Electrofisiologa. El potencial de membrana.

Desde los experimentos de Luigi Galvani a finales de los aos 1700, se identific una estrecha relacin entre la fsica y la fisiologa, gracias a la demostracin de las respuestas contrctiles musculares que aparecan, producto de la estimulacin elctrica, en las extremidades inferiores de una rana, dando origen a los conceptos de bioelectricidad y electrofisiologa. Actualmente sabemos que muchas de las funciones y procesos fisiolgicos bsicos dependen de eventos elctricos en las clulas y tejidos, regulados por las caractersticas y la composicin de los compartimientos lquidos del organismo y la membrana plasmtica. As como en conductor metlico discurre corriente elctrica gracias al flujo de electrones libres a lo largo de sus tomos constituyentes, a travs de la membrana plasmtica tambin encontramos un flujo de corriente, sin embargo, esta es transportada mediante el flujo de tomos cargados elctricamente (iones), desde el compartimiento extracelular al intracelular, o viceversa. La membrana celular es una bicapa lipdica, con permeabilidad selectiva, que solo permite el libre paso de molculas muy pequeas y sin carga (gases plasmticos). Como es prcticamente impermeable a los iones, esta se comporta como un medio aislante en soluciones llenas de ellos, el lquido intracelular, rico en K+ y A- (PO4--- y Prot-), y el lquido extracelular, con Na+ y Cl-. Esta diferente distribucin inica es consecuencia del equilibrio de Gibbs-Donnan y el efecto de la bomba Na+/K+ ATPasa. El acumulo de diferentes cargas elctricas (iones) a ambos lados de la membrnaa celular genera un potencial elctrico en cada compartimiento, entendindose ste como el simple acumulo de energa potencial elctrica en cada lado de la membrana. Esta separacin de cargas se mantiene porque la membrana es un mal conductor elctrico impidiendo la libre difusin de los iones, regulando su paso a travs de protenas integrales de membrana, denominadas canales inicos. Esta separacin da origen a una diferencia de potencial elctrico, o voltaje, a travs de la membrana (es decir, debido a la diferente distribucin de cargas y potenciales elctricos a ambos lados de la membrana se genera una diferencia de potencial), denominado POTENCIAL DE MEMBRANA (Vm). El potencial de membrana se define como: El potencial elctrico en la parte interna de la clula menos el potencial en la parte externa. Es decir, Vm = Vic - Vec Sin embargo, por convencin, el potencial fuera de la clula se establece en 0. Por lo cual el potencial de membrana va a ser igual al potencial en la parte interna de la clula, Vm = Vic. Consideremos el siguiente ejemplo, (Ver figura 1): Colocamos 155 mEq de KCl en un compartimiento A, y 4 mEq de KCl en un compartimiento B, que se encuentran separados por una membrana rgida, impermeable a la difusin de dichos solutos. En este caso, Cul sera el potencial de membrana, o diferencia de potencial? Recordemos que este valor depende de la diferente distribucin de cargas elctricas a ambos lados de la membrana. En este caso, en cada compartimiento, producto de la disociacin del KCl, tenemos la misma cantidad de cargas positivas y negativas, a pesar de la diferencia de concentracin qumica (155 vs 4 mEq), es decir, en cada compartimiento no existe una carga neta, generando un potencial elctrico nulo, de 0 mV. Si el Vic = Vec = 0, podemos concluir que no existe una diferencia de potencial a travs de la membrana. (Ver figura 1)

Figura 1. Influencia de la permeabilidad sobre el potencial de membrana.

Si consideramos este mismo ejemplo, pero hacemos permeable la membrana interna al K+, mediante la incorporacin de canales inicos selectivos para este in, podemos predecir el siguiente cambio,

Figura 2. Efecto de los canales inicos sobre el potencial de membrana.

Al tener una membrana permeable para el K+, considerando la diferencia de gradiente qumico entre ambos compartimientos, el in difundir desde el compartimiento A hacia el B, alterando el balance previo de cargas elctricas. A medida que el K+ difunde hacia el medio B, como el in Cl- no puede desplazarse, aumenta la proporcin de cargas negativas en el compartimiento A, generando un potencial elctrico negativo. De igual manera, el compartimiento B, al recibir mayor cantidad de K+, pasa a tener un exceso de cargas positivas. Si consideramos que el Vm es igual al Vic, podemos concluir que este adquiere un valor negativo, producto de la mayor proporcin de cargas negativas en el medio A en relacin al medio B. (Ver figura 2). Como hemos visto, el potencial de membrana depende de la diferente distribucin inica a travs de la membrana plasmtica, regulada por el trfico o movimiento de iones a travs de la misma. El movimiento de los iones esta mediado por canales inicos, una clase de protenas integrales de membrana que se encuentra en todas las clulas del organismo, y que permiten el pasaje de ciertos iones a travs de la membrana. Como todos sabemos la membrana celular es una bicapa lipidica selectivamente permeable, por lo cual no todas las molculas pueden atravesarla libremente, de hecho, la membrana es impermeable a los iones (ya que son molculas con carga elctrica), por lo cual para el trnsito de iones en la clula es necesario la presencia de estos canales inicos. Los canales inicos son altamente selectivos y permiten solamente el paso de iones con caractersticas especficas. Esta selectividad se basa tanto en el tamao del ion como en la carga del mismo. Por ejemplo, canales que presenten carga negativa en su interior (debido a la presencia de residuos de aminocidos con carga negativa, dentro de la estructura del canal) suelen permitir el paso de cationes (iones con carga positiva), pero excluyen el paso de aniones (iones con carga negativa), y viceversa. Igualmente, un canal que permita el paso de cationes podra permitir el paso solo de Na+ y excluir el paso de K+, a pesar de que sean ambos iones positivos, debido a que el Na+ es en la practica un ion de mayor tamao que el K+ y no podra atravesar el canal. Los canales inicos constituyen un mecanismo de transporte pasivo, al no requerir un gasto extra de energa metablica para permitir la movilizacin del in, de tal manera, que este se desplaza en base a su gradiente electroqumico. Este mecanismo es subclasificado como difusin facilitada, al estar este transporte mediado por un canal proteico. Los canales inicos poseen 3 propiedades importantes: a) Conducen iones a velocidades extremadamente altas b) Reconocen y seleccionan iones especficos c) Presentan una cintica lineal, no saturable Se pueden distinguir 2 tipos de canales inicos por sus diferentes funciones en la sealizacin neuronal y su diferente mecnica de activacin: En reposo: Son canales inicos que se encuentran activos (abiertos) cuando la clula est en estado de reposo, es decir, en ausencia de estimulacin o excitacin. Estos canales contribuyen al potencial de membrana en reposo de la clula. Regulados: Los cuales se abren y cierran en respuesta a diferentes estmulos. Existen canales voltaje-dependientes (o regulados por voltaje), los cuales responden a la variacin del potencial de membrana; canales ligando-dependientes los cuales responden a

mensajeros qumicos (hormonas, neurotransmisores, segundos mensajeros), y los regulados mecnicamente los cuales son sensibles a la presin o estiramiento de la membrana. El movimiento de los iones a travs de la membrana, como todo proceso de difusin, se encuentra regulado por dos variables: el gradiente y la permeabilidad. El primero es la fuerza impulsora del desplazamiento del ion, y contempla tanto un gradiente elctrico, dado por la diferencia de cargas entre los compartimientos, y un gradiente qumico, generado por la diferencia de concentracin. El segundo, depende de la cantidad de canales inicos, selectivos para el ion, que se encuentren abiertos en la membrana. Si consideramos el desplazamiento de iones (cargas elctricas) a travs de la membrana, en relacin con la unidad de tiempo, podemos establecer un flujo de corriente, denominado intensidad de la corriente (I), el cual, de acuerdo a lo descrito anteriormente, depender del gradiente impulsor y la permeabilidad de la membrana. La ley de Ohm, enuncia que dicha intensidad, es igual a: I = V /R, por lo que el flujo de corriente es directamente proporcional a la diferencia de potencial a travs de la membrana, e inversamente proporcional a la resistencia que ofrece la membrana al paso del in. Como vimos, la permeabilidad de la membrana puede interpretarse en funcin de la cantidad de canales inicos abiertos para el in, mientras mayor sea dicho nmero, ms fcilmente difundir el tomo a travs de la membrana, denominando esta variable como conductancia (g), siendo inversamente proporcional a la resistencia del medio. Por lo que mientras ms canales inicos estn abiertos, mayor ser la conductancia de la membrana a dicho in, y menor ser la resistencia que ofrece, por lo que existir un mayor flujo de corriente ante una misma diferencia de potencial, segn lo enunciado, R = 1 / g, por lo que, I = V x g Si incorporamos el concepto fsico de diferencia de potencial (V), este enuncia que es el trabajo necesario para desplazar una carga elctrica desde un punto a otro, por lo que al aplicar ley de Ohm (I = V /R), vemos a la diferencia de potencial, como el trabajo necesario para desplazar un flujo de corriente (I), en contra de la resistencia que ofrece el medio (R), expresado como: V = I x R. Los Tejidos Excitables. El potencial de membrana en reposo. Las clulas nerviosas y musculares tienen la capacidad de responder activamente a estmulos externos alterando su potencial de membrana, gracias a la modificacin del trfico de iones a travs de su membrana, esta propiedad celular caracterstica recibe el nombre de excitabilidad celular. Las clulas excitables presentan 2 estados alternos, el estado de reposo y el estado excitable, el primero se manifiesta en ausencia de estimulacin externa, manteniendo un potencial de membrana en equilibrio dinmico; el segundo, aparece ante la estimulacin, e implica un cambio en el trfico de iones, desplazando el potencial de membrana de su valor en reposo, siendo sta la base de la sealizacin celular.

El potencial de membrana de una clula en reposo recibe el nombre de potencial de membrana en reposo, y suele ser de alrededor de -60 a -70 mV, debido al gran acumulo de cargas elctricas negativas en el interior celular. Para lograr entender como la diferencia de distribucin de los iones genera este potencial de reposo, comenzaremos con un ejemplo de permeabilidad exclusiva de membrana, como es el caso de las clulas gliales, las cuales son exclusivamente permeables a un tipo de ion en reposo (K+). Al igual que el resto de las clulas, la clula glial tiene una elevada concentracin de K+ y A- en el interior celular y una gran concentracin de Na+ y Cl- en la externa. Sin embargo, en condicin de reposo, solo posee canales inicos abiertos para el K+, por lo que es exclusivamente permeable a este in. Producto de la diferencia de concentraciones, el K+ est sometido a un gradiente qumico que impulsa su difusin hacia el LEC, dejando al medio intracelular con un exceso de cargas negativas, generadas por los A- que no pueden difundir por la membrana. A medida que contina el proceso de difusin, y el medio intracelular se hace ms negativo, se acenta un gradiente elctrico, opuesto al qumico, que tiende a atraer nuevamente el K+ al medio intracelular, producto de la atraccin electrosttica generada por la negatividad intracelular. Llega un punto en el cual el potencial de membrana adquiere un valor tan negativo, que la fuerza elctrica que arrastra K+ al interior de la clula est en perfecto equilibrio con la fuerza qumica que arrastra al K+ fuera de la clula, haciendo nula la difusin neta del in. El potencial de membrana al cual no hay flujo neto del in, ya que los gradientes elctrico y qumico son iguales y opuestos, se denomina potencial de equilibrio del in. (Ver figura 3). En el potencial de equilibrio se alcanza un equilibrio electroqumico en donde las fuerzas qumicas y elctricas que actan sobre un ion son iguales y opuestas y no ocurre difusin neta del mismo.

Figura 3. En la primera situacin, observamos una clula exclusivamente permeable al K+, en donde, en base a la diferencia de gradiente de concentracin, entre el interior y el exterior celular, este va a difundir hacia el lquido extracelular, dejando atrs, las cargas inicas negativas generadas por el acumulo de protenas intracelulares. A medida que sigue saliendo el K+, el potencial intracelular va hacindose cada vez ms negativo, lo que implica que se establece un gradiente elctrico al interior celular (al ser el K+ un in positivo), que tiende a contrarrestar el gradiente de concentracin qumico que impulsa la salida de K+. El potencial de membrana (potencial intracelular), la tendencia de arrastre al medio intracelular por el gradiente elctrico, contrarresta e iguala al gradiente de concentracin qumico que tiende la salida del in, se denomina potencial de equilibrio.

Si conocemos la carga elctrica del in y su diferencia de concentracin a travs de la membrana, podemos predecir si el potencial de equilibrio tiene un valor negativo o positivo. Consideremos una clula que sea exclusivamente permeable al in Na+, su gradiente qumico lo impulsa a entrar al LIC, haciendo ms positivo el medio intracelular, hasta que llegue un punto en el cual este sea tan positivo, que establezca un gradiente elctrico para repelerlo hacia el lquido extracelular. Cuando el potencial de membrana es tan positivo que el gradiente qumico que facilita la entrada del in se iguala con el gradiente elctrico que lo desplaza al exterior, encontramos el potencial de equilibrio del Na+. (Ver figura 4).

Figura 4. Difusin del Na+ a travs de una membrana exclusivamente permeable al mismo, que demuestra que la difusin del mismo hacia el medio intracelular, por su gradiente qumico, se mantendr hasta que las cargas positivas en el medio intracelular y las negativas en el exterior, generen un gradiente elctrico que impulse su salida en la misma proporcin, y se establezca el potencial de equilibrio.

El potencial de equilibrio para cualquier ion puede calcularse mediante una ecuacin ideada por el fisicoqumico alemn Walter Nernst, denominada ecuacin de Nernst. Ex = RT/ZF x ln Cec/Cic, donde: R: Constante universal de los gases F: Constante de Faraday T: temperatura del medio (K) Z: Valencia del in

Cec: Concentracin del in en el medio extracelular

Cic: Concentracin del in en el medio intracelular Resolviendo la primera parte de la ecuacin, incorporando el valor de temperatura corporal (37 C), y considerando el valor de e, para transformarla a una ecuacin logartmica natural (log base 10), encontramos el siguiente resultado: Ex = 61.54 x log Cec/Cic Si consideramos las concentraciones fisiolgicas de K+ en el medio intra y extracelular del tejido muscular, obtenemos el siguiente valor: EK+ = 61.54 x log 4.5/155; EK+ = - 94 mV

Dicho valor apoya nuestra inferencia acerca de la magnitud de la negatividad del potencial de membrana necesario para generar un balance entre el gradiente qumico, que tiende a expulsar al K+ al LEC, y el gradiente elctrico, que impulsara su retorno al medio intracelular. Si consideramos las concentraciones de Na+ en el tejido muscular, su potencial de equilibrio viene determinado por: ENa+ = 61.54 x log 145/12; ENa+ = + 67 mV Como podemos ver, en la ecuacin de Nerst no se considera la permeabilidad o conductancia general de la membrana, por lo tanto, el nico factor que determina el potencial de equilibrio de un ion son sus concentraciones en el medio intra y extracelular, ya que consideramos que la permeabilidad celular a dicho in es mxima y exclusiva (solo es permeable a dicha molcula). La concentracin inica de K+, Na+ y Cl- difiere en los diferentes tejidos del organismo, y por lo tanto, tambin lo hace el potencial de equilibrio. A continuacin se presenta una tabla que refleja los clculos obtenidos por la Ecuacin de Nerst a las concentraciones inicas fisiolgicas del tejido neuronal.

Figura 5. Potencial de Equilibrio del K+, Na+, Ca++ y Cl- en el tejido nervioso. Se evidencia que aunque los valores absolutos son diferentes a los descritos para el tejido muscular, la tendencia negativa o positiva del Ex se mantiene.

