Pg/1

Trabajo de Revisin

Toxicologa Analtica

Determinacin de psicofrmacos en orina

Dr. Federico Contreras
Laboratorio Bioscreen, Rosario, Santa Fe, Argentina. Correspondencia a: E mail: fcontreras@bioscreen.com.ar

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004

Pg/2

Resumen
Los psicofrmacos comprenden un amplio nmero de sustancias qumica heterogneas que afectan el sistema nervioso central y pueden clasificarse por sus efectos sobre el mismo. Muchas de estas sustancias (o sus metabolitos) pueden determinarse en orina, anlisis que a menudo posee implicancias legales y por eso el muestreo es crtica tanto para asegurar los derechos del paciente como para prevenir la adulteracin. La amplitud de sustancias en cuestin obliga a recurrir a procedimientos analticos especializados como la extraccin seguida de cromatografa y mtodos inmunoqumicos.

Palabras claves: psicofrmacos, orina Palavras claves: psicofarmacos, urina Keywords: psicoactive drugs, urine.

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004

Pg/3

Introduccin
La determinacin de psicofrmacos en orina se solicita frecuentemente a los pacientes que ingresan en centros de emergencia con signos y sntomas toxicolgicos o que se sospecha los han utilizado, pero tambin se requiere dentro de controles laborales (tanto ingresos como exmenes rutinarios o aleatorios) y finalmente para el seguimiento de pacientes en tratamiento por el empleo de drogas de abuso. Esta determinacin presenta una serie de particularidades legales y analticas

Exposicin del tema

1. Qu se entiende por psicofrmacos? Entre las particularidades de esta determinacin figura en primer lugar la gran cantidad de sustancias que pueden denominarse psicofrmacos. En una clasificacin de las sustancias de inters toxicolgico segn su estructura qumica puede verse que el nmero de compuestos llamados drogas es superior a la suma de los restantes (aniones, metales, gases, voltiles, pesticidas). Desde el punto de vista toxicolgico una definicin de droga es toda aquella sustancia natural sinttica que introducida en el organismo modifican, alteran, o reparan sus funciones normales mientras que podemos definir a los psicofrmacos como sustancias con accin preferencial sobre el sistema nervioso central. Slo los psicofrmacos comercialmente disponibles suman docenas de compuestos y por eso es natural que se los haya agrupado por sus efectos y su estructura qumica. Una clasificacin a la vez til y sencilla es la de la Organizacin Mundial de la Salud, que divide a los psicofrmacos en agentes psicolpticos,

psicoanalpticos y psicodislpticos

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004

Pg/4

Los agentes psicolpticos son depresores del sistema nervioso central y se utilizan como anestsicos, antipsicticos y tranquilizantes; dentro de los mismos tenemos hipntic os barbitricos (fenobarbital, secobarbital) hipnticos no barbitricos (hidrato de cloral, glutetimida), alprazolam, carbamatos bromazepam, (meprobamato, lorazepam) carisoprodol) benzodiazepinas (diazepam, y

fenotiacinas

(clorpromacina,

trifluoperacina)

compuestos derivados de la butirofenona (haloperidol) y reserpinoides (reserpina) Los agentes psicoanalpticos son estimuladores del sistema nervioso central y se utilizan en el tratamiento de algunas patologas como la depresin y en el alivio del dolor. Algunos ejemplos son los inhibidores de la monoaminooxidasa (tranilcipromina, fenelzina la cocana y sus derivados (novocana, procana) la la anfetamina y y sus compuestos derivados

relacionados

(fenilpropilamina,

fenilisopropilamina)

fluoxetina

(paroxetina) y los antidepresivos tricclicos (imipramina, amitriptilina) Los agentes psicodislpticos son perturbadores del sistema nervioso central. Este grupo comprende los analgsicos opiodes (morfina, codena, herona. los cannabinoides

(marihuana, hashish) y agentes alucingenos como las indolalquilaminas (LSD) y las fenilalquilaminas (mescalina). Tambin pueden incluirse en este grupo las drogas

anticolinrgicas atropnicas (atropina, escopolamina, alcaloides de la belladona) Estas sustancias tan heterogneas en lo qumico, teraputico y en el marco legal de su uso son apenas una fraccin de los psicofrmacos: continuamente se liberan al mercado
http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox Copyright 2004

