Fac. Cs. Qs. Dpto. De FARMACIA LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA II Q.F.

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BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LICENCIATURA: QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

ÁREA ESPECÍFICA DE: FARMACIA

NOMBRE DE LA ASIGNATURA: CÓDIGO: FECHA DE ELABORACIÓN: NIVEL EN EL MAPA CURRICULAR: TIPO DE ASIGNATURA:

FARMACOLOGÍA II FAR 532L MARZO 2001 FORMATIVO CIENCIA DISCIPLINARIA

PROFESORES QUE PARTICIPARON EN SU ELABORACIÓN: DC. ISABEL MARTINEZ GARCIA MC. DANIEL ILHUICAMINA LIMON PEREZ DE LEON MC. FELIX LUNA MORALES

HORAS DE TEORÍA:

HORAS PRÁCTICA: 2

CRÉDITOS:

Fac. Cs. Qs. Dpto. De FARMACIA LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA II Q.F.B

ÍNDICE

PRÁCTICA No.1 NEUROTRANSMISIÓN…………………………. 1 PRÁCTICA No. 2 EVALUACIÓN DE DROGAS ANSIOLÍTICAS… 3 PRÁCTICA No. 3 ANTAGONISMO FARMACOLÓGICO EN TEJIDO AISLADO…………………………………………………. 11 PRÁCTICA No. 4 ESTIMULANTES SNC…………………………… 15 PRÁCTICA No. 5 EFECTO DEL ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN EL TIEMPO DE SANGRADO……………………………………. 20 PRÁCTICA No. 6 ANTICONVULSIVANTES……………………….. 23 PRÁCTICA No. 7 ANALGESIA………………………………………. 29 PRACTICA No 8 EFECTOS DE LA ADMINISTRACIÓN DE ESTRÓGENOS SOBRE ÓRGANOS REPRODUCTORES……….. 32 PRÁCTICA No. 9 HIPOGLUCEMIANTES………………………….. 36

PRÁCTICA No.1 NEUROTRANSMISIÓN
INTRODUCCIÓN
En el estudio de la biología celular neuronal hemos visto que las neuronas utilizan dos tipos de canales para la comunicación intracelular: los canales de reposo que producen el potencial de reposo y los canales activados por voltaje que producen el potencial de acción. Ahora abordamos la transmisión sináptica, el proceso de comunicación entre las células, donde estudiaremos los dos tipos de canales adicionales: los canales en la unión íntima y los activados por ligandos. Durante el desarrollo individual, las neuronas establecen conexiones sinápticas muy específicas con otras neuronas. La percepción, la emoción y el aprendizaje se basan en la especificidad de las conexiones sinápticas que se realizan entre las neuronas durante su desarrollo. Una neurona realiza un promedio de 1.000 conexiones sinápticas y recibe muchas más. Por lo tanto, el encéfalo humano, que contiene alrededor de 1011 neuronas, establece 1014 conexiones. Afortunadamente, mediante el examen detallado de unas cuantas sinapsis, podemos alcanzar una comprensión global de toda la transmisión sináptica general. La sinapsis es el lugar de interacción entre dos células, está constituida por tres elementos: la terminal presináptica, la terminal postsináptica y una zona de aposición (hendidura sináptica). En virtud de sus zonas de aposición, las sinapsis se clasifican en dos grupos principales: eléctrica y química. En la sinapsis eléctrica la hendidura sináptica es pequeña, y la corriente generada por el potencial de acción en la neurona presináptica pasa directamente hacia la célula postsináptica gracias a los canales de unión especializados, denominados canales de la unión íntima. En la sinapsis química la hendidura sináptica es mayor y no existe éste tipo de canales. Un cambio en el potencial de membrana en la célula presináptica conduce a la liberación de un transmisor químico desde la terminal presináptica. El transmisor químico difunde a través de la hendidura sináptica uniéndose a las moléculas receptor, situadas en la membrana celular postsináptica, abriendo los canales iónicos a través de los cuales para corriente. El receptor del transmisor puede clasificarse en dos grupos fundamentales, en virtud de cómo controle el receptor de un canal iónico de la célula posináptica. Uno de los tipos de Receptores forma una estructura común con un canal iónico que controla

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directamente. El segundo tipo, actúa directamente en el canal por medio del segundo mensajero y otras reacciones moleculares internas en la célula postsináptica. A su vez, a cada uno de estos grupos pertenecen múltiples tipos de receptores, debido a las diferentes combinaciones de las moléculas isomórficas. Ambos grupos de receptores pueden producir excitación e inhibición. El sentido de la acción sináptica dependerá de la interacción receptor-transmisor. No de las propiedades del transmisor, pues el mismo transmisor puede producir efectos diferentes dependiendo del subtipo receptorial con el que interactué. Como en el caso del glutamato, que es el transmisor químico encefálico excitador por excelencia, que produce diferentes acciones según el tipo de receptor glutametérgico al que se una. No obstante, a pesar de la pequeña cantidad de transmisores que hay, son capaces de producir una gran variedad de acciones sinápticas. Como consecuencia de la complejidad estructural y de la arquitectura molecular de las sinapsis químicas, pueden existir gran variedad de enfermedades debidas a la alteración de éste tipo de sinapsis.

OBJETIVO
Conocer los fenómenos eléctricos y químicos que favorecen o bloquean la neurotransmisión.

PROCEDIMIENTO Y CUESTIONARIO
Empleando el programa interactivo

NEURON, explora Y RESPONDE :

1. La participación de los canales iónicos en la generación del potencial de acción 2. El mecanismo de los canales iónicos sensibles a ligando 3. El mecanismo de los canales iónicos sensibles a voltaje 4. El origen del potencial de membrana en reposo 5. El potencial de acción postsináptico inhibitorio 6. El potencial de acción postsináptico excitatorio 7. El mecanismo de libración del neurotransmisor 8. El mecanismo de segundos mensajeros 9. El mecanismo de recaptación de neurotransmisor 10. Como sale calcio intracelular.

