodetector, que detecta la DFF no absorbida y un registrador.

Espectro de absorcin de clorofila a, clorofila b, -caroteno, ficoeritrina y ficocianina.

EXCITACIN DE PIGMENTOS (absorcin de luz)

BALANCE DE LA RADIACIN SOLAR Radiacin emitida por el sol (100%) Atmsfera (50%): reflexin (23%), absorcin (19%), dispersin (8%) Superficie de la tierra (50%) : absorcin (47%), reflexin (3%)

TIPOS DE RADIACIONES EMITIDAS POR EL SOL

La fraccin del espectro de radiaciones emitidas por el sol correspondiente a la luz es muy pequea.

NATURALEZA DE LA LUZ La luz tiene una doble naturaleza: Se transmite como onda:

Se emite y absorbe como partcula (fotn) sin masa y con carga energtica (E) inversamente proporcional a la longitud de onda con que se transmite (): h.c E = E = h., siendo = c/ La energa de un mol de fotones (einstein) se obtiene multiplicando la E de un fotn 23 por el nmero de Avogadro (N = 6,023.10 ). MODELO DE BOHR Segn el modelo de Bohr los protones y neutrones se localizan en el nucleo del tomo y los electrones en los orbitales. En cada orbital coexisten dos electrones con dif-rente sentido de giro Los orbitales de menor energa estn localizados ms cerca del nucleo. EXCITACIN DE PIGMENTOS (absorcin de luz) Los tomos realizan transiciones entre orbitales, permitidas por la mecnica cuntica, mediante la absorcin o emisin de energa. La absorcin de un foton (h) causa el desplazamiento de un electrn desde su orbital estable al correspondiente *

La diferencia de energa entre los orbitales y * tiene que ser igual igual a la carga energtica del fotn (h )

 La ley de Stark-Einstein establece que el fotn absorbido por el pigmento debe contener la diferencia de energa exacta entre los dos orbitales. Se descarta: a) La excitacin de un pigmento por dos fotones. b) La excitacin de dos pigmentos por un fotn. La energa del fotn absorbido por los pigmentos fotosintticos permanece en el estado excitado

Las clorofilas absorben dos tipos de fotones y logran dos estados excitados: S2 para fotones azules y S1 para fotones rojos. Los carotenoides y ficobilinas absorben un tipo de fotn y solo logran un estado excitado.

Cuando un pigmento se excita pueden suceder varias cosas: Relajacin trmica. Las clorofilas se relajan parcialmente emitiendo calor hasta el subnivel energtico de menor energa del correspondiente estado excitado (S2 o S1). Emisin de fluorescencia. La fluorescencia es la reemisin de luz desde el estado excitado. Las clorofilas emiten fluorescencia desde S1 (fluorescencia roja). Por este motivo, la iluminacin de una suspensin de clorofila con luz azul emite fluorescencia roja (si las clorofilas se iluminan con azul las vemos rojas)

Clulas de Spirogira iluminadas con luz blanca (izquierda) y luz azul (derecha). Oxidacin: El pigmento pierde el electrn excitado que pasa al aceptor primario de electrones del correspondiente fotosistema. Los pigmentos de las antenas absorben luz y emiten fluorescencia. La fluorescencia es captada por molculas de pigmentos vecinas que logran as excitarse. El resultado es la canalizacin de la energa absorbida hacia los centros de reaccin de los fotosistemas. Cuando las clorofilas de los centros de reaccin (en los dos fotosistemas son dmeros de clorofila a, P680 y P700) se excitan provocan la reduccin de su aceptor de electrones primario.

 Los electrones que saltan de los centros de reaccin entran en el Canal Fotosinttico Transportador de Electrones (CTE). Los ltimos transportadores del PSII y PSI son una quinona y una ferredoxina respectivamente

ULTRAESTRUCTURA DEL TILACOIDE Los pigmentos fotosintticos y los transportadores de electrones se unen a cuatro complejos proteicos del tilacoide: Fotosistema II (PS II), Citocromo b6/f y Fotosistema I (PS I): Actan en serie + en el transporte de electrones desde el H2O hasta el NADP ATP-sintasa: Sintetiza ATP utilizando el gradiente de protones entre el lumen y el estroma generado por el transporte de electrones.

La figura no incluye la ATP-sintasa. Se incluye la enzima ferredoxina+ NADP -oxidorre-ductasa (enzima que se encuentra unida al tilacoide por el lado estromtico MOVIMIENTO DE ELECTRONES EN TRANSPORTADOR DE ELECTRONES (CFTE) EL CANAL FOTOSINTTICO

Los electrones se pueden mover por el CFTE de dos formas: cclica y aciclicamente: Flujo de electrones acclico Origen / final PS II PS I Citocromo b6/f Genera gradiente electroqumico de H+ Forma oxgeno Forma NADP+oxgeno H2O / NADP SI SI SI SI SI SI
+

cclico PS I / PSI NO SI SI SI NO NO

Flujo acclico de electrones FOTOSISTEMA II

Flujo cclico de electrones

Tiene actividad fotoinducida aguaplastoquinona oxidorreductasa Estructura polipeptdica D1D2: subunidades del nucleo que unen al P680 QA, QB: quinonas, Phe: feofitina. Z: tirosina (donador primario de edel PSII MSP: protena manganeso (OEC) LADO OXIDANTE DEL FOTOSISTEMA II El PSII puede encontrarse en uno de cuatro posibles estados S. Cada estado S (S1, S2, S3 y S4) es un estado de oxidacin superior (una carga positiva ms). P680+ se reduce por su donador primario de electrones, Z (trosina de una subunidad proteica del nucleo que pasa a + un estado de catin Z ). La proteina OEC + reduce a Z , a travs de un tomo de Mn. La oxidacin de OEC coincide con la acumulacin de una carga positiva en el PS II (cambio de estado S). La acumulacin de 4 cargas positivas (estado S4) provoca la hidrlisis de 2 H2O + (formacin de O2 y depsito de 4H en el lumen). Izquierda. Estructura probable del ncleo de manganeso estabilizado en la protena OEC

LADO REDUCTOR DEL FOTOSISTEMA II

Los electrones abandonan el PSII y reducen molculas de plastoquinona (transportador de dos electrones) .

FOTOSISTEMA I Las ferredoxinas reducidas pueden: Reducir NADP (son necesarias dos molculas de ferredoxina para + reducir una molcula de NADP . Ceder el electrn citocromo b6/f. al complejo
+

Intervenir directamente en reacciones metabilicas de reduccin Ao,: aceptor primario de elctrones (feofitina), A1: quinona, X: ferredoxina, PC: plastocianina. FX, FA, FB: sulfoferroprotenas.

