Enzimas de Restriccin

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Que son las enzimas de restriccin?

Sitio de restriccin

2 a 8 bases nitrogenadas

Ligasas
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Extremos cohesivos

Extremos romos

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Estas enzimas fueron descubiertas en la dcada del 70 y hasta la fecha existen ms de 250 enzimas de restriccin. Para diferenciarlas se les Nomenclatura Ejemplo Corresponde a: agregan letras y Gnero de la bacteria nmeros E Escherichia romanos, colipor Especie de la bacteria ejemplo: co EcoRI.
R I RY13 Cepa de la bacteria La primera enzima identificada Orden de identificacin de la enzima en la bacteria

Orige n

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La primer enzima descubierta del tipo II se descubri en la bacteria Haemophilus influenzae. Se cree que la funcin natural de estas enzimas en las bacterias es protegerlas contra ADN de virus que podran ingresar en sus clulas. De esta manera, la bacteria utiliza estas tijeras moleculares para

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En 1972 justamente se genera el primer ADN recombinante combinando el ADN de un plsmido, con un tramo de ADN de anfibio.

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Existen 3 tipos de enzimas de restriccin:

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Tipo I y Tipo III: a) Tienen actividad de restriccin (cortan) y

modificacin (metilan). a) Cortan a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento, las Tipo I cortan lejos de la secuencia de reconocimiento, ya sea ro arriba o ro abajo. Las Tipo III cortan de 5-8 bases antes o despus de la secuencia que reconocen. a) Necesitan ATP para moverse a travs de la molcula de DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte.
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Tipo II:
a) Slo tienen actividad de restriccin. a) Cortan de manera consistente y predecible dentro de la secuencia que reconocen. a) Slo requieren Mg++ como cofactor. a) No necesitan ATP.

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Usos y Aplicaciones

Haga clic para modificar el estilo de subttulo del patrn

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1. Hacer mapa de restriccin de un plsmido o bacterifago.

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2. Fragmentar ADN para separacin por electroforesis.

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3. Generacin de fragmentos para ser clonados en los vectores apropiados, y crear ADN recombinante.

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http://www.youtube.com/watch?v=yDGA8n1oJ5Q

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