Una vez descrito como los gradientes inicos generan el potencial de reposo glial, y como este es igual al potencial de equilibrio del potasio (por tener una permeabilidad exclusiva al mismo), analizaremos el caso de las neuronas y el resto de las clulas, en donde la permeabilidad vara, siendo la membrana permeable a 3 tipos de iones en reposo, el Na+, el K+ y el Cl-. Para entender la relacin entre estos iones, pensemos rpidamente en nuestro ejemplo de las clulas gliales, imagnense que a estas clulas (exclusivamente permeables al potasio en reposo), con un potencial de membrana igual al EK+ y un valor absoluto de -90mV, le ponemos ahora una pequea cantidad de canales inicos, abiertos en reposo, para el Na+, qu va a pasar?.... Podemos inferir que el Na+ va a entrar al medio intracelular, siguiendo su gradiente electroqumico, (elctrico por la negatividad en el interior de la clula, derivada de la salida de potasio en reposo, y el acumulo de las protenas intracelulares con carga negativa, y qumico por la mnima concentracin del mismo en el medio intracelular). Este influjo de cargas positivas (Na+) desplaza el potencial de membrana (Vm = Vic) hacia un valor de -70 mV, ligeramente ms positivo que el potencial de equilibrio del K+, reduciendo la magnitud del gradiente elctrico que arrastraba al K+ al medio intracelular. Recordemos que en el estado de equilibrio no exista un gradiente neto de desplazamiento inico por el balance entre los gradientes qumicos y elctricos. Sin embargo, al disminuir la negatividad intracelular (producto de la entrada de

Na+), cae la magnitud del gradiente elctrico de atraccin electrosttica que contrarrestaba la difusin de K+ al medio extracelular, estableciendo una difusin neta del in hacia el medio extracelular, impulsado por el gradiente qumico. En estas condiciones, se establece un equilibrio entre la magnitud de la corriente inica neta de entrada de Na+ (INa+) y la corriente inica neta de salida del K+ (IK+), manteniendo el potencial de membrana estable, en un valor de -65 a -70 mV, en el tejido neuronal, denominado potencial de membrana en reposo (Vmr). Para comprender este estado de equilibrio, (INa+ = - IK+), recordemos que la magnitud del flujo inico a travs de la membrana celular, es el producto de su fuerza de arrastre electroqumica, por la conductancia o permeabilidad de la membrana al ion. Lo cual se expresa de la siguiente manera, Ix = (Vm Ex) x g Dnde: Ix = Corriente o flujo inico (Vm Ex): Fuerza electromotriz o gradiente neto que impulsa el desplazamiento del in g: Conductancia o permeabilidad de la membrana al in. El potencial de equilibrio de un in (Ex) implica un estado en el cual los gradientes qumicos y elctricos son iguales y opuestos, por lo que no hay una difusin o flujo neto de corriente inica a travs de la membrana. En este sentido, mientras ms diferencia exista entre el potencial de membrana (Vm) y el potencial de equilibrio del in (Ex), ms gradiente neto existe, es decir, mayor fuerza de arrastre electroqumica se ejerce sobre el in, generando mayor flujo inico. Desde un punto de vista terico, cuando esta diferencia (Vm-Ex), es de magnitud positiva, implica una corriente inica de salida al medio extracelular, y cuando es negativa, demuestra una corriente inica neta de entrada al interior de la clula. El gradiente o fuerza electromotriz (Vm-Ex) de los principales iones del medio intra y extracelular, se puede evidenciar en la siguiente grfica:

Figura 6. Se ilustra la fuerza electromotriz (Vm-Ex), que impulsa el desplazamiento de los principales iones del medio intracelular y extracelular, en una clula muscular.

Considerando el Vmr en -80 mV, en una clula muscular, podemos comparar la fuerza electromotriz (Vm-Ex) que impulsa el desplazamiento del Na+ y del K+. En el primer caso, existe un importante gradiente que impulsa la corriente de entrada de sodio al medio intracelular, (Vm-ENa = -147 mV). Por el contrario, en el caso del K+, la fuerza neta de la corriente de salida al medio extracelular es mucho menor (Vm-EK = +15 mV). Como vemos, existe una diferencia importante en la magnitud del gradiente neto electroqumico que promueve el desplazamiento de los iones a travs de la membrana, entonces, cmo se puede mantener un equilibrio entre las corrientes inicas de Na+ y K+ (INa+ = -IK+) en el estado de reposo celular? Recordemos que el flujo de corriente depende tanto de la fuerza electromotriz (gradiente) como de la conductancia o permeabilidad de la membrana al in. Una clula excitable, en estado de reposo, posee pocos canales abiertos para el Na+, de forma que, la conductancia es muy baja. Por lo que, pese a las grandes fuerzas qumicas y elctricas que arrastran al Na+ al interior de la clula, la entrada de este es escasa. En contraste con ello, el nmero de canales inicos abiertos para el K+ es 40 veces mayor, implican una mayor conductancia del in. Como resultado de ello, a pesar de tener una pequea fuerza neta que impulse su difusin, la elevada conductancia le permite producir un flujo neto de K+, hacia el exterior celular, de igual magnitud que el flujo neto de Na+ al medio intracelular. La figura 7 nos resume, el papel del K+ y el Na+ en la generacin del potencial de membrana en reposo.

Figura 7. Influencia de los canales inicos de K+ y Na+ sobre el potencial de membrana en reposo. A. Cuando la clula es exclusivamente permeable al K+, el in difunde al medio extracelular por su gradiente qumico (flecha de color azul), dejando el interior celular cargado negativamente, sin embargo, llega un punto en que el gradiente elctrico (flecha roja), impulsa al in a regresar al medio intracelular, por la atraccin electrosttica del medio negativo. Cuando el gradiente qumico y elctrico son iguales y opuestos, no existe un flujo neto del in a travs de la membrana, y se alcanza el potencial de equilibrio (EK+ = -90 mV). B. Las clulas excitables en reposo, no son exclusivamente permeables al K+, sino que tambin poseen canales de Na+, aunque tienen una conductancia 40 veces mayor al K+. La presencia de canales inicos de Na+ permite la entrada del in al medio intracelular, impulsado por sus gradientes qumicos (diferencia de concentracin), y elctrico (atraccin por el medio negativo). A medida que entra Na+, el LIC se hace menos negativo. C. Producto de la entrada de Na+, como la membrana es menos negativa, disminuye el gradiente elctrico (flecha roja), que impulsa el reingreso de K+ al interior celular, estableciendo una difusin neta de K+ al LEC, impulsado por su gradiente qumico (flecha azul). A pesar que la conductancia de la membrana al K+ es mucho mayor que al Na+, producto de la diferencia de fuerza electromotriz, o gradiente neto, que acta sobre el in, el flujo de K+ al LEC es igual y opuesto al flujo neto de Na+ al LIC, manteniendo el Vm en un estado estacionario, menos negativo que el EK+, con un valor alrededor de -65 a -70 mV. D. En la situacin A y B, el potencial de membrana es igual al EK+. En la situacin C, producto de la entrada de Na+, el Vm se desplaza a valores ms positivos.

Como hemos considerado, el potencial de membrana en reposo depende del gradiente electroqumico y la conductancia de la membrana para el Na+ y el K+. Sin embargo, podemos inferir que, producto del proceso de difusin constante a travs de la membrana, estos gradientes no se mantienen de manera indefinida. La salida constante de potasio estara limitada al agotarse el potasio intracelular, alcanzando unas concentraciones similares a las del medio extracelular, terminando la difusin, y viceversa para el sodio. Esta disipacin de los gradientes inicos,

neutralizara la excitabilidad celular, y provocara el acumulo de Na+ en el medio intracelular, incrementando la osmolaridad de dicho compartimiento lquido, generando un gradiente osmolar que desplazara H2O al mismo, hinchando la clula. Con la finalidad de mantener los gradientes inicos, la bomba Na+/K+ ATPasa, transporta 3 Na+ y 2K+, en contra de sus gradientes electroqumicos, extrayendo el Na+ al medio extracelular y permitiendo la entrada de K+ al medio intracelular, lo cual permite mantener estable la composicin de dichos compartimientos, y por lo tanto, el gradiente que impulsa su movimiento por la membrana. Es de destacar, que la bomba tambin tiene una discreta contribucin electrognica, ya que al remover 3 cargas positivas de Na+, introduciendo solamente 2 cargas positivas de K+, lo que contribuye a generar un grado adicional de negatividad (alrededor de -4 mV), ms all del que se puede explicar por la mera difusin inica. La Na+/K+ ATPasa es inhibida por los digitalicos o glucsidos cardiacos, un efecto importante que influye en el incremento de la contractilidad cardiaca como parte del tratamiento de la insuficiencia cardiaca. Llama la atencin, que mencionamos un tercer in capaz de influir sobre el potencial de membrana en reposo, el Cl-, sin embargo, su papel es despreciable en condicin fisiolgica de reposo, ya que el potencial de equilibrio del Cl- (ECl) es de igual magnitud que el Vmr, por lo que no hay un flujo neto del in que pueda influir sobre dicho valor. Sin embargo, cuando se altera la permeabilidad basal de la membrana al Cl-, en caso de que un ligando permita la apertura o cierre de canales de Cl-, este puede afectar dicho potencial. Aunque hemos descrito que el flujo inico de K+, Na+ y Cl- determinan el valor del potencial de membrana en reposo, este no es igual a los potenciales de equilibrio de dichos iones (EK+, ENa+, ECl-), sino que se encuentra en un valor intermedio, ya que la membrana no es exclusivamente permeable a uno de dichos iones, sino a todos, en diferente medida. Como regla general, cuando el Vm es determinado por dos o ms especies de iones, la contribucin de cada ion no solo depende de las concentraciones en el medio intra y extracelular (como enunciaba la ecuacin de Nerst), sino tambin la facilidad con la que el in atraviesa la membrana (Conductancia o permeabilidad). La relacin entre el valor de Vmr ante las diferentes concentraciones y permeabilidades inicas est determinada por la ecuacin de Goldman:

Donde, P = permeabilidad o conductancia al in, siendo las dems variables similares a las descritas en la ecuacin de Nerst. Podemos evidenciar que mientras mayor sea la concentracin y la permeabilidad de un in, mayor ser su contribucin al potencial de membrana en reposo, y tendera a desplazar dicho valor hacia su potencial de equilibrio inico. De hecho, si retomamos el ejemplo de la clula glial, que tiene permeabilidad exclusiva al K+, podemos ver que la ecuacin de Goldman se convierte en la ecuacin de Nerst para dicho in (eliminando el producto del Na+ y el Cl-, por tener permeabilidad igual a cero).

Si aplicamos dicha ecuacin a una clula excitable en reposo, a una temperatura de 37 C, en donde la permeabilidad al K+ es 40 veces mayor a la del Na+, debido al mayor nmero de canales inicos abiertos para el primero, y despreciamos el papel del Cl-, obtenemos el siguiente valor:

De tal manera que el potencial de membrana en reposo de la neurona, se encuentra influenciado por la mayor permeabilidad al K+ (40 veces mayor a la del Na+), ejerciendo ste in un mayor efecto sobre el Vmr, acercndolo a su potencial de equilibrio (EK+ = -90 mV). El papel del gradiente inico de K+ sobre el potencial de membrana en reposo, puede evidenciarse en la siguiente grfica:

Figura 8. Se evidencia el papel de las concentraciones de K+ en el LEC sobre el potencial de membrana en reposo (Vmr).

Se evidencia que a las concentraciones de K+ fisiolgicas en el LEC (3.5 5 mM), el potencial de membrana (Vm) en reposo oscila entre -90 a -70 mV, un rango normal de acuerdo al tipo de clula excitable (musculo vs. neurona). Sin embargo, en un estado de hiperpotasemia, cuando los valores de K+ superan los 5mM, el Vmr se desplaza hacia valores positivos, dado por la disminucin del gradiente qumico que lleva a la extrusin del K+ del medio intracelular al exterior. Al aumentar las concentraciones de K+ extracelulares, existe un menor gradiente para impulsar la salida del in del medio intracelular (a pesar de tener una elevada conductancia), acumulndose progresivamente, aumentando las cargas positivas en el interior de la clula y por lo tanto desplazando el Vm hacia valores positivos. Por el contrario, ante una hipopotasemia, con una concentracin extracelular de K+ menor a 3.5 mM, la clula desplaza su Vmr hacia valores ms negativos, como consecuencia del incremento del

gradiente qumico que facilita la salida del in al medio extracelular, removiendo mayor cantidad de cargas positivas y acumulando las cargas negativas no difusibles del medio intracelular. En el estado de reposo, no existe una corriente inica neta a travs de la membrana, ya que el flujo de Na+ al medio intracelular, tiene un flujo igual y opuesto de K+ al LEC, manteniendo el Vmr en un estado estacionario. Cuando la clula recibe un estmulo externo, se altera el trfico inico en la membrana, provocando un flujo neto de cationes o aniones, cambiando el potencial elctrico de la membrana. El desplazamiento del Vmr hacia valores positivos, producto del incremento de las cargas positivas en el medio intracelular recibe el nombre de despolarizacin, y puede ocurrir como consecuencia de: a) La apertura de canales inicos para el Na+, que permita una mayor entrada de cargas positivas al medio intracelular, siguiendo su gradiente electroqumico. b) El cierre de canales inicos de K+, lo cual disminuye la salida de K+ al medio extracelular, en condicin de reposo, acumulndose las cargas positivas en el medio intracelular c) El incremento de la concentracin de K+ en el medio extracelular, disminuyendo el gradiente de salida de K+, aumentando la carga neta positiva del LIC Cuando el potencial de membrana se desplaza a valores ms negativos que su potencial de reposo, se denomina hiperpolarizacin, y puede ocurrir como consecuencia de: a) La apertura de canales inicos de Cl-, que permita la entrada de un in negativo al medio intracelular b) La apertura de canales inicos para el K+, incrementando la difusin del in al medio extracelular, removiendo mayor cantidad de cargas positivas del lquido intracelular. c) La disminucin de la concentracin de K+ en el medio extracelular, incrementado el gradiente de salida de K+, acumulando mayor cantidad de cargas negativas en el LIC. Toda respuesta elctrica de una clula excitable a un estmulo, involucra un cambio en el flujo inico en la membrana, provocando una despolarizacin o hiperpolarizacin, sentando las bases de la sealizacin celular. La respuesta a los estmulos. El potencial de accin. La transmisin de informacin a lo largo de las clulas excitables ocurre mediante seales elctricas y qumicas. Las seales elctricas se producen, todas ellas, por cambios temporales del flujo de corriente a travs de la membrana, regulado por la apertura y cierre de canales inicos, arrastrando el potencial de membrana y alejndolo de su valor en reposo. Estas seales, interpretadas como variaciones del potencial de membrana, permiten el transporte de la informacin concerniente al estmulo, de una forma rpida y segura a larga distancia. La mxima respuesta de sealizacin celular ante un estmulo, se denomina potencial de accin, y representa una seal elctrica autoregenerativa, cuya amplitud no disminuye a medida que se propaga por la clula, y que surge a raz del cambio de la conductancia y flujo inico en la membrana celular, generando una inversin transitoria de la polaridad celular.

