cido Perydico de Schiff (PAS) Fijacin: 10% en buffer neutro de formalina Se utilizan las siguientes soluciones: 1.

cido hidrocloridrico (cido hidrocloridrico 83.5 ml, agua destilada 916.5 ml) 2. Solucin de Schiff (Disolver 1 gramo de fucsina bsica en 200 ml de agua destilada caliente. Llevar a punto de ebullicin. Dejar enfriar a 50C y filtrar y adicionar cido hidrocloridrco, dejar enfriar ms y adicionar 1 gramo de bisulfito de sodio o metabisulfito de sodio. Mantener en un lugar oscuro durante 48 horas hasta que la solucin comience a tener una coloracin amarillenta. Conservar refrigerado) 3. Test de la solucin de Schiff (Vierta un poco de solucin de Shiff en 10 ml de formaldehido al 37% o 40% en un vidrio. S la solucin se torna rojo-prpura rpidamente esta correcta, si a reaccin se retrasa y resulta en un color azul-prpura profundo la solucin est descopuesta) 4. cido peridico 0.5% (cido peridico 0.5 g, agua destilada 100 ml) 5. Verde brillante al 2% STOCK (verde brillante SF amarillento 2 g, agua destilada 100 ml, cido actico glacial 0.2 ml) 6. Verde brillante SLN de trabajo (SLN verde brillante STOCK 10 ml, agua destilada 50 ml) 7. Hematoxilina de Harris cristales de hematoxilina 5 g, alcohol al 100% 50 ml, amonio o alumbre de potasio 100 g, agua destilada 1000 ml, xido de mercurio rojo 2,5 g) Procedimiento 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 8. Desparafinar e hidratar con agua destilada Oxidar en cido peridico durante 5 minutos Lavar en agua destilada Dejar en la solucin de Schiff durante 15 minutos Lavar en una corriente de agua por 10 minutos para que el color rosa se desarrolle Dejar en la solucin de Hematoxilina de Harris por 6 minutos o la contratincin verde brillante por unos pocos segundos (si existe presencia en la muestra de hongos) Lavar en agua destilada Diferenciar en alcohol cido al 1% de tres a diez veces en enjuagadas rpidas Lavar en agua destilada Sumergir en agua amoniacal las secciones azules lavar en una corriente de agua por 10 minutos Deshidratar con alcohol al 95% o alcohol absoluto y limpiar con xileno dos veces Montar la lmina con Permount o Histoclad