CRECIMIENTO Y DESARROLLO DE PLANTAS

Sucesin ordenada de eventos que colaboran a la progresiva elaboracin del cuerpo de la planta y la capacitan para obtener alimento, reproducirse y adaptarse al medio. Engloba dos componentes: Cuantitativos: Cambios en el tamao: crecimiento. Cualitativos: Cambios en la forma: diferenciacin (clula), morfognesis (rgano). Morfognesis (Sinnimo de desarrollo): Integracin de divisiones y diferenciaciones expansiones- celulares que acontecen durante el ciclo vital de una planta. CRECIMIENTO DE PLANTAS Variacin irreversible del tamao de una clula, tejido, rgano o planta. El crecimiento descarta variaciones reversibles puesto que la entrada y salida de agua en clulas vegetales es reversible. El crecimiento continuado requiere de una asociacin espacial y temporal de divisiones y expansiones celulares. La divisin celular no origina crecimiento si no se acompaa de la elongacin irreversible de las clulas hijas. Mecanismo de crecimiento: expansin celular irreversible que conlleva ganancia de peso seco. La expansin celular est causada por efecto de la presin de turgencia sobre una pared celular relajada:

celula hija 1. Divisin celular celula hija

2. Relajacin de la pared celular

presin de turgencia

celula rigidez

celula hija pared relajada 3. Elongacin

4. Sntesis nuevos componentes

Clula hija elongada

RELAJACIN DE PARED CELULAR Endo-(1,4)-D-glucanasa: rompe cadenas de xiloglucano (poco probable en relajacin de la pared) Xiloglucano-endotransglicosilasa (XET): alarga cadenas de xiloglucano Expansinas: rompen puentes de hidrgeno entre celulosa y hemicelulosas

MERISTEMOS Estn formados por clulas indiferenciadas. Pueden estar activos o inactivos Pueden ser primarios o secundarios. Meristemos primarios. Estn en el embrin de la planta: * Meristemo caulinar: forma parte area. * Meristemo radicular: forma parte subterrnea. Meristemos secundarios. Se forman por actividad de los meristemos primarios (estn presentes en el cuerpo de la planta). Meristemo caulinar de planta dicotilednea. El meristemo ocupa una posicin terminal en el tallo y se protege por los primordios foliares Meristemo radicular de planta dicotilednea. El meristemo ocupa una posicin no terminal y se protege por la caliptra.

 Las clulas se dividen en los meristemos y las clulas hijas: Continan indiferenciadas

como

clulas de

Inician

una ruta diferenciacin celular.

Los meristemos primarios van aadiendo unidades repetitivas denominadas metmeros. El metmero de la parte area se denomina fitmero. El fitmero est formado: rgano lateral (hoja). Posicin segn filotaxia. Nudo. Zona del tallo dnde se une la hoja. Meristemo axilar. El meristemo caulinar se segrega en la axila de la hoja. Entrenudo. Zona del comprendida entre dos nudos. tallo

Algunas plantas crecen vegetativamente en forma de roseta: los entrenudos no se alargan una vez que se forman El inicio de la floracin coincide con el crecimiento del entrenudo superior. El alargamiento del tallo (bolting) favorece la polinizacin.

MERISTEMO CAULINAR Aprox. 100 m de dimetro con 800-1.200 clulas pequeas, con paredes celulares delgadas y citoplasma denso. Tiene dos partes: Tnica Corpus Un anlisis ms detallado revela existencia de tres capas de clulas con diferente plano de divisin celular L1: externa, una clula de grosor y divisin celular anticlinal L2 (intermedia, grosor variable y divisin anticlinal (clulas internas) y periclinal (clulas ms externas). L3 (interna). Grosor variable entre especies. Divisin celular en planos L1 origina la epidermis, mientras que L2 y L3 contribuyen a la formacin de tejidos centrales del tallo y hojas El gancho plumular protege el meristemo apical durante la emergencia de plntulas dicotiledneas. La luz provoca, a travs del fotorreceptor fitocromo, la desaparicin del gancho plumular.

 El gancho plumular protege el meristemo apical durante la emergencia de plntulas dicotiledneas. La luz provoca, a travs del fotorreceptor fitocromo, la desaparicin del gancho plumular. La luz inhibe, a travs del fotorreceptor fitocromo, el crecimiento del coleoptilo.

El cultivo de meristemos es una herramienta til para eliminar virosis sistmicas en plantas. Se regenera la planta entera a partir del meristemo caulinar. Se basa en la ausencia de comunicacin floemtica entre el meristemo y el resto de la planta. Relacin directa: Tamao / Capacidad Regenerativa Tamao / carga vrica MERISTEMO RADICAL

No ocupa una posicin terminal sino est protegido por la caliptra. La caliptra tiene dos funciones: Proteccin del meristemo Percepcin de la gravedad (columela)

 El meristemo radical tiene cuatro capas de clulas iniciales (centro quiescente y tres capas de clulas iniciales). Clulas iniciales centrales (centro quiescente, (CQ): Divisin celular lenta aunque se acelera en respuesta a heridas. Capacidad de regeneracin de la raz completa. Promeristemo: formado por el CQ y las clulas iniciales ms prximas. Cllulas iniciales (CI). Prximas a CQ: Divisin celular rpida Tres tipos: Clulas iniciales del cilindro central. Originan los tejidos internos incluyendo tejido vascular. Clulas iniciales corticales. Generan el crtex Clulas iniciales de la caliptra (caliptrgeno). Forman la caliptra.

El centro quiescente produce los tres tipos de clulas iniciales CI ENDODERMIS

CI CILINDRO CENTRAL

CQ

CI TEJIDO CONDUCTOR

CALIPTRGENO 6

Curvas de crecimiento
Los modelos matemticos de crecimiento son muy tiles en investigacin bsica y aplicada. Curva de crecimiento: Representacin de la variacin del tamao frente al tiempo: evolucin en el tiempo de un parmetro que cuantifica el crecimiento a partir de un inculo.

Una curva de crecimiento completa tiene 4 fases: Fase de adaptacin (lag) (I). Adaptacin. Fase de crecimiento exponencial (log) (II). Fase de crecimiento lineal (III). Fase de senescencia (IV).

Las curvas de crecimiento varan con: Tipo de planta (anual, bianual, etc. Naturaleza del inculo. Condiciones de cultivo.

El crecimiento exponencial se debe a que la biomasa producida se destina a formar nuevo tejido fotosinttico aumenta la capacidad de crecimiento. Durante el crecimiento exponencial: La velocidad de crecimiento (dT/dt) aumenta linealmente. El tamao (T) aumenta exponencialmente.

 La representacin del logaritmo del tamao (Log T) frente al tiempo (t) es una recta lnT = 0,693/td x t + lnTo La razn por la que se abandona el crecimiento exponencial (disminuye la pendiente) es variada: Crecimiento Reproductivo Condiciones Ambientales Disponibilidad de nutrientes

m=0,693/td

td: tiempo de duplicacin REGULACIN DEL DESARROLLO El desarrollo vegetal sigue un programa gentico. La ejecucin del programa gentico de desarrollo precisa de una comunicacin intra e intercelula y otra comunicacin planta-entorno.

Las hormonas vegetales son seales qumicas que intervienen en la comunicacin planta-planta y planta-medio ambiente

Problemas de Fisiologa Vegetal

24. En el punto de compensacin (fotosntesis neta=0) unas hojas fijan por fotosntesis 110 mg/h de CO2. Despreciando la contribucin de la respiracin mitocondrial a la produccin de CO2 Cuntos moles/h de ribulosa 1,5-bifosfato se descomponen por actividad oxigenasa de la rubisco?, cuntos moles/h de ribulosa 1,5-bifosfato se descomponen por actividad carboxilasa de la rubisco? Solucin: Si Fotosntesis Neta = 0 Fotosntesis Real = Respiracin (mitocondrial +
fotorrespiracin). Como Resp. mitocondrial = 0 Fotosntesis Real = Fotorrespiracin. FR =

hora

110 mg CO2

Milimol CO2 x = 2,5 milimoles CO2 / hora 44mg CO2

Para fijar 2,5 milimoles CO2 / hora por fotosntesis debe descomponer por actividad carboxilasa de rubisco 2,5 milimoles RuBP / hora Para formar 2,5 milimoles CO2 / hora por fotorrespiracin debe descomponer por actividad oxigenasa de rubisco 5 milimoles RuBP / hora