Cuando una clula excitable recibe un estmulo proveniente de una sinapsis celular (mediada por neurotransmisores), una distensin mecnica, o algn estimulo externo (ambiental), ocurre un cambio en la proporcin de canales inicos abiertos en la membrana plasmtica (conductancia). En la mayora de los casos, se abren canales inicos de Na+ regulados por ligando o efecto mecnico, incrementando el flujo del in al medio intracelular, provocando una despolarizacin leve y transitoria, que se propaga pasivamente a lo largo de la clula, disminuyendo su amplitud progresivamente. En el caso de una sinapsis qumica, esta respuesta local de la membrana se denomina potencial post-sinptico, y puede ser de carcter excitatorio o inhibitorio, de acuerdo al efecto sobre las corrientes inicas, y si genera una despolarizacin o hiperpolarizacin, respectivamente. Si consideramos una neurona, la cual puede recibir miles de estmulos a travs de su rbol dendrtico, cada una de estas respuestas post-sinpticas, algunas excitatorias y otras inhibitorias, deben cotejarse, con la finalidad de integrar la informacin y permitir su transmisin a lo largo de su axn, mediante una seal elctrica nica, de amplitud constante, y de propagacin autoregenerativa, representada por el potencial de accin. Dicho proceso de integracin y generacin de la seal ocurre en el segmento inicial del axn, denominado cono axnico, y depende de la apertura de canales inicos de Na+ voltaje-dependientes. La apertura de estos canales ocurre por el cambio del potencial de membrana celular, dado por la despolarizacin originada por la llegada y confluencia de los diferentes estmulos celulares y sus potenciales post-sinpticos. El nivel de despolarizacin necesario para permitir la apertura masiva de estos canales voltaje dependiente y mantener un circuito de retroalimentacin positiva de despolarizacin se denomina potencial umbral (-50 mV). Cuando la despolarizacin inicial alcanza el nivel umbral, la conductancia de la membrana al Na+ se incrementa 500 veces en relacin a su valor de reposo, permitiendo la entrada masiva del in al medio intracelular, desplazando el potencial de membrana hacia valores positivos, generando as, el potencial de accin. En la mayora de las neuronas, la cantidad de neurotransmisor liberado en una sola sinpsis es baja, permitiendo la apertura de un pequeo nmero de canales inicos ligando-dependientes, generando potenciales post-sinpticos excitatorios de escasa magnitud, los cuales, por lo general, no alcanzan el nivel umbral necesario para la apertura de los canales inicos de Na+ voltaje dependientes, no se produce la inversin de la polaridad de la membrana, y por lo tanto no se genera el potencial de accin. Sin embargo, en respuesta a dicho estmulo, se produce un cambio del potencial de membrana, denominado potencial subumbral, electrotnico o graduado, representando una respuesta despolarizante transitoria de la membrana, la cual se va a propagar localmente, disminuyendo su amplitud, sin poder transmitir eficazmente la informacin a lo largo del cuerpo y el axn neuronal Los potenciales electrotnicos pueden tener diferente amplitud, de acuerdo a la magnitud del estmulo aplicado, y por lo tanto del nmero de canales inicos abiertos. Como estos potenciales pueden tomar diferentes valores dentro del espectro subumbral, se consideran seales analgicas. Si se incrementa la intensidad del estmulo o se produce la integracin de mltiples seales (en el cono axnico), y la respuesta despolarizante es lo suficientemente grande para alcanzar el nivel umbral, se produce la apertura de los canales de Na+ voltaje dependiente y se genera el potencial de accin. (Ver figura 9). Por lo tanto, podemos concluir que los potenciales electrotnicos o subumbrales son respuestas locales, pasivas, de la membrana plasmtica, cuya magnitud depende

de la intensidad del estmulo, estas, per se no suelen alcanzar el nivel umbral, sin embargo, pueden ser sumadas o integradas en el cono axnico, aumentando la probabilidad de generar el potencial de accin.

Figura 9. Potenciales subumbrales y el Potencial de Accin. Ante estmulos de intensidad creciente, se producen potenciales subumbrales de mayor magnitud, hasta alcanzar el potencial umbral, y permitir la apertura de los canales de Na+ voltaje dependientes, desencadenando el potencial de accin.

Fases del potencial de accin Al obtener un registro elctrico de los potenciales de accin generados en una neurona, podemos identificar 3 grandes fases, cada una relacionada con un evento inico en particular: 1) Despolarizacin: Como consideramos antes, la clave en la generacin del potencial de accin es la apertura de los canales de Na+ voltaje dependientes, una vez alcanzado el nivel umbral, lo que provoca la entrada masiva del in al interior de la clula, impulsado por su gradiente electro qumico. A medida que aumenta la corriente de entrada de Na+, se abren ms canales inicos voltaje dependiente, generando a su vez mayor despolarizacin, estableciendo as un circuito de retroalimentacin positiva, lo cual explica la naturaleza explosiva de esta primera fase. Producto del incremento masivo de la conductancia al Na+, el potencial de membrana se desplaza hacia valores positivos, cercanos al potencial de equilibrio del in (ENa+). La amplitud de esta fase depender de la concentracin de Na+ en el medio extracelular. 2) Repolarizacin: Al finalizar la fase ascendente del potencial de accin neuronal, evidenciamos que el potencial de membrana regresa paulatinamente a sus valores de reposo, es decir, se repolariza la membrana. Esta fase descendente es consecuencia de dos procesos, una disminucin de la conductancia al Na+ (gNa+) y un incremento de la conductancia al K+ (gK+). En respuesta a la despolarizacin de la membrana se produce, en primer lugar, un aumento de la conductancia al Na+, y luego, al poco tiempo, una disminucin de la misma. Este

fenmeno es consecuencia de la cintica particular del canal inico de Na+ voltaje dependiente. Estos canales poseen 3 estados estructurales: reposo, activacin o inactivacin, de acuerdo con diferentes cambios conformacionales. A su vez estos estados se expresan como dos patrones de actividad funcional: canal abierto o cerrado. Cuando la clula est en estado de reposo, el canal tambin se encuentra en reposo, funcionalmente cerrado, sin permitir el paso del Na+ al medio intracelular. Una vez que llega una despolarizacin inicial que alcanza el nivel umbral, el canal pasa al estado de activacin, y se abre, permitiendo la entrada de Na+ al interior celular, disparando el potencial de accin. Sin embargo, si la despolarizacin se mantiene por un tiempo prolongado, el canal pasa al estado de inactivacin, bloqueando la corriente de entrada del in. En este estado el canal no puede volver al estado activo (abierto) por una nueva despolarizacin. La inactivacin solo puede ser revertida mediante la repolarizacin de la membrana a su potencial de reposo original, llevando el canal al estado de reposo nuevamente. Este cambio requiere de tiempo, ya que los canales abandonan el estado inactivo de una forma relativamente lenta. Los efectos temporales de la despolarizacin sobre la gNa+ dependen de la cintica de dos mecanismos de compuertas en el canal de Na+. Cada canal posee una compuerta de activacin, la cual se mantiene cerrada cuando la membrana est en reposo y se abre en respuesta a la despolarizacin umbral; y una compuerta de inactivacin, la cual est abierta en estado de reposo, pero se cierra despus que el canal pas al estado activo, en respuesta a la despolarizacin. El canal solo permite el trfico del in durante el estado activo, cuando ambas compuertas estn abiertas. La repolarizacin revierte ambos procesos, cerrando la compuerta de activacin, y abriendo la de inactivacin. Hay que destacar que cuando el canal de Na+ entra en estado de inactivacin, no puede volver a ser estimulado, hasta que se cumpla un periodo de tiempo, y vuelva al estado de reposo. (Ver figura 10).

Figura 10. Cintica y conformacin estructural del canal de sodio. En el estado de reposo, la compuerta de activacin est cerrada, mientras que la compuerta de inactivacin est abierta. En respuesta a la despolarizacin, la compuerta de activacin se abre, permitiendo el desplazamiento del Na+ al medio intracelular. Ante la despolarizacin prolongada, la compuerta de inactivacin se cierra, bloqueando el canal, impidiendo su reactivacin hasta que vuelva al estado de reposo, al finalizar la repolarizacin de la membrana.

En segundo lugar, producto de la despolarizacin, se induce la apertura de un grupo de canales inicos de K+ voltaje-dependiente (canales rectificadores tardos), incrementando as la conductancia al in y, por tanto, la corriente de salida al medio extracelular, facilitando el regreso del potencial de membrana a sus valores negativos de reposo. Estos canales slo tienen una compuerta que se abre con la despolarizacin, por lo que no tienen estado inactivo. La duracin y forma de la fase de repolarizacin vara a lo largo de los diferentes tejidos excitables. Al finalizar esta fase podemos volver al potencial de membrana en reposo (Vmr) o, en el caso del tejido nervioso, terminar en valores ms negativos que el Vmr. 3) Hiperpolarizacin: En la mayora de clulas nerviosas, el potencial de accin es seguido de una fase hiperpolarizante, en la cual el potencial de membrana de desplaza hacia valores ms negativos que los del potencial de reposo. Esta se origina porque los canales de K+ voltaje dependientes, que se activaron durante la fase de repolarizacin, no se cierran en forma inmediata al retornar el potencial de membrana a su valor de reposo, por el contrario, permanecen abiertos por algunos milisegundos ms, por lo que la conductancia de la membrana al K+ es mayor al final del potencial de accin de lo que era justo antes de comenzar, permitiendo una mayor salida del in y acercando el Vm hacia el EK+. Una vez que se cierran estos canales, el potencial de membrana vuelve a sus valores de reposo originales. En la figura 11 podemos evidenciar el registro tpico del potencial de accin neuronal, identificando sus fases y los cambios de conductancia inica en cada una de ellas.

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Figura 11. Potencial de accin neuronal. Se evidencia la fase 1 (despolarizacin), dada por un incremento de la conductancia al Na+ producto de la apertura de los canales de Na+ voltaje dependiente. La fase 2 (repolarizacin), como consecuencia del cierre e inactivacin de los canales de Na+, y la apertura de canales de K+ voltaje dependientes, incrementando la conductancia a este in, los cuales se cierran paulatinamente, despus que la clula retorno a su potencial de membrana en reposo, por lo que generan una tercera fase, la hiperpolarizacin.

Caractersticas del Potencial de Accin 1) Todo o nada: La regla del todo o nada establece que solo cuando la despolarizacin inicial alcanza una magnitud umbral, permite la generacin y conduccin del potencial de accin, con una misma forma, amplitud y duracin dentro de una mismo tipo de clula excitable (todos los potenciales neuronales son similares, sin embargo, son diferentes a los potenciales musculares), independientemente de la intensidad total del estmulo (Ver figura 12); cualquier estimulo que no alcance el nivel umbral, aunque sea por una fraccin de milivoltio, no producir esta respuesta autopropagada, y constituir una despolarizacin pasiva, local de la membrana, que se propagara disminuyendo su amplitud, formando un potencial electrotnico o subumbral. Como hemos descrito, diferentes estmulos mecnicos, qumicos o elctricos, pueden provocar la apertura de canales de Na+, permitiendo su entrada al medio intracelular, generando una despolarizacin inicial, que lleva a la apertura de canales de Na+ voltaje dependientes, concentrados a nivel del cono axnico, permitiendo una mayor entrada de sodio, mayor despolarizacin y nueva apertura de canales voltaje dependiente, estableciendo un crculo vicioso de retroalimentacin positiva que contina hasta que todos los canales de sodio han sido activados por el voltaje. Esto implica que la conductancia al Na+ aumenta de una forma estrictamente graduada con la despolarizacin, donde cada incremento de la misma aumenta el nmero de canales de Na+ voltaje dependientes que pasan del estado cerrado al abierto, y aumentan gradualmente el influjo del in, por lo que podemos preguntarnos, Por qu hay un umbral brusco para generar un potencial de accin? Aunque una pequea despolarizacin subumbral incrementa el flujo de Na+ (INa+) al medio intracelular, tambin aumenta las corrientes de salida de K+ (IK+) y Cl- (ICl-), al incrementar la fuerza electroqumica de arrastre sobre estos iones, por un incremento en la negatividad extracelular. Adems, la despolarizacin aumenta la conductancia al K+ (gK+), al abrir gradualmente canales de K+ voltaje dependiente. Segn aumentan IK+ y ICl- con la despolarizacin, tienden a resistir la accin despolarizante del flujo de Na+ al medio intracelular. Sin embargo, cuando un estmulo es de gran intensidad, generando una despolarizacin inicial de alta magnitud, dada la mayor sensibilidad al voltaje y la rpida cintica de activacin de los canales de Na+ voltaje dependiente, la apertura masiva de estos provoca que la despolarizacin alcance finalmente un punto en que el incremento de la INa+ supera la IK+ y ICl- hacia el exterior celular. El valor especifico del Vm con el cual la corriente inica neta (INa + IK + ICl-) cambia precisamente de ir hacia afuera a hacerlo hacia el medio intracelular, depositando cargas positivas netas en el lado interno de la membrana, es el potencial umbral. La forma del potencial de accin en una clula excitable refleja las propiedades especializadas de dicha clula. Por ejemplo, los potenciales de accin nerviosos son rpidos y breves, lo que permite una transmisin eficiente de la informacin, mientras que los potenciales de accin del msculo cardiaco o liso, son prolongados, para permitir una contraccin muscular coordinada y eficaz. (Ver figura 12).

Figura 12. Relacin entre potenciales de accin entre clulas nerviosas y musculares. Se evidencia la diferente morfologa entre los potenciales de distintas clulas excitables.

Hasta ahora hemos considerado la importancia de la magnitud (intensidad) de un estmulo despolarizante inicial, para disparar un potencial de accin. Sin embargo, la duracin de dicho estmulo tambin es importante. Podemos establecer una relacin entre la intensidad y duracin del estmulo, donde la despolarizacin mnima necesaria para llegar al nivel umbral y desencadenar el potencial de accin, puede venir de un estmulo breve, de alta intensidad, o bien de un estmulo prolongado, de baja intensidad. Por lo tanto, como podemos ver en la Figura 13, la efectividad de un estmulo para generar un potencial de accin depende del producto de su intensidad y duracin. Sin embargo, independientemente de la intensidad del estmulo siempre se requiere que tenga una duracin mnima, y viceversa.

Figura 13. Relacin entre la intensidad y duracin de un estmulo. Si el estmulo es breve, requiere de una alta intensidad para alcanzar una corriente despolarizante que llegue al nivel umbral y desencadene el potencial de accin, sin embargo, un estmulo prolongado, aunque sea de menor intensidad, tambin puede provocarlo. Las lneas punteadas indican la intensidad y duracin mnima necesarias para generar el potencial de accin.

2) Origina un periodo de perdida de excitabilidad: Todo potencial de accin lleva a un breve periodo de menor excitabilidad celular, o periodo refractario, el cual puede dividirse en 2 fases. El periodo refractario absoluto, se produce inmediatamente tras el disparo del potencial de accin; durante este periodo es imposible excitar la celular por ms grande que sea la corriente de estimulacin que se le aplique, ya que la totalidad de los canales de Na+ voltaje-dependiente que generaron la fase de despolarizacin del potencial de accin se encuentran en estado inactivo y por lo tanto no pueden ser excitados nuevamente hasta que vuelvan a su estado de reposo. Para las fibras nerviosas grandes mielinizadas, este periodo es de aproximadamente 1/2500 segundos. Por tanto, se puede inferir que una fibra de este tipo, puede generar un mximo de 2500 potenciales por segundo. Esta fase va seguida del periodo refractario relativo, durante la cual es posible desencadenar un potencial de accin, pero solo aplicando estmulos mayores que los requeridos normalmente para alcanzar el umbral, ya que la membrana esta hiperpolarizada. (Ver figura 13).
Figura 13. Periodos refractarios relativo y absoluto en el potencial de accin. Durante el periodo refractario absoluto la clula no puede responder a ningn estmulo, independientemente de su intensidad, ocurre por la inactivacin de los canales de Na+ voltaje dependiente. En el periodo refractario relativo, la clula puede generar un potencial de accin pero requiere de un estmulo de mayor intensidad, ya que la membrana esta hiperpolarizada, mas lejos del potencial umbral.

3) Se propaga de forma autoregenerativa: La neurona, en respuesta a la llegada de un estmulo excitatorio, altera el trfico de iones a travs de la membrana, facilitando la entrada de Na+ al interior celular, desplazando el potencial de membrana hacia valores positivos (despolarizacin). Este cambio transitorio del Vm se propaga a lo largo de la clula, hasta llegar al cono axnico, donde se decidir la generacin del potencial de accin. Para comprender la propagacin del potencial de accin, describiremos en primer lugar, la propagacin de las respuestas graduadas subumbrales en la membrana. Como ya hemos considerado, los estmulos de intensidad subumbral generan potenciales graduados, de diferente amplitud, que se propagan pasivamente, de manera electrotnica, disminuyendo su amplitud. Para entender esta atenuacin en la amplitud de las respuestas subumbrales a medida que se propagan, debemos aplicar los principios fsicos de la teora de cables o conductores a la fibra nerviosa. Si utilizamos un electrodo para inyectar corriente de intensidad subumbral al medio intracelular en un punto determinado, y medimos el cambio del potencial de membrana mediante un electrodo de registro, evidenciamos que cuanto ms cerca est el electrodo

del lugar de entrada de la corriente, ms amplio y abrupto es este cambio, mientras que disminuye de manera exponencial mientras ms lejos se encuentre del punto de entrada. La variacin del potencial de membrana con la distancia depende de dos factores: la resistencia de la membrana, y la resistencia del axoplasma. Debemos recordad que el flujo de corriente, de acuerdo a la ley de Ohm, ser mayor mientras menor sea la resistencia del medio, en otras palabras, la corriente tiende a seguir la va de menor resistencia. Si aplicamos la teora de cables, podemos establecer un modelo de circuito para describir la propagacin de las seales elctricas, como el que se evidencia en la figura 14.

Figura 14. Modelo de circuito equivalente de la membrana plasmtica. Se evidencia la disposicin en paralelo de las mltiples unidades de resistencia de membrana (Rm) a lo largo del axn, as como la disposicin en serie de la resistencia del axoplasma (Ri).

