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SERVICIO DE SALUD METROPOLITANO OCCIDENTE HOSPITAL SAN JUAN DE DIOS-CDT Laboratorio Clnico
Manual de Toma y transporte de muestras microbiolgicas
Cdigo: DOC LAB 7 APL 1.2 M Junio 2011 Edicin: 3 Fecha: Mayo 2009 Pgina 1 de 29 Vigencia: Junio 2014
3. Responsabilidades:
Responsable Actividad Indicacin de la Muestra Elaboracin de la orden de examen Toma de la muestra microbiolgica Preparacin para la Toma de muestra Transporte de la Muestra Recepcin de la Muestra Aceptacin o Rechazo de Muestra Supervisin de la toma de muestra Mdico Servicio Clnico E E CE C C I I I EU/Mat/KNS Servicio Clnico I IE EI EC C I I E E = Ejecuta TPM Servicio Clnico I I I E E I I I I = Informado Recepcin de Mdico TM TPM Muestras Laboratorio Microbiologa Microbiologa Lab. Clnico Microbiologa I I I I I E EI I C = Controla I I I I I C C C I I I I I I CE I I I I I I E EI I
4. Definiciones: 4.1 Asepsia: Desinfeccin de un tejido vivo o piel. 4.2 Antisptico: Sustancia qumica que aplicada en tejidos vivos elimina o inhibe la reproduccin de microorganismos. 4.3 Bioseguridad: Conjunto de medidas preventivas para proteger la salud y la seguridad humana y del ambiente frente a diferentes riesgos producidos por agentes biolgicos, fsicos, qumicos o mecnicos. 4.4 Contenedor: Recipiente que contiene la muestra para su transporte. 4.5 Limpieza: Es la remocin mecnica de toda materia extraa con el objeto de disminuir el nmero de microorganismos. Se realiza a travs del arrastre mecnico. 4.6 Medio de transporte: Medio utilizado para el transporte de muestras microbiolgicas, destinado a mantener la viabilidad de los microorganismos durante el tiempo de transporte. 4.7 Muestra microbiolgica: Toda muestra a la cual se le solicita algn estudio microbiolgico, como examen directo, tincin o cultivo. 4.8 Tcnica asptica: es el conjunto de medidas o prcticas que se deben cumplir para mantener la esterilidad durante los procedimientos mdicos y de enfermera. 5. Desarrollo: 5.1 Condiciones generales para la obtencin y manejo de muestra: Informar al paciente del procedimiento y solicitar su cooperacin. La toma de muestra debe realizarse en condiciones de mxima asepsia, evitando la contaminacin de la muestra, del personal, y del propio enfermo. Obtener una suficiente cantidad de muestra para asegurar el aislamiento del microorganismo relacionado con el proceso infeccioso en estudio y evitar los resultados falsos negativos. Obtener la muestra antes del inicio de la terapia antimicrobiana. Si el paciente ya hubiera recibido alguna dosis del antimicrobiano al momento de obtener la muestra, el Laboratorio debe ser informado al respecto. El material destinado a cultivo no debe estar en contacto con sustancias desinfectantes o anestsicas, siempre que sea posible. El personal que toma la muestra siempre debe utilizar los elementos de proteccin personal (guantes, mascarilla y antiparras), dado el potencial contacto con fluidos de riesgo.
La muestra debe etiquetarse con el nombre del paciente, el servicio solicitante, el tipo de muestra y la fecha y hora de recoleccin. Enviar las muestras al laboratorio inmediatamente despus de haber sido obtenidas para su procesamiento, con el objeto de incrementar la probabilidad de recuperacin de los microorganismos involucrados en el proceso infeccioso. Las muestras deben colocarse en un recipiente secundario apropiado para su transporte al laboratorio para evitar cualquier derrame y por lo tanto los riesgos que de ello se derivan.
5.2 Criterios de Aceptacin de Muestras: Rotulacin e identificacin adecuadas. La identificacin en el caso de muestras microbiolgicas debe incluir: - Nombre completo del paciente y RUT. - Edad. - Fecha de toma de muestra. En el caso de los hemocultivos, adems registrar en la botella la hora de la toma de muestra. - Diagnstico clnico infectolgico. - Estudio solicitado. - Tipo de muestra y sitio anatmico. Esto incluye: a) Especificacin del tipo de muestra en urocultivo: segundo chorro, cateterismo, puncin de CUP, puncin suprapbica o recolector. b) Especificacin del sitio de puncin en los hemocultivos perifricos y del tipo de catter en los hemocultivos centrales. c) Sitio anatmico de heridas, secreciones o abscesos. Muestras acordes con el tipo de estudio solicitado. Volumen mnimo necesario. Envases estriles y hermticos. Medio de transporte apropiado segn corresponda. Conservacin y tiempos de transporte apropiados segn el tipo de muestra y el estudio solicitado.
5.3 Criterios de Rechazo de Muestras: 5.3.1 Muestras mal identificadas: Falta de identificacin del paciente Discrepancia entre identificacin de orden mdica y rotulacin de la muestra Falta de identificacin del tipo de muestra Falta de identificacin en la orden mdica del tipo de estudio solicitado 5.3.2 Muestras no adecuadas para procesamiento: Muestra enviada en medio de transporte no adecuado. Muestra que requiere medio de transporte enviada sin el medio de transporte necesario.
Muestra enviada en envase no adecuado. Muestras derramadas. Muestras inadecuadas para el tipo de estudio solicitado.
5.3.3 Muestras repetidas en el da del mismo paciente, con la excepcin de los hemocultivos. 5.3.4 Muestras contaminadas o en descomposicin visible. 5.4 Principales Contenedores: 5.4.1 Hemocultivos: Frasco de hemocultivo adulto. Frasco de hemocultivo peditrico. Frasco hemocultivo para micobacterias. Jeringa heparinizada (hemocultivos cuantitativos). 5.4.2 Urocultivos: Frasco de orina estril. 5.4.3 Coprocultivos: Trula Cary Blair. Frasco de orina estril. 5.4.4 Secreciones: Frasco de orina estril / Tubo estril con tapa sin aditivos (Muestras respiratorias bajas). Trula Stuart (Otras muestras). 5.4.5 Lquidos estriles (LCR, lquido pleural, lquido peritoneal, lquido articular, lquido pericrdico): Tubo estril con tapa sin aditivos.
5.5 Normas especficas por tipo de muestra: 5.5.1 Hemocultivos:

