Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Laboratorio de Diagnóstico Clínico.

2º curso

Cocos Gram Negativos - 1 U.T. 12 - 5 Bloque temático III

Familia Neisseriaceae
Introducción Dentro de esta familia encontramos principalmente 2 géneros, semejantes en cuanto a morfología, actividad metabólica y habitat acostumbrado, pero difieren en su potencial patógeno y características genéticas. Los 2 géneros son : Neisseria y Branhamella, a este último por estudio genéticos, se considera subgénero de otro de esta familia que es la Moraxella, aunque antiguamente se incluían en Neisserias, siendo la especie más común la Branhamella catarrhalis. Morfología Son cocos gram (-), se presentan en pares como forma de grano de café, por tener los lados adyacentes aplanados, no presentan esporas, inmóvil, hay cepas encapsuladas y otras producen un pigmento verde amarillento, aerobios estrictos, catalas y oxidasa positivo, poco fermentadores. Cultivo Crecen a 35-37ºC, luego son mesófilas, en una atmósfera de 10% de CO2, la cual se consigue mediante el sistema de la vela o en medios de cultivo que llevan un sobre con una sustancia capaz de crear esa atmósfera. Son bacterias muy susceptibles a influencias ambientales desfavorables como temperatura alta y sequedad; por lo que es conveniente sembrar inmediatamente en un medio adecuado; si esto no fuera posible se utiliza un medio de transporte como el Stuart, que no es nutritivo, pero conservar las bacterias para una posterior recuperación. También puede emplearse un medio de cultivo de transporte nutritivo para desarrollo de las bacterias. Como medios primarios y de aislamiento puede utilizarse el agar chocolate, siendo más selectivos y específicos el Thayer-Martin y el TM modificado que son las botellas Tg (Transgrow).El medio Thayer-Martin, lleva una mezcla de antibióticos (vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprim,que lo hace selectivo para Neisserias. Neisseria gonorrhoeae. Esta bacteria produce la enfermedad denominada gonorrea, la cual se transmite por contacto directo generalmente sexual que en la mujer es asintomática, mientras que en el hombre cursa sin sintomas un 3-10%. El período de incubación es de 3 a 4 días y se manifiesta con uretritis en el hombre y como cervicitis en la mujer, también puede producir infecciones anorectal y bucofaringea, sobre todo en homosexuales. De todos los pacientes con gonorrea, un bajo porcentaje presentan una infección gonocócica diseminada (IGD), por que las bacterias hayan difundido a sangre. Es frecuente e importante la oftalmía gonocócica en RN, pudiendo darse también en mujeres. Muestras: Toma de endocervix, uretra, anorectal, conjuntiva, faringe y sangre, lesiones cutáneas y líquidos articulares en el caso de IGD. Diagnóstico. Primeramente mediante un frotis bien de cultivo, bien de la muestra, para observar morfología, apareciendo los cocos intra y extracelulares. Se debe informar de la celularidad existente como mucha o escasa. También puede realizarse una oxidasa, para comprobar la existencia de un enzima oxidativo, pues son oxidasa positivo.

Mª Isabel Fernández Cerezo. I. E. S. Jaime Ferrán Clúa.

Profesor Técnico de Formación Profesional. San Fernando de Henares. (28830 Madrid)

Curso 2003-2004 Código 28038616

5 Bloque temático III Esto sería una identificación presuntiva. siempre con controles positivos y negativos. muestras nasofaringeas y de las petequias que se producen en la piel. por ver las bacterias de color amarillo verdoso. de C.Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos Laboratorio de Diagnóstico Clínico.T. ambos causantes también de meningitis bacteriana. Muestras. Los conjugados fluorescentes se observan al microscopio para ver si existe o no fluorescencia. que se comportan como antígenos y se enfrentan a antiinmunoglobulinas. Es el causante de la meningitis. Además sólo existe vacuna para el meningococo tipo A y C no para el B. La oxidasa como prueba presuntiva. Se realiza una tinción Gram. Puede hacerse por método directo (Ac. Tb. o Ac. como la glucosa que disminuye y las proteínas que aumentan. siendo maltosa y glucosa positivo. diplococos intracelulares o extracelulares. LCR. se realiza para neumococo y Haemophilus. 2º curso Cocos Gram Negativos . septicimia. Se realiza una electroforesis y cada uno migra hacia el otro hasta que llegan a encontrarse dando lugar a una banda de precipitación entre los dos pocillos donde están Ag y Ac. Sensibilidad a los antimicrobianos. para realizar una identificación definitiva.2 U. Los meningococos han permanecido sensibles hasta ahora a penicilina y cloramfenicol. Sensibilidad antimicrobiana.se marca el Ac con fluoresceína dando lugar a un conjugado que es capaz de reaccionar con el Ag para el cual se hizo el Ac. Como pruebas confirmativas la fermentación de H. La virulencia del meningococo es debida a una endotoxina lipopolisacárida . la cual puede hacerse para identificar Ag. son glucosa positivo con porducción de ácido pero no de gas. Jaime Ferrán Clúa. 12 . para detectar Ag) o indirecto (Ac. sangre. S. E. podemos hacer un estudio de fermentación de H. pero debe realizarse la actividad inhibitoria de las sulfamidas al aparecer resistencias en algunos casos. Por ello se puede usar tetraciclinas como alternativa. que da positiva. I. . como consecuencia de la presencia del enzima beta-lactamasa. donde en un medio alcalino se enfrenta Ag. Los gonococos. Neisseria meningitidis Esta bacteria se encuentra en nasofaringe de portadores sanos en un 3% de la población aunque en invierno puede aumentar esta cifra. pero son sensibles a rifampicina. Pero como método específico y altamente sensible el la contrainmunoelectroforesis. mediante pruebas de aglutinación. observando los cocos Gram (-). de C. son sensibles a la penicilina. La prevención se basa en la vacunación. Puede confundirse con otra Neisseria que tiene el mismo habitat. de la bacteria cargado negativo y Ac específicos para ese Ag. Profesor Técnico de Formación Profesional. Diagnóstico. el cual debe utilizarse en familiares que han estado en contacto con el enfermo y no son sensibles a penicilina. neutros o ligera carga positiva. San Fernando de Henares. endocarditis y neumonía.Serológicamente se puede indentificar utilizando sueros polivalentes. aunque actualmente ha aumentado la CMI y se han observado algunas cepas resistentes. pero se diferencia por la fermentación de H. Normalmente también suelen alterarse unos parámetros bioquímicos. pero esta debe ser sólo a personas de riesgo que han podido estar en contacto con la bacteria. El tipo A se asocia con epidemias y los tipos B y C son ocasionales Mª Isabel Fernández Cerezo. O podemos realizar la tinción de anticuerpo fluorescente (AF). (28830 Madrid) Curso 2003-2004 Código 28038616 . de C.

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