Las fibras nerviosas presentan muchas de las caractersticas de un cable o conductor elctrico. En un conductor perfecto, el aislamiento que rodea al conductor central impide las prdidas de corriente hacia el entorno, de forma que la seal se transmite por el cable sin perder potencia. Si comparamos una fibra nerviosa amielnica con un cable elctrico, la membrana plasmtica equivale al aislamiento, y el citoplasma al conductor central. Sin embargo, la membrana no es un aislante perfecto, cada segmento de membrana neuronal ofrece una resistencia intrnseca elevada, pero se encuentran conectadas en paralelo a lo largo de la clula, por lo que la resistencia total de la membrana a lo largo del axn es baja, aparte posee canales inicos que permiten la difusin (goteo) de las cargas a travs de la misma. Si consideramos la resistencia del axoplasma, esta es menor que la resistencia de la membrana, sin embargo, se encuentran conectadas en un modelo en serie, por lo que la resistencia total del circuito es mayor dentro del axoplasma que en la membrana. Esto implica que si aplicamos una corriente en un punto determinado, esta se va a propagar a lo largo de la clula, escapndose a travs de la membrana (como agua que se escapa a travs de una manguera con huecos), por ser esta la va de menor resistencia. (Ver figura 15). La cada de la diferencia de potencial con la distancia es exponencial y puede ser expresada por la siguiente funcin: V (x) = V0 e-x/, donde x es la distancia desde el sitio de entrada de la corriente, V0 el cambio de potencial de membrana producido en el sitio de inyeccin de corriente (x = 0), y la constante de longitud. La constante de longitud o constante espacial es la distancia a la cual el cambio de potencial de membrana ha cado a 37% de su valor inicial. (Ver figura 15). Es una medida de la eficiencia de la

conduccin electrotnica a lo largo de la neurona, y est determinada por la resistencia de la membrana y del axoplasma, = Rm/Ri donde, Rm es la resistencia de la membrana, y Ri, la resistencia del axoplasma. El valor promedio de es de 0.1 1.0 mm. Por lo tanto, a mayor aislamiento de la membrana (aumenta Rm), y mientras mejor sean las propiedades de conduccin del citoplasma (menor Ri), mayor ser la constante de longitud, y ms lejos podr llegar la diferencia de potencial antes de disminuir su amplitud (mejor conduccin electrotnica).

Figura 15. Conduccin Electrotnica. A. Al aplicar una corriente despolarizante en un punto de la neurona, las cargas se disipan a medida que se desplazan del punto inicial, escapando a travs de la va de menor resistencia, la membrana plasmtica. A mayor distancia, menor amplitud del cambio de potencial. B. La relacin entre la distancia y la disminucin del cambio de potencial de membrana es exponencial y determina la constante de longitud (), definida como la distancia a la cual la diferencia de potencial cae a un 37% del valor inicial.

Tanto la propagacin electrotnica, como la conduccin del potencial de accin dentro de la clula ocurren por el flujo de corrientes locales. Imaginemos que el axn se encuentra dividido en diferentes segmentos, e inyectamos una corriente despolarizante en uno de ellos, que llamaremos segmento activo. El citosol de esta regin activa, invirti su polaridad, y posee mayor cantidad de cargas positivas intracelulares que sus segmentos adyacentes inactivos, los cuales mantienen la negatividad del Vmr. Esta diferencia de cargas entre el segmento activo (donde se gener la respuesta), y los segmentos adyacentes, provoca el flujo de iones positivos a lo largo del axoplasma, atrados por los iones negativos del segmento inactivo. Sin embargo, finalmente, las cargas seguiran

la va de menor resistencia, a travs de la membrana plasmtica, y regresaran al medio extracelular, cerrando el circuito. (Ver figura 16)

Figura 16. Propagacin por corrientes locales. En respuesta a la llegada del estmulo, un segmento de la membrana se despolariza, acumulando cargas positivas en su interior, las cuales son atradas, de forma electrosttica, por la negatividad de los segmentos adyacentes, an en estado de reposo, este desplazamiento provoca la despolarizacin de estos nuevos segmentos, favoreciendo la transmisin de la seal. Finalmente, las cargas positivas salen a travs de la membrana plasmtica, de nuevo al medio extracelular, disminuyendo la seal y cerrando el circuito de transmisin.

La conduccin del potencial de accin, a pesar de seguir el flujo de corrientes locales, se diferencia de la conduccin electrotnica, en su capacidad de propagarse de manera autoregenerativa, sin disminuir su amplitud. La conduccin con decremento no conseguira que la seal llegara de un extremo del axn al otro, salvo en axones muy cortos, como las neuronas retinianas. Los axones de otras regiones pueden tener una longitud de un metro o ms, por ejemplo, un axn de una motoneurona, de tal manera que son varias veces ms largos que sus constantes de longitud. Para que un impulso elctrico pueda circular por toda la extensin de la clula, sin disminuir su amplitud,

el potencial de accin se tiene que autoregenerar durante su conduccin por la fibra. Por lo que el potencial de accin se propaga, adems de conducirse. La propagacin implica la generacin de potenciales de accin nuevos, conforme se van transmitiendo a lo largo de la clula. Como describimos anteriormente, la conduccin del potencial de accin sigue la teora del flujo de corrientes locales, en donde la corriente inicial despolarizante en la regin activa, es atrada por las cargas negativas de los segmentos inactivos adyacentes. Si consideramos que el estmulo inicial genera un potencial de accin en el segmento activo, en vez de una respuesta subumbral, la corriente despolarizante que se conduce a los segmentos adyacentes, debera ser de intensidad suficiente para que estos alcancen su valor umbral y generen un nuevo potencial de accin. Estos segmentos pasan ahora a ser regiones activas, creando ms flujo de corrientes locales, y permitiendo que reas ms alejadas todava alcancen el umbral y puedan generar, a su vez, potenciales de accin. En resumen, la propagacin se produce por ciclos repetidos de despolarizacin que generan un flujo de corriente local suficiente para que una regin adyacente de la membrana celular cree un potencial de accin. Por tanto, el potencial de accin se conduce por el axn mediante la generacin de nuevos potenciales de accin a lo largo de su longitud. De este modo, el potencial se propaga a larga distancia conservando la misma forma y tamao. El potencial de accin se genera en el segmento inicial del axn (cono axnico), y se propaga al extremo terminal, por lo que podemos considerar la propagacin como un frente de onda, que va despolarizando segmentos de membrana adyacentes y generando nuevos potenciales de accin. Debemos considerar que cuando las cargas se propagan a los segmentos inactivos, la regin activa original entra en fase de repolarizacin, y periodo refractario absoluto, por tanto, si alguna carga positiva del frente de onda se regresa, atrada por esta negatividad, no generara respuesta alguna, manteniendo la propagacin del potencial de accin en un sentido unidireccional, ortodrmico, desde el soma al terminal axnico. La propagacin rpida del potencial de accin es funcionalmente importante, para lo cual el sistema nervioso animal ha desarrollado dos estrategias bsicas para mejorar las propiedades de conduccin de la fibra nerviosa, y aumentar la velocidad de propagacin: incrementar el dimetro del axn, lo que disminuye la resistencia del axoplasma; y la mielinizacin, aumentando la resistencia de la membrana plasmtica. El dimetro de la fibra, es un importante factor que influye sobre el valor de la constante de longitud, de acuerdo a la siguiente relacin, = aRm/2Ri, podemos concluir que, mientras mayor sea el dimetro del axn, mayor constante de longitud, y mejor ser la propagacin electrotnica de las seales elctricas. (Ver figura 17)

Figura 17. Relacin entre el dimetro del axn y la constante de longitud. Podemos observar que mientras mayor sea el dimetro del axn, menor es la resistencia axoplasmica, y por lo tanto mayor es la constante de longitud, favoreciendo la propagacin de la seal de forma ms rpida y eficiente.

Un segundo mecanismo para aumentar la velocidad de conduccin es la mielinizacin del axn, es decir, el envoltorio de este con membranas de clulas gliales, de forma concntrica. El grosor de la vaina de mielina puede alcanzar hasta 300 capas de membrana y representar hasta un 40% del dimetro total de la fibra nerviosa. Las clulas gliales productoras de mielina, son las clulas de Schwann en el sistema nervioso perifrico (SNP), o los oligodendrocitos, dentro del sistema nervioso central (SNC). (Ver figura 18). La vaina de mielina, tanto en el SNC como en el SNP, est constituida por un alto porcentaje de lpidos (70-85%), y un bajo porcentaje de protenas (15-30%), dispuestos bajo un modelo de bicapa lipdica, con protenas integrales y extrnsecas, y disposicin asimtrica de ambas hojas. Como elementos lipdicos posee colesterol, fosfolpidos (lecitin fosfatidilcolina, esfingomielina), y de forma caracterstica, cerebrosidos (galactosil ceramida), en una relacin 4:3:2. Otros lpidos incluyen polifosfoinositoles, esteres de cidos grasos de galactocerebrosidos, y ganglisidos, como el GM1 en el SNC. Esta composicin lpidica es muy similar en todas las especies, con algunas variaciones regionales, entre el SNC y el SNP.

Una gran variedad de protenas han sido identificadas dentro de la vaina de mielina, con algunas diferencias en su expresin entre el SNC y el SNP. Dentro del SNC, las protenas ms abundantes son la protena proteolipdica (PLP) y la protena bsica de la mielina (MBP), representando un 60 al 80% del total; mientras que en el SNP, encontramos la glicoprotena P0, representando ms del 50% del total, la protena P2, la protena perifrica de la mielina 22, as como la MBP, entre otras. Se postula que juegan un papel importante en la estabilizacin de la vaina, as como en la interaccin con el axn. En los ltimos aos, nuevas protenas han sido identificadas, incluso receptores hormonales, quedando por dilucidar la funcin de todas estas. Las numerosas envolturas de la membrana que rodea al axn aumentan la resistencia de la membrana, incrementando el cociente Rm/Ri, y por lo tanto la constante de longitud. Este incremento de la resistencia de la membrana, minimiza la perdida de corriente a travs de la misma, ya que las cargas son forzadas a viajar por el medio axoplsmico, de menor resistencia, disminuyendo la cada de la amplitud de la seal con la distancia. En una neurona con un axn mielinizado, el potencial de accin se desencadena en el segmento no mielinizado de la membrana, situado en el cono axnico, propagndose a lo largo del axn a partir de este. La vaina de mielina forma una verdadera capa aislante a lo largo de la fibra, evitando el escape de las cargas transportadas por el axoplasma, favoreciendo su rpida y eficaz transmisin, sin embargo, en axones de gran longitud, estas cargas pueden ser incapaces de descargar la capacitancia de la membrana a lo largo de todo el axn, y as poder mantener la amplitud constante a travs de la fibra, y si aparte consideramos que el interior de la fibra mielinica estara completamente aislado del exterior, esto evitara que nuevas cargas positivas puedan entrar al medio intracelular y contribuir al reforzamiento de la seal, provocando una disminucin eventual de la amplitud de la misma. Para evitar que el potencial de accin se agote, la vaina de mielina esta interrumpida a intervalos regulares, cada 1 a 2 mm, por zonas de membrana axonal desnudas, de 2 mcm de longitud, denominadas ndulos de Ranvier. (Ver figura 18).

Figura 18. Corte transversal y longitudinal de una fibra mielinica. Se evidencia como el axn se encuentra envuelto en mltiples capas de membrana rica en mielina, producidas por la clula de Schwann, ubicada en la periferia del axn. En la grfica de la derecha se evidencia como el nico segmento desnudo del axolema es el nodo de Ranvier.

Los canales de Na+ voltaje dependientes que generan el potencial de accin se encuentran densamente concentrados en la membrana del nodo de Ranvier, mientras que no existen en los segmentos internodales, lo que implica que los nodos pueden generar una intensa corriente de Na+ hacia el interior celular, en respuesta a la llegada de la despolarizacin, transmitida de forma pasiva a lo largo del resto del axn, por lo que el potencial de accin solo se regenera en dichos ndulos, en lugar de regenerarse forma continua a lo largo de la fibra, como sucede en los axones amielnicos. La resistencia al flujo de iones a travs de la vaina de mielina de los segmentos internodales es tan elevada, que no existen corrientes transmembrana y las cargas intracelulares se propagan rpidamente hasta llegar al siguiente nodo de Ranvier, donde al encontrar un segmento de membrana desnuda, podemos desplazarla al umbral, y regenerar el potencial de accin. Estas nuevas cargas que se introducen al medio intracelular, se propagaran rpidamente como corrientes locales hasta llegar al siguiente nodo. Por ello, parece que el potencial de accin en las fibras mielinicas, salta de un nodo de Ranvier a otro, denominndose este proceso, conduccin saltatoria. A diferencia de las fibras Amielinicas, las cuales, como deben regenerar su potencial de accin de forma continua a lo largo del axn, poseen una conduccin continua. (Ver figura 19 y 20).

Figura 19. Propagacin del potencial de accin a travs de una fibra mielinica. Podemos observar como el potencial se propaga rpidamente a lo largo de los segmentos internodales, demostrado por el poco tiempo en que la seal recorre distancias largas (baja pendiente tiempo/distancia), mientras que al llegar a los nodos de Ranvier disminuye la velocidad (aumenta la pendiente de relacin tiempo/distancia), con la finalidad de redisparar el potencial, y transportarlo mediante corrientes locales rpidas hasta el siguiente nodo.

Figura 20. Conduccin continua y saltatoria. A. En las fibras amielinicas la conduccin del potencial de accin se realiza mediante la despolarizacin de todos los segmentos de la fibra nerviosa, adyacentes a la regin donde se gener la seal, proceso denominado conduccin continua. B. En las fibras mielinicas, el potencial se genera en el cono axnico, a partir del cual se propaga por corrientes locales hasta el siguiente nodo de Ranvier, donde la membrana plasmtica pierde la vaina de mielina, se activan canales de Na+ voltaje dependientes y se redispara el potencial, transportando dichas cargas por corrientes locales rpidas hasta el siguiente nodo, proceso denominado conduccin saltatoria.

La velocidad de propagacin del potencial de accin en una fibra mielinica, es mucho mayor que en las fibras Amielinicas, a pesar que estas ltimas tengan un dimetro superior. Por ejemplo, los axones del calamar gigante tienen 500 micras de dimetro, con lo que alcanzan velocidades de conduccin aproximadas de 20 m/s, mientras que una fibra mielinica de 10 micras de dimetro, puede alcanzar velocidades de 50 m/s, ms del doble del registrado en el axn del calamar, a pesar de tener un dimetro 50 veces menor. (Ver figura 21). Si nuestros nervios no estuviesen mielinizados, para poder mantener la misma velocidad de conduccin, la medula espinal tendra que ser tan grande como el tronco de un rbol.
Figura 21. Velocidad de conduccin en fibras mielinicas y Amielinicas de acuerdo a su dimetro. Podemos evidenciar como la velocidad de conduccin de los axones mielinicos es superior a la de los amielnicos, a pesar de tener estos un dimetro 100 veces superior.