PROCEDIMENTO CONTENEDOR HEMOCULTIVOS AEROBIOS PERIFERICOS 1. Realizar higiene de manos. 2. Retirar la tapa plstica y desinfectar el tapn de goma del frasco con gasa estril impregnada en alcohol 70. 3. Realizar antisepsia de piel: - Limpiar la zona con agua y jabn antisptico. Secar. - Aseptizar con compresa estril empapada en alcohol 70 del centro hacia la periferia. Abarcar una zona de +/- 10 cm. alrededor de la zona a puncionar. - Solamente tocar la zona con guantes estriles despus de realizada la antisepsia. 4. Con guantes estriles, puncionar la vena con jeringa en forma asptica y extraer el volumen de sangre requerido. 5. Inocular la botella de hemocultivo sin cambiar la aguja. 6. Rotular los frascos con el nombre del paciente, fecha y hora de la toma de muestra. Marcar si corresponde al primer o segundo frasco (I II). Nota: Se recomienda tomar siempre dos frascos por paciente. Cada hemocultivo debe realizarse en un sitio de puncin diferente. No debe utilizarse la misma puncin para inocular ms de una botella. Frasco de Hemocultivo Bact/Alert: Verde: aerbico adulto Amarillo: aerbico peditrico Transporte inmediato temperatura ambiente. a TRANSPORTE
Precaucin: NO escribir sobre el cdigo de barra de la botella. VOLUMEN RECOMENDADO POR FRASCO Adultos: 10 ml. Nios: - Mnimo 0,5 ml. (prematuros) = frasco peditrico - 2 a 12 K: 2 a 4 ml. = frasco peditrico - 12 a 35 K: 5 a 10 ml. = frasco adulto - > 35 K: 10 ml. = frasco adulto
Cdigo: DOC LAB 7 APL 1.2 M Junio 2011 Edicin: 3 Fecha: Mayo 2009 Pgina 7 de 29 Vigencia: Junio 2014 TRANSPORTE
PROCEDIMENTO CONTENEDOR HEMOCULTIVOS AEROBIOS CENTRALES Nota: el hemocultivo central siempre debe ser acompaado de hemocultivos perifricos 1. Realizar higiene de manos 2. Retirar la tapa plstica y desinfectar el tapn de goma del frasco con gasa estril impregnada en alcohol 70. 3. Realizar antisepsia de la piel alrededor del catter. 4. Desinfectar con alcohol la conexin. Abrir con tcnica asptica. 5. Con guantes estriles, extraer 1-3 ml de sangre por el catter central y eliminar. Luego extraer 10 ml (adultos) o 1 a 5 ml (nios) a travs del catter e inocular una botella de hemocultivo (adulto o peditrico segn corresponda). 6. Obtener uno o dos hemocultivos perifricos de sitios de puncin diferentes. 7. Rotular los frascos con el nombre del paciente, fecha y hora de la toma de muestra. Marcar las botellas segn corresponda (central rama o lumen perifrico I II). NOTA: Idealmente tomar una muestra por cada lumen o rama del dispositivo. En catter de dilisis tomar siempre una muestra por cada rama ms un hemocultivo perifrico. Frasco de Hemocultivo Bact/Alert: Verde: aerbico adulto Amarillo: aerbico peditrico Precaucin: NO escribir sobre el cdigo de barra de la botella.
Transporte inmediato a temperatura ambiente
VOLUMEN RECOMENDADO POR FRASCO Igual que Hemocultivo aerbico perifrico NOTA: Para estimar el tiempo diferencial de hemocultivos se debe tomar siempre el hemocultivo central ms uno o dos hemocultivos perifricos. EL VOLUMEN DE SANGRE DEBE SER IGUAL EN TODOS LOS FRASCOS.
HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS PAREADOS Nota: el hemocultivo central siempre debe ser acompaado de hemocultivos perifricos 1. Realizar la antisepsia de piel y alrededor del catter, desinfectar con alcohol la conexin del catter. 2. Obtener una muestra de 2 ml de sangre por puncin perifrica y una muestra de 2 ml de sangre obtenida a travs del catter (eliminar los primeros 1-3 ml de sangre extrados del catter central). 3. Rotular las jeringas indicando el origen de la muestra (central o perifrico). 4. Tomar dos hemocultivos perifricos. NOTA: Idealmente tomar una muestra por cada lumen o rama del dispositivo. En catter de dilisis tomar siempre una muestra por cada rama ms un hemocultivo perifrico. Jeringa heparinizada de 3 ml o jeringa de gases (GSA) con tapa estril Volumen: 2 ml (mnimo 1 ml) por jeringa. Transporte Inmediato (antes de 15 minutos) a temperatura ambiente Nota: detallar en la orden de examen HCT cuantitativos central y perifrico.
PROCEDIMENTO HEMOCULTIVOS PARA MICOBACTERIAS Nota: examen realizado slo a solicitud de Unidad de Infectologa 1. Solicitar el frasco con la orden de estudio de tuberculosis en Laboratorio de Microbiologa. 2. Seguir el procedimiento de toma de hemocultivos perifricos normado. 3. El volumen de muestra es de 3 a 5 ml por paciente. Nota: la solicitud de muestra debe realizarse en orden de SOLICITUD DE INVESTIGACIN BACTERIOLGICA DE TUBERCULOSIS
CONTENEDOR
TRANSPORTE
Frasco de Hemocultivo para Micobacterias Bact/Alert (tapa negra) Un frasco por paciente
Transporte inmediato a temperatura ambiente
VOLUMEN RECOMENDADO POR FRASCO Adultos: 3 a 5 ml. CULTIVO DE PUNTA DE CATETER Nota: acompaar siempre por dos hemocultivos aerobios perifricos 1. Cortar con tcnica asptica 3 a 5 cm. del extremo distal del catter inmediatamente despus de retirarlo, pinzando el extremo distal para proceder. 2. Colocar la punta en frasco estril y cerrar inmediatamente. Nota: No enviar a cultivo de rutina, slo en sospecha de infeccin asociada a catter. Frasco estril sin aditivos Transporte Inmediato (antes de 15 minutos) a temperatura ambiente
5.5.2 Urocultivos (*):

