Analiza plantelor

Principii
Principiile analizei chimice a plantelor au fost dezvoltate ncepnd din anii 1800, n Europa Direcii n cercetarea tiinific din domeniul analizei chimice a plantelor:

investigarea disfunciilor nutriionale interpretarea i compararea rezultatelor obinute n urma

monitorizrii plantelor pe diverse perioade de timp

dezvoltarea de metode de analiz rapide i eficiente

utilizarea rezultatelor analizelor ca metod de monitorizare a
nutrienilor

Utilitatea practic a analizelor pe probe de plante

stabilirea importanei unui anumit element pentru dezvoltarea plantelor

sau a msurii n care acesta este asociat cu nutriia i creterea plantei

verificarea gradului de toxicitate a anumitor elemente stabilirea concentraiilor optime de elemente pentru obinerea unor

randamente mari la recoltare

determinarea prin experimente pe diverse culturi a msurii n care solul

sau fertilizatorii asigur plantelor necesarul de nutrieni compatibilitii acestora pentru o anumit cultur

evaluarea i compararea unor zone diferite din punctul de vedere al

Concentraii ale elementelor eseniale n plante

Aspecte specifice ale analizei plantelor

respectarea procedurii descris n metoda de lucru

proba de analizat: reprezentativ pentru ntreaga plant:

partea de plant care se eantioneaz

numrul de plante necesare momentul din evoluia plantei n care este recomadabil s se

preleveze proba

Prelevare probe

Scientist sampling plants for tritium analysis. The plants act as "detectors" for the presence of tritium in the soil's water vapor.

 manipularea corect a probei:

identificarea probei: locul prelevrii, numr
depozitare, conservare

alegerea unei metode adecvate pentru pregtirea probei i

pentru efectuarea analizei

prelucrarea i nregistrarea rezultatelor analizei

Ce NU poate constitui prob de analizat

pri de plant acoperite cu sol,

praf sau rezidduri chimice

plante distruse de insecte, prin

mijloace mecanice, sau plante bolnave

plante moarte sau fragmente din

plante moarte
plante aflate n condiii de

temperatur i umiditate neobinuite

Prepararea plantelor pentru analiza de

laborator

decontaminarea uscarea reducerea dimensiunii materialului uscat (mcinare) pstrarea distrugerea materiei organice extracia fitochimic

Cut randomly select plant

Put into soapy water jar

Sample five plants

Bring to lab / office

No. 170 Sieve, tilted base

Flushing water tank, 18psi

Rinse lid into sieve

pour out contents....

....into the sieve

Flush out the jar into sieve

Wash each plant.....

....rubbing every part clean

Decontaminarea
const n splarea i cltirea cu ap deionizat
in cazul n care s-a utilizat o metod corect de prelevare a

probei, decontaminarea nu este semnificativ

decontaminarea nu este obligatorie n cazul n care planta a

fost expus ploilor repetate i n cazul n care nu au fost aplicate prin pulverizare fungicide sau soluii coninnd nutrieni a opri reaciile enzimatice i degradarea esuturilor

dup decontaminare plantele trebuie uscate imediat pentru

Uscarea n etuv

Scop: - stoparea reaciilor enzimatice - stabilizarea probei - faciliteaz mcinarea

Condiii: 800C timp de 12-24 h Durata uscrii este dependent de natura probei i de coninutul de ap al acesteia Probele cu coninut ridicat de carbonai necesit utilizarea unei alte metodologii de uscare Uscarea rapid n cuptoare cu microunde

Reducerea dimensiunilor particulelor

constituente ale probei
Dimensiunea a particulelor

probelor este redus la 0.51.0 mm pentru a se asigura omogenitatea probei i a se facilita distrugerea materiei organice

Mcinare:
mori mecanice n azot lichid folosind

un mojar i pistil rcite

n prealabil vid

Wiley Mill

Pstrare

s asigure integritatea probei pn n momentul cntririi i

aplicrii procedurii analitice

conteinere vidate, dulapuri speciale plasate ntr-un mediu

ntunecos i uscat sau frigidere

Distrugerea materiei organice

Descompunerea la temperatur nalt (Dry

Ashing)
Mineralizarea cu acizi (Wet Ashing) Mineralizarea accelerat (Accelerated Wet

Digestion)

Descompunerea la temperatur nalt

(Dry Ashing)

cuptor electric la 500-5500C, timp de 4-8 ore cenua se dizolv n HNO3 sau HCl diluate sau ntr-un

amestec al acestora

 probele cu coninut ridicat de zaharuri sau uleiuri pot

necesita adugarea de: H2SO4 10%, HNO3 concentrat sau soluie de Mg(NO3)2H2O 7%
metoda nu este recomandat n cazul plantelor cu coninut

ridicat de Si - afecteaz recuperarea Zn

descompunerea la temperatur nalt poate conduce la

valori mai sczute ale concentraiilor de Fe i Al

Oxidarea uscat la temperatur nalt

metod pe baza creia se prepar probele de plante pentru analiza

B, Ca, Cu, Fe, Mg, Mn, P, K, Na i Zn

cenua obinut se dizolv n acid clorhidric iar soluia astfel

obinut poate fi analizat spectrofotometrie n UV-Vis

prin

AAS,

ICP-AES

sau

Limita de detecie: 0.04% pentru Ca, K, Mg i P i 4.0mg/kg pentru

Cu, Fe, Mn, Na i Zn/ mas de plant uscat

Reproductibilitate: 7%

Mineralizarea cu acizi (Wet Ashing)

se folosesc unul dintre urmtorii acizi: H2SO4, HNO3 i
HClO4 sau un amestec, H2O2

Condiii: 80-1250C, pe plit electric

dup dizolvare, soluia este rcit i diluat n

funcie de metoda i aparatura utilizate pentru determinare

Factori care influeneaz rezultatele mineralizrii cu acizi

vasul n care se efectuez operaia temperatura compoziia amestecului de acizi volumul final

Recomandat pentru probe cu coninut ridicat de Si sau pentru cele care conin elemente volatile: As, Hg, Se

Mineralizarea cu amestec acid azoticpercloric n vas deschis

utilizat pentru preparea probelor n vederea determinrii Ca, Cu,

Fe, Mg, Mn,Mo, P, K, Se, Na, S i Zn i elementelor aflate n urme prin AAS, ICP-AES i a P i S prin spectrofotometrie n UV-Vis i turbidimetrie

presupune dizolvarea prealabil n HNO3, urmat de adugarea

HClO4 i dizolvare la temperatur nalt

Limita de detecie: 0.02% pentru P, S, K, Mg, i Na i 0.5 mg/kg

pentru Zn, Mn, Fe i Cu/ mas de substan uscat

Reproductibilitate: 7%

Mineralizarea accelerat (Accelerated

Wet Digestion)
cuprinde: procedee de oxidare umed care utilizeaz pentru

reducerea timpului de dizolvare temperaturi sau presiuni ridicate

sunt utilizate vase deschise sau nchise i plite electrice sau

cuptoare cu microunde ca surs de cldur

pierderea de prob este controlat prin ataarea de sisteme pentru refluxare

procedeele care folosesc vase deschise trebuie monitorizate

pentru a evita pierdea de prob

Mineralizarea asistat de microunde n

vase nchise/deschise
Se pregtesc probele pentru determinarea B, Ca, Cu, Fe,

Mg, Mn, Mo, P, K, Na, S and Zn prin AAS sau ICP-AES, folosind pentru dizolvare un amestec de acid azotic/ap oxigenat i nclzire n cuptor cu microunde n vas nchis
Dezavantaje: nu asigur o oxidare completa a carbonului organic
nu asigur recuperarea integral Al, Si i Se din plant

Limita de detecie: 0.01% pentru Ca, K, Mg i P i 0.2 mg/kg

pentru B, Cu, Fe, Mn, Mo i Zn/ mas de substana uscat

Reproductibilitate: 7% pentru toi analiii

Fitochimie

Fitochimia const n studiul compuilor biologic activi aflai

n plante care pot avea: un efect protector mpotriva insectelor sau bolilor plantelor proprieti benefice asupra sntii oamenilor

Extracia fitochimic

tehnici i procese de extracie

care permit izolarea speciilor la nivel molecular i obinerea de extrase cu utilitate terapeutic

 Tehnicile utilizate pentru extracia acestor compui

din plante medicinale sunt: infuzia, macerarea, percolarea, dezagregarea, extracia Soxhlet, fermentaia, extracia asistat microunde sau ultrasunete extracia cu fluide supercritice extracia fitonic care utilizeaz solveni de tipul 1,1,2,2tetrafluoroetan cunoscut ca hidrofluorocarbon 134A

Pentru plantele aromatice sunt utilizate:

hidrodistilarea, macerarea urmat de distilare, microextracia pe faz solid

 Cantitatea i compoziia speciilor extrase este

influenat:

tipul extracie timpul de extracie temperatur natura solventului concentraia solventului polaritatea solventului

1.OMOGENIZARE: -ruperea esuturilor -eliberarea compuilor chimici

2. FILTRARE CU VID: -separarea compuilor chimici de resturile de plant

Infuzia:
macerare cu durat scurt n ap rece sau cald

Macerare

Percolare
macerare urmat de extracie prin adugarea continu, cu vitez controlat de solvent proasptextracie complet

Liofilizare:
ingheare extract, reducerea presiunii i nclzire la o temperatur care s permit sublimarea

Extracia cu solveni

Extracia cu solvent accelerat (ASE-accelerated solvent extraction)

este similar ca i principiu extraciei Soxhlet

const n efectuarea extraciei la presiuni i temperaturi ridicate

crete capacitatea de solubilizare a solventului

extracia se efectueaz n timp scurt i cu cantitate mic de solvent

Extracia Soxhlet

Extracia cu solveni asistat de ultrasunete

se bazeaz pe faptul c

propagarea undelor sonore din domeniul ultrasunetelor prin lichide provoac condensri i dilatri cu variaii mari de presiune i temperatur care favorizeaz extracia n solveni