BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS

KATERINE TORRES DELGADO TATIANAN ZULUAGA MONTOYA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MINAS INGENIERA QUMICA MEDELLN 2009

BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS

KATERINE TORRES DELGADO TATIANA ZULUAGA MONTOYA

Trabajo de grado para optar el ttulo de Ingeniera Qumica

ASESORA CARMEN ELENA ZAPATA INGENIERA DE PETROLEOS

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MINAS INGENIERA QUMICA MEDELLN 2009 2

TABLA DE CONTENIDO INTRODUCCION...6 1. LOS SUELOS..7 INTRODUCCION7 1.1. COMPOSICIN DEL SUELO.7 1.1.1. La fraccin mineral..8 1.1.2. Materia orgnica del suelo...8 1.2. TIPOS DE SUELOS SEGN SUS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS 10 1.3. ESTRUCTURA DE AGREGACION DEL SUELO .11 1.3.1. Estructura del suelo11 1.3.2. Agregacin de un suelo11 1.4. GASES DE UN SUELO...12 1.4.1 difusin de gases en el perfil de un suelo .12 1.5. HUMEDAD DEL SUELO.13 1.6. SISTEMAS DE CLASIFICACION DE SUELOS 15 1.7. TIPOS DE SUELOS COLOMBIANOS.18 1.7.1. Regin de la Orinoqua.18 1.7.2. Regin Amaznica..19 1.7.3. Regin del Pacfico.19 1.7.4. Regin del Caribe21 1.7.5. Regin Andina..21 2. EL PETROLEO23 INTRODUCCION...23 2.1. COMPOSICION DEL CRUDO DEL PETROLEO ..23 2.1.1. Composicin general..23 2.1.2. Composicin por familias de hidrocarburos 24 2.1.3. Composicin del crudo segn el origen 27 2.2. COMPOSICION DEL CRUDO SEGN GRAVEDAD API28 2.3. EL PETROLEO EN COLOMBIA.29 2.3.1. Resea histrica29 3

2.3.2. Potencial petrolfero.30 2.3.3. Refinacin.31 2.3.4. Transporte.31 3. LOS HIDROCARBUROS Y LA CONTAMINACION ...32 INTRODUCCION32 3.1. FORMAS DE CONTAINACION POR LA OPERACIN PETROLERA.32 3.2. CAUSAS DE DERRAMES POR LA ACTIVIDAD PETROLERA.33 4. BIORREMEDIACION..35 INTRODUCCION35 4.1. ANTECEDENTES HISTORICOS DE LA BIORREMEDIACION 36 4.2. FUNDAMENTACION BIOQUIMICA DE LA BIORREMEDIACION..36 4.3. FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIORREMEDIACION .37 4.3.1. Factores Medioambientales38 4.3.2. Factores Fsicos.40 4.3.3. Factores Qumicos.40 4.3.4. Factores Microbiolgicos...41 4.4. MICROORGANISMOS EN LA BIORREMEDIACION .41 4.4.1. Bacterias...42 4.4.2. Hongos..44 4.4.3. Microorganismos Concretos.45 4.5. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACION ..46 4.5.1. Ventajas46 4.5.2. Desventajas.46 4.6. ETAPAS DEL TRABAJO PARA UNA BIORREMEDIACION MAS EFICAZ47 4.6.1. Investigacin y caracterizacin de la contaminacin47 4.6.2. Anlisis y eleccin de las medidas biocorrectivas ..47 4.6.3. Diseo y evaluacin del sistema.47 4.6.4. Anlisis e interpretacin de resultados48 5. METODOS DE BIORREMEDIACION ..49 INTRODUCCION49 4

5.1 BIORREMEDIACION IN SITU..49 5.1.1. Bioaireacin o Bioventeo49 5.1.2. Inyeccin de aire a presin51 5.1.3. Atenuacin Natural52 5.1.5. Bioaumentacin..54 5.2. BIORREMEDIACION EX SITU55 5.2.1. Disposicin del suelo..55 5.2.2. Bioceldas o Biopilas.58 5.2.3. Tratamiento de Biosuspencin.59 5.3. FITORREMEDIACION...60 5.3.1. Fitodescontaminacin y Fitoestabilizacin .61 5.3.2. Tolerancia de las plantas contaminantes .61 5.3.3. Futuro de la Fitorremediacin.63 6. APLICACIN EN COLOMBIA..64 INTRODUCCION64 6.1. BIORREMEDIACION DE OXISOLES64 6.2. BIORREMEDIACION DE ULTISOLES .67 6.3. BIORREMEDIACION DE INCEPTISOLES ..68 6.4. BIORREMEDIACION DE ARIDISOLES Y ENTISOLES ..69 6.5. BIORREMEDIACION DE ALFISOLES Y MOLISOLES70 6.6. BIORREMEDIACION DE ANDISOLES .70 7. NORMATIVIDAD..72 7.1 REPARACION E INDEMNIZACION.73 8. TABLA RESUMEN..74 9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES.75 10. GLOSARIO.76 11. ANEXO A84 11.1 TRANSPORTE DEL CRUDO.84 11.2 PRINCIPALES OLEODUCTOS DEL PAIS .85 12. BIBLIOGRAFIA.91 5

INTRODUCCION

El impacto ambiental de los derrames de crudo en Colombia ha dejado miles de hectreas afectadas, sin dejar a un lado los kilmetros de ros y quebradas. Estos daos a las fuentes hdricas, suelos, aire, fauna y vegetacin, causados por actos terroristas a la infraestructura petrolera o como resultado de la actividad de la extraccin del petrleo, son prcticamente irremediables, ya que los procesos de descontaminacin no alcanzan a cubrir todas las reas afectadas y se realizan mucho tiempo despus de que el crudo ha penetrado al ecosistema. La biorremediacin surge de la necesidad de disminuir el impacto ambiental que esto conlleva, con el fin de detoxificar contaminantes en los diferentes ambientes (mares, lagos, ros, estuarios y suelos) usando microorganismos, plantas o enzimas de estos, de manera estratgica. Gracias a la biotecnologa se han desarrollado diversas estrategias con el fin de restaurar el suelo y la calidad ambiental, de acuerdo con las necesidades y dimensiones del problema. Con este proyecto se pretende realizar una revisin bibliogrfica de la biorremediacin y los mtodos mas conocidos de dicha tcnica. Se tienen en cuenta los factores que condicionan la biorremediacin, ventajas, desventajas y caractersticas de cada uno de sus mtodos. Adems, se nombran los diferentes tipos de suelos, sus caractersticas principales, tipologa y su clasificacin segn estructura y composicin en rdenes, con el fin de hacer una clasificacin de los suelos colombianos de cada regin. Se realiza un anlisis de la composicin del crudo, la clasificacin segn su gravedad API y el desarrollo de la industria petrolera en Colombia. Por ltimo se indican las causas de los derrames de crudo en Colombia y la normatividad que rige el manejo ambiental que debe drsele a dicha problemtica. Tambin se analiza que mtodos pueden ser utilizados en los suelos que conforman el territorio colombiano, segn la regin y el tipo de suelo predominante en la misma, que han sido contaminados por derrames de hidrocarburos o que se encuentran en riesgo potencial.

1. LOS SUELOS

INTRODUCCIN

Se denomina suelo al sistema estructurado, biolgicamente activo, que tiende a desarrollarse en la superficie de las tierras emergidas por la influencia de la intemperie y de los seres vivos. Se trata de un sistema formado por componentes minerales, componentes orgnicos (humus y derivados, biomasa viva y muerta), gas (aire en el espacio existente en los poros), y agua envolviendo partculas y el espacio capilar. El suelo constituye la interfaz entre la tierra, el aire y el agua, lo que le confiere la capacidad de desempear tanto funciones naturales como de uso antropognico.

Los suelos proporcionan soporte fsico y nutrientes para el crecimiento de las plantas y los microorganismos. Existe una gran variedad de microorganismos (bacterias, actinomicetos, hongos, algas y protozoos) que casi siempre estn presentes en ellos, aunque las densidades de poblacin de las mismas varan ampliamente. La superficie de los suelos constituye el lugar donde se producen la mayora de las reacciones bioqumicas pertenecientes al ciclo de la materia orgnica, el nitrgeno y otros minerales, a la meteorizacin de las rocas y a la toma de nutrientes por parte de las plantas (Alexander, 1991).

Las propiedades fsicas y qumicas de los suelos influyen en gran manera sobre la aireacin, la disponibilidad de nutrientes y la retencin de agua y, por lo tanto, en la actividad biolgica. Las propiedades ms importantes de las que engloban estos grupos son el tamao de partcula, la porosidad, la humedad, estado de aireacin, composicin qumica, fraccin de arcilla, capacidad de intercambio de cationes y fraccin orgnica. El tamao de partcula afecta a la qumica de la superficie de los suelos y al tamao de los poros. La cantidad de poros depende de la textura, estructura y contenido de materia orgnica del suelo.

1.1.

Composicin del suelo

La matriz de un suelo est compuesta por cinco componentes principales:

Minerales. Los materiales minerales constituyen los principales componentes estructurales de los suelos y suponen ms del 50% del volumen total. 7

Aire agua. Conjuntamente constituyen el volumen de poros , que, por lo general, ocupa entre el 25 y 50% del volumen total. La proporcin aire agua vara considerablemente con la humedad del suelo. Organismos vivos. Ocupan menos del 1% del volumen.

Materia orgnica. Oscilan entre el 3 y 6% del volumen, con valor medio.

1.1.1. La fraccin mineral. El mineral predominante en un suelo es el dixido de silicio (SiO2). Igualmente se encuentran en abundancia el aluminio y el hierro, mientras que el calcio, magnesio, potasio, titanio, manganeso, nitrgeno, azufre, sodio y fsforo estn presentes en menor cuanta (Alexander, 1991). La composicin qumica vara de un suelo a otro y, en un mismo suelo, a diferentes profundidades. Los microorganismos obtienen parte de los nutrientes que necesitan de la fraccin mineral del suelo, siendo dichos nutrientes nitrgeno, fsforo, potasio, magnesio, azufre, hierro, calcio, manganeso, zinc, cobre y molibdeno. Sin embargo los microorganismos pueden disponer con facilidad nicamente de una pequea parte de estos minerales, convirtindolos ms en una provisin de lento empleo, que en una fuente de rpido uso. Los suelos se clasifican segn el tamao de sus partculas1, teniendo en cuenta tres componentes principales:

Arcilla. Pasa por un tamiz de 0,002 mm (2 m).

Limo. Queda retenido en el tamiz de 0,002 mm pero pasa a travs del tamiz de 0,05 mm. Arena. Queda retenida en el tamiz de 0,05mm aunque pasa a travs del de 2mm2.

El rea especfica (rea/volumen) de los diferentes tipos de partculas afecta directamente las propiedades fsicas, qumicas y biolgicas del suelo (Tabla 1.1). La arcilla constituye el tipo de partcula que mayor efecto produce sobre las propiedades de un suelo, principalmente debido a la alta actividad superficial que la caracteriza. La mayor parte de sus partculas son de naturaleza coloidal, tienen una carga superficial negativa y de forma plana; adems, son buenos absorbentes de agua, iones y gases. Las partculas de
1

En general, la clasificacin segn tamaos est basada en el anlisis granulomtrico que proporciona el Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA) 2 Aquellas partculas que quedan retenidas en el tamiz de 2mm de paso se clasifican como grava o piedra.

mayor tamao, como la arena, no tienen el mismo nivel de actividad superficial. Los principales efectos asociados a las partculas de arena estn relacionados con el tamao del poro del suelo y, por tanto, con el movimiento del aire y el agua a travs del mismo (las arenas no afectan en gran medida a las propiedades qumicas y biolgicas del suelo). La presencia en un suelo de superficies que absorban con gran intensidad determinadas clases de compuestos pueden reducir la disponibilidad de compuestos orgnicos para la biodegradabilidad. Tambin afecta la disponibilidad de nutrientes la capacidad de intercambio de cationes en el suelo de los minerales arcillosos y los compuestos orgnicos que constan de zonas con carga elctrica superficial negativa3. El amonio, por ejemplo, que tiene carga positiva, pasa a estar disponible en menor grado para su uso directo por plantas y microorganismos y queda retenido en el suelo ms tiempo que los nitratos, oxidndose y pasando a tener carga negativa.

TABLA 1.1. Clasificacin de las partculas de un suelo

Tipo de partcula

Dimetro, mm

rea especfica, m2/kg

Arena

Gravilla Arena gruesa Arena media Arena fina Arena muy fina Limo Arcilla Fuente: Millar et al., 1958

1,0 2,0 0,5 1,0 0,25 0,5 0,1 0,25 0,05 0,1 0,002 0,05 0,002

1,1 2,3 4,5 9,1 22,7 45,4 1130,0

1.1.2. Materia orgnica de un suelo. La fraccin orgnica del suelo esta compuesta por:

Residuos de plantas y animales.

3

Atraen iones de carga positiva, tales como NH4+, K +, Na +, Ca 2+ y Mg 2+.

Clulas microbianas.

Productos resultantes del metabolismo microbiano, comnmente llamado humus. El humus es materia orgnica que ha sufrido varias degradaciones y transformaciones. Est compuesto en su mayor parte por sustancias polimerizadas: compuestos aromticos, polisacridos aminocidos, polmeros del cido urnico y compuestos que contienen fsforo (Alexander, 1991).

Mucha de la materia orgnica de un suelo, en particular el humus, es ligeramente soluble nicamente en agua y de alguna forma, resistente a la biodegradacin. El material hmico tiene propiedades coloidales y una carga neta negativa; por lo tanto , la importancia que tiene en el proceso de formacin de complejos organometlicos es considerable.

1.2.

Tipos de suelos segn sus caractersticas biolgicas

La arcilla y el humus son el asiento de la actividad del suelo; estos dos constituyentes existen en el llamado estado coloidal. Las propiedades qumicas y fsicas de los suelos son controladas, en gran parte, por dichos compuestos, que actan como centros de actividad donde ocurren reacciones qumicas y cambios nutritivos.

Por sus caractersticas biolgicas los suelos pueden ser: Suelos mull o de humus elaborado . Se caracterizan por tener una actividad biolgica intensa, sobre todo de la fauna y microorganismos que se alojan en el suelo y descomponen rpidamente la materia orgnica del mismo. Aparecen en regiones de temperatura elevada y humedad mediana. El suelo est bien aireado. La roca madre suele ser calctica y la vegetacin rica en nitrgeno. Suelos mor o de humus bruto. Son suelos biolgicamente poco activos. La vegetacin tiende a ser acidificante, pobre en nitrgeno, y la roca madre silcica. La lentitud de los procesos de descomposicin favorece que se forme un mantillo de materia orgnica mal descompuesta. Suelos moder. Poseen un tipo de humus intermedio entre el mull y el mor. En realidad se trata de la degradacin desde el bosque caducifolio a la pradera alpina. Suelos de turba. Son suelos formados en condiciones anaerbicas, permanentemente cubiertos de agua. La fauna y la flora se reduce a especies 10

microscpicas y pequeos hongos. La transformacin de la materia orgnica es muy lenta, y se acumula en grandes cantidades. Las turbas pueden ser tanto cidas como bsicas. Segn las condiciones climticas y topogrficas los suelos pueden variar de un tipo a otro. Suelo permafrost o pergelisol. Por la falta de calor est permanentemente helado, lo que impide el desarrollo de la vegetacin. En un suelo permafrost podemos diferenciar la zona helada de la capa de mollisol, que se deshiela en verano y se hiela en invierno.

1.3.

Estructura y agregacin de un suelo

1.3.1. Estructura de un suelo. La estructura de un suelo se puede definir como la disposicin y organizacin de las diferentes partculas del mismo. Dicha estructura constituye una propiedad cualitativa y depende de la porosidad total de un volumen de suelo, de la forma de cada poro y de la distribucin global de los tamaos de los poros. Como consecuencia, la estructura de un suelo afecta en gran medida a las propiedades mecnicas de ste, principalmente al movimiento de fluidos, incluidas la infiltracin, la retencin de agua y la aireacin. Aquellos suelos en los que las partculas estn sueltas y no adheridas entre s (como los depsitos no consolidados de polvo del desierto), se definen como carentes de estructura o como poseedores de una estructura de grano simple. En contraposicin, los suelos con partculas estrechamente unidas (como en una arcilla seca), se definen como poseedores de una estructura en masa. Los suelos que poseen una estructura intermedia entre las dos anteriormente descritas, se denominan como agregados (Hillel, 1982). 1.3.2. Agregacin de un suelo. La agregacin de un suelo consiste en la estabilizacin de la arena, limos y arcilla, mediante la formacin de complejos de materia arcillosa orgnica en agregados. En comparacin con las partculas minerales, los agregados constituyen unidades estructurales temporales, en los cuales, su estabilidad se ve afectada en gran parte por la actividad microbiana, los cambios climticos y por las prcticas agrcolas (tales como la preparacin del terreno para su sembrado). La formacin de agregados es el resultado de los enlaces inicos originados entre arcillas, que poseen una gran superficie neta negativa, y materia orgnica, que tambin est cargada negativamente para valores de pH neutro, a travs de los cationes polivalentes presentes en el suelo. Los agregados padecen una consolidacin posterior debido a fuerzas fsicas tales como evaporacin, deshielo, el crecimiento de races y la compactacin (Eweis et al., 1999). 11

1.4.

Gases de un suelo

Existe una relacin directa entre las cantidades de agua y aire contenidas en un volumen de suelo, ya que el espacio de poros que no ocupe el gas lo ocupa el agua. Los principales gases que conforman un suelo son, en esencia, los mismos que se encuentran en la atmsfera terrestre. El aire de la atmsfera est compuesto, aproximadamente, por un 78,08% de nitrgeno (N2), un 20,94% de oxgeno (O2), un 0,035% de dixido de carbono (CO2) y un 0,93% de gases inertes como el argn y el nen. Sin embargo, las concentraciones relativas de dichos gases en el suelo, especficamente del O2 y del CO2, dependen de la aireacin del mismo y de la actividad microbiana en todo el perfil.

En un suelo con buena aireacin la concentracin de O2 puede oscilar entre el 18% y 20% y la concentracin del CO2 puede alcanzar valores tan altos como del 1% al 2%. En suelos con menor aireacin (como los suelos arcillosos con un alto contenido en agua y una actividad microbiana considerable) el CO 2 puede llegar a presentarse en una concentracin del 10%.

En cuanto a la actividad microbiana, el nivel de aireacin de un suelo no es tan importante como las condiciones en el interior de los agregados. Aquellos suelos que en general estn bien aireados pueden tener zonas microscpicas anaerobias en el interior de las formaciones de agregados, las cuales constituyen una explicacin relativa a la presencia de bacterias anaerobias, tales como los clostridium, en las capas superiores de un suelo (Eweis et al., 1999). Las bacterias aerobias al mismo tiempo que colonizan zonas microscpicas, consumen todo el oxgeno all almacenado, dando lugar a las condiciones que las bacterias anaerobias necesitan para desarrollarse y sobrevivir. Se calcula que la transicin de condiciones aerobias a anaerobias tiene lugar para valores de la concentracin de oxgeno inferiores al 1%; al mismo tiempo se cree que manteniendo una aireacin adecuada del suelo, el porcentaje del espacio de los poros ocupado por aire no disminuira por debajo de un 10% (Paul y Clark, 1989).

1.4.1

Difusin de gases en el perfil de un suelo. La difusin de gases en el perfil de un suelo, como describe la ley de Fick, es directamente proporcional al gradiente de concentracin en dicho perfil:

dC dz
(1.1)

12

donde

q = flujo difusivo, g/cm 2.s D = coeficiente de difusin, cm 2/s C = concentracin del gas, g/cm 3 z = profundidad, cm

Los gases se mueven bien en la fase aire, esto es, a travs de los poros, suponiendo que estn conectados entre s y en contacto con la atmsfera, o en fase lquida en forma disuelta. La solubilidad de los gases en agua depende de varios factores, incluyendo el propio gas, la temperatura y las presiones parciales de los gases en el espacio de poros (Eweis et al., 1999). Sin embargo, la difusin de gases en agua es unas diez mil veces ms lenta que en el aire (Tabla 1.2)

TABLA 1.2. Constantes de difusin de los principales gases.

Difusividad, cm2/s Coeficientes adimensional de la ley de Henry* 1,07 30,7 60,4

Gas

Aire

Agua 0,177 x 10-4 0,180 x 10-4 0,164 x 10-4

CO2 O2 N2

0,161 0,205 0,205

Fuente: Paul y Clark, 1989 * H = Cg/CL

1.5.

Humedad de un suelo

Para darse una idea general de la importancia que tiene el agua para el suelo es necesario resaltar que junto con sus sales disueltas, forma la llamada solucin del 13

suelo; sta es esencial para abastecer de nutrimentos a las plantas que en l se desarrollan. La humedad del suelo influye significativamente en la actividad biolgica, puesto que un suministro adecuado de agua es esencial para el crecimiento y la estabilidad microbianos. Un suelo con una humedad demasiado baja da lugar a zonas secas y a una disminucin en la actividad microbiana; sin embargo, demasiada humedad inhibe el intercambio de gases y el movimiento de oxgeno a travs del suelo y deriva en la aparicin de zonas anaerobias, lo cual dara lugar a la eliminacin de las bacterias aerobias y el aumento de la presencia de anaerobios o anaerobios facultativos.