PROCEDIMENTO ORINA DE SEGUNDO CHORRO (SEGUNDA MICCION) 1. Realizar el aseo genital con agua y jabn corriente. 2. Con guantes de procedimiento, separar los labios menores o retraer el prepucio segn corresponda. Puede utilizarse tapn vaginal en caso de considerarlo necesario. 3. Indicar al paciente que elimine el primer chorro de orina y detenga la miccin. 4. Recolectar la orina del segundo chorro en el frasco estril. Nota: Idealmente utilizar la primera miccin de la maana. Si esto no es posible, tomar la muestra despus de tres horas de retencin. ORINA POR RECOLECTOR 1. Realizar aseo genital con agua y jabn corriente. 2. Colocar el recolector. No mantener el recolector ms de 30 minutos. 3. Una vez que el paciente orine, traspasar la muestra a un frasco estril y cerrar inmediatamente. Frasco estril de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Precaucin: registrar en la orden el tipo de muestra de orina Frasco estril de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Precaucin: registrar en la orden el tipo de muestra de orina Transporte inmediato a temperatura ambiente o a 4 C. Transporte inmediato a temperatura ambiente o a 4 C. Frasco estril de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Precaucin: registrar en la orden el tipo de muestra de orina Transporte inmediato a temperatura ambiente o a 4 C. Puede mantenerse refrigerada (4 C) hasta 24 horas CONTENEDOR TRANSPORTE
ORINA POR CATETERISMO VESICAL 1. Realizar aseo genital con agua y jabn corriente. 2. Con guantes estriles (separando labios menores en la mujer o retrayendo el prepucio en hombres con una gasa estril), introducir la sonda en forma asptica hasta que comience a fluir la orina. Realizar este procedimiento utilizando campo estril. 3. Si es posible, eliminar los primeros 5-10 ml de orina. 4. Recolectar la segunda porcin de orina en el frasco estril.

PROCEDIMENTO
CONTENEDOR
TRANSPORTE
ORINA POR PUNCION DE CATETER URINARIO PERMANENTE (catter de ms de 24 horas desde su instalacin) * 1. Desinfectar el sitio de puncin del catter con alcohol 70%. Se debe puncionar el segmento proximal al paciente del catter urinario. 2. Aspirar con jeringa estril entre 2 a 5 ml de orina, vaciar inmediatamente al frasco estril. Es inaceptable obtener la muestra de la bolsa recolectora Nota: En pacientes portadores de CUP, idealmente cambiar la sonda para tomar urocultivo, slo puncionar cuando esto no sea posible. No tomar cultivos de rutina en pacientes portadores de CUP. *NO se recomienda el urocultivo a travs de sonda Foley, ya que en la mayora de los casos, el crecimiento bacteriano representa colonizacin ORINA POR PUNCION SUPRAPUBICA 1. Realizar antisepsia de piel 2. Puncin y aspiracin con tcnica asptica (procedimiento mdico). Utilizar siempre campo estril y los elementos de proteccin personal. Frasco estril de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Precaucin: registrar en la orden el tipo de muestra de orina Transporte inmediato a temperatura ambiente o a 4 C. Frasco estril de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Precaucin: registrar en la orden el tipo de muestra de orina Transporte inmediato a temperatura ambiente o a 4 C.
(*) Nota: Se recomienda siempre acompaar el urocultivo de un examen de sedimento urinario u orina completa.
5.5.3 Tracto respiratorio:

PROCEDIMENTO NASAL * 1. Introducir suavemente 2 cm una trula fina en la nariz, en direccin paralela al Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart piso nasal. 2. Girar suavemente contra la mucosa de la superficie nasal, extraer la trula e introducirla inmediatamente al medio de transporte. 3. Si se utiliza trula de algodn, humedecer en suero fisiolgico estril antes de introducir. * Nota: El cultivo de exudado nasal NO debe ser utilizado para el diagnstico etiolgico de la sinusitis. FARINGO-AMIGDALINA 1. Bajo visin directa, con la ayuda de un baja lengua, tocar con la trula en faringe posterior y criptas tonsilares, especialmente las reas con exudado o inflamacin. 2. No tocar la mucosa oral, lengua o vula. 3. Introducir la trula inmediatamente al medio de transporte. SECRECION OTICA (CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO) * 1. Limpieza del odo externo con una trula humedecida en suero fisiolgico estril. 2. Obtener la muestra rotando la trula estril en el conducto auditivo. 3. Introducir la trula inmediatamente al medio de transporte. * Nota: CAE no es representativo de los microorganismos del odo medio. SECRECION OTICA (TIMPANOCENTESIS) Y ASPIRADO SINUSAL 1. Puncin y aspiracin con tcnica asptica por mdico ORL. 2. Volumen: mnimo 0.5 ml. Frasco estril sin aditivos o Jeringa estril sin aguja con tapn de goma. NO se recibirn jeringas con aguja o jeringas abiertas. Transporte Inmediato (antes de 15 minutos) a temperatura ambiente Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas CONTENEDOR TRANSPORTE
Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas
Nota: especificar si paciente es portador de fibrosis qustica

