ESPORAS

Las esporas son clulas diferenciadas altamente resistentes al estrs fsico y qumico, tal como calor, presin, sequedad, cidos y bases fuertes y radiacin UV. Cuando una clula bacteriana capaz de esporular abandona su crecimiento exponencial debido a la deprivacin de nutrientes esenciales en su hbitat debe tomar la decisin de esporular o arriesgarse a continuar creciendo como tal y correr el riesgo de morir. Tiene un muy bajo metabolismo, que les permite permanecer viables por perodos tiempos indefinidos. Tiene propiedades inmunognicas. El ncleo de una espora madura difiere mucho de la clula vegetativa de la cual proviene. Adems del abundante contenido en dipicolinato de calcio, el ncleo de esta estructura se presenta en un estado parcialmente deshidratado, conteniendo solo el 10-30 % del agua de la clula vegetativa, por lo que la consistencia del citoplasma se corresponde con la de un gel denso. La deshidratacin aumenta dramticamente la termo resistencia de la espora y al mismo tiempo le confiere resistencia frente a sustancias qumicas, como el perxido de hidrgeno. La espora bacteriana se define como una estructura que se encuentra metablicamente latente, y que bajo ciertas condiciones germina y da lugar a una clula vegetativa (clula metablicamente activa). Se observan 2 tipos de esporas bacterianas, la endospora y la exospora. i. Endospora

Se caracteriza porque posee una estructura con pared gruesa y se forma dentro de la clula bacterial. Esta es resistente a agentes qumicos y factores fsicos extremos. Podemos observar endosporas en los siguientes gneros bacteriales: Bacillus, Clostridium, Sporosarcina y Terminoactinomyces. Estas estructuras son nicas de las bacterias y su localizacin dentro de la clula vara dependiendo de la especie. Las endosporas usualmente se producen en clulas que estn creciendo en un medio de cultivo rico, pero que estn llegando al final del crecimiento activo. Las endosporas son resistentes a: tinciones, calor, desecacin, agentes desinfectantes y a radiacin. Las endosporas de Clostridium botulinum pueden resistir agua hirviendo por varias horas, sin embargo la mayora de las esporas se destruyen a 80 C por 10 minutos. Las esporas pueden germinar por vejez o por tratamiento con calor. Contienen grandes cantidades de cido dipicolnico (DPA) junto con

grandes cantidades de calcio, estos compuestos le confieren la resistencia de la cual se caracterizan. Espora presente en el interior de la bacteria. Destinada a germinar originando la forma vegetativa de la que deriva ii. Exosporas

Son esporas externas, stas son resistentes slo a calor y desecacin y no contienen DPA. Podemos encontrar exoesporas en el gnero Methylosimes (bacterias que oxidan metano). Esporo que permanece libre en el ambiente, constituyendo la forma de resistencia bacteriana ante condiciones adversas o desfavorables (nutricin, desecacin, temperatura, presencia de agentes qumicos, presiones, etc.) Determinadas bacterias (Methylosinum, Rhodomicrobium) forman esporas reproductivas por gemaciones sucesivas al final de sus prostecas. Estas exosporas poseen una envuelta a base de pared rodeada de una cpsula o cubierta gruesa.

ESTRUCTURA Y COMPOSICIN QUMICA DE LA ENDOSPORA I. Protoplasto o ncleo

El citoplasma de la espora est muy deshidratado. Sus componentes estn inmovilizados en una matriz de quelatos de iones Ca++ y cido dipicolnico. El citoplasma de la espora contiene altas concentraciones de ion Ca ++ (1-3% del peso seco de la espora), y de cido dipicolnico (DPA) (10% en peso); ambos estn formando un quelato, llamado dipicolinato clcico (DPC), una sustancia exclusiva de las esporas bacterianas. Papel del DPC: Como veremos, es una reserva de Ca2+, que durante la esporulacin secuestra este in, lo que tendr un papel importante en la deshidratacin del protoplasto; durante la germinacin, la liberacin del Ca 2+ ser fundamental en este proceso. El protoplasto contiene un cromosoma completo, condensado, y todos los componentes indispensables para reiniciar el crecimiento vegetativo cuando la espora germine, pero carece de muchos componentes tpicos de la clula vegetativa:

Carece de componentes inestables: no hay ARNm, ni enzimas biosintticas, ni aminocidos ni bases nitrogenadas libres, ni cofactores reducidos (NADH; CoA) Pero en cambio, existe una gran cantidad de una serie de pequeas protenas especiales (llamadas SASP, del ingls small acid-soluble proteins). Cuando se produzca la germinacin, estas protenas sern hidrolizadas rpidamente, y los aminocidos resultantes sern empleados en la sntesis de nuevas protenas necesarias en la germinacin y crecimiento ulterior. Adems, las SASPs estn acomplejando al ADN (induciendo en l un cambio conformacional hacia la rara forma A, en vez de la B habitual), protegindolo del dao por luz UV. Contiene nuclesidos mono- y difosfatados, pero no NTP (no hay ATP) La moneda energtica de la espora es el 3 -fosfoglicerato, otra molcula estable del protoplasto, que ser convertido rpidamente a 2-fosfoglicerato, y de l a PEP (fosfo-enol-pirvico) al germinar la espora (el PEP es donador de P para generar ATP). Rodeando al protoplasto est la membrana citoplsmica (membrana interna de la espora), una bicapa lipdica carente de fluidez. II. Pared de la espora

Se encuentra inmediatamente por encima de la membrana interna de la espora. Compuesto a base de un peptidoglucano (PG) similar al de la clula vegetativa, con sus caractersticos enlaces entre los tetrapptidos. Al germinar la espora, dar lugar a la pared celular de la nueva clula vegetativa, confirindole, mientras tanto, resistencia osmtica. III. Corteza o crtex

Compuesto de un peptidoglucano (PG) especial, diferente en composicin al PG de la clula vegetativa: Se sintetiza a partir de la clula madre, con sus intermediarios ensamblados a nivel de la membrana externa que rodea a la corteza. Tiene un bajo grado de puentes entre tetrapptidos (slo un 6%). Ello condiciona: Su rpida autolisis, durante la germinacin de la espora. La lactama del murmico condiciona una gran resistencia a la lisozima.

La corteza est limitada por la membrana esporal externa, procedente de invaginacin de la membrana citoplsmica de la clula vegetativa madre. Posee una polaridad opuesta a la de la membrana esporal interna. IV. Cubiertas

Son estructuras a base de una o varias protenas de tipo queratina, todas muy ricas en cistena y en aminocidos hidrfobos, y que llegan a constituir el 60% en peso seco de la espora. Buena parte de la cistena se aade posttraduccionalmente, por modificacin de la protena inmadura. A microscopio electrnico se puede comprobar el gran grosor (volumen) de las cubiertas, y su aspecto relativamente denso a los electrones. Son muy insolubles e impermeables, e impiden la entrada de numerosos agentes qumicos, incluyendo sustancias txicas. La abundancia de puentes S-S las hace muy compactas y muy estables qumicamente. V. Exosporio

Es una mezcla de protenas, polisacridos complejos, y lpidos, muy resistente a enzimas proteolticas, lo que sugiere (pero no prueba directamente) que el exosporio puede representar algn papel como barrera de defensa externa de la espora. En B. cereus es una estructura membranosa transparente, a modo de saco cerrado, delgado y flojo, envolviendo al resto de la espora de una forma suelta, despegado en principio respecto de las cubiertas (tras la liberacin de la espora, al perderse el contenido acuoso que haba entre exosporio y cubiertas, aquel se pega a stas). En B. subtilis y B. megaterium, el exosporio est envolviendo a la espora de una forma ms estrecha, estableciendo algunos contactos fsicos con la superfie de las cubiertas. http://www.terragene.com.ar/uploads/pdf/de_bacterias_a_esporas.pdf http://facultad.bayamon.inter.edu/yserrano/CELULAmicro2002.htm http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/09esporas.htm#_Toc57039386