El agua que se encuentra en un suelo se clasifica en tres tipos: Gravitacional. Es el agua que est disponible para los microorganismos y las races de las plantas. sta juega un papel importante en el transporte de contaminantes y otras materias. Capilar. Es el agua que est contenida en los poros; tambin est disponible para los microorganismos del suelo. Osmtica. Es el agua que est retenida por las partculas de arcilla y el humus y, opuesto a los otros dos tipos de agua, no es de fcil alcance para los microorganismos y las races de las plantas. El contenido de agua en un suelo, en peso o volumen, es funcin de la presin de succin o, como tambin se le conoce, el potencial de la matriz. Como concepto, el potencial de la matriz constituye una medida de la tenacidad con la que es agua es retenida en los poros o en la matriz de un suelo. Principalmente, el agua es retenida en los poros por efecto capilar y por adsorcin. En la prctica, el potencial de la matriz es una medida de la succin necesaria para que un determinado volumen de suelo contenga una cierta cantidad de agua. La relacin entre el potencial de la matriz y la humedad del cuelo se representa grficamente mediante la curva caracterstica de la humedad de un suelo, la cual es nica para cada tipo de suelo. Segn los diferentes tipos de suelo, cuanto mayor sea el contenido de arcilla de un suelo, mayor ser su capacidad de retener agua y la variacin de la pendiente de la curva caracterstica suelo agua ser ms gradual (Eweis et al., 1999). En la bibliografa la presin de succin puede expresarse en bares (bar) y algunas veces en atmsferas (atm) o en megapascales (MPa), pero en el laboratorio, normalmente se expresa en centmetros de succin de agua. La altura de la columna de agua se traduce como medida de presin mediante la ecuacin

gh
(1.2) 14

donde P = presin, kg/m.s2 = densidad de agua, kg/m 3 g = constante gravitacional, 9,81m/s2 h = altura de la columna de agua, m

los tres tipos de agua anteriormente mencionados4, pueden ser eliminados de la matriz de un suelo si se aumenta la presin de succin, como se ve en la Tabla 1.3. se estima que la actividad microbiana ptima se obtiene para las humedades correspondientes a 0,5 bares de presin de succin (Paul y Clark, 1989). A presiones de succin menores el suelo tiene demasiada humedad y puede encharcarse, mientras que en presiones mayores el suelo est demasiado seco.

TABLA 1.3. Presin de succin necesaria para eliminar agua en el suelo.

Presin de succin necesaria para eliminar toda el agua

Tipo de agua

m 03 3 150 150 - 1500

Bares 0 0,3 0,3 15 15 - 150

Gravitacional Capilar Osmtica

1.6.

Sistemas de clasificacin de Suelos

Los suelos son clasificados de acuerdo con su estructura y composicin en rdenes, subrdenes, grandes grupos, subgrupos, familias y series. Se ha visto que las caractersticas del suelo varan enormemente de un lugar a otro; se han reconocido

Gravitacional, capilar y osmtica.

15

estas variaciones en los diferentes lugares y han establecido distintos sistemas de clasificacin.

Las diferencias que presentan los suelos se utilizan para clasificarlos en diez rdenes principales:

Aridisoles. Son los suelos de climas ridos ya sean fros o clidos, que no disponen durante largos perodos de agua suficiente para el crecimiento de cultivos o pasturas polifticas. La mayor parte del tiempo el agua presente es retenida a gran tensin, lo que la hace prcticamente inutilizable para las plantas o bien es agua salada. En general estos suelos se caracterizan por un horizonte superficial claro y pobre en materia orgnica (epipedn crico) por debajo del cual puede aparecer una gran variedad de caracteres morfolgicos de acuerdo a las condiciones y a los materiales a partir de los que se han desarrollado. Entisoles. En este Orden estn incluidos los suelos que no evidencian o tienen escaso desarrollo de horizontes pedogenticos. La mayora de ellos solamente tiene un horizonte superficial claro, de poco espesor y generalmente pobre en materia orgnica (epipedn crico). Inceptisoles. Son suelos de regiones subhmedas y hmedas que no han alcanzado a desarrollar caracteres diagnsticos de otros rdenes pero poseen evidencias de desarrollo mayores que las de los Entisoles. Debe interpretrselos como suelos inmaduros que tienen dbil expresin morfolgica de los suelos maduros. Muestran horizontes alterados que han sufrido prdida de bases, hierro y aluminio pero conservan considerables reservas de minerales meteorizables. Alfisoles. Son suelos que se desarrollan en climas que tienen perodos ridos; por lo tanto, el perfil se presenta seco en parte del ao. El Orden de los Alfisoles se caracteriza por presentar un horizonte subsuperficial de enriquecimiento secundario de arcillas desarrollado en condiciones de acidez o de alcalinidad sdica, y asociado con un horizonte superficial claro, generalmente pobre en materia orgnica o de poco espesor.

Oxisoles. Este orden de suelos son bien conocidos por su presencia en selvas tropicales hmedas, 15 a 25 norte y sur del ecuador terrestre. Los Oxisoles siempre tienen color rojo o amarillo, debido a la alta concentracin de hierro(III) y xidos e hidrxidos de aluminio. Adems contienen cuarzo y arcilla caolinita, ms pequeas cantidades de otros minerales de arcilla y de materia orgnica. Molisoles. Bsicamente son suelos negros o pardos que se han desarrollado a partir de sedimentos minerales en climas templado hmedo a semirido, aunque tambin se presentan en regmenes fros y clidos con una cobertura vegetal 16

integrada fundamentalmente por gramneas. Otras propiedades que caracterizan a los Molisoles son: la estructura granular o migajosa moderada y fuerte que facilita el movimiento del agua y aire; la dominancia del catin calcio en el complejo de intercambio catinico, que favorece la fluctuacin de los coloides. Los Molisoles son utilizados por el hombre, en un alto porcentaje, para la produccin de alimentos. Ultisoles. Se desarrollan en climas con supervit de precipitacin, pero con una estacin parcialmente seca. Lo anterior los hace ser lixiviados y pobres en bases. Fuerte desequilibrio entre la cantidad de bases liberadas por meteorizacin y las bases removidas por lixiviacin. La agricultura es imposible sin el uso de fertilizantes. Espodosoles. Son suelos desarrollados en climas hmedos y fros, en presencia de vegetacin de bosque. Existencia de un horizonte de eluviacin, espdico, en el cual se acumulan sustancias amorfas, tanto coloides orgnicos, como sesquixidos de aluminio. Vertisoles. Son suelos en donde hay un alto contenido de arcilla expansiva conocida como montmorillonita que forma profundas grietas en las estaciones secas, o en aos. Los Vertisoles se forman tpicamente de rocas altamente bsicas tales como basalto en climas estacionalmente hmedos o sujetos a sequas errticas y a inundacin. Dependiendo del material parental y del clima, pueden oscilar del gris o rojizo al ms familiar negro, adems son especialmente buenos para el cultivo del arroz debido a su impermeabilidad cuando se saturan. Histosoles. Este Orden comprende a los suelos orgnicos, que tienen su origen en la produccin de materia orgnica en forma ms rpida que su mineralizacin, lo que ocurre comnmente bajo condiciones de saturacin con agua casi continua que restringe la circulacin del oxgeno a travs del suelo. La lentitud resultante en la descomposicin de la materia orgnica permite su acumulacin. La mayora tiene una densidad aparente baja (> de 1 gr/cm3). Comnmente estn saturados con agua, tiene una capacidad de retencin de humedad extremadamente alta. Andisoles. El material original lo constituyen fundamentalmente cenizas volcnicas. son suelos de regiones con temperatura media anual superiores a 0. Se encuentran en reas onduladas o montaosas de las regiones hmedas. Tienen una textura fina, aunque su contenido arcilloso no pasa de 20 a 25%, pobre en arenas, estructura muy porosa y permeabilidad elevada.

17

TABLA 1.4. Clasificacin de suelos y su porcentaje en el mundo

Tipo de Suelo

% de superficie en el mundo 19.2 15.8 14.7 12.5 9.2 9.0 8.5 5.4 2.1 0.8 2.8 100

Aridisoles Inseptisoles Alfisoles Entisoles Oxisoles Molisoles Ultisoles Espodosoles Vertisoles Histosoles Suelos diversos Total

1.7.

Tipos de suelos colombianos

1.7.1. Regin de la Orinoqua. Su evolucin y desarrollo est ligados con el origen de la megacuenca sedimentaria localizada entre el escudo de la Guayana y el flanco este de la Cordillera Oriental. El clima dominante es tropical con temperaturas entre 26 - 28 C con estacionalidad marcada y de tipo monomodal. El clima define, en consecuencia, pocas lluviosas que influyen en la prdida de los pocos elementos solubles o intercambiables de los suelos, generando alta acidez. (rangos dominantes de pH inferiores a 5, pudiendo llegar, en profundidad, hasta 5.5) y pocas secas que favorecen tanto la polimerizacin de substancias hmicas como el endurecimiento de horizontes y la cementacin (materiales petrofrricos) a partir de la deshidratacin de compuestos de hierro.

18

En la fraccin arcillosa predominan caolinita, oxihidrxidos de Fe y Al, intergrados 2:1:1, con aluminio interlaminar, pirofilita y gibsita (IGAC, 2000b). Los suelos de la altillanura orinocense representan los de mayor grado evolutivo en el pas y estn dominados por la tipologa de los diferentes Oxisoles (Haplustox, 19.6% y Hapludox, 14.5%) y, en mucha menor proporcin, de los Ultisoles (Kandiudults, 1.7%, Hapludults, 0.9%, Endoaquults, 0.8% y Paleudults, 0.6%).

La Orinoquia inundable manifiesta grados avanzados de alteracin (cuarzo, caolinita, integrados, micas) relacionados con sus productos de depsito ms que con la gnesis de los suelos, pero tipos de suelos de mucha menor evolucin (Entisoles e Inceptisoles), con Ultisoles y algunos, muy pocos, Alfisoles en Arauca, como resultantes de procesos evolutivos especficos. El prototipo de mxima evolucin lo constituyen los Endoaquults (15.8%), con Haplaquox (3.4%) y muy escasos Endoaqualfs.

1.7.2. Regin Amaznica. La Regin Amaznica hace parte de la extensa megacuenca sedimentaria desarrollada entre el Escudo de la Guayana y el flanco este de la Cordillera Oriental. El clima dominante en la regin es clido hmedo-muy hmedo, sin estaciones secas marcadas y con precipitaciones promedio anuales. El promedio de la temperatura anual es de 25.7%, isotermal, pero con grandes variaciones diarias, la humedad relativa presenta valores entre 84 - 88%.

En la tipologa sobresalen los suelos de alta evolucin, representados por los Oxisoles (Hapludox, Haploperox y Haplaquox) en el 31% de la regin (IGAC, 2003) y por los Ultisoles (Kandiudults, Paleudults y Hapludults) en el 20%. Despus de la altillanura, en la Orinoqua colombiana, esta regin representa los suelos ms evolucionados del pas; se diferencia de la primera por el mayor componente de Ultisoles (relacin Oxisoles a Ultisoles: 1.6) y por una proporcin de 1.5 entre los suelos de mayor evolucin (Oxisoles - Ultisoles) a los de menor (Entisoles - Inceptisoles).

1.7.3. Regin del Pacfico. Esta regin conocida como Andn del Pacfico, comprende una franja alargada y estrecha, entre el flanco occidental de la Cordillera Occidental hasta la lnea de costa, desde la frontera con Ecuador, en el sur, hasta la frontera con Panam, en el norte. 19

El clima dominante se caracteriza por temperaturas altas e isotermales (promedio de 26.4oC en 11 estaciones seleccionadas, IGAC 2002). Las condiciones previas, aunadas a las altas humedades relativas (88.3%, promedio de 13 estaciones, IGAC, 2002). La vegetacin del Andn Pacfico es una de las ms diversas y complejas del pas en cuanto a estructura y nmero de especies, explicada por el medio donde se encuentra: muy altas precipitaciones y temperaturas, tipo y composicin de rocas, sedimentos y suelos. El humus del suelo en los paisajes de inters, est vinculado con el aporte de biomasa anotado, texturas finas, regmenes perdicos, dicos e isohipertrmicos, saturaciones de Al mayores del 60% en el 80% de los suelos y baja a muy baja saturacin de bases de intercambio (IGAC, 2002), asociados con alta acidez (pH en el rango 4.5 - 5.5).

La tipologa de los suelos en los paisajes bajo estudio, dado que en los dems (planicie y montaa) predominan suelos no sujetos a anlisis, excepto Andisoles (1% de Hapludands y estos ms que Melanudands) en montaa y algunos suelos evolucionados en las terrazas ms antiguas, est caracterizada por Ultisoles (Hapludults, 7%) y Oxisoles (Hapludox y Perox, 8%), en porcentajes que no alcanzan la tercera parte de los presentes en la regin amaznica. Su distribucin se concentra en la parte central de la regin, disminuyendo en sus extremos, especialmente hacia el Sur (Nario), (IGAC, 1999).

En la Regin del Pacfico los Inceptisoles y Entisoles constituyen los suelos ms frecuentes (73%) (Corts, 1982). Los primeros (49%) estn representados por los Dystrudepts (34%), Eutrudepts (10%) y por los Epi y Endoaquepts. Entre los Entisoles (24%) se destacan los Udorthents, Udifluvents y Fluviaquents, los cuales y en conjunto se acercan al 20%; en menor proporcin estn los Hidraquents (3%). Resalta el hecho de presentarse suelos relativamente saturados (Eutrudepts) en el 10% de la regin, a pesar de las extremas condiciones de precipitacin, vinculado a la litologa msica de los materiales que los forman.

Los suelos orgnicos (Histosoles), Sulfi y Haplohemists, constituyen el 3%, mientras que los Andisoles se concentran en montaa y los muy escasos Vertisoles (Hapluderts, 1%), slo en la zona menos hmeda del norte de la regin. 20

1.7.4. Regin del Caribe. La regin Caribe de Colombia est comprendida entre el Golfo de Urab, en el Sudoccidente hasta la Pennsula de la Guajira en el Nororiente. Geolgicamente incluye el bloque tectnico de la Sierra Nevada de Santa Marta, la Depresin Momposina y la parte baja de las cuencas y valles aluviales de los ros Magdalena, Sin y San Jorge. Las temperaturas promedio se aproximan a los 27.6oC, generando un rgimen isohipertrmico en el 91.4% de los suelos. La evapo-transpiracin potencial vara inversamente con la precipitacin. A pesar del bajo contenido de materia orgnica (65% de los suelos), el humus evoluciona en condiciones de alternancia estacional de precipitacin y temperaturas altas (los regmenes stico y ardico abarcan el 65%), pH superiores a 5.6 (73% de los suelos), adecuadas bases de intercambio, condiciones bajas de saturacin de Al (86.8% de los suelos con saturaciones inferiores al 30%) y predominancia de arcillas 2:1 (esmectitas, vermiculita y micas) en el 70 - 75% de los suelos, en especial en la parte central de la regin y en la Guajira. Lo anterior repercute en formas evolucionadas (polimerizadas) de humus que influyen notablemente en la dinmica, morfologa y propiedades de los suelos de inters (vgr. Molisoles y Vertisoles). Los suelos analizados en la presente tipologa incluyen los Alfisoles (Natrustalfs y Haplustalfs, 3%), Vertisoles (Haplusterts, 4%, Hapluderts, 1%), Molisoles (Haplustolls, 4%, Hapludolls, 1%), Aridisoles (Haplocalcids y Haplocambids, 4%). Los Oxisoles (Hapludox) slo estn presentes en aproximadamente el 1% de la Regin (zonas de sabanas de Ayapel y San Benito Abad, IGAC, 1983), igual porcentaje lo alcanzan los Ultisoles (Hapludults). Los suelos de menor evolucin (Entisoles e Inceptisoles) representan el 62% de ella. En los suelos de inters resaltan los procesos de lexiviacin (translocacin arcillosa con o sin concentracin de sodio) caracterstico de los Alfisoles, la haploidizacin en los Vertisoles sticos con arcillas expandibles, lustre y estructuras inclinadas (figura 13), la melanizacin y altos contenidos en bases, propia de los Mollisoles y el desarrollo de horizontes clcicos o cmbicos bajo rgimen ardico asociada a los Aridisoles.

1.7.5. Regin Andina. Comprende la cordillera central, La Cordillera Occidental se desprende desde el Nudo de los Pastos en direccin Sur-Norte, pasa por la Hoz de Minam en la cuenca del Pata y se prolonga hacia el norte hasta perderse en las planicies de la regin Caribe. La Cordillera Oriental se inicia en el Macizo Colombiano y se prolonga hacia el norte hasta la Serrana de Perij, est comprendida entre el Valle del Magdalena por el Occidente y los Llanos 21

Orientales por el Oriente. Su litologa est conformada en los Macizos de Garzn, Quetame y Bucaramanga. Las condiciones climticas de la regin andina son muy variadas y difciles de ser sintetizadas, caso opuesto a las dems regiones comentadas. Los efectos orogrficos, las vertientes, el relieve, etc., condicionan grandes cambios en espacios reducidos. Se destacan fundamentalmente las relacionadas con los Andisoles (suelos derivados de cenizas volcnicas con horizontes A (espesos y oscuros) y con horizontes B (con abundantes alfanas)) y su proceso especfico de formacin (Andolizacin: complejo de adsorcin dominado por Al-humus o por alfanashumus). En los horizontes A el Al es el principal catin de enlace, responsable de la insolubilizacin de los complejos rgano minerales o complejos sales. Los Andisoles colombianos en su mayora, corresponden a suelos bajo regmenes dicos, cricos, isomsicos o isotrmicos, de ciclo corto (Holoceno). En ellos son comunes los horizontes enterrados como consecuencia de la actividad volcnica (Cordillera Central). Los Andisoles a que se ha hecho referencia constituyen los suelos ms representativos desde el punto de vista de la tipologa, ya que integran el 16% (Hapludands, 11% y Melanudands, 5%). Los dems, Mollisoles y Alfisoles, slo abarcan el 3% de la regin. Los suelos de menor evolucin ( Inceptisoles y Entisoles) conforman el 67%, destacndose los Dystrudepts (55%), (IGAC, 2003). En estos suelos los procesos de prdida por erosin y lixiviacin, se compensan parcialmente por los de ganancia de materiales orgnicos por efecto del clima (la mayora presenta contenidos medianos y altos de C. O.: 1.5 a 6% o mayores), ello conlleva la aparicin de horizontes A (mbricos) sobre, generalmente, horizontes B (Cmbicos). En medios desaturados, predominan suelos extremada y fuertemente cidos y bajos en P. Como referencia comparativa con las dems regiones naturales, los Oxisoles y Ultisoles slo integran el 0.34% del territorio regional.

22

2. EL PETRLEO

INTRODUCCIN

El petrleo es el producto de la degradacin anaerbica de materia orgnica, durante largos perodos de tiempo y bajo condiciones de alta presin y temperatura, que la convierte en gas natural, crudo y derivados del petrleo. El petrleo crudo es una mezcla extremadamente compleja y variable de compuestos orgnicos, donde la mayora de los ellos son hidrocarburos, que varan en peso molecular desde el gas metano hasta los altos pesos moleculares de alquitranes y bitmenes. Estos hidrocarburos pueden presentarse en un amplio rango de estructuras moleculares: cadenas lineales y ramificadas, anillos sencillos, condensados o aromticos. Los dos grupos principales de hidrocarburos aromticos son los monocclicos, el benceno, tolueno y xileno (BTEX) y los hidrocarburos policclicos (HAPs) tales como el naftaleno, antraceno y fenantreno.

La degradacin microbiana constituye el principal proceso de descontaminacin natural (Prince, 1993). Este proceso se puede acelerar y/o mejorar mediante la aplicacin de tecnologas de biorremediacin (Alexander, 1999). El crudo de petrleo se caracteriza por ser una matriz contaminante que contiene una elevada diversidad de compuestos, por lo que es un sustrato ideal para evaluar el potencial catablico de cepas o consorcios microbianos de inters en biorremediacin.

2.1.

COMPOSICIN DEL CRUDO DEL PETRLEO

2.1.1. Composicin general El crudo de petrleo se caracteriza por ser un lquido negro, viscoso y con una composicin qumica sumamente compleja, pudiendo contener un sin numero de compuestos, bsicamente de la familia de los hidrocarburos (Rosini, 1960). Los hidrocarburos hacen parte de la familia predominante de compuestos 5, por lo que constituyen uno de los grupos de contaminantes ambientales ms importantes, tanto por su abundancia, como por su persistencia en distintos compartimentos ambientales (Casellas et al., 1995).

Un 50 a 98% de la composicin.