Investigación

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Explica y esquemática las secuencias de sus efectos farmacologicos y que utilidad tendria. Consideras que ayudaría a mantener la presión arterial en un paciente que tenga hipertensión arterial. C) Que diseño experimental realizarías para estudiar un fármaco que bloquea la recaptura de Dopamina.A) Realiza un esquema en donde expliques e indiques como se incrementa el calcio. cuales serian las consecuencias sobre los niveles de noradrenalina y sus efectos periféricos. K) Se trata de un fármaco que bloquea los receptores µi y µ2 . J) Si bloqueamos los receptores α2 presináptico. 3 . H) Que utilidad tendría una fármaco que bloquea la enzima biotransformante de la acetilcolina (anticolinesterasico). B) Se trata de una fármaco que incrementa la salida de calcio intracelular. i) Explica las diferencias farmacologicas y farmacoterapueticas de un inhibidor de la acetilcolinesterasa reversible de uno no reversible. D) Que utilidad tiene un fármaco que bloquea la recaptura de Noradrenalina E) Que utilidad clínica tiene un fármaco que bloquea la recaptura de GABA. F) Explica los efectos periféricos de un fármaco que bloquea los receptores muscarinicos.

9 Conocimiento de la administración subcutánea e intraperitoneal . de sudación. taquicardía.9 % 4 . Actualmente es necesario que se administre una serie de fármacos para contrarrestar la ansiedad. agorafobia y otros tipos de fobia. Además la administración de algunas benzodiacepinas o nuevos ansiolíticos en algún núcleo del SNC nos daría información sobre la participación de diferentes núcleos en el estado de ansiedad. como es el caso. 2 EVALUACIÓN DE DROGAS ANSIOLÍTICAS OBJETIVO Demostrar el efecto ansiolítico del diacepam en el modelo de Vogel . En un estado de ansiedad ocurren diversos cambios fisiológicos en el organismo. Demostrar el efecto ansiolítico del diacepam en el modelo elevado en cruz INTRODUCCIÓN En el hombre los desórdenes mentales están asociados con el estrés. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material ƒ ƒ 4 jeringas de 1ml Una balanza para roedores Fármaco: Diacepam (VALIUM 10 mg/2ml ) Soluciones: Solución Salina Isotónica NaCl al 0. ira. alegría. temor. CONOCIMIENTOS PREVIOS. trastornos psico-motores y trastornos de pánico. Se sabe que al año se produce 8000 toneladas de benzodiacepinas por lo que son necesarios modelos experimentales para evaluar los nuevos ansiolíticos. 9 Conocimiento de los fármacos ansiolíticos. tristeza.PRÁCTICA No. 9 Conocimiento del manejo y cuidado de los animales de laboratorio. la ansiedad y la depresión.

0. 5 .9. En la parte superior del cubo se encuentra un bebedero que esta conectado a un electrodo de referencia (corriente).7 mA/1seg que es regulado mediante un generador que a su vez se encuentra conectado a un contador de pulsos.8. 0. 0.7. 6. 1. 25 cm de ancho y 25 cm de altura además de que cuenta con un cubo posterior de 8 cm de ancho por 11 cm de altura con un soporte de 8cm de largo formando un ángulo de 60º. Otro electrodo se conecta a una rejilla que esta localizada en la parte inferior de la caja.5. 0.0 mA). Cuando el roedor sorbe agua cada 20 veces recibe un choque eléctrico de 0.MODELO DE VOGEL Este modelo esta constituido por una caja de acrílico de 33 cm de largo. eventos y a una medidor de voltaje (0.

DIAGRAMA DE TRABAJO PARA LA ADMINISTRACIÓN SISTÉMICA DE ANSIOLÍTICOS (MODELO DE VOGEL) SUJETOS DE EXPERIMENTACIÓN CONTROL SUPRESIÓN DE AGUA X 48 HRS PROBLEMA ADMINISTRACIÓN DE DIACEPAM EVALUACIÓN DE PARAMETROS RESULTADOS 6 .

El centro del laberinto mide 10 cm de largo por 10 cm de ancho y la base del laberinto se encuentra a un metro del nivel del piso. con paredes de 15 cm. 1 FIGURA No. y 2 brazos abiertos. 2 7 .LABERINTO ELEVADO EN CRUZ El proceso de ansiedad se realizará en un laberinto “T“ el cual esta compuesto de 4 brazos con una longitud de 50 cm cada uno: 2 brazos cerrados. (Figura 1 y 2) FIGURA No.

DIAGRAMA DE TRABAJO PARA LA ADMINISTRACIÓN SISTÉMICA DE ANSIOLITICOS ( LABERINTO ELEVADO EN CRUZ ) SUJETOS DE EXPERIMENTACIÓN CONTROL ADAPTACIÓN AL LABERINTO PROBLEMA ADMINISTRACIÓN DE ANSIOLÍTICOS EVALUACIÓN DE PARAMETROS RESULTADOS 8 .

8 mg/Kg por vía subcutánea y a una concentración de 10 mg/2 ml..250 gr. se emplearán ratas macho de la cepa Wistar. 1 RATA TL1S (seg) NP NE 9 .. 2.. 3.Graficar los parámetros contra fármaco en forma de barras.1 5. de peso 200. Al grupo 1 (control) se le administrará solución salina isotónica a razón de 0. provenientes del Bioterio Claude Bernard de esta Universidad (MODELO DE VOGEL) Nota: Antes de la prueba de situación de conflicto (Modelo Vogel) se privarán de agua por 48 hrs.1ml /10gr de peso por vía subcutánea. además de mantenerse en un ciclo luz-oscuridad de 12/12 hrs/día.PROCEDIMIENTO ƒ Para ambos modelos de experimentación. TABLA No. 1. Al grupo 2 (problema) se les administrará Diacepam a una dosis de 0.Recopilar los datos por sección y llenar la tabla No. Se administrará 1 µl en el hipocampo SSI al grupo control y 1 µl de diacepam (1µg/µl) al grupo problema y se efectuará la prueba de Vogel 3 minutos después de la administración.Evaluar los siguientes parámetros durante 20 minutos: A) Tiempo de Latencia al primer sorbo en segundos (TL1S) B) Número de pulsos (NP) C) Número de eventos (NE) 4.