25. Unas hojas de espinaca absorben 150 e/h de luz fotosintticamente activa y sintetizan 40 g/h de fructosa, sin emitir fluorescencia (ni reflexin), Suponiendo que la fotofosforilacin acclica proporciona suficiente ATP para el funcionamiento del ciclo de Calvin, qu porcentaje de los fotones absorbidos se aprovecha netamente en la fotosntesis de fructosa? (masa molecular de la fructosa=180). Solucin: El 7,1% de los fotones absorbidos se utilizan en la fotosntesis de fructosa.
La sntesis de 1 molcula de frc (6 carbonos) requiere la fijacin de 6 CO2. Cada CO2 necesita 2 NADPH (la relacin ATP/NADPH que demanda el ciclo de Calvin es 3/2). Seis CO2necesita 12 NADPH Como cada NADP+ tiene que recibir 2 electrones para reducirse a NADPH, los 12 NADP+ tienen que recibir 24 electrones para reducirse a NADPH. Cada electrn que se transporta en el transporte acclico, los fotosistemas tienen que absorber 2 h. El transporte de 24 electrones requiere la absorcin de 48 h (24 h en PS II y 24 h en PS I). Resumiendo y pasando las cantidades a moles y einstein La absorcin de 48 einstein transporta 24 moles de electrones desde el agua hasta 12 moles de NADP+ para formar 12 moles de NADPH que luego sirven para que 6 moles de CO2 se fijen y se sintetice 1 mol de fructosa. Si toda la energa absorbida se utilizase en sintetizar fructosa, es decir si se aprovechase el 100% de los fotones absorbidos, en formar fructosa, los 150 einstein absorbidos deberan sintetizar: 150 / 48 = 3,12 moles frc Una produccin de 3,12 moles/h corresponde a una utilizacin del 100% de los fotones absorbidos en sintetizar fructosa. La produccin real de fructosa, 40 g/h = 0,22 moles/h, es el 7,10% de de 3,12 moles/h

Problemas de Fisiologa Vegetal

26. Una suspensin de cloroplastos emite 7 e/min de luz fluorescente y desprende 0,08 mg de O2/min. Cuando recibe 35 e/min de luz fotosintticamente activa, a) En qu proporcin relativa circulan los electrones acclica y cclicamente?, b) en qu proporcin relativa circulan los electrones por los fotosistemas I y II? Solucin: 0,08 mg de O2/min = 2,5 moles O2/min Luz absorbida = 35 e/min 7 e/min = 28 e/min + El O2 solo se forma en el transporte acclico (desde H2O hasta NADP ) Para formar 2,5 moles O2/min se deben romper 5 moles H2O/min que liberaran 10 moles de e (que se transportaran acclicamente) Para transportar acclicamente 10 moles de e /min se deben absorber 20 e/min (10 e/min en PSII y 10 e/min en PSI) De los 28 e/min que absorbe, 20 (10 PSII y 10 PSI) son utilizados en transporte acclico para mover 10 electrones y 8 son utilizados en el transporte cclico para mover 8 electrones en PS I. e transportados acclicamente / e transportados cclicamente = 10/8 e PS II / e PS I = 10 / 18

CIDO ABSCSICO
cido abscsico:
Su nombre es errneo pues no participa en la abscisin como se pens en un principio.

Sesquiterpeno (15C) que participa en estados avanzados del desarrollo de las plantas y ante situaciones de estrs: especialmente dficit hdrico patgenos.

CIDO ABSCSICO
De los posibles ismeros de ABA solo es activo el (S)-2-trans-ABA

Estructura de los enatimeros de ABA

BIOSNTESIS DE CIDO ABSCSICO

Se han propuesto dos vas biosintticas de ABA:

Ac. Mevalnico

Farnesil-PP
Directa (C15) Indirecta (C40) GGPP

Resmen de las dos vas biosintticas posibles de ABA

(S)-2-trans-ABA

BIOSNTESIS DE CIDO ABSCSICO

Va biosinttica de ABA Fue idescubierta en el hongo Cercospora rossicola No es activa en plantas

BIOSNTESIS DE CIDO ABSCSICO

El marcaje isotpico confirma la existencia en plantas de la va biosinttica de ABA indirecta C40.

BIOSNTESIS DE CIDO ABSCSICO

Acetil-CoA

Hidroximetil-glutaril-CoA

cido Mevalnico

Farnesil-PP

GGPP Estados iniciales de la va indirecta C40: produccin de GGPP y -caroteno

-caroteno

BIOSNTESIS DE CIDO ABSCSICO

-caroteno trans-Violaxantina trans-neoxantina

ABA-aldehdo ltimos estados de la va biosinttica indirecta C40: desde -caroteno.

9-cis-violaxantina

9-cis-neoxantina

xantoxina

ABA

Se sealan en rojo los lugares de regulacin

CIDO ABSCSICO
Catabolismo: oxidacin y conjugacin:
Hidroxilacin por monooxigenasa dependiente de P450

Metabolismo del ABA

EFECTOS DEL CIDO ABSCSICO

Crecimiento vegetativo:
Causa el cierre estomtico en respuesta a una cada del potencial hdrico del suelo. Participa en la defensa qumica inducida frente a patgenos:
Induce la transcripcin de inhibidores de proteasas en respuesta a daos mecnicos como parte de la defensa de las plantas frente a patgenos.

Afecta al crecimiento de la raz pero de forma variable en distintas especies: lo inhibe o promueve. Se emplea en algunos procesos rizognicos (2 fase ).

CIDO ABSCSICO

Cierre estomtico inducido por ABA

EFECTOS DEL CIDO ABSCSICO

Crecimiento reproductivo:
Induce la sntesis de protenas de reserva en semillas. Participa en la induccin y mantenimiento de la dormicin de yemas y semillas. Favorece el transporte de productos fotosintticos a la semilla. Inhibe especficamente el efecto inductor de las giberelinas sobre la enzima -amilasa (se utiliza como bioensayo)
Evita el viviparismo: germinacin precoz de la semilla en el fruto.

CIDO ABSCSICO
Efecto del ABA en dormicin de yemas semillas:

la y

El ABA evita la germinacin precoz (viviparismo). El mutante de maz vp1 (foto) es insensible al ABA

DORMICIN
Dormicin: desarrollo. inhibicin tempopral del Se da principalmente en yemas y semillas. Significado fisiolgico: acoplamiento del ciclo de crecimiento a las condiciones del entorno. Tipos:
Impuesta por el entorno (las condiciones no permiten desarrollo). Se sale de ella al restablecer las condiciones. Adquirida: No hay desarrollo an en condiciones permisivas.

DORMICIN DE SEMILLAS
La autntica dormicin es la adquirida: Semilla
Condiciones favorables Germinacin Ausencia de germinacin Ausencia de germinacin Dormicin endgena Eliminacin de la testa Germinacin Dormicin impuesta Dormicin adquirida Dormicin exgena

Almacenamiento lugar seco, Tra. ambiente Fotoperodo Vernalizacin Germinacin

DORMICIN
El ABA participa en la dormicin de yemas y semillas:
Se acumula al final de la embriognesis Induce la sntesis de protenas LEA que confieren tolerancia a la prdida de agua que aparecer a continuacin. Las protenas LEA (Late Embryogenesis Abundant) son muy hidrfilas y sirven para estabilizar una capa de hidratacin sobre las membranas de la clula. La ruptura de la dormicin se asocia con la desaparicin de ABA y/o aparicin de un promotor.

AUXINAS
Descubrimiento:
El descortezamiento anular de rboles causa una necrosis de la parte inferior de la herida y un abultamiento de la parte superior.
Kogl, Hagen & Erxleben (1934) descubren la actividad auxnica de la orina humana Thimann (1935) aisla IAA de Rhizopus suinus Went (1946) aisla IAA de Zea mays

Experimentos con coleoptilos

AUXINAS
Estructura molecular:
NATURALES

SINTTICAS

AUXINAS
Estructura molecular:
NATURALES

SINTTICAS

Medical legacies of Vietnam live on: Agent Orange blights Vietnam

AUXINAS
EXTRACCIN:
Se deben tener en cuenta: * Concentracin baja. Los resultados se corrigen con el mtodo de la dilucin isotpica. * Estado: libre o conjugado. Las auxinas libres se extraen con mezclas de agua y metanol. Las auxinas conjugadas se extraen con mezclas de cido actico y metanol.