23

En su mayora son alcanos de cadena lineal (n alcanos o n parafinas), alcanos ramificados (en menor cantidad), cicloalcanos (o naftenos) y cantidades variables de hidrocarburos aromticos. (Fernndez et al., 1992). La composicin elemental de un crudo est condicionada por la predominancia de los compuestos tipo hidrocarburo: 84 a 87% de carbono (C), 11 a 14% de hidrgeno (H), de 0 a 8% de azufre (S), y de 0 a 4% de oxgeno (O) y nitrgeno (N) y metales como el nquel y el vanadio (Clark y Brown 1977; Howe-Grant, 1996). Los principales componentes se subdividen y purifican en distintas fracciones:

Fraccin saturada. n-alcanos, alcanos ramificados con cadenas alqulicas, las cicloparafinas o cicloalcanos y los hopanos. Fraccin aromtica. Hidrocarburos monoaromticos, diaromticos y aromticos policclicos (HAP). Fraccin de resinas. Agregados de piridinas, quinolinas, carbazoles, tiofenos, sulfxidos y amidas. Fraccin de asfaltenos. Agregados de HAP, cidos naftnicos, sulfuros, cidos grasos, metaloporfirinas, fenoles polihidratados. Son menos abundantes y consisten en compuestos ms polares, pudindose encontrar hidrocarburos heterocclicos, hidrocarburos oxigenados y agregados de alto peso molecular (Speight, 1991).

2.1.2. Composicin por familias de hidrocarburos El estudio ms detallado de los hidrocarburos de un crudo de petrleo agrupa estos compuestos en las siguientes familias:

Parafinas voltiles. Representan hasta un 30% del crudo de petrleo. Son n alcanos e isoprenoides (alcanos ramificados) de un tamao C 1 a C10 6 .Es la fraccin ms voltil del crudo y por lo tanto la ms susceptible de prdidas abiticas por volatilizacin. La fraccin gas natural contiene, principalmente C 1 a C5. Los isoprenoides voltiles, estn representados principalmente por el isobutano e isopentano. Los isoprenoides voltiles tambin pueden llegar hasta C10 (2,6 dimetil octano) (Howe-Grant, 1996). Parafinas no voltiles. Se definen como aquellos n alcanos e isoprenoides entre C11 y C40. Los n alcanos oscilan entre C11 y C40, aunque se han descrito cadenas
6

De 1 a 10 tomos de carbono.

24

ms largas y pueden constituir entre el 15 y 20% de crudos no degradados; mientras que los isoprenoides varan de C 12 a C22 y constituyen entre 1-2% del crudo, llegando a 15% en crudos degradados. Los componentes entre C 11 y C15 son de volatilidad intermedia. Naftenos. Esta familia est compuesta por las cicloparafinas o cicloalcanos. Los compuestos ms abundantes de esta familia son los ciclopentanos alquilados (fundamentalmente metilados), que pueden llegar a representar un 31% del crudo. Los compuestos mono y dicclicos corresponden entre el 50 y 55% de esta fraccin, los tricclicos al 20% y los tetracclicos al 25%. Esta familia engloba a los hopanos.

Oleofinas. Son alquenos, los cuales estn poco presentes en el crudo de petrleo, encontrndose en concentraciones traza. Adquieren importancia en los productos resultantes del refinado, ya que se generan durante el proceso de cracking, existiendo hasta un 30% en gasolinas y un 1% en fueles. Aromticos. El crudo de petrleo contiene una mezcla muy compleja de hidrocarburos aromticos. Esta fraccin la componen molculas que contienen uno o varios anillos bencnicos en su estructura. As se encuentran hidrocarburos monoaromticos (un anillo bencnico), diaromticos (2 anillos bencnicos) y poliaromticos (HAPs, con ms de dos anillos bencnicos).

25

FIGURA 2.1. Estructuras qumicas de diferentes compuestos mayoritarios del petrleo.

26

 Hidrocarburos monoaromticos. Se encuentran el benceno y sus alquilados (monoalquilados como el tolueno y dialquilados como los xilenos), formando la familia de los BTEX (benceno, tolueno, etilbenceno y xileno) de gran importancia ambiental debido a su volatilidad y toxicidad. Hidrocarburos poliaromticos. Entre los hidrocarburos diaromticos, encontramos el naftaleno y sus alquilados (mono, di, tri y tetrametilnaftalenos). Constituyen la familia mayoritaria de hidrocarburos aromticos presentes en un crudo. Entre los hidrocarburos poliaromticos de tres anillos, encontramos el fenantreno, antraceno, fluoreno, y sus derivados alquilados. El fenantreno y los metilfenantrenos, representan los componentes mayoritarios de los triaromticos. Entre los hidrocarburos poliaromticos de ms de tres anillos, encontramos el fluoranteno (3 anillos bencnicos y uno no bencenico), pireno y criseno (4 anillos aromticos), pireno y benzo(a)pireno (5 anillos aromticos) y coroneno (un HAP pericondensado con 6 anillos). Resinas y asfaltenos. Se trata de mezclas complejas, integradas por ncleos policclicos o naftenoaromticos. Contienen cadenas hidrocarbonadas con heterotomos de oxgeno, nitrgeno y azufre (componentes NOS del petrleo) y a veces estn asociadas con pequeas concentraciones de metales como el vanadio y el nquel. Constituyen entre un 10% en crudos poco degradados o ligeros, hasta un 60% en crudos muy degradados. Es la fraccin que presenta una mayor recalcitrancia de un crudo de petrleo. Se trata de agregados de piridinas, quinolinas, carbazoles, tiofenos, sulfxidos, amidas, HAP, sulfuros, cidos naftnicos, cidos grasos, metaloporfirinas y fenoles polihidratados. (Howe-Grant, 1996).

2.1.3. Composicin del crudo segn el origen

La composicin de un crudo vara segn su localizacin (Mller, 1987). Habitualmente, todos los crudos de petrleo (no degradados) contienen alcanos (de cadena lineal y ramificada, de C1 a C40 aproximadamente, cicloalcanos o naftenos e hidrocarburos aromticos. Las fracciones de punto de ebullicin menor, estn formadas por alcanos en todos los casos, mientras que la composicin de las fracciones superiores vara segn la fuente del petrleo. Se denomina crudo parafnico o ligero cuando el crudo contiene una elevada proporcin de parafinas (n alcanos y alcanos ramificados), y asfltico o pesado si predominan naftenos (cicloalcanos), alcanos de cadena larga (C30 a C45) y HAPs (Howe- Grant, 1996). Segn el origen, se tienen crudos parafnicos o asflticos (Tabla 1.3) 27

TABLA 2.1. Tipo de crudo segn el pozo de origen.

Pozo de origen Pennsylvania Iran Irak Rumania Mjico Baku Venezuela Texas Oklahoma

Tipo de crudo Parafnico Parafnico Parafnico Parafnico Parafnico Asfltico Asfltico Intermedio Intermedio

2.2.

CLASIFICACIN DEL CRUDO SEGN GRAVEDAD API

La gravedad API es una unidad implementada por el American Petroleum Institute en 1921. Bsicamente creada para clasificar lquidos menos densos que el agua en una escala relacionada con la gravedad especifica de dicho fluido. La Gravedad API se calcula as:

API

141.5 131.5 GravedadEspecificadelFluido

(2.1)

Como se ve en la ecuacin 2.1, los petrleos con menores gravedades especficas (ms livianos), tendrn mayores valores API. En lneas generales los petrleos con gravedades API entre 40 y 45 tienen ms altos precios en el mercado. El petrleo se clasifica como liviano, mediano o pesado de acuerdo a su gravedad API: Petrleo liviano. Es el que tiene una gravedad API mayor que 31.1 API. 28

Petrleo mediano. Esta definido por una gravedad API entre 22.3 API y 31.1 API.

Crudos pesados. Se caracterizan por tener gravedades API por debajo de 22.3 API. Crudos extrapesados o bitumen. Se caracterizan por tener gravedades API menores de 10 API. Estas clasificaciones pueden variar por regiones, especialmente en el caso de crudos pesados y extrapesados (bitumen). El bitumen se hunde en el agua mientras que el petrleo flota.

En Colombia se han encontrado petrleos con un amplio rango de grados API, desde los livianos de Cusiana hasta los ms pesados del Magdalena Medio o de los Llanos. En su gran mayora el crudo colombiano es pesado, llamado Crudo Castilla que luego de ser mezclado con otros crudos pesados se vende en el mercado como Crudo Castilla Blend con una Gravedad API de 18.8 API aproximadamente.

Los crudos livianos han empezado a escasear y el mundo ha tenido que comenzar a mirar los crudos ms pesados, o de menor grado API, como alternativa de negocio; incluso las refineras han tenido que hacer reconversiones para cargar un mayor volumen de pesados. Los petrleos tambin se clasifican entre dulces y agrios. Los primeros son aquellos que contienen menos de 0,5% de azufre; los segundos los que tienen ms de 1,0% de azufre. Al refinarlos, los petrleos livianos y dulces producen ms gasolina y causan menos contaminacin. Por eso son tan apetecidos (ECOPETROL S.A, 2009).

2.3.

EL PETRLEO EN COLOMBIA

2.3.1. Resea histrica Los primeros registros histricos de la existencia de petrleo en Colombia se remontan a la conquista espaola, cuando las tropas de Gonzalo Jimnez de Quesada llegaron 29

por el ro Magdalena a La Tora, un casero de los yarigues situado en lo que hoy es Barrancabermeja.

En los alrededores encontraron lugares donde manaba un lquido negro y aceitoso que los yarigues utilizaban como reconfortante corporal, entre otros usos. Los espaoles lo usaron a su vez para impermeabilizar las embarcaciones. Siglos despus ese aceite vendra a ser la base de lo que hoy es la industria colombiana del petrleo.

Desde los albores del siglo XX, cuando se inici la explotacin del petrleo en Colombia, la poltica que ha regido a esta industria ha tenido diversos y profundos cambios por parte de los distintos gobiernos, en sus esfuerzos por mantener una produccin de petrleo que abastezca el consumo nacional y de paso exporte los excedentes que le generen recursos adicionales a la nacin.

En la bsqueda y extraccin de hidrocarburos Colombia ha pasado de un sistema de concesin a un contrato de asociacin con variables como el Factor R. Hoy, cien aos despus de los primeros hallazgos comerciales de crudo, cuenta con un modelo de contrato de exploracin y produccin muy competitivo internacionalmente.

As mismo, la administracin de esos recursos no renovables pas de una empresa industrial y comercial del Estado (la Empresa Colombiana de Petrleos, Ecopetrol), que durante 52 aos se encarg de gestionar el mapa de tierras y las reservas de hidrocarburos en el pas, a la Agencia Nacional de Hidrocarburos (ANH), unidad especial del Ministerio de Minas y Energa (ECOPETROL S.A, 2009).

2.3.2. Potencial petrolfero El potencial petrolfero (crudo y gas natural) de Colombia se estima en ms de 47 mil millones de barriles de petrleo equivalente, distribuidos en 18 cuencas sedimentarias que abarcan un rea de 1.036.400 km 2.

Alrededor de 82% de esa rea sedimentaria se encuentra disponible para adelantar trabajos de exploracin y explotacin de petrleo y gas natural.

Las cuencas de mayor actividad exploratoria son las de los valles Superior y Medio del Magdalena, Catatumbo, La Guajira, cordillera Oriental, Putumayo y Llanos Orientales.

Los ms importantes descubrimientos hechos en Colombia son los de La CiraInfantas, en Barrancabermeja; Chuchupa, en La Guajira; Cao Limn, en Arauca; y Cusiana-Cupiagua, en Casanare. 30

Los centros de produccin petrolera se encuentran en los departamentos del Meta, Casanare, Arauca, Santander, Antioquia, Bolvar, Boyac, Huila, Tolima, La Guajira, Putumayo y Norte de Santander (ECOPETROL S.A, 2009).

2.3.3. Refinacin Colombia tiene una capacidad de refinacin promedio de 315 mil barriles por da. En las dos principales refineras del pas (en Barrancabermeja y Cartagena) se procesan los crudos y se obtienen los combustibles con los cuales se atiende la mayora de la demanda nacional. Tambin se atiende cerca del 75% de la demanda de productos petroqumicos e industriales con produccin del Complejo Industrial de Barrancabermeja.

Actualmente, tanto el Complejo como la Refinera de Cartagena son objeto de programas de optimizacin para incrementar su capacidad y mejorar la calidad de los combustibles para que stos se ajusten a las nuevas exigencias ambientales (ECOPETROL S.A, 2009).

2.3.4. Transporte Actualmente se cuenta para el transporte de hidrocarburos con una red de tubera de 4.184 km de oleoductos para transporte de petrleo y 3.952 km de poliductos para transporte de productos refinados. El total de estaciones de bombeo y terminales es de 67, distribuidas en 37 para oleoductos y 30 para poliductos (ver Anexo A).

Para atender las exportaciones o importaciones de petrleo y refinados se tienen tres puertos de embarque por el mar Caribe, que son Coveas, Cartagena y Pozos Colorados (Santa Marta), y dos puertos por el Ocano Pacfico en Tumaco y Buenaventura (ECOPETROL S.A, 2009).

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3. LOS HIDROCARBUROS Y LA CONTAMINACION

INTRODUCCION

Desde el inicio de la actividad petrolera, el entorno en le que se desarrolla, se ve afectado por numerosas intervenciones que daan severamente el medio ambiente. Las huellas mas evidentes que se encuentran en todo el planeta donde se ha dado extraccin de petrleo, frecuentemente han sido ocasionadas por accidentes en tanques de almacenamiento o en oleoductos. Sin embargo los accidentes que son los acontecimientos mas notorios no son las nicas fuentes de contaminacin o degradacin del medio, ni siquiera las mas importantes. Todas las actividades que estn envueltas en la exploracin y explotacin del petrleo provocan impactos potencialmente negativos sobre el medio ambiente y sobre las personas que lo usan o que estn en contacto con l. Gran parte de los ecosistemas afectados por la exploracin y explotacin de hidrocarburos cuentan con formas de vida muy diversas y complejas. A pesar de este hecho, la expansin petrolera muy a menudo se enfoca en dichos ecosistemas.

3.1 FORMAS DE CONTAMINACION POR LA OPERACIN PETROLERA

La operacin ssmica. Es una de las mas utilizadas en la etapa de exploracin, y consiste en la medicin de las ondas de resonancia que produce la detonacin de cargas de dinamita. Esto significa que la zona explorada queda completamente llena de agujeros dinamitados. Al encontrarse el lugar donde probablemente se puede dar la explotacin del mineral, se procede a abrir los pozos exploratorios. La fase exploracin. Durante este proceso son utilizados lodos qumicos, los cuales son altamente contaminantes, para la mayor penetracin en el terreno de los taladros que deben ser enfriados constantemente con agua. Tambin se construyen piscinas para depositar las aguas acidas y los lodos contaminados que salen junto con el petrleo. Esta fase altera el equilibrio natural, ya que requiere de grandes cantidades de agua del lugar y aumenta los niveles de contaminacin. Tambin en las perforaciones se producen lodos con metales pesados y txicos como cadmio, cobre, arsnico, mercurio y plomo. La fase de extraccin. Comienza cuando alguno de los pozos exploratorios toca un yacimineto. En tierra o en mar las operaciones a realizarse en esta etapa alteran el ambiente natural y lo contaminan. Esta etapa presente riesgos adicionales de accidentes, relacionados con gases txicos, aguas acidas y los depsitos de crudo.

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El transporte. Se da despus de la extraccin del crudo. El transporte del crudo es una de las etapas mas riesgosas y costosas en trminos de destruccin ambiental. Desde que se transporta el crudo masivamente, son millones de barriles que se han derramado en zonas selvticas, ros, lagos y mares. Las consecuencias de tales derrames continan afectando estos ecosistemas muchos aos despus. Dentro de las etapas de exploracin y explotacin tambin se da una compactacin de los suelos por la maquinaria pesada donde por la prdida de vegetacin, se produce una erosin y contaminacin de los suelos de la zona. Los microorganismos del suelo son alterados por la contaminacin con hidrocarburos, desapareciendo o disminuyendo las especies menos resistentes sin dejar atrs las altas tasas de mutaciones. Las alteraciones al suelo producen cambios en el pH de este y del agua, que pueden causar un deterioro crnico de los ecosistemas. Por lo tanto un manejo inadecuado de dicha fuente energtica puede causar problemas de gran envergadura socio-ambiental.

3.2 CAUSAS DE DERRAMES POR LA ACTIVIDAD PETROLERA

Los derrames de petrleos constituyen uno de los aspectos mas vergonzoso tanto para las naciones como en general para la especie humana, pues debido a sus manifestaciones tanto a corto como a largo plazo, se ponen de presente la inevitable necesidad de llevar con continuidad una poltica de desarrollo sostenible que eviten que este tipo de desastres se vuelvan una pesadilla futura. En Colombia se ha vivido con frecuencia este tipo de situaciones, debido por o general a actos violentos a los que se encuentra sometidos tanto la industria petrolera, como la poblacin cercana a la infraestructura dedicada a esta actividad. Dentro de las doctrinas que tratan este tema se define vertimiento al derrame accidental; es decir, no provocado, no deseado, sbito, imprevisible e irresistible, no contable que afecta un recurso natural no renovable. 7 En estos eventos la contaminacin puede tener una fuente o varias causas que participan de una forma determinante al desastre contaminador o complicar el problema por los elementos o desechos que de forma independiente no tienen carcter contaminador, pero que por combinacin o adicin con las fuentes procedentes de la misma u otras, llegan a contaminar. Las causas mas frecuentes de contaminacin en la industria petrolera por transporte por medio de tubera u oleoducto, son: Falla operacional. Se da por un desajuste o asincronismo en la actividad normal de la operacin de un oleoducto, un poliducto o estacin, ya sea en la manipulacin de los
7

Domingo Gmez. Articulo Responsabilidad por dao ambiental en la actividad petrolera de Colombia en Responsabilidad por daos ambientales. Universidad Externado de Colombia. 2001.P.123

33

instrumentos o en la parte operativa por parte de los operadores, que ocasiona una sobrepresin de la lnea de transporte. Fatiga de Materiales. Ocasionado por el inadecuado mantenimiento de las instalaciones, llmese tubo, pozo o mltiple abastecimiento, provocando un pittinges, un agujero por el cual se genera una fuga del lquido. Cuando un derrame es provocado por la accin dolosa de un tercero, en dicho caso es habitual que el origen del mismo se pueda dar por: Hurto. Cuando los terceros que acometen el hecho punible no tienen por motivo nada distinto que obtener un lucro con el crudo que extraen de la tubera. Acto terrorista. Es aquel que se atribuye por lo general a grupos u organizaciones armadas que enarbolando un carcter poltico acometen el dao con le inters de desestabilizar.

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4. BIORREMEDIACIN

INTRODUCCIN

La biorremediacin es una tecnologa que utiliza el potencial metablico de los microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero tambin hongos y levaduras) para transformar contaminantes orgnicos en compuestos ms simples poco o nada contaminantes, y, por tanto, se puede utilizar para limpiar terrenos o aguas contaminadas (Glazer y Nikaido, 1995). Su mbito de aplicabilidad es muy amplio, pudiendo considerarse como objeto cada uno de los estados de la materia (Atlas y Unterman, 1999): Slido. Con aplicaciones sobre medios contaminados como suelos o sedimentos, o bien directamente en lodos, residuos, etc. Lquido. Aguas superficiales y subterrneas, aguas residuales. Gases. Emisiones industriales, as como productos derivados del tratamiento de aguas o suelos. Tambin se puede realizar una clasificacin en funcin de los contaminantes con los que se puede trabajar (Alexander, 1999; Eweis et al., 1999): Hidrocarburos de todo tipo (alifticos, aromticos, BTEX, PAHs,...). Hidrocarburos clorados (PCBs, TCE, PCE, pesticidas, herbicidas,...). Compuestos nitroaromticos (TNT y otros). Metales pesados. Estos no se metabolizan por los microorganismos de manera apreciable, pero pueden ser inmovilizados o precipitados. Otros contaminantes. Compuestos organofosforados, cianuros, fenoles, etc. Los microorganismos transforman y metabolizan aerbicamente los hidrocarburos y otros compuestos orgnicos hasta dixido de carbono, agua y fuentes de alimento para sustentar su crecimiento y reproduccin, es decir, la biodegradacin ocurre naturalmente. Es conocido que los microorganismos indgenas tienen la capacidad de adaptarse y eventualmente degradar cualquier compuesto orgnico natural sin asistencia del hombre; sin embargo, esta adaptacin requiere la presencia de condiciones ambientales apropiadas tales como el pH, temperatura, el aceptor final de electrones (que en procesos aerbicos es el oxgeno), concentraciones de contaminante no txicas para los microorganismos y adecuadas condiciones de humedad y conductividad del medio, entre las mas importantes. La ausencia de alguna o varias de las anteriores condiciones puede limitar parcial o totalmente la actividad 35

biolgica y es cuando la mano del hombre juega un papel fundamental en la optimizacin del proceso, ya sea mejorando estas condiciones para aumentar la poblacin de microorganismos (bioaumentacin) y/o manipulando genticamente los microorganismos para la degradacin especfica de algunos compuestos qumicos.