El objetivo será familiarizar al roedor con el laberinto elevado en “cruz “.(MODELO LABERINTO ELEVADO EN CRUZ) Nota: La adaptación al laberinto se realizará un día antes de comenzar los ensayos. este procedimiento se repetirá para cada roedor. Al grupo control se le administrará solución salina y al grupo problema el ansiolítico a evaluar. b) Al retirar el contenedor la rata quedará liberada para llevar a cabo la actividad exploratoria en el laberinto durante un tiempo de 10 minutos. El procedimiento será el siguiente: a. Por otra parte a otro grupo se le administrará 1 µg/µl del ansiolítico a evaluar y a otro grupo SSI ambos en el hipocampo y después de 3 minutos de la aplicación experimental se tomarán los siguientes parámetros experimentales para cada rata durante 15min. Se colocará al roedor en el centro del laberinto cubriéndolo con un contenedor. 2. b. ambos por vía subcutánea y se esperará 3 minutos antes de efectuar el ensayo. 1. ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ ƒ Número de veces al brazo abierto = # VBA Número de veces al brazo cerrado =# VBC Tiempo de latencia al brazo abierto= TLBA Tiempo de latencia al brazo cerrado =TLBC Tiempo de persistencia en el brazo abierto =TPBA Tiempo de persistencia en el brazo cerrado =TPBC 10 .

Explica el mecanismo de acción de las Benzodiacepinas. Se recopilarán los datos por sección. 2 con sus datos TABLA No.3. ¿Que estructuras del SNC están relacionadas con la ansiedad? 5. ¿Qué otro modelo propones para evaluar los ansiolíticos? 3. 2. para después graficar los resultados en forma de barras parámetro contra fármaco CUESTIONARIO 1. Menciona las propiedades farmacocinéticas de: A) Diacepam B) Pracepam C) Clordiacepóxido 11 . 2 RATA TLBA TLBC TPBA TPBC #VBA #VBC 4. Llenar la tabla No. ¿Como se define a la ansiedad? 6. ¿Como se clasifican los ansiolíticos? 4.

Realizar la curva dosis respuesta de un agonista con el antagonista y encontrar el efecto máximo. desde un punto de vista fisiológico. El estudio de la interacción pudiese ser con la finalidad de bloquear un efecto endógeno exagerado. En el caso del antagonismo se trata del bloqueo del efecto. Las interacciones son de tipo sinérgico o antagónico. en una preparación aislada o en su defecto en tejido o en cultivo de células. farmacológico o químico. 12 . En el primer caso se trata de que dos o más fármacos produzcan un efecto mayor que cuando se administran por sí solas. Sin embargo la interacción de esos fármacos pudiese ser benéfica o en el último de los casos inocua. El bloqueo fisiológico es contrarrestar el efecto de un estado fisiológico mediante la administración de fármacos que ejercen acciones diferentes. por una determinada patología o en su defecto aumentar la capacidad fisiológica de un tejido. 3 ANTAGONISMO FARMACOLÓGICO EN TEJIDO AISLADO OBJETIVOS ƒ ƒ Analizar las características del uso de las preparaciones en tejido aislado para el análisis del antagonismo farmacológico. INTRODUCCIÓN Una de las características importantes de la prescripción médica es la administración de fármacos en forma conjunta. El estudio de esas interacciones se puede realizar a diferentes niveles como es el caso en animal integro. en ambas curvas. Por último en el bloqueo farmacológico se trata de administrar un fármaco que se una al sitio de acción de la sustancia endógena y con ello disminuir el efecto agonista.PRÁCTICA No. En el caso de la interacción química es por medio de la interacción de fármacos pero solo desde el punto de vista químico.

1 mL por cada 10 ml de solución Hartman. PROCEDIMIENTO 1. Tabula tus registros en la Tabla No. Se repiten estos mismos pasos hasta que se complete las concentraciones descritas. registre por 10 seg y continúe agregando las subsecuentes concentraciones de acetilcolina. dejando entre cada lavado 1 minuto. 3. Continúe registrando y en este punto agregue 0. 1 los registros de todo el grupo.DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material 9 Quimógrafo 9 Estuche de Disección 9 6 vasos de precipitado de 1000 ml 9 6 vasos de precipitado de 100 ml 9 6 pipetas de 1 ml 9 Cajas petri ( tapa o base ) 9 Bomba de aire 9 Termómetro Soluciones Acetilcolina 50 mg/5 ml y diluir 1:2 siete veces Histamina 50 mg/5mL y diluir 1:2 siete veces 1. se drena la cámara con nueva solución a 370C y se lava el intestino dos veces. Agregue la concentración mas diluida de acetilcolina. 5. Se detiene el quimógrafo y se retira la pajilla. y el otro extremo a la pajilla del quimógrafo. Prepare y monte el ileón de rata fijando uno de los extremos en el alambre de tapón de hule. 2. 4.1 ml de histamina (1mg/2ml) y observe como disminuye la respuesta. Administre la concentración inicial de acetilcolina 0.5 lt de Solución Hartman por equipo. Observe que la pajilla va subiendo hasta una meseta. Llene la cámara con solución Hartman hasta un nivel donde cubra todo el músculo. Sujetos de experimentación Rata para toda la sección 13 .

RESULTADOS TABLA No. Analice cada uno de los elementos de la curva dosis respuesta. en la búsqueda de nuevos fármacos. (mm) (mm) Acetilcolina Acetilcolina + histamina DISCUSIÓN En relación a la revisión bibliográfica del tema y de los resultados obtenidos discuta lo resultados obtenidos. del fármaco agonista y del antagonismo. Analice además la importancia de este tipo de experimentos farmacológicos. 1 Fármaco Concentración Logaritmo Respuesta Respuesta µg/µl Conc. 14 .

¿Por qué la histamina disminuye la contracción del músculo liso? 3. ¿Por qué al aumentar la concentración de acetilcolina aun no se revirtió el efecto de la atropina? 5. 15 . ¿Cómo actúa la histamina y su relación con sus usos clínicos? 4. ¿Cuáles son las acciones fisiológicas de la acetilcolina? 2. ¿Por qué la acetilcolina a concentraciones altas si revirtió el efecto de la histamina? 6.Si la concentración de histamina es demasiada. Realiza un esquema de la acción de la acetilcolina.. La atropina ejerce su acción sobre los receptores muscarínicos.CUESTIONARIO 1. 7. ¿Qué son estos receptores? ¿cuántos tipos existen? Y ¿cuáles son sus mecanismos de transducción de señales? 8. explica que está sucediendo a nivel de receptores y sus efectos clínicos.