PROCEDIMENTO
CONTENEDOR
TRANSPORTE
EXPECTORACION 1. Enjuagar la boca con agua destilada estril o solucin salina. 2. Obtener el esputo tras una expectoracin profunda, preferentemente matinal. 3. De no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (15 ml durante 10 minutos), drenaje postural o kinesioterapia respiratoria. Frasco estril hermtico de boca ancha Volumen: 2 a 5 ml. Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas
ASPIRADO TRAQUEAL / ASPIRADO TRAQUEAL CUANTITATIVO Nota: Aspirado traqueal cuantitativo slo en pacientes sometidos a Ventilacin Mecnica (diagnstico NAVM). 1. Aspirar el tubo endotraqueal antes de obtener la muestra. 2. Utilizando tcnica asptica, introducir un catter de aspiracin por el tubo endotraqueal y conectar a un colector o trampa estril. 3. No diluir la muestra. Si las secreciones son espesas, se deben aplicar aspiraciones intermitentes hasta conseguir la muestra. El procedimiento debe ser realizado idealmente por dos operadores entrenados. LAVADO BRONCOALVEOLAR 1. Broncoscopa. Realizar el procedimiento con tcnica asptica. Instilar solucin salina estril y recuperar el lavado en un tubo o frasco estril. Frasco estril hermtico Volumen mnimo 2 ml. Transporte inmediato a temperatura ambiente Frasco estril hermtico Volumen mnimo 2 ml. Transporte inmediato a temperatura ambiente

PROCEDIMENTO
CONTENEDOR
TRANSPORTE
ASPIRADO NASOFARINGEO CON RED DE ASPIRACION CENTRAL O BOMBA DE VACIO 1. Extender la cabeza del paciente en un ngulo de 70 2. Abrir el kit de aspiracin. Conectar un extremo del tubo (dimetro mayor) a la bomba o red de aspiracin. 3. Conectar el otro extremo del tubo (dimetro menor) a una sonda de alimentacin (dimetro 6 u 8). 4. Medir con la sonda desde la aleta de la fosa nasal hasta el lbulo de la oreja, medida que se introducir en la fosa nasal del paciente. 5. Insertar la sonda de alimentacin por la fosa nasal del paciente. 6. Retirar la sonda, aspirando y girando suavemente. 7. Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal. 8. Aspirar un volumen de 5-10 ml de solucin tampn pH 7,2 (PBS) fro a travs del tubo colector para arrastrar la secrecin de la sonda. 9. Cambiar la tapa del tubo colector, identificar con los datos del paciente. Nota: realizar la toma de muestra con guantes de procedimiento y mascarilla quirrgica. Se recomienda tomar la muestra con el paciente en ayunas. ASPIRADO NASOFARINGEO CON JERINGA 1. Extender la cabeza del paciente en un ngulo de 70 2. Conectar la sonda de alimentacin directamente en la jeringa. 3. Medir con la sonda desde la aleta de la fosa nasal hasta el lbulo de la oreja, medida que se introducir en la fosa nasal del paciente. 4. Introducir la sonda por la fosa nasal y retirarla aspirando con la jeringa. 5. Traspasar la muestra al tubo con PBS, colocando el extremo de la sonda de alimentacin en el tubo, aspirando el contenido (PBS) y vaciando nuevamente el contenido de la jeringa al tubo colector. Nota: realizar la toma de muestra con guantes de procedimiento y mascarilla quirrgica Se recomienda tomar la muestra con el paciente en ayunas. Frasco con medio de transporte viral o PBS fro. Transporte a 4 C o en hielo hasta 2 horas Frasco con medio de transporte viral o PBS fro. Transporte a 4 C o en hielo hasta 2 horas
PROCEDIMENTO HISOPADO NASOFARINGEO 1. Poner la cabeza del paciente en un ngulo de 70 grados. 2. Introducir hisopo en la fosa nasal. Deslizar el hisopo por la mucosa del piso de la fosa nasal hasta tocar la pared posterior de la faringe. 3. Frotar el hisopo en la faringe haciendo girar para obtener una buena cantidad de clulas epiteliales. 4. Repetir el procedimiento con la misma trula en la otra fosa nasal. 5. Retirar el hisopo, y ponerlo en frasco con medio de transporte o PBS. 6. Si el hisopo no cabe entero en el frasco debe cortarse o quebrarse. 7. Rotular la muestra con los datos del paciente Nota: No introducir el hisopo hacia arriba siguiendo la forma de la nariz, sino hacia atrs siguiendo el piso de la nariz. Nota: realizar la toma de muestra con guantes de procedimiento y mascarilla quirrgica.
CONTENEDOR
TRANSPORTE
Hisopo de dacrn o rayn. No utilizar trulas de algodn o trulas con medio de transporte Stuart o Cary Blair. Introducir el hisopo en medio de transporte viral o PBS fro.
Transporte a 4 C o en hielo hasta 2 horas
5.5.4 Tracto gastrointestinal:

PROCEDIMENTO DEPOSICION PARA COPROCULTIVO 1. Obtener deposicin recin emitida con la trula, seleccionando la zona ms alterada de la deposicin (mucus, pus, sangre). 2. Introducir la trula inmediatamente al medio de transporte. 3. En caso de no tener deposicin, introducir suavemente la trula a travs del esfnter anal alrededor de tres cm. y rotar en forma circular. Retirar la trula e introducirla inmediatamente al medio de transporte. DEPOSICION PARA ROTAVIRUS / TOXINA C. DIFFICILE / LEUCOCITOS FECALES 1. Recolectar alrededor de 5 ml de deposicin recin emitida en el frasco estril. Frasco hermtico ancha de estril boca Transporte inmediato a temperatura ambiente. Trula de algodn con medio de transporte Cary Blair Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas. No refrigerar. CONTENEDOR TRANSPORTE
Volumen: 5 a 10 ml. HISOPADO RECTAL PARA BUSQUEDA DE ENTEROCOCCUS RESISTENTE A VANCOMICINA 1. Introducir la trula en el esfnter anal, rotar suavemente y retirar. 2. Introducir la trula inmediatamente en el medio de transporte. Nota: seguir calendario de vigilancia de ERV del comit de IIH. CONTENIDO GASTRICO PARA BUSQUEDA DE TBC 1. Introducir la sonda nasogstrica hasta el estmago. 2. Lavar con 25-50 ml de agua destilada o suero fisiolgico estril. 3. Aspirar la muestra e introducir en un tubo o frasco estril. Nota: Recolectar la muestra a primera hora de la maana, antes que el paciente reciba alimentacin. Frasco estril hermtico protegido de la luz Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas
5.5.5 Tracto genital:

PROCEDIMENTO FLUJO VAGINAL Incluye tincin de gram, cultivo corriente y cultivo de hongos 1. Con la paciente en posicin ginecolgica introducir el espculo sin lubricante (si es necesario utilizar agua tibia). 2. Recoger bajo visin directa la muestra con una trula, de la zona con mayor exudado, o en su defecto, del fondo del saco posterior. 3. Introducir la trula en el medio de transporte (cultivo). 4. Si slo se requiere tincin de gram, rotar la trula con muestra en un portaobjetos limpio y dejar secar al aire. Rotular el portaobjetos con el nombre y RUT de la paciente. SECRECION ENDOCERVICAL 1. Con la paciente en posicin ginecolgica introducir el espculo sin lubricante (si es necesario utilizar agua tibia). 2. Bajo visin directa, limpiar el exocrvix de secreciones vaginales con una trula seca. 3. Introducir una trula en el canal endocervical con un suave movimiento de rotacin. 4. Retirar e introducir inmediatamente en el medio de transporte. 5. Si slo se requiere tincin de gram, rotar la trula con muestra en un portaobjetos limpio y dejar secar al aire. Rotular el portaobjetos con el nombre y RUT de la paciente. PESQUISA DE STREPTOCOCCUS AGALACTIAE EN EMBARAZADAS 1. Con la paciente en posicin ginecolgica rotar la trula estril por la zona perineal. 2. Introducir inmediatamente en el medio de transporte. Nota: rotular el tipo de muestra como Bsqueda de Streptococcus grupo B. Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas CONTENEDOR TRANSPORTE

PROCEDIMENTO
CONTENEDOR
TRANSPORTE
SECRECION URETRAL 1. En caso de exudado franco, recoger el exudado con la trula estril. El exudado puede estimularse exprimiendo la uretra. 2. Si no se observa exudado introducir suavemente una trula con movimiento rotatorio hasta +/- 2 cm dentro de la uretra. 3. Retirar e introducir inmediatamente en el medio de transporte. 4. Si slo se requiere tincin de gram, rotar la trula con muestra en un portaobjetos limpio y dejar secar al aire. Rotular el portaobjetos con el nombre y RUT del paciente. Nota: Obtener la muestra preferentemente antes de la primera miccin de la maana. Si esto no es posible, esperar por lo menos una hora desde la ltima miccin FLUJO VAGINAL PARA ESTUDIO DE TRICHOMONAS (EXAMEN DIRECTO) 1. Con la paciente en posicin ginecolgica introducir el espculo sin lubricante (si es necesario utilizar agua tibia). 2. Recoger bajo visin directa la muestra con una trula, de la zona con mayor exudado, o en su defecto, del fondo del saco posterior. 3. Introducir la trula en el tubo con suero fisiolgico estril. 4. Enviar inmediatamente al laboratorio. Tubo estril con 2 ml de suero fisiolgico estril Transporte Inmediato (antes de 15 minutos) a temperatura ambiente. La muestra puede mantenerse a 37 C hasta dos horas. NO refrigerar. Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Lmina portaobjeto (extendido) Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas
Coordinar recepcin de muestras previamente con TM de Laboratorio Clnico seccin Serologas (242332) o Microbiologa (2422001)
5.5.6 Piel y tejidos blandos:

PROCEDIMENTO HERIDAS / QUEMADURAS / ULCERAS 1. Lavar cuidadosamente la superficie de la herida por arrastre mecnico, eliminar detritus y secrecin superficial. 2. Con la trula frotar la parte ms profunda, evitando el contacto con la piel adyacente. 3. Introducir la trula inmediatamente en el medio de transporte. Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas. CONTENEDOR TRANSPORTE
VESICULAS 1. Realizar antisepsia de piel abarcando una zona de 10 cm. alrededor de la zona a puncionar. 2. Aspirar con jeringa el contenido de las lesiones. Cuando esto no es posible, instilar una pequea cantidad de suero fisiolgico estril y aspirar. 3. Transferir la muestra a un tubo o frasco estril. 4. En caso de lceras secundarias o lesiones costrosas, remover la secrecin superficial por limpieza por arrastre, raspar con una trula la base de la lesin e introducir la trula al medio de transporte. Frasco o tubo estril hermtico. Si la cantidad de aspirado es muy pequea, enviar directamente la jeringa tapada y sin aguja. O Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Frasco o tubo estril hermtico Transporte inmediato a temperatura ambiente
ABSCESOS CERRADOS 1. Realizar antisepsia de piel abarcando una zona de 10 cm. alrededor de la zona a puncionar. 2. Puncionar y aspirar el material con jeringa. 3. Transferir la muestra a un tubo o frasco estril. Transporte inmediato a temperatura ambiente

PROCEDIMENTO
CONTENEDOR
TRANSPORTE
ESTUDIO MICOLOGICO DE PIEL 1. Desinfeccin de la zona con alcohol 70 . 2. Raspar suavemente la lesin con bistur o cucharilla esterilizada y depositar la muestra en entre dos portaobjetos limpios. 3. Tomar cantidad de muestra suficiente para examen directo y cultivo. Lminas portaobjeto. Envolver los portaobjetos en papel plstico o bolsas individuales para evitar la prdida de muestra durante el transporte. Lminas portaobjeto. Envolver los portaobjetos en papel plstico o bolsas individuales para evitar la prdida de muestra durante el transporte. Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 24 horas
ESTUDIO MICOLOGICO DE UA 1. Desinfeccin de la zona con alcohol 70 . 2. Raspar profundamente con cucharilla estril el lecho ungueal (debajo de la ua) y depositar la muestra entre dos portaobjetos limpios. 3. Tomar cantidad de muestra suficiente para examen directo y cultivo. Transporte a temperatura ambiente hasta 24 horas
ESTUDIO MICOLOGICO DE MUCOSA (BUCAL O LENGUA) 1. Con la trula frotar la zona alterada, evitando el contacto con la piel o mucosa adyacente. 2. Introducir la trula inmediatamente en el medio de transporte. ESTUDIO MICOLOGICO DE PELO 1. Tomar con las pinzas 10 a 12 pelos afectados, con races y puntas intactas. 2. Depositar la muestra en tubo o frasco estril. Frasco o hermtico tubo estril Transporte a temperatura ambiente hasta 24 horas Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas
5.5.7 Muestras oculares:

PROCEDIMENTO SECRECION CONJUNTIVAL 1. Con una trula humedecida en suero fisiolgico estril, frotar sobre la conjuntiva tarsal inferior y el frnix (ngulo interno). 2. Introducir la trula inmediatamente al medio de transporte. Nota: recolectar la muestra antes de la aplicacin de analgsicos locales, colirios o antibiticos RASPADO CORNEAL 1. Raspar la(s) lcera(s) o lesin(es) con una esptula estril. 2. Inoculacin directa de las placas de cultivo y posterior realizacin de dos extendidos rotando la esptula en los portaobjetos. Placas de cultivo lminas portaobjeto. y Transporte Inmediato (antes de 15 minutos) a temperatura ambiente Trula fina de algodn con medio de transporte Stuart Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas CONTENEDOR TRANSPORTE
Nota: Procedimiento realizado por oftalmlogo, previa coordinacin con el Laboratorio de Microbiologa (2422001) para la entrega de material.
5.5.8 Muestras de lquidos estriles y tejidos (*):

PROCEDIMENTO LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO 1. Realizar antisepsia de piel con clorhexidina, povidona yodada o alcohol 70%. 2. Puncionar entre L3-L4 o L4-L5 e insertar la aguja en el canal espinal. No aspirar. Recolectar el lquido directamente en los tubos necesarios. 3. Volumen recomendado de muestra 2 ml (mnimo 0,5 ml.) Frasco o tubo Sin aditivos estril hermtico Transporte inmediato a temperatura ambiente. No refrigerar. CONTENEDOR TRANSPORTE
LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL / PLEURAL / ASCITICO / PERICARDICO / AMNIOTICO 1. Realizar antisepsia de piel con clorhexidina, povidona yodada o alcohol 70%. 2. Puncionar y aspirar directamente con jeringa. 3. Transferir la muestra a un tubo estril o a un frasco de Hemocultivo (rotular el frasco, sacar la tapa plstica y desinfectar el tapn de goma del frasco de hemocultivo con alcohol 70 antes de realizar la antisepsia de piel). 4. Volumen recomendado de muestra 2 a 5 ml. TEJIDO 1. Tcnica quirrgica. 2. Volumen: Basta con un trozo de tejido (+/- 0,5 x 0,5 cm.). Frasco o tubo estril hermtico sin aditivos (agregar solucin salina estril si es necesario para evitar que se deseque la muestra). Transporte inmediato a temperatura ambiente. No fijar la muestra Frasco o tubo estril hermtico Sin aditivos o Frasco de hemocultivo peditrico Transporte inmediato a temperatura ambiente.
(*) Nota: Corresponden a procedimientos que deben ser realizados por mdico capacitado
5.6 Registros: Orden de examen. Registro de toma de muestras en hoja de enfermera. Registro de recepcin de muestras de Laboratorio Clnico. Registro de recepcin de muestras de Laboratorio de Microbiologa (SIL). Registro de rechazo de muestras.
6. Flujograma: Proceso de indicacin, toma de muestra y recepcin de la muestra.