4.1. ANTECEDENTES HISTRICOS DE LA BIORREMEDIACIN A mediados del siglo XX se desarrollaron las primeras investigaciones encaminadas a estudiar el potencial de los microorganismos para biodegradar contaminantes (Zobell, 1946; Davis, 1956). Este uso intencionado recibi entonces el nombre de biorremediacin ("bioremediation"). Las primeras tcnicas que se aplicaron fueron similares al "landfarming" (labranza) actual y sus actores, lgicamente, compaas petrolferas. Las primeras patentes, fundamentalmente para remediacin de vertidos de gasolina, aparecen en los aos 70. En los aos 80 se generaliz el uso del aire y perxidos para suministrar oxgeno a las zonas contaminadas mejorando la eficiencia de los procesos degradativos. Durante los aos 90 el desarrollo de las tcnicas de " air sparging" (burbujeo de oxgeno) hizo posible la biorremediacin en zonas por debajo del nivel fretico. Al mismo tiempo, la implementacin en la prctica de aproximaciones experimentales en el laboratorio permiti el tratamiento de hidrocarburos clorados, los primeros intentos con metales pesados, el trabajo en ambientes anaerobios, etc. Paralelamente, se desarrollaron mtodos de ingeniera que mejoraron los rendimientos de las tcnicas ms populares para suelos contaminados ("landfarming", "composting", etc.) (Riser-Roberts, 1998). En la actualidad, la biorremediacin enfrenta un nuevo reto: el de convencer a las compaas y a los organismos oficiales de su alto potencial. En algunos pases, la biorremediacin fue una tcnica poco reconocida y marginada, hoy en da se ha convertido en una verdadera industria. Esta industria busca seguir mejorando en sus lneas interdisciplinares, que se pueden resumir en los siguientes puntos: Integracin en el proceso de tcnicas innovadoras que ayuden a comprender y controlar los fenmenos de transporte de nutrientes y otros posibles aditivos. Desarrollo de tcnicas rpidas de biologa molecular que permitan caracterizar las poblaciones indgenas de los emplazamientos contaminados as como su potencial enzimtico (Theron y Cloete, 2000; Watanabe , 2001). Exploracin de las implicaciones del concepto de biodisponibilidad ("bioavailability") definido por las propiedades fsico-qumicas de los contaminantes. Se trata de un factor que en muchos casos est limitando la biodegradacin y en otros reduciendo la toxicidad de los contaminantes. Desarrollo definitivo de tcnicas de bioaumentacin realmente tiles (Major et al., 2002).

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4.2. FUNDAMENTACIN BIOQUMICA DE LA BIODEGRADACIN

El fundamento bioqumico de la biorremediacin se basa, principalmente, en la serie de reacciones de xido-reduccin (cuyo fin es la obtencin de energa) que se producen en la cadena respiratoria, o transportadora de electrones de las clulas. La cadena la inicia un sustrato orgnico (compuestos hidrocarburados) que es externo a la clula y que acta como dador de electrones, de modo que la actividad metablica de la clula acaba degradando y consumiendo dicha sustancia (Maroto Arroyo, articulo internet). Los aceptores ms comnmente utilizados por los microorganismos son el oxgeno, los nitratos, el hierro (III), los sulfatos y el dixido de carbono. Cuando el oxgeno es utilizado como aceptor de electrones la respiracin microbiana se produce en condiciones aerobias, y los procesos de biodegradacin sern de tipo aerobio; sin embargo, si utiliza los sulfatos o el dixido de carbono se produce en condiciones reductoras o anaerobias, y los procesos de biodegradacin sern de tipo anaerobio (Figura. 3.1)

FIGURA 4.1. Esquema de las reacciones

4.3. FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIORREMEDIACIN DE UN SUELO

La biodegradabilidad de una mezcla de hidrocarburos presente en un suelo contaminado depende de diversos factores, los cuales como pueden clasificarse en cuatro grupos: Medio ambientales. Fsicos. Qumicos.

Microbiolgicos.

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4.3.1. Factores medio ambientales Los factores medio ambientales son aquellos necesarios a la hora de proporcionar las condiciones ptimas para el crecimiento de los microorganismos que llevan a cabo la recuperacin. Los microorganismos son muy sensibles a los cambios de temperatura, pH, disponibilidad de nutrientes, oxgeno y humedad. El pH. Afecta significativamente la actividad microbiana. En consecuencia, cuanto mayor sea la diversidad de microorganismos existentes, potencialmente mayor ser el rango de tolerancia. No existen unas condiciones preestablecidas que sean ptimas en todos los casos, pero en trminos generales el crecimiento de la mayor parte de los microorganismos es mximo dentro de un intervalo de pH situado entre 6 y 8. En general, el pH ptimo para las bacterias hetertrofas es neutro (pH 6 - 8), mientras que es ms cido para los hongos (pH 4 - 5). El pH ptimo establecido para procesos de biodegradacin es neutro (pH 7,4 - 7,8) (Dibble y Bartha, 1979). As mismo el pH tambin afecta directamente en la solubilidad del fsforo y en el transporte de metales pesados en el suelo. La acidificacin o la reduccin del pH en el suelo se puede realizar adicionando azufre o compuestos del azufre. Temperatura. Es uno de los factores ambientales ms importantes que afecta la actividad metablica de los microorganismos y la tasa de biodegradacin. Generalmente, las especies bacterianas crecen a intervalos de temperatura bastante reducidos, entre 20 y 30 C (condiciones mesfilas), decreciendo la biodegradacin por desnaturalizacin de las enzimas a temperaturas superiores a 40 C e inhibindose a inferiores a 0 C. Sin embargo, tambin se ha dado la biodegradacin de hidrocarburos a temperaturas extremas: 10C en suelos subrticos y subalpinos (Sparrow y Sparrow, 1988; Margesin y Schinner, 1997a,b). 5C en suelos rticos (Whyte et al., 1999) 60C por una cepa termfila de Bacillus stearothermophilus aislada de un suelo contaminado con crudo de petrleo del desierto kuwait (Sorkoh et al., 1993). Humedad. Los microorganismos requieren unas condiciones mnimas de humedad para su crecimiento. El agua forma parte del protoplasma bacteriano y sirve como medio de transporte a travs del cual los compuestos orgnicos y nutrientes son movilizados hasta el interior de las clulas. Un exceso de humedad inhibir el crecimiento bacteriano al reducir la concentracin de oxgeno en el suelo (el rango vara en funcin de la tcnica). Por lo anterior, la humedad del suelo puede limitar de forma severa la biodegradacin, fundamentalmente en suelos superficiales afectados por oscilaciones importantes en el contenido de agua. No obstante el nivel ptimo de humedad depende de las propiedades de cada suelo, el tipo de contaminacin y si la biodegradacin es aerbica o anaerbica. 38

El oxgeno. Es el aceptor final de electrones generalmente empleado en procesos biolgicos y tambin es necesario en determinados tipos de reacciones de oxidacin reduccin catalizada por enzimas. Los microorganismos, oxidan compuestos orgnicos o inorgnicos, obteniendo as la energa necesaria para su crecimiento. El proceso de oxidacin da lugar a electrones que intervienen una cadena de reacciones en el interior de la clula y, al final, deben ser vertidos en el entorno. El aceptor final de electrones es el receptor de los mismos y, en el caso de un metabolismo aerobio, O2 es el aceptor y H2O es el producto. La mayor parte de hidrocarburos presentes en los productos petrolferos son degradados con mayor extensin y rapidez de forma aerbica (O 2 como aceptor final de electrones), ya que en ausencia de O 2, y en presencia de aceptores de electrones alternativos (NO 3-, SO42-, CO2, Mn4+ y Fe3+) los hidrocarburos pueden ser degradados, pero con unas tasas de biodegradacin muy inferiores a las aerbicas (Holliger y Zehnder, 1996; Grishchenkov et al., 2000; Boopathy, 2002; Massias et al., 2003). Necesidad de nutrientes inorgnicos. El metabolismo microbiano est orientado a la reproduccin de los organismos y stos requieren que los constituyentes qumicos se encuentren disponibles para su asimilacin y sintetizacin. Los nutrientes principalmente requeridos son el fsforo y el nitrgeno, por tanto, las concentraciones asimilables de dichos elementos presentes en el suelo, suelen ser limitantes para un incremento y activacin de la poblacin microbiana, mientras que otros nutrientes esenciales como el Ca 2+, Na+, Fe2+ y SO42- ya estn presentes en cantidades suficientes (Menn et al., 2000). La adicin de fuentes de N y P inorgnicas, generalmente tiene un efecto positivo incrementando las poblaciones microbianas y las tasas de biodegradacin de hidrocarburos en suelos contaminados (Dott et al., 1995; Breedveld y Sparrevik, 2001; Chaineau et al.,2003). Las proporciones molares de C:N:P, descritas en la bibliografa, respecto al contenido de carbono a degradar son muy distintas; el rango normal de C:N:P depende del sistema de tratamiento a emplear, siendo de modo habitual 100:10:1. Aunque en general la adicin de fuentes inorgnicas de N y P al suelo es beneficiosa para los procesos de biodegradacin, de igual manera, el uso excesivo de nutrientes inorgnicos tambin puede inhibir los procesos de biodegradacin (Zhou y Crawford, 1995; Margesin y Schinner, 1997; Genouw et al., 1994). Para evitar el exceso de nutrientes, as como la prdida de los mismos por lixiviacin, tambin se han utilizado fertilizantes inorgnicos oleoflicos de liberacin lenta (Inipol EPA 22) para la biorremediacin de suelos contaminados (Lindstrom et al., 1991; Pritchard y Costa, 1991) Adems es importante destacar que la accin de los nutrientes inorgnicos puede estar limitada debido a la interaccin qumica con los minerales del suelo. (el amonio se puede unir a las arcillas por intercambio catinico y el fosfato puede unirse y precipitar con iones calcio, hierro y aluminio) (Morgan y Watkinson ,1992).

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4.3.2. Factores fsicos Los factores fsicos de mayor importancia en la biorremediacin son la biodisponibilidad, la presencia de agua y la provisin de un aceptor de electrones adecuado, por ejemplo, el oxgeno (descrito en este captulo, en el numeral 4.3.1.). Biodisponibilidad. La tasa de degradacin depende tanto de la capacidad de transporte y del metabolismo microbiano, como de la transferencia de masas del compuesto. La relacin entre estos factores se conoce como biodisponibilidad. En los suelos uno de los factores limitantes para la biodegradacin es la transferencia de masas, ya que los microorganismos de los suelos contaminados, suelen tener amplias capacidades biodegradativas al estar expuestos a una gran variedad de compuestos orgnicos diferentes. Por lo tanto la adsorcin, la absorcin, desadsorcin, disolucin y la difusin son fenmenos, propios de la transferencia de masas, que condicionan la biodisponibilidad de los contaminantes (Stucki y Alexander, 1987; Tabak et al., 1994 y 1995; Harms et al., 1996; Bosma et al., 1997). Un fenmeno que afecta de forma negativa a la biodisponibilidad de los contaminantes es el envejecimiento o ageing que se define como la prdida de la biodegradabilidad de los compuestos a lo largo del tiempo en el suelo (aunque la poblacin microbiana mantenga intacto su potencial catablico), el cual es ms importante en suelos con elevado contenido en materia orgnica (Huesemann, 1995; Nocentini, 2000; Breedveld y Sparrevik, 2001). Este efecto se produce por una serie de fenmenos como son: la adsorcin con la materia particulada del suelo, absorcin a la materia orgnica del suelo, a la baja difusividad de los compuestos, principalmente desde los microporos; a la disolucin en fases lquidas no acuosas (FLNAs), o a la formacin de uniones covalentes con la materia orgnica e inorgnica del suelo ( Loosdrecht et al., 1990; Weissenfels et al., 1992; Erickson et al., 1993; Alexander, 1995; Shuttleworth y Cerniglia, 1995; Alexander, 1999; Bosma et al., 1997). Con la finalidad de aumentar la biodisponibilidad de los contaminantes existen numerosos ejemplos en la bibliografa de la utilizacin de tensoactivos sintticos y biotensoactivos en la biorremediacin de suelos contaminados por hidrocarburos (Volkering y Breure, 1998 ; Chritofi y Ivshina, 2002). Presencia de agua. sta es necesaria ya que, como se ha visto con anterioridad, los microorganismos toman en carbono orgnico, los nutrientes inorgnicos y los aceptores de electrones, necesarios para el crecimiento microbiano, de la fase lquida. Por lo tanto, el agua debe estar en contacto con los contaminantes estar presente en cantidades que permitan el desarrollo de las comunidades microbianas. Sin embargo, el agua puede llegar a inhibir el flujo de aire y reducir el sumito de oxgeno necesario para la respiracin microbiana. Existen valores de humedad ptima para biorremediacin de terrenos no saturados, que habitualmente estn entre 150 y 250 grados de agua por kg de terreno seco.

4.3.3. Factores qumicos

El factor qumico ms importante en la biorremediacin es la estructura molecular del contaminante, cmo sta afecta a sus propiedades qumicas y fsicas y su capacidad para ser biodegradado. La capacidad para ser biodegradado est relacionada con 40

factores tales como la solubilidad, el grado de ramificacin, el grado de saturacin y la naturaleza y el efecto de los sustituyentes. Estructura qumica. La inherente biodegradabilidad de un hidrocarburo depende, en gran medida, de su estructura molecular. Siendo los parmetros que ms van a afectar la halogenacin, la existencia de ramificaciones, la baja solubilidad en el agua y la diferente carga atmica. De las distintas familias de hidrocarburos del petrleo, los n-alcanos y los alcanos ramificados (isoprenoides) de cadena intermedia (C 10-C20) son los sustratos ms fcilmente degradables por los microorganismos del suelo, y que por lo tanto tienden a ser eficazmente biodegradados. Sin embargo, los alcanos de cadena larga (>C20) son ms difciles de degradar debido a su (elevado peso molecular) y su baja solubilidad en agua (Chaineau et al., 1995). Los cicloalcanos, por norma general, se degradan ms lentamente que los nalcanos y alcanos ramificados. De igual forma, los HAPs que contienen de 2 a 3 anillos aromticos pueden ser biodegradados eficazmente en el suelo en condiciones ambientales ptimas, mientras que los HAP de 4 anillos, y especialmente, los de 5 o ms anillos bencnicos presentan una mayor recalcitrancia inherente y una baja solubilidad (Kstner, 2000). Las fracciones de resinas y asfaltenos son las que presentan una menor degradabilidad debido a las complejas estructuras qumicas y al elevado peso molecular de sus molculas (Harayama et al., 1997, 1999).

4.3.4. Factores microbiolgicos

El factor microbiolgico ms importante en la biorremediacin es la transformacin biolgica de compuestos orgnicos, catalizada por accin de las enzimas. La biodegradacin de un compuesto especfico es frecuentemente un proceso que se realiza paso a paso en el cual se involucran muchas enzimas y muchos organismos. Las enzimas son especficas en trminos de los compuestos que atacan y las reacciones que catalizan. Ms de una enzima es normalmente requerida para romper una sustancia orgnica. Frecuentemente, los organismos que tienen las enzimas para degradar estn presentes en el suelo. 4.4. MICROORGANISMOS EN LA BIORREMEDIACIN

Existen varias clases de microorganismos: mohos, levaduras, bacterias, actinomicetos, protozoos, algas, virus. La Figura 3.1 muestra el tamao comparativo de algunos microorganismos.

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FIGURA 4.1. Tamao comparativo de algunos microorganismos (Fuente: Stanier et al, 1984)

El suelo es un ambiente muy apropiado para el desarrollo de los microorganismos tanto eucariotas (algas, hongos, protozoos) como procariotas (bacterias y arqueas), adems de encontrar virus y bacterifagos. Todos estos organismos establecen relaciones entre ellos en formas muy variadas y complejas y tambin contribuyen a las caractersticas propias del suelo por su papel en la modificacin de las fases slida, lquida y gaseosa antes mencionadas. Los microorganismos desempean funciones de gran importancia en relacin con procesos de edafognesis; ciclos biogeoqumicos de elementos como el carbono, el nitrgeno, oxgeno, el azufre, el fsforo, el hierro y otros metales; fertilidad de las plantas y proteccin frente a patgenos; degradacin de compuestos xenobiticos, etc. En un suelo agrcola estn presentes alrededor de 10 10 organismos por g de suelo y constituyen una biomasa de aproximadamente 1500 kg por Ha. Un gramo de suelo frtil puede contener 5 m de micelio fngico, 10 8 clulas bacterianas, 106 esporos de actinomicetos. Los microorganismos hacen parte fundamental de los procesos de biorremediacin. En gran parte, las bacterias casi siempre son los degradadores primarios, aunque en algunas ocasiones los hongos juegan un papel importante. Las bacterias desempean el papel de mayor importancia en la biodegradacin de contaminantes orgnicos en suelos; los hongos tambin metabolizan compuestos orgnicos pero no son tan eficientes como las bacterias.

4.4.1. Bacterias Las bacterias son el grupo de organismos ms abundante en los suelos y la cantidad de especies presentes en el mismo parece relativamente constante alrededor del 42

mundo. Dichos organismos son un grupo diverso con variaciones extensivas en las propiedades morfolgicas, ecolgicas y fisiolgicas y son los principales degradadores de compuestos orgnicos naturales y xenobiticos encontrados en el suelo. Las ms comunes son Pseudomonas, Arthrobacter, Achromobacter, Micrococcus, Vibrio, Acinetobacter, Brevibacterium, Corynebacterium y Flavabacterium. Por su diversidad, las bacterias se encuentran regularmente en comunidades heterogneas; algunas especies son degradadores primarios, es decir, ellas inician la degradacin de la materia orgnica en el suelo; otras crecen en compuestos resultantes de la degradacin parcial de complejos orgnicos o productos residuales de degradadores primarios. Las bacterias tienen tres apariencias fsicas generales (ver Figura 3.2.): Esfricas (cocos) Forma de bastones (bacilos) Forma de espiras (espirilos) Y se clasifican usando sus caractersticas fsicas, qumicas, genticas y metablicas.

Figura 4.2. Apariencias fsicas generales de las bacterias (Fuente: Schlegel, 1993)

El uso y tolerancia al oxgeno que es uno de los mtodos ms generales de clasificacin. Los aerobios estrictos son bacterias que requieren oxgeno como aceptor final de electrones y crecen solamente en presencia del mismo. Las aerobias facultativas son bacterias que pueden utilizar aceptores de electrones terminales alternativos y crecer en presencia o ausencia de oxgeno. Algunas anaerobias son tolerantes al oxgeno, pero ste es txico a muchas anaerobias estrictas. Las bacterias tambin se pueden clasificar como eutrofas, las cuales crecen en presencia de altas concentraciones de sustratos, y oligotrofas, las cuales crecen con concentraciones trazas. Los actinomicetos son un grupo intermedio entre las bacterias procariotas ms primitivas y los hongos eucariotas; stos estn presentes en un gran nmero de suelos. Toleran un intervalo amplio de pH y temperatura, crecen bajo condiciones limitadas de nutrientes y son resistentes a desecacin. Aunque su tasa de crecimiento es ms baja que la de las bacterias, la habilidad de los actinomicetos para crecer en 43

condiciones adversas permiten a estos predominar cuando las condiciones del medio son difciles8. Algunas bacterias son capaces de formar esporas cuando las condiciones de crecimiento son muy adversas, como cuando el suelo est seco o cuando los nutrientes estn limitados. Las esporas son muy resistentes al calor y no son fciles de destruir por radiacin u otros factores qumicos tales como cidos y desinfectantes. Las bacterias formadas de esporas son muy comunes en suelos donde las condiciones pueden ser muy variables.

4.4.2 Hongos Los hongos son altamente protistas, no tienen movimiento y emplean materia orgnica como fuente de carbono y energa. Algunos de los hongos mejor conocidos son mohos, levaduras y setas (ver Figura 3.3 y Figura 3.4).

Figura 4.3. Aspecto de un moho (Fuente: Webster, 1986)

Figura 4.4. Aspecto de una levadura y una seta (Fuente: Hawksworth et al., 1995; Webster, 1986)

Se ha demostrado que los actinomicetos degradan fenoles, aromticos, esteroides, aromticos clorados y lignocelulosas (US EPA, 1983)

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En comparacin con las bacterias, los hongos son menos numerosos y crecen a velocidades considerablemente bajas; adems, los procesos metablicos de stos son menos diversos. Como grupo, los hongos tienden a ser ms tolerantes a los cidos que las bacterias (muchas especies crecen a un pH ptimo de 5 o menos) y son ms sensibles a la variacin en la humedad. Un hongo que tiene un considerable potencial en el tratamiento de compuestos orgnicos peligrosos es Phanerochaete chrysoporium , hongo de la podredumbre blanca. Este organismo produce una encima extracelular peroxidasa que degrada la lignina en presencia del perxido; se ha encontrado que degrada una alta variedad de compuestos altamente clorados y recalcitrantes. El uso de dicho hongo est limitado para condiciones en las cuales el nitrgeno est limitado porque la peroxidasa no se produce de otra manera.

4.4.3 Microorganismos concretos Los microorganismos aislados en suelos poseen actividades de peroxidasas y oxigenasas, que permiten la oxidacin de algunas fracciones del petrleo. Esta oxidacin cambia las propiedades de los compuestos hacindolos susceptibles a ataques secundarios y facilitando su conversin a bixido de carbono y agua. Rhodococcus. Uno de los gneros bacterianos ms explotados en bioprocesos no convencionales es Rhodococcus, un grupo nico consistente en microorganismos que presentan una gran diversidad metablica, capaz de transformar, biodegradar y utilizar como nica fuente de carbono compuestos hidrfobos. El Rhododoccus posee una gran variedad de vas metablicas para la degradacin y modificacin de compuestos aromticos, incluyendo las actividades de di-oxigenasa y mono-oxigenasa sobre anillos, as como la actividad de ruptura de catecol. Algunas cepas presentan tambin la va del 3oxoadipato. Lo anterior sumado a su capacidad de crecimiento en medios con escasos nutrientes, la carencia de un sistema de represin catablica y su persistencia ambiental las hacen excelentes candidatas para los tratamientos de biorremediacin. Dentro de las aplicaciones industriales y ambientales, se incluye la produccin de cido acrlico y acrilamida, conversin de esteroides, biorremediacin de hidrocarburos clorados y fenoles, a lo que se aade su gran capacidad de degradar hidrocarburos alifticos halogenados y numerosos compuestos aromticos, como los HAPs (hidrocarburos policclicos aromticos). Nuevas especies de Rhodococcus que presentan una nueva mutacin tienen la capacidad de degradar compuestos alifticos con enlaces dobles principalmente en el noveno carbono del grupo metilo terminal (alquenos).