Pg/5

nuevos compuestos pero eso no es todo ya que los psicofrmacos, como la mayora de las drogas, sufren procesos de biotransformacin luego de su ingreso al organismo y puede darse el caso que en orina se encuentren los metabolitos y no la droga original,

con lo que resulta imprescindible conocer la metabolizacin de los frmacos que se desea analizar. Las benzodiazepinas, por ejemplo, atraviesan procesos de desalquilacin e hidroxilacin y mientras la vida media del flurazepam en plasma es de 2 a 3 horas la de su metabolito ms activo el N -desalquilflurazepam es de 50 horas. Otro ejemplo es el

caso de la cocana, cuyos metabolitos son la benzoilecgonina y metilecgonina y en el caso de una ingesta concomitante de alcohol aparece la etilbenzoilecgoninda (cocaetileno) cuya vida media es de 3 a 4 veces mayor que la cocana. Entonces podemos concluir que la investigacin en toxicologa comprende la sustancia en cuestin y sus metabolitos para lo que la orina (en todas aquellas sustancias con eliminacin renal) es la muestra de eleccin.

2. Aspectos legales de la toma de muestras Si bien la toma de muestra es crtica en todas las determinaciones de laboratorio en la psicofrmacos en orina tiene caractersticas especiales que si no se cumplen pueden invalidar un estudio completamente correcto desde el punto de vista tcnico y tener serias consecuencias legales. De hecho ciertos anlisis slo pueden realizarlos las instituciones y los profesionales legalmente habilitados y el procedimiento de muestreo se encuentra detallado en la misma legislacin. Un ejemplo (en la Rep. Argentina) es la ley 24819 del doping deportivo que comienza afirmando corresponde a la Secretara de Deportes y Recreacin del Ministerio de Desarrollo Social y Medio Ambiente, en forma indelegable, la plena responsabilidad de los controles antidoping establecidos en la presente y luego detalla cmo realizar la toma de muestras, la forma de rotular y conservar las mismas, entregar los resultados y el procedimiento a seguir en caso de detectarse alguna de las sustancias comprendidas en la ley. En este caso y en el de las pericias realizadas en el marco de las leyes 17818 (estupefacientes) 19303

(psicotrpicos) y 23737 (rgimen penal de psicotrpicos) actan las personas designadas

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox Copyright 2004

Pg/6

al efecto y conformes a las mismas, pero en otras circunstancias esta determinacin puede ser solicitada y realizada por otros profesionales y para eso es necesario conocer la forma correcta para prevenir adulteraciones (las personas que consumen drogas de abuso o sustancias ilcitas generalmente intentan ocultarlo) garantizar la calidad del anlisis y por ltimo pero no por ello menos importante, garantizar en todo momento los derechos del paciente. Se entiende por cadena de custodia al procedimiento que asegura la trazabilidad e inviolabilidad de las mismas. Lgicamente las acciones especficas a seguir varan segn el profesional o la institucin que solicita la determinacin y la encargada de realizar el anlisis, pero algo comn a la mayora de los procedimientos es la identificacin inequvoca e inmediata del colector con la muestra y el sellado de modo que no pueda abrirse sin que se advierta. Una manera usual de hacerlo es cruzando la tapa del recipiente con una etiqueta firmada por el paciente y el encargado de recolectar las muestras. Las muestras deben estar en todo momento bajo la responsabilidad de una persona cuyos datos, conformidad y observaciones si las hubiera se registrarn

igualmente de manera fidedigna. La manipulacin de la orina se define como la alteracin intencional de su integridad con el propsito de falsear el resultado de pruebas bioqumicas. La misma puede efectuarse de diferentes maneras, siendo las ms comunes la sustitucin y la dilucin. Tambin puede producirse mediante la ingestin de sustancias que modifiquen la funcin renal (diurticos, inhibidores) o sustancias

mscara como probenecid y epitestosterona.

3. Aspectos tcnicos de la toma de muestras Lo ideal es que el profesional supervise al paciente mientras emite la muestra, que es orina espontnea (por lo menos 100 ml) y que debe tomarse en un colector estril y conservarse refrigerada (debe tenerse en cuenta que el material plstico de los envases puede absorber ciertos compuestos orgnicos). Como las muestras generalmente se toman en baos es importante recordar cortar el suministro de agua y colorear el

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004

Pg/7

remanente en inodoros y depsitos p ara prevenir su sustitucin. Asimismo se aconseja controlar que los pacientes no oculten lquidos en bolsos y/o prendas amplias. Una vez recogida la muestra se controla la temperatura, que debe estar entre los 32 y 38. Se debe medir el pH y anotar el color de la orina, si la misma tiene algn precipitado o cualquier indicio de anormalidad. Se recomienda que el laboratorio efecte una determinacin de creatinina en orina (rango normal de 0.5 a 3 gramos/litro, valores menores a 0.3 gramos/litro indican una probable dilucin)