VALORACIN:
Bioensayos. Test de Went (curvatura en oscuridad de coleptilos de Avena decapitados) Mtodos fisicoqumicos. Absorcin UV Inmunoensayos.

AUXINAS
Bioensayos: Valoran la fitohormona en
funcin de la respuesta que provocan cuando se aplican a tejidos, rganos o planta entera Ventajas:
* Sencillez * Alta sensibilidad

Inconvenientes:
* Baja especificidad * Metabolismo hormonal en el material vegetal

AUXINAS

Test de Went.
Germinacin de semillas de Avena Decapitacin de coleptilos Aplicacin lateral de bloques de agar con el extracto a valorar (6) Incubacin en oscuridad Medida del ngulo de curvatura (7).

AUXINAS

Test de Went.
Germinacin de semillas de Avena Decapitacin de coleptilos Aplicacin lateral de bloques de agar con el extracto a valorar (6) Incubacin en oscuridad Medida del ngulo de curvatura (7).

AUXINAS

La sensibilidad a las auxinas vara entre la parte area y subterrnea de la planta: Las races son mas sensibles que los tallos.

BIOSNTESIS DE AUXINAS
Rutas biosintticas diferentes en plantas y bacterias. Bacterias: Agrobacterium tumefaciens, Corynebacterium
fascians. El triptfano es el precursor. Trp Los genes de la ruta biosinttica se localizan en un 1 plsmido denominado Ti (tumor Indol-acetamida induction). Sntesis de IAA en dos pasos: 2

cido Indol-3-actico 1: L-trp-monooxigenasa 2: indolacetamida-hidrolasa

BIOSNTESIS DE AUXINAS
Agrobacterium tumefaciens
Bacteria fitopatgena. Durante la infeccin A. tumefaciens transfiere el plsmido Ti al ncleo de la clula vegetal. El plsmido Ti contiene genes para la sntesis de auxinas y citoquininas.

BIOSNTESIS DE AUXINAS
Rutas biosintticas diferentes en plantas y bacterias. Bacterias: Agrobacterium tumefaciens, Corynebacterium
fascians. El triptfano es el precursor. Trp Los genes de la ruta biosinttica se localizan en un 1 plsmido denominado Ti (tumor Indol-acetamida induction). Sntesis de IAA en dos pasos: 2

cido Indol-3-actico 1: L-trp-monooxigenasa 2: indolacetamida-hidrolasa

BIOSNTESIS DE AUXINAS
Plantas:
Existen dos rutas biosintticas de IAA con diferentes precursores:
Ruta independiente de triptfano (indolglicerolfosfato). Ruta dependiente de trp (triptfano).

En cada una las rutas existen diversas variantes. Pueden coexistir diferentes rutas en una especie determinada Lugar de sntesis: * Crecimiento vegetativo:
vascular, tallos y hojas jvenes. * Crecimiento Reproductivo: formndose. meristemos, semillas cambium que estn

BIOSNTESIS DE AUXINAS (dependiente de triptfano)

Ruta Ac. Indol-3-pirvico
La mejor caracterizada. Aun no se han aislado todos los genes participantes.

L-triptfano

Indolpiruvato

IAA

Indolacetaldehdo

BIOSNTESIS DE AUXINAS (dependiente de triptfano) Ruta Triptamina

Fue descartada en un principio (plantas de tabaco que sobreexpresaban la enzima trpdescarboxilasa no tenan un fenotipo alterado. Zhao y col. (2001) aislan la enzima YUCCA que cataliza la conversin de triptamina en Nhidroxi-triptamina. Las plantas que sobreexpresan YUCCA acumulan IAA y tienen fenotipos caractersticos.

BIOSNTESIS DE AUXINAS
Sntesis independiente de triptfano: se basa en algunos resultados experimentales:
Indolglicerolfosfato tiene actividad en el test de Went. Antranilato es convertido en IAA pero el trp no. Algunos mutantes de cereales incapaces de sintetizar trp no pierden la capacidad de formar IAA.

METABOLISMO DE AUXINAS
La concentracin de IAA en la clula depende de la sntesis, degradacin, transporte y conjugacin.

La degradacin de IAA puede ocurrir de dos formas: Oxidacin descarboxilativa y no descarboxilativa.

METABOLISMO DE AUXINAS
Oxidacin descarboxilativa:

Catalizada por IAA oxidasa. Puede darse en la cadena lateral (derecha) o en el anillo indlico (izquierda).

METABOLISMO DE AUXINAS
Oxidacin no descarboxilativa:
Menos caracterizada. La cadena lateral se conserva intacta. Los intermediarios o los productos finales de la ruta degradativa pueden conjugarse con aminocidos o azcares.

TRANSPORTE DE AUXINAS
El transporte de las fitohormonas pueden ser: Corta distancia: difusin simple entre clulas. Larga distancia: tejidos conductores.

Transporte polar:
El IAA puede transportarse adems por clulas no conductoras pero asociadas a los tejidos conductores: cambium y clulas prximas. Lento (~ 10 mm/h). Depende de ATP: se inhibe en condiciones de anoxia

TRANSPORTE DE AUXINAS
El transporte de auxinas es polar (slo tiene una direccin):
Parte aerea: direccin basiptala. Parte subterrnea: acroptala. Cuando se coloca un segmento de hipoctilo entre dos bloques de agar, el IAA solo se transporta de uno a otro si no no se altera la posicin que tiene en la planta

TRANSPORTE DE AUXINAS
Mecanismo del transporte polar auxnico

Forma electroneutra de la auxina Forma ionizada de la auxina Bomba de protones (ATP-asa) Transportador (carrier) de auxina

TRANSPORTE DE AUXINAS
1. Pared celular (pH~ 5,0): IA- + H+ IAH 2. IAH entra en la clula por el lado superior puesto que puede difundir por la membrana plasmtica. 3. Citoplasma (pH~7,0): IAH IA- + H+ 4. La H+-ATPasa saca H+ y permite el transporte activo de IA- fuera de la clula. 5. IA- necesita un transportador para atravesar la membrana El transportador se localiza plasmtica y entrar en la siguiente exclusivamente en la parte inferior de la clula) clula.

TRANSPORTE DE AUXINAS
La protena transportadora tiene 10 dominios transmembrana que estabilizan su estructura cuando se une a la membrana de las clulas conductoras.

TRANSPORTE DE AUXINAS
Cmo se pudo saber que la protena transportadora se localizaba exclusivamente en la zona inferior de la clula? 1. Extraccin y purificacin de la protena a homogeneidad. 2. Inmunizacin de conejos con la protena transportadora (antgeno). 3. Obtencin de anticuerpos y unin de los anticuerpos a una protena marcadora que emite luminiscencia. 3. Incubacin de segmentos de coleptilos con los anticuerpos anti-IAA unidos a la protena luminiscente.

TRANSPORTE DE AUXINAS

4. Obtencin de cortes para observacin al microscopio. 5. La luminiscencia solo aparece en el lado inferior

EFECTOS DE AUXINAS
Nivel celular:
Expansin celular Divisin celular (con citoquininas)

Nivel planta:
Dominancia apical Diferenciacin vascular Organognesis en los meristemos primarios Tropismos (hiptesis de Cholodny-Went) Formacin de races adventicias Crecimiento de races Crecimiento del fruto Floracin:
Determinacin del sexo en flores imperfectas Induccin en Bromeliaceas

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre la divisin celular:
Regulacin del ciclo celular (con citoquininas):
Ciclo celular: sucesin de cmbios bioqumicos y
genticos durante dos divisiones celulares consecutivas:

Mitosis: Profase Metafase Anafase Telofase Citocinesis Interfase: G1, S, G2

Al salir de citocinesis y entrar en mitosis la clula decide si permanecen (duplicacin de ADN y/o divisin) o abandonan (diferenciacin ) el ciclo.