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Pseudomonas. Las bacterias de este gnero poseen la habilidad para utilizar diversos substratos, incluyendo aquellos creados por el petrleo. Las Pseudomonas son bacterias Gram negativas, obicuas, que pertenecen a la subclase gamma de las Proteobacterias. Las Pseudomonas son bacterias productoras de biosurfactantes. Algunos microorganismos productores de biosurfactantes extracelulares solubilizan y facilitan la penetracin de los hidrocarburos a travs de la pared celular hidroflica; contienen adems enzimas degradadoras de hidrocarburos en la membrana citoplasmtica. La Pseudomonas aeruginosa, es otro de los microorganismos ms usado y estudiado en biorremediacin. Estudios con relacin al desempeo metablico de esta Pseudomona ha permitido identificarla como degradadora de gran cantidad de sustratos como el n-hexadecano, mineralizacin de compuestos alifticos en condiciones anaerobias, y degradadora de hidrocarburos aromticos y poli aromticos.

4.5 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACIN

4.5.1 Ventajas Mientras que los tratamientos fsicos y buena parte de los qumicos estn basados en transferir la contaminacin entre medios gaseoso, lquido y slido, en la biorremediacin se transfiere poca contaminacin de un medio a otro. Es una tecnologa poco invasiva y generalmente no requiere componentes estructurales o mecnicos que signifiquen una amenaza para el medio. Comparativamente, es econmica viable y al tratarse de un proceso natural, suele tener aceptacin por parte de la opinin pblica. 4.5.2 Desventajas La biodegradacin incompleta puede generar intermediarios metablicos inaceptables, con un poder contaminante similar o incluso superior al producto de partida y algunos compuestos contaminantes son tan resistentes que pueden incluso inhibir a biorremediacin. Es difcil predecir el tiempo de requerido para un proceso adecuado y el seguimiento y control de la velocidad y/o extensin del proceso es dispendioso.

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4.6 ETAPAS DEL TRABAJO PARA UNA BIORREMEDIACIN MS EFICAZ

4.6.1 Investigacin y caracterizacin de la contaminacin y del emplazamiento La caracterizacin del emplazamiento se lleva a cabo mediante el estudio del mismo detallando la volumetra del suelo a tratar, las condiciones geolgicas e hidrogeolgicas, analizando las caractersticas del suelo y sus propiedades (pH, granulometra, humedad, porosidad, etc). La caracterizacin del contaminante se centra en la investigacin del tipo y concentracin del mismo, as como la biodisponibilidad de los compuestos en el suelo (aceptores de electrones, metales pesados, nutrientes, etc). 4.6.2 Anlisis y eleccin de las medidas biocorrectivas Para ello se hace necesario: a) Identificar y cuantificar los contaminantes. Definiendo sus propiedades fsico qumicas ms importantes: Identificacin y clasificacin de compuestos. Concentracin en suelos y aguas subterrneas. Caracterizacin de la presin de vapor, constante de Henry, densidad y grado de solubilidad. b) Conocer los factores que influyen en la transformacin biolgica de los contaminantes: Factores ambientales tales como humedad, oxgeno disuelto, temperatura, pH, disponibilidad de nutrientes. Factores microbiolgicos tales como presencia de microorganismos y aclimatacin de las poblaciones microbianas. c) Designar las medidas biocorrectivas. En funcin de los factores anteriormente expuestos, se debe elegir el sistema de biotratamiento ms adecuado . 4.6.3 Diseo y evaluacin del sistema Para el diseo de un sistema de biorrecuperacin es necesario establecer unas etapas de trabajo, en las cuales se determinan y evalan los parmetros fundamentales necesarios para su eficacia. Las etapas a seguir en el diseo de un sistema de biotratamiento son: a) Evaluacin de la viabilidad de la tcnica. Se deben estudiar los parmetros de evaluacin que definen el sistema elegido, as como se deben evaluar las condiciones de biotratabilidad, los objetivos de limpieza exigidos y los costes de tratamiento necesarios. b) Evaluacin del diseo. Se deben estudiar los factores que afectan la eficacia de la tcnica y las posibles mejores o acondicionamientos a aplicar.

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c) Evaluacin del control y seguimiento. Para asegurar la correcta ejecucin y un progreso adecuado del tratamiento se debe llevar a cabo un plan de control y seguimiento del sistema. Para una correcta optimizacin se debern controlar los siguientes puntos: Control de las condiciones de degradacin y biodegradacin. Se debe registrar la variacin de concentracin de TPH, BTEX, CO2 desprendido y Oxigeno disuelto, variacin de nutrientes (N, P, etc). Control de los parmetros que afectan directamente en el funcionamiento del sistema. 4.6.4 Anlisis e interpretacin de resultados En esta ltima etapa se deben analizar los resultados obtenidos, haciendo un balance de los objetivos alcanzados y los marcados inicialmente. En este punto, si fuese necesario, se deben proponer y estudiar aquellas mejoras o modificaciones necesarias para la optimizacin del sistema.

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5. MTODOS DE BIORREMEDIACIN

INTRODUCCIN

El trmino biorremediacin se aplica a cualquier sistema o proceso en el que se empleen mtodos biolgicos para transformar contaminantes en el suelo o en las aguas. La biorrecuperacin en suelos contaminados puede llevarse a cabo In Situ: excavando el terreno y tratndolo a pie de excavacin, o bien Ex Situ, en instalaciones aparte. Existen parmetros que aumentan o disminuyen la probabilidad de obtener buenos resultados en el proceso de biorremediacin en un medio contaminado por hidrocarburos. La tcnica apropiada para llevar a cabo este proceso, debe ser el resultado de la valoracin de una serie de variables y de caractersticas del sitio o del contaminante a tratar.

5.1. BIORREMEDIACIN IN SITU

Este tipo de tratamiento normalmente es la opcin ms adecuada para la recuperacin de suelos, ya que no es necesaria la preparacin y excavacin del material contaminado. No obstante, antes de decidir el tipo de tratamiento deben valorarse numerosos factores entre los que se destacan: Impacto ambiental en la zona. Actividades industriales que pueden verse afectadas. Costos comparativos con otros tratamientos. La dificultad de acceso a la zona contaminada para proveer de oxgeno y nutrientes. La determinacin del porcentaje de tratamiento. La velocidad del proceso. El potencial peligro de extensin de la contaminacin. El mtodo de la biorremediacin In Situ de suelos se puede dividir en dos tipos: tratamiento de compuestos voltiles y tratamiento de compuestos semivoltiles y no voltiles. Las tcnicas ms utilizadas se ven con detalle a continuacin:

5.1.1. Bioaireacin o bioventeo Es una variante de la tcnica de extraccin de gas con vapor (Soil Gas Extraction o Volatilizacin), que consiste en suministrar aire al terreno contaminado para 49

promover la actividad de los microorganismos presentes en el subsuelo y biodegradar los hidrocarburos. El aire se suministra mediante un sistema de extraccin e inyeccin. Para disear estos sistemas es necesario conocer la permeabilidad del suelo a los gases, con el fin de determinar el radio de influencia de los pozos de venteo, la distancia entre pozos y las dimensiones de los equipos de inyeccin. La bioaireacin generalmente se lleva a cabo en reas poco profundas y pequeas; a menudo es factible la instalacin de barreras para guiar el flujo, el uso de cubiertas, un control intensivo, un plan de muestreo y un sistema de ventilacin. Una caracterstica determinante en la seleccin de esta tcnica es el tipo de contaminante, puesto que es de mayor efectividad donde los contaminantes tienen baja volatilidad. Adems se deben tener en cuenta las caractersticas fsicas del suelo, la profundidad de la zona contaminada y el potencial para transportar contaminantes fuera de la zona.

Ventajas. Es una tcnica altamente efectiva para tratar contaminaciones con compuestos con baja presin de vapor (menos de 1 mmHg), ya que su tasa de degradacin es mucho mayor que la de volatilizacin (Matthews, 1993). Como todos los tratamientos In Situ, cuando los costos de excavacin son altos el bioventeo puede ser una alternativa econmicamente interesante. No requiere rea adicional para llevar a cabo el tratamiento, ni el uso de maquinaria pesada.

Desventajas. Las limitantes de este mtodo son: Tipo y concentracin del contaminante. Perdida de nutrientes en el subsuelo. Bajo contenido de humedad del suelo y la dificultad de lograr el caudal de aire a travs de la zona contaminada; por ello requiere caractersticas especiales del suelo en cuanto a humedad, porosidad, conductividad hidrulica, etc. Requiere largos perodos de tiempo para obtener la concentracin final de hidrocarburo deseada. Los tiempos de limpieza pueden durar de meses a aos. La descontaminacin puede llevarse a cabo por efecto de la volatilizacin de compuestos ms que por su biodegradacin.

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5.1.2. Inyeccin de aire a presin Consiste en inyectar aire a presin en la parte inferior para deslazar el agua de los espacios intersticiales de la matriz del suelo. Esta inyeccin genera principalmente dos efectos: 1. El aire inyectado absorbe gran cantidad de los hidrocarburos voltiles presentes en el agua y el suelo. 2. El aire eleva los niveles de oxgeno del agua mejorando la biodegradacin de los contaminantes (Matthews, 1993). Con la inyeccin de aire a presin se llevan a cabo dos mecanismos de remocin del contaminante, la volatilizacin de compuestos de la zona insaturada y la fase acuosa y la biodegradacin. El mecanismo gobernante depende de las caractersticas de los contaminantes. Las caractersticas determinantes en la seleccin de esta tcnica son: El tipo de contaminante. Se degradan fcilmente las molculas ms pequeas (hasta C20), siendo ms biodegradables los compuestos parafinados o de cadena lineal que los compuestos aromticos. En general, son favorables los compuestos de alta volatilidad (presin de vapor mayor de 10 mm de Hg a 20C). Tipo de suelo. Los suelos deben contener bajos contenidos en arcilla y ser lo ms homogneamente posible, con un valor de permeabilidad al aire adecuado (> 10-10 cm2). Los aportes de oxgeno deben ser suficientes, as como la existencia de fuentes de carbono, aceptores de electrones y energa suficientes. Deben existir unas condiciones ptimas de pH (6 a 8), de humedad (12 a 30% en peso), potencial redox mayor de -50 mV, temperatura entre 0 y 40 C y los nutrientes del suelo en relacin N:P de 10:1.

Ventajas. Es un proceso excelente para casos donde los compuestos voltiles son los contaminantes principales. Necesidad de tiempos de actuacin cortos (meses). No requiere rea adicional para llevar a cabo el tratamiento, ni el uso de maquinaria pesada.

Desventajas.

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 El principal problema es la biodisponibilidad de los microorganismos. Cuanto menor es la solubilidad de los contaminantes menor ser la biodisponibilidad. En este sistema hay poco control del movimiento del agua subterrnea y los contaminantes, lo cual puede acelerar y agravar la extensin de la contaminacin. En cuanto a las profundidades, la literatura recomienda profundidades mnimas aproximadas de 1,2 metros, necesarias para confinar adecuadamente el aire inyectado; y mximas aproximadas de 9 metros, por debajo de las cuales sera muy difcil controlar la direccin del desplazamiento del aire. Los cambios en la litologa del suelo pueden afectar la direccin y la velocidad del flujo, ms an si se tiene en cuenta que el aire a presin viaja aceleradamente.

5.1.3. Atenuacin natural La atenuacin natural, aunque no est considerada como una tcnica de descontaminacin propiamente dicha, est englobada dentro de las tcnicas de remediacin In Situ. Su caracterstica principal es la utilizacin de los procesos fisicoqumicos de interaccin contaminante-suelo y los procesos de biodegradacin que tienen lugar de forma natural en el medio. Estos procesos se conocen como procesos de biotransformacin natural. Los procesos de biotransformacin natural son aquellos que van a reducir la concentracin de los contaminantes y entre los que se encuentran la dilucin, dispersin, volatilizacin, adsorcin, biodegradacin y aquellas reacciones qumicas que se producen en el suelo y que contribuyen de alguna forma a la disminucin de la contaminacin. Esta tcnica se aplica en aquellos casos en los que exista contaminacin producida por hidrocarburos de tipo halogenado o no halogenado. La atenuacin natural puede darse en presencia (condiciones aerbicas) o ausencia de oxigeno (condiciones anaerbicas). En presencia de oxgeno los microorganismos convierten en ltima instancia los contaminantes en dixido de carbono, agua y masa celular microbiana (mineralizacin). En el caso de escasez de oxgeno, los microorganismos dependen de otros aceptores de electrones disponibles (nitrato, sulfato, formas oxidadas de Fe o Mn,...). Se trata de una biodegradacin anaerobia, cuyos mecanismos y significado se estn comenzando a comprender en los ltimos aos (Heider et al., 1999). Entre los factores que influyen en la eficacia y viabilidad de la atenuacin natural destacan: 52

 La existencia de unas condiciones geolgicas y geoqumicas favorables. Las necesidades de reduccin de la masa contaminante en un intervalo razonable de tiempo (meses a aos), tanto en la superficie del suelo como en la zona ms subsuperficial del mismo. Confirmacin de la existencia de los tipos y nmero de poblaciones de microorganismos que puedan biodegradar los contaminantes. La concentracin de los compuestos utilizados como aceptores de electrones en condiciones anaerobias debe ser superior a 0,21 mg/l para nitratos, la de Fe3+ para que pueda ser reducido a Fe 2+ debe ser superior a 21,8 mg/l y la de sulfatos mayor de 0,21 mg/l. El potencial redox debe estar situado entre un rango de -400 y 800 mV. Deben existir unas condiciones ptimas de pH (6 a 8), de humedad (12 a 30% en peso), temperatura entre 0 y 40 C y los nutrientes del suelo en relacin N:P de 10:1. Existencia de un coeficiente de retardo favorable para que se produzcan los fenmenos de sorcin con suficiente eficacia. Si se aportan al medio algunos de los elementos de los que carece o bien se potencian los existentes, se favorece la eliminacin del posible contaminante. En muchos casos este tipo de intervencin ser necesario para reforzar el proceso natural o bien para implantar unas condiciones que reduzcan el riesgo. En esto se basan la bioestimulacin y la bioaumentacin, que son aproximaciones biotecnolgicas de la atenuacin natural.

Ventajas. Es una tcnica de biorremediacin In Situ de muy bajo costo. Puede darse en presencia o ausencia de oxgeno, por tanto no se hace necesario adicionar oxgeno al medio contaminado.

Desventajas. La exigencia de proteccin y el riesgo de los potenciales receptores durante el tiempo que dura la atenuacin. Produccin y conservacin en el medio de subproductos de carcter persistente o ms txico que los iniciales, durante y despus de la atenuacin natural.

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5.1.4. Bioestimulacin En este sistema, el agua subterrnea es conducida a la superficie por medio de un sistema de pozos de extraccin, se acondiciona en un reactor para volverla a inyectar y estimular la degradacin bacteriana de los contaminantes del subsuelo y del acufero. En el reactor en superficie se agregan al agua: nutrientes, oxgeno, microorganismos previamente seleccionados y adaptados, y el efluente se retorna al subsuelo por medio de pozos de inyeccin, aspersores superficiales o galeras de infiltracin distribuidas a lo largo y ancho del sitio que se requiere remediar. Algunas veces esta tcnica utiliza biosurfactantes para ayudar al lavado de contaminantes del suelo (Zitrides, 1990); (Cole, 1994). Las caractersticas determinantes en la seleccin, el xito o el fracaso de esta tcnica de remediacin son:

Tipo de suelo. Los suelos deben ser lo ms homogneos posible, con un valor de porosidad y permeabilidad al aire adecuado (> 10-10 cm2). Deben existir unas condiciones ptimas de pH (6 y 8), de humedad (1230% en peso), temperatura entre 0 y 40 C y los nutrientes del suelo en relacin N:P de 10:1. Ventajas. Esta tcnica es muy til en el tratamiento de extensas zonas contaminadas de centros industriales donde no es posible o conveniente parar el proceso operativo para realizar el tratamiento requerido.

5.1.5. Bioaumentacin Otras lneas de investigacin han llevado a la introduccin de microorganismos aclimatados o incluso modificados genticamente en el medio, con el fin de mejorar la biodegradacin (Walter, 1997; Atlas y Unterman, 1999). Esta tcnica funciona en condiciones de laboratorio o bioreactor, pero en ambientes externos (suelo o agua) su implantacin depende de una serie de factores (Alexander, 1999). Presencia de toxinas, nutrientes y condiciones ambientales, movilidad y/o distribucin de los microorganismos y la presencia de abundante materia orgnica. Los microorganismos aadidos deben sobrevivir a los depredadores y competir con xito con la poblacin autctona antes de ocupar los nichos potenciales. En general, los ambientes ms selectivos y la utilizacin de consorcios microbianos favorecen la bioaumentacin. 54

Ventajas. No requiere rea adicional para llevar a cabo el tratamiento, ni el uso de maquinaria pesada. Desventajas. El tamao de la poblacin de microorganismos degradadores crece rpidamente como respuesta a la contaminacin del medio y es muy difcil, si no imposible, incrementar la poblacin microbiana ms all de esos valores.

5.2. BIORREMEDIACIN EX SITU

Dos son los tratamientos que se distinguen cuando el procedimiento se realiza fuera del lugar donde est la contaminacin: tratamiento por va slida y tratamiento por va suspensin. La biorrecuperacin va slida se puede realizar por dos mtodos: tratamiento en lechos y tratamiento por compostaje. La diferencia fundamental entre ambos es el sistema de aireacin, mientras que en el primero slo se pueden tratar las capas de suelo menos profundas, en el compostaje se requiere la formacin de grandes apilamientos de material degradable. En el tratamiento va suspensin se excava el material contaminado y se traslada a un reactor. La caracterstica de este mtodo es la suspensin en un medio acuoso del suelo contaminado, es decir, el tratamiento se lleva a cabo bajo condiciones de saturacin de agua. La ventaja de estos procedimientos frente a los primeros radica en la posibilidad de optimizar mejor los parmetros microbiolgicos, as como el control del proceso; a cambio, lgicamente, de un mayor costo.

5.2.1. Disposicin sobre el suelo Tambin conocido como Landfarming, tratamiento en lechos o tratamiento va slida. Esta es la tcnica ms usada para la biorremediacin de los lodos contaminados con hidrocarburos y de otros desechos de la industria petrolera. Esta tcnica consiste en excavar los suelos contaminados, extenderlos sobre un rea suficientemente amplia y estimular las variables de incidencia en el proceso para promover la actividad de los microorganismos encargados de degradar los hidrocarburos. Antes de extender el suelo contaminado se deben adecuar las condiciones de la superficie para controlar los lixiviados y las aguas lluvias (Zitrides, 1990). 55

Una vez extendido el suelo contaminado se irriga con las soluciones de nutrientes, los microorganismos y los aditivos qumicos en el caso que sean necesarios para la biodegradacin. Peridicamente se debe airear el suelo para suministrarle oxgeno, con la ayuda de tractores y retroexcavadoras (aireacin mecnica) o sistemas de inyeccin de aire comprimido. Adems, el espesor del suelo extendido debe ser menor de 70 u 80 cm, con el fin de permitir la transferencia de oxgeno del aire atmosfrico a la pila del suelo, El sitio donde se realice el tratamiento debe ser adecuado para el manejo de aguas lluvias y control de agua de escorrenta. El suelo extendido debe tener una pendiente para retirar excesos de humedad en la pila. Se deben construir canaletas o diques en tierra o suelo cemento para evitar la entrada de agua de escorrenta a la zona de tratamiento. En reas de riesgo de contaminacin de acuferos, se debe impermeabilizar la zona de tratamiento con sellos de arcilla o geomembranas para evitar el arrastre de hidrocarburos solubles de las lluvias hacia las aguas subterrneas. Para empezar el procedimiento, se hace una bsqueda y seleccin de bacterias nativas aisladas de las muestras de suelos que se encuentran contaminados, ya que estas tienen la capacidad catablica para crecer bajo las condiciones fsico-qumicas y de estrs a las que estn sometidas, y tendrn un mejor desempeo a la hora de la biorremediacin. La bsqueda comienza en el procesamiento de una muestra de suelo mediante una serie de diluciones, tratando de obtener aquellos morfotipos cultivables; ya que una gran parte de los microorganismos del suelo no pueden ser recuperados en medios para el cultivo de microorganismos. Adems de una bsqueda general, se realiza una especfica a travs de medios selectivos y diferenciales, en la cual se pretende aislar ciertos morfotipos como las Pseudomona sp. y bacterias lactosa positivas (bacterias capaces de utilizar la lactosa), debido a su bien conocida actividad degradadora de hidrocarburos. Luego, estas diluciones son sembradas en diferentes medios de cultivo donde grandes familias de morfotipos se hacen presentes; stas varan en densidad y diversidad. La diversidad est determinada por los morfotipos recuperados que se diferencian segn su morfologa macroscpica (su aspecto fsico), mientras que la densidad est determinada por el nmero total de individuos que pertenecen a un grupo con una morfologa macroscpica comn. Estos datos de densidad y diversidad son de gran valor. Primero, porque indican acerca de la calidad microbiana del suelo, ya que un suelo que tiene gran nmero de morfotipos, es un suelo que tiene vida y por ende presenta una buena prospeccin para la biorremediacin debido a su posible alta actividad microbiana. Segundo, porque aquellos morfotipos que se encuentren en mayor nmero sern seleccionados por su habilidad para sobrevivir a la presin selectiva del contaminante y para usarlo como fuente de energa y carbono, pues por eso estn creciendo. Ya seleccionados los morfotipos se conforma un consorcio o pool de microorganismos degradadores de hidrocarburos y, utilizando la estrategia de bioaumentacin, se hace 56

una produccin a mayor escala y en proporciones estratgicas de estos. En esta produccin debe tenerse en cuenta el volumen de suelo contaminado para biorremediar, la concentracin del contaminante y las clases de morfotipos que se aislaron. Los factores a tener en cuenta en la aplicacin del Landfarming son: La existencia de unas condiciones geolgicas y geoqumicas favorables. El manejo de un consorcio microbiano sobre la utilizacin de un solo morfotipo, debido a que los morfotipos al estar en grupo pueden tolerar mejor los cambios fsico-qumicos en el campo y sus actividades metablicas pueden interactuar entre s para la parcial o final biorremediacin. Conocer las condiciones ambientales en las cuales se desea que los morfotipos trabajen, para as poder optimizar la biorremediacin, cambiando los posibles parmetros fsicos o qumicos que puedan ir en contra de la actividad microbiana en el material a biorremediar o en el ambiente. Resaltar la importancia que tiene la seleccin de microorganismos autctonos (aislados del lugar para la biorremediacin), debido a que estos morfotipos se encuentran mejor adaptados al contaminante; a diferencia de morfotipos forneos, que aunque con una gran actividad biorremediadora, pueden no funcionar bajo las condiciones ambientales del lugar.

