PRACTICA No. 4 ALELOS MULTIPLES OBJETIVO Determinar los diferentes tipos de genotipos presentes en un poblacin. Aplicar ley de Hardy-Weinberg.

g. INTRODUCCION ALELOS MULTIPLES Muchos genes tienen ms de dos alelos (si bien un individuo diploide solo puede tener dos alelos por cada gen). Los alelos mltiples se originan de diferentes mutaciones sobre un mismo gen. El sistema ABO para tipificar la sangre humana es un ejemplo de alelos mltiples. El tipo de sangre humana esta determinado por los alelos A, B y O. A y B son codominantes sobre el O. El nico genotipo posible para una persona de tipo O es OO. Los de tipo A pueden tener un genotipo AA o AO. El tipo B, genotipo BB o BO. El tipo AB tiene solo el genotipo (heterocigoto). Los alelos A y B del gen producen diferentes glicoprotenas (antgenos) en la superficie de cada clula. Los homocigotas para A producen el antgeno A, los de B solo los del B, los del AB ambos y los homocigotas para el O, ninguno. Se ha considerado hasta el momento que un par de alelos es el que controla una determinada caracterstica fenotpica. Pero un determinado gen puede tener ms de dos formas allicas. Cuando se presenta esta situacin se dice que tienen alelos mltiples o polialelos. En el caso de alelos mltiples, un individuo diploide tendr como mximo dos de estos alelos, uno en cada uno de los cromosomas homlogos, aunque en la poblacin se presenten ms alelos para el mismo gen. Un ejemplo clsico de alelos mltiples en seres humanos, es la herencia de los grupos sanguneos de la clasificacin ABO. A diferencia del albinismo, donde solamente se encuentran dos alelos diferentes A y a (y por lo tanto no se trata de polialelos), en el caso de la clasificacin ABO se han identificado tres alelos. Los alelos son IA IB I y se organizan en 6 clases de genotipos, los que codifican para 4 clases de fenotipos, que son los grupos sanguneos O, A, B y AB. Fenotipo A B AB O Genotipo IAIA IAI IBIB IBI I A IB II

Existe una relacin de dominancia entre los alelos IA I y tambin entre IB I. En cambio la relacin es de codominancia entre los alelos IA IB Es importante considerar que esta clasificacin de grupo sanguneo se considera en casos de transfusiones sanguneas, puesto que los antgenos A y B son antgenos fuertes, capaces de desencadenar reacciones antgeno-anticuerpo. Los individuos del grupo A tienen en su suero anticuerpos anti-B. Los individuos del grupo B tienen anticuerpos anti-A. Los individuos del grupo AB no poseen en su suero anticuerpos anti-A como tampoco anti-B y los individuos del grupo O poseen ambos anticuerpos en su suero. Por lo tanto, el grupo sanguneo O es dador universal, es decir, le puede dar sangre a individuos de cualquier grupo sanguneo, pero recibe sangre slo de su propio grupo. En cambio, el grupo AB es receptor universal, porque al no poseer anticuerpos anti - A y anti - B puede recibir sangre de cualquier grupo sanguneo. Muchos genes tienen ms de dos alelos (si bien un individuo diploide solo puede tener dos alelos por cada gen). 1

Los alelos mltiples se originan de diferentes mutaciones sobre un mismo gen. El sistema ABO para tipificar la sangre humana es un ejemplo de alelos mltiples. El tipo de sangre humana esta determinado por los alelos A, B y O. A y B son codominantes sobre el O. El nico genotipo posible para una persona de tipo O es OO. Los de tipo A pueden tener un genotipo AA o AO. El tipo B, genotipo BB o BO. El tipo AB tiene solo el genotipo (heterocigoto). Los alelos A y B del gen producen diferentes glicoprotenas (antgenos) en la superficie de cada clula. Los homocigotas para A producen el antgeno A, los de B solo los del B, los del AB ambos y los homocigotas para el O, ninguno.

Se definen as a los genes que tiene ms de dos alelos en toda la poblacin. Es decir en vez del tpco caso de dos alelos para una caracterstica existen mas de dos. Sin embargo cada indiviudo puede portar solo dos alelos ya que posee solo dos cromosomas homlogos. Similares ejemplos en grupos sanguneos se dan en casi todos los animales. Adems del alelo I A y el I B descriptos anteriormente, existe un alelo ms en la poblacin, el i, el que cuando se presenta en estado homocigota produce como fenotipo el grupo sanguneo O. Cabe aclarar que en organismos diploides, un individuo slo puede llevar dos alelos, nunca ms ya que posee slo 2 cromosomas homlogos (cada homlogo lleva un alelo). Si tenemos en cuenta todas las combinaciones posibles que pueden portar los individuos de la poblacin, vemos que se pueden dar seis genotipos distintos, algunos de los cuales presentan igual fenotipo ya que el alelo IA y el IB son codominantes, pero el I A tanto como el I B son dominantes completos sobre el alelo recesivo i: IA IA.. Grupo A IA i. Grupo A I B IB.. Grupo B I B i. Grupo B I A IB. Grupo AB i i. Grupo O El alelo i no produce ningn tipo de antgenos de superficie en los glbulos rojos, por esto es dador universal ya que si se administra sangre de grupo O a una persona de cualquier grupo, no produce reaccin contra los eritrocitos del dador ya que no los reconoce como extraos, en cambio si tuvieran antgenos seran atacados por el sistema inmune del receptor al ser reconocidos como extraos. Como habamos mencionado anteriormente los alelos de un gen deben haberse originado por mutaciones un alelo original o salvaje, en el caso de los alelos mltiples evidentemente a lo largo de la evolucin se han originado una gran cantidad de mutaciones que han originado un gran nmero de alelos y que se han conservado debido a la ventaja adaptativa que le brindan a la especie. 2