Por ltimo, la conduccin saltatoria de las fibras mielinicas tambin es favorable desde un punto de vista metablico, sobre la conduccin continua. Como las corrientes inicas solo se establecen en los nodos de Ranvier, en la fibra mielinica, menos cantidad de sodio atraviesa una unidad de longitud de membrana en la fibra, necesitando una menor actividad de la Na+/K+ ATPasa para restablecer y mantener los gradientes inicos, disminuyendo el gasto de ATP celular. Se postula que la mielina no solo cumple funciones pasivas, relacionadas con la resistencia y capacitancia de la membrana, sino que juega un papel activo afectando la estructura del axn al cual envuelve, optimizando sus propiedades para la transmisin de potenciales de accin de forma saltatoria. La mielina puede regular la organizacin polarizada de la membrana axonal, favoreciendo el ensamblaje y expresin de los canales de Na+ solo a nivel del nodo de Ranvier, entre otras protenas. Al mismo tiempo, mediante mecanismos de sealizacin desde la mielina, al interior del axn, puede incrementar el dimetro axonal induciendo cambios bioqumicos en los componentes del citoesqueleto axonal, como los neurofilamentos. Gracias a la vaina de mielina, podemos mantener una alta velocidad de conduccin neural, necesaria para un procesamiento mental complejo y eficiente, conservando al mismo tiempo espacio y energa. La transmisin sinptica. Previamente, consideramos los mecanismos que subyacen al fenmeno de excitabilidad celular, la capacidad que tienen las clulas excitables de responder a un estmulo externo alterando el trfico de iones a travs de su membrana, generando un potencial de accin y conducindolo a travs de toda su extensin. Para continuar nuestro viaje por el mundo neuromuscular, nos enfocaremos en la descripcin de los mecanismos celulares que permiten la transmisin de la seal elctrica entre dos clulas excitables, bien sea una neurona neurona, neurona msculo, o msculo msculo, proceso denominado transmisin sinptica. Dentro del sistema nervioso la transmisin sinptica se concibe generalmente como la interaccin que ocurre entre dos neuronas, en una regin especializada denominada sinapsis, termino acuado por Charles Sherrington, al inicio del siglo XX. Cada neurona es capaz de formar y recibir alrededor de 1.000 a 10.000 conexiones sinpticas (inclusive las clulas de Purkinje cerebelares pueden recibir hasta 100.000), y, si consideramos que nuestro cerebro posee aproximadamente 1011 neuronas, esto quiere decir que poseemos de 1014 a 1015 sinapsis, 1000 veces ms que el total de estrellas en nuestra galaxia, afortunadamente todas estas conexiones siguen una estructura y caractersticas funcionales bsicas, que estudiaremos a continuacin. Con algunas excepciones, toda sinapsis est constituida por tres componentes: a) el terminal presinaptico, b) la hendidura sinptica, y c) la zona postsinaptica, de acuerdo a la organizacin morfofuncional de estos elementos podemos describir 2 grandes tipos de sinapsis: qumicas y elctricas. Desde la aparicin del concepto de bioelectricidad, el anlisis y explicacin del proceso de transmisin de las seales elctricas entre clulas adyacentes signific un reto importante para los fisilogos del momento. Sir Bernard Katz (1911-2003), calcul que la transmisin pasiva del potencial de accin, desde un terminal presinaptico hasta la zona postsinaptica, implicara una atenuacin de 10000 veces en la amplitud de la seal, de tal manera, que un potencial de accin transmitido por

una motoneurona (con una amplitud de 100 mV aproximadamente), al llegar a la clula muscular, solo provocara una despolarizacin de 1 microvoltio, impidiendo cualquier respuesta celular. Con la finalidad de permitir la comunicacin eficaz y eficiente entre las clulas excitables, la evolucin nos ha dotado de mecanismos sinpticos especializados que permiten la comunicacin intercelular. Para explicar el proceso de transmisin sinptica, dos hiptesis surgieron, derivadas de diferentes escuelas experimentales. Una de ellas, propona que las clulas se encontraban unidas por puentes celulares microscpicos, que permitan el flujo de la seal elctrica de una a otra directamente; mientras que la otra, se bas en observaciones experimentales farmacolgicas, para proponer que la transmisin sinptica era mediada por sustancias qumicas o neurotransmisores. Para la dcada de 1960, los hallazgos experimentales acumulados nos permiten confirmar que las clulas utilizan tanto mecanismos qumicos como elctricos para la transmisin sinptica. La evidencia directa para la confirmacin de la existencia de mecanismos qumicos de transmisin sinptica precedi a la identificacin de los mecanismos de sinapsis elctrica. Desde los estudios de Loewi en 1921, se identific a la Ach como el mensajero qumico responsable de la transmisin autonmica parasimptica en el corazn, estudios confirmados por Dale, algunos aos despus, en la placa motora, postulando que el potencial de accin neuronal, al llegar al terminal sinptico, permita la liberacin de mensajeros qumicos, los cuales eran los responsables de la transmisin de la seal a la clula postsinaptica, sentando as las bases experimentales de la sinapsis qumica. Por el contrario, la primera evidencia experimental que confirmo la existencia de mecanismos de sinapsis elctrica, no llega sino hasta el ao 1959, cuando mejoran las tcnicas experimentales, y se logra identificar la rpida, casi inmediata, transmisin de una seal elctrica entre dos clulas, conectadas entre s mediante canales inicos especializados, conformando una unin tipo nexo (gap junction), que permite la libre transmisin de iones y pequeas molculas entre ambas clulas. Sinapsis Elctrica Una sinapsis elctrica es una verdadera conexin estructural entre dos clulas excitables, dada por la presencia de una unin tipo nexo (gap junction), conformada por canales inicos que permiten el libre paso de iones entre la clula pre y postsinaptica. En vista de esta conexin directa, la hendidura sinptica entre las clulas es muy pequea, de 3 nm aproximadamente. Aunque su existencia en el SNC de los mamferos se conoce desde hace mucho tiempo, se pensaba que las sinapsis elctricas entre neuronas tenan relativamente poca importancia en el funcionamiento del SNC. Sin embargo, recientemente se ha hecho evidente que estas uniones son bastante comunes, y que en ellas pueden subyacer funciones neuronales importantes. Estn presentes en el SNC animal desde los invertebrados hasta los mamferos, y aparecen entre clulas gliales, as como entre neuronas. Su presencia se ha demostrado en la mayora de las regiones enceflicas, incluyendo la oliva inferior, el cerebelo, la neocorteza, el tlamo, el hipotlamo la retina, el estriado y la mdula espinal. La unin tipo nexo en la sinapsis elctrica est constituida por una serie de canales inicos especializados, que forman una va de baja resistencia entre ambas clulas, permitiendo la transmisin de la corriente de forma rpida, sin retraso, y con poca atenuacin. En respuesta a un potencial de accin en la clula presinptica, se produce un potencial postsinptico despolarizante

en la clula postsinaptica, con un retraso mnimo, casi inexistente, que usualmente sobrepasa el nivel umbral y desencadena otro potencial de accin. (Ver figura 22).

Figura 22. Potencial presinptico y postsinptico en una sinapsis elctrica. Se evidencia la ausencia de retardo sinptico entre la respuesta de la clula presinaptica y la aparicin de una respuesta postsinaptica, en vista del libre paso de las cargas despolarizantes a travs de la gap junction.

Esta es una diferencia importante con la sinapsis qumica, la cual presenta un retardo sinptico entre la respuesta de la clula presinaptica y postsinaptica, asociado con los eventos celulares necesarios para la exocitosis del neurotransmisor desde el terminal presinaptico. El cambio de potencial de la clula postsinaptica est relacionado con la amplitud y forma del potencial presinaptico. Inclusive, cuando la respuesta presinaptica es de baja amplitud, subumbral, parte de esta corriente despolarizante pasa por la gap junction y provoca cierta despolarizacin en la clula postsinaptica, aunque no alcance el umbral para la generacin de un potencial de accin, por lo que tambin se denomina transmisin electrotnica. (Ver figura 23). Por el contrario, dentro de las sinapsis qumicas, la respuesta presinaptica debe implicar obligatoriamente la presencia de un potencial de accin, que permita la activacin de canales de Ca++ en el terminal presinaptico y la puesta en marcha de la maquinaria exoctica de los mensajeros qumicos, para poder generar una respuesta postsinaptica.

Figura 23. Transmisin electrotnica en la sinapsis elctrica. Aun cuando la despolarizacin presinaptica sea subumbral, parte de esta corriente despolarizante pasara a travs de la gap junction, produciendo una respuesta pasiva, subumbral en la clula postsinaptica.

Cada canal de la gap junction est formado por un par de hemicanales, denominados conexones, ubicados tanto en la membrana presinaptica, como postsinaptica. Ambos hemicanales forman un puente de comunicacin entre las dos clulas, con un dimetro aproximado entre 1 a 2nm, que permite el paso de iones y molculas pequeas (1kDa) entre ambos citoplasmas. Cada conexn est formado por seis subunidades idnticas, denominadas conexinas, codificadas por una familia de ms de 21 genes diferentes, dentro de las cuales la conexina 36 (de acuerdo a su peso molecular en kDa) es la principal dentro del SNC adulto. (Ver figura 24)

Figura 24. Estructura de una gap junction. Ambas clulas se encuentran acopladas electromecnicamente por la presencia de mltiples canales inicos, cada uno de ellos formados por dos hemicanales o conexones. Cada conexn est constituido por seis subunidades de protena conexina. El espacio sinptico es muy estrecho, de tan solo 3 nm.

La mayora de las sinapsis elctricas son bidireccionales, permitiendo el paso de la corriente elctrica con la misma eficiencia en ambas direcciones, la clula que responda al estmulo externo ser considerada la clula presinaptica, despolarizndose y conduciendo dicha seal a la clula contigua (postsinaptica). La presencia de sinapsis elctricas en el SNC es importante para la respuesta rpida y sincrnica de grupos neuronales. Por ejemplo, los reflejos de huida y escape de algunos animales, son mediados por sinapsis elctricas, que permiten la respuesta inmediata a un estmulo sensorial perifrico, permitiendo una respuesta motora estereotipada, involuntaria, asociada a la huida de dicho estimulo nocivo. Igualmente, facilita el acoplamiento elctrico de grupos neuronales especficos, en donde muchas clulas pequeas, al permitir el paso de la corriente despolarizante libremente a travs de ellas, pueden actuar en conjunto como una gran clula, potenciando la respuesta postsinaptica. Por ltimo, aunque las sinapsis elctricas se muestran generalmente como relativamente simples y estticas en comparacin con las sinapsis qumicas, en realidad son entidades bastante dinmicas. Por ejemplo, la actividad de diferentes isoformas de conexinas est regulada por factores como la diferencia de voltaje, el pH y la concentracin de calcio intracelular. Estos factores pueden alterar el

acoplamiento entre clulas a travs de variaciones en la conductancia de canales aislados, la formacin de nuevas uniones gap o la eliminacin de las existentes. Sinapsis Qumica A diferencia de las sinapsis elctricas, en las sinapsis qumicas no hay una continuidad estructural entre las neuronas pre y post-sinpticas. En lugar de esto, las membranas celulares estn separas por una hendidura sinptica de alrededor de 20-40 nm, interactuando entre s mediante la liberacin de mensajeros qumicos, conocidos como neurotransmisores. Las sinapsis qumicas son unidireccionales, polarizadas, permitiendo la propagacin de la seal en una sola direccin, desde la clula presinaptica, que libera el neurotransmisor, hasta la clula postsinaptica, que contiene los receptores especficos que reconocen y fijan dicho ligando. Los neurotransmisores suelen estar incluidos en vesculas sinpticas, agrupadas en los terminales presinapticos del axn, alrededor de regiones especializadas de la membrana, denominadas zonas activas, desde donde sern liberados al espacio sinptico. La transmisin sinptica en una sinpsis qumica puede resumirse de la siguiente manera: Se genera un potencial de accin en la clula presinptica Dicho potencial se propaga a lo largo del axn hasta el terminal presinaptico, donde permite la apertura de canales de Ca++ voltaje dependiente, permitiendo la entrada del in al medio intracelular, siguiendo su gradiente electroqumico. El incremento de las concentraciones de Ca++ activa una maquinaria exoctica, que permite la fusin de las vesculas sinpticas con la membrana presinaptica y la liberacin de su contenido a la hendidura sinptica. El neurotransmisor difunde a travs de la hendidura sinptica e interacta con receptores especficos ubicados en la clula postsinaptica. La unin del transmisor a los receptores provoca la alteracin del trfico inico en la clula postsinaptica, provocando un cambio transitorio del potencial de membrana local (potencial postsinptico), que puede implicar una despolarizacin (Potencial postsinptico excitatorio) o una hiperpolarizacin (Potencial postsinptico inhibitorio). Finaliza la seal qumica, mediante la degradacin enzimtica del neurotransmisor, su recaptura al terminal presinaptico o su difusin a regiones adyacentes.

La exocitosis de las vesculas sinpticas implica la actividad de una serie de protenas intracelulares, que permiten el traslado de las mismas hacia las zonas activas, y su fusin con la membrana presinaptica. En respuesta al incremento de las concentraciones de Ca++ intracelulares, se activan protenas quinasas dependientes de Ca++ y calmodulina, las cuales fosforilan a las protenas sinapsinas, movilizando las vesculas sinpticas desde su pool de reserva, lejos de la zona activa, hasta esta. La fusin de las vesculas con la membrana presinaptica implica la actividad de las protenas SNARE, de las cuales existen 2 tipos: las v-SNARE, presentes en la membrana de la vescula; y las t-SNARE, presentes en la membrana plasmtica presinaptica. Cada vescula posee un solo tipo de v-SNARE, la sinaptobrevina, mientras que la zona activa presinaptica posee 2 tipos

de t-SNARE, la sintaxina y la SNAP-25. Considerando que la fusin de las vesculas con la membrana plasmtica debe ocurrir en una fraccin de milisegundo, se postula que las protenas SNARE se encuentran formando un complejo de unin ternario, facilitado por la accin de protenas SM, como la Munc-18, antes de la entrada del Ca++ al medio intracelular. Una vez que llega la seal elctrica al terminal presinaptico, y se abren los canales de Ca++ voltaje dependiente, el incremento del in en el interior celular, activa a una protena sensora de calcio, en la membrana vesicular, denominada sinaptotagmina, la cual permite la fusin definitiva de las membranas, la formacin del poro sinaptico y la exocitosis del contenido de la vescula. Es de destacar que las protenas SNARE son bloqueadas por accin de la toxina botulnica, disminuyendo la liberacin de neurotransmisores como la acetilcolina, en la placa motora y los ganglios autonmicos. (Ver figura 25)

Figura 25. Formacin y disociacin del complejo SNARE. Podemos evidenciar el ciclo SNARE. Inicialmente la sinaptobrevina interacta con las dos protenas t-SNARE, la sintaxina y la SNAP-25, formando un complejo ternario que acerca la vescula y la membrana presinaptica, este complejo es estabilizado gracias a la protena Munc-18. La entrada de Ca++ al interior de la clula, permite la activacin de la sinaptotagmina, favoreciendo la fusin de las membranas y la formacin del poro sinptico, con la subsiguiente liberacin del contenido vesicular. Finalmente, las protenas NSF y SNAP, se unen al complejo SNARE permitiendo su disociacin, en una reaccin dependiente de ATP, reciclando as la membrana de la vescula.

Considerando los pasos necesarios para la liberacin del neurotransmisor y la respuesta postsinaptica, en respuesta a la llegada del potencial de accin al terminal presinaptico, las sinapsis qumicas son ms lentas que sus contrapartes elctricas, presentando un retardo sinptico caracterstico, definido como el tiempo que transcurre entre la estimulacin presinaptica y la respuesta postsinaptica. Sin embargo, a pesar de esto, las sinapsis qumicas tienen una importante propiedad de amplificacin de la seal, ya que inclusive la liberacin de una sola vescula sinptica, permite la interaccin de miles de molculas de neurotransmisor con sus receptores postsinpticos, actuando sobre una gran cantidad de canales inicos y alterando el trafico inico de la clula diana, por lo que una pequea corriente despolarizante presinaptica, puede generar una importante despolarizacin en la postsinapsis. (Ver figura 26)

Figura 26. Transmisin sinptica en la sinapsis qumica. Como podemos evidenciar en los registros elctricos a la izquierda, existe un retardo sinptico (indicado por la flecha), entre la estimulacin presinaptica, y la respuesta postsinaptica, relacionada con los eventos bioqumicos que implican la liberacin del neurotransmisor desde las vesculas sinpticas y su interaccin con los receptores postsinpticos, eventos descritos en las figuras de la derecha. El potencial de accin presinaptico permite la apertura de los canales de Ca++ voltaje dependientes, el aumento de la concentracin del in en el medio intracelular permite la exocitosis del neurotransmisor, el cual interacta con los receptores postsinpticos generando el potencial postsinptico, excitatorio en este caso.