Ventajas. Es econmico con respecto a otras tcnicas de biorremediacin. Es un proceso considerado de bajo nivel tecnolgico que no requiere exigentes consideraciones de ingeniera, y a la vez permite una fcil manipulacin y control de las variables de diseo y operacin. Desventajas. Requiere grandes extensiones de terreno para disposicin de suelos y no es viable si no se cuenta con suficiente rea. Cuando los contaminantes son hidrocarburos livianos la remediacin puede ser acelerada por su volatilizacin, lo cual generara problemas con las autoridades ambientales donde las regulaciones de emisiones atmosfricas son exigentes. Cuando la contaminacin es profunda los costos de excavacin y movimiento de tierras pueden ser altos. 57

5.2.2. Bioceldas o biopilas La tcnica conocida como bioceldas o biopilas es un tratamiento de biorrecuperacin en condiciones no saturadas, que consiste en la reduccin de la concentracin de contaminantes derivados del petrleo en suelos excavados mediante el uso de la biodegradacin a partir de la construccin de un sistema cerrado que permita controlar lixiviados, hidrocarburos voltiles y algunas variables de diseo mediante el suministro de nutrientes y oxgeno a travs de la pila del suelo. La tcnica consiste en la formacin de pilas de material biodegradable de dimensiones variables, formadas por suelo contaminado y materia orgnica (compost) en condiciones favorables para el desarrollo de los procesos de biodegradacin de los contaminantes. En el fondo de la pila el sistema cuenta con un aislante que generalmente son geomembranas o canales plsticos para el control de lixiviados. Estas pilas de compost pueden ser aireadas de forma activa, volteando la pila, o bien de forma pasiva, mediante tubos perforados de aireacin, con distribucin permanente de nutrientes, microorganismos y aire. En principio, las biopilas se pueden aplicar a la mayora de los compuestos orgnicos, siendo ms eficaz en los compuestos de carcter ms ligero. Entre los factores que influyen en la aplicacin de las biopilas se destacan: Los hidrocarburos deben ser no halogenados y deben encontrarse en el suelo en concentraciones menores a 50.000 ppm. Dada la necesidad de excavacin y posterior depsito del suelo contaminado, se requiere una superficie de trabajo relativamente grande cuyas dimensiones dependen del volumen de suelo a tratar. Necesidad de una densidad de poblaciones microbianas (>1.000 CFU/gramo de suelo), condiciones de humedad (40 a 85% de capacidad de campo), temperatura (10 a 45C), textura (baja proporcin de arcillas), pH del suelo adecuadas (6 a 8) y baja presencia de metales pesados (< 2.500 ppm). La concentracin de nutrientes en el suelo cuyo rango normal de C:N:P sea de 100:10:1. Ventajas. Esta tcnica es muy eficiente en el tratamiento de residuos con bajas concentraciones de hidrocarburos. Por ser un sistema cerrado permite un mayor control de las variables del proceso, como el control de condiciones climatolgicas adversas (baja temperatura o alto rgimen pluviomtrico). Cuando no se dispone de espacio suficiente para extender el suelo, este sistema permite construir pilas de suelo cuatro o cinco veces ms altas que en una disposicin sobre el suelo (ocupa diez veces menos rea)(Zitrides, 1995).

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Desventajas. Si en el proceso se generan gases o vapores de hidrocarburos voltiles regulados por la autoridad ambiental, o las condiciones climatolgicas de la zona pueden afectar negativamente la eficiencia del proceso, la pila del suelo se debe cubrir con membranas o poner techo de forma similar a los invernaderos. Los vapores generados en el proceso se deben colectar y tratar antes de ser emitidos a la atmsfera. Lo que incurre a costos adicionales. Como todos los tratamientos Ex Situ, cuando la contaminacin es muy profunda, el movimiento de tierra puede requerir costos ms altos. 5.2.3. Tratamiento de biosuspensin Tambin conocido como sistema biorreactor o contacto lquido-slido. El procedimiento consiste en excavar el suelo contaminado y luego introducirlo en un reactor aadiendo nutrientes, agua, y los cultivos microbianos adecuados para que se lleve a cabo la degradacin. Se mezcla bien y se airea la suspensin hasta que las transformaciones de los compuestos seleccionados para su eliminacin alcanzan el nivel deseado. A continuacin se detienen el mezclado y la aireacin, y se deja a los slidos separarse de los fluidos por sedimentacin. El sedimento es retirado y, si la transformacin ha tenido xito, el suelo se devuelve a su lugar de origen, mientras que los lquidos se tratan como aguas residuales. El suministro de oxgeno puede realizarse mediante aireacin difusa, turbina difusora y aireacin superficial (Metcalf y Eddy, 1991). La tasa de transferencia de oxgeno necesaria es funcin de la tasa de degradacin de los compuestos orgnicos y de la tasa de crecimiento microbiano. Su determinacin no es fcil de hacer, sin embargo, las tasas de transferencia disminuyen al aumentar la concentracin de slidos suspendidos. El mezclado y el suministro de nutrientes tambin son fundamentales, ya que por el primero se incrementa el contacto entre los microorganismos y los componentes contaminantes, dando como resultado un incremento de las velocidades de transferencia de masa y de reaccin. Los nutrientes normalmente optimizan la biorrecuperacin por favorecer el crecimiento de los microorganismos. Por otro lado, el mezclado y la aireacin ayudan a romper los flculos de tierra y a disolver los contaminantes. Ventajas. En comparacin con otros procesos de tratamiento, los reactores va suspensin proporcionan el mayor contacto entre los contaminantes, los microorganismos, el oxgeno, el agua y los nutrientes. La capacidad de controlar los sistemas del tratamiento va suspensin es mucho mayor y por tanto puede ser la tecnologa ms efectiva. 59

 El tratamiento va suspensin puede aplicarse en particular a los suelos contaminados con residuos oleosos y de consistencia alquitranada (siendo estos compuestos difciles de biodegradar). Es ms rpido y requiere menos superficie que otros sistemas.

Desventajas. Debido al energtico mezclado y a la aireacin forzada se favorece el escape de emisiones de aire, por ello la suspensin no es una buena eleccin para suelos donde los compuestos voltiles sean mayora. Esta tcnica demanda mayor cantidad de dinero a comparacin de otras tcnicas de biodegradacin.

5.3. FITORREMEDIACIN: OTRA ALTERNATIVA DE BIORREMEDIACIN

La fitorremediacin constituye una variacin de las tcnicas de biorremediacin, que se basa en el uso de plantas verdes y los microorganismos asociados a ellas as como las enmiendas del suelo y tcnicas agronmicas dirigidas a liberar, contener, o transformar en compuestos inocuos a los contaminantes del suelo (48). Inicialmente, el trmino de fitorremediacin se asoci al uso de plantas capaces de bioconcentrar niveles inusuales de metales en sus tejidos. La mayor parte de ellas estn constituidas por pequeas plantas herbceas que se desarrollan en zonas metalrgicas naturales o en depsitos (49). Hoy en da, las investigaciones en fitorremediacin se encaminan no slo al tratamiento de contaminantes inorgnicos (metales, metaloides, haluros y radionucleidos), sino tambin al tratamiento de contaminantes orgnicos (50); algunas especies de plantas probadas con xito en la fitorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos del petrleo son: Zea mays L., Panicum maximun Jacq., Paspalum virgatum L., Echinochloa polystachya H.B.K., Sorghum vulgare L., Phaseolus vulgaris L., Phaseolus coccineus L., Chamaecrista nictitans (L.) Moench., Brachiaria brizantha (Hochst. ex A. Rich) Stapf., Triticum aestivum L., Hordeum vulgare L., entre otras. (Revista Latinoamericana de Microbiologa vol 48. Abril - Junio de 2006) Comprendiendo tanto los procesos dirigidos a liberar el contaminante de la matriz del suelo (descontaminacin), como los encargados de secuestrarlos en dicha matriz (estabilizacin).

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La fitorremediacin comprende tanto los procesos dirigidos a liberar el contaminante de la matriz del suelo (descontaminacin), como los encargados de secuestrarlos en dicha matriz (estabilizacin).

5.3.1. Fitodescontaminacin y fitoestabilizacin La fitodescontaminacin es el proceso por el cual la concentracin de contaminantes del suelo se reduce a niveles tolerables a travs de la accin de las plantas, su microflora asociada y de las tcnicas agronmicas apropiadas. A su vez, comprende los siguientes procesos: Fitoextraccin. Es el proceso por medio del cual, tanto los contaminantes metlicos, como los contaminantes orgnicos del suelo, son absorbidos directamente por las plantas e incorporados a su biomasa, que con posterioridad ser recolectada para su destruccin. Fitovolatilizacin. Proceso por el cual las plantas y la actividad microbiana asociada, a travs de enzimas especializados, pueden transformar, degradar y finalmente volatilizar los contaminantes desde el suelo. La volatilizacin puede producirse tanto desde el sistema radicular como desde la parte superficial del suelo. Fitodegradacin. Es el proceso mediante el cual las plantas toman el contaminante y lo metabolizan transformndolo en un material sin riesgos para el medio natural. Rizodegradacin. Es el proceso por medio del cual las races de las plantas, su microflora asociada y/o los productos excretados destruyen el contaminante en la zona radicular. La fitoestabilizacin es el proceso que est encaminado al secuestro y estabilizacin de los contaminantes en los suelos. Se utilizan plantas tolerantes al contaminante, capaces de estabilizarlo mecnicamente, y por tanto impiden su transporte a otros medios, incluyendo el agua subterrnea.

5.3.2. Tolerancia de las plantas a los contaminantes Una caracterstica esencial en cualquier tecnologa de fitorremediacin es la tolerancia de las plantas a los contaminantes, que se define como la capacidad para resistir la acumulacin en sus tejidos de elevados niveles de compuestos txicos. Para comprender el desarrollo de las plantas hipertolerantes es necesario conocer las estrategias moleculares que adoptan para resistir los efectos txicos de los contaminantes inorgnicos y orgnicos.

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Tolerancia a los metales pesados. La tolerancia a los metales pesados por las plantas est limitado tanto por la admisin celular, como por la resistencia de los metales una vez que han penetrado en las clulas. Las estrategias empleadas por las plantas, para resistir los efectos txicos causados por los metales pesados, se relacionan con los siguientes mecanismos: Establecimiento de enlaces entre los metales y la pared celular. Nivel de tolerancia por la membrana celular hacia los metales. Reduccin del transporte por la membrana celular. Flujo activo de metales desde las clulas hacia el exterior. Nivel de tolerancia de los enzimas vegetales hacia los metales. Compartimentacin o acumulacin del exceso de metales en rganos subcelulares como son las vacuolas. Quelacin del (fitoquelatos). metal por ligandos orgnicos y/o inorgnicos

Precipitacin del metal al formar compuestos de baja solubilidad.

Tolerancia a los contaminantes orgnicos. Las plantas muestran una variacin considerable de su tolerancia hacia los contaminantes orgnicos; dos son los mecanismos por los que las plantas pueden incrementar su resistencia a los contaminantes orgnicos. El primero de ellos consiste en la transformacin de los elementos txicos en la rizosfera, para ello la planta libera ms del 20% de su fotosintato dentro del suelo en forma de exudado radicular. El fotosintato liberado est constituido por una mezcla de azcares, alcoholes, fenoles, cidos orgnicos y protenas que rpidamente son utilizados por las comunidades microbianas existentes en la rizosfera. Estas poblaciones pueden ser, de 100 a 10.000 veces mayores que las poblaciones presentes en la matriz del suelo, y se caracterizan por presentar enzimas especficos capaces de metabolizar los contaminantes orgnicos hacia formas menos txicas. El segundo mecanismo se produce una vez que los contaminantes han atravesado el sistema radicular. En este caso, los elementos txicos pueden seguir dos vas de transformacin, por un lado se trasladan hacia brotes y hojas para, posteriormente, volatilizarse, y por otro pueden sufrir procesos de metabolizacin hacia nuevas formas. Estos nuevos compuestos pueden mineralizarse o pueden acumularse como nutrientes o como nuevos contaminantes. La inclusin en rganos subcelulares y la formacin de otros compuestos representan las principales vas para la desintoxicacin de xenobiticos en plantas. 62

5.3.3. Futuro de la fitorremediacin La fitorremediacin es una tecnologa emergente en el tratamiento de la contaminacin, su aplicacin es cada vez mayor y sus resultados se estn valorando como muy positivos. La utilizacin de tcnicas, en campo, con plantas herbceas, gramneas, vegetacin arbrea y algunos mutantes transgnicos, pone de manifiesto que la fitorremediacin empieza a ser una tecnologa competitiva en la recuperacin de suelos contaminados. El conocimiento de los procesos fisiolgicos que tienen lugar en la planta, junto al conocimiento de los compuestos txicos, est haciendo que se puedan seleccionar plantas con mayores niveles de tolerancia hacia contaminantes especficos. Adems, por tcnicas genticas se pueden incrementar la biomasa vegetal, su morfologa, densidad radicular o penetracin en profundidad, as como favorecer la existencia de asociaciones especficas de microorganismos-races. La fitorremediacin podra ser particularmente atractiva en medios con bajo riesgo, donde los contaminantes estn limitados a la zona radicular y donde no hubiera fuertes contrastes climticos. En estas condiciones, la velocidad de la toma de contaminantes por especies fitoextractoras y la velocidad de fitodegradacin por enzimas especficos podran, probablemente, ser mayores que la velocidad de difusin de los contaminantes. Sin embargo, la fitorremediacin est limitada por las condiciones que impiden un crecimiento normal de las plantas como son: el clima. la topografa, los procesos de erosin, y concentraciones de contaminante que exceda del nivel de tolerancia de las plantas. Tambin limita la utilizacin de esta tcnica el tiempo que haya para la descontaminacin (la fitorremediacin es lenta), y la distancia del contaminante a zonas sensibles: ros, lagos, lagunas y aguas subterrneas.

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6. APLICACIN EN COLOMBIA

INTRODUCCION

En los suelos existe dentro de su poblacin habitual, un reducido nmero de microorganismos con capacidad biodegradadora de hidrocarburos. Las molculas orgnicas constituyentes del material vegetal y animal que como detritos, se incorporan al suelo para cumplir luego los ciclos biogeoqumicos de degradacin, liberan compuestos orgnicos con estructuras y propiedades iguales o similares a las que se generan en la biodegradacin de hidrocarburos, ac es importante recordar el origen del petrleo y su formacin geoqumica. El trabajo de biorremediacin, se plantea como objetivo prioritario, incentivar la poblacin autctona para realizar el bioproceso de degradacin, siguiendo estrategias de bioaumentacin, primero agotando las medidas in situ, ya que son menos costosas y pueden generar un menor impacto al suelo.

6.1. Bioremediacin de Oxisoles

Las alternativas de biorremediacin para suelos de este tipo son variadas, cualquiera de las que se mencionarn mas adelante son una opcin para la recuperacin del terreno contaminado. La metodologa que se puede aplicar para limpiar las riberas de las zonas pantanosas e inundables (caractersticas de este tipo de suelos) que han sido afectadas por el derrame de crudo y para la descontaminacin del suelo contaminado con petrleo, es el resultado de la observacin en campo del comportamiento del contaminante derramado y que se ha distribuido a travs del suelo y sedimento en las reas cenagosas, as como tambin en el agua superficial existente. Con el fin de un proceso mas ptimo se hace necesario que el tratamiento se realice en dos fases.

Fase1.Tratamiento del suelo mediante hidrolavado: Para iniciar el tratamiento del suelo y sedimentos de las reas inundables, se procede a remover la vegetacin (tallos, hojas y races). La vegetacin que presente contaminacin es sometida a lavado a presin con agua y con ayuda de agentes desgrasantes; una vez limpia, se deposita en los alrededores del rea de tratamiento para que se degrade naturalmente. Al suelo y a los sedimentos se les trata con una solucin acuosa de biodesengrasantes compuestos principalmente por aceites de origen vegetal, que qumicamente contienen Ramnolpidos, fosfolpidos y lipoalcoholes de diferente contenido de carbono. Con esta mezcla de biosurfactantes catinicos, aninicos, terpenoides y molculas lipoliticas lo que se logra es: Bajar la tensin superficial y disminuir las fuerzas de capilaridad dentro de las partculas de hidrocarburo y/o minerales de las superficies rocosas, limosas y arcillosas. 64

 Crear una microemulsin del tipo Winsor III9 que sea estable. Solubilizar las molculas individuales para que formen miscelas o una simple fase de microemulsiones. El hidrocarburo desprendido se recupera utilizando sustratos vegetales oleoflicos en forma de barreras, evitando as que los productos del lavado fluyan por los cuerpos de agua. Si la cantidad de petrleo desprendido es grande justificar el uso de un skimmer de tambor o rodillo para su recuperacin y almacenamiento. Las siguientes son las actividades que se realiza para la limpieza, descontaminacin y remediacin del rea afectada: Adecuacin y construccin de campamento y de vas de acceso al rea de trabajo. Desbroce y remocin de la vegetacin existente en las riveras y suelos/sedimentos dentro de las zonas inundables. Este material se almacena en las reas de lavado preestablecidas a fin de proceder a lavar y separar el hidrocarburo que est impregnado. Construccin de muros de separacin y delimitacin del rea de trabajo. Asegurarse que en los pantanos aledaos no se tenga almacenada gran cantidad de agua que pudiera afectar los procesos de lavado y remediacin. Construccin de camas para el lavado de vegetacin contaminada. El hidrocarburo liberado ser colectado mediante la aplicacin de agentes absorbentes. Instalacin de casetas de bombeo: Sitios de captacin de agua para el funcionamiento de las bombas e hidrolavadoras que se emplea en el lavado de las riveras y suelos/sedimentos de los pantanos. Lavado de sedimentos y suelos contaminados con hidrocarburos. Para este lavado se aplica biodesengrasantes a alta presin con ayuda de pitones de vstago y compresores. Con el fin de remover los sedimentos y permitir que el hidrocarburo se libere de las arcillas, limos y arenas presentes en el pantano. De igual forma, el hidrocarburo liberado se colecta en las trampas establecidas al final de cada muro de contencin. Este proceso de lavado se aplica tantas veces como sea necesario a fin de remover la mayor cantidad de hidrocarburos. Debido a condiciones climticas de la zonas hmedas donde se hay oxisoles, se evala la necesidad de encausar las aguas provenientes de los pantanos que pueden estar ubicados aguas arriba, de tal forma que el rea de trabajo no este totalmente inundada. Las siguientes son las actividades que se realizan para el tratamiento del material vegetal contaminado con hidrocarburo, material confinado y almacenado en sacos de polipropileno: El lavado del suelo es una tcnica que consiste en el uso de agentes desengrasantes orgnicos a base de ctricos (Orange Truch), generalmente agua, acompaada de un
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Ciertos sistemas agua - aceite- surfactante forman microemulsiones al equilibrio. Las microemulsiones son sistemas monofsicos, termodinmicamente estables, generalmente transparentes o translcidas, de baja viscosidad, que contienen micro-dominios deformables de agua y de aceite separadas por una pelcula delgada y fluctuante de surfactante. Existe una microemulsin en equilibrio a la vez con una fase oleosa y una fase acuosa (Winsor III). En este caso, la formulacin del sistema es calificada de ptima cuando la microemulsin media contiene cantidades iguales de agua y de aceite.