Para poder calcular el nmero de genotipos distintos que pueden existir en la poblacin cuando hay ms de dos alelos para una caracterstica en particular, se usa la siguiente frmula: n ( n + 1 )/2 = N de genotipos, donde n es el nmero de alelos en la poblacin. Para este caso: 3 4/2 = 6 genotipos distintos. En ocasiones existen alelos mltiples en la poblacin para algunas caractersticas que a su vez entre ellos tienen un orden de dominancia entre ellos. En estos casos se habla de serie allica. Un ejemplo es la serie allica para el color del pelaje en los gatos, dnde el alelo C es dominante sobre el Cs, el que a su vez domina sobre el Cb , ste sobre ca y ste a su vez sobre c. El alelo C codifica para distribucin de color uniforme, el C s codifica la distribucin de color siams, el Cb color burmese, el ca color semialbino y el c albino. A su vez entre el siams y el burmese existe dominancia incompleta o codominancia el que produce un fenotipo que ha sido seleccionado como raza llamada tonquins. Quiere decir que existen varios genotipos distintos dependiendo del orden de dominancia: C _Distribucin de Color uniforme (CC, C Cs, C Cb, C ca y C c) Cs _Distribucin de color siams (Cs Cs, Cs ca y Cs c) Cb _Distribucin de color burmese (Cb Cb, Cb ca y Cb c) ca _Semialbino (ca ca y ca c). c cAlbino (cc). CsCb Tonquins (Codominantes). Como vemos existen 15 genotipos distintos y 6 fenotipos distintos. Existen otros ejemplos de series allicas en el color del pelaje de los conejos, etc. El mismo tipo de variabilidad de este tipo de alelos de antgenos de histocompatibilidad se da en casi todos los animales domsticos al igual que en los humano

Equilibrio Hardy-Weinberg para alelos mltiples Extensin de lo estudiado para un gen autosmico con 2 alelos. Si se cumplen las suposiciones del equilibrio H-W (Panmixia, no hay mutacin, ni migracin, seleccin o deriva gentica), las frecuencias gnicas y genotpicas se mantienen generacin tras generacin. Si las condiciones dejan de cumplirse en una generacin, el equilibrio se recupera en la generacin siguiente. Algunas propiedades del equilibrio H-W para alelos mltiples: Mxima frecuencia de heterozigotos: Se logra cuando todos los genes tienen la misma frecuencia. Si hay k alelos (p1, p2, p3, ..., pk), cada uno valdr 1/k. Canto valdr?: Depende del n de alelos del sistema. Clculo: Frecuencia del total de homocigotos + Frecuencia del total de heterocigotos = 1 Frecuencia total de homocigotos cuando pi= 1/k.

Frecuencia del total de heterocigotos cuando pi= 1/k (Mxima heterozigosidad):

Variacin de la heterozigosidad mxima conforme aumenta el nmero de alelos. N alelos (k) 2 3 4 5 10 k N genotipos heterocigotos posibles 1 3 6 10 45 Mxima heterozigosidad (p1=p2=p3= =pk) (1/2) = 0.5 (2/3) = 0.66 (3/4) = 0.75 (4/5) = 0.80 (9/10) = 0.90

Grficamente:

EL modelo de Hardy-Weinberg se utiliza para calcular las frecuencias genotpicas a partir de las frecuencias allicas. En efecto, si consideramos en una poblacin la pareja allica A1 y A2 de un locus dado, p es la frecuencia del alelo A1 0 =< p =< 1 q es la frecuencia del alelo A2 0 =< q =< 1 y p + q = 1 Siendo las frecuencias allicas iguales para ambos sexos, por ejemplo: hombres (p,q) mujeres (p,q) En la generacin siguiente: (p + q)2 = p2 + 2pq + q2 = 1 donde: p2 = frecuencia del genotipo A1 A1 HOMOCIGOTO 2pq = frecuencia del genotipo A1 A2 HETEROCIGOTO q2 = frecuencia del genotipo A2 A2 HOMOCIGOTO MATERIAL Lancetas Torundas con alcohol Placas con pozos Papel seda Palillos de madera