La naturaleza molecular de las sinapsis qumicas le otorga una gran diversidad y especializacin funcional, encontrando neurotransmisores con efecto inhibitorio (GABA) o excitatorio (Glutamato), o una misma molcula que puede desarrollar respuestas postsinapticas tanto excitatorias como inhibitorias. La accin del neurotransmisor depender de las propiedades del receptor postsinptico que fija dicho ligando, no de las propiedades qumicas de la sustancia. Por ejemplo, la acetilcolina (Ach) puede excitar algunas clulas postsinapticas (musculo liso gastrointestinal) e inhibir otras (miocardio), e incluso en otras clulas puede producir tanto excitacin como inhibicin (neuronas postganglionares autonmicas). Es el receptor postsinptico el que determina la accin final de la Ach, determinando si la sinapsis colinrgica ser excitatoria o inhibitoria. La liberacin de neurotransmisores puede ser considerada como mltiples paquetes individuales que vierten su contenido al espacio extracelular, cada uno de ellos representa una vescula sinptica, cuyo contenido individual es la mnima cantidad de neurotransmisor que puede ser liberado en una

sinapsis, esta cantidad fija se denomina cuanto. Cada cuanto de NT produce un potencial postsinptico de amplitud fija, gracias a la interaccin con un nmero determinado de receptores postsinpticos, denominado potencial postsinptico cuntico. El potencial postsinptico total viene representado por la sumatoria de mltiples potenciales cunticos, ya que durante una sinapsis qumica estndar se produce la liberacin de miles de cuantos, produciendo cada uno de ellos, un potencial cuntico individual, los cuales se superponen para generar el potencial postsinptico. Existen dos grandes categoras de receptores postsinpticos para los neurotransmisores, los receptores ionotrpicos, los cuales constituyen canales inicos ligando dependientes, la activacin del canal puede provocar una despolarizacin o hiperpolarizacin de la membrana, dependiendo de la selectividad inica del mismo; y los receptores metabotrpicos, receptores acoplados a protenas G (receptores con siete dominios transmembrana), en respuesta a su activacin, las subunidades alfa y beta-gamma de la protena G activan una serie de respuestas celulares mediante la interaccin directa con otros canales inicos o segundos mensajeros. Por su propia naturaleza, los receptores inotropicos median respuestas sinpticas rpidas, que ocurren en la escala de los milisegundos, mientras que los receptores metabotropicos median respuestas lentas, de segundos a minutos de duracin. En la siguiente tabla podemos comparar las principales caractersticas morfofuncionales de la sinapsis elctrica y qumica. Sinpsis Elctrica La hendidura sinptica es muy estrecha Las clulas se encuentran acopladas electromecnicamente entre si, gracias a las gap junctions La despolarizacin de la clula postsinptica, es inducida por la corriente inica de la clula presinaptica Es bidireccional, siempre excitatoria Sinpsis Qumica Presenta una hendidura sinptica amplia Las clulas se encuentran separadas una de otra, sin contacto fsico La despolarizacin o hiperpolarizacin post-sinptica es mediada por la liberacin de neurotransmisores desde el terminal presinaptico Es unidireccional, puede ser excitatoria o inhibitoria dependiendo de la naturaleza del receptor postsinptico. Hay retardo sinptico. Es ms lenta.

No existe retardo sinptico. Es rpida.

Tabla 1. Comparacin de las propiedades funcionales de las sinapsis elctricas y qumicas.

La sinapsis neuromuscular. La sinapsis qumica entre las terminaciones nerviosas perifricas y las fibras musculares esquelticas es la conexin sinptica ms estudiada dentro del sistema nervioso, en vista de su relativa simplicidad, y su facilidad de acceso para experimentacin. Las neuronas motoras del asta anterior de la mdula espinal (motoneuronas), dan origen a axones perifricos, que discurren a

travs de los nervios espinales hasta llegar al msculo efector, cada axn se ramifica intensamente a medida que se acerca a la clula diana, dando origen a una gran cantidad de terminaciones sinpticas, que interactuaran con diferentes clulas musculares. Esta regin especializada de comunicacin entre la motoneurona y la clula muscular, recibe el nombre de unin neuromuscular. Esta sinapsis est constituida por el botn presinaptico de la motoneurona y su zona activa, y una regin especializada de la clula muscular, denominada placa terminal o placa motora, donde la membrana muscular posee una gran cantidad de invaginaciones, que le permiten incrementar el rea total que participa dentro de la sinapsis, estas poseen una gran cantidad de receptores postsinpticos y canales de Na+ voltaje dependiente. La hendidura sinptica tiene un espesor de 50 nm, aproximadamente, y contiene una gran cantidad de protenas y proteoglicanos, que forman parte de la matriz extracelular. Es de destacar, la presencia de la enzima acetilcolinesterasa, asociada a la membrana basal de las invaginaciones postsinapticas. Las vesculas presinapticas contienen acetilcolina (Ach), siendo este el neurotransmisor clave de la unin neuromuscular. Cada vescula posee alrededor de 6000 a 10000 molculas del neurotransmisor, el cual es sintetizado en el soma celular, gracias a la enzima colina acetiltransferasa, para posteriormente ingresar a la vescula por la accin de un intercambiador AchH+. (Ver figura 27)

Figura 27. La unin neuromuscular. Las motoneuronas alfa nacen en la sustancia gris del asta anterior de la mdula espinal, desde donde salen a travs de los nervios espinales hacia los msculos efectores perifricos. Cada axn se ramifica en mltiples terminales axonales, que inervan a diferentes clulas musculares. Cada terminal a su vez, da origen a una serie de botones sinpticos, los cuales entran en contacto estrecho con una regin de la clula muscular denominada placa motora, la cual posee una gran cantidad de invaginaciones, llenas de receptores nicotnicos musculares y de la enzima acetilcolinesterasa. Cada botn posee una gran cantidad de vesculas sinpticas, agrupadas en la zona activa de la membrana presinaptica. El neurotransmisor presente en las vesculas es la acetilcolina, sintetizada en el soma neuronal, a partir de la colina y acetilCoA, gracias a la enzima, colina acetiltransferasa, dicho neurotransmisor ingresa a la vescula por un antiporte con H+. En respuesta al potencial de accin neuronal, se abren canales de Ca++ voltaje dependiente, aumenta la concentracin de Ca++ intracelular, y se activa la maquinaria de exocitosis de las vesculas sinpticas, liberando la Ach a la hendidura sinptica, interactuando con los receptores nicotnicos musculares, generando un potencial excitatorio postsinptico en la placa motora. Finalmente, la Ach es degradada a Acetato y colina por la enzima acetilcolinesterasa, finalizando la seal.

En relacin con los receptores postsinpticos, existen 2 grandes tipos de receptores colinrgicos: los receptores nicotnicos, de carcter ionotrpico, los cuales constituyen un canal inico con alta permeabilidad para el Na+, cuya apertura depende de la presencia de la interaccin de 2 molculas de acetilcolina con su sitio activo, dichos receptores se ubican a nivel de la placa motora de la unin neuromuscular, y en la neurona postganglionar, dentro de las sinapsis ganglionares autonmicas; y los receptores muscarnicos, de carcter metabotrpico, los cuales se encuentran acoplados a protenas G, que permiten la activacin de protenas efectoras y la generacin de segundos mensajeros, estos receptores se encuentran dentro de las sinapsis postganglionares parasimpticas. (Ver figura 28)
Figura 28. Receptores nicotnicos y muscarnicos. A. Los receptores nicotnicos son receptores ionotrpicos, es decir, son canales inicos ligando dependientes. En respuesta a la unin de dos molculas de acetilcolina el canal se abre, permitiendo la entrada de Na+ al medio intracelular, generando una rpida despolarizacin de la membrana y un potencial postsinptico excitatorio. Se encuentran ubicados en la placa motora y las neuronas postganglionares autonmicas. B. Los receptores muscarnicos son receptores de tipo metabotrpico, acoplados a un sistema de segundos mensajeros. Pueden mediar respuestas excitatorias o inhibitorias. Se encuentran ubicados en las sinapsis postganglionares parasimpticas. Por ejemplo, a nivel cardiaco, la acetilcolina al interactuar con los receptores M2 activa a una protena G inhibitoria, que induce la activacin de corrientes de salida de K+, hiperpolarizando las clulas del sistema de conduccin y disminuyendo la frecuencia cardiaca.

En la unin neuromuscular, una vez que el potencial de accin se propaga hasta el terminal presinaptico de la motoneurona, se inicia una cascada de eventos que concluye con la liberacin de acetilcolina hacia la hendidura sinptica, la cual interacta con receptores nicotnicos musculares de la placa motora, generando un potencial excitatorio postsinptico, conocido como potencial de placa motora (PPM). Los receptores nicotnicos musculares son canales catinicos no selectivos, que requieren de la unin de dos molculas de acetilcolina para pasar al estado activo, y permitir el paso tanto al Na+ como al K+, sin embargo, como el gradiente electroqumico que impulsa al Na+ es superior, podemos generalizar afirmando que, producto de la llegada del ligando a la placa motora, aumenta la conductancia al Na+ en la membrana plasmtica, generando una despolarizacin local, transitoria, que constituye el potencial de placa motora, y que suele posee la amplitud necesaria para alcanzar el umbral de la clula muscular (Vm = -50 mV), activar canales de Na+ voltaje dependiente y desencadenar el potencial de accin muscular. Sin embargo, es de destacar que, per se, el potencial de placa motora es un potencial graduado, cuya amplitud depender del nmero de receptores colinrgicos activos, por ejemplo, en condiciones fisiolgicas la cantidad de cuantos de acetilcolina liberados producen la activacin de un nmero tal de receptores nicotnicos que permite la generacin de un potencial de placa motora de amplitud suficiente para llegar al potencial de accin muscular, pero si utilizamos curare, un antagonista competitivo de los receptores nicotnicos, la amplitud del PPM disminuir y no se producir el potencial de accin muscular. (Ver figura 29).

Figura 29. El potencial de placa motora. A. El potencial de placa motora representa el potencial excitatorio postsinptico de la unin neuromuscular, se origina por la activacin de mltiples receptores nicotnicos por la liberacin de las vesculas presinapticas con acetilcolina. En condiciones fisiolgicas, su amplitud es suficiente como para alcanzar el umbral de la clula, abrir canales de Na+ voltaje dependiente, y desencadenar el potencial de accin muscular. B. Si utilizamos curare, un antagonista de los receptores nicotnicos, la amplitud del potencial disminuye, producto de la menor entrada de Na+ al medio intracelular, por lo cual, puede no alcanzar el umbral, no generar potenciales de accin y por lo tanto, no se evidencia contraccin muscular.

En condiciones fisiolgicas, un potencial de accin en la motoneurona produce un potencial de placa motora con una amplitud aproximada de 40 mV, suficiente para alcanzar el umbral y desencadenar el potencial de accin muscular. Esta seal de gran amplitud ocurre como consecuencia de la liberacin de aproximadamente 200 vesculas sinpticas, cada una conteniendo de 6000 a 10000 moleculas de acetilcolina. Sin embargo, estudios de registros electrofisiolgicos de la placa motora, realizados por Fatt y Katz en 1950, identificaron que clulas musculares no sometidas a estimulacin nerviosa presentaban pequeas despolarizaciones de alrededor de 0.4 mV de amplitud, las cuales aparecan a intervalos aleatorios. Estas respuestas eran abolidas mediante el uso de curare, un antagonista de los receptores nicotnicos, pero se incrementaban con la aplicacin de neostigmina, un inhibidor de la acetilcolinesterasa. Considerando que estas fluctuaciones espontaneas del Vm exhiban un curso temporal similar al del potencial de placa motora, fueron denominadas potenciales de placa motora en miniatura. Estas observaciones sugieren que aun en ausencia de estimulacin nerviosa, hay una pequea probabilidad de liberacin de neurotransmisores en la terminal presinaptica, que provoca la apertura de un pequeo nmero de receptores nicotnicos en la membrana postsinaptica. De hecho, los potenciales de placa motora en miniatura se presentan como mltiplos discretos de una amplitud unitaria, hecho que confirma la naturaleza cuntica de la liberacin de los neurotransmisores. Bajo este sentido, la liberacin espontanea de un cuanto (vescula) de acetilcolina producira un PPM en miniatura de 0.4 mV de amplitud, la liberacin de dos cuantos, implicara una amplitud de 0.8 mV, y as sucesivamente. De hecho, el potencial de placa motora se origina producto de la sumatoria de mltiples potenciales miniatura, generados por la liberacin de hasta 200 cuantos de neurotransmisor simultneamente.

Figura 30. Potenciales de placa motora en miniatura. El potencial de placa motora en miniatura ocurre por la liberacin espontanea de cuantos aislados de acetilcolina desde la motoneurona. Su amplitud es unitaria, y est alrededor de 0.4 mV. Si generamos pequeos estmulos presinapticos, y aumentamos la liberacin de cuantos de neurotransmisor, podemos ver que las respuestas postsinapticas son mltiplos de 0.4 mV, la respuesta mnima originada por el neurotransmisor.

FISIOLOGA MUSCULAR. El movimiento en los seres vivos es ejecutado por rganos llamados msculos. Existen 2 tipos de msculos: El msculo estriado y el msculo liso. El msculo estriado a su vez puede dividirse en msculo esqueltico y msculo cardiaco. El msculo esqueltico es el que forma la musculatura somtica, tiene estriaciones transversales evidentes, no es capaz de contraerse sin una estimulacin nerviosa, y sus fibras se comportan como unidades anatmicas y funcionales independientes. El msculo cardiaco tiene igualmente estriaciones transversales, pero sus fibras se comportan como un sincitio, por la presencia de sinapsis elctricas entre sus clulas, y gracias a la presencia de clulas marcapasos en el miocardio, se contrae de forma rtmica sin estimulacin nerviosa. El msculo liso carece de estriaciones transversales. El musculo liso unitario que forma las vsceras huecas se comporta como un sincicio y contiene marcapasos para contracciones rtmicas.

Al igual que las clulas nerviosas, las clulas musculares pueden excitarse en respuesta a estmulos qumicos, elctricos o mecnicos, y generar un potencial de accin que se propague a lo largo de la fibra muscular. La diferencia bsica entre ambas clulas radica en que el potencial de accin en la fibra muscular desencadena un mecanismo contrctil, el cual esta mediado por la interaccin de protenas contrctiles, como lo son la actina y la miosina. La musculatura esqueltica. El msculo esqueltico es un rgano que puede equipararse con un motor flexible y elstico que se une a palancas rgidas (los huesos), y que al contraerse imprime un giro sobre esta palanca a travs de las articulaciones, que actan como puntos de apoyo. Este conjunto de elementos, los msculos, los huesos y las articulaciones forman el aparato locomotor del organismo, que est bajo control de los sistemas nervioso y endocrino. El msculo esqueltico est formado por un conjunto de fibras musculares, cada una de estas fibras se corresponde con una clula muscular, cilndrica, alargada y rodeada de una membrana celular (el sarcolema), este sarcolema se invagina de trecho en trecho en la clula para formar los tbulos T. El citoplasma de las clulas musculares contiene una gran cantidad de enzimas, lpidos, partculas de glucogeno, mitocondrias y miofibrillas. Las miofibrillas constituyen el mecanismo contrctil del msculo, estn formadas por un conjunto de filamentos, que pueden separarse en: Filamentos delgados, Filamentos gruesos y Filamentos conectores. Las estriaciones caractersticas del msculo esqueltico se deben a los diferentes ndices de refraccin que presentan las diferentes partes de la fibra muscular. En la miofibrilla, se evidencia una banda I (isotrpica) que se corresponde con la presencia de los filamentos finos, las bandas I se acoplan entre s en la denominada lnea Z; se evidencia tambin una banda A (anisotropica) oscura, que se corresponde con la presencia de filamentos gruesos, en la banda A se encuentra una regin central denominada zona H, donde se encuentran exclusivamente los filamentos gruesos, en el

medio de esta zona H se encuentra la lnea M, que sirve de anclaje a los filamentos de miosina. El rea entre 2 lneas Z se denomina Sarcmera, y es la unidad funcional del msculo estriado, es aqu donde se interdigitan e interaccionan los filamentos finos y gruesos que permiten el mecanismo de contraccin muscular. (Ver figura 31).

Figura 31. Sarcmero muscular

Los filamentos gruesos estn constituidos por molculas de Miosina II, la cual posee por 2 cabezas globulares, con alfa afinidad por la actina y actividad ATPasa, conformada por cadenas ligeras y cadenas pesadas, y una cola, constituida solamente por las cadenas pesadas.

Figura 32. Filamentos gruesos.