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procedimiento mecnico vibratorio que permite clasificar y separar el crudo de los sedimentos con el fin de depurar el suelo. El elemento mecnico esta conformado por zarandas vibratorias montadas sobre un tanque abierto que permite capturar el hidrocarburo recuperado; al momento de pasar el material o sedimentos por la malla este es sometido a una presin de agua combinada con agente desengrasante que remueve el hidrocarburo del sedimento. En el procedimiento de lavado del suelo se separa la tierra fina (limo y arcilla), de la tierra gruesa (arena y grava). - Las partculas de grava y de arena ms pesadas se asientan y son sometidas a pruebas para detectar contaminantes. Si estn limpias, este material se puede usar en el sitio o llevarse a otro lugar para usarlo como relleno. Si aun quedan vestigios de contaminantes, se puede someter el material a otro ciclo de lavado, recogerlo para aplicarle un tratamiento diferente o disponerlo en otro lugar. - El limo y la arcilla contaminados que estn en el agua del lavado se asientan y se separan del agua del lavado; luego, se los somete a una prueba para determinar si contienen contaminantes. Si estn limpios, este material se puede usar en el sitio o llevarse a otro lugar para usarlo como relleno. Si por el contrario, el material todava presenta trazas de hidrocarburos, se dispone en forma de biopilas para someterlo a un proceso de degradacin mediante la aplicacin de nutrientes y bioventilacin para que el material en contacto con el oxigeno oxide los hidrocarburos residuales. El agua del lavado es sometida a tratamiento, previo vertimiento o reutilizacin. Fase 2. Cualquiera de las siguientes tcnicas se podr aplicar siempre y cuando se haya realizado una primera fase de tratamiento, es decir el lavado de suelos, ya que con este primer tratamiento es posible disminuir la concentracin del contaminante en al menos un 60%: Biorremediacin in situ: El tratamiento biolgico de suelos contaminados involucra el uso de microorganismos y/o vegetales para la degradacin de los contaminantes orgnicos. La actividad biolgica altera la estructura molecular del contaminante y el grado de alteracin determina si se ha producido biotransformacin o mineralizacin, (La biotransformacin es la descomposicin de un compuesto orgnico en otro similar no contaminante o menos txico, mientras que la mineralizacin es la descomposicin a dixido de carbono, agua, y compuestos celulares). Se realizan las siguientes tareas: a. Se Construye un canal de drenaje en el rea de confinamiento del material contaminado a fin de eliminar la mayor cantidad de agua posible del bajo existente; este canal de drenaje deber atravesar los pantanos. b. Remover el suelo y sedimentos de los pantanos con la finalidad de recuperar el hidrocarburo libre, facilitar la homogenizacin del material y permitir evaporacin del exceso de agua presente. c. Incorporar material de soporte: Este puede ser residuos vegetales que permitirn una fcil aireacin y oxigenacin del medio en tratamiento. d. Aplicacin de fertilizantes: Se usarn fuentes de nitrgeno, fsforo y potasio necesarios para el incremento y desarrollo de poblacin microbiana con capacidad degradadora de petrleo.

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e. Aplicacin de fertilizantes orgnicos: Estos pueden ser gallinazas, estircoles y otros que a mas de aportar con cepas microbiana con capacidad de degradacin de petrleo, proporcionaran fuentes de nutrientes y oligoelementos necesarios para el desarrollo biolgico en el suelo en tratamiento. f. Aireacin mecnica, a fin de incrementar la disponibilidad de oxigeno para el crecimiento microbiano y para el proceso de evapotranspiracin del agua existente. g. Aplicacin de caldos y medios de cultivo provistos de cepas endmicas de organismos degradadores de petrleo, aisladas del sitio de remediacin, clasificadas, potenciadas y bioaumentadas. Esta tcnica de biorremediacin in situ se puede aplicar siempre y cuando los niveles de hidrocarburos no sean tan altos y no haya presencia de hidrocarburo intemperizado. Bioventing: Tcnica de tratamiento de biorrecuperacin de tipo in situ, consistente en la ventilacin forzada del suelo mediante la inyeccin a presin de oxgeno (aire) en la zona no saturada del suelo a travs de pozos de inyeccin. Debido a la aireacin del suelo se va a favorecer la degradacin de los hidrocarburos por dos motivos: por volatilizacin, facilitando la migracin de la fase voltil de los contaminantes, y por biodegradacin, ya que al incrementar la oxigenacin del suelo se va a estimular la actividad bacteriana. Biopila: Tambin conocidos como bioceldas. Son usadas para reducir las concentraciones de los constituyentes del petrleo en suelos excavados mediante la biodegradacin. Esta tecnologa involucra el apilamiento del suelo en celdas y la estimulacin de la actividad aerbica de los microorganismos dentro del suelo a travs de la aireacin y o adicin de minerales, nutrientes y humedad. Las biopilas son similares al landfarming, los dos mtodos son en la superficie del terreno, pero en las biopilas se utilizan sistemas de ingeniera que usan oxigeno, generalmente aire, para estimular el crecimiento y reproduccin de las bacterias aerbicas, las cuales degradan los constituyentes del petrleo absorbidos en el suelo. Mientras que los landfarmig son aireados por labrado o arado, las biopilas son aireadas mas a menudo forzando aire a moverse por inyeccin o extraccin a travs de ranuras o tuberas perforadas en toda la pila. El proceso de biodegradacin empieza con la mezcla de los residuos aceitosos o suelos contaminados con la tierra del sector dispuesto para el tratamiento, previa caracterizacin fsico-qumica y microbiolgica del suelo, y posterior adicin de nutrientes fundamentales para la estimulacin del crecimiento bacteriano nativo, como el Nitrgeno, Fsforo y Potasio.

6.2. Bioremediacin de Ultisoles

Se ha evaluado la efectividad de varios productos comerciales formulados para la biorremediacin de sitios contaminados con hidrocarburos de petrleo, en combinacin de dichos productos y un fertilizante agrcola en una vegetacin pantanosa contaminada con petrleo crudo a una concentracin de aproximadamente 30% y encontraron que entre los diferentes tratamientos el mejor fue el fertilizante agrcola, pero tambin el producto surfactante ligero con nutrimentos funcion relativamente bien. 67

El remediador aplicado consiste en una formulacin a base de biomasas vegetales que combina diferentes partes areas de plantas en proporciones especficas que suministran nutrimentos, particularmente nitrgeno, a los procesos de biorremediacin. Adems del contenido de nitrgeno y otros nutrimentos, las biomasas vegetales actan mejorando la estructuracin del desecho, al incrementar la porosidad en el desecho y por ello el intercambio de oxgeno. Todas estas caractersticas favorecen el proceso de biodegradacin de los componentes saturados y aromticos de un crudo, cuya dosis de aplicacin del producto vara en funcin de la concentracin del crudo en el desecho. Este producto ha sido aplicado exitosamente en reas sensibles como los ultisoles, para restaurar suelos altamente meteorizados que han sido afectados por derrames de crudo. Adems de la biodegradacin de los componentes saturados y aromticos, los productos remediadores actan como un mejorador orgnico, restaurando el equilibrio ecolgico del suelo al favorecer el desarrollo de la cobertura vegetal. Una vez aplicado, el producto se mezcla por medio de maquinarias en los primeros horizontes del suelo, ajustando el porcentaje de humedad del suelo a un 60 % de la capacidad de campo. La aplicacin del producto remediador no slo se limita a la recuperacin de suelos impactados por crudo, al mejorar los procesos de biodegradacin, sino que se aplica al manejo de desechos durante la perforacin, conocidos como ripios base aceite, y a la recuperacin de reas, mediante el tratamiento orgnico, como es el caso de las arenas petrolizadas. Despus de las labores de recoleccin del crudo, siempre queda un remanente de arenas petrolizadas. stas son apiladas y tratadas con el remediador al 3%, previa evaluacin, a nivel de laboratorio, de su efectividad. El producto remediador es aplicado para mejorar la calidad orgnica. La mejora de las arenas desde el punto de vista biolgico permite su disposicin efectiva, establecindose una rpida cobertura vegetal propia del ecosistema caracterstico de regiones con este tipo de suelos. Se han observado resultados del efecto positivo del uso del remediador sobre algunas propiedades qumicas de las arenas petrolizadas. Se observa un incremento del contenido de materia orgnica, nitrgeno y fsforo total; as como una disminucin de la relacin de adsorcin de sodio, pH, y contenido de aceites y grasas. Estos cambios, generados por la adicin del producto remediador permiten la restauracin efectiva de estas reas.

6.3. Bioremediacion de Inceptisoles

Los suelos que corresponden al orden Inceptisoles, incluyen suelos de regiones subhmedas y hmedas, que no han alcanzado a desarrollar caracteres diagnsticos de otros ordenes, pero muestran evidencias de desarrollo progresivo, son suelos inmaduros, con escasa expresin morfolgica. Los parmetros edficos que determinan y condicionan la eleccin de un suelo para "landfarming" son: textura, estructura, pH, temperatura, porosidad, velocidad de percolacin, capacidad de retencin de agua, infiltracin, contenido de oxgeno, contenido de macro y micronutrientes, humedad. La textura del suelo incide en la aireacin, en su capacidad de retencin de agua, porosidad y velocidades de percolacin e infiltracin. Los suelos dicho orden, pueden 68

ser predominantemente limo-arcillosos en superficie y netamente arcillosos en profundidad, poseen buen drenaje. La temperatura del suelo, recomendada para la biodegradacin del petrleo se encuentra entre 20 y 30 C; si se utiliza la poblacin microbiana autctona del suelo se puede lograr que los microorganismos involucrados posean estrategias adaptativas de sobrevivencia para soportar la variabilidad climtica de su hbitat natural. La estructura, textura y materia orgnica del suelo son factores determinantes de la porosidad del mismo, entonces estos parmetros deber ser determinados antes, durante y luego de finalizado el biotratamiento. Otros nutrientes como zinc, calcio, hierro, molibdeno, azufre, etc., llamados micronutrientes, por sus pequeas concentraciones, tambin deben controlarse y suministrarse en caso necesario. El laboreo agrcola debe iniciarse previo a la incorporacin del residuo, con el objeto de descompactar, airear y homogeneizar el material de las capas superficiales, de modo que pueda aumentarse mecnicamente el nmero de poros. Para este tipo de suelos se hace posible utilizar uno o varios mtodos a la vez para recuperar la actividad microbiolgica del suelo, pues es necesario que en las temporadas secas donde se evidencia la compactacin del terreno, se haga riego del terreno y en las temporadas de lluvias se realicen calicatas exploratorias y laboreo agrcola con herramientas convencionales. Las celdas Landfarming, la bioaumentacin y la fitorremediacion son mtodos que se pueden utilizar en este tipo de casos, en algunos, se hace necesaria la utilizacin de los tres mtodos, lo que depende del dao (antecedentes del suelo), de las caractersticas climticas de la zona y de la actividad microbiolgica del suelo, estudiada con anterioridad.

6.4. Biorremediacin de Aridisoles y Entisoles

El tratamiento para la recuperacin de reas de este tipo consiste en la aplicacin de procesos de biorremediacin y Landfarming in situ, en un trabajo artesanal y manual, efectuando una bioaumentacin con bacterias autctonas, con el objeto de acelerar el proceso de degradacin del contaminante. De esa manera se aumentan las posibilidades de mantener las caractersticas biticas de la tierra, y se reducen los tiempos para la resolucin del problema. Durante los primeros das se realizan las siguientes actividades: Extraccin de muestras para determinar la calidad del hidrocarburo y la concentracin presente del mismo. Se retiran las tierras afectadas, impregnadas, tratando las mismas en la cancha de Landfarming de una empresa asentada en el lugar. Se remueve el suelo en forma manual, evitando alterar la flora nativa. Se agrega material granular para asegurar que la porosidad se mantenga, para as crear cmaras de oxgeno indispensables para el metabolismo de las bacterias (aerbicas). 69

Se controla la humedad hasta obtener la humedad ideal, y se siembran bacterias hidrocarburolticas y nutrientes en el suelo afectado. Para mantener el proceso degradativo, se remueve el suelo peridicamente y se controla la humedad del mismo.

6.5. Biorremediacion de Alfisoles y Molisoles

Los alfisoles y molisoles son los tipos de suelos con mayor fertilidad natural. La Bioestimulacin es una buena alternativa ya que en ella es indispensable el acondicionamiento o ajuste de los principales factores abiticos, tales como pH, humedad, aireacin y nutrientes, entre otros que favorecen o estimulan el desarrollo de poblaciones bacterianas. Son muchos los estudios conducidos tanto a escala laboratorio como en campo que demuestran la efectividad del proceso de biodegradacin bajo la modalidad de bioestimulacin, sin necesidad de aadir preparaciones biolgicas, o usar la bioaumentacin. Esta tcnica ha sido aplicada con xito en este tipo de suelos y se han demostrado sus bondades en comparacin con la bioaumentacin en diversos desechos de la industria petrolera, tales como ripios de perforacin, suelos contaminados por derrames de productos y crudo, lodos de fondo de tanques y saneamiento de fosas. Su aplicacin ha sido realizada como Landfarming, referida a la biodegradacin del contaminante en la capa arable del suelo; composting aerbico, formando pilas de hasta 3 m de altura y 2 m de ancho con incorporacin de mejoradores orgnicos y tratamiento in situ, como en el caso de fosas, en las cuales se aplica el biotratamiento o biorremediacin dentro de la misma, sin necesidad de remover y extraer el desecho para tratarlo en otra rea.

6.6. Biorremediacin de Andisoles

A este tipo de suelos se les puede aplicar la tcnica llamada bioelectrocintica. Se combina la aplicacin de la corriente elctrica directa con alguna de las tcnicas de biorremediacin. Se busca estimular la biodegradacin de contaminantes orgnicos al introducir nutrientes y bacterias dentro del suelo, de manera que el campo elctrico desorbe los contaminantes incrementando su disponibilidad para que los microorganismos los incorporen a su metabolismo, o bien sean estabilizados como resultado de reacciones qumicas entre el contaminante y productos metablicos como el sulfuro y metales divalentes (Maini y Sharman 1999, Gent y Bricka 2001). Esta modificacin ha sido probada con molculas orgnicas sintticas como TNT, BPC y pesticidas, entre algunos otros (Marks et al. 1994) y metales pesados como cobre (Maini y Sharman 1999). En este grupo se encuentran los procesos de "lasagna", en los cuales se intercalan estratos de materia orgnica para absorber los contaminantes que se liberaron del suelo y que migran por accin del campo elctrico. Una vez que los contaminantes (generalmente orgnicos) se encuentran en la zona de materia orgnica, se inicia la biodegradacin de los mismos en esta zona.

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7. NORMATIVIDAD

La legislacin sobre contaminacin del suelo no se encuentra de forma especfica en una Ley o Decreto de orden nacional, se tienen normas de mbito regional o local (Resoluciones por parte de las Corporaciones Autnomas Regionales), esto se debe principalmente a que el recurso del suelo necesariamente hace parte fundamental de los ecosistema terrestres, por lo tanto no se hace referencia exclusiva a la contaminacin del suelo como tal, sino que generaliza a la proteccin de los recursos naturales. En la Constitucin Nacional de 1991 se presentan 17 artculos relacionados con la proteccin, conservacin, control y mejoramiento de los recursos naturales. De forma especfica sobre el suelo se menciona en los artculos 360, 361 y 366, a los cuales se refiere la corte constitucional. El cdigo penal sanciona los delitos en contra de los recursos naturales en los artculos 242 al 247. Especficamente el articulo 247 se refiere a la sancin que se aplica a quien por contaminacin ambiental ilcitamente, incurrir, sin perjuicio de las sanciones administrativas a que hubiere lugar y siempre que el hecho no constituya otro delito, en prisin de uno a seis aos y multa de cincuenta mil a dos millones de pesos. En la ley 23 de 1997 se relacionan aspectos como la prevencin y control de la contaminacin del medio ambiente, mejoramiento, conservacin y restauracin de los recursos naturales renovables, determinando como vienes contaminables el aire, el agua y el suelo. Esta ley define como contaminacin a la alteracin del medio ambiente por sustancias o formas de energa puestas all por la actividad humana o de la naturaleza, en cantidades, concentraciones o niveles capaces de interferir con el bienestar y la salud de las personas, atentar contra la flora y la fauna, degradar la calidad del medio ambiente o afectar los recursos de la nacin o de particulares. Tambin define Contaminante como todo elemento, combinacin de elementos o forma de energa que actual o potencialmente pueda producir alguna o algunas de las alteraciones ambientales descritas en la definicin de contaminacin. En el Cdigo Nacional de Recursos Naturales Renovables y de Proteccin al Medio Ambiente (Decreto 2811 de 1974), en sus artculos relacionados con el medio ambiente, especficamente con el recurso suelo, se tienen los siguientes artculos: Artculo 8. Se consideran factores que deterioran el ambiente, entre otros: La degradacin, la erosin, el revenimiento de suelos y Las alteraciones nocivas de la topografa Artculos 182 al 186 . Relacionado con el uso y conservacin de los suelos Artculos 324 al 326 Relacionados con los distritos de conservacin de suelos. 71

7.1. Reparacin e indemnizacin Si los demandantes se sitan en el derecho civil comn como en el derecho ambiental o el contencioso administrativo, los perjuicios que reconozcan los tribunales y ocasionen la compensacin, han de ser actuales, directos y ciertos, cualquiera que sea la intensidad de los mismos.10 Las posibles respuestas a la reparacin ambiental pueden ser las siguientes: La Adopcin de Reglamentos. Buscan poner a prueba la responsabilidad financiera de aquellos que con su actividad econmica pueden poner en riesgo el medio ambiente. Fondos de Compensacin. Constituidos de manera particular o mixta entre el gobierno y los particulares, precaviendo los costes en que se pudiera llegar a incurrir por la restauracin ambiental, mientras se determina la responsabilidad legal o en los eventos en que no se pudiera determinar el responsable. Adhesin a Convenios Internacionales. Para buscar tanto la prevencin como la unificacin normativa de todos aquellos reglamentos que regulan el caso petrolero. Seguros Ecolgicos. Por medio de los cuales se traslada la responsabilidad a la aseguradora, son de importancia si se impone de manera obligatoria para las actividades de alto riesgo o que puedan considerarse como peligrosas como la actividad petrolera. Al hablar de prevencin y reparacin en materia petrolera, es necesario fijar la atencin en el Sistema de Prevencin y Atencin de desastres, pero especialmente en le Plan nacional de contingencia contra derrames de hidrocarburos, derivados y sustancias nocivas en aguas marinas, fluviales y lacustres adoptado por el Gobierno Nacional mediante el decreto 321 de 1999, que constituye el instrumento rector del diseo y realizacin de actividades dirigidas a prevenir, mitigar y corregir los daos ocasionados por derrames de hidrocarburos, buscando una nica lnea de accin. El decreto 321 es un esfuerzo de coordinacin institucional que busca atender este tipo de emergencia a travs de tanto en el sector pblico como privado, bajo criterios unificados. En cuanto a reglamentacin se encuentran diversos cuerpos normativos, como es le caso del decreto 1895 y 1973 del artculo 95, por el cual se dictan normas de explotacin y exploracin petrolera 11. El decreto 1945 y 1984 fija los estndares y las normas a los se deben someter los vertimientos, normalmente asociados a la produccin.
10 11

Contaminacin y Seguro 5 Congreso mundial del Seguro. Mapfre.1975.p.199. Se debe mencionar que el Art.95 del decreto en mencin dispone que: Los operadores responsables de cualquier tipo de contaminacin, removern a su costa de la zona afectada cualquier material contaminante. El Ministerio podr suspender de plano las operaciones de perforacin, produccin, transporte o almacenamiento, cuando se compruebe que se han violado las normas consagradas en este capitulo.

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De acuerdo con el Art. 2 de la ley 491 de 1999 en Colombia el seguro ecolgico tendr por objeto amparar los perjuicios econmicos cuantificables producidos a una persona determinada como parte de la consecuencia de daos al ambiente y a los recursos naturales, en los casos de responsabilidad civil excontractual, cuando tales daos hayan sido causados por un hecho imputable al asegurado siempre y cuando no sea producido por un acto meramente potestativo o causado con dolo o culpa grave; o en los casos de los seguros reales como consecuencia de un hecho accidental, sbito e imprevisto de la accin de un tercero o por causas naturales. La determinacin del dao a dispuesto la ley 491/99 Art.6 donde se necesita la certificacin sobre la ocurrencia y cuanta por parte de la autoridad ambiental correspondiente. En los eventos en que el valor amparado no cubra la cuantia del dao, quien fuere el causante del hecho deber responder con su propio patrimonio por todos los daos o perjuicios causados en exceso (Art.8 L491/99). Las voladuras de oleoductos, hurtos y atentados terroristas que ocasionen derrames no son actividad petrolera, pues en sentido estricto, el Estado no ha creado el riesgo que origino el dao. Por tal motivo, una responsabilidad ambiental por actos terroristas no es imputable, toda vez que el dao no ha sido ocasionado por este sino por un tercero, lo que constituir una causa extraa.

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Regin

Orinoqua Se encuentra ubicada en la Megacuenca sedimentaria entre el escudo de la Guayana el flanco de la cordillera Oriental

Amazonia Hace parte de la extensa Megacuenca sedimentaria desarrollada entre el Escudo de la Guayana y el flanco este de la Cordillera Oriental.