REGULACIN DEL CICLO CELULAR

La regulacin del ciclo celular se logra mediante protein quinasas dependientes de ciclinas (protenas CDK):

G1. Sntesis de ciclina G1: G1 + CDK

G1-CDK paso G1S

S. Degradacin de ciclina G1:

G1- CDK CDK paso SG2

G2. Snte.

ciclina m (CM): CM + CDK CDK-CM paso G2 mitosis

Mitosis. Degradacin de CM:

CDK-GM CDK
Las auxinas afectan al ciclo celular a travs de la induccin de la sntesis de proteinquinasas dependientes de ciclina (CDK)

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre la divisin celular:
El efecto de las auxinas sobre la divisin celular se observa en heridas realizadas en segmentos de tallos de Coleus:

La cantidad de IAA aplicado es proporcional el nmero de elementos de xilema (rosa) que se forman

EFECTOS DE AUXINAS
El efecto de las auxinas sobre la divisin celular se observa en cultivos in vitro de clulas, tejidos u rganos vegetales:
Las tcnicas de cultivo in vitro de tejidos fueron posibles gracias a la accin de las auxinas sobre la divisin celular. Se pueden dar varios casos: * Ser las nicas fitohormonas imprescindibles para que se dividan las clulas en el medio de cultivo. * Ser necesaria la presencia de otras hormonas para una divisin celular continuada. * A veces, el subcultivo en medio sin auxina puede causar sntesis de auxinas (cultivos adaptados).

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre la expansin celular:
Las auxinas promueven la expansin celular a travs de un mecanismo conocido como crecimiento cido: IAA + R Activacin H+-ATP-asas pH pared celular Activacin hidrolasas Relajacin Pared Celular

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el desarrollo de tallos:
1. Formacin de tejidos conductores:
La reanudacin de la actividad del cambium vascular depende de la sntesis de IAA en la yema caulinar que se produce poco despus del letargo invernal. Se compruieba con dos experimentos: * La eliminacin de la yema caulinar cesa la actividad del cambium y la aplicacin de IAA en la herida la reanbuda. * La aplicacin de auxinas sobre la superficie de un callo causa la diferenciacin de clulas xilemticas.

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el desarrollo de tallos:
2. Dominancia apical: Inhibicin del crecimiento de las yemas laterales provocado por el crecimiento de la yema caulinar

Tratamiento
CQs en yemas laterales Eliminacin pice caulinar IAA en herida

Actividad en yemas laterales

promocin crecimiento promocin crecimiento inhibicin crecimiento

DOMINANCIA APICAL
Hiptesis:
La dominancia apical est controlada por el balance Aux/CQs en las yemas laterales: Planta intacta: eL IAA de la yema apical impide que las yemas laterales retiren CQs de los tejidos conductores. Planta decapitada: las CQs retiradas por las yemas laterales de los tejidos conductores causan su crecimiento

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el desarrollo de tallos:
3. Organognesis en los meristemos primarios: El balance endgeno auxinas/citoquininas (CQs) controla la formacin del cuerpo primario (organognesis en los meristemos primarios):
Agrobacterium tumefaciens. La respuesta de tumores procedentes de bacterias modificadas en medio sin hormonas depende del tipo de modificacin: * Bloqueo de la sntesis de IAA CQs / Aux formacin de brotes. * Bloqueo de la sntesis de CQs CQs / Aux formacin de raices.

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el desarrollo de tallos:
3. Organognesis en los meristemos primarios:
Dos tipos de experimentos: Agrobacterium tumefaciens. La respuesta de tumores procedentes de bacterias modificadas en medio sin hormonas depende del tipo de modificacin realizada en el plsmido Ti:

EFECTOS DE AUXINAS
3. Organognesis en los meristemos primarios:
* Bloqueo de la sntesis de IAA CQs / Aux formacin de brotes. * Bloqueo de la sntesis de CQs CQs / Aux formacin de raices.

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el desarrollo de tallos:
3. Organognesis en los meristemos primarios:La
respuesta de un explanto durante su cultivo in vitro depende en gran medida del balance Aux/CQs 1
1. Callognesis 2 2. Organognesis indirecta 3. Embriognesis indirecta

MICROPROPAGACIN DE PLANTAS
Tres mtodos de micropropagacin:
Cultivo de yemas axilares. Ruptura de la dominancia apical en tallos Organognesis Embriognesis

Dos tipos de morfognesis (organognesis o embriognesis):

Indirecta : explanto callo rgano Directa. explanto rgano

MICROPROPAGACIN DE PLANTAS
En la organognesis indirecta se cumple la hiptesis de Skoog-Miller:
explanto

Aux/CQs callo
meristemos caulinares brotes plantas

Aux/CQs
meristemos radicales raices

EFECTOS DE AUXINAS
Las auxinas regulan la formacin de adventicias y el crecimiento del sistema radicular:
RAICES IAA se transporta de forma polar por el ciclindro central: Sale al poplasto al final de la zona de maduracin (an no se ha formado la estructura primaria) Promueve la formacin de races adventicias Elonga las clulas

EFECTOS DE AUXINAS
Las auxinas regulan la formacin de raices adventicias y el crecimiento del sistema radicular:
TALLOS (esquejes) La aplicacin de auxinas a tallos sin yemas caulinares y hojas jvenes (esquejes): Promueve la formacin de races adventicias. Inhibe crecimiento de la raz.

MOVIMIENTOS DE RGANOS
Las plantas utilizan diferentes medios para dispersar las semillas y as moverse como un todo. Las plantas son capaces aderms de capatar diferentes seales y mover sus rganos para optimkizar su desarrollo: Los movimientos se clasifican de muchas formas: Segn sea la orientacin del movimiento: Tropismos: movimientos causados y orientados por el estmulo Nastias: causados por estmulos pero no orientados. El movimiento siempre tiene la misma direccin

MOVIMIENTOS DE RGANOS
Segn sea el mecanismo del movimiento: Movimientos de crecimiento: se deben a un crecimiento asimtrico del rgano que se mueve o del rgano sobre el que se asienta. Movientos de variacin: se deben a la actividad de unas clulas (clulas motoras) que toman o pierden agua y generan variaciones muy localizadas de turgor que desplazan el rgano que se mueve o del rgano sobre el que se asienta. Existen cuatro tipos de movimientos de rganos ya que las nastias y los tropismos pueden ser de crecimiento o variacin

TROPISMOS
La respuesta trpica puede ser:
Ortotrpica: igual direccin que el estmulo (positiva si se acerca al estmulo y negativa si se aleja de l). Plagiotrpica: direccin oblicua. Diatrpica: direccin perpendicular.

Los tropismos son positivos cuando el crecimiento es hacia el estmulo y negativos cuando se aleja del estmulo:
La parte area de una planta tiene fototropismo positivo y gravitropismo negativo, mientras que la subterrnea responde de forma contraria

MOVIMIENTOS DE RGANOS
Los tropismos ms importantes son: fototropismos y gravitropismos. El estmulo de los fototropismos es la iluminacin lateral (existe
una direccin predominante de luz incidente).

El estmulo de los gravitropismos es la gravedad.

TROPISMOS
Se distinguen tres fases en un tropismo (fototropismo y gravitropismo)
Percepcin: interaccin entre el estmulo y el receptor. Transduccin: transformacin del estmulo en una seal transmisible Induccin de la respuesta: crecimiento asimtrico.

La auxina sintetizada en el pice caulinar (IAA) participa en los tropismos de crecimiento (gravitropismos y fototropismos).