Solicitud de Examen Microbiolgico Nombre y RUT Edad Fecha de toma de muestra Diagnstico clnico Estudio solicitado Tipo de muestra y sitio anatmico
Elaboracin de Orden de examen Preparacin de zona de toma de muestra
Recoleccin de la muestra
Rotulacin de la muestra
Envo a Laboratorio
NO
Muestra Aceptada
SI
Registro y Reporte de rechazo de muestra
Procesamiento de la muestra
7. Indicador y mtodo de evaluacin:
7.1 Tasa de Contaminacin de Hemocultivos por servicio:

Indicador Frmula Rango de desempeo Fuente de informacin Perodo de evaluacin Responsable Tasa de Contaminacin de Hemocultivos por servicio N de hemocultivos contaminados por servicio clnico x 100 N de hemocultivos perifricos solicitados por ser vicio clnico Excelente < 1% / Aceptable 1 5% / Critico > 5% Sistema Informtico de Laboratorio Semestral Mdico Laboratorio de Microbiologa
7.2 Porcentaje de Hemocultivos con volumen adecuado:

Indicador Frmula Rango de desempeo Fuente de informacin Perodo de evaluacin Responsable Porcentaje de Hemocultivos de adulto con volumen adecuado N de hemocultivos de adulto con volumen de 10 2 ml por servicio clnico / N total de hemocultivos solicitados por servicio clnico X 100. Excelente > 95% / Aceptable 70 95% / Critico < 70% Sistema Informtico de Laboratorio. Semestral. Mdico Laboratorio de Microbiologa.
7.3 Tasa de Contaminacin de Urocultivos por servicio:

Indicador Frmula Rango de desempeo Fuente de informacin Perodo de evaluacin Responsable Tasa de Contaminacin de Urocultivos por servicio N de urocultivos contaminados por servicio clnico x 100 N total de urocultivos solicitados por servic io clnico. Excelente < 2% / Aceptable 2 5% / Critico > 5% Sistema Informtico de Laboratorio Semestral Mdico Laboratorio de Microbiologa
8. Distribucin del documento: 8.1 Direccin HSJD. 8.2 Subdireccin Mdica Atencin Cerrada, Subdireccin Mdica Atencin Abierta. 8.3 Subdireccin de Gestin del Cuidado, Subdireccin de Apoyo Clnico. 8.4 Servicios y Unidades clnicas y de apoyo. 8.5 Unidad de Calidad y Seguridad del Paciente.
9. Referencias bibliogrficas: 9.1 Montiel F., Lam M. Seleccin, recoleccin y transporte de muestras para estudios microbiolgicos. En: Manual de Microbiologa Clnica. Editorial Mediterrneo, 2001. 9.2 Thomson RB. Specimen Collection, Transport, and Processing: Bacteriology. En: Murray PR, Baron EJ. Manual of Clinical Microbiology. 9 ed. 2007 9.3 Isenberg, HD. Specimen Collection, Transport and Acceptability. En: Isenberg, HD. Clinical Microbiology Procedures Handbook 10. Anexos: 10.1 Pautas de evaluacin de Toma de muestras de Urocultivo. 10.2 Pautas de evaluacin de Toma de muestras de Hemocultivo.
Anexo 1: Pautas de evaluacin de Toma de muestras de urocultivo.
PROPOSITO OBJETIVO EVALUACION 1 EVALUACION 2 UMBRAL DE CUMPLIMIENTO
Lograr una adecuada toma de muestra de orina para urocultivo. Evaluar el cumplimiento de las medidas de toma de muestra de urocultivo. N de pautas aplicadas que cumplen 100% x 100 Nmero total de pautas aplicadas Nmero de tems cumplidos en las pautas aplicadas X 100 Nmero total de tems evaluados en las pautas aplicadas Excelente > 90% / Aceptable 75 - 90% / Critico < 75%
Pauta de supervisin Toma de muestra de urocultivo Muestra: Orina de segundo chorro Fecha de la evaluacin: ___________________________________________________ Servicio clnico/Sector: _____________________________________________________ Estamento Funcionario evaluado: ____________________________________________ Nombre del evaluador: _____________________________________________________
tems a evaluar Explica procedimiento al paciente. Realiza higiene de manos antes del aseo genital. Practica aseo genital segn norma. Realiza higiene de manos antes de tomar la muestra. Se coloca guantes para la toma de muestra. Desecha el primer chorro de orina. Recibe la muestra directamente en contenedor estril. Enva la muestra de inmediato a laboratorio o mantiene el frasco de orina en contenedor a 4 - 8 C hasta su envo. Rotula la orden con el tipo de muestra. Registro de procedimiento en hoja de enfermera. SI NO
Observaciones:____________________________________________________________ ________________________________________________________________________
Pauta de supervisin Toma de muestra de urocultivo Muestra: Orina por cateterismo vesical o por cambio de sonda foley. Fecha de la evaluacin: ____________________________________________________ Servicio clnico/Sector: _____________________________________________________ Estamento Funcionario evaluado: ____________________________________________ Nombre del evaluador: _____________________________________________________
tems a evaluar Explica procedimiento al paciente. Realiza higiene de manos antes del aseo genital. Practica aseo genital segn norma. Realiza higiene de manos antes de realizar procedimiento. Se coloca guantes estriles. Utiliza tcnica asptica para el procedimiento. Desecha el primer chorro de orina (5 a 10 ml). Recibe la muestra directamente en contenedor estril. Enva la muestra de inmediato a laboratorio o mantiene el frasco de orina en contenedor a 4 - 8 C hasta su envo. Rotula la orden con el tipo de muestra. Registro de procedimiento en hoja de enfermera.
SI
NO
Observaciones:____________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________
Pauta de supervisin Toma de muestra de urocultivo. Muestra: Orina por puncin de sonda foley Fecha de la evaluacin: ____________________________________________________ Servicio clnico/Sector: _____________________________________________________ Estamento Funcionario evaluado: ____________________________________________ Nombre del evaluador: _____________________________________________________
tems a evaluar Explica procedimiento al paciente. Se descarta posibilidad de cambio de sonda por condiciones del paciente. Realiza higiene de manos antes de realizar procedimiento. Utiliza guantes para la toma de muestra. Desinfecta el sitio de puncin del catter con alcohol al 70%. Punciona la sonda foley en segmento proximal al paciente. Punciona y aspira 2 a 5 ml. de orina. Enva la muestra de inmediato a laboratorio o mantiene el frasco de orina en contenedor a 4 - 8 C hasta su envo. Rotula la orden con el tipo de muestra. Registro de procedimiento en hoja de enfermera.
SI
NO
No Aplica
Observaciones:____________________________________________________________ ________________________________________________________________________ _________________ _______________________________________________________
Anexo 2: Pautas de evaluacin de Toma de muestras de hemocultivo.