Ubicacin

Pacfico Comprende una franja larga y estrecha entre el flanco occidental de la cordillera Occidental hasta la lnea dela costa, desde la frontera del Ecuador en el sur hasta la frontera con Panam en el norte

Caribe Comprende el Golfo de Uraba en el suroccidente hasta la pennsula de la guajira hasta el nororiente. Incluye el bloque tectnico de la Sierra nevada de Sta Marta, la depresin de la Momposina y la prte baja de las cuencas y valles aluviales de los ros Magdalena, Sin y San Jorge

Andina La cordillera Central y la cordillera Occidental desde el Nudo de los Pastos en direccin sur norte pasando por la Hoz de Minam en la cuenca de Pata y hasta las se prolonga hasta las planicies dela regin Caribe. En la cordillera desde el Valle Magdalena por el occidente y los llanos Orientales por el oriente su litologa la conforman los macizos de Garzn, Quetame y Bucaramanga. 28 - 0 en los nevados Montaa tropical- selva tropical Basico cercano a la neutralidad 65% aprox Andisoles Molisoles -Alfisoles OxisolesUltisoles

T promedio(C) Clima pH Humedad relativa Suelos mas predominantes Suelos menos predominantes

27 Lluvioso <5 >75% Oxisoles Ultisoles

28 Clido hmedo-muy hmedo 5.5 - 3.7 84 - 88% Oxisoles - Ultisoles Entisoles - Inceptisoles

26,4 Clido - Isotermal 4.5 - 5.5 88.3% Inceptisoles-Entisoles Andisoles(montaas), Vertisoles - Ultisoles, Oxisoles - Histosoles

27,6 Clido > 5.6 80% Alfisoles - Molisoles Entisoles -Inceptisoles (62%) Oxisoles - Ultisoles Land Farming+ Bioestimulacion Hidrolabado + Bioveting o Biopilas o Bioaumentacion (insitu) Adicin de producto remediador (in-situ)

Tipo de bioremediacin

Hidrolabado + Bioveting o Biopilas o Bioaumentacion (insitu)

Hidrolabado + Bioveting o Biopilas o Bioaumentacion (insitu) Adicin de producto remediador (in-situ)

Land Farming+ Bioaumentacin + Fitorremediacin

Bioelectrocintica

TABLA RESUMEN

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9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

En general, la contaminacin de suelos por productos, compuestos o desechos orgnicos de la industria petrolera pueden ser tratados y recuperados ecolgicamente con la biorremediacin, basada en la estimulacin de los microorganismos para adecuacin de los factores abiticos.

As mismo podra indicarse que en suelos de textura contrastantes como los arcillosos y arenosos, deben emplearse acondicionadores orgnicos que permitan mejorar la estructura de la mezcla para favorecer as la biorremediacin.

Tanto los tratamientos ex-situ como in-situ son una buena alternativa para conseguir degradar el contaminante, siendo los tratamiento ex-situ los que mejores resultados presentan, ya que las variables pueden ser mejor controladas, es un tratamiento costoso a causa del transporte del terreno contaminado a la zona de tratamiento. El tratamiento in situ es el mas recomendado para suelos permeables cuando la contaminacin afecta a los horizontes subsuperficiales. En cualquier tratamiento de biorremediacin la velocidad de descomposicin por los organismos va a depender de su concentracin, de determinadas caractersticas del suelo (disponibilidades de oxgeno y de nutrientes, pH, humedad y temperatura) y de la estabilidad del contaminante. Para definir el tratamiento mas apropiado es necesario un estudio previo del las caractersticas edficas del suelo y el nivel de contaminacin que presenta, con el fin recuperar sus caractersticas biolgicas y morfolgicas.

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10. GLOSARIO A Abitico: Que carece de vida. Se dice de los factores no vivos que conforman un ecosistema, tales como el clima, el suelo, etc. Actinomicetos: Grupo de bacterias de aspecto bacilar o filamentoso que segn el medio de desarrollo forman bacilos aislados o largos filamentos con aspecto de micelios fngicos, por lo que han sido considerados mucho tiempo como hongos. Agua de escorrenta: son las aguas que caen y corren sobre los techos de los edificios, en calles, aceras y en cualquier otra superficie impermeable durante un evento de lluvia. Estas aguas en lugar de introducirse en el suelo, corren sobre las superficies y llegan a los drenajes pluviales. En el Recinto estos drenajes descargan en los terrenos y cuerpos de agua cercanos sin ningn tratamiento. Alfana: Silicato de almina hidratado, que tiene el brillo y transparencia de la cera. Aluvial: Se aplica al terreno que se ha creado por aluvin de materiales arrastrados por las corrientes de agua. Antropognico: se refiere a los efectos, procesos o materiales que son el resultado de actividades humanas a diferencia de los que tienen causas naturales sin influencia humana. Normalmente se usa para describir contaminaciones ambientales en forma de desechos qumicos o biolgicos como consecuencia de las actividades econmicas, tales como la produccin de dixido de carbono por consumo de combustibles fsiles Asfaltenos: son una familia de compuestos qumicos orgnicos, resultan de la destilacin fraccionada del petrleo crudo y representan los compuestos ms pesados y por tanto, los de mayor punto de ebullicin. Aunado: unificado, aliado, unido

B Bacterifago: Del agente o virus que infecta y se reproduce en el interior de las bacterias provocando su lisis (Destruccin o disolucin de clulas o bacterias) Bacterias Gram: Forma de clasificacin de bacterias. Estas se pueden dividir en dos grupos: Gram positivo (+) y Gram negativo (-). Esta divisin se basa en la capacidad de reaccin de las bacterias frente al mtodo de coloracin, desarrollado por Christian Gram en 1884. Las que se tien con el colorante son Gram + y aquella que no toman el colorante son Gram -.

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Bacterias Obicuas: Son bacterias que se presentan en todos los hbitats y debido principalmente a su gran adaptabilidad metablica, pueden sobrevivir en muchos medios que no permitiran en ningn tipo de vida. Basalto: Roca gnea de grano fino y composicin mfica, es decir, con un alto contenido de hierro. Se compone mayormente de piroxeno yolivino, conteniendo cantidades menores de feldespato y cuarzo. Biodisponibilidad: Es la fraccin ingestada de un nutriente que es disponible para un organismo. Es decir, que se refiere al porcentaje de los compuestos que dicho organismo consume y que pueda asimilar y utilizar en sus funciones biolgicas normales. Biogeoqumico: Ciclo que se refiere al movimiento de cantidades masivas de carbono, nitrgeno, oxgeno, hidrgeno, calcio, sodio, sulfuro, fsforo y otros elementos entre los componentes vivientes y no vivientes del ambiente (atmsfera y sistemas acuticos) mediante una serie de procesos de produccin y descomposicin. Bitica: Propio de los seres vivos

C Cmbico: Horizonte arcilloso, con menos arcilla que el arglico y el espdico, formado por alteracin. Cementacin: Trabazn slida de fragmentos clsticos sueltos mediante un cemento o pasta ptrea, generalmente arcillosa, ferruginosa, calcrea o silcea, que une los elementos algenos de las rocas clsticas, tales como areniscas, conglomerados, brechas, pudingas, etc. Compostaje: Ciclo aerbico (con alta presencia de oxgeno) de descomposicin de la materia orgnica. Cracking: Desintegracin del petrleo que consiste en la ruptura o descomposicin de hidrocarburos de elevado peso molecular, como los contenidos en las fracciones de alto punto de ebullicin del petrleo crudo, en compuestos de menor peso molecular, de punto de ebullicin ms bajo

D Desadsorcin: o desorcin. Es lo opuesto a la adsorcin, se trata de un fenmeno en el que las molculas adsorbidas abandonan la superficie del material adsorbente. Desbrozar: limpiar, despejar, descombrar Detoxificar: Proceso de eliminacin de sustancias txicas 77

Detrito: Material de meteorizacin y fragmentos rocosos de cualquier tipo. Los agentes mviles (por ejemplo, la solifluccin) los convierten en material mvil

E Edfico: Del suelo o relativo a l, especialmente en lo que se refiere a las plantas Edafognesis: Proceso de formacin y evolucin de un suelo Eluviacin: Proceso de arrastre de las sustancias solubles o coloidales del suelo que lleva a la formacin de horizontes eluviales, pobres en tales sustancias y designados por la letra A. Los productos arrastrados, se acumulan en el horizonte B o de acumulacin Epipedon crico: suelos que en su mayora solamente tiene un horizonte superficial claro, de poco espesor y generalmente pobre en materia orgnica Esmectita: filosilicatos, son eminentemente plsticas esto es consecuencia de su morfologa laminar, a su pequeo tamao de partcula y alta capacidad de hinchamiento Espdico: Horizonte con acumulacin de compuestos amorfos de materia orgnica y sesquixidos Exudado radicular: Se extienden todos aquellos compuestos orgnicos, liberados al medio por races de plantas sanas e intactas. Bajo condiciones no estriles de trabajo, se hace difcil establecer si los compuestos detectados son realmente excretados por las races, o son el resultado de la actividad de microorganismos presentes en el suelo o medio de cultivo.

F
Fitodegradacin: Consiste en el metabolismo de contaminantes dentro de los tejidos de la planta, a travs de enzimas que catalizan su degradacin Fitoextraccin: Implica la captacin de contaminantes del suelo y su translocacin hacia los tejidos de la planta, que finalmente se cosechan y tratan. El Ni y el Zn son los metales absorbidos ms fcilmente Flanco: Cada una de las partes de un pliegue (ver definicin) a uno y otro lado del plano axial. Forneos: Forastero, extranjero Fosfolpidos: son molculas anfipticas, decir, tienen una regin apolar hidrfoba que repele el agua y una regin polar hidrfila que tienen afinidad por la misma Fotosintato: Carbohidratos y otros compuestos que se producen en la fotosntesis 78

G Geomembranas: Son geosintticos de mayor utilizacin para evitar la contaminacin de los suelos generados por rellenos sanitarios, residuos de la explotacin de minerales, lodos generados en la refinera del petrleo entre otros Gibsita: Mineral que se encuentra en suelos altamente meteorizados tales como Ultisoles y Oxisoles, y en circunstancias especiales, en Inceptisoles y Andisoles. Gramnea: Planta monocotilednea, de tallos cilndricos, huecos, con nudos llenos, hojas alternas y largas, con flores en espiga y granos secos.

H Haploidizacin: se refiere a los procesos naturales (excluyendo la erosin, por cuanto se reducen a extraer y exportar materiales edficos) Hidrocarbultica: Hidrofilco: que tiene afinidad con el agua Hidrfoba: sustancias repelidas por el agua, que no pueden tener contacto o mezclarse con ella. Hipertolerante: En este contexto se refiere a las planas que poseen caractersticas mltiples: crecimiento rpido, abundante biomasa, races profundas, fcil de cosechar y ser capaz de tolerar y acumular una amplia gama de metales pesados en sus partes areas. Holoceno: Es la ltima y actual poca geolgica del perodo Cuaternario. Comprende los ltimos 11.784 aos, desde el fin de la ltima glaciacin. Es un perodo interglaciar en el que la temperatura se hizo ms suave y la capa de hielo se derriti, lo que provoc un ascenso en el nivel del mar Horizonte A: Horizonte eluvial es la parte del horizonte A a la que el agua le ha arrebatado sus materias nutritivas. Horizonte B: Horizonte de alteracin de la roca madre a la vez que horizonte de acumulacin o iluvial. Hopanos: biomarcadores petrognicos tiles en el estudio de la evolucin de la degradacin del petrleo cuando se emplean microorganismos

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Intemperizado: Material que ha sido sometido a procesos de meteorizacin y/o erosin, es decir, que ha sufrido algn cambio, sea fsico o qumico de como era originalmente Isohipertrmico: Rgimen de temperatura mayor a 20C Isomesicos: Rgimen de temperatura de 10 a 13C

M Melanizacin: Es el proceso responsable de la coloracin oscura, ms o menos negra, que adquieren los horizontes A de los suelos. Es el resultado de la impregnacin de los restos orgnico en la masa del suelo. Mesfila: Bacteria que descompone la materia orgnica a temperaturas que oscilan entre 30 y 400C Meteorizacin: es la desintegracin y descomposicin de una roca en la superficie terrestre o prxima a ella como consecuencia de su exposicin a los agentes atmosfricos, con la participacin de agentes biolgicos. Mica: Minerales pertenecientes a un grupo numeroso de silicatos de almina, hierro, calcio, magnesio y minerales alcalinos caracterizados por su fcil exfoliacin en delgadas lminas flexibles, elsticas y muy brillantes, dentro del subgrupo de los filosilicatos Micelio fngico: Masa de hifas (elementos filamentosos cilndricos caractersticos de la mayora de los hongos. Estn constituidos por una fila de clulas alargadas envueltas por la pared celular que, reunidas, forman el micelio) Miscelas: Molculas lipolticas: Molcula orgnica de pequeo tamao que facilita el transporte de las grasas hacia las mitocondrias (con ello, se agiliza su metabolismo y degradacin). Montmorillonita: Mineral del grupo de los Silicatos, subgrupo Filosilicatos y dentro de ellos pertenece a las llamadas arcillas. Es un hidroxisilicato de magnesio y aluminio, con otros posibles elementos. Morfotpos: Especies que presentan varias formas, cada uno en los estados distinguibles

O Oleoflicos: Absorbente para capturar petrleo o sus derivados y repeler el agua. 80

Oligoelementos: Son bioelementos que se encuentran en cantidades pequesimas en los seres vivos y tanto su ausencia como una concentracin por encima de su nivel caracterstico puede ser perjudicial para el organismo Organofosforado: Grupo de qumicos usados como plaguicidas artificiales aplicados para controlar las poblaciones plagas de insectos Organometalicos: Compuestos en los que los tomos de carbono forman enlaces covalentes, es decir, comparten electrones Oxigenasa: Cualquier enzima que oxida un sustrato mediante la transferencia de oxgeno presente en el oxgeno molecular (O2, como en el aire)

P Pedognico: Percolacin: Se refiere al movimiento y filtracin de fluidos a travs de materiales porosos no saturados. Por ejemplo el movimiento de un solvente a travs de papel filtro (cromatografa) y el movimiento de petrleo a travs de una roca fracturada Peroxidasa: Tipo de enzimas muy extendidas en toda la escala filogentica. Pertenecen a la categora de las oxidorreductasas y segn el Comit de Nomenclatura de la Unin Internacional de Bioqumica y Biologa Molecular se clasifican con los nmeros EC 1.11. Perdico: Rgimen de humedad caracterizado porque las precipitaciones supren a las evapotranspiraciones todos los mese del ao. Pirofilita: Recurso compuesto principalmente por el mineral pirofilita, que contiene, adems, caolinita, alunita y cuarzo. Proteobacterias: son uno de los principales grupos de bacterias. Incluyen una gran variedad de patgenos, como Escherichia, Salmonella, Vibrio, Helicobacter, Neisseria gonorrhoeae y muchos otros Protoplasma: Es un citoplasma ms el ncleo. Se encuentran las protenas, entre otros componentes qumicos

R Radionucleidos: Elementos qumicos con configuracin inestable que experimentan una desintegracin radiactiva que se manifiesta en la emisin de radiacin en forma de partculas alfa o beta y rayos X o gama Ramnolpidos: Bacterias productoras de biosurfactantes involucrados en procesos de remocin de aceites y productos relacionados 81

Rizosfera: Parte del suelo inmediata a las races donde tiene lugar una interaccin dinmica con los microorganismos. Las caractersticas qumicas y biolgicas de la rizosfera se manifiestan en una porcin de apenas 1 mm de espesor a partir de las races.

S Sequias herrticas: Sesquixidos: Conjunto de hidratos de hierro y de aluminio, generalmente coloidales, que se presentan bajo una forma mas o menos libre y mvil, en el suelo Sistema radicular: Se denomina as al conjunto de races Sorcin: Retencin de una sustancia por otra cuando estn en contacto; incluye las operaciones de absorcin, adsorcin, intercambio inico y dilisis

T Termfilo: Se aplica a organismos vivos que pueden soportar condiciones extremas de temperatura relativamente altas, por encima de los 45 C, o relativamente bajas Terpenoide: Diversas clases de compuestos orgnicos similares a los terpenos. Pueden verse como formados por unidades de 5-carbono isopreno, ensambladas y modificadas de muchas maneras diferentes, siempre basadas en el esqueleto del isopentano

U dico: Regimen de humedad caracterstico de los suelos de climas con una distribucin regular de la pluviometra a lo largo del ao. En verano llueve lo suficiente para que el aua almacenada en el suelo iguale o supere la evaporacin potencial. Si hay sequas, son cortas y muy poco frecuentes. stico: Rgimen de humedad del suelo intermedio entre los regmenes ardico y dico, y que es caracteristicos de algunas regiones subhumedas o semiridas, o de las regiones tropicales y subtropicales del clima monznico

V Vacuolas: rgano celular presente en plantas y en algunas clulas protistas eucariotas. Las vacuolas son compartimentos cerrados que contienen diferentes fluidos, tales como agua o enzimas, aunque en algunos casos puede contener slidos 82

Vermiculita: Mineral formado por silicatos de hierro o magnesio, del grupo de las micas.

X Xenobitico: Se aplica a los compuestos cuya estructura qumica en la naturaleza es poco frecuente o inexistente debido a que son compuestos sintetizados por el hombre en el laboratorio

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11. ANEXO A PRINCIPALES OLEODUCTOS EN COLOMBIA

11.1 TRANSPORTE DEL CRUDO

FIGURA A1. Esquema del transporte del petrleo desde el campo petrolfero hasta el puerto martimo (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009)

El paso inmediato al descubrimiento y explotacin de un yacimiento es su traslado hacia los centros de refinacin o a los puertos de embarque con destino a la exportacin. Para ello se construye un oleoducto, trabajo que consiste en unir tubos de acero a lo largo de un trayecto determinado, desde el campo productor hasta el punto de refinacin y/o de embarque. La capacidad de transporte de los oleoductos vara y depende principalmente del dimetro de la tubera. Es decir, cuanto ms grande sea el dimetro, mayor la capacidad. En Colombia hay oleoductos desde 4 hasta 36 pulgadas de dimetro.

Estas lneas de acero pueden ir areas en puentes colgantes y sobre la superficie o 84

bajo tierra y atraviesan la ms variada topografa. En Colombia, las tuberas bajo tierra generalmente van enterradas a 1,20/2,0 metros de profundidad. En la parte inicial del oleoducto una estacin de bombeo impulsa el petrleo y, dependiendo de la topografa por donde ste pase, se colocan estratgicamente otras estaciones denominadas de reimpulso o refuerzo, necesarias para que le permitan superar sitios de gran altura, como las cordilleras en Colombia, y transportar el petrleo hasta la estacin terminal.

Los oleoductos disponen tambin de vlvulas de seccionamiento y vlvulas de choque que permiten controlar el paso del petrleo entre la estacin inicial y terminal y atender oportunamente situaciones de emergencia.

El gas natural se transporta en idnticas circunstancias, pero en este caso la tubera se denomina gasoducto. Hay ductos similares que cumplen funciones especf icas: poliductos para gasolinas, A.C.P.M. y otros derivados; propanoductos para gas propano, combustoleoductos para combustleo, etc.

Los buque-tanques son enormes barcos dotados de compartimentos y sistemas especiales diseados para el transporte martimo de petrleo crudo, gas, gasolina o cualquier otro derivado. Son el medio de transporte ms utilizado para el comercio mundial del petrleo. La capacidad de cada una de estas naves vara segn su tamao, el servicio que preste y la ruta que cubra. Usualmente transportan cientos de miles de barriles (ECOPETROL).

La operacin de cargue puede tardar de 12 horas a dos das, contando el amarre inicial y el desamarre final del buque en el sitio de cargue. En ella intervienen, desde las autoridades portuarias y ambientales de la Nacin donde se realiza la operacin y los representantes de las compaas que venden y compran el crudo, hasta el capitn del buque y los buzos de puerto que conocen las tuberas por donde se transporta el petrleo en el lecho marino.

11.2. PRINCIPALES OLEODUCTOS DEL PAS Los oleoductos ms importantes son: Oleoducto Cao Limn Coveas. Tiene 770 kilmetros de longitud y a travs de l se transportan los crudos producidos en el campo Cao Limn (Arauca). Oleoducto de Alto Magdalena. Transporta los crudos que se obtienen en el Valle Superior del Magdalena. 85

Oleoducto Central de los Llanos.

Oleoducto Central S.A. (Ocensa). Con 790 kilmetros de longitud, transporta fundamentalmente los crudos del piedemonte llanero (Cusiana Cupiagua) hasta el terminal martimo de Coveas. Oleoducto de Colombia. Tiene 481 kilmetros y conecta la estacin de Vasconia con el puerto de Coveas.

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FIGURA

A2. Infraestructura petrolera ECOPETROL S.A, 2009).

de

Colombia

Oleoductos

(Fuente:

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FIGURA A3. Oleoducto Cao Limn Coveas (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009).

FIGURA A4. Oleoducto del Alto Magdalena (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009). 88

FIGURA A5. Oleoducto Central de los Llanos (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009).

FIGURA A6. Oleoducto Ocensa (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009). 89

FIGURA A7. Oleoducto de Colombia (Fuente: ECOPETROL S.A, 2009).

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12. BIBLIOGRAFA

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