El uso crónico de niveles relativamente bajos de un estimulante. si bien existen muchas similitudes farmacológicas entre los diversos compuestos. Se ha sugerido el tratamiento de la intoxicación con estimulantes con agentes antipsicóticos. La agitación y la paranoia son características y pueden acompañarse de alucinaciones táctiles de insectos arrastrándose debajo de la piel. esto no siempre es así. así como altas dosis en forma aguda pueden dar como resultado un síndrome parecido a una psicosis. Con el uso prolongado se produce depleción de los neurotransmisores y la regulación ascendente compensadora del número de los receptores. sobre la base de los cambios neuroquímicos en el cerebro. cada estimulante tiene efectos que son únicos.PRÁCTICA NO. INTRODUCCIÓN Los estimulantes del SNC incluyen sustancias como las anfetaminas. La acidificación de la orina en teoría tiene valor pero no ha sido útil en la práctica para incrementar la eliminación de los estimulantes. Por tanto existen. con lo cual los sistemas se vuelven más sensibles. pero es preferible proporcionar sostén clínico y protección. 4 ESTIMULANTES SISTEMA NERVIOSO CENTRAL OBJETIVO ¾ Demostrar el efecto estimulante de anfetamina. Las evidencias experimentales demuestran que todos los estimulantes bloquean en forma aguda la recaptación de los neurotransmisores con monoaminas y algunos también causan la liberación de estas sustancias químicas. cafeína y L-dopa en campo cerrado. 16 . la cocaína y el metilfenidato. Si bien muchos estimulantes comparten una estructura que se asemeja a la anfetamina. ¾ Demostrar el efecto estimulante de anfetamina. Este síndrome se ve a menudo en personas que toman estimulantes para mantener un rendimiento laboral adecuado. cafeína y L-dopa en campo abierto.

facilitar el sentimiento de bienestar. 17 . Es capaz de incrementar el estado de alerta y el estado de ánimo. en la parte inferior se encuentra una rejilla y en las paredes de la caja están distribuidos ocho fotodiodos por los cuales se hace pasar una haz de luz a lo ancho de caja.La cafeína es el estimulante mas consumido en el mundo. aumentar la motivación del trabajo. potenciar el sentimiento de bienestar. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material ƒ ƒ Caja de actividad motora en campo cerrado 3 Jeringas de 1 mL Soluciones ƒ Solución Salina Isotónica NaCl (0. este dispositivo se encuentra adaptado a la caja y los datos obtenidos se almacenan en la memoria de la caja para su posterior lectura y gratificación al término del experimento.9%) Fármacos ƒ ƒ ƒ ƒ Cafeína Anfetamina (Clobenzorex) L-dopa Haloperidol Sujetos de experimentación ƒ Ratas macho cepa Wistar CAJAS DE ACTIVIDAD MOTORA EN CAMPO CERRADO Se representa con una caja de acrílico de color negro. facilitar las tareas psicomotoras. la energía y la concentración y retrasar el inicio del sueño. Cada vez que la trayectoria de la luz se interrumpa por el movimiento del animal se contabiliza en un dispositivo electrónico.

5 mg/Kg (10mg/1mL) de cafeína vía 18 . 3. 5. 9. 10. A otra rata se le administra el haloperidol (50mg/1mL) un depresor del SNC por vía intraperitoneal. 4. 7. A otra rata se le administra 200 mg/Kg de L-dopa vía oral. Transcurridos 10 minutos después de la administración del fármaco la rata se coloca en la caja de campo cerrado por 6 periodos de 10 minutos y se anotan el número de cuentas acumuladas. A una rata se le administra intraperitoneal. Transcurridos 20 minutos después de la administración del fármaco la rata se coloca en la caja de campo cerrado por 6 periodos de 10 minutos.PROCEDIMIENTO 1. A otra rata se le administra 5 mg/Kg (4 mg/mL) de anfetamina vía subcutánea. 2. 1. Transcurridos 15 minutos después de la administración del fármaco la rata se coloca en la caja de campo cerrado por 6 periodos de 10 minutos y se anotan el número de cuentas acumuladas. Lo mismo se hace para la rata control solo que en este caso se administra solución salina isotónica. 6. Transcurridos 15 minutos después de la administración del fármaco la rata se coloca en la caja de campo cerrado por 6 periodos de 10 minutos y se anotan el número de cuentas acumuladas. 8. Al finalizar los seis periodos se anotan el número de cuentas acumuladas y se anotan en la tabla No.

Los resultados se anotan en la tabla 2. 2. El mismo procedimiento se hace para las ratas de anfetamina (5 mg/Kg). Transcurridos 20 minutos después de la administración del fármaco se coloca la rata en la caja de campo abierto durante 1 hora y se observará lo siguiente: ƒ ƒ ƒ NC: Número de cuadrantes visitados NA: Número de acilaciones NR: Número de rearing 4.CAJAS DE ACTIVIDAD MOTORA EN CAMPO ABIERTO PROCEDIMIENTO 1. La caja se debe de dividir en 9 partes iguales y 4 compañeros deben estar colocados a los lados de la caja como se muestra en la figura: 3. 5. A una rata se le administra 5 mg/Kg (10mg/1mL) de cafeína por vía subcutánea. L-dopa (200 mg/Kg) y solución salina isotónica solo que en estos casos se deja transcurrir 10 minutos después de la administración. RESULTADOS TABLA NO. 1 Periodos Rata con cafeína Rata con anfetamina Rata con L10 minutos 20 minutos 30 minutos 40 minutos 50 minutos 60 minutos 19 .

3. Grafica tus parámetros contra el fármaco. Explica el mecanismo de acción de los estimulantes utilizados. ¿Cuáles son los protocolos clínicos para la administración de los estimulantes? 20 .dopa Haloperidol Rata con SSI TABLA NO. ¿Cuál es la utilidad clínica de los estimulantes del SNC? 5. 2 Ratas Cafeína Anfetamina L-dopa Haloperidol SSI NE NA NR CUESTIONARIO 1. 4. 2. Menciona las propiedades fisicoquímicas de los fármacos utilizados.