Los filamentos delgados estn constituidos por 3 protenas: la actina F, la tropomiosina y la troponina. El filamento est formado por una doble hlice de molculas de Actina F (filamentosa), en el surco que queda entre ambas cadenas discurre la tropomiosina, la cual oculta los sitios activos de interaccin de la actina para con la miosina; y, finalmente, cada 7 residuos de actina se encuentra la Troponina, constituida por 3 subunidades, la Troponina T (se une a la tropomiosina), la Troponina I (inhibe la interaccin actina-miosina), la Troponina C (fija al Ca++ y comienza la contraccin muscular).

Figura 33. Filamentos delgados. Estructura del filamento delgado, evidenciando la actina F, la tropomiosina, deslizandose entre las 2 cadenas de la actina, y cada 7 residuos de actina, el complejo troponina (I, C y T)

Como filamentos conectores encontramos a los filamentos de titina, que permiten el anclaje de la lnea Z con la lnea M, con caractersticas elsticas, proporcionndole elasticidad al msculo, constituyendo el andamiaje de la sarcomera. Igualmente encontramos a la nebulina que une ambos extremos de los filamentos finos regulando su longitud durante el ensablaje del filamento fino, y la Alfa actinina que ancla los filamentos delgados a la linea Z. Como se haba mencionado, el sarcolema de la fibra muscular se invagina de trecho en trecho (en la unin de la banda A con la banda I), para formar los tbulos T, estos permiten la rpida propagacin del potencial de accin a lo largo de la fibra muscular, estos tbulos T interactan, a cada lado, con cisternas terminales del retculo sarcoplsmico (que interviene en el almacenamiento de Ca++), formando as la estructura denomina trada, y regulando la liberacin de Ca++ para comenzar el mecanismo contrctil cuando se propaga un potencial de accin a lo largo de la fibra. (Ver figura 34).

Figura 34. Triada del musculo esqueltico. Se denota la invaginacin del sarcolema, constituyendo los tbulos T, asociados a ambos lados con las cisternas del retculo sarcoplsmico, sitio este, en donde se desarrolla el acoplamiento excitacin-contraccin.

Todo el proceso de la contraccin muscular suele desarrollarse en respuesta a la excitacin nerviosa de la placa motora, y la generacin del potencial de accin muscular. El proceso por el cual la despolarizacin del msculo inicia la contraccin se llama acoplamiento excitacin-contraccin. El potencial de accin se transmite a lo largo de toda la fibra por el sistema T; se inicia la liberacin de Ca++ de las cisternas terminales, este se une con la troponina C y comienza el proceso de contraccin, por lo que este acoplamiento implica una interaccin entre las triadas (tbulo T y cisternas del retculo sarcoplsmico) y los miofilamentos, mediado en parte, por la accin de los receptores de dihidropiridina y rianodina. La despolarizacin de la membrana del tbulo T activa al retculo sarcoplsmico mediante los receptores para dihidropiridina, estos actan como canales inicos de Ca++ voltaje dependientes en el msculo cardiaco, mientras que en el msculo esqueltico, actan como sensores de voltaje. Cuando se propaga el potencial de accin a lo largo de la fibra, se activan estos receptores y este acta como un disparador para la liberacin de Ca++ desde el retculo. Este receptor cuando se activa, induce a la activacin de los receptores de Rianodina, (ya que esta acoplado electromecnicamente con estos receptores), canales de Ca++ ubicados en la membrana del retculo, y as se permite la liberacin de Ca++ hacia el citosol celular. El aumento de las concentraciones de calcio intracelular es el desencadenante de la contraccin muscular, permitiendo la interaccin acto miosina. (Ver figura 35).

Figura 35. Acoplamiento excitacin-contraccin. El receptor de dihidropiridina se encuentra ubicado en la membrana del tubulo T, y se encuentra acoplado electromecnicamente al receptor de rianodina, presente en la membrana de la cisterna. El receptor de dihidropiridina acta, en el msculo esqueltico, como un sensor de voltaje, activndose en respuesta a la llegada del potencial de accin muscular, permitiendo la apertura del receptor de rianodina, el cual permite la salida de Ca++ desde el interior de la cisterna hacia el citoplasma, iniciando los mecanismos contrctiles.

La contraccin consiste en el acortamiento de la longitud del msculo, esto se debe a una disminucin en la longitud sarcomerica, con la finalidad de explicar este fenmeno se ha postulado la teora de los filamentos deslizantes o mecanismo de los puentes cruzados. Durante la contraccin o el estiramiento muscular la banda A del sarcomero no modifica su longitud, a diferencia de la banda I que aumenta su longitud (en el estiramiento) o la disminuye (en la contraccin), este fenmeno se explica mediante movimientos deslizantes de los filamentos delgados sobre los filamentos gruesos.

Figura 36. Acortamiento de las bandas I durante la contraccin muscular. Se evidencia que la banda A permanece constante, mientras lo que se evidencia es un acortamiento de las bandas I (constituidas por filamentos finos), siendo este una evidencia de que en la contraccin muscular lo que realmente hay es un deslizamiento del filamento fino sobre el filamento grueso.

Una vez establecido este movimiento deslizante, es importante establecer cual es el mecanismo que impulsa este movimiento, el cual depende de la interaccin de los puentes cruzados que se proyectan desde el filamento grueso hacia el filamento delgado. La teora de los puentes cruzados implica la unin intermitente de la actina de los filamentos delgados con los puentes cruzados de miosina de los filamentos gruesos. En condiciones estructurales normales del Sarcmero, la interaccin actina-miosina se encuentra inhibida por la presencia de la troponina I, al liberarse Ca++ al medio intracelular este se une a la troponina C, lo cual trae como consecuencia un cambio conformacional que inactiva a la troponina I y la tropomiosina se desplaza lateralmente, permitiendo la exposicin de los sitios activos de la actina para con la miosina. Inicialmente el filamento de miosina se encuentra unido a la actina, la cabeza de la miosina se encuentra en una orientacin de 45 grados (despus del ultimo ciclo de puentes cruzados), se une el ATP lo que causa una disminucin de la afinidad de la actina por la miosina y permite la disociacin de los filamentos as como la reorientacin de la cabeza de miosina a su estado de reposo en 90 grados. Luego el ATP es hidrolizado rpidamente gracias a la actividad ATPasa de las cabezas de miosina para formar el complejo Miosina-ADP-Pi, este complejo se caracteriza por tener una elevada energa libre y una alta afinidad para con la actina, despus de la unin con la actina, se libera el ADP y Pi, esto trae como consecuencia un cambio conformacional en la cabeza de miosina, la cual rota para pasar de una orientacin de 90 grados a una de 45 grados con respecto al filamento delgado, este cambio conformacional origina una fuerza que impulsa al filamento delgado hacia el

filamento grueso, esta fuerza se transmite al citoesqueleto de la clula gracias a la proteina distrofina y produce el acortamiento general de la misma; Luego a este complejo actina-miosina se le une una molcula de ATP, el complejo resultante (miosina-ATP) tiene una baja afinidad por la actina y esto trae como consecuencia la disociacin del complejo, posteriormente este ATP es hidrolizado nuevamente y comienza el ciclo. Ver figura 37.

Figura 37. Ciclo de puentes cruzados.

Este ciclo continua realizndose hasta que se acabe el ATP o los mecanismos reguladores entren en accin, disminuyendo las concentraciones de Ca++ intracelular, lo cual retrae a los sitios activos de la actina para con la miosina y finaliza la contraccin muscular. Una vez, termina la seal nerviosa, la concentracin de calcio en el citoplasma disminuye por diversos mecanismos: 1) El retculo sarcoplsmico empieza a reacumularlo mediante un mecanismo de transporte activo, mediado por la protena SERCA, hacia las porciones longitudinales del retculo, y de aqu difunden hacia las cisternas terminales, donde es capturado por la protena calsecuestrina y almacenado hasta que es liberado por el siguiente potencial de accin. 2) El calcio es exportado hacia el exterior celular, por una bomba de calcio de la membrana plasmtica, llamada Ca++-ATPasa de la membrana o PMCA

3) Puede salir al exterior celular en un intercambio por Na+, gracias a la actividad del antiporter Na+/Ca++ de la membrana.

Figura 38. Mecanismos de relajacin muscular. El calcio puede ser recaptado al interior del reticulo sarcoplasmico, por accin de la protena SERCA, para posteriormente ser fijado por la calsecuestrina o calreticulina. El otro mecanismo implica la exportacin del calcio al medio extracelular, por una bomba de Ca++ (PMCA), o un intercambiador Na+/Ca++

Una vez que la concentracin de Ca++ fuera del retculo se redujo lo suficiente, cesa la interaccin qumica entre la miosina y la actina, y el msculo se relaja. Ntese que el ATP proporciona la energa tanto para la contraccin como para la relajacin. El deslizamiento de regreso de los filamentos delgados a su posicin de relajacin es dependiente de la energa elstica almacenada en las estructuras sarcomricas y extrasarcomricas. Cuando las fibras musculares agotan por completo el ATP y la fosforilcreatina, desarrollan un estado de rigidez llamado rigor. Cuando esto sucede despus de la muerte, la situacin se denomina rigor mortis. En el rigor casi todas las cabezas de miosina se unen con la actina, pero de manera anormal, fija y resistente. Si los mecanismos de recaptacin de Ca++ se encuentran inhibidos, o bien se estimula la apertura directa de los receptores de rianodina, en ausencia de estimulacin nerviosa (como la producida por la cafena), se puede producir una contraccin sostenida, conocida como contractura. Podemos concluir que el potencial de accin muscular siempre precede al aumento de la concentracin de Ca++ intracelular, el cual precede siempre a la contraccin muscular y la generacin de tensin, por lo tanto existe un periodo de tiempo entre la generacin del potencial de accin y la generacin de tensin muscular conocido como periodo de latencia.

Figura 39. Periodo de latencia muscular.

Si tomamos en cuenta el mecanismo de los puentes cruzados, la fuerza total que se genera en la contraccin muscular, depende del nmero de interacciones simultaneas entre los puentes cruzados y los filamentos delgados. Esta interaccin va a depender de 3 factores bsicos: La longitud muscular en reposo, la frecuencia y la intensidad de estimulacin nerviosa. La longitud muscular influye en la capacidad de generacin de tensin, en base a la diferente interaccin entre los miofilamentos. La tensin muscular, se puede clasificar en tensin pasiva y tensin activa. La tensin activa es la que depende de la interaccin actomiosina, mientras que la pasiva, es la que deriva de la capacidad elstica del musculo, en donde, mientras mayor sea la longitud del mismo, mayor elasticidad (tendencia a regresar a su posicin original) va a tener, y mayor tensin pasiva generara. La sumatoria de ambas se denomina tensin total (siendo esta la nica posible de registrar con un transductor de tensin). Si se modifica la longitud del msculo, ya sea por estiramiento o acortamiento, este numero de interacciones se ve modificado, si se sobreestira el msculo, la nter digitacin entre los filamentos va a disminuir progresivamente hasta desaparecer por completo (al igual que la tensin activa generada, sin embargo va a aumentar la tensin pasiva generada ya que aumenta la resistencia elstica del musculo que tiende a volverlo a su estado normal), si se acorta la longitud del msculo, los filamentos van a distorsionar la interaccin en los puentes cruzados; a medida que modificamos la longitud del musculo y lo correlacionamos con la tensin muscular generada, podemos evidenciar la curva de la figura 40, destacando que todo musculo presenta una longitud optima sarcomerica en la cual las interacciones de los puentes cruzados con los filamentos delgados son optimas y se genera la mayor tensin activa posible.

Figura 40. Curva longitud-tensin musculo esqueltico. Se evidencia que al principio, cuando la longitud del Sarcmero es muy corta, la tensin activa que genera el musculo es baja, sin embargo, a medida que se alarga el musculo, esta va aumentando, hasta llegar al punto en el cual se genera la mxima tensin activa posible (longitud optima), luego esta va disminuyendo paulatinamente, y la tensin total aumenta a expensas de la tensin pasiva, derivada del sobreestiramiento del musculo.

La contraccin muscular puede expresarse de 2 formas: en trminos de acortamiento o en trminos de tensin. La contraccin muscular se manifiesta, segn las condiciones en las que se realiza, de manera esttica o dinmica. Es esttica cuando el msculo no cambia de longitud debido a que la carga es suficientemente grande como para sobrepasar la capacidad generadora de tensin del msculo, y aunque hay acortamiento del sarcomero, este no es suficiente para llevar a un acortamiento de la fibra muscular, y la longitud de la misma se mantiene a expensas de una distensin del componente elastico muscular; en este caso no se genera trabajo, y la energa se disipa en forma de calor. Este tipo de contraccin se conoce como isometrica.

Figura 41. Contraccin isomtrica. Se evidencia que la tensin generada por el musculo no alcanza la necesaria para levantar la carga, de tal manera, que no se produce el acortamiento del musculo.

La contraccin es dinmica o isotnica cuando el msculo cambia de longitud mientras ocurre el proceso de la contraccin, y en la cual hay un mayor acortamiento del sarcomero, siendo este lo suficiente para llevar al acortamiento de la fibra a pesar de la distensin del componente elastico muscular, y puede ser de 2 modalidades: 1) concntrica, cuando el msculo se acorta al desplazar un objeto de cierto peso una determinada distancia, es decir, realiza trabajo; o bien excntrica, cuando el msculo se alarga mientras ocurre el proceso de la contraccin, debido al gran peso del objeto que se sostiene contra la gravedad o alguna otra fuerza que mueve el objeto en sentido contrario a la direccin del movimiento.

Figura 42. Contraccin isotnica. La tensin muscular alcanza el valor necesario para levantar la carga y asi, acortar la longitud muscular.

Es importante destacar, que mientras mayor sea la carga que tiene que vencer el musculo, menor ser la velocidad de acortamiento, lo cual se puede evidenciar en la siguiente figura.

Figura 43. Relacin entre la carga que soporta el musculo y la velocidad de acortamiento de la fibra

En donde se puede denotar que mientras menor carga tenga el musculo mayor es la velocidad de acortamiento, hasta que la carga se hace tal que el musculo no logra contraerse, y cuando la curva corta el eje de las X, se dice que la contraccin es isometrica. Otros determinantes de la tensin muscular son la frecuencia e intensidad de estimulacin nerviosa. La frecuencia de estimulacin regula la concentracin de Ca++ libre en el sarcoplasma, y por lo tanto la interaccin actomiosina. Mientras ms repetida sea la estimulacin, mayor cantidad de calcio va a haber en el citoplasma, asociado a mayor reclutamiento de miofilamentos y mas tensin activa. Un solo potencial de accin genera una contraccin breve seguida de un periodo de relajacin, esta respuesta mecnica se conoce como sacudida simple. La sacudida comienza aproximadamente 2 mseg despus del inicio de la despolarizacin de la membrana. Un modo de prolongar el estado activo de un msculo es aplicar a la fibra altas frecuencias de estimulacin. El estado activo que sigue a cada estmulo se une al siguiente, con lo cual la tensin registrada es mayor que la de una sola sacudida. Al aplicar estmulos repetidos antes que comience el periodo de relajacin, se produce una mayor activacin de los mecanismos contrctiles y por ende una mayor generacin de tensin, esta respuesta mecnica se conoce como suma de ondas. Ver figura 44.