4. Consideraciones analticas A grandes rasgos la metodologa de trabajo se base en una primera etapa o screening que permite descartar las muestras negativas y una segunda etapa o confirmatoria empleando otra tcnica para las positivas. Existen tres analticas: las inmunolgicas, las cromatogrficas grandes grupos de tcnicas

y las colorimtricas. Estas ltimas

comprenden un gran nmero de reacciones qumicas llevadas a cabo sobre la muestra con reactivos relativamente asequibles (por ejemplo la de Trinder para salicilatos, Fujiwara para hidrocarburos halogenados) y si bien han prestado y prestan un gran servicio a la toxicologa de urgencia y de recursos limitados su baja especifidad y sensibilidad no permite recomendarlas para esta determinacin. Las tcnicas inmunolgicas se basan en la reaccin antgeno-anticuerpo y comprenden el mismo conjunto de tcnicas empleadas Muchos y en qumica clnica, especialmente realizarse y los por

enzimoinmunoensayos polarizacin de

competitivos. (FPIA)

psicofrmacos

pueden

fluorescencia

multiplicacin

enzimtica

(EMIT)

existen

casettes con anticuerpos para los grupos de drogas usualmente encontrados en comas o accidentes (benzodiazepinas, antidepresivos tricclicos, opiodes, cannabinoides,

cocana...) y si su rapidez y especificidad los hacen idneos para situaciones de urgencia su costo prohbe emplearlos para determinaciones de rutina, convirtindose adems su especificidad en un inconveniente ya que es imposible incluir anticuerpos para todos los compuestos que definimos como psicofrmacos. Las tcnicas cromatogrficas, por otra

parte, se basan en la distinta solubilidad de los componentes de una muestra frente a

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm Sertox Copyright 2004

Pg/8

una fase mvil y permiten la separacin de todos esos componentes para su posterior identificacin. Contrariamente a las tcnicas anteriores el primer paso es una preparacin o clean up de la muestra, que tiene por objeto a la vez concentrar las sustancias buscadas y eliminar las interferencias producidas por otros componentes de la orina. Este procedimiento, a su vez, puede realizar por dos mtodos clsicos: extraccin lquido /

lquido solventes o extraccin en columnas de fase slida (SPE, por sus iniciales en ingls). En el primero una alcuota de la muestra es extrada en ampolla mediante una combinacin de solventes orgnicos y cidos / bases, mientras que el segundo se basa en la interaccin de los componentes de la muestra con las molculas adheridas a la El primer procedimiento es sencillo y econmico, aunque

columna (fase estacionaria).

suele emplear volmenes relativamente grandes de muestra y solventes comparado con la SPE, que generalmente permite recuperaciones mejores. En cuanto a los sistemas de cromatografa la variedad es enorme; las clasificaciones se basan en la naturaleza de las fases mviles y estacionarias y si los tres sistemas ms populares son la cromatografa en capa delgada (TLC), lquida de alta performance (HPLC ) y la gaseosa (CG) existe un enorme nmero de fases estacionarias, mviles y detectores (por ejemplo ultravioleta, fluorescencia o electroqumica para HPLC, captura de electrones, ionizacin de llama y nitrgeno-fsforo para GC...) y si bien la cromatografa permite separar e identificar ms compuestos que otro mtodo tambin es imposible detectar todas las sustancias con una extraccin o sistema cromatogrfico.

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004

Pg/9

Bibliografa
1. Aspectos analticos de la determinacin de drogas en fluidos biolgicos. Snchez Bruzon, J. Tcnicas bsicas. Especialmente cromatogrficas. The Journal of Analytical Toxicology. Publicacin donde se recogen los ms importantes trabajos en toxicologa analtica en el mbito mundial. 2. Clarke's isolation and identification of drugs in pharmaceuticals, body fluids, and postmortem material. Second edition. The pharmaceutical press - 1986. Compendio de propiedades fsicas y qumicas de drogas y medicamentos 3. Recommended methods for the detection and assay of () in biological specimens. Naciones Unidas, NY. Anlisis de drogas de abuso. 4. Bedside Toxicology. Kaye, S. Pediatric Clinics of North America - Vol. 17, No. 3, August, 1970. Tcnicas colorimtricas de aplicacin en toxicologa de urgencia. 5. Qumica Clnica. Kaplan, L, Pesce, A. Ed Panamericana. Introduccin a las diversas metodologas inmunolgicas y cromatogrficas

http://www.sertox.com.ar/retel/default.htm

Sertox Copyright 2004