9 Acciones cardiovasculares de los salicilatos. 5 EFECTO DEL ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN EL TIEMPO DE SANGRADO OBJETIVO • Determinar el efecto del Ácido acetilsalicílico en el tiempo de sangrado. Se determina midiendo el tiempo que transcurre desde el momento en que se hace una punción (dedo u oreja) hasta que la sangre deja de brotar de la herida. El ácido acetilsalicílico inhibe la liberación de ADP de las plaquetas y la agregación plaquetaria por acetilación de las enzimas plaquetarias que sintetizan los precursores de las prostaglandinas y del tromboxano A2 (sustancia que estimula más la agregación). la adherencia y agregación plaquetaria y la coagulación sanguínea. INTRODUCCIÓN Cuando se produce la apertura de un vaso sanguíneo la sangre se derrama. 9 Método de Duke. pero por lo general dicha hemorragia cesa espontáneamente mediante un mecanismo fisiológico denominado hemostasia. 21 . CONOCIMIENTOS PREVIOS 9 Mecanismos de coagulación de la sangre. que es la detención espontánea de la hemorragia de vasos sanguíneos dañados. Un método de estudio para evaluar la fase vascular y plaquetaria de la hemostasia es el tiempo de sangría. Se consideran normales los comprendidos entre 1 y 3 minutos.PRÁCTICA NO. En esta intervienen tres procesos la contracción de los vasos.

4. Determinar en 5 voluntarios sanos la duración de tiempo de sangrado (valores controles).DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material 9 Cronómetro 9 Una lanceta estéril y desechable 9 Papel filtro 9 Torundas de algodón impregnadas de alcohol 9 2 tabletas de ácido acetilsalicílico de 500mg PROCEDIMIENTO 1. 1 5. 3. Nota: Los voluntarios sanos no deben ingerir alimentos cuando menos cinco horas antes de la administración del ácido acetilsalicílico. Anotar los resultados en tabla No. Graficar sus resultados del promedio del tiempo de sangrado de sus valores controles y los valores problema en forma de barra. Administrar a cada uno de los voluntarios dos tabletas de AAS (1g). 2. Transcurrida 4 horas. determinar nuevamente en los cinco voluntarios la duración del tiempo de sangrado. TABLA No. 1 TIEMPO DE SANGRADO VOLUNTARIO 1 2 3 4 5 Promedio VALORES CONTROLES DESPUÉS DE LA ADMINISTRACIÓN DE AAS 22 .

¿Cuáles son los efectos tóxicos del AAS? 5. De sus datos obtenidos. ¿Cuál es el mecanismo de acción del AAS como analgésico. ¿Cuáles son las utilidades del AAS además de analgésico? 2. Investigar modelos experimentales para valorar ¾ Analgesia ¾ Antipiresis 6.CUESTIONARIO 1. antipirético y antiinflamatorio? 3. ¿Cómo actúa el AAS sobre la coagulación? (Esquema) 23 . ¿Cuál es el efecto que observa sobre el tiempo de sangría? y ¿Explique a que se debe? 7. ¿Cómo afecta el AAS a nivel cardiovascular? 4.

5 -1. desoxibarbitúricos. ni con métodos de curación. no es extraño que la investigación sea intensa en esta rama de la Farmacología y se busquen nuevos fármacos con propiedades anticonvulsivas. dejan al individuo en riesgo de lesión corporal y a veces obstaculizan las actividades de estudio y trabajo de éste. Las convulsiones epilépticas suelen producir alteración transitoria del conocimiento. El término convulsión se refiere a un trastorno transitorio de la conducta. Si bien se sabe. sincrónica y rítmica de poblaciones enteras de neuronas cerebrales.PRÁCTICA No. hidantoínas. iminoestilbenos. benzodiacepinas. etc. pero si se cuenta con una serie de fármacos disponibles que inhiben las convulsiones. Conocer las características de las crisis convulsivas en un modelo INTRODUCCIÓN La epilepsia es una enfermedad que afecta entre 0.0 % de la población en general. no se cuenta con una profilaxis eficaz. causado por la activación desordenada. entre los cuales encontramos a los barbitúricos anticonvulsivos. • • Demostrar el efecto anticonvulsivo del Diazepam biológico. succinimidas. 24 . Como la epilepsia es una enfermedad frecuente y que tiene alteraciones secundarias en algunos individuos. 6 ANTICONVULSIVANTES OBJETIVOS • Evaluar la combinación de drogas antiepilépticas administradas en el hipocampo de rata sobre crisis convulsivas de tipo generalizadas inducidas por pentilentetrazol. Su manifestación más importante es la presencia de crisis. muchas veces convulsivas.

Pentilentetrazol 100 mg/5ml Diazepam 10 mg/2ml Difenilhidantoína Solución fisiológica 25 .CONOCIMIENTOS PREVIOS. 9 Conocimiento de los anticonvulsivos. ƒ ƒ ƒ Ratas 4 jeringas de 1ml Balanza para roedores Soluciones. 9 Conocimiento del manejo y cuidado de los animales de laboratorio 9 Conocimiento de la administración intrahipocampal e intraperitoneal . DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material.

DIAGRAMA DE TRABAJO PARA LA ADMINISTRACIÓN DE ANTIEPILÉPTICOS Sujetos de experimentación Cirugía estereotáxica Grupo control SSI Grupo problema administración anticonvulsivantes Administración sistémica del Convulsionante Evaluación Conductual Evaluación del implante Reportar y Graficar 26 .

B) Número de convulsiones tónico-clónicas (NCTC).1ml/10g de peso. se esperarán 3 minutos y se les administrará el convulsionante (Pentilentetrazol) por vía i.p. Contracciones musculares tónicas generalizadas con flexión de las extremidades 27 . A otro grupo de ratas (control) se le administrará SSI por vía intraperitoneal a razón de 0.PROCEDIMIENTO Nota: Se emplearán ratas adultas de la cepa Wistar de peso 200-250 g. 3. a una dosis de 37 mg/Kg de peso.p. ADMINISTRACION LOCAL 1. B) Al segundo grupo (problema) se le administrará en el hipocampo el anticonvulsivante (Diacepam 1µl) a una concentración de 1µg/µl esperando 3 minutos para administrar el convulsionante (Pentilentetrazol) por vía i.. provenientes del bioterio Claude Bernard de esta Universidad. las cuales se dividirán en dos grupos: A) Al primer grupo (control) se le administrará en el hipocampo 1 µl SSI y después de 3 minutos se administrará el convulsionante (Pentilentetrazol) por vía intraperitoneal a una dosis de 37 mg/kg de peso. después de la cirugía los animales serán colocados individualmente en cajas esperando un lapso de 5 días para su recuperación. breves y que van de leves a violentas de una parte o de todo el cuerpo sin pérdida de la conciencia. A un grupo de ratas se les realizará la cirugía estereotáxica. a una dosis de 37 mg/kg de peso ADMINISTRACIÓN SISTÉMICA Por otra parte: 1. A otro animal administrarle en las mismas condiciones 10 mg/kg de difenilhidantoina. Evaluar los siguientes parámetros durante un tiempo de 15 minutos: A) Número de sacudidas (NS) o convulsiones mioclónicas. 2. estas sacudidas son únicas. Finalmente a otro grupo experimental se le administrará el anticonvulsivante Diacepam a una dosis de 1mg/Kg y a una concentración de 10 mg/2 ml por vía intraperitoneal.