REACTIVOS Aceite de inmersin Antisuero A 4

Antisuero B Antisuero AB Antisuero O

PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. Alelo IA IB I0 Obtener cuatro gotas de sangre y colocarlas sobre una placa. Aadir en cada pozo una gota de antisuero (A, B, AB, RH). Obtener la frecuencia de alelos del grupo. Genotip o I A I A ; IA I 0 IB IB ; IBI0 I A IB I 0 I0 Fenotip o A B AB O Antgeno en la membrana celular A B AyB O Anticuerpos en el plasma Anti-B Ant-A Ant-A, Anti-B --

RESULTADOS Y DISCUSIONES Nombre paciente MAESTRA GRECIA ARTURO LIZETTE DIANA ZARA MIRIAM JAZMIN MIRNA SILVIA FRANCISCO MARIAN NAYELLI ITZEL Fenotipo A+ O+ A+ B+ O+ O+ O+ O+ O+ A+ O+ AB+ B+ A+ Observaciones En el caso de Diana, Zarai, Grecia, Jazmn, Miriam, Mirna, Francisco, que son grupo O RH+, se observa que no aglutino en ninguno de los antisueros aglutino a excepcin del D (RH), donde demuestran que son positivos a este antisuero. En esta imagen solo se observa el caso de Jazmn, Miriam y Zarai (orden arriba abajo), sin embargo en todas las muestras O + se observan igual. Esto es por que no presenten en la superficie los eritrocitos ninguna glucoproteina. Por lo que se les llama receptores universales. En este caso se observan dos tipos de aglutinaciones en las cuales una de ellas aglutino con el antisuero A y otra con el antisuero B. Lizette(primera lnea) presento aglutinacin en el antisuero B demostrndonos as que su fenotipo es B + (Rh aglutino tambien). En la fila de abajo perteneciente a Arturo nos demuestra lo contrario, aglutinacin en el antisuero A, determinando asi su fenotipo B. Tambin se presenta aglutinacin en el antisuero AB, ya que presentan uno de los dos. 5

Imagen de las aglutinaciones

Este mismo caso se presento con Nayelli (grupo B) e Itzel (grupo A) En el caso de Marian se aglutino en todos los antisueros, y se le puede llamar Donador Universal. COLORES DE LOS ANTISUEROS: Anti A: azul Anti B: amarillo Anti AB: sin color, ligeramente amarillo muy palido Anti RH (D): tranparente Alelo A+ B+ AB+ O+ No. Casos 4 2 1 7 % 1 solo alelo 28.57% 14.2% 7.14% 50% Frecuencia de 3 alelos 9.523 4.73 2.38 16.6

6 genotipos = 3 tipos de alelos Ley de Hardy- Weinberg : (p+ q+ r)= p2+q2+r2+2pq+2pr+2pr En donde: p= grupo A q= grupo B r= grupo O (cero) (13)2=16+4+49+16+56+28 169=169 Por lo tanto si se cumple la ley, la cual dice que en poblaciones de especie los genes son iguales, solo cambian por alguna mutacin, derivadas genticas o desastre mayor. CONCLUSIONES Un ejemplo muy clsico de los alelos mltiples y fcil de demostrar es el caso de la determinacin de grupos sanguneos de determinada poblacin en este caso: seccin 1 del laboratorio de Gentica 7mo semestre. Se debe recordar que el fundamento de los grupos sanguneos se basa en las diferentes protenas (antgenos) que se encuentra en la membrana celular de los eritrocitos, especifica de cada individuo. Pero en este caso solo se determinan los grupos mas comunes A, B, y O. Pero aproximadamente existen 27 tipos de grupos sanguneos (antigenos) menores que no se detectan rutinariamente durante la determinacin del grupo sanguneo. Si no se detectan, la persona puede experimentar una reaccin al recibir ciertos tipos de sangre. Es por eso la importancia de la determinacin de los grupos sanguineos y de otras pruebas como por ejemplo pruebas cruzadas. Los alelos mltiples se originan de diferentes mutaciones sobre un mismo gen. El sistema ABO es un ejemplo de alelos mltiples. El tipo de sangre humana esta determinado por los alelos A, B y O. A y B son codominantes sobre el O. En gentica de poblaciones establece que la composicin gentica de una poblacin permanece en equilibrio mientras no acte la seleccin natural ni ningn otro factor y no se produzca ninguna mutacin. Es decir, la herencia mendeliana, por s misma, no engendra cambio evolutivo. Si se cumplen las suposiciones del equilibrio H-W (Panmixia, no hay mutacin, ni migracin, seleccin o deriva gentica), las frecuencias gnicas y genotpicas se mantienen generacin tras generacin. Si las condiciones dejan de cumplirse en una generacin, el equilibrio se recupera en la generacin siguiente. BIBLIOGRAFA http://ejb.ucv.cl/gmunoz/genweb/genetica/frame/textos/8_2alelos_multiples.htm

http://genmolecular.wordpress.com/mecanismos-de-interaccion-genica/ www.cecyt6.ipn.mx/.../herencia_postmendel.htm http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/genet2.htm http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/gpepe/g-poblaciones/clases/Tema_05/Alelos-multiples2.htm 6