FOTROPISMOS
El anlisis del espectro de accin de la respuesta fototrpica indica la naturaleza del fotorreceptor. El fotorreceptor de los fototropismos es el criptocromo o receptor de luz azul:

FOTROPISMOS
La hiptesis de Cholodny-Went propone una acumulacin de la auxina del pice en el lado obscuro.

La acumulacin de la auxina en el lado obscuro ocurre probablemente a travs del bloqueo del trasnporte polar auxnico en el lado ilumionado.

GRAVITROPISMOS
Las races tienen gravitropismo positivo y los tallos negativo.
Los amiloplastos de la columela son los receptores de la gravedad en plantas.

Alteracin de la posicin espacial desplazamiento de los amiloplastos variacin de la presin sobre el retculo endoplasmtico acumulacin de IAA en el lado superior de la raiz.

EFECTOS DE AUXINAS
Sobre el crecimiento del fruto:
Las auxinas del embrin provocan el crecimiento del fruto

CITOQUNINAS
Definicin: sustancias capaces de estimular la divisin celular en presencia de auxinas. Descubrimiento:
Hamberlandt: la presencia de fludo floemtico en el medo de cultivo induce la proliferacin celular en secciones de tubrculo de patata. Van Oberbeeck: el endospermo lquido de coco contiene sustancias que promueven la divisin celular. Skoog (~1950): inicia el cultivo in vitro. Observa proliferacin celular en secciones de tallo de patata. Miller (1954): aade esperma de arenque autoclavado (formacin de 6-furfuril-amino-purina) a diversos cultivos de tejidos y observa una intensa proliferacin celular

CITOQUNINAS: estructura qumica

Las naturales derivan de adenina:
Sustituidos en N6 con un radical adenina isopentenilo (1), hidroxi-isopentenilo (2), o hidroxi isopentanilo (3). Sustituidos en N9 con ribosa, 0 fosforibosa 1 Solo tienen actividad los ismeros trans de las citoquininas derivadas 2 de isopentenilo. (6)

(9)

Estructura bsica de las citoquininas

CITOQUNINAS: estructura qumica

Las citoquininas naturales mas importantes son:
Citoquininas libres Citoquininas glicosiladas

CITOQUNINAS: estructura qumica

Las citoquininas sintticas ms importantes son:

CITOQUNINAS: estructura qumica

Algunas citoquininas son componentes de ARN de transferencia (tRNAser and tRNAtyr ): Una base prxima al anticodon est modificada. La hidrlisis de estos tRNA libera citoquininas libres.

CITOQUININAS
Conjugacin con azcares: Citoquininas o-glucosiladas:

La O-glisoilacin es reversible Los O-glucosidos de citoquininas son inactivos.

CITOQUININAS
Conjugacin con azcares: Citoquininas N-glicosiladas:

Las citoquininas N-glicosiladas son estables e inactivos. La N-glicosilacin de citoquininas es reversible,

CITOQUININAS
Conjugacin aminocidos:

La conjugacin con aminocidos es irreversible Los conjugados con aminocidos son inactivos y se degradan

CITOQUININAS

Las citoquininas libres son las nicas formas activas. Los ribtidos de citoquininas suelen ser formas de transporte.

CITOQUININAS: bioensayos

Incubacin de cotiledones de calabaza con extractos vegetales que contienen citoquininas. Izquierda: antes de la incubacin. Derecha: despues de la incubacin.

CITOQUININAS: bioensayos

Efecto de las citoquininas (benciladenina) durante el cultivo de callos

CITOQUININAS: Localizacin en la planta

Las mayores citoquininas se concentran en rganos con intensa divisin celular: embriones y frutas jvenes en desarrollo. Las races tienen concentraciones menores de citoquininas. Las citoquininas se transportan por el floema. En las hojas son relativamente inmviles.

CITOQUININAS: biosntesis
La sntesis de citoquininas ocurre a travs modificaciones bioqumicas de la adenina: de

1. Formacin de isopentenil-pirofosfato (IPP) a partir de piruvato:

Comn a la sntesis de otros terpenoides): Dos rutas : 1.a Va acetato mevalonato (principal). 1.b Va gliceraldehdo-fosfato.

2. Formacin de isopentenil-adenosina-5'-fosfato a partir de isopentenilpirofosfato (IPP) y adenosinmonofosfato (AMP). 3. Sntesis del resto de citoquininas a partir de isopentenil-adenosina-5'-fosfato

CITOQUININAS: biosntesis
1. Formacin de isopenteni-lpirofosfato (IPP):
1.a Va acetato mevalonato:
1

1. Acetil-CoA Acetoacetil-CoA Enzima: Tiolasa

2. Acetoacetil-Coa + Acetil-CoA 3-Hidroxi-3-metil-glutaril-CoA (HMG-CoA) Enzima HMG-CoA sintasa 3-Hidroxi-3-metil-glutaril-CoA cido Mevalnico Enzima HMG-CoA reductasa
2

2 3

CITOQUININAS: biosntesis
1. Formacin de isopenteni-lpirofosfato (IPP):
4. cido Mevalnico + ATP Mevalonato-fosfato. Enzima: Mevalonato quinasa 5. Mevalonato + ATP Mevalonato-pirofosfato Enzima: Mevalonato quinasa 6. Mevalonato pirofosfato Isopentenil-pirofosfato Enzima: Mevalonato descarboxilasa

CITOQUININAS: biosntesis
1.b Va acetato gliceraldehdo-fosfato :
3 1 2 4

1. piruvato + tiamina-pirofosfato (TPP-C2) gliceraldehdo fosfato + CO2 2. gliceraldehdo fosfato 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato 3. 1-desoxi-D-xilulosa-5-fosfato 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato 4. 2-C-metil-D-eritritol-4-fosfato Isopentenil pirofosfato

CITOQUININAS: biosntesis
IPP es precursor de todos los terpenoides

CITOQUININAS: biosntesis
2. Formacin de isopentenil-adenosina-5'fosfato a partir de isopentenilpirofosfato (IPP) y adenosin-monofosfato (AMP).

+
Reaccin catalizada por isopentenil-AMP sintasa. Isopentenil-adenosina-5'-fosfato es precursor de todas las citoquininas.

CITOQUININAS: biosntesis
3. Sntesis del resto de citoquininas a partir de isopentenil-adenosina-5'-fosfato
Horizonal: eliminacin de fosfato y ribosa para formar el ribsido y la base libre respectivamente. Vertical: hidroxilacin y reduccin de la cadena lateral (del ribtido, ribsido o base libre) para formar la correspondiente base libre, zeatina o dihidro-zeatina.

CITOQUININAS: modo de accin

Se desconocen muchos aspectos de modo de accin de las citoquininas. Se han aislado varias protenas de unin a citoquinina (protenas CBPs). Algunas de ellas han sido identificadas como receptores de citoquininas. Las citoquininas alteran el patrn proteico de la clula sensible actuando en la transccripcin, traduccin y post-traduccin. Los dos receptores de citoquininas mejor caracterizados se localizan en la membrana plasmtica y en los ribosomas de clulas sensibles. El receptor de la membrana plasmtica afecta a la transcripcin mientras que el receptor ribosomal altera la traduccin de protenas.

CITOQUININAS: modo de accin

Receptor dembrana plamtica:
La zeatina se une a un receptor anclado en la membrana plasmtica. El receptor activado fosforila una protena en el citosol. La protena fosforilada se desplaza al nucleo y activa uno o ms factores de transcripcin (trans). Los factores trans se unen a regiones cis del promotor de genes. La transcripcin de estos genes genera mRNAs que salen al citosol La traduccin de estos mRNAs forma protenas que inducen la respuesta citoquinnica

EFECTOS DE LAS CITOQUININAS

Ruptura de la dominacin apical. Morfognesis en los meristemos primarios Senescencia foliar. Formacin de cloroplastos Estimulan la germinacin en oscuridad de semillas de cuya germinacin depende de la luz Ruptura dormicin de semillas Crecimiento de frutos Estimulacin frutos. de partenocarpia en algunos

SENESCENCIA
Ocurre en diferentes rganos y formas: uniforme (plantas aunales), parte area (geofitas), hojas (rboles caducifolios) y ascendente (natural o bajo diversas situaciones desfavorables). Significado fisiolgico: recuperacin de nutrientes. Tres fases: hidrlisis, translocacin y abscisin.