seguidas por contracciones rítmicas de los miembros.superiores y extensión forzada de las extremidades inferiores.1 ADMINISTRACION LOCAL RATAS NS NCTC DCTC TL1SM TL1CTC TABLA No. Llenar las tablas No. Usualmente duran varios minutos y hay pérdida de la conciencia. 5.1 y No. Tiempo de latencia a la primera convulsión tónico-clónica (TL1CTC). C) D) E) Duración de cada convulsión tónico-clónica (DCTC). Tiempo de latencia a la primera sacudida mioclónica (TL1SM). 2 6. Graficar los resultados en forma de barras: parámetros contra fármaco TABLA No.2 ADMINISTRACION SISTEMICA RATAS NS NCTC DCTC TL1SM TL1CTC 28 .

¿Cuál es la clasificación de las convulsiones epilépticas y las características que estas presentan? 4. ¿Cuáles son los efectos indeseables de los anticonvulsivos? 6. ¿Cuál es el mecanismo de desarrollo de las convulsiones? 5. ¿Cuáles son los métodos de estudio de las drogas anticonvulsivantes? 2.CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son los requisitos de una droga antiepiléptica ideal? 29 . ¿Cuáles son los mecanismos de acción de las drogas anticonvulsivas? 3.

el naproxeno. En este grupo se incluyen a la aspirina. el ketoprofeno. el ibuprofeno. o bien en la periferia. La morfina es el analgésico por excelencia y el mejor representante de este grupo. Su mecanismo de acción es a través de la inhibición de la ciclooxigenasa 1 (COX-1 constitutiva) y ciclooxigenasa 2 (COX-2 inducida) en el sitio de la inflamación. la indometacina. entre otros. sirve para reducir o abolir el dolor sin producir inconsciencia.Práctica No. OBJETIVO Producir un cuadro analgésico con el opioide sintético fentanil empleando el modelo experimental de choque térmico. se obtiene del opio. Además de incluir a los opioides de origen endógeno. Los fármacos analgésicos empleados en la clínica se dividen en dos grupos: los analgésicos opioides y los analgésicos no opioides. el piroxicam y el ketorolaco. el cual además de la morfina contiene otros alcaloides con propiedades analgésicas y estimulantes del SNC. Los analgésicos no opioides Los analgésicos tipo aspirina o también llamados antiinflamatorios no esteroidales (AINEs) están entre los más empleados en el mundo. y con ello la reducción de la síntesis de prostaglandinas y tromboxanos. Analgésicos opioides Son un amplio grupo de sustancias tanto de origen natural como sintético que incluye agonistas semejantes a la morfina y sus antagonistas que pueden bloquear estos efectos. 30 . 7 Analgesia INTRODUCCIÓN Un analgésico es una sustancia que a través de su acción sobre el Sistema Nervioso Central (SNC). En la práctica clínica se utilizan para aliviar el dolor de leve a moderado.

9. 8.DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material • Naloxona (25 UI) • Fentanil (70µg/Kg) • Metamizol sódico Procedimiento 1. Durante los 30 minutos el animal deberá mantener la cola en posición perpendicular con respecto a la mesa donde se encuentre el contenedor. 3. Dejar pasar dos minutos y repetir el mismo proceso hasta tener 5 lecturas basales. Obtener el promedio de las lecturas y anotar los datos en la tabla No. 4.05 mg/ml. La habituación consiste en introducir a cada roedor en un contenedor durante 30 minutos por tres días y a la hora que se realizará el experimento. El día del experimento. tabla No. Habituar a la rata. instantáneamente con un cronometro tomar el tiempo que tarda la rata en sacudir la cola o realizar movimientos corporales. Administrar por vía intraperitoneal el fentanil en una dosis de 70mg/kg de peso. 2. 10. En un sólo movimiento introducir la mayor parte de la cola de la rata en el vaso. Llenar con agua un vaso de precipitado de 400 mL. Obtener el valor promedio y anotar los datos en la 31 . calentar a una temperatura de 58 ºC (estrictamente). Administrar el antagonista naloxona en una dosis de 25 UI esperar 5 minutos de latencia y hacer 5 mediciones. 6. 7. La concentración del fentanil es de 0. 1. pesar a la rata. 5. Por último administrar el metamizol sódico (200mg/Kg) esperar 5 minutos de latencia y hacer 5 mediciones. 1. Esperar 6 minutos de latencia y realizar 5 mediciones con espacios de 2 minutos entre cada una.

¿Cuál es el mecanismo de acción de los opiáceos? 18. ¿Qué es la hipnoanalgesia y qué explicación daría en caso de que se presente en pacientes que consumen un opiáceo? 14. ¿Qué es el dolor? 7. Describe otros modelos experimentales para medir analgesia. Indica los usos clínicos de los opioides 6. ¿Qué es la analgesia? 10. Investiga 5 nombres de analgésicos opioides y 5 de analgésicos no opioides. 2. ¿En qué consiste el método de la placa caliente? Indica un diagrama experimental con este método para la determinación de la analgesia de una droga. ¿Cuáles son las propiedades de un analgésico ideal? 19. 16. 9. Describe el sistema de transmisión de los mensajes nociceptivos. 3. ¿En qué consiste la farmacodependencia de los opiáceos? 13. 17. 1 Lecturas 1 2 3 4 5 Promedio Basal (tiempo en seg) Fentanil (tiempo en seg) Naloxona (tiempo en seg) Metamizol sòdico (tiempo en seg) CUESTIONARIO 1. Describe el tipo de antagonismo producido por la naloxona. Indica la localización de los diferentes subtipos de receptores a los fármacos opiáceos. Describe el mecanismo de acción propuesto para los analgésicos opioides. 32 . Menciona tres diferencias entre los analgésicos opioides y no opioides. ¿Qué son los opioides endógenos? 5. 4. ¿Qué es analgesia y la neuroleptoanalgesia? 12.TABLA No. Investigar los métodos de estudio que se ocupan para estudiar la evolución de la analgesia. 11. 8.