Si la frecuencia de estimulacin es lo suficientemente alta, los msculos alcanzan la tensin mxima posible, conocida como tensin tetnica completa, que corresponde al mximo valor del estado activo. La tensin generada durante el ttanos es mayor a la generada en la sacudida simple, debido a que con la estimulacin rpida y repetida de las fibras musculares antes de que aparezca la relajacin, se va realizando una suma de ondas sucesiva que permite una activacin prologada de todos los mecanismos contrctiles de la fibra, esto debido a un aumento en la concentracin de Ca++ intracelular, igualmente debido a esta alta frecuencia en los estmulos no existe un periodo evidente de relajacin que permita la disminucin de esta concentracin (ya sea por receptacin del mismo al retculo o difusin hacia el exterior celular), esta elevacin prolongada de los niveles de Ca++ intracelular permite una mayor interaccin entre los filamentos delgados y los puentes cruzados de miosina), que se evidencia en un aumento en la generacin de tensin por parte del msculo. Existen 2 tipos de ttanos: perfecto e imperfecto, el ttanos perfecto se consigue cuando debido a la alta frecuencia de los estmulos, las respuestas unitarias de contraccin se fusionan en una sola contraccin, sin que hayan periodos de relajacin evidentes, con lo cual la concentracin de calcio intracelular es mxima y se encuentran interactuando la mayor cantidad de puentes cruzados generando la mxima tensin activa posible ; en el ttanos imperfecto, hay una ligera disminucin en la frecuencia de los estmulos, y por ende existen periodos de relajacin incompleta entre los estmulos repetidos, en este ttanos debido a este corto periodo de relajacin hay una disminucin relativa de los niveles de Ca++ intracelular que traen como consecuencia algunos desacoplamientos entre los puentes cruzados y los filamentos delgados en la fibra muscular, disminuyendo ligeramente la tensin activa generada. Ver figura 44. Durante la actividad muscular sostenida (ttanos completo), el msculo presenta paulatinamente una disminucin temporal en la capacidad mxima para generar fuerza (tensin), esto se conoce como fatiga muscular. El estado de fatiga de un msculo acta como un mecanismo protector que inhibe el suicidio de las celulas musculares por extinguir sus reservas de ATP, ante una actividad sostenida. Con la actividad intermitente repetida, la disminucin inicial en la produccin de fuerza es debido a efectos sobre el aparato contrctil, y la posterior disminucin de fuerza es debido a la disminucin en la liberacin de Ca++ del RS, ambos causados por los cambios metablicos dentro del msculo. Esta disminucin de generacin de fuerza se ha determinado que puede ocurrir bien por la disminucin progresiva de las reservas de glucogeno y sntesis de ATP (necesario para la contraccin muscular, y para la recaptacin de Ca++ al retculo, por lo que la relajacin se retrasa), asi como por un aumento en la concentracin de protones intracelular (liberados en la ruta glicolitica), que trae como consecuencia una disminucin del pH intracelular; y a una elevacin en la concentracin de fosfato inorganico (Pi), por el desdoblamiento del ATP por la miosina. El pH acido y las altas concentraciones de Pi por ejemplo, afectan la produccin de fuerza y la recaptura de Ca++ por el retculo. Despus de un ttanos, la amplitud de la sacudida muscular simple es mayor. Este comportamiento ha sido llamado potenciacin post tetnica y probablemente se debe a una alteracin temporal en

la intensidad o duracin del estado activo. Tal potenciacin se ha atribuido a la fosforilacin de las cadenas ligeras de la cabeza de miosina, pero otro mecanismo posible es la elevacin del Ca++ en el citosol por un lapso corto, despus de terminar el ttanos. La misma explicacin se ha dado al fenmeno de la escalera positiva, que consiste en un crecimiento progresivo de las sacudidas isomtricas cuando los estmulos son aplicados a bajas frecuencias.

Figura 44. Variaciones en la fuerza de contraccin muscular en relacion con la frecuencia de estimulacion de la fibra. A. Fuerza de contraccin del musculo, en base a una sacudida simple, del musculo Gastronecmio y Soleo, B. Fenomeno Escalera, en donde a una misma frecuencia de estimulacion, se evidencia paulatinamente un aumento en la tension generada por el musculo; C. Suma de ondas, donde a frecuencias crecientes de estimulacion, la tension generada por el musculo es mayor, ya que cada estimulacion se da antes que se complete el periodo de relajacin de la fibra; D. Tetanos perfecto. Ante frecuencias de estimulacion muy elevadas, no hay periodos de relajacin en la fibra, por lo que la tension activa generada es maxima.

La contraccin muscular requiere energa y el msculo se compara con una mquina para convertir energa qumica en trabajo mecnico. La fuente inmediata de esta energa es el ATP, y ste se forma por el metabolismo de carbohidratos y lpidos. El msculo tiene 3 vas para regenerar ATP: degradacin de la fosforilcreatina, glicolisis anaerbica y fosforilacin oxidativa. El ATP se sintetiza de nuevo a partir del ADP por la adicin de un grupo fosfato. Parte de la energa para esta reaccin endotrmica proviene de la degradacin de glucosa hasta CO2 y agua, pero el msculo tambin cuenta con otro compuesto de fosfato de alta energa que puede aportar esta energa por periodos cortos. Este compuesto es fosforilcreatina, que se hidroliza hasta grupos creatina y fosfato con la liberacin de una cantidad considerable de energa. Durante el ejercicio, este compuesto se hidroliza en la unin entre las cabezas de miosina y la actina, con lo que se forma ATP a partir de ADP y esto permite que contine la contraccin, siendo esta la forma mas rpida de obtener ATP por parte del musculo, la que se desarrolla inmediatamente al inicio de la contraccin muscular. Como sabemos, el principal combustible muscular son los carbohidratos, el msculo almacena glucosa en forma de glicgeno, este sirve como una fuente de reserva de glucosa en el msculo. Durante el ejercicio este glucogeno es degradado y la glucosa entra en una va metablica conocida como gliclisis, la cual da como resultado final piruvato y 2 ATP, en condiciones aerbicas este piruvato entra al ciclo de Krebs y se produce ATP en la fosforilacin oxidativa. Durante el ejercicio extenuante, cuando la sntesis aerbica de energa es insuficiente para cubrir la demanda metablica, este piruvato puede reducirse hasta lactato sin que tenga que entrar en el ciclo de Krebs, este proceso se denomina gliclisis anaerbica y conlleva la produccin neta de mucho menos enlaces fosfato de alta energa, pero no requiere la presencia de O2. El uso de la va anaerbica se autolimita porque, a pesar de la rpida difusin del lactato a la corriente sangunea, se produce una acumulacin muscular de lactato tal, que finalmente rebasa la capacidad de los amortiguadores titulares y causa un descenso en el pH que inhibe las enzimas. No obstante, por periodos cortos, la presencia de una va anaerbica para la degradacin de la glucosa permite un esfuerzo muscular mucho mayor al que sera posible sin ella. Sin embargo, la via de la fosforilacin oxidativa, aunque es lenta, es la va de mayor rendimiento metablico, al proporcionar 36 molculas de ATP, por lo que es la ruta metablica de eleccin de las fibras musculares lentas. Las clulas msculo esquelticas estn especializadas en 2 tipos principales. Esta especializacin permite elevadas velocidades de contraccin o contracciones de larga duracin. Las dos clases de clulas se diferencias en que unas se expresa el gen para una isoenzima de la miosina lenta y en otras el de la miosina rpida (es decir, tiene una actividad ATPasa alta). Las fibras lentas (tipo I), caracterizadas por velocidades moderadamente bajas, consumen ATP a ritmos moderados, reciben un buen aporte sanguneo y suelen llamarte fibras rojas. Se caracterizan por ser oxidativas, al no requerir de una gran cantidad de ATP, este puede ser obtenido a partir de la fosforilacin oxidativa. Si el aporte sanguneo es apropiado, las fibras lentas proporcionan una gran resistencia.

Las fibras rpidas (tipo II), tienen un alto consumo de ATP, que solo puede conseguirse mediante la activacin de la ruta glicolitica. Las fibras rpidas se fatigan enseguida con el agotamiento del glucgeno.

Figura 45. Clasificacin de las fibras musculares en las unidades motoras, de acuerdo a sus propiedades fisiolgicas

Ya que los axones de las motoneuronas espinales que inervan a los msculos esquelticos se ramifican para llegar a varias fibras musculares, la cantidad ms pequea de msculo que se puede contraer en respuesta a un estmulo de una sola motoneurona no es una fibra muscular, sino todas las fibras inervadas por esa neurona. Cada motoneurona y las fibras musculares a las que inerva se denominan unidades motoras. Cada motoneurona inerva solo un tipo de fibra muscular, por lo que todas las fibras musculares de una unidad motora son del mismo tipo, tambin es importante destacar, que mientras menos fibras musculares tenga una unidad motora determinada, mayor fineza y regulacin de la contraccin va a existir, ejemplo: los msculos oculares presentan solo 13 fibras por cada unidad motora. Con base en el tipo de msculo que inervan y, por tanto, con base en la duracin de la sacudida, las unidades motoras se dividen en rpidas y lentas. Describimos anteriormente que la intensidad de estimulacin nerviosa tambin era capaz de regulacin la tensin muscular, elemento que se relaciona con el reclutamiento paulatino de unidades motoras. Dentro de cada nervio motor, cada axn presenta un nivel umbral distinto, por lo que a bajas intensidades de estimulacin se activan unos axones y por lo tanto algunas unidades motoras, mientras que progresivamente, a mayor intensidad de estimulacin, se reclutan mas axones, y mas unidades motoras, aumentando as, la capacidad de generar tensin muscular. Este reclutamiento paulatino de unidades motoras se hace en base a los requerimientos fisiolgicos de generar tensin, por ejemplo, cuando estamos caminando, no es necesario activar mltiples unidades motoras rpidas resistentes a la fatiga, sino mas bien con unidades motoras lentas podemos llevar a cabo esta tarea, y si paulatinamente empezamos a correr, pues reclutaremos gradualmente unidades motoras rpidas y responderemos generando mas tensin, esta capacidad que tiene el organismo de reclutar unidades motoras paulatinamente, en base a los requerimientos fisiolgicos se denomina Respuesta Graduada.

Figura 46. Respuesta graduada muscular. Se evidencia el reclutamiento paulatino de unidades motoras lentas, rpidas fatigables, y rpidas resistentes a la fatiga, en relacin con la frecuencia de estimulacin nerviosa y las necesidades fisiolgicas acordes.

La musculatura lisa. Los rganos huecos del organismo, excepto el corazn, para cumplir su funcin requieren ejecutar una contraccin lenta y sostenida, proporcionada por el msculo liso de sus paredes. El msculo liso esta compuesto por clulas uninucleares, delgadas y fusiformes. Su ncleo y los organelos citoplsmicos se ubican en el centro de la fibra.

Desde el punto de vista anatmico, el msculo liso difiere del msculo esqueltico y cardiaco, en que no presenta estriaciones transversales. Si presenta filamentos de actina y miosina II y estos se deslizan para producir la contraccin, pero no estn dispuestos de forma regular, por lo cual no se observan las estriaciones. En vez de discos Z se observan cuerpos densos, los cuales se encuentran anclados al sarcolema y a los filamentos delgados por la alfa actinina. El msculo liso contiene tropomiosina, pero no se ha evidenciado la troponina. Las isoformas de la actina y la miosina del msculo liso difieren a la del msculo esqueltico. La fibra lisa no contiene un sistema de tbulos T ni de cisternas terminales, pues su retculo sarcoplsmico esta pobremente desarrollado, pero s contiene numerosas cisternas membranosas o cavolas. Al no presentar un retculo desarrollado, no contiene altos niveles de calsecuestrina. En general, el msculo liso contiene pocas mitocondrias, por lo cual depende fundamentalmente de la gliclisis para la generacin de energa. Adems de su capacidad contrctil, el musculo tiene la capacidad de sintetizar colgeno tipo III, elastina y proteoglicanos. Existen varios tipos de estmulos que promueven la contraccin; los ms importantes son: seales nerviosas, estimulacin hormonal y distensin del tejido. La musculatura lisa esta inervada por nervios autnomos de los sistemas simptico y parasimptico, los cuales no entran en contacto directo con ellas, por lo tanto no existen uniones neuromusculares. Los axones terminales tienen mltiples varicosidades muy prximas a la superficie de la clula muscular, las cuales secretan sustancias neurotransmisoras (norepinefrina y acetilcolina principalmente).

Figura 47. Estmulos para la contraccin de la musculatura lisa.

El potencial de membrana de las clulas musculares lisas oscila entre -60 y -70mV y contienen mas canales de calcio que la musculatura esqueltica, aunque mas pocos canales de sodio. El flujo de Ca++ es el principal responsable de la generacin de los potenciales de accin. Se distinguen 2 tipos de musculatura lisa: Unitaria o visceral: Las clulas se encuentran unidas por uniones estrechas (tight junction) y uniones comunicantes (gap junction) que permiten el acoplamiento mecnico y elctrico entre las clulas, comportndose como un sincicio. Debido a la presencia de estas uniones, la estimulacin nerviosa es menor, ya que esta se propaga a lo largo de las celulas. El msculo liso visceral se caracteriza por la inestabilidad de su potencial de membrana, este puede experimentar oscilaciones espontaneas denominadas ondas lentas, las cuales pueden alcanzar un valor umbral y desencadenar potenciales de accin espontaneo; y porque presenta contracciones continuas e irregulares independientes de la inervacin, dicho estado mantenido de contraccin parcial es conocido como tono.

Figura 48. Contraccin tnica. Se evidencia como se mantiene la fuerza tensil generada por el musculo a lo largo del tiempo

Multiunitario: Cada clula muscular se comporta como una unidad individual, se asemeja bastante al msculo esqueltico en este sentido. Presentan pocas uniones comunicantes y estrechas por lo cual existe una mayor densidad de estimulacin nerviosa. A diferencia del msculo liso visceral, el multiunitario no presenta funcionamiento sincitial y las contracciones se diseminan por todo el msculo. Por ello, las contracciones de este tipo de msculo liso son mas delicadas, diestras y localizadas que las del msculo visceral. La respuesta contrctil de este msculo suele ser mas intensa e irregular que la del msculo esqueltico.

Figura 49. Tipos de musculo liso.

Acoplamiento excitacin contraccin en el msculo liso. El Ca++ participa en el inicio de la contraccin del msculo liso, tal como sucede en el msculo esqueltico. No obstante, el msculo liso visceral casi siempre tiene un retculo sarcoplsmico poco desarrollado y el aumento en la concentracin intracelular de Ca++ , que inicia la contraccin, se debe, sobre todo, a la entrada de este ion a partir del liquido extracelular por la apertura de canales de Ca++ voltaje o ligando dependientes. En presencia de una sustancia agonista (noradrenalina, angiotensina, endotelina) se activan determinados receptores de membranas que comienzan una cascada de transduccin de seales mediada por la accin de la fosfolipasa C que lleva a la Protein Kinasa C que va a fosforilar a los canales de calcio tipo L, activndolos. Estos canales de calcio tipo L, tambin se abren en respuesta a la despolarizacin de membrana en respuesta al estiramiento de la fibra muscular. En el msculo liso, la regulacin de la contraccin esta asociada a la miosina y no a la actina, debido a la ausencia de troponina. Como consecuencia de el aumento en la concentracin intracelular de Ca++ este se une a la calmodulina, formando el complejo Ca++- Calmodulina, este complejo promueve: la exposicin de los sitios activos de la actina, mediante el desplazamiento lateral de la tropomiosina; y la activacin de la cinasa de la cadena ligera de miosina dependiente de calmodulina, esta proteina fosforila a la molcula de miosina, estimulando su actividad ATPasa necesaria para el inicio de la contraccin. En algunas fibras musculares lisas la fosforilacin es mantenida a un bajo nivel en ausencia de un estmulo externo o de una activacin mecnica; esto proporciona el tono muscular, cuya intensidad puede ser variable y depende de una interaccion diferente entre la miosina y la actina llamada latchbridges para diferenciarla de los cross-bridges, estos puentes no se disocian o se disocian lentamente y mantienen el nivel tnico de tensin con minimo gasto de ATP. Cuando la cabeza de miosina es desfosforilada, los filamentos se desensamblan y la miosina se disocia de la actina; esta desfosforilacin es mediada por fosfatasa de la cadena ligera de miosina, permitiendo la relajacin del msculo liso.

Figura 50. Acoplamiento excitacin-contraccin del Msculo liso. Los aumentos de la concentracin de calcio en el interior de la fibra, son secundarios a la entrada de calcio desde el exterior de la celula, los cuales llevan finalmente a la activacin de una quinasa de la cadena ligera de miosina, y la fosforilacion del filamento grueso que lleva a la formacin del complejo acto-miosina

La relajacin ocurre como resultado de la desaparicin del estmulo contrctil o por la accin de una sustancia que inhiba el mecanismo contrctil. Cualquiera que sea el causante de la relajacin, se requiere una reduccin del Ca++ intracelular y un incremento en la actividad de la fosfatasa. Muchos mecanismos participan en la reduccin del Ca++ intracelular e involucran retculo sarcoplsmico y a la membrana celular. Existe una recaptacin de Ca++ al retculo gracias a la presencia de la bomba Ca++-Mg++ ATPasa y al exflujo de Ca++ gracias a canales de membrana. Tambin existe un mecanismo de relajacin dependiente de AMPc; generada por agonistas betaadrenergicos, adenosina.

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