DNA hair extraction procedure. a) Enjuagar el pelo con agua destilada y etanol absoluto, dejar secar.

b) Incubar el pelo a 55C por 3 hrs. en 500 ul de solucin de lisis: 0.01 M trisHcl pH 8.0 0.01 M EDTA 0.1 M NaCl 0.039 M DTT 2% SDS 50 ug/ml Proteinase K c) Agregar NaCl 0.2 M y 10 ug de glucgeno d) Llevar a cabo una extraccin fenol:cloroformo: 1) Agregar 0.5ml de fenol:cloroformo: alcohol isoamyl (24:24:1) a la solucin. 2) Mezclar completamente. Se puede usar vortex por 10 seg, en el caso de DNA de alto peso molecular agitar suavemente. 3) Centrifugar durante 3 min a 12,000 rpm. 4) Tomar la fase acuosa (fase superior, aproximadamente 0.5ml) cuidando de evitar la interfase, colocar la fase acuosa en un tubo nuevo (Los pasos 1-4 pueden repetirse hasta que la interfase no sea visible). 5) Agregar 0.5ml de cloroformo:octanol (24:1) a la fase acuosa. 6) Centrifugar por 3 min a 12,000 rpm. 7) Tomar la fase acuosa y colocarla en un tubo nuevo. 8) Repetir los pasos 5-7 una vez ms. e) Agregar 1ml de etanol absoluto fro (a 20C). f) Dejar pecipitando toda la noche a 20C min. g) Centrifugar 20 min a 10,000 rpm. h) Agregar 1 ml de etanol al 70% fro a 20C, dejar reposar 5 min a temperatura ambiente, centrifugar a 10,000 RPM por 3 min, eliminar el sobrenadante. i) j) Repetir el paso anterior 2-3 veces. Dejar secar, hasta eliminar completamente el etanol.

k) Resuspender (volumen, buffer o agua, a determinar), se puede incubar a 3755C agitando constantemente.