aunque los medicamentos y las dosificaciones específicos que se utilizan en esas dos situaciones son diferentes. Los estrógenos circulantes provocan cambios en el útero. estrona y estriol La disminución de estrógenos se ha asociado a un incremento en el riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares. dichos efectos comprenden acciones vinculadas con el desarrollo. • Estro: La vagina se ve cornificada y seca. no hay presencia de leucocitos. Presencia de leucocitos y células cornificadas 33 enfermedades degenerativas. Hay presencia de células epiteliales grandes y cornificadas (no nucleadas). y efectos sobre el metabolismo de minerales. Existen evidencias que sugieren que la disminución o pérdida de estradiol y estrona puede revertirse con el uso de la terapia de . en particular después de la menopausia reemplazo hormonal. pero solo tres en cantidades notables: ß-estradiol. estados de depresión y demencia. • Metaestro: En esta etapa la vagina se ve húmeda. Las aplicaciones más frecuentes de esos compuestos son la terapia de reemplazo hormonal y la anticoncepción. y sus efectos farmacológicos son un reflejo de sus acciones fisiológicas. proteínas y lípidos. aparece un flujo vaginal abundante. Gran numero de células epiteliales nucleadas. Se han aislado del plasma sanguíneo hasta seis estrógenos naturales. efectos neuroendocrinos. osteoporosis. estas se dividen en fases que son: • Proestro: La vagina se torna seca y se comienza a producir la cornificación de las células de las paredes. En los roedores se presentan características diferentes de acuerdo a la presencia o no de estrógenos. El uso terapéutico de los estrógenos se halla extremadamente difundido. carbohidratos. preparación cíclica de las vías de reproducción para la fecundación e implantación.PRACTICA No 8 EFECTOS DE LA ADMINISTRACIÓN DE ESTRÓGENOS SOBRE ÓRGANOS REPRODUCTORES INTRODUCCIÓN Los estrógenos son hormonas endógenas que producen muchos efectos fisiológicos.

Se encuentran especialmente leucocitos y algunas células epiteliales nucleadas. Colocar la muestra obtenida sobre el portaobjetos y extenderla hasta obtener una capa fina de la misma. solo se debe tomar la muestra en la parte mas externa de la vagina para no provocar una pseudopreñez en la rata. Separa el útero de la vagina. Se fija al calor y se tiñe con colorante de Write. Pesar a las ratas muertas y realizar una incisión en la parte dorsal. • En un portaobjetos limpio se coloca una gota de agua destilada. 5. Una vez que se hayan observado y registrado los cambios en el frotis vaginal de todas las fases del ciclo estral. OBJETIVO • Determinar el ciclo estro de la rata y los efectos provocados por la administración de ß-estradiol-3-benzoato (E2) sobre órganos reproductores de roedores.4.• Diestro: El pH vaginal es de 6. Se observa al microscopio en seco fuerte (40X).5 mm.3.1. 2. seleccionar y sacrificar una rata en fase estro y otra en fase metaestro o diestro. DETERMINACIÓN DEL CICLO OVARICO EN RATA Material 3 ratas hembra adultas jóvenes Asa bacteriológica Porta objetos Colorante de Write Alcohol etílico al 70% Lámpara de alcohol Éter PROCEDIMIENTO 1. 34 . Tomar frotis vaginales diariamente a cada rata. el diámetro de la luz uterina es de 2. Observa y registra las diferencias encontradas en el útero. posteriormente se introduce una asa estéril en la vagina de la rata y se da un giro de el asa para hacer un ligero raspado vaginal.

7. Dejar las ratas en recuperación dos días. 35 . 8. saca el útero y las trompas uterinas sobre un papel filtro y extrae todo el líquido intrauterino.6. al localizar el músculo se separan las facias posteriormente se introduce una pinza y se separa el tejido adiposo con el fin de localizar el ovario y el cuerno uterino. Material 4 ratas hembras adultas jóvenes Material para cirugía Jeringas para insulina Anestésico(Ketamina) Antibióticoβ-estradiol-3-benzoato[50mg/20ml] Balanza Cubreobjetos PROCEDIMIENTO 1. 6. Pesa el útero y calcula los mg de peso uterino por 100g de peso corporal. realizar una asepsia en la zona ubicada entre la última costilla y la columna vertebral. Rasurar la zona y desinfectar. 3. Posteriormente se introduce el tejido a la cavidad para después suturar el músculo. Se realiza el mismo procedimiento en el lado contrario. realizar una incisión en piel con tijera de punta roma. Se coloca al animal en posición ventro-dorsal sobre un campo quirúrgico estéril. a nivel de los dos ijares. EFECTOS DE LA ADMINISTRACIÓN DE ESTRÓGENOS EN RATAS OVARIECTOMIZADAS. Finalmente se sutura la piel y se administran 20UI de antibiótico (IM) por tres días y realizar limpieza diaria de las heridas con isodine para evitar posibles infecciones. Después se liga con hilo Nylon entre el cuerno uterino y los ovarios 5.seccionando la cerviz. realizar frotis vaginales y calcular la dosis de anestésico (pentobarbital 45 mg/Kg) 2. Pesar las ratas. 4.