PROPOSITO OBJETIVO INDICADOR 1 INDICADOR 2 UMBRAL DE CUMPLIMIENTO Lograr una adecuada toma de muestra de sangre para hemocultivos Evaluar el cumplimiento de las medidas de toma de muestra de hemocultivos N de pautas aplicadas que cumplen 100% x 100 Nmero total de pautas aplicadas Nmero de tem cumplidos en las pautas aplicadas X 100 Nmero total de tem evaluados en las pautas aplicadas Excelente > 90% / Aceptable 75 - 90% / Deficiente < 74%
Pauta de supervisin Toma de muestra de Hemocultivos perifricos Fecha de la evaluacin: ____________________________________________________ Servicio clnico/Sector: _____________________________________________________ Estamento Funcionario evaluado: ____________________________________________ Nombre del evaluador: _____________________________________________________
tems a evaluar Rotula los frascos con el tipo de muestra, nombre de paciente, fecha y hora de la toma de muestra. Desinfecta con gasa estril impregnada en alcohol 70% el tapn de goma del frasco. Realiza higiene de manos antes del procedimiento. Limpia ampliamente la zona a puncionar con agua y jabn y seca la piel. Realiza desinfeccin de piel con alcohol 70% y espera que seque antes de puncionar Utiliza guantes estriles para realizar la puncin. Toma volumen adecuado de sangre (ver manual de toma de muestra). Realiza una puncin distinta para cada frasco. Enva la muestra de inmediato a laboratorio a temperatura ambiente. Registro de procedimiento en hoja de enfermera. SI NO
Observaciones:_______________________________________________________
__________________________________________________________________ _________________________________________________________________
Pauta de supervisin Toma de muestra de Hemocultivos centrales
Fecha de la evaluacin: ____________________________________________________ Servicio clnico/Sector: _____________________________________________________ Estamento Funcionario evaluado: ____________________________________________ Nombre del evaluador: _____________________________________________________
tems a evaluar Rotula los frasco con el tipo de muestra, nombre de paciente, fecha y hora de la toma de muestra Desinfecta con gasa estril impregnada en alcohol 70% el tapn de goma del frasco Realiza higiene de manos antes del procedimiento Limpia y desinfecta con alcohol la piel alrededor del catter Realiza desinfeccin de la(s) conexin(es) con alcohol 70% y abre la(s) conexin(es) con tcnica asptica Utiliza guantes estriles para la toma de muestra Elimina los primeros 1 a 3 ml de sangre extrada Toma volumen adecuado de sangre (ver manual de toma de muestra) y volumen es igual a hemocultivo(s) perifrico(s) Se toma por lo menos una muestra de hemocultivo perifrico Enva la muestra de inmediato a laboratorio a temperatura ambiente Registro de procedimiento en hoja de enfermera
SI
NO
Observaciones:_______________________________________________________
__________________________________________________________________ __________________________________________________________________ _________________________________________________________________

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5.5 Normas especficas por tipo de muestra: 5.5.1 Hemocultivos:

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Transporte inmediato a temperatura ambiente

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Transporte inmediato a temperatura ambiente

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5.5.2 Urocultivos (*):

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5.5.3 Tracto respiratorio:

Transporte a temperatura ambiente hasta 2 horas

Nota: especificar si paciente es portador de fibrosis qustica

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Transporte a 4 C o en hielo hasta 2 horas

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5.5.4 Tracto gastrointestinal:

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5.5.5 Tracto genital:

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5.5.6 Piel y tejidos blandos:

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5.5.7 Muestras oculares:

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5.5.8 Muestras de lquidos estriles y tejidos (*):

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6. Flujograma: Proceso de indicacin, toma de muestra y recepcin de la muestra.

Elaboracin de Orden de examen Preparacin de zona de toma de muestra

Registro y Reporte de rechazo de muestra

Manual de Toma y transporte de muestras microbiolgicas

7. Indicador y mtodo de evaluacin:

7.1 Tasa de Contaminacin de Hemocultivos por servicio:

7.2 Porcentaje de Hemocultivos con volumen adecuado:

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7.3 Tasa de Contaminacin de Urocultivos por servicio:

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Anexo 1: Pautas de evaluacin de Toma de muestras de urocultivo.

PROPOSITO OBJETIVO EVALUACION 1 EVALUACION 2 UMBRAL DE CUMPLIMIENTO

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Observaciones:____________________________________________________________ ________________________________________________________________________ _________________ _______________________________________________________

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Anexo 2: Pautas de evaluacin de Toma de muestras de hemocultivo.

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Pauta de supervisin Toma de muestra de Hemocultivos centrales

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Observaciones: ____ _ _______________________________________________

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