SENESCENCIA

La senescencia natural o inducida se acompaa de un descenso en la concentracin endgena de citoquininas libres. La aplicacin de citoquininas a hojas retrasa la senescencia.

SENESCENCIA
Las plantas transgnicas de tabaco (derecha) que expresan el gen ipt bajo control de promotores de genes especficos de senescencia foliar tienen una mayor concentracin endgena de citoquininas y retrasan la senescencia foliar La inhibicin de la senescenia por parte de las citoquininas se debe a la supresin de genes especficos de senescencia y/o favorecimiento de de genes de fotosntesis

EFECTOS DE LAS CITOQUININAS

Las citoquininas y otros promotores del embrin hacen crecer el fruto.

ETILENO
-

Es el hidrocarburo sencillo.

insaturado

ms

- Su estructura espacial es plana y resulta indispensable para unirse a su receptor.

ETILENO
Es la nica fitohormona gaseosa.
Se mueve por los tejidos difundiendo por la pared celular y citosol y pasa libremente a la atmsfera.

La manzana (fruto climatrico) produce etileno que la hace madurar. Al ser un gas el etileno pasa a la atmsfera (cerrada en este caso) y su acumulacin provoca la abscisin de hojas de la rama de acebo

SINTESIS DE ETILENO
Se sintetiza preferentemente en tejidos perifricos
- El precursor es la metionina, pero su sntesis no consume metionina puesto que se recupera a partir de metiltioribosa (Ciclo de Yang) 1. Conversin de metionina en S-adenosil metionina con gasto de ATP. Reaccin catalizada por la S-adenosil- trasnferasa

SINTESIS DE ETILENO
2.a SAM es el substrato de la ACC sintasa que forma Sametil-tioadenosina y ACC.

2.b Metiltioadenosina regenera metionina a traves de metiltioribosa, 1-fosfato metilribosa y cido -ceto.metil-tiobutrico (Ciclo de Yang).

SINTESIS DE ETILENO
3.a Oxidacin de ACC a etileno Catalizada por ACC-oxidasa. La reaccin consume O2 y libera HCN y etileno

3.b Alternativamente ACC puede conjugarse con malonil-Coa y formar malonil-ACC.

SINTESIS DE ETILENO
La regulacin de la sntesis de etileno se ejerce principalmente a travs de ACC sintasa. ACC-sintasa est codificada por una familia de genes divergentes: diferentes genes codifican para distintas protenas con actividad ACC sintasa. La sntesis de ACC sintasa est inducida por diferentes factores: estado de desarrollo, heridas, fro, auxinas y ETILENO.

SINTESIS DE ETILENO
Hay dos mecanismos de sntesis de etileno: M1 no autocataltico y M2 autocataltico . M2: La sntesis de etileno se estimula por el propio etileno a travs de la induccin de la sntesis de ACC-sintasa El mecanismo autocatalico se da durante la maduracin de frutos climaticos y durante la senescencia de flores, hojas o tallos

MECANISMO AUTOCATALTICO DEL ETILENO

La maduracin de frutos climatricos y senescencia de flores, hojas o tallos sntetizan etileno por el mecanismo M2 (autocataltico), siendo responsible de los cambios que acompaan a ambos procesos.

MECANISMO AUTOCATALTICO DEL ETILENO

Es responsible del adelanto de la maduracin en frutos climatricos escindidos de rboles:

La herida causada al
escindir el fruto induce la sntesis de etileno. El etileno producido estimula su propia sntesis y el fruto madura rpidamente y se estropea.

MADURACIN DE FRUTOS
El significado fisiolgico de la maduracin del fruto es mejorar el proceso de la dispersin de las semillas. La maduracin se acompaa de dos tipos de cambios en el fruto: Cambios encaminados a hacer el fruto ms atractivo para algunos animales. Cambios que causan la cada o abscisin del fruto y dehiscencia.

MADURACIN DE FRUTOS
El fruto se establece, crece y madura. El crecimiento del fruto est regulado por promotores sintetizados en el eje embrionario. Una elevada concentracin de auxinas al final del crecimiento induce la sntesis de etileno El etileno regula la maduracin del fruto. El etileno tambin induce la abscisin del fruto maduro.

ABSCISIN DE RGANOS
El etileno induce la formacin de la capa de abscisin en la base del gano El etileno induce la sntesis de enzimas degradativos de la pared celular La pared celular se rompe y la presin de turgencia rompe la clula.

OTRO EFECTO DEL ETILENO: formacin de aernquima

Estimula la formacin de aernquima en algunas plantas acuticas: algunos grupos de clulas del parnquima del tallo o raz degradan sus paredes celulares por efecto del etileno. Se forman grandes espacios areos que recorren longitudinalmente el ta llo y la raz oxigenando la corteza radicular con oxgeno de la atmsfera. As logran sobrevivir en medios encharcados anxicos.

REGULACIN DEL DESARROLLO

El desarrollo vegetal sigue un programa gentico. La ejecucin del programa de desarrollo precisa de: Comunicacin e intercelular. Comunicacin planta-entorno. Las hormonas vegetales son seales qumicas que intervienen en la comunicacin planta-planta y planta-medio ambiente intra gentico

FITOHORMONAS:
Caractersticas generales
Sustancias endgenas: producidas por las plantas. * Las sustancias exgenas con actividad hormonal no se consideran estrictamente hormonas Estructura molecular sencilla: peso molecular < 1000. Actan en un rango estrecho de concentraciones bajas. Metabolismo dependiente de dos tipos de factores: * Endgenos: estado de diferenciacin celular * Exgenos: luz, dficit hdrico, patgenos, etc

Modo de accin: Inhiben o permiten

reacciones programadas en las clulas sensibles
La respuesta de un tejido (sensible) a una fitohormona depende de su unin a un receptor.

FITOHORMONAS: diferencias con hormonas animales

El trmino hormona tiene origen animal No se sintetizan en glndulas especializadas. Cualquier clula con ncleo puede sintetizarlas Su actividad no depende de su transporte a las clulas diana. La respuesta a una fitohormona depende de:
Concentracin en las clulas diana Sensibilidad de las clulas diana: * Nmero de receptores * Estado de los receptores * Canal de transduccin

FITOHORMONAS: MODO DE ACCIN

Tres etapas: Percepcin Transduccin Induccin

FITOHORMONAS: MODO DE ACCIN

Percepcin: Fitohormona (FH) + Receptor(R). Los receptores cumplen 3 premisas: 1. Unin afn con FH 2. Unin especfica y reversible . 3. La unin R/FH inicia un canal de transduccin que finaliza en una respuesta (alteracin del espectro proteico). Factores de unin (BPs): cumplen 1 y 2. Receptores: cumplen 1, 2 y 3.

FITOHORMONAS: MODO DE ACCIN

Transduccin: Cmbios producidos en la clula
diana al activarse el receptor (R+FH). Se sintetizan mensajeros secundarios. El canal de transduccin depende naturaleza protein-quinasa (PQ) del receptor: de la

* Receptor proteinquinasa (R : PQ1). La unin con FH activa PQ (inicio Cascada de Fosforilaciones):

R + PQ1(inactiva) PQ1(activa) PQ2(inactiva) PQ2(activa) PQ3(inactiva) PQ3(activa) CIS / TRANS

FITOHORMONAS: MODO DE ACCIN

* Receptor no proteinquinasa: Participan las protenas G (GTP-asas): FH + R FH-R + Prot. G FH R - Prot.G

Activacin fosfolipasas FH R - Prot.G Activacin ciclasas Activacin canales inicos

FITOHORMONAS: PRINCIPALES TIPOS

A) PROMOTORES: Citoquininas Giberelinas

Auxinas B) INHIBIDORES:

Etileno

Acido abscsico

GIBERELINAS
Fueron dscubiertas al caracterizar una enfermedad del arroz (bakanae) producida por un hongo Gibberella fujikuori

Tienen una estructura molecular comple ja: pueden ser de 20 o 19 carbonos.

GIBERELINAS
Fueron dscubiertas al caracterizar una enfermedad del arroz (bakanae) producida por un hongo Gibberella fujikuori Tienen una estructura molecular compleja:

GIBERELINAS
Estructura molecular:
Diterpenos tetracclicos cidos Existen principales: dos grupos

GAs de 20C: el C20 est como radical metilo, hidroximetilo, aldehdo o carboxilo. GAs de 19 C son lactonas cclicas.

GIBERELINAS
La mayora de las plantas tienen ~10 GAs. Diferencias estructurales de las GAs de una planta: Grado de oxidacin desaparicin de C20 Radical hidroxilo: 3: activacin 2: desactivacin irreversible 13: activacin o

BIOSNTESIS DE GIBERELINAS
Se distinguen varias fases en la sntesis de GAS: 1. Formacin de Geranil-Geranil-piro fosfato Rutamevalonato. Ruta gliceraldehdo -fosfato

BIOSNTESIS DE GIBERELINAS
2. Ciclacin de GGPP en dos reacciones catalizadas por copalil-pirofosfato sintasa y ent-kaurene sintasa:

La inhibicin de cualquiera de las dos enzimas bloquea especificamente la sntesis de GAs.

BIOSNTESIS DE GIBERELINAS
2. Formacin de la (precursora del resto). primera giberelina

ent-kaureno se oxida y forma ent-kaureno, ent-kaurenal, cido ent-kaurenoico, cido ent-7-hidroxikaurenoico y GA12-aldehdo

BIOSNTESIS DE GIBERELINAS
2. Formacin del resto de Gas a partir de GA12-aldehdo.

Dos vas principales con o sin hidroxilacin en 13

GIBERELINAS
Bioensayos:

De crecimiento: basados en la induccin del crecimiento internodal que provoca la aplicacin exgena de GAs.

GIBERELINAS
Bioensayos:
De induccin enzimtica: basados en la induccin de la sntesis de algunas hidrolasas por GAs. La actividad que ms se utiliza para valorar GAs es la -amilasa.
1. El eje embrionario libera Gas hacia el endospermo 2. Las GAs estimulan la actividad -amilasa

GAs endospermo

eje embrionario

azcares 3. Los azcares producidos

en la hidrlisis del almidn se transportan al eje embrionario

EFECTOS DE GIBERELINAS
Crecimiento vegetativo:
Estimula el crecimiento internodal del tallo en plantas enanas o que se desarrollan como rosetas.
Induce bolting en plantas de da corto

Afecta a la movilizacin de reservas durante la germinacin y desarrollo de plntulas, especialmente en cereales Condiciona la forma de la hoja al estimular la elongacin de la epidermis foliar.

EFECTOS DE GIBERELINAS
Crecimiento reproductivo:
Modifica la induccin floral: Substituye necesidad vernalizadora en la induccin floral Modifica la determinacin del sexo en flores im perfectas. El efecto depende de cada especie.
La aplicacin de GAs en plantas hembra de maz promueve la formacin de flores estaminadas (macho) La inhibicin de la sntesis de giberelinas en plantas de Cannabis macho induce la formacin de flores pistiladas (femeninas).

ESTIMULACIN POR GAs DEL CRECIMIENTO INTERNODAL DEL TALLO

La zona superior del entrenudo recien formado y las hojas jvenes sintetizan GAs que estimulan la elongacin y la divisin celular en clulas sensibles del entrenudo.

EFECTOS DE GIBERELINAS
Estimulacin de la divisin celular por GAs: Los entrenudos de variedades de guisante de alto enrame tienen ms clulas que los correspondientes a variedades enanas. La aplicacin de GAs estimula la mitosis en la zona subapical de plantas con forma de roseta.

ELONGACIN DEL TALLO POR GIBERELINAS

GA1 es la forma activa que induce el crecimiento internodal:

1. La estimulacin del crecimiento internodal en guissante se corresponde con el contenido en GA1.

ESTIMULACIN POR GAs DEL CRECIMIENTO INTERNODAL DEL TALLO

2. Le-1 y le-2 son mutantes carentes de actividad hidroxilasa. La aplicacin de GA1 a cualquiera de los dos mutantes estimula el crecimiento internodal 3. La aplicacin de GA20 a le-1 le-2 no afecta su fenotipo. 4. Le convierte GA20 (13C3H)GA20) en GA1 (13C3H)GA20) pero no es capaz de convertir GA1 en GA20.

ESTIMULACIN POR GAs DEL CRECIMIENTO INTERNODAL DEL TALLO

GA20 es precursor de GA1:

ESTIMULACIN POR GAs DEL CRECIMIENTO INTERNODAL DEL TALLO

Mecanismo:
Activacin por GA1 de la actividad xiloglucano-endo-transglicosilasa (XET).
La actividad XET hidroliza internamente xiloglucano y transfiere uno de los extremos formados a otro extremo libre de otra molcula de xiloglucano

EFECTOS DE GIBERELINAS
Las GAs afectan a la movilizacin de reservas durante la germinacin y desarrollo de plntulas, especialmente en cereales
Estructura de la semilla de cereal: Testa: protege la semilla y regula el intercambio de gases. Endospermo con capa de aleurona (ms externa): almacena reservas. Escutelo (cotiledn modificado): participa activamente en el metabolismo de la germinacin. Eje embrionario con los meristemos primarios.

EFECTOS DE GIBERELINAS

Las GAs liberadas por el eje embrionario inducen la sntesis de -amilasa en la capa de aleurona. Los azcares liberados en la hidrlisis posterior del almidn son absorbidos por el escutelo y trasnportados al eje embrionario

EFECTOS DE GIBERELINAS

Efecto de la aplicacin de cido giberlico (GA3) 5.10-5M (derecha) sobre la produccin de -amilasa en endospermos aislados. Control (izquierda) incubacin de endospermos en agua.

EFECTOS DE GIBERELINAS
El efecto de las GAs sobre la -amilasa es mltiple. Acta principalmente sobre:
Transcripcin Estabilizacin de mRNA activo: aumenta la acumulacin de mRNA Adems las GAs pueden:
Activacin de enzimas preexistentes Activacin de m-RNA inactivo Aumento de la liberacin de la enzima por alteracin de la permeabilidad de la membrana plasmtica

ESTIMULACIN DEL CRECIMIENTO DEL TALLO PREVIO A LA FLORACIN

Algunas plantas de da largo, como espinaca, crecen en forma de roseta bajo condiciones no inductoras de la floracin (DC). Bajo condiciones inductoras de la floracin (DL) el tallo se alarga con el objeto de favorecer la polinizacin de la flor que se desarrolla

ESTIMULACIN DEL CRECIMIENTO DEL TALLO PREVIO A LA FLORACIN

La conversin de GA20 en GA1 regula el crecimiento del tallo previo a la floracin en plantas de dia largo (PDL)

El inhibidor AMO 1618 bloquea el bolting La aplicacin de GA1 revierte el efecto de AMO 1618 La exposicin a DL aumenta 5 veces la concentracin de GA1 Las condiciones inductoras de la floracin (DL) causa un aumento del mRNA codificante de la oxidasa que convierte GA53 en GA20