11. CUESTIONARIO 1. 4. Dividir el grupo en dos: ¾ OVX + E2 (Problema) ¾ OVX + Vehículo (Control) 10. Sacrificar las ratas y comparar los órganos reproductores de ambos grupos. Investiga y explica los protocolos terapéuticos de los estrógenos. Investiga las consecuencias de los estrógenos sobre la liposisis y la glucolisis. tomar frotis vaginales de las 4 ratas cada 24 horas hasta que aparezca la fase estro en las ratas administradas con E2. 36 . 3. Explica los efectso farmacologicos de la administración de estrógenos sobre los cambios de los estrógenos. ¿Cual es mecanismo de acción de estrógenos? 2. Después de empezar la administración del β-estradiol-3-benzoato (500mg/20mL) por 7 días a las ratas problema y DMSO a las ratas control.9. extirpa el útero y calcula los mg de peso uterino por 100 g de peso corporal.

de modo que el lugar de los fármacos debe ser siempre secundario. Los fármacos orales son medicamentos de utilidad sólo para tratar la Diabetes Mellitus Tipo 2 (DM2).PRÁCTICA No. acetohexamida. metformina. acarbosa) ¾ Tiazolidinedionas (troglitazona. efectos secundarios y toxicidad. Los hipoglucemiantes orales abarcan cuatro familias de drogas bien definidas: ¾ Sulfonilureas (glibenclamida. 9 HIPOGLUCEMIANTES OBJETIVO Determinar los cambios de los niveles de glucosa sanguínea en rata con hipoglucemiantes. pioglitazona. clorpropamida) ¾ Biguanidas (buformina. Realmente el mejor hipoglucemiante que se conoce es el binomio Dieta-Ejercicio. 37 .glucosidasas (miglitol. potenciación de sus efectos por otros medicamentos. vías de eliminación. INTRODUCCIÓN Los hipoglucemiantes orales son un conjunto heterogéneo de drogas que se caracterizan por producir una disminución de los niveles de glucemia luego de su administración por vía oral. necesitando todos de la presencia de insulina para poder ejercer su acción. Solo aquellos pacientes que no respondan adecuadamente a un régimen dietético y de actividad física deberán ser tratados con estos fármacos. Para su correcto manejo es preciso tener presente sus características farmacocinéticas. mientras que las biguanidas y los inhibidores de las alfa-glucosidasas son antihiperglucemiantes. ciglitazona) Las sulfonilureas y las tiazolidinedionas son realmente hipoglucemiantes. fenformina) ¾ Inhibidores de las .

tratamiento y control de la Diabetes Mellitus. que comienza a hacer efecto a los 15 minutos de haberse inyectado. ¾ Conocer los diferentes efectos que producen los hipoglucemiantes. Balanza para roedores. Insulina de acción rápida que empieza a hacer efecto a los 30 minutos de haberse inyectado. que empieza a hacer efecto a los 60 minutos de haberse inyectado.Otro hipoglucemiante que se puede mencionar es la Insulina la cual es una hormona producida por el páncreas. actuando con mayor intensidad entre los 30 y los 70 minutos. Insulinas de acción intermedia o lenta. ¾ Conocer el manejo del glucómetro Ascencia EliteTM. Insulina de acción ultrarrápida. Todas ellas están muy purificadas y tan solo contienen proteínas de insulina y no contaminaciones de otro tipo. 38 . Glucómetro Ascencia EliteTM. Tiras reactivas para el glucómetro Ascencia EliteTM. actuando con mayor intensidad entre la 1 y 3 horas después de la inyección. CONOCIMIENTOS PREVIOS ¾ Conocer la NOM-015-SSA2-1999. El único factor que las diferencia es la duración de acción. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA Material Ratas de 250g-300g de peso. para la prevención. actuando con mayor intensidad entre la 3 y 6 horas después de la inyección. La insulina ayuda a que los azúcares obtenidos a partir del alimento que ingerimos lleguen a las células del organismo para suministrar energía. Las insulinas de origen bovino o porcino han desaparecido prácticamente del mercado. Hoy en día todas las insulinas del mercado son insulinas humanas sintetizadas por ingeniería genética (DNA recombinante). y la forma de toma de muestra para roedores.

A una rata se le administrará la Glibenclamida 2. Insertar la tira reactiva en el medidor. Isodine. y esperar ½ hora. Los resultados se indican en miligramos de glucosa por decilitro (mg/dL).Tijeras. 2. Introducir a las ratas en la jaula de inmovilización y limpiar la zona de corte de la cola para la toma de muestra. 5. 6.5 mg/Metformina 500 mg V. Realizar el corte de cola y obtener una muestra de sangre.5 mg 500 mg 39 . Poner en contacto la gota de sangre con el extremo de la tira reactiva y esperar hasta que los resultados aparezcan en la pantalla. 2. 8. Calibrar el medidor.O. 9. Realizar esto cada hora hasta completar 4 lecturas en total. Comprobar que en la pantalla aparece el mismo “F-#” de la tira de codificación. 3. El medidor está listo para usarse. Agua purificada. Cada equipo utilizará dos ratas las cuales hay que pesar y marcar. Repetir este procedimiento para la administración de la Insulina. Fármaco: Glibenclamida Metformina Insulina de acción corta. Cánula. Tomar la lectura la cual corresponderá a la medida de la glucosa basal. * Insertar la tira de codificación en la ranura del instrumento (el medidor emitirá 2 pitidos y en la pantalla aparecerá “F-#”) * Quitar la tira de codificación. 4. 7. PROCEDIMIENTO 1. tomar nuevamente una muestra de sangre y medir los niveles de glucosa.

Peso (g) Dosis (mg/Kg) Basal Glucosa (mg/dL) ½H 1H 1½H TABLA DE SEGUIMIENTO INSULINA DE ACCIÓN CORTA. No.RESULTADOS TABLA DE SEGUIMIENTO GLIBENCLAMIDA /METFORMINA. No. Peso (g) Dosis (mg/Kg) Basal Glucosa (mg/dL) ½H 1H 1½H 40 .

9. 3. (Explicar los resultados). ¿Qué otros métodos conoces para la determinación de la glucosa. Graficar los niveles de glucosa en mg/dL contra el tiempo con los resultados de toda la sección. Concuerdan los resultados obtenidos con lo esperado teóricamente. Menciona por lo menos dos? 7. ¿Crees que exista alguna influencia de la vía de administración sobre el efecto hipoglucemiante del fármaco? 4. 5.CUESTIONARIO 1. 2. Investiga el mecanismo de acción de las biguanidas. ¿Cuál es la cinética de las biguanidas? 8. Da una explicación. Investiga las estructura generales así como las propiedades fisicoquímicas de las sulfonilureas y biguanidas. 6. Explica la relación Ejercicio-Glibenclamida con respecto a los niveles de Glucosa sanguínea. ¿Cuáles son los efectos tóxicos de la Glibenclamida y de la Insulina? 41 .

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