Eletroforese

Prof Adriana Paula Braz de Souza

Eletroforese
uma tcnica bioqumica e biofsica mais usual na biologia molecular para separar molculas eletricamente carregadas, principalmente protenas e cidos nucleicos. Como o prprio nome indica, o movimento destas molculas devido ao campo eltrico.

Princpio da tcnica
Quando um campo eltrico aplicado numa soluo, molculas com carga positiva migram para o ctodo e as com carga negativa para o nodo do campo.

 A velocidade de migrao depende da fora exercida pelo campo em favor do movimento e da fora de atrito, ou resistncia , exercida pelo meio contra o movimento; ambos sobre a molcula. A resistncia do meio ao movimento varia de acordo com o tamanho e forma da molcula, enquanto que o favorecimento do campo ao movimento varia com sua carga.

Metodologia
A eletroforese de uma mistura de molculas pode ser realizada em meio aquoso; no entanto, mais conveniente o uso de algum suporte slido. Gel de agarose (protenas e cidos nucleicos); Gel de poliacrilamida (protenas e cidos nucleicos); Suporte de papel (aminocidos).

Modelo

 Dois eletrodos ctodo (-) e nodo (+), cada um num tanque separado os quais so preenchidos com uma soluo eletroltica (tampo de corrida); Os gis tambm tem pH ajustado; O gel colocado fazendo ligao, pelas suas extremidades, entre os dois eletrodos; Uma amostra da mistura de molculas aplicada no gel e o campo eltrico ligado; Depois de um tempo suficiente para migrao das molculas, o gel removido e embebido com um corante especfico para protenas ou cidos nucleicos.

 O excesso de corante removido e o resultado evidenciado por estreitas faixas coradas (bandas) que mostram a nova posio que cada tipo de molcula ocupa.

Cuba vertical

Bibliografia
DURAN, J. E. R. Biofsica: Fundamentos e Aplicaes. So Paulo: Prentice Hall Brasil, 2005. HEINENE, I. F. Biofsica Bsica. So Paulo: Atheneu Editora, 2002. GARCIA, E. A. C. Biofsica. So Paulo: Sarvier, 2002. SING, Glenan. Fisiologia Dinmica. So Paulo: